FI59787C - Foerfarande foer framstaellning av biologiskt aktiva 4-cyklopropylmetylenoxi-3-klorfenylaettiksyra och dess farmaceutiskt anvaendbara salter - Google Patents

Description

E5F*I rB] (^KUULUTUSJULKAISU γλπλπ l J u 'utläggningsskmft 0 7/87 ^ fa tent m^ddelat ^ ’ (51) Kv.ik.Wa.3 C 07 C 59/56 SUOMI—FIN LAND (21) 750056 (22) Hakamlipitvl — AneBknlnpdtg 09.01.75 ' * (23) Alkupilvi—Glltigh«t*4m 09.01.75 (11) Tullut lulklMkal — BIMt affuntllg 15.07.75

Patent· och ragiaterstyralaan * ^ Anri*·» ut££Tod»^!irtAM^ub«ic«rad 30.o6.8l (32)(33)(31) Fjnrduttjr tudkww— Bugifd priorttat ^ *01*

Italia-Italien(lT) 19366 A/71* (71) I-S-F Societa per Azioni, Via Leonardo da Vinci, 1, 20090 Trezzano S/N, Milano, Italia-rtalien(lT) (72) Giorgio Pifferi, Milano, Italia-Italien(lT) (7*0 Oy Borenius & C:o At (5^) Menetelmä biologisesti aktiivisen U-syklopropyylimetyleeni-oksi-3- kl00rifenyylietikkahapon ja sen farmaseuttisesti käyttökelpoisten suolojen valmistamiseksi - Förfarande för framställning av biologiskt aktiva U-cyklopropylmetylenoxi-3~klorfenylättiksyra och dess farma-ceutiskt användbara salter

Keksintö koskee menetelmää biologisesti aktiivisen fenyylietikkahapon johdannaisen ja sen suolan valmistamiseksi. Tarkemmin sanottuna aikaansaadaan keksinnön avulla menetelmä kaavan ch2 C1\_

I CH -ch2-o -<f >ch2-cooh (I

CH^ mukaisen 4-syklopropyylimetyleenioksi-3-kloorifenyylietikkahapon ja sen farmaseuttiseen käyttöön sopivien epäorgaanisten ja orgaanisten suolojen valmistamiseksi. Näillä yhdisteillä on hyvin kiinnostavia tulehdus-, kuume- ja kipulääkkeen ominaisuuksia.

Esimerkiksi GB-patenttijulkaisusta 1.174.535 tunnetaan fenyylietikkahapon johdannaisia, joilla on.laadultaan samanlainen biologisen aktiivisuuden muoto kuin keksinnön mukaisella uudella yhdisteellä, 4-syklopropyylimetyleenioksi-3-kloorifenyyliatikkahapolla. Kuitenkin niihin verrattuna uudelle yhdisteellä ei ole vain parempi kemiallinen stabiilisuus vaan myös huomattavasti suurempi biologinen aktiivisuus ja pysyvästi korkeampi terapeuttinen indeksi.

2 59787

Keksinnön mukainen uusi yhdiste, 4-syklopropyylimetyleenioksi-3-kloorifenyylietikkahappo, voidaan valmistaa reagoittamalla keskenään 3- kloori-H-hydroksifenyylietikkahapon alempialkyyliesteriä ja syklo-propyylimetyleenihalogenidia kohotetussa lämpötilassa ja vedettömässä tilassa, mitä seuraa saadun esterin saippuoiminen. Menetelmällä saadaan suuria saantoja ja saatu 4-syklopropyylimetyleenioksi-3-kloorifenyylietikkahappo on kemiallisesti pysyvä kiteinen aine.

Sanonta "alempi alkyyli" tarkoittaa tyydytettyä suoraketjuista radikaalia, jossa hiilitomien määrä on korkeintaan 3.

4- syklopropyylimetyleenioksi-3-kloorifenyylietikkahapon suoloihin kuuluvat esim. suolat alkali- ja maa-alkalimetallien, kuten natriumin, kaliumin, kalsiumin ja magnesiumin kanssa, ammoniumsuola ja kupari-suola samoin kuin myrkyttömien orgaanisten emästen suolat, esim. emäksisten aminohappojen, kuten ornitiinin, lysiinin, arginiinin ja histi-diinin kanssa.

