FR2629824A1

FR2629824A1 - Nouveaux peptides de la somatostatine, leur preparation et leur utilisation comme medicaments

Info

Publication number: FR2629824A1
Application number: FR8904785A
Authority: FR
Inventors: Rainer Albert; Wilfried Bauer; Francois Cardinaux; Janos Pless
Original assignee: Sandoz AG
Current assignee: Sandoz AG
Priority date: 1988-04-11
Filing date: 1989-04-10
Publication date: 1989-10-13
Anticipated expiration: 2009-04-10
Also published as: IL89897A0; AU3263989A; LU87496A1; IT8947833A0; IT1231943B; DE3910667A1; BE1003200A4; DK171489A; SE8901278D0; CH677795A5; NL8900882A; GB2224280B; FR2629824B1; ES2013431A6; DK171489D0; JPH01305098A; GB8907902D0; SE8901278L; GB2224280A

Abstract

L'invention concerne les peptides de la somatostatine comprenant au moins un reste de formule a, b ou c (CF DESSIN DANS BOPI) dans lesquelles l'un des symboles Y1 et Y2 signifie l'hydrogène et l'autre un groupe hydroxy ou bien les deux symboles Y1 et Y2 signifient l'hydrogène, f et g signifient indépendamment 0 ou 1, l'un des symboles X1 et X2 signifie l'hydrogène et l'autre signifie l'hydrogène ou un groupement protecteur du groupe amino et X3 signifie un groupe alkylène en C2 -C6 , la valence libre dans chaque reste a, b ou c étant située sur le groupe amino N-terminal du peptide. Ces composés peuvent être utilisés comme médicaments.

Description

La présente invention a pour objet de nouveaux peptides de la

somatostatine, leur préparation et leur

utilisation comme médicaments.

L'invention concerne en particulier les peptides de la somatostatine comprenant au moins un reste de formule (a), (b) ou (c) Y, Xl

HOH2C-(CHOH)f-(C)g-CH2- HOH2C-(CHOH)f-CH-CH2OH -X3-

I I

Y2 X2

(a) (b) (c) dans lesquelles l'un des symboles Y1 et Y2 signifie l'hydrogène et l'autre un groupe hydroxy ou bien les deux symboles Y1 et Y2 signifient l'hydrogène, f et g signifient indépendamment 0 ou 1, l'un des symboles X1 et X2 signifie l'hydrogène et l'autre signifie l'hydrogène ou un groupement protecteur du groupe amino et X3 signifie un groupe alkylène en C2-C6, la valence libre dans chaque reste (a), (b) ou (c) étant située sur le groupe amino N-terminal du peptide, et les éthers physiologiquement acceptables et les esters physiologiquement hydrolysables et physiologiquement acceptables de ces composés lorsque le peptide contient au moins un reste de formule (a) ou (b),

sous forme libre ou sous forme d'un sel ou d'un complexe.

Le terme.peptides de la somatostatine" comprend les analogues et les dérivés de la somatostatine. Par dérivés et analogues, on entend des peptides linéaires, pontés ou cycliques dans lesquels un ou plusieurs restes d'amino-acides ont été supprimés et/ou substitués par un ou plusieurs autres restes d'amino-acides et/ou dans lesquels un ou plusieurs groupes fonctionnels ont été remplacés par un ou plusieurs autres groupes fonctionnels et/ou dans lesquels un ou plusieurs groupes ont été

remplacés par un ou plusieurs autres groupes isostères.

En général, le terme englobe tous les dérivés modifiés d'un peptide biologiquement actif qui exerce un effet qualitativement similaire à celui du peptide de la somatostatine non modifiée. Les peptides de la somatostatine préférés sont ceux contenant par exemple de 4 à 9 aminoacides. De tels composés sont décrits par exemple dans les demandes de brevets européens EP-A3-1295, EP-A2-203 031, 214 872, 215 171, 277 419 et 298 732, dont le contenu est incorporé dans la présente demande à titre

de référence.

Ces composés seront désignés ci-après les

composés de l'invention.

Les composés de l'invention comprennent également ceux dans lesquels le groupe amino N-terminal est disubstitué par des restes de formule (a) et/ou (b) et/ou

(c), de préférence de formule (a) et/ou (b).

Dans le reste de formule (a), g signifie de

préférence 0 ou bien g et f signifient chacun 0.

Dans le reste de formule (b), f signifie de

préférence 0.

Les groupes alkylène représentés par X3 dans le

reste de formule (c) peuvent être linéaires ou ramifiés.

X3 signifie de préférence un groupe alkylène en C2-C4, plus particulièrement un groupe qlkylène en C2-C4 linéaire. Les groupements protecteurs du groupe amino représentés par X1 ou X2 peuvent être n'importe quel groupement utilisé habituellement dans la chimie des peptides et comprennent par exemple les groupes benzyle,

acyle, tels que formyle, acétyle, benzoyle, p-toluène-

sulfonyle ou benzènesulfonyle, les groupes benzyloxycar-

bonyle, benzyloxycarbonyle substitués, par exemple substitués dans le reste aromatique par de l'halogène ou par des groupes nitro et/ou alkyle inférieurs ou alcoxy inférieurs, des groupes R-oxycarbonyle dans lesquels R signifie un reste aliphatique ou cyclique tel que les

groupes tert.-butoxycarbonyle ou 9-fluorénylméthoxy-

carbonyle. De préférence, X1 et X2 signifient chacun l'hydrogène. Le reste de formule (a) est particulièrement préféré. Par l'expression "éther physiologiquement acceptable" telle qu'appliquée aux composés de l'invention contenant au moins un reste de formule (a) ou (b), on entend des composés dans lesquels le ou les groupes hydroxy dans le reste (a) ou (b) sont éthérifiés et qui sont non toxiques aux doses administrées. De tels éthers comprennent les éthers linéaires, ramifiés ou cycliques, par exemple les éthers alkyliques en C1-C4, par exemple les éthers dans lesquels un ou tous les groupes hydroxy présents sont substitués par des groupes méthyle, et les éthers cycliques dans lesquels deux groupes hydroxy situés sur deux atomes de carbone adjacents sont substitués par exemple par le reste de formule

