FI68810B - Nya saosom mellanprodukter anvaendbara aminosyraderivat - Google Patents

Description

L 68810

Uusia välituotteina käyttökelpoisia aminohappojohdannaisia

Jakamalla erotettu patenttihakemuksesta 751256 5 Keksintö koskee uusia aminohappojohdannaisia, nii den suoloja ja optisesti aktiivisia isomeerejä. Keksinnön mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia välituotteita valmistettaessa yhdisteitä, joilla on arvokkaita biologisia ja farmaseuttisia ominaisuuksia. Tällaisia yhdisteitä ovat 10 ne aminohappojohdannaiset, joita valmistetaan suomalaisen patenttihakemuksen 751256 mukaisesti.

Keksinnön mukaisilla aminohappojohdannaisilla on yleinen kaava I

15 R-'-HN-CH-CO-A1 (CH.) I 2 n ^ CO-JJ-((:H)-(CH2)t-BJ- (I) R R5 20 jossa A on hydroksyyli, mahdollisesti p-asemassa alkoksilla tai nitrolla substituoitu C-. n-aralkoksi tai - (NH-CHR6-CO) -Y, 6 ly r jossa R on vety tai C, .-alkyyli, Y on hydroksyyli tai 1-4 -j_ C^_4~alkoksi ja r on kokonaisluku 1-10, B on -SC^OH, tai 25 -OPO(OH)2, R on vety tai C^_^-alkyyli, R"^ on vety, C^_^-alkoksikarbonyyli tai mahdollisesti yhdellä tai useammalla substituenteista halogeeni, alkoksi ja nitro substituoitu C_ --aralkoksikarbonyyli, 5 30 R on vety tai karboksyyli, n on 1 tai 2, ja t on 1 tai 2, jolloin A^ ei ole hydroksyyli, jos R^ on vety.

Julkaisusta Acta Chemica Scandinavica 21 (1967) 35 1593-1604, sivulta 1602 tunnetaan kaavan I mukainen yhdiste, 2 68810 jossa B1 on -SSR"; Ν,Ν'-bis-(^-p-tolueenisulfonyyli)-L-glutamyylikystamiini.

Kaikki keksinnön mukaiset yhdisteet ovat uusia ja näistä seuraavat ovat edullisia yhdisteitä: 5 / («.*—bentsyyli)-glutamyyli- jfl/-tauriini, /N-karbobentsyylioksi-( *--bentsyyli)-aspartyyli- pj-tauriini, / (ok^-bentsyyli) -aspartyyli-/? /“homotauriini, /N-karbobentsyylioksi- ( '•L -bentsyyli) -aspartyyli-^_7~kola-miinifosfaatti, 10 /N-karbobentsyylioksi-(ot -bentsyyli)-glutamyyli-j^Z-homo-tauriini, /N-karbobentsyylioksi- (<*_-bentsyyli) -glutamyyli- J^-kola-miinifosfaatti, /N-karbobentsyylioksi-(·<- -bentsyyli) -glutamyyli- ^/-kyste-15 iinihappo, /N-karbobentsyylioksi- ( J^-kysteamidi) -glutamyyli) -oC.7~gly-siinietyyliesteri, /N-karbobentsyylioksi- ( ^-tauriini) -glutamyyli- .//-glysii-nietyyliesteri, 20 /N-karbobentsyylioksi-($ -tauriini)-glutamyyli-//-glysii-nimetyyliesteri, /1 ^"-tauriini)-L-glutamyyli-oC /-glysiini ja /N-karbobentsyylioksi-(oL -bentsyyli)-L-glutamyyli- )f/-tau-riini.

25 Eräs kaikille kaavan I mukaisille yhdisteille yhtei nen rakenneominaisuus on, että niissä on ^-asemassa subs-tituoitu dikarboksyylihappo tai myös sen muissakin asemissa substituoitu johdannainen, joka ^-karboksyyliryhmästään on sitoutunut happo-amidisidoksella priaariseen tai sekun-30 daariseen alkyyliamiiniin, jossa dikarboksvylihapossa tai sen johdannaisessa on alkyylisivuketjussa olevien erilaisten substituenttien lisäksi ryhmä, joka on luonteeltaan voimakkaasti hapan ja joka on ^-asemassa.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi voi-35 daan toimia seuraavasti: 3 68810

a) yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa on sulfonyyli-, sulfonyylioksi- tai fosforyylioksi-ryhmä, yhdisteet, joilla on yleinen kaava V

5 R^HN-CH-CO-A1 (CH ) I 2 n 2 CO-N-(CH)-(CH_) -BZ (V) I I 5 2 t

R R

I 15 10 jossa A , R, R , R , n ja t merkitsevät samaa kuin edellä 2 ja B on -SH, -SOOH, -OH, p-tolueenisulfonyylioksi, halogeeni tai -S02R^°, jossa R^ on C^_^-alkoksi tai aralkoksi, hapetetaan tai hydrolysoidaan, saatetaan reagoimaan alka-limetalli- tai alkalimetallivetysulfiitin kanssa, esteröi-15 dään rikkihapolla tai fosforihapolla tai niiden johdannaisella, tai

b) yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa B^ on -S020H, yhdisteet, joilla on yleinen kaava VI

20 R1-HN-CH-CO-A1 (CH ) CO-N-R12 (VI) k1 25 II 12 jossa R , A ja n merkitsevät samaa kuin edellä, R on vety tai ^-alkyyli, ja R on alkalimetalli, saatetaan reagoimaan halogeenialkyylisulfonihapon alkalimetallisuo-lojen kanssa, tai

30 c) yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa B^" on -S020H, hapetetaan yhdisteet, joilla on yleinen kaava VII

_ .. TT"

6881 O

4 r7-hn-ch-co-a4 «PVn CO-N-(CH)-(CH.) -S- (VII) 1 I 5 ^ t

R R

5 __ __ 2 4 jossa A on hydroksyyli, aralkoksi, edullisesti bentsyyli-oksi, substituoitu aralkoksi, edullisesti p-metoksibent-10 syylioksi tai p-nitrobentsyylioksi, 7 R on C^_^-alkoksikarbonyyli tai mahdollisesti yhdellä tai useammalla substituenteista halogeeni, alkoksi ja nitro substituoitu C-.-aralkoksikarbonyyli ja 5 “

R, R , n ja t merkitsevät samaa kuin edellä, tai 15 d) yhdisteet, joilla on yleinen kaava XVI

R7-N-CH-COOH

I I

0=C-(CH2)n (XVI) 7 20 jossa R ja n merkitsevät samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan yhdisteiden kanssa, joilla on kaava H2N-(<p»)-‘cH2>t-E1

