FI99114C - Menetelmä tyvikalvoproteiinien eristämiseksi ihmis- ja eläinkudoksista - Google Patents
Menetelmä tyvikalvoproteiinien eristämiseksi ihmis- ja eläinkudoksista Download PDFInfo
- Publication number
- FI99114C FI99114C FI881122A FI881122A FI99114C FI 99114 C FI99114 C FI 99114C FI 881122 A FI881122 A FI 881122A FI 881122 A FI881122 A FI 881122A FI 99114 C FI99114 C FI 99114C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- basement membrane
- membrane proteins
- proteins
- human
- extraction
- Prior art date
Links
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims abstract description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 24
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title abstract description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title abstract description 11
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 29
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 claims abstract description 8
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 claims description 30
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 14
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 9
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 9
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 6
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 claims description 5
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 claims description 5
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 abstract description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 abstract description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 12
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 12
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 12
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 9
- 108010008217 nidogen Proteins 0.000 description 8
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 6
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 6
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 6
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 5
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 3
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N DEAE-cellulose Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)O[C@H]1O[C@@H]1C(CO)OC(O)C(O)C1O GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N 0.000 description 2
- 208000009331 Experimental Sarcoma Diseases 0.000 description 2
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical compound NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HDFGOPSGAURCEO-UHFFFAOYSA-N N-ethylmaleimide Chemical compound CCN1C(=O)C=CC1=O HDFGOPSGAURCEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012506 Sephacryl® Substances 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- ZCYVEMRRCGMTRW-YPZZEJLDSA-N iodine-125 Chemical compound [125I] ZCYVEMRRCGMTRW-YPZZEJLDSA-N 0.000 description 2
- 229940044173 iodine-125 Drugs 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QDHHCQZDFGDHMP-UHFFFAOYSA-N Chloramine Chemical compound ClN QDHHCQZDFGDHMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- GHAZCVNUKKZTLG-UHFFFAOYSA-N N-ethyl-succinimide Natural products CCN1C(=O)CCC1=O GHAZCVNUKKZTLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-NQAPHZHOSA-N Sorbitol Polymers OCC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-NQAPHZHOSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N chloramine T Chemical compound [Na+].CC1=CC=C(S(=O)(=O)[N-]Cl)C=C1 VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N guanidinium chloride Chemical compound [Cl-].NC(N)=[NH2+] PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 108010028309 kalinin Proteins 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- ZIUHHBKFKCYYJD-UHFFFAOYSA-N n,n'-methylenebisacrylamide Chemical compound C=CC(=O)NCNC(=O)C=C ZIUHHBKFKCYYJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 230000014511 neuron projection development Effects 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000000578 peripheral nerve Anatomy 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 238000000163 radioactive labelling Methods 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 231100000732 tissue residue Toxicity 0.000 description 1
- 229960001479 tosylchloramide sodium Drugs 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6887—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids from muscle, cartilage or connective tissue
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S261/00—Gas and liquid contact apparatus
- Y10S261/88—Aroma dispensers
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/803—Physical recovery methods, e.g. chromatography, grinding
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/82—Subcellular parts of microorganisms
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/961—Chemistry: molecular biology and microbiology including a step of forming, releasing, or exposing the antigen or forming the hapten-immunogenic carrier complex or the antigen per se
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/962—Prevention or removal of interfering materials or reactants or other treatment to enhance results, e.g. determining or preventing nonspecific binding
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/811—Test for named disease, body condition or organ function
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/825—Pretreatment for removal of interfering factors from sample
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/25—Chemistry: analytical and immunological testing including sample preparation
- Y10T436/25375—Liberation or purification of sample or separation of material from a sample [e.g., filtering, centrifuging, etc.]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Manufacture Of Macromolecular Shaped Articles (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- External Artificial Organs (AREA)
- Shaping By String And By Release Of Stress In Plastics And The Like (AREA)
- Tires In General (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
99114
Menetelmä tyvikalvoproteiinien eristämiseksi ihmis- ja eläinkudoksista
Laminiini, nidogeeni ja BM40 ovat glykoproteiineja, 5 joilla katsotaan olevan ratkaiseva osa tyvikalvojen raken tumisessa sekä solujen ja tyvikalvojen välisessä vuorovaikutuksessa (M. Paulson et ai., Eur. J. Biochem. 161 (1986) 455-464; R. Timpl ja M. Dziadek, Int. Rev. Exp. Pathol.
