FR2729957A1 - Complexes organometalliques a base de sitosterols et d'acylglycerols et compositions pharmaceutiques et produits dietetiques en contenant. - Google Patents

Abstract

L'invention concerne un complexe organométallique susceptible d'être obtenu par réaction: - d'un cation d'un métal (M) au degré d'oxydation au moins égal à 2 utilisable comme biocatalyseur dans le métabolisme vivant - du bêta ou du gamma-sitostérol libre ou d'un mélange de ces deux produits ou d'un extrait végétal en contenant, - d'un mono-, d'un di- ou d'un triglycéride répondant à la formule (I): (CF DESSIN DANS BOPI) dans laquelle: - R1 est un reste acyle d'acide gras en C14 à C24 saturé ou non, de l'hydrogène, ou un mono-, un di- ou un tri-galactose ou glucose, - R2 est un reste acyle d'acide gras en C18 présentant une insaturation, de préférence un reste d'acide oléique ou d'un de ses isomères de position de la double liaison (cis-6, 7, 9, 11, 12 et 13) ou d'un de ses isomères isoramifiés, - R3 est un reste acyle d'acide gras en C14 -C24 saturé ou non ou un atome d'hydrogène. Elle concerne aussi des compositions pharmaceutiques et des produits cosmétiques contenant ce complexe, particulièrement ceux où le métal est le vanadium et leur utilisation dans le traitement du diabète et de ses complications ainsi que l'hyperinsulinisme et l'insulino-résistance et des pathologies associées.

Description

La présente invention conceme à titre de produits industriels nouveaux des complexes organométalliques à base de sitostérols et d'acylglycérols.

Elle concerne aussi des compositions pharmaceutiques contenant ces complexes.

Les acylglycérols, plus particulièrement les acylglycéols d'acides gras, sont présents dans la plupart des végétaux et sont des constituants majoritaires des corps gras végétaux et animaux.

Seuls varient d'un acylglycérol à l'autre le nombre d'acides gras, leur position sur le glycérol, leur longueur de chaîne et le nombre de leurs éventuelles insaturations. n peut s'agir, en particulier, de mono-, di- ou triacylglycérols.

Le sitostérol, dont il existe deux isomères actifs le ss et le y-sitostérol, est, lui aussi, un constituant de l'ensemble des végétaux.

Certains extraits totaux de plantes qui, comme la majorité des plantes, contiennent parmi leurs très nombreux constituants des flavonoldes, tannins, saponines, coumarines, alcaloïdes, triterpènes, stérols, carbohydrates et/ou glycosides ont été décrits pour leur activité hypoglycémiante, comme par exemple l'extrait d'accacia (Egypt. J. Pharm. Sci., 1992, 33 (1-2), 327-340), ou l'extrait de teucrium oliverianum (Fitoterapia, 1984, 55(4), 227-230). Aucun lien entre l'activité et la fraction contenant les stérols n'est établi.Dans ces publications, cette activité est en général attribuée aux carbohydrates ou polyols du cyclohexane comme le conduritol, dérivé de l'inositol isolé à partir d'un extrait de gymnéma sylvestre qui ne diminue pas directement la glycémie, mais empèche les sucres de passer à travers la paroi intestinale.

Quelques sapogénines ont été décrites pour le traitement du diabète, (par exemple la sarsasapogénine et la similagénine dans EP 0 204 661). n s'agit de dérivés dont la chaîne latérale est constituée de deux éthers cycliques spiro.

D'autres dérivés hypoglycémiants issus de végétaux ont été décrits comme par exemple:
- le glycoside de la leucopélargonidine dans Indian J. Exp. Biol. 1993, 31(1), 2629;
- les glycosides de la prototimosaponine dans Chemical Abstracts 117(9):83451f qui résume le brevet japonais JP 04054194;
- le ginsenoside Rb2 décrit dans Chemical Abstracts 105(17):146237r qui résume le brevet japonais JP 61024597. Ce produit, testé sur le rat, agit comme antidiabétique, la dose, par voie intrapéritonéale, étant de 10 mg/par rat. Cette dose diminue la glycémie de 20 %.

Les feuilles et les sommités fleuries de l'ortie (urtica dioica) sont traditionnellement connues pour leur propriétés antidiabétiques (Prcrere' description dans la littérature scientifique dès 1926). Cette activité est reproductible et quantifiable mais personne n'en a jusqu'à présent isolé le ou les principes actifs.

Les stérols végétaux, en particulier ceux de la racine d'ortie (urtica dioica) font depuis quelques années l'objet de beaucoup d'études notamment pour le traitement de certaines tumeurs comme l'adénome prostatique.

Un extrait végétal de pygeum africanum, commercialisé en France sous le nom de TADENANB par les Laboratoires Debat pour le traitement de l'adénome prostatique depuis de nombreuses années, a fait l'objet d'études récentes tendant à prouver que l'activité serait due à la fraction stérol-lipidique qui contient d'après R. Longo et S. TR Farmaco, Ed.Pract. 1983, 38(7), pages 287-292, du bêta-sitostérol, le bêta-sitostéryl glucoside et la 3 bêta-sitosténone ainsi que du n docosanol et du n-docosyl trans-férulate d'après le résumé Chemical Abstraits
CA 104(22):193255j.

Dans le Journal of Natural Products, 1987, 50(5), pages 881-885,
N. Chaurasia et M. Wichtl décrivent l'isolation, la séparation, et l'identification de certains stérols de la racine de l'ortie.

En 1979, une équipe de chercheurs brésiliens décrivait dans Rev. Med.

Univ. Fed. Ceara, 19(1-2), 49-53, un extrait de grains verts de café arabica dont le sitostérol serait hypoglycémiant. Depuis lors, cette activité n'a pas pu être reproduite et aucun travail publié ne l'a confirmée.

Le Brevet US 4 588 717 décrit comme complément vitaminique, réducteur de poids et complément de régime réduisant l'absorption de carbohydrates, et donc la glycémie, un mélange contenant des métaux, des complexes de métaux avec du fructose, des vitamines, des acides gras, des phospholipides, des esters de stérols, des amino-acides, etc.

Les auteurs de ce brevet ne décrivent pas à proprement parler d'activité thérapeutique, ils n'attribuent pas les propriétés de leur mélange à une seule des familles de produits présents dans leur mélange.

Au cours des 5 dernières années, des publications de plus en plus nombreuses, tant épidémiologiques que sur des modèles animaux, font état d'un syndrome complexe dénommé "syndrome métabolique" ou encore "syndrome X", qui associe obésité de type androïde, hypertension artérielle, dyslipidémie, des pathologies coronariennes obstructives telles que l'infarctus du myocarde, avec une constante biologique commune qui est l'hyperinsulinisme associé à une insuline résistance ; cet état d'insulino-résistance est considéré actuellement comme le marqueur majeur du risque athérogène.

Aucun traitement n'existe actuellement pour corriger l'hyper- insulinisme et ses conséquences métaboliques, à l'exception du régime alimentaire de type méditerranéen (riche en huile d'olive) et une activité physique musculaire régulière.

Par ailleurs, le diabète est contrôlé ou contenu par des produits qui régulent la glycémie: - insuline exogène; - sulfamides et/ou biguanides; - produits réduisant l'adsorption des carbohydrates; - inhibiteurs de l'aldose-réductase.

