FI81580C - Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara pyridazopyridazinderivat och nya mellanprodukter. - Google Patents

Description

1 81530

Menetelmä uusien, terapeuttisesti käyttökelpoisten pyri-datsopyridatsiinijohdannaisten valmistamiseksi ja uudet välituotteet 5 Jakamalla erotettu patenttihakemuksesta 831661 (Patentti 77244) Tämä keksintö koskee menetelmää uusien, terapeuttisesti käyttökelpoisten heksahydro-, oktahydro-9-okso- ja 10 6,9-dioksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappo-

jen ja niiden esterien valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava I

R4 .K'

Ib L J

f t 3 R O COOR·3 20 jossa pisteviiva merkitsee mahdollista lisäsidosta, R1 merkitsee Ci.g-alkyyli-, fenyyli-C^-alkyyli-, amino-C1.4-alkyy-li-, fenyyli-C1.4-alkyylikarbonyyliamino-C1.4-alkyyli-, fe-nyyli-C1.4-alkoksikarbonyyliamino-C1.4-alkyyli-, fenyyli-25 C1.4-alkyyliaminokarbonyyliamino-C1.4-alkyyli-, taip-toluee-nisulfonyyliamino-C1.4-alkyyliryhmää, R2 merkitsee karbok-syy-11- tai C^-alkoksikarbonyyliryhmää tai ryhmää, jolla on kaava 1 0 30 | (i) —

^OH

R3 merkitsee vetyatomia tai C^-alkyyliryhmää ja R4ja R5 35 merkitsevät kumpikin vetyatomia tai R4 ja R5 yhdessä merkitsevät oksoryhmää,

2 81 5 i O

ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditio ja emässuolojen valmistamiseksi.

Lisäksi keksinnön kohteena ovat eräät uudet, keksinnön mukaisessa menetelmässä käyttökelpoiset välituot-5 teet.

EP-patenttijulkaisuisa 25 941 ja 42 100 on kuvattu 6,9-diokso-pyridatso-[l,2-a]pyridatsiini- ja 3-okso- ja

1,3-diokso-lH-pyratsolo[l,2-a]pyridatsiinijohdannaisia, jotka omaavat ACE-estovaikutuksen. Näillä yhdisteillä on 10 siten antihypertensiivisiä ominaisuuksia. Uusista kaavan I

mukaisista yhdisteistä poiketen mainituissa tunnetuissa yhdisteissä on sivuketju, joka on liittynyt hieman erilaiseen rengassysteemiin aminoryhmän sijasta hiiliatomin välityksellä.

15 Havaitaan, että kaavan I mukaisissa yhdisteissä on asymmetrisiä hiiliatomeja ja sen vuoksi ne voivat esiintyä optisesti puhtaina diastereoisomeereina, diastereoisomee-ri-rasemaatteina tai diastereomeeriseoksina. Tämän keksinnön piiriin on tarkoitus sisällyttää kaikki nämä muodot. 20 Tämän keksinnön yhdisteissä konfiguraatio kunkin epäsymmetrisen hiiliatomin kohdalla on ensisijaisesti (S)-muotoa vastaava.

Tässä patenttiselityksessä käytettynä termi "alkyy-li", yksinään tai yhdistelmässä, tarkoittaa suoraketjuista 25 tai sivuketjuista alkyyliryhmää, jossa on 1-8, ensisijaisesti 1-4 hiiliatomia (esim. metyyli, etyyli, propyyli, isopropyyli, butyyli, tert.-butyyli, pentyyli ja heksyy-li). Halogeeni tarkoittaa fluoria, klooria, bromia tai jodia. Alkoksiryhmä ja alkoksiosa voi oilasuoraketjuinen 30 tai sivuketjuinen ja siinä on 1-8, ensisijaisesti 1-4 hiiliatomia.

Seuraavat ovat esimerkkejä mielenkiintoisista edellä esitetyn kaavan 1 mukaisista yhdisteistä: 8-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)oktahydro-35 6,9-dioksopyridatso[ 1,2-a] pyridatsiini-l-karboksyylihappo,

II

3 81580 tert.-butyyli-8-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliami-no)oktahydro-6,9-dioksopyridatso[l, 2-a]pyridatsiini-l-kar-boksylaatti, metyyli-oktahydro-8-(l-metoksikarbonyyli-3-fenyylipropyy-5 liamino)-9-oksopyridatso[1,2-a]pyridatsiini-l-karboksy- laatti, oktahydro-8-(3-fenyyli-l-fosfonopropyyliamino )-6,9-diokso-pyridatso[1,2-a]pyridatsiini-1-karboksyylihappo, 8-( l-karboksi-3-fenyylipropyyliamino)-l, 4,5,7,8, 9-heksa-10 hydro-6,9-dioksopyridatso[1,2-a]pyridatsiini-l-karboksyy- llhappo, 2-(l-karboksi-3-fenyyllpropyyliamino )heksahydro-3-okso-lH-pyratsolo[1,2-a]pyridatsiini-5-karboksyylihappo, metyyli-8-( 5-bentsyylioksiformamido-l-etoksikarbonyylipen-15 tyyliamino)-9-oksopyridatso[ 1,2-a] pyridatsiini-l-karboksy- laatti, 8-(5-bentsyylioksiformamido-l-karboksipentyy liamino)okta-hydro-9-oksopyridatso[ 1,2-a] pyridatsiini-l-karboksyylihap-po, 20 8-(5-amino-l-karboksipentyyliamino)-oktahydro-9-oksopyri- datso(l,2-a]pyridätsiini-1-karboksyy1ihappo, metyyli-8-( l-metoksikarbonyyli-4-fenyylibutyyliamino )okta-hydro-9-oksopyridatso[l, 2-a] pyridatsiini-l-karboksylaatti, 8-( l-karboksi-4-fenyylibutyyliamino) -oktahydro-9-oksopyri-25 datso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappo, metyyli-8-(l-metoksikarbonyyli-4-metyylipentyyliamino)ok-tahydro-9-oksopyridatso[ 1,2-a] pyridatsiini-l-karboksylaatti, 8-(l-karboksi-4-metyylipentyyliamino)-oktahydro-9-oksopy-30 ridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappo, metyyli-oktahydro-8-[l-metoksikarbonyyli-5-(3-fenyylipro-pioniamido)pentyyliamino] -9-oksopyridatso[l, 2-a] pyridatsiini-l-karboksylaatti, 8-[l-karboksi-5-(3-fenyylipropioniamido)pentyyliamino]ok-35 tahydro-9-oksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksyyli- 4 81 580 happo, metyyli-8-[5-(3-bentsyyliureido-l-etoksikarbonyyli )pentyy-liamino]oktahydro-9-oksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaatti, 5 8-[5-(3-bentsyyliureido-1-kerhoksi)pentyyliamino]oktahyd- ro-9-oksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappo, metyyli-oktahydro-8-[ l-metoksikarbonyyli-5-(p-tolueenisul-foniamido )pentyyli amino] -9-oksopyridatso [ 1,2-a] pyridatsii-ni-l-karboksylaatti, 10 8-[l-karboksi-5-(p-tolueenisulfoniamido)pentyyliamino]ok- tahydro-9-oksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksyyli-happo, metyyli-8-[[5-(6-bentsyyliformamidoheksaaniamido)-1-etok-sikarbonyyli]pentyyliamino]-oktahydro-9-oksopyridatso-15 [1,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaatti, 8-[[5-(6-bentsyylioksiformamidoheksaaniamido)-1-karbok-si]pentyyliamino] -oktahydro-9-oksopyridatso [ 1,2-a] pyridat-siini-l-karboksyylihappo ja 8- (l-etoksikarbonyyli-3-f enyylipropyyliamino )-1,4,6,7,8,9-20 heksahydro-6,9-dioksopyridatso[ 1,2-a] pyridatsiini-l-kar- boksyylihappo.

Keksinnön mukaiselle menetelmälle uusien, kaavan 1 mukaisten yhdisteiden ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi on tunnusomaista, että 25 a) yhdiste, jolla on yleinen kaava II

R\ 30 i 2 I a (II) ^CH A jj Hai*^ c- V/

II I

° COOR3 jossa pisteviiva, R3, R4 ja R5 merkisevät samaa kuin edellä 35 ja Hai merkitsee halogeeniatomia, saatetaan reagoimaan li 5 81580

yhdisteen kanssa, jolla on yleinen kaava III

R1 - CH - NH2 I (lii) 5 R2 jossa R1 ja R2 merkitsevät samaa kuin edellä, tai

b) alkyloidaan pelkistämällä yhdiste, jolla on yleinen kaava IV

R\ ^ CH l jj (Ιν> 15 o ' ->

COORJ

jossa pisteviiva, R3, R4 ja Rs merkitsevät samaa kuin edellä, yhdisteellä, jolla on yleinen kaava V

20 R1-C»0 I (V) R2 25 jossa R1 ja R2 merkitsevät samaa kuin edellä, tai c) yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava I, jossa R2 merkitsee karboksyyliryhmää ja/tai R3 merkitsee vetyatomia, kaavan I mukaista yhdistettä, jossa R2 merkitsee C1.4-alkoksikarbonyyliryhmää ja/tai R3 merkitsee C^- 30 alkyyliryhmää, käsitellään hapolla tai emäksellä, tai d) yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava I, jossa R1 merkitsee amino-C^-alkyyliryhmää, fenyyli-C1.4-al-koksikarbonyyliryhmä lohkaistaan katalyyttisesti hydraa-malla vastaavasta kaavan I mukaisesta yhdisteestä, jossa R1 35 merkitsee fenyyli-C1.4-alkoksikarbonyyliaminoC1.4-alkyyliryh- 6 81580 mää, ja 1) haluttaessa, erotetaan saatu diastereoisomeeri-seos diastereoisomeeri-rasemaatiksi tai optisesti puhtaiksi diastereoisomeereiksi, ja/tai 5 2) haluttaessa, erotetaan saatu rasemaatti kahdeksi antipodiksi, ja 3) haluttaessa, kaavan I mukaisen yhdiste muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi happoadditio- tai emäs-suolaksi .

10 Kaavan II mukaisen yhdisteen reaktio kaavan III

mukaisen yhdisteen kanssa menetelmän suoritusmuodon (a) mukaisesti voidaan suorittaa sinänsä tunnetulla tavalla. Tarkoituksenmukaisesti reaktio suoritetaan inertissä orgaanisessa liuottimessa ja happoa sitovan aineen läsnä-15 ollessa. Sopivia inerttejä orgaanisia liuottimia ovat aromaattiset hiilivedyt (esim. bentseeni, tolueeni jne.), dimetyyliformamidi ja näiden kaltaiset liuottimet. Käytettävä happoa sitova aine on ensisijaisesti emäs ja erityisesti tertiäärinen orgaaninen emäs kuten trietyyliamiini 20 jne. Kuitenkin voidaan käyttää ylimäärin kaavan III mukaista yhdistettä ja se voi tällöin toimia happoa sitovana aineena. Reaktio suoritetaan tarkoituksenmukaisesti normaalia korkeammassa lämpötilassa (esim. lämpötilan ollessa välillä noin 60°C - reaktioseoksen kiehumislämpötila).