29 (1986) 1-112). Laminiini edistää neuriittien kehitty- 10 mistä ääreishermojen neuroneista (D. Edgar et ai., EMBO J.
3 (1984) 1463-1467) ja niiden regeneroitumista in situ (Medison et ai., Exp. Neurol. 88 (1985) 767-772).
Näiden proteiinien laajemman käytön on tähän saakka estänyt ennen kaikkea se, että ei ole ollut käytössä sopi-15 via menetelmiä, joilla näitä proteiineja voidaan eristää ihmiskudoksesta säästävällä tavalla. Ristelin ja Timplin (Biochem. J. 193 (1981) 749-755) esittämässä menetelmässä on kysymys proteaasille resistentin laminiinifragmentin Pl eristämisestä ihmisen istukasta. Tämä fragmentti ei sisäl-’>/••20 lä enää hermojen ja kasvainsolu j en kanssa tapahtuvalla vuorovaikutukselle tärkeitä kohta 8:a. Menetelmällä, jonka ·;<·· ovat esittäneet Timpl et ai, (J. Biol. Chem. 254 (1979) 9933-9937) laminiinin eristämiseksi kasvainkudoksesta, ei kyetä liuottamaan laminiinia istukasta ja kasvainkudokses-25 takin tällä menetelmällä saadaan vain pieniä saantoja.
.. Menetelmä, jota ovat kuvanneet Ohno et ai. (Bio- • « chem. Biophys, res. Corn. 112 (1983) 1091-1098) ja Wewer et * ai. (J. Biol. Chem. 258 (1983) 12654-12660), edellyttää • joko denaturoivia olosuhteita tai proteolyysiä, jotta ku- • · « * :'*’:30 doksesta saadaan uutetuksi huomattavia määriä laminiinia • I ( tai laminiinif ragmentteja. Myös nidogeeniä ja BM40:tä on • · · *·’ ’ kyetty tähän saakka eristämään ainoastaan denaturoivissa olosuhteissa (Dziadek et ai., Eur. J. Biochem. 161 (1985) 455-464; Paulson et ai., Eur. J. Biochem. 156 (1986) 467-35 478).
2 99114 Tämän keksinnön mukaisella menetelmällä on nyt mahdollista välttää nämä haittapuolet ja eristää biologisesti aktiivinen materiaali sitä säästävällä tavalla. Vesiliuoksesta voidaan yllättävästi uuttaa kelaatin muodostajan 5 läsnä ollessa intakteja tyvikalvoproteiineja ja vieläpä suurempia määriä kuin tähän saakka.
Keksintö koskee siis menetelmää tyvikalvoproteii-nien eristämiseksi ihmis- tai eläinkudoksista, jolle menetelmälle on tunnusomaista se mitä patenttivaatimuksessa 1 10 esitetään. Keksintö koskee myös keksinnön mukaisella me netelmällä eristettyjen tyvikalvoproteiinien käyttöä erittäin spesifisten antiseerumien tai vasta-aineiden valmistamiseen ja sen myötä tyvikalvoproteiinien määrittämiseen kehon nesteistä j kudosuutteista.
15 Seuraavassa selostetaan keksintöä, erityisesti edullisia suoritusmuotoja, yksityiskohtaisesti. Keksintö määritellään lisäksi patenttivaatimuksissa.