Seuraavassa esimerkki keksinnön valaisemiseksi.

Esimerkki

Seosta, jossa on 10,6 g metyyli-3-kloori-4-hydroksifenyyliasetaattia, 13,5 g syklopropyylimetyleenibromidia ja 13,8 g vedetöntä kaliumkarbonaattia 200 ml:ssa asetonia, lämmitetään palautusjäähdyttimen alla sekoitettuna 20 tuntia. Sitten poistetaan liuotin tyhjötislauksen avulla vesihauteella ja jäännös otetaan 60 mitään tislattua vettä ja uutetaan kahdesti dietyylieetterillä. Yhdistetyt eetteriuutteet pestään kylmällä, laimealla natriumhydroksidin vesiliuoksella ja vedellä ja kuivataan lopuksi vedettömällä magnesiumsulfaatilla.

Suodatuksen ja liuottimen haihdutuksen jälkeen saadaan 12,7 g metyyli- 4-syklopropyylimetyleenioksi-3-kloorifenyyliasetaattia oljenkeltaisena öljynä. Näin saatu yhdiste lisätään liuokseen, jossa on 27,5 ml etanolia ja 27,5 ml 2N natriumhydroksidin vesiliuosta, ja keitetään 2 tuntia, minkä jälkeen reaktioseos haihdutetaan tyhjössä kuiviin, jäännös liuotetaan tislattuun veteen, jäähdytetään ja 50%:ista rikkihappoa lisätään siihen kunnes se todetaan kongo-punaisen avulla happamaksi.

3 59787

Saatua valkoista sakkaa uutetaan kahdesti dietyylieetterillä ja yhdistetyt eetteriuutteet pestään vedellä ja kuivataan vedettömän magnesiumsulfaatin päällä. Suodatuksen jälkeen haihdutetaan liuotin pois ja jäännös kiteytetään sykloheksaanista, jolloin saadaan 11,4 g 4-syklopropyylimetyleenioksi-3-kloorifenyylietikkahappoa valkeana kiteisenä aineena, joka sulaa 105...106 °C:ssa.

Kuparisuola. - 7,2 g 4-syklopropyylimetyleenioksi-3-kloorifenyyli-etikkahappoa liuotetaan 30 ml:aan natriumbikarbonaattiliuosta. Tähän liuokseen lisätään tipoittain ja sekoittamalla kupariase-taattiliuosta. Seosta sekoitetaan puoli tuntia, kiinteä aine otetaan suodattamalla talteen, pestään lämpimällä vedellä neutraaliin reaktioon ja kuivataan vesihauteella vakiopainoon. Saadaan 4,5 g kupari-4-syklopropyylimetyleenioksi-3-kloorifenyyliasetaat-tia, joka sulaa 198...200 °C:ssa.

DL-lysiinisuola. - 2,4 g 4-syklopropyylimetyleenioksi-3-kloori- fenyylietikkahappoa liuotetaan 20 ml:aan absoluuttista alkoholia. Tähän liuokseen lisätään 3 g 50%:ista DL-lysiinin vesiliuosta. Seos saa seistä puoli tuntia, minkä jälkeen hyytelömäinen valkea sakka suodatetaan ja kuivataan tyhjössä. Saadaan 3,80 g DL-lysiini-4-syklopropyylimetyleenioksi-3-kloorifenyyliasetaattia, joka 95%:isesta etyylialkoholista kiteytettynä sulaa 175-6 °C:ssa.

