FI92491C - Menetelmä farmakologisesti aktiivisten nukleosidijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

5 92491

Menetelmå farmakologisesti aktiivisten nukleosidijohdannais-ten valmistamiseksi Tåmå keksintd koskee menetelmåå virusvastaisten yhdis-teiden ja tarkemmin nukleosidijohdannaisten estereiden ja amidien valmistamiseksi, jotka vaikuttavat ihmisen immuuni-puutosvirusta (HIV), retrovirusta, joka aiheuttaa AIDS-tau-10 din, vastaan.

AIDS on suhteellisen uusi tauti. Se loydettiin 1981 ja sen jålkeen taudista on diagnosoitu useita tuhansia tapauk-sia. On odotettavissa, ettå lukumåårå kasvaa ainakin usei-siin satoihin tuhansiin muutamina seuraavina vuosina. Tilan-15 ne on erityisen vakava useissa Keski-Afrikan maissa. AIDS on kuolemaan johtava tauti, ja noin 40 % kaikista diagnosoi-duista tapauksista on pååtynyt kuolemaan. Niistå, joiden on diagnosoitu sairastavan AIDSria kolme tai useampia vuosia sitten, arvioidaan noin 85 % kuolleen tåhån mennesså.

20 Kliinisiå oireita ovat painon lasku, krooninen ripuli, jatkuva kuume ja opportunistiset infektiot T-solujen mene-tyksen vuoksi, mikå jårkyttåå puolustusjårjestelmån koko-naistasapainoa. Potilas menettåå kykynså taistella muutoin merkityksettdmiå infektioita vastaan.

25 Infektion taltuttamiseksi on kokeiltu useita erilaisia menetelmiå. Kokeiltu ja menetelmiå ovat puolustusjårjestelmån stimulointi sekå (sekundaaristen) henkeå uhkaavien infekti-oiden tavanomainen hoito. Tåhån mennesså lupaavin menetelmå on ollut HIV-viruksen replikoitumiseen kohdistuva menetelmå.

30 On kokeiltu useita erilaisia yhdisteitå, jotka håiritsevåt replikoitumista, esim. fosfonoformaatti (Foscarnet), sura-miini, Evansin sininen, 3'-atsido-3'-deoksitymidiini (AZT) ja 2',3'-dideoksinukleosidit.

EP-patenttihakemuksessa nro 0 196 185A kuvataan esim.

35 farmaseuttisia koostumuksia, jotka sisåltåvåt AZT:ta, tun-nettua yhdistettå, joka on ollut erittåin lupaava AIDS:n ja AIDS:iin liittyvån kokonaisuuden hoidossa. Uskotaan, ettå » 92491 » AZT toimii siten, ettå se eståå kåånteistranskriptaasia, elinvoimaista entsyymiå retrovirusten elinkaaressa.

5 Lisatutkimuksia on suoritettu sellaisille vaihtoehtoi- sille kåånteistranskriptaasieståjille, joiden avulla voitai-siin vålttåå AZT:n rajoitukset ja haitat, esim. luuytimen håviåminen tai tarve antaa suhteellisen suuria mååriå låå-kettå usein, ja mainituista yhdisteistå tållaisia ovat ol-10 leet 2',3'-dideoksinukleosidit.

Nåiden yhdisteiden synteesi ja vaikutusta on kuvattu (Mitsuya ja Broder, Proc. Natl. Acad. Sci. 83., 1911 (1986)), ja osoitettiin, ettå sekå 2'- ettå 3'-asemien tåytyy olla substituoimattomia, kun taas 5'-hydroksiryhmån on oltava 15 låsnå, mahdol lis tåen todennåkoisesti muuttumisen vastaaviksi nukleotideiksi in vivo.

EP-patenttihakemuksessa nro 0 206 497A tuodaan esille sytosiini- tai puriiniemåsten 2',3'-dideoksiribofuranosidi-johdannaisia virusvastaisina yhdisteinå. Vaikka siinå viita-2 0 taan nåiden yhdisteiden estereihin mahdollisina metabolisina prekursoreina, siinå ei ole mainintaa siitå, ettå estereillå voisi olla minkåånlaisia edullisia ominaisuuksia verrattuna 5'-hydroksikantayhdisteisiin, eikå yhtåån esteriå nimetå erityisesti tai niiden synteesistå esitetå esimerkkiå. Siinå 25 ei viitata vastaaviin tymidiiniyhdisteisiin tai nukleosidi-johdannaisiin, joissa olisi N-asyloituja aminoryhmiå.

Olemme nyt todenneet, ettå esteroimållå tai eetteroi-mållå 4- tai 5'-happi ja/tai amidoimalla renkaan ulkopuolel-la tai renkaassa olevia typpiatomeja, joita on mukana purii-30 ni- tai pyrimidiinirenkaassa, voidaan saada merkittåviå etu-ja imeytymisesså, kokonaisvaikutuksessa ja vaikutuspaikassa. PCT-hakemuksessamme PCT/GB-88/00224 (vastaa FI-patenttihake-musta 894 397) kuvataan tiettyjå tåmåntyyppisiå estereitå ja amideja, joissa on asyyliryhmiå 5'-asemassa tai renkaan ul-35 kopuolella olevissa typisså. Esillå oleva keksinto kåsit- 92491 3 tåå tåmån pååperiaatteen osana låheisesti yhteenliittyvien yhdisteiden laajempaa aluetta.

5 Siten keksinnon mukaisesti saadaan kaavan (I) mukaisia yhdisteitå

Y'°~[p/X

z 15 jossa Z on vetyatomi tai atsidoryhmå, Y1 on vetyatomi tai fysiologisesti hyvåksyttåvå ryhmå, jonka kaava on R1 (0) nC0 (OCR2R3) m - 20 jossa n on 0 tai l, m on 0 tai l ja R1 on mahdollisesti substituoitu alkyyli- tai aryyliryhxnå tai, kun n on 0, vetyatomi; R2 ja R3 ovat itsenåisesti vetyatomeja tai alempia alkyyli-25 ryhmiå; ja X on ryhmå, joka on valittu seuraavista: 2. 3 4

O OY NY Y

30 i I X J j i O^N-^ I I i (A) (ΒΪ (C) 35 4 4 3 4

2 NY NY NYY

’X) ''Xoi rVi • (D) I (E) I (F) 92491 5 ο ου2 γ2^ U Τ - Ν -Ν «I X JJ (ο .ί X il <Η)

I I

O ΟΥ2 '^Χ'Ίΐ—i Νί#^"ϊ]—Ν 15 y‘n^AnJ <> I» 1 -i. 1 20 jossa ryhmåt Υ2, Υ3 ja Υ4 ovat kuten mååritettiin ryhmålle Y1, ja ne voivat olla samanlaisia tai erilaisia kuin Y1 tai kes-kenåån samanlaisia tai erilaisia, R4 on vetyatomi tai ryhmå 25 -NY3Y4, jossa Y3:lla ja Y4:llå on edellå annetut merkitykset, ja R5 on vetyatomi tai alempi alkyy li ryhmå, edellyttåen, ettå ainakin yksi ryhmistå Υ1, Υ2, Y3 ja Y4 on ryhmå R1 (0)nC0 (OCR2R3)m-, jossa m = 1, ja/tai niiden suoloja.