. . Keksinnön mukaisella menetelmällä voidaan uuttaa ; ; kaikenlaisia ihmis- ja eläinkudoksia, joissa tyvikalvopro- '· ‘:20 teiineja esiintyy, esimerkiksi ihmisen istukkaa, ihmisen ' ' ja eläinten kasvainkudosta ja munuaista. Ensin voidaan '·"· suorittaa esiuutto. Kudos homogenisoidaan tyvikalvoprote- V,: iineille soveltuvassa fysiologisessa puskurissa proteaasi- inhibiittoreiden ollessa läsnä ja sentrifugoidaan. Edulli- 25 sesti tässä käsittelyssä poistetaan helppoliukoiset prote- t*. iinit, kuten seerumiproteiinit ja kudoksen sytoplasmapro- « teiinit. Kudosjäännös sekoitetaan sitten uudelleen fysio- • · · • logiseen puskuriin ja homogenisoidaan ja uutetaan proteaa- • « · i.: : si-inhibiittoreiden sekä kelaatin muodostavien aineiden • ·· . 30 ollessa mukana. Sopivia kelaatin muodostajia ovat orgaani- set polyhapot, kuten esimerkiksi EDTA, EGTA ja sitraatti. Uutto toteutetaan 1 - 500 mmol, edullisesti 10 - 50 mmol, kelaatin muodostajaa lisäämällä ja tarkoituksenmukaisuus-syistä pitämällä lämpötila jäähdytyksen avulla 0-15 °C:-35 na, edullisesti 4-10 °C:na. Uutto korkeammissa lämpöti- 3 99114 loissa on myös mahdollista, mutta se johtaa silloin häiritseviin hajoamisreaktioihin. Uutteet sisältävät haluttuja tyvikalvoproteiineja. Erityisen edullisesti keksinnön mukaisella tavalla eristetään BM40, nidogeeni ja laminii-5 ni, osaksi ei-kovalenttisena kompleksina.
Yksittäiset proteiinit eristetään uutteesta mole-kyyliseulakromatografiän avulla sopivia pylväitä, kuten esimerkiksi dekstraania, erityisesti N,N'-metyleenibisak-ryyliamidilla silloitettua allyylidekstraania, tai agaroo-10 siä sisältävää pylvästä käyttäen. Tyvikalvoproteiinien tarkempi puhdistus tapahtuu kulloisestakin proteiinista riippuen edullisesti helposti emäksisillä ioninvaihtimil-la, mitä seuraa molekyyliseulakromatografiakäsittely tai lisäpuhdistus agaroosi- tai sefaroosipylväässä.
15 Tällä tavalla kyetään eristämään sellaisia määriä intakteja tyvikalvoproteiineja, joihin tähänastisin eris-tysmenetelmin ei päästä.
. , Eristettyjä ja puhdistettuja tyvikalvoproteiineja ; ' voidaan sitten käyttää antigeeneinä erittäin spesifisten 20 antiseerumien tai vasta-aineiden tuottamiseksi. Tämä ta pahtuu tavanomaisesti injektoimalla niitä koeeläimiin, edullisesti kaniineihin, subkutaanisesti tai intramusku-laarisesti. Tällöin on tarkoituksenmukaista käyttää mukana täydellistä Freundin apuainetta. Sellaisissa tapauksissa 25 voidaan käyttää tavanomaisia antigeeniannoksia. Edullinen annos kaniineilla on 0,5 - 1 mg eläintä kohden. Muodostu-nut antiseerumi voidaan sitten ottaa talteen alan ammatti- • · · ihmisille tutulla tavalla ja käyttää sellaisenaan. On myös 9 • < i :>:: : mahdollista vielä esipuhdistaa seerumissa esiintyvät vas- • · .
\,.‘30 ta-aineet. Edullinen menetelmä siihen tarkoitukseen on af f initeettikromatograf ia.
Puhdistettujen tyvikalvoproteiinien avulla tuotettu, erittäin spesifinen antiseerumi tekee mahdolliseksi määrittää tyvikalvoproteiinit kehon nesteistä, kuten esi-35 merkiksi seerumista, virtsasta jne, sekä kudosuutteista 4 99114 sinänsä tunnettuja immunologisia analyysimenetelmiä käyttäen .
Näissä määrityksissä voidaan käyttää sekä tunnettuja radioimmunologisen analyysin (RIA) muunnelmia että 5 entsymaattisen immunologisen analyysin muunnelmia ja muita vastaavia menetelmiä.
Immunologisen määrityksen edellyttämä antigeenin merkitseminen voidaan toteuttaa menetelmin, jotka ovat proteiinien merkitsemisessä tunnettuja. Edullisesti käy-10 tetään radioaktiivista merkintää, entsyymimerkintää tai fluoresenssimerkintää. Radioaktiivisen merkinnän tapauksessa käytetään radionuklidina jodi-125:tä. Merkintä voidaan silloin tehdä tunnetulla kloramiini-T-menetelmällä (Int. Arch. Allergy 29 (1966) 185).