25 Kaavan IV mukaisen yhdisteen pelkistysalkylointi kaavan V mukaisen yhdisteen kanssa menetelmän suoritusmuodon (b) mukaisesti voidaan suorittaa sinänsä tunnetulla tavalla. Eräässä menetelmässä reaktio voidaan suorittaa natriumsyaaniboorihydridin läsnäollessa sopivassa liuot-30 timessa kuten vedessä, veden ja alkanolin (esim. vesipitoinen etanoli) seoksessa. Tämä reaktio suoritetaan tarkoituksenmukaisesti neutraaleissa olosuhteissa ja suunnilleen huoneen lämpötilassa. Toisessa menetelmässä kaavan IV mukaisen yhdisteen, jossa pisteviiva merkitsee lisäsidosta 35 annetaan reagoida kaavan V mukaisen yhdisteen kanssa ja

II

7 815 80 muodostunut Sohiffin emäs hydrataan katalyyttisesti in situ. Tässä katalyyttisessä hydrauksessa lisäsidoksen muodostama kaksoissidos pelkistyy yksinkertaiseksi sidokseksi. Katalyyttinen hydraus suoritetaan tavanomaisissa olo-5 suhteissa; esimerkiksi käyttämällä jalometalli-katalyyttiä (esim. palladium-hiiltä) tai Raney-nikkeliä inertissä orgaanisessa liuottimessa (esim. alkanolissa tai etanolissa) huoneen lämpötilassa ja 1-10 ilmakehän paineessa.

Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R2 merkitsee C^-10 alkoksikarbonyyliryhmää ja/tai R3 merkitsee C^-alkyyliryh- mää, muutetaan vastaavaksi kaavan 1 mukaiseksi yhdisteeksi, jossa R2 merkitsee karboksyyliryhmää ja/tai R3 merkitsee vetyatomia, tämän menetelmän suoritusmuodon (c) mukaisesti käsittelemällä hapolla tai emäksellä. Tämä menetel-15 män suoritusmuoto suoritetaan sinänsä tunnetulla tavalla; esimerkiksi käsittelemällä alkalimetallihydroksidin kuten natriumhydroksidin tai kaliumhydroksidin kanssa, tarkoituksenmukaisesti lämpötilan ollessa huoneen lämpötilan ja seoksen kiehumispisteen välillä, tai alkoksikarbonyyliryh-20 män ollessa käsittelemällä vedettömällä hapolla.

Menetelmän suoritusmuodon (d) mukainen lohkaisu voidaan suorittaa sinänsä tunnetulla tavalla katalyyttisesti hydraamalla. Sopivia käyttökelpoisia katalyyttejä ovat tällöin jalometalli-katalyytit (esim. palladium, pla-25 tina, rutenium tai rodium) ja Raney-nikkeli. Jalometalli-katalyytti voi olla sopivalla kantaja-materiaalilla (esim. palladium hiilellä, rodium aluminiumoksidilla jne). Katalyyttinen hydraus voidaan suorittaa tavallisessa neutraalissa orgaanisessa liuottimessa kuten, esimerkiksi, aro-30 maattisessa hiilivedyssä (esim. bentseenissä, tolueenis-sa, ksyleenissä jne), alkanolissa (esim. metanolissa, etanolissa jne.) tai eetterissä (esim. dioksaanissa jne). Katalyyttinen hydraus suoritetaan edullisesti huoneen lämpötilassa ja ilmakehän paineessa, joskin se voidaan suorit-35 taa normaalia korkeammassa lämpötilassa ja/tai paineessa.

8 81500

Diastereoisomeeriseosten erottaminen diastereoiso-meeri-rasemaateiksi tai optisesti puhtaiksi diastereoiso-meereiksi tämän menetelmän suoritusmuodon (e) mukaisesti ja rasemaattien erottaminen kahdeksi antipodiksi tämän 5 menetelmän suoritusmuodon (f) mukaisesti voidaan suorittaa sinänsä tunnettujen menetelmien mukaisesti.

Tämän menetelmän suoritusmuodon (g) mukaisesti kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan muuttaa farmaseuttisesti hyväksyttäviksi suoloiksi käsittelemällä farmaseuttisesti 10 hyväksyttävän hapon tai emäksen kanssa. Esimerkkejä farmaseuttisesti hyväksyttävistä hapoista ovat epäorgaaniset hapot kuten halogeenivetyhapot (esim. bromivetyhappo tai kloorivetyhappo), rikkihappo, fosforlhappo ja typpihappo, ja orgaaniset hapot kuten etikkahappo, maleiinihappo, fu-15 maarihappo, viinihappo, sitruunahappo, metaanisulfonihappo ja paratolueenisulfonihappo. Esimerkkejä farmaseuttisesti hyväksyttävistä emäksistä ovat alkalimetallihydroksidit (esim. natriumhydroksidi tai kaliumhydroksidi), maa-alka-limetallihydroksidit (esim. kalsiumhydroksidi tai magne-20 siumhydroksidi), ammoniumhydroksidi ja orgaaniset emäkset (esim. disykloheksyyliamiini).

Kaavan II mukaiset lähtöaineet, joita käytetään tämän menetelmän suoritusmuodossa (a) ja joissa R4 ja R5 merkitsevät yhdessä oksoryhmää, ovat yleisesti tunnettuja 25 yhdisteitä. Spesifisiä edustavia yhdisteitä, joita ei ole tähän saakka selostettu, voidaan valmistaa kuten seuraa-vissa esimerkeissä on selostettu tai analogisin menetelmin.

Sitävastoin kaavan II mukaiset lähtöaineet, joissa 30 R4 ja R5 merkitsevät kumpikin vetyatomia, ovat uusia ja muodostavat myös tämän keksinnön kohteen. Näitä yhdisteitä kuvataan kaavalla Ha

II

9 81 580

H

5 ,IIa)

Hal il I 3

0 COORJ

Kaavan II mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa,

10 esimerkiksi, syklisoimalla yhdiste, jolla on yleiskaava VIII

R5

R- C—X

' 15 9H2 Hlf j| (VIII)

Hal I ΐ· 20 jossa pisteviiva, R4, R5 ja Hai merkitsevät samaa kuin kaavassa II, X merkitsee halogeeniatomia ja R30 merkitsee C^-alkoksikarbonyyliryhmää, ja tarvittaessa, tuotteessa oleva C1.4-alkoksikarbonyyliryhmä R30 muutetaan karboksyyliryhmäk-si tai toisenlaiseksi C^-alkoksikarbonyyliryhmäksi.

25 Kaavan VIII mukaisen yhdisteen syklisointi voidaan suorittaa tavanomaiseen tapaan; esimerkiksi sopivan iner-tin orgaanisen liuottimen (esim. dimetyyliformamidin tai tetrahydrofuraanin) läsnäollessa ja valinnaisesti emäksen kuten alkalimetallikarbonaatin (esim. natriumkarbonaatin, 30 kaliumkarbonaatin jne.) tai tertiäärisen orgaanisen emäksen (esim. trietyyliamiinin, N-etyylimorfoliinin jne. ) läsnäollessa, sopivassa lämpötilassa, joka on välillä 0°C - 80°C. Syklisointi on tarkoituksenmukaista suorittaa in situ; se on, eristämättä kaavan VIII mukaista yhdistettä 35 väliaineesta, jossa se on valmistettu.

10 81 580

Tuotteessa, s.o. kaavan II mukaisessa yhdisteessä, jossa R3 merkitsee C1.4-alkyyliryhmää, olevan C^- alkoksi-karbonyyliryhmän R30 muuttaminen karboksyyliryhmäksi voidaan suorittaa samalla tavalla jota on selostettu aikai-5 semmin tämän keksinnön menetelmän suoritusmuodon (c) yhteydessä. Näin saatu kaavan II mukainen yhdiste, jossa R3 merkitsee vetyatomia, voidaan haluttaessa esteröidä. Vaihtoehtoisesti kaavan II mukainen yhdiste, jossa R3 merkitsee C1.4-alkyyliryhmää, voidaan trans-esteröidä tunnettujen me-10 netelmien mukaisesti, jolloin saadaan kaavan II mukaista yhdistettä, jossa R3 merkitsee toisenlaista C^-alkyyliryh-mää.

Kaavan VIII mukaisia yhdisteitä, joissa R4 ja R5 merkisevät kumpikin vetyatomia, voidaan valmistaa, esimer-15 kiksi, saattamalla yhdiste, jolla on yleiskaava IX

zO

20 HN\/ !30

reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on yleiskaava X

25 X-CH2-CH2-CH-C0C1 I (X)

Hai

ja poistamalla bentsyylioksikarbonyyliryhmä saadusta yh-30 disteestä, jolla on yleiskaava XI

CH0-X

I 2 fH2 ZN^\ I I : (xi) 35

Hai (j f S '30

II

11 81580 joissa kaavoissa pisteviivalla ja vastineilla R30, X ha Hai on aikaisemmin mainittu merkitys ja Z merkitsee bentsyyli-oksikarbonyyliryhmää.

Kaavan IX mukaisen yhdisteen, joka on tunnettu yh-5 diste tai analoginen tunnetun yhdisteen kanssa, reaktio kaavan X mukaisen yhdisteen kanssa, joka niinikään on tunnettu yhdiste tai analoginen tunnetun yhdisteen kanssa, voidaan suorittaa yleisesti tunnetulla tavalla; esimerkiksi inertin orgaanisen liuottimen (esim. halogenoidun hii- 10 livedyn kuten dikloorimetaanin) läsnäollessa ja happoa sitovan aineen kuten alkalimetallikarbonaatin (esim. natriumkarbonaatin) tai alkalimetallivetykarbonaatin (esim. natriumvetykarbonaatin) läsnäollessa suunnilleen huoneen lämpötilassa.

15 Bentsyylioksikarbonyyliryhmän lohkaisu kaavan XI

mukaisesta yhdisteestä voidaan suorittaa, esimerkiksi, käsittelemällä jääetikkahapossa bromivedyn kanssa noin huoneen lämpötilassa tai käyttämällä vetyä katalyytin läsnäollessa tunnettujen menetelmien mukaisesti.

20 Kaavan VIII mukaisia yhdisteitä, joissa R4 ja R5

merkitsevät yhdessä oksoryhmää, voidaan valmistaa, esimerkiksi, antamalla tässä edellä mainitun kaavan IX mukaisen yhdisteen reagoida yhdisteen kanssa, jolla on yleiskaava XII

25 BzO^^

Ci - CH,-CH-C0C1 (XII) / 1 0^ Hai 30 jossa vastineella Hai on aikaisemmin mainittu merkitys ja Bz merkitsee bentsyyliryhmää,

poistamalla bentsyyli- ja bentsyylioksikarbonyyliryhmät muodostuneesta yhdisteestä, jolla on yleiskaava XIII

35 12 81 580

Ql (XIII) 10 jossa pisteviivalla ja vastineilla R30, Hai, Bz ja Z on aikaisemmin mainittu merkitys,

ja muuttamalla saatu happo, jolla on yleiskaava XIV

\/a

15 I

' (XIV) I 2 f])

I V

20 R

jossa pisteviivalla ja vastineilla R30 ja Hai on aikaisemmin mainittu merkitys, vastaavaksi happohalogenidiksi.