Rb 25 1 5 .

jossa B , R ja t merkitsevät samaa kuin edellä, tai niiden suolojen kanssa, tai yhdisteet, joilla on yleinen kaava XVIII

30 R7-HN-CH-CO-A4 (CH.) (XVIII) 2 n CO-A7 5 6 8 310 4 7 7 jossa A , R ja n merkitsevät samaa kuin edellä ja A on hydroksyyli, p-nitrofenyylioksi, pentakloorifenyylioksi tai C2_4-alkoksikarbonyyli, saatetaan reagoimaan yhdisteiden kanssa, joilla on yleinen kaava XX 5 HN- (CH) -(CH ) .-B1 I I 5 2 t R R (XX)

joissa B^, R, R5 ja t merkitsevät samaa kuin edellä, tai 10 f) yhdisteistä, joilla on yleinen kaava XXI

r7-hn-j;h-co-a4 (CH ~) | 2 n ^ CO-N-(CH)-(CH„) -B (XXI) |lc 2 t

15 R R

4 1 5 7 jossa A , B , R, R , R , n ja t merkitsevät samaa kuin edellä, lohkaistaan suojaryhmä ,ji--aminoryhmästä, tai g) yhdisteistä, joilla on edellä esitetty yleinen kaava 4 1 5 7 20 XXI, jossa A , B , R, R , R , n ja t merkitsevät samaa kuin edellä, poistetaan suojaryhmäct-karboksyyliryhmästä, tai

h) yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava XXIII

25 R1-HN-CH-CO-A8 (CH ) I 2 n , CO-N-(CH)-(CH ) -B (XXIII)

I I ς 2 t R RJ

30

jossa A8 on -(NH-CHR6-CO) -Y ja B1, R, R1, R5, n ja t merkitsevät samaa kuin edellä, saatetaan ^-asemassa aktivoidut ^-aminokarboksyylihappopitoisen peptidien johdannaiset reagoimaan yhdisteiden kanssa, joilla on yleinen kaa-35 va XXIV

6881 O

6 HN - (CH) - (CH2) - B4 R R5 (XXIV) 4 5 jossa B on -SC^-OH, -OPO(OH)2 tai -SH ja R ja R merkitse- 5 vät samaa kuin edellä, ja mahdollisesti merkaptoryhmä hapetetaan, ja saadut yhdisteet muutetaan suoloikseen tai yhdisteet vapautetaan suoloistaan ja/tai yhdisteet valmistetaan optisesti aktiivisina isomeereinä käyttämällä valinnaisessa 10 reaktiovaiheessa optisesti aktiivisia reaktiokomponentte-ja tai suorittamalla yhdisteille rasemaatin hajoittaminen.

Menetelmävaihtoehdossa (a) saatetaan edullisesti yleisen kaavan V mukaiset yhdisteet reagoimaan permuura-haishapon kanssa tai jääetikan ja vetyperoksidin seoksen 15 kanssa tai yhdisteitä kuumennetaan alkalimetallisulfii-tin vesiliuoksen kanssa.

Menetelmävaihtoehdossa (b) saatetaan edullisesti yleisen kaavan VI mukaiset yhdisteet reagoimaan bromi-etaanisulfonihapon tai bromipropaanisulfonihapon alka-20 limetallisuolojen kanssa.

Menetelmävaihtoehdossa (c) saatetaan edullisesti yleinen kaavan VII mukaiset yhdisteet reagoimaan jääetikan ja 30-%:sen vetyperoksidin seoksen kanssa.

Menetelmävaihtoehdossa (d) saatetaan edullisesti 25 yleisen kaavan XVI mukaiset yhdisteet, edullisesti pyro-glutamiinihappo, reagoimaan tauriinin tai homotauriinin kanssa.

Menetelmävaihtoehdossa (e) saatetaan edullisesti yleisen kaavan XVIII mukaiset yhdisteet, edullisesti 3 0 N-karbobent syy 1 ioks iaminokarboksyy 1 ihappo- r* .-bent syy 1 i-^-p-nitrofenyyliesteri pyridiinin ja veden seoksessa, reagoimaan yleisen kaava XX mukaisten yhdisteiden kanssa, edullisesti tauriinin, N-metyylitauriinin, homotauriinin, kolamiinifosfaatin tai kystamiinihapon kanssa.

Il 7 6381 0

Menetelmävaihtoehdossa (f) poistetaan edullisesti yleinen kaava XXI mukaisista yhdisteistä, edullisesti N-karbobentsyylioksi-* -bentsyyliesterijohdannaisista karbobentsyylioksiryhmä edullisesti bromivedyllä jää-5 etikassa.

Menetelmävaihtoehdossa (g) poistetaan yleisen kaavan XXI mukaisista yhdisteistä, edullisesti N-karbobent-syylioksi-o^-bentsyyliesterijohdannaisista, esteriryhmä edullisesti saippuoimalla.

10 Valmistettaessa yleisen kaavan I mukaisten yhdis teiden suoloja saatetaan edullisesti yleisen kaavan I mukaiset yhdisteet reagoimaan alkalimetallien tai maa-alkalimetä11ien hydroksidien tai karbonaattien kanssa tai orgaanisten emästen kanssa.

15 Keksintöä kuvataan lähemmin seuraavissa esimerkeis sä .

Esimerkki 1; ^-L-glutamyylitauriini (a) 40,85 g (0,11 moolia) karbobentsyylioksi-L-glutamiinihappo-ok-bentsyyliesteriä (Liebigs Annalen 20 655 (1962) 200, liuotetaan 500 ml:aan asetonitriiliä.

Liuos jäähdytetään -15°C:seen, samalla estetään ilman kosteuden vaikutus. Liuokseen lisätään tipoittain ja samalla sekoittaen ensin 15,4 ml (0,11 moolia) trietyyliamiinia, sitten 15,4 ml (0,11 moolia) kloorimuurahaishappoisobu-25 tyyliesteriä. Reaktioseosta sekoitetaan -15°C:ssa 40 minuuttia, sitten siihen lisätään 28 ml (0,2 moolia) trietyyliamiinia, tämän jälkeen 11,26 g (0,05 moolia) kysta-miinihydroklodia ja lopuksi 250 ml asetonitriiliä. Seosta sekoitetaan sitten vielä 2 tuntia -15°C:ssa ja 4 tuntia 30 huoneen lämpötilassa.

