FI60935C - Foerfarande foer koncentrering och rening av ett urin- och serumprov foer bestaemning av hcg eller dess beta-underenhet immunologiskt och i foerfarandet anvaendbar anordning - Google Patents
Foerfarande foer koncentrering och rening av ett urin- och serumprov foer bestaemning av hcg eller dess beta-underenhet immunologiskt och i foerfarandet anvaendbar anordning Download PDFInfo
- Publication number
- FI60935C FI60935C FI763601A FI763601A FI60935C FI 60935 C FI60935 C FI 60935C FI 763601 A FI763601 A FI 763601A FI 763601 A FI763601 A FI 763601A FI 60935 C FI60935 C FI 60935C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- hcg
- urine
- och
- serum
- membrane
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/74—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
- G01N33/76—Human chorionic gonadotropin including luteinising hormone, follicle stimulating hormone, thyroid stimulating hormone or their receptors
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/807—Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
- Y10S436/81—Tube, bottle, or dipstick
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/811—Test for named disease, body condition or organ function
- Y10S436/814—Pregnancy
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/815—Test for named compound or class of compounds
- Y10S436/817—Steroids or hormones
- Y10S436/818—Human chorionic gonadotropin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
RSPl [B] (11) ULUTUSJ ULKAISU η Q -, -
MA lJ UTLÄGGNI NGSSKRIFT OU^O
C (45) Patentti myönnetty 13 04 1932 IPatent aieddelat w ^ (51) Kv.ik.Vci.3 G 01 N 33/76 SUOMI—'FINLAND (21) P»t«nttlh»k*mu* — Patvnttroeknlng 703001 (22) Haktmlspttvi — AiwSIcnlngtdtg 15.12.76 (23) Alkupilvi —GUtlfhettd·! 15.12.76 (41) Tullut julklMlul — Bllvlt offwitllg 18.06.77
Patentti- ja rekisterihallitus .... κ,........ . , . ,. .. .
„ ' (44) Nihtlvikslpanon ja kuul.|ulkalsun pvm. — .
Patent- och registerstyrelsen ' Anrtktn utlagd och utl.skrifttn publkarad 31.12.81 (32)(33)(31) Pyy«l««y «tuelkau*— Baglrd prloritat 17-12.75
Kanada(CA) 2U22lU
, (71) American Home Products Corporation, 685 Third Avenue, New York, ! N.Y. 10017, USA(US) (72) Morris Lincoln Givner, Pierrefonds, Quebec, Upendra Kumar Banik, Pierrefonds, Quebec, Guenther Schilling, Westmount, Quebec,
Kanada (CA) (7M Oy Kolster Ab (5^) Menetelmä virtsa- ja seeruminäytteen konsentroimi seksi ja puhdistamiseksi HCG:n tai sen j}-alayksikön määrittämiseksi immunologi s esti ja menetelmässä käytettävä laite - Förfarande för koncentrering och rening av ett urin- och serumprov för bestämning av HCG eller dess β-underenhet immunologiskt och i förfarandet användbar anordning Tämä keksintö koskee menetelmäävirtsa- ja seeruminäytteen konsentroi-miseksi ja puhdistamiseksi HCG:n tai sen ^-alayksikön määrittämiseksi im-munologisesti.
Keksintö koskee myöskin menetelmässä käytettäviä laitetta. Keksinnön mukaisella menetelmällä ja laitteella voidaan yksinkertaisesti ja luotettavasti todeta naisen raskaus, varsinkin raskauden hyvin varhaisessa vaiheessa.
Yksinkertainen ja herkkä koe naisen raskauden varhaista diagnoosia varten on tärkeä apu lääketieteelle ja yhteiskunnalle. Esimerkiksi se on 2 60935 edullinen ei-toivottujen raskauksien tai habituaalisten abortinhakijoiden ollessa kysymyksessä, joilla on hyötyä varhaisesta terapiasta. On myös lääkärille hyödyllistä saada tieto raskauden varhaisvaiheesta ennen lääkkeen määräämistä, koska lääke voi aiheuttaa epämuodostumien syntymistä (teratogeoninen vaikutus). Ei myöskään ole ylenkatsottava miten tärkeä seikka psykologisesti naiselle on varmasti tietää onko hän raskaana vaiko ei.
Laajimmassa käytössä ovat nykyisin ne raskauskokeet, jotka perustuvat ihmisen korionisen (sikiön suonikalvon) gonadotropiinin toteamiseen (HCG) virtsanäytteissä immunologisilla menetelmillä. Nämä kokeet perustuvat siihen, että HCG on raskauden gonatropiini, jota istukan suonikalvokudos erittää lisääntyviä määriä pian sen jälkeen kun hedelmöitynyt munasolu on kiinnittynyt siihen. (HCG:n erittymisen huippu yli 50 000 i.u. 2k tunnin virtsan koostumassa tapahtuu 5^-8¼ päivää viimeisen kuukautisjakson jälkeen, E.H. Venning teoksessa "Text Book of Gynegologic Endocrinology", J.J. Gold, Ed., Harper and Row, New York, 1968, ss. 95-97)· Nämä kokeet ovat yleensä luotettavia raskauden toteamiseen noin kahdennentoista päivän jälkeen, jotka seuraa T®.t poisjäänyttä kuukautis jaksoa (so. noin neljäntenäkymmenentenä päivänä kuukautisten puuttumista) ja antaa noin 2-6 % virheen oikein käytettynä, B.M. Hibbard, Brit. Med. J. 593 (1971) ja C.A. Horwitz et ai., Obstet. Gynecol., ^3, 693 (197M· Kokeisiin ei kuitenkaan voida luottaa ennen mainittua aikaa, koska niillä voidaan todeta vain HCG minimikonsentraatio noin 1000 - 3000 m. i.u./ml virtsaa. Pääsyynä siihen, että näiden kokeiden harkkyyttä ei ole lisätty on välttää väärät positiiviset tulokset, jotka johtuvat aineista, jotka ris-tiinreagoivat HCG-antiseerumin kanssa, B.M. Hobson, J. Reprod. Fertil., 12, 33 (1966).
Viime aikoina on kehitetty herkempiä kokeita. Nämä uudemmat kokeet perustuvat herkkään, mutta joskus ei-spesifiseen radioimmunoanalyysi (RIA) tekniikkaan. Näiden kokeiden ei-spesifisyys johtuu siitä, että ne antavat positiivisia tuloksia myös muiden gonadotropiinien, kuten ihmisen aivolisäkkeen kelta-rauhashormoonin (LH) kanssa, so. HCG antiseerumit ristiinrea-goivat LH:n kanssa. Käytettäessä ei-spesifistä RIA-tekniikkaa on LH-HCG osoitettu nousevan voimakkaasti alkaen 10-lU päivää jakson keskusta LH huipusta raskauden ensimmäisenä kuukautena. Katso esim. R.B. Jaffe, et ai., 3 6 0 9 3 5 J. Clin. Endocrinol, Metabol., 29, 128l (1969); A.F. Parlow, et al., J. Clin. Endocrinol, Metabol., 31, 213 (1970); D.P. Goldstein, et al., Fertil, Steril., 23, 817 (1972), L. Wide, Lancet, 2, 863 (1969); ja D.R. Mishell, Jr. et al., Am. J. Obstet. Gynecol., 117, 631 (1973).
On myös kehitetty RIA, joka on spesifinen HCG /l-alayksikölle. Viimeksi mainittua koetta on käytetty mittaamaan seerumi- tai plasma-HCG RIA:11a miertävän LH:n läsnäollessa raskauden saman varhaisen vaiheen aikana. Katso esim. L. Wide, Lancet, 2, 863 (1969), T.S. Kosasa, et al., J, Clin, Endocrinol. Metabol., 36, 622 (1973); ja T.S. Kosasa, et al., Obstet. Gynecol., 1*2, 868 (1973).
Vaikka RIA-tekniikat ovat herkkiä, on huomattava, että nämä menetelmät ovat kalliita ja monimutkaisia. Niitä suorittamaan tarvitaan korkeasti koulutettua henkilökuntaa, joka käyttää isotooppiainetta ja hyvin monimutkaista laitteistoa.
Toinen koe on radioreseorianalyysi HCG:lie, jonka kokeen äskettäin kehitti B.B. Saxena, et al., Science, 181*, 793 (197M. Vaikka tämä koe on vähemmän aikaa vaativa kuin RIA myös se vaatii sekä erikoislaitteis-ton että teknillisen taidon omaavan käyttäjän.
Toisen ryhmän raskauskokeita muodostavat biologiset kokeet, joihin kuuluu hyvin tunnettu "kaniinikoe". Mitä tulee tätä ja muita kokeita koskevaan kirjallisuuteen, katso edellä viitattua B.M. Hobsonin kirjoitusta. On kuitenkin hyvin tunnettu tosiasia, että nämä biologiset kokeet ovat työläitä ja aikaavieviä. Lisäksi ne vaativat eläinkolonioiden ylläpitoa, joissa eläinten herkkyydessä on vuodenaikavaihtelulta.
