FI66534B - Foerfarande foer framstaellning av immunoglobulin som innehaoller antikroppar och aer laempligt foer intravenoes administration - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av immunoglobulin som innehaoller antikroppar och aer laempligt foer intravenoes administration Download PDFInfo
- Publication number
- FI66534B FI66534B FI792757A FI792757A FI66534B FI 66534 B FI66534 B FI 66534B FI 792757 A FI792757 A FI 792757A FI 792757 A FI792757 A FI 792757A FI 66534 B FI66534 B FI 66534B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- immunoglobulin
- solution
- precipitate
- polyethylene glycol
- purification step
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/06—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies from serum
- C07K16/065—Purification, fragmentation
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Electronic Switches (AREA)
Description
H M KUULUTUSJULKAISU £ £ C Ύ λ jBfjfc W 01) utlAggningsskrift 66534 c Patentti cyEnneUy 12 11 1984 ™ Patent meddelat 01) A 61 K 39/395, C 07 G 7/00 SUONI—FINLAND <2i) 792757
Hmk—lM<l»t—AwMmlMAt 05·09·79 ' (23) ΑΝηρβΜ—GlMglMOdaf 05.09.73 (41)-IWteHUMM —MNfcoAHtMg 20.03.80 mm I III «tilin rj iTn (4Q MW»1 MwyiMMwr~-- 31.07.84 (32)(33)(31) *rr*«*rBfHprtoffc* 19.09.78
Itävalta-österrike(AT) A 6753/78 (71) "Immuno" Aktiengesel1schaft fiir chemisch-medizinische Produkte, Industriestrasse 72, 1220 Wien, Itävalta-österrike(AT) (72) Martha Eibl, Wien, Otto Schwarz, Wien, Yendra Linnau, Wien,
Itävalta-Österrike(AT) (74) Oy Kolster Ab (54) Menetelmä suonensisäiseen antoon soveltuvan, vasta-aineita sisältävän immunoglobuliinin valmistamiseksi - Förfarande för framställning av immunoglobulin, som innehäller antikroppar och är lampiigt för intra-venös administration
Keksinnön kohteena on menetelmä suonensisäiseen antoon soveltuvan, vasta-aineita sisältävän immunoglobuliinin valmistamiseksi, jolloin ihmisen veriplasma fraktioidaan ja immunoglobuliinipitoisesta fraktiosta poistetaan ei-toivotut proteiiniepäpuhtaudet käsittelemällä sitä moniarvoisen epäorgaanisen hapon suolalla ja yhden tai useamman kerran polyetyleeniglykolilla.
Kestettyään infektiosi ihmisen elimistö on yleensä suojattu saman taudinaiheuttajan toista infektiota vastaan. Tällainen suoja voidaan saada aikaan myös rokottamalla; se perustuu sellulaa-riseen ja humoraaliseen immuniteettiin. Sellulaarisen immuniteetin johtuessa lymfosyyteistä humoraalisen immuniteetin aiheuttajana ovat erilaiset spesifiset vasta-aineet. Vasta-aineet ovat suurimolekyyli-siä veressä esiintyviä valkuaisaineita, joilla on globuliiniluonne.
2 66534
Humoraalisen immuniteetin täyteen kehittymiseen voi kulua ensimmäiset kaksikymmentä elinvuotta, ja se on heikoimmillaan varsinkin 6-24 kuukauden ikäisillä. On jo kauan ollut tunnettua (1952 Bruton), että joiltakin potilailta voivat vasta-aineet puuttua (vasta-aine-puutossyndrooma), jolloin kyseessä on useimmiten perheittään esiintyvä sairaus. Tällaisilla potilailla on erilaisia, usein toistuvia infektioita, jotka saattavat toisinaan olla hengenvaarallisia. Tällaiset vasta-ainepuutostilat saattavat olla paitsi geneettisiä myös hankittuja, ja ne esiintyvät enimmäkseen selektiivisenä tai osittaisena vasta-ainesyndroomana(AMS).
Koska tällaiset potilaat eivät pysty muodostamaan heiltä puuttuvia vasta-aineita, on heille infektioiden käsittelemiseksi tai estämiseksi annettava puuttuvia vasta-aineita riittävässä määrin. Tällaisen korvaushoidon vaikutus on ajallisesti rajoitettu ja vaikutuksen kesto on riippuvainen annettujen vasta-aineiden biologisesta puoliintumisajasta. Elimistössä muodostuneilla vasta-aineilla on 3-4 viikon biologinen puoliintumisaika.
Vasta-ainepitoisten immunoglobuliinien valmistus fraktioimalla ihmisen veriplasmaa esimerkiksi ns. Cohn-menetelmällä (J.L.Oncley, M.Melin, D.A.Richert, J.W.Cameron ja P.M.Gross, Jr. "The Separation of the antibodies, Isoagglutinins, Prothrombin, Plasminogen and β y-Lipoprotein into Subfractions of Human Plasma", J.Am.Chem.Soc.,
Band 71, S 541 (1949)) alkoholisaostuksella on tunnettu. Nämä valmisteet sopivat kuitenkin vain lihaksensisäiseen antoon eivätkä suonensisäiseen antoon, sillä valmistusmenetelmässä muodostuu sivutuotteita, joilla on haitallisia ominaisuuksia. Ne aiheuttavat suonensisäisesti injektioituina usein jo injektiot annettaessa tosin lyhytaikaisiin, mutta erittäin voimakkaisiin vastareaktioihin, kuten esim. verenpaineen alenemiseen, joka saattaa johtaa hengenvaarallisiin tilanteisiin. Suonensisäisesti injektoitavien, siedettyjen immunoglobuliinien valmistamiseksi on tähän asti immunoglobu-liineja hajoitettu entsymaattisesti tai muutettu kemiallisesti.
