FR2711921A1 - Composition et procédé pour la désinfection et la stérilisation d'une matière contaminée par des bactéries, des champignons, des spores, des virus et similaires. - Google Patents

Abstract

On décrit un procédé et une composition pour désinfecter une substance ou des matières, telles que des instruments médicaux, des salles d'opération, des tables d'examen, des murs, des fenêtres, des sols, des solutions, des substances poreuses et similaires, contaminées par des bactéries, des spores bactériennes, des champignons ou des virus. La composition consiste en un mélange d'un peroxymonosulfate et d'un composé à teneur en carbonyle et de leurs produits de réaction, et est, de préférence, un dioxiranne formé par oxydation in situ d'une cétone ou d'un aldéhyde par le peroxymonosulfate en solution aqueuse. Les composés à teneur en carbonyle qui ont été testés comprennent l'acétone, la 2-pentanone, la 4-hydroxy-4-méthyl-2-pentanone et l'acide camphre sulfonique. Le procédé comprend les opérations consistant à prendre une solution contenant le mélange réactionnel de dioxiranne et de mettre en contact la substance ou les matières avec elle à la température ambiante pendant un laps de temps suffisant pour désinfecter et stériliser la substance ou les matières.

Description

COMPOSITION ET PROCEDE POUR LA DESINFECTION ET LA

STERILISATION D'UNE MATIERE CONTAMINEE PAR DES BACTERIES, DES

CHAMPIGNONS, DES SPORES, DES VIRUS ET SIMILAIRES

La présente invention porte sur une composition et sur un procédé pour la désinfection et la stérilisation d'une matière contaminée par des bactéries, des champignons, des

spores, des virus et similaires.

Les institutions, telles que les hôpitaux, les cliniques, les cabinets médicaux, les laboratoires biomédicaux, les industries de traitement des denrées alimentaires, et les industries pharmaceutiques et cosmétiques, utilisent toutes des procédés de stérilisation ou de désinfection par des liquides. L'invention se rapporte à un procédé de désinfection et de stérilisation de diverses formes de matière, o un agent stérilisateur ou désinfectant efficace est nécessaire. Une telle matière peut comprendre des instruments médicaux, des tables d'examen, de la verrerie, des portes, des fenêtres, des murs, des solutions, des espaces fermés ou chambres fermées, tels que des

incubateurs, des appareillages de laboratoire et similaires.

Par conséquent, l'invention a une application potentielle à être utilisée dans la totalité des domaines ci-dessus et autres domaines o un agent stérilisateur ou désinfectant efficace est nécessaire. A des fins d'illustration seulement, les instruments médicaux seront exemplifiés tout

au long de cette description.

Des modes opératoires de stérilisation des instruments médicaux prévoient l'inactivation de microorganismes infectieux et sont d'importance particulière dans la désinfection et la stérilisation d'instruments et de dispositifs médicaux réutilisables et de certains instruments et dispositifs médicaux jetables, de dispositifs implantables, et de prothèses. Une stérilisation efficace de ces articles et appareillages pour la fabrication de produits médicaux est essentielle. Les épidémies de SIDA, de tuberculose concomitante (TB) et d'hépatite B en cours soulignent la nécessité d'une stérilisation avec un large

spectre d'application efficace. La transmission de patient-

à-patient des maladies microbiennes par l'intermédiaire

d'instruments et dispositifs contaminés a été rapportée.

Weller, I. et al., 29 Gut 1134 (1988); Hanson, P. & Collins, J., 44 Thorax 778 (1989); Bond, W., 257 J. Am. Med. Ass'n 843 (1987). De telles études ont montré l'apparition de divers agents infectieux dans les dispositifs médicaux, en

particulier du HIV dans des bronchoscopes à fibres optiques.

Ces études indiquent qu'une cause possible d'infections nocosomiales est constituée par des dispositifs médicaux

insuffisamment stérilisés qui subissent de multiples usages.

Favero, M. & Bond, W., Stérilisation, Désinfection et Antisepsie dans l'Hôpital (Sterilization, Disinfection, and Antisepsis in the Hospital), Manual of Clinical Microbioloav

183-200 (American Society of Microbiology, 1989).

Les infections pathogènes et les complications résultantes dues aux dispositifs contaminés sont difficiles à constater. Les données ont tendance à ne pas être rapportées dans toute la mesure du possible en raison des temps d'incubation et du retrait des patients du site d'exposition. Des infections incidentes de 6% pour la pneumonie, 30% pour la bactériémie et de 46% pour la fièvre après des bronchoscopies ont été montrées. Pereira, W., et al., 112 Am. Rev. Resp. Dis. 59 (1975); Burman, S., 40 J. Thoracic and Cardiovas. Surq. 635 (1960). Bien qu'une contamination par bronchoscope semble être la contamination la mieux illustrée par des documents, plusieurs autres dispositifs médicaux ont également été mis en rapport avec une transmission de maladie. La transmission de l'hépatite par des dispositifs médicaux contaminés est depuis longtemps

une préoccupation pour les chirurgiens et les cliniciens.

Une contamination bactérienne à l'intérieur d'un spiromètre après une utilisation d'une semaine a été mesurée à une

centaine de millions (109) d'organismes par millilitre.

Houston et al., 12 Breath 10 (1981). Certains modèles de ventilateurs et de respirateurs sont également suspects dans

la transmission des microorganismes infectieux.

Des modes opératoires de stérilisation sont nécessairement orientés vers la destruction de microbes que l'on rencontre partout. Certaines spores bactériennes sont extrêmement résistantes à chaleur et nécessitent un chauffage dans la vapeur d'eau sous pression à une température supérieure à 120 C pendant un laps de temps aussi long que onze heures pour assurer la destruction. Cependant, la plupart des spores n'ont pas cette résistance et sont tuées par de la chaleur humide à une température supérieure à 120 C pendant trente minutes. Les spores bactériennes sont également très résistantes aux composés bactéricides. Pour de nombreux désinfectants couramment utilisés, tels que l'hypochlorite et les phénols, des concentrations d'un millier à dix milliers de fois plus grandes sont nécessaires pour détruire des spores que celles nécessaires pour détruire des cellules végétatives. Une exception à cette généralisation est constituée par les agents alkalants, tels que l'oxyde d'éthylène et le formaldéhyde, o une quantité d'une demi- à quinze fois autant d'agent alkalant est nécessaire pour détruire des spores que celle qui est nécessaire pour détruire des cellules végétatives. Par conséquent, un agent sporicide qui est capable de stériliser une large gamme de dispositifs et instruments médicaux d'une

manière simple et directe, est souhaitable.

Les dioxirannes représentent une classe relativement nouvelle de composés. L'isolement tenté des dioxirannes a commencé en 1974 lorsque Montgomery a observé que les cétones rehaussent la vitesse de décomposition des sels peroxymonosulfates (connus également comme étant les caroates), plusieurs réactions d'oxydation de caroate ayant

été montrées comme étant catalysées par les cétones.

Montgomery, R., 96 J. Am. Chem. Soc. 7820 (1974). Il a ensuite été proposé que diverse cétones pourraient rehausser la décomposition des caroates, conduisant à une classe générale théorique de composés appelés dioxirannes. Le

schéma réactionnel proposé est le suivant.

R O R OH

OR 0-OO R

\ I1

C C + H00--'SO --

R OOSOaO P 0 dioxiranne (Formule I) La confirmation des dioxirannes comme nouvelle classe de composés a été obtenue par Murray et collaborateurs, lorsqu'ils ont isolé le diméthyldioxiranne (DMD) (R = CH3 dans la Formule I) en 1985. Murray, R. & Jeyaraman, R., 50 J. Org. Chem. 2847 (1985). La préparation du diméthyldioxiranne à partir de la cétone correspondante (acétone) et du caroate (KHSO5) a fourni un accès commode à une série d'oxydants puissants. Murray, R. & Jeyaraman, R.,

J. Org. Chem. 2847 (1985).

La préparation in situ de certains dioxirannes est accomplie par addition de caroate (peroxymonosulfate) à des solutions d'une diversité de cétones. En variante, certains dioxirannes peuvent être produits et purifiés par distillation pour fournir des solutions diluées dans la cétone à partir de laquelle ils ont été préparés, par

exemple, le diméthyldioxiranne dans l'acétone.

La préparation du diméthyldioxiranne à partir de la cétone correspondante (acétone) et du caroate (KHSO5) se déroule comme suit

O 0-OO

CH,-C--C CE, KHSO" - CH--C-CH,

Aceltone Caroate Diméthyldioxiranne

et du méthyl-n-propyldioxiranne est formé à partir de la 2-

pentanone: Il \ / Ct -C CH2 -CH: + Caroate - - CH -C---CH2-C Les exemples suivants illustrent les propriétés oxydantes puissantes, mais néanmoins spécifiques, des dioxirannes. Le brevet américain US-A-5 087 752, délivré aux noms de Murray et al., expose un procédé pour la synthèse de nitroxides utilisant des dioxirannes. Ce brevet discute des procédés antérieurs de synthèse de nitroxides à partir d'amines secondaires, qui donnaient lieu à de nombreux problèmes, tels que le manque de rendements significatifs et la production de sous-produits indésirés. Ces problèmes annulent en fait la valeur de ces procédés antérieurs. Par opposition à cela, le procédé Murray propose un mode opératoire général pour la synthèse de nitroxides à partir d'amines secondaires, qui est simple, qui peut être conduit dans un récipient de réaction unique avec des rendements élevés, et produit peu ou pas de sous-produits indésirés. La réaction se déroule comme suit: R a R O0 RR O O I I I \/ I lI I

R-C-N--C--R + 9 C--CIC -, R-,--C-R + XC-C

I I 1 I

R R R R

Amine Secondaire Diméthyldioxiranne Nitroxide Cétone Le procédé Murray assure la production de nitroxides par réaction d'une amine secondaire avec deux équivalents molaires d'un dioxiranne. L'amine secondaire est initialement oxydée en un intermédiaire hydroxylamine, lequel est encore oxydé pour former le nitroxide. Dans des travaux ultérieurs, Murray, et al., ont également produit du diméthyldioxiranne (DMD) à l'aide d'un système caroate (peroxymonosulfate)-acétone pour la production d'époxydes à partir d'alcènes, conversion d'acétaldéhyde en acide acétique et du norbornène en l'epoxyde. R. Murray, 89 Chem. Rev. 1187 (1989). Egalement, Edwards, et al. ont utilisé un système peroxymonosulfate-acétone pour assurer l'époxydation

stéréospécifique d'alcènes. Edwards, J. et al., 22 Acc.