On toivottavaa, ettå jotkut X-ryhmistå, esim. ne, jois-30 sa Y2 on vetyatomi, ovat muiden X-ryhmien tautomeerejå ja esiintyvåt tasapainossa niiden kanssa.

Edellå mååriteltyjå kaavan (I) mukaisia yhdisteitå ja/tai niiden suoloja voidaan kåyttåå hoidettaessa tai en-naltaehkåiståesså retrovirusinfektioita, erityisesti neuro-35 trooppisia viruksia ja erikoisesti HIV-infektioita.

Il 92491' 5 R^ryhmå on edullisesti alkyyliryhmå, jossa on 1-20 hii-liatomia ja joka voi olla suora tai haaroittunut, tai se on 5 aryyliryhmå, jossa voi olla 6-20 hiiliatomia ja joka voi olla yksi- tai monirenkainen. Substituentteja, joita voi olla låsnå R'-alkyyliryhmisså, ovat aryyliryhmåt, joissa on edullisesti 6-10 hiiliatomia (kuten aralkyyliryhmisså), hyd-roksi- ja karboksiryhmåt. Aryyliryhmiå ovat heterosykliset 10 aryyliryhmåt, kuten pyridinyyli- ja tienyyliryhmåt. Substituentteja, joita voi olla låsnå aryyliryhmisså, ovat alkyy-liryhmåt, esim. sellaiset, joissa on 1-6 hiiliatomia, hyd-roksi- ja karboksiryhmåt. Esimerkkeinå tållaisista ryhmistå ovat metyyli-, etyyli-, propyyli-, t-butyyli-, pentyyli-, 15 stearyyli-, palmityyli-, karboksietyyli- ja bentsyyliryhmåt.

Alemmissa alkyyliryhmisså R2, R3 ja R5 ovat edullisesti 1-6 hiiliatomia. R2 edustaa kuitenkin edullisesti vetyatomia.

R3 on edullisesti vetyatomi tai edullisemmin metyyliryhmå, R5 on edullisesti vetyatomi tai metyyliryhmå.

20 Tulee huomata, ettå keksinnon mukaisissa yhdisteisså voi olla useampia kuin yksi seuraavista ryhmistå: Y1, Y2, Y3 ja Y4. Yhdisteisså, joiden kaava on (I), D, E, I ja J, on edullista, ettå m on ryhmåsså Y4 0 (nolla) . Y2-ryhmillå on edullisesti seuraava kaava: 25 R'.CO-, R'CO.0.CR2R3 tai R'.O.CO.CR2R3-.

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden suolat voivat olla happoadditiosuoloja, jotka on muodostettu orgaanisten tai 30 epåorgaanisten happojen, kuten suola- tai fosforihapon tai metaanisulfonihapon, etaanidisulfonihapon, 2-naftyylisul-fonihapon, pivaliinihapon ja pamoiinihapon kanssa. Voidaan kåyttåå my6s virusvastaisia vastaioneja, kuten fosfonofor-maattia tai suramiinia. Orgaanisia tai epåorgaanisia emås-35 suoloja voidaan muodostaa molekyylisså olevien happamien 6 924 9' ryhmien kanssa; sopivia vastaioneja ovat metalli-ionit, kuten natrium- ja kaliumionit, kahdenarvoiset ionit, kuten 5 kalsium- ja sinkki-ionit, ja orgaaniset ionit, kuten tetra-alkyyliammonium ja koliini, tai ionit, jotka on johdettu meglumiinista tai etyleenidiamiinista. Mainitut suolat voi-daan muodostaa reaktiolla, jossa kaavan (I) mukainen yhdiste reagoi sopivan hapon tai emåksen kanssa.

10 Farmaseuttisia koostumuksia voidaan formuloida tunne- tulla tavalla sekoittamalla yksi tai useampi tåsså edellå mååritelty kaavan (I) mukainen yhdiste apuaineiden ja/tai kantaja-aineiden kanssa.

Uskotaan, ettå kaavan (I) mukaiset yhdisteet eivåt ole 15 itse kåånteistranskriptaasin eståjiå, vaan ra muuttuvat in vivo 5-hydroksi-2',3'-dideoksinukleosideiksi. Joka tapauk-sessa substituoimalla kukin 0- ja N-atomi erikseen, saadaan yllåttåviå etuja imeytymisen ja pitkitetyn vaikutuksen suh-teen. Kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat lipofiilisempiå 20 kuin kantayhdisteet ja siten ne imeytyvåt maha-suolikanavas-ta nopeasti ja tehokkaasti; imeytymisnopeus voidaan optimoi-da valitsemalla tarkasti substituenttiryhmå, jolla saadaan haluttu lipofiilisyyden ja hydrofiilisyyden tasapaino. Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden lipofiilisen luonteen vuoksi 25 molekyylin on mahdollista tunkeutua solukalvoihin helpommin, ja se johtaa suurempiin solunsisåisiin konsentraatioihin, jolloin saadaan parempi annos-vaikutussuhde. Yhdisteiden tasainen hydrolysoituminen varmistaa pitkitetyn aktiivisen yhdisteen konsentraation solussa ja siten pidemmåt aikavålit 30 annosten vålillå ovat mahdollisia, jolloin voitetaan tunnet-tujen yhdisteiden, kuten AZT:n huomattava haitta.

Lopuksi, esillå olevan keksinnon mukaiset yhdisteet voivat låpåistå veri-aivoesteen ja siten niiden avulla on mahdollista hoitaa hermostollisia håirioitå, joiden on ha-35 vaittu liittyvån neurotrooppisten virusten, esim. retrovi-rusten, kuten HIV, ja lentivirusten låsnåoloon (Yarchoan et

II

92491 7 » al, The Lancet, 17. tammikuuta 1987, sivu 132) . Tåmå on mer-kittåvå etu verrattuna vastaaviin substituoimattomiin yhdis-5 teisiin tai muihin virusvastaisiin yhdisteisiin, eikå siihen ole viitattu koskaan aikaisemmin, ei esim. EP-A-0 196 I85:ssa tai EP-A-0 206 497:sså. Yrityksiå nåiden hermostol-listen håirioiden hoitamiseksi AZT:llå on tehty, mutta menestys on ollut rajallista.

10 Kaavan (I) mukaisia yhdisteitå voidaan valmistaa sinån- så tunnetulla tavalla siten, ettå yhdiste, jolla on kaava

XB

15 Y‘0—i /

Lo^/ (II)

20 Z

[jossa Y1 ja Z ovat kuten edellå mååritettiin ja XB on kuten edellå mååritettiin X:lle paitsi, ettå kukin ryhmistå Y1, Y2, 25 Y3 ja Y4 voi lisåksi olla suojaryhmå, edellyttåen, ettå aina-kin yksi ryhmistå Y1, Y2, Y3 ja Y4 on vetyatomi] saatetaan reagoimaan sellaisen reagenssin kanssa, joka liittåå edellå mååritetyn R1 (0)nC0. (OCR2R3) m-ryhmån, minkå jålkeen tarvitta-essa poistetaan nåin liitetyt mahdolliset suojaryhmåt ja/tai 30 ei-toivotut substituentit.

Tulisi huomata, ettå kun låhtdaineessa useampi kuin yksi ryhmistå Y1, Y2, Y3 ja Y4, on vety, voi ilmetå moninker-taisia reaktioita.