Aucun de ces traitements à l'heure actuelle ne traite réellement les causes du diabète , ni ne provoque de rémission vraiment durable, ni de guérison qui persiste après L'arrêt du traitement.

Les travaux de la demanderesse l'ont déjà conduite à décrire, dans différents brevets, différentes associations, en particulier sous forme de complexes organométalliques utilisables dans le traitement et/ou la prévention de l'hyperglycémie, du diabète et des maladies connexes. On citera: - les brevets français FR 2 654 620 et FR 2 676 738 qui décrivent des dérivés
organiques de métaux de transition, à structure poiphyrinique, - le brevet français FR 2 659 333 qui décrit des dérivés à structure
phospholipidique, - le brevet français FR 2 686600 qui décrit des complexes organométalliques de
l'ioositol ou de ses dérivés, - le brevet fiançais 2686511 qui décrit des complexes d'acides aminés, - le brevet français 2686512 qui décrit des complexes organométalliques avec
des dérivés catécholiques, - le brevet FR 2686514 qui décrit des complexes organométalliques dans lesquels
le ligand contient un cycle renfermant au moins deux atomes d'azote, - le brevet français FR 2686603 qui décrit des complexes organométalliques avec
des dérivés de l'acide dithiocarbamique, - le brevet français 2 686 515, plus particulièrement orienté vers l'utilisation des
dérivés organométalliques du niobium pour le traitement et la prévention des
désoréres du métabolisme des glucides et/ou des lipides.

Par ailleurs, la demanderesse a également décrit dans la demande de brevet français FR 2695390 des compositions pharmaceutiques contenant des complexes de tanins avec différents métaux.

Poursuivant ces recherches approfondies en vue de déterminer des fractions végétales actives ou des complexes de ces fractions avec des métaux, la demanderesse a découvert, tout à fait par hasard, que certains produits, fractions ou complexes par ailleurs inactifs ou insuffisamment actifs comme agent hypo glycémiant voyaient leur activité considérablement augmentée lorsqu'ils étaient administrés en solution dans de l'huile d'olive. Ceci a conduit la demanderesse à chercher parmi les nombreux constituants de l'huile d'olive ceux qui pouvaient conduire par mélange ou réaction avec les produits testés à des produits plus actifs;.

Cest ainsi que la demanderesse a pu identifier de nouveaux produits désignés dans le présent mémoire sous le vocable "complexes organométalliques" et obtenus par réaction entre un dérivé du vanadium au degré d'oxydation 4 ou 5 et deux composés organiques issus d'extraits végétaux et constitués respectivement de sitostérols et d'acylglycérols.

Les nouveaux produits découverts ainsi par la demanderesse corrigent durablement des animaux diabétiques et ce, quel que soit le modèle de diabète animal, aussi bien de type génétique que de type chimique.

De la même façon, la demanderesse a découvert que ces mêmes nouveaux produits corrigeaient l'hyperinsulinisme et l'insulino-résistance d'un modèle animal similaire à l'hypertension artérielle dite "essentielle" chez l'homme avec une correction simultanée de l'hyperinsulinisme et de l'hypertension artérielle.

La demanderesse a également découvert que des complexes analogues pouvaient être préparés à partir d'autres dérivés métalliques de métaux au degré d'oxydation au moins égal à 2 et connus pour leur activité antidiabétique.

Elle a également découvert que des complexes analogues étaient susceptibles de se former entre les deux types de dérivés organiques cités précédemment et différents cations de métaux connus comme cations à activité biocatalytique, ces complexes constituant, dans tous les cas, des agents particulièrement efficaces comme transporteurs de cations à activité biocatalytique.

Par cations à activité biocatalytique, on entend aussi bien ceux ayant une activité biocatalytique directe que ceux susceptibles de se substituer à des biocatalyseurs et modifier par ce moyen certaines voies métaboliques pathologiques. On citera l'exemple du vanadium qui peut se substituer au phosphate du fait de leur similitude de chimie de coordination : ainsi les phosphatases acides et alcalines sont inhibées par les vanadyles et les vanadatcs, de mîmc que la tyrosine phosphatase qui induit une stimulation de la phosphorylation de la tyrosine du récepteur périphérique de l'insuline ainsi que des protéines kinascs associées.

Ainsi selon un premier aspect, l'invention concerne selon une de ses caractéristiques essentielles de nouveaux complexes organométalliques susceptibles d'être obtenus par réaction:
- d'un cation d'un métal (M) au degré d'oxydation au moins égal à 2 utilisable comme biocatalyseur dans le métabolisme vivant,
- du ss ou du y-sitostérol libre ou d'un mélange de ces deux produits ou d'un extrait végétal en contenant,
- d'un mono-, d'un di- ou d'un triglycéride répondant à la formule (1):

dans laquelle:: -R1 est un reste d'acide acyle gras en C14 à C24 saturé ou non, de l'hydrogène, ou
un mono-, un di- ou un tri- galactose ou glucose, -R2 est un reste acyle d'acide gras en C18 présentant une insaturation, de
préférence un reste d'acide oléique ou d'un de ses isomères de position de la
double liaison (cis-6, 7, 9, 11, 12 et 13) ou d'un de ses isomères isoramifiés, -R3 est un reste acyle d'acide gras en C14-C24 saturé ou non ou un atome
d'hydrogène.

Selon une variante préférée, l'un au moins des groupements R1 ou R3 de la formule (1) ci-dessus est constitué d'un reste acyle d'acide oléique (C18: 1[cisj-9).

Selon une variante particulièrement avantageuse de l'invention, les deux groupements R1 et R3 de la formule (I) ci-dessus sont constitués d'hydrogène.

Les cations du métal M utilisables pour préparer les complexes selon l'invention sont tous les cations de degré d'oxydation au moins égal 2 et susceptibles de se complexer avec les deux types de dérivés organiques cidessus et connus pour leur activité catalytique sur les systèmes biologiques. On parlera dans le présent mémoire de biocatalyseur pour designer ces métaux à activité catalytique sur les systèmes biologiques.

Las complexes de l'invention se forment relativement aisément par mélange des trois types de constituants en les maintenant à une température comprise entre 3OeC et 4OeC pendant une douzaine d'heures ; la réaction catalytique de fabrication du complexe se fait de façon plus lente à température ambiante (5 à 8 jours à 2S'C) ; le complexe ne se fabrique que peu ou pas si le mélange est maintenu au froid.

Ainsi donc, la demanderesse a clairement mis en évidence l'effet favorable d'une élévation de température, en particulier entre 30 et 40 C, sur la réaction intervenant entre les constituants du complexe de l'invention.

Les trois types de composés réagissent très aisément, par leur mise en solution dans un solvant organique, par exemple le dichlorométhane, l'éther, le chloroforme, méthanol ou l'acétate d'éthyle qui seront évaporés par la suite.

Le métal M sera choisi en fonction de l'activité biologique visée.

A titre d'exemples, si l'on vise un produit à activité hypoglycémiante et/ou antidiabétique et/ou insulinomimétique, on choisira tout particulièrement un dérivé métallique du niobium, du vanadium, du molybdène, du sélénium, du chrome ou du zinc.

Dans ces drivés métalliques:
- le niobium est avantageusement au degré d'oxydation 4 ou 5, de préférence 5,
- le vanadium est avantageusement au degré d'oxydation 3, 4 ou 5, de préférence 4,
- le sélénium est avantageusement au degré d'oxydation 4 ou 6, de préférence 4,
- le molybdène est en général à un degré d'oxydation compris entre 3 et 6, de préférence 3,
- le chrome est préférentiellement au degré d'oxydation 3,
- le zinc est de préférence au degré d'oxydation 2.

