FI120358B - Isolerade nukleotidsekvenser och cykloheximidresistenta proteiner - Google Patents

Isolerade nukleotidsekvenser och cykloheximidresistenta proteiner Download PDF

Info

Publication number
FI120358B
FI120358B FI940036A FI940036A FI120358B FI 120358 B FI120358 B FI 120358B FI 940036 A FI940036 A FI 940036A FI 940036 A FI940036 A FI 940036A FI 120358 B FI120358 B FI 120358B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
sequence
uuu
uhu
protein
resistance
Prior art date
Application number
FI940036A
Other languages
English (en)
Finnish (fi)
Other versions
FI940036A0 (sv
FI940036A (sv
Inventor
Pierre Dehoux
Julian Davies
Original Assignee
Pasteur Institut
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pasteur Institut filed Critical Pasteur Institut
Publication of FI940036A0 publication Critical patent/FI940036A0/sv
Publication of FI940036A publication Critical patent/FI940036A/sv
Application granted granted Critical
Publication of FI120358B publication Critical patent/FI120358B/sv

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/37Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from fungi
    • C07K14/39Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from fungi from yeasts

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Macromolecular Compounds Obtained By Forming Nitrogen-Containing Linkages In General (AREA)
  • Inks, Pencil-Leads, Or Crayons (AREA)
  • Photoreceptors In Electrophotography (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Claims (21)

1. En isolerad K. lactis nukleinsyrasekvens med ca. 5.2 kb och vilken i K. lactis och S. cerevisiae 5 förmär ästadkomma resistens mot cykloheximid, vilken förekommer i en halt over 1 mg/ml, och ytterligare, vilken innehäller restriktionsställena: Sau3A: 0, StuI: + 300 bp, PvuII: +600 bp, BglHI: +900 bp, BstXI; +1200 bp, PvuII: +2300 bp, PstI: +2400 bp, PstI: +3000 bp,
2. En 5.2 kb nukleinsyrasekvens enligt patent-krav 1, vilken innehäller en nukleotidsekvens I: Sekvens I 15 AT GGTTAACGTT CCAAAGACCA GAAAGACTTA CTCTAAGGGT AAGGAGTGCC GTAAGCACGC CCAACACAAG GTTACCCAAT ACAAGGCTGG TAAGGCTTCC TTGTACGCTC AAGGTAAGAG AAGATATGAC CGTAAACAAT CTGGTTTCGG TGGTCAAACC AAGCAAATTT TCCACAAGAA AGCTAAGACT ACCAAGAAGG TCGTTTTGAG ATTGGAATGT ATGTCCTGTA AGACCAAGAC CCAATTGGCT TTGAAGAGAT GTAAGCACTT CGAATTGGGT GGTGAAAAGA AGCAAAAGGG TCAAGCTTTG CAATTCTGA eller vilken hybridiseras med en för sekvensen I komple-mentär sekvens under mycket svära förhällanden (0.1 x SSC, 0.1 % SDS, 65 °C), och i K. lactis förmär ästadkomma en resistens mot en cykloheximidhalt over 100 pg/ml, 20 och fördelaktigt over 1 mg/ml.