Chem. Res. 205 (1989). En outre, des procédés analogues ont été utilisés pour convertir la pyridine en oxyde de pyridine et le phénylméthylsulfure en phénylméthylsulfoxyde, et finalement, du diperoxyde et du triperoxyde d'acétone ont été produits à 520C en l'espace de 16 heures dans du caroate en

excès.

Murray et Jeyaraman, J. Org. Chem., 50, 2847 (1985), ont également rapporté que des solutions préparées in situ de dioxiranne à la température ambiante réagissaient avec des substances en solution pour donner des rendements élevés de produits spécifiques, par exemple: (A) le trans-cinnamate d'éthyle, le cis-stilbène et le trans-stilbène ont tous été convertis en les époxydes correspondants dans un rendement de à 95% (déterminations par GLPC). Dans tous les cas, les réactions étaient stéréospécifiques avec rétention de la configuration. (B) Le phénanthrène a été converti en son 9,10-oxyde (rendement de 83%), et le phénylméthylsulfure a

été converti en phénylméthylsulfoxyde (rendement de 84%).

(C) La 2-butanone a été convertie en éthylméthyldioxiranne et cette solution a été utilisée pour convertir le phénanthrène en son 9,10- oxyde (rendement de 82%) et le trans-stilbène en

oxyde de trans-stilbène (rendement de 58%).

En suivant la voie de Murray et Jeyaraman, Curci et al., 30 Photochem. & Photobiol. 63 (1979), ont clarifié la chimie de la formation du dioxiranne en émettant l'hypothèse de l'existence d'"oxydes de carbonyle" comme intermédiaires clés dans un nombre de procédés d'oxydation. Les dioxirannes sont des éléments du plus petit système de peroxyde cyclique, et sont isomères avec les oxydes de carbonyle, Lovas, F. & Suenram, R., 51 Chemical Physical Letters 453 (1977); Adam, W. et al., 22 Acc. Chem. Res. 205 (1989), l'un des intermédiaires peroxydiques mis en jeu dans le procédé d'ozonolyse. Une démonstration courante suggère la mise en jeu possible d'oxydes de carbonyle dans la chimie des dioxirannes. 0----

\/ I

R- C-R'----

Dioxiranne Oxyde carbonyle Le dioxiranne (H2CO2) obtenu par ozonolyse de l'éthylène n'est pas stable, mais a été caractérisé par des méthodes spectrales et par micro-ondes. Adam, W. et al., 22 Acc. Chem. Res. 205 (1989); Suenram, R. & Lovas, F., 100 J.

Am. Chem. Soc. 5117 (1978).

Alors que des dioxirannes ont été utilisés comme intermédiaires pour la préparation d'autres composés, il n'a

pas été démontré d'activité ou utilité biologique.

L'utilisation de solutions aqueuses de peroxymonosulfate de potassium comme biocide à l'encontre de certaines bactéries et de certains champignons est décrite dans le brevet américain US-A-3 873 696. Egalement, l'utilisation virucide de solutions aqueuses diluées de peroxy monosulfate de potassium est revendiquées dans le

brevet américain US-A-4 404 191.

Un désinfectant à large spectre, prétendu être efficace à l'encontre des bactéries, des champignons, des virus et des spores bactériennes et fongiques, est enseigné dans le brevet américain US-A-5 186 946 et consiste en une quantité allant jusqu'à 90% en poids de peroxymonosulfate de potassium, conjointement avec des rapports équilibrés d'acides malique et sulfamique. En outre, un agent chélatant, tel qu'un sel de sodium de 1'EDTA, et un détergent consistant en un éther alkylé de polyéthylène glycol sont tous les deux requis. Ceux-ci sont établis agir d'une manière synergique et assurer la production de peroxyde

d'hydrogène et d'oxygène, en tant qu'ingrédients actifs.

Ceci est accompli par la décomposition du monoperoxysulfate de potassium, amorcée par les acides malique et sulfamique irréductibles. L'un des modes d'action biocide est établi comme étant la rupture de liaisons disulfure dans le

revêtement protéinique des spores.

Il est connu que des ponts disulfure sont une caractéristique de parois cellulaires et autres éléments particuliers contenant des protéines de cellules bactériennes. Mahler, H. & Coredes, E., Organisation Structurale des Protéines (Structural Organization of Proteins), Biological Chemistrv 74 (1966). La rupture ou cassure d'un pont disulfure par oxydation en fractions d'acide sulfonique est représentée dans le Schéma 2 suivant:

-S-S- + peracide, -S0 + SO-

pont disulfure ipont disulfure clivé (Schéma 2) Une spore bactérienne typique est entourée par un exosporium, un sac lâche particulier à certaines espèces de spores. D'autres couches, en allant vers l'intérieur, comprennent (a) des revêtements multicouches contenant des protéines riches en liaisons disulfure, (b) une couche de cortex épais qui contient la muréine polymère (ou le peptidoglycane), (c) une membrane plasmatique, et (d) un

noyau protoplasme de la spore.

Une première ligne de résistance des spores bactériennes aux agents exogènes consiste en les revêtements externes protéines qui contiennent des protéines de type kératine. Comme cela est bien connu, la stabilité de structures kératiniques est due à des réticulations fréquentes de valence primaire (liaisons disulfure) et à des réticulations de valence secondaire (liaisons hydrogène) entre des chaînes polypeptidiques voisines. Les protéines de type kératine sont typiquement insolubles dans des solutions aqueuses de sels ou des solutions diluées d'acides ou de bases, et elles sont également résistantes vis-à-vis des enzymes protéolytiques et de l'hydrolyse. En d'autres termes, les revêtements externes feuilletés sont plutôt inertes et jouent un rôle prédominant dans la protection de

la spore à l'encontre des agents exogènes.

Les couches externes sont des revêtements d'une protéine soluble dans les alcalis qui tend à former des fibrilles in vitro. Cette couche soluble dans les alcalis peut être retirée seulement après rupture mécanique des spores ou traitement par un réactif qui casse les liaisons disulfure, telles que le mercaptoéthanol. Il a été envisagé qu'une couche riche en disulfure maintient la couche soluble dans les alcalis à l'intérieur de la spore d'une certaine manière (la structure physique de ponts disulfure par exemple pourrait faire partie intégrante de cette fonction des

couches cellulaires).

La pénétration des couches externes semble jouer un rôle important dans l'action -cide des spores. Des modifications physiques ou chimiques à la paroi cellulaire permettent la diffusion d'agents anti- microbiens dans le protoplasme, interrompant par là le métabolisme cellulaire et

la synthèse de l'ADN.

Les couches externes protectrices de cellules végétatives bactériennes sont davantage sensibles aux agents anti-microbiens que ne le sont les spores, d'o il résulte qu'un agent capable de rompre les parois cellulaires des spores et de pénétrer dans les couches internes d'une spore est attendu détruire les cellules végétatives également. Les parois de cellules fongiques varient fortement parmi les taxa

et également parmi les structures végétatives et au repos.

La résistance de structures au repos aux composés anti-

microbiens est généralement comparable à celle des spores bactériennes. Les virus sont des acides nucléiques recouverts par une enveloppe protéinique protectrice. Les virus sont typiquement bien plus sensibles aux agents de rupture des protéines que ne le sont les bactéries et les champignons. Il serait souhaitable de proposer un biocide à large spectre qui joue efficacement le rôle de désinfectant et d'agent stérilisateur, qui ne nécessite pas le mélange d'une multitude d'ingrédients, qui ne possède pas d'activité résiduelle sur une longue période de temps, et qui ne nécessite pas d'élimination à partir de la matière ou de la

substance qui doit être traitée.

C'est donc un objectif principal de la présente invention que de proposer une composition désinfectante ou stérilisante comprenant un mélange fluide contenant un sel peroxymonosulfate et un composé à teneur en carbonyle et des produits de réaction de ceux-ci, en particulier o les produits de réaction conduisent à un dioxiranne, pour inactiver les virus, les champignons, et les cellules végétatives bactériennes et les spores dans ou sur divers

types de matière.

C'est également un objectif de l'invention que de proposer un procédé pour utiliser la composition désinfectante ou stérilisante telle que, lorsqu'elle sera appliquée à la matière ou à la substance devant être traitée, dans des conditions d'environnement appropriées, la composition agira comme agent microbicide très efficace pour

inactiver une large diversité de microorganismes.

Un autre objectif de l'invention consiste à proposer une composition désinfectante ou stérilisante consistant en un mélange fluide contenant un sel peroxy monosulfate et un composé à teneur en carbonyle et des produits de réaction de ceux-ci, le composé à teneur en carbonyle étant une cétone ou un aldéhyde et étant particulièrement choisi dans le groupe constitué par l'acétone, la 2-pentanone, la 4-hydroxy-4-méthyl-2- pentanone, et l'acide camphre sulfonique individuellement ou en combinaison d'un ou plusieurs éléments choisis dans le groupe constitué par les peroxydes, les aldéhydes, les époxydes et les agents tensio- actifs. Certains ions métalliques, tels

que Cu2+, peuvent également être présents.