Tämä vaikuttaa kuitenkin haitallisesti immuniglobuliinivalmisteiden terapeuttiseen tehoon tai biologiseen laatuun. Entsymaattisen käsittelyn vaikutuksesta immunoglobuliinit pilkkoutuvat ja vasta-aineiden laatu heikkenee, mutta tämän lisäksi tällöin esiintyvät pilkkoutumistuotteet ehkäisevät kompetitiivisesti tavoiteltua 3 66534 antigeeni/vasta-ainereaktiota ja/tai antigeeni/vasta-ainekompleksien sitoutumista Fc-reseptoreihin. Tällaisten muunnettujen immunoglobu-liinien toisena haittatekijänä on niiden lyhentynyt biologinen puoliintumisaika.
Eräänä haittana kemiallisesti muutetuilla immunoglobuliineilla on uusien antigeeni-spesifisyyksien esiintyminen, mikä saattaa toistetussa annossa aiheuttaa uusia vastareaktioita.
Tekniikan tasoon kuuluu edelleen menetelmä (DE-hakemusjulkaisu 2 606 118) suonensisäiseen antoon sopivan gammaglobuliinin valmistamiseksi plasmaproteiinisuspension asteittaisella puhdistamisella polyetyleeniglykolilla ja sen jälkeen saostamalla täydellisesti polyetyleeniglykolilla. Polyetyleeniglykolipuhdistusvaiheet suoritetaan mahdollisimman alhaisella ionikonsentraatiolla, mitä ai pidetty proteiinien denaturoitumisen kannalta olennaisena. Frakti-oinnin suoritus äärimmäisen alhaisilla ionikonsentraatioilla on kuitenkin, kuten todettiin, hankalaa, eivätkä valmistetut tuotteet ole vapaita vastareaktioita aiheuttavista tekijöistä.
Tunnettuun tekniikan tasoon voidaan lisäksi laskea menetelmä (AT-patenttijulkaisu 344 883), jonka mukaan suonensisäiseen antoon sopivia gammaglobuliinivalmisteitä saadaan saostamalla plasmafrak-tiosta antikomplementaariset gammaglobuliini osat polyetyleenigly-kolilla hydroksietyylitärkkelyksen läsnäollessa; on kuitenkin osoittautunut, ettei tällainen puhdistus ole riittävä sellaisen tuotteen saamiseksi, jolla ei ole suonensisäisesti annettuna sivureaktioita.
Keksinnön tarkoituksena on välttää mainitut haittatekijät ja sen kohteena on sellaisen suonensisäisesti annettavan immunoglobu-liinivalmisteen saaminen, joka ei ole entsymaattisesti eikä kemiallisesti muunnettu ja jota voidaan antaa suonensisäisesti korkeina annoksina ilman sivureaktioita.
Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, että a) ensimmäisessä puhdistusvaiheessa immunoglobuliinipitoista fraktiota käsitellään ammoniumsulfaatti- tai alkalimetallifosfaatti-suolan vesiliuoksella, ja tällöin muodostunut sakka erotetaan ja heitetään pois, b) vaiheesta a) saatua liuosta käsitellään ammoniumsulfaatti- tai alkalimetallifosfaattisuolan vesiliuoksella, jolla on korkeampi suolapitoisuus kuin vaiheessa a) käytetyllä liuoksella, jolloin inununo- 4 66534 globuliinia sisältävä sakka saostuu ja se otetaan talteen ja liuos heitetään pois, c) immunoglobuliinipitoinen sakka liuotetaan veteen, ja suola poistetaan liuoksesta, edullisesti dialyysillä, d) jäljelle jäänyt immunoglobuliinipitoinen liuos johdetaan lisä-puhdistusvaiheeseen monosakkaridin tai disakkaridin läsnäollessa ioniväkevyyden ollessa vähintään 0,15 käsittelemällä sitä polyety-leeniglykolilla, jolloin muodostuu sakka, joka heitetään pois, e) jäljelle jäänyt puhdistusvaiheesta d) saatu liuos käsitellään vielä kerran polyetyleeniglykolilla, jonka konsentraatio on suurempi kuin vaiheessa d), jolloin saadaan haitallisista epäpuhtauksista vapaa immunoglobuliinipitoinen liuos ja sakka, ja jälkimmäinen heitetään pois, f) vaiheesta e) saatua liuosta käsitellään vesiliukoisella polymeerillä, esimerkiksi polymeerisellä polyoli-saostueaineella, jolloin immunogloguliini saostuu.
Immunoglobuliinipitoinen fraktio saadaan tarkoituksenmukaisesti ihmisen verplasmasta tunnetulla Cohn-menetelmällä tai modifioidulla Cohn-menetelmällä saostamalla etanolilla ja poistamalla fraktion sisältämä etanoli edullisesti dialyysin avulla.
