FI67857C

FI67857C - Analogifoerfarande foer framstaellning av en foerening som aeranvaendbar vid terapi och haemning av sjukdomar foeranled dav parasiter

Info

Publication number: FI67857C
Application number: FI782880A
Authority: FI
Inventors: John Clifford Chabala; Michael Herbert Fisher
Original assignee: Merck & Co Inc
Priority date: 1977-10-03
Filing date: 1978-09-21
Publication date: 1985-06-10
Also published as: IT1107561B; DK434578A; NO783307L; RO75612A; AU3999678A; NL930116I1; IL55603A0; IE781963L; FI67857B; DK152128C; IE48032B1; JPS5461198A; ATA711378A; EP0001689A1; NO149662B; JPH0317837B2; DD140458A5; YU231978A; AU519569B2; EP0001689B1

Description

[TTi^rn KU U LUTUSJ U LK AISU „ B (11) UTLÄGGNINGSSKRIFT 6 7 857 C (45) Γ-.t:-’ i! 10 CS 1935

Patent I/ * ’ i:1 nfc (51) Kv.ik.*/int.ci.* C 07 H 17/08, C 07 D ^93/22 (21) Patenttihakemus — Patcntansökning 782880 (22) Hakemispäivä — Ansökningsdag 21.03.78 (Η) (23) Alkupäivä — Glltighetsdag ^ .09.78 (41) Tullut julkiseksi — Blivit offentlig Qk . 04.79

Patentti, ja rekisterihallitus (44) Nähtäväksipanon ja kuul.julkaisun pvm. - .

Patent- och registerstyrelsen ' ' Ansökan utlagd och utl.skriften publicerad 2a.02.85 (32)(33)(31) Pyydetty etuoikeus — Begärd prioritet 03.10.77 USA(US) 838603 (71) Merck & Co., Inc., 126 E. Lincoln Avenue, Rahway, New Jersey, USA(US) (72) John Clifford Chabala, Westfield, New Jersey, Michael Herbert Fisher, Bridgewater, New Jersey, USA(US) (7*0 Oy Kolster Ab (5*0 Analogiamenetelmä loisten aiheuttamien tautien hoidossa ja ehkäisyssä käyttökelpoisen yhdisteen valmistamiseksi - Analogiförfarande för framställning av en förening som är användbar vid terapi och hämning av sjukdomar föranledda av parasiter

Keksinnön kohteena on analogiaraenetelmä loisten aiheuttamien tautien hoidossa ja ehkäisyssä käyttökelpoisen yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava I

CH3 f^Y^CH3 ^0 ^R1

CV'S, T

S °Y° Γ ° —1-γ/1— CH3 R2 6785 7 jossa R^ on iso-propyyli tai sek.-butyyli; on raetoksi, hydroksi tai (alempi alkanoyyli)oksi; ja R^ on vety; alempi alkanoyyli; oi -L-oleandrosyyli; 4'-(alempi alkanoyyli)-.i~L -oleandrosyyli; 4(x-L-oleandrosyyli)-oi-L-oleandrosyyli; 4"-(alempi alkanoyyli)-4'-(ol-L-oleandrosyyli ) -oC-L-oleandrosyyli.

Tässä keksinnössä termillä "alempi alkanoyyli" tarkoitetaan niitä alkonoyyliryhmiä, joissa on 2-6 hiiliatomia kuten asetyyli, propionyyli, buturyyli ja pivaloyyli .

Edullisia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat ne, joissa R^ on iso-propyyli tai sek.-butyyli; R2 on metoksi tai hydroksi; ja on vety,<X-L-oleandrosyyli tai 4'-(oL-L-oleandrosyyli)- oi. -L-oleandrosyyli.

Edullisia saatuja yhdisteitä ovat myös ne yhdisteet, joissa R3 on alempi alkanoyyli, joka on disakkaridi-, monosakkaridi-tai aglykoni yhdisteessä oleva asetyyli.

Kaavan I mukaiset yhdisteet liittyvät C-076-yhdisteisiin, jotka ovat makrolideja. Merkintää C-076 käytetään sarjasta yhdisteitä, jotka on eristetty C-076:ta tuottavan kannan Strepto-myces avermitilis viljelyliemestä.

Sarjan C-976 yhdisteillä on rakenne ? „ r· iiV · 13 ^ r2

“> I V

^ v I 8η Γ 0 - -V5 y— CH3 R3 3 67857 jossa R on 4'-(x_-L-oleandrosyyli)-L-oleandroosiryhmä, jolla on kaava r„ CHx CH3 Γ°\ ho—·^4" y— o —vly~ CH^O ^ CH3° ja jossa katkoviiva tarkoittaa yksinkertaista tai kaksoissidos-ta; R^ on hydroksi ja on läsnä vain silloin, kun katkoviiva tarkoittaa yksinkertaista sidosta; on iso-propyyli tai sek.-but-yyli; ja R^ on metoksi tai hydroksi.

On olemassa kahdeksan erilaista C-076-yhdistettä ja niitä merkitään yksittäisten yhdisteiden rakenteen perusteella seuraavasti: Ala, Alb, A2a, A2b, Bla, Blb, B2a, B2b.

Edellä mainituilla rakennekaavoilla esitettyinä C-076-yhdisteet ovat seuraavat:

Yhdiste R^ tai sidos R^ R^

Ala kaksoissidos sek.-butyyli -OCH3

Alb kaksoissidos iso-propyyli ”0CH3 A2a -OH sek.-butyyli -OCH3 A2b -OH iso-propyyli -OCH^

Bla kaksoissidos sek.-butyyli -OH

Blb kaksoissidos iso-propyyli -OH

B2a -OH sek.-butyyli -OH

B2b -OH iso-propyyli -OH

C-076-yhdisteet, jotka ovat tyydyttämättömiä kohdassa 22,23 muodostavat "1-sarjan".

Uudet kaavan I mukaiset yhdisteet valmistetaan näistä 1-sarjan yhdisteistä, jolloin lähtöaineena käytetään C-076-yh-disteitä, joista on poistettu joko toinen tai molemmat — -L-oleandroosi-osat ja/tai joiden hydroksiryhmistä yksi tai useampia on asyloitu.

Keksinnön mukaiselle menetelmälle kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi on tunnusomaista, että yhdisteen, jolla 67857

on kaava II

CH- __nu I 3 ^ CH3 “"k, t '

!| OH

fV'l 0 CH 3 Ί R2 jossa R^ , ja R^ merkitsevät samaa kuin edellä, 22,23-kaksois-

sidos hydrataan käsittelemällä kaavan II mukaista yhdistettä vedyllä, kun läsnä on katalyyttinen määrä, edullisesti 0,05-0,5 moolia/lähtöainemooli, yhdistettä, jolla on kaava III

^“(CgH ) 3P//3RhX III

jossa X on halogeeni, edullisesti kloori.

Kuten C-076-lähtöaineiden rakenteen analyysin perusteella on selvästi nähtävissä, on 1-sarjan yhdisteissä viisi tyydyttämätöntä kohtaa. Keksinnön mukaisessa menetelmässä pelkistetään 22,23-kaksoisidos, samalla kun kaikki neljä muuta tyydyttämättömään kohtaan sekä kaikki molekyylin muut reaktiokykyiset ryhmät jäävät ennalleen.

Spesifisenä hydrauskatalysaattorina käytetään edullisesti kaavan III mukaista yhdistettä, jossa X on kloori, tämä yhdiste on tris(trifenyylifosfiini)-rodium(I)kloridi, joka tunnetaan myös Wilkinsonin homogeenisena katalysaattorina.

Hydrauksessa käytetään katalyyttinen määrä katalysaattoria. Katalysaattorin määrä ei ole kriittinen, mutta on edullista käyttää 0,05-0,5 moolia katalysaattoria kutakin lähtöaineen moolia kohti. Moolisuhteita, jotka ovat 0,25-0,40, ovat edullisimpia .