Reaktioajan päätyttyä seos haihdutetaan 30°C:ssa tyhjössä. Jäännös liuotetaan sekoittaen ja jäähdyttäen 200 ml:aan jäävettä, ja seos haihdutetaan jälleen tyhjössä 35°C:ssa. Jäännös viedään yhdessä veden (250 ml) ja etyy-35 liasetaatin (500 ml) kanssa erotussuppiloon ja orgaaninen 0 68810 8 faasi erotetaan. Orgaaninen faasi ravistellaan peräkkäin veden (250 ml), 5-%:isen natriumkarbonaattiliuoksen (2 x 250 ml), 1-n suolahapon (2 x 250 ml) ja lopuksi veden (250 ml) kanssa (ravisteltaessa natriumkarbonaattiliuoksen 5 kanssa saadusta vesifaasista voidaan tekemällä happamek-si suolahapolla ja ravistelemalla eetterin kanssa saada talteen noin 5 g reagoimatonta karbobentsyylioksi-L-glu-tamiinihappo-6*— bentsyyliesteriä) . Etyyliasetaattifaasi kuivataan vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutetaan 10 sitten kuiviin tyhjössä 30°C:ssa. Saadaan paksu öljymäi-nen jäännös, joka pian kiteytyy kiteiseksi massaksi. Raa-katuote (40-42 g) kiteytetään uudelleen etyyliasetaatin (100 ml) ja eetterin (170 ml) seoksesta. Saadaan 29,3 g N,N 1 -bis/N-karbobentsyylioksi-/'- (<*- -bentsyyli) -L-gluta-15 myyli7-kystamiinia, sp. 91-92°C.

Alkuaineanalyysi kaavalla C44H5oN4°iqS2 = ^59,05) Laskettu: C 61,52 %, H 5,89 %, N 6,52 %, S 7,46 % Löydetty: C 60,85 %, H 5,91 %, N 6,61 %, S 7,72 %.

(b) 25,77 g (0,03 moolia) edellä saatua Ν,Ν’-bis-20 /N-karbobentsyylioksi- £ - (ck,-bentsyyli) -L-glutamyyli7-kys- tamiinia liuotetaan 75 ml:aan jääetikkaa. Jäillä jäähdytettyyn liuokseen tiputetaan 15 minuutin kuluessa vasta-valmistettua 30-%:isen vetyperoksidin (75 ml) ja jääeti-kan (225 ml) seos. Lisäyksen jälkeen jäähdytys lopetetaan 25 ja reaktioseosta sekoitetaan 4 tuntia huoneen lämpötilassa. Sitten haihdutetaan kuiviin tyhjössä 30°C:ssa. Öljy-mäinen tuote kuivataan ensin eksikaattorissa fosforipen-toksidilla, sitten kiinteällä kaliumhydroksidilla. Saadaan 28,5 g karbobentsyylioksi- fr-(^—bentsyyli)-L-glu-30 tamyylitauriinia. Raakatuotetta voidaan käyttää puhdistamatta )f-L-glutamyylitauriinin valmistukseen.

(c) 26,32 g (55 mmoolia) edellä valmistettua karbobentsyylioksi- fr'- (^-bentsyyli) -L-glutamyylitauriinia liuotetaan 50 ml:aan jääetikkaa. Liuokseen lisätään 4 li

6881 O

9 moolia bromivetyä liuotettuna 50 ml:aan jääetikkaa. Voidaan havaita kiivasta hiilidioksidikehitystä. Reaktioseos saa seistä 2 tuntia huoneen lämpötilassa, sitten se haihdutetaan kuiviin tyhjössä 30°C:ssa. Öljymäinen jäännös 5 liuotetaan 170 ml:aan vettä ja ravistellaan eetterin (5 x 70 ml) kanssa. Vesifaasi haihdutetaan kuiviin tyhjössä 35°C:ssa. Saadaan 20,42 g (^-bentsyyli) -L-glutamyy-litauriinia, joka kiteytetään uudelleen 90 %:isesta etanolista, sp. 204-208°C.

10 Rf (n-butanoli-pyridiini-jääetikka-vesi 15:10:3:12) = 0,53 Rf (n-butanoli-jääetikka-vesi 4:1:1) =0,39.

(d) 20,42 g edellä saatua $ -(oC-bentsyyli-L-gluta-myylitauriinia liuotetaan 150 ml:aan 1-n kaliumhydroksi-diliuosta. Liuos saa seistä huoneen lämpötilassa 4 tun-15 tia, sitten se viedään H+-vaiheessa olevaan Dowex 50 x 2:11a (Fluka, 100-200 mesh) täytettyyn 2 x 100 cm:n patsaaseen. Eluoidaan vedellä. Eluoimisen alusta laskien otetaan talteen 300 ml eluaattia. Tämä haihdutetaan kuiviin tyhjössä 35°C:ssa. öljymäinen jäännös saadaan kitey-20 tymään lisäämällä 8 - 10 ml vettä ja noin 100 ml etanolia. Suodatetaan, pestään alkoholilla ja kuivataan, jolloin saadaan 13,7 g -L-glutamyylitauriinia. Kiteinen tuote kiteytetään uudelleen 80 %-sesta vesipitoisesta etanolista. Saadaan 9,79 g puhdasta tuotetta, mikä vastaa 70 %:n 25 saantoa N,N 1 -bis-/N-karbobentsyylioksi-- (r/-^-bentsyyli) -L-glutamyyli7_kystamiinin suhteen.

Esimerkki 2: ^-L-glutamyylitauriini (a) 529 mg (1,1 moolia) esimerkissä 1 b valmistettua karbobentsyylioksi- -bentsyyl i) -L-glutamyylitau- 30 riinia liuotetaan 5 ml:aan 1-n kaliumhydroksidia, ja liuoksen annetaan seistä huoneen lämpötilassa 4 tuntia. Sitten liuos ravistellaan eetterin kanssa (3x3 ml). Vesifaasi viedään Dowex 50 x 2:11a täytettyyn 1 x 20 cm:n patsaaseen ja eluoidaan vedellä. Otetaan talteen 50 ml liuosta, joka 10 6881 0 haihdutetaan kuiviin tyhjössä 35°C:ssa. Saadaan raakaa karbobentsyylioksi- ^-L-glutamyylitauriinia, joka puhdistetaan pH 6,5:ssä suoritetulla paperielektroforeesilla. Suhteellinen liikkuvuus kysteiinihappoon verrattuna on 5 1,05.