4-syklopropyylimetyleenioksi-3-kloorifenyylietikkahapolla ja sen suoloilla on tulehdus-, kuume- ja kipulääkevaikutus samoin kuin alhainen myrkyllisyys. Näitä lääkevaikutuksia on arvioitu vertailevalla tutkimuksella, jossa keksinnön mukaisen yhdisteen ja sen kupari- ja DL-lysiinisuolojen ohella, joiden annostus on ilmoitettu happona, kohteena on ollut fenyylibutatsoni (4-butyyli-1,2-difenyyli- 3,5-dioksopyratsolidiini), joka on hyvin tunnettu tulehdus-, kuume-ja kipulääkkeenä, sekä 4-allyylioksi-3-kloorifenyylietikkahappo, joka on GB-patenttijulkaisusta 1.174.535 tunnettu edullinen yhdiste ja rakenteellisesti hyvin samanlainen kuin keksinnön mukainen uusi yhdiste.

Teho kipulääkkeenä Tätä arvosteltiin seuraavilla menetelmillä: 59787 a) Randell ja Selitto

Mitattiin Hg-mm:einä paine, joka tarvittiin aiheuttamaan kipureaktio rotan käpälään, joka oli edeltäkäsin tehty pöhöttyneeksi ruiskuttamalla jalkapohjaan 0,1 ml hiivan 20%:ista vesiliuosta. Kipukynnys mitattiin 30 minuuttia ennen ja 30, 60, 90 ja 120 jälkeen tutkittavien aineiden antamista.

Käytettiin kymmentä 170...190 g painavaa wistar-rottaurosta kullakin annostustasolla ja määriteltiin kutakin annosta vastaavat keskimääräiset arvot.

Kipukynnyksen prosenttista kasvua verrattuna perusarvoihin pidetään kipulääketehon osoittimena. Saadut tulokset on esitetty seuraavassa taulukossa I.

5 59787

Kipukynnyksen prosenttista ka stub verrattuna perusarvoihin pidetään kipu-lääketehon o soittimena« Saadut tulokset on esitetty seuraajassa taulukossa I.

•rt J a •rt o irt · ►»f» CO CM *3 CO V rrt X CO V o » OS rt d -rt rt rt V 3 Pm i i i I -rt -rt X 4 rt ® >, j ^4* a -rt

rt X O ® -P

0 O, rt V -p

rt O O -rt <0 »CO O V

•rtMdh® oo o no e o, ai o -P irt «h X O r-t O « H H rt ® 1 44 -P 44 <0 J X ® I -rt O S! n <-t

Il h o 44 * I X ft >, a -rt a p, -rt * 4) a I H Λ Ή Λ

ν' X O -rt O

I X .rt h 44 •rt Oi 3 O 4C t» rt OI Cp h O ® O rt «CM <p rt ® M ® rt -P r-t irt SP* P< irt 44 4) 3 O X | -rt 3 fcd Irt -P « Irt o a ...................— -----

I I

a o i i « i « U X -rt V 44 a p, -p » -rt -rt •rt O Φ 44 P -P o •p rt g O O » p,

-p 44 rt rt O -rt P. t- ΙΟ (O V* O O

M C XH flrtrt « N o f" f n 00 ® ® i>» ® 44 ΧΛ Irt irt pH Irt o * ] X « | >, e 44 O V P* pH n a 44 3 S.--

H I

3d » * ® Il EH ® -rt -rt 44 * rt

X 44 X O

d o o.

d h a a X rt C β

44 XV A

3 X -rt OB (· o n 4) h w

Oi rt h 4 CO OS rt lO es •rt rt O 44 M β O -rt

I rt -P

V 44 ® • · · ® P« P< P< •Η · · · a eh rt rt -rt e o e • ta i < aw io o o >o o o «4 B CM lO o CM ie o rt rt 6 59787 b) Siegmund

Arvosteltiin vastavaikutusta fenyylibentsokinonin avulla aikaasaatuun vatsanpingotukseen. 19...21 g painaville sveitsiläisille uroshiirille annettiin suun kautta tutkittavia yhdisteitä 30 minuuttia ennen kuin vatsakalvonsisäisesti annettiin 0,25 ml fenyylibentsokinonia 0,02%: ista liuosta. Eläimiä tarkkailtiin 30 minuutin ajan fenyylibentso-kinonilla käsittelyn jälkeen ja kunkin eläimen vatsanpingotusten määrä laskettiin. Kymmentä hiirtä käsiteltiin kullakin annostus-tasolla ja vastaavat keskiarvot laskettiin. Kipuja lievittävän tehon osoittimeksi otettiin koeaineilla käsiteltyjen eläinten vatsanpingo-tusten määrän prosenttinen alentuminen verrattuna vain vettä saaneisiin kontrollieläimiin. Saadut tulokset on esitetty seuraavassa taulukossa 2.