Vielä muita raskauskokeita on selostettu kirjallisuudessa. Nämä muut kokeet perustuvat seerumisteroiditasojen estimointiin tai verenvuodon poisjäännin havainnoimiseen pelkän progestrogeeniterapian tai pro-gestrogeeni-estrogeeni-terapian jälkeen. Näitä kokeita pidetään vähemmän luotettavina kuin edellä käsiteltyjä kokeita.
Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, että näyte johdetaan ultrasuodatusmembraanin läpi, joka on esipesty proteiiniliuoksella ja johon sitoutuvat molekyylit, joiden molekyylipaino on välillä 10 000 ja 50 000, ja että HCG:tä sisältävä retentaatti otetaan talteen. Keksinnön mukainen menetelmä perustuu siten ruumiin nesteen (esim. virtsa, seerumi tai plasma) hienosuodatukseen, mitä seuraa HCG:n immunologinen määritys. Hienosuodatusta on käytetty "istukan suonikalvokasvain HCG" alkuaan 60935 u korkeiden tiittereiden konsentroimiseen virtsassa, M.L. Taymor, et al., J. Endocrinol., 36, Ul7 (1966) ja S. Lok, Asian J. Med., 9» 319 (1973). Tällaiset kasvaimet tuottavat korkeita tasoja "istukan suonikalvo HCG":tä (trophoblastic HCG), paljon korkeampia kuin mitä tavataan raskaudessa M.L. Taymor, et ai., konsentroivat korkean "istukan suonikalvo tiitteri HCG" virtsassa vaiheessa, joka suuntautui tämän gonadotropiinin puhdistamiseen. Näitä kasvannaisia esiintyy vain harvoin. On huomattava, että istukan suonikalvon kasvannaiset antavat positiivisen koetuloksen esillä olevan keksinnön mukaisessa kokeessa. Tämän mukaisesti, niissä tapauksissa, joissa esillä oleva menetelmä antaa positiivisen koetuloksen, joka myöhemmin osoitetaan vääräksi mitä raskauteen tulee, olisi epäiltävä tällaisia HCG tuottavia kasvannaisia.
Keksinnön mukaiselle laitteelle on tunnusomaista, että laitteeseen.
kuuluu: (a) kammio, joka on ylhäältä avoin ja pohjasta suljettu, jonka yläosan ainakin yhtenä seinänä on ultrasuodatusmembraani, joka pystyy selektiivisesti pidättämään gonadotropiinin, ja kaikki muut seinät ovat jäykkää läpäisemätöntä ainetta; (b) kerros absorbenttia, joka pystyy sorboimaan mainitun kalvon lävitse kulkevan virtsan tai seerumin ja on rajakkain mainitum membraanin ulkosivupinnan kanssa ja tehokkaassa kosketuksessa mainittuun kalvoon; (c) kammion alaosa, jonka kaikki seinät ovat läpäisemättömät, pidättämään tietty määrä virtsan tai seerumin konsentraattia, joka sisältää gonadotropiinia; (d) mainitun kammion alapäässä suljettavat ulospäästamisvälineet, ja (e) reagenssisäiliö, joka on yhdistetty mainittuun kammioon mainittujen ulospäästämisvälineiden kautta ja sovitettu vastaanottamaan reagenssin gonadotropiinin immunologista toteamista varten, ja välineet siinä olevan reagenssin ja mainitun, gonodotropiinia sisältävän virtsa-tai seerumikonsentraatin välisen reaktion havaitsemista varten.
Tämän keksinnön mukaisen laitteen yhteen suoritusmuotoon sisältyy suodatin, joka on sijoitettu suodattamaan virtsaa, joka viedään kammioon.
Gonadotropiinialaan perehtyneille on ilmeistä, että HCG:n ^-alayksikön immunologinen määritys on mahdollinen siitä riippumatta, onko -alayksikkö erillinen vaiko sisältyneenä HCG-molekyyliin. Tämän keksinnön tarkoituksiin on tehokas ^-alayksikön toteaminen kummassa muodossa tahansa.
5 60935 Tämän keksinnön mukaisen menetelmän ensimmäinen vaihe käsittää virtsa- tai seeruminäytteen konsentroimisen hienosuodatukeella. Virtsan ollessa kysymyksessä käytetään edullisesti näytettä aamun ensimmäisestä virtsauksesta. Hienosuodatus toteutetaan hienosuodatuskalvon avulla.
Joukko tällaisia hienosuodatuskalvoja on selitetty seuraavissa julkaisuissa: W.F. Blatt, Methods in Enzymology, Voi. XXII, W.B. Jakoby, Ed. Academic Press, New York and London, 1971; V.E. Pollak, et ai., J. Lab. Clin. Med., 71, 338 (1968); W.F. Blatt, et ai., Nature, 216, 511 (1967); W.F. Blatt, et ai., Science, 150, 22^ (1965); US patentti n:o 35^9 016 (22.12.1970); US patentti n:o 3 6l5 02k (26.10.1971)·
Esimerkkeihin sopivista hienosuodatuskalvoista kuuluvat anisotrooppi-set, aromaattiset polymeerityypit, esim. Diaflo PM-10, Diaflo PM-20 (Amicon Corp) ja Diaflo * PM-30 (American Corp) ja Iopor x AP ja Iopor * XP (Dorr-Oliver, Stamford, Conn); anisotrooppiset selluloosatyypit, esim. HFA-100 ja HFA-200 (Abcor Inc., Cambrige Mass.) ja PSED (Millipore Corp., Bedford, Mass.); ja sellofaani, kuten esim se, jota valmistaa du Pont Chemicals, Wilmington, Delaware tai Union Carbide, N.Y.C.
Menetelmiä ja laitteistoja edellä mainittujen näytteiden konsentroi-miseksi hienosuodatuksella on kuvattu edellä annetuissa referaateissa, jotka koskevat hienosuodatuskalvoja. Erityisen käyttökelpoisia muotoja hienosuodatuskonsentraattoreille on kuvattu myös US patentissa 3 817 379 (E.M. Zipilivan et ai., 18.6.197^).
Esillä olevan menetelmän toinen vaihe käsittää HCG:n toteamisen konsentroidussa näytteessä. Edullisia koemenetelmiä HCG:n läsnäolon määrittämiseksi konsentroidussa virtsa- tai seeruminäytteessä ovat immunologiset kokeet, joita sanotaan agglutinaatio- tai agglutinaationesto-kokeiksi.
Agglutinaatiokokeet, katso esim. H.Fink ja A.Frie, Obstet. Gynecol., 28, 660(1966), perustuvat suoraan reaktioon HCG:n ja HCG:n vasta-aineen välillä.
Agglurinaationestokokeet perustuvat HCG-antiseerumin ja HCG:n välisen reaktion ehkäisemiseen kantimella, esim. veren punasoluilla tai lateksi-osasilla. Kun viimeksimainitussa kokeessa käytetään veren punasoluja, sitä x) tavaramerkkejä 60935 έ nimitetään haemagglutinaationestotestiksi ja kun käytetään lateksiosasia, sitä nimitetään lateksiagglutinaationesto-testiksi. Katso esim. L.Vide ja C*A. Gemzell, Aota Endocrinol., 35, 261 (i960); B.M. Hobson, J.Reprod.
Pert., 12, 33 (1966) ja tämän viittaukset» B.M. Hibbard, Brit. Med. J., 1, 593 (1971); US patentti n:o 3 54Θ 051, 15.12.1970; US patentti n:o 3 551 555» 29.i2.i970» ja US patentti nto 3 666 421, 30.5.1972.
HCG-vasta-aine, jota tarvitaan edellämainituissa testeissä, on tunnet*· tu. Vasta-aineen valmistaminen on selitetty useita kertoja, ks. esim. edellä siteerattua Vide ja Gemsell ja A.R.Midgley et ai., Proo. Soo. Ezp. Biol. Med. 10Θ, Θ5 (1961). Haluttaessa voidaan HCG myös todeta käyttäen speeifiistä antiseerumia HCG:n beeta-alayksikölle, ks. J.vaitukaitis, et ai., J. Clin. Endocrinol., 33» 988 (1971) ja Amer J.Obstet. Gynecol,113, 751 (1972). Kun käytetään HCG:n beeta-alayksikölle spesifistä antiseerumia, se luonnollisesti ilmaisee itse beeta-alayksikön läsnäolon samoinkuin ehjän HCG:n läsnäolon. (On tunnettua, että HCGtn beeta-alayksikkö helposti disasso-sioituu HCGistä).
Välineitä HCG:n toteamiseksi virtsa- ja seeruminäytteissä esilläolevan keksinnön menetelmän mukaisesti on kaupallisesti saatavissa» esimerkkeinä mainittakoon haemagglutinaationesto-testivälineistö, esim. Pregnostioon All-in X (Organon, Hollanti ja USA.) ja UCG* (Vampole Laboratories, Stamford, Conn.)» lateksi-agglutinaationesto-teetlvälineet, esim. planotest *, Pregnostioon Bri-Bot *' (Organon, Hollanti ja USA), Gravindex *" (Ortho, Raritan, N.J., USA) ja Prepurex tai Prepurin * (Burroughs Wellcome, USA ja Yhdistyneet Kuningaskunnat)» ja suora-agglutinaatiotesti, esim. BAP Test. (Beaver Biologicals Co USA.) ja Gonavielide (Mplter Gmbh., Länsi-Saksa).
