FI98462C - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 4,5,6,11-tetrahydrobentso[6,7]syklo-okta[1,2-b]tiofeeni-6,11-imiinien ja 6,11-dihydrobentso[6,7]syklo-okta[1,2-b]tiofeeni-6,11-imiinien valmistamiseksi ja siinä käyttökelpoinen välituoteyhdiste - Google Patents

Description

- 98462

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 4,5,6,11-tetra-hydrobentso[6,7]syklo-okta[1,2-b]tiofeeni-6,11-imiinienja 6,ll-dihydrobentso[6,7]syklo-okta[1,2-b]tiofeeni-6,11-imiinien valmistamiseksi ja siinä käyttökelpoinen välituo-5 teyhdiste

Keksinnön tausta US-patentti 4 414 154 kuvaa yhdisteitä, joilla on kaava 10 R1 >--<ch2) m

Q

Yhdisteiden mainitaan olevan käyttökelpoisia kou-20 ristustenvastaisina, anksiolyytteinä ja antidepressant teinä. Edellä olevilla yhdisteillä ei ole tiofeenirengasta osana trisyklistä rengassysteemiä.

US-patentti 4 252 810 kuvaa yhdisteitä, joilla on kaava '25

R1 R

R3

Yhdisteiden mainitaan olevan käyttökelpoisia ahdistuk-senvastaisina aineina ja lihasrelaksantteina. Patentin 33 4 242 810 yhdisteissä on erilainen tiofeenirenkaan orien- 98462 2 taatio kuin tämän keksinnön mukaisissa yhdisteissä kuten myös syklohepta- eikä syklo-okta-rengas osana silloittu-nutta, trisyklistä rengassysteemiä.

Keksinnön yhteenveto 5 Tämä keksintö koskee kaavan I mukaisia yhdisteitä R2-1 R1 jossa pilkkuviiva esittää valinnaista kaksoissidosta, R1 ja R4 valitaan itsenäisesti vedystä ja C^-Cg-alkyylistä, ja R2 15 ja R3 valitaan itsenäisesti vedystä, Cj-Cg-alkyylistä, halogeenista (esimerkiksi fluori, kloori, bromi ja jodi), C^-C^-alkoksista ja C^-Cg-alkyylitiosta, ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja.

Edullisia yhdisteitä ovat kaavan I mukaiset yhdis-20 teet, joissa R1 on vety. Edullisemmin R1 on vety ja R4 on metyyli.

Erityisen edullisia tämän keksinnön mukaisia yhdisteitä ovat seuraavat: ll-metyyli-4,5,6,ll-tetrahydrobentso[6,7]syklo-ok-.'.25 ta[l, 2-b) tiofeeni-6,11-imiini; 8-f luori-ll-metyyli-4, 5,6, ll-tetrahydrobentso[6,7] -syklo-okta[l,2-b]tiofeeni-6,11-imiini; ja 8,11 -dimetyyli-4, 5,6,11-tetrahydrobentso [ 6,7] syklo-okta[l,2-b]tiofeeni-6,11-imiini.

30 ll-metyyli-4,5,6,ll-tetrahydrobentso[6,7]syklo-ok- .. ta[1,2-b]tiofeeni-6,11-imiinin (+)-isomeeri on erityisen edullinen.

Tämä keksintö koskee myös farmaseuttisia koostumuksia aivohalvauksen, Alzheimerin taudin tai kouristusten 35 hoitoon käsittäen kaavan I mukaisen yhdisteen tai sen far- 3 - 98462 maseuttisesti hyväksyttävän suolan määrän, joka on tehokas estämään neuronaalisia vauriolta, joita seuraa aivohalvauksen jälkeen tai Alzheimerin taudin etenemisen aikana, tai kouristusten estämisessä, ja farmaseuttisesti hyväk-5 syttävän kantajan. Edulliset tämän keksinnön mukaiset koostumukset sisältävät edellä olevia edullisia ja erityisen edullisia yhdisteitä.

Tämä keksintö koskee myös menetelmää aivohalvauksen, Alzheimerin taudin tai kouristusten hoitamiseksi, kä- 10 sittäen kaavan 1 mukaisen yhdisteen tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan määrän annostelemisen, joka määrä on tehokas estämään neuronaalista vauriota, jotka seuraavat aivohalvausta tai Alzheimerin taudin etenemisen aikana, tai estämään kouristuksia.

15 Tämä keksintö koskee myös menetelmää kaavan I tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi.

Tämä keksintö koskee myös kaavan I valmistamisessa käytettäviä uusia välituotteita. Sellaiset välituotteet ovat yhdisteitä, joilla on kaava 20 R4 r^V^-R3 R5 jossa R4 on vety tai metyyli, R3 on vety, fluori tai metyyli ja R5 on suojaryhmä kuten C02CH2CC13.

30 Keksinnön yksityiskohtainen kuvaus Tämän keksinnön mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa kuten on näytetty alla olevassa reaktiokaaviossa: . 56462 4 ΒΤΊ NHSIBuPhj 5 Β< A) Dilitiaatio /Ύ] " CI,CH2COCOa τ,3 ' emäs

R II B) III

λΑ,* 10 I 1| jossa Y = Hj tai D2 C) h30 +

V

“ "YY .· ,-v ,· r^-.> V-A^NHCOjCHjCC., ^ Cl!— \ Γ j" R4 HBr MV_*!— 0—1 AoOH AA^/ U COeCHzCCl,

IV VI

25 / \silikageeli / \ /HBr R< 7 30

CUCHjCOCON S I

ΟέΓ^

V

35 5 - 98462

Ensimmäinen sarjan vaihe käsittää sopivan kaavan II mukaisen N-silyylibentseenimetanamiinijohdannaisen dili-tioinnin käsittelemällä kaavaa II ainakin 2 ekvivalentilla alkyylilitiumreagenssia, edullisesti kaupallista n-butyy-5 lilitiumia, jota myydään heksaaniliuoksena. Sopivat liuottimet käsittävät vedettömät dialkyylieetterit, tetrahydro-furaanin, tyydyttyneet hiilivedyt tai minkä tahansa niiden seoksen. Litioinnin helpottamiseksi voidaan käyttää 0,5 - 1,0 ekvivalenttia tetrametyylietyleenidiamiinia rinnak-10 kaisliuottimena. Litiointiprosessi suoritetaan yleisesti lämpötiloissa liikkuen noin 0 eC:sta käytetyn liuottimen kiehumispisteeseen, vaikka alle -78 °C:n lämpötiloja voidaan käyttää haluttaessa. Kun reaktio suoritetaan huoneenlämpötilassa, noin 2 tunnin aika on yleisesti sallittu 15 täydellisen dilitioinnin aikaansaamiseksi; pitemmät ajat (esim. noin 12 tuntia) ovat hyväksyttäviä. Syntynyttä di-litio-N-silyylibentseenimetaaniamiinijohdannaista ei yleensä eristetä ja sen voidaan antaa reagoida sopivan 4,5-dihydro-6H-syklopenta[b]tiofen-6-onin kanssa samassa 20 astiassa, jossa dilitiointi suoritetaan. 4,5-dihydro-6H- syklopentafb]tiofen-6-oni tyypillisesti saatetaan liuokseen käyttämällä sellaisen tyyppistä vedetöntä inerttiä liuotinta, jota käytetään dilitiointiprosessissa. Tämä vaihe suoritetaan ulkoisen hauteen lämpötiloissa vaihdel-25 Ien noin -100 °C:sta noin 0 °C;seen, vaikka -78 eC on edullinen lämpötila. Seuraavan reaktion annetaan tapahtua noin 0,5 - noin 3 tunnin ajan. Tässä pisteessä reaktioseos sammutetaan ylimäärällä kylläistä NH4Cl-liuosta ja annetaan tasapainottua huoneenlämpötilaan. H20:lla laimentamista 30 seuraavana seos tyypillisesti uutetaan kahdesti dietyy- lieetterillä. Sitten yhdistetyt dietyylieetteriuutteet konsentroidaan alennetussa paineessa liuottimien poistamiseksi. öljyinen jäännös liuotetaan laimean mineraalihapon ja inertin sekoittuvan liuottimen, edullisesti tetrahydro-35 furaanin, seokseen, ja annetaan sekoittua huoneenlämpöti- 6 - 98462 lassa noin 2 - noin 24 tunnin ajan; pidemmät ajat ovat hyväksyttäviä. Suurimman osan rinnakkaisliuotinta poistaminen suoritetaan sitten alennetussa paineessa. Jäljelle jäänyt jäännös laimennetaan H20:lla ja uutetaan dietyyli-5 eetterillä ja uutteet heitetään pois. Lisäämällä emästä (tyypillisesti NaOH, KOH ja/tai NaHC03) vesikerroksen pH säädetään ainakin 9:ään. Seos uutetaan taas kahdesti eetterillä ja yhdistetyt uutteet kuivataan kiinteän Na2S04:n tai K2C03:n päällä. Suodatuksen jälkeen liuotin haihdute-10 taan alennetussa paineessa. Jäännös laitetaan tyypillisesti alennettuun paineeseen, jotta poistetaan liuottimen jäänteet ja jotta poistetaan bentseenimetaaniamiini tai sen johdannaiset. Halutun kaavan III mukaisen yhdisteen eristäminen voidaan sitten saavuttaa kromatografisesti 15 silikageelillä, yleisesti käyttämällä metanolin ja kloroformin yhdistelmää eluenttina.

Seuraava sarjan vaihe käsittää sopivan kaavan 111 mukaisen yhdisteen asyloimisen 2,2,2-trikloorietyyliklo-roformiaatilla ja sitä seuraavalla hapon katalysoimalla 20 toisiintumisella vastaavaksi kaavan VI mukaiseksi yhdisteeksi. Siten standardeissa asylointiolosuhteissa kaavan III mukaista yhdistettä yleisesti käsitellään noin 1 -noin 1,5 ekvivalentilla 2,2,2-trikloorietyyliklorofor-miaattia 1-2 ekvivalentin tertiääristä amiinia, pyridii-25 niä tai muuta emästä läsnä ollessa, joka on liukoinen käytettävään liuottimeen, joka ei reagoi 2,2,2-trikloorietyy-likloroformaatin kanssa. Edullinen liuotin on dikloorime-taani, vaikka muut liuottimet, kuten kloroformi, hiilitet-rakloridi, bentseeni ja muut aproottisen liuottimet ovat 30 myös sopivia. Reaktio suoritetaan yleisesti 0 °C;ssa, vaikka jopa niin korkeaa lämpötilaa kuin liuottimen kiehumispiste tai alle -78 eC voidaan käyttää. Reaktioajat, jotka vaihtelevat noin 5 minuutista useisiin tunteihin, voidaan käyttää, kun reaktio käy 0 °C:ssa. Kaavan IV mu-35 kaista välituotetta, N-2,2,2-trikloorietyylioksikarbonyy- 98462 7 lijohdannaista ei tarvitse eristää, kun asylointireaktio suoritetaan liuottimissa kuten dikloorimetaani tai muut halogenoidut hiilivedyt. Näissä tapauksissa, seuraten asy-lointivaiheen täydentämistä, reaktioseosta käsitellään 5 suoraan HBr-kaasulla, jota kuplitetaan liuokseen riittävän pitkän ajan (tyypillisesti 5 minuuttia), jolloin saavutetaan täydellinen reaktioseoksen kyllästyminen. Edullinen lämpötila tälle vaiheelle on noin 0 eC; kuitenkin muita lämpötiloja vaihdellen -78 eC:sta liuottimen kiehumispis-10 teeseen voidaan käyttää. HBr:n liittämistä seuraavana reaktioseosta sekoitetaan aika, joka vaihtelee noin 0,5 tunnista useisiin päiviin, tyypillisesti reaktioaika on noin 2 tuntia. Tässä pisteessä liuotin poistetaan alennetussa paineessa. Haluttu kaavan VI mukainen yhdiste voi-15 daan sitten eristää jäännöksestä nestekromotografisesti silikageelillä. Etyyliasetaatin ja heksaanin seosta käytetään tavallisesti eluenttina.