Kun halutaan varmistaa, ettå asylointi tai alkylointi 35 suoritetaan samalla, kun yksi tai useampi ryhmistå 8 92491 Υ1, Υ2, Υ3 ja Υ4 såilyy vetyatomina, saattaa olla toivotta-vaa suojata viimeksi mainitut ryhmåt ensin, jolloin muo-dostuu kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa yksi tai useampi ryhmistå Υ1, Y2, Y3 ja Y4 on suojaryhmå, ja nåmå poistetaan 5 halutun asyyli- tai eetteriryhmån liittåmisen jålkeen. Tållaisia suojaryhmiå voivat itse asiassa olla N- tai O-suojaryhmåt, kuten R1COO-ryhmåt, jotka voidaan poistaa valikoiden sellaisen ryhmån (ryhmien) låsnå ollessa, jotka on tarkoitus jåttåå jåljelle. Siten esimerkiksi N-bent-10 syylioksikarbonyyliå voidaan kåyttåfi suojattaessa renkaan ulkopuolella olevaa aminoryhmåå, ja mikåli jåljelle jåå-våksi tarkoitettu ryhmå ei ole sellainen, joka voidaan poistaa pelkiståmållå, esimerkiksi suoraketjuinen alkoksi-karbonyyliryhmå, N-bentsyylioksikarbonyyliryhmå voidaan 15 helposti poistaa selektiivisesti kåyttåen vetyå ja jalome-tallikatalyyttiå, kuten palladiumia. Voidaan kåyttåå my6s trisubstituoituja silyyliryhmiå suojaryhminå, erityisesti 5'-happiatomille, ja tållaisia ovat trialkyylisilyyli-, esim. trimetyylisilyyli-, dimetyyli-t-butyylisilyyli- ja 20 teksyylidimetyylisilyyliryhmåt.

Yleisesti ottaen, kun useampi kuin yksi seuraavista ryhmistå Υ1, Y2, Y3 ja Y4 on vety ja valmistetaan yhdistei-den seosta, yksittåiset komponentit voidaan helposti erot-taa, esimerkiksi kromatografioimalla.

25 Kun suoritetaan 5'-O-monoalkylointi (se on Y1-ryh- mån, jossa m on 1, liittåminen), on erityisen tehokasta muodostaa nukleosidin kaksoisioni (esim. saattamalla se reagoimaan natriumhydridin kanssa) ja saattamalla tåmå reagoimaan yhden ekvivalentin kanssa alkyloivaa ainetta. 30 On edelleen tietysti mahdollista kåyttåå nukleosidien suo- jattuja muotoja, esimerkiksi asyloimalla nukleofiilinen typpiatomi ennen suolan muodostusta natriumhydridin kanssa.

Sopivia asyloivia aineita, joita voidaan kåyttåå 35 reaktiossa, ovat sellaiset, joiden kaava on Ac-L, jossa L

II

9 92491 on låhtevå ryhmå. Kun asyyliryhmå Ac- johdetaan karbok-syylihaposta, joka on kaavan R^CO- mukainen, niin sopivia asyloivia aineita ovat happohalogenidit ja happoanhydri-dit, edullisesti emåksen låsnå ollessa; kun asyyliryhmå 5 johdetaan hiilihaposta, joka on kaavan R^O.CO- mukainen, asyloivia aineita ovat halogeeniformaattiesterit ja reak-tiiviset hiilihappodiesterit. Tållaisissa reagensseissa halogeeni voi esimerkiksi olla kloori tai bromi. Emås, jota kåytetåån reaktiossa happohalogenidin tai -anhydridin 10 kanssa, voi olla esimerkiksi heterosyklinen emås, kuten pyridiini tai 4-dimetyyliaminopyridiini. Viimeksi mainit-tu aine lisåå reaktionopeutta ja sitå voidaan kåyttåå edullisesti pyridiinin kanssa. Reaktio suoritetaan taval-lisesti inertin liuottimen låsnå ollessa, esim. substi-15 tuoidun amidiliuottimen, kuten dimetyyliformamidin, dime-tyyliasetamidin tai halogenoidun hiilivedyn, kuten dikloo-rimetaanin låsnå ollessa.

Yleisesti ottaen, olemme todenneet, ettå kåytet-tåessa happoanhydrideja asyloivina aineina R1CO-ryhmån 20 liittåmiseksi, 5'-aseman O-asylointi tapahtuu nopeammin kuin N-asylointi, kun taas kåytettåesså happohalogenideja, N-asylointi tai jopa N-diasylointi on vallitseva. N-asyy-liryhmat R1C0- voidaan kuitenkin poistaa selektiivisesti esimerkiksi reaktiolla fenolin, kuten p-metyylifenolin 25 kanssa. Kun halutaan saada aikaan monisubstituutio, vah-vempi emås, kuten natriumhydridi, voi olla edullinen.

Sopivia asyylioksialkyloivia aineita, joita voidaan kayttåa keksinndsså, ovat yleisesti kaavan R^O. O. CR2R3L tai R1O.CO.O.CR2R3L mukaisia, ja kaavoissa L on låhteva ryhmå. 30 Siten ryhma L voi olla esimerkiksi halogeeniatomi, kuten . kloori- tai bromiatomi tai hiilivety-sulfonyylioksiryhmå, kuten tosyylioksi- tai mesyylioksiryhmå.

Alkylointireaktio suoritetaan tavallisesti emåksen låsnå ollessa, tarkoituksenmukaisesti epåorgaanisessa kar-35 bonaatissa, kuten kaliumkarbonaatissa, tai alkalimetalli- 9249" 10 hydridisså, kuten natriumhydridisså. Emåkset, joita kåytettiin asylointiin, voivat myos olla kåyttokelpoisia.

5 Kaavan (II) mukaiset låhtdaineyhdisteet, joissa Y1, Y2, Y3 ja Y4 ovat kaikki vetyatomeja, ovat kirjallisuudessa hyvin ku-vattuja - katso esim. Lin et al, J. Med. Chem. 30., 440 (1987) . Låhtoyhdisteitå, joissa yksi tai useampi seuraavista Y1, Y2, Y3 ja Y4 on jokin muu kuin vety, voidaan valmistaa edellå kuva-10 tuilla esireaktioilla.

Farmaseuttiset koostumukset voidaan formuloida farmasian teknologiassa hyvin tunnetuilla tavoilla, ja ne voidaan antaa millå tahansa tarkoituksenmukaisella tavalla, esim. suun kaut-ta, peråsuoleen, emåttimeen, suonensisåisesti tai lihakseen. 15 Esimerkkeinå sopivista formulaatioista ovat tabletit ja kapse-lit, vesiformulaatiot, jotka annetaan suonensisåisenå injektiona, ja 61jypohjaiset formulaatiot, jotka annetaan injektiona lihakseen. Sopivat annostukset ovat vålillå 0,1-100 mg kiloa ruumiinpainoa kohden vuorokaudessa. Farmaseuttiset koostu-20 mukset voivat myos sisåltåå muita aktiivisia virusvastaisia aineita, esim. asykloviriå, fosfonoformaattia, suramiinia, Evansin sinistå, interferoneja tai AZT:tå.

Keksintoå valaistaan seuraavilla esimerkeillå (låhtoai-neet ovat joko tunnettuja aineita tai ne valmistetaan PCT-ha-25 kemuksemme PCT/GB88/00224 mukaan). Capsugel on tavaramerkki.

