FI72124C - Foerfarande foer tillvaratagande av interferon. - Google Patents

Foerfarande foer tillvaratagande av interferon. Download PDF

Info

Publication number
FI72124C
FI72124C FI802566A FI802566A FI72124C FI 72124 C FI72124 C FI 72124C FI 802566 A FI802566 A FI 802566A FI 802566 A FI802566 A FI 802566A FI 72124 C FI72124 C FI 72124C
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
interferon
water
heparin
insoluble
human
Prior art date
Application number
FI802566A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI72124B (fi
FI802566A (fi
Inventor
Yahiro Uemura
Hirofumi Arimura
Hiroshi Morise
Satoshi Funakoshi
Tadakazu Suyama
Original Assignee
Green Cross Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Green Cross Corp filed Critical Green Cross Corp
Publication of FI802566A publication Critical patent/FI802566A/fi
Publication of FI72124B publication Critical patent/FI72124B/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI72124C publication Critical patent/FI72124C/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/555—Interferons [IFN]
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/811—Interferon
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
    • Y10S530/829—Blood
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
    • Y10S530/837—Lymph; lymph-glands; thymus
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
    • Y10S530/838—Marrow; spleen
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
    • Y10S530/848—Lungs

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

G3=^l KUULUTUSjULKAISU
β ^ UTLÄGG NIN GSSKRIFT ^ ^ C (45) Nyo::: v tty ^ ^ ^ ^ ' (51) Kv.ik.‘/lnt.ci.« C 07 K 3/20, 15/26, C 12 P 21/00 g y q |^| | FINLAND (21) Patenttihakemus — Patentansökning 802566 (22) Hakemispäivä — Ansökningsdag 1 4.08.80 (F·) (23) Alkupäivä — Glltighetsdag 1 4.08.80 (41) Tullut julkiseksi — Blivit olfentlig 06.04.8 1
Patentti- ja rekisterihallitus (44) Nähtäväksipanon ja kuul.julkaisun pvm.— i ] ] £ 86
Patent- och registerstyrelsen V ' Ansökan utlagd och utl.skriften publicerad (86) Kv. hakemus — Int. ansökan (32)(33)(31) Pyydetty etuoikeus — Begärd prioritet 05-10.79 Japani-Japan(JP) 128513/79 (71) The Green Cross Corporation, 1-47, Chuo-1-chome, Joto-ku, Osaka,
Japan i-Japan(JP) (72) Yahiro Uemura, Hirakata-shi, Hirofumi Arimura, Toyonaka-shi,
Hiroshi Mori se, Hirakata-shi, Satoshi Funakoshi, Katano-shi,
Tadakazu Suyama, Kyoto, Japani-Japan(JP) (74) Oy Kolster Ab (54) Menetelmä interferonin ta 1teenottamiseksi -Förfarande för ti11varatagande av interferon
Keksinnön kohteena on menetelmä interferonin talteenottami-seksi, jolloin ihmisperäisten indusoitujen solujen tuottamaa interferonia sisältävä liuos saatetaan kosketukseen veteen liukenemattomaksi tehdyn adsorbentin kanssa interferonin adsorboimiseksi veteen liukenemattomaksi tehdylle adsorbentille ja sen jälkeen interferoni eluoidaan epäorgaanisen suolan vesiliuoksella.
Interferoni on tietyn tyyppinen glykoproteiini, jonka muodostumista ihmisen tai muiden eläinten soluissa indusoi virus- tai muut ärsykkeet. Interferoni vaikuttaa ehkäisevästi virusten, bakteerien tai alkueläinten kasvuun soluissa. Lajispesifisyyden vuoksi interferonin käyttämiseksi ihmisellä lääkeaineena on välttämätöntä saada ihmissoluissa tuotettua interferonia. Ihmisen interferonin suurten määrien saamiseksi on välttämätöntä kerätä suuri määrä ihmisen imusoluja, ihmisen sidekudosemosoluja tai vakiintuneen sukupolven ihmisen varhaisimusoluja, ärsyttää niitä sitten sopivin keinoin tuottamaan interferonia ja ottaa muodostunut in- 2 72124 terferoni talteen suurella saannolla. Tavanomaiset interferonin talteenottomenetelmät ovat menettelyltään kuitenkin liian monimutkaisia ja ne ovat liian aikaavieviä suoritettaviksi kaupallisessa mitassa ja lisäksi niillä saatavat saannot ovat pieniä.