Keksinnön mukaisen menetelmän edullisessa suoritusmuodossa käytetään kolmea puhdistusvaihetta, jotka yksityiskohtaisesti suoritetaan seuraavasti: ensimmäisessä puhdistusvaiheessa immunoglobuliini-pitoista fraktiota käsitellään ammoniumsulfaattiliuoksella, pitoisuudessa 145-208 g/1 ammoniumsulfaattia (25-35%:inen kyllästys) pH-ar-vossa 5,9-6,5, sakka erotetaan ja hylätään ja seuraavassa saostus-vaiheessa jäljelle jääneestä liuoksesta saostetaan ammoniumsulfaattiliuoksella pitoisuudessa 268-289 g/1 ammoniumsulfaattia (44-47%:inen kyllästys) pH-arvossa 8,0 immunoglobuliinia sisältävä sakka, saatu sakka liuotetaan veteen ja liuoksesta poistetaan, edullisesti dialyysin avulla, ammoniumsulfaatti; näin saadulle immunoglobuliinipitoiselle liuokselle suoritetaan toisessa puhdistusvaiheessa sakkaridin läsnäollessa ja liuoksen ionivahvuuden ollessa vähintään 0,15 polyetyleenigly-kolikäsittely pH-arvossa 5,8-6,4, syntynyt sakka erotetaan ja hylätään, ja saadulle liuokselle suoritetaan kolmas puhdistusvaihe käsittelemällä sitä vielä kerran polyetyleeniglykolilla pH-arvossa 6,4-7,0, 5 66534 erottamalla jälleen saatu sakka ja hylkäämällä se, ja seostamalla saadusta liuoksesta, joka ei enää sisällä haitallisia epäpuhtauksia, immunoglobuliini pH-arvossa 7,0-7,5 polymeerisellä saostueaineella.
Tässä toimenpideyhdistelmässä voidaan toisessa puhdistusvai-heessa saostusaineena käyttää 60-90 g/1 polyetyleeniglykolia, jonka molekyylipaino on 2000-6000 ja saostus suorittaa 0-40°C:ssa. Myös kolmannessa puhdistusvaiheessa voidaan saostus suorittaa 0-40°C:ssa polyetyleeniglykolilla, jonka molekyylipaino on 2000-6000, ja jota käytetään tarkoituksenmukaisesti 70-100 g/1.
Liukoisista hiilihydraateista ovat sopiviksi osoittautuneet erityisesti sakkaridit, kuten monosakkaridit, esim. glukoosi, fruktoosi, mannoosi ja galaktoosi tai disakkaridit, esim. sakkaroosi, laktoosi ja maltoosi, ja niiden käyttömäärä on sopivasti 1-35 paino-%, edullisesti 5-20 paino-% liuoksen suhteen. Kun immu-noglobuliinien puhdistus on suoritettu edellä kuvatulla tavalla, voidaan ne erottaa liuoksesta saostamalla vesiliukoisilla polymeereillä. Sopiviksi ovat osoittautuneet etyleenioksidin ja polyoksi-propyleenin kopolymeerit (BASF:n kaupalliset tuotteet nimeltä g
Pluronic ), edelleen polyvinyylialkoholi, polyvinyylipyrrolidoni jne. Puhtaan immunoglobuliinin saostamiseen voidaan käyttää myös polyetyleeniglykolia korottamalla liuokseen jääneen polyetyleeniglykolin konsentraatio yli 150 g:ksi/l. Saostettu immunoglobuliini valmistetaan sitten tavanomaisella tavalla farmaseuttiseksi valmisteeksi.
Puhdistetun immunoglobuliinin valmistus farmaseuttiseksi valmisteeksi suoritetaan edullisesti liuottamalla se pyrogeenivapaaseen veteen, dialysoimalla, ultrasuodattamalla tai geelisuodattamalla liuos, säätämällä immunoglobuliinikonsentraatio 5-200 g:ksi/l, edullisesti 50-160 g:ksi/l ja säätämällä liuoksen ionipitoisuus NaClrllä arvoon 0,005-0,3, edullisesti 0,1-0,2.
Lopputuotteen sisältämät plasmaproteiinit koostuvat vähintään 80%risesti muuttumattomista immunoglobuliineista, joiden sedimentaa-tiovakio S on 7,0 ja biologinen puoliintumisaika 21-28 vrk. Tuotteen antikomplementaarinen aktiivisuus vastaa arvoa, jonka mukaan yhden CH^-yksikön neutralointiin tarvitaan vähintään 35 mg proteiinia. Keksinnön mukaisille valmisteille on lisäksi tunnusomaista, 6 66534 että ne sisältävät alle 5% proteiinikomponentteja, joiden molekyyli-paino on yli 160 000.
Keksinnön mukaista menetelmää valaistaan seuraavilla esimerkeillä.