Vaihtoehtoinen menettely voi seurata 2,2,2-trikloo-rietyylikloroformiaatin reaktion kaavan III mukaisen yh-20 disteen kanssa täydentymisen jälkeen. Tämä on edullinen menetelmä, kun asylointivaihe suoritetaan muissa liuottimissa kuin halogenoiduissa hiilivedyissä. Sitten kun reaktio 2,2,2-trikloorietyylikloroformaatin kanssa on täydellinen, liuotin poistetaan haihduttamalla alennetussa pai-25 neessa. Kaavan IV mukaisen yhdisteen välituote N-2,2,2-trikloorietyylioksikarbonyylijohdannainen eristetään sitten, tyypillisesti käyttämällä nestekromatografiaa silikageelillä. Sillä aikaa kun suoritetaan kromatografointi silikageelillä, hapon katalysoima johdannaisen syklisoitumi-30 nen voi tapahtua, jolloin saadaan kaavan V mukainen iso-meerinen spirosyklinen amiinijohdannainen. Spirosyklisen yhdisteen, kaavan IV mukaisen välituoteyhdisteen tai kahden isomeerin käsittely HBr-kaasulla tehdään sitten, kuten edellä on kuvattu, käyttämällä halogenoitua hiilive-35 tyä (esim. dikloorimetaani) liuottimena.

98462 8

Lopullinen vaihe kaavan 1 mukaisten yhdisteiden valmistamisessa käsittää 2,2,2-trikloorietyylioksikarbo-nyylisuojaryhmän poistamisen kaavan VI mukaisesta väli-tuoteyhdisteestä. Tämä voidaan saavuttaa käyttämällä stan-5 dardeja menetelmiä, joita on kuvattu kemiallisessa kirjallisuudessa. Tyypillisesti kaavan VI mukainen yhdiste liuotetaan etikkahappoon ja käsitellään ylimäärällä sinkkijauhetta. Reaktio tapahtuu tavallisesti noin 50 °C:ssa, vaikka lämpötiloja etikkahapon jäätyrnis- ja kiehumispisteiden 10 välillä voidaan käyttää. Kun reaktio tapahtuu 50 eC:ssa, reaktioaikoja noin 1 ja noin 24 tunnin välillä käytetään tavallisesti. Reaktion lopussa reagoimaton sinkki poistetaan suodattamalla ja suurin osa etikkahaposta poistetaan haihduttamalla alennetussa paineessa. Jäännös liuotetaan 15 dietyylieetteriin tai metyleenikloridiin ja pestään NaHC03-liuoksella, vedellä ja suolaliuoksella. Liuos kuivataan (Na2S04, K2C03 tai MgS04), suodatetaan ja haidutetaan, jolloin saadaan raaka kaavan I mukainen yhdiste. Puhdistus saavutetaan tavallisesti käyttämällä nestekromatografiaa 20 silikageelillä. Kaavan I mukaiset yhdisteet ovat usein öljyjä, mutta ne voidaan muuttaa kiteisiksi suoloiksi standardeilla menetelmillä.

Dilitioidun kaavan II, jossa R4 on muu kuin vety tai metyyli, mukaisen bentseenimetanamiinijohdannaisen additio * 25 4,5-dihydro-6H-syklopenta[b]tiofen-6-oniin, jolloin saa daan kaavan III mukainen yhdiste, ei tapahdu edellä kuvatuissa olosuhteissa. Vaihtoehtoinen reitti kaavan III mukaiseen yhdisteeseen, jossa R4 on muu kuin vety tai metyyli, on seuraava: 98462 9 o s <O^A i

)- « K

m N. — Γ7

\ \H N

^txt N a

^ CM

1 Λ 1 ! \^° % , <N ‘ , i tm A ~ \ ® \=o

•H

= ·τ A

e fc· f _ z a pe o Λ r.

IK 1 °-SS

^ ν' \ « «s ®

An /3=· 5sZS

°\jo <J N

r—L K "

<2AS

98462 10 Tästä kaaviosta voidaan vetää seuraava yhteenveto: 2-(2-bromifenyyli)-l,3-dioksolaania (A) käsitellään 2 ekvivalentilla tert-butyylilitiumia, jotta vaikutetaan halo-geenimetyylivaihtoon. 2-(2-litiofenyyli) -1,3-dioksolaani 5 (B) saatetaan sitten reagoimaan in situ 4,5-dihydro-6H- syklopenta[b]tiofen-6-onin kanssa. Vesipitoisen happotyös-kentelyn jälkeen 2-(4H-syklopenta[b]tiofen-6-yyli)bentsal-dehydi (C) eristetään flash-kromatografisesti. Tätä käsitellään Grignardin reagenssilla (R4MgBr), jolloin saadaan 10 6-[2-(1-hydroksialkyyli)fenyyli]-4-H-syklopenta[b]tiofee- niä (D), joka sitten seuraavassa hapetetaan 6-[2—(alkyyli-karbonyyli)fenyyli]-4H-syklopenta[b]tiofeeniksi (E). E:n pelkistävän aminoinnin pitäisi sitten antaa rakenteen III mukaisia yhdisteitä.

15 Kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden farmaseutti sesti hyväksyttävät suolat ovat tehokkaita kiihottavia aminohapporeseptoriantagonisteja ja ovat siten käyttökelpoisia aineina estämään neuronaalisia vaurioita aivoissa. Erityisesti yhdisteet ovat käyttökelpoisia estämään aivo-20 halvauksen jälkeisiä ja Alzheimerin taudin etenemisen aikana syntyviä neuronaalisia vaurioita. Lisäksi yhdisteet toimivat antikonvulsantteina.

Erilaisten edellä kuvattujen tilojen hoitamista varten kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden farmaseutti-25 sesti hyväksyttävät suolat voidaan annostella hoidon tarpeessa olevaan kohteeseen erilaisten tavanomaisten annos-telureittien kautta, käsittäen oraalisen, tooppisen, rek-taalisen, parenteraalisen reitin ja inhalaation aerosoli-muodossa. Yleisesti nämä yhdisteet annostellaan oraalises-30 ti tai parenteraalisesti annoksissa välillä noin 0,01 -noin 50 mg/kg käsiteltävän kohteen ruumiin painokiloa kohti päivässä, edullisesti noin 0,05 noin 10 mg:aan/kg. Kuitenkin jotkin variaatiot annoksissa ovat tarpeellisia riippuen hoidettavan kohteen tilasta ja käytettävän yhdis-35 teen aktiivisuudesta. Annostelemisesta vastuussa oleva 98462 11 henkilö määrittää joka tapauksessa sopivan annoksen yksittäiselle kohteelle.

Kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat voidaan annostella yksin tai 5 yhdessä farmaseuttisesti hyväksyttävien kantajien kanssa, joko yksittäisenä tai useana annoksena. Sopivat farmaseuttiset kantajat käsittävät inert!t kiinteät laimentimet tai täyteaineet, steriilit vesiliuokset ja erilaiset orgaaniset liuottimet. Farmaseuttiset koostumukset, jotka on muo-10 dostettu yhdistämällä uudet kaavan I mukaiset yhdisteet ja farmaseuttisesti hyväksyttävät kantajat, annostellaan sitten heti erilaisissa annosmuodoissa kuten tabletit, pulverit, pastillit, siirapit, injektoitavat liuokset ja sellaiset. Nämä farmaseuttiset koostumukset voivat haluttaes-15 sa sisältää lisäaineosia kuten makuaineet, sitojat, täyteaineet ja sellaiset. Siten oraalista annostelemista varten tabletteja, jotka sisältävät erilaisia täyteaineita, kuten natriumsltraatti, kalsiumkarbonaatti ja kalsiumfosfaatti, voidaan käyttää erilaisten hajottaja-aineiden kanssa, ku-20 ten tärkkelys, alginiinihappo ja tietyt komleksisilikaa-tit, yhdessä sitomisaineiden kanssa kuten polyvinyylipyr-rolidoni, sukroosi, gelatiini ja akaasia. Lisäksi natrium-lauryylisulfaatti ja talkki ovat usein hyödyllisiä table-tointitarkoituksiin. Samantyyppisiä kiinteitä koostumuksia 25 voidaan käyttää täyteaineina pehmeissä ja kovissa täytetyissä gelatiinikapseleissa. Edulliset materiaalit tähän sisältävät laktoosin tai maitosokerin ja korkean molekyy-lipainon polyetyleeniglykolit. Kun vesisuspensiot tai eliksiirit ovat haluttuja oraaliseen annostelemiseen, 30 olennainen aktiiviaineosa siinä voidaan yhdistää erilais ten makeutus- ja mausteaineiden kanssa, värjäysaineen tai väriaineiden kanssa, ja haluttaessa emulgointi- tai sus-pendointiaineiden kanssa yhdessä laimentimien kanssa kuten vesi, etanoli, propyleeniglykoli, glyseriini ja niiden 35 yhdistelmät.

98462 12

Parenteraalista annostelemista varten kaavan I mukaisen yhdisteen tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan liuosta seesami- tai maapähkinäöljyssä, propyleeniglykolin vesiliuoksessa tai steriilissä vesiliuoksessa 5 voidaan käyttää. Sellaiset vesiliuokset pitäisi sopivasti puskuroida tarvittaesssa ja nestemäinen laimennin ensin tehdä isotoniseksi riittävällä määrällä saliinia tai glukoosia. Nämä erityiset vesiliuokset ovat erityisen sopivia intravenöösiin, lihaksensisäiseen, ihonalaiseen tai 10 vatsakalvonsisäiseen annostelemiseen. Tässä yhteydessä käytettävät steriilit vesiväliaineet ovat helposti saatavissa standardeilla tekniikoilla, jotka ovat alan ammatti-miehille tunnettuja.

Kaavan 1 mukaisten yhdisteiden aktiivisuus aineiden 15 neuronaalisten vaurioiden estämisessä aivoissa ja antikon- vulsantteina voidaan määritellä erilaisilla standardeilla biologisilla tai farmakologisilla kokeilla. Sopiviin testeihin kuuluvat in vivo -kokeet (kuten audiogeenisen hal-vauskohtauksen estäminen DBA/2-hiirissä ja NMDA-indusoitu-20 jen halvauskohtausten estäminen CF-l-hiirissä) yhtä hyvin kuin in vitro -kokeet (kuten 3H-TCP:n korvaaminen aivoleik-keistä ja NMDA-indusoidun syklisen GMP:n inhibitio).

Tätä keksintöä valaistaan seuraavilla esimerkeillä.

On kuitenkin ymmärrettävä, että keksintö ei rajoitu näiden 25 esimerkkien erityisiin yksityiskohtiin.

Reaktiot, jotka vaativat vedettömiä olosuhteita, suoritettiin liekkikuivatuissa lasiastioissa typpi-ilma-kehässä. Reaktioita, joissa käytettiin n-BuLi:a (n-butyy-lilitium) emäksenä, varten eetteri tislattiin tuoreeltaan 30 LiAlH4:stä ja vedetöntä THF:ää (tetrahydrofuraani) käytettiin vasta-avatuista pulloista. Muita liuottimia ja kemikaaleja käytettiin sellaisenaan kuin valmistajat ne toimittivat ilman enempiä puhdistuksia. 4,5-dihydro-6H-syklo-penta]b]tiofen-6-oni valmistettiin kuten on kuvattu viit-35 teessä MacDowell et ai., J. Org. Chem., 32, 1226 (1967).

98462 13 4-fluori-a-metyylibentseenimetanamiini ja a,4-dimetyyli-bentseenimetanamiini valmistettiin kuten on kuvattu viitteessä Roocker ja de Radzitsky, Bull. Soc. Chim. Beiges, 72, 195 (1963). Sulamispisteet ovat korjaamattomia. Kaikki 5 NMR-spektrit mitattiin käyttämällä liuottimena CDCl3:a.

NMR-arvot ilmoitetaan miljoonasosina (6) ja ne ovat suhteessa liuottimen näytteen deuteriumpiikkiin. Flash-kroma-tografia suoritettiin kuten on kuvattu viitteessä Still et ai., J. Org. Chem., 43, 2923 (1978) käyttämällä 32 - 36 pm 10 silikageeliä.