C'est un autre objectif de l'invention que de proposer une composition désinfectante ou stérilisante consistant en un mélange fluide contenant un dioxiranne, tel que, mais sans y être limité, le diméthyldioxiranne, le 4-hydroxy-4-méthyl-2-pentadioxiranne, le 2- pentadioxiranne, et le dioxiranne d'acide camphre sulfonique, individuellement ou en combinaison avec un ou plusieurs éléments choisis dans le groupe constitué par les peroxydes, les aldéhydes, les époxydes, les agents tensio-actifs. Si on le désire, des ions métalliques, tels que Cu2+, peuvent également être présents. C'est encore un autre objectif de l'invention que de proposer une composition désinfectante ou stérilisante comprenant un mélange fluide contenant un sel peroxymonosulfate et un composé à teneur en carbonyle et des produits de réaction de ceux-ci, au moins l'un des produits de réaction étant un dioxiranne qui détruira sensiblement tous les virus, champignons et cellules végétatives bactériennes et spores actifs, couramment rencontrés dans des

opérations de stérilisation d'instruments médicaux.

C'est encore un autre objectif de la présente invention que de proposer une composition désinfectante ou stérilisante comprenant un mélange fluide contenant un sel peroxymonosulfate et un composé à teneur en carbonyle et des produits de réaction de ceux-ci, au moins l'un des produits de réaction étant un dioxiranne, destiné à être utilisé dans la désinfection et la stérilisation d'appareils de laboratoires, de dispositifs médicaux et de prothèses, d'homogreffes et d'hétérogreffes, de greffes de synthèse, d'implants, de produits alimentaires et similaires, en vue d'une utilisation sur ou dans le corps humain ou ses environs qui peuvent être l'habitat pour les êtres humains, par traitement de ces derniers par lesdites compositions

désinfectantes ou stérilisantes.

Ces objectifs, ainsi que d'autres, sont réalisés dans une composition contenant une quantité efficace d'un mélange fluide contenant du peroxymonosulfate et un composé à teneur en carbonyle et des produits de réaction de ceux-ci, pour être utilisée comme agent stérilisateur et désinfectant pour inactiver des virus, champignons et cellules végétatives bactériennes et spores, ainsi que pour inactiver des cellules choisies. En même temps que le mélange fluide, d'autres composés peuvent également être présents par suite de la réaction entre le peroxymonosulfate et le composé à teneur en carbonyle, tels que des dioxirannes, des oxydes de carbonyle,

des époxydes, des di-peroxydes et, le cas échéant, des tri-

peroxydes. Ces autres composés peuvent contribuer à l'efficacité du mélange fluide en tant qu'agent efficace stérilisateur, désinfectant, microbicide et inhibiteur cellulaire. Proposer un mélange fluide qui joue le rôle d'agent stérilisateur, désinfectant, microbicide ou inactivateur de cellules sélectives, dépend de la sélection d'une cétone appropriée ou d'un aldéhyde approprié en tant que molécule à teneur en carbonyle devant être combinée avec

la quantité appropriée de peroxymonosulfate ou caroate.

Alors qu'il est estimé que la fraction cétone ou aldéhyde en mélange avec le caroate réagit in situ pour produire des dioxirannes, il ne peut pas ne pas être tenu compte du fait que le mélange en tant que tel possède également une activité biocide. Un oxydant microbicide idéal serait un oxydant qui est efficace dans le transfert d'oxygène, qui est sélectif dans sa réactivité, qui est doux envers le produit oxydé, qui est commodément préparé à partir de matières disponibles dans le commerce, qui possède une activité catalytique, et qui est recyclable et agréable pour l'environnement. Les caractéristiques de certains mélanges fluides de peroxymonosulfate et de composé à teneur en carbonyle choisi dans le groupe constitué par les cétones et les aldéhydes s'approchent de cet idéal lorsqu'ils sont utilisés dans la

manière revendiquée présentement.

Pour modifier les revêtements externes multicouches de spores bactériennes et permettre ainsi une nouvelle pénétration et des interactions possibles dans les régions

critiques de cortex ou de protoplaste par un agent anti-

microbien, on doit choisir un agent très actif. Les agents décrits dans la présente invention sont des véhicules idéaux pour procurer des atomes réactifs, des radicaux libres et des molécules qui modifieront spectaculairement les couches protectrices de cellules végétatives bactériennes et de spores, virus, et champignons. Un aspect souhaitable de cette invention est un procédé pour la réaction in situ de peroxymonosulfate avec des cétones ou des aldéhydes pour produire des mélanges fluides qui sont des agents microbicides actifs, et l'utilisation de ces composés pour attaquer et modifier les couches protectrices de cellules végétatives bactériennes et de

spores, champignons et virus, les détruisant de cette façon.

On pense que mélanger un peroxymonosulfate avec une cétone ou un aldéhyde en tant que composé à teneur en carbonyle provoque une oxydation du composé à teneur en carbonyle pour fournir un dioxiranne, et le cas échéant d'autres composés, qui manifestent l'activité microbicide. La production de dioxirannes dans les conditions décrites ici n'a cependant pas été rigoureusement prouvée. Bien qu'une préparation in situ du mélange fluide ait donné les meilleurs résultats et soit une méthode préférée de mise en pratique de l'invention, des mélanges fluides, qui ont été préalablement préparés et ont une durée de stockage suffisante, sont également utiles

dans la présente invention.

De façon spécifique, comme exposé ci-dessous et supporté par les données d'essais dans les exemples, les biocides utilisés dans l'invention sont montrés comme inactiver sensiblement 100% des microorganismes testés, comprenant les bactéries, les spores bactériennes, les virus et les champignons, avec une exposition à une quantité efficace du mélange fluide pendant un laps de temps suffisant. Concernant la destruction de microbes, les exemples illustrent les conditions et succès que les mélanges

fluides biocides de l'invention ont atteint.

Telles qu'elles sont utilisées ici, les expressions "mélange fluide biocide", "produit caroate/carbonyle", "produit carbonyle/caroate", "mélange fluide contenant un sel peroxymonsulfate et un composé à teneur en carbonyle et des produit de réaction de ceux-ci", "produit de réaction peroxymonosulfate/carbonyle" et "dioxiranne", et toutes autres expressions analogues, sont utilisées de façon interchangeable. Alors qu'on estime que les propriétés biocides du fluide illustré sont attribuées à la formation de dioxirannes, il ne doit pas être dénié ou mis en doute que des mélanges de composés à teneur en carbonyle et caroate possèdent également une activité biocide. Le terme "dioxiranne" est utilisé de façon préférentielle pour décrire l'invention, mais il est estimé comprendre les mélanges

carbonyle/caroate fournissant des produits carbonyle/caroate.

Cette définition est estimée être appropriée parce qu'une majeure partie du dioxiranne produit l'est par la réaction in

situ du composé carbonyle et du caroate.

Telle qu'elle est utilisée ici, l'expression "composé carbonyle" signifie une cétone ou un aldéhyde, et n'est pas destinée à comprendre d'autres composés contenant un groupe carbonyle, tels que les acides, esters, anhydrides, amides et halogénures d'acyle. De préférence, le composé

carbonyle est une cétone.

Tels qu'elles sont utilisées ici, les expressions "caroate", "sel caroate", "peroxymonosulfate", "sel peroxymonosulfate" sont utilisées de façon interchangeable, et, sauf indication contraire, se réfèrent au sel de potassium et, par conséquent, sont également synonymes des expressions "caroate de potassium" et "peroxymonosulfate de potassium". Tels qu'ils sont utilisés ici, les termes "matière" ou "substance" se rapportent à un produit contaminé qui doit être stérilisé ou désinfecté. Ce sera, de préférence, une surface d'une quelconque sorte, telle qu'un instrument médical, une table d'examen, des tables et équipements de salles d'opération, de la verrerie de laboratoire ou autres surfaces, des murs, des portes, des sols, des fenêtres et similaires, qui nécessitent un lavage ou un essuyage avec une solution de désinfectant. Cependant, des chambres d'incubation, des voies d'air, des espaces fermés et similaires peuvent être traités par une solution de dioxiranne gazeuse ou liquide. Il est encore envisagé que des solutions, des matières poreuses telles que des éponges, des denrées alimentaires et n'importe quels autres produits qui peuvent être amenés en contact avec le dioxiranne, peuvent égalementêtre considérés comme "substance" ou "matière". De ce fait, on doit donner à ces termes la définition la plus large possible, limitée seulement par la fonctionnalité du produit caroate/carbonyle ou dioxiranne dans la désinfection ou stérilisation d'une telle "substance"

ou "matière".

Telle qu'elle est utilisée ici, l'expression "instrument médical" signifie un instrument, ustensile, outil, machine, dispositif, dispositif implantable, prothèse et similaires, qui sont soumis à une contamination par des microbes et qui doivent être désinfectés ou stérilisés avant

d'être utilisés.

Telle qu'elle est utilisée ici, l'expression "in situ" signifie la préparation du mélange fluide contenant le produit caroate/carbonyle ou le dioxiranne au ou au voisinage du moment ou de l'emplacement o le mélange fluide doit être

utilisé pour désinfecter ou stériliser une matière.

Tel qu'il est utilisé ici, le terme "fluide" désigne à la fois les liquides et les gaz qui servent de

supports pour le produit dioxiranne (caroate/carbonyle).

Telle qu'elle est utilisée ici, l'expression "quantité efficace" signifie une quantité du mélange fluide contenant un dioxiranne ou produit caroate/carbonyle, et, facultativement, d'autres ingrédients qui sont efficaces dans la destruction de tous ou de pratiquement tous les microbes contaminant la matière qui doit être désinfectée ou stérilisée à l'intérieur d'un certain laps de temps. Il doit être reconnu qu'une quantité efficace est fonction de la concentration des ingrédients actifs du mélange fluide et du temps d'exposition. Comme cela sera représenté dans les exemples, des concentrations d'un mélange fluide qui ne détruisent pas tous les microbes contaminants en un cours laps de temps sont totalement efficaces pour détruire la totalité des microbes contaminants dans une plus longue période de temps. La présente invention est envisagée comme englobant des circonstances dans lesquelles des concentrations élevées et des laps de temps courts sont utilisés, aussi bien que des concentrations inférieures et

des laps de temps plus longs.