A titre d'exemples de métaux adaptés à d'autres types d'application, on citera:
- l'antimoine ou l'étain, si l'on vise le traitement des maladies autoimmunes touchant en particulier le système nerveux, par exemple la sclérose en plaques,
- l'or, dans les pathologies auto-immunes touchant l'appareil locomoteur, par exemple dans le cas de la polyarthrite rhumatoïde,
- le vanadium dans les néoplasies du tube digestif,
- le ruthénium ou le palladium dans les néoplasies respiratoircs,
- le lithium dans les pathologies du système nerveux central,
- l'étain dans les syndromes d'immunodéficiences acquises.

A titre d'exemples de dérivés métalliques particulièrement utiles selon l'invention, on citera les halogénures, les oxyhalogénures, les sulfates, les hydrates, les sels d'ammonium, les méthalates de métaux alcalins ou alcalinoteroeux qui peuvent être avantageusement dissous dans l'eau ou parfois dans des alcools. On citera des dérivés organiques de métaux comme les acétylacétonates, les alcoolates ou des complexes de métaux avec des solvants organiques, par exemple des éthers, le THF, la DMF. Ces dérivés organiques de métaux sont généralement solubles dans des solvants organiques, plus particulièrement dans des solvants chlorés comme le chloroforme ou le dichlorométhane.

Le sitostérol utilisé pour la préparation des complexes de l'invention sera sous forme ss ou y. On pourra également utiliser un mélange de ces deux stérols.

Le sitostérol existe sous forme commerciale. Mais il est alors généralement en mélange avec du campestérol. Dans ces produits commerciaux généralement extraits du soja, le ss-sitostérol ne représente que 50% du produit, l'impureté principale étant le campestérol. On pourra obtenir du ss-sitostérol présentant une pureté supérieure à 95 %, voir même de 99 %, en pxcedant de la façon suivante : on fait plusieurs recristallisations successives à l'acétone du mélange commercial, ce qui permet de prépurifier le ss-sitostérol par élimination du campestanol et du sitostanol présents dans le mélange.Puis, on fait subir au produit ainsi prépurifié 1 à 3 étapes de purification par chromatographie liquide haute pression sur colonne préparative C18 en utilisant des mélanges éluants, tels que le méthanol, en particulier du méthanol à 100 % ou des mélanges de méthanol et d'acétonitrile, en particulier des mélanges 80-20 ou tout mélange intermédiaire permettant d'obtenir le sitostérol avec une pureté supérieure à 95 voir même à 99 %. Cette pureté est déterminée par chromatographie en phase gazeuse.

On peut également préparer le sitostérol par extraction à partir de végétaux selon des techniques révélées dans la littérature, par exemple à la page 95 de la thèse soutenue en novembre 1993 à Montpellier par Claude Cerdon ayant pour titre "Modulation de la production des sapogénines stéroidiques en réponse à l'inhibition de la synthèse des stérols".

Cette extraction est avantageusement réalisée par complexation des métaux selon le procédé décrit en particulier dans le brevet français N. 2 316 247 dans lequel est décrit un procédé pour isoler les 3-hydroxystéroides et les 3 oxostérodes de mélange contenant ces composés.

Pour réaliser cette extraction, on pourra utiliser tout végétal ou produit d'origine végétale connu pour sa teneur relativement élevée en sitostérol.

A titre d'exemples de végétaux ou de produits d'origine végétale à teneur relativement élevée en sitostérol libre, on citera en particulier l'huile d'olive, l'huile de soja, les feuilles de coton, les feuilles de café, les germes de blé, dont les teneurs relatives en stérols libres ainsi que le pourcentage de sitostérol dans la fraction stérol libre sont donnés dans le tableau ci dessous ::

<tb> <SEP> Teneur/kg <SEP> % <SEP> % <SEP> de <SEP> la <SEP> fraction <SEP> stérol
<tb> Huile <SEP> d'olive <SEP> 1 <SEP> 310 <SEP> m <SEP> <SEP> 91 <SEP> <SEP> % <SEP>
<tb> Huile <SEP> de <SEP> soja <SEP> 908 <SEP> mg <SEP> 53 <SEP> 96 <SEP>
<tb> Feuilles <SEP> de <SEP> coton <SEP> 3961 <SEP> mg <SEP> 93 <SEP> %
<tb> Feuilles <SEP> de <SEP> café <SEP> 9 <SEP> 914 <SEP> mg <SEP> 51 <SEP> % <SEP>
<tb> Germe <SEP> de <SEP> blé <SEP> 17 <SEP> 336 <SEP> mg <SEP> 67 <SEP> 4b <SEP>
<tb>
n faut préciser cependant que la fraction sitostérol libre contient une proportion variable selon les végétaux des isomères 24 R et 24 S, proportion mal connue car peu ou pas étudiée, et qui paraît expliquer une meilleure activité relative de la fraction stérol de certains végétaux et surtout l'excès de sitostérol nécessaire lors de la fabrication des nouveaux produits.

Les acylglycérols utiles pour la préparation des complexes selon l'invention peuvent etre isolés dans la plupart des végétaux.

Plus généralement, la fraction chimique contenant ces produits peut être extraite de labiées, ortie (urtica dioica et urens), de la sauge, les bugles, la luzerne ou alfalfa (medicago sativa), les eucalyptus (globulus, delegatensis), l'angelica archangelica et l'angelica sinensis, les ombelliferes, le gymnema sylvestre (asclepiadaceae), le marsdenia condurango, le momordica charantia, le gingko biloba, le chardon-marie, le thé vert, le thé noir (camelia sinensis), la rhubarbe, le dioscorea dumetorum (dioscoreaceae), l'indigofera arrecta (papilionaceae), le pittosporaceae, l'agrimonia eupatoria, le curcuma xanthorrhiza (roxb.), l'uncaria gambier (roxb.), le swertia chirayita (roxb.), les résédacées (réséda, phyteuma, lutea, alba, luteola), l'harpagophytum, les rubiacées, les gentianxcaes, l'asparagus racemosus, le dioscorea durnetorum (dioscoracese), l'aubépine (crataegus oxyacantha), le gui (viscum album), les palétuviers (rhizophoracées), le kaki, les chênes, le chêne à galle (fagacées), les ronces, l'hamamélis (hamamélidacées), le ratanhia (kramériacées), le salicaire (lythracées), le calophyllum (clusiacées), les acacias, l'acacia à cachou (Légumineuses mimosoidées), le quebracho (anacardiacées), les raisins (vitis vinifera, ampelidacées), les cassis (saxifragacées dont ribes nigrum), les myrtilles (erieaeées), les mûres (rubus fructicosus), le sureau, le choux-rouge, l'ail (allium sativum), le coriendre (coriandrum sativum), le juniper (juniperus communis), les pins (abiétacées), le pin maritime, les cyprès (cupressasées), les hibiscus, les rhus (anacardiacae), les dicotylédones, les fougères, les gymnospermes, les melianthus, les rosasées, les roses, l'eriobotrya japonica (rosaceae), le boussingaultia baselloides, le malva verticillata (malvaceae), les fraisiers, les citrus (rutaeées), la benoite, le blighia sapida (sapindaceae), l'aubépine, les châtaigniers (fragacées), les sumacs (anacardiacées), les myrabolans (combrétacées), la bistorte, les légumineuses césalpinioidées (dividivi, tara, algarobille), les légumineuses papilioncées (derris, lonchcarpus, mundelea, tephrosia), le lespedeza, le sophora, les polygonacées, les légumineuses, le sarrasin.