(n-butanoli-pyridiini-jääetikka-vesi 15:10:3:12) = 0,57. (b) Edellä saatu karbobentsyylioksi- ft-L-glutamyy-litauriini liuotetaan 2 ml:aan 4 moolia bromivetyä sisältävää jääetikkaa. Seos saa seistä huoneen lämpötilassa 10 puoli tuntia, sitten se haihdutetaan kuiviin tyhjössä 35°C:ssa. Jäännöstä hierotaan useampaan kertaan eetterin Q, kanssa ja erotetaan siitä dekantoimalla. Saatu £-L-gluta-myylitauriini kiteytetään uudelleen esimerkissä 3 kuvatulla tavalla.

15 Esimerkki 3: ^-L-glutamyylitauriini 5,79 g (13,1 mmoolia) esimerkissä Ib valmistettua karbobentsyylioksi- (c^-bentsyyli) -L-glutamyylitaurii-nia liuotetaan etanolin (100 ml) ja veden (25 ml) seokseen ja hydrataan ravistellen 10 %:isen palladiumhiili-20 katalysaattroin (0,5 g) läsnäollessa. Katalysaattori lisätään tarkoituksenmukaisesti kahtena 0,25 g:n annoksena. Kun vedyn sitoutumista ei enää tapahdu, liuos suodatetaan ja haihdutetaan sitten kuiviin tyhjössä 30°C:ssa. Öljymäinen jäännös kuivataan eksikaattorissa fosforipen-25 toksidilla. Saadaan 3,1 g^ -L-glutamyylitauriinia, joka on erittäin hyvin liukeneva veteen ja liukenematon alkoholiin. Lissämällä hieman vettä ja alkoholia pieninä annoksina saadaan tuote kiteytymään. Kiteinen tuote sulaa 202 - 204°C:ssa.

30 IR-spektrissä karakteerisillä ryhmillä on seuraa- vat maksimit:

Onh* x OH 3600 - 2400; ^ NH (amidi) 3315; V CO (kar-boksyyli) 1758; ^CO (amidi) 1666;0nh* 1576; 0 SO- 1296 , 1031 cm"1.

6881 O

11

Raakatuote kiteytetään useampaan kertaan 80 %:isesta etanolista. Saadaan 2,02 g puhdasta lopputuotetta 66 %:n saannolla N,N'-bis-/N-karbobentsyylioksi-(oL·-bentsyy-li)-L-glutamyyli7-kystamiinin suhteen. Puhtaan tuotteen 5 sulamispiste on 219 - 220°C. +14° (vesi, c = 1,02) .

Kysteiinihappoon verrattu suhteellinen liikkuvuus pH 6,5:ssä suoritetussa paperielektroforeesissa on 0,73 ja pH l,8:ssa 0,53.

Rj (n-butanoli-pyridiini-jääetikka-vesi 15:10:3:12) = 0,19 10 Analyysi kaavalle C^H^^O S (M = 254,27)

Laskettu: C 33,07 %, H 5,55 %, N 11,02 %, O 37,75 %, S 12,61 % Löydetty: C 33,15 %, H 5,76 %, N 10,94 %, O 37,53 %, S 12,17 %.

15 Esimerkki 4: ^-L-glutamyylitauriini 5,42 g (11 mmoolia) karbobentsyylioksi-L-glutamiini-happo-(^-bentsyyli)--p-nitrofenyyliesteriä (Chem.Ber.

96, 204, 1963) liuotetaan 50 ml:aan pyridiiniä. Liuos jäähdytetään 0°C:seen ja siihen tiputetaan sitten puolen 20 tunnin kuluessa voimakkaasti sekoittaen liuos, jossa on 1,25 g (10 mmoolia) tauriinia 20 ml:ssa vettä. Sitten seokseen lisätään 3,08 ml (22 mmoolia) trietyyliamiinia, jäähdytys ja sekoitus lopetetaan. Seoksen annetaan seistä huoneen lämpötilassa 72 tuntia, sitten se haihdutetaan 25 kuiviin tyhjössä. Jäännös liuotetaan 50 ml:aan vettä, ja keltaiseen liuokseen lisätään niin kauan 1-n suolahappoa, että väri katoaa, p-nitrofenolin poistamiseksi liuos ravistellaan eetterin kanssa (10 x 50 ml). Vesifaasi haihdutetaan kuiviin tyhjössä. Saadaan 6,9 g karbobentsyyli-30 oksi-M- -bentsyyli)-L-glutamyylitauriini-trietyyli-ammoniumsuolaa.

Tämä aine hydrataan katalyyttisesti esimerkissä 3a kuvatulla tavalla, ja liuotin poistetaan haihduttamalla tyhjössä. Trietyyliamiinin poistamiseksi aine liuote-35 taan pieneen vesimäärään ja liuos viedään Dowex 50 x 2 12 6881 0 patsaaseen (2 x 40 cm). Eluoidaan vedellä. Eluaattia otetaan talteen noin 120 ml, ja se haihdutetaan kuiviin tyhjössä 35°C:ssa. Tuotteen kiteyttäminen ja eristäminen tapahtuu esimerkissä 3 kuvatulla tavalla. Saadaan 1,72 g 5 ^-L-glutamyylitauriinia, mikä vastaa 60 %:n saantoa tauriinin suhteen.

IR-spektrissä karakteerisillä ryhmillä on seuraa-vat maksimit:

OnH* x OH 3600 - 2400; VNH (amidi) 3315; V/CO (kar-10 boksyyli) 1758,-^00 (amidi) 1666; 1576; 0 SO~ 1296, 1031 cm_1.

Esimerkki 5: fr-L-glutamyylitauriini (a) 0,48 g (1 mmooli) karbobentsyylioksi- ci--L-glutamyyli-(^-p-nitrofenyyliesteri)-glysiinietyyliesteriä 15 (Acta Chim. Acad. Sei. Hung. 65, 375, 1970) liuotetaan 6 ml:aan etyyliasetaattia. Liuos jäähdytetään jäävedellä. 0°C:ssa liuokseen tiputetaan ensin 0,08 g (1 mmooli) kysteamiinia 1 ml:ssa dimetyyliformamidia, sitten 0,14 ml (1 mmooli) trietyyliamiinia. Muodostuu hitaasti sakka.