5 67857

Hydraus suoritetaan vetykehässä joko ilmakehän paineessa tai paineessa, joka voi olla jopa neljä ilmekehää tavanomaisessa laboratoriossa käytettävässä hydrauslaitteessa. Tavallisesti lähtöaine ja katalysaattori liuotetaan liuottimeen. Edullisia liuottimia ovat hiilivetyliuottimet kuten bentseeni, tolueeni, petro-lieetteri ja muut alkaanihiilivedyt. Reaktio on täydellinen, kun se on kuluttanut lasketun määrän vetyä. Tämä vaatii yleensä noin 1-48 tuntia. Hydraus voidaan suorittaa lämpötiloissa, jotka ovat huoneen lämpötilasta aina 75°C:n lämpötilaan saakka, kuitenkin huoneen lämpötilaa pidetään edullisena lämpötilana. Hydraustuot-teet eristetään ja puhdistetaan sinänsä tunnetuilla tavoilla.

Sekä monosakkaridien että aglykonien valmistukseen yleisesti soveltuviin reaktio-olosuhteisiin sisältyy C--076-yhdisteen liuottaminen happameen, ei-nukleofiiliseen, vettä sisältävään orgaaniseen liuottimeen, joka sekoittuu veden kanssa, edullisesti dioksaanin, tetrahydrofuraanin, dimetoksietaanin, dimetyyli-formamidiin, bis-2-metoksietyylieetteriin yms., jossa veden määrä on 0,1-20 tilavuus-%. Konsentroitua happoa lisätään vettä sisältävään orgaaniseen liuottimeen 0,01-10 tilavuus-%. Yleensä reaktioseosta sekoitetaan noin 20-40°C:ssa, edullisesti huoneen lämpötilassa, 6-24 tuntia. Pienet happomäärät, jolloin liuotti-messa on happoa noin 0,01-0,1 %, tuottavat pääasiallisesti mono-sakkaridia yllä mainituissa reaktio-olosuhteissa. Suuremmat happomäärät, jolloin liuottimessa on happoa noin 1-10 %, tuottavat ensisijaisesti aglykonia yllä mainituissa reaktio-olosuhteissa. Happomäärät noin 0,1-1 % tuottavat yleensä monosakkaridin ja aglykonin seoksia. Tuotteet eristetään ja seokset erotetaan esim. pylväs-, preparatiivisella ohutkerros- ja korkeapaine nestekro-raatografiällä ja muilla tunnetuilla menetelmillä.

Sopivia happoja ovat mineraalihapot ja orgaaniset hapot kuten rikki-, halogeenivety-, fosfori-, trifluorietikka- ja trifluorimetaanisulfonihappo. Halogeenivetyhappo on edullisesti kloorivety- tai bromivetyhappo. Edullinen happo on myös rikkihappo.

Toisessa menetelmässä C-076-yhdisteiden monosakkaridin tai aglykonin valmistamiseksi käytetään erilaisia liuotinjärjestelmiä 6 67857 monosakkaridille ja aglykonille. Monosakkaridin valmistusmenetelmässä käytetään 1 tilavuus-%:sta happoa, joka on isopropanolis-sa, 20-40°C:ssa, edullisesti huoneen lämpötilassa, 6-24 tunnin ajan. Aglykonien valmistamiseen on havaittu soveltuvan 1 tilavuus-%: sen hapon metanolissa, edellä mainituissa reaktio-olosuhteissa.

Kun tätä menetelmää sovelletaan lähtöaineeseen (yhdisteeseen, jossa on 22,23-kaksoissidos), nukleofiilinen additioreak-tion mahdollisuus on kaksoissidoksessa. Nukleofiilisen additio-reaktion tapahtuessa syntynyt sivutuote poistetaan kromatografisella puhdistuksella.

Yllä mainitut hapot soveltuvat tähänkin menetelmään, ja rikkihappo on tässäkin menetelmässä edullinen happo.

Yllä kuvatut yhdisteet eristetään reaktioseoksesta, ja yhdisteiden seokset erotetaan sinänsä tunnetuilla tavoilla käyttämällä erityisesti yllä kuvattuja kromatografisia menettelytapoja.

Asyloidut yhdisteet saadaan asylointitekniikalla, jossa reaktio-olosuhteet vaihtelevat riippuen asyloitavan hydroksi-ryhmän reaktiokyvystä. Kun on asyloitava ainakin kaksi hydroksi-ryhmää, käytetään erilaisia reaktio-olosuhteita, jotta seosten muodostuminen olisi mahdollisimman vähäistä.

Käytettävät asylointiaineet ovat yleisesti alempi alka-noyylien halogenideja, edullisesti klorideja.

Lisäksi asylointiaineet voivat olla anhydridinä tai halo-geeniformiaattina. Siinä tapauksessa, että reaktiot suoritetaan halogenidin kanssa, on usein edullista sisällyttää reaktioseok-seen emäksinen yhdiste, joka voi reagoida halogenivedyn kanssa ja neutraloida sen, kun se muodostuu reaktion kuluessa. Emäksinen yhdiste on edullisesti tertiäärinen amiini, kuten trietyyli-amiini, pyridiini, dimetyyliaminopyridiini tai di-isopropyyli-etyyliamiini.

Emäksistä yhdistettä tarvitaan ekvimolaariset määrät laskettujen vapautuvien halogenivedyn moolien suhteen, kuitenkaan ylimäärä, silloinkaan kun emäksistä yhdistettä käytetään liuottimena, ei ole haitallinen.

^ 67857

Al-sarjan V-076-yhdisteissä on vain yksi hydroksiryhraä, 4"-hydroksi/ joka voidaan asyloida. Monosakkaridin tai aglykonin muodostuminen kuitenkin jättää vain yhden hydroksiryhmän, joka voidaan asyloida, tämä on 4'- tai 13-hydroksiryhmä.

Al-sarjan C-076-yhdisteissä 4"-, 4‘- ja 13-hydroksiryh-mien ollessa kysymyksessä asylointiaine liuotetaan sopivaan liuot-timeen, edullisesti pyridiiniin, ja asylointiaine lisätään. Reaktiota pidetään yllä lämpötilassa, joka on 0°C:sta huoneen lämpötilaan, 4-24 tunnin ajan. Tuote eristetään sinänsä tunnetuilla tavoilla.

Bl-sarjan yhdisteissä on kaksi hydroksiryhmää: 4"-(4'-tai 13-) ja 5-asemissa. Kuitenkin näillä kahdella hydroksiryh-mällä on samanlainen reaktiivisuus. Kun Bl-sarjan yhdiste ja pyridiinin liuotettu asyloiva aine saatetaan reagoimaan noin huoneen lämpötilassa, 4-24 tunnin ajan, saadaan diasyyliyhdiste. Kun reaktio suoritetaan 0°C:ssa, saadaan 4"-(4'- tai 13-) ja 5-monoasyyliyhdisteiden seos. Yksittäisten yhdisteiden saamiseksi seos kromatografioidaan pylväissä tai preparatiivisella kro-matografialevyllä, jossa on aluminiumoksidia tai silikageeliä, ja yksittäiset yhdisteet eristetään helposti. Lisäksi asyloitu-jen yhdisteiden seosten erottamiseen voidaan käyttää esimerkiksi korkeapainenestekromatografiaa.

Täten valmistetut asyyliyhdisteet eristetään reaktioseok-sesta sinänsä tunnetuilla tavoilla.

Kaavan I mukaisilla uusilla yhdisteillä on merkittävä loisia tappava aktiivisuus matolääkkeinä, ulkoloisia tappavina aineina, hyönteismyrkkyinä ja punkkeja tappavina aineina ihmisten ja eläinten terveydenhoidossa sekä maatalouden piirissä.