15 Näissä tunnistusreaktioissa merkitty tyvikalvopro- teiini kilpailee tunnetulla tavalla vasta-aineesta, joten merkityn antigeenin määrä muodostuneessa antigeenivasta-. , ainekompleksissa on sitä pienempi, mitä enemmän määritys- ’ näyte sisältää merkitsemättömiä antigeenejä. Joko komplek- ' "‘2 0 sin merkitsemistä, esimerkiksi radioaktiivisuutta tai ent- ' syymiaktiivisuutta, tai antigeeni-vasta-aine-kompleksin erotuksen jälkeisen supernatantin merkitsemistä voidaan käyttää tutkittavan näytteen sisältämän antigeenimäärän :Y: selvittämiseen standardikäyrää, joka muodostetaan tunnetun 25 määrän tyvikalvoproteiinia sisältävien näytteiden avulla, apuna käyttäen. Edullisesti määritetään kompleksissa oleva .·;·. merkintä.
• · ·
Eräässä keksinnön mukaisen menetelmän edullisessa « · :.i : toteutusmuodossa spesifisen antiseerumin avulla muodostet- • · · :...:30 tu antigeeni-vasta-ainekompleksi erotetaan toisen vasta- aineen avulla. Tähän tarkoitukseen käytetään edullisesti spesifisen antiseerumin tuottamisessa käytetyn eläinlajin immunoglobuliini-G:n vastaista Vasta-ainetta. Antigeeni-vasta-ainekompleksin erotus liuoksesta voidaan toteuttaa 35 tavanomaisin menetelmin, kuten saostamalla, sentrifu- 5 99114 goimalla tai suodattamalla. Vaihtoehtona tälle antiseerumi tai toinen vasta-aine voidaan sitoa kiinteään kantajaan. Antigeeni-vasta-ainekompleksin erotuksen jälkeen määritetään sitten kompleksin sisältämä tai liuoksen jäänyt ra-5 dioaktiivisuus tai muu merkintä.
Entsymaattinen immunologinen analyysi tyvikalvo-proteiinin määrittämiseksi voidaan tehdä myös siten, että asianomaisen eläinlajin, esimerkiksi kaniinin, immunoglo-buliini-G:n vastainen vasta-aine on merkitty entsyymillä.
10 Tällaisessa entsymaattisessa immunologisessa analyysissä määritetään antigeeni-vasta-aine-kompleksin muodostumisen jälkeen jäljellä oleva osuus tyvikalvoproteiinin vastaisesta antiseerumista sitomalla se kantajaan kiinnitettyyn tyvikalvoproteiiniin ja saattamalla se sitten reagoimaan 15 kaniinin immunoglobuliini-G:n vastaisen vasta-aineen kans sa, joka on merkitty entsyymillä. Sitoutuneen entsyymimer-kityn vasta-aineen määrä määritetään sen jälkeen mittaa-, , maila entsyymireaktio, ja se on epäsuorasti verrannollinen näytteen sisältämään tuntemattomaan tvyikalvoproteiinimää-20 rään.
Keksintöä valaistaan tarkemmin seuraavissa esimerkeissä :
Esimerkki 1
Tyvikalvoproteiinien laminiini, nidogeeni ja BM40 25 eristys C57Bl-hiiriin injektoitiin subkutaanisesti EHS-kas-vainsoluja (Orkin et ai, J. Exp. Med. 145 (1977) 204). 10 • · · - 14 vuorokauden kuluttua kasvain poistettiin, ja puhdis- · tettua kasvainmateriaalia säilytettiin -20 °C:ssa. 75 g:n « * · erää pakastettuja kasvaimia homogenisoitiin 1 minuutti 1,5 l:ssa seosta, joka sisälsi 0,15 mol NaCl/litra ja 0,05 mol « · « ....j Tris-HCl/litra (pH 7,4) (TBS) ja joka oli 0,05 mM fe- nyylimetaanisulfonyylifluoridin (PMSF) ja N-etyylimaleimi-din (NEM) suhteen. 20 minuutin sentrifugoinnin (8000 min':) 35 jälkeen supernatantti heitettiin pois, ja jäännöstä homo- 6 99114 genisoitiin uudelleen 375 mlrssa edellä mainittua puskuria, johon oli lisätty 10 mmol EDTA/litra, ja samalla jäähdyttäen 1 tunti.
Edellä kuvatun kaltaisen sentrifugoinnin jälkeen 5 saatiin uute, joka joko käytettiin heti edelleen tai va rastoitiin -20 °C:seen. Halutun tuotteen saantoa ja puhtausastetta kyettiin parantamaan edelleen, kun uuttovai-heet toistettiin.