/ XCH3

Par l'expression "ester physiologiquement hydro-

lysable et physiologiquement acceptable" telle qu'appli-

quée aux composés de l'invention contenant au moins un reste de formule (a) ou (b), on entend des composés dans lesquels un, deux ou tous les groupes hydroxy dans le reste (a) ou (b) sont estérifiés et qui sont hydrolysables sous des conditions physiologiques pour donner un acide qui est lui-même physiologiquement acceptable, par exemple

non toxique, aux doses administrées. De tels esters com-

prennent par exemple les esters avec des acides carboxyliques aliphatiques contenant de 2 à 8 atomes de carbone. Dans les composés de l'invention, n'importe lequel des groupes hydroxy libres dans le reste de formule

(a) ou (b) peut également être lié par une liaison gluco-

sidique à un mono-, di- ou oligosaccharide réducteur ou à

un sucre aminé.

Selon le degré de substitution, le reste de formule (a) ou de formule (b) peut contenir un ou deux atomes de carbone asymétriques et les composés de l'invention peuvent donc exister sous forme de racémiques ou d'isomères optiques ou sous forme de mélanges de diastéréoisomères (sans tenir compte de la stéréochimie de la chaîne peptidique). Les racémiques et les mélanges de diastéréo-isomères peuvent être séparés en leurs isomères individuels selon les méthodes connues. Selon une autre

alternative, on peut obtenir des produits finals optique-

ment actifs, en utilisant des produits de départ

optiquement actifs. L'invention couvre toutes les formes.

Les composés de l'invention peuvent se présenter

sous forme libre ou sous forme de sels ou de complexes.

Les sels d'addition d'acides peuvent être formés par exemple avec des acides organiques, y compris des acides polymères, et des acides minéraux. De tels sels d'addition d'acides comprennent par exemple les chlorhydrates et les acétates. Par complexes, on entend des composés de type connu, formés à partir des composés de l'invention par addition de substances minérales, par exemple de sels minéraux ou d'hydroxydes tels que les sels de calcium et de zinc, et/ou addition de substances organiques polymères. Un groupe de composés selon l'invention comprend les composés contenant au moins un reste de formule (a) o-u (b). Les composés préférés de l'invention sont ceux correspondant à la formule I

- Z1 A' CH2-S-Y1' Y21-S-CH2

I I II

R1 -N-CH-C-NCH-N--C-D - --E-NH-- CHC-B--CCF (I)

R2 dans laquelle R1 signifie un reste de formule (a), (b) ou (c) tel que défini précédemment, R2 signifie l'hydrogène, un groupe alkyle en C1-C12, alcanoyle en C1-C4, phénylalkyle en C7-C10 ou un reste de formule (a), (b) ou (c) tel que défini précédemment, >N-CH(ZI)-CO signifie a) un reste (L) - ou (D)-phénylalanine éventuellement substitué dans le cycle par de l'halogène ou par des groupes NO2, NH2, OH, alkyle en C1-C3 et/ou alcoxy en C1-C3, ou b) le reste d'un "-amino-acide naturel ou d'un (D)-aminoacide correspondant, autre que celui défini sous a), ou d'un e-aminoacide synthétique, Zl dans le reste >N-CH(Zl)-CO- représente le résidu du reste d'amino-acide tel que défini sous a) et b), A' signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C3, Y1' et Y2' signifient ensemble une liaison directe, ou bien Y1' et Y2' signifient, indépendamment l'un de l'autre, l'hydrogène ou un reste répondant à l'une des formules (1) à (5) suivantes: Ria CH2 -CO-C-(CH2)-H -CO-CH -CO-NHRc Rb (CH2)n

(1) (2) (3)

Ra" R, -CO-NH-CH-COOR, -CO-(NU)p C -(CH2)r Rd Rb'jq

(4) (5)

dans lesquelles Ra signifie un groupe méthyle ou éthyle Rb signifie l'hydrogène ou un groupe méthyle ou éthyle m signifie un nombre entier de 1 à 4 inclus n signifie un nombre entier de 1 à 5 inclus Re signifie un groupe alkyle en Cl-C6 Rd représente le substituant fixé sur l'atome de carbone a d'un c-amino-acide naturel (y compris l'hydrogène) R. signifie un groupe alkyle en C1-Cs Ra' et Rb' signifient chacun, indépendamment l'un de l'autre, l'hydrogène ou un groupe méthyle ou éthyle, R8 et R9 signifient chacun, indépendamment l.un de l'autre, l'hydrogène, un halogène ou un groupe alkyle en C1-C3 ou alcoxy en C1-C3 p signifie 0 ou 1, q signifie 0 ou 1, et r signifie 0, 1 ou 2, B signifie -Pheéventuellement substitué dans le cycle par de l'halogène ou par des groupes NO2, NH2, OH, alkyle en Cl-C3 et/ou alcoxy en C1-C3, ou un reste naphtylalanine, C signifie (L)-Trp- ou -(D)Trp- éventuellement a-Nméthylés et éventuellement substitués dans le --cycle benzénique par de l'halogène ou par des groupes NO2, NH2, OH, alkyle en C1-C3 et/ou alcoxy en C1-C3, D signifie -Lys-, Lys dans lequel la chaîne latérale contient O ou S en position 0, yF-Lys, 8F-Lys ou Orn, éventuellement a-N-méthylés, ou un reste 4-aminocyclohexyl-Ala ou 4-aminocyclohexyl-Gly E signifie Thr, Ser, Val, Phe, Tyr, Ile, ou un reste d'acide amino-isobutyrique ou aminobutyrique F signifie un groupe de formule R16 \R12 -COOR7, -CH20R10, -CON" ou -CO- X dans lesquelles R7 signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C3 R o signifie l'hydrogène ou le reste d'un ester physiologiquement hydrolysable et physiologiquement