Esimerkki 1
Ihmisen veriplasman pH säädetään arvoon 7,0-7,2 ja plasma pidetään -2°C:n lämpötilassa. Liuokseen lisätään 8 paino-%:ista etanolia, jolloin saostuu olennaisesti fibrinogeenista koostuva sakka. Sakan erottamisen jälkeen etanolipitoisuus nostetaan 25 paino-%:iin ja lämpötila lasketaan -6°C:seen. Saostunut, olennaisesti epäpuhtaasta immunoglobuliinista koostuva sakka uutetaan fosfaatti-asetaat-tipuskuriin, uutteeseen lisätään 12 paino-%:ista etanolia pH-arvossa 5,3 -2°C:ssa. Sakka (alfa- ja betaglobuliinia sisältävä) hylätään ja liuoksen etanolikonsentraatio korotetaan 25 paino-%:iin pH-arvossa 7,2 ja lämpötilassa -10°C jolloin immunoglobuliini saostuu. Näin valmistettua tahnamaista immunoglobuliinifraktiota käsitellään keksinnön mukaisesti seuraavalla tavalla: 1 kg immunoglobuliinitahnaa liuotetaan sekoittaen 2 litraan 0,9%:ista NaCl-liuosta ja dialysoidaan. Proteiinikonsentraatio säädetään 20 g:ksi/l ja ionivahvuus arvoon 0,15 ja liuokseen lisätään pH-arvossa 6,25 176 g/1 ammoniumsulfaattia (ensimmäinen puhdistus- vaihe), minkä jälkeen syntynyt, ei-toivottuja epäpuhtauksia sisältävä sakka hylätään, ja päällä olevaan nesteeseen lisätään uusi erä ammoniumsulfaattia konsentraation saamiseksi 275 g:ksi/l, ja pH säädetään arvoon 7,2. Saostunut immunoglobuliinipitoinen sakka liuotetaan veteen ja dialysoidaan vesijohtovettä vastaan. Sitten liuokseen lisätään 80 g/1 polyetyleeniglykolia ja 150 g/1 glukoosia pH-arvossa 6,0 ja ionivahvuuden ollessa 0,15 (toinen puhdistusvaihe). Sakka hylätään ja liuoksen polyetyleeniglykolipitoisuus korotetaan pH-arvossa 6,5-6,6 95 g:ksi/l. Saatu sakka hylätään (kolmas puhdis- tusvaihe).
Liuoksen polyetyleeniglykolikonsentraatio korotetaan nyt pH-arvossa 7,2 180 g:ksi/l, jolloin siitä saostuu epäpuhtauksista vapaa immunoglobuliini. Tuote lingotaan, ja siitä poistetaan siinä jäljellä oleva polyetyleeniglykoli pesemällä viisi kertaa.
7 66534
Esimerkki 2
Esimerkissä 1 kuvatulla tavalla valmistettua immunoglobuliini-tahnaa (1 kg) käsitellään samoin kuin esimerkissä 1 käyttämällä kuitenkin toisessa puhtausvaiheessa glukoosin sijasta 150 g/1 fruktoosia.
Esimerkki 3
Esimerkissä 1 kuvatulla tavalla valmistettua immunoglobuliini-tahnaa ( 1 kg) käsitellään samoin kuin esimerkissä 1 käyttämällä kuitenkin toisessa puhdistusvaiheessa glukoosin sijasta 150 g/1 sakkaroosia.
Esimerkki 4 0,5 kg esimerkissä 1 kuvatulla tavalla ihmisen veriplasmasta valmistettua immunoglobuliinitahnaa liuotetaan sekoittaen 6 litraan 0,9%:ista NaCl-liuosta ja etanoli poistetaan liuoksesta ultrasuodat-tamalla. Liuoksen proteiinikonsentraatio säädetään 20 g:ksi/l ja ionivahvuus arvoon 0,15, minkä jälkeen liuokseen lisätään pH-arvossa 6,7 119,5 g/1 dinatriumvetyfosfaattia (puhdistusvaihe). Saostunut sakka hylätään ja päällä olevan nesteen pH säädetään natriumhydrok-sidilla arvoon 7,2, jolloin muodostuu jälleen sakka, joka myös hylätään (puhdistusvaihe). Liuokseen lisätään sitten 275 g/1 ammoniumsulfaattia. Saostunut immunoglobuliinia sisältävä sakka liuotetaan veteen ja dialysoidaan epäorgaanisten suolojen poistamiseksi. Liuokseen lisätään 87,5 g/1 polyetyleeniglykolia ja 150 g/1 glukoosia ja pH säädetään arvoon 6,0. Sakka hylätään (puhdistus-vaihe), liuoksen pH säädetään arvoon 6,6 ja polyetyleeniglykolikon-sentraatio korotetaan lisäämällä polyetyleeniglykolia 95 g/1. Saatu sakka hylätään (puhdistusvaihe). Liuoksen polyetyleeniglykolipitoi-suus korotetaan pH-arvossa 7,2 150 g:ksi/l, jolloin epäpuhtauksista vapaa immunoglobuliini saostuu. Tuote lingotaan kuten esimerkissä 1 ja siitä poistetaan pesemällä polyetyleeniglykoli.
8 66534
Esimerkki 5
Esimerkissä 1 kuvatulla tavalla valmistettua immunoglobuliini-tahnaa (1 kg) käsitellään samoin kuin esimerkissä 1 suorittamalla kuitenkin epäpuhtauksista vapaan immunoglobuliinin loppusaostus lisäämällä 38 g/1 Pluronic®F 68:aa (etyleenioksidin ja polyoksipropylee-nin kopolymeeri) pH-arvossa 7,2.