Esimerkki 1 N-1-butyy1idifenyy1i silyy1ibentseenimetanamiini

Liuokseen, jossa oli bentseenimetanamiinia (21,8 ml, 0,20 mol) ja trietyyliamiinia (41,2 ml, 0,30 mol) ase-15 tonitriilissä (400 ml), lisättiin tipoittain t-butyyli- klooridifenyylisilaania (52 ml, 0,20 mol). Seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 3 tuntia ja sitten suodatettiin liukenemattoman valkoisen saostuman poistamiseksi (trietyyliamiinihydrokloridi). Liuottimen poistamisen va-20 kuumissa jälkeen raakatuote liuotettiin 4:1 eetteri/hek- saani-seokseen ja pestiin sarjassa H20:lla, kylläisellä NaHC03-liuoksella ja H20:lla. Liuos kuivattiin (Na2S04/K2C03) ja konsentroitiin, jolloin jäi öljyä, joka tislattiin korkeassa vakuumissa. Pääfraktio sisälsi puhdasta tuotetta 25 (45,9 g, 66 %) tislattuna 140 - 160 °C:ssa noin 0,1 - 0,2 mmHg:ssä ja kiteytyi seisoessaan huoneenlämpötilassa, sp. 34 - 36 °C.

XH NMR: 6 7,84 - 7,72 (m, 4H), 7,50 - 7,28 (m, 11 H), 3,98 (d, J - 8 Hz, 2 H), 1,28 (leveä m, 1 H), 1,10, 30 (s, 9 H).

Esimerkki 2 6- [2- (aminometyyli) -fenyyli] -4H-syklopenta[b] tio- feeni

Liuos, jossa oli esimerkin 1 otsikon yhdistettä 35 (3,45 g, 10,0 mmol) ja N,N N',N'-tetrametyylietyleenidi- 98462 14 amiinia (0,75 ml, 5,0 mmol) kuivassa eetterissä (70 ml), jäähdytettiin 0 eC:seen ja käsiteltiin n-BuLi:n (2,5 M) liuosta heksaanissa (8,0 ml, 20 mmol). Seosta sekoitettiin 0 °C:ssa 0,25 tuntia ja sitten huoneenlämpötilassa vielä 3 5 tuntia. Tässä pisteessä seos jäähdytettiin -78 eC:seen.

Sitten lisättiin liuos, jossa oli 4,5-dihydro-6H-syklopen-ta[b]tiofen-6-onia (1,5 g, 10,8 mmol) kuivassa THF:ssä (15 ml), tipoittain ja syntynyttä liuosta sekoitettiin 78 - -60 eC:ssa yli 1 tunti. Reaktio sammutettiin lisää-10 mällä kylläistä NH4Cl-liuosta ja sen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan. Seos laimennettiin eetterillä ja H20:lla. Eetterikerros erotettiin ja konsentroitiin, jolloin jäi öljyä, joka liuotettiin seokseen, jossa oli 1 N HCl:ää (70 ml) ja THF:ää (105 ml). Syntynyttä liuosta sekoitet-15 tiin huoneenlämpötilassa yön yli. Sitten seos laimennettiin H20:lla ja uutettiin kahdesti eetterillä. Uutteet laitettiin sivuun myöhempää reagoimattoman ketonin talteenottoa varten sillä aikaa kun vesikerros tehtiin emäksiseksi lisäämällä kiinteää NaOH:ta ja uutettiin jälleen kah-20 desti eetterillä. Nämä uutteet yhdistettiin, kuivatttiin (Na2S04) ja konsentroitiin vakuumissa, jolloin jäi tummaa öljyä. Tämä laitettiin korkeaan vakuumiin ja lämmitettiin 50 °C:ssa 1 tunti bentseenimetanamiinin poistamiseksi, jolloin jäi 540 mg (23 %) otsikon yhdistettä. Tämän aineen ; 25 NMR-spektri osoitti sen olevan riittävän puhdasta käytet täväksi suoraan seuraavassa vaiheessa. Muissa tämän reaktion ajoissa kuitenkin tämä aine voitiin puhdistaa flash-kromatografisesti Si02:lla käyttämällä peräkkäin 1) CHCl3:a ja 2) 10 % MeOH/CHCl3:a eluentteina.

30 *H NMR: 6 7,46 - 7,42 (m, 2 H), 7,36 - 7,16 (m, 3 H), 7,07 (d, J - 4,5 Hz, 1H), 6,44 (t, J = 2 Hz, 1 H), 4,94 (s, 2 H), 3,40 (d, J - 2 Hz, 2 H).

MS: m/z (suhteelliset prosentit) 227 (82), 212 (62), 209 (77), 85 (100). Tarkka massa laskettuna kaavalle 35 C14H13NS: 227,0769. Havaittu: 227,0754.

15 98462

Esimerkki 3 4,5,6,11-tetrahydrobentso [6,7] syklo-okta [ 1,2-b] tio-feeni-6,ll-imiini-12-karboksyylihappo-2,2,2-tri-kloorietyyliesteri 5 Liuokseen, jossa oli esimerkin 2 otsikon yhdistettä (540 mg, 2,37 mmol) ja 4-dimetyyliaminopyridiiniä (579 mg, 4,74 mmol) CH2Cl2:ssa (50 ml) 0 °C:ssa, lisättiin 2,2,2-trikloorietyylikloroformaattia (0,49 ml, 3,56 mmol).

0 eC:ssa 0,25 tuntia sekoittamisen jälkeen HBr-kaasua kup-10 litettiin liuoksen läpi kyllästymisen saavuttamiseksi. Sekoitusta 0 °C:ssa jatkettiin 1 tunti ja huoneenlämpötilassa vielä 0,5 tuntia. Liuos poistettiin vakuumissa ja jäännös flash-kromatografoitiin silikageelillä käyttämällä CHCl3:a eluenttina. Kaikki tuotefraktiot yhdistettiin ja 15 konsentroitiin, jolloin jäi kullanruskeaa öljyä. Tämän aineen *H NMR -spektri osoitti sen sisältävän seoksen siilo! ttuneita haluttuja tuotteita ja reagoimatonta spirosyk-listä välituotetta suhteessa noin 3:1. Siten seos liuotettiin jälleen CH2Cl2:een (50 ml). Syntynyt liuos jäähdytet-20 tiin 0 eC:seen ja kyllästettiin HBr-kaasulla. 0 eC:ssa 0,5 tuntia sekoittamisen jälkeen ja huoneenlämpötilassa vielä 1 tunti, haihtuvat poistettiin vakuumissa. Jäännös flash-kromatografoitiin silikageelillä käyttämällä 10-%:ista EtOAc:tä (etyyliasetaatti)/heksaania eluenttina. Fraktiot, 25 jotka sisälsivät vain otsikon yhdistettä, yhdistettiin ja konsentroitiin vakuumissa, jolloin saatiin kirkasta öljyä (660 mg, 69 %).

*H NMR: 6 7,34 - 7,10 (m, 4 H), 6,95 - 6,91 (m, 1 H), 6,66 (d, J * 5 Hz, 1 H), 6,02 (s, 0,6 H), 5,99 (s, 0,4 30 H), 5,53 - 5,47 (m, 1 H), 4,78 (d, J = 12 Hz, 0,6 H), 7,73 (s, 0,8 H), 4,61 (d, J = 12 Hz, 0,6 H), 2,70 - 2,61 (m, 1 H), 2,49 - 2,37 (m, 1 H), 2,14-2,00 (m, 1 H), 1,98 - 1,84 (m, 1 H).

IR: (CHC13) 1712, 1414, 1121 cm'1.

- 98462 16 MS: m/z (suhteellisina prosentteina) 403 (65), 401 (65), 254 (22), 226 (100), 211 (65), 210 (94), 184 (48).

Tarkka massa laskettuna kaavalle C17H1435C13N02S: 400,9837. Havaittu: 400,9824.

5 Esimerkki 4 4,5,6,11-tetrahydrobentso [6,7] syklo-okta [ 1,2-b] tio- feeni-6,11-imiini

Liuokseen, jossa oli esimerkin 3 otsikon yhdistettä (600 mg, 1,49 mmol) jääetikassa (30 ml), lisättiin sinkki-10 jauhetta (974 mg, 14,9 mmol). Seosta sekoitettiin typessä öljyhauteessa 50 eC:ssa yön yli ja sitten jäähdytettiin huoneenlämpötilaan. Seos suodatettiin piimään läpi [Celite (tavaramerkki)] (pesten CH2Cl2:lla) ylimäärän sinkin poistamiseksi ja konsentroitiin, öljyinen jäännös laimennet-15 tiin CH2Cl2:lla ja pestiin kahdesti kylläisellä NaHC03-liuoksella ja kerran suolaliuoksella. Liuos kuivattiin (MgS04) ja konsentroitiin vakuumissa. Raaka tuote flash-kromatografoitiin silikageelillä käyttämällä 25-%:ista EtOAc/heksaania eluenttina. Fraktiot, jotka sisälsivät ha-20 luttua tuotetta, yhdistettiin ja konsentroitiin, jolloin saatiin öljyä (230 mg, 68 %).

*H NMR: δ 7,31 - 7,10 (m, 4 H), 6,88 (d, J = 5 Hz, 1 H), 6,69 (d, J - 5 Hz, 1 H), 5,28 (s, 1 H), 4,80 (t, J = 3 Hz, 1 H), 2,62 (dt, J = 15, 3 Hz, 1 H), 2,42 (leveä s, 1 ·. 25 H), 2,18 - 1,86 (m, 3 H).

13C NMR: 6 142,4, 142,3, 141,6, 136,4, 131,5, 127,6, 122,2, 122,5, 121,8, 120,3, 63,1, 60,9, 37,1, 25,6.

MS: m/z (suhteellinen prosentti) 227 (100), 212 (81).

30 Hydrobromidisuolan näyte valmistettiin lisäämällä HBr:ää eetterissä jääkylmään amiinin eetteriliuokseen, joka sisälsi pienen määrän MeOH:ta; sp. 268 - 274 (haj.). Analyysi laskettuna kaavalle C14H14BrNS: C, 54,55; H, 4,58; N, 4,54. Havaittu: C, 54,20; H, 4,39; N, 4,37.

98462 17 Tämän yhdisteen rakenne määritettiin yksiselitteisesti hydrobromidisuolan röntgensäde-kristallografisella analyysillä.

Esimerkki 5 5 5,5-dideutero-4,5-dihydro-6H-syklopenta[b] tiofen- 6-oni

Liuokseen, jossa oli 4,5-dihydro-6H-syklopenta[b]-tiofen-6-onia (10,4 g, 75 mmol) kuivassa bentseenissä (100 ml), lisättiin kiinteää K2C03:a. Seosta kuumennettiin pa-10 lautusjäähdytykseen typpi-ilmakehässä, CD30D:tä (10 g) li sättiin varovasti, ja kuumentamista palautusjäähdytysläm-pötilassa jatkettiin 1 tunti. Tislauspään reaktiopulloon asentamisen jälkeen metanoli poistettiin kuumentamalla, kunnes tisleen lämpötila saavutti 77 °C. Toinen annos 15 CD30D:tä lisättiin sitten, palautusjäähdytystiivistäjä laitettiin uudelleen paikalleen ja kuumentamista palautus-jäähdytyslämpötilassa jatkettiin 0,5 tuntia. Tämä prosessi toistettiin vielä kaksi kertaa. Viimeisen metanolin poistamisen jälkeen tumman purppura seos laimennettiin CH2-20 Cl2:lla, käsiteltiin aktivoidulla hiilellä ja suodatettiin piimään läpi [Celite (tavaramerkki)]. Syntynyt kirkas liuos konsentroitiin vakuumissa, jolloin jäi vaaleankeltaista kiinteää aine (10,5, g, 100 %).

*H NMR: δ 7,87 (d, J = 4,5 Hz, 1 H), 7,02 (d, J = 25 4,5 Hz, 1 H), 3,02 (s, 2 H).