US-patenttijulkaisu 4 041 152 koskee lääkeaineita, jotka sisältävät interferonia, joka on tehty veteen liukenemattomaksi sitomalla se kantajaan, esimerkiksi Sepharose-tuotteeseen. Tämän julkaisun mukaan polysakkaridia, esimerkiksi sulfatoitua polysakkaridia käytetään kantajana. Kantaja aktivoidaan BrCN:llä tai etanoliamiinilla ja sen jälkeen se yhdistetään ihmisperäiseen interferoniin kovalenttisilla sidoksilla. Vaihtoehtoisesti interferoni liitetään kantajaan, joka sisältää konkonavaliini A:ta, veteen liukenemattoman interferonivalmisteen saamiseksi. Tällä tunnetulla keksinnöllä pyritään parantamaan tuotteen terapeuttista tehoa parantamalla interferonin biologista tehoa syntetisoimalla sen johdannaisia.
Sitävastoin esillä olevassa keksinnössä hepariinia käytetään interfenonin adsorboimiseen liuoksesta, jolloin interferoni on helppo eristää adsorbentiltä ja lopuksi puhdistaa. Täten esillä oleva keksintö eroaa edellä mainitusta tunnetusta keksinnöstä sekä keksinnön tarkoituksen että keksinnön vaikutuksen osalta.
FR-patenttijulkaisu 23 51 665 koskee menetelmää interferonin puhdistamiseksi, jossa menetelmässä interferoni-affUnisena aineena käytetään Cibacron Blue F3GA-nimistä ainetta, kun taas esillä olevassa keksinnössä käytetään interferoni-affiinisena aineena hepariinia.
Julkaisussa Biochemistry 15 (1976) 5182 käsitellään kiinnitetyn Cibacron Blue F3GA:n ja interferonin yhdistelmää. Tässä julkaisussa ei kuitenkaan esitetä interferonin puhdistusta hepa-riinin avulla.
Julkaisussa Pharmacia Fine Chemicals Affinity Chromatography, Principles and Methods, Örebro, Ruotsi, kesäkuu 1979, s. 64 käsitellään interferonin eristämistä käyttämällä adsorbenttina poly-uridyylihappo-Sepharose 4B:tä. Tällöin interferoni-affiinisena aineena käytetään polyuridyylihappoa. Kuten jo edellä on esitetty käytetään keksinnön mukaisessa menetelmässä hepariinia interfero-ni-affiinisena ryhmänä.
li 3 72124 Tämän keksinnön tekijät ovat tutkineet useita vuosia menetelmiä, joilla olisi helppo ottaa talteen interferonia ja suurilla saannoilla. Tällöin havaittiin ensimmäistä kertaa, että sulfa-toidulla polysakkaridilla, kuten hepariinilla, kondroitiinisulfaa-tilla, dekstraanisulfaatilla ja sen kaltaisilla yhdisteillä on kyky sitoa interferonia spesifisesti. Jatkotutkimuksissa havaittiin, että suuri määrä interferonia voidaan ottaa teollisessa mitassa talteen lyhyessä ajassa, kun ihmisperäisten indusoitujen solujen tuottamaa interferonia sisältävä liuos saatetaan kosketukseen veteen liukenemattomaksi tehdyn adsorbentin kanssa interferonin adsorboimiseksi veteen liukenemattomaksi tehdylle adsorbentille ja sen jälkeen interferoni eluoidaan epäorgaanisen suolan vesiliuoksella.
Tämän keksinnön mukaiselle menetelmälle interferonin tal-teenottamiseksi on tunnusomaista, että veteen liukenemattomaksi tehtynä adsorbenttinä käytetään veteen liukenemattomaksi tehtyä hepariinia, jolta interferoni eluoidaan epäorgaanisen suolan vesi-liuoksella .
Tämän keksinnön mukaista menetelmää kuvataan seuraavassa yksityiskohtaisemmin.
Adsorbentin tekemiseksi veteen liukenamattomaksi on sopivaa noudattaa menetelmää, jonka P. Cuatrecasas /J.B.C., 245 (12) (1970) 3059? on esittänyt sulfatoidun polysakkaridin kiinnittämiseksi kan-toaineeseen. Se toteutetaan esimerkiksi aktivoimalla kantoaineena toimiva veteen liukenamatan suuren molekyylipainon omaava polysakkaridi, kuten esimerkiksi Sepharose-tuote, agaroosi tai selluloosa syaanibromidilla tai vesiliuoksella karbodi-imidillä ja antamalla aktivoidun materiaalin reagoida polysakkaridisulfaatin kanssa. Myös muita menetelmiä voidaan käyttää.
Hepariinin lähteinä voidaan käyttää hepariinia ja sen natrium- ja kaliumsuoloja. Tämän keksinnön mukaisessa menetelmässä interferonia sisältävä vesiliuos saatetaan kosketukseen veteen liukenemattomaksi tehdyn adsorbentin kanssa, jossa on kemiallisesti yhtynyttä hepariinia tai sen alkalimetallisuolaa.
Tämän keksinnön mukaisessa menetelmässä käytettäväksi tarkoitettu, interferonia sisältävä lähtöaine voi olla ihmisen solu- 4 72124 viljelmä, joka sisältää indusoitua interferonia tai materiaalia, joka on osittain puhdistettu siitä ammoniumsulfaattifraktioinnil-la, ioninvaihtoadsorbtiolla tai bentoniittiadsorbtiolla.