Seuraavassa taulukossa I on esitetty esimerkkien 1-5 mukaisesti valmistettujen iramunoglobuliinien antikomplementaarinen aktiivisuus. Arvot on määritetty menetelmällä, jonka ovat kuvanneet E.A.Rabat jfr M.M.Mayer, "Experimental Immunochemistry" (Thomas, Springfield 1961) tai Public Health Monograph Nr.74. Standardized diagnostic Complement fixation method and adaptation to microtest (Washington, 1965)
Taulukko I
Immunoglobuliini Antikomplementaarinen valmistettu esi- aktiivisuus merkissä no_ _ 1 96 mg 2 95 mg 3 101 mg 4 35 mg 5 104 mg
Esimerkissä 1-5 valmistetut tuotteetsisälsivät yli 80 % 7 S-komponentteja (taulukko II). Määritys suoritettiin analyysiultra-sentrifugilla Eurooppalaisen Farmakopean, osa II, Deutscher Apotheker Verlag, Stuttgart 1975, ohjeen mukaisesti käyttämällä määritykseen l-%:ista liuosta (tilav./tilav.) fosfaattipuskurissa pH-arvossa 6,0 - 8,0 ja ionivahvuudessa vähintään 0,2.
9 66534
Taulukko II
Immunoglobuliini vai- 7 S-komponentit »istettu esimerkissä 1 95,5 % 2 95,5 % 3 98,4 % 4 88,0 % 5 98,2 %
Esimerkeissä 1-5 valmistettuja immunoglobuliineja tutkittiin myös natriumdodekyylisulfaatti-polyakryyliamidi-geelielektroforeesilia (SDS-PAGE, K.Weber ja M.Osborn, J.Biol. Chem. 244, 4406, 1969), jolloin saatiin määritettyä proteiinien molekyylipainojakautuma. Esimerkkien 1-5 mukaisesti valmistettujen immunoglobuliinien (näytteet 1-5) molekyylipainot on esitetty oheistetussa kuviossa, jossa ne nähdään leveinä nauhoina molekyylipainon 150 000 kohdalla.
Näytteellä 6, joka on pepsiinillä entsymaattisesti hajotettu valmiste, ja näytteellä 7, joka on plasmiinilla entsymaattisesti hajotettu valmiste, molekyylipainojen leveät nauhat ovat sensijaan alempana, edellisellä kohdassa 105 000 ja jälkimmäisellä kohdassa 50 000. Näyte 8 on kemiallisesti muunnettu valmiste, jossa on huomattavasti molekyylipainon 160 000 ylittäviä komponentteja myös alhaisen molekyylipainon, noin 105 000 omaavia aineosia.
Keksinnön mukaisesti valmistettujen tuotteiden verenpainetta alentavaa vaikutusta verrattiin Cohn-menetelmällä valmistetun tuotteen verenpainetta alentavaan vaikutukseen. Vertailukokeet suoritettiin nukutetuilla koirilla. Tällöin koiran alaleuan alareunassa oleva ulompi kaulalaskimo preparoitiin ja molempiin laskimohaaroihin sidottiin kateetrit· Lisäksi päänvaltimo otettiin esille, ja siihen liitettiin kateetri. Verenpaine mitattiin sähkömanometrillä valtimo-kateetrista? molempien muiden kateetrien kautta annettiin nukutusaine ja vertailtavat immunoglobuliinivalmisteet, jolloin annon aikana injek-tiotilavuudet pidettiin vakioina. Verenpainearvot mitattiin 60 minuutin kuluttua koeyhdisteen annosta ja tällöin määritettiin sekä systolinen että diastolinen verenpaine ja laskettiin keskiarvo.
Annetut annokset olivat 150 mg/kg. Tulokset nähdään seuraavassa taulukossa: 10 66534
Verenpaine, mm/Hg (keskiarvo)
Keksinnön mukai- alussa 5 min.10 min. 20 min. 30 min. 60 min.
sesti valmistet- kulut-kulut- kulut- kulut- kuluttu valmiste tua tua tua tua tua 100 94 100 100 98 98
Tunnettu valmiste 100 43 58 58 70 90
Claims (7)
1. Menetelmä suonensisäiseen antoon soveltuvan, vasta-aineita sisältävän immunoglobuliinin valmistamiseksi, jolloin ihmisen veriplasma fraktioidaan ja immunoglobuliinipitoisesta fraktiosta poistetaan ei-toivotut proteiiniepäpuhtaudet käsittelemällä sitä moniarvoisen epäorgaanisen hapon suolalla ja yhden tai useamman kerran polyety-tyleeniglykolilla, tunnettu siitä, että a) ensimmäisessä puhdistusvaiheessa immunoglobuliinipitoista fraktiota käsitellään ammoniumsulfaatti- tai alkalimetallifosfaattisuolan vesiliuoksella, ja tällöin muodostunut sakka erotetaan ja heitetään pois, b) vaiheesta a) saatua liuosta käsitellään ammoniumsulfaatti- tai alkalimetallifosfaattisuolan vesiliuoksella, jolla on korkeampi suolapitoisuus kuin vaiheessa a) käytetyllä liuoksella, jolloin immu-noglobuliinia sisältävä sakka saostuu ja se otetaan talteen ja liuos heitetään pois, c) immunoglobuliinipitoinen sakka liuotetaan veteen, ja suola poistetaan liuoksesta, edullisesti dialyysillä, d) jäljelle jäänyt immunoglobuliinipitoinen liuos johdetaan lisäpuh-distusvaiheeseen monosakkaridin tai disakkaridin läsnäollessa ioni-väkevyyden ollessa vähintään 0,15 käsittelemällä sitä polyetyleeni-glykolilla, jolloin muodostuu sakka, joka heitetään pois, e) jäljelle jäänyt puhdistusvaiheesta d) saatu liuos käsitellään vielä kerran polyetyleeniglykolilla, jonka konsentraatio on suurempi kuin vaiheessa d), jolloin saadaan haitallisista epäpuhtauksista vapaa immunoglobuliinipitoinen liuos ja sakka, ja jälkimmäinen heitetään pois, f) vaiheesta e) saatua liuosta käsitellään vesiliuokoisella polymeerillä, esimerkiksi polymeerisellä polyolisaostusaineella, jolloin immunoglobuliini saostuu.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että ensimmäisessä puhdistusvaiheessa a) immunoglobuliinipitoista fraktiota käsitellään ammoniumsulfaattiliuoksella, jonka pitoisuus on 145-208 g/1, pH-arvossa 5,9-6,5.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että saostusvaiheessa b) vaiheesta a) saatua liuosta käsitellään ammoniumsulfaattiliuoksella, jonka pitoisuus on 268-289 g/1, pH-arvossa noin 8,0. 12 66534
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että toisessa puhdistusvaiheessa d) käytetään 60-90 g/1 poly-etyleeniglykolia 2000-6000 lämpötilassa 0-40°C ja pH-arvossa 5,8-6,4.