Esimerkki 6 N-t-butyylidifenyylisilyyli-a-metyylibentseenime- tanamiini

Liuokseen, jossa oli raseemista a-metyylibentseeni-30 metanamiinia (24,2 g, 0,2 mol) ja trietyyliamiinia (42 ml, 0,30 mol) asetonitriilissä (400 ml) liekkikuivatussa pullossa typpi-ilmakehässä, lisättiin tipoittain t-butyyli-klooridifenyylisilaania (47 ml, 0,18 mol). Seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 3 tuntia ja sitten suodatet-35 tiin liukenemattoman valkoisen saostuman poistamiseksi 98462 18 (trietyyliamiinihydrokloridi). Liuottimen vakuumissa poistamisen jälkeen raakatuote liuotettiin eetteriin ja pestiin sarjassa H20:lla, kylläisellä NaHC03-liuoksella ja suolaliuoksella. Liuos kuivattiin (Na2S04/K2C03) ja konsen-5 troitiin, jolloin jäi kirkas öljy, joka tislattiin korkeassa vakuumissa. Pääfraktio sisälsi puhdasta otsikon yhdistettä (30,5 g, 47 %) tislattuna 160 - 165 °C:ssa noin 0,4 mmHg:ssä.

*H NMR: δ 7,80 (m, 2 H), 7,60 (m, 2 H), 7,50 - 7,16 10 (m, 10 H), 4,01 (m, 1 H), 1,44 (leveä s, 1 H), 1,39 (d, J - 6,5 Hz, 3 H), 1,09 (s, 9 H).

Esimerkki 7 6 - [ 2 - (1 - aminoe tyy 1 i) f enyy 1 i]-4H-sykiopenta[b]tio- feeni 15 Liuos, jossa oli esimerkin 8 yhdistettä (7,3 g, 20,3 mmol) ja Ν,Ν,Ν’Ν’-tetrametyylietyleenidiamiinia (1,65 ml, 10,9 mmol) kuivassa eetterissä (120 ml), jäähdytettiin 0 °C:seen ja käsiteltiin n-BuLi:n liuoksella (2,5 M) heksaanissa (17,5 ml, 43,8 mmol). Seosta sekoitet-20 tiin 0 eC:ssa 0,5 tuntia ja sitten huoneenlämpötilassa vielä 1,5 tuntia. Tässä vaiheessa seos jäähdytettiin -78 °C:seen. Esijäähdytetty esimerkin 5 yhdisteen liuos (2,63 g, 18,8 mmol) kuivassa THF:ssä lisättiin sitten suoraan siirtokanyylillä ja aikaansaatua seosta sekoitettiin 25 -78 - 60 eC:ssa 0,5 tuntia. Reaktio sammutettiin lisäämäl lä kylläistä NH4Cl-liuosta (40 ml) ja sen annetiin lämmetä huoneenlämpötilaan. Seos laimennettiin eetterillä ja H20:lla. Eetterikerros erotettiin ja konsentrotiin, jolloin jäi öljyä, joka liuotettiin seokseen, jossa oli 1 N HClrää 30 (200 ml) ja THF:ää (250 ml). Syntynyttä seosta sekoitet tiin huoneenlämpötilassa yön yli. Seuraten enimmän THF:n poistamista vakuumissa liuos uutettiin kahdesti eeterillä.

Uutteet laitettiin syrjään myöhemmän reagoimattoman esimerkin 5 yhdisteen talteenottamiseksi, kun vesikerros teh-35 tiin emäksiseksi lisäämällä kiinteää NaOH:ta ja uutettiin 98462 19 jälleen kahdesti eetterillä. Nämä uutteet yhdistettiin, kuivattiin (Na2S04) ja konsentroitiin vakuumissa, jolloin jäi punainen öljy. Tämä laitettiin korkeaan vakuumiin, lämmitettiin α-metyylibentseenimetanamiinin poistamiseksi 5 ja flash-kromatografoltiin silikageelillä. Kolonni eluoi-tiin aluksi CHCl3:lla ei-haluttujen ei-polaaristen epäpuhtauksien poistamiseksi. Sitä seuraava eluointi 2-%:isella ja sitten 5-%:isella MeOH/CHCl3:lla antoi, liuottimien poistamisen jälkeen, otsikon yhdistettä (1,19 g, 26 %).

10 *H NMR: (300 MHz) δ 7,68 - 7,58 (m, 1 H), 7,44 - 7,18 (m, 4 H), 7,10 (d, J = 4,5 Hz, 1 H), 6,37 (t, J = 2 Hz, 0,7 H), 4,46 (q, J = 6,5 Hz, 1 H), 3,39 (d, J = 2 Hz, 0,7 H), 4,46 (q, J = 6,5 Hz, 1 H), 3,39 (d, J « 2 Hz, 2 H), 1,65 (leveä s, 2 H), 1,33 (d, J = 6,5 Hz, 3 H).

15 13C NMR: (75 MHz) 6 147,8, 147,4, 146,0, 140,8, 133,9, 132,1, 129,0, 128,6, 126,8, 125,6, 122,5, 46,9, 35,8, 25,6.

MS: m/z (suhtellinen prosentti) 242 (37), 241 (61), 223 (48), 209 (100), 208 (94), 113 (52). Tarkka massa las-20 kettuna kaavalle C15H15NS: 241,0926. Havaittu: 241,0927. Esimerkki 8 ll-metyyli-4,5,6,ll-tetrahydrobentso[6,7]syklo-ok-ta[l,2-b]tiofeeni-6,ll-imiini-12-karboksyylihappo- 2,2,2-trikloorietyyliesteri 25 Liuokseen, jossa oli esimerkin 7 yhdistettä (1,17 g, 4,38 mmol) ja 4-dimetyyliaminopyridiiniä (0,88 g, 7,20 mmol) CH2Cl2:ssa (75 ml) 0 °C:ssa, lisättiin 2,2,2-trikloorietyylikloroformaattia (0,83 ml, 6,06 mmol).

0 °C:ssa 1 tunnin sekoittamisen jälkeen HBr-kaasua kupli-30 tettiin liuoksen läpi kyllästymisen savuttamiseksi. Sekoi-: tusta 0 °C:ssa jatkettiin vielä 1,75 tuntia, missä pis teessä liuos poistettiin vakuumissa. Jäännös liuotettiin minimimäärään CH2Cl2:ta ja flash-kromatografoitiin silikageelillä käyttämällä 20-%:ista EtOAc/heksaania eluenttina.

35 Fraktiot, jotka sisälsivät vain haluttua tuotetta, yhdis- 98462 20 tettiin, konsentroitiin ja taas flash-kromatografoitiin silikageelillä käyttämällä 10-%:sta EtOAc/heksaania eluenttina. Fraktiot, jotka sisälsivät vain haluttua tuotetta, yhdistettiin ja konsentroitiin, jolloin saatiin 5 puhdasta otsikon yhdistettä (1,23 g, 61 %) kirkkaana öljynä. Epäpuhtaat fraktiot yhdistettiin, konsentroitiin ja laitettiin kolmanteen kolonniin. Tämä eluoitiin 5-%:isella EtOAc/heksaanilla, jolloin saatiin lisämäärä puhdasta kar-bamaattia (0,35 g, 18 %).

10 *H NMR: δ 7,36 - 7,24 (m, 3 H), 7,14 - 7,04 (m, 1 H), 6,94 (d, J = 5 Hz, 0,6 H), 6,90 (d, J = 5 Hz, 0,4 H), 6,68 - 6,60 (m, 1 H), 5,56 (leveä s, 0,6 H), 5,52 (leveä s, 0,4 H), 4,84 (d, J = 12 Hz, 0,4 H), 4,75 (d, J = 12 Hz, 0,6 H), 4,67 (d, J = 12 Hz, 0,6 H), 4,63 (d, J = 12 Hz, 15 0,4 H), 2,70 - 2,46 (m, 2 H), 2,36 (s, 1,2 H), 2,35 (s, 1,8 H), 2,10 - 1,75 (m, 2 H).

IR: (CHC13) 1720, 1400, 1350, 1295, 1135 cm-1.

MS: m/z (suhteellinen prosentti) 417 (10), 415 (12), 240 (41), 223 (25), 224 (100), 198 (44), 131 (38), 20 97 (57), 95 (49). Tarkka massa laskettuna kaavalle C18H1635- C13N02S: 414,9967. Havaittu: 414,9815.

Esimerkki 9 ll-metyyli-4,5,6,ll-tetrahydrobentso[6,7]syklo-ok-ta[l,2-b]tiofeeni-6,11-imiini ! 25 Liuokseen, jossa oli esimerkin 8 yhdistettä (659 mg, 1,58 mmol) jääetikassa (25 ml), lisättiin sinkkijauhetta (994 mg, 15,2 mmol). Seosta sekoitettiin typpi-ilma-kehässä öljyhauteessa 55 °C:ssa yön yli ja sitten jäähdytettiin huoneenlämpötilaan. Seos suodatettiin piimään läpi 30 [Celite (tavaramerkki)] (pestiin CH2Cl2:lla) sinkin yli määrän poistamiseksi ja konsentroitiin. Öljyinen jäännös laimennettiin CH2Cl2:lla ja pestiin kahdesti kylläisellä NaHC03-liuoksella ja kerran suolaliuoksella. Liuos kuivattiin (MgS04) ja konsentroitiin vakuumissa. Raakatuote 35 flash-kromatografoitiin silikageelillä käyttämällä - 98462 21 25-%:ista EtOAc/heksaania eluenttina. Fraktiot, jotka sisälsivät otsikon yhdistettä, yhdistettiin ja konsentroitiin, jolloin saatiin vaaleankeltaista öljyä (276 mg, 72 %).

5 *H NMR: 6 7,27 (m, 3 H), 7,07 - 7,04 (m, 1 H), 6,88 (d, J - 5 Hz, 1 H), 6,67 (d, J - 5 Hz, 1 H), 4,80 (t, J = 3 Hz, 1 H), 2,64 (dt, J = 15, 3 Hz, 1 H), 2,35 (leveä s, 1 H), 2,18 - 1,84 (m, 3 H), 1,97 (s, 3 H).

13C NMR: 6 148,1, 145,1, 142,8, 137,6, 131,7, 127,8, 10 127,0, 121,7, 121,2, 119,5, 65,2, 62,6, 36,8, 26,7, 26,0.

Hydrobromidisuolanäyte valmistettiin lisäämällä HBr:n liuosta eetterissä jääkylmään amiinin eetteriliuok-seen. Saostuma uudelleenkiteytettiin eetterin ja metanolin seoksesta; sp. suurempi kuin 250 °C.

15 Analyysi laskettuna kaavalle C15H16BrNS: C. 55,90; H, 5,00; N, 4,35. Havaittu: C, 55,79; H, 5,02; N, 4,38.

Samalla tavalla valmistettiin hydrokloridisuolan näyte eetterissä 0 eC:ssa ja se uudelleenkiteytettiin eet-teri/metanolista; sp. 265 - 268 eC.

20 MS: m/z (suhteellinen prosentti) 241 (100), 226 (44).

Analyysi laskettuna kaavalle C15H16C1NS*%H20: C, 62,81; H, 5,97; N, 4,88. Havaittu: C, 62,35; H, 5,45; N, 4,59.

25 Esimerkki 10 ll-metyyli-4,5,6,ll-tetrahydrobentso[6,7]syklo-ok-ta[1,2-b]tiofeeni-6,11-imi ini-12-karboksyy1ihappo- 1,1-dimetyylietyyliesteri

Liuokseen, jossa oli esimerkin 9 yhdistettä (205 30 mg, 0,85 mmol) CH2Cl2:ssa (10 ml), lisättiin di-t-butyyli-dikarbonaatin liuos (250 mg, 1,15 mmol). Seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa kuusi päivää. Liuottimen haihdutuksen jälkeen jäännös flash-kromatografoltiin silikagee-lillä käyttämällä sarjassa 5-%:ista ja 10-%:ista EtOAc/ 35 heksaania eluenttina. Fraktiot, jotka sisälsivät otsikon - 98462 22 yhdistettä, yhdistettiin ja konsentroitiin, jolloin jäi öljyä (242 mg, 83 %).

XH NMR: 6 7,25 - 7,23 (m, 3 H), 7,06-7,03 (m, 1 H), 6,89 (d, J = 5 Hz, 1 H), 6,62 (d, J = 5 Hz, 1 H), 5,38 5 (leveä s, 0,7 H), 5,32 (leveä s, 0,3 H), 2,62 - 2,52 (m, 2 H), 2,30 (s, 0,9 H), 2,20 (s, 2,1 H), 1,84 - 1,68 (m, 2 H), 1,42 (s, 2,7 H), 1,33 (s, 6,3 H).