Hepariinin tiedetään adsorboivan antitrombiini-III:a tai muita veren hyytymistekijöitä. Jos on olemassa pelkoa tällaisten aineiden aiheuttamasta kontaminaatiosta, ne on poistettava ennen käyttöä tai prosessoinnin kuluessa. Tehokas keino tähän tarkoitukseen on bentoniittiadsorptio tai geelisuodatus. Yhdistämällä tämän keksinnön mukainen menetelmä näihin puhdistuskäsittelyihin on mahdollista saada erittäin puhdasta interferonia suuressa mittakaavassa .
Esimerkkejä muista puhdistusmenetelmistä, jotka sopivat käytettäväksi yhdessä keksinnön mukaisen menetelmän kanssa, ovat eta-nolifraktiointi (Tissue Culture Association, In Proceedings of a Tissue Culture Association Work Shop in Vitro, Raportti no. 3, 1973); menetelmä jossa pylväskromatografia ja geelisuodatus on yhdistetty käyttäen heikosti happamia ja heikosti emäksisiä io-ninvaihtimia (Japanilainen patentti nro. 34 442/76); menetelmä, jossa käytetään ammoniumkloridia tai dekstraania /Änn. Med. Exp. Bio. Fenn. 44 (1966) 265-273; Ditto 45 (1967) 20- 297;ja fraktioin-ti käyttäen vahvasti hapanta kationinvaihdinta (Japanilainen patenttihakemus Kokai nro 89 011/69).
Ihmisalkuperää olevat solut, jotka sopivat käytettäväksi tässä prosessissa, ovat valkosoluja, imusoluja, retikuloendoteeli-soluja, kuten ruoansulatuskanavan, keuhkon ja pernan soluja, viljeltyjä ihmisen varhaisimusolumaisia soluja ja muita tunnettuja soluja, jotka kykenevät tuottamaan interferonia. Tuottavuuden kannalta suositeltavia ovat ihmisen valkosolut ja viljellyt ihmisen varhaisimusolumaiset solut, erityisesti Namalva-sukua olevat. Navalma-suku on vakiintunut solusukupolvi, joka on valittu 20:stä vakiintuneesta imusolusukupolvesta, jotka ovat peräisin Burkitfin imukudoskasvain- ja leukemiapotilailta. Se tunnetaan soluna, joka tuottaa eniten interferonia /Intern. J. Cancer 11 (1973) 121J.
Vaikka interferonin erotuksessa käytettäväksi tarkoitettua veteen liukenemattomaksi tehtyä hepariinia tarvitsee vain pestä vedellä ennen käyttöä, sitä on suositeltavaa pitää tasapainotettuna puskuriliuoksella, jonka pH on 5-10. Puskuriliuos on suositel- 11 5 72124 tavaa säätää suolaväkevyyteen 0,5 mol/1 tai alle sen, edullisesti arvoon 0,3 mol/1 tai sen alle. Interferonia sisältävä vesiliuos on myös suositeltavaa säätää samaan suolaväkevyyteen ja samaan pH-arvoon kuin yllä mainittiin. Interferonin adsorbointi vesiliuoksesta suoritetaan esimerkiksi saattamalla epäpuhdasta interferonia sisältävä vesiliuos kosketukseen hepariinin kanssa, jota kannattaa edullisesti kolonniin pakattu liukenematon kantoaine.
Veteen liukenemattomaan hepariiniin adsorboitu interferoni eluoidaan kantoaineesta epäorgaanisen suolan vesiliuoksella, jonka suolaväkevyys on 0,5-2 mol/1. Vesiliuoksessa käytetty suola voi olla alkalimetalli tai maa-alkalimetallin epäorgaaninen suola, kuten natriumkloridi, kaliumkloridi, kalsiumkloridi tai natrium-sulfaatti. Näistä suoloista natriumkloridia on suositeltavinta käyttää. Lisäksi epäorgaaninen suola voi sisältää kondroitiini-sulfaattia. Adsorptio- ja eluointikäsittelyissä käytettäväksi tarkoitetun vesiliuoksen vetyioniväkevyys, ts. pH on 5-10.
Keksinnön mukaisella meentelmällä interferoni saadaan talteen suuremmin saannoin kuin tavanomaisesti käytetyillä menetelmillä. Tällä menetelmällä saannot ovat yli 70 % ja välttämättömiä käsittelyvaiheita ovat vain interferonin vesiliuoksen saattaminen kosketukseen liukenemattomaksi tehdyn hepariinin kanssa ja interferonin eluointi epäorgaanisen suolan vesiliuoksella. Koska nämä käsittelyvaiheet ovat sekä yksinkertaisia että helppoja suorittaa, tämä prosessi on sopiva interferonin kaupalliseen tuotantoon.
Keksintöä kuvataan seuraavassa esimerkein. Esimerkeissä interferonin voimakkuus määritettiin plakin 50 %:sen vähenemisen menetelmällä käyttäen rakkulasuutulehdusvirusta ja FL-solua, joka on peräisin ihmisen vesikalvosta. Interferonin tiitteri ilmoitettiin kansainvälisenä yksikkönä (IU) laskettuna testattavana olevan näytteen ja interferonin standardinäytteen analyysistä. //'Saishin Iyaku" (Modern Medicine) 29 (4) (1974) 66_θ7·