Kaavan IX mukaisen yhdisteen reaktio kaavan XII 25 mukaisen yhdisteen kanssa, joka on tunnettu yhdiste tai analoginen tunnetun yhdisteen kanssa, voidaan suorittaa tavalla, joka on analoginen menetelmän kanssa, jota on selostettu aikaisemmin kaavan IX mukaisen yhdisteen ja kaavan X mukaisen yhdisteen reaktion yhteydessä.

30 Bentsyyli- ja bentsyylioksikarbonyyliryhmien poisto kaavan XIII mukaisesta yhdisteestä voidaan suorittaa yleisesti tunnettujen menetelmien mukaisesti; esimerkiksi käyttämällä vetyä katalyytin, kuten jalometallikatalyytin (esim. palladium-hiilen) läsnäollessa tai R30:n merkitessä 35 muuta kuin tert.-butoksikarbonyyliryhmää, käyttämällä bro- li

13 81 5 SO

mivetyä j ääetikkahapossa.

Kaavan XIV mukaisen hapon konversio vastaavaksi kaavan VIII mukaiseksi happohalogenidiksi voidaan niinikään suorittaa sinänsä tunnettujen menetelmien mukaises-5 ti; esimerkiksi käyttämällä sopivaa halogenointiainetta kuten tionyylikloridia, fosforipentakloridia ja näiden kaltaista halogenointiainetta.

Menetelmän suoritusmuodossa (a) käytetyt kaavan III mukaiset lähtöaineet ovat tunnettuja yhdisteitä tai tun-10 nettujen yhdisteiden kanssa analogisia yhdisteitä, joita voidaan valmistaa samalla tavalla kuin tunnettuja yhdisteitä.

Tämän menetelmän suoritusmuodossa (b) lähtöaineina käytettävät kaavan IV mukaiset yhdisteet ovat uusia yhdis-15 teitä ja muodostavat myöskin tämän keksinnön kohteen.

Kaavan IV mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa, esimerkiksi, saattamalla kaavan II mukainen yhdiste reagoimaan alkalimetalliatsidin kanssa ja pelkistämällä muodostunut atsidi, jollaa on yleiskaava XV

20 *\ /*’

/c\ /V

F jl (XV) C H i 3

25 X

H T

0 COOR3 jossa pisteviivalla ja vastineilla R3, R4 ja R5 on aikaisemmin mainittu merkitys.

30 Kaavan II mukaisen yhdisteen reaktio alkalimetalli atsidin, ensisijaisesti natriumatsidin kanssa, voidaan suorittaa tunnetulla tavalla; esimerkiksi inertin orgaanisen liuottimen (esim. ketonin kuten asetonin) läsnäollessa normaalia korkeammassa lämpötilassa (esim. reaktioseoksen 35 kiehumislämpötilassa).

14 81 580

Kaavan XV mukaisen atsidin pelkistämiseen voidaan käyttää tavanomaisia menetelmiä, jolloin saadaan kaavan IV mukaisia yhdisteitä. Ensisijaiseen menetelmään sisältyy kaavan XV mukaisen atsidin käsittely sopivassa inertissä 5 orgaanisessa liuottimessa kuten dioksaanissa trifenyyli-fosfiinin kanssa suunnilleen huoneen lämpötilassa, minkä jälkeen seuraa hydrolysointi hapolla (esim. käyttämällä kloorivetyhappoa).

Kaavan IV mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa

10 myös, esimerkiksi, syklisoimalla yhdistettä, jolla on yleiskaava XVI

R5 r4_ 1 —x l 15 CH, mi >1 (XVI) ! I :

ReXCH\c>V

20 jossa pisteviivalla ja vastineilla R30, R4, R5 ja X on aikaisemmin mainittu merkitys ja R* merkitsee ftaloyyliami-noryhmää, ja poistamalla ftaloyyliryhmä saadusta yhdisteestä, jolla on yleiskaava XVII

r{ R5 25 \ / | | · (xvii)

: ^rY

30 0 COOR3 jossa pisteviivalla ja vastineilla R30, R4, R5 ja Re on aikaisemmin mainittu merkitys; jolloin Cx_4-alkoksikarbonyyliryhmä R30 muutetaan valinnai- 35 sesti karboksyyliryhmäksi tai toisenlaiseksi Cx_4-alkok-

II

is 81560 sikarbonyyliryhmäksi ennen ftaloyyliryhmän poistamista tai sen poistamisen jälkeen, kuten sopivaksi katsotaan.

Kaavan XVI mukaisen yhdisteen syklisointi voidaan suorittaa yleisesti tunnetulla tavalla; esimerkiksi pää-5 asiallisesti samalla tavalla, jota on selostettu aikaisemmin kaavan VIII mukaisen yhdisteen syklisoinnin yhteydessä. Kaavan XVI mukaiset yhdisteet syklisoidaan ensisijaisesti in situ.

Ftaloyyliryhmän poistaminen kaavan XVII mukaisesta 10 yhdisteestä voidaan suorittaa sinänsä tunnetulla tavalla käyttämällä hydratsiinia, mukavasti inertissä orgaanisessa liuottimessa kuten alkanolissa (esim. etanolissa) huoneen lämpötilassa tai sitä korkeammassa lämpötilassa (esim. seoksen kiehumislämpötilassa).

15 Valinnainen C1.4alkoksikarbonyyliryhmän R30 konversio karboksyyliryhmäksi tai toisenlaiseksi Cj.4-alkoksikarbonyy-liryhmäksi voidaan suorittaa analogisella tavalla, jota on selostettu aikaisemmin kaavan II mukaisten lähtöaineiden valmistuksen yhteydessä.

20 Kaavan XVI mukaisia yhdisteitä, joissa R4 ja R5 mer

kitsevät kumpikin vetyatomia, voidaan valmistaa, esimerkiksi, saattamalla edellä esitetty kaavan IX mukainen yhdiste reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on yleiskaava XVIII

25 X-CH2-CH2-CH-COCl (XVIII) R8 jossa Rs:lla ja X:llä on aikaisemmin mainittu merkitys, ja

30 poistamalla bentsyylioksikarbonyyliryhmä muodostuneesta yhdisteestä, jolla on yleiskaava XIX

CH--X

I 2 35 f"2 (XIX) I fr 16 81 5 60 jossa pisteviivalla ja vastineilla R30, Re, X ja Z on aikaisemmin mainittu merkitys.

Kaavan IX mukaisen yhdisteen reaktio kaavan XVIII mukaisen yhdisteen kanssa, joka on tunnettu yhdiste tai 5 tunnetun yhdisteen analogi, voidaan suorittaa samalla tavalla kuin on selostettu aikaisemmin kaavan IX mukaisen yhdisteen ja kaavan X mukaisen yhdisteen reaktion yhteydessä,

Bentsyylioksikarbonyyliryhmän poistaminen kaavan 10 XIX mukaisesta yhdisteestä voidaan suorittaa samalla tavalla kuin aikaisemmin on selostettu poistettaessa bent-syylioksikarbonyyliryhmä kaavan XI mukaisesta yhdisteestä.

Kaavan XVI mukaisia yhdisteitä, joissa R4 ja R5 yhdessä merkitsevät oksoryhmää, voidaan valmistaa, esimer-15 kiksi, saattamalla edellä esitetty kaavan IX mukainen yhdiste reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on yleiskaava xx

BzO^^ - CH2-CH-C0C1 20 I (XX)

Re

jossa Rs:lla ja Bz:lla on aikaisemmin mainittu merkitys, poistamalla bentsyyli- ja bentsyylioksikarbonyyliryhmät 25 saadusta yhdisteestä, jolla on yleiskaava XXI

0. ^0Bz ch2 Zlf 30 ' I ‘ (XXI) R s j.30 jossa pisteviivalla ja vastineilla Re, R30, X ja Bz on ai-35 kaisemmin mainittu merkitys,

II

17 81 580

ja muuttamalla muodostunut happo, jolla on yleiskaava XXII

°>> /°H

C

5 9H2 I I :| (xxii)

A' T

10 jossa pisteviivalla ja vastineilla R® ja R30 on aikaisemmin mainittu merkitys, vastaavaksi happohalogenidiksi.

Kaavan IX mukaisen yhdisteen reaktio kaavan XX mukaisen yhdisteen kanssa, joka on tunnettu yhdiste tai tun-15 netun yhdisteen analogi, voidaan suorittaa samalla tavalla kuin on selostettu aikaisemmin kaavan IX mukaisen yhdisteen ja kaavan X mukaisen yhdisteen reaktion yhteydessä.

Bentsyyli- ja bentsyylioksikarbonyyliryhmien poistaminen kaavan XXI mukaisesta yhdisteestä voidaan suorit-20 taa samalla tavalla kuin aikaisemmin on selostettu poistettaessa nämä ryhmät kaavan XIII mukaisesta yhdisteestä.

Kaavan XXII mukaisen hapon konversio vastaavaksi kaavan XVI mukaiseksi happohalogenidiksi voidaan suorittaa samalla tavalla kuin on selostettu aikaisemmin kaavan XIV 25 mukaisen hapon konversion yhteydessä vastaavaksi happohalogenidiksi .

Menetelmän suoritusmuodossa (b) käytetyt kaavan V mukaiset lähtöaineet ovat tunnettuja yhdisteitä tai tunnettujen yhdisteiden analogeja, joita voidaan valmistaa 30 samalla tavalla kuin tunnettuja yhdisteitä.

Kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat ovat käyttökelpoisia verenpainetta alentavina aineina. Ne inhibioivat verisuonia supistavaa ainetta muuntavan entsyymin (ACE) vaikutusta, joka 35 aiheuttaa angiotensiini I:n muuttumisen angiotensiini ie 81580 II:ksi ja sen vuoksi ne ovat käyttökelpoisia alentaessaan tai lievittäessään angiotensiiniin liittyvää liiallista painetta.

Näiden yhdisteiden aktiivisuus inhibioida angioten-5 siiniä muuttavan entsyymin vaikutusta in vitro voidaan määrittää seuraavan kokeen avulla.

Käytetty menetelmä perustuu Cushman’in ja Cheung’in menetelmään (Biochem. Pharmacol., 20, 1637-1648) siihen liittyvin Hayakari'n ym.tn (Anal. Biochem., 84, 361-369) 10 esittämin sovellutuksin. Viljelyainetta (hippuryylihisti-dyyli-leusiinia, 2 mmoolia) inkuboidaan angiotensiiniä muuttavan entsyymin kanssa siten, että läsnä on tai ei ole erilaisin konsentraatioin koeainetta kaliumfosfaatti-puskurissa (pH 8,3; 100 mmoolia), joka sisältää natriumklori-15 dia (300 mmoolia), 24 minuuttia 37°C:ssa (kokonaisarvo 500 μΐ). (Jos koeaine on esteriä, se on tarkoituksenmukaista lohkaista sianmaksa-esteraasin avulla ennen kokeen suorittamista). Reaktio päätetään lisäämällä 3 ml kaliumfosfaatti-puskuria (pH 8,3; 200 mmoolia) 0”C:ssa. Lisätään 2,4,6-20 trikloori-s-triatsiinia (3 %) 1,5 ml:ssa dioksaania ja seosta sekoitetaan kunnes keltainen väri on kehittynyt täydellisesti. Sitten näytteet sentrifugoidaan kaiken muodostuneen sakan poistamiseksi. 2,4,6-trikloori-s-triatsii-nin vapaan hippurihapon kanssa reagoidessa muodostunut 25 keltainen väri mitataan spektrofotometrisesti kohdalta 382 nm. ICS0-arvot määritetään koeaineen konsentraationa, joka vähentää 50 % angiotensiiniä muuntavan entsyymin aiheuttamaa hippuryyli-histidyyli-leusiinin lohkeamista edellä mainituissa olosuhteissa.