7 59787

•H

1 fl

Ή O

r* m ^ «j to to co a -p «o e» ® a

Ph a

I I I

I ·Η -rt ►» fl ·ψ r-4 « ►, v i >»λ a -h a -m >t o v +» •H C BcH H -(j β -h o a -h a « -rt H Φ H β

g β p, φ o ·Ρ O O O

Φ >» O pH O ® CO OS O

pH pH pH P·* pH β pH

a I Ji -p « M >s « I «rt g fi « E n h a •marnmmmmmmmmmm .mi

“H I

-P I | ►, O

•P M ® 1 fe» Oi a >» e -h a o.

® -rt « Φ CO

Λ | fH M ·" Λ O rf ►> o -H e U I h Ä _ _

A -H A, O O JbO © pH OS

ft O Φ O -rt SO ® OS

G β ft ® pH -P

:«5 O, ftH Λ ® OI H 3 O 1 -rt

:« i4H P 05H

O :«J

.M g .......-1

M B II

a m o i i « i -H a H >>·Η *H Λ 3 pH P.P e H h

β O 4) ^ ft -P O

EH g pH Β o O Φ A H h 00 0) M ·Η ·Η O ·Η P« rt p Os

H* ►»Ή 3 pH pH (S

« · ►» ® M >»Λ a i ►> ® i >» ®

-P 'i· O, pH CO 0 M

o

W II I .IMMI· I I

fl

•H I

Ai CO

I I

•rt -rt « pH

M h ° 0 X o, •rt a fl,

pH φ <0 t- 00 «O

>>*H JS OI Λ OS

►»•rt * pH ft M pH O JO β O -rt

1 pH -P

Hf M Φ _ Φ •rt a a a EH o o o a ta fl >o O o

OM OI SO O

e pH

8 59787

Tulehdusta vastustava vaikutus Tämä määritettiin Winterin menetelmällä, joka mittaa carrageenin avulla aikaansaatua pöhötystä vastustavan vaikutuksen.

170...190 g painavia urosrottia käsiteltiin tutkittavilla yhdisteillä ja 60 minuutin kuluttua ruiskutettiin 0,05 ml carrageeninin 1%:ista vesiliuosta kunkin eläimen takajalan pohjaan. Käsitellyn käpälän tilavuus määritettiin heti ruiskutuksen jälkeen sekä 3 tuntia myöhemmin .

Kymmentä eläintä käsiteltiin kullakin annostustasolla. Tulehdusta vastustavan tehon indeksiä esittää käsiteltyjen eläinten käpälien tilavuuden kasvun ero verrattuna kontrolliin. Saadut tulokset ilmaistuina prosenttisena pöhöttymän tilavuuden kasvun vähenemisenä verrattuna kontrolliin ja laskettuna kunkin annoksen aiheuttamasta keskiarvosta on esitetty seuraavassa taulukossa 3.

9 59787

H

) a •H O pH · ^ a oeooiiooao

fl -μ CM ΙΟ CM

V fl

Ph >o

I I I

I -H -H ►»

H* pH

I e -H

•H ►» O 0) 4» a a ή vt -h H O e -H «e

H h « h « 00^· pH pH

® A © o -P 00(0 -M* 00 V, O pH O »