Esimerkki 1 3-asetoksimetyyli-2',3'-dideoksiuridiini (kaava (I)A Y2 = asetoksimetyyli, R5 = Y1 = H)

Seosta, jossa on 2',3'-dideoksiuridiinia (1 mmol) ja 30 kaliumkarbonaattia (0,8 mmol) kuivassa N,N-dimetyyliasetami-dissa (20 ml), sekoitetaan ympåristån låmpåtilassa kaksi tuntia, liuos, jossa on asetoksimetyylikloridia (0,7 mmol) kuivassa N,N-dimetyyliasetamidissa (5 ml), li- I! u 92491 såtSSn tipoittain sekoittaen, seosta sekoitetaan ympSris-tOn lSmpotilassa 36 tuntia, se suodatetaan, suodos haih-dutetaan ja tuote puhdistetaan tuikekromatografioimalla silikageelillS, kSyttSen etyyliasetaatti:petrolieetteriS.

5 Esimerkki 2 3,5'-O-bis(asetoksimetyyli)-2',3'-dideoksiuridiini (kaava (I)A, Y1 =Y2=asetoksimetyyli, R5 = H) ja , O4, 5'-O-bis(asetoksimetyyli-2',3'-dideoksiuridiini kaava (I)B, Y1=Y2*asetoksimetyyli, R5=H) 10 Seosta, jossa on 2', 3' -dideoksiuridiinia (1 nunol) ja natriumhydridiS (2 nunol) kuivassa DMFrssa (50 ml), sekoitetaan ympSristOn ISmpOtilassa kaksi tuntia, liuos, jossa on asetoksimetyylikloridia (2 nunol) kuivassa DMF:ssa (10 ml), lisåtåan tipoittain sekoittaen, seosta sekoite-15 taan ympåristdn lampdtilassa 24 tuntia, se suodatetaan, suodos haihdutetaan ja tuoteseos erotetaan tuikekromatograf ioimalla silikageelilia, kåyttåen etyyliasetaattiipet-rolieetteria.

Esimerkki 3 20 3-asetoksimetyyli-5'0-palmitoyyli-2', 31 -dideoksity- midiini kaava (I)A, Y2=asetoksimetyyli, Y1=palmitoyyli, R5=metyyli)

Seosta, jossa on 5O-palmitoyyli-2',3'-dideoksity-midiiniS (1 mmol) ja kaliumkarbonaattia (0,8 mmol) kuivas-25 sa N,N-dimetyyliasetamidissa (20 ml), sekoitetaan ympSris- t6n ISmpdtilassa kaksi tuntia, liuos, jossa on asetoksimetyylikloridia (0,7 mmol) kuivassa N,N-dimetyyliasetamidis-sa (5 ml), lisåtåån tipoittain sekoittaen, seosta sekoitetaan ymparistdn ISmpotilassa 24 tuntia, se suodatetaan, 30 suodos haihdutetaan ja tuote puhdistetaan tuikekromatogra- fioimalla silikageelillS, kSyttSen etyyliasetaatti:petro-- lieetteriS.

► 12 92491

Esimerkki 4 N4,5' -O-di (bentsyylioksikarbonyyli) -N4pivaloyyliok-simetyyli-2',3'-dideoksisytidiini (kaava (I)C, YX=Y4 bentsyylioksikarbonyyli, Y3 = pivaloyylioksimetyyli) ja 3-piva-5 loyylioksimetyyli-N4,5 ' -O-di (bentsyylioksikarbonyyli) 4-imino-3,4-dihydro-2',31-dideoksisytidiini (kaava (I) D, Y2=pivaloyylioksimetyyli, Yl= Y4 = bentsyylioksikarbonyyli) N4,5'-O-di(bentsyylioksikarbonyyli)-2',3'-dideok-sisytidiiniå (1 mmol) liuotetaan kuivaan DMF:in (20 ml), 10 liuos jååhdytetåån 0 °C:eseen, lisåtåån natriumhydridiå (1,1 mmol), seosta sekoitetaan 0 eC:ssa yksi tunti, kun vedyn kupliminen on pååttynyt, pivaloyylioksimetyyliklori-dia (1,1 mmol), joka on kuivassa DMFtssa (10 ml) lisåtåån tipoittain, syntynyttå seosta sekoitetaan ymparistdn lam-15 pdtilassa 36 tuntia, suurin osa liuottimesta poistetaan låmpotilassa, joka on alle 40 °C, kåyttåen Oljypumppua, vetta lisatåån jaånndkseen ja seos uutetaan etyyliasetaa-tilla. Kuivattu (MgS04) etyyliasetaattiliuos haihdutetaan ja jaannos tuikekromatografioidaan, kåyttåen petrolieette-20 ri:etyyliasetaattia, joka eluoi otsikon yhdisteen.

Esimerkki 5 N4-pivaloyylioksimetyyli-2 ' , 3 ' -dideoksisytidiini (kaava (I)C, YX=Y4=H, Y3=pivaloyylioksimetyyli) N4,5 ' -O-di (bentsyylioksikarbonyyli)-l^-pivaloyyliok-25 simetyyli-2',3'-dideoksisytidiiniå (0,2 mmol) lisåtåån suspensioon, jossa on 5 % palladioitua hiiltå (25 mg) eta-nolissa (25 ml), ilma poistetaan tyhjOsså ja seosta hydra-taan ilmanpaineessa, kunnes hydrautuminen on pååttynyt (noin kolme tuntia). Seos suodatetaan sitten, suodos 30 haihdutetaan alennetussa paineessa ja tuote puhdistetaan suodattamalla (kromatografia) neutraalilla silikageelillå, kåyttåen kloroformi:etanolia.

II

92491

Esimerkki 6 3-pivaloyylioksimetyyli-3 f-deoksitymidiini i) 3'-deoksitymidiinia (0,0449 g, 0,198 mmol) ja imidatsolia (0,0328 g, 0,482 mmol) liuotettiin DMF:aan 5 (0,5 ml). Teksyylidimetyylisilyylikloridia (0,047 ml, 0,238 mmol) lisattiin ja reaktioseosta sekoitettiin huo-neeniampbtilassa 19 tuntia. Liuotin poistettiin alenne-tussa paineessa ja kloroformia (15 ml) lisåttiin jaanniik-seen, se pestiin vedelia (5 ml x 2), kuivattiin (MgS04) ja 10 haihdutettiin. JaannOs kromatografioitiin piidioksidilla, kayttaen etyyliasetaatti-heksaania (7:3); saanto 0,0578 g (79 %) 5'-0-teksyylidimetyylisilyyli-3 *-deoksitymidiinia valkoisena jauheena. S.p. 109 - 110 °C (korjaamaton).

1H NMR (CDC13, 300 MHz) δ : 0,14 (s, 6H), 0,86 - 0,90 15 (m, 12H), 1,64 (m,lH), 1,91 (s, 3H), 1,93 - 2,02 (m,3H), 2,26 - 2,41 (m,lH), 3,66 - 3,96 (ABX,2H), 4,08 - 4,17 (m,1H), 6,05 (dd, 1H), 7,51 (d, 1H), 8,50 (b,lH).