Sairaus tai tautien ryhmä, jota yleisesti kuvataan mato-taudiksi johtuu isäntäeläimen saamasta tartunnasta, jonka lois-madot, sisälmysmatoina tunnetut, aiheuttavat. Matotauti on yleinen ja vakava taloudellinen ongelma kotieläinten piirissä, kuten sialla, lampaalla, hevosilla, nautakarjalla, vuohilla, koirilla, kissoilla ja siipikarjalla. Sisälmysmatojen joukosta sukkulamadot aiheuttavat laajalle levinneen ja usein vakavan tartunnan erilaisilla eläinlajeilla. Yleisimmät, yllämainituilla eläimillä 8 67857 tartunnat aiheuttavat sukkulamatojen suvut ovat Haemonchus, Trichostrongylus, Ostertagtia, Nematodirus, Cooperia, Ascaris, Bunostomum, Oesophagostomum, Chabertia, Trichuris, Strongylus, Trichonema, Dictyocaulus, Capillaria, Heterakis, Toxocara, Ascaridia, Oxyuris, Ancylostoma, Uncinaria, Toxascaris ja Parascaris. Näistä tietyt, kuten Nematodirus, Cooperia ja Oesphagostomum tartuttavat lähinnä suoliston alueen, kun muut taas, kuten Haemonchus ja Ostertagia, ovat yleisempiä vatsassa, kun eräät kuten Dictyocaulus löytyvät keuhkoista. Muita loisia saattaa olla muissa kudoksissa ja elimissä kuten sydämessä ja verisuonistossa, ihonalaisessa ja lymfakudoksessa yms. Loistar-tunnat, jotka tunnetaan matotauteina, aiheuttavat anemiaa, ravitsemushäiriöitä, heikkoutta, painon menetystä, vakavia vaurioita suoliston seinämissä ja muissa kudoksissa ja elimissä, ja jos ne jätetään hoitamatta, saattavat tuottaa tartunnan saaneen isännän kuoleman. Keksinnön mukaisilla, hydratuilla C-076-yhdis-teillä on odottamattoman suuri aktiivisuus näitä loisia kohtaan, ja lisäksi ne ovat aktiivisia Dirofilaria kohtaan koirilla, loisia Nematospiroides, Syphacia ja Aspiculuris kohtaan jyrsijöillä, eläinten ja lintujen niveljalkaisia ulkoloisia, kuten punkkeja, täitä, kärpäsiä, lihakärpäsiä kohtaan, lampaalla Lucilia sp.:a kohtaan, purevia hyönteisiä ja sellaisia siirtyviä toukkia kuten Hypoderma sp.:a kohtaan nautaeläimillä, Gastrophilusta kohtaan hevosella ja Cuterebra-lajeja kohtaan jyrsijöillä.

Kysymyksessä olevat yhdisteet ovat käyttökelpoisia myös loisia kohtaan, jotka tarttuvat ihmisiin. Yleisimmät ihmisen vatsasuoliston seudun loissuvut ovat Ancylostoma, Necator, Ascaris, Strongyloides, Trichinella, Capillaria, Trichuris ja Enterobius. Muut lääkeopillisesti tärkeät loisten suvut, joita esiintyy veressä tai muissa kudoksissa ja elimissä gastrointes-tinaalisen alueen ulkopuolella ovat rihmamaiset madot kuten Wuchereria, Brugia, Onchocerca ja Loa, Drancunculus ja Strongyloides ja Trichinella suolistomatojen suolen ulkopuoliset kehitysasteet. Yhdisteillä on käyttöä myös ihmisessä loisivia niveljalkaisia, purevia hyönteisiä ja muita kaksisiipisiä tuhohyönteisiä vastaan, jotka aiheuttavat harmia ihmiselle.

9 67857

Yhdisteet ovat aktiivisia myös taloudessa esiintyviä tuhohyönteisiä kuten torakkaa Blatella sp., vaatekoita Tineola sp. , turkiskuoriaista Attagenus sp., ja huonekärpästä Musca domestica kohtaan.

Yhdisteet ovat käyttökelpoisia myös varastoitujen jyvien tuhohyönteisiä kuten Tribolium sp., Tenebrio sp. ja viljelyskasvien tuhohyönteisiä kuten hamähäkkipunkkeja (Tetranychus sp.), punkkeja Acyrthiosiphon sp. vastaan; vaeltavia suorasiipisiä kuten heinäsirkkoja ja kasvikudoksissa elävien hyönteisten epäkypsiä kehitysvaiheita vastaan. Yhdisteet ovat käyttökelpoisia nematosideinä torjuttaessa maassa eläviä sukkulamatoja ja kasvien loisia kuten Meloidogyne-lajeja, joilla voi olla merkitystä maanviljelyksessä.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden aktiivisuus eräitä loisia vastaan ilmenee taulukosta I. Kokeet suoritettiin seuraavilla loisilla:

Koodi Loinen

Ts Trichostrongylus sigmodontus

Te Trichostrongylus colubriformus

He Haemonchus contortus

Oc Ostertagia circumcincta

Ta Trichostrongylus axei

Cs Cooperia spp.

Oe Oesophogostomum columbianum

Co Cooperia Oncophora

Yhdiste Koodi Annos/Aktiivisuus 10 67857

Taulukko I

22.23- dihydro Ts 110 pg/kg aktiivinen C-076 Bla m 1 . . . . .

Te 50 ug/kg aktiivinen

He 50 jig/kg aktiivinen

Oc 100 pg/kg aktiivinen

Ta 100 pg/kg aktiivinen

Cs 100 ug/kg aktiivinen

Oe 50 pg/kg aktiivinen

Co 0,5 mg/kg aktiivinen 22.23- dihydro Ts 1,25 mg/kg hieman aktiivinen C-076 Bla aglykoni m , Λ. .

2 Te 100 gg/kg aktiivinen \

He 3 mg/kg hieman aktiivinen

Ta 3 mg/kg kohtalaisen aktii vinen

Oe 3 mg/kg aktiivinen

Co 3 mg/kg hieman aktiivinen 22.23- dihydro Ts 200 gg/kg aktiivinen C-076 Bla mono- . , . . .

sakkaridi Tc 200 pg/kg aktllvlnen

He 300 pg/kg aktiivinen

Oc 300 pg/kg aktiivinen

Ta 300 pg/kg aktiivinen

Oe 300 pg/kg aktiivinen

Co 1 mg/kg aktiivinen 22.23- dihydro Ts 1,25 mg/kg hieman aktiivinen C-076 Ala _ ocn

Tc 250 pg/kg aktiivinen

He 150 pg/kg aktiivinen

Oc 300 pg/kg kohtalaisen aktii vinen

Oe 300 pg/kg aktiivinen 11

Yhdiste Koodi Annos/Aktiivisuus 67857

Taulukko I (jatkoa) 22.23- dihydro Ts 1,25 mg/kg hieman aktiivinen monosakkaridi Tc 1'25 ra9/k9 aktiivinen 4"-0-asetyyli- Ts 2,5 mg/kg hieman aktiivinen 22'2i? ^ihydro Tc 1,25 mg/kg hieman aktiivinen 4",5-0-diasetyyli- Ts 0,5 mg/kg hieman aktiivinen C-076 Bla^dr° Tc 0,5 mg/kg hieman aktiivinen 4"-0-asetyyli- Ts 100 pg/kg hieman aktiivinen C-076 Bla^r° Tc 100 hieman aktiivinen

He 100 pg/kg aktiivinen

Oc 100 pg/kg kohtalaisen aktiivinen

Ta 100 pg/kg hieman aktiivinen

Oe 100 pg/kg aktiivinen 41-O-asetyyli- Ts 0,5 mg/kg hieman aktiivinen C-0^6^Bla^r° Tc 100 pg/kg hieman aktiivinen monosakkaridi Oc 100 pg/kg kohtalaisen aktiivinen

Ta 100 pg/kg kohtalaisen aktiivinen

Co 10 0 pg/kg kohtalaisen aktiivinen 5-O-asetyyli- Ts 2,5 mg/kg hieman aktiivinen C-076 Bla^r° Tc 500 pg/kg hieman aktiivinen monosakkaridi

Seos, jossa 80 % Ts 150 pg/kg aktiivinen 22.23- dihydro m , , . . .

„ . Tc 25 ug/kg aktiivinen C-076 Bla:ta ja Γ 20 % 22,23-dihydro C-076 Blb:ta 13-O-asetyyli- Ts 2,5 mg/kg hieman aktiivinen C-07 6 Β1^^Γ° Tc 2,5 hieman aktiivinen aglykoni

Taulukko I (jatkoa)

Yhdiste Koodi Annos/Aktiivisuus 12 67857 22.23- dihydro Ts 250 ug/kg akti ivinen C-076 Blb φ i ,

Tc ^0 pg/kg aktiivinen 22.23- dihydro Ts 500 ug/kg hieman aktiivinen C-076 Blb φ mn / monosakkaridi iC 1UU hieman aktiivinen

Seos, jossa 80 % 22-23-dihydro ~ ^ C-076 Bla monosak- Ts 2,5 /kg aktiivinen karidia ja 20 % Tc 50 ug/kg aktiivinen 22.23- dihydro ' C-076 Blb mono- sakkaridia 22.23- C-076 Blb Ts 5 mg/kg hieman aktiivinen aglykoni Tc 5 mg/kg hieman aktiivinen Nämä yhdisteet voidaan annostella suun kautta yksikköannok-sen muodossa kapselina pillerinä tai tablettina tai lääkejuomana, kun niitä käytetään nisäkkäiden matolääkkeinä. Lääkejuoma on tavallisesti aktiivisen aineosan liuos, suspensio tai dispersio vedessä yhdessä suspendoivan aineen kuten bentoniitin ja kostutus-aineen tai sen kaltaisen täyteaineen kanssa. Tavallisesti lääke-juomat sisältävät myös vaahtoamista estävän aineen. Lääkejuomaformu-laatiot sisältävät tavallisesti noin 0,001-0,5 paino-% aktiivista yhdistettä, edullisesti ne sisältävät aktiivista yhdistettä 0,01-0,1 paino-%. Kapselit ja pillerit sisältävät aktiivisen aineosan sekoitettuna kantaja-aineeseen.