Toteutettaessa tämän keksinnön aukaista menetelmää naisen virtsa- tai seeruminäyte (esim. 5 - 50 ml näyte), Joka edullisesti selkeytetään suodattamalla sopivan suodatinpaperin lävitse tai sentrlfugolmalla konsentroidaan 10-300 kertaisesti, edullisesti 10-30 kertaisesti sijoittamalla näyte kosketukseen hienosuodatuskalvon kanssa, jonka molekyylipainokatkaisu on alueella noin 10 000 - 50 000, edullisesti noin 15 000 - 35 000. Toisin sanoen alarajana on 10 000 tai edullisesti 13 000 ja ylärajana 30 000, edullisesti 35 000, mitkä rajat on todettu käyttökelpoisiksi. Käytettä suodatetaan kalvon lävitse siihen saakka kunnes suodattamaton osa näytteestä (jäävä osuus) on saavuttanut halutun konsentraatioasteen» esim. jäävän osan tilavuus on 0,1 - 3,0 ml. Koneentrolntivaihe toteutetaan tavallisesti lämpötila-alueella noin 0 - 40°C, edullisesti 4 - 25°C ja tavallisesti se vaatii yhdestä kahteen tuntiin. Suodos hyljätään ja jäävä osuus alistetaan immunologiseen testiin HCG:n suhteen jonkin edellä mainitun menetelmän mukaisesti.
s tavaramerkkejä 7 60935
Konsentroidun virtsan tai seerumin vesiliuos sekoitetaan ampullissa tavallisesti suositeltuun määrään lyofiloitua seosta HCG- tai beeta-HCG-anti-seerumista, erytrosyyteletä tai lateksiosaslsta herkistettynä HCG:llä, puskurista, säilytysalnedsta ja indifferentlsta, kantlmesta. Sen jälkeen kun seoksen on annettu seisoa noin puolesta kahteen tuntia, positiivisen reaktion osoituksena on spesifinen sedimentaatiokuvio selvästi määrätyn renkaan muodossa ampullin pohjalla jos ampulli on pyöreäpohjainen taikka pisteen muodossa, jos ampullissa on kartionmuotöinen pohja negatiivisen reaktion osoituksena on diffuusi, keltalsenruskea sedimentti.
Vaihtoehtoisesti käytetään edellä mainittuja suoria agglutinaatiotestäjä HCG:n toteamiseen konsentroidun virtsan vesiliuoksessa.
Tämän keksinnön edellä esitetyn käytäntöön soveltamisen edullisessa modifikaatiossa on todettu edulliseksi esipestä konsentraattorin sisäpinta, so. kammio, joka sisältää hienosuodatuskalvon, 0,1 - 5 #, edullisesti 0,1 - 1,0 ia vesiliuoksella nautaeläineeerumivalkuaisaineesta (BSA) kosketuksessa koneentraattorin sisäpintoihin noin yhden minuutin ajan ennen virtsanäytteen sijoittamista konsentraattoriin. Tästä modifikaatiosta on tuloksena selvemmin määritetyt positiiviset ja negatiiviset reaktiot ja se parantaa esillä olevan menetelmän herkkyyttä estämällä HCGsn absorption laitteen pintaan.
Edelleen olemme havainneet, että samat edulliset tulokset saavutetaan, jos BSA:ta käytetään edellä mainitun suodatinpaperin pesuun, jota käytetään suodattamaan virtsa- tai seeruminäytettä tai jos BSAtta lisätään suoraan aluksi koottuun virtsanäytteeseen antamaan konsentraatio 0,001 - 1,0 it edullisesti 0,01 - 1,0 ia BSA:ta virtsassa.
Myöt muut proteiinit kuin BSA ovat sopivia edellä mainittuun tarkoitukseen, esim. ihmisen seerumin valkuaisaine, gammaglobuliini (sekä nautaeläimen että ihmisen), myoglobiini, fibrinogeeni, ihmisen hemoglobiini, ja "keyhole limpet hemooyamin".
Vaikka voi näyttää ilmeiseltä konsentroida laimea HCG-liuos siten että HCG konsentraatio osuu annetun kokeen herkkyysrajoihin, on tämä täysin vastakkainen kumulatiivisen kokemuksen kanssa immunologisissa testeissä HCG:n määrittämiseksi ihmisen ruumiin nesteissä. Ensiksikin on huomattava, että sellaisten ruumiin nesteiden kuin virtsan ja seerumin konsentrointi samalla tavoin konsentroi ne aineet, jotka häiritsevät immunologista testiä. Toiseksi on olemassa asiantuntijalausuntoja siltä, että ruumiin nesteiden kuten virtsan konsentrointi lisää väärien positiivisten tulosten esiintymistä, ke. esim. L.Vide, Acta Endocrinol., Supp, 70 (1962), s. 95 ja 100 ja H.Hobson edellä mainittua referaattia s. 43· 6 O 9 3 5
Tarkemmin sanottuna Wide euosittelee voimakkaasti, että immunologiset testit oliei säädettävä siten, että positiivinen testitulos saavutetaan vain kun HCG koneentraatio virtsassa on 1000 tai enemmän m.i.u./ml. Muulloin LH-tasot tai ihmisen menopausaalinen gonadotropiini, jota esiintyy joissakin näytteissä, voi häiritä HOG analyysin spesiifisyyttä ja johtaa vääriin positiivisiin testituloksiin.
Yhtä yritystä välttää tätä tilannetta on kuvannut R.T. Pisk US patentissa 3 171 783» 2.3.1965» Tämän Piskin patentin menetelmän mukaan, joka on paljon monimutkaisempi kuin esillä olevan keksinnön mukainen hlenosuodatus-menetelmä, HCG virtsassa konsentroidaan absorptiolla kaoliinille. HCG:n adsorption jälkeen on kuitenkin tässä proseduurissa toteutettava vähintään kolme muuta vaihetta ennenkuin mennään immunologiseen testiin HCGtn suhteen. Samanlaisen työlään tekniikan, joka myös perustui absorptiolle kaoliinille, kuvasivat aikaisemmin E.H.Hon ja J.McL. Morris, Yale J.Biol, Med., 27 178 (1954). Lisäoeoituksena näiden kahden menetelmän monimutkaisuudesta on että niitä ei milloinkaan ole käytännössä laajalti käytetty, ke. edellä mainittua Hobson referaattia ja Hibbardin edellä mainittua referaattia. Lisäksi näistä viimeksimainltuista menetelmistä ja eräästä muusta niihin verrattavasta ennestään tunnetusta menetelmästä, B.M. Hobson ja L.Vide, Aota Endocrinol., 46, 632 (1964), «n seurauksena noin 50 menetys gonadotropiinin aktiviteetissa ja tästä johtuva menetys herkkyydessä, myös lisääntyy mahdollisuus saada vääriä positiivisia testituloksia joissakin tapauksissa, esim. virtsanäytteissä premenopausaalisista, menopausaalisista tai poetmenopau-saalisista naisista.
Esillä olevan keksinnön mukaisen laitteen useita suoritusmuotoja on esitetty oheisissa piirustuksissa 1-14»
Kuvio 1 esittää perspektiivikuvana keksinnön mukaisen laitteen yhden suoritusmuodon sisempää ja ulompaa komponenttia erotettuina toisistaan ennen ensinmainitun komponentin sijoittamista jälkimmäiseen.
Kuvio 2 esittää pyeteikkausta kuvion 1 esittämistä sisemmästä ja ulommasta komponentista toiminnallisessa kiinteässä suhteessa toisiinsa ennen virtsan konsentrointia.
Kuvio 3 esittää pystyleikkausta kuvion 1 esittämistä sisemmästä ja ulommasta komponentista toiminnallisesti yhdistettyinä virtsan konsentroinnin jälkeen sisemmän komponentin ollessa osittain ulosvedettynä.
Kuvio 4 esittää vaakaleikkaista pitkin viivaa 4-4 kuviossa 2.
Kuvio 3 esittää suurennettua osittalsleikkausta kuviosta 2 ja kuvaa lisäksi vlrtsakonsentraattia.
Kuvio 6 esittää samanlaisena pystyleikkaukeena kuin kuvio 2 tämän keksinnön mukaisen laitteen toista suoritusmuotoa käytettäväksi ennaltavalitun virtsatilavuuden yhteydessä.
9 6 0 9 3 5
Kuvio 6A esittää suurennettua osittaisleikkausta kuviosta 6 sanaan tapaan kuin kuvio 5·
Kuvio 6B edustaa osittaista pystyleikkausta kuvion 6 suoritusmuodosta samalla tavoin kuin kuvio 3 edellisestä suoritusmuodosta.
Kuvio 6C esittää suurennettua osittaisleikkausta kuviosta 6B.
Kuvio 7 eeittää pystyleikkausta suoritusmuodosta, joka on samanlainen kuin kuvion 6 esittämä, mutta johon sisältyy erotettava reagenttikammio.
Kuvio 7A esittää pystyleikkausta kuvion 7 mukaisesta suoritusmuodosta sisemmän komponentin ollessa osittain ulosvedettynä.
Kuvio Θ on vaakaleikkaus pitkin viivaa 8-6 kuviossa 6.
Kuvio 9 esittää leikkausta kuvion 7 mukaisesti irroitetusta reagenttl-kammlosta asennettuna analyysiä varten.