3. S 5 u «· - a c 3 3 £ 3 O' * ® £, »S 5 U-« ^4«n O' *"* »HO» O' *-« ϋΓ2 II: *%„ *%. »“♦ Γ» ^ >, h O* ® m''·». >» ·£ f? *j iip* jz s ;s o>s "3.S «« 0. £ 3 .2 S -g 5 »9 0. ** Λ n « >* 5, i? O' * ^ *n l·, u »-* * w *” S ·% o (0 *J ® ^ , -» c sft O' ^ £ J5 ,3 », »>» % £ o. o* -♦ * 0 « u « * 5, 5 >. jC •'ί Jj1 rv Ο ·~* O' y ? £ r « w JS O 'Z g. > * M -« o- -4 W CU w «J 3 Λ >, M JC « > * *» 10 ^ G w u ϋ ^ : s ϊ ä · · --4 c O’ «* C ^ £
3. En 5.2 kb nukleinsyrasekvens enligt patent-krav 1 eller 2, vilken innehäller en nukleotidsekvens II: ooooooooo ("•»(-sQeooooooooooooieB'S'Ovoc'iaDwo nNfflffQiflNivOiNevoeooHNNnnem Sr-trHfMfnfn'TVVnVO'Cr-r-eCNmi-ir-lr-lr-tr-lr-tr-IrHr-l 205h<<<U<<UU0OOHH<0<H0OUU0 VeHrii!coHUHUHOOHH0<HO0UU-UH<H0 Sc<H < 00HUH<<S<O< H~ <- U<H<0U0H “mcjU0<UHH<0HUO<<-H-O<UUH0H..O< OOOOOU<UHO<2<OOH<OHOH<OHO <<OOOU0HHh2oUHHHH<UHOHH< U «moäUUH0U0H<0<<OU<<0*£<O00|“' S«£UH<OHHH<<HHHO00h2hHH0O<H M<HO<UUH<UH<<UHO0HH0HHU0O u<<uhoh<<<h<<hhhhh<h u y h h < MM<<UH0<UH<0UHHHH<<<<0HHO — MHO<UUUOOUU<<<HH<HOUUOHHy MMOHU<H0<<<<OH<<<O<<<<UH< uhooohuo<u<o<<h<ooho<<u0< <UHOHUUUOHUU<U0H<H<U<OHOH <HHUUUHH<H<UH<<0O02HO<UHO o<UH0H0UHUH<<HUU<<<0<<HH0H Sohohoho ^<ϋϋϋΗΗ5<ϋϋ<υυ<<ϋ< <<HOUO0OHHHH<H<OHHO<U<<<O 52mmhHOUHH0OH<UOOU<<<UO<< 5 5 5 5 UH<U<HHOH<<<U<<HOU<UO — 22<OHO<HH<<HO<<o<<oy<o2<< mm<hoohu<hh<uo2o2o<<<<<<< M<<HOHO0<O0HH0<HUO<H<HHO0 S§§§2BS8.äa8ssscii8Ssac8esac sst5S88sgss8Si;y5gassgi;ssaBB BSSgg§§2SgicSi3SaKtSC8S838 <UU<UHOH<<<HHyOH0<y<<<<<H _c_iMHHHH0u2hU<<<<U<<<H<OH<H MOUOU<O0 OHH0<<2HHHH<H<<H< mHHUUUOHHU0O<O0OO<<<H<Uo2 U<<OHOHUHH<H0OHOHOHOO. 0<00 oo<hho0hhhohh<ouo<u<<u2<o OOU<HU<<UH<H<<U0<O<y<OyO<U <hhu<h0O<h<h<2h<hhhh2oooo OHH<0<0u2h-<h2<02h000H<<<< H0<<<u0U00uoo<<H<<oooy222 — Hh2hU< H 0H<H0HOO<<O<<HOH00 St)U<<U0HHH<H0<HOHH0<H<0<U O<H<<<UUO<00<0H0HO00H<0O< <0H<H<<0UH<<<HH<O<HH<H<O0 0H0<OO0H<00OU<<HHOO<20<H< et> 0H0<O0HOO<HO<OUH<O0HOOH< 2h000O0HUOHU0<OH<HH00HUHHH 0HO0UHHH<<<HHHHO0O<H00OH0 0HHHHHOO<H2H0<0HH0HOHH0<H 2OH0HU0<0<U<<<<H<U<0<0O<O —-0HHHHH<UHHH0H00<H<0<H<<<y mMHOUO<HH<U<HH<OU2<<<0HOH M0<CH<HHH<0<0H00OUOUH00000 U800UUUU0<200<0<UHH<H<H<H OOHUHH0O0HHH<000H0H<<<H<< «ΝβΓθΦΝθνΟ«ΜΝβνΟ«ΝΙθνΟβΝΟν IjZjrNjHifn^^yinvc^r-r-cDcricrsoo^-trNfsinn*!