Esimerkki 1
Ihmisen laskimosta peräisin olevia imusoluja viljeltiin MEM-väliaineessa, joka sisälsi 0,25 % ihmisen albumiinia ja interferoni indusoitiin Sendai-viruksella. Viljelyneste säädettiin pH— arvoon 2 kloorivetyhapolla indusointiaineena käytetyn Sendai-viruk-sen inaktivoimiseksi. Saatu raakainterferonineste sentrifugoitiin 6 72124 yläpuolisen nesteen keräämiseksi talteen. Yhteen litraan yläpuolista nestettä lisättiin 2,0 g bentoniittiä interferonin adsor-boimiseksi. Bentoniitti kerättiin talteen sentrifugoimalla ja suspendoitiin 1 %:seen ammoniumsulfaattiliuokseen, jota seurasi sentrifugointi. Tämä käsittely toistettiin kolme kertaa pesten bentoniitti joka kerta epäpuhtaksien poistamiseksi. Pestyyn bento-niittiin sekoitettiin 0,5 % akrinoliliuosta (pH 2,5) ja sekoitettiin 37°C:ssa 30 minuuttia interferonin eluoimiseksi. Eluaatti säädettiin 4-N natriumhydroksidiliuoksella pH-arvoon 7 ja siihen lisättiin pieni määrä (5 g) CM-Sephadex (Pharmacia Co.)-tuotetta akri-nolin poistamiseksi adsorptiolla.
Valmistettiin hepariini-sepharose-kolonnin kiinnittämällä hepariinia Sepharose 4B-tuotteeseen, jota oli aktivoitu syaani-bromidilla P. Cuatrecasas'in menetelmän mukaisesti ja pakkaamalla hepariini-sepharose 50 ml:n kolonniin. Kolonni tasapainoitettiin 0,9 %:sella natriumkloridiliuoksella. Yllä saatu epäpuhdas eluaatti syötettiin hepariini-sepharose-kolonniin interferonin adsor-boimiseksi. Kolonnin pestiin 0,9 %:sella natriumkloridiliuoksella epäpuhtauksien poistamiseksi, kunnes O.D.-arvo (optinen tiheys) aallonpituudella 280 nm oli saavuttanut arvon 0,050 tai alle sen. Natriumkloridin väkevyys nostettiin sitten 2-molaariseksi interferonin eluomiseksi. Jakeet, joilla oli suuret interferoniaktiivi-suudet /.Saishin Iyaku (Modern Medicine) 29 (4) (1974) 660.7 kerät tiin yhteen, väkevöitiin ultrasuodatuksella ja dialysoitiin sello-faaniputkella fysiologista suolaliuosta vastaan puhdistetun interferonin saamiseksi.
Interferoniaktiivisuuden kokonaistalteenotto oli 48 % olettaen lähtöaineen aktiivisuuden olleen 100 % ja talteenotto oli 80 % olettaen aktiivisuuden ennen kolonniin adsorboimista olleen 100 %. Puhdistus oli 5100-kertainen lähtöaineesta laskettuna.
Puhdistetun interferonin väkevöity liuos johdettiin steriilin bakteerisuodattimen läpi. Suodos jaettiin edelleen annoksiin ja jokainen lyofilisoitiin kuivan valmisteen saamiseksi. Hiirille ja kaniineilla annettiin yllä mainittua valmistetta 1 000 000 IU/kg:n annos ja niitä tarkkailtiin 7 päivän ajan. Mitään epätavallista ruumiinpainon nousua tai laskua ja karvan jäykistymistä ei havaittu.
7 72124
Esimerkki 2
Vakiintuneen solusukupolven ihmisen varhaisimusoluja indusoitiin Sendai-viruksella interferonin tuottamiseksi. Sendai-viruksen inaktivoinnin jälkeen saatiin interferonia sisältävä vil-jelyneste. 20 litraan viljelynestettä lisättiin 2 kg märkäpainos-ta laskettuna SP-Sephadex-tuotetta interferonin adsorboimiseksi siihen. Kontaminanttiproteiinit poistettiin pesemällä 0,01-M asetaattipuskurilla (pH 4), joka sisälsi 0,4 % natriumkloridia. Adsorboitunut interferoni eluoitiin 0,10-M fosfaattipuskurilla (pH 8,0). Esimerkissä 1 saatu hepariini-sepharose pakattiin 1000 ml:n kolonniin. Kolonni tasapainotettiin 0,01-M asetaattipuskuriliuok-sella (pH 5,0). Tähän kolonniin syötettiin yllä mainittu eluaatti SP-Sephadex-tuotteesta interferonin adsorboimiseksi kolonniin.
Kontaminanttiproteiinien poiston jälkeen kuten esimerkissä 1 interferoni eluoitiin 2-M natriumkloridiliuoksella, joka sisälsi 0,02 % kondroitiinisulfaattia (keskimääräinen molekyylipaino 4000) puhdistetun interferoniliuoksen saamiseksi.
Interferoniaktiivisuuden kokonaistalteenotto oli 80 % lähtöaineesta laskettuna puhdistuksen oltua 4200-kertainen. Talteenotetun interferonin kuivuttua valmistetta annettiin hiirille ja kaniineille havaitsematta mitään epänormaalia.