Kun halutaan antaa C-076-johdannaiset kuivassa, kiinteässä yksikköannoksen muodossa, tavallisesti käytetään kapseleita, pillereitä tai tabletteja, jotka sisältävät halutun määrän aktiivista yhdistettä. Nämä annosmuodot valmistetaan sekoittaen aktiivinen aineosa perinpohjaisesti ja tasaisesti sopivien hie 13 6785 7 nojakoisten laimentimien, täyteaineiden, disintegraattoriainei-den ja/tai sitojien kanssa. Sellaiset yksikköannosformulaatiot saattavat vaihdella laajalti niiden kokonaispainon ja loisia tappavan aineen suhteen riippuen käsiteltävästä isäntäeläimestä, infektion tyypistä ja voimakkuudesta ja isännän painosta.

Kun aktiivinen yhdiste annetaan eläimen ruoan yhteydessä, se hajoitetaan perusteellisesti ruokaan, tai sitä käytetään ulkonaisena voiteena tai pillereiden muodossa, jotka lisätään viimeisteltyyn ruokaan tai vaihtoehtoisesti ne syötetään erikseen. Vaihtoehtoisesti keksinnön mukaiset loisia tuhoavat yhdisteet saatetaan antaa eläimien ruoansulatuskanavan ulkopuolista tietä, esim. pötsin kautta, lihakseen, henkitorven kautta tai ihonalaisena ruiskeena, jolloin aktiivinen aineosa liuotetaan tai dispergoi-daan liukoiseen kantaja-aineeseen. Ruoansulatuskanavan ulkopuolista annostelua varten aktiivinen aine sekoitetaan sopivasti hyväksyttävän apuaineen, mieluummin kasvisöljyn kuten maapähkinäöljyn, pellavansiemenöljyn yms. kanssa. Käytetään myös muita ruoansulatuskanavan ulkopuolista tietä tapahtuvaan annosteluun soveltuvia apuaineita kuten orgaanisia valmisteita, joissa on "solketalia", glyseroliformaalia, sekä käytetään myös vettä sisältäviä parenteraalisia formulaatioita. Aktiivinen monosakkari-di tai aglykoni-C-076-yhdiste tai sellaiset yhdisteet liuotetaan tai suspendoidaan parenteraaliseen formulaatioon annostelua varten; sellaiset formulaatiot sisältävät tavallisesti 0,005-5 pai-no-% aktiivista yhdistettä.

Vaikka keksinnön mukaisilla loisia torjuvilla aineilla on ensisijaista käyttöä hoidettaessa ja/tai estettäessä matotautia, ne ovat käyttökelpoisia estettäessä tai hoidettaessa tauteja, joita muut loiset, esim. niveljalkaiset loiset kuten punkit, täit, kirput ja muut purevat hyönteiset aiheuttavat kotieläimissä ja siipikarjalla. Ne ovat tehokkaita muissa elämissä, ihminen mukaanluettuna, esiintyvien loistautien hoidossa. Paras käytettävä määrä parhaan tuloksen saavuttamiseksi riippuu tietenkin käytetystä yksittäisestä yhdisteestä, käsiteltävistä eläinlajeista ja loistartunnan tai -vaivan tyypistä ja vakavuudesta. Yleisesti saadaan uusilla yhdisteillä hyviä tuloksia, kun an 14 67857 nostellaan suun kautta 0,001 mg-10 mg/kg eläimen ruumiin painoa, jolloin sellaiset kokonaisannokset annetaan yhdellä kertaa tai jaettuina annoksina, suhteellisen lyhyen ajan, kuten 1-5 päivän, kuluessa. Edullisilla kaavan I mukaisilla yhdisteillä hillitään tällaisia eläimillä esiintyviä loisia antamalla niille yhdistettä yksittäisannoksena, jonka suuruus on 0,025-0,5 mg/ruumiin painoa. Tarvittaessa käsittelyt toistetaan infektion uusiutumisen estämiseksi, mikä riippuu loislajeista ja käytettävästä maataloustekniikasta. Näiden aineiden annostelutekniikat eläimien suhteen ovat yleisesti eläinlääkintään perehtyneiden tiedossa.

Kun tässä kuvattuja yhdisteitä annetaan eläinten ruoan osana tai juomaveteen liuotettuna tai lietettynä, valmistetaan koostumuksia, joissa aktiivinen yhdiste tai yhdisteet perinpohjaisesti sekoitetaan inerttiin kantajaan tai laimennusaineeseen. Inertillä kantajalla tarkoitetaan kantaja-ainetta, joka ei reagoi loisia tappavan aineen kanssa ja jota saatetaan antaa eläimelle turvallisesti. Rehun annostelun yhteyteen soveltuva kantaja-aine on mieluummin, tai saattaa olla, eläimeen päivässä saatavan ravintoannoksen aineosa.

Sopivat koostumukset sisältävät ruokaan ennakolta sekoitettavan tai sitä täydentävän aineosan, jossa aktiivista ainesta on suhteellisen suuressa määrässä ja joka sopii eläimelle suoraan syötettäväksi tai välillä tapahtuvan laimennus- tai sekoitusvai-heen jälkeen. Sellaisiin koostumuksiin sopiva, tyypillisiä kantajia tai laimennusaineita ovat esim. kuivattu rankki, maissijauho, sitrushedelmäjauho, käymisjätteet, jauhetut osterin kuoret, leseet, hienoksi jauhetut vehnän jyvät, liukoiset melassin osat, massintähkäjauho, syötävä papujauhorehu, karkeat soijajauhot, murskattu kalkkikivi yms. Aktiiviset hydratut C-076-yh-disteet dispergoidaan perusteellisesti kantaja-aineeseen käyttäen sellaisia menetelmiä kuten jauhamista, sekoittamista, myllyllä jauhamista ja kaatamista. Koostumukset, jotka sisältävät aktiivista yhdistettä noin 0,005-2,0 paino-% soveltuvat erityisesti sekoitettaviksi ruokaan etukäteen. Rehua täydentävät aineosat, jotka syötetään suoraan eläimelle, sisältävät aktiivista ainetta noin 0,0002-0,3 paino-i.

15 67857 Tällaisia täydentäviä aineita lisätään eläimen rehuun määrällisesti siten, että aktiivisen yhdisteen konsentraatio valmiissa ruoassa on haluttu loistautien hoitamiseksi ja hillitsemiseksi. Vaikka aktiivisen yhdisteen haluttu konsentraatio vaihtelee riippuen aikaisemmin mainituista tekijöistä sekä käytetystä yksittäisestä C-076-johdannaisesta, kaavan I mukaisia yhdisteitä syötetään tavallisesti konsentraatioina, jotka ovat 0,00001-0,002 % ruoasta, jotta saavutetaan toivottu loisia tappava tulos.

Käytettäessä kaavan I mukaisia yhdisteitä yksittäiset hyd-ratut C-076-yhdisteet saatetaan valmistaa ja käyttää tässä muodossa. Vaihtoehtoisesti voidaan käyttää kahden tai useamman yksittäisen hydratun C-076-yhdisteen seosta sekä alkuperäisten C-076-yhdisteiden seoksia, muuta C-076-yhdistettä tai muita aktiivisia yhdisteitä, jotka eivät liity C-076:een eivätkä keksinnön yhdisteisiin.