· i—| t «* OOOOOOOOOOOOOOOOOOOO OOfS δίΝβϊτθνθΟΙβ>*Γ©\£>ίΜ®«Γ·θνθ«Ν®νθν0£ν ΗΗΗΗΗΗΗΗΜίΝ(ΜΝΓΝ(ΜΝΝΝΝΝΝ!\ΝΝ HUH<HHU<H UOOO<O<UOO<U0 o *£»£<U000HU0H0U<H<0<H ® nniHUUl3HUUUU<iHUU<<<U5W R^h<huu<u<h<oho<uuoo<o ^£oUH<HUHUHOO<UUUHOOUU £S88hh*<u§u<<0o2ohuhou ^-»•tiir6-iri^t0ÄCJ<O<<HUUHO<<U Su5<<<Su§hS<SS<ö<U<}5<< O<<OUHU<O<OHU<U<OUUOUU HUU<<<U<HHUHOy<0<<yHOU o hhuuhuouhuuohhhochocuo m r . f . t—I f Λ f»|fffc-t*£H<HH<0<H<<0<<0 H<U<OHH<OHHOH<yOU<OOr-jO u<hoooh<uuhoh<o<oo<<oo <U<HO<HUO<UOHyyyOO<<<U H<HHHU<<OOU<<<H<<<<5$S2 HHHHU<<H<<UO<Uyyy<OU<< <HH<<<UH<UO<UUUU<UH<UU U<U<OHHHUHHUH<UOOHU<U< © <H<HO<HH<<<H<UUU<U<U<H ^ UOH<<HHO<<U<2UHUUU<HOU H<<HH<HHUO<OHH<U<<<UHH O<HU0<0HHU<0<U<H<UU0HH £ho<uhhuoh<<<<u<uh<<<o - <HHH<OH<<<OU<U<<<<UUUH <UHUH<<<UHO<UOHHUU<OUU UH<H<H<UH<<<O<<O<H<<<< f*t-ir»s-«^*f-i<HHOUUOOHHHOUUOU © HHli<So3<Ho2«SuOHOyOOfHU n HHOH<UH<<H<<OHOHO<<<UH ^tfUuloHUCOOOUHCOHUOHCO O<H<UHUHUU<HHHOU<U<UOO - <H<H<<H<<<U<U<UUOUUH<U <HH<HHHUOHHHU<HH<HOO<U UH<HH<<<<OH<<OHOOH<<OOH HHUHHUU<OHHH<H<<HUUU<UO 8<hShSh£hhS£8SoSoouu< *f-2<£H<O<UH0UUH<H<0<00H<H <uSh<ou<ou<u<uuuh<<<huu_ 5iSSS<Sh<<o2uu8SoSuohhhu SBSSSSHiSSSSööSggjfcogog <HHO<OHOHUUUUO<OUUO<OHH <<<H<<HOO<HH<HUH<O<<HHHO <U<HHO<HUOUOUO<HUyO<y<< <UUU<OU<<OHHUHHHHH<O<OU <H<UHU<H<U0U<<UH0<0<HHH 0HUHH0HHHHHU0H<<HH<<5<0 HOHHOH<HUHUUHHU<<HUy<00 t3HHU<UH<<UHOUHHU<H<<H<< 0|hHHOUO<2<H<HOHHO<UO<UO OtfNOD^OeNtDVOtfNCtMrOtfNOVOtfN inin'OvOHeeaaiOxOHiHCNCMnv^'inu^vor-H® eller vilken hybridiseras med en för sekvensen II kom-plementär sekvens under mycket svära förhällanden (0.1 x SSC, 0.1 % SDS, 65 °C), och i K. lactis förmär ästadkom-ma en resistens mot en cykloheximidhalt over 100 pg/ml, 5 och fördelaktigt over 1 mg/ml.