5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kolmannessa puhdistusvaiheessa e) käytetään 70-100 g/1 polyetyleeniglykolia 2000-6000 lämpötilassa 0-40°JC ja pH-ssa 6,4-7,0.
6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa d) monosakkaridina käytetään glukoosia, fruktoosia, mannoosia tai galaktoosia tai disakkaridina sakkaroosia, laktoosia tai maltoosia niiden määrän ollessa 1-35 paino-%, edullisesti 5-20 paino-%.
7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että proteiiniepäpuhtauksista vapautettu immunoglobuliini saostetaan vaiheessa f) lisäämällä polyvinyylialkoholia, polyvinyyli-pyrrolidonia, polyetyleeniglykolia tai etyleenioksidin ja polyoksi-propyleenin tms. kopolymeeria pitämällä pH arvossa 7,0-7,5. 13 66534
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AT675378A AT359641B (de) | 1978-09-19 | 1978-09-19 | Verfahren zur herstellung eines intravenoes ver- abreichbaren antikoerperhaeltigen immunglobulin- praeparates |
| AT675378 | 1978-09-19 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI792757A FI792757A (fi) | 1980-03-20 |
| FI66534B true FI66534B (fi) | 1984-07-31 |
| FI66534C FI66534C (fi) | 1984-11-12 |
Family
ID=3589418
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI792757A FI66534C (fi) | 1978-09-19 | 1979-09-05 | Foerfarande foer framstaellning av immunoglobulin som innehaoller antikroppar och aer laempligt foer intravenoes administration |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4276283A (fi) |
| JP (1) | JPS5547628A (fi) |
| AT (1) | AT359641B (fi) |
| BE (1) | BE878688A (fi) |
| CA (1) | CA1112166A (fi) |
| CH (1) | CH646608A5 (fi) |
| DE (1) | DE2936047A1 (fi) |
| DK (1) | DK154267C (fi) |
| ES (1) | ES484292A1 (fi) |
| FI (1) | FI66534C (fi) |
| FR (1) | FR2436604A1 (fi) |
| GB (1) | GB2030150B (fi) |
| IT (1) | IT1123200B (fi) |
| NL (1) | NL191670C (fi) |
| NO (1) | NO154255C (fi) |
| SE (1) | SE447790B (fi) |
| YU (1) | YU44151B (fi) |
Families Citing this family (27)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4374763A (en) * | 1979-09-17 | 1983-02-22 | Morishita Pharmaceutical Co., Ltd. | Method for producing gamma-globulin for use in intravenous administration and method for producing a pharmaceutical preparation thereof |
| JPS5855432A (ja) * | 1981-09-29 | 1983-04-01 | Fujirebio Inc | 静脈注射用免疫グロブリンの製法 |
| JPS58180433A (ja) * | 1982-04-16 | 1983-10-21 | Fujirebio Inc | 免疫グロブリンから抗補体作用物質の除去法 |
| US4434093A (en) | 1982-07-26 | 1984-02-28 | Ortho Diagnostic Systems Inc. | Methods for preparation of HBs Ag free gamma globulins |
| ATE66616T1 (de) * | 1982-08-30 | 1991-09-15 | Baxter Int | Verfahren zur herstellung von gamma-globulin enthaltenden zusammensetzungen. |
| US4639513A (en) * | 1984-02-02 | 1987-01-27 | Cuno Inc. | Intravenously injectable immunoglobulin G (IGG) and method for producing same |
| DK166763C (da) * | 1983-03-16 | 1993-07-12 | Immuno Ag | Immunoglobulin-g-holdig fraktion |
| US5234685A (en) * | 1983-03-16 | 1993-08-10 | Immuno Aktiengesellschaft Fur Chemisch-Medizinische Produkte | Method of determining incompatibility-reaction-causing substances in blood products as well as a method of inactivating said incompatibility-reaction-causing substances |
| AT383739B (de) * | 1983-03-16 | 1987-08-10 | Immuno Ag | Verfahren zur inaktivierung von unvertraeglichkeitsreaktionen verursachenden substanzen in immunglobulinhaeltigen blutfraktionen |
| US4482483A (en) * | 1983-04-06 | 1984-11-13 | Armour Pharmceutical Company | Composition of intravenous immune globulin |
| DE3344656A1 (de) * | 1983-12-09 | 1985-06-13 | Lentia GmbH Chem. u. pharm. Erzeugnisse - Industriebedarf, 8000 München | Verfahren zur herstellung einer serumproteinloesung |
| US4623541A (en) * | 1984-06-26 | 1986-11-18 | Candian Patents And Development Limited | Production of purified porcine immunoglobulins |
| EP0256190A1 (en) * | 1986-08-20 | 1988-02-24 | Canadian Patents and Development Limited Société Canadienne des Brevets et d'Exploitation Limitée | Production of purified porcine immunoglobulins |