acceptable

R11 signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en CI-C3, phényle ou phénylalkyle en C7-C1O R12 signifie l'hydrogène, un groupe alkyle en C1C3 ou un reste de formule -CH(R13)-X4 R13 signifie -CH20H, -(CH2)2-OH, (CH2)3-OH, ou --CH(CH3)OH ou représente le substituant fixé sur l'atome de carbone a d'un =-amino-acide naturel ou synthétique (y compris l'hydrogène) et X4 signifie un groupe de formule /R14 -COOR7, -CH20R10o CO-N Ri4 du \R15 dans-lesquelles R. et R10 ont les significations données précédemment, R14 signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en Cl-C3, et R15 signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C3, phényle ou phénylalkyle en C7-Clo et R16 signifie l'hydrogène ou un groupe hydroxy, R11 devant signifier l'hydrogène ou un groupe méthyle lorsque R12 représente un reste -CH(R13)-X4, et dans la formule I les restes B, D et E ont la configuration L, et les restes en position 2 et 7 et les restes Y1 4) et Y2 4) ont chacun, indépendamment, la configuration (L) ou (D), et les éthers physiologiquement acceptables et les esters physiologiquement hydrolysables et physiologiquemnent acceptables de ces composés lorsque les composés de formule I contiennent au moins un reste de formule (a) ou (b). Par halogène, on entend dans la présente demande de préférence le fluor, le chlore ou le brome. Selon la pratique habituelle, les restes d'amino-acides désignés par une abréviation, par exemple -Phe-, -Cysetc...., doivent être compris comme ayant la configuration (L), sauf indication contraire. Le terme amino-acide naturel se réfère à un amino-acide provenant de source naturelle ou produit d'une autre manière, par.exemple par synthèse ou culture cellulaire. Le terme "amino-acide synthétique" se réfère à un amino-acide obtenu par synthèse et n'existant

pas dans la nature.

A' signifie de préférence l'hydrogène ou un

groupe méthyle, spécialement l'hydrogène.

Lorsque >N-CH(Z1)-CO- a la signification donnée sous (a), ii signifie de préférence un reste (L)- ou (D)-phénylalanine, pentafluorophénylalanine ou (L)- ou (D)-tyrosine (o Z1 signifie un groupe benzyle ou g

p-OH-benzyle), plus préférablement un reste (D)-phényl-

alanine. Lorsque >N-CH(Z1)-CO- a la signification donnée sous b), le reste défini est de préférence lipophile. Les restes b) préférés sont les restes dans lesquels Z, signifie un groupe alkyle ayant 3, de préférence 4 atomes de carbone ou plus, ou un reste -CH2-A2 dans lequel A2

signifie un groupe naphtyle, pyridyle ou 3-indolyle.

Plus préférablement >N-CH(Zl)-CO- a la

signification donnée sous a).

De préférence, Y1' et Y2' représentent ensemble une liaison directe ou bien chaque symbole Y1' et Y2' signifie, indépendamment l'un de l'autre, l'hydrogène ou un reste de formule (1) ou (3). Plus préférablement, Y1'

et Y2' représentent ensemble une liaison directe.

Lorsque B signifie -Phe- substitué dans le cycle

par de l'halogène, il peut s'agir d'un reste pentafluoro-

alanine.

Dans les composés de formule I, les significa-

tions suivantes sont préférées, prises isolément ou en combinaison: B signifie Phe ou Tyr, C signifie (D)Trp ou 5-halo-(D)Trp, en particulier DTrp, D signifie Lys ou 4-aminocyclohexylalanine, E signifie Thr, Ser ou Val, en particulier Thr ou Val, F signifie -CO-N, spécialement-CO-N

R12 CH(R13)X4

ou R11 signifie l'hydrogène, R12 a la signification donnée précédemment, R13 signifie CH20H, CH(CH3)OH, CH2CH20H, (CH2)30H, isopropyle, isobutyle, ou un reste dérivé de Trp, 5-fluoro-Trp, g-Nal, Ala, MeAla ou Gly, de préférence CH2OH ou CH(CH3)OH, spécialement

CH(CH3)OH,

R14 X4 signifie -CO-N ou CH2N0R10 R1s spécialement CH2ORlo R10 signifie l'hydrogène, R10 en tant que reste d'ester signifie de préférence un groupe formyle, alkylcarbonyle en C2-C12, phénylalkylcarbonyle en C8-C12 ou benzoyle, le groupe -CH(R13)-X4 a de préférence la configuration L. Les restes en position 2 et 7 ont de préférence la configuration L. Les composés de formule I sont par exemple les suivants: R1 'DPhC1 a. (D)PheCys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol R2 b. (D)Phe-Cys-Tyr-(D)Trp-Lys-Val-CysThrNH2 R2 Rl r c. / (D)Phe-Cys-Tyr-(D)Trp-Lys-Val-Cys-TrpNH2 R2 d.R1s d., (D)Trp-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-ThrNH2 R2 e. (D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-LysThr-Cys-ThrNH2 R2 RI f. /3-(2-(Naphthyl)-(D)Ala-Cys-Tyr-(D)Trp-Lys-ValCys-ThrNH2 R2 g. (D)Phe-Cys-Tyr-(D)Trp-Lys-Val-Cys- -Nal-NH2 R2 RI, h. _3(2-naphthyl)-Ala-Cys-Tyr-(D)Trp-Lys-Val-Cys--Nal-NH2 R2 R1 i. (D)Phe-Cys-Nal-(D)Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2 R2 Les composés de l'invention particulièrement préférés sont les composés de formule I o R1 et/ou R2

signifient un reste de formule (a).

Les composés de l'invention spécialement préférés sont ceux qui comportent deux restes de formule (a) et/ou (b) sur. le groupe amino N- terminal, par exemple les composés de formule II

Z1 A' CH2-S-Y1' Y2'-S-CH2

I I I

Rl 7--CH-C ----CO--N--C-CO---C--D-E--NHE-CH-F (II) I Rl 8 dans laquelle Zl, A', Y1', B, C, D, E, F et Y2' sont tels que définis précédemment et les symboles R17 et R18 signifient des restes de formule (a) ou (b), de préférence des restes de formule (a), plus préférablement identiques, et leurs éthers physiologiquement acceptables et leurs esters physiologiquement hydrolysables et

physiologiquement acceptables.