Kuvio 10 esittää pystyleikkausta vielä yhdestä tämän keksinnön mukaisen laitteen suoritusmuodosta.
Kuvio 11 esittää vaakasuoraa leikkausta pitkin viivaa 11-11 kuviossa 10.
Kuvio 12 esittää perspektiivikuvana kuvion 10 suoritusmuodon kalvoa mukaanluettuna sen läpäisemätön alaosa.
Kuvio 13 esittää pystyleikkausta vielä yhdestä tämän keksinnön mukaisen laitteen suoritusmuodosta.
Kuvio 14 esittää pystyleikkausta keksinnön mukaisen laitteen vielä yhdestä suoritusmuodosta.
Kuvio 13 on kaaviollinen kuvaus esilläolevasta keksinnöstä.
Tämän keksinnön mukaisen menetelmän yhdessä esimerkkieuosituemuodossa virtsanäytteen konsentrointi toteutetaan käyttämällä Minicon-B-15 * hieno-suodatuskonsentraattoria, jota toimittaa Amioon Corporation, Lexington, Massachusetts, USA. Valmistajan antamien tietojen mukaan Minicon-B-15 kon-sentraattori perustuu periaatteeseen, että anisotroopplsen Blaflo * hieno-suedatuekalvon, jonka molekylaarinen katkaisu on 15 000, taakse on sijoitettu absorbenttityynyt. Toisessa ajossa käytettiin saman valmistajan Minicon-PM-30 *; tämä koneentraattori on valmistettu saman periaatteen mukaisesti kuin Minicon-{3-15 x ja sen molekylaarinen katkaisu on 30 000. Tämän rakenteen omaavia konsentraattoreita on kuvattu edellä jo aikaisemmin mainitussa US patentissa 3 817 379.
Esillä olevassa suoritusmuodossa viiden ml näyte ensiksi eritettyä aamuvirtsaa, joka oli suodatettu läpi Whatman ft 1 suodatinpaperin, konsentroitiin sijoittamalla näyte Minicon-B-15 *" konsentraattorin säiliöön. Kon-eentrointivaiheen aikana konsentraattorin annettiin seisoa ympäristölämpotilas-sa noin 4°C. Noin kahden tunnin kuluttua näyte oli konsentroitunut noin 0,1 ml:ksi. Konsentroitu virtsa (jäävä osuus) poistettiin konsentraattorista * tavaramerkkejä 10 609 35 ja laimennettiin tislatulla vedellä takaisin tilavuuteen 0,5 ml konsentroidun virtsan vesiliuoksen saamiseksi. Jäävän osan poistaminen suoritettiin käyttäen hienoa Pasteur-pipettiä. Sen jälkeen konsentroidun virtsan vesi-liuos testattiin HCGtn läsnäolon suhteen koevälineillä HCGtn määrit, seksl virtsae a. Testivälineenä oli haemagglutinaationeeto-testlväline, jota nimitetään Pmegnostioon All-in r.
Kuvion 1 mukaisesti kuuluu sisempään komponenttiin 1 varsi 2, välin päässä toisistaan olevat kaulukset 5 ja 4* jotka on yhdistetty toisiinsa hienosuudatuskalvolla 5» joka ympäröi absorbenttia 6. Varsi 2 on varustettu kädensijalla 7 komponentin sisääntyöntämisen ja poisottamisen helpottamiseksi ja pääteoealla, joka ulkonee ohi kauluksen 3 ja toimii tulppana. Kaulukset 3 ja 4 ympäröivät vartta 2, kaulus 4 on nestettä läpäisemättömästi kiinnitetty varteen 2 ja kaulus 3 on siten kiinnitetty, että se päästää ilman poistumaan absorbentista 6.
Ulompaan komponenttiin Θ kuuluu sisäseinä 9 ja ulkoseinä 10, jotka on liitetty toisiinsa elimellä 11, niin että muodostuu suppllonmuotoinen yläpään aukko 12. Sisä- ja ulkoseinä 9 ja 10 sulkevat väliinsä absorbentin 13*
Kuten kuviosta 2 nähdään on ulompi komponentti Θ sovitettu vastaanottamaan sisempi komponentti 1, niin että muodostuu rengasmainen tila 14 ja ulompi komponentti on alaosassaan seinällä 15 sovitettu vastaanottamaan kaulus 4 ja varren 2 alapää nestettä läpäisemättömästi. Ulompaan komponenttiin 8 sisältyy integroidusti sen kanssa oleva alaspäin suuntautuva reagentti-säillö 17, joka sisältää reagenttia 17a. Ulomman komponentin 8 sisäseinässä 9 on myös aukko 1Θ, joka johtaa absorbenttiin 13.
Käytettäessä kuvioissa 1-5 esitettyä keksinnön suoritusmuotoa raskauden testaamiseen , naisen virtsanäyte suodatetaan esim. Vhatman mol suodatinpaperin lävitse tai sentrifugoldaan esim. 3000 kierrosta minuutissa 5 minuuttia ja kaadetaan kuviossa 2 esitetyn yksikön suppilonmuotoiseen yläpään aukkoon 12. Virtsa virtaa alaspäin ja täyttää rengasmaisen tilan 14 ja mahdollinen liikemäärä yli esim. 5 ml:n virtaa aukon 18 lävitse ja tulee absorbentin 13 absorboimaksi. Hienosuodatuskalvo 5 on valittu aikaansaamaan molekyylipainokatkalsu noin 10 000 - 50 000, edullisesti 15 000 - 35 000, niin että se ei päästä lävitse ihmisen korionista gonadotropiinla. Tällaisia kalvoja on kuvattu edellä.
Osa rengasmaisen tilan 14 virtsasta kulkee hlenosuodatuskalvon 5 lävitse ja tulee absorbentin 6 absorboimaksi, syrjäytetty ilma poistuu ylöspäin nhi kauluksen 3· Kun konsentraatin taso rengasmaisessa tilassa 14 saavuttaa kauluksen 4 yläpinnan, so. läpäisemättömän pysäytysvyöhykkeen, noin kahden tunnin kuluttua, enempää konsentroitumista ei voi tapahtua, kuten on esitetty * tavaramerkkejä
6 0 9 3 S
11 kohdassa 19 kaviossa 5 ja konsentraattia on ennaltamäärätty määrä, esim.
0,5 ml. Sisempi komponentti 1 nostetaan ulommasta komponentista 8, mikä päästää konsentraatin kulkemaan ohi varren 2 kauluksen 4 ulkonevan pääteosan (se on varren tulppaosan) ympäri säiliöön 17.
Säiliöön 17 on sijoitettu reagenttia 17a, joka on lyofiloitua seosta HCG tai beeta-HCG antiseerumista, erytrosyyteistä tai latekeiosasista herkistettynä HCG:llä, puskurista, säilöntäaineesta ja indifferenteista kanti-mista.
Sen jälkeen kun on kulunut puolestatoista kahteen tuntia, suoritetaan lukeminen. Jos nainen on raskaana, ilmenee spesifiinen sedimentointikuvio selvästi määritettynä renkaana tai pisteenä siitä riippuen onko säiliön 17 pohjamuoto pyöreä vaiko kiilamainen. Jos ei ilmesty rengaeta tai pistettä, nainen ei ole raskaana. Testitulosten lukemista varten varsi 2 voi olla tehty lasista tai kirkkaasta muoviaineesta, niin että käyttäjä voi nähdä renkaan tai pisteen katsomalla alaspäin vartta pitkin. Tässä tapauksessa kammion 17 alaosa on tehty läpikuultavasta aineesta. Sammion 17 alle sijoitettu peili 20 (kuvio 6) yksinkertaistaa testitulosten tukemista.
Kuviot 6, 6A, 6B, 6C ja 8 kuvaavat vaihtoehtoista suoritusmuotoa, jossa laite ei ole varustettu ylijuoksulla ja vaatii virtsanäytteen esimittauk-sen. Täten sisempi komponentti 1 on sama ja ulompaan komponenttiin ei sisälly ulkoseinää 10 ja absorbenttla 13.
Kuviot 7» IA ja 9 esittävät vaihtoehtoista suoritusmuotoa, jossa komponentti 1 on sama ja ulompi komponentti on konstruoitu kahtena kappaleena. Täten kuviossa 7 ulompaan komponenttiin kuuluu seinä 9, alemman osan seinä 15 ja putki 21. Putken 21 alla ja tätä liukuvasti ympäröiden on säiliö 22, jossa on 8ulkukalvo 23, joka rajoittaa reagenttia 17a sisältävää suljettua osaa 24.
Kuviosea 7A kalvo 23 on kuvattu rikottuna sen jälkeen kun putkea 21 on edelleen työnnetty säiliöön 22 Ja sisempi komponentti 1 on osittain uloevedettynä eli nostetussa asemassa.
Kuvio 9 esittää säiliön 22 ixroltettuna kuvion 7 putkesta 21 ja asennettuna tukitellneeseen 25, joka sisältää myös peilin 20.