30 Tulokset, jotka on saatu edellä selostetussa ko keessa käyttämällä koeaineena kaavan I mukaisia tyypillisiä yhdisteitä, on koottu seuraavaan taulukkoon.

Yhdiste A: 8(S)-(l-karboksi-3-fenyylipropyyliami- no)-oktahydro-6,9-dioksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-35 karboksyylihappo; isomeeri 2 (katso esimerkkiä 1).

Il is 81580

Yhdiste B: 8-(l-karboksi-3-fenyylipropyyliamino)-oktahydro-9-oksopyridatso[l, 2-a]pyridatsiini-l-karbok-syylihappo; rasemaatti B (katso esimerkkiä 6).

Taulukko 5 Yhdiste IC«n: A 2,2 x 10~8 moolia B 5,5 x 10~8 moolia

Kaavan I mukaisia yhdisteitä ja niiden farmaseutti-10 sesti hyväksyttäviä suoloja voidaan käyttää lääkkeinä farmaseuttisten valmisteiden muodossa, jotka sisältävät niitä seostuvan farmaseuttisen kantaja-aineen yhteydessä. Tämä kantaja-aine voi olla orgaanista tai epäorgaanista kantaja-ainetta, joka soveltuu annettavaksi sisällisesti 15 (esim. suun kautta) tai parenteraalisesti, jolloin esimerkkejä sellaisista kantaja-aineista ovat vesi, gelatiini, arabikumi, maitosokeri, tärkkelys, magnesiumstearaat-ti, talkki, kasviöljyt, polyalkyleeniglykolit, vaseliini jne. Farmaseuttiset valmisteet voidaan valmistaa kiinteäk-20 si muodoksi (esim. tableteiksi, lääkerakeiksi, peräpuikoiksi tai kapseleiksi) tai nestemäiseksi muodoksi (esim. liuoksiksi, suspensioiksi tai emulsioiksi). Farmaseuttisia valmisteita.voidaan käsitellä standardinmukaisin farmaseuttisin työmenetelmin kuten steriloimalla ja/tai ne voi-25 vat sisältää apuaineita kuten suojaavia aineita, stabiloivia aineita, kostutusaineita tai emulgoivla aineita, suoloja osmoottisen paineen vaihtelemiseksi tai puskureita. Farmaseuttiset valmisteet voivat myös sisältää muita terapeuttisesti arvokkaita aineita.

30 Kaavan I mukaisia yhdisteitä ja niiden farmaseut tisesti hyväksyttäviä suoloja voidaan antaa täysikasvuisille päivittäisen annostuksen ollessa noin 0,1 mg 100 mg, ensisijaisesti noin 1 mg - 50 mg, kehon painon kiloa kohden . Päivittäinen annoste voidaan antaa yhtenä annoksena 35 tai jaettuina annoksina. On täysin ymmärrettävää, että 20 8 1 5 8 0 edellä mainittu annosalue on annettu ainoastaan esimerkin muodossa ja sitä voidaan vaihdella pienemmäksi tai suuremmaksi riippuen sellaisista tekijöistä kuten annettavasta tietystä yhdisteestä tai suolasta, autotiestä, hoidettavan 5 oireen vakavuudesta ja hoitavan lääkärin määrittelemästä potilaan tilasta.

Seuraavat esimerkit valaisevat tätä keksintöä.

Esimerkki 1 0,9 g oktahydro-8(S)-amino-6,9-dioksopyridatso-10 [l,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappoa (isomeeriä B) ja 3,5 g 2-okso-4-fenyylivoihappoa suspendoitiin 25 ml:aan vettä ja pH säädettiin arvoon 7 natriumhydroksidilla. Lisättiin 0,72 g natriumsyaaniboorihydridiä ja liuosta sekoitettiin 20°C:ssa 24 tuntia. Eluoimalla sulfonihappo-15 ioninvaihtohartsista vedellä, jossa oli 2 % pyridiiniä, ja haihduttamalla sen jälkeen kuiviin, saatiin 0,8 g valkeata kiinteätä ainetta, joka kromatografloitiin Amberlite XAD 2:11a käyttämällä eluointiin 0,1-norm, ammoniumhydroksidin vesiliuosta, jossa oli 5 % metanolla, jolloin saatiin 20 8(S)-(l-karboksi-3-fenyylipropyyliamino)oktahydro-6,9-di- okso-pyridatso[1,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappoakah-tena diastereomeerina: isomeerin 1 (240 mg) eluoituessa ensin ja muodostaessa vedestä hydraattla, ja isomeeriä 2 (320 mg), joka eluoltui toiseksi ja muodosti vedestä hemi-25 hydraattla, jonka sulamispiste oli 214eC (hajoten). Kroma-tografoitaessa saatiin myös 200 mg aminohappo-lähtöainetta.

Lähtöaineena käytettyä oktahydro-8(S)-amino-6,9-dioksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappoa 30 (isomeeriä B) valmistettiin seuraavasti: (A) Liuosta, jossa oli 29,5 g N-ftaloyyli-S-aspar-giinihappo-B-bentsyyliesteriä 550 ml:ssa kuivaa eetteriä, käsiteltiin 0°C:ssa 16,7 gramman kanssa fosforipentaklo-ridia. Seosta sekoitettiin 0°C:ssa 1,5 tuntia ja sitten 35 haihdutettiin kuiviin. Jäljelle jäänyt öljy liuotettiin

II

21 81580 250 ml:aan dikloorlmetaania ja lisättiin hitaasti 0°C:ssa sekoitettuun seokseen, jossa oli 26,8 g 1-bentsyylioksi-karbonyylipiperatsiinihappo-tert.-butyyliesteriä 500 ml:ssa dikloorlmetaania ja 380 ml:ssa kyllästettyä nat-5 riumvetykarbonaatin vesiliuosta. Seosta sekoitettiin 20°C:ssa 17 tuntia ja kerrokset erotettiin. Orgaaninen kerros pestiin natriumkloridiliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Jäännöksestä eristettiin, sen jälkeen kun oli kromatografioitu kolon-10 nissa silikageelillä käyttämällä etyyliasetaatti/n-hek-saani-seosta (tilavuussuhde eluoitaessa 1:2), 16,8 g (31 %) öljyistä bentsyyli-tert.-butyyli-heksahydro-2-[3-bent-syy1ioksikarbonyyli-2(S)-ftaali-imidopropionyy1i]-1,3-py-rldatsiinidikarboksylaattia (diastereomeeria A) ja 21,4 g 15 (39 %) öljyistä bentsyyli-tert.butyyliheksahydro-2-[3- bentsyylioksikarbonyyli-2(S )-f taali-imidopropionyyli] -1,3-pyridatsiinidikarboksylaattia (diastereomeeria B).

(B) Liuosta, jossa oli 11,1 g bentsyyli-tert.-butyyli-heksahydro-2- [3-bentsyylioksikarbonyyli-2( S )ftaali- 20 imidopropionyyli]-l,3-pyridatsiinidikarboksylaattia (dia stereomeeria B) 220 ml:ssa metanolia, hydrattiin 1,1 grammalla 10 %:ista palladium-hiiltä 18 tunnin ajan. Katalyytti poistettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 6,9 g (94 %) tert.-butyyli-hek-25 sahydro-2-[3-karboksi-2(S)-£taali-imidopropionyyli]-3-py- rldatsiinikarboksylaattia (diastereomeeria B) hartsin muodossa.

(C) Jääkylmää liuosta, jossa oli 6,9 g tert.-butyy-li-heksahydro-2-[3-karboksi-2( S )-f taali-imidopropionyyli] - 30 3-pyridatsiinikarboksylaattia (diastereomeeria B) 270 ml:ssa tetrahydrofuraania, käsiteltiin 3,4 ml:n kanssa N-etyylimorfoliinia ja 3,4 gramman kanssa fosforipentaklo-ridia ja seosta sekoitettiin 20*C:ssa 1,5 tuntia. Liuotin poistettiin vakuumissa ja jäännös Jaettiin etyyliasetaat-35 tiin ja 0,5-norm. suolahappoon liukeneviin osiin. Orgaani- 22 81 580 nen kerros pestiin peräkkäin natriumkloridiliuoksella, kyllästetyllä natriumkarbonaattiliuoksella ja natriumklo-ridiliuoksella, ja kuiviin haihduttamisen jälkeen saatiin 6,6 g (99 %) tert.-butyylioktahydro-6,9-diokso-8(S)-ftaa-5 li-imidopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattia (diastereomeeria B) valkeiden kiteiden muodossa, joiden sulamispiste oli 131°C (etyyliasetaatti/n-heksaani-seoksesta ) .

(D) 6,6 grammaa tert.-butyyli-oktahydro-6,9-diokso- 10 8 (S) -f taali-imidopyridatso [ 1,2-a]pyridatsiinil-karboksy- laattia (diastereomeeri B) jätettiin paikoilleen tunnin ajaksi huoneen lämpötilaan 30 ml:n kanssa trifluorietik-kahappoa. Kuiviin haihduttamisen jälkeen jäännös kiteytettiin uudelleen etikkahappo/dietyylieetteri-seoksesta, jol-15 loin saatiin 4,1 g (72 %) oktahydro-6,9-diokso-8(S)-ftaa-li-imidopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappoa (diastereomeeria B) valkeiden kiteiden muodossa, joiden sulamispiste oli 275-277*C (hajoten).

(E) Suspensiota, jossa oli 7,5 g oktahydro-6,9- 20 diokso-8(S )-ftaali-imidopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappoa 290 ml:ssa etanolia, käsiteltiin 3 ml:n kanssa hydratsiinihydraattia ja seosta lämmitettiin kiehuttaen tunnin ajan. Seos jätettiin jäähtymään ja sitten se suodatettiin. Jäännöstä sekoitettiin 160 ml:n kanssa 2-25 norm, etikkahappoa 20°C:ssa tunnin ajan ja seos suodatettiin. Suodos haihdutettiin kuiviin ja jäännös pestiin neljällä 10 ml:n erällä etanolia. Näin saatiin 3,4 g (71 %) oktahydro-8 (S) -amino-6,9-dioksopyridatso [ 1,2-a] pyridatsii-ni-l-karboksyylihappoa (diastereomeeria B) valkean kiin-30 teän aineen muodossa, jonka sulamispiste oli 263-265eC (hajoten).