Eristettäessä lihaliemiviljelmästä C-076-yhdisteitä, jotka toimivat kysymyksessä olevien valmistusmenetelmien lähtöaineina, erilaisten C-076-yhdisteiden havaitaan muodostuneen eri suuruisissa määrissä. Nimenomaan "a"-sarjan yhdistettä valmistuu enemmän kuin vastaavaa "b"-sarjan yhdistettä. "a"-sarjan paino-suhde vastaavaan "b"-sarjaan on noin 75:25-99:1. Erot "a"-sarjan ja "b"-sarjan välillä ovat samat kaikilla C-076-yhdisteillä ja johtuvat 25-asemassa vastaavasti sijaitsevasta sek.-butyyli- ja isopropyyliryhmästä. Tämä ero ei tietenkään ole ristiriidassa minkään kysymyksessä olevan reaktion kanssa. Nimenomaan ei ole tarpeellista erottaa "b"-komponentteja läheisestä '^"-komponentista. Näiden hyvin läheisten yhdisteiden erottaminen ei yleensä ole toteutettavissa käytännössä, koska "b"-yhdistettä on vain hyvin pieni painoprosentuaalinen määrä ja rakenteellisella erolla on kielteinen vaikutus reaktioiden kulkuun ja biologisiin aktiivisuuksiin.

Nimenomaan on todettu, että keksinnön mukaisten yhdisteiden lähtöaineita usein valmistetaan suhteessa, jossa on noin 80 % C-076 Bla:a tai Ala:a ja 20 % C-076 B.lb:a tai Alb;a. Täten keksinnön mukaisesti saatava edullinen tuote on sellainen, joka sisältää noin 80 % "a"-komponenttia ja 20 % "b"-komponenttia.

16 67857

Seuraavissa esimerkeissä valmistetut, hydratut C-076-johdannaiset eristetään tavallisesti amorfisina kiinteinä aineina eikä kiteinä. Saadut yhdisteet on karakteroitu analyyttisesti massaspektrometrilla ja NMR-spektrometrilla (spektroskooppiset tulokset on esitetty taulukoissa II ja III esimerkin 11 jälkeen).

Koska yhdisteet ovat amorfisia, niitä ei voida karakte-roida tarkkojen sulamispisteiden avulla, kuitenkin käytetyt kro-matograafiset ja analyyttiset menetelmät osoittavat niiden olevan puhtaita.

Esimerkki 1 22.23- dihydro C-076 Ala 51,0 mg C-076 Ala:a ja 14,4 mg tris(trifenyylifosfiini)-rodium(I)kloridia yhdistetään 3,5 ml:ssa bentseeniä ja hydrataan 20 tuntia huoneen lämpötilassa ilmakehän paineessa. Raaka reak-tioseos kromatografioidaan preparatiivisella kerroskromatogra-fia-levyllä eluoimalla kaksi kertaa kloroformiin valmistetulla 10 %:11a tetrahydrofuraanilla. Tuote poistetaan alustalta etyyliasetaatilla, joka haihdutetaan kuivaksi, ja jäännös analysoidaan 300 megahertsin ydinmagneettisella resonanssilla ja massaspektroskopialla, mikä osoittaa valmisteen olevan 22,23-dihydro C-076 Ala.

Esimerkki 2 22.23- dihydro C-076 Bla

Liuosta, jossa on 87,3 mg C-076 Bla:a 6 ml:ssa bentseeniä, joka sisältää 25 mg tris(trifenyylifosfiini)rodium(I)kloridia hydrataan 4 tuntia huoneen lämpötilassa 1 ilmakehän vetypaineessa. Preparatiivinen kromatografia silikageelillä kloroformiin valmistetulla 20 %:lla tetrahydrofuraanilla eluoimalla antaa lähtömateriaalin. Näyte hydrataan uudelleen edellä mainittujen olosuhteiden mukaisesti 19 tunnin ajan. Preparatiivinen kerroskroma-tografia antaa 55 mg 22,23-dihydro C-076 Blata, joka identifioidaan massaspektrometrialla ja 300 megahertsin ydinmagneettisella resonanssilla.

Esimerkki 3 22.23- dihydro C-076 Bla

Liuosta, jossa on 1,007 f C-076 Bla:a, 314 mg tris(trifen- 17 67857 yylifosfiini)rodium(I)kloridia ja 33 ml bentseeniä hydrataan 21 tuntia huoneen lämpötilassa 1 ilmakehän vetypaineessa. Liuotin poistetaan tyhjössä ja jäännös liuotetaan metyleenikloridin ja etyyliasetaatin seokseen (1:1) ja suodatetaan. Suodos kaadetaan silikageelipylvääseen (60 g) ja eluoidaan metuleenikloridin ja etyleeniasetaatin seoksella (1:1) ja otetaan 10 ml:n suuruiset jakeet. Jakeet 15-65 yhdistetään ja haihdutetaan kuiviksi, jolloin saadaan 1,118 g kiinteää ainetta, jonka korkeapaineneste-kromatografiän avulla on osoitettu olevan hydratun tuotteen ja lähtöaineen seosta suhteessa 60/40. Seos hydrataan uudelleen 55 ml:ssa bentseeniä lisäämällä siihen 310 mg tris(trifenyyli-fosfiini)rodium(I)kloridia ja sekoittamalla 21 tuntia huoneen lämpötilassa ja 1 ilmakehän vetypaineessa. Liuotin poistetaan tyhjössä, ja jäännös kromatografoidaan silikageelillä (80 g) käyttämällä etyyliasetaatin ja metyleenikloridin seosta (40:60) elu-enttina. Kerätään 10 ml:n suuruiset jakeet, ja tuote tulee esille jakeissa 26-80. Nämä jakeet yhdistetään ja haihdutetaan kuiviksi tyhjössä, jolloin saadaan keltainen öljy. öljy liuotetaan bentseeniin ja lyofiloidaan, jolloin saadaan keltainen jauhe, joka tunnistetaan 22,23-dihydro C-076 Bla:ksi massaspektrometrian ja 300 megahertsin ydinmagneettisen resonanssin perusteella. Tuotetta saadaan 0,976 g.

Esimerkki 4 22,23-dihydro C-076 Ala monosakkaridi 11,2 mg 22,23-dihydro C-076 Ala:a liuotetaan 1,1 ml:aan 1 %:sta rikkihappoa isopropanolissa ja sekoitetaan 20 tuntia huoneen lämpötilassa. Reaktioseos laimennetaan kloroformilla noin 5,0 ml:n tilavuuteen ja pestään kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja natriumkloridin liuoksella. Orgaaninen kerros kuivataan natriumsulfaatin päällä ja haihdutetaan kuivaksi tyhjössä, jolloin saadaan öljy. öljy kromatografioi-daan preparatiivisella kerroskromatografialevyllä silikageelillä ja eluoidaan kloroformiin valmistetulla 5 % tetrahydrofuraa-nilla. Tuote poistetaan levyltä ja lyofiloidaan bentseenistä, jolloin saadaan 5,2 mg valkoista jauhetta, joka identifioidaan 300 megahertsin ydinmagneettisen resonanssin ja massaspektrometrian avulla 22,23-dihydro C-076 Ala-monosakkaridiksi.

18 67857

Esimerkki 5 22.23- dihydro C-076 Ala-aglykoni 10,1 ml 22,23-dihydro C-076 Ala:a sekoitetaan 20 tuntia huoneen lämpötilassa 1,1 ml:ssa metanoliin valmistettua 1 %:sta rikkihappoliuosta. Reaktioseosta käsitellään kuten esimerkissä 4, jolloin saadaan öljy, joka puhdistetaan preparatiivisella kerroskromatografiällä silikageelillä eluoiden kloroformiin valmistetulla 5 %:lla tetrahydrofuraanilla. Tuote poistetaan kroma-tografialevyltä ja lyofiloidaan bentseenistä, jolloin saadaan 4,2 mg:aa valkoista jauhetta, jonka 300 megahertsin ydinmagneet-tinen resonanssi ja massaspektrometria osoittavat olevan 22,23-dihydro C-076 Ala-aglykonia.