H H H CO

i X M m

H >?# I H

Q m g CT pH

1 I ►> e .M · I ft ►* E -H fl O,

• -H * ® CO

>,OH « CM pH pH 00 pH

I >>-H UM « 10 (O CT t- •H ft fl O JM h O t OH « h « H (> CV A pH M ®

a o >,1 H

hi Ή -P CT pH

•H | J

P o 1 | © |

H» h X-H Vt M

fl A -P -H -Pt

CT Φ O © P4 h -P O

« pH E o O © A

OO PJ -pt -Pt O -H A to f- «O pH pH to

P4 hl pH fl pH pH a pH CT to CO CT CO

MP- ® >> * M >>M

P · I h # I >» ©

pH -H H* A pH CT fl M

g .§ -—-- EH -P 1

© CT

© I I

•H *H

fl * pH

• M ►> O

® O >, ft X -Pt fl ft >, pH © © -P htVd :© ►»•pt «

J3 pH Vt >M

:© pH o PC O O K5 f- CO Ή*

ft CO O *fH pH CM tO pH CT

I pH -p ΗΓ PJ « s · · · · •H ft A ft ft EH ··*··

•H H H H O O

« M

fl < fl M ·

«MS CM 10 lO O O O

CM IO pH 10 1 o 59787

Kuumetta vastustava vaikutus Tätä arvioitiin kahdentyyppisen korkean kuumeen suhteen.

Kuumeen aiheuttaja: a) bactopeptoni 1 ml bactopeptonin 5%:ista vesiliuosta, jota oli haudottu 18 tuntia 37 °C:n lämmössä, ruiskutettiin ihonalaisesti 170...190 g painaviin wistar-rottauroksiin. M- tuntia kuumeenaiheuttajalla käsittelyn jälkeen eläimet jaettiin 10 eläimen ryhmiin ja niille annettiin suun kautta tutkittavia aineita. Lämpötila mitattiin peräsuolesta kokeen alussa, 4 tuntia pyrogeenin ruiskutuksen jälkeen ja sitten 1, 2 ja 3 tuntia testiaineen antamisen jälkeen. Lämpötilaero käsiteltyjen ja kontrolli-eläimien välillä osoittaa kuumetta alentavan tehon.

b) hiiva

Albiinokaneihin ruiskutettiin suonensisäisesti 1 ml/kg 0,2%:ista hiivan vesisuspensiota. Peräsuolen lämpötila mitattiin kokeen alussa ja 60 minuuttia pyrogeenilla käsittelyn jälkeen. Heti lämpötilan mittaamisen jälkeen annettiin testattavia yhdisteitä eläimille suun kautta ja niiden peräsuolen lämpötila mitattiin sitten 30, 60, 120 ja 180 minuutin kuluttua. Kunkin annostason mittauksessa käytettiin kymmentä eläintä.

Käsiteltyjen eläinten ja kontrollieläinten lämpötilojen erotus on kuumetta alentavan tehon osoittimena. Nämä kahdella menetelmällä saadut tulokset kuumetta alentavan tehon määrityksestä on esitetty seuraavissa taulukoissa H ja 5 kullakin annoksella saatujen tehojen keskiarvoina.

59787 11 i v 0 ·Η J< «

:«6 fl M

p :«d A K) t> h e h t- co ao r- ® n a « p · ·»· ··· ·· · * · · · earn ao oo oo t- os t- t- «o «o t- co oooor- fl p co n n n eo co co eo co coco n n n

WH 0 Φ CO rH P

0

Jd I :«J :® +3 fl „M « p ►, cm t- rj< io non r- cm oo oo a « fl c H · ·· ··· ·· ·· · · · aa® o» oo oo r~ ® ao p- t- p. oo f- oo ao p- 0 P p 00 CO CO CO cococo coco coco cococo

P P P

0 P

Mr-·» 1 I :<d 0 :« P j* j* oo ►, o cm co p· r- r- co «-too co co«-t«-t fl « i—4 · ··« ·»· · ·· · · · rt o « co oo r- t- ao p- t- ao t- t» f» ooooao §-p -p eo eo co co eo eo co eo eo coco cococo p -P 0 0 P P rH a 0 - — ----- --- .......----------------- -........— - ...........