L'invention concerne également un procédé de préparation des composés de l'invention, procédé selon lequel a) on élimine au moins un groupement protecteur dans un peptide protégé contenant au moins un reste de formule (a), (b) ou (c) défini précédemment, ou b) on soumet à une amination réductrice soit un composé de formule III Y, HOH2C-(CHOH)f-(C)g-Z2 (III) Y2 dans laquelle f a la signfication donnée plus haut, g signifie 0 ou 1, Y1 et Y2 ont l'une des significations données précédemment et Z2 signifie -CHO, ou bien g signifie 1, Z2 signifie CH2OH et -CY1Y2 forment ensemble un groupe carbonyle, les groupes hydroxy libres pouvant être éthérifiés ou estérifiés, soit un composé de formule IV X'i1-NH-X'3-CHO (IV) dans laquelle X1' signifie un groupement protecteur du groupe amino, et X3' signifie un groupe alkylène en CI-C5, avec un composé de formule V

P - NH2 (V)

dans laquelle P signifie le reste d'un peptide de la somatostatine sous forme protégée, par exemple un composé de formule V'

Z1 A'

1I

H2N---CH-CO--N-CH--CO--B-C-D-E-NH-CH-F (V')

CH2-S-Y1 ' Y2 '-S-CH2

dans laquelle Z1, Y1', Y2', A', B, C, D, E et F sont tels que définis précédemment, les groupes amino libres présents dans le reste de formule

CH2-S-Y1' Y2 '-S-CH2

I I

-CH---CO-NCH--CO---B--C--D-E---NH--CH-F

I I

Z1 A'

étant sous forme protégée, et, si nécessaire, on met en oeuvre l'étape a) du procédé, c) on couple par une liaison amide deux fragments peptidiques dont chacun contient au moins un amiro-acide ou l'un de ses dérivés, sous forme protégée ou non protégée, l'un au moins des fragments peptidiques contenant au moins un reste de formule (a), (b) ou (c) tel que défini précédemment et les fragments peptidiques étant tels qu'on obtient une séquence polypeptidique protégée ou non protégée, et, si nécessaire, on met en oeuvre l'étape a) du procédé, ou d) on élimine ou on transforme un groupe fonctionnel d'un polypeptide protégé ou non protégé en un autre groupe fonctionnel de telle sorte qu'on obtient un polypeptide protégé ou non protégé et, lorsqu'il est protégé, on met en oeuvre l'étape a) du procédé, e) on introduit au moins un reste éventuellement protégé dans un peptide protégé ou non protégé et, si nécessaire, on met en oeuvre l'étape a) du procédé, f) on sépare les isomères optiquement actifs à partir d'un mélange quelconque de tels isomères obtenu selon les étapes a) à e), et on récupère le composé ainsi obtenu sous forme libre

ou sous forme d'un sel ou d'un complexe.

Le procédé ci-dessus peut être effectué par exemple de manière analogue aux procédés décrits ci-après

dans les exemples.

Les étapes a), c), d) et e) du procédé peuvent être effectuées selon les méthodes connues dans la chimie

des peptides.

Si on le désire, les groupements protecteurs qui sont appropriés pour protéger les peptides peuvent être utilisés dans ces réactions pour protéger des groupes fonctionnels qui ne participent pas à la réaction. Le terme groupement protecteur comprend également une résine

polymère ayant des groupes fonctionnels.

L'étape b) du procédé peut être effectuée selon les méthodes connues pour l'amination réductrice d'un aldose ou d'un cétose. La réaction peut être effectuée par exemple en présence de NaBH3CN. On opère de préférence à un pH acide, par exemple un pH compris entre 5 et 7, et à une température comprise par exemple entre la température ambiante et 100 C. Il peut être avantageux d'effectuer la réaction dans un solvant inerte, par

exemple l'eau, un alcool, le dioxanne ou le diméthyl-

formamide, ou leurs mélanges.

Les produits de l'invention ainsi obtenus peuvent

être purifiés et isolés selon les méthodes connues.

Les polypeptides non modifiés, utilisés comme produits de départ dans les étapes b) et c) du procédé, peuvent être préparés selon les méthodes connues en solution ou par un procédé en phase solide, par exemple comme décrit dans le brevet US 4 395 403, y compris l'oxydation du polypeptide linéaire pour obtenir un polypeptide monocyclique. Le fragment peptidique contenant au moins un reste de formule a), b), c), utilisé comme produit de départ dans l'étape c) du procédé, peut être

préparé de manière analogue à l'étape b) du procédé.

Les composés utilisés comme produits de départ sont connus ou peuvent être obtenus selon des méthodes connues ou de manière analogue aux méthodes décrites dans

la littérature.

Les exemples suivants illustrent la présente invention sans aucunement en limiter la portée. Toutes les températures sont données en degrés Celsius et les valeurs [a]20D sont non corrigées. Les abréviations

suivantes ont été utilisées.

BOC - tert.-butyloxycarbonyle DMF - diméthylformamide MeOH - méthanol

AcOH - acide acétique.

Tous les peptides sont obtenus sous forme de polyacétate polyhydraté ayant une teneur en peptide de 70 à 90%, sauf indication contraire. Les polypeptides contiennent moins de 5% d'autres peptides (analyse par

chromatographie HPLC).

Le facteur "F" utilisé ci-après indique la teneur en peptide dans le produit (F - 1 indique une teneur en peptide de 100%). La différence jusqu'à 100% [(1 - F)

x 100] est constituée par de l'acide acétique et de l'eau.