Osa TBS-EDTA-uutteesta laskettiin agaroosi-(BiogelR 10 A5m) tai sefaroosi Cl-6B-pylvään (3 x 135 cm) läpi, joka oli sitä ennen saatettu tasapainoon TBS:llä, joka sisälsi 2 mmol EDTA/litra, 0,5 mmol PMSF/litra ja 0,5 mmol NEM/litra. Tällöin tapahtui jakautuminen 3-4 fraktioksi. Ensimmäisenä eluoitunut materiaali, jossa on mukana ero-15 tettavia aineita, sisälsi laminiininidogeenikompleksia ja vapaata laminiinia, ja seuraavat jakeet sisälsivät vapaata nidogeeniä intaktissa (M 150 kD) ja osaksi hajonneessa (M . , 130 ja 100 kD) muodossa. Sen jälkeen eluoitui BM40.
; Laminiinin puhdistus tapahtuu ensin heikosti emäk- ' 20 sisellä ioninvaihtimella (DEAE-selluloosa) 2 mol ureaa/- litra sisältävää Tris-HCl-puskuria (pH 8,6), johon on lisätty proteaasi-inhibiittoreita, käyttäen. Eluointi suori-. tetaan lineaarista NaCl-gradienttia (0 - 0,4 M) käyttäen.
!V: Häiritsevät proteoglykaani- ja nukleiinihappoepäpuhtaudet 25 poistuvat tässä vaiheessa. Jäljellä oleva nidogeeni ja
pienemmät proteiinit poistetaan lopuksi laminiinista kro-matografisesti sefaroosi Cl-4B:llä käyttäen eluenttina 2 M
• · · guanidiinikloridia (pH 7,4).
• · : Nidogeenin puhdistus tapahtuu ensin DEAE-selluloo- • · · s...:30 salia ja sefaroosi Cl-4B:llä, kuten laminiinin yhteydessä kuvattiin. Mahdollisesti tarvittavat lisäpuhdistusvaiheet • · » sisältävät kromatografisen käsittelyn CM-selluloosalla käyttäen eluenttina 2 mol ureaa sisältä.vää 0,02 M Na-ase-taattia (pH 4,8) ja allyylidekstraanilla (Sephacryl S200) 35 käyttäen eluenttina 0,2 M NH4HC03.
Il 7 99114 BM40:n jatkopuhdistus tapahtuu myös DEAE-selluloo-salla käyttäen eluenttina 2 mol ureaa/litra sisältävää 0,05 M Tris-puskuria (pH 8,6) ja käyttäen eluoinnissa apuna lineaarista NaCl-gradienttia (0 - 0,4 M NaCl). BM40 5 eluoituu gradientin ollessa vaiheessa 0,2 - 0,25 M NaCl, ja väkevöinnin jälkeen se puhdistetaan lopullisesti Sephacryl S200:lla käyttäen eluenttina 0,2 M NH4HC03.
Taulukko osoittaa esimerkiksi sen, että säästävällä uutolla saadaan esimerkiksi EHS-kasvaimesta eristetyksi 10 sellaisia määriä intakteja tyvikalvoproteiineja, joihin tähänastisin menetelmin ei voida päästä.
Taulukko
Todettu proteiinimäärä (mg/g märkäpainoa) 15 Lamiini Nidogeeni BM40 TBS-uute 0,98 0,05 0,07 TBS/EDTA-uute 2,84 0,46 0,34 : ·.: 0,5 M NaCl 0,39 < 0,05 ei määritetty ' ' 6 M guanidiini- ' 20 kloridi 0,83 0,30 < 0,01 i i : Esimerkki 2
Merkityn antigeenin valmistus 25 pg esimerkin 1 mukaisesti eristettyä tyvikal- ,·;·.25 voproteiinia merkitään 0,5 mCi:llä jodi-125:tä kloramiini ♦ 1 · T menetelmällä, ja sitoutumaton jodi poistetaan dialyysil- • « · ' lä tai geelisuodatuksella polyakryyliamidigeeliä (esim.
• · · J...· Biogel1 P2, Pharmacia Eine Chemicals Inc) käyttäen.