L'invention englobe également un mélange fluide désinfectant, qui peut être une solution ou un gaz ou un mélange de ceux-ci, préparé par mélange de diverses cétones ou de divers aldéhydes avec un caroate dans une solution polaire appropriée ou un environnement gazeux approprié. De préférence, la solution polaire est une solution aqueuse, mais elle peut également contenir ou consister en alcools, cétones et similaires. Comme cela sera montré ci-dessous, il

est souvent souhaitable d'avoir un excès de caroate présent.

Dans de telles situations, des situations aqueuses ou alcooliques seraient préférées par rapport à un solvant à teneur en carbonyle, tel qu'une cétone. Comme préalablement établi, on pense que le caroate oxyde la fraction carbonyle pour former un dioxiranne, et que c'est le dioxiranne qui est le microbicide principal. Par exemple, la 2-pentanone peut être mélangée avec du caroate dans l'eau ou des solutions aqueuses contenant également d'autres solvants ou ingrédients, afin de former le méthyl-n-propyldioxiranne. De façon analogue, l'acétone est mélangée avec du caroate dans

un environnement aqueux afin de former du diméthyldioxiranne.

Egalement, l'acide camphre sulfonique est mélangé avec du caroate dans l'eau afin de former le dioxiranne de l'acide camphre sulfonique. Toutes ces réactions sont effectuées à la température ambiante, d'environ 20-25 OC. L'invention n'est pas destinée à être limitée au dioxiranne ou produits carbonyle/caroate spécifiques illustrés par les exemples. En règle générale, les solutions résultantes contiennent au moins environ 60% d'eau. Les solutions sont alors prêtes à être utilisées pour désinfecter, assainir ou stériliser des surfaces ou des objets. Cependant, d'autres concentrations de caroate, cétones ou aldéhydes et dioxirannes peuvent être obtenues par dilution ou concentration de la solution réactionnelle initiale. L'activité biocide des solutions est dépendant du temps d'exposition et même à de faibles concentrations, par exemple 2,5% (p/v) de caroate avec 5%

(p/v) de cétone, seront efficaces en l'espace de 30 minutes.

Comme présenté ci-dessus, une mole d'un composé carbonyle, tel que l'acétone réagit avec une mole de caroate pour produire un dioxiranne, à savoir le diméthyldioxiranne dans le cas de l'acétone. Théoriquement, des rapports stoechiométriques de réactifs sont satisfaisants dans la plupart des cas. Cependant, pour les objectifs de cette invention, il est estimé suffisant de proposer des rapports molaires d'entre environ 0,01:1 à 10:1, et, de préférence, d'entre environ 0,1:1 à 3:1, de caroate à composé à teneur en carbonyle. Les rapports de caroate inférieurs sont suffisants pour fournir suffisamment de dioxiranne ou carbonyle/caroate pour entretenir une activité biocide lorsqu'au moins environ 1% en poids de chacun parmi le caroate et la cétone ou l'aldéhyde est présent dans la composition. Cependant, la portée de l'invention doit être interprétée seulement par fonctionnalité. Par conséquent, des rapports de caroate à carbonyle même supérieurs à 10:1 peuvent être utilisés si cela est justifié. Comme représenté dans le Schéma 2, l'oxydation des liaisons disulfure nécessite une quantité très importante d'oxygène. Dans de tels cas, un dioxiranne peut être réduit à nouveau en son précurseur carbonyle. Un excès de caroate produirait in situ du dioxiranne supplémentaire et permettrait au précurseur carbonyle d'être oxydé et réduit sur une base répétitive

pendant un laps de temps aussi long que nécessaire.

La concentration de caroate/carbonyle ou de dioxiranne dans un fluide peut être aussi élevée que la saturation ou aussi faible que 1% en poids. Des concentrations supérieures nécessitent moins de temps, mais sont plus toxiques et peuvent requérir une manipulation spéciale et une élimination à partir de la matière devant être traitée. Une concentration inférieure nécessitera davantage de temps pour désinfecter et/ou stériliser la matière qui est traitée, mais peut ne pas nécessiter d'élimination. A l'évidence, plus la concentration des ingrédients actifs est élevée, plus fortes seront les chances que le biocide viendra en contact avec l'organisme à détruire. L'invention se rapporte à l'utilisation des compositions pour leur but visé, et les concentrations à utiliser peuvent facilement être déterminées par l'homme du métier. D'une façon générale, des concentrations comprises

entre environ 1 et 40% en poids sont satisfaisantes.

Exemples

Dans l'expérimentation de l'efficacité des dioxirannes comme agents stérilisateurs et désinfectants, des solutions d'essai ont été préparées par combinaison de caroate et d'une cétone in situ pour produire des solutions contenant un caroate/composé carbonyle ou un dioxiranne actif. Des solutions d'essai contenant un pourcentage en poids variable de caroate et d'une cétone dans de l'eau distillée ont été mélangées à la température ambiante. Les mélanges étaient transparents, incolores, sans signe de dégagement de gaz, et n'ont pas formé de précipité. Les solutions témoins et les solutions tampons ont également été

préparées et testées concurremment.

Des solutions ont été préparées comme suit. Du caroate a été pesé dans une fiole de 5 ml taré, et la cétone a été pesée dans une fiole à capuchon à vis de 30 ml. De l'eau ou une solution tampon a été ajoutée à la fiole contenant l'acétone pour fabriquer des échantillons de 10 g (poids net). Les solutions ont été activées par addition du caroate pré-pesé aux ingrédients aqueux dans la fiole de ml à la température ambiante, agitation du mélange résultant, et en laissant le mélange reposer pendant 10 minutes à la température ambiante. Les solutions ont

ensuite été testées pour leur activité biocide.

Le caroate a été obtenu auprès d'Aldrich Chemical Co., Inc. (Milwaukee, WI), commercialisé sous la marque de fabrique "OXONE" de DuPont. Cette formulation de caroate est un mélange de peroxymonosulfate de potassium, d'hydrogéno sulfate de potassium et de sulfate de potassium (2KHSO5.KHSO4.K2SO4). Ont également été obtenus auprès d'Aldrich Chemical Co., Inc., l'acide 10-camphre sulfonique et la 4hydroxy-4-méthyl-2-pentanone, alors que l'acétone a été obtenue auprès de Mallinckrodt Inc. (St. Louis, MO). De l'eau désionisée, distillée, a été utilisée dans tous les cas, excepté si un tampon est indiqué. La solution tampon était KH2PO4 0,5 M, pH 7,4. Les agents tensio- actifs polyéthylène glycol (Union Carbide, Danbury, CT) et nonyl phénol (Emery Industries, Los Angeles, CA) ont été testés

pour déterminer une amélioration possible de l'activité anti-

bactérienne des solutions biocides due à l'action de surface sur les cellules. Toutes les quantités d'ingrédients dans les solutions sont exprimées dans les exemples suivants en

termes de pourcentage en poids.

Exemple 1

Le mode opératoire utilisé pour tester l'activité sporicide des composés caroate/cétone ou dioxiranne était conforme aux Méthodes Officielles d'Analyse de l'Association des Chimistes Analytiques Officiels (Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists) 966.04 (AOAC 1990), qui est par les présentes incorporée par référence. B. subtilis (ATCC 19659) a été amené à se propager dans un bouillon nutritif d'extrait de terre. Ce milieu a été préparé par extraction d'une livre de terre de jardin dans 1 litre d'eau, filtration plusieurs fois à travers un papier SS #588, et dilution au volume. A ceci, on a ajouté g d'extrait de boeuf, 5 g de NaCl et 10 g de peptone. Le milieu a ensuite été porté à ébullition pendant 20 minutes et dilué au volume. Le pH a été ajusté à la valeur de 6,9 par addition de NaOH 1 N, et le milieu a été à nouveau filtré sur papier. Le milieu a ensuite été distribué dans des tubes et passé à l'autoclave à 121 C pendant 60 minutes. Des tubes de bouillon nutritif de terre ont été inoculés par B. subtilis et incubés au moins 72 heures à 37 C. La culture a été macérée par agitation par tourbillonnement ou broyage pour rompre la pellicule. La culture a ensuite été filtrée à travers du coton ou de la gaze humide dans des tubes à essai stériles de x 150 mm. On a contaminé des boucles de suture en soie par Bacillus subtilis en les plaçant dans les tubes de culture et en les trempant avec agitation pendant un laps de temps de à 15 minutes. Les boucles de suture contaminées ont ensuite été buvardées sur du papier filtre et placées dans un dessicateur sous vide contenant CaCl2 et séchées pendant

24 heures sous un vide de 22 pouces de mercure (74290 Pa).

Les boucles contaminées ont été placées dans la solution de caroate/cétone ou de dioxiranne. Chaque solution échantillon a été testée avec six boucles de suture. Les boucles de suture ont été retirées des solutions 10, 20 et 30 minutes après exposition initiale à la solution. Les boucles de suture ont ensuite été placées dans des tubes individuels contenant 20 à 25 ml de milieu thioglycollate (Difco), les tubes ont été agités par tourbillonnement et les boucles de suture ont été transférées dans des tubes frais de milieu

thioglycollate.

Les tubes contenant le milieu thioglycollate ont été transportés dans un laboratoire indépendant et ont été incubés à 35 2 'C pendant 72 heures, puis lus par des techniciens de laboratoire qualifiés pour la croissance

bactérienne.

Le Tableau 1 montre les effets de concentration de caroate et de cétone et de la présence d'un tampon et/ou agent tensio-actif sur l'activité bactéricide sur une bactérie formant des spores, Bacillus subtilis. Les échantillons A-10 et B-26 montrent que la réaction résultant d'un mélange d'acétone et de caroate, c'est-à-dire le diméthyldioxiranne, est efficace pour détruire les bactéries formant des spores. Même à de faibles concentrations (échantillon B-29), la formation de diméthyldioxiranne a montré une activité sporicide significative. Cependant, l'addition de tampon a inhibé l'activité bactéricide du mélange, et le caroate seul ne manifeste pas une bonne

activité anti-bactérienne.