Esimerkki 11 2, ll-dimetyyli-4,5,6,11-tetrahydrobentso [6,7] syklo-10 okta[l,2-b]tiofeeni-6,ll-imiini-12-karboksyylihap- po-1,1-dimetyylietyyliesteri

Liuokseen, jossa oli esimerkin 10 yhdistettä (100 mg, 0,293 mmol) kuivassa THF:ssä (5 ml) -78 °C:ssa, lisättiin n-BuLi:n liuos (2,5 M) heksaanissa (0,14 ml, 0,35 15 mmol). Liuosta sekoitettiin -78 °C:ssa 0,5 tuntia. Lisämäärä n-BuLi:ä heksaanissa (0,14 ml, 0,35 mmol) lisättiin ja sekoitusta -78 °C:ssa jatkettiin vielä 1 tunti. Sitten liuosta käsiteltiin dimetyylisulfaatilla (99 μΐ, 1,05 mmol). -78 °C:ssa 0,5 tuntia sekoittamisen jälkeen liuosta 20 sekoitettiin huoneenlämpötilassa yön yli ja konsentroitiin vakuumissa. Jäännös siirrettiin EtOAcrhen ja liuos pestiin peräkkäin kylläisellä NH4Cl-liuoksella, H20:lla ja suolaliuoksella. Kuivaamisen (Na2S04) jälkeen liuos konsentroitiin, jolloin jäi viskoosia öljyä, joka flash-kromatogra-25 foitiin silikageelillä käyttämällä 5-%:ista EtOAc/heksaa-nia eluenttina. Fraktiot, jotka sisälsivät vain otsikon yhdistettä, yhdistettiin ja konsentroitiin vakuumissa, jolloin jäi öljyä (40 mg, 38 %).

*H NMR: δ 7,26 - 7,20 (m, 3 H), 7,08 - 7,02 (m, 1 30 H), 6,29 (s, 1 H), 5,36 (leveä s, 0,6 H), 5,30 (leveä s, 0,4 H), 2,60 - 2,40 (m, 2 H), 2,34 (s, 3 H), 2,26 (s, 1,2 H), 216 (s, 1,8 H), 1,86 - 1,56 (m, 2 H), 1,44 (s, 3,6 H), 1,36 (s, 5,4 H).

98462 23

Esimerkki 12 2,11-dimetyyli-4,5,6, ll-tetrahydrobentso[6,7]syklo-okta[l,2-b]tiofeeni-6,11-imiini

Liuos, jossa oli esimerkin 11 yhdistettä (40 mg, 5 0,113 mmol) CH2Cl2:ssa (5 ml) 0 °C:ssa, perfusoitiin HBr- kaasulla ja sitten sekoitettiin 0 eC:ssa 0,5 tuntia. HBr:n ja CH2Cl2:n poistamista vakuumissa seuraavaksi jäännös siirrettiin EtOAc:hen ja peräkkäin pestiin kahdesti kylläisellä NaHC03-liuoksella, kerran suolaliuoksella. Synty-10 nyt liuos kuivattiin (Na2S04) ja konsentroitiin, jolloin jäi raaka otsikon yhdiste tummanruskeana öljynä.

XH NMR: (osittainen) 6 7,28 - 7,20 (m, 3 H), 7,08 - 7,04 (m, 1 H), 6,35 (s, 1 H), 4,88 (t, J = 3 Hz, 3 H), 2,34 (s, 3 H), 1,98 (s, 3 H).

15 Raakatuote flash-kromatografoitiin silikageelillä käyttämällä EtOAcztä eluenttina. Fraktiot, jotka sisälsivät vain haluttua tuotetta, yhdistettiin ja konsentroitiin, jolloin jäi ruskeaa öljyä. Tämä siirrettiin MeOHzhon ja liuosta käsiteltiin HCl-kaasulla. Liuottimen ja ylimää-20 rän HCl:n vakuumissa poistamisen jälkeen hydrokloridisuola liuotettiin H20:hon. Liuos suodatettiin 22 pm Millipore-suodattimen läpi ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin hydrokloridisuolaa kalpean kullanruskeana kiiteänä aineena (20 mg, 61 %).

25 MS: m/z (suhteellinen prosentti) 255 (100). Tarkka massa laskettuna kaavalle C16H17NS: 255,1081. Havaittu: 255,1058.

Esimerkki 13 2-metyylitio-ll-metyyli-4,5,6,11-tetrahydrobentso-30 [6,7]syklo-okta[l,2-b]tiofeeni-6,ll-imiini-12-kar- boksyylihappo-1,1-dimetyylietyyliesteri Liuokseen, jossa oli esimerkin 10 mukaista yhdistettä (200 mg, 0,586 mmol) kuivassa THF:ssä (7 ml) -78 eC:ssa, lisättiin n-BuLi:n liuosta (2,5 M) heksaanissa 35 (0,56 1, 1,40 mmol). Liuosta sekoitettiin -78 °C:ssa yksi 98462 24 tunti ja sitten käsiteltiin vasta tislatulla metyylidisul-fidilla (125 μΐ, 1,39 nunol). -78 °C:ssa 0,5 tunnin sekoituksen jälkeen liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa yön yli ja sammutettiin kylläisellä NH4Cl-liuoksella. Seos 5 laimennettiin EtOAc:llä ja orgaaninen kerros pestiin peräkkäin Η,ΟζΙΙβ ja suolaliuoksella. Kuivaamisen jälkeen (MgS04) liuos konsentroitiin, jolloin jäi viskoosi öly, joka flash-kromatografoitiin silikageelillä käyttämällä 5-%:ista EtOAc/heksaania eluenttina. Fraktiot, jokta si-10 sälsivät vain haluttua tuotetta, yhdistettiin ja konsentroitiin vakuumissa, jolloin jäi öljyä (134 mg, 59 %).

1H NMR: (osittainen) 6 7,30 - 7,20 (m, 3 H), 7,08 - 7,02 (m, 1 H), 6,66 - 6,60 (m, 1 H), 5,37 (leveä s, 0,7 H), 5,31 (leveä s, 0,3 H).

15 Esimerkki 14 2-metyylitio-ll-metyyli-4,5,6,11-tetrahydrobentso-[6,7]syklo-okta[l,2-b]tiofeeni-6,11-imiini Liuos, jossa oli esimerkin 13 yhdistettä (134 mg, 0,346 mmol) CH2Cl2:ssa (10 ml) 0 eC:ssa, perfusoitiin HBr-20 kaasulla ja sitten sekoitettiin 0 °C:ssa 2 tuntia. HBr:n ja CH2Cl2:n vakuumissa poistamisen jälkeen jäännös siirrettiin Et0Ac:hen ja pestiin peräkkäin kahdesti kyläisellä NaHC03-liuoksella, kerran H20:lla ja kerran suolaliuoksella. Syntynyt liuos kuivattiin (MgS04) ja konsentroitiin, 25 jolloin jäi raakaa otsikon yhdistettä ruskeana öljynä. Se flash-kromatografoitiin silikageelillä käyttäen EtOAc:tä eluenttina. Fraktiot, jotka sisälsivät vain haluttua tuotetta, yhdistettiin ja konsentroitiin, jolloin jäi kalpean kullanruskeaa öljyä (23 mg, 23 %).

30 *H NMR: δ 7,28 - 7,20 (m, 3 H), 7,09 - 7,03 (m, 1 H), 6,67 (s, 1 H), 4,82 (t, J = 3 Hz, 1 H), 2,65 (leveä s, 1 H), 2,56 (dt, J = 15, 3 Hz, 1 H), 2,42 (s, 3 H), 2,12 - 2,04 (m, 2 H), 1,94 (s, 3 H), 1,90 - 1,79 (m, 1 H).

Vapaa otsikon yhdiste siirrettiin MeOH:hon ja sitä 35 käsiteltiin HCl:n metanoliliuoksella. Liuottimen ja yli- 98462 25 määrän HCl:n vakuumissa postamisen jälkeen jäännös atseo-tropoitiin kahdesti eetterin kanssa, jollon jäi valkoista sakkaa. Tämä liuotettiin H20:hon. Liuos suodatettiin 22 pm:n Millipore-suodattimen läpi ja jäädytyskuivattiin, 5 jolloin saatiin hydroklorldisuolaa valkoisena sakkana (18 mg).

MS: m/z (suhteellinen prosentti) 287 (100). Tarkka massa laskettuna kaavalle C16H17NS2: 287,0802. Havaittu: 287,0763.

10 Esimerkki 15 2-bromi-ll-metyyli-4,5,6,ll-tetrahydrobentso[6,7]-syklo-okta [ 1,2-b] tiof eeni-6, ll-imiini-12-karboksyy-lihappo-1,1-dimetyylietyyliesteri ja 2-bromi-ll-metyyli-4,5,6, ll-tetrahydrobentso[6,7] syklo-okta-15 [1,2-b]tiofeeni-6,11-imiini

Liuokseen, jossa oli esimerkin 10 yhdistettä (146 mg, 0,428 mmol) CH2Cl2:ssa (4 ml) ja AScOH:ssa (4,4 ml) 0 eC:ssa, lisättiin bromia (22 pl, 0,427 mmol). Seosta sekoitettiin 0 °C:ssa 2 tuntia ja sitten huoneenlämpötilassa 20 yön yli. Liuottimen poistamista vakuumissa seuraavaksi jäännös siirrettiin EtOAc:hen ja pestiin peräkkäin kahdesti kylläisellä NaHC03-liuoksella, kerran H20:lla ja kerran suolaliuksella. Liuos kuivattiin (Na2S04) ja konsentroitiin, jolloin jäi ruskeaa öljyä. Tämä flash-kromatografoi-25 tiin silikageelillä käyttämällä Et0Ac:tä eluenttina. Ensin eluoitui karbamaatti, öljynä (34 mg, 19 %) liuottimen poistamisen jälkeen.

XH NMR: (osittainen) 6 7,30 - 7,20 (m, 3 H), 7,06 - 7,00 (m, 1 H), 6,59 (s, 1 H), 5,36 (leveä s, 0,6 H), 5,30 30 (leveä s, 0,4 H), 2,23 (s, 1,2 H), 2,14 (s, 1,8 H), 1,44 (s, 3,6 H), 1,37 (s, 5,4 H).

Polaarisempi amiini (myös öljynä) eluoitiin seuraavaksi .

XH NMR: 6 7,33 - 7,24 (m, 3 H), 7,13 - 7,07 (m, 1 35 H), 6,68 (s, 1 H), 4,84 (t, J = 3 Hz, 1 H), 2,61 (dt, J - - 98462 26 15, 3 Hz, 1 H), 2,49 (leveä s, 1 H), 2,18 - 2,08 (m, 2 H), 1,96 (s, 3 H), 1,94 - 1,84 (m, 1 H).

Vapaa amiini siirrettiin MeOH:hon ja sitä käsiteltiin HCl:n metanoliliuoksella. Liuottimen ja ylimäärän 5 poistamisen vakuumissa jälkeen jäännös atseotropoitiin kolme kertaa eetterillä, jolloin jäi valkoinen sakka. Tämä liuotettiin H20:hon (5 ml). Liuos suodatettiin 22 pm Milli-pore-suodattimen läpi ja jäädytyskuivattiin, jolloin saatiin hydrokloridisuolaa valkoisena sakkana (29 mg, 19 %).

10 MS: m/z (suhteellinen prosentti) 321 (100), 2,40 (97). Tarkka massa laskettuna kaavalle C15H1481BrNS: 321,0010. Havaittu: 321,0050.