Esimerkki 3 • t « — ____;30 Immunologisen määrityksen suoritus
Kaikki immunologisen määrityksen edellyttämät vaiheet toteutetaan niin, että mukana on 0,05 % ionitonta pinta-aktiivista ainetta, kuten esimerkiksi Tween 20:tä, 8 99114 joka on polyetoksyloitua sorbitolimonolauraattia. Sitou-tumiskäyrät määritetään 1 ng:lla merkittyä, esimerkin 1 mukaisesti eristettyä tyvikalvoproteiinia. Tyvikalvoprote-iinin pitoisuus tuntemattomassa seeruminäytteessä tai 5 muussa kehonnestenäytteessä määritetään seuraavalla inhi- bitiotestillä:
Tiettyä määrää spesifistä vasta-ainetta tai anti-seerumia esi-inkuboidaan tuntemattoman näytteen kanssa 4 °C:ssa 16 tuntia ja sen jälkeen, kun on lisätty 1 ng mer-10 kittyä antigeeniä, 8 tuntia lisää 4 °C:ssa. Sen jälkeen lisätään ylimäärin kaniinin immunoglobuliini-G:n vastaista vasta-ainetta, ja 4 °C:ssa suoritetun 16 tunnin lisäinku-boinnin jälkeen immuunikompleksiin sitoutunut antigeeni erotetaan sentrifugoimalla. Tuntemattoman näytteen inhibi-15 tiovaikutusta verrataan merkitsemättömän antigeenin stan- dardipitoisuuden vaikutukseen.
Esimerkki 4 , Antiseerumin valmistus
Kaniinit immunisoidaan 0,3-1 mg:11a (eläintä koh-20 den) esimerkin 1 mukaisesti eristettyä tyvikalvoproteii nia injektoimalla niihin subkutaanisesti tai intramusku-laarisesti antigeeniliuosta, johon on sekoitettu tilavuu-1 ( deltaan yhtä suuri määrä täydellistä Freundin apuainetta.
:' Neljän viikon kuluttua ensimmäisestä injektoinnista in- 25 jektoidaan subkutaanisesti tai intramuskulaarisesti sama määrä antigeeniliuosta sekoitettuna täydelliseen Freundin • · « apuaineeseen. 4-8 viikon kuluttua toisesta injektoin- t 4 e nista otetaan veri talteen, ja siitä saadaan koaguloinnin : jälkeen antiseerumia.
Γ' ; t 4 · • · · *94 1 i! · · · ·
Claims (6)
1. Menetelmä tyvikalvoproteiinien eristämiseksi ihmis- tai eläinkudoksista, tunnettu siitä, 5 että a) tyvikalvopitoinen kudos esiuutetaan puskurilla, joka ylläpitää tyvikalvoproteiinien luonnollisen konfor-maation ja joka sisältää proteaasi-inhibiittoreita; b) tyvikalvoproteiinit uutetaan ihmis- tai eläin-10 kudoksista puskurilla, joka ylläpitää tyvikalvoproteiinien luonnollisen konformaation ja joka sisältää sekä proteaasi-inhibiittoreita että kelaatinmuodostajaa.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että uutto toteutetaan lisäten 15 liuokseen kelaatin muodostavia orgaanisia polyhappoja.
3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että uutto toteutetaan lisäten liuokseen EDTA tai EGTA.
'· 4. Yhden tai useamman patenttivaatimuksista 1-3 20 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että uutto toteutetaan lisäten liuokseen 1-500 mmol kelaatin muodos-taj aa/litra.
5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että uutto toteutetaan lisäten 25 liuokseen 10-50 mmol kelaatin muodostajaa/litra. j1.