13C NMR (CDCI3) 6 : -3,51, -3,43, 12,47, 18,31, 18,41, 20,12 20,32, 25,32, 25,38, 32,30, 33,91, 64,24, 80,76, 85,68, 20 110,18, 135,53, 150,14, 163,59.

ii ) 5' -O-teksyylidimetyylisilyyli-3 ' -deoksitymi diini (0,0254 g, 0,0689 mmol) ja kaliumkarbonaattia (0,0111 g, 0,0803 mmol) suspensoitiin DMF:in (1 ml) ja sekoitettiin 1,5 tuntia huoneeniampotilassa. Seos jaåhdy-25 tettiin 0 °C:seen ja lisåttiin kloorimetyylipivalaattia (0,013 ml, 0,0895 mmol). Seosta sekoitettiin huoneeniam-pbtilassa 18 tuntia ennen kuin liuotin haihdutettiin pois alennetussa paineessa. Jåannos kromatografioitiinn piidioksidilla, kayttaen etyyliasetaatti-heksaania (35:65); 30 saanto 0,031 g (93 %) 3-pivaloyylioksimetyyli-5'-0-tek-syylidimetyylisilyyli-31-deoksitymidiinia lasimaisena ai-neena.

XH NMR (CDCI3, 300 MHz) δ : 0,14(s, 6H), 0,87 - 0,90(m,12H), l,17(s, 9H), 1,56 - l,70(m,lH), l,94(d,3H), 35 1,95 - 2,02(m,3H), 2,30 - 2,44 (m,lH), 3,67 - 3,97 14 ' 92491 (ABX,2H), 4,11 - 4,17(m, IH), 5,90 - 5,98 (AB, 2H), 6,06 (dd,IH), 7,54 (d,IH).

13C NMR (CDC13) 6 : -3,49, -3,42, 13,09, 18,31, 20,12, 20,33, 25,34, 26,92, 32,37, 33,91, 38,71, 64,22, 5 64,90, 80,92, 86,35, 109,37, 134,50, 150,23, 162,58, 177,43.

iii) 3-pivaloyylioksimetyyli-5'-O-teksyylidimetyy-lisilyyli-3'-deoksitymidiini (0,029 g, 0,061 mmol) liuo-tettiin THF:in (0,5 ml) ja 0,25 M liuos tetrabutyyliammo-10 niumfluoridia THFrssa (0,5 ml) lisåttiin. Seosta sekoi-tettiin 30 minuuttia ennen kuin liuotin haihdirtettiin. JåSnnds liuotettiin kloroformiin (7 ml) ja pestiin vedelia (1 ml). Orgaaninen faasi kuivattiin (MgS04), haihdutettiin ja jaånnOs puhdistettiin valmistavalla TLCtlia. Levyt 15 eluoitiin dietyylieetterilia (3x) ja tuote uutettiin paa-joukosta kloroformi-etanolilla (9:1); saanto 0,0170 g (83 %) otsikon yhdistetta valkoisena kiinteana aineena. S.p. 64 - 66 °C (korjaamaton) XH NMR (CDCI3, 300 MHz) δ : 1,17 (s,9H), 1,93 20 (d,3H), 1,95 - 2,15( m,4H), 2,32 - 2,48 (m,lH), 3,72 - 4,03 (ABX,2H), 4,14 - 4,21 (m,lH), 5,90 - 5,97 (AB,2H), 6,10 (dd, IH), 7,60 (d, IH).

13C NMR (CDCI3) δ : 13,12, 24,91, 26,90, 32,22, 38,71, 63,42, 64,89, 81,10, 86,73, 109,62, 135,04, 150,26, .. 25 162,51, 177,47.

Eslmerkki 7 3,5' -O-di (pivaloyylioksimetyyli) -3' -deoksitymidiini 3'-deoksitymidiinia (0,050 g, 0,221 mmol) liuotettiin DMF:in (1 ml) ja jåahdytettiin 0 °C:eseen. Natrium-30 hydridia (0,0147 g, 80 % dljysså, 0,49 mmol) lisåttiin ja seosta sekoitettiin 0 eC:ssa yksi tunti ennen kuin kloo-rimetyylipivalaattia lisåttiin. Seosta sekoitettiin 0 °C:ssa yksi tunti ja sitten huoneeniampdtilassa 20 tun-tia. TLC osoitti osittaisen muuttumisen dialkyloiduksi 35 tuotteeksi, ja seos jåahdytettiin 0 °C:eseen ja lisåttiin 11 92491 natriumhydridiå (0,0027 g, 80 % Oljysså, 0,090 mmol). Seosta sekoitettiin 0 °C:ssa yksi tunti ennen kuin kloo-riraetyylipivalaattia (0,013 ml, 0,090 mmol) lisåttiin. Seosta sekoitettiin yksi tunti ennen kuin liuotin haihdu-5 tettiin alennetussa paineessa. Kloroformia (10 ml) lisåt-tiin jåånnokseen ja seos pestiin kyllåisellå natriumklori-dilla (5 ml x 2) ja vedellå (5 ml x 2). Kloroformifaasi kuivattiin (MgS04), haihdutettiin ja jåånnds ajettiin val-mistavalla TLC:llå. Levyt eluoitiin dietyylieetteri-pen-10 taani-metanolilla (50:50:0,1) (7x) ja tuote uutettiin påå-joukosta kloroformi-metanolilla; saanto 0,042 g (42 %) vårittGmånå dljynå.

*H NMR (CDC13, 300 MHz) δ : 1,19 (s, 9H), 1,24 (s, 9H), 1,95 - 2,10 (m,6H), 2,30 - 2,50 (m,lH), 3,74 -4,06 15 (ABX,2H), 4,20 - 4,30 (m,lH), 5,33 - 5,40 (AB,2H), 5,92- 5,99 (AB,2H), 6,10 - 6,16 (M,1H), 7,66 (d,lH).

13C NMR (CDC13) 6 : 13,04, 25,13, 26,91, 32,51, 38,70, 38,84, 64,87, 70,16, 79,42, 86,40, 88,49, 109,44, 134,83, 150,24, 162,53, 177,39, 177,75.

20 Esimerkki 8 5'-0-pivaloyylioksimetyyli-3'-deoksitymidiini Seosta, jossa oli 3'-deoksitymidiiniå (0,0103 g, 0,046 mmol) ja natriumhydridiå (0,0029 g, 80 % oljysså, 0,097 mmol) DMF:ssa (0,5 ml), sekoitettiin 0 °C:ssa yksi . 25 tunti. Kloorimetyylipivalaattia (0,0070 ml, 0,048 mmol) lisåttiin ja seosta sekoitettiin 0 eC:ssa kolme tuntia. Lisåttiin 1M ammoniumkloridia (3 ml) ja seos uutettiin dietyylieetterillå (3 ml). Eetteriuute pestiin kyllåisel-lå natriumkloridilla (3 ml x 2), kuivattiin (MgS04) ja 30 haihdutettiin. Jåånnds kromatografioitiin piidioksidilla, kåyttåne kloroformi-metanolia; saanto 0,0068 g, (43 %) lasimaisena aineena.

XH NMR (CDCI3, 300 MHz) 6 : 1,23 (s,9H), 1,90 - 2,10 (m,6H), 2,30 - 2,50 (m,lH), 3,73 - 4,05 (ABX,2H), 4,18 - lfi 92491 1 b 4,28 (m, IH), 5,33 - 5,39 (AB, 2H), 6,08 - 6,14 (m,lH), 7,62 (d,IH), 8,44 (b,lH).