Esimerkki 6 22.23- dihydro C-076 Bla-monosakkaridi 395 mg 22,23-dihydro C-076 Bla:a lisätään 50 mlraan sekoitettua liuosta, joka sisältää 1 %:n rikkihappoa isopropanolissa, ja liuosta sekoitetaan 14 tuntia huoneen lämpötilassa. Reaktio-seosta käsitellään esimerkin 4 mukaisesti, jolloin saadaan bentseenistä suoritetun lyofiloinnin jälkeen 0,404 g vaahtoa. Vaahto kromatografioidaan 6 preparatiivisella silikageelikerroskromato-grafialevyllä eluoimalla kaksi kertaa kloroformissa olevalla 4 %:lla tetrahydrofuraanilla. Monosakkaridi, jonka Rf on 0,15, kootaan ja pestään silikageelistä etyyliasetaatilla, jonka kokonaismäärä on 650 ml. Yhdistetyt pesuliuokset haihdutetaan kuiviin ja jäännös lyofiloidaan bentseenistä, jolloin saadaan 0,2038 g 22,23-dihydro C-076 Bla monosakkaridia, jonka korkea-painenestekromatografia osoittaa olevan olennaisesti puhtaan.

Esimerkki 7 22.23- dihydro C-076 Bla aglykoni 9,5 mg 22,23-dihydro C-076 Bla:a sekoltaan yön yli 1 ml:ssa 1 %:sta rikkihappoa, joka on metanoliliuoksessa. Reaktio-seosta käsitellään kuten esimerkissä 4 on esitetty, ja kiinteää ainetta käsitellään preparatiivisella kerroskromatografiällä silikageelillä eluoiden kloroformiin valmistetulla 10 %:lla tetrahydrof uraanilla. Kromatografialevyltä saatu öljy lyofiloidaan bentseenistä, mikä menettely tuottaa 4,7 mg valkoista jauhetta, 19 67857 jonka 300 megahertsin ydinmagneettinen resonanssi ja massaspektrometria osoittavat olevan 22,23-dihydro 007 6 Bla aglykonia.

Esimerkki 8 22,23-dihydro 0076 Bla aglykoni 0,486 g 22,23-dihydro 0076 Bla:a lisätään sekoitettuun liuokseen, jossa on 50 ml metanoliin valmistettua 1 %:sta rikkihappoa, ja reaktioseosta sekoitetaan 13 tuntia huoneen lämpötilassa. Reaktioseos laimennetaan 250 ml:aa metyleenikloridia ja pestään 50 ml :11a kyllästettyä kaliumbikarbonaatin vesiliuosta sekä 50 ml:11a vettä. Vesikerros pestään kaksi kertaa 20 ml:n erillä metyleenikloridia, ja yhdisteyt orgaaniset faasit kuivataan kyllästetyllä suolaliuoksella ja natriumsulfaatilla ja haihdutetaan kuivaksi tyhjössä, jolloin saadaan 0,480 g vaaleankeltaista vaahtoa. Vaahto liuotetaan 4 ml:aan metyleenikloridia ja pannaan neljälle preparatiivisen kerroskromatografiän silikageeli-levylle ja eluoidaan neljästi seoksella, jossa on 4 % tetrahydro-furaania kloroformissa. Tuote saadaan silikageelilevyiltä öljy-mäisenä jäännöksenä, joka lyofiloidaan bentseenistä, mikä toimenpide tuottaa 255,8 mg valkoista kiinteää ainetta. Metyyliokandro-sidi-jäämiä osoitetaan olevan kiinteässä aineessa.

Valkea kiinteä aine lyofiloidaan sitten jälleen bentseenistä ja asetetaan korkeavakuumiin 20 tunniksi epäpuhtauksien poistamiseksi, jolloin saadaan 22,23-dihydro C-076 Bla aglykoni.

Esimerkki 9 4"-0-asetyyli-22,23-dihydro C-076 Ala 6,8 mg 22,23-dihydro C-076 Ala:a liuotetaan 40 pisaraan vedetöntä pyridiiniä, jäähdytetään 0°C:een ja käsitellään 20 pisaralla etikkahappoanhydridiä. Reaktioseoksen annetaan lämmetä huoneen lämpötilaan, ja sitä sekoitetaan yli yön. Reaktioseos laimennetaan 5 ml:lla eetteriä ja 6 ml:lla vettä ja kerrokset erotetaan. Vesifaasi pestään kahdesti eetterillä, ja orgaaniset kerrokset yhdistetään ja pestään vielä 3 kertaa vedellä. Eette-rikerros kuivataan magnesiumsulfaatin päällä ja haihdutetaan kuivaksi tyhjössä, jolloin saadaan öljy. öljy kromatografioi-daan silikageelillä preparatiivisella kerroskromatografialevyil-lä eluoimalla 5 %:lla tetrahydrofuraanin kloroformiliuoksella.

20 6785 7

Tuote otetaan talteen levyiltä ja lyofiloidaan bentseenistä, mikä tuottaa 6,1 mg 4"-0-asetyyli-22,23-dihydro C-076 Ala:a massaspektrometrian ja 300 megahertsin ydinmagneettisella resonanssilla määritettynä.

Esimerkki 10 4"-0-asetyyli-22,23-dihydro C-076 Bla ja 4",5-di-O-aset-yyli-22,23-dihydro C-076 Bla 18,6 mg 22,23-dihydro C-076 Bla:a liuotetaan 63 pisaraan (noin 1 ml:aan) kuivaa pyridiiniä ja käsitellään 9 pisaralla etikkahappoanhvdridiä 0°C.ssa. Seosta sekoitetaan typpi-atmosfäärissä 6 tuntia 0°C:ssa. Seos jäähdytetään 5 ml:11a vettä, ja sitä uutetaan 3 kertaa 3 ml:n eetterierillä. Yhdistetyt eette-riuutteet pestään 3 kertaa 3 ml:n vesierillä ja kuivataan magnesiumsulfaatin päällä ja haihdutetaan kuiviksi tyhjössä, öljy kro-matografoidaan preparatiivisella silikageelikerroskromatografia-levyillä eluoimalla kaksi kertaa 5 %:lla tetrahydrofuraanin klo-roformiliuoksella, mikä tuottaa 5,8 mg 4"-0-asetyyli-22,23-di-hydro C-076 Bla:a ja 5,8 mg 4",5-di-0-asetyyli-22,23-dihydro C-076 Bla:a bentseenistä suoritetun lyofiloinnin jälkeen. Rakenteet on varmistettu 300 megahertsin ydinmagneettisella resonanssilla ja massaspektrometrialla.

Esimerkki 11 22,23-dihydro C-076 Bla 39 g C-076 Bla:a liuotetaan 1540 ml:aan tolueenia ja tuodaan 4 litran vetoiseen, sekoitettavaan autoklaaviin. Tähän lisätään 3,9 g tris(trifenyylifosfiini)rodium (I)kloridia (Wilkin-sonin katalysaattoria). Pidetään yllä 275,6 Pa:n hydrauspainetta ja 40°C:n lämpötilaa sekoittaen samalla 4 1/2 tuntia. Tämä ajanjakson kuluttua nestekromatografia-analyysi ilmaisee dihydro C-076 Bla:n saannon olevan 98 %, samalla kun tetrahydro C-076 Bla:n saanto on 1,5 %. Tolueeni poistetaan haihduttamalla tyhjössä, ja tummanpunainen kumi liuotetaan etanoliin nopeudella, joka on 4 ml:aa etanolia grammaa kohti tuotetta. Formamidia lisätään nopeudella 10 ml:aa grammaa kohti tuotetta, ja liuos kuumennetaan vesihöyryhauteella 40-50°C:een, sillä aikaa kun lisätään vettä nopeudella 2 ml:a grammaa kohti tuotetta. Kun ki 21 67857 teytyminen alkaa, lämmitys poistetaan ja liuoksen annetaan jäähtyä hitaasti sekoittaen yön yli. Kiinteä aine poistetaan suodattamalla ja pestään seoksella, jossa on kolme osaa vettä ja yksi osa etanolia ja kuivataan yön yli tyhjössä. Kiinteät aineet liuotetaan 150 mlraan etanolia ja lämmitetään 35-40°C:een vesihöyry-hauteella. Vesi (150 ml) lisätään hitaasti sekoittaen. Kun liukeneminen on täydellinen 35°C:ssa, lämmitys poistetaan ja liuoksen annetaan jäähtyä hitaasti yön yli. Kiteet poistetaan suodattamalla ja pestään 50 %:lla etanolilla ja kuivataan tyhjössä yön yli, jolloin saadaan 32,55 g 22,23-dihydro C-076 Bla:a, jonka sulamispiste on 155-517°C.