Kuvioiden 10 ja 11 mukaisessa suoritusmuodossa kammiolla 26 on suorakulmaisen prisman muoto ja sitä rajoittavat läpäisemättömät seinät 27, 28, 29 ja 30 ja kammion 26 sisään on sijoitettu pyramiidinmuotolnen hlenosuodatus-kalvo 31* Jonka ulkopintaa ympäröi absorbentti 32. Tilaan 32a, jota rajoittaa pyramildimaisesti muodostettu kalvo 31 (mukaanluettuna nestettä läpäisemätön pyramiidinmuotolnen alaosa 32b, so. läpäisemätön pysäytys vyöhyke}, on sijoitettu ampulli 33» joka sisältää tyhjössä pidettyä reagenttia 34* Alaosassa 6 0 9 3 5 12 32b on syvennys 35» jok» on sovitettu tiiviieti vastaanottamaan ampullin 33 kara 36* Tässä suoritusmuodossa karaa 36 esipuristetaan kohdassa 32c, joka vastaa läpäisemättömän alaosan 32b pohjaa.
Elimen 31 pyramiidimainen muoto mukaanluettuna sen alaosa 32b kuvioiden 10 ja 11 esittämää suoritusmuotoa varten on esitetty kuviossa 12.
Kuvion 10 mu’aista suoritusmuotoa käytettäessä virtsaa viedään tilaan 32a, joka ympäröi ampullia 35 ja virtsa konsentroidaan jääväksi osuudeksi. Ampulli 35» joka tiiviisti sopii syvennykseen 35» murretaan sitten esipuris-tetusta kohdasta. Virtsan jäävä osuus tulee pakosta imetyksi aikaisemmin evakuoituun ampulliin 33 ja tulee kosketukseen reagentin 34 kanssa, ampulli 33 käännetään ylösalaisin, sisältö sekoitetaan perusteellisesti ja sitten ampulli sijoitetaan telineeseen katselua varten.
Tämän keksinnön mukaisen laitteen vielä eräs suoritusmuoto on esitetty kuviossa 13. Tässä kuviossa on kuvattu pohja 37 tukemassa ulkoseinää 38. Ulkoseinä 38 tukee kartionmuotoista elintä 39, jonka alaosa 40 on muodostettu nestettä läpäisemättömästä aineesta ja elimen 39 yläosa 41 on muodostettu hienoeuodatuskalvoeta. Kalvon 41 viereen on sijoitettu absorbentti 42 tehokkaaseen kosketukseen kalvon ulkopinnan kanssa. Kartionmuotöisen elimen 39 läpäisemättömän osan 40 alapuolelle on sijoitettu reagenttisälliö 43 js tämän alle on sijoitettu peili 20. Säiliötä ympäröivä osa ulkoseinästä 38 ja itse säiliö on tehty valoa läpäisevästä aineesta. Ulkoseinän 38 yläpuolelle on sijoitettu hattu 45» josta suuntautuu alaspäin kehäseinä 46 ja mäntä 47, jossa on terävä kärki 48*
Laitetta käytettäessä virtsaa mitataan hattuun 45« virtsa kaadetaan kartionmuotoieeen elimeen 39, neste kulkee läpi ylemmän osan 41 ja absorbent-tiin 42 ja jäävä osuus kootaan läpäisemättömään alaosaan 40. Kun jäävä osuus on koottu, hattua 45 pakotetaan alaspäin esimerkiksi kuviossa nähtävän kierteityksen avulla, niin että männän 47 kärki 48 rikkoo elimen 39 läpäisemättömän seinän 40. Kun mäntä 47 vedetään poispäin, jäävä osuus virtaa rikkoutuman lävitse reagenttisäiliöön 43* Reaktio voidaan lukea poistamalla reagentti-säiliö taikka peilin 20 avulla, joka on sijoitettu reagenttlsäillön 43 alle.
Vielä yksi suoritusmuoto on esitetty kuviossa 14· Tähän suorltusmuo-muotoon kuuluu pohja 49» joka kantaa teleskooppielintä 50· Teleskooppielimeen 30 kuuluu ulkoseinäosa 31 ja sisäselnäosa 32) viimeksimainittu menee liukuvasti ensinmainitun sisään. Poistettava vaste-elin 33 on sijoitettu ulkoseinä-elimen 31 ja pohjan 49 väliin soittamaan uiko- ja sisäseinäelimet 51 ja 32 toisiinsa nähden. Ulkoseinäelin 31 kantaa pyramiidinmuotolsta elintä 34) mainitun elimen 34 alaosa 35 on nestettä läpäisemätöntä ainetta ja yläosa 36
6 O 9 3 S
13 on hienosuodatuskalvo. Elimen 54 viereen on sijoitettu absorbentti 57 tehokkaaseen kosketukseen kalvon 56 yläosan ulkopintaan. Läpäisemättömän osan 53 alapuolelle on kannattimien tukemana sijoitettu alemmalle seinäelimelle 52 reagenttisäiliö 58, joka sisältää reagenttia 59» joka pidetään alipaineessa kumitiivisteen 60 avulla. Ontto putki 61 riippuu läpäisemättömän alaosan 55 pohjasta ja on nestetiiviissä yhteydessä mainittuun alaosaan 53* tiiviste 60 sulkee putken 61 pohjan. Yläosan 54 yläpuolelle on ulkoselnäelimen 51 tukemana sijoitettu suodatin 62. Tämän suoritusmuodon mukainen laite on lisäksi varustettu poistettavalla pölyhatulla 63 ja peili 20 on sijoitettu reagentti-säiliön 56 alapuolelle.
Laitetta käytettäessä ennaltamäärätty määrä virtsaa suodatetaan suodattimen 62 lävitse ja kootaan pyramiidinmuotoiseen elimeen 54« Sorboituva neste kulkee läpi yläosan 56 absorbenttiin 57 ja jäävä osuus kasantuu nestettä läpäisemättömään alaosaan 55« Kun jäävä osuus on tullut kootuksi*vaste-elin 53 poistetaan ja yläseinää työnnetään alaspäin kohti pohjaa 49« niin että onton varren 61 alakärki rikkoo tiivisteen 60 ja jäävä osuus virtaa alipaineen avulla reagenttisäiliöön 58. Laitteen osat erotetaan toisistaan vetämällä ulkoseinäelintä 51 ylöspäin ja poispäin sisäseinäelimestä 52 niin että jäljelle jää laitteen alaosa* johon kuuluvat pohja 49* sisäeeinäelin 52* peili 20 ja reagenssisäiliö 56. Sen jälkeen kun on tapahtunut reaktio jäävän osuuden ja reagentin välillä, reaktion tulos luetaan säiliön 56 alle sijoitetun peilin 20 avulla.
Kuvio 15 kuvaa kaaviollisesti gonadotropiinia sisältävän virtsan tai seerumin konsentrointivaiheita hienosuodatuskalvolla, joka on tehokkaassa kosketuksessa absorbenttiin* joka pystyy sorboimaan biologista nestettä, jäävän osuuden saamiseksi suodatuksella ja tämän jäävän osuuden saattamisen reagoimaan reagentin kanssa, joka pystyy ilmaisemaan gonadotropiinln läsnäolon.
Mitä tulee raaka-aineisiin, jotka ovat käyttökelpoisia tämän keksinnön mukaisen laitteen valmistuksessa, löytyy selostus hienosuodatuskalvosta la absorbentista edellä mainituista hienosuodatuskalvoa koskevista referaateista, esim. edellä jo mainitusta TTS patentista 3 817 379.
Mitä tulee laitteiston muihin osiin kuin hienosuodatuskalvoon, ne voidaan valmistaa mistä tahansa sopivasta läpäisemättömästä aineesta, joka helposti voidaan muovata haluttuun muotoon. Lasia ja muovia voidaan käyttää. Termoplastinen aine tai katalyyttisesti kovetettu muovi, esim. polyeteeni, polypropeeni tai polystyreeni on erittäin taloudellista ja sopivaa tähän tarkoitukseen.
Tämän keksinnön mukaisen menetelmän herkkyys HCGsn Ilmaisemiseksi virtsassa on osoitettu kokeella, jossa ennaltamäärättyjä määriä HCGstä lisä- 14 6 0 9 3 5 tään normaaliin virtsaan (so. virtsaan, jossa ei ole HCGitä), joka sitten analjeoidaan esillä olevalla menetelmällä. Seuraava taulukko 1 kuvaa tällaisten kokeiden tuloksia, joissa ennaltamäärätty määrä HCGttä (APL *,
Ayerst Laboratories, New York, USA.) liuotetaan virtsaan, joka on koottu naiselta normaalin jakson l6ttena ja 17>tenä päivänä ja postmenopausaali-selta naiselta, muodostamaan virtsanäytteet, jotka sisältävät 20, 40 ja 80 m.i.u./ml HCGttä. (On huomattava, että nykyisin käytetyt raskaustestit voivat antaa vääriä positiivisia tuloksia näiden naisten virtsanäytteistä.) Sen jälkeen näytteet saatetaan esimerkklsuoritusmuodon konsentrointl-ja ilmaisuvaiheiden alaisiksi käyttäen 1 $> BSA esipesua konsentraattorllle. Virtsanäyte toimii omana kontrollinäytteenään ja kaikki analyysit tehdään kahdennettuina.