13C NMR (CDC13) δ : 12,59, 25,29, 27,03, 32,58, 38,97, 70,33, 79,40, 85,83, 88,60, 110,37, 136,01, 150,26, 5 163,69, 177,92.

Esimerkki 9 5 ' -0-pivaloyylioksimetyyli-3' -atsido-3' -deoksitymi- diini

Seosta, jossa oli 3'-atsido-3'-deoksitymidiiniå 10 (0,0335 g, 0,125 mmol) ja natriumhydridiå (0,0079 g, 80 % Oljysså, 0,263 mmol) DMFtssa (1,5 ml), sekoitettiin 0 °C:ssa 1,5 tuntia. Kloorimetyylipivalaattia (0,020 ml, 0,138 mmol) lisåttiin ja seosta sekoitettiin 0 °C:ssa yksi tunti. Lisåttiin etikkahappoa (0,0072 ml, 0,126 mmol) ja 15 liuotin haihdutettiin. Jåånnbs kromatografioitiin pii- dioksidilla, kåyttåen kloroformi-metanolia; saanto 0,031 g (63 %) oljynå.

*H NMR (CDC13, 300 MHz) δ : 1,22 (s,9H), 1,94 (d,3H), 2,20 - 2,50 (m,2H), 3,76 - 4,02 (m,3H), 4,22 - 20 4,32 (m,IH), 5,34 (s,2H), 6,23 (t,lH), 7,44 (d,lH), 9,35 (b,IH).

13C NMR (CDCI3) δ : 12,51, 26,91, 37,71, 38,90, 59,91, 68,49, 82,58, 84,55, 88,27, 111,32, 135,39, 150,38, 163,88, 177,88.

25 Esimerkki 10 N4-bentsyylioksikarbonyyli-5'-0-pivaloyylioksimetyy-li-2',3'-dideoksisytosiini

Seosta, jossa oli N4-bentsyylioksikarbonyyli-2',3'-dideoksisytosiinia (0,022 g, 0,0637 mmol) ja natriumhydri-30 diå (0,0044 g, 80 % oljysså, 0,147 mmol) DMF:ssa (1,5 ml), .. sekoitettiin 0 eC:ssa 1,5 tuntia. Seos jååhdytettiin -50 eC:eseen ja lisåttiin kloorimetyylipivalaattia (0,0102 ml, 0,0702 mmol). Kyllåistå ammoniumkloridia (1 ml) lisåttiin ja liuottimet haihdutettiin. Jåånnos

II

17 92491 kromatografioitiin piidioksidilla, kayttaen kloroformi-metanolia; saanto: 0,0145 g (50 %) Gljyna.

*H NMR (CDC13, 300 MHz) 6 : 1,24 (s,9H), 1,80 - 2,00 (m, 2H), 2,10 - 2,25 (m,lH), 2,42 - 2,60 (m,lH), 3,73 - 5 4,12 (ABX,2H), 4,22 - 4,34 (m,lH), 5,23 (s,2H), 5,27 - 5,43 (AB,2H), 6,07 (dd, IH), 7,15 - 7,30 (b,lH), 7,30 - 7,48 (m,6H), 8,32 (d,lH).

Esimerkki 11 5'-O-pivaloyylioksimetyyli-2',3'-dideoksisytosiini 10 N4-bentsyylikarbonyyli-5'-O-pivaloyylioksimetyyli- 2',3'-dideoksisytosiinia (0,05 mmol) lisataan suspensioon, jossa on 5 % palladioitua hiilta (5 mg) etanolissa (2 ml). Sekoitettu suspensio hydrataan ilmanpaineessa, kåyttaen Brownin laitteistoa, jossa H2-kaasu kehitetaån saadettavai-15 13 tavalla lisaåmaiia 3N HCl:a liuokseen, jossa on nat- riumboorihydridia erilliselia osastossa. Reaktion anne-taan edeta yksi tunti huoneeniampdtilassa, seos suodate-taan ohuen Celite-kerroksen lapi, suodos haihdutetaan ja tuote puhdistetaan kromatografioimalla silikageelipylvåas-20 sa, kayttaen CHC13:EtOH:ta (9:1) eluointiin.

Esimerkki 12 3-pivaloyylioksimetyyli-5'-0-propionyyli-3'-atsido-3'-deoksitymidiini 3 ' -atsido-3 ' -deoksitymidiinia (0,0504 g, 0,189 mmol) 25 ja 4-dimetyyliaminopyridiiniå (0,0023 g, 0,019 mmol) liuo-tettiin pyridiiniin (2 ml) ja jaahdytettiin 0 eC:seen. Propionianhydridia (0,0265 ml, 0,206 mmol) lisattiin ja seosta sekoitettiin huoneeniampdtilassa typpiatmosfaarissa 24 tuntia ennen kuin liuotin haihdutettiin alennetussa 30 paineessa. Tolueenia lisattiin ja se haihdutettiin alen-• netussa paineessa, ja jaannds kromatografioitiin piidiok sidilla, kayttaen kloroformia ja kloroformi-metanolia (98,2); saanto 0,060 g (98 %) 5'-0-propionyyli-3'-atsido-3'-deoksitymidiinia varittomana oljyna.

92491 18 5 ' -O-propionyyli-3'-atsido-3'-deoksitymidiiniå (0,042 g, 0,130 mmol) ja kaliumkarbonaattia (0,0198 g, 0,143 mmol) suspensoitiin DMF:in (1 ml) ja sekoitettiin huoneenlåmpotilassa typpiatmosfåårisså 1,5 tuntia. Seos 5 jååhdytettiin 0 °C:eseen ja kloorimetyylipivalaattia (0,0226 ml, 0,156 mmol) lisåttiin. Seosta sekoitettiin 0 °C:ssa 30 minuuttia ja sitten huoneenlåmpbtilassa 19 tuntia ennen kuin liuotin haihdutettiin alennetussa paineessa. Jåånnås kromatografioitiin piidioksidilla, 10 kåyttåen etyyliasetaatti-heksaania (4:6); saanto 0,045 g (81 %) vårittbmånå oljynå.

NMR (CDC13, 300 MHz) δ : 1,19 (s) ja 1,19 (t) [12H], 196 (d, 3H), 2,29 - 2,57 (m) ja 2,41 (q) [4H], 4,06 - 4,15 (m,IH), 4,16 - 4,25 (m,lH), 4,31 - 4,42 15 (ABX,2H ), 5,91 - 5,98 (AB,2H), 6,15 (t,lH), 7,27 (d,H-6).

13C NMR (CDC13) δ : 9,03, 13,27, 27,02, 27,43, 37,73, 38,84, 60,54, 63,19, 64,95, 81,91, 86,10, 110,49, 134,10, 150,04, 162,27, 173,72, 177,48.

Esimerkki 13 20 3-a- (etyylioksikarbonyylioksi) etyyli-5 ' -O-propio nyyli-3 '-deoksitymidiini 3’-deoksitymidiiniå (0,0352 g, 0,156 mmol) ja 4-dimetyyliaminopyridiiniå (0,0020 g, 0,016 mmol) liuotet-tiin pyridiiniin (3 ml) ja jååhdytettiin 0 °C:eseen. Pro-25 pionianhydridiå (0,0241 ml, 0,187 mmol) lisåttiin ja seosta sekoitettiin huoneenlfimpGtilassa typpiatmosfåårissS 24 tuntia ennen kuin liuotin haihdutettiin alennetussa paineessa. Tolueenia lisåttiin ja se haihdutettiin alennetussa paineessa, ja jåånnos kromatografioitiin pii-30 dioksidilla, kåyttåen kloroformia ja kloroformi-metanolia (98,2); saanto 0,0435 g (99 %) 5’-O-propionyyli-3'-deoksi-tymidiiniå puolikiinteånå aineena.