On utilise de façon particulièrement avantageuse comme source d'acylglycérols des huiles végétales insaturées, en particulier de l'huile d'olive de première pression à froid.

D'une façon générale, on choisira comme source d'acylglycérols utiles selon l'invention une huile contenant une forte teneur en acide oléique, une telle huile contenant généralement une forte proportion d'acylglycérols utiles selon l'invention.

A titre d'exemples de telles huiles, on citera:
- l'huile d'olive dont la teneur en acide oléique (C18: 1) est comprise entre 60 et 80 %, les huiles européennes étant plus riches en C1g: 1 que les huiles d'Afrique du Nord,
- l'huile de toumesol de variété dite hybride tournesol oléique, contenant 83 % de C18:1 au lieu de 16 % dans l'huile de tournesol normale,
- l'huile de carthame de variété oléique, contenant de 73 à 80 % de C18: 1 au lieu de 10 à 20 % dans la variété linoléique,
- l'huile d'amande contenant de 64 à 82 % de C1g: 1,
- l'huile de noisette contenant de 66 à 83 % de C1g: 1,
- l'huile d'avocat dont la teneur en C18:1 varie entre 36 et 80 %.

La fraction contenant des acylglycérols utiles pour préparer les complexes selon l'invention peut être avantageusement préparée à partir de l'huile d'olivc de la façon suivante : on effectue une prépurification de l'huile d'olive en la passant sur une faible hauteur de silice (10 à 15 cm), en réalisant le vide et en éluant à l'aide d'un solvant organique tel que le dichlorométhane ou un mélange de cyclobexane et d'acétate d'éthyle dans des proportions 96/4 ou tout autre éluant présentant une polarité voisine, de façon à isoler les triglycérides présents dans l'huile parmi lesquels on trouve celui présentant un C18 sur le C en position 2 du glycérol.La silice est ensuite lavée avec de l'acétate d'éthyle afin de récupérer les monoglycérides et les diglycérides intéressants selon l'invention, c'est-à-dire ceux comportant un acide gras en C18 sur le carbone en position 2 dans le groupement glycérol.

La fraction ainsi obtenue est ensuite passée sur une colonne de silice et éluée avec différents gradients de mélange acétate d'éthyle/cyclohexane compris entre 10/90 et 100/0 de façon à séparer les différentes familles chimiques de l'huile et à récupérer la famille active recherchée.

les complexes selon l'invention sont comme on l'a vu précédemment aisément fabriqués par simple mélange des trois types de composés décrits cidessus. Ce mélange est avantageusement réalisé dans un solvant organique tel que le dichlorométhane, l'éther, le chloroforme, l'acétate d'éthyle, l'éthanol, le mélange est ensuite maintenu à une température comprise entre 300C et 4o.C pendant une douzaine d'heures.

On utilise avantageusement des proportions équimolaires des deux constituants lipidiques ; toutefois, ces conditions ne sont pas critiques, et l'on pourra avantageusement utiliser un excès de sitostérol par rapport à l'acylglycérol dans des proportions de 1 à 50 en fonction de la nature du stérol (24 R ou 24 S).

Le métal est utilisé à doses très basses par rapport aux deux autres constituants, dans un rapport de 1/1 000 à 1/10 000 exprimé en moles par rapport à l'acylglycérol.

les différents constituants sont formellement identifiés par des moyens analytiques adaptés:
- pour le sitostérol: chromatographie en phase gazeuse,
- pour l'acylglycérol HPLC avec un détecteur à diffusion de lumière, sur une colonne de kromasil C18, en présence d'un éluant constitué par exemple d'acétonitrile isocratique.

On peut également utiliser la chromatographie en phase gazeuse pour l'identification des monoglycérides.

Les complexes de l'invention peuvent être représentés schématiquement par la formule in fi cidessous:

dans laquelle - M est un cation d'un métal au degré d'oxydation au moins égal à 2 utilisable
comme biocatalyseur dans le métabolisme vivant, - R est un groupement de type acylglycérol répondant à la formule (l)cidessous:

dans laquelle: R1 est un reste acyle d'acide gras en C14 à C24, saturé ou non, un atome
d'hydrogène ou un mono-, un di- ou un tri-galactose ou glucose, R2 est un reste acyle d'acide gras en C1g:: 1, de préférence provenant dc l'acide
oléique ou d'un de ses isomères de position de la double liaison (cils4, 7, 9, 11,
12 ou 13) ou un de leurs isomères isoramifiés, R3 est un reste acyle d'acide gras en C14 à C24, saturé ou non ou un atome
d'hydrogène.

Le pic de masse du complexe n'est généralement pas détectable avec les méthodes usuelles, telles que l'ionisation chimique et l'impact électronique, ce qui peut s'expliquer par le fait que les complexes formés par ces deux constituants avec le métal sont généralement instables comme la plupart des complexes organométalliques ayant une activité biologique.

On suppose toutefois, selon une première hypothèse, que les complexes selon l'invention répondent à la formule (il) :

dans laquelle R et M ont les significations données cidessus.

Selon une variante particulièrement préférée, dans les complexes décrits cidessus les groupements R1 et R3 sont constitués par de l'hydrogène.

Selon une autre variante préférée de l'invention, l'un au moins des groupements R1 ou R3 est constitué d'acide oléique (C18 1[cisj-9).

Cette première hypothèse, concernant la structure du complexe selon l'invention, est tout à fait plausible étant donné l'activité observée des produits selon l'invention. En effet, l'augmentation d'activité caractéristique du métal à des doses très basses, laisse penser qu'il s'agit d'un véritable complexe organométallique permettant de transporter le métal vers des sites spécifiques d'action où il peut agir à des doses particulièrement basses, augmentant ainsi considérablement la biodisponibilité du métal. En effet, dans le cas du vanadium, la dose du métal par kg d'animal peut être abaissée à 1 g/kg alors qu'elle est de 10 mg/kg dans le cas du sulfate de vanadyle.

Toutefois, une autre hypothèse, également plausible étant donnée la très faible quantité de métal nécessaire, serait de penser que le métal joue un rôle purement catalytique pour favoriser la réaction de l'acylglycérol et du sitostérol.

Le métal biocatalytique M est avantageusement choisi parmi les métaux suivants : zInc, fer, cuivre, magnésium, vanadium, titane, chrome, manganèse, cobalt, nickel, gallium, germanium, antimoine, étain, indium, palladium, rhodium, ruthénium, technium, molybdène, niobium, zirconium, yttrium, tantale, tungstène, rhénium, osmium, iridium, platine, or, argent, thallium.

D'une façon particulièrement avantageuse, le métal est le vanadium, au degré d'oxydation 3, 4 ou 5, de préférence 4 ou 5, de préférence encore 4. Ceci permet une application des complexes selon l'invention en particulier dans le traitement et/ou la prévention du diabète et de ses complications.

Selon un autre de ses aspects, l'invention concerne l'utilisation des complexes décrits précédemment en tant qu'agents transporteurs de cations à activité biocatalytique, les ligands liés au métal servant à accroître la biodisponibilité dudit métal.