Claims (5)

8 721 24
1. Menetelmä interferonin talteenottamiseksi, jolloin ihmisperäisten indusoitujen solujen tuottamaa interferonia sisältävä liuos saatetaan kosketukseen veteen liukenemattomaksi tehdyn adsorbentin kanssa interferonin adsorboimiseksi veteen liukenemattomaksi tehdylle adsorbentille ja sen jälkeen interferoni eluoidaan epäorgaanisen suolan vesiliuoksella, tunnettu siitä, että veteen liukenemattomaksi tehtynä adsorbenttinä käytetään veteen liukenemattomaksi tehtyä hepariinia, jolta interferoni eluoidaan epäorgaanisen suolan vesiliuoksella.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että veteen liukenemattomaksi tehty hepariini pestään vedellä ennen käyttöä.
3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että veteen liukenemattomaksi tehtyä hepariinia pidetään tasapainotettuna puskuriliuoksella, jonka pH on 5-10.
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että epäorgaanisena suolana käytetään natriumkloridia.
5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet- t u siitä, että käytetään epäorgaanista suolaa, joka sisältää kond-roitiinisulfaattia. Il
FI802566A 1979-10-05 1980-08-14 Foerfarande foer tillvaratagande av interferon. FI72124C (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP12851379 1979-10-05
JP12851379A JPS5651995A (en) 1979-10-05 1979-10-05 Preparation of interferon