Esimerkki 2

Liuos, jossa oli 3,0 g natriumsyaaniboorihydridiä 40 ml:ssa 50 %:ista etanolin vesiliuosta, lisättiin sekoi-35 tettuun suspensioon, jossa oli 9,3 g etyyli-2-okso-4-fe-

II

23 815 30 nyylibutanoaattia ja 3,4 g oktahydro-8(S)-amino-6,9-diok-sopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappoa (dia-stereomeeria B) 90 ml:ssa 50 %:ista etanolin vesiliuosta. Tunnin välein lisättiin edelleen kaksi 3,1 gramman erää 5 etyyli-2-okso-4-fenyylibutanoaattia ja seosta sekoitettiin 20°C:ssa 18 tuntia. Eluoitaessa sulfonihappo-ioninvaih-tajahartsista vedellä, jossa oli 2 % pyridiiniä ja haihduttamalla sen jälkeen kuiviin, saatiin valkeata kiinteätä ainetta, joka jaettiin etyyliasetaattiin ja veteen liuke-10 neviin osiin. Vesikerroksesta saatiin takaisin 1,2 g reagoimatonta aminohappolähtöainetta. Orgaanisesta kerroksesta eristettiin 1,8 g 8(S)-[l-(R,S)-etoksikarbonyyli-3-fe-nyyllpropyyliamino]oktahydro-6,9-diokso-pyrldatso[l,2-a]-pyridatsiini-l-karboksyylihappoa valkeana kiinteänä ainee-15 na, jonka sulamispiste oli 193-195°C (etyyliasetaatista), saannon ollessa 45 % reagoineesta aminohappo-lähtöaineesta laskien.

Esimerkki 3

Liuosta, jossa oli 0,6 g tert.-butyyli-8(S)-amino-20 oktahydro-6,9-dioksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karbok-sylaattia ja 2,4 g etyyli-2-okso-4-fenyylibutanoaattia 30 ml:ssa etanolia, hydrattiin 0,5 grammalla 10 %:ista palladium-hiiltä molekyyliseulan läsnäollessa 65 tuntia. Katalyytti poistettiin suodattamalla. Suodos haihdutettiin 25 kuiviin ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä, jol loin saatiin kahta tert.-butyyli-8(S)-(1-etoksikarbonyyli- 3-fenyylipropyyliamino)-oktahydro-6,9-dioksopyridatso-[1,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattidiastereomeeria; isomeerin 1 (180 mg) eluoituessa ensin ja muodostaessa val-30 keitä kiteitä, joiden sulamispiste oli 122-123eC (etyyli-asetaatti/n-heksaani-seoksesta) ja isomeerin 2 (100 mg) eluoituessa toisena ja muodostaessa valkeita kiteitä, joiden sulamispiste oli 96-99°C (n-heksaanista).

Lähtöaineena käytettyä tert. -butyyli-8( S )-amino-ok-35 tahydro-6,9-dioksopyridatso[l, 2-a]pyridatsiini-l-karbok- 24 81580 sylaattia valmistettiin seuraavasti:

Liuosta, jossa oli 1,0 g tert.-butyyli-oktahydro- 6,9-diokso-8(S)-ftaali-imidopyridatso[1,2-a]pyridatsiini- 1-karboksylaattia (diastereomeeria B) 50 ml:ssa etanolia, 5 käsiteltiin 0,25 ml:n kanssa hydratsiinihydraattia ja seoksen annettiin olla paikoillaan huoneen lämpötilassa 4 tuntia. Liuotin poistettiin vakuumissa ja jäännöstä sekoitettiin tunnin ajan 40 ml:n kanssa 2-norm. etikkahappoa. Suodattamisen jälkeen suodos tehtiin emäksiseksi natrium-10 karbonaatilla ja uutettiin etyyliasetaatilla. Etyyliasetaatti-uutteesta saatiin 0,6 g tert.-butyyli-8(S)-amino-oktahydro-6,9-dioksopyridatso[ 1,2-a] pyridatsiini-l-karbok-sylaattia (diastereomeeria B) öljyn muodossa.

Esimerkki 4 15 Seosta, jossa oli 1,6 g metyyli-8-bromi-oktahydro- 9-oksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattia (ra-semaattia A), 1,27 g metyyli-2-amino-4-fenyylibutanoaattia ja 0,55 g trietyyliamiinia 10 ml:ssa dimetyyliformamidia, sekoitettiin 60°C:ssa 24 tuntia ja sitten huoneen lämpöti-20 lassa 48 tuntia. Liuottimet poistettiin haihduttamalla kuiviin ja jäännös jaettiin dlkloorlmetaaniln ja kyllästettyyn natriumvetykarbonaatin vesiliuokseen liukeneviin osiin. Orgaaninen kerros eristettiin, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Saatu öljy kro-25 matografoltiin silikageelillä. Eluoitaessa etyyliasetaa tilla saatiin ensin 0,52 g (23 %) metyyli-oktahydro-8-(1-metoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamlno ) -9-oksopyridat-so[l,2-a]pyridatsilni-l-karboksylaattia (rasemaattia A) vaaleankeltaisena öljynä ja sen jälkeen 0,9 g (40 %) me-30 tyyli-oktahydro-8-(l-metoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli- amino)-9-oksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaat-tia (rasemaattia B) vaaleankeltaisena öljynä.

Lähtöaineena käytettyä metyyli-8-bromi-oktahydro-9-oksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattia (rase-35 maattia A) valmistettiin seuraavasti:

II

25 81 580 (A) liuosta, jossa oli 10 g 1-bentsyylioksikarbo-nyylipiperatsiinihappotert.-butyyliesteriä ja 16,5 g 2,4-dibromibutyryylikloridia 50 ml:ssa dikloorimetaaania, sekoitettiin huoneen lämpötilassa 3 tuntia 100 ml:n kanssa 5 kyllästettyä natriumkarbonaatin vesiliuosta. Sitten orgaaninen kerros eristettiin, pestiin kyllästetyllä nat-riumvetykarbonaatin vesiliuoksella ja natriumkloridiliuok-sella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Saatu öljy kromatografioitiin silikageelillä 10 käyttämällä eluoinnissa dietyylieetteriä, jolloin näin saatiin 12,38 g (73 %) l-bentsyyli-3-tert.butyyli-2-(2,4-dibromibutyryyli) -heksahydro-1,3-pyridatsiinidikarboksy-laattia (2 rasemaattia) valkean kiinteän aineen muodossa, jonka sulamispiste oli 81-82eC (dietyylieetteri/petroli-15 eetteri-seoksesta).

(B) 4 g l-bentsyyli-3-tert.-butyyli-2-(2,4-dibromi-butyryyli)-heksahydro-1,3-pyridatsiinidikarboksylaattia (2 rasemaattia) sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan 25 ml:n kanssa trifluorietikkahappoa ja sitten seos 20 haihdutettiin kuiviin. Saatu öljy liuotettiin 20 ml:aan metanolia ja esteröitiin käyttämällä diatsometaanin di-etyylieetteriliuosta. Haihduttamalla seos kuiviin saatiin 3,2 g (87 %) l-bentsyyli-3-metyyli-2-(2,4-dibromibutyryy-li)-heksahydro-1,3-pyridatsiinidikarboksylaattia (2 rase-25 maattia) valkean kiinteän aineen muodossa, jonka sulamis piste oli 76-76,5°C (dietyylieetteristä).

(C) 11 g l-bentsyyli-3-metyyli-2-(2,4-dibromibu-tyryyli)-heksahydro-1,3-pyridatsiinidikarboksylaattia (2 rasemaattia) sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin 30 ajan 35 ml:n kanssa 45 %:ista bromivedyn jääetikkahappo-liuosta ja sitten seos haihdutettiin kuiviin. Muodostunut öljyinen kiinteä aine pestiin dietyylieetterillä ja jaettiin sitten dikloorimetaaniin ja kyllästettyyn natrium-vetykarbonaatin vesiliuokseen liukeneviin osiin. Orgaani-35 nen kerros erotettiin, kuivattiin natriumsulfaatilla ja 26 81 580 haihdutettiin kuiviin. Saatu öljy liuotettiin 50 ml:aan dimetyyliformamidia ja sekoitettiin 80°C:ssa 2 tuntia 3 gramman kanssa kuivaa kaliumkarbonaattia. Sitten seos haihdutettiin kuiviin ja jäännös jaettiin dikloorimetaa-5 niin ja kyllästettyyn natriumvetykarbonaatin vesiliuokseen liukeneviin osiin. Orgaaninen kerros erotettiin, kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös kromatografioitiin silikageelillä. Eluoitaessa tert.-bu-tyyli-metyylieetterillä saatiin ensin 3,57 g (30 %) metyy-10 li-8-bromi-oktahydro-9-oksopyridatso[l, 2-a]pyridatsiini-l- karboksylaattia (rasemaattia A) valkean kiinteän aineen muodossa, jonka sulamispiste oli 95-96°C (etyyliasetaat-ti/n-heksaaniseoksesta) ja sen jälkeen 2,1 g (33 %) metyy-li-8-bromioktahydro-9-oksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-15 karboksylaattia (rasemaattia B) valkean kiinteän aineen muodossa, jonka sulamispiste oli 102-103‘C (etyyliase-taatti/n-heksaani-seoksesta).

Esimerkki 5

Liuos, jossa oli 160 mg natriumhydroksidia 8 mltssa 20 vettä, lisättiin liuokseen, jossa oli 403 mg metyyliokta-hydro-8-(l-metoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-9-okso-pyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattia (rasemaattia A) 8 ml:ssa metanolia ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 3 tuntia. Saatu liuos pantiin 8 25 ml:aan Zerolit 225-ioninvaihtohartsia (H*-muoto). Eluoi taessa vedellä, jossa oli 2 % pyridliniä, saatiin 112 mg (30 %) 8-(l-karboksi-3-fenyylipropyyliamino)-oktahydro-9-oksopyridatso[l,2-a]pyridatsilni-l-karboksyylihappoa (rasemaattia A) valkean kiinteän aineen muodossa, joka vedes-30 tä uudelleen kiteyttämisen jälkeen suli 203-204°C:ssa (ha joten).