Exemple 1

2,3-dihydroxypropyl-(D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol

A 300 mg de 2,3 dihydroxy-l-propyl-(D)Phe-

Cys-Phe-(D)Trp-Lys(BOC)-Thr-Cys-Thr-ol, on ajoute 3 ml d'acide trifluoroacétique (100%) et on maintient à la température ambiante jusqu'à ce que tout le produit de départ soit dissous (5 minutes). Après addition de 20 ml d'éther diisopropylique, on filtre le composé du titre qui

a précipité et on le lave avec de l'éther diisopropyliq.ue.

Le composé du titre ainsi obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant: CHCl3/MeOH/AcOH/H20 7/3/0.5/0.5) et est isolé sous forme

de lyophilisat blanc.

[C]D20 - - 24,5 (c - 1 dans AcOH à 95%), F - 0,83.

Le produit de départ peut être préparé comme suit: a) E-DPhe-Cys-Phe-DTrpLys(BOC)-Thr-Cys-Thr-ol A une solution de 10 g de H-DPhe-Cys-Phe-DTrp-LysThr-Cys-Thr-ol dans 10 ml de DMF, on ajoute lentement goutte à goutte à la température ambiante 2,25 g de pyrocarbonate de di-tert.-butyle dissous dans 30 ml de DMF. Après 2 heures à la température ambiante, on élimine le solvant sous pression réduite et on ajoute 200 ml d'éther diisopropylique au résidu. On filtre le précipité qui s'est formé, on le lave avec de l'éther diisopropylique et on le sèche. Le produit brut est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant: CH2Clz/MeOH 9/1) et est ensuite isolé sous forme d'une poudre

amorphe blanche -[]20D * 29,8 (c - 1,28 dans DMF).

b) 2,3-dihydroxy-1-propyl-(D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys(BOC)-Thr-

Cys-Thr-ol Procédé A A 0,5 g du produit de l'étape a) dans 30 ml d'un mélange 3:7 de dioxanne et d'eau, on ajoute 50 mg de NaBH3CN et 130 mg de glycéraldéhyde. Le pH du mélange réactionnel est réglé à 7 ave 0,1 ml de HCl et le mélange est chauffé à 100 pendant 6 heures. Le mélange est refroidi, congelé et lyophilisé. Le résidu est repris dans de l'acétate d'éthyle (50 ml) et extrait avec de l'eau. La phase organique est séchée et évaporée sous vide pour donner le composé du titre sous forme amorphe. [î]20D - 23,2 (c - 1,2 dans DMF) Procédé B A la place d'un mélange d'eau et de dioxanne, on peut utiliser un mélange de méthanol et d'eau (2/1, volume/volume) et le mélange réactionnel est réglé à pH avec un tampon phosphate. Après un temps de réaction de 4 à 6 heures à 50 , le composé du titre peut être isolé sous forme d'une poudre amorphe après addition

d'eau, filtration et séchage sur P401o0.

Exemple 2

2,3-dihydroxy-(2S)-propyl-(D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-

Thr-ol On répète le procédé de l'exemple 1 mais on

utilise 130 mg de (D)-glycéraldéhyde.

[a]20D - - 25,1 (c - 1 dans AcOH à 95%), F = 0,86.

Exemple 3

2,3-dibydroxy-(2R)-propyl-(D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-

Thr-ol On répète le procédé de l'exemple 1 mais on

utilise 130 mg de (L)-glycéraldéhyde.

[O]20D - - 18,40 (c - 1 dans AcOH à 95%), F - 0,90.

Exemple 4

On répète le procédé de l'exemple 1 mais on remplace le glycéraldéhyde par une quantité équivalente de glycolaldéhyde. On obtient les composés suivants: a) 2-hydroxyethyl-(D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol

[M]20 = - 28,8 o (c = ldans AcOH à 95%),F= 0,90.

D b) Bis-(2-hydroxyéthyl)-(D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol

[o]20 = _ 21,9 (c = 1 dans AcOH à 95%),F= 0,83.

D

Exemple 5

En procédant comme décrit à l'exemple 1 mais en utilisant le 2-méthoxyacétaldéhyde, on obtient les composés suivants: a) 2-Methoxyéthyl-(D)PheCys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol

[0]20 = _ 8,5 o (c = 0,25 dans AcOH à 95%),F 0>76.

D et b) Bis-(2-méthoxyéthyl)-(D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol [] 20 = _ 5 o (c = 0,5 dans AcOH à 95%), F = 0,79 D Dans les composés suivants, SMS signifie le reste peptidique -DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-CysThr-ol.

Exemple 6

2,3-di-propionyloxy-(2S)-propyl-SNS On procède comme décrit à l'exemple 1 mais on utilise le 2,3-di-O-propionyl-D-glycéraldéhyde:

[a]20D - -21,7 (c - 0,9 dans AcOH à 95%), F 0,88.

Exemple 7

2,3-di-hexanoyloxy-(2S)-propyl-SMS On procède comme décrit à l'exemple 1 mais on utilise le 2,3-di-O-hexanoyl-D-glycéraldéhyde:

["]2OD - -18,8 (c - 0,25 dans AcOH à 95%), F ' 0,79.

Exemple 8

2,3-di-O-isopropylidène-2,3-dihydroxy-(2S)-propyl-SMS On procède comme décrit à l'exemple 1 mais on utilise le 2,3-di-O-isopropylidène-Dglycéraldéhyde:

["]20D - -38 (c- 0,25 dans AcOH à 95%), F - 0,76.

Exemple 9

2,3,4-tri-hydroxy-(2S,3R)-butyl-S$S On procède comme décrit à l'exemple 1 mais on utilise le D(-)érythrose: [=]20D - -29,2

(c - 0,25 dans AcOH à 95%), F - 0,81.

Exemple 10

2-aminoéthyl-SNMS On procéde comme décrit à l'exemple 1 mais on utilise le N-Boc-2-amino-acétaldéhyde:

["]20D - -32 (c - 0,13 dans AcOH à 95%), F 0,84.

Exemple 11

3-aminopropyl-SMS On procède comme décrit à l'exemple 1 mais on

utilise le N-Boc-3-amino-propionaldéhyde.