Taulukko I
Päivää viimeisten kuu- Esillä olevan menetelmän
Virtsa- kautisten ensimmäisen RyhmätCHCG, mukaiset tulokset voimak- näytteen päivän jälkeen tai m.i.u./ml kaasti positlivinen(++), n:o postmennpausaalinen/ virtsaa) positiivinen (-t-)epävarma (PM) (+), negatiivinen (-) 1 16 kontrolli I 16 Plus HCG (20) ± I 16 ... Plus HCG (40) + 1 16 Plus HCG (80) ++ 2 17 kontrolli 2 17 Plus HCG (20) ± 2 17 Plus HCG (40) + 2 17 Plus HCG (80) ++ 3 PM ’ kontrolli 3 PM Plus HCG (40) + 3 PM Plus HCG (80) ++ 4 PM kontrolli 4 PM Plus HCG (40) + 4 PM Plus HCG (80) ++ * tavaramerkki 15 6 0 9 3 5 /
Edellä mainitun kokeen tulokset osoittavat, että tämän keksinnön mukaisella menetelmällä yhdenmukaisesti todetaan HCG virtsassa konsentraatloina 40 m.i.u./ml tai enemmän. Nämä tulokset osoittavat, että esillä olevalla menetelmällä on suurempi herkkyys HCG:n toteamisessa virtsassa kuin muilla nykyisin käytettävissä olevilla in vitro testeillä lukuunottamatta edellä aikaisemmin mainittuja työläitä RIA ja radioreseptorimenetelmiä. Tulokset ovat joka vielä merkittävämpiä, kun otetaan huomioon, että HCG konsentraati-oita virtsassa alle 500 m.i.u/ml ei ole todettu nykyisin laajalti käytetyillä raskaustestausvälineillä, ke. S.G. Driscoll, et ai., Am.J.Obstet.Gynecol., 110, 1083 (1971)« D.A. Edelman et ai., Am. J. Obstet. Gynecol., 119» 521 (1974), H. Hepp ja R.H. Richter, Med. Klin. 68, 920 (1973) ja M.L. Taymor, Medical World News, helmlk. 1. s. 24 (1974). Katso myös Medical Letter, 17» 6 (1975)· Kuten edellä mainittiin,kaupallisten välineistöjen säätämisestä ilmaisemaan alempia HCG konsentraatioita on seurauksena lisääntyvä väärien positiivisten testitulosten esiintyminen. Koska HCG konsentraa-tioita noin 40 m.i.u./ml raskaana olevan virtsassa saadaan ensimmäisen raskausviikon aikana, esim. ks. L. Wide, Lancet, 2, 863 (1969), esillä oleva menetelmä muodostaa hyvän testin antaen vannan osoituksen raskaudesta niin aikaisen kuin raskauden ensimmäisen viikon aikana.
Tämän keksinnön aukaisen menetelmän parempi luotettavuus verrattuna yleisesti käytettyihin in vitro menetelmiin raskauden toteamiseksi, erityisesti varhaisen raskauden toteamiseksi, on osoitettu vertailevalla tutkimuksella, jossa analysoidaan perättäisten päivien virtsanäytteitä. Esimerkiksi seuraava taulukko II kuvaa sellaisen kokeen tuloksia, jossa perättäisten päivien virtsanäytteet koottiin ja analysoitiin henkilöistä,joiden raskauden lääkäri myöhemmin vahvisti kliinisesti. Kukin päivittäinen näyte analysoitiin ensin tunnetulla haemagglutinaatlonestotestilla (HIT), toiseksi haenagglutinaationestotestillä, jota edelsi virtsanäytteen ensin konsentroin-ti asetonisaostusmenetelmällä (AE-HIT) ja kolmanneksi konsentroimalla näyte hienosuodatuksella mitä seurasi HCG:n toteaminen haenagglutinaationestotestil-la (TJF-HIT). Viimeksimainitussa analyysissä käytettiin menetelmää, joka tässä on kuvattu esimerkkisuoritusmuotona, käyttäen 1 $6 BSA esipesua konsentraeb-torille.
HIT-testiä varten käytettiin Pregnosticon ALL-in * testlvälineistöä. Ensimmäiseksi eritetty aamuvirtsanäyte (0,1 ml), joka ensin suodatettiin läpi Whatman n:o 1 suodatinpaperin, laimennetaan 0,4 ml:11a tislattua vettä ja tulokseksi saatu seos alistetaan immunologisen testireaktion alaiseksi noin kahdeksi tunniksi.
* tavaramerkkejä
16 6 O 9 3 S
AE-HIT-testinä käytetään tunnettua asetonlsaostusmenetelmää, ka. esim. L.Vide Ja C.Gemzell, Acta, Andorcinol., 39« 539 (1962). Täsmällisemmin sanottuna 30 ml suodatettua (Whatman n:o 1 suodatinpaperi) ensimmäistä aamuvirtsaa (pH 5«O lisäämällä 1 $ etikkahappoa) lisättiin 100 mitään kylmää asetonia. Seos pidettiin lämpötilassa 4-10°C yhden tunnin ajan Ja sitten sentrifugoitiin 4000 r/min lämpötilassa 20-25°C kymmenen minuuttia. Pinnalle nouseva kerros poistettiin Ja sakka kuivattiin Ilmavirtauksessa kymmenen minuuttia Ja sitten tyhjökuivauslaitteessa kymmenen minuuttia. Kuivattu sakka liuotettiin 1,23 mitään tislattua vettä. Liuos sentrifugoitiin kuten edellä viisi minuuttia Ja 0,3 ml (ekivalenttinen 20 mitään alkuperäistä virtsaa) pinnalle nousevaa liuosta käytettiin sitten HIT-testiin.
Taulukko II
6 0 9 3 5 17
Raskaana Virtsanäytteet testattu- Tulokset oleva na ennen(-)ja jälkeen Positii- Negatiivinen Epävaraa(+) henkilö (+) odotettua kuukau- vinen(+; (-) mo S tiepälvää (0) UIT | »E-IMT Γ ΙΙί-ΗΠ--- 65 +1 ± 4 +2 - + -i + 3 ± -* +4 + + 5 - + + 6 ± ± + 66 0 - - . + + Γ - + + +2 ± + +3 ± + + 4 ± + +5 + + + + 6 + - +
98 -3 /N
-2 + -I - 4 ei tehty 0 4 + 1 - 4 +2 " 4
+3 " H
+'1 +θ tehty ei tehty +9 + Φ 18
Taulukko II (iatk.)
6 O 9 3 S
Tulokset
Raskaana Virtsanäytteet testattu- , .
oleva ennen (-)ja jälkeen Positii^ Negatiivien Bpävarma(+) henkilö (+) odotettua kuukau- (-) ~ a tispäivää (0) - f f ..... . 1 HIT AF- HI T__UF-HIT_
-ms Γ - Λ - . I
-2 + -I - + o - + -I + 2 ei tehty + 3 + 4 - + 3 ei tehty ei tehty i 6 - + 7 - + 8 + ^ a raskaus myöhensin varmistettu kliinisesti kaikissa tapauksissa.
v Edellä esitetystä vertailevasta tutkimuksesta voidaan päätellä, että tämän keksinnön mukainen menetelmä on yksinkertaisempi ja luotettavampi raskauden toteamiseen kuin edellä mainitut standardimenetelmät. Lisäksi sillä pystytään toteamaan raskaus aikaisemmin kuin näillä standardimenetelmillä, se on herkempi menetelmä.
Eräässä toisessa neljän potilaan ryhmässä raskaus todettiin tämän keksinnön mukaisella menetelmällä toisen ja viidennen päivän välillä odotetun ja poisjääneen kuukautisjakson jälkeen, kun taas raskautta ei tänä aikana voitu näissä henkilöissä todeta edellä mainitulla HIT-menetelmällä. Myöhemmin raskaanaolo vahvistettiin kliinisesti kaikissa neljässä tapauksessa.
Merkittäviä tuloksia saatiinayös tapauksissa, joissa nainen ohitti odotetun kuukautispäivänsä, mutta sai myöhemmin kuukautiset. Näissä tapauksissa negatiivinen testitulos osoittautui olevan 100 $ oikea, mitä myöhemmät kuukautiset osoittivat. Monissa tapauksissa tämän keksinnön mukaisella menetelmällä saatu negatiivinen tulos vapautii potilaan pelosta viivästyneen kuukautisjakson aikana. Näiden jälkimmäisten testien tulokset on esitetty taulukossa III,joka käsittelee naisia,jotka myöhemmin kliinisesti todettiin olevan el-raskaana.