Esimerkki 6

Liuos, jossa oli 120 mg natriumhydroksidia 6 ml:ssa vettä, lisättiin liuokseen, jossa oli 240 mg metyyliokta-35 hydro-8-(l-metoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-9-

II

27 81 580 oksopyridatso[l,2-a]pyridatslini-l-karboksylaattia (rase-maattia B) 6 mlrssa metanolla ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 3 tuntia. Saatu liuos pantiin 6 ml:aan Zerolit 225-ioninvaihtohartsia (H*-muoto). Eluoitaessa ve-5 dellä, jossa oli 2 % pyridiiniä, saatiin 173 mg (77 %) 8-( l-karboksi-3-fenyylipropyyliamino )oktahydro-9-oksopyrl-datso[l,2-a]pyrldatsiini-l-karboksyylihappoa (rasemaattia B) valkean kiinteän aineen muodossa, joka vedestä uudelleen kiteyttämisen jälkeen suli 208-210°C:ssa (hajoten). 10 Esimerkki 7

Liuos, jossa oli noin 3,7 g (3-fenyylipropionyy-li)-fosfonihappoa 100 ml:ssa vettä, titrattiin pH-arvoon 7 15,5 ml:lla 2-norm, natriumhydroksidia. Lisättiin sekoittaen 0,8 g oktahydro-8(S)-amino-6,9-dioksopyridat-15 so[1,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappoa(diastereomeeria B) ja saadun liuoksen pH säädettiin arvoon 7,5 1,5 ml:11a 2-norm. natriumhydroksidia. Lisättiin 0,67 g natrium-syaaniboorihydridiä ja seosta sekoitettiin yön ajan huoneen lämpötilassa. Eluoimalla sulfonihappoioninvaihtohart-20 sista vedellä, saatiin, kuiviin haihduttamisen jälkeen, 0,295 g oktahydro-8(S)-[3-fenyyli-1(R,S)-fosfonopropyyli-amino] -6,9-dioksopyridatso[ 1,2-a] pyridatsiini-1 (S) -karbok-syylihappoa valkean kiinteän aineen muodossa, jonka sulamispiste oli 165-185*C. Saanto oli 40 % reagoineesta ami-25 nohappo-lähtöaineesta laskien. Eluoimalla hartsi 2-norm.

ammoniakilla saatiin 0,4 g (50 %) aminohappo-lähtöainetta.

Lähtöaineena käytettyä (3-fenyylipropionyyli )fosfo-nihappoa valmistettiin seuraavasti: (A) 10,7 g trimetyylisilyylibromidia lisättiin ti-30 puttamalla huoneen lämpötilassa tunnin kuluessa 8,5 grammaan dimetyyli-(3-fenyylipropionyyli)fosfonaattia. Seosta sekoitettiin sitten edelleen tunnin ajan ja haihdutettiin sitten kuiviin 30°C:ssa/0,l mmHg:n vakuumissa, jolloin saatiin 12,5 g bis(trimetyyllsilyyli)-(3-fenyylipropionyy-35 li)fosfonaattia vaaleankeltaisena öljynä. Tätä öljyä käy- 28 81 530 tettiin seuraavassa vaiheessa enempää puhdistamatta.

(B) 6,3 g bis(trimetyylisilyyli)-(3-fenyylipropio-nyyli)£os£onaattia sekoitettiin 100 ml:ssa vettä huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Saatu öljyinen seos uutettiin 5 kahdella 50 ml:n erällä dietyylieetteriä ja vesikerrosta, jossa oli noin 3,7 g (3-fenyylipropionyyli)fosfonihappoa, käytettiin enempää puhdistamatta tämän esimerkin ensimmäisessä kappaleessa selostetussa menetelmässä.

Esimerkki 8 10 Samalla tavalla kuin on selostettu esimerkin 1 en simmäisessä kappaleessa, 90 mg:sta 8-amino-l,4,6,7,8,9-heksahydro-6,9-dioksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-kar-boksyylihappoa saatiin 8-(l-karboksl-3-fenyylipropyyllami-no)-l,4,6,7,8,9-heksahydro-6,9-dioksopyridatso [ 1,2-a] pyri-15 datsilni-l-karboksyylihappoa lyofilisoituneena diastereo-meerien seoksena.

Lähtöaineena käytettyä 8-amino-l,4,6,7,8,9-heksa-hydro-6,9-dioksopyridätso[1,2-a]pyridätsi ini-1-karboksyy-lihappoa valmistettiin seuraavasti: 20 (A) 6,3 ml tert.-butyyli-hypokloriittia lisättiin -20°C:ssa sekoitettuun suspensioon, jossa oli 10 g 4-bro-mi-3,6-diokso-l,2,3,6-tetrahydropyridatsiinia ja 5,83 g metyyli-pentadienoaattia 150 ml:ssa dikloorimetaania. Suspensiota sekoitettiin -20°C:ssa typen suojaamana 8 tuntia 25 ja sitten edelleen 20°C:ssa 17 tuntia. Suodattamalla poistettiin 5,7 g reagoimatonta 4-bromi-3,6-diokso-l,2,3,6-tetrahydropyridatsiinia ja suodos haihdutettiin kuiviin. Saatiin 2,5 g metyyli-8-bromi-l,4,6,9-tetrahydro-6,9-dioksopyridatso [1,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattia valkeina 30 kiteinä, joiden sulamispiste oli 201-203eC (asetonista). Kromatogra£oimalla emäliuos silikageelillä, käyttämällä eluointiin etyyliasetaatti/n-heksaani-seosta (til.suhde 1:1), saatiin 1,2 g metyyli-7-bromi-l,4,6,9-tetrahydro- 6,9-dioksopyridatso[l, 2-a] pyridatsiini-l-karboksylaattia 35 valkeina kiteinä, joiden sulamispiste oli 137-141eC (toil 29 81 580 lueenista).

(B) 2,1 g metyyli-8-bromi-1,4,6,9-tetrahydro- 6,9 -dioksopyr idät so [ 1,2 - a ] pyr idat si ini -1 - kar boksy 1 aa 11 i a ja 0,9 g natriumatsidia lämmitettiin kiehuttaen 50 ml:ssa 5 asetonia 8 tuntia. Liuotin poistettiin vakuumissa ja jäännös jaettiin etyyliasetaattiin ja veteen liukeneviin osiin. Orgaanisesta kerroksesta saatiin, etyyliasetaat-ti/n-heksaaniseoksesta uudelleen kiteyttämisen jälkeen, 1,06 g metyyli-8-atsido-l,4,6,9-tetrahydro-6,9-dioksopyri-10 datso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattia, jonka sulamispiste oli 123-126“C.

(C) Liuosta, jossa oli 1 g metyyli-8-atsido-l,4,6, 9 -1 e t r ahydro - 6,9-dioksopyridatso[l, 2-a] pyridatsiini-l-kar-boksylaattia ja 1 g trifenyylifosfiinia 15 ml:ssa diok- 15 saania, sekoitettiin 20°C:ssa 2 tuntia. Kuiviin haihduttamisen jälkeen jäännöstä sekoitettiin 20*C:ssa 40 ml:n kanssa 2-norm. suolahappoa tunnin ajan. Trifenyylifos-fiinioksidi poistettiin suodattamalla ja suodos kyllästettiin natriumkloridilla ja uutettiin kloroformiin. Kloro-20 formiuutteesta eristettiin 0,74 g metyyli-8-amino-l,4,6,9-tetrahydro- 6,9 -dioksopyr idat so [ 1,2 -a ] pyr idat si ini -1 -kar-boksylaattia vaaleankeltaisina kiteinä, joiden sulamispiste oli 193-194eC (etyyliaeetaatti/n-heksaaniseoksesta).

(D) 100 mg metyyli-8-amino-l,4,6,9-tetrahydro-6,9- 25 dioksopyridatso[1,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattia liuotettiin 4 ml:aan kuivaa metanolia ja pH säädettiin arvoon 4 kloorivedyn metanoliliuoksella. Lisättiin 26 mg natriumsyaaniboorihydridiä ja seosta sekoitettiin 20°C:ssa 24 tuntia. Lisättiin vielä 26 mg natriumsyaaniboorihydri-30 diä j a seosta sekoitettiin edelleen 24 tuntia. Koko reaktion ajan pH pidettiin arvossa 4 lisäämällä silloin tällöin kloorivedyn metanoliliuosta. Liuos haihdutettiin kuiviin ja jäännös jaettiin laimeaan suolahappoon ja kloroformiin liukeneviin osiin, jolloin orgaanisesta kerrokses-35 ta saatiin 75 mg reagoimatonta lähtöainetta» Vesikerros 30 81 5 80 tehtiin emäksiseksi natriumvetykarbonaatilla ja uutettiin kloroformilla. Haihduttamalla kloroformiuutteet kuiviin saatiin 25 mg metyyli-8-amino-l,4,6,7,8,9-heksahydro-6,9-dioksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattia val-5 keina kiteinä, joiden sulamispiste oli 174-175°C (hajoten) (etyyliasetaatista).

(E) 120 mg metyyli-8-amino-l,4,6,7,8,9-heksahydro- 6,9-dioksopyridatso[l, 2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattia sekoitettiin 10 ml:n kanssa metanolia ja 0,32 ml:n kanssa 10 2-norm. natriumhydroksidiliuosta OeC:ssa 45 minuuttia.

Saatu liuos haihdutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin veteen ja pantiin kolonniin, jossa oli 10 g sulfonihappo-ioninvaihtohartsia. Kolonni pestiin vedellä ja sitten, eluoimalla 2-norm. ammoniumhydroksidilla, saatiin 100 mg 15 8-amino-l,4,6,7,8,9-heksahydro-6,9-dioksopyridatso- [1,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappoa valkean lyofili-saatin muodossa.

Esimerkki 9

Seosta, jossa oli 0,873 g metyyli-8-bromi-oktahyd-20 ro-9-oksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattia (rasemaattia A), 1,016 g etyyli-Ne-bentsyylioksikarbonyy-li-L-lysinaattia ja 0,303 g trietyyliamiinia 5 ml:ssa dime tyyliformamidi a, sekoitettiin 60°C:ssa 16 tuntia. Liuotin poistettiin haihduttamalla kuiviin ja jäännös jaettiin 25 dikloorimetaaniin ja kyllästettyyn natriumvetykarbonaatin vesiliuokseen liukeneviin osiin. Orgaaninen kerros erotettiin, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Saatu öljy kromatografoitiin silikageelillä. Eluoimalla dletyylieetteri/metanoli-seoksella (19:1) saa-30 tiin 0,933 g (60 %) metyyli-8-(5-bentsyylioksiformamido-l- etoksikarbonyylipentyyliamino)-oktahydro-9-oksopyridat-so[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattia (2 diastereomee-rla) vaaleankeltaisena öljynä.

Esimerkki 10 35 Liuos, jossa oli 160 mg natriumhydroksidia 10

II

31 81580 ml:ssa vettä, lisättiin liuokseen, jossa oli 1,04 g metyy-li-8- (5-bentsyylioksiformamido-l-etoksikarbonyylipentyy-liamino) -oktahydro-9-oksopyridatso [ 1,2-a ] pyr idät si ini -1 -karboksylaattia (2 diastereomeeria) 10 ml:ssa metanolia ja 5 seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 3 tuntia. Sitten lisättiin vielä 80 mg natriumhydroksidia 5 ml:ssa vettä ja seosta sekoitettiin 2 tuntia. Saatu liuos pantiin 10 ml-:lle Zerolit 225-ioninvaihtohartsia (H*-muoto). Eluoimalla vedellä, jossa oli 2 % pyridiiniä, saatiin 600 mg (63 %) 10 8- (5-bentsyylioksif ormamido-l-karboksipentyyliamino) -ok- tahydro-9-oksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karbok-syylihappoa (2 diastereomeeria) valkeana kiinteänä aineena (metanoli/asetonitriili-seoksesta).