| US4835257A (en) * | 1984-07-07 | 1989-05-30 | Armour Pharma Gmbh | Process for preparing gamma globulin suitable for intravenous administration using peg and a citrate buffer |
| EP0168506B2 (en) * | 1984-07-07 | 1998-01-07 | Armour Pharma GmbH | Process for preparing gamma globulin suitable for intravenous administration |
| US5019557A (en) * | 1986-09-15 | 1991-05-28 | Pitts Jr Ferris N | Method for the effective treatment of disease conditions in humans associated with HTLV-III infection |
| DE3641115A1 (de) * | 1986-12-02 | 1988-06-16 | Lentia Gmbh | Verfahren zur herstellung eines intravenoes anwendbaren und in fluessiger form stabilen immunglobulins |
| AT389817B (de) * | 1987-01-22 | 1990-02-12 | Schwab & Co Ges Mbh | Verfahren zur herstellung eines in fluessiger form stabilen immunglobulins zur intravenoesen anwendung |
| CA1308023C (en) * | 1988-07-29 | 1992-09-29 | William Austin James Mcauley | Immunoglobulin extraction utilizing properties of colloidal solutions |
| JPH0552008U (ja) * | 1991-04-04 | 1993-07-09 | 株式会社日本アルミ | 伸縮継手装置の耐火帯構造 |
| DE4344824C1 (de) * | 1993-12-28 | 1995-08-31 | Immuno Ag | Hochkonzentriertes Immunglobulin-Präparat und Verfahren zu seiner Herstellung |
| DE4424935C1 (de) * | 1994-07-14 | 1996-03-21 | Immuno Ag | Humanes virussicheres monomeres Immunglobulin A und Verfahren zu seiner Herstellung |
| US8703126B2 (en) | 2000-10-12 | 2014-04-22 | Genentech, Inc. | Reduced-viscosity concentrated protein formulations |
| US6875432B2 (en) | 2000-10-12 | 2005-04-05 | Genentech, Inc. | Reduced-viscosity concentrated protein formulations |
| MXPA04003640A (es) * | 2001-10-16 | 2005-04-11 | Rxkinetix Inc | Formulaciones de proteina de alta concentracion y metodo de fabricacion. |
| WO2008100578A2 (en) * | 2007-02-14 | 2008-08-21 | Amgen Inc. | Method of isolating antibodies by precipitation |
| RU2011140498A (ru) | 2009-03-06 | 2013-04-20 | Дженентек, Инк. | Препарат антител |
Family Cites Families (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR1350895A (fr) * | 1962-01-03 | 1964-01-31 | South African Inventions | Précipitation des colloïdes organiques |
| NL286954A (fi) * | 1962-01-03 | |||
| SE348942B (fi) * | 1970-06-02 | 1972-09-18 | Statens Bakteriologiska Labor | |
| DE2234069A1 (de) * | 1971-07-16 | 1973-02-08 | South African Inventions | Verfahren zur herstellung eines gereinigten gamma-globulins |
| US3763135A (en) * | 1971-11-08 | 1973-10-02 | Baxter Laboratories Inc | Gamma globulin production from cohn fraction iii using polyethylene glycol |
| JPS49101516A (fi) * | 1973-01-13 | 1974-09-25 | ||
| DE2364792A1 (de) * | 1973-01-15 | 1974-07-18 | South African Inventions | Verfahren zum reinigen von gammaglobulin |
| DE2500076C3 (de) * | 1975-01-02 | 1982-11-18 | SCHURA Blutderivate GmbH & Co KG, 4150 Krefeld | Verfahren zur Gewinnung von intravenös-verträglichen Gammaglobulinen |
| CA1064396A (en) * | 1975-02-18 | 1979-10-16 | Myer L. Coval | Fractional precipitation of gamma globulin with polyethylene glycol |
| US4126605A (en) * | 1975-12-29 | 1978-11-21 | Plasmesco Ag | Process of improving the compatibility of gamma globulins |
| US4165370A (en) * | 1976-05-21 | 1979-08-21 | Coval M L | Injectable gamma globulin |
| JPS6016406B2 (ja) * | 1976-08-06 | 1985-04-25 | マイヤ−、ル−イス、コ−バル | 静脈内に投与可能なガンマ・グロブリンの製造法ならびにそれにより調製したガンマ・グロブリン |
| JPS5347515A (en) * | 1976-10-13 | 1978-04-28 | Green Cross Corp:The | Gamma-globulin pharmaceutical preparation for intravenous injection |
| US4124576A (en) * | 1976-12-03 | 1978-11-07 | Coval M L | Method of producing intravenously injectable gamma globulin |
| DE2658334C3 (de) * | 1976-12-23 | 1987-05-07 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Verfahren zum Herstellen von Immunglobulinpräparationen mit verminderter Komplementaktivität und ein diese enthaltendes Arzneimittel |
-
1978
- 1978-09-19 AT AT675378A patent/AT359641B/de not_active IP Right Cessation