4. Nukleinsyrasekvens enligt patentkrav 1 eller 2, vilken innehäller en nukleotidsekvens, vilken är belägen i sekvensen II: ooooooooo ΩΩΩΩΟΟΟΟΟΟΟΟΟΟΟΓΜβΟ'τΟνΡίΜβ^τΟ oSSSoS^®^overM®^ovooo^fscMfnm^vn _-<L,c_ir,f»5f5U<000*£<000Ä0<H!H0Uf-,H ,9^5^^^ÄuS<uaouuHH<o<:Houooo Η^£Η5θΗϋ<<<ΗΗ«εΗϋΗθΗΕ-*υΕ-«<<ϋ — fif^Mti^UHHSoHOOÄÄHO^OUHOHOÄ ^Η^Μυου<υ<<<000<Η<0<0<0Η< ^Η^Η«υ<ΟΗΟ<2<ΟΟΗ<υ£-·ΟΗ<ϋΗϋ Λ<ΟΟΟΟΟΗΗ6-<2θΟΗΗΗ6-'«ϋΕ-ιΟΕ-'6-·< U «MUC C3UH0UC5H<O«C<00<<O<<OOOH ?ΪΗ£^ηΗμΗιί<ίΗΗΗυϋ(5Η<ΗΗΗϋϋ<Η ,/,S<CH0<U0H<Ue-'<<0fc-'C50HH0HH00U -SE§S§a§si§?§sssssBsaasBt;s SSgg§GS§§iäS8SgSSaBS8SS88S <ΗΗ0υ0ΗΗ<Η<0Η<<000<Η0<06-0 «ÄOf-<UHOUHUH<eC<HOU<<<U<<S2HOH iib§"SoSHo5‘<äiiuu“S<u5<S SlS§SBäSB£S2ssssassBa8saa iiisisfsissssslsssssssssi u8<ShBSh.2<öohhhooo<hooo*<h mrfn^n»HUUHU<HUHH<Oi2HHh<<UU 5S<SS5i)HuiSo£eSH“HhiS“u“S8 _SSggKt:SuiH5<i^B<S«S5uSiH s^göBuSgHouslBlBsasgiigguS OÄ^OHOHOt-tHÄHOOHO&ijOHOO. 0<00 (JuSHBUUHHHUHHÄOUUÄUtfÄUeÄU O0t5<HU*C*i0H<H<<00<U<0<000<y S-CHO<yHHHHO<HO^H<UOUg^O<gg sKsagasssfrsssissSuouSaaaa _ggSS§aS8sa88BsssssaaK8|is §SgSSa8GBSSBaSB8BG8SBS8Sa sgtjluoSHgogSoaassSuSSBSHS sSg8§8g^gaggSyBSSBaBS8BBS 2εΗ0Ηυ0<Ι«ϋ<«ί<Η<ϋ<0<585υ — «^hhhh<uhhhShoo<h<o<h<*cäo H0<H<HHH<0<OH0l3UUOUH<3OC3OO OOOOaUOUO<C<ÖO<Ö<OHH<H<t^<H fS <γή ^ ^ ^ OOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOfS) tn^ovor»eDO30vc^Of-i^HfNifsifn'5r«,inin'«Pr-r~aDaD plHHHHHrtrtiNCgNNINNINrsrMtMCVfNMCMN t_r>f-i*£f-iHU<Hoooo<o<o00<00 o Sy5<<<U0UOHU0HUU<H<0<H «> MO<HOU0HOOUU<HU0<<<0<0 ο^5<Ηου<0<Η<οΗυ<υουο<ο <HUUH<HUHUHUU<UyyH0UUy _ <<H<HU<5W<U<iU§<HUUHU<£<U rn ( ) / J if if if (f M M M jc£ t£& (j) if Ο ϋ *ί CD O<<OOHU<O<OHO<U<0O0000 HHOOHUOOHUUUHHH0<HO<UO m e. 6-4 c-4 cn o €£. fa <£ fa ιβ! §"* fa O fc·* Ä O ^ ^ O H<U<OHH<OHHOH<OOO<O0HO U<HU00h2uUHUH<O<OO<<O0 HOOH<H<<O<HU<U<O<<OO<0 <O<HO<H0o2uOHUOyOO<<<O r L·^ M jjf jtf £-4 jtf Q (J 4ί£ Q U U U U U ^ ^ <hh<<<uh<uS<uuou<uh<uo O<O<0HHHOHHOH<O00HO<0< O <H<HO<HH<<<H<UOO<O<O<H v ooh<<hho<2o<2ohuoo<hou h<<hh<hhuo<ohh<u<<<ohh