ft

6‘ M

O' Ο O.JA

oce 0M to n o co to ίο toto »o »o η n O

JC rH « B HCMO rH CM rH CM rH CM H CM O

Jd ft rH

0 -P .. ........... .......... . - -- ------ ' —

0 0 ft I P

«0 0« I I -p O I -p

Eh :0 P OO ] !>* -P h ¢0 P

rH P O 0 ►> I k · Ale 0 rH 0 P P C 0 | « © p «0

fl a Jd «0 O h 0 o CO P rH β P

v Jd I Λ 0O0 PI® Λ Λ # p rH CO « ft Ο <0 0·«Η « !>> O ® 0

O 0 | Jfl HH J Ο ® « > P β O

0 0 -Η,Μ ►> Λ «H Jfl P 10 P

a 0 CH >> 1 Jd JO O rH Tt< ® rH P

* J4 P 0«3 >%P ►> I « X « P PO® O I ft I s k HH k p φ β p p p P ft P I « d fl k fl 9

0 ► rH rH p 0«« P -® Φ Ή p φ P

a π >i p o rt ή I h v p © vt ft P O >»►, H OH p ^.P I g ft 1-t

P P rH fl JC H k PPP >>P P

•H P rH ® >i 0 « ® O rH rH O

Jd 0 ® «Η Φ 0 0 S O I >t O 0 P O I ft I « Φ AftH ») kH «

0 Λ·ψρ M· HP Jd P JC Q 0 Jd P

P _ i ______ ___ I 0 « p o rH ® fl ®

•H p ® « fl co ρ- H· o t- H· eo 0 oo ao oo CO p- CM

P P Φ P ® · ··· ·« ·· ·· ··· :o s be β φ ao ao oo 0 oo ao ao oo oo ao ao ao go a 00 β co co eo oo eo co co coco coco cococo

0 P P P rH

:«d ►» 0 :«

P 'M* 0 « -r-J

I I

:o

00« t- to «O t CM H" to COCO Η* ® H 00 rH

p β H · ··· ··· ·· ·· ···

Φ :3 -h CO «ΦΝ t© CO CO coco COCO POP

0p p co eo co co co co eo coco coco cococo 12 59787 0 :4

P P

P m 2 >» 9 « ρ to m to cmciiio dd« ρ o cm o n o Ρ Ρ P · · »·· E Ρ P O O © © d ©

Op 4· 4· « ^ « to op* 00 0 :0 ΗΛΛ O :4 p P P « 0 ►» 9 4 P CO COO 43000

00« CO O n 43 4< CM

PPP ·· ··· epp o oo> o a> o>

0 P 4* 4* CO 4* CO CO

Op· <N 0 :4 P Λ Ä :4

0 P

p · P ►»

0 4 P

00« CO CO 43 43043 a P P 43 POO P A e pPP · ·· · · · £i 0 p ο oo> ο o> a

Ρ» p p CO PCOCO

O 0 :4 ΟϋΛ :4

0 P

p « P >>

0 « P

« 00« P 043 t*· 10 43

0 CPP CO COCO HOO

P pPP · ·· ··· · e 0 p 2 22 222 43 O O 9 :4

eo M

o a P__--

3 P

ρ :o «tr 9 ft or» 043 43043

4 E C \ POVI P CM

E-* :« β u p «5 O I ..-..1.11 ..... — « ||

P O p CO

0 9 I I ρ I I

9 9 P !>> O ►> P P

:4 P^0O4O,JCU,O

U 4 ΡΟφ«ΟΟ^Ρ< ® > ρ Ρ «Η 43 μ p 0 0, B« β Ρ Ρ P 4 0,004 Ρ* O >> μ J4 Ο « P ,0 PP h rSOjd P«P 4 pp P POP A)H h Λ0 0 PPP X ►> ο Λ

Pa o « JC ® «pop ojc λ IIP I ® ρ ρ p 4f top ö' Β Λ « « I 0 1 « ρ Φ « Ρ M E « p 9 O a p 0 μ Ρ p r- co© 43 00© P 9 >> 0 :4 © P© 4« CO p :o *h Cl, as ·η · · · · · ·

Co B © © © ©©O

a «00 CO 41 4* CO CO 4* :4 Ο Ρ Ρ « Ρ © P 0 4 _______

A :<3 ©043 H t- lO

aa,* n a to oo p 43 μ g ρ · ·· ·· φ:4Ρ © ©© 00 © © α,ρ ρ « © co « « w