Une telle application est d'autant plus importante que, d'une façon générale, l'homme du métier sait que la difficulté d'utilisation thérapeutique des cations métalliques est liée à leur toxicité aux doses actives : des exemples bien connus sont les sels de lithium utilisés en pathologie psychiatrique ou les sels de platine, ruthénium, palladium utilisés en cancérologie.

L'exemple du vanadium dans le traitement du diabète et de ses complications illustre bien ce problème et la solution apportée par la présente invention. En effet: - les sels de vanadium en développement depuis une décennie (vanadyl et vanadate) sont actifs chez l'animal à la dose de 5 à 10 mg/kg (exprimée en métal) par voie intrapéritonéale ; à cette dose, ils sont très toxiques et ne peuvent être administrés à l'homme.

- Certains complexes organiques décrits au cours des dernières années, notamment dans le brevet européen n 0 305 264 déposé le 10.08.88, permettent d'obtenir une activité à des doses de l'ordre de 1 à 5 mg/kg (exprimée en métal).

- Les complexes organométalliques de vanadium, décrits selon l'invention, permettent, quant à eux, une activité optimale (retour à une glycémie normale et guérison le plus souvent durable de l'ensemble des symptômes) avec une dose de vanadium (exprimée en métal) de l'ordre de 1 ssg/kg chez l'animal, donc à des doses nettement plus basses et dénuées de toxicité.

Les complexes organométalliques décrits dans la présent invention optimisent ainsi la biodisponibilité du cation métallique transporté, permettant son utilisation thérapeutique avec une toxicité faible ou nulle, ce qui présente un avantage considérable par rapport à l'état de la technique.

Selon un autre de ses aspects, l'invention concerne également des compositions pharmaceutiques contenant au moins un complexe tel que défini précédemment et un véhicule, excipient ou support pharmaceutiquement acceptable.

Selon une première variante, la composition pharmaceutique contient un complexe tel que défini précédemment d'un seul métal.

Selon une autre variante, la composition pharmaceutique peut comprendre un mélange de deux complexes tels que définis précédemment de deux métaux différents.

Un tel mélange aboutit, dans certains cas, à un effet synergique: c'est le cas, en particulier, lorsque la composition contient un mélange de complexe de vanadium et de zinc. On a pu observer, dans ce cas, un effet synergique lors de l'utilisation de composition pharmaceutique contenant un mélange de ces deux types de complexes dans le traitement du diabète.

Comme excipient, véhicule ou support pharmaceutiquement acceptable, on peut utiliser tout excipient, véhicule ou support bien connu de l'homme de l'art. On peut citer, par exemple, et de façon non limitative: le lactose, l'amidon de mais, le glucose, la gomme arabique, l'acide stéarique ou le stéarate de magnésium, la dextrine, le mannitol, le talc, les huiles d'origine naturelle riches en acides gras insaturés essentiels et en stérol. En particulier, si cela s'avère éventuellement nécessaire, on peut utiliser d'autres additifs bien connus de l'homme de l'art tels que des stabilisants, des desséchants, des liants, des tampons de pH.

Les compositions de l'invention peuvent être administrées de différentes manières, en particulier par voie intramusculaire, sous-cutanée, sublinguale, per os, permuqueuse, transdermique (en administrant la composition sous forme de patch ou de gel).

Selon un autre de ses aspects, l'invention concerne l'utilisation des complexes de l'invention pour la préparation d'un médicament destiné à être utilisé comme agent régulateur ou stimulant des systèmes biologiques biocatalytiques, en particulier dans le traitement ou la prévention des déficits ou des dysfonctionnements (génétiques ou acquis) des systèmes enzymatiques nécessitant la présence de métaux sous forme de cations comme catalyseur des réactions biochimiques notamment dans le traitement ou la prévention des maladies métaboliques, auto-immunes ou néoplasiques.

Dans toutes ces utilisations, on met en application le fait que la biodisponibilité du métal lui-même connu comme biocatalyseur se trouve accrue du fait dc sa complexation.

La complexation conduit dans tous les cas à une exaltation du pouvoir biocatalytique du métal, ce qui permet d'obtenir une activité avec des doses de métal considérablement diminuées par rapport aux doses habituellement utilisées.

Selon une des variantes particulièrement importantes de l'invention, on citera l'utilisation des complexes dans lequel le métal est choisi dans le groupe constitué du vanadium, du niobium, du sélénium, du chrome et du molybdène pour le traitement et/ou la prévention du diabète insulino-dépendant ou non insulinodépendant, de ses complications cardio-vasculaires et/ou de l'insulino-résistance et de ses complications cardio-vasculaires, en particulier l'hypertension artérielle, les coronaropathies obstructives (infarctus du myocarde, angor), les microangiopathies oculaires ou périphériques et/ou de l'hypercholestérolémie et/ou de l'hypertrigiycéridémie ainsi que de l'obésité de type androide.

On choisira parmi ces complexes de préférence ceux du vanadium au degré d'oxydation 3, 4 ou 5, de préférence encore les complexes dans lesquels le vanadium se trouve au degré d'oxydation 4.

Selon un autre de ses aspects particulièrement important, l'invention concerne également des produits diététiques, notamment des produits diététiques utilisables comme compléments alimentaires à activité régulatrice du métabolisme glucidique et/ou protectrice cardiovasculaire, incorporant les complexes précédemment définis ainsi qu'un mode de préparation de ces produits.

En effet, étant donné le mode de préparation des complexes décrits précédemment, ils peuvent se former aisément par addition dans une huile riche en acides oléiques C18: 1 de ss ou de y-sitostérol ou un extrait végétal contenant au moins l'une de ces deux formes de sitostérol et d'un sel de métal tel que défini précédemment.

Comme on l'a vu précédemment, les teneurs en acide oléique C18: 1 des huiles végétales varient considérablement selon la nature du végétal et son origine géographique.

Pour la préparation des produits diététiques selon l'invention, on utilise avantageusement une huile végétale dans laquelle les acides oléiques représtntent au moins 60 96 des acides gras.

Selon une variante préférée, on utilisera de l'huile d'olive, de préférence de l'huile de première pression à froid.

Le sitostérol sera avantageusement introduit sous forme d'un extrait végétal. On pourra, en particulier, utiliser un extrait végétal du commerce obtenu à partir du soja.

Pour obtenir un produit diététique, en particulier, utilisable comme complément alimentaire à activité régulatrice du métabolisme glucidique et/ou protectrice cardiovasculaire, on utilisera avantageusement comme sel métallique, un sel de vanadium, dans lequel le vanadium est au degré d'oxydation 4 ou 5, dc préférence 4, en particulier un vanadate ou un acétyl acétonate.

Le produit diététique est obtenu par simple mélange de l'huilc, de l'extrait végétal riche en sitostérol et du sel métallique.

Toutefois, il est apparu que l'activité était considérablement accrue lorsque le mélange était chauffé, en particulier lorsqu'il était chauffé pendant environ 12h à une température comprise entre 30 et 40-C, ce qui permet d'abaisser considérablement la teneur en métal.

A titre d'exemple de tels produits diététiques selon l'invention, on citera les mélanges constitués de:
- 100 ml d'huile dont les acides gras ont une teneur d'au moins 60 % en acides oléiques, en particulier de l'huile d'olive,
- 0,5 à 3 g de sitostérol extrait du soja,
- 10 à 100 g de sel de vanadium exprimé en poids de métal
Ce produit administré quotidiennement à raison de 5 à 10 ml per os permet une meilleure régularisation du métabolisme glucidique et une prévention des complications cardiovasculaires. Un tel traitement diététique est particulièrement indiqué dans le cas des diabétiques et des personnes présentant un hyperinsulinisme et/ou une insulino-résistance.