HssgSHi2t;8ys<i<5£uy^<<5 - h<h<oo<<uh8Shuhuh0<<h< <HHH<OH<<<UU<U<<<<UUUf" <UHUH<<<UH0<O0HHyp<OOU UH<H<H<UH<<20<<O<H<<<< nHUH<H<HH0UUUUHHHUOyOU O HHH<0O<<HO<<HU0HUyppHU r> HH0H<UH<<H2<0H0H0<JC<OH HUHU<<O0HOO<<<<00<OOyi? U<UU20HU<000UH<0HU0H<0 __ f}ÄH<UH0HUU<HHH0U<y<U00 <H<H<<H<<<U<U<UU0UUH<U 5s-i6-i^hHHU0HHHU*CHH<H00<0 UH<HH<<<<0H<<0H00H<<00H HHUHHUU<0HHH2H<<HUUU<U0 S?eSgSgH§HS<Söu5SHÖSS<8HS sShuhhhShhSSS<oouuuwpo< <2<H<U<UH0UUh2h<U<00H<H lag£SS8S8aiSiS8§8SS0SS88- iggssieisas8ö8|g§yaB|Bg SEBSSSBSBSBSSSSSSSÖSSBB <<<H<<H00<HH<HUH<0<<HHHO <U<HHO<HUOUOU0<HUOO<0<< <UUU<0U<<0HHUHHHHH<0<0U <<H<H<UUH<0<UU <<0000HUU 2H<UHU<H<U0U<<0H0<0<HHH 0HUHH0HHHHHU0H<<HH<<<< O SBBSäBSSaGBSCBKSSBagSSä 0$_,$-ig-(0Uu22<H<HOHH0<U0<00 ,Η»Η»Η*Η«Ηί·>«*Η*Η*Η*Η*·Η*-Ιψ*Ψ-4ί~ί*-4*Η<-4ψ-4*-***ζ-*ζ4 OOtMO^OVOr^ro^OVOfMevONOfMevOVCfN ι/>ΐΛ0νθΓ-ω®<*σ*©»-ι·-«ΓΜΓ>»ην«β»ιηιη«>ΗΗ® HHHHHrtrtHHMNNiVNNNNWNNNNN mellan positionerna 9 och 2763 eller vilken hybridiseras med en för sekvensen II komplementär sekvens under myck-et svära förhällanden (0.1 x SSC, 0.1 % SDS, 65 °C), och i K. lactis förmär ästadkomma en resistens mot en cyklo-5 heximidhalt over 100 pg/ml, och fördelaktigt over 1 mg/ml.
5. O' C * ® O' £ O' ^ vj. O' r~< "r* £ £ £ ei >—4 h rv la CD >> v JIO ^ X £ «2 * -· ^ eller att proteinet innehäller denna sekvens A helt eller delvis, eller en sekvens, vilken kodas av en nuk-leotidsekvens, vilken hybridiseras med en för sekvensen II komplementär sekvens under mycket svära förhällanden 5 (0.1 x SSC, 0.1 SDS, 65 °C), under förutsättning, att en dylik protein ästadkommer en resistens i en rekombinan-teukaryotvärd mot en cykloheximidhalt over eller lika med 100 pg/ml, vilken värd är transformerad med en nuk-leotidsekvens som kodar ett dylikt protein under förhäl-10 lande som möjliggör produktion av proteinet.
5. Nukleotidsekvens enligt nägot av patentkra-ven 1 - 4, kännetecknad därav, att den er-hälls ur E. Coli-stammen DH5a, vilken är