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI802566A FI802566A (fi) 1981-04-06
FI72124B FI72124B (fi) 1986-12-31
FI72124C true FI72124C (fi) 1987-04-13

Family

ID=14986594

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI802566A FI72124C (fi) 1979-10-05 1980-08-14 Foerfarande foer tillvaratagande av interferon.

Country Status (6)

Country Link
US (2) US4314935A (fi)
EP (1) EP0026970B1 (fi)
JP (1) JPS5651995A (fi)
CA (1) CA1137470A (fi)
DE (1) DE3064130D1 (fi)
FI (1) FI72124C (fi)

Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FI88175C (fi) 1980-04-03 1993-04-13 Biogen Inc Rekombinant-dna-molekyler och foerfaranden foer framstaellning av polypeptider liknande humant -interferon
WO1982002834A1 (en) * 1981-02-17 1982-09-02 Uemura Yahiro Process for recovering interferon
US4382027A (en) * 1981-08-18 1983-05-03 Meloy Laboratories, Inc. Purification of human immune interferon
US4440675A (en) * 1981-08-18 1984-04-03 Meloy Laboratories, Inc. Human immune interferon
DE3214337C2 (de) * 1982-04-19 1984-04-26 Serapharm - Michael Stroetmann, 4400 Münster Resorbierbares Flachmaterial zum Abdichten und Heilen von Wunden und Verfahren zu dessen Herstellung
US4462940A (en) * 1982-09-23 1984-07-31 Cetus Corporation Process for the recovery of human β-interferon-like polypeptides
US5702699A (en) * 1982-09-23 1997-12-30 Cetus Corporation Process for the recovery of lipophilic proteins
US4992271A (en) * 1982-09-23 1991-02-12 Cetus Corporation Formulation for lipophilic IL-2 proteins
US4723000A (en) * 1983-07-05 1988-02-02 Biospectrum, Inc. Human interferon gamma and interleukin-2
EP0150067A3 (en) * 1984-01-23 1986-12-30 Takeda Chemical Industries, Ltd. Stable composition of gamma-interferon
US4499014A (en) * 1984-02-07 1985-02-12 Interferon Sciences, Inc. Method for purifying gamma-interferon
US4803163A (en) * 1984-06-04 1989-02-07 E. I. Du Pont De Nemours And Company Preparation of a protein fraction exhibiting cell growth-inhibiting activity
GB8522336D0 (en) * 1985-09-09 1985-10-16 Biogen Nv Composition for treatment of allergies
US6030958A (en) * 1987-09-18 2000-02-29 Genzyme Corporation Water insoluble derivatives of hyaluronic acid
US6235726B1 (en) * 1987-09-18 2001-05-22 Genzyme Corporation Water insoluble derivatives of polyanionic polysaccharides
US6174999B1 (en) * 1987-09-18 2001-01-16 Genzyme Corporation Water insoluble derivatives of polyanionic polysaccharides
US6610669B1 (en) 1987-09-18 2003-08-26 Genzyme Corporation Water insoluble derivatives of polyanionic polysaccharides
US5527893A (en) * 1987-09-18 1996-06-18 Genzyme Corporation Water insoluble derivatives of polyanionic polysaccharides
US5641868A (en) * 1991-04-18 1997-06-24 Toray Industries, Inc. Interlekin-6 compositions, and a production process thereof
US6399296B1 (en) * 1994-07-20 2002-06-04 The General Hospital Corporation Interaction trap systems for detecting protein interactions
US6294202B1 (en) 1994-10-06 2001-09-25 Genzyme Corporation Compositions containing polyanionic polysaccharides and hydrophobic bioabsorbable polymers
US6296643B1 (en) 1999-04-23 2001-10-02 Sdgi Holdings, Inc. Device for the correction of spinal deformities through vertebral body tethering without fusion
US6299613B1 (en) 1999-04-23 2001-10-09 Sdgi Holdings, Inc. Method for the correction of spinal deformities through vertebral body tethering without fusion
AU768636B2 (en) 1999-07-07 2003-12-18 Children's Hospital Medical Center Spinal correction system
AR034749A1 (es) * 2001-07-09 2004-03-17 Schering Ag Formulaciones de interferon beta humano
CZ2007695A3 (cs) 2005-04-11 2008-02-27 Savient Pharmaceuticals, Inc. Variantní formy urátoxidázy a jejich použití
US9072554B2 (en) 2005-09-21 2015-07-07 Children's Hospital Medical Center Orthopedic implant
HU230758B1 (hu) * 2006-04-12 2018-03-28 Crealta Pharmaceuticals LLC 100% Fehérjék tisztítása kationos felületaktív anyaggal
SG176897A1 (en) 2009-06-25 2012-01-30 Savient Pharmaceuticals Inc Methods and kits for predicting infusion reaction risk and antibody-mediated loss of response by monitoring serum uric acid during pegylated uricase therapy