-
1979
- 1979-08-23 SE SE7907045A patent/SE447790B/sv not_active IP Right Cessation
- 1979-08-31 FR FR7921922A patent/FR2436604A1/fr active Granted
- 1979-09-03 DK DK368579A patent/DK154267C/da not_active IP Right Cessation
- 1979-09-05 FI FI792757A patent/FI66534C/fi not_active IP Right Cessation
- 1979-09-06 DE DE19792936047 patent/DE2936047A1/de active Granted
- 1979-09-06 NL NL7906685A patent/NL191670C/xx not_active IP Right Cessation
- 1979-09-07 CA CA335,211A patent/CA1112166A/en not_active Expired
- 1979-09-10 BE BE0/197072A patent/BE878688A/xx not_active IP Right Cessation
- 1979-09-10 US US06/074,257 patent/US4276283A/en not_active Expired - Lifetime
- 1979-09-13 JP JP11679879A patent/JPS5547628A/ja active Granted
- 1979-09-13 CH CH830779A patent/CH646608A5/de not_active IP Right Cessation
- 1979-09-13 GB GB7931744A patent/GB2030150B/en not_active Expired
- 1979-09-17 YU YU2259/79A patent/YU44151B/xx unknown
- 1979-09-18 IT IT7925778A patent/IT1123200B/it active
- 1979-09-18 NO NO793001A patent/NO154255C/no unknown
- 1979-09-19 ES ES484292A patent/ES484292A1/es not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| GB2030150A (en) | 1980-04-02 |
| DE2936047A1 (de) | 1980-03-27 |
| IT7925778A0 (it) | 1979-09-18 |
| DK154267C (da) | 1989-03-28 |
| DK368579A (da) | 1980-03-20 |
| YU44151B (en) | 1990-02-28 |
| ES484292A1 (es) | 1980-05-16 |
| FR2436604A1 (fr) | 1980-04-18 |
| NO154255C (no) | 1986-08-20 |
| FI792757A (fi) | 1980-03-20 |
| NL7906685A (nl) | 1980-03-21 |
| GB2030150B (en) | 1982-11-03 |
| NL191670B (nl) | 1995-10-02 |
| BE878688A (fr) | 1979-12-31 |
| IT1123200B (it) | 1986-04-30 |
| NO154255B (no) | 1986-05-12 |
| DK154267B (da) | 1988-10-31 |
| CA1112166A (en) | 1981-11-10 |
| ATA675378A (de) | 1980-04-15 |
| FI66534C (fi) | 1984-11-12 |
| NO793001L (no) | 1980-03-20 |
| YU225979A (en) | 1983-10-31 |
| SE7907045L (sv) | 1980-03-20 |
| JPS5547628A (en) | 1980-04-04 |
| DE2936047C2 (fi) | 1988-10-27 |
| US4276283A (en) | 1981-06-30 |
| CH646608A5 (de) | 1984-12-14 |
| FR2436604B1 (fi) | 1982-11-05 |
| JPH0253408B2 (fi) | 1990-11-16 |
| AT359641B (de) | 1980-11-25 |
| SE447790B (sv) | 1986-12-15 |
| NL191670C (nl) | 1996-02-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI66534B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av immunoglobulin som innehaoller antikroppar och aer laempligt foer intravenoes administration | |
| EP0073371B1 (en) | Intravenously injectable immune serum globulin and method of preparing same | |
| DK2270044T3 (en) | Liquid immunoglobulin G (IgG) product | |
| EP2270044B1 (en) | Liquid immunoglobulin G (lgG) product | |
| CA1245155A (en) | Immunoglobulin-g-containing fraction | |
| US4499073A (en) | Intravenously injectable immune serum globulin | |
| US4168303A (en) | Lyophilized native gamma globulin preparation for intravenous administration | |
| EP0764447B1 (en) | Preparation of virally inactivated intravenously injectable immune serum globulin | |
| JPH0365327B2 (fi) | ||
| US4886758A (en) | Method of determining incompatibility-reaction-causing substances in blood products as well as a method of inactivating said incompatibility-reaction-causing substances | |
| EP0078331B1 (en) | Process for preparing immunoglobulin suitable for intravenous injection | |
| KR20080108556A (ko) | 약물로 작용하는 치군군야-특이적 면역글로블린 농축액 | |
| US5234685A (en) | Method of determining incompatibility-reaction-causing substances in blood products as well as a method of inactivating said incompatibility-reaction-causing substances | |
| RU2264826C1 (ru) | Способ получения антитимоцитарного глобулина для внутривенного введения | |
| SI7912259A8 (sl) | Postopek za pripravo protitelesa vsebujočega imunglobulinskega pripravka za intravenozno dajanje | |
| KR810001235B1 (ko) | 정맥주사용 동결 건조 천연 감마 글로블린제의 제조방법 | |
| JPH07103045B2 (ja) | 非化学修飾γ−グロブリンの加熱処理方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MA | Patent expired |
Owner name: "IMMUNO" AKTIENGESELLSCHAFT FUER |