5'-O-propionyyli-3'-deoksitymidiiniå (0,063 g, 0,2 - 23 mmol) ja kaliumkarbonaattia (0,0339 g, 0,245 35 mmol) suspensoitiin DMF:in (2 ml) ja sekoitettiin huoneen-

II

19 92491 ISmpOtilassa typpiatmosfSSrissa 1,5 tuivtia. Seos jaahdy-tettiin 0 eC:seen ja 1-kloorietyyietyylikarbonaattia (0,039 ml, 0,291 mmol) lisattiin. Seosta sekoitettiin 0 eC:ssa 30 minuuttia ja huoneenlSmpGtilassa kaksi tuntia.

5 Låmpdtila nostettiin 60 eC:eseen ja seosta sekoitettiin 19,5 tuntia ennen kuin liuotin haihdutettiin alennetussa paineessa. jaannds kromatografioitiin piidioksidilla, kayttåen etyyliasetaatti-heksaania (50:50) (Rf 0,17); saan-to 0,0477 g (54 %) Oljyna.

10 XH NMR (CDC13, 300 MHz) δ : 1,18 (t,3H), 1,29 (t,3H), 1,70 - 1,87 (m) ja 1,86 (d) [4H], 1,94 (d,3H), 1,97 - 2,14 (m,2H), 2,35 - 2,52 (m) ja 2,40 (q) [3H], 4,12 - 4,25 (m,2H), 4,26 - 4,40 (m,3H), 6,07 - 6,12 (m,IH), 7,20 - 7,28 (m,lH), 7,36 (d, IH).

15 13C NMR (CDC13) 6 : 9,09, 13,23 ja 13,36*, 14,15, 17,86 ja 17,94*, 25,81 ja 25,84*, 27,48, 32,25 ja 32,35*, 64,34, 64,79, 77,49, 78,46 ja 78,56*, 86,52 ja 86,58*, 109,81 ja 109,84*, 133,92 ja 133,97*, 149,82, 153,81 ja 153,85*, 162,57 ja 162,59*, 174,06.

20 * Erilaiset siirtymat kahdelle enantiomeerille (-CH(CH3) -N): n havaitsemisen vuoksi.

Esimerkki 14 5'-O-propionyyli-3-α-(tienyylioksikarbonyylioksi)-etyyli-3'-atsido-3'-deoksitymidiini 25 5 ’ -0-propionyyli-3'-atsido-3'-deoksitymidiiniå : (0,051 g, 0,158 mmol) ja kaliumkarbonaattia (0,024 g, 0,174 mmol) suspensoitiin DMF:in ja sekoitettiin huoneen-låmpbtilassa typpiatmosfåårisså yksi tunti. Seos jSåhdy-tettiin 0 eC:eseen ja 1-kloorietyylitienyylikarbonaattia 30 (0,046 g, 0,208 mmol) lisåttiin. Seosta sekoitettiin huo- neenlSmpotilassa 9 tuntia. Liuotin haihdutettiin alenne-tussa paineessa ja jåannds kromatografioitiin piidioksidilla kåyttåen kloroformia ja kloroformi-metanolia (99:1). Tuotetta sisMltåvåt fraktiot, Rf 0,3 (kloroformi-metanoli 35 (99:1) koostuivat kahdesta diastereoisomeerikomponentista, 92491 20

Rf 0,18 ja Rf 0,22 (etyyliasetaatti-heksaani (4:6); saanto 0,050 g.

Esimerkki 15 N6-bentsyylioksikarbonyyli-5'-O-pivaloyylioksimetyy-5 li-2',3’-dideoksiadenosiini 2',3'-dideoksiadenosiinia (0,1 mmol) ja 4-dimetyy-liaminopyridiinia (0,1 mmol) liuotettiin pyridiiniin ja seos jSShdytettiin 0 °C:eseen. Bentsyylikloroformaattia (0,2 mmol) lisattiin ja syntynytta seosta sekoitettiin 10 huoneenlåmpdtilassa typpiatmosfåårisså 24 tuntia. Lisat- tiin 4-dimetyyliaminopyridiiniå (0,1 mmol) ja seos jååhdy-tettiin 0 °C:eseen. Lisattiin bentsyylikloroformaattia (0,2 mmol) ja seosta sekoitettiin huoneenlåmpbtilassa 24 tuntia. 4-dimetyyliaminopyridiinin ja bentsyylikloro-15 formaatin lisåys toistettiin kolme kertaa, sekoittaen 24 tuntia kunkin lisåyksen vålillå, ennen kuin liuotin haihdutettiin alennetussa paineessa. JaSnnGs kromatogra-fioitiin piidioksidilla, kåyttåen kloroformia, kloroformi-metanolia (99:1) ja kloroformi-metanolia (9:1), ja nain 20 saatiin N6-bentsyylioksikarbonyyli-2',3'-dideoksiadenosiinia . N6-bentsyylioksikarbonyyli-2',3’-dideoksiadenosiinia (0,1 mmol) ja natriumhydridia (80 % GljyssS, 0,21 mmol), jotka olivat DMF:ssa (2 ml), sekoitettiin 0 °C:ssa yksi tunti. Seos jaahdytettiin 50 °C:eseen ja lisattiin kloo-25 rimetyylipivalaattia (0,1 mmol). Seosta sekoitettiin nel- jé tuntia ennen kuin lisattiin etikkahappoa (0,1 mmol). Liuotin haihdutettiin alennetussa paineessa ja jaannds kromatografioitiin piidioksidilla, kayttaen kloroformia ja kloroformi-metanolia (99:1), ja nain saatiin otsikon yh-30 diste.

. Farmaseuttinen esimerkki A

Suun kautta nautittavien kapseleiden valmistus

Aktiivinen yhdiste 50 mg

Amylym maydis q.s.

li 21 92491

Jauhe sekoitetaan ja tåytetåån koviin gelatiinikap-seleihin (Capsugel koko 00).

Farmaseuttinen esimerkki B Voiteen valmistus 5 Aktiivinen yhdiste 1 g

Nestemåinen parafiini 100 g

Valkoinen pehmeå parafiini ad 1 000 g

Valkoinen pehmeå parafiini sulatetaan ja yhdiste-tåån nestemåiseen parafiiniin ja sekoitetaan, kunnes seos 10 on kylmåå. Aktiivinen yhdiste jauhetaan osan kanssa pe-rusainetta ja våhitellen lisåtåån jåljellå oleva perusai-ne. Voide tåytetåån lakattuihin alumiiniputkiin (20 g) ja suljetaan. Voide sisåltåå 0,1 % aktiivista yhdistetta. Farmaseuttinen esimerkki C

15 Ruoansulatuskanavan ulkopuolelle annettava suspen- sio

Aktiivinen yhdiste 200 grammaa

Polysorbaatti 80 3 grammaa

Sorbitoli 400 grammaa 20 Bentsyylialkoholi 8 grammaa

Vesi ad 1 000 ml 1M HC1 g.s.