Les exemples suivants sont donnés à titre purement illustratif de l'invention.

EXEMPTES
Exemple 1 : Purification des produits de départ
a) Purification du sitostérol
On part d'un produit commercial extrait du soja et contenant 50 % de sitostérol., sous forme d'un mélange de B-et y-sitostérols, l'impureté principale étant le campestérol.

On prépurifie le sitostérol par élimination du campestanol et du sitostanol présents dans le mélange par recristallisation à l'acétone.

On soumet le produit à une étape de séparation par chromatographie liquide haute pression préparative sur colonne C18 avec un mélange éluant constitué d'un mélange MEOH/acétonitrile 80/20.

On récupère une fraction contenant du sitostérol à une pureté supérieure à 95 % déterminée par chromatographie en phase gazeuse.

b) Préparation d'une fraction contenant plus de 90 % d'acylglycérol
On part d'huile d'olive que l'on prépurifie sur une colonne de silice de faible hauteur (10 à 15 cm). On réalise l'élution avec le dichlorométhane ou un mélange cyclohexane/acétate d'éthyle 96/4, sous vide. Cette opération permet d'éliminer les triglycérides présents dans l'huile.

La silice est ensuite lavée avec de l'acétate d'éthyle et on récupère la fraction intéressante de l'huile.

Cette fraction est ensuite passée sur colonne de silice en éluant avec différents gradients de mélange acétate d'éthyle/cyclohexane compris entre 10/90 et 100/0. Cette opération permet de séparer les différentes familles chimiques de l'huile et de récupérer la fraction active recherchée qui est contrôlée en HPLC avec détecteur à diffusion de lumière.

Deux fractions sont concernées par cette activité, la fraction dite monoglycéride qui contient le 2-monooléylglycérol et la fraction dite diglycéride contenant le 1,2 dioléylglycérol Exemple 2 - Préparation du complexe selon l'invention
2.1) à température ambiante
2.1a) Le sitostérol préparé dans l'exemple la) est dissous dans un solvant organique avec le dérivé métallique et la fraction active de l'huile d'olive préparéeàl'étapeb).

Ainsi, dans 15 cc de dichlorométhane, on dissout:
1 g de sitostérol
50 mg de monoglycéride
25 mg de VO (AcAc)2 où AcAc désigne l'acétylacétonate.

2.1b) On procède avec les mêmes fractions de sitostérol et dc monoglycérides que dans l'exemple 2.1a.

On réalise une émulsion avec 1 g de sitostérol et 50 mg de monoglycérides on ajoute 25 mg de (VOSO4.H2O) dans un milieu contenant 10 cc d'éthanol et 90 cc de sérum physiologique.

2.1c) On prend comme dans l'exemple 2.1a cidessus mais en remplaçant les monoglycérides extraits de l'huile d'olive par 50 mg de 2monooléylglycérol commercial.

2.2) A température plus élevée
On purifie le sitostérol selon le procédé de l'exemple 1(a).

On prépare une fraction contenant plus de 90 % d'acylglycérol selon l'exemple lb).

On prépare des complexes selon l'invention selon l'un des protocoles donnés à l'exemple 2.1 mais en utilisant 100 g de VO(AcAc au lieu de 25 mg et on chauffe le mélange pendant environ douze heures à une température comprise entre 30 et 40 C.

Exemple 3: lréparation d'une composition Dharmaceutiaue
On prépare une composition pharmaceutique à partir d'un des complexes formés selon l'exemple 2, de la façon suivante:
Le complexe est incorporé au liquide d'injection et le solvant organique est chassé par exemple sur évaporateur rotatif sauf lors d'une solution hydroalcoolique qui est injectée en l'état. Le produit peut alors être administré par exemple en injection intramusculaire.

Le complexe peut également être incorporé à un patch pour une diffusion transdermique.

Le complexe peut aussi, sous sa forme solide, être conditionné en gélule gastro-résistante.

Exemple 4: Tests nbanaaoeloìoues
4.1) Détermination d'un effet hypoglycémiant
4.1a) Protocole du test de détermination d'un effet hypoglycdmiant
Les complexes obtenus selon les exemples 2.1 et 2.2 sont évalués selon la procédure suivante::
- des rats mâles de souche Wistar provenant de l'élevage de la Société If a Crédo et pesant en moyenne 160 g sont maintenus 4 jours en obscrvation et reçoivent de la nourriture et de l'eau de boisson ad libitum. ns sont soumis à une température de 21-C + 1-C, et à un cycle jour/nuit de 12h;
- ils sont ensuite anesthésiés à l'éther éthylique et on leur administre une dose de 60 mg/kg de Streptozotocine en solution dans un tampon citrate à pH 4,5 par une injection pratiquée au niveau de la veine du pénis;;
- trois jours plus tard, les animaux (qui pèsent alors 200 g environ) présentant une glycémie comprise entre 3 et 4,9 g/l sont groupés par lots de 6 animaux, 3 par cage et soumis au traitement par la substance à tester par injection intra-péritonéale (désignée ci-après par IP) en solution dans une fraction extraite d'huile d'olive et ne contenant que des triglycérides qui ont un comportement neutre par rapport aux complexes à tester (ou encore dans du transcutol).

On constitue également un lot de rats témoins normaux et un lot de rats témoins diabétiques, qui à la place des substances à évaluer, reçoivent le même volume de triglycérides extraits d'huile d'olive, par voie W.

Le contrôle de la glycémie est effectué au temps souhaité avec un
Glucometter m AMES (Bayer) sur glucofilm, lorsqu'il s'agit d'un test d'évaluation d'un effet hypoglycémiant à 2 et 6 h après l'administration, ou avec un Glucometter
IAMBES, sur glucostix lorsqu'il s'agit d'un traitement de plusieurs jours, servant à évaluer le rôle régulateur de la glycémie, préventif des complications du diabète et un éventuel effet rémanent après arrêt du traitement, par incision de l'extrémité de la queue et prélèvement d'une goutte de sang.

4.1b) Résultats
bl) Résultats obtenus avec des complexes du vanadium
Le tableau I ci-dessous donne les résultats obtenus lors du traitement de différents lots de rats en suivant le protocole du paragraphe a) et en utilisant un complexe préparé selon l'exemple 2.1 à partir de 50 mg d'acylglycérol présentant une insaturation, 1 g de sitostérol et 10 mg de vanadium (exprimé en métal). Le dérivé de vanadium utilisé pour la préparation de ce complexe est VO(AcAc)2. Le complexe est solubilisé dans de l'éthanol puis introduit dans un excipient injectable constitué de la fraction triglycéride de l'huile d'olive. Le tableau I ci dessous donne, pour différents lots de rats, les résultats obtenus aux jours J0, J5, J8, et J11 du traitement.

Ce tableau précise, aux jours J5, J8, J11:
- le taux de glycémie (glyc),
- la variation de ce taux de glycémie par rapport au taux à J0
(var%),
- le nombre de rats corrigés (corr), par rats corrigés on entend ceux
présentant une glycémie inférieure à 1,50 g/l,
- la variation du poids des rats (pds).