19
Taulukko III 60935 [Virtsanäytteet teetätti päivää ennen (~)
Henkilö tai jälkeen (+) odotetut o tua kuukautispäivää(O)
____UF-HIT
53 -3 -
-2 I
Bnela- 0 aäinen +1 - jakso +2 +3 +4 +5 -5 -4
Toinen -3 jakso -2 O - ' + 1 +8 55 -1 56 +3 57 +30 58 +14 59 0 60 +18 61 +2 +7 62 +9 ..... " ' 11 ""— 1 ‘ ......... I .1 - 65 +4 1 1 ’ .......... - . — I. — . ---- - - Il -- 66 -1 67 -2 69 -6 -5 -4 -3 0 60935
Taulukko III (iatk.) 20 1 Virtsanäytteet testattu päivää ennen (-) tai Henkilö jälkeen (+) odotettua n,n kuukautispäivää(O)
UF-HIT
77 +5 + 12 83 +8 - 100 +2 +3 106 +4 +8 109 +2 110 -3 -2 0 + 1 +2 +3 112 -4 -3 0 + 1 +2 __+3__- 119 +4 60935 21
On havaittu, että esilläolevan keksinnön mukaisessa menetelmässä väärien positiivisten tulosten esiintyminen on olennaisesti vähentynyt. Viimeksimainittua aspektia demonstroi lisää yhdenmukaiset negatiiviset testitulokset, kun tämän keksinnön mukaista menetelmää sovelletaan virtsaan, joka on saatu ryhmistä naisia, joilla on ovulaatio tai jotka ovat postmenopau-eaallsia, on hyvin tunnettua, että virtsanäytteet edellä mainituista kahdesta ryhmästä voivat aiheuttaa väärien positiivisten tulosten esiintymistä analysoitaessa nykyisin käytetyillä raskaustesteillä.
Vaikka edellä esitetyissä tiedoissa on käytetty naispuolista ihmidtä subjektina, voidaan tätä keksintöä käyttää raskauden määrittämiseen kalkissa imettäväisissä, jotka erittävät raskausgonadotropiinia, esimerkiksi hevos-lajeiesa.
Tämän keksinnön mukaisen menetelmän menestyksellisyys, sen kyky todeta hyvin vähäisiä määriä HCG:tä hyvin suurella tarkkuudella, väärien negatiivisten testitulosten merkittävä vähentyminen jm väärien positiivisten testitulosten väheneminen johtuvat sopivan hlenosuodatuskalvon valinnasta. Kalvo sallii inerttien aineiden ja sellaisten aineiden, jotka häiritsevät seuraavaa immunologista testiä, läpikulun suodokeeen samalla kun se pidättää ruumiin nestenäytteessä olevan HCGtn. Tällä tavoin olemme onnistuneet toteamaan raskauden esiintymisen niin varhain kuin 26:tena päivänä normaalia 26 päivän kuukautisjaksoa tarvitsemassa turvautua RIA- tai radloreseptorime-netelinään. Joissakin tapauksissa tämä merkitsee, että raskaus todetaan 10-12 päivää hedelmöitymisen jälkeen kun useimmilla nykyisin käytettävissä olevilla raskaustesteillä ei voida todeta raskautta ennenkuin noin 24-26 päivää hedelmöityksen jälkeen.
Esillä olevan keksinnön mukaisen menetelmän vaihtoehtoisena suoritusmuotona on käyttää edellä kuvattua menetelmää määritettäessä aivolisäke-tai sukurauhastoimintoja, esim. ovulaatiota käyttäen LH-vasta-aineita ja LH-antigeeneja immunologisessa reagentissa HCG-vasta-aineen ja antigeenin sijasta.
Erääseen toiseen vaihtoehtoiseen suoritusmuotoon kuuluu menetelmän käyttäminen määrittämään esterogeenipuutetlloja ihmisissä käyttäen ihmisen gona-dotropiinin vasta-aineita, follikkellastimuloivaa hormoonia (FSH) ja ihmisen menopausaalista gonadotropilnia (BMG).
Asianmukaiset vasta-aineet, esim. anti-LH, ff.R.Mougdal ja H.G.Madva Raj. Pituitary Gonadotrophins, teoksessa "Methods of Hormone Radioimmunoassay", B.M.Jaffe ja H.R.Behrman, Ed., Aoademic Press, Hew Tork, 1974* s. 75) anti-FSH, A.H.M. Sohuurs ja C.J. Tan Wijngaarden, J.Clln, Endocrinol,
Metabol,40,6l9 (1975)4 ja anti-HKG, B.Lunenfeld,et al., J.Clin,Endoorlnol. Metabol., 21,478(1961)ja antigeenit(LH,FSH tai HMG)korvaavat HCG vasta-aineen ja antigeenin aineksina näille vaihtoehtoisille suoritusmuodoille.
Claims (5)
1. Menetelmä virtsa- ja seeruminäytteen konsentroimiseksi ja puhdistamiseksi HCG:n tai sen/ϊ» -alayksikön määrittämiseksi immunologisesta, tunnettu siitä, ettei näyte johdetaan ult-rasuodatusmembräanin läpi, joka on esipesty proteiiniliuoksella ja johon sitoutuvat molekyylit, joiden molekyylipaino on välillä 10 000 ja 50 000, ja että HCG:tä sisältävä retentaatti otetaan talteen.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että käytetään ultrasuodatusmembraania, johon sitoutuvat molekyylit, joiden molekyylipaino on välillä 15 000 ja 35 000.
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että proteiinina on naudan seerumialbumiini, ihmisen seerumialbumiini, r -globuliini, myöglobiini, fibrinogeeni, ihmisen hemoglobiini tai "keyhole limpet" hemosyaniini·.
4. Koelaite, joka on sopiva HCG:n tai tämän/»»-alayksikön toteamiseen virtsasta tai seerumista, tunnettu siitä, että laitteeseen kuuluu: (a) kammio, joka on ylhäältä avoin ja pohjasta suljettu, jonka yläosan ainakin yhtenä seinänä on ultrasuodatuskalvo, joka pystyy selektiivisesti pidättämään gonadotropiinin, ja kaikki muut seinät ovat jäykkää läpäisemätöntä ainetta; (b) kerros absorbenttia, joka pystyy sorboimaan mainitun kalvon lävitse kulkevan virtsan tai seerumin ja on rajakkain mainitun membraanin ulkosivupinnan kanssa ja tehokkaassa kosketuksessa mainittuun kalvoon; (c) kammion alaosa, jonka kaikki seinät ovat läpäisemättömät, pidättämään tietty määrä virtsan tai seerumin konsentraattia, joka sisältää gonadotropiinia; (d) mainitun kammion alapäässä suljettavat ulospäästämis-välineet, ja (e) reagenssisäiliö.,. joka on yhdistetty mainittuun kammioon mainittujen ulospäästämisvälineiden kautta ja sovitettu vastaanottamaan reagenssin gonadotropiinin immunologista toteamista varten,ja välineet siinä olevan reagenssin ja mainitun, gonodotro-piinia sisältävän virtsa- tai seerumikonsentraatin välisen reaktion havaitsemista varten.
5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen laite, tunnettu 3iitä, että siihen on sijoitettu suodatin kammioon vietävän virtsan suodattamista varten. K f
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CA242,214A CA1054515A (en) | 1975-12-17 | 1975-12-17 | Ultrafiltration in pregnancy diagnosis |
CA242214 | 1975-12-17 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FI763601A FI763601A (fi) | 1977-06-18 |
FI60935B FI60935B (fi) | 1981-12-31 |
FI60935C true FI60935C (fi) | 1982-04-13 |
Family
ID=4104796
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FI763601A FI60935C (fi) | 1975-12-17 | 1976-12-15 | Foerfarande foer koncentrering och rening av ett urin- och serumprov foer bestaemning av hcg eller dess beta-underenhet immunologiskt och i foerfarandet anvaendbar anordning |
Country Status (24)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4033723A (fi) |
JP (1) | JPS5276423A (fi) |
AT (1) | AT354639B (fi) |
AU (1) | AU511835B2 (fi) |
BE (1) | BE849555A (fi) |
BR (1) | BR7608467A (fi) |
CA (1) | CA1054515A (fi) |
DE (1) | DE2657089A1 (fi) |
DK (1) | DK516976A (fi) |
ES (1) | ES454276A1 (fi) |
FI (1) | FI60935C (fi) |
FR (1) | FR2335846A1 (fi) |
GB (1) | GB1537537A (fi) |
HK (1) | HK31980A (fi) |
HU (1) | HU175033B (fi) |
IE (1) | IE44238B1 (fi) |
IL (1) | IL50929A (fi) |
IT (1) | IT1067269B (fi) |
MX (1) | MX145110A (fi) |
NL (1) | NL7613962A (fi) |
NZ (1) | NZ182697A (fi) |
PH (1) | PH14125A (fi) |
SE (1) | SE7614183L (fi) |
ZA (1) | ZA766964B (fi) |
Families Citing this family (24)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4123509A (en) * | 1974-12-19 | 1978-10-31 | American Home Products Corporation | Pregnancy test |
US4123224A (en) * | 1975-12-17 | 1978-10-31 | American Home Products Corporation | Diagnostic test device |
JPS5283930A (en) * | 1975-12-25 | 1977-07-13 | Teikoku Hormone Mfg Co Ltd | Filter for urine and body fluid |
FR2366860A1 (fr) * | 1976-10-05 | 1978-05-05 | Rhone Poulenc Ind | Appareil a fibres creuses pour le fractionnement de fluide, utilisable notamment comme rein artificiel |