20 Reaktioseosta pidetään vielä jonkin aikaa jäävedessä ja sitten vuorokauden ajan huoneen lämpötilassa, lopuksi se laimennetaan eetterin ja etyyliasetaatin 1:1 seoksella. Sakka erotetaan linkoamalla ja pestään ensin eetterin ja etyyliasetaatin 4:1 seoksella, sitten useampaan 25 kertaan eetterillä. Rikkihapon yllä kuivaamisen jälkeen sakka pestään 3 kertaa 1-n suolaholla, 2 kertaa vedellä, 2 kertaa kyllästetyllä natriumvetykarbonaattiliuoksella ja lopuksi vielä 2 kertaa vedellä ja kuivataan sitten tyhjössä rikkihapon yllä. Saadaan 0,35 g karbobentsyyli-30 oksi-^.-L-glutamyyli-( ^-kysteamiini)-glysiinietyyliesteriä, mikä vastaa 85 %:n saantoa.

Analyysi kaavalle C^gH^^OgN^S (M = 411,4) i3 6881 0

Laskettu: C 62,6 %, H 6,1 %, S 7,8 % Löydetty: C 53,4 %, H 6,5 %, S 7,7 %. Infrapunaspektrissä karakteerisillä ryhmillä on seuraavat maksimit: 5 Y NH 3310; Y C=0 (COOEt) 1748; Y C=0 (Z) 1690; Y C=0 (amidi) 1655 cm ^.

100 mg karbobentsyylioksi-06-L-glutamyyli- ( £^*-kystea-miini)-glysiini-etyyliesteriä liuotetaan 2 ml:aan jääetik-kaa, ja liuokseen lisätään 0,5 ml 30 %:sta vetyperoksidia.

10 Reaktioseoksen annetaan seistä 4 tuntia jäävedellä jäähdy tettynä. Reaktionkulkua seurataan paperielektroforeesin avulla. Vedellä laimentamisen jälkeen reaktioseos lyofili-soidaan. Lopputuote saadaan vaahtona. Saadaan 0,11 g karbobentsyylioksi-0O-L-glutamyyli-( ^-tauriini)-glysiini-15 etyyliesteriä (95 %) .

(b) 100 mg edellä valmistettua karbobentsyylioksi- -L-glutamyyli- ( ^-tauriini) -glysiinietyyliesteriä liuotetaan trifluorietikkahpaon (1 ml) ja väkevän suolahapon (1 ml) seokseen. Liuosta pidetään 35°C:ssä 3 tuntia 20 suljetussa pommiputkessa. Sitten liuos haihdutetaan kui viin tyhjössä, jäännös digeroidaan useampaan kertaan eetterillä ja n-heksaanilla sitten haihdutetaan jälleen kuiviin. Saadaan valkea amorfinen aine, joka osoittautuu elektroforeesitutkimuksessa yhtenäiseksi, ja jolla saadaan 25 positiivinen ninhydriinitäplä. Tuote on&i-L-glutamyyli- ( ^"-tauriini)-glysiini, saanto 0,06 g (88 %) .

Analyysi kaavalle CgH^N^O^S (M = 311,3)

Laskettu: S 10,3 % Löydetty: S 10,0 %.

30 Infrapunaspektrissä karakteerisillä ryhmillä on seuraavat maksimit: 3100 (leveä); )>OH (COOH) 3200 (leveä); C=0 (COOH) 1730; )> C=0 (amidi-I) 1680;^C=O (amidi-II) 1560; p S=0 (SO2OH) 1220 (intensiivinen); S=0 (SO2O ) 35 )^ 1045 cm ^ (intensiivinen).

i4 6 8 81 0

Hydrolyysi: 20 mg ainetta pidetään 1 ml:ssa 6-n suolahappoa kiinnisulatetussa lasiputkessa 105°C:ssä 24 tuntia. Jäähdyttyä liuoksesta otetusta näytteestä suoritetaan pH l,8:ssa elektroforeesi. Liuos sisältää gluta-5 miinihappoa, glysiiniä ja tauriinia.

100 mg edellä valmistettuaO^-L-glutamyyli- (/-- tau-riini)-glysiiniä liuotetaan 25 ml:aan 0,2 molaarista aramo-niumvetykarbonaattipuskuria, jolla on pH 8,5. Liuokseen lisätään 1 mg karboksipeptidaasi A:ta liuotettuna 0,5 10 ml:aan vettä (entsyymin valmistaja: Serva, Heidelberg).

Seosta pidetään 24 tuntia termostaatissa 37°C:ssä, sitten se lyofilisoidaan. Kuivasta lyofilisaatista voidaan osoittaa ^ -L-glutamyylitauriini ja glysiini. Puhdasta glutamyylitauriinia saadaan elektroforeesin avulla tai 15 kromatografoimalla Dowex 50 patsaalla.

Esimerkki 6: J^-L-glutamyylitauriini (a) 0,47 g (1 mmooli) karbobentsyylioksi-o<C-L-glutamyyli- (^*"-p-nitrofenyyliesteri) -glysiinimetyylies-teriä liuotetaan 6 ml:aan pyridiiniä. Jäillä jäähdytet- 20 tyyn liuokseen viedään ensin 0,125 g (1 mmooli) tauriinia 2 ml:ssa vettä, sitten 0,28 ml (2 mmoolia) trietyyliamiinia niin pieninä annoksina, että liuos pysyy koko ajan kirkkaana. Reaktioseoksen annetaan seistä huoneen lämpötilassa 3 vuorokautta. Kuiviinhaihduttamisen jälkeen tyhjössä saa- 25 daan öljy, joka digeroidaan perusteellisesti eetterissä, sitten petrolieetterissä ja lopuksi kuivataan tyhjössä rikkihapon päällä. Saadaan karbobentsyylioksi-ö(,-L-gluta-myyli-( r- tauriini)-glysiinimetyyliesteriä.

(b) 100 mg edellä valmistettua karbobentsyylioksi-30 °C-L-glutamyyli-( l·- tauriini)-glysiinimetyyliesteriä saatetaan reaktioon huoneen lämpötilassa 2-n bromivetyhapon etikkahappoliuoksen (4 ml) kanssa, kunnes koko ainemäärä on liuennut (noin 30 minuuttia). Saatu kirkas liuos kaadetaan 30 ml:aan eetteriä ja jätetään viileään paikkaan 35 vuorokaudeksi. Syntynyt sakka lingotaan, pestään useampaan 6881 0 15 kertaan eetterillä ja kuivataan sitten tyhjössä kalium-hydroksidin, rikkihapon ja fosforipentoksin yllä. Kuten elektroforeettinen tutkimus osoittaa, saadaan°C-L-gluta-myyli-(^-tauriini)-glysiinimetyyliesterin vetybromidi 5 käytännöllisesti katsoen puhtaana.