Valmistettujen yhdisteiden NMR-spektrometrilla (300 MHz) ja massaspektrometrilla saadut tulokset ilmenevät taulukoista II ja III.

Taulukon II NMR-siirtymät on kaikki määritetty standardina käytetyn TMS:n suhteen ja J-arvot on annettu hertseinä. Taulukossa II on lisäksi käytetty seuraavia lyhenteitä: d = dupletti, m = multipletti, s = singletti, t = tripletti, dd = dupletin dupletti, dm = multipletin dupletti, q = kvartetti ja dt = tripletin dupletti.

22 6785 7

Taulukko II: NMR-siirtymät (300 MHz) 'Protoni j 4”-OAC-22,23- ! 4"-OAC-22,23- j 4",5-di(QAC)- dihydro- dihydro- i 22,23-dihydro- j C076-Ala C076-Bla C076-Bla 1 r ------ 1 ------1 ' 1 -----— 1 f" " ' - 1 — < C2H 3,36 q (J=2) j 3,31 q (J=2) 3,38 m C^H 5,41 leveä s i 5,44 leveä s 5,55 leveä s C4CH3 1,83 leveä s j 1,89 s ; 1,77 s C5H 3,99 d (J=6) | 4,31 t (J=6) ; 5,55 d (J=6) C5OCH3 3,52 s C5OOOCH3 - - 2,17 s

CgH 4,05 d (J=6) | 3,99 d (J=6) 4,09 d (J=6) C-,ΟΗ 4,12 s 4,15 s ! 4,06 s ' i 1

CgCH, 4,65 dt (J=13,2) 4,67 dt (J=13,2) 4,69 dt (J=14,2) CH i 4,71 dt (J=13,2) 4,73 dt (J=13,2) | 4,59 dt (J=14,2) C9H 5,85 m , 5,89 m ' 5,87 m C-jqH 5,76 m 5,75 m 5,76 m C-qH 5,74 m ; 5,75 m 5,72 m C32h 2,53 m : 2,53 m i 2,53 m C12CH3 1,17 d (J=7) , 1,17 d (J=7) ! 1,17 d (J=7) C13H 3,95 m ; 3,95 m 3,95 m C14CH3 1,52 leveä s j 1,52 leveä s 1,52 leveä s C^H 5,01 m I 5,01 m 5,01 m C^gH 5,36 m j 5,38 m 5,38 m C22H 1»43 m 1,45 m 1,44 m C23H 1,38 m ; 1,37 m 1,37 m C24CH3 0,79 d (J=7) : 0,79 d (J=7) 0,79 d (J=7) C26CH3 0,85 d (J=7) 1 0,86 d (J=7) 0,86 d (J=7) ;C2gCH3 0,93 t (J=7) 1 0,93 t (J=7) 0,93 d (J=7)

CltH 4,79 d (J=3) 4,80 d (J=2) 4,79 d (J=3) C3,OCH3 3,44 s 3,45 s 3,44 s C4,H 3,25 dt (J=2,9) 3,27 t (J=9) 3,25 t (J=9) C5,CH3 1,26 d (J=7) 1,26 d (J=7) 1,25 d (J=7)

Clt,H 5,41 d (J=3) 5,42 d (J=3) 5,41 d (J=3) C3„Oai3 3,37 s 3,38 s 3,38 s C4„H 4,68 t (J=9) 4,68 t (J=9) 4,68 t (J=9) C4„OCOCH3 2,10 s 2,10 s 2,11 s C5„CH3 1,14 d (J=7) 1,14 d (J=7) 1,14 d (J=7) 6785 7

Taulukko II (jatkoa) ; Protoni | C076-A, 22,23-dihydro- ! 22,23-dihydro- 22,23-dihydro- ; I C076-A, ! C076-A, I C076-A, ! i la ! la la i ._j_;_, raonosakkaridi I aglykoni__ |C2H 3,35 q (J=2) ; 3,34 q (J=3) 3,33 q (J=2) | 3,31 q (J=2) | I C-,Η 1 5,41 leveä s 5,41 leveä s >5,40 leveä s 5,39 leveä s I J i I \ i iC^CH^ | 1,82 leveä s I 1,82 leveä s 1,81 leveä s j1,81 s | i CcH 3,99 d (J=5,5) I 3,98 d (J=6) 3,96 d (J=6) ! 4,01 m ! ,C5OCH3 ; 3,52 s I 3,52 s j 3,50 s | 3,50 s i Cc0C0CHo - - i 5 3 ! i ;crH 4,06 d (J=5,5) 4,09 d (J=6) i 4,04 d (J=6) 4,03 m

i o i j I

C^OH 4,11 s 4,22 s 4,15 s j 4,11 s

CgCH χ i 4,65 dd <J=2,14)j 3,66 dd(J=2,14) j 4,62 dd (J=2,15)j4,63 dt (J=13,2) ;CH ^ ' 4,72 dd (J=2,14)i 3,72 dd(J=2,14) 4,70 dd (J=2,15) | 4,71 dt (J=13,2);

CgH 5,80 ra j 5,85 m 5,84 m ' 5,80 m C^qH 5,77 ra 5,76 m 5,77 m I 4,77 m

CuH : 5,72 m 5,74 m 5,72 m I 4,74 ra 2,53 m i 2,53 ra j 2,53 m '2,53 m C12CH3 1,18 d (J=7) | 1,17 d (J=7) 11,16 d (J=7) !1,17 d (J=7) 3,95 m 3,95 m 3,95 m 3,98 m C, hCH-, 1,50 leveä s 1,52 s )1,50 s i 1,50 s 5,00 m | 5,00 m j4,98 m ;5,33 m 5,42 m I 5,36 m ΐ 5,35 ra 5,33 m C22H 5,78 dd (J=l,10)| 1,45 ra 1,44 ra 1,44 ra C23H 5,57 dd (J=3,10)' 1,38 m 1,34 m ' 1,35 ra C24CH3 0,93 d (J=7) j 0,79 d (J=7) 0,78 d (J=7) | 0,79 d (J=7) C26CH3 0,93 d (J=7) : 0,86 d (J=7) 0,85 d (J=7) j0,84 d (J=7) CGqCH-, 0,94 t (J=7) ; 0,94 t (J=7) s 0,93 t (J=7) 0,95 t (J=7) (3χ,H 4,78 d (J=3) 4,79 d (J=3) l4,82d (J=2,5) , C3,OCH3 3,43 s ! 3,43 s 3,48 s 1 C4,H 3,25 t (J=8) i 3,25 t (J=8) 3,15 dt (J=2,8) : C5,CH3 1,26 d (J=7) | 1,26 d (J=7) 1,27 d (J=7) ,C1„H 5,42 d (J=4) i 5,41 |c3„OCH3 1 3,45 s ' 3,44 s j - iC.„H I 3,18 dt (J=2,8) 3,18 d (J=2,8)

4 I

C4„OCOCH3 - - |C5„CH3 I 1,28 d (J=7) | 1,28 d | j i 24 6 7 8 5 7

Taulukko II (jatkoa) ,Protoni , C076-B, f 22,23-dihydro- ' 22,23-dihydro- 22,23-dihydro- 1 ! , C076-B, , C076-B, | C076-B, * j la , la | la , ;_I_i roonosakkaridi j aglykoni_j IC^H 3,31 q (J=3) j 3,30 q (J=2) j 3,29 q (J=2) j"3,27 q (J=2) j ! C^H 5,44 leveä s ! 5,46 leveä s ^5,45 leveä s 5,43 leveä s ! C.CH- 1,89 leveä s 1,88 leveä s 1,88 leveä s 1,88 leveä s 1 : 4 jS ; | j

CcH 4,31 t (J=6,5) 4,32 t (J=6,5) j4,31 t (J=6) ; 4,31 t (J=6) 5 C5OCH3 - I - 1 I - ic.OCOCH., - ! 1 · !