[=]20D - -21 (c - 0,29 dans AcOH à 95%), F - 0,76.

Dans les essais effectués sur les animaux de laboratoire, les composés de l'invention, sous forme libre ou sous forme d'un sel ou d'un complexe pharmaceutiquement acceptable, se signalent par d'intéressantes propriétés pharmacologiques et peuvent donc être utilisés en

thérapeutique comme médicaments.

En particulier, ils exercent une activité inhibitrice sur la sécrétion de l'hormone de croissance (GH), comme il ressort par exemple de la baisse des taux

plasmatiques de GH chez le rat.

L'essai est effectué avec des rats mâles. La substance à essayer est administrée à diverses doses croissant de façon logarithmique, en utilisant au moins 5 rats par doses. Une heure après l'administration par voie sous-cutanée de la substance à essayer, on prélève du sang. On détermine les taux de GH dans le sang à l'aide de la méthode de dosage radio-immunologique. Dans cet essai,

les composés de l'invention sont actifs après administra-

tion par voie sous-cutanée à des doses comprises entre

0,02 et 100 p/kg, par exemple à 30 pg/kg.

En outre, l'activité inhibitrice des composés de l'invention sur la sécrétion de la GH a été également examinée après administration par voie orale à des rats mâles ayant des implants d'oestradiol. L'essai est effectué de la manière suivante: Un tube de silastic (longueur 50 mm, diamètre 3mm) à 50 mg d'oestradiol est implanté sous anesthésie à l'éther sous la peau dorsale d'un rat mâle de souche OFA d'un poids d'environ 300 g. A divers intervalles de temps (1 à 6 mois plus tard), les animaux à jeun sont utilisés à plusieurs reprises pour les essais. Dans cet essai, les composés sont actifs après administration par voie orale à des doses comprises entre 10 et 5000 pg/kg (le taux de GH dans le sérum est déterminé selon la méthode de dosage radio-immunologie 1 heure et 2 heures après

l'administration par voie orale).

Les composés de l'invention sont donc indiqués pour l'utilisation en thérapeutique dans le traitement de troubles ayant une étiologie comprenant ou associée à une sécrétion excessive de GH, par exemple dans le traitement de l'acromégalie ainsi que pour le traitement du diabète sucré, spécialement de ses complications vasculaires, par exemple l'angiopathie, la rétinopathie prolifère, le

phénomène de l'aube et la néphropathie. Les composés de l'invention inhibent également la sécrétion gastrique et

la sécrétion pancréatique exocrine et endocrine et la libération de différents peptides du tractus gastrointestinal, comme il ressort des essais classiques effectués sur des rats ayant une fistule gastrique ou pancréatique. Dans cet essai, les composés sont actifs après administration par voie orale à une dose

comprise entre 0,1 et 10 mg/kg.

Les composés de l'invention sont donc également indiqués pour l'utilisation en thérapeutique dans le traitement de troubles gastrointestinaux, par exemple pour le traitement de l'ulcère, de la fistule entérocutanée et pancréaticocutanée, du syndrome du côlon irritable, du syndrome de dumping, des diarrhées aqueuses, de la pancréatite aiguë et des tumeurs gastrointestinales productrices d'hormones (par exemple le vipome, le glucagonome, l'insulinome, les tumeurs carcinoïdes etc...)

ainsi que des hémorragies gastro-intestinales.

Les composés de l'invention inhibent également la prolifération et/ou la kératinisation des cellules épidermiques et sont donc indiqués pour l'utilisation en

thérapeutique dans le traitement de maladies dermatolo-

giques associées à une prolifération et/ou à une kératinisation pathologique des cellules de l'épiderme, en

particulier dans le traitement du psoriasis.

En outre, les composés de l'invention sont indiqués pour l'utilisation en thérapeutique dans le traitement de la démence sénile dégénérative, également

connue comme démence sénile du type Alzheimer (DSTA).

Les composés de l'invention sont également efficaces dans le traitement de divers types de tumeurs, en particulier de tumeurs contenant des récepteurs de la

somatostatine, comme il ressort des essais de prolifé-

ration avec différentes lignées cellulaires cancéreuses et dans les essais de croissance de tumeurs chez des souris nudes ayant des tumeurs dépendant des hormones (par exemple le cancer du colon dépendant des hormones gastriques). Les composés de l'invention peuvent donc être utilisés en thérapeutique par exemple pour le traitement du cancer du sein, de la prostate, du colon, du pancréas et

du cerveau.

Pour toutes les indications ci-dessus, la dose quotidienne appropriée est comprise entre environ 2 pg et environ 20 mg, de préférence entre environ 0,01 et environ mg, par exemple environ 10 à environ 5000 pg par voie sous-cutanée et entre environ 300 et 20.000 pg par voie orale, les composés de l'invention étant avantageusement administrés en doses fractionnées jusqu'à 4 fois par jour sous forme de doses unitaires contenant par exemple d'environ 0,5 pg à environ 10 mg de substance active, par exemple d'environ 2 pg à 10 mg, ou sous une forme à

libération prolongée.

Le composé des exemples 1, 4b et 10 sont les

composés préférés.

Les composés de l'invention peuvent être administrés sous forme libre ou sous forme d'un sel ou d'un complexe pharmaceutiquement acceptable. De tels sels ou complexes peuvent être préparés selon les méthodes

habituelles et ont la même activité que la forme libre.