(c) Edellä saatu suola saatetaan reaktioon 3 tunnin ajan 1-n natriumhydroksidiliuoksen (2 ml) kanssa samalla jäähdyttäen jäävedellä. Hydrolyysin edistymistä seurataan elektroforeesin avulla. Reaktioseokselle suoritetaan 10 ioninvaihto 10 ml :11a Dowex 50 H+-muodossa, sitten se lyo- filisoidaan. Koska elektroforeesi osoittaa vielä epäpuhtauksia, tuote kiteytetään riittävän puhtausasteen saavuttamiseen asti useampaan kertaan vesipitoisesta etanolista. Saadaan 40 mg (59 %) c<_-L-glutamyyli- (^^^tauriini) -15 glysiiniä.

Infrapunaspektrissä on karakteerisillä ryhmillä seuraavat maksimit: NH 3310; VnH^ 3100 (leveä); C=0 (COOH) 1730; ^0=0 (amidi-I) 1650; >>C=0 (amidi-II) 1570; >*S=0 1220 20 (intensiivinen), 1045 cm ^ (intensiivinen).

(d) 100 mg edellä valmistettua °<l_L-glutamyyli-( Λ· tauriini)-glysiiniä liuotetaan 25 ml:aan 0,2 molaarista am-moniumvetykarbonaattipuskuria, jolla on pH 8,5. Liuokseen lisätään 1 mg karboksipeptidaasi A:ta liuotettuna 0,5 25 ml:aan vettä (entsyymin valmistaja: Serva, Heidelberg).

Seosta pidetään 24 tuntia termostaatissa 37°C:ssa, sitten se lyofilisoidaan. Kuivasta lyofilisaatista voidaan osoittaa J^-L-glutamyylitauriini ja glysiini. Puhdasta ^-L-glutamyylitauriinia saadaan elektroforeesin avulla tai 30 kromatografroimalla Dowex 50 patsaalla.

Esimerkki 7: «^-L-glutamyylihomotauriini (a) 1,083 g (2,2 mmoolia) karbobentsyylioksi-L- glutamiinihappo-(^-bentsyyli)- ^-p-nitrofenyyliesteriä liuotetaan 6 ml:aan pyridiini-vesiseosta 2:1. Liuokseen 35 lisätään ensin 278 mg (2 mmoolia) homotauriinia, sitten 16 6881 0 0,59 ml (4,2 mmoolia) trietyyliamiinia. Keltainen liuos saa seistä huoneen lämpötilassa 72 tuntia ja haihdutetaan sitten kuiviin tyhjössä. öljymäinen jäännös liuotetaan veteen, neutraloidaan suolahapolla ja uutetaan sitten 5 p-nitrofenolin poistamiseksi jatkuvakäyttöisessä uuttamis- laitteessa eetterillä 8 tuntia. Vesifaasi haihdutetaan tyhjössä. Saadaan 1,68 g karbobentsyylioksi -bent- syyli)-L-glutamyylihomotauriinia.

(b) Koko edellä valmistettu ainemäärä (1,68 g) 10 liuotetaan 10 ml:aan 50 %:ista vesipitoista etanolia, sitten liuokseen lisätään 0,3 g 10 %:ista palladiumhiiltä, ja suspension lävitse johdetaan vetyä 4 tuntia. Sitten liuos suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. Jäännös liuotetaan 1-2 mlraan vettä ja liuos viedään trietyyliamiinin 15 poistamiseksi H+-muodossa olevaan Dowex 50 x 2 patsaaseen (1 x 35 cm). Eluddaan vedellä. Eluaattia otetaan talteen 50 ml ja se haihdutetaan sitten kuiviin. Jäännös sisältää 440 ml ^-L-glutamyylihomotauriinia, mikä vastaa 82 %:n saantoa. pH 6,5:ssä suoritettu elektroforeesi osoittaa 20 pieniä määriä osaksi neutraaleja, osaksi happamia aineita (homotauriini tai glutamiinihappo). Tuote voidaan puhdistaa esimerkiksi preparatiivisella elektroforeesilla.

Sekä pH 6,5:ssä että pH l,8:ssa suoritetussa elektroforeesissa substanssi vaeltaa katodiin päin. Sen suhteel-25 linen liikkuvuus kysteiinihappoon verrattuna on pH 6,5:ssä 0,68 ja pH l,8:ssa 0,50.

(n-butanoli-pyridiini-jääetikka-vesi 15:10:3:12) = 0,19 IR-spektrissa karakteerisillä ryhmillä on seuraavat maksimit: 30 P-NH 3345; >*NH*, OH 3200 - 2200; V CO 1740; TP CO-NH 1645; y SO" 1240, 1190, 1150, 1038; (f -NH 1570, 1535; SO~ 590 cm"1.

Esimerkki 8: r- L-glutamyyli-N-metyylitauriini (a) 1,083 g (2,2 mmoolia) karbobentsyylioksi-L- 35 glutamiinihappo-(bentsyyli) p-nitrofenyyliesteriä 17 6881 0 saatetaan reaktioon N-metyylitauriinin (278 mg, 2 mmoolia) kanssa esimerkissä 7a kuvatulla tavalla. Saadaan 1,59 g karbobentsyylioksi-/*'-- (iX_-bentsyyli) -L-glutamyyli-N-metyylitauriinia.

5 (b) Koko edellä valmistettu ainemäärä (1,59 g) hydrataan katalyyttisestä esimerkissä 7b kuvatulla tavalla. Saadaan 423 mg L-glutamyyli-N-metyylitauriinia, mikä vastaa 79 %:n saantoa.

Aine vaeltaa sekä pH 6,5:ssä että pH l,8:ssa paperi-10 elektroforeesissa anodia kohti. Suhteellinen liikkuvuus kysteiinihappoon verrattuna on pH 6,5:ssä 0,68, pH l,8:ssa 0,49.

(n-butanoli-pyridiini-jääetikka-vesi 15:10:3:12) = 0,16. Esimerkki 9: ^"-L-glutamyyli-L-kysteiinihappo 15 (a) 2,87 g (6,6 mmoolia) karbobentsyylioksi-L- glutamiinihappo- (<>C-bentsyyli) - P^-p-nitrofenyyliesteriä liuotetaan 20 ml:aan pyridiiniä, ja liuokseen lisätään 1,25 g (6 mmoolia) L-kysteiinihappomonohydraattia liuotettuna veden (17 ml) ja pyridiinin (17 ml) seokseen. Lisä-20 tään vielä 2,6 ml (18,6 mmoolia) trietyyliamiinia, minkä jälkeen reaktioseos saa seistä huoneen lämpötilassa 72 tuntia. Sitten liuos haihdutetaan tyhjössä 30°C:ssä. Jäännös liuotetaan 20 ml:aan vettä, liuos tehdään happa-meksi väkevällä suolahapolla ja ravistellaan sitten eet-25 terin kanssa (15 x 10 ml). Vesifaasi haihdutetaan tyhjös sä 35°C:ssä. Saadaan karbobentsyylioksi- Λ ( öC-bentsyy1i)-L-glutamyyli-L-kysteiinihappoa.