Tableau 1

Echantil- Caroate/ % de Diluant % d'agent % de Ion Acétone Caroate + tensio-actif3croissance4 Acétone2

A-1 ND5 5 H20 0 75

A-5 ND 5 Tarrpon 0,1 75

A-10 0,09 10 H2O 0 0

B-24 0,094 10 Tampon 0 92

B-26 0,047 15 H20 0 0

B-27 ND 5 H20 0,1 92

B-28 0,094 10 H20 0,1 33

B-29 0,024 12,5 H20 0,1 25

B-30 0,047 15 Tampon 0 25 1 Rapport molaire 2 Pourcentage en poids de caroate plus acétone dans la solution 3 Tensio-actif indique le tensio-actif nonyl phénol 4 La croissance a été calculée sur la base de tous résultats positifs pris à 10, 20 ou 30 minutes d'exposition 5 Non défini parce qu'il n'a pas été ajouté d'acétone 6 Tampon indique KH2PO4 0,5 M, pH 7,4

Exemple 2

Le mode opératoire de l'Exemple 1 a été suivi, excepté que les réactifs cétones testés étaient l'acétone

(AC), l'acide camphre sulfonique (CSA) et la 4-hydroxy-4-

méthyl-2-pentanone (4HP). Ni le CSA ni la 4HP n'ont montré d'activité sporicide en l'absence de la présence de caroate (échantillons respectivement CO2A et C03A). Cependant, mélanger un caroate avec CSA (échantillon C-02) ou un caroate avec 4HP (échantillon C-08) en présence d'une petite quantité de tampon n'a pas conduit à une croissance bactérienne. Une concentration supérieure de tampon dans le mélange a inhibé

l'activité sporicide de caroate et de CSA (échantillon E-07).

L'alcool isopropylique (50% d'IPA, échantillon E-08) n'a pas montré d'effet sur la croissance des spores. Par conséquent, les dioxirannes résultants produits par mélange in situ de caroate et soit d'acétone, soit de CSA, soit de 4HP ont montré une efficacité de 100% dans la destruction de la

bactérie formant des spores, B. subtilis.

Tableau 2

Echantil- Caroate/ % Caroate % Tampon3 % H20 % de Ion Cétone1 + Cétone2 croissance4

C-02 0,38 CSA 20 I 79 0

C-02A0 CSA 10 1 79 100

C-03 0,19 4HP 20 1 79 0

C-03A 04HP 10 1 79 100

C-06 0,094 AC 20 0 80 0

E-07 0,38 CSA 20 80 0 16

E-08 ND' 0 50 IPA 50 100

Rapport molaire suivi par une abréviation pour indiquer la cétone utilisée 2 Pourcentage en poids de caroate plus cétone dans la solution 3 Le tampon, s'il était présent, était soit KH2PO4 0,5 M, pH 7,4, soit l'alcool isopropylique à 50% (IPA) 4 La croissance a été calculée sur la base de tous résultats positifs pris à 10, 20 ou 30 minutes d'exposition Non défini parce qu'il n'a pas été ajouté de cétone. Exemple 3 Dans cet exemple, le mode opératoire de l'Exemple 1 a été suivi, à l'exception que les échantillons ont été testés immédiatement après la préparation. Le Tableau 3 montre que la combinaison de caroate et de 4HP était complètement efficace pour éliminer la croissance bactérienne, alors que la combinaison de caroate et de CSA n'était pas aussi efficace qu'après 10 minutes d'incubation (Exemple 2). Cette période d'incubation nécessaire pour le caroate et le CSA indique qu'un produit de réaction est formé

comme ingrédient actif, c'est-à-dire le dioxiranne de CSA.

Il est également estimé que le 4HP et le caroate réagissent aussi, mais que la cinétique de la réaction permet au dioxiranne de se former bien plus rapidement. L'effet du tampon dans la diminution de l'efficacité de la combinaison caroate-cétone, noté dans les Exemples 1 et 2, a été présenté

comme étant répétitible.

Tableau 3

Echantil- Caroate/ % Caroate % H20 % Tampon3 % de Ion Cétone1 + Cétone2 croissance4

C-10 0,38 CSA 20 80 0 10

C-11 0,38 CSA 20 53 0 15

C-12 0,38 CSA 20 60 20 5

C-13 0,19 4HP 20 80 0 0

C-14 0,19 4HP 20 0 80 5

1 Rapport molaire suivi d'une abréviation pour indiquer la cétone utilisée 2 Pourcentage en poids de caroate plus cétone utilisée dans la solution 3 Tampon indique KH2PO4 0,5 M, pH 7,4 4 La croissance a été calculée sur la base de tous résultats

positifs pris à 10, 20 ou 30 minutes d'exposition.

Exemple 4

Dans cet exemple, le mode opératoire conforme à l'Exemple 1 a été suivi, comprenant la période de réaction de minutes après le mélange de la cétone et du caroate. Les résultats présentés dans le Tableau 4 démontrent que le tampon phosphate de potassium monobasique gène l'activité bactéricide et sporicide (échantillon C-14A). Un tampon disponible dans le commerce, utilisé dans l'échantillon C-15N, n'a pas gêné l'activité du produit de réaction

contenant le dioxiranne.

Tableau 4

Echantil-Caroate/ % de Caroate Diluant % de Ion Cétone' + Cétone2 Croissance3

C-10 OA 0,38 CSA 20 H20 O

C-11A 0,38 CSA 20 14% QAMOH4 O

C-13A 0,19 4HP 20 H20 O

C-14A 0,38 CSA 20 KH2PO4 0,5 M, pH 7,4 5 C-15N 0,38 CSA 20 Sol. Tamp. Fisher O pH 45 1 Rapport molaire suivi par une abréviation indiquant la cétone utilisée dans la solution de désinfectant 2 Pourcentage en poids de caroate plus cétone dans la solution 3 La croissance a été calculée sur la base de tous résultats positif pris à des expositions de 10, 20 ou 30 minutes 4 QAMOH indique l'hydroxyde de tétrabutylammonium Biphtalate de potassium, pH 4,0 à 25'C, fourni par Fisher

(#SO-B-101).

Exemple 5

Dans cet exemple, le mode opératoire de l'Exemple 1 a été suivi, à l'exception que les solutions de désinfectant ont également été testées contre Clostridium sporogenes (ATCC 3584). C. sporogenes a été amené à se propager dans un milieu extrait de terre oeuf-viande. On a préparé ce milieu en plaçant 1,5 g de milieu oeuf-viande déshydraté et 15 ml

d'extrait de terre de jardin dans des tubes de 25 x 150 mm.

Le milieu a ensuite été passé à l'autoclave à 121 C pendant

minutes et utilisés pour faire se propager les bactéries.

Les tubes de culture ont été inoculés par des bactéries et incubés au moins 72 heures à 37 C. La culture a ensuite été filtrée à travers du coton ou de la gaze humide dans des tubes de culture stériles de 25 x 150 mm. Dix boucles de suture ont été placées dans la culture, incubées, séchées et testées comme décrit à l'Exemple 1, excepté qu'aucune instruction spécifique n'a été donnée au technicien de laboratoire d'attendre 10 minutes après la préparation de la solution de désinfectant avant son utilisation.

Tableau 5

Echantil-lon Caroate/ % Caroate + % B. subtiis C. sporogenes3 Cétone' Cétone2 H20 _

20 30 10 20 30

B1 0,38 CSA 20 80 50 0 0 25 0 0

CCO ND' 10 90 100 100 100 100 100 100

0 CCP 0,14 P5 20 80 0 0 0 0 0

P2 0,19 4HP 20 80 10 0 0 10 0 0

CS13 0,38 CSA 20 80 0 0 0 0 0 0

CS14 0,38 CSA 14 86 5 0 0 15 5 0

CS15 0,38 CSA 20 80 5 0 0 0 0 0

CS13A ND 10 90 100 100 100 100 100 100

Rapport molaire suivi par une abréviation pour indiquer la cétone utilisée 2 Pourcentage en poids de caroate plus cétone dans la solution 3 La croissance d'organismes a été déterminée après 10, 20 et minutes d'exposition à la solution de désinfectant 4 Non défini parce qu'il n'a pas été ajouté de cétone Indique que la 2-pentanone était la cétone utilisée. Cette série d'exemples a été conduite pour voir si les résultats préalables étaient reproductibles. En fait, les résultats sont sensiblement les mêmes qu'auparavant. Les spores sont éliminées en 20 minutes, excepté si le niveau caroate/CSA était réduit à 7% chacun (CS14). Les solutions ont été utilisées immédiatement après le mélange (aucun temps

d'attente spécifique n'a été spécifié dans le protocole).

Exemple 6

Dans cet exemple, le mode opératoire de l'Exemple 1 a été suivi, à l'exception que les bactéries ne formant de spores Pseudomonas aeruginosa, Salmonella choloraesuis, et Staphylococcus aureus ont été utilisées à la place de B. subtiles. Les échantillons (50 g) ont été exposés à la solution de

désinfectant pendant 20 minutes.

Tableau 6

Echantillons de 50 g, % de Croissance Exposition de 20 minutes, Pénicylindres en acier inoxydable Dioxiranne1 abcoCIDE2 P. aeruginosa 0 0 S. choloraesuis 0 0 S. aureus 0 0 La solution de dioxiranne contenait 10% de caroate, 10% de CSA et 80% d'H20. Le rapport molaire de caroate à la acétone était de 0,38 2 abcoCIDE est une solution de dialdéhyde activé (glutaraldéhyde à 2%) fourni par abco Dealers, Inc.,

Milwaukee, WI.