Esimerkki 11 15 Seosta, jossa oli 250 mg 8-(5-bentsyylioksiformami- do-l-karboksipentyyliamino)-oktahydro-9-oksopyridatso-[1,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappoa (2 diastereomeeria) 25 ml:ssa metanolia, hydrattiin 50 mg:11a 10 %:ista palladiumhiiltä 2,5 tuntia. Katalyytti poistettiin suodat-20 tamalla ja suodos haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 80 mg (45 %) 8-(5-amino-l-karboksipentyyliamino)-oktahyd-ro-9-oksopyridätso[1,2-a]pyridätsiini-1-karboksyy1ihappoa (2 diastereomeeria) valkeana kiinteänä aineena (asetonit-riilistä).

25 Esimerkki 12

Seosta, jossa oli 2,91 g metyyli-8-bromi-oktahydro- 9-oksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattia, 2,48 g metyyli-2-amino-5-fenyylipentanoaattia ja 1,01 g trietyyliamiinia 20 ml:ssa dimetyyliformamidia, sekoitet-30 tiin 60°C:ssa 18 tuntia. Liuottimet poistettiin haihduttamalla kuiviin ja jäännös jaettiin dikloorimetaaniin ja kyllästettyyn natriumvetykarbonaatin vesiliuokseen liukeneviin osiin. Orgaaninen kerros erotettiin, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Kromatogra-35 foimalla jatkuvasti saatua öljyä silikageelillä saatiin 32 81 560 ensin 0,97 g (23 %) metyyli-8-(l-metoksikarbonyyli-4-fe-nyylibutyyliamino)-oktahydro-9-oksopyridatso[1,2-a]pyri-datsiini-l-karboksylaattla (rasemaattia A) vaaleankeltaisena öljynä ja toiseksi 1,77 g (42 %) metyyli-8-(1-metok-5 si-karbonyyli-4-fenyylibutyyliamino )-oktahydro-9-oksopyri- datso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattia (rasemaattia B) vaaleankeltaisena öljynä.

Esimerkki 13

Liuos, jossa oli 210 mg natriumhydroksidia 13 10 ml:ssa vettä, lisättiin liuokseen, jossa oli 740 mg metyy--i-8-(l-metoksikarbonyyli-4-fenyylibutyyliamino)-oktahyd-ro-9-oksopyridatso[1,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattia (rasemaattia A) 13 ml:ssa metanolia, ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 13 tuntia. Saatu liuos pantiin 15 25 ml:lie Zerolit 225-ioninvaihtohartsia (H*muoto). Eluoi- malla vedellä, jossa oli 2 % pyridiiniä, saatiin 0,48 g (69 % ) 8-(l-karboksi-4-fenyylibutyyliamino)-oktahydro-9- oksopyridatso[l,2-a]pyrldatsiini-l-karboksyylihappoa (ra-semaattia A) valkeana kiinteänä aineena, joka metanolin 20 vesiliuoksesta kiteyttämisen jälkeen suli 192-194®C:ssa (hajoten).

Esimerkki 14

Liuos, jossa oli 240 mg natriumhydroksidia 15 ml: ssa vettä, lisättiin liuokseen, jossa oli 834 mg me- 25 tyyli-8-(l-metoksikarbonyyli-4-fenyylibutyyliamino)-okta- hydro-9-oksopyridatso[l, 2-a] pyridatsiini-l-karboksylaattia (rasemaattia B) 15 ml:ssa metanolia, ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 3 tuntia. Saatu liuos pantiin 20 ml:lie Zerolit 225-ioninvaihtohartsia (H*-muoto). Eluoi-30 maila vedellä, jossa oli 2 % pyridiiniä, saatiin 0,48 g (61 %) 8-(l-karboksl-4-fenyyllbutyyliamlno)-oktahydro-9- oksopyridatso[l,2-a]pyridatsilnl-l-karboksyylihappoa (rasemaattia B) valkeana kiinteänä aineena, joka metanolin vesiliuoksesta kiteyttämisen jälkeen suli 213°C:ssa (hajo-35 ten).

li

33 8 1 5 SO

Esimerkki 15

Seosta, jossa oli 2,04 g metyyli-8-bromi-oktahydro- 9-oksopyridatso[l,2-a]pyrldatsilni-l-karboksylaattia, 1,23 g metyyli-2-amino-5-metyyliheksanoaattia ja 0,71 g 5 trietyyliamiinia 15 ml:ssa dimetyyliformamidia, sekoitettiin 60°C:ssa 24 tuntia ja sitten huoneen lämpötilassa 48 tuntia. Liuottimet poistettiin haihduttamalla kuiviin ja jäännös jaettiin dikloorimetaaniin ja kyllästettyyn nat-riumvetykarbonaatin vesiliuokseen liukeneviin osiin. Or-10 gaaninen kerros erotettiin, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Kromatografoimalla jatkuvasti saatua öljyä silikageelillä saatiin ensin 0,35 g (14 %) metyyli-8-(l-metoksikarbonyyli-4-metyylipentyyliamino)-oktahydro-9-oksopyridatso-[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksy-15 laattia (rasemaattia A) valkeana kiinteänä aineena, jonka sulamispiste oli 81 - 84eC (etyyliasetaatti/n-heksaani-seoksesta) Ja toiseksi 0,15 g (6 %) metyyli-8-(1-metok-sikarbonyyli-4-metyylipentyyliamino) -oktahydro-9-oksopyri-datso[l, 2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattia (rasemaattia B) 20 vaaleankeltaisena öljynä.

Esimerkki 16

Liuos, jossa oli 156 mg natriumhydroksidia 8 mlrssa vettä, lisättiin liuokseen, jossa oli 490 mg metyyli-8-(1-metoksikarbonyyli-4-metyylipentyyliamino) -oktahydro9-ok-25 sopyridatso[1,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattia (rase maattia A) 8 ml:ssa metanolia ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 3 tuntia. Saatu liuos pantiin 20 ml:lie Zerolit 225-ioninvaihtohartsia (H*-muoto). Eluoimalla vedellä, jossa oli 2 % pyridiiniä, saatiin 210 mg (47 %) 30 8-(l-karbok8i-4-metyylipentyyliamino)-oktahydro-9-oksopy- rldatso[1,2-a]pyridatsiini-l-karboksyyllhappoa (rasemaattia A) valkeana kiinteänä aineena, joka vesi/asetonitrii-liseoksesta kiteyttämisen jälkeen suli 181-184*C:ssa (hajoten).

35

34 81 5 & O

Esimerkki 17

Liuos, jossa oli 48 mg natriumhydroksidia 3 ml:ssa vettä, lisättiin liuokseen, jossa oli 150 mg metyyli-8-(1-metoksikarbonyyli-4-metyylipentyyliamino)-oktahydro-9-5 oksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattia (rase-maattia B) 3 ml:ssa metanolia ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2,5 tuntia. Saatu liuos pantiin 8 ml:lie Zerolit 225-ioninvaihtohartsia (H*-muoto). Eluoimalla vedellä, jossa oli 2 % pyridiiniä, saatiin 66 mg (48 %) 10 8-(l-karboksi-4-metyylipentyyliamino)-oktahydro-9-oksopy- ridatso[l,2-a]pyridatslinl-l-karboksyylihappoa (rase- maattia B) valkeana kiinteänä aineena, joka vesi/asetonit-riili-seoksesta kiteyttämisen jälkeen suli 190-191eC:ssa (hajoten).

15 Esimerkki 18

Seosta, jossa oli 2,91 g metyyli-8-bromi-oktahydro- 9-oksopyridätso[1,2-a]pyridätsiini-1-karboksylaattia, 3,5 g metyyli-N6-(3-fenyylipropionyyli)-L-lysinaattia ja 1,01 g trietyyliamiinia 10 ml:ssa dimetyyliformamidia, 20 sekoitettiin 60°C:ssa 18 tuntia. Liuottimet poistettiin haihduttamalla kuiviin ja jäännös jaettiin dikloorimetaa-niin ja kyllästettyyn natriumvetykarbonaatin vesiliuokseen liukeneviin osiin. Orgaaninen kerros erotettiin, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Saatu 25 öljy kromatografioitiin silikageelillä. Eluoimalla dietyy- lieetteri/metanoli-seoksella (19:1) saatiin 2,6 g (52 %) metyyli-oktahydro-8-[l-metoksikarbonyyli-5-(3-fenyylipro-pionlamido)pentyyliamino] -9-oksopyridatso[l,2-a]pyridat-siini-l-karboksylaattia (2 diastereomeeria) vaaleankeltai-30 sena öljynä.

Esimerkki 19

Liuos, jossa oli 480 mg natriumhydroksidia 20 ml:ssa vettä, lisättiin liuokseen, jossa oli 2,08 g metyy-lioktahydro-8- [l-metoksikarbonyyli-5-( 3-fenyylipropioni-35 amido)pentyyliamino]-9-oksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-

II

35 81 580 1-karboksylaattia (2 diastereomeeria) 20 ml:ssa metanolia ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 3 tuntia. Saatu liuos pantiin 40 ml:lie Zerolit 225 ioninvaihtohart-sia (H*-muoto). Eluoimalla vedellä, jossa oli 2 % pyridii-5 niä, saatiin 920 mg (48 %) 8-[l-karboksi-5-(3-fenyylipro-pioniamido)pentyyliamino]-oktahydro-9-oksopyridatso-[1,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappoa (2 diastereomeeria) valkeana kiinteänä aineena (vesi/asetonitriili-seok-sesta).

10 Esimerkki 20

Seosta, jossa oli 1,75 g metyyli-8-bromi-oktahydro- 9-oksopyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksylaattia,2,46 g etyyli-N6-bentsyylikarbamoyyli-L-lysinaattia ja 0,61 g trietyyliamiinla 10 ml:ssa dimetyyliformamidia, sekoitet-15 tiin 60°C:ssa 24 tuntia ja sitten huoneen lämpötilassa 16 tuntia. Liuottimet poistettiin haihduttamalla kuiviin ja jäännös jaettiin dikloorimetaaniin ja kyllästettyyn nat-riumvetykarbonaatin vesiliuokseen liukeneviin osiin. Orgaaninen kerros erotettiin, kuivattiin magnesiumsulfaatil-20 la ja haihdutettiin kuiviin. Saatu öljy kromatografioi-tiin silikageelillä. Eluoimalla dikloorimetaani/metanoli-seoksella (9:1) saatiin 1,14 g (37 %) metyyli-8-[5-(3-bentsyyliureido-l-etokslkarbonyyli )pentyyliamino] -oktahyd-ro-9-oksopyridatso[l,2-a3pyridatsilnl-l-karboksylaattla 25 (2 diastereomeeria) vaaleankeltaisena öljynä.

Esimerkki 21

Liuos, jossa oli 80 mg natriumhydroksidia 10 ml:ssa vettä, lisättiin liuokseen, jossa oli 775 mg metyyli-8-[5-(3-bentsyyliureido-l-etoksikarbonyyll)pentyyliamino]okta-30 hydro-9-oksopyridatso[ 1,2-a] pyridatsiini-l-karboksylaattia (2 diastereomeeria) 10 ml:ssa metanolia ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2 tuntia. Sitten lisättiin vielä 40 mg natriumhydroksidia 5 ml:ssa vettä ja seosta sekoitettiin 2 tuntia. Saatu liuos pantiin 30 ml:lie 35 Zerolit 225-ioninvaihtohartsia (H+-muoto). Eluoimalla ve- 36 81 580 dellä, jossa oli 2 % pyridiiniä, saatiin 370 mg (52 %) 8- [ 5- (3-bentsyyliureido-l-karboksi )pentyyliamino] -oktahyd-ro-9-oksopyrldatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappoa lyofilisoituneena diastereomeerien seoksena.