(b) Edellä valmistettu tuote liuotetaan 20 ml:aan vettä, lisätään 0,3 g 10 %:sta palladiumaktiivihiiltä, 30 ja suspension lävitse johdetaan vetyä 3 tuntia. Reaktio- seoksen jatkokäsittely tapahtuu esimerkissä 7b kuvatulla tavalla. Saadaan ^-L-glutamyyli-L-kysteiinihappoa, joka sulaa 187°C:ssä. Paperikromatografiällä suhteellinen liikkuvuus kysteiinihappoon verrattuna on pH 6,5:ssä 1,21 35 ja pH l,8:ssa 0,54.

18 6881 0 IR-spektrissä karakteerisillä ryhmillä on seuraavat maksimit: }) NH (amidi) 3423; OH 3300 - 2200; j) CO (kar- boksyyli) 1748, 1712; J>CO (amidi) 1627; j) NH (amidi) 1527; 5 .Pso” 1221, 1109, 1043; ($ SO~ 525 cm"1.

Analyysi kaavalle cqhi4N2°8S = 298,28)

Laskettu: C 32,86 %, H 4,73 %, N 9,39 %, S 10,75 % Löydetty: C 33,06 %, H 5,28 %, N 9,05 %, S 11,11 %.

Esimerkki 10: L-glutamyylikolamiinifosfaatti 10 (a) 1,083 g (2,2 mmoolia) karbobentsyylioksi-L- glutoimiinihappo- (oC-bentsyyli) p-nitrofenyyliesteriä liuotetaan 6 ml:aan pyridiinin ja veden 2:1-suhteessa valmistettua seosta. Liuokseen lisätään ensin 282 mg (2 mmoolia) kolamiinifosfaattia (US-patentti n:o 2 730 542) 15 ja sitten 0,87 ml (6,2 mmoolia) trietyyliamiinia. Reaktio- seos saa seistä huoneen lämpötilassa 72 tuntia, sitten se haihdutetaan tyhjössä. Jatkokäsittely suoritetaan karbobentsyylioksi -r- (CZ*.-bentsyyli) -L-glutamyylihomotau-riinin (esimerkki 7a) yhteydessä kuvatulla tavalla. Saa-20 daan 1,25 g karbobentsyylioksi-^-(ÖC-bentsyyli)-glutamyyli-kolamiinifosfaattia.

(b) Edellä saatua tuotetta (1,25 g) hydrataan kata-lyyttisesti suojaryhmien poistamiseksi. Hydraus ja puhdistus ioninvaihdolla suoritetaan ^^-L-glutamyylihomotaurii-25 nin (esimerkki 7b) valmistuksen yhteydessä kuvatulla ta valla. Saadaan 470 mg ^-L-glutamyylikolamiinifosfaattia, mikä vastaa 91 %:n saantoa. Tuote sisältää kuitenkin, kuten paperielektroforeesissa voidaan todeta, epäpuhtautena noin 15 - 20 % kolamiinifosfaattia. Puhdistusmene-30 telmänä voidaan käyttää mm. elektroforeesia.

Paperielektroforeesissa aine vaeltaa sekä pH 6,5:ssä että pH l,8:ssa anodia kohti. Suhteellinen liikkuvuus kysteiinihappoon verrattuna on pH 6,5:ssä 0,75, pH l,8:ssa 0,36.

35 R^ (n-butanoli-pyridiini-jääetikka-vesi 15:10:3:12) = 0,18.

19 6881 0

Esimerkki 11: /¾ -L-aspartyylitauriini (a) 526 mg (1,1 mmoolia) karbobentsyylioksi-L-asparagiinihappo- (CX-bentsyyli) -/3-p-nitrofenyyliesteriä (Chem.Ber. 97, 1789, 1964) liuotetaan 5 ml:aan pyridiiniä.

5 Liuos jäähdytetään 0°C:hen ja siihen lisätään sitten pieninä annoksina liuos, jossa on 125 mg (1 mmooli) tau-riinia 2 ml:ssa vettä, ja sen jälkeen 0,28 ml (2 mmoolia) trietyyliamiinia. Reaktioseos saa seistä huoneen lämpötilassa 48 tuntia, sitten se haihdutetaan tyhjössä.

10 Jäännös liuotetaan 5 ml:aan vettä ja aluksi keltaiseen liuokseen lisätään 1-n suolahappoa, kunnes väri häviää, p-nitrofenolin poistamiseksi liuosta ravistellaan eetterin kanssa (10 x 5 ml). Vesifaasi haihdutetaan tyhjössä. Saadaan 478 mg karbobentsyylioksi-^-pC-bentsyyli)-L-aspartyy-15 litauriinia.

(b) Koko edellä saatu tuotemäärä liuotetaan 6 ml:aan 50 %:ista vesipitoista etanolia. Liuokseen lisätään 100 mg 10 %:ista palladiumaktiivihiiltä, ja seosta hydra-taan sitten 4 tuntia johtamalla sen lävitse vetykaasua.

20 Suodatuksen ja haihduttamisen jälkeen tyhjössä trietyylia- miini poistetaan tuotteesta ^^-L-glutamyylihomotauriinin valmistuksen (esimerkki 7b) yhteydessä kuvatulla menetelmällä ioninvaihdolla. Saadaan 17 2 mg/ä-L-aspartyylitau-riinia, mikä vastaa 71 %:n saantoa. Tuotteessa on epäpuh-25 tautena jonkin verran tauriinia, joka voidaan poistaa mm. elektroforeesin avulla.

Paperielektroforeesissa aine vaeltaa sekä ph 6,5:ssä että pH l,8:ssa anodia kohti. Suhteellinen liikkuvuus kysteiinihappoon verrattuna on pH 6,5:ssä 0,77 ja pH l,8:ssa 30 0,58.

(n-butanoli-pyridiini-jääetikka-vesi 15:10:3:12) = 0,16.

Esimerkki 12: /^-L-aspartyylihomotauriini (a) 526 mg (1,1 mmoolia) karbobentsyylioksi-L- asparagiinihappo (öd-bentsyyli) -(δ-nitrofenyyliesteriä ja 35 139 g (1 mmooli) homotauriinia saatetaan reaktioon esimer- 6881 0 20 kissa 11 kuvatulla tavalla. Saadaan karbobentsyylioksi-/b - (öC“bentsyyli) -L-aspartyylitauriinia.