Cette étude testant contre Pseudomonas aeruginosa, Salmonella choloraesuis et Staphylococcus aureus avec une comparaison avec abcoCIDE a montré des résultats équivalents en 20 minutes; les deux agents ont empêché une croissance

dans tous les organismes.

Exemple 7

Dans cet Exemple, le mode opératoire de l'Exemple 5 a été suivi, excepté que l'on a laissé reposer les solutions de désinfectant pendant 10 minutes à la température ambiante avant qu'elles aient été testées. La solution résultante contenant le dioxiranne contenait 10% de caroate et soit 10% de CSA soit 10% du sel de sodium de CSA (NaCSA). Ainsi, le rapport molaire de caroate à cétone était de 0,38 dans chaque cas. NaCSA a été préparé par addition de 0,172 g de NaOH par gramme de CSA en solution. La quantité appropriée de caroate a ensuite été ajoutée à la solution pour préparer le dioxiranne en vue de l'expérimentation. Comme présenté dans le Tableau 7, le sel de sodium de CSA (échantillon 2CNA1-9)

réduit l'efficacité du dioxiranne à l'encontre de B. subtilis.

Ce résultat suggère que la présente d'ions dans les solutions tamponnées peut gêner l'efficacité des dioxirannes dans ces essais également. Cependant, des temps d'exposition plus longs à des solutions de dioxiranne contenant NaCSA ont fourni une activité sporicide accrue sur des périodes d'exposition plus courtes. Le Tableau 7 montre également que

NaCSA était 100% efficace dans la destruction de C. sporogenes.

Des solutions de dioxiranne préparées à partir de CSA et de caroate étaient d'excellents bactéricides à l'encontre à la fois de B. subtiles et C. sporogenes. Chaque donnée est la

* moyenne de 9 répétitions de l'expérience.

Tableau 7

Echantillon Cétone B. subtiîs C. sporogenes

20 30 10 20 30

min. min. min. min. min. min. 2 5 2CNA1-9 NaCSA 97 67 19 0 0 0

2CS1-9 CSA 0 0 0 0 0 0

Exemple 8

Dans cet Exemple, les modes opératoires de l'Exemple 5 ont été suivis, y compris qu'il n'a pas été donné d'instructions spécifiques au technicien de laboratoire

d'attendre 10 minutes avant l'utilisation de la solution.

Les solutions résultantes contenant du dioxiranne ont été testées pour l'activité bactéricide, puis les solutions contenant du dioxiranne ont été stockées à une température de à 24 C pendant 6 jours et retestées. Les résultats des essais immédiatement après que l'on ait rassemblé le caroate et les cétones sont présentés dans le Tableau 8. Une large gamme de résultats a été obtenue dans les 10 premières minutes, suggérant que les 10 minutes initiales après le mélange du caroate et de la cétone sont critiques. Cette période de temps permet à la réaction de se produire, laquelle conduit à la production du dioxiranne. Cependant, vingt minutes après la préparation de la solution de dioxiranne, l'activité sporicide des solutions d'essai a été établie.

Tableau 8

Echantil-lon Formule B. subtilis' C. sporogenes' % de Croissance % de Croissance (min/exp) (minlexp) Caroate/ % Caroate + 10 20 30 10 20 30 CSA2 Cétone'

8-1-PC 0,38 20 25 0 0 50 0 0

8-1A-PC 0,38 20 100 0 0 50 0 0

8-2-PC 0,31 22 0 0 0 0 0 0

8-2A-PC 0,31 22 25 0 0 0 0 0

8-3-PC 0,25 25 0 0 0 0 0 0

8-3A-PC 0,25 25 0 0 0 0 0 0

8-4-PC 0,38 24 75 0 0 0 0 0

8-4A-PC 0,38 24 25 0 0 0 0 0

8-5-PC 0,38 30 0 0 0 0 0 0

8-SA-PC 0,38 30 50 0 O 25 0 0

8-6-PC 0,14P' 20 O O 0 25 O O

8-6A-PC 0,12 P 22 0 0 0 25 0 0

8-7-PC NDO 10 100 100 100 50 0 0

8-7A-PC O 10 100 100 100 100 100 100

La croissance a été déterminée après 10, 20 et 30 minutes

d'exposition des organismes aux solutions désinfectantes.

2 Rapport molaire.

3 Pourcentage en poids de caroate plus cétone dans la solution.

4 P indique que la 2-pentanone a remplacé le CSA.

Non défini parce qu'il n'a pas été ajouté de cétone.

Exemple 9

Le Tableau 9 montre les résultats de l'expérimentation des solutions de dioxiranne choisies parmi les échantillons provenant du Tableau 8 après 6 jours de stockage à une température de 20 à 24 C. Les dioxirannes préparés avec 10% de caroate et 10% de CSA ont donné presque les mêmes résultats que lorsqu'ils étaient fraîchement préparés, 100% d'activité sporicide après une exposition de minutes. Cependant, les dioxirannes préparés avec le caroate et la pentanone (échantillon 8-6-PC) n'a pas

manifesté d'activité sporicide 6 jours après la préparation.

Ainsi, en termes de stabilité sur une longue période de temps, les dioxirannes préparés avec de l'acide camphre sulfonique ont fourni les meilleurs résultats parmi ceux

testés.

Tableau 9

Echantillon Formule B. subtilis C. sporogenes' % de Croissance % de Croissance (min/exp) (min/exp) Caroate/ % Caroate + 10 20 30 10 20 30 CSA2 Cétone3

8-1-PC 0,38 20 50 0 0 0 0 0

8-2-PC 0,31 22 50 0 0 0 0 0

8-3-PC 0,25 25 25 0 0 0 0 0

8-4-PC 0,38 24 25 0 0 25 0 0

8-5-PC 0,38 30 25 0 0 0 0 0

8-6-PC 0,14 p4 20 100 100 100 100 100 100 1 La croissance a été déterminée après 10, 20 et 30

minutes d'exposition aux solutions désinfectantes.

2 Rapport molaire.

3 Indique le pourcentage en poids du caroate et de la cétone

4 P indique que la 2-pentanone a remplacé la CSA.

Exemple 10

Dans cet exemple, le mode opératoire de l'Exemple 5 a été suivi à l'exception que le mélange de caroate et de CSA a été équilibré pendant 10 minutes afin de former le dioxiranne de CSA avant d'être testé. Trois mélanges d'essai ont été préparés, à savoir TS-1, TS-2 et TS-3, chacun contenant des rapports équimolaires de caroate et de CSA,

c'est-à-dire 26% en poids de caroate et 10% en poids de CSA.

Les trois mélanges d'essai ont été ensuite testés contre à la fois B. subtilis et C. sporogenes. Les analyses des tubes de culture ont été faites 3, 7, 14 et 21 jours après le début de l'expérience. Comme présenté dans le Tableau 10, il n'a pas été détecté de croissance dans les tubes pour l'un ou l'autre des organismes. Les mêmes trois mélanges d'essai ont été gardés à la température ambiante pendant 2 jours, puis l'efficacité des mélanges d'essai a été testée à nouveau de la même manière. Comme présenté dans le Tableau 10A, il n'a pas été observé de croissance de l'un ou l'autre des organismes à n'importe quel moment de temps. Ces résultats montrent que le dioxiranne de CSA restait efficace contre les

bactéries formant des spores pendant au moins 2 jours.

Tableau 10

Echan- Microbe % de Croissance tillon 3 j 7 j 14 j 21 j TS-1 B. subtilis 0 0 0 0 C. sporogenes 0 0 0 0 TS-2 B. subtilis 0 0 0 0 C. sporogenes 0 0 0 0 TS- 3 B. subtilis 0 0 0 0 C. sporogenes 0 0 0 O

Tableau 10A

Echan- Microbe % de Croissance tillon 3 j 7 j 14 j 21 j TS-1 B. subtilisO O O O C. sporogenes O O O O TS-2 B. subtilisO O O O C. sporogenes 0 O O O TS-3 B. subtilisO O O O C. sporogenes O O O O

Exemple 11

Le mode opératoire utilisé pour tester l'activité tuberculocide descomposés caroate/cétone ou dioxiranne était la Méthode d'Essai de l'Activité Tuberculocide adoptée par l'Agence de Protection de l'Environnement le 11 Décembre 1985, qui est par les présentes incorporée par référence. Voir Agence Américaine de Protection de l'Environnement, Office des Pesticides et des Substances Toxiques, Notice d'Entrée des Données d'Efficacité Tuberculocide pour tous les Pesticides Antimicrobiens avec des Activités Tuberculocides (Reçu le 13 Juin 1986). Des solutions d'essai ont été évaluées à l'aide de Mycobacterium bovis BCG (TMC 1028) développé jusqu'à un titre de 1,49 x 107 unités formant des colonies (CFU) par ml de milieu de Proskauer-Beck modifié contenant du Tween 80. Ce milieu contient 2,5 g de KH2PO4, 5,0 g d'asparagine, 0,6 g de MgSO4.7H20, 2,5 g de citrate de magnésium, 0,0046 g de FeCl3, 0,001 g de ZnSO4.7H20, 20 ml de glycérol, et 1 ml de Tween 80 par litre. Des parties aliquotes ont été stockées à -70QC jusqu'à utilisation. Les parties aliquotes ont été décongelées pour les ramener à la température ambiante, diluées avec un volume égal de gélatine tamponnée, et brièvement homogénéisées dans un bain de glace. La gélatine tamponnée contient 33 ml d'une solution A (2,8 g de NaH2PO4/100 ml d'eau), 67 ml de solution B (5,4 g Na2HPO4.7H20/100 ml d'eau), 2 g de Bacto-gélatine (Difco), et de l'eau pour porter le volume à 200 ml. La suspension cellulaire a ensuite été diluée à environ 107 CFU/ml dans une solution saline-Tween (NaCl à 0,85%, Tween 80 à 0,1% (v/v)) contenant 5% de sérum de veau. Ensuite, des parties aliquotes 9 ml du désinfectant devant être testé ont été équilibrées à 20 C et 1 ml de la culture M. bovis a été ajouté et mélangé par tourbillonnement. A chaque intervalle de temps, une partie aliquote de 1 ml a été retirée et mélangée avec 50 ml de bouillon de neutralisant (30 g de bouillon de produit de digestion de caséine de soja, 5 g de Tween 80, 0,7 g d'azolectine et 0,5 mg de thiosulfate de sodium par litre d'eau). Cette suspension a ensuite été filtrée à travers une membrane de 0,45 mm à bord hydrophobe. La membrane a été rincée soigneusement avec 50 ml de solution saline (NaCl à 0,85%), puis placée sur de la gélose Mycobacteria 7H11 et incubée dans une chambre d'humidification pendant 21 jours à 37 C. La gélose Mycobacteria 7H11 contient: 1 g de produit de digestion pancréatique de caséine, 0,5 g d'acide L-glutamique, 0,4 g de citrate de sodium, 0,001 g de pyroxydine, 0,0005 g de biotine, 0,04 g de sulfate d'ammonium ferrique, 0,5 g de sulfate d'ammonium, 1,5 g de phosphate disodique, 1, 5 g de phosphate monopotassique, 0,05 g de sulfate de magnésium, g de Bacto-gélose, 0,001 g de vert malachite Bacto, 5 ml de glycérol par litre. Après stérilisation, le milieu est refroidi à une température de 50 - 55 OC, et 100 ml