Esimerkki 16 2-kloor i -11-me tyyl i - 4,5,6,11 - tetrahydrobent so [ 6,7 ]-15 syklo-okta[l,2-b]tiofeeni-6,11-imiini

Liuokseen, jossa oli esimerkin 15 karbamaattia (33 mg, 0,79 mmol) kuivassa DMF:ssä (1 ml), lisättiin vedetöntä CuCliää (23 mg, 0,237 mmol). Liuosta kuumenettiin varovasti palautusjäähdytyslämpötilassa yön yli. Jäähdytyksen 20 jälkeen liuos laimennettiin H20:lla ja uutettiin kolme kertaa EtOAc:llä. Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin kahdesti H20:lla ja kahdesti suolaliuoksella. Liuos kuivattiin Na2S04:llä ja konsentroitiin, jolloin saatiin ruskeaa öljyä. Tämä flash-kromatografoitiin silikageelillä käyttä-25 mällä etyyliasetaattia eluenttina. Fraktiot, jotka sisäl sivät vain haluttua tuotetta, yhdistettiin ja konsentroitiin vakuumissa, jolloin jäi otsikon yhdistettä kalpean kullanruskeana öljynä. Amiini siirrettiin Me0H:hon ja sitä käsiteltiin HCl:n metanoliliuoksella. Liuottimen ja HC1-30 ylimäärän vakuumissa poistamisen jälkeen jäännös atseotropoitiin kahdesti eetterin kanssa, jolloin jäi valkoinen sakka. Tämä liuotettiin H20:hon (5 ml). Liuos suodatettiin 22 pm Millipore-suodattimen läpi ja jäädytyskuivattiin, jolloin jäi hydrokloridisuolaa Valkosena sakkana (7 mg, 35 28 %).

98462 27 MS: m/z (suhteellinen prosentti) 275 (100), 240 (28). Tarkka massa lasksettuna kaavalle C15H1435C1NS: 275,0514. Havaittu: 275,0420.

Esimerkki 17 5 11-metyyli-4,5,6,ll-tetrahydrobentso[6,7]syklo-ok- ta[l,2-b]tiofeeni-6,ll-imiini-12-karboksyylihappo- 2,2,2-trikloorietyyliesteri N-bromisukkinimidin (210 mg, 1,17 mmol) suspensio CCl4:ssä (12 ml) saatettiin palautusjäähdytykseen. Atso-10 bisisobutyronitriiliä (10 mg) lisättiin sitten, mitä seurasi pian liuos, jossa oli esimerkin 8 yhdistettä (486 mg, 1,17 mmol) CCl4:ssä. Kuumentamista palautusjäähdytyslämpö-tilassa jatkettiin 0,25 tuntia. Seos jäähdytettiin ja suodatettiin piimään läpi [Celite (tavaramerkki)] pesten eet-15 terillä. Suodos konsentroitiin, jolloin jäi öljyä, joka sisälsi hieman sakkaa (sukkinimidiä). Eetteriä lisättiin ja seos suodatettiin taas sakan poistamiseksi. Liuottimen poistamisen vakuumissa jälkeen öljyinen jäännös (yhä sisältäen sakkaa) siirrettiin tolueeniin (55 ml) ja sitä 20 käsiteltiin 1,8-diatsobisyklo[5.4.0]undek-7-eenillä (DBU) (799 mg, 4,59 mmol). Syntyttä liuosta kuumennettiin sitten palautusjäähdytyslämpötilassa 0,5 tuntia. Tämän ajan aikana muodostui tummaa öljyä pullon reunustoille. Jäähdytyksen jälkeen tolueeniliuos dekantoitiin pullosta, pestiin 25 eetterillä. Pulloon jäljelle jäänyt jäännös liuotettiin H20:hon ja syntynyt liuos uutettiin eetterillä. Eetterifaasi pestiin suolaliuoksella, yhdistettiin tolueeniliuoksen kanssa ja konsentroitiin vakuumissa. Siiten raaka öljytuote flash-kromatografoitiin kahdella peräkäisellä sili-30 kageelikolonilla. Ensimmäinen kolonni käytti 14-%:ista EtOAc/heksaania eluenttina ja se palveli reagoimattoman DBU:n poistamiseksi seoksesta. Toinen kolonni ajettiin varovasti käyttämällä 5-%:ista EtOAc/heksaania eluenttina ja onnistuneesti erotettiin reaktion kaksi päätuotetta. Vä-35 hemmän polaarinen tuote (144 mg, 21 %) identifioitiin 11- 98462 28 metyyli-4, 5,6, ll-tetrahydrobentso[6,7]syklo-okta[l, 2-b] -tiofeeni-6,ll-imiini-12-karboksyylihappo-2,2,2-trikloo-rietyylikarbamaatiksi ja laitettiin syrjään. Polaarisempi komponentti (205 mg, 36 %) tunnistettiin otsikon yhdis-5 teeksi ja se siirrettiin seuraavaan vaiheeseen. Molemmat tuotteet olivat öljyjä.

ΧΗ NMR: δ 7,28 - 7,24 (m, 3 H), 7,14 - 7,10 (m, 1 H), 6,99 (d, J = 5 Hz, 0,6 H), 6,95 (d, J = 5 Hz, 0,4 H), 6,77 - 6,74 (m, 1 H), 6,31 - 6,22 (m, 2 H), 5,72 - 5,67 10 (m, 1 H), 4,76 - 4,59 (m, 2 H), 2,37 (s, 0,4 H), 2,36 (s, 0,6 H).

Esimerkki 18 ll-metyyli-4,5,6,ll-tetrahydrobentso[6,7]syklo-ok- ta[1,2-b]tiofeeni-6,11-imiini 15 Liuokseen, jossa oli esimerkin 17 yhdistettä (205 mg, 0,49 mmol) jääetikassaa (7 ml), lisättiin sinkkipulve-ria (700 mg, 6,1 mmol). Seosta sekoitettiin typpi-ilmakehässä öljyhauteessa 55 °C:ssa 7 tuntia ja sitten jäähdytettiin huoneenlämpötilaan. Seos suodatettiin piimään läpi 20 [Celite (tavaramerkki)] (pesten eetterillä) sinkin ylimäärän poistamiseksi ja konsentroitiin, öljyinen jäännös laimennettiin eetterillä ja pestiin kylläisellä NaHC03-liuok-sella. Liuos kuivattiin (Na2S04) ja konsentroitiin vakuu-missa. Raaka tuote flash-kromatografoitiin silikageelillä 25 käyttämällä EtOAc:tä eluenttina. Fraktiot, jotka sisälsivät otsikon yhdistettä, yhdistettiin ja konsentroitiin, jolloin saatiin vaaleanruskeaa öljyä (95 mg, 81 %).

*H NMR: δ 7,25 - 7,20 (m, 3 H), 7,13 - 7,08 (m, 1 H), 6,97 (d, J - 5 Hz, 1 H), 6,81 (d, J = 5 Hz, 1 H), 30 6,37 - 6,27 (m, 2 H), 5,02 (d, J = 5 Hz, 1 H), 2,29 (leveä s, 1 H), 2,01 (s, 3 H).

Hydrobromidisuola valmistettiin lisäämällä HBr-liuosta eetterissä amiinin eetteriliuokseen 0 eC:ssa ja uudelleenkiteytettiin MeOH/eetteristä; sp. 287 - 289 °C.

98462 29 MS: m/z (suhteellinen prosentti) 239 (100), 224 828), 212 (44), 197 (41). Tarkka massa laskettuna kaavalle C15H13NS: 239,0769. Havaittu: 239,0728.

Analyysi laskettuna kaavalle C15H14BrNS: C, 56,26; H, 5 4,41; N, 4,37. Havaittu: C, 55,91; H, 4,35; N, 4,38.

Esimerkki 19 11,12-dimetyyli-4,5,6,ll-tetrahydrobentso[6,7]syk- lo-okta[l,2-b]tiofeeni-6,11-imiini

Liuokseen, jossa oli esimerkin 9 yhdistettä (75 mg, 10 0,311 mmol) ja fumaarihappoa (36 mg, 0,31 mmol) CH3CN:ssä (2,5 ml), lisättiin 37-%:ista formaldehydiliuosta (120 μΐ) ja natriumsyaaniboorihydridiä (28 mg, 0,45 mmol). Seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 4 tuntia ja tehtiin sitten emäksiseksi 1 N NaOH-liuoksella. Liuos uutettiin kah-15 desti EtOAc:llä ja yhdistetyt uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (Na2S04) ja konsentroitiin, jolloin jäi viskoosia öljyä. Tämä flash-kromatografoitiin silikagee-lillä käyttämällä 25-%:ista EtOAc/heksaania eluenttina. Fraktiot, jotka sisälsivät vain otsikon yhdistettä, yh-20 distettiin ja konsentroitiin, jolloin jäi öljyä (46 mg, 51 %).

XH NMR: δ 7,24 - 7,16 (m, 3 H), 7,06 - 7,02 (m, 1 H), 6,88 (d, J - 5 Hz, 1 H), 6,63 (d, J = 5 Hz, 1 H), 4,55 (leveä s, 1 H), 2,47 (leveä d, J = 15 Hz, 1 H), 2,37 -25 2,25 (m, 1 H), 2,22 (s, 3 H), 1,88 (s, 3 H), 1,76 - 1,57 (m, 2 H).

Hydrokloridisuola valmistettiin isopropanoli/eet-terin seoksessa (37 mg); sp. suurempi kuin 240 eC.

MS: m/z (suhteellinen prosentti) 255 (100), 240 30 (88), 158 (82).

Esimerkki 20 N-1-butyy 1 idi f enyy 1 i silyyli- 4- f luori-α-metyy 1 ibent- seenimetanamiini

Liuokseen, jossa oli raseemista 4-fluori-a-metyy-35 libentseenimetanamiinia (2,95 g, 21,2 mmol) ja trietyyli- 98462 30 amiinia (4,3 ml, 30,9 mmol) asetonitriilissä (75 ml) liek-kikuivatussa pullossa typpi-ilmakehässä, lisättiin tipoit-tain t-butyyliklooridifenyylisilaania (5,5 ml, 21,1 mmol). Seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa yön yli ja sitten 5 suodatettiin liukenemattoman valkoisen saostuman poistamiseksi (trietyyliamiinihydrokloridia). Liuottimen poistamisen vakuumissa jälkeen raakatuote siirrettiin eetteriin ja pestiin sarjassa H20:lla, kylläisellä NaHC03-liuoksella ja suolaliuoksella. Liuos kuivattiin (Na2S04/K2C03) ja konsen-10 troitiin, jolloin jäi kirkasta öljyä, joka tislattiin korkeassa vakuumissa. Pääfraktio sisälsi puhdasta otsikon yhdistettä (3,8 g, 47 %) tislattuna 123 - 143 °C:ssa 0,15 mmHg:ssä.

*H NMR: 6 7,72 - 7,65 (m, 2 H), 7,50 - 7,44 (m, 2 15 H), 7,40 - 7,28 (m, 4 H), 1,33 (d, J = 6,5 Hz, 3 H), 1,30 (leveä s, 1 H), 1,04 (s, 9 H).

Esimerkki 21 6-[2-(l-aminoetyyli)-4-fluorifenyyli]-4H-syklopen- ta[b]tiofeeni 20 Liuos, jossa oli esimerkin 20 yhdistttä (3,8 g, 10,1 mmol) ja N,N,Ν',N'-tetrametyylietyleenidiamiinia (0,75 ml, 5,0 mmol) kuivassa eeterissä (70 ml), jäähdytettiin 0 °C:seen ja käsiteltiin n-BuLi:n liuoksella (2,5 M heksaanissa (8,0 ml, 20 mmol). Seosta sekoitettiin : 25 0 °C:ssa 0,25 tuntia ja sitten huoneenlämpötilassa vielä 3 tuntia. Tässä pisteessä seos jäähdytettiin -78 °C:seen. Sitten lisättiin liuos, jossa oli esimerkin 5 yhdistettä (1,4 g, 10,0 mmol) kuivassa THF:ssä (15 ml), tipoittain ja syntynyttä seosta sekoitettiin -78 °C - -60 °C:ssa yli 30 tunnin ajan. Reaktio sammutettiin lisäämällä kylläistä NH4Cl-liuosta ja seoksen annettiin lämmetä huoneenlämpö-tilaan. Seos laimennettiin eetterillä ja H20:lla. Eetteri-kerros erotettiin ja konsentroitiin, jolloin jäi öljyä, joka siirrettiin 1 N HCl:n (70 ml) ja THF:n (105 ml) seok-35 seen. Syntynyttä seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 98462 31 yön yli. Sitten seos laimennettiin H20:lla ja uutettiin kahdesti eetterillä. Uutteet laitettiin sivuun myöhemmän reagoimattoman esimerkin 5 yhdisteen talteenottamiseksi, kun taas vesikerros tehtiin emäksiseksi lisäämällä kiin-5 teää NaOH:ta ja uutettiin kahdesti eetterillä. Nämä uutteet yhdistettiin, kuivattiin (Na2S04) ja konsentroitiin vakuumissa, jolloin jäi tummaa öljyä. Tämä laitettiin korkeaan vakuumiin ja lämmitettiin 4-fluori-a-metyylibentsee-nimetanamiinin poistamiseksi. Raakatuote flash-kromatogra-10 foitiin Si02:lla käyttämällä peräkkäoin CHCl3:a ja 2-%:ista MeOH/CHCl3:a eluetteina. Fraktiot, jotka sisälsivät otsikon yhdistettä, yhdistettiin ja konsentroitiin, jolloin saatiin öljyä, 540 mg (21 %).