Polysorbaatti 80, sorbitoli ja bentsyylialkoholi liuotetaan 500 ml:an tislattua vettå. Aktiivinen yhdiste . 25 siivilbidåån 0,15 mm seulan låpi ja dispergoidaan liuok- seen voimakkaasti sekoittaen. pH såådetåån arvoon 4,5 li-sååmållå tipoittain 1M HC1. Vettå lisåtåån 1 000 mlraan asti, suspensio tåytetåån 1 ml:n lååkepulloihin. Lååke-pullot steriloidaan gamma-såteilytyksellå. Kukin lååke-30 pullo sisåltåå 200 mg aktiivista yhdistettå.

• 92491 22

Farmaseuttinen esimerkki D

Tablettien valmistus grammaa

Aktiivinen yhdiste 200 5 Laktoosi 85

Polyvinyylipyrrolidoni 5 Tårkkelys 42

Talkkijauhe 15

Magnesiumstearaatti 3 10 Aktiivinen yhdiste ja laktoosi siivildidåån 0,15 nun seulan låpi ja niitå sekoitetaan yhdesså 10 minuuttia. Sekoitettu jauhe kostutetaan polyvinyylipyrrolidonin vesi-liuoksella. Massa rakeistetaan ja kuivatut (40 °C) rakeet sekoitetaan tårkkelyksen, talkkijauheen ja magnesiumstea-15 raatin kanssa. Rakeet puristetaan tableteiksi. Tabletin halkaisija on 11 mm, tabletin paino on 350 mg ja kukin tabletti sisåltåå 200 mg aktiivista yhdistettå.

Farmaseuttinen esimerkki E

Peråsuoleen annettavan suspension valmistus 20 Metyyli-p-hydroksibentsoaattia (70 mg) ja propyyli- jD-hydroksibentsoaattia (15 mg) liuotetaan veteen (100 ml) 90 °C:ssa. Kun on jååhdytetty 30 °C:eseen, lisåtåån me-tyyliselluloosaa (2 g) ja seosta sekoitetaan kolme tuntia. Yksi gramma aktiivista yhdistettå siiviloidåan 0,15 mm 25 seulan låpi ja dispergoidaan liuokseen voimakkaasti se-koittaen. Suspensio tåytetåån 100 ml:n putkeen. Suspen-sio sisåltåå 10 mg aktiivista yhdistettå/ml.

Il 23 92491

Farmaseuttinen esimerkki F

Suun kautta nautittavan suspension valmistus grammaa

Aktiivinen yhdiste 10 5 Karboksimetyyliselluloosa 1,5

Sorbitoli 200

Natriumbentsoaatti 1,0

Appelsiiniesanssi 0,3

Aprikoosiesanssi 0,7 10 Etanoli 50

Vesi 236,5

Karboksimetyyliselluloosa, sorbitoli ja natriumbentsoaatti liuotetaan veteen, sekoittaen kaksi tunti. Lisåtåån liuos, jossa on esanssit etanolissa. Aktiivinen 15 yhdiste siivilbidåån 0,15 mm seulan låpi ja dispergoidaan liuokseen voimakkaasti sekoittaen. Suspensio (10 grammaa) tåytetåån 20 ml:n putkeen. Kukin putki sisåltåå 200 mg aktiivista yhdistettå.

Farmaseuttinen esimerkki G 20 Injektioliuoksen valmistus 10 mg aktiivista yhdistettå liuotetaan 10 ml:an 0,9 % natriumkloridia. pH sfiådetåån arvoon 4,5 IN HClrlla. Liuos steriilisuodatetaan ja tåytetåån 10 ml:n lååkepulloon. Liuos sisåltåå 1 mg aktiivista yhdistet-25 tå/ml.

Farmaseuttinen esimerkki H

Tablettien valmistus (såådetysti lååkeainetta va-pauttava formulaatio) grammaa 30 Aktiivinen yhdiste 500

Hydroksipropyylimetyyliselluloosa 120 (Methocel Kl5)

Laktoosi 45

Povidoni 30 35 Magnesiumstearaatti 5 24 92491

Aktiivista yhdistettS, hydrokspropyylimetyylisellu-loosaa ja laktoosia sekoitetaan yhdessS 20 minuuttia ja ne rakeistetaan povidoniliuoksella. Magnesiumstearaattia lisStåån ja seos puristetaan tableteiksi. Tabletin halkai-5 sija on 13 mm, tabletin paino on 700 mg ja kukin tabletti sisåltåå 500 mg aktiivista yhdistettå.

Claims (3)

1. I I 30 cAn^ I I I (A) (B) (c)

35. NY4 NY4 nyV I (E) I (F) ·: 40 92491 o or2 . vs-. , o 1 0, 1 λΧ»Χ^" jic? '” i" 1 J, I 15 jossa ryhmåt Y2, Y3 ja Y4 ovat kuten mååritettiin ryhmålle Y1, ja ne voivat olla samanlaisia tai erilaisia kuin Y1 tai kes-20 kenåån samanlaisia tai erilaisia, R4 on vetyatomi tai ryhmå -NY3Y4, jossa Y3:lla ja Y4:llå on edellå annetut merkitykset, ja R5 on vetyatomi tai alempi alkyyliryhmå, tai sen suolojen valmistamiseksi, edellyttåen, ettå ainakin yksi ryhmistå Y1, Y2, Y3 ja Y4 on ryhmå R1 (O) „CO (OCR2R3) m-, jossa m=l, tunnet tu 25 siitå, ettå yhdiste, jolla on kaava XB Y'O—i L—o-J (II) 3c w z 35 [jossa Y1 ja Z ovat kuten edellå mååritettiin ja XB on kuten edellå mååritettiin X:lle paitsi, ettå kukin ryhmistå Y1, Y2, Y3 ja Y4 voi lisåksi olla suojaryhmå, edellyttåen, ettå ainakin yksi ryhmistå Y1, Y2, Y3 ja Y4 on vetyatomi] saatetaan . 40 reagoimaan sellaisen reagenssin kanssa, joka liittåå edellå mååritetyn R1 (0)„CO. (OCR2R3)m-ryhmån, minkå jålkeen tarvitta- 92491 essa poistetaan nåin liitetyt mahdolliset saojaryhmåt ja/tai ei-toivotut substituentit.

1. Menetelmå farmakologisesti aktiivisen yhdisteen valmis-tamiseksi, jolla on kaava

5 X y'o — J (i) V z jossa Z on vetyatomi tai atsidoryhmå, Y1 on vetyatomi tai fysiologisesti hyvåksyttåvå ryhmå, jonka kaava on 15 R1 (0) nC0 (OCR2R3) m - jossa n on 0 tai l, m on 0 tai 1 ja R1 on mahdollisesti substituoitu alkyyli- tai aryyliryhmå 20 tai, kun n on 0, vetyatomi; R2 ja R3 ovat itsenåisesti vetyatomeja tai alempia alkyyli-ryhmiå; j a X on ryhmå, joka on valittu seuraavista: ο ου2 nvV Y IT"' N IT"'

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmå, tunnettu siitå, 5 ettå valmistetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa R1 on mah- dollisesti substituoitu C1.20-alkyyliryhinå tai C^jQ-aryyliryhmå.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmå, tunnettu siitå, ettå valmistetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa R2 on vety- 10 atomi ja R3 on vetyatomi tai metyyliryhmå.