d'enrichissement Bacto Middlebrook OADC sont ajoutés.

Le Tableau 11 montre les résultats de l'exposition à une solution résultante du dioxiranne de CSA contenant 10% de caroate, 10% de CSA et 80% de H20. Le rapport molaire de caroate à CSA était de 0,38. Le désinfectant dioxiranne obtenu de cette manière a fourni < 1 de M. bovis BCG après 20

minutes d'exposition.

Tableau 11 Temps d'Exposition Unités Formant de Colonies (CFU) (minutes) (réplications)

1 2 3 4

1 3 3 4

1 1 * 1

30 0 O O O

O O O O

O O O O

Plaque contaminée

Exemple 12

Le mode opératoire utilisé pour tester l'activité fongicide de composés caroate/cétone ou dioxiranne était l'Essai d'Activité Fongicide tel que décrit dans 1 AOAC Méthods, chapitre 6, 955.17 (15ème édition 1990), qui est par les présentes incorporé par référence. En résumé, une culturemère de Trichophyton mentagrophytes (ATCC 9533) a été inoculée sur des pentes de néopeptone-glucose gélose (NGA)

et incubée à une température de 25 à 30 C pendant 10 jours.

La NGA consiste en 10 g de néopeptone, 20 g de glucose et g de gélose par litre d'eau. La culture a ensuite été transférée de la pente sur 5 plaques de NGA et incubée à une température de 25 à 30 C pendant 10 jours. Après incubation, les tapis mycéniens ont été retirés à l'aide d'une spatule stérile. La culture à été macérée dans 25 ml de solution saline par tourbillonnement avec des perles de verre. La suspension a été filtrée à travers de la gaze de coton stérile pour éliminer les éléments formés par les hyphes. Le titre conidien a été déterminé avec un hémacytomètre, et le

titre a été ajusté approximativement 106 conidies par ml.

On a préparé la solution de désinfectant en mélangeant la poudre avec le liquide et en la laissant se dissoudre pendant dix minutes. Cinq ml de la solution désinfectante ont été ajoutés à chacun de 10 tubes et équilibrés à 20 C dans un bain d'eau. Une fois toutes les secondes, une partie aliquote de 0,5 ml de la suspension conidienne a été ajoutée à chaque tube de désinfectant. Au bout de 5, 10, 20 et 30 minutes d'exposition, une boucle de 4 mm a été utilisée pour retirer un échantillon provenant de chaque tube à essai. Cet échantillon a été transféré dans un tube de bouillon de néopeptone-glucose avec des neutralisants (NGB/M; 10 g de néopeptone, 20 g de glucose, 0,5 g de thiosulfate de sodium par litre d'eau). Ces tubes ont été

incubés à une température de 25 à 30 C pendant 10 jours.

Une solution-mère à 5 % de phénol a ensuite été diluée pour faire des dilutions au 1:60 et au 1:70. Cinq ml du phénol dilué ont été ajoutés à chacun des 10 tubes et équilibrés à 20 C dans un bain d'eau. Une fois toutes les secondes, une partie aliquote de 0,5 ml de la suspension conidienne a été ajoutée à chaque tube de phénol. Après 5, , 20 et 30 minutes d'exposition, une boucle de 4 mm a été utilisée pour retirer un échantillon provenant de chaque tube à essai en vue du transfert dans un tube de NGB/N. Ces tubes de bouillon ont ensuite été incubés à une température de 25

à 30 C pendant 10 jours.

Après l'incubation, chaque tube a été examiné pour la croissance du champignon et les tubes ont été cochés comme positifs ou négatifs. La neutralisation a été testée par inoculation d'une série de tubes qui étaient cochés comme négatifs par 10 à 100 CFU de l'organisme d'exposition. Ces tubes ont été incubés pendant 10 jours à une température de

à 30 C, puis observés et cochés.

Le Tableau 12 montre que Trichophyton mentagrophytes est efficacement détruit par une exposition de cinq minutes à une solution du dioxiranne de CSA contenant 10% de CSA, 10% de caroate et 80 % d'eau. Le rapport molaire du caroate au CSA était de 0,38. Le champignon était résistant au phénol aux concentrations testées et une croissance positive a été observée dans les essais de neutralisation, démontrant une

neutralisation efficace des solutions de dioxiranne.

Tableau 12

Temps d'Exposition (minutes) Résultats

0/101

0/10

20 0/10

0/10

Nombre de tubes avec croissance de T. mentagrophytes/Nombre total de tubes.

Exemple 13

Le mode opératoire pour l'expérimentation de l'effet virucide de solutions contenant du caroate/cétone ou du dioxiranne a été conduit conformément aux directives données par l'Agence de Protection de l'Environnement pour les préparations virucides, Agence Américaine de Protection de l'Environnement, "Exigences de Données d'Efficacité: Virucide" (Office de Programmes de Pesticide, EPA, 1976), qui

est par les présentes incorporé par référence.

En résumé, un flacon confluent de cellules de carcinome cervical épithélioïde humain (HeLa) a été inoculé par 2 ml de poliovirus type 1 dans du milieu essentiel minimal (MEM) avec 2 % de sérum de veau, à une multiplicité d'infection de 0,01. Le virus a été amené à s'absorber pendant 30 minutes, puis approximativement 10 ml de milieu ont été ajoutés au flacon. Le flacon a été incubé à 370C avec du CO2 à 5% jusqu'à ce qu'il ait atteint l'effet cytopathique (CPE) 4+. Le flacon a ensuite été congelé à -70 C et décongelé pour récolter le virus. L'amas de virus a été stocké à -70 C. L'essai TCID-50 a été effectué comme suit. Tout d'abord, des plaques de microtitration à 96 puits ont été ensemencées par des cellules HeLa. Les plaques ont été incubées pendant toute une nuit à 37 0C dans du CO2 à 5 %, jusqu'à ce qu'elles ait atteint la confluence. Des dilutions au 1/10 en série ont été faites du virus dans du MEM avec 2 % de sérum de veau. Les dilutions ont été ajoutées aux puits sur les plaques en parties aliquotes de 0,1 ml en quatre exemplaires. Quatre puits, inclus en tant que témoins négatifs, ont reçu seulement du MEM avec 2 % de sérum de veau. Le virus a été amené à s'absorber sur les cellule pendant 30 minutes, puis 0,1 ml supplémentaire de MEM avec 2 % de sérum de veau a été ajouté à chaque puits sur les plaques. Les plaques ont été incubées à 37 t avec du CO2 à 5% pendant 3 jours. Les plaques ont ensuite été fixées avec une solution de formaldéhyde à 10% et colorées par du cristal violet à 0,1 %. Le TCID-50 de l'échantillon a été déterminé

à l'aide de la méthode de Reed-Muench.

Des contrôles de toxicité ont été effectués comme suit. Des parties aliquotes de dix ml de la solution de désinfectant ont été placées dans des tubes stériles dans un bain d'eau à 20 C et amenés à s'équilibrer pendant un laps de temps de 10-15 minutes. Un support stérile a été placé dans chaque tube pendant 15 minutes (le temps d'exposition maximal), puis retiré et agité par tourbillonnement dans 3 ml de MEM avec 2 % de sérum de veau. Des délutions au 1/10 en série ont été faites des milieux contenant les supports. Les dilutions ont été placées sur des cellules HeLa dans une

plaque à 96 puits comme dans le mode opératoire de TCID-50.

Du MEM avec 2 % de sérum de veau a été ajouté à quatre puits en tant que témoins des cellules. Les plaques ont été incubées à 37 C pendant 30 minutes puis 0,1 ml supplémentaire de MEM avec 2% de sérum de veau a été ajouté a chaque puits sur les plaques. Les plaques ont été incubées à 37 C avec du CO2 à 5% pendant 3 jours. Les plaques ont ensuite été fixées avec une solution de formaldéhyde à 10% et colorées avec du cristal violet à 0,1 %. Chaque puits a été coché pour la toxicité, et la TCID-50 a été calculée à l'aide

de la méthode de Reed-Muench si une toxicité était détectée.

Des contrôles de neutralisation ont été effectués comme suit. Des parties aliquotes de dix ml des solutions de désinfectant ont été placées dans des tubes stériles dans un bain d'eau et amenées à s'équilibrer pendant un laps de temps de 10 - 15 minutes à 20 OC. Un support stérile a été placé dans chaque tube pendant 15 minutes (le temps d'exposition maximal), puis retiré et agité par tourbillonnement dans 3 ml de MEM avec 2 % de sérum de veau. Des dilutions au 1/10 en

série ont été faites des milieux contenant les supports.