(b) Edellä saatu tuote hydrataan katalyyttisesti esimerkissä 7b kuvatulla tavalla. Saadaan 203 mg (84 %) 5 (b -L-aspartyylihomotauriinia.

Paperielektroforeesissa aine vaeltaa sekä pH 6,5:ssä että pH l,8:ssa anodia kohti. Kysteiinihappoon verrattuna suhteellinen liikkuvuus on pH 6,5:ssä 0,72 ja pH l,8:ssa 0,53.

10 Rf (n-butanoli-pyridiini-jääetikka-vesi 15:10:3:12) =0,17.

Esimerkki 13: /?) -L-aspartyylikolamiinifosfaatti (a) Karbobentsyylioksi-L-asparagiinihappo-(0^-bent-syyli) -/'ä-p-nitrofenyyliesteri ja kolamiinifosfaatti saatetaan reaktioon keskenään esimerkissä 10 kuvatulla taval- 15 la. Saadaan karbobentsyylioksi-^-(O^-bentsyyli)-L-aspar- tyylikolamiinifosfaattia.

(b) Edellä saatu aine hydrataan katalyyttisesti esimerkissä 7b kuvatulla tavalla. Saadaan <3-L-aspartyyli-kolamiinifosfaattia.

20 Paperielektroforeesissa aine valetaa sekä pH 6,5:ssä että pH l,8:ssa anodia kohti. Kysteiinihappoon verrattuna suhteellinen liikkuvuus on pH 6,5:ssä 0,81 ja pH l,8:ssa 0,40.

(n-butanoli-pyridiini-jääetikka-vesi 15:10:3:12) = 0,14.

Claims (13)

1. Välituotteina terapeuttisesti käyttökelpoisten aminohappo johdannaisten valmistuksessa, joilla on yleinen kaava 1' h2n-ch-co-oh (CH ) j 2 n (i·) CO-N-CH- (CHJ -B1 ; | £ t. 10. r5 5 jossa R on vety tai C, .-alkyyli, R on vety tai karboksyyli, 1 ^ 4 B on -S020H tai -OPO(OH)2, n on 1 tai 2 ja t on 1 tai 2, ja niiden farmakologisesti hyväksyttävien suolojen ja optisesti aktiivisten isomeerien valmistuksessa käyttökelpoiset uudet 15 aminohappojohdannaiset, tunnetut siitä, että niillä on yleinen kaava I R1HN-CH-CO-A1 (CH-) I 2 n / j)

20 I 1 ' ^1 CO-N-(CH) —(CHJ . -Q ti 2 t jossa A1 on hydroksyyli, mahdollisesti p-asemassa alkoksilla tai 25 nitrolla subsitutoitu C-, 0-aralkoksi tai - (NH-CHR^-CO) ,,-Y, 6 /-y r jossa R on vety tai C,,-alkyyli, Y on hydroksyyli tai 1-4 η C^_4~alkoksi ja r on kokonaisluku 1-10, B on -S020H tai -OPO(OH)2, R on vety tai C^_4~alkyyli,

30 R^ on vety, C^^-alkoksikarbonyyli tai mahdollisesti yhdellä tai useammalla subsituenteista halogeeni, alkoksi ja nitro substituoitu C-, „-aralkoksikarbonyyli , 5 '-y R on vety tai karboksyyli, n on 1 tai 2 ja 35. on 1 tai 2, jolloin A^ ei ole hydroksyyli, jos R^ on vety, niiden suolat ja optisesti aktiiviset isomeerit. _______ — ίγ^ ----- 22 6381 0

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen aminohappojohdannainen, tunnettu siitä, että se on /( Λ-bentsyyli)-glutamyyl i-Y7 -tauriini, sen suola tai optisesti aktiivinen isomeeri.

3. Patenttivaatimuksen i mukainen aminohappojohdan nainen, tunnettu siitä, että se on /N-karbobent-syylioksi-( oL-bentsyyli)-aspartyyli-^7-tauriini, sen suola tai optisesti aktiivinen isomeeri.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen aminohappojohdan- 10 nainen, tunnettu siitä, että se on /( ίΛ-bentsyyli) -aspartyyli -ή7 -hoAiotauriini, sen suola tai optisesti aktiivinen isomeeri.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen aminohappojohdannainen, tunnettu siitä, että se on /N-karbobent- 1. syylioksi- (<Λ -bentsyyli) -aspartyyli -<7 -kolamiinifosfaatti, sen suola tai optisesti aktiivinen isomeeri.

5 6 8 81 0

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen aminohappojohdannainen, tunnettu siitä, että se on /N-karbobent-syylioksi- (cK -bentsyyli) -glutamyyli- V -homotauriini, sen 20 suola tai optisesti aktiivinen isomeeri.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen aminohappojohdan nainen, tunnettu siitä, että se on /N-karbobent-syylioksi -M -bentsyyli)-glutamyyli- -kolamiinifosfaatti, sen suola tai optisesti aktiivinen isomeeri.

8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen aminohappojohdannai nen , tunnettu siitä, että se on /N-karbobentsyyli-oksi- u -bentsyyli)-glutamyyli- -kysteiinihappo, sen suola tai sen optisesti aktiivinen isomeeri.

9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen aminohappojohdannai- 30 nen, tunnettu siitä, että se on /N-karbobentsyyIloksi- ( Ϋ-ky steamidi) -glutamyyli- a^-glysiinietyyliesteri .

10. Patenttivaatimuksen 1 mukainen aminohappojohdannainen, tunnettu siitä, että se on /N-karbobentsyyIloksi- (**-tauriini)-glutamyyli -<7 -glysiinietyyliesteri.

11. Patenttivaatimuksen 1 mukainen aminohappojohdannai nen, tunnettu siitä, että se on /N-karbobentsyyli-oksi-(^-tauriini)-glutamyyli -*7 -glysiinimetyyliesteri. 23 6 881 0

12. Patenttivaatimuksen 1 mukainen aminohappojohdannainen, tunnettu siitä, että se on /T( V'-tauriini) -L-glutamyyli- Λ7 -glysiini tai sen suola.

13. Patenttivaatimuksen 1 mukainen aminohappojohdan-5 nainen, tunnettu siitä, että se on /N-karbobent- syylioksi- ( 0^-bentsyyli) -L-glutamyyli- »^/-tauriini, sen suola tai optisesti aktiivinen isomeeri. 6881 0 24