Dans l'exemple de préparation décrit ci-dessus, la quantité de complexe obtenu permet de traiter un lot de 6 rats pendant 11 jours avec une administration quotidienne.

TABLEAU I

Lot <SEP> J0 <SEP> J5 <SEP> J8 <SEP> J11
<tb> glyc <SEP> glyc <SEP> var% <SEP> corr <SEP> pds <SEP> glyc <SEP> var% <SEP> corr <SEP> pds <SEP> glyc <SEP> var% <SEP> corr <SEP> pds
<tb> Témoin <SEP> 3,69 <SEP> 4,38 <SEP> 19 <SEP> 11 <SEP> 4,81 <SEP> 30 <SEP> 27 <SEP> 4,4 <SEP> 19 <SEP> 30
<tb> 1 <SEP> 3,82 <SEP> 1,3 <SEP> -66 <SEP> 5 <SEP> -4 <SEP> 1,03 <SEP> -73 <SEP> 5 <SEP> 7 <SEP> 1,09 <SEP> -71 <SEP> 6 <SEP> 27
<tb> 2 <SEP> 3,77 <SEP> 1,12 <SEP> -70 <SEP> 5 <SEP> -17 <SEP> 1,21 <SEP> -68 <SEP> 6 <SEP> -10 <SEP> 1,12 <SEP> -70 <SEP> 6 <SEP> 9
<tb> 3 <SEP> 3,7 <SEP> 0,92 <SEP> -75 <SEP> 6 <SEP> -19 <SEP> 1,09 <SEP> -71 <SEP> 6 <SEP> -3 <SEP> 1,11 <SEP> -70 <SEP> 6 <SEP> 23
<tb> 4 <SEP> 3,67 <SEP> 0,94 <SEP> -74 <SEP> 6 <SEP> -10 <SEP> 1,3 <SEP> -65 <SEP> 6 <SEP> 0 <SEP> 1,19 <SEP> -68 <SEP> 6 <SEP> 22
<tb> 5 <SEP> 3,57 <SEP> 0,91 <SEP> -75 <SEP> 6 <SEP> -9 <SEP> 1,22 <SEP> -66 <SEP> 6 <SEP> -7 <SEP> 1.06 <SEP> -70 <SEP> 6 <SEP> 7
<tb> 6 <SEP> 3,85 <SEP> 0,97 <SEP> -75 <SEP> 6 <SEP> -15 <SEP> 0,93 <SEP> -76 <SEP> 6 <SEP> 0 <SEP> 1,2 <SEP> -69 <SEP> 5 <SEP> 20
<tb> 7 <SEP> 4,16 <SEP> 1,23 <SEP> -70 <SEP> 4 <SEP> -16 <SEP> 1,02 <SEP> -75 <SEP> 6 <SEP> 6 <SEP> 1,12 <SEP> -73 <SEP> 6 <SEP> 27
<tb>
fi ressort du tableau I ci-dessus que sur 42 rats diabétiques traités, la diminution de la glycémie moyenne sur l'ensemble des rats est de 70,74 %.

41 rats sur 42 ont retrouvé une glycémie normale inférieure à 1,50g'l.

On observe une activité comparable à celle obtenue avec les
produits de l'exemple 2.1 mais pour une dose de vanadium considérablement
diminuée, en remplaçant les produits de l'exemple 2.1 par ceux de l'exemple 22.

Par contre, on constate que sans l'étape de chauffage un produit fabriqué avec les
mêmes proportions que celles de l'exemple 2.2 n'a pas d'activité
b2) Résultats obtenus avec des complexes d'autres metaux
Le ligand organique utilisé est le même ; la méthode de préparation
est la même, les produits sont testés selon le même protocole pharmacologique.

Les résultats sont donnés dans le tableau fi ci dessous.

TABLEAU fi

<tb> Dérivé <SEP> métallique <SEP> Dose <SEP> (mg) <SEP> du <SEP> Dosage <SEP> de <SEP> métal <SEP> Glycémie <SEP> à <SEP> 6 <SEP> h
<tb> <SEP> produit <SEP> organiquc <SEP> (mg) <SEP> (variation)
<tb> <SEP> aucun <SEP> 5 <SEP> 0 <SEP> -5 <SEP> %
<tb> <SEP> NbCl5 <SEP> 5 <SEP> 0,5 <SEP> -36 <SEP> %
<tb> <SEP> ScO4Na2 <SEP> 5 <SEP> 0,5 <SEP> -33 <SEP> %
<tb> <SEP> Cr(SO4)2K <SEP> 5 <SEP> 0,2 <SEP> -25 <SEP> %
<tb> <SEP> VOSO4 <SEP> 5 <SEP> 0,1 <SEP> -59 <SEP> %
<tb> <SEP> ZnCl2 <SEP> 5 <SEP> 1 <SEP> -27 <SEP> %
<tb> <SEP> ZnCl2+ <SEP> 5 <SEP> 1 <SEP> mg <SEP> Zn <SEP> + <SEP> -68 <SEP> %
<tb> <SEP> VOSO4 <SEP> 0,1 <SEP> mg <SEP> V
<tb>
On observe une activité intéressante pour tous les complexes réalisés avec ces métaux.On note une activité optimale du vanadium pour abaisser la glycémie, les autres métaux apparaissent interchangeables, mais avec une activité moindre.

On observe également un intéressant effet de synergie pour
l'association des complexes contenant deux métaux (zinc et vanadium).

4.2 - Activité sur @ insulino-résistance et l hype@@nsulinisme et les pathologies associées
4.2.1) Protocole de test
L'étude est réalisée sur des rats modèle SHR (Spontaneously Hypertensîve Rat)
Ces rats sont spontanément, pour des raisons génétiques, hypertendus et hyperinsuliniques. Ce modèle est très comparable à l'hypertension dite essentielle chez l'homme. Les traitements classiques antihypertenseurs réduisent l'hypertension, mais ne modifient pas l'hyperinsulinisme.

Cette étude a été réalisée avec 3 lots de 6 rats SHR âgés de 6 semaines (noté a à f)
- lot 1: rats SHR témoins.

- lot 2 : rats SHR traités par un complexe selon l'invention
- lot 3 : rats SHR rationnés en nourriture (de façon à limiter leur consommation à une consommation identique à celle des rats du lot 2).

Ces animaux ont une glycémie normale.

Le taux d'insuline plasmatique a été dosé après 10 jours de traitement (ou de rationnement).

4.2.2) Résultats
Le tableau ffi ci-dessous donne les taux d'insuline plasmatique et la
pression artérielle des rats des trois lots définis ci dessus, ceux du lot 2 ayant été
traités par un complexe selon l'invention préparé selon l'exemple 2.2, à raison de
1 llg quotidien de vanadium par kg d'animal, ceci pendant 11 jours.