XH NMR: 6 7,59 (dd, J = 6, 9,5 Hz, 1 H), 7,21 (d, 15 J - 5 Hz, 1 H), 7,09 (d, J = 5 Hz, 1 H), 7,08 - 7,04 (m, 2 H), 6,33 (m, 0,25 H), 4,42 (q, J = 6,5 Hz, 1 H), 3,39 (s, 2 H), 1,60 (leveä s, 2 H), 1,30 (d, J = 6,5 Hz, 3 H).

Esimerkki 22 8- f luori-11 -metyyli - 4,5,6,11-tetrahydrobentso [6,7]-20 syklo-okta[1,2-b]tiofeeni-6,11-imiini

Liuokseen, jossa oli esimerkin 21 yhdistettä (540 mg, 2,08 mmol) ja 4-dimetyyliaminopyridiiniä (366 mg, 3,0 mmol) CH2Cl2:ssa (50 ml) 0 eC:ssa, lisättiin 2,2,2-trikloo-rietyylikloroformaattia (0,43 ml, 3,12 mmol). 0 ®C:ssa 1 25 tunnin sekoittamisen jälkeen HBr-kaasua kuplitettiin liuoksen läpi kyllästymisen saavuttamiseksi. Sekoitusta 0 °C:ssa jatkettiin vielä 0,5 tuntia, missä pisteessä liuotin poistettiin vakuumissa. Jäännös flash-kromatogra-foitiin silikageelillä käyttämällä CHCl3:a eluenttina.

30 Kaikki tuotefraktiot yhdistettiin ja konsentroitiin, jol loin jäi öljyä. Tämän aineen XH NMR-spektri osoitti sen sisältävän 8-fluori-ll-metyyli-4,5,6,11-tetrahydrobentso-[6, 7]syklo-okta[l,2-b]tiofeeni-6,11-imiini-l,2-karboksyy-li-2,2,2-trikloorietyyliesterin ja 6'-fluori-4,5,2',3'-35 tetrahydro-spiro[6H-syklopenta[b]tiofeeni-6,1'-[lH]isoin- 98462 32 doll]-2'-karboksyylihappo-2,2,2-trikloorietyyliesterin (reaktion pääkomponentit) seoksen (noin 1:1). Seos siirrettiin jälleen CH2Cl2:een (50 ml). Syntynyt liuos jäähdytettiin 0 eC:seen ja kyllästettiin HBr-kaasulla. Vielä 6 5 tuntia huoneenlämpötilassa sekoittamisen jälkeen haihtuvat poistettiin vakuumissa. *H NMR-spektri osoitti tässä vaiheessa, että vähän lisätoisiintumista 8-fluori-11-metyyli- 4,5,6, ll-tetrahydrobentso[6,7] syklo-okta[ 1,2-b] tiofeeni- 6,ll-imiini-12-karboksyyli-2,2,2-trikloorietyyliesteriksi 10 oli tapahtunut. Jäännös flash-kromatografoitiin silikagee-lillä käyttämllä CH3Cl:ää eluenttina. Reaktion pääkompo-nenttien erotus ei onnistunut, öljyinen seos (460 mg, 51 %) liuotettiin sitten jääetikkaan (50 ml) ja sitä käsiteltiin sinkkijauheella (653 mg, 10 mmol) 2,2,2-tri-15 kloorietyylioksikarbonyyliryhmän poistumiseen vaikuttami seksi. Seosta sekoitettiin typpi-ilmakehässä öljyhauteessa 60 °C:ssa yön yli ja sitten jäähdytettiin huoneenlämpötilaan. Sinkkiylimäärä poistettiin suodattamalla piimään läpi [Celite (tavaramerkki)] (pesten CH2Cl2:lla) ja liuot-20 timet haihdutettiin vakuumissa. öljyinen jäännös liuotet tiin CH2Cl2:een ja pestiin kylläisellä NaHC03-liuoksella ja suolaliuoksella. Liuos kuivattiin (MgS04) ja konsentroitiin vakuumissa. Raaka tuoteseos flash-kromatografoitiin sili-kageelillä käyttämällä EtOAc:tä eluenttina. Otsikon yhdis-25 teen ja 6'-fluori-4,5,2',3'-tetrahydro-spiro[6H-syklopen-ta[b]tiofeeni-6,1'-[1H]isoindolin] erottaminen saavutettiin. Fraktiot, jotka sisälsivät otsikon yhdistettä, yhdistettiin ja konsentroitiin, jolloin saatiin öljyä (54 mg, 10 %). Fraktiot, jotka sisälsivät edellä mainittua 30 isoindolia, antoivat myös öljyä (86 mg, 16 %).

XH NMR δ 7,01 - 6,90 (m, 3 H), 6,88 (d, J = 5 Hz, 1 H), 6,67 (d, J = 5 Hz, 1 H), 4,76 (t, J = 3 Hz, 1 H), 2,66 (dt, J = 15, 3 Hz, 1 H), 2,17 (leveä s, 1 H), 2,08 - 1,90 (m, 3 H), 1,94 (m, 3 H).

98462 33

Hydrokloridisuolanäyte valmistettiin lisäämällä HCl:n eetteriliuosta jääkylmään amiinin eetteriliuokseen. Saostuma uudelleenkiteytettiin eetterin ja 2-propanolin seoksesta, sp. suurempi kuin 250 "C.

5 MS: m/z (suhteellinen prosentti) 259 (100), 244 (30). Tarkka massa laskettuna kaavalle C15h14FNS: 259,0831. Havaittu: 259,0841.

Analyysi laskettu kaavalle C15H15C1FNS: C, 60,91; H, 5,11? N, 4,74. Havaittu: C, 60,68; H, 5,04; N, 4,71.

10 Esimerkki 23 N-1-butyy 1 idi f enyy 1 i s i lyy 1 i-a, 4-dime tyy 1 ibent seeni- metanamiini

Liuokseen, jossa oli raseemista a,4-dimetyylibent-seenimetanamiinia (4,00 g, 30,0 mmol) ja trietyyliamiinia 15 (6,1 ml, 43,8 mmol) asetonitriilissä (100 ml) liekkikuiva- tussa pullossa typpi-ilmakehässä, lisättiin tipoittain t-butyyliklooridifenyylisilaania (7,7 ml, 29,6 mmol). Seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa yön yli ja sitten suodatettiin liukenemattoman valkoisen saostuman poistami-20 seksi (trietyyliamiinihydrokloridi). Liuottimen poistamisen vakuumissa jälkeen raaka tuote siirrettiin eetteriin ja pestiin sarjassa H20:lla, kylläisellä NaHC03-liuoksella ja suolaliuoksella. Liuos kuivattiin (Na2S04/K2C03) ja konsentroitiin, jolloin jäi kirkasta öljyä, joka tislattiin 25 korkeassa vakuumissa. Pääfraktio, joka sisälsi otsikon yhdistettä (6,7 g, 60 %), tislattiin 134 - 165 °C:ssa 0,1 mmHg:ssä.

*H NMR: δ 7,75 - 7,72 (m, 2 H), 7,57 - 7,54 (m, 2 H), 7,41 - 7,22 (m, 6 H), 7,12 - 7,04 (m, 4 H), 3,98 -30 3,88 (m, 1 H), 2,35 (s, 3 H), 1,36 (leveä s, 1 H), 1,31 (d, J = 6,5 Hz, 3 H), 1,03 (s, 9 H).

Esimerkki 24 6- [ 2- (1-aminoetyyli) -4-metyylifenyyli] -4H-syklopen- ta[b]tiofeeni 35 Liuos, jossa oli esimerkin 23 yhdistttä (3,7 g, 9,9 mmol) ja N,N,N’ ,N'-tetrametyylietyleenidiamiinia (0,75 98462 34 ml, 5,0 mmol) kuivassa eetterissä (70 ml), jäähdytettiin 0 °C:seen ja käsiteltiin n-BuLi:n liuoksella (2,5 M) hek-saanissa (8,0 ml, 20 mmol). Seosta sekoitettiin 0 °C:ssa 0,25 tuntia ja sitten huoneenlämpötilassa vielä 3 tun-5 tia. Tässä pisteessä seos jäähdytettiin -78 °C:seen. Sitten lisättiin liuos, jossa oli 4,5-dihydro-6H-syklopenta-[b]tiofen-6-onia (1,40 g, 10,1 mmol) kuivassa THFrssä (15 ml), tipoittain ja syntynyttä seosta sekoitettiin -78 - -60 °C:ssa yli tunnin ajan. Reaktio sammutettiin li-10 säämällä kylläistä NH4Cl-liuosta ja seoksen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan. Seos laimennettiin eetterillä ja H20:lla. Eetterikerros erotettiin ja konsentroitiin, jolloin jäi öljyä, joka siirrettiin 1 N HCl:n (70 ml) ja THF:n (105 ml) seokseen. Syntynyttä seosta sekoitettiin 15 huoneenlämpötilassa yön yli. Sitten seos laimennettiin H20:lla ja uutettiin kahdesti eetterillä. Uutteet laitettiin sivuun myöhempää reagoimattoman 4,5-dihydro-6H-syklo-penta[b]tiofen-6-onin talteenottamiseksi, kun taas vesi-kerros tehtiin emäksiseksi lisäämällä kiinteää NaOH:ta ja 20 uutettiin kahdesti eetterillä. Nämä uutteet yhdistettiin, kuivattiin (Na2S04) ja konsentroitiin vakuumissa, jolloin jäi öljyä. Tämä laitettiin korkeaan vakuumiin ja lämmitettiin o,4-dimetyylibentseenimetanamiinin poistamiseksi. Flash-kromatografointia siikageelillä, käyttäen EtOAc:tä 25 eluenttina, seuraavaksi otsikon yhdiste eristettiin öljynä (180 mg, 7 %).

XH NMR: δ 7,49 (d, J = 8 Hz, 1 H), 7,22 - 7,18 (m, 2 H), 7,08 (d, J = 4,5 Hz, 1 H), 6,36 (t, J = 2 Hz, 1 H), 4,41 (q, J = 6,5 Hz, 1 H), 3,40 (d, J = 2 Hz, 2 H), 2,35 30 (s, 3 H), 1,33 (d, J = 6,5 Hz, 3 H).

Esimerkki 25 8, ll-dimetyyli-4,5,6, ll-tetrahydrobentso[6,7]syklo-okta[l,2-b]tiofeeni-6,ll-imiini-12-karboksyylihap-po-2,2,2-trikloorietyyliesteri 35 Liuokseen, jossa oli esimerkin 24 yhdistettä (180 mg, 0,705 mmol) ja 4-diemtyyliamipyridiiniä (122 mg, 35 98462 1,0 mmol) CH2Cl2:ssa (15 ml) 0 eC:ssa, lisättiin 2,2,2-tri-kloorietyylikloroformaattia (0,14 ml, 1,0 mmol). 0 °C:ssa 0,25 tuntia sekoittamisen jälkeen HBr-kaasua kuplitettiin liuoksen läpi kyllästymisen saavuttamiseksi. Sekoittamista 5 0 °C:ssa jatkettiin vielä 0,5 tuntia, jossa pisteessä liuotin poistettiin vakuumissa. Jäännös flash-kromatogra-foitiin silikageelillä käyttämällä 10-%:ista EtOAc/heksaa-nia eluenttina. Fraktiot, jotka sisälsivät otsikon yhdistettä, yhdistettiin ja konsentroitiin, jolloin jäi öljyä 10 (230 mg, 76 %). Tämän aineen *H NMR-spektri osoitti sen olevan hieman epäpuhdasta.