L'invention concerne également les composés de l'invention pour l'utilisation comme médicaments, spécialement pour le traitement des troubles ayant une étiologie comprenant ou associée à une sécrétion excessive de l'hormone de croissance, par exemple le diabète sucre, pour la prophylaxie et le traitement de la néphropathie, de l'angiopathie et de la réthinopathie prolifère, de l'acromégalie, des troubles gastrointestinaux, par exemple de l'ulcère, de la fistule pancréatique, du syndrome du côlon irritable, du syndrome de dumping, du

syndrome de diarrhée aqueuse, des hémorragies gastro-

intestinales, de la pancréatique aiguë et des tumeurs gastro-intestinales productrices d'hormones, pour le traitement des maladies dermatologiques associées à une prolifération et/ou à une kératinisation pathologique des cellules de l'épiderme, pour le traitement de la démence sénile dégénérative et le traitement de divers types de tumeurs. En tant que médicaments, les composés de l'invention peuvent être administrés sous forme d'une composition pharmaceutique contenant, comme substance active, un composé de l'invention sous forme libre ou sous forme d'un sel ou d'un complexe pharmaceutiquement acceptables, en association avec un véhicule ou diluant pharmaceutiquement acceptable. De telles compositions, qui font également partie de l'invention, peuvent être préparées selon les méthodes habituelles. Les composés peuvent être administrés selon l'une quelconque des voies habituelles, par exemple par voie parentérale, par exemple sous forme de solutions ou de suspensions injectables, par voie entérale, de préférence orale, par exemple sous forme de comprimés ou de gélules, ou sous une forme appropriée pour l'administration par voie nasale ou sous forme de suppositoires.

Claims

REVENDICATIONS

1.- Un peptide de la somatostatine comprenant au moins un reste de formule (a), (b) ou (c) Y1 Xl

HOH2C-(CHOH)f-(C)g-CH2- HOH2C-(CHOH)f-CH-CH20H N-X3-

Y2 X2

(a) (b) (c) dans lesquelles l'un des symboles Y1 et Y2 signifie l'hydrogène etl'autre un groupe hydroxy ou bien les deux symboles Y1 et Y2 signifient l'hydrogène, f et g signifient indépendamment O ou 1, l'un des symboles X1 et X2 signifie l'hydrogène et l'autre signifie l'hydrogène ou un groupement protecteur du groupe amino et X3 signifie un groupe alkylène en C2-C6, la valence libre dans chaque reste (a), (b) ou (c) étant située sur le groupe amino N-terminal du peptide, et les éthers physiologiquement acceptables et les esters physiologiquement hydrolysables et physiologiquement acceptables de ces composés lorsque le peptide contient au moins un reste de formule (a) ou (b),

sous forme libre ou sous forme d'un sel ou d'un complexe.

2.- Un peptide de la somatostatine de formule I Z1 A' CH2-S-Yl' Y2'-S-CH2 I l I

R1 - N-CH-CO--NCHCOB--C(H-H--F

R2 dans laquelle R1 -signifie un reste de formule (a), (b) ou (c) tel que défini à la revendication 1, R2 signifie l'hydrogène, un groupe alkyle en Cl-Cl2, alcanoyle en C1-C4, phénylalkyle en C7-CI0 ou un reste de formule (a), (b) ou (c) tel que défini à la revendication 1, >N-CH(Zl)-CO signifie a) un reste (L)- ou (D)-phénylalanine éventuellement substitué dans le cycle par de l'halogène ou par des groupes NO2, NH2, OH, alkyle en C1-C3 et/ou alcoxy en C1-C3, ou b) le reste d'un =-amino-acide naturel ou d'un (D)-amino-acide correspondant, autre que celui défini sous a), ou d'un =-amino-acide synthétique, Z1 dans le reste >N-CH(Z1)-CO- représente le résidu du reste d'amino-acide tel que défini sous a) et b), A' signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C3, Y1' et Y2' signifient ensemble une liaison directe, ou bien Y1' et Y2' signifient, indépendamment l'un de l'autre, l'hydrogène ou un reste répondant à l'une des formules (1) à (5) suivantes:

R, CH2

I/ -CO-C-(CH2)>-H -CO-CE -CO-NHRe i R\ R1b (CH2)n

(1) (2) (3)

Ra' R 1 Re -CO-NH-CH-COOR, -CO-(NH)p- C (CH7>r Rd R')q

(4) (5)

dans lesquelles Ra signifie un groupe méthyle ou éthyle Rb signifie l'hydrogène ou un groupe méthyle ou éthyle m signifie un nombre entier de i à 4 inclus n signifie un nombre entier de 1 à 5 inclus Re signifie un groupe alkyle en C1-C6 Rd représente le substituant fixé sur l'atome de carbone a d'un a-amino-acide naturel (y compris l'hydrogène) R. signifie un groupe alkyle en Cl-C5 Ra' et Rb' signifient chacun, indépendamment l'un de l'autre, l'hydrogène ou un groupe méthyle ou éthyle, R8 et R9 signifient chacun, indépendamment l'un de l'autre, l'hydrogène, un halogène ou un groupe alkyle en C1-C3 ou alcoxy en C1-C3 p signifie 0 ou 1, q signifie 0 ou 1, et r signifie 0, 1 ou 2, B signifie -Pheéventuellement substitué dans le cycle par de l'halogène ou par des groupes NO2, NH2; OH, alkyle en C1-C3 et/ou alcoxy en C1-C3, ou un reste naphtylalanine, C signifie (L)-Trp- ou -(D)Trp- éventuellement a-Nméthylés et éventuellement substitués dans le cycle benzénique par de l'halogène ou par des groupes NO2, NH2, OH, alkyle en C1-C3 et/ou alcoxy en Cl-C3, D signifie -Lys-, Lys dans lequel la chaîne latérale contient 0 ou S en position B, rF-Lys, SF-Lys ou Orn, éventuellement a-N-méthylés, ou un reste 4-aminocyclohexyl-Ala ou 4-aminocyclohexyl-Gly E signifie Thr, Ser, Val, Phe, Tyr, Ile, ou un reste d'acide amino-isobutyrique ou aminobutyrique F signifie un groupe de formule R16 RI 1 ouCO-N LX4