Chaque dilution a été inoculée par le virus pour créer une concentration finale de 10 à 100 virus par ml. Un blanc contenant du MEM avec 2 % de sérum de veau a également été inoculé par un virus en temps que témoin de virus. Les dilutions ont été placées sur des cellules HeLa dans une

plaque à 96 puits comme dans le mode opératoire de TCID-50.

Les plaques ont été incubées à 37 C pendant 30 minutes, puis 0,1 ml de MEM avec 2 % de sérum de veau a été ajouté à chaque puits sur les plaques. Les plaques ont été incubées à 37 t avec du CO2 à 5 % pendant 3 jours. Les plaques ont ensuite été fixées avec une solution de formaldéhyde à 10 % et colorées par du cristal violet à 0,1 %. Chaque puits a été

coché pour le CPE.

Une solution de désinfectant de caroate/cétone ou dioxiranne a été préparée par mélange de 3 g de caroate avec 27 g d'eau distillée désionisée contenant 3 g de CSA. On a commencé une exposition de supports aux solutions de désinfectant en plaçant des supports dans les virus de l'amas de virus pendant 15 minutes, puis en les retirant et en les faisant sécher pendant 15 minutes à la température ambiante sur une papier filtre stérile. Des parties aliquotes de dix ml des désinfectants ont été placées dans des tubes stériles et équilibrées à 20 0C dans un bain d'eau. Les supports contaminés ont été placés dans les tubes pendant 5, ou 15 minutes, puis retirés et agités par tourbillonnement dans 3 ml de MEM avec 2 % de sérum de veau pour neutraliser le désinfectant et libérer les virus. Chaque temps d'exposition a été testé avec trois répliques. Le mode opératoire de TCID-50 a été effectué sur les milieux contenant le supports pour doser les virus. Trois supports contaminés ont été agités par tourbillonnement dans des parties aliquotes de 3 ml de MEM avec 2 % de sérum de veau et

titrés en tant que témoins de virus positifs.

Le Tableau 13 montre les résultats du désinfectant à base de dioxiranne de CSA dans la réduction du titre de virus dans des essais d'efficacité du désinfectant. Un log10 de réduction de trois est requis par l'EPA pour une préparation virucide. Lorsqu'aucun virus n'est détecté après exposition au désinfectant, le log10 de réduction du virus par le désinfectant est calculé par soustraction de la TCID-50 (la limite détectable) du titre moyen du témoin de virus. Le désinfectant a réduit le titre de virus de 3,4 log10, satisfaisant ainsi les exigences pour une préparation virucide par l'EPA. Les expériences de contrôle de la toxicité ont montré que la première dilution du support dans 3 ml de MEM avec 2 % de sérum de veau (support/3 ml ou dilution au 1/3) était toxique pour les cellules dans trois des quatre déterminations. Une dilution au 1/10 du milieu contenant le support n'était pas toxique. La TCID-50 pour les deux lots de la solution de dioxiranne de CSA était de 101-3 ml. Les expériences de contrôle de la neutralisation ont montré que la première dilution du support dans 3 ml de MEM avec 2 % de sérum de veau (dilution au 1/3) était toxique, d'o il résulte que le virus n'a pas pu être détecté. Une dilution au 1/10 du milieu contenant le support était suffisante pour neutraliser la solution de dioxiranne. Des effets cytophatiques viraux (CPE) comparables avec les

témoins de virus ont été détectés dans quatre déterminations.

Tableau 13

Temps d'Exposition TCID-50 Log de Réduction Témoin de Virus 104-7/mL -Minutes 10-3/mL >3,4 Minutes l01-3/mL >3,4 Minutes 101-3/mL >3,4 Alors que certains modes de réalisation représentatifs de l'invention ont été décrits ici à des fins d'illustration, l'invention peut être mises en oeuvre suivant d'autres formes spécifiques sans que l'on s'écarte de son esprit ou de ses caractéristiques essentielles, et les exemples décrits ne doivent pas être considérés comme restrictifs, mais seulement illustratifs. La portée de

l'invention est donc définie par les revendications annexées

et leurs équivalents, plutôt que par les exemples précédents.

Claims (17)

REVENDICATIONS

1 - Procédé de désinfection et de stérilisation d'une matière contaminée par un ou plusieurs éléments choisis dans le groupe constitué par les bactéries, les spores bactériennes, les champignons et les virus, caractérisé par le fait qu'il comprend les étapes consistant à: (a) prendre un fluide biocide contenant un mélange de peroxymonosulfate et d'un composé à teneur en carbonyle et des produits de réaction de ceuxci, dans lequel le rapport molaire du peroxymonosulfate au composé à teneur en carbonyle est d'au moins 0,01:1; et (b) mettre en contact la matière avec le fluide biocide pendant un laps de temps suffisant pour désinfecter et

stériliser ladite matière.

2 - Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que ledit rapport molaire du peroxymonosulfate au composé à teneur en carbonyle se situe entre environ 0,01:1

et 10:1.

3 - Procédé selon la revendication 2, caractérisé par le fait que ledit composé à teneur en carbonyle est un élément choisi dans le groupe constitué par l'acétone, la 2-pentanone, la 4-hydroxy-4-méthyl-2pentanone et l'acide

camphre sulfonique.

4 - Procédé selon la revendication 3, caractérisé par le fait que ledit fluide biocide est une solution polaire. - Procédé selon la revendication 4, caractérisé par le fait que ledit fluide biocide est une solution aqueuse. 6 - Procédé selon la revendication 5, caractérisé par le fait que ledit composé à teneur en carbonyle est l'acétone. 7 - Procédé selon la revendication 5, caractérisé par le fait que ledit composé à teneur en carbonyle est la

2-pentanone.

8 - Procédé selon la revendication 5, caractérisé par le fait que ledit composé à teneur en carbonyle est la 4-hydroxy-4-méthyl-2-pentanone. 9 Procédé selon la revendication 5, caractérisé par le fait que ledit composé à teneur en carbonyle est

l'acide camphre sulfonique.

- Procédé selon la revendication 5, caractérisé par le fait que ledit mélange de peroxymonosulfate et d'un composé à teneur en carbonyle et de produits de réaction de ceux-ci est présent dans ladite solution aqueuse à une concentration comprise entre environ 1% en poids et la saturation. 11 - Procédé selon la revendication 5, caractérisé par le fait que ladite matière contient une aire de surface

qui doit être désinfectée et stérilisée.

12 - Procédé selon la revendication 11, caractérisé

par le fait que ladite matière est un instrument médical.

13 - Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que ledit rapport molaire du peroxymonosulfate au composé à teneur en carbonyle se situe entre environ 0,1:1 et 3:1. 14 - Procédé selon la revendication 2, caractérisé par le fait que ledit fluide biocide contient un ou plusieurs éléments choisis dans le groupe constitué par les peroxydes,

les aldéhydes, les époxydes et les agents tensio-actifs.

- Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que ledit fluide biocide contient un dioxiranne en tant que produit de réaction entre ledit peroxymonosulfate

et ledit composé à teneur en carbonyle.

16 - Procédé selon la revendication 15, caractérisé par le fait que ledit rapport molaire du peroxymonosulfate au composé à teneur en carbonyle est compris entre environ

0,01:1 et 10:1.

17 - Procédé selon la revendication 16, caractérisé par le fait que ledit composé à teneur en carbonyle est un élément choisi dans le groupe constitué par l'acétone, la 2-pentanone, la 4-hydroxy-4-méthyl-2pentanone et l'acide camphre sulfonique, et ledit dioxiranne est un élément choisi dans le groupe constitué par le diméthyl dioxiranne, le

méthyl-n-propyldioxiranne, le 4-hydroxy-4-méthyl-2-

pentadioxiranne, et le dioxiranne de l'acide camphre sulfonique. 18 Procédé selon la revendication 17, caractérisé par le fait que ledit fluide biocide est une solution polaire. 19 - Procédé selon la revendication 18, caractérisé par le fait que ledit fluide biocide est une solution aqueuse. - Procédé selon la revendication 19, caractérisé par le fait que ledit composé à teneur en carbonyle est

l'acétone et ledit dioxiranne est le diméthyldioxiranne.

21 - Procédé selon la revendication 19, caractérisé par le fait que ledit composé à teneur en carbonyle est la

2-pentanone, et ledit dioxiranne est le méthyl-n-

propyldioxiranne. 22 - Procédé selon la revendication 19, caractérisé par le fait que ledit composé à teneur en carbonyle est la 4-hydroxy-4méthyl-2-pentanone, et ledit dioxiranne est le 4-hydroxy-4-méthyl-2pentadioxiranne. 23 - Procédé selon la revendication 19, caractérisé par le fait que ledit composé à teneur en carbonyle est l'acide camphre sulfonique, et ledit dioxiranne est le

dioxiranne de l'acide camphre sulfonique.

24 - Procédé selon la revendication 19, caractérisé par le fait que ledit mélange de peroxymonosulfate et d'un composé à teneur en carbonyle et du produit de réaction dioxiranne est présent dans ladite solution aqueuse à une

concentration entre environ 1% et la saturation.

- Procédé selon la revendication 19, caractérisé par le fait que ladite matière contient une aire de surface

qui doit être désinfectée et stérilisée.

26 - Procédé selon la revendication 25, caractérisé

par le fait que ladite matière est un instrument médical.

27 - Procédé selon la revendication 16, caractérisé par le fait que ledit fluide biocide contient additionnellement un ou plusieurs éléments choisis dans le groupe constitué par les peroxydes, les aldéhydes, les

époxydes et les agents tensio-actifs.

28 - Produit de réaction de l'acide camphre

sulfonique et du peroxymonosulfate dans une solution aqueuse.

29 - Produit selon la revendication 28, qui est le

dioxiranne de l'acide camphre sulfonique.