! 5 3 j i j I

,C,H 3,98 d (J=6,5) 3,99 d (J=6,5) 3,99 d (J=6) ! 3,97 d (J=6) ! ; O ! 1 ! jC^OH 4,04 s 4,16 s 4,10 s 4,07 s i I CqCH.,- 4,68 dt (J=12,2)! 4,67 dd(J=13,2)! 4,67 dm (J=14) 4,66 dd (J=14,2) : i ö " i ] :CH i 4,72 dt (J=12,2)i 4,73 dd(J=13,2)j4,71 dm (J=14) | 4,72 dd (J=14,2) ! .CgH 5,89 m ! 5,89 m :5,89 m j 5,83 m j C^qH ! 5,76 m 5,77 m |5,75 m I 5,77 m

CnH ! 5,75 m 5,76 m j 5,74 m 5,75 m !C10H i 2,54 m 2,53 m ! 2,51 m 2,53 m I I S ; |ci2CH3 1,18 d (J=7) 1,17 d (J=7) ; 1,16 d (J=7) 1,18 d (J=7) ; jC-^H ; 3,96 m 3,96 m 1 3,97 m 4,02 m ;C14CH3 1/50 leveä s 1,52 leveä s 1,52 leveä s ' 1,53 leveä s ' C^H 1 5,00 m 5,00 m 5,00 m 5,33 m C,nH 5,40 m I 5,39 m 5,38 m ' 5,33 m ty ! 1 , t :C22H j 5,79 dd (J=4,10)| 1,46 m 1 1,44 m 1,41 m C23H 5,58 dd (J=l,10)j 1,37 m 1,36 m j 1,33 m C24CH3 0,92 d (J=7) ‘ 0,80 d (J=7) 0,81 d (J=7) 0,80 d (J=7)

CocCTL· 0,92 d (J=7) ! 0,86 d (J=7) 0,86 d (J=7) 0,85 d (J=7) C2gCH3 0,94 t (J=7) ] 0,94 t (J=7) 0,94 t (J=7) ' 0,96 t (J=7) C^H 4,79 d (J=3) j 4,80 d (J=3) 4,83 d (J=3) C3,OCH3 3,44 s ; 3,43 s 3,49 s C4,H 3,26 t (J=9) ! 3,26 t (J=9) 3,17 dt (J=2,8) C5,CH3 1,28 d (J=7) J 1,28 d (J=7) 1,28 d <J=7) C1MH 5,42 d (J=4) ; 5,42 d (J=3) C3„OCH3 3,45 s j 3,44 s - C4„H 3,18 dt (J=2,9) ' 3,18 dt (J=2,9) c4„oooch3 -

Cc„CH, 1,26 d (J=7) 1,26 d (J=7)

D J

25 67857 ä * y sa « 6 £

TJ* 7 of"1 C I

Γ rn I ~~ IT) (N O + 0000^1-1(0 0)1-(1-^1-^0

- S|S gCNCNr-IOlOOCNCOOOCNO

E CN O Γ'00(0!0<0(Νγ-Ιγ·Ηγ-('—I

N" <N U I

ro

(N

- * (N · M I IÖ 0 I 0 rH £

oooot^iHrHniHr^r'in o >,0 + CNCOOOCOOCNOOCOCNO

Λ T .d r- Sr^iniororo(N(NrHfHrH^i 0) = H o

\ 'a* Ό U

B,

P

I I

(d h id -<-j +

U >9 ΓΗ S I I s I III

4-( I m o '—’

•H (O I AC O CO Γ~ Ή ro rH

d (NO >i CO O O O CN OO

O 'O' r—I O LO CO (N CN iH

-r-f (NO CP

CN U (d +) ·· ^ Η Ή ----- · · ------ ----- "' *

H O

H M

Q +5 L

rt3 M ^ h3 I £ § id H (d ^ + ^ § Tai I S , 4J nii/S o o oo r- h ro ή o r- co y] (NO Ο Π00ΟΟ O (N CO N< CN r-t

H M" £ r- o o ro cn (N I—I r-4 γ—I I—I

m (N o Q

c (N c_> S

r-i ό 6 O (¾ ό £ τ 7. g « s •h fra rroooor-CTi.-icor-ior^ro

M Γ0| r--(NCOOOOOOCN<X>NH(Ni—I

+) (NO ΟΟΓ^-OOrOCNCNCNi—I.—li—li—I

Λί -Γ- 3

ft) CN O -P

Q- CN O -P

ra- -h (d· <d yj & II *

.—-H

ro + cu (—) 2

CQ =· U

I (ΝΓ'Ν'ΟΟσ'ιι-Ι.-ΙΟΟΓ^ίΟ O Γ'-(ΝΟΟΟΟΟΟΟ(ΝΓ~·0·(Ν.—I ·

r- OOr'-LOOCOCNCNCNi—Ir-li—(r—I O

o u *c 26 6785 7 Λ CN *

CN O

N I fl

I P -H G

Q M < ooocMc^r-tmcni-ir^r^m < ti I +^oooonr-fNoooocNjtn

0 >lO Sr^UJLnrOrOfNfMrHiHr^rH

1 H o *> 3 U

3 os -π 7<r b έ

f'"' I X I I ~ I III

oao >( ocsir- m π h

- r- <H O 00 O h (N CO

(Noth Oinro (NCNiH

(N u Ό fd •ΓΊ i d m ¢3 g g <d $ έ 3 r-T’S 1 1 *3* O CN t" 1 ιηοΟιΗίΠΓ^ΓΟ 3 oolrt o oo o r^cNoo'srtNr-i

r-\ (NO p Γ" O LTI 00 0\| CN r—H iH r-H ι—I

3 "t 5 (no 5 H (N CJ s a ί| d οοοοοΓΝΓ'ΟίηοοΓΗΐηΓ^Γ'ΐ VH OON'OOOOOOt^tNOO'S'iNr-l OOr^OlDrO(N(N(NrHrHrHr-(

ro I

(N CO

- r~

CM O (N CJ

3

+J

Ή § .3

+ -H

<0 a a)

Or—iooom<T>ini—icTiLor^ro 11

I OO'i'CTiOOOCOr^iNr'^rrNrH

O COP'inuhOOCNCNCNr-lr-lr-Hi-l · Γ' 0 o u c ... *

Claims

67857 27 Patenttivaatimus Analogiamenetelmä loisten aiheuttamien tautien hoidossa ja ehkäisyssä käyttökelpoisen yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava I ch3 ^\^ch3 R3° - /'X '' 0 X Jv ] r° Ri CH3 II Ί \ °s.-° I ' OH ] - X 0- ·. Ac„3 I -3 R2 jossa on iso-propyyli tai sek.-butyyli; on metoksi, hydroksi tai (alempi alkanoyyli)oksi; ja R3 on vety; alempi alkanoyyli; -L-oleandrosyyli; 4'-(alempi alkanoyyli)- -L-oleandrosyyli; 41-(<*-L-oleandrosyyli)- x -L-oleandrosyyli; 4"-(alempi alkanoyyli)-4 '-( * -L-oleandrosyyli) - ->-L-oleandrosyyli; tunnettu siitä, että yhdisteen, jolla on kaava II CH-. - X ."CH3 ,L / - / ° : ! r3°t— [o/'Ri CH ^ ^ 3 ! '' Λ o Ί, v !' OH ; ! 1 ’i II
0 CH3 i R2 “ 67857 jossa , ja R^ merkitsevät samaa kuin edellä, 22,23-kaksoissidos hydrataan käsittelemällä kaavan II mukaista yhdistettä vedyllä, kun läsnä on katalyyttinen määrä, edullisesti 0,05 - 0,5 moolia/lähtöaine-mooli, yhdistettä, jolla on kaava III /(C,Hc)_P_/-,RhX III o b 3 3 jossa X on halogeeni, edullisesti kloori. 67857 29 Analogiförfarande för framställning av en förening som är användbar vid terapi ooh hämning av sjukdomar föranledda av parasiter och som har formeln I Tx f i CH3l| T li o (5 ApC °-U-Ci3 R2 väri R^ är iso-propyl eller sek.-butyl; R2 är metoxi, hydroxi eller (lägre alkanoyl)oxi, och är väte; lägre alkanoyl; &-L-oleandrosyl; 4'-(lägre alkanoyl)-oi -L-oleandrosyl; 4 ' - (oö-L-oleandrosyl) - c< -L-oleandrosyl ; 4(lägre alkanoyl) -4 ' - (oC. -L-oleandrosyl) ~oL -L-oleandrosyl; kännetecknat därav, att man hydrerar 22,23-dubbelbindningen i en förening med formeln II f J 0 \r, ch3'^ii i l v I OH (]} .
0-U-CH3 R2