5 Esimerkki 22

Seosta, jossa oli 2,91 g metyyli-8-bromi-oktahydro- 9- oksopyridätso[1,2-a]pyridatsiini-1-karboksylaattia,3,77 g metyyli-N2-tolyylisulfonyyli-L-lysinaattia Ja 1,01 g tri-etyyliamiinia 20 ml:ssa dimetyyliformamidia, sekoitettiin 10 60°:ssa 18 tuntia. Liuottimet poistettiin haihduttamalla kuiviin ja jäännös jaettiin dikloorimetaaniin ja kyllästettyyn natriumvetykarbonaatin vesiliuokseen liukeneviin osiin. Orgaaninen kerros erotettiin, kuivattiin magnesium-sulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Saatu öljy kromato-15 grafoitiin silikageelillä. Eluoimalla dietyylieetteri/me-tanoli-seoksella (19:1) saatiin 3,63 g (69 %) metyyliok-tahydro-8- [ l-metoksikarbonyyli-5- (p-tolueenisulf oniamido) -pentyyliamino]-9-oksopyridatso[l, 2-a]pyridatsiini-l-kar-boksylaattia (2 diastereomeeria) vaaleankeltaisena öljynä. 20 Esimerkki 23

Liuos, jossa oli 160 mg natriumhydroksidia 10 ml:ssa vettä, lisättiin liuokseen, jossa oli 1,05 g metyy-lioktahydro-8-[l-metoksikarbonyyli-5-(p-tolueenisulf oniamido )pentyyli amino] -9-oksopyridatso[ 1,2-a]pyridatsiini-l-25 karboksylaattia (2 diastereomeeria) 15 ml:ssa metanolia ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2,5 tuntia. Sitten lisättiin vielä 80 mg natriumhydroksidia 5 mlzssa vettä ja seosta sekoitettiin tunnin ajan. Saatu liuos pestiin 40 ml:lie Zerolit 225-ioninvaihtohartsia (H*-muoto). Eluoi-30 maila vedellä, jossa oli 2 % pyridiiniä saatiin 552 mg (56 %) 8-[l-karboksi-5-(p-tolueenisulfoniamido)-pentyyli-amino] -oktahydro-9-oksopyridatso[l, 2-a]pyridatsiinl-l-kar-boksyy1ihappoa (2 diastereomeeria) valkeana kiinteänä aineena .

35

II

37 81 5 tO

Esimerkki 24

Seosta, jossa oli 1,05 g metyyli-8-bromi-oktahydro- 9-oksopyridätso[1,2-a]pyridatsiini-1-karboksylaattia, 1,81 g etyyli-N6-(6-bentsyylioksiformamidoheksanoyyli)-L-5 lysinaattia ja 0,61 g trietyyliamiinia 8 ml:ssa dimetyyli-formamidia, sekoitettiin 70°C:ssa 18 tuntia. Liuottimet poistettiin haihduttamalla kuiviin ja jäännös jaettiin di-kloorimetaaniin ja kyllästettyyn natriumvetykarbonaatin vesiliuokseen liukeneviin osiin. Orgaaninen kerros ero-10 tettiin, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Saatu öljy kromatografloitiin silikageelillä. Eluoimalla dikloorimetaani/metanoli-seoksella (9:1) saatiin 1,21 g (53 %) metyyli-8-[[5-(6-bentsyylioksiformami-doheksaani ami do) -1 -etok sika r bonyy 1 i]pentyyllamino]-okta-15 hydro-9-oksopyridatso[l, 2-a] pyridatsiini-l-karboksylaattia (2 diastereomeeria) vaaleankeltaisena öljynä.

Esimerkki 25

Liuos, jossa oli 115 mg natriumhydroksidia 8 ml:ssa vettä, lisättiin liuokseen, jossa oli 900 mg metyyli-8-20 [ [ 5- (6-bentsyylioksif ormamidoheksaaniamido )-1-etoksikar- bonyyli ] pentyyli amino] -oktahydro-9-oksapyridatso [ 1,2-a] pyridatsiini-l-karboksylaattia (2 diastereomeeria) 12 mltssa metanolia ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 2,5 tuntia. Sitten lisättiin vielä 57 mg natriumhydroksidia 4 25 ml:ssa vettä ja seosta sekoitettiin 2,5 tuntia. Saatu liuos pantiin 30 ml :11a Zerolit 225-ioninvaihtohartsia (H*-muotoa). Eluoimalla vedellä, jossa oli 2 % pyridiiniä, saatiin 320 mg (38 %) 8-[[5-(6-bentsyylioksiformamidoheksaaniamido )-1-karboksi]pentyyliamino]-oktahydro-9-oksopy-30 ridatso[1,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappoa (2 diaste reomeeria) valkeana kiinteänä aineena.

Esimerkki 26

Samalla tavalla kuin esimerkissä 2 on selostettu 1,78 grammasta 8-amino-l,4,6,7,8,9-heksahydro-6,9-diokso-35 pyridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappoa saatiin 38 81 5 60 30 %:n saannoin (reagoineesta aminohappo-lähtöaineesta laskien) 0,54 g 8(S)-[l-(R,S)-etoksikarbonyyli-3-fenyyli-propyyliamino] -1,4,6,7,8,9-heksahydro-6,9-dioksopyridatso-[1,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappoa öljyn muodossa.

5 Diastereomeerit erotettiin kromatografoimalla silikagee-lillä (eluoimalla 5 %:isella etikkahapon dietyylieetteri-liuoksella), jolloin saatiin kahta kiinteätä ainetta, joiden sulamispisteet olivat 166-167eC ja 183-184°C (etyyli-asetaatti/n-heksaaniseoksesta).

10

II

Claims (10)

1. 3« 81 5 SO
2. 1. Menetelmä uusien, terapeuttisesti käyttökelpoisten heksahydro-, oktahydro-9-okso- Ja 6,9-dioksopyridat-5 so[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihappojen ja niiden esterien valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava I "Ύ 10 df SN//\ F | I (1) ^CH m j) r1-ch-h^ ' c' Y r2 0 C00RJ 15 jossa pisteviiva merkitsee mahdollista lisäsidosta, R1 merkitsee Cj^-alkyyli-, fenyyli-C^-alkyyli-, amino-C^-alkyy-li-, fenyyli-C1.4-alkyylikarbonyyliamino-C1.4-alkyyli-, fe-nyyli-C1.4-alkoksikarbonyyliamino-C1.4-alkyyli-, fenyyli-C^-alkyyliaminokarbonyyliamino-C^-alkyyli- tai p-toluee-20 nisulfonyyliamino-C^-alkyyliryhmää, R2 merkitsee karbok-syyli- tai C^-alkoksikarbonyyliryhmää tai ryhmää, jolla on kaava i 0 | OH (i) 25 OH R3 merkitsee vetyastomia tai C^-alkyyliryhmää ja R4 ja R5 merkitsevät kumpikin vetyatomia tai R4 ja R5 yhdessä mer-30 kitsevät oksoryhmää, ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditio- ja emässuolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että a) yhdiste, jolla on yleinen kaava II 35 40 815S0 \/'s ί "Ο <«> γτ, ° COOR-3 jossa pisteviiva, R3, R4 ja R5 merkisevät samaa kuin edellä ja Hai merkitsee halogeeniatomia, saatetaan reagoimaan yh-10 disteen kanssa, jolla on yleinen kaava III R1 - CH - NHj | (III) R2 15 jossa R1 ja R2 merkitsevät samaa kuin edellä, tai b) alkyloidaan pelkistämällä yhdiste, jolla on yleinen kaava IV R4 ^r5 20 \ | 2 | : (IV) CH Nn. s? 1^3
3. 25. COOR jossa pisteviiva, R3, R4 ja R5 merkitsevät samaa kuin edellä, yhdisteellä, jolla on yleinen kaava V
4. 30 R1-C«0 I (V) R2 jossa R1 ja R2 merkitsevät samaa kuin edellä, tai 35 c) yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava I, 11 4i 81 SCO jossa R2 merkitsee karboksyyliryhmää ja/tai R3 merkitsee vetyatomia, kaavan I mukaista yhdistettä, jossa Rz merkitsee C^-alkoksikarbonyyliryhmää ja/tai R3 merkitsee C^-alkyyliryhmää, käsitellään hapolla tai emäksellä, tai 5 d) yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava I, jossa R1 merkitsee amino-C1.4-alkyyliryhmää, fenyyli-C1.4-al-koksikarbonyyliryhmä lohkaistaan katalyyttisesti hydraa-malla vastaavasta kaavan I mukaisesta yhdisteestä, jossa R1 merkitsee fenyyli-C^-alkoksikarbonyyliamino-C^-alkyyli- 10 ryhmää, ja 1. haluttaessa, erotetaan saatu diastereoisomeeri-seos diastereoisomeeri-rasemaatiksi tai optisesti puhtaiksi diastereoisomeereiksi, ja/tai 2. haluttaessa, erotetaan saatu rasemaatti kahdeksi 15 antipodiksi, ja 3. haluttaessa, kaavan I mukaisen yhdiste muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi happoadditio- tai emäs-suolaksi .
5. 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 20 tunnettu siitä, että valmistetaan 8(S)-(l-karboksi- 3-fenyylipropyyliamino)-oktahydro-6,9-dioksopyridatso-[1,2-]pyridatsiini-l-karboksyylihappo.
6. 3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 8-(l-karboksi-3- 25 fenyylipropyyliamino)-oktahydro-9-oksopyridatso[l,2-a]py- ridätsiini-l-karboksyylihappo. 4. 8-halogeeni-heksahydro- ja -oktahydro-9-oksopy-ridatso[l,2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihapot ja niiden alkyyliesterit, jotka ovat käyttökelpoisia välituotteina 30 patenttivaatimuksen 1 mukaisessa menetelmässä a) ja joilla on yleinen kaava Ha \ „ CH, (Ha)
7. 35 I 2 I :] CH il J? Hal^ ^ il I ,
8. 0 COOR·3 42 81 560 jossa pisteviiva merkitsee mahdollista lisäsidosta ja R3 merkitsee vetyatomia tai C1.4-alkyy li ryhmää.
9. 5. Heksahydro- ja oktahydro-8-amino-9-okso- ja -6,9-dioksopyridatso[l, 2-a]pyridatsiini-l-karboksyylihapot 5 ja niiden alkyyliesterit, jotka ovat käyttökelpoisia välituotteina patenttivaatimuksen 1 mukaisessa menetelmässä b) ja joilla on yleinen kaava IV R\ ^r5 10 \ ^ ί 'O ¥ i I
10. 15. COOR3 jossa pisteviiva merkitsee mahdollista lisäsidosta, R3 merkitsee vetyatomia tai C^-alkyyliryhmää ja R4 ja R5 merkitsevät kumpikin vetyatomia tai R4 ja R5 yhdessä merkitsevät 20 oksoryhmää. Il 43 81 580