*H NMR: δ 7,09 - 6,86 (m, 4 H), 6,63 - 6,59 (m, 1 H), 5,48 (leveä s, 0,6 H), 5,45 (leveä s, 0,4 H), 4,82 (d, J = 12 Hz, 0,4 H), 4,74 (d, J « 12 Hz, 0,6 H), 4,66 (d, 15 J = 12 Hz, 0,6 H), 4,61 (d, J * 12 Hz, 0,4 H), 2,65 - 2,43 (m, 2 H), 2,37 (s, 3 H), 2,33 (s, 1,2 H), 2,32 (s, 1,8 H), 2,03 - 1,78 (m, 2 H).

Esimerkki 26 8, ll-dimetyyli-4,5,6, ll-tetrahydrobentso[6, 7]syklo-20 okta[l,2-b]tiofeeni-6,11-imiini

Liuokseen, jossa oli karbamaattia (230 mg, 0,534 mmol) jäetikassa (20 ml), lisättiin sinkkijauhetta (326 mg, 5,0 mmol). Seosta sekoitettiin typpi-ilmakehässä öljy-hauteessa 50 ®C:ssa yön yli ja sitten jäähdytettiin huo-25 neenlämpötilaan. Seos suodatettiin piimään läpi [Celite (tavaramerkki)] (pesten CH2C12:11a) sinkkiylimäärän poistamiseksi ja konsentroitiin. Öljyinen jäännös laimennettiin CH2Cl2:lla ja pestiin kylläisellä NaHC03-liuoksella. Liuos kuivattiin (MgSo4) ja konsentroitiin vakuumissa. Raaka-30 tuote flash-kromatografoitiin silikageelillä käyttämällä 20-%:ista EtOAc/heksaania eluenttina. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttuja tuotteita, yhdistettiin ja konsentroitiin, jolloin saatiin öljyä.

XH NMR: 6 7,07 - 7,01 (m, 2 H), 6,93 (d, J = 8 Hz, 35 1 H), 6,86 (d, J = 5 Hz, 1 H), 6,66 (d, J = 5 Hz, 1 H), i 98462 36 4,75 (t, J - 3 Hz, 1 H), 2,63 (dt, J = 15, 3 Hz, 1 H), 2,34 (s, 3 H), 2,10 - 1,85 (m, 4 H), 1,94 (s, 3 H).

Amiini muutettiin hydrokloridisuolakseen varovasti lisäämällä HCl:n eetteriliuosta amiinin eetteriliuokseen 5 0 °C:ssa. Saostuma uudelleenkiteytettiin MeOH/eetteristä; sp. suurempi kuin 250 "C. Saanto oli 30 mg (19 %).

MS: m/z (suhteellinen prosentti) 255 (100). Tarkka massa laskettuna kaavalle C16H17NS: 255,1082. Havaittu: 255,1090.

10 Analyysi laskettuna kaavalle C16H18C1NS: C, 65,85; H, 6,22; N, 4,80. Havaittu: C, 65,11; H, 6,11; N, 4,59. Esimerkki 27 11-metyyli-4,5,6,11-tetrahydrobentso[6,7]syklo-ok-ta[l,2-b]tiofeeni-6,11-imiinin resoluutio 15 Liuos, jossa oli esimerkin 9 yhdistettä (202 mg, 0,837 mmol) vedettömässä tetrahydrofuraanissa (10 ml), lisättiin tipoittain sekoitettuun liuokseen, jossa oli (R)-(-)-(1-naftyyli)etyyli-isosyanaattia (147 μΐ, 0,838 mmol) vedettömässä tetrahydrofuraanissa (10 ml). Syntynyt-20 tä seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa yön yli. Sitten liuotin poistettiin vakuumissa, jolloion jäi viskoosi ruskea öljy, joka kiteytyi asetonitriilistä. Valkoinen sakka (138 mg) kerättiin suodattamalla, kun taas suodos konsentroitiin, jolloin saatiin kullanruskeaa vaahtoa (233 mg).

25 HPLC-analyysillä (korkeapaineinen nestekromatografia) sakan osoitettiin olevan rikas yhden otsikon yhdisteen dia-stereomeerisen ureajohdannaisen suhteen (diastereomeeri A), kun taas vaahdon osoitettiin olevan rikas toisen dia-stereomeerin suhteen (diastereomeeri B). Sakka uudelleen-30 kiteytettiin kuumasta asetonitriilistä (8 ml) ja uudel-leenkiteytettyä ainetta trituroitiin asetonitriilin kanssa (8 ml) huoneenlämpötilassa 2 minuuttia. Puhdas diastereomeeri A (113 mg) kerättiin sitten suodattamalla. Suodok-set diastereomeeri A: n uudelleenkiteytys/trituroinnista 35 yhdistettiin edellä mainitun kullanruskean vaahdon kanssa 98462 37 ja konsentroitiin. Jäännöksille, noin 30 mg:n erät, suoritettiin preparatiivisen asteen HPLC käyttämällä Dynamax (tavaramerkki) 21,4 mm x 25 mm 300 A 12 pm C18-kolonnia ja 1:1 asetonitriili/vettä liikkuvana faasina ajaen 15 ml/mi-5 nuutissa. Aine, joka eluoitiin 43,3 ja 50 minuutin välillä, kerättiin, yhdistettiin ja konsentroitiin, jolloin jäi puhdas diastereomeeri B valkoisena vaahtona (74 mg). Seu-raavaksi eluoidut vähemmän puhtaat diastereomeeri B:n fraktiot taas preparatiivisesti HPLC-kromatografoitiin, 10 kuten edellä, jolloin saatiin, konsentroinnin jälkeen, lisämäärä diastereomeeriä B (20 mg).

Diastereomeeri A *H NMR (CDC13) 6 7,94 - 7,92 (m, 1 H), 7,72 - 7,68 (m, 1 H), 7,60 (d, J * 8,5 Hz, 1 H), 7,38 - 7,32 (m, 2 H), 7,23 - 7,16 (m, 4 H), 6,98 - 6,94 15 (m, 1 H), 8,81 (d, J = 8 Hz, 1 H), 6,64 (d, J = 5 Hz, 1 H), 6,43 (d, J = 5 Hz, 1 H), 5,72 - 5,63 (m, 1 H), 5,41 (s, 1 H), 4,86 (d, J = 7 Hz, 1 H), 2,51 - 2,43 (m, 1 H), 2,36 - 2,27 (m, 1 H), 2,19 (s, 3 H), 1,83 - 1,62 (m, 2 H), 1,51 (d, J = 7 Hz, 3 H).

20 Diastereomeeri B *H NMR (CDC13) δ 7,94 (d, J = 7,5

Hz, 1 H), 7,76 (d, J * 8,5 Hz, 1 H), 7,70 (d, J - 8,5 Hz, 1 H), 7,42 - 7,32 (m, 4 H), 7,20 - 7,12 (m, 3 H), 6,99 - 6,94 (m, 1 H), 6,92 (d, J « 5 Hz, 1 H), 6,63 (d, J = 5 Hz, 1 H), 5,74 - 5,65 (m, 1 H), 5,31 (s, 1 H), 4,67 (d, J = 7 25 Hz, 1 H), 2,50 - 2,43 (m, 1 H), 2,25 - 2,10 (m, 1 H), 2,14 (s, 3 H), 1,74 - 1,62 (m, 2 H), 1,43 (d, J = 7 Hz, 3 H).

Diastereomeeri A (113 mg, 0,26 mmol) liuotettiin p-dioksaanin (30 ml) ja veden (10 ml) seokseen. 1 N NaOH-liuoksen (2,32 ml, 2,32 mmol) lisäyksen jälkeen seosta 30 kuumennettiin palautusjäähdytyslämpötilassa 6 päivää ja sitten se jäähdytettiin. Liuotin poistettiin vakuumissa, jolloin jäi jäännös, joka flash-kromatografoitiin silika-geelillä käyttämällä etyyliasetaattia eluenttina. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta [(+)-ll-metyyli-35 4,5,6, ll-tetrahydrobentso[6,7] syklo-okta[ 1,2-b] tiofeeni- 98462 38 6.11- imiiniä] yhdistettiin ja konsentroitiin, jolloin saatiin öljyä (53 mg, 85 %), [a]D = +234,9°.

Diastereomeeri B (94 mg, 0,215 mmol) liuotettiin p-dioksaanin (23 ml) ja veden (8 ml) seokseen. 1 N NaOH-5 liuoksen (1,93 ml, 1,93 mmol) lisäyksen jälkeen seosta kuumennettiin palautusjäähdytyslämpötilassa 6 päivää ja sitten se jäähdytettiin. Liuotin poistettiin vakuumissa, jolloin jäi jäännös, joka flash-kromatografoitiin silika-geelillä käyttämällä etyyliasetaattia eluenttina. Frak-10 tiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta [(-)-ll-metyyli-4,5, 6, ll-tetrahydrobentso[6,7]syklo-okta[l,2-b]tiofeeni- 6.11- imiiniä] yhdistettiin ja konsentroitiin, jolloin saatiin öljyä (40 mg, 77 %), [o]D = +257,9°.

(+)- ja (-)-enantiomeerit kumpikin osoittivat 15 1H NMR-spektrit, jotka olivat identtisiä raseemisen materiaalin spektrille, ja ne muutettiin erikseen vastaaviksi hydrokloridisuoloikseen kuten esimerkissä 9 on kuvattu.

(+)-enantiomeerin havaittiin olevan arviolta kahdeksan kertaa niin aktiivinen kuin (-)-enantiomeeri, kun 20 testattiin 3H-TCP-sitoutumismäärityksessä.

Esimerkki 28 P2-membraanit rotan etuaivoista suspendoitiin 5 mM:seen tris(hydroksimetyyli)aminometaanihydrokloridi-puskuriin (pH 7,4). Koeyhdisteen liuos H20:ssa tai DMSO/ 25 H20:ssa lisättiin, mitä seurasi 3H-TCP. Seosta inkuboitiin 20 minuuttia 30 °C:ssa ja sitten injektoitiin lasikuitu-suodattimeen. Suodattimet pestiin kylmällä puskurilla ja laitettiin pulloihin seuraavaa nestetuikespektrometriaa varten. IC50 laskettiin suodattimiin jääneen tritiummerkin 30 määrästä. Esimerkkien 9, 22 ja 26 otsikoiden yhdisteet testattiin tässä 3H-TCP-sitoutumismäärityksessä ja niiden havaittiin osoittavan ei suurempaa kuin 40 nanomolaarista IC50-arvoa. Tässä määrityksessä esimerkkien 4, 14, 15 (vapaa amiini), 16 ja 18 otsikoiden yhdisteiden havaittiin 35 osoittavan ei suurempaa kun 2 mikromolaarista IC50-arvoa.

Claims (7)

98462 39

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava 5 R2-1 R1 jossa pilkkuviiva esittää tyydyttynyttä tai olefiinista sidosta, R1 ja R4 ovat kukin vety tai C^-Ce-alkyyli, ja R2 15 ja R3 ovat kukin vety, C^-C^-alkyyli, halogeeni, Cj-Cg-al-koksi tai C^-C^-alkyylitio, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi, tunnettu siitä, että yhdisteestä, jolla on kaava 20 r4 rv3 juj ii : 25 r5 jossa R2, R3 ja R4 ovat edellä määriteltyjä ja R5 on suoja-ryhmä, poistetaan suojaryhmä.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n-30 n e t t u siitä, että R4 on metyyli.

3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R2 on vety, metyyli, metyyli-tio tai kloori.

4. Minkä tahansa edeltävän patenttivaatimuksen mu-35 kainen menetelmä, tunnettu siitä, että R1 on vety ja R3 on vety tai metyyli. 98462 40

5. Minkä tahansa edeltävän patenttivaatimuksen mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R1, R2, R3 ja R4 ovat vetyjä.

6. Yhdiste, tunnettu siitä, että sillä on 5 kaava R4 10 r2~^3CTj 11 R5 jossa pilkkuviiva esittää tyydyttynyttä tai olefiinista 15 sidosta, R5 on suojaryhmä kuten C02CH2CC13, R3 on vety, fluori tai metyyli ja R4 on vety tai metyyli.

7. Patenttivaatimuksen 6 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että R4 on metyyli ja R3 on vety tai R4 on metyyli ja R3 on fluori tai R3 ja R4 ovat metyylejä. 98462 41