6. Yhden tai useamman patenttivaatimuksen 1-5 mu- *-..t kaisella menetelmällä eristettyjen tyvikalvoproteiinien * « · käyttö erittäin spesifisten antiseerumien tai vasta-ai- » · :.· 1 neiden valmistamiseen ja sen myötä tyvikalvoproteiinien * : 30 määrittämiseen kehon nesteistä ja kudosuutteista. ♦ 1· • » · • · · · 99114
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19873708198 DE3708198A1 (de) | 1987-03-13 | 1987-03-13 | Verfahren zur isolierung von basalmembranproteinen aus menschlichen und tierischen geweben |
| DE3708198 | 1987-03-13 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI881122A0 FI881122A0 (fi) | 1988-03-10 |
| FI881122A FI881122A (fi) | 1988-09-14 |
| FI99114B FI99114B (fi) | 1997-06-30 |
| FI99114C true FI99114C (fi) | 1997-10-10 |
Family
ID=6323001
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI881122A FI99114C (fi) | 1987-03-13 | 1988-03-10 | Menetelmä tyvikalvoproteiinien eristämiseksi ihmis- ja eläinkudoksista |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5147782A (fi) |
| EP (1) | EP0282018B1 (fi) |
| JP (1) | JP2532559B2 (fi) |
| AT (1) | ATE124706T1 (fi) |
| DE (2) | DE3708198A1 (fi) |
| DK (1) | DK173677B1 (fi) |
| ES (1) | ES2074983T3 (fi) |
| FI (1) | FI99114C (fi) |
| IE (1) | IE67563B1 (fi) |
| NO (1) | NO173336C (fi) |
| PT (1) | PT86944B (fi) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5512657A (en) * | 1988-12-12 | 1996-04-30 | Bainbridge Sciences, Inc. | Detection of complexes which include basement membrane components as diagnostic of cancer and other diseases |
| US5541076A (en) * | 1988-12-12 | 1996-07-30 | Bard Diagnostic Sciences, Inc. | Methods for determining the invasiveness of a bladder tumor |
| WO1992019970A1 (en) * | 1991-04-26 | 1992-11-12 | Emanuel Calenoff | Methods to detect and treat diseases caused by bacterial allergens |
| NZ524868A (en) | 2003-03-21 | 2005-09-30 | Velvet Antler Res New Zealand | Process for purifying low molecular weight proteins from tissue in situ |
| NZ526157A (en) * | 2003-05-27 | 2006-01-27 | Velvet Antler Res New Zealand | Method for the extraction of deer antler and use of the extract therefrom |
| US20070190165A1 (en) * | 2005-10-21 | 2007-08-16 | Brey Eric M | Tissue-specific basement membrane gels |
| US10076535B2 (en) | 2012-04-27 | 2018-09-18 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Use of CPG oligonucleotides co-formulated with an antibiotic to accelerate wound healing |
| WO2024130365A1 (en) * | 2022-12-21 | 2024-06-27 | Cristália Produtos Químicos Farmacêuticos Ltda | Laminin extraction, purification and polymerization processes, use, polylaminin and kit |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2923583A1 (de) * | 1979-06-11 | 1980-12-18 | Max Planck Gesellschaft | Verfahren zur immunologischen bestimmung von basalmembranmaterial und hierfuer geeignete neue basalmembranfragmente |
| US4628027A (en) * | 1982-05-19 | 1986-12-09 | Molecular Engineering Associates, Ltd. | Vitro diagnostic methods using monoclonal antibodies against connective tissue proteins |
| DE3511199A1 (de) * | 1985-03-28 | 1986-10-02 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Verfahren zur immunologischen bestimmung von heparansulfat-proteoglykan, verfahren zur herstellung bzw. reinigung von dafuer geeignetem heparansulfat-proteoglykan aus basalmembran-haltigen geweben |
| JPH01155757A (ja) * | 1987-12-11 | 1989-06-19 | Nec Corp | 可変不在転送解除方式 |
-
1987
- 1987-03-13 DE DE19873708198 patent/DE3708198A1/de not_active Withdrawn
-
1988
- 1988-03-09 AT AT88103668T patent/ATE124706T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-03-09 ES ES88103668T patent/ES2074983T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-03-09 DE DE3854096T patent/DE3854096D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-03-09 EP EP88103668A patent/EP0282018B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-03-10 FI FI881122A patent/FI99114C/fi not_active IP Right Cessation
- 1988-03-10 PT PT86944A patent/PT86944B/pt not_active IP Right Cessation
- 1988-03-11 NO NO881111A patent/NO173336C/no not_active IP Right Cessation