-COOR7, -CH20RIo, -CON\ o -

\R12 dans lesquelles R7 signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C3 R1o signifie l'hydrogène ou le reste d'un ester physiologiquement hydrolysable et physiologiquement

acceptable

Ril signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en CI-C3, phényle ou phénylalkyle en C7-Co10 R12 signifie l'hydrogène, un groupe alkyle en C1C3 ou un reste de formule -CH(R13)-X4 R13 signifie -CH2OH, -(CH2)2-OH, (CH2)3-OH, ou -CqH(CH3)OH ou représente le substituant fixé sur l'atome de carbone a d'un a-amino-acide naturel ou synthétique (y compris l'hydrogène) et X4 signifie un groupe de formule -COOR7, -CH20R1o ou /R14

-CO-N\

\R1 s dans lesquelles R7 et Ro10 ont les significations données précédemment, R14 signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en Cq-C3, et R15 signifie l'hydrogène ou un groupe alkyle en Cl-C3, phényle ou phénylalkyle en C7-C10 et R16 signifie l'hydrogène ou un groupe hydroxy, Rll devant signifier l'hydrogène ou un groupe méthyle lorsque R12 représente un reste -CH(R13)-X4, et dans la formule I les restes B, D et E ont la configuration L, et les restes en position 2 et 7 et les restes Y1 4) et Y2 4) ont chacun, indépendamment, la configuration (L) ou (D), et les éthers physiologiquement acceptables et les esters physiologiquement hydrolysables et physiologiquemnent acceptables de ces composés lorsque les composés de formule I contiennent au moins un reste de formule (a) ou (b).

3.- Un peptide de la somatostatine selon la revendication 2, et répondant à la formule II

Z1 A' CH2-S-Y1' Y2'-S-CH2

I I t I

R1, -N--CH--CO--N CH--CO-B-C-D-E-NH-CH-F (II)

R18 dans laquelle Z1, A', Y1', B, C, D, E, F et Y2' sont tels que définis à la revendication 2 et les symboles R17 et R18 signifient des restes de formule (a) ou (b) tels que définis à la revendication 1, et leurs éthers physiologiquement acceptables et leurs esters physiologiquement hydrolysables et

physiologiquement acceptables.

4.- Le 2,3-dihydro-(2R)-propyl-(D)Phe-

Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cós-Thr-ol, sous forme libre ou

sous-forme d'un sel ou d'un complexe.

5.- Le 2-hydroxyéthyl-(D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol

sous forme libre ou sous forme d'un sel ou d'un complexe.

6.- Le Bis-(2-hydroxyéthyl)-(D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol

sous forme libre ou sous forme d'un sel ou d'un complexe.

7.- Un peptide de la somatostatine choisi parmi

a) 2,3-dihydroxypropyl-(D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-

Thr-ol

b) 2,3-dihydroxy-(2S)-propyl-(D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-

Cys-Thr-ol c) 2-Méthoxyéthyl-(D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol !!

d) Bis-(2-méthoxyéthyl)-(D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-

Thr-ol e) 2,3-Di-propionyloxy-(2S)-propyl-SMS f) 2,3-Di-hexanoyloxy-(2S)propyl-SMS g) 2,3-Di-O-isopropylidène-2,3-dihydroxy-(2S)-propyl-SMS h) 2, 3,4-Tri-hydroxy-(2S,3R)-butyl-SMS i) 2-Aminoéthyl-SMS j) 3-AminopropylSMS i I o SMS signifie -DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol,

sous forme libre ou sous forme d'un sel ou d'un complexe.

8.- Un procédé de préparation d'un peptide de la somatostatine tel que défini à la revendication 1, caractérisé en ce que a) on élimine au moins un groupement protecteur dans un peptide protégé contenant au moins un reste de formule (a), (b) ou (c) défini à la revendication 1, ou b) on soumet à une amination réductrice soit un composé de formule III Y, HOH2C(CHOH)f-(C)g-Z2 (III) Y2 dans laquelle f a la signification donnée à la revendication 1, g signifie 0 ou 1, Y1 et Y2 ont l'une des significations données à la revendication 1, et Z2 signifie -CHO, ou bien g signifie 1, Z2 signifie CH2OH et -CY1Y2 forment ensemble un groupe carbonyle, les groupes hydroxy libres pouvant être éthérifiés ou estérifiés, soit un composé de formule IV

X,_-NH-X'3-CHO (IV)

dans laquelle X1' signifie un groupement protecteur du groupe amino, et X3' signifie un groupe alkylène en C1-C5, avec un composé de formule V.

P - NH2 (V)

dans laquelle P signifie le reste d'un peptide de la somatostatine sous forme protégée, et, si nécessaire, on met en oeuvre l'étape a) du procédé, c) on couple par une liaison amide deux fragments peptidiques dont chacun contient au moins un amino-acide ou l'un de ses dérivés, sous forme protégée ou non protégée, l'un au moins des fragments peptidiques contenant au moins un reste de formule (a), (b) ou (c) tel que défini à la revendication 1 et les fragments peptidiques étant tels qu'on obtient une séquence polypeptidique protégée ou non protégée, et, si nécessaire, on met en oeuvre l'étape a) du procédé, ou d) on élimine ou on transforme un groupe fonctionnel d'un polypeptide protégé ou non protégé en un autre groupe fonctionnel de telle sorte qu'on obtient un polypeptide protégé ou non protégé et, lorsqu'il est protégé, on met en oeuvre l'étape a) du procédé, e) on introduit au moins un reste éventuellement protégé dans un peptide protégé ou non protégé et, si nécessaire, on met en oeuvre l'étape a) du procédé, f) on sépare les isomères optiquement actifs à partir d'un mélange quelconque de tels isomères obtenu selon les étapes a) à e), et on récupère le composé ainsi obtenu sous forme libre

ou sous forme d'un sel ou d'un complexe.

9.- Un peptide de la somatostatine selon l'une

quelconque des revendications 1 à 7, sous forme libre ou

sous-forme d'un sel ou d'un complexe pharmaceutiquement

acceptable, pour l'utilisation comme médicament.

10.- Une composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend un peptide de la somatostatine

selon l'une quelconque des revendications i à 7, sous

forme libre ou sous forme d'un sel ou d'un complexe pharmaceutiquement acceptable, en association avec un

véhicule ou diluant pharmaceutiquement acceptable.