US4123510A (en) * | 1977-04-11 | 1978-10-31 | American Home Products Corp. (Del.) | Method for the determination of gonadotropins |
JPS53129694A (en) * | 1977-04-19 | 1978-11-11 | Teikoku Hormone Mfg Co Ltd | Filter medium for urine and humor |
US4145293A (en) * | 1977-10-14 | 1979-03-20 | Bio-Molecular Dynamics | Precise cutoff concentrator-dialyzer device |
US4208187A (en) * | 1977-12-19 | 1980-06-17 | American Home Products Corporation | Diagnostic test |
JPS5933228B2 (ja) * | 1978-12-25 | 1984-08-14 | 武田薬品工業株式会社 | 妊娠診断反応用被検液の前処理方法ならびに前処理剤 |
IL56342A (en) * | 1978-12-29 | 1982-05-31 | Zer Tamar | Method and means for determining human chorionic gonadotropin in urine |
IL63855A (en) * | 1981-09-16 | 1984-10-31 | Teva Pharma | Method and kit for detecting pregnancy |
GB8406752D0 (en) * | 1984-03-15 | 1984-04-18 | Unilever Plc | Chemical and clinical tests |
DE3719302C1 (de) * | 1987-06-10 | 1988-12-29 | Hoyer Gmbh & Co | Vorrichtung zur Harnuntersuchung |
US4999163A (en) * | 1987-10-29 | 1991-03-12 | Hygeia Sciences, Inc. | Disposable, pre-packaged device for conducting immunoassay procedures |
US5401467A (en) * | 1993-07-21 | 1995-03-28 | Eastman Kodak Company | Whole blood metering cup |
GB2322192B (en) * | 1997-02-14 | 2001-01-31 | Unilever Plc | Assay devices |
US6165796A (en) * | 1997-11-26 | 2000-12-26 | Beckman Coulter, Inc. | Pipettable ion detector and method |
US6740293B1 (en) | 2001-07-17 | 2004-05-25 | Biotech Atlantic, Inc. | Housing for test strip device and test strip therefor |
US20040072284A1 (en) * | 2002-10-15 | 2004-04-15 | Mccarthy Kevin J. | Critical association concentration assembly |
US20100055730A1 (en) * | 2006-05-05 | 2010-03-04 | Anny Usheva-Simidjiyska | Methods for the Diagnosis and Treatment of Female Infertility Using Molecular Markers |
US20070292969A1 (en) * | 2006-06-15 | 2007-12-20 | Armando Canseco | Pregnancy test device |
US20230173485A1 (en) | 2021-02-28 | 2023-06-08 | Uchenna Nkechi Chukwu | Methods and devices for covid-19 testing using urine samples |
US11921076B1 (en) | 2021-02-28 | 2024-03-05 | Uchenna Chukwu | Methods and devices for COVID-19 testing using urine samples |
USD1023336S1 (en) * | 2023-02-16 | 2024-04-16 | Andon Health Co., Ltd. | Instrument and utensil for medical or laboratory diagnosis |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3873683A (en) * | 1968-12-10 | 1975-03-25 | Princeton Lab Inc | Pregnancy test composition and method |
US3689633A (en) * | 1969-01-13 | 1972-09-05 | Teikoku Hormone Mfg Co Ltd | Preparation of test sample for immunological assay of pregnancy of mares |
JPS549078B1 (fi) * | 1971-02-23 | 1979-04-20 | ||
US3783127A (en) * | 1971-07-02 | 1974-01-01 | M Cook | Combination concentrator-dialyzer device |
US3817379A (en) * | 1972-07-10 | 1974-06-18 | Amicon Corp | Disposable liquid concentrating device |
-
1975
- 1975-12-17 CA CA242,214A patent/CA1054515A/en not_active Expired
- 1975-12-31 US US05/645,860 patent/US4033723A/en not_active Expired - Lifetime
-
1976
- 1976-07-07 JP JP51082447A patent/JPS5276423A/ja active Pending
- 1976-11-17 IL IL50929A patent/IL50929A/xx unknown
- 1976-11-17 DK DK516976A patent/DK516976A/da not_active Application Discontinuation
- 1976-11-22 ZA ZA766964A patent/ZA766964B/xx unknown
- 1976-11-23 NZ NZ182697A patent/NZ182697A/xx unknown
- 1976-11-24 AU AU19940/76A patent/AU511835B2/en not_active Expired
- 1976-11-25 HU HU76AE480A patent/HU175033B/hu unknown
- 1976-12-02 PH PH19187A patent/PH14125A/en unknown
- 1976-12-09 IT IT30219/76A patent/IT1067269B/it active
- 1976-12-14 IE IE2731/76A patent/IE44238B1/en unknown
- 1976-12-15 FI FI763601A patent/FI60935C/fi not_active IP Right Cessation
- 1976-12-16 BR BR7608467A patent/BR7608467A/pt unknown
- 1976-12-16 ES ES454276A patent/ES454276A1/es not_active Expired
- 1976-12-16 GB GB52639/76A patent/GB1537537A/en not_active Expired
- 1976-12-16 DE DE19762657089 patent/DE2657089A1/de not_active Withdrawn
- 1976-12-16 NL NL7613962A patent/NL7613962A/xx not_active Application Discontinuation
- 1976-12-16 MX MX167443A patent/MX145110A/es unknown
- 1976-12-16 FR FR7637965A patent/FR2335846A1/fr active Granted
- 1976-12-16 SE SE7614183A patent/SE7614183L/xx not_active Application Discontinuation
- 1976-12-16 AT AT931476A patent/AT354639B/de not_active IP Right Cessation
- 1976-12-17 BE BE173397A patent/BE849555A/xx unknown
-
1980
- 1980-06-12 HK HK319/80A patent/HK31980A/xx unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
IE44238L (en) | 1977-06-17 |
GB1537537A (en) | 1978-12-29 |
ES454276A1 (es) | 1977-11-16 |
PH14125A (en) | 1981-02-26 |
ZA766964B (en) | 1977-10-26 |
AU1994076A (en) | 1978-06-01 |
AU511835B2 (en) | 1980-09-11 |
FR2335846B1 (fi) | 1981-07-03 |
IL50929A0 (en) | 1977-01-31 |
BR7608467A (pt) | 1977-12-20 |
DK516976A (da) | 1977-06-18 |
ATA931476A (de) | 1979-06-15 |
MX145110A (es) | 1982-01-06 |
IE44238B1 (en) | 1981-09-23 |
FI60935B (fi) | 1981-12-31 |
FI763601A (fi) | 1977-06-18 |
JPS5276423A (en) | 1977-06-27 |
NZ182697A (en) | 1979-07-11 |
DE2657089A1 (de) | 1977-06-23 |
US4033723A (en) | 1977-07-05 |
BE849555A (fr) | 1977-06-17 |
CA1054515A (en) | 1979-05-15 |
AT354639B (de) | 1979-01-25 |
FR2335846A1 (fr) | 1977-07-15 |
HK31980A (en) | 1980-06-20 |
IL50929A (en) | 1980-11-30 |
HU175033B (hu) | 1980-05-28 |
SE7614183L (sv) | 1977-06-18 |
IT1067269B (it) | 1985-03-16 |
NL7613962A (nl) | 1977-06-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
FI60935C (fi) | Foerfarande foer koncentrering och rening av ett urin- och serumprov foer bestaemning av hcg eller dess beta-underenhet immunologiskt och i foerfarandet anvaendbar anordning | |
US4208187A (en) | Diagnostic test | |
US4123224A (en) | Diagnostic test device | |
US7892774B2 (en) | Diagnostic method for determining the susceptibility to delivery and reagent kit for use therefor | |
FI91566B (fi) | Laite solumateriaaliin liittyneen kohdeligandin määrittämiseksi | |
JP2592386B2 (ja) | 胎児膜の破裂を検出する方法およびその方法を利用する試験キット | |
US8431405B2 (en) | Hyperglycosylated hCG detection device | |
JP2002510048A (ja) | 口腔液の一段階検定用採集装置 | |
CN108139410A (zh) | 改进的怀孕测试装置及方法 | |
US8765487B2 (en) | Detection of amniotic fluid in vaginal secretions of pregnant women due to premature rupture of fetal membranes | |
US4123509A (en) | Pregnancy test | |
US4123510A (en) | Method for the determination of gonadotropins | |
CN201087839Y (zh) | 脑钠肽颜色颗粒诊断试纸 | |
JP3304214B2 (ja) | 簡易測定方法及び簡易測定装置 | |
CN202383145U (zh) | 人绒毛膜促性腺激素胶体金定量检测试剂盒 | |
US4138214A (en) | Diagnostic test utilizing human chorionic gonadotropin | |
KR102079738B1 (ko) | 베타 코어 단편 hCG를 표지자로 포함하는 신규 임신 진단 장치 | |
CN211697830U (zh) | 一种促黄体生成素检测试纸及试纸卡 | |
CN105929175A (zh) | 尿液胱抑素c半定量检测胶体金试纸 | |
US20030124618A1 (en) | Device for analysing analyte compounds and use hereof | |
US20020098532A1 (en) | One step test for abortion safety based on detection of 2 IU/ml or more of gonadtropin in a urine sample | |
CN213240182U (zh) | 一种用于检测双份生物样本来源同一性的快速检测试纸 | |
IE44239B1 (en) | Method for detecting physiological conditions,especially pregnancy | |
Banik et al. | A simple and sensitive nonradioactive method for the detection of urinary human chorionic gonadotropin and diagnosis of early human pregnancy. II. Single-unit test | |
WO2003048771A2 (en) | Device for analysing analyte compounds and use hereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM | Patent lapsed |
Owner name: AMERICAN HOME PRODUCTS CORPORATION |