- 1988-03-11 IE IE72988A patent/IE67563B1/en not_active IP Right Cessation
- 1988-03-11 US US07/167,177 patent/US5147782A/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-03-11 DK DK198801356A patent/DK173677B1/da not_active IP Right Cessation
- 1988-03-11 JP JP63056490A patent/JP2532559B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI881122A (fi) | 1988-09-14 |
| DE3854096D1 (de) | 1995-08-10 |
| IE880729L (en) | 1988-09-13 |
| IE67563B1 (en) | 1996-04-17 |
| NO881111D0 (no) | 1988-03-11 |
| US5147782A (en) | 1992-09-15 |
| FI99114B (fi) | 1997-06-30 |
| DE3708198A1 (de) | 1988-09-22 |
| ATE124706T1 (de) | 1995-07-15 |
| NO173336C (no) | 1993-12-01 |
| PT86944A (pt) | 1988-04-01 |
| NO881111L (no) | 1988-09-14 |
| DK173677B1 (da) | 2001-06-11 |
| EP0282018A2 (de) | 1988-09-14 |
| FI881122A0 (fi) | 1988-03-10 |
| EP0282018A3 (en) | 1990-01-24 |
| PT86944B (pt) | 1992-05-29 |
| JPS63243098A (ja) | 1988-10-07 |
| DK135688A (da) | 1988-09-14 |
| NO173336B (no) | 1993-08-23 |
| ES2074983T3 (es) | 1995-10-01 |
| DK135688D0 (da) | 1988-03-11 |
| EP0282018B1 (de) | 1995-07-05 |
| JP2532559B2 (ja) | 1996-09-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4340581A (en) | Process for the immunological determination of basal membrane material and new basal membrane suitable therefor | |
| US4504587A (en) | Procedure for immunologic determination of procollagen peptide (type III) and procollagen peptide col 1 (type III) together and a process for preparing anti-procollagen peptide col 1 (type III) serum | |
| Schubert et al. | Characterization of an amyloid beta precursor protein that binds heparin and contains tyrosine sulfate. | |
| US4312853A (en) | Radioimmunological determination of procollagen (type III) and procollagen peptide (type III) | |
| EP0699306B1 (en) | Assay for cardiac troponin i | |
| Tatarinov et al. | Development of a radioimmunoassay for pregnancy‐specific beta1‐globulin and its measurement in serum of patients with trophoblastic and non‐trophoblastic tumours | |
| FI92880B (fi) | Tyypin III kollageenin hajoamisen määritys | |
| US4489167A (en) | Methods and compositions for cancer detection | |
| FI99114C (fi) | Menetelmä tyvikalvoproteiinien eristämiseksi ihmis- ja eläinkudoksista | |
| JPH04232462A (ja) | アンギオテンシンｉｉの特異的検定のためのキット | |
| Salabe et al. | Radioimmunoassay for Human Antithyroglobulin Antibodies I. The Relationship Between Tanned Cell Haemagglutination and a Double Antibody Technique | |
| US4478934A (en) | Determination of adenosine by immunoassay involving acylation of the adenosine | |
| EP0020090B1 (en) | Radioimmunoassay of migration inhibitory factor | |
| EP0313156B1 (en) | Snrnp-a antigen and fragments thereof | |
| JPH01139600A (ja) | タイプ３プロコラーゲンのプロペプチドに対する抗体およびそれを用いるアッセイ法 | |
| FI75935C (fi) | Foerfarande foer analysering av komplementfragmentet c3a, c4a och c5a eller des-arg derivat och en foer utfoerande av foerfarandet anvaendbar uppsaettning. | |
| JPS6340858A (ja) | 炎症の検出とその新しい抗体 | |
| KR101240207B1 (ko) | 알츠하이머병 조기진단용 단백질성 마커 | |
| Tracy et al. | Development of monoclonal antibodies to proteins separated by two-dimensional gel electrophoresis | |
| Heffetz et al. | Antibodies directed against phosphothreonine residues as potent tools for studying protein phosphorylation | |
| JPS6210070A (ja) | ヒスタミン誘導体、免疫原接合体およびそれに対してレイズされた抗体 | |
| JPS60224064A (ja) | 体液中の基底膜コラーゲンの測定法及び基底膜コラーゲン―ドメインｎｃ１に対する抗体の検出法 | |
| US5177020A (en) | Method for the immunological determination of heparan sulfate-proteoglycan and process for the preparation and purification of heparan sulfate-proteoglycan suitable for this purpose from tissues containing basal membrane | |
| US4731336A (en) | Immunoassay for complement fragments | |
| Chytil | [15] Immunochemical characteristics of chromosomal proteins |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BB | Publication of examined application | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: HOECHST AKTIENGESELLSCHAFT Owner name: MAX-PLANCK-GESELLSCHAFT ZUR FOERDERUNG DER WISSENS |