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3144390A (en) * 1960-06-28 1964-08-11 Nat Res Dev Process for the purification of interferon
FR2244543B1 (fi) * 1973-07-27 1977-07-01 Inst Nl Sante Rech Medica
FR2351665A1 (fr) * 1976-05-21 1977-12-16 Elf Aquitaine Procede de purification de preparations possedant notamment une activite interferon, preparations purifiees ainsi obtenues et leur application en tant que medicament

Also Published As

Publication number Publication date
FI72124B (fi) 1986-12-31
US4343736A (en) 1982-08-10
CA1137470A (en) 1982-12-14
FI802566A (fi) 1981-04-06
JPS5651995A (en) 1981-05-09
EP0026970A1 (en) 1981-04-15
DE3064130D1 (en) 1983-08-18
US4314935A (en) 1982-02-09
EP0026970B1 (en) 1983-07-13
JPS6149959B2 (fi) 1986-10-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI72124C (fi) Foerfarande foer tillvaratagande av interferon.
US4275056A (en) HGI-Glycoprotein capable of stimulating proliferation and differentiation of human granulocyte, process for preparing same and leukopenia curative containing same
US4230697A (en) Virus-inactivated HGI-glycoprotein capable of stimulating proliferation and differentiation of human granulocyte, process for preparing same and leukopenia curative containing same
CA1135622A (en) Type ii interferon and agents thereof
US4495282A (en) Process for producing target cell lysis factor and uses therewith
FI60501B (fi) Foerfarande foer selektiv separering av interferon fraon interferon-raopreparat
US4440675A (en) Human immune interferon
US4541952A (en) Purification method of human interferon
JPS59137417A (ja) 人尿由来コロニ−形成刺激因子及びカリクレインの製造法
JPH07116236B2 (ja) アンチトロンビン調製物およびその調製方法
US4510084A (en) Method of producing an antithrombin III-heparin concentrate or antithrombin III-heparinoid concentrate
FI72143C (fi) Foerfarande foer framstaellning av maenniskointerferon.
KR0131204B1 (ko) 암 면역치료용 보조제
US4455300A (en) Fibronectin compositions
US20030190732A1 (en) Plasma fraction containing bikunin, method for the production thereof and use of the same
GB2108387A (en) A pharmaceutical composition containing myeloperoxidase
US4526782A (en) Process for recovering interferon
EP0098123B1 (en) A process for concentrating and purifying human urinary kallikrein
FUNATSU et al. Structure and Toxic Function of Ricin I Purification Procedures of Ricin D
FI62103C (fi) Foerfarande foer framstaellning av heparin med hoeg specifik aktivitet
EP0280859A2 (en) Polypeptide having an antiviral activity, and its use
IL29066A (en) Pharmaceutical preparations containing multi-chain poly-nucleotides to encourage interferon production in humans, animals or cell cultures
JPS641117B2 (fi)
JPS641118B2 (fi)
JPH0459796A (ja) アフィニティークロマトグラフィー用担体およびアンチトロンビン３の精製方法

Legal Events

Date Code Title Description
MM Patent lapsed

Owner name: THE GREEN CROSS CORP