TABLEAU III

<tb> <SEP> Lots <SEP> de <SEP> rats <SEP> SHR <SEP> Insulinémie <SEP> (ng/ml) <SEP> Tension <SEP> artérielle
<tb> <SEP> (mmHg)
<tb> <SEP> a <SEP> 2 <SEP> 160
<tb> <SEP> b <SEP> 3,8 <SEP> 185
<tb> <SEP> c <SEP> 2,1 <SEP> 165
<tb> loti <SEP> d <SEP> T <SEP> <SEP> 3,4 <SEP> 180
<tb> <SEP> e <SEP> 1,04 <SEP> 140
<tb> <SEP> f <SEP> 3,8 <SEP> 190
<tb> <SEP> moyens <SEP> du <SEP> lot <SEP> 2s69 <SEP> 170
<tb>

<tb> <SEP> a <SEP> 2,28 <SEP> 160
<tb> <SEP> b <SEP> 0,64 <SEP> 120
<tb> <SEP> c <SEP> 055 <SEP> 115
<tb> lot <SEP> 2 <SEP> d <SEP> 2,2 <SEP> | <SEP> 155
<tb> <SEP> e <SEP> 0,6 <SEP> 120
<tb> <SEP> f <SEP> 2,7 <SEP> 155
<tb> <SEP> moyen <SEP> du <SEP> lot <SEP> 1,48 <SEP> 137
<tb> <SEP> a <SEP> 4,3 <SEP> 170
<tb> <SEP> b <SEP> 9,5 <SEP> 180
<tb> <SEP> c <SEP> 12,3 <SEP> 185
<tb> lot <SEP> 3 <SEP> d <SEP> 0,5 <SEP> 120
<tb> <SEP> e <SEP> 4,5 <SEP> 185
<tb> <SEP> f <SEP> 4 <SEP> 180
<tb> <SEP> moyenne <SEP> du <SEP> lot <SEP> 5,85 <SEP> 170
<tb>
Le taux d'insuline plasmatique moyen chez le rat normal est de 0,9 ng/ml.

Sur les 6 rats traités par le complexe de l'invention, 3 ont retrouvé un taux d'insuline normal, les 3 autres ont un taux d'insuline abaissé par rapport aux témoins ; il y a une corrélation avec la correction de l'hypertension artérielle.

La restriction de nourriture entraîne une augmentation importante du taux de l'insulinémie, et un maintien de l'hypertension artérielle.

Claims (19)

BEVOlDICATIONS

1. Complexe organométallique susceptible d'être obtenu par réaction:

- d'un cation d'un métal (M) au degré d'oxydation au moins égal à 2 utilisable comme biocatalyseur dans le métabolisme vivant,

- du ss ou du y-sitostérol libre ou d'un mélange de ces deux produits ou d'un extrait végétal en contenant,

- d'un mono, d'un di- ou d'un triglycéride répondant à la formule (1):

dans laquelle:: -R1 est un reste acyle d'acide gras en C14 à C24 saturé ou non, de l'hydrogène, ou

un mono, un di- ou un tri-galactose ou glucose, -R2 est un reste acyle d'acide gras en C18 présentant une insaturation, de

préférence un reste d'acide oléique ou d'un de ses isomères de position de la

double liaison (cis-6, 7, 9, 11, 12 et 13) ou d'un de ses isomères isoramifiés, - R3 est un reste acyle d'acide gras en C14-C24 saturé ou non ou un atome

d'hydrogène.

2. Complexe organométallique selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'un au moins des groupements R1 ou R3 est constitué d'un reste acyle de l'acide oléique.

3. Complexe selon la revendication 1, caractérisé en ce que les groupements R1 et R3 sont constitués d'hydrogène.

4. Complexe selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le mélange de sitostérols est un mélange de sitostérols obtenu à partir du soja

5. Complexe selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que le métal appartient à la famille constituée des métaux suivants : zinc, fer, cuivre, magnésium, vanadium, titane, chrome, manganèse, cobalt, nickel, gallium, germanium, antimoine, étain, indium, palladium, rhodium, ruthénium, technîum, molybdène, niobium, zirconium, yttrium, tantale, tungstène, rhénium, osmium, iridium, platine, or, argent, thallium.

6. Complexe selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que le métal est le vanadium au degré d'oxydation 3, 4 ou 5, de préférence 4

7. Procédé de préparation d'un complexe selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce qu'on mélange les constituants dudit complexe dans un solvant organique.

8. Procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce que l'on porte ledit mélange à une température comprise entre 30 et 4(rC C pendant environ douze heures.

9. Utilisation d'un complexe organométallique selon l'une des revcndi- cations 1 à 6, ou obtenu selon le procédé des revendications 7 ou 8, en tant qu'agent transporteur du cation M à activité biocatalytique.

10. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle contient au moins un complexe tel que défini dans l'une des revendications 1 à 6, ou obtenu selon le procédé des revendications 7 ou 8, et un véhicule, excipient ou support pharmaceutiquement acceptable.

11. Composition selon la revendication 10, caractérisée en ce qu'elle contient un complexe du vanadium.

12. Composition selon la revendication 11, caractérisée en ce qu'elle contient un complexe de zinc.

13. Utilisation d'un complexe selon l'une des revendications 1 à 6, ou obtenu selon l'une des revendications 7 ou 8, pour la préparation d'un médicament destiné à être utilisé comme agent régulateur ou stimulant des systèmes biologiques biocatalytiques, en particulier dans le traitement ou la prévention des déficits ou dysfonctionnements (génétiques ou acquis) des systèmes enzymatiques nécessitant la présence de métaux sous forme de cation comme catalyseur des réactions biochimiques notamment dans le traitement ou la prévention des maladies métaboliques, auto-immunes ou néoplasiques.

14. Utilisation selon la revendication 13 d'un complexe selon l'une des revendications 1 à 6, ou obtenu selon le procédé selon l'une des revendications 7 ou 8, dans lequel le métal est choisi dans le groupe constitué du vanadium, du niobium, du sélénium, du chrome, du zinc et du molybdène pour le traitement et/ou la prévention du diabète insulino-dépendant ou non insulino-dépendant, de ses complications cardio-vasculaires et/ou de l'insulino-résistance et de ses complications cardio-vasculaires, en particulier l'hypertension artérielle, les coronaropathies obstructives, telles qu'infarctus du myocarde ou angor, les microangiopathies oculaires ou périphériques, et/ou de l'hypercholestérolémie et/ou de l'hypertriglycéridémie ainsi que de l'obésité de type androïde.

15. Utilisation selon la revendication 14, caractérisée en ce que le métal est le vanadium, de préférence le vanadium au degré d'oxydation 3, 4 ou 5, de préférence 4.

16. Produit diététique, notamment à activité régulatrice du métabolisme glucidique et/ou protectrice cardio-vasculaire, contenant un complexe selon l'une des revendications 1 à 6 ou obtenu selon le procédé de l'une des revendications 7 ou 8, caractérisé en ce qu'il est constitué d'un mélange:

- d'huile végétale contenant une teneur en acides oléiques d'au moins 60 % en poids par rapport aux acides gras,

- de ss-sitostérol et/ou de y-sitostérol ou d'un extrait végétal en contenant

- d'un sel de métal M tel que défini dans la revendication 1.

17. Produit diététique selon la revendication 16, caractérisé en ce que le métal M est du vanadium au degré d'oxydation 4 ou 5, de préférence 4.

18. Produit diététique selon l'une des revendications 16 ou 17, caractérisé en ce qu'il contient:

- 100 ml d'huile végétale contenant au moins 60 % d'acides oléiques par rapport aux acides gras, de préférence d'huile d'olive de 1ère pression à froid,

- 0,5 à 3 g de sitostérol extrait du soja,

- 10 à 100 Fg de sel de vanadium exprimé en poids de métal.

19. Procédé de préparation d'un produit diététique selon l'une des revendications 16 à 18, caractérisé en ce que ledit mélange est porté à une température de 30 à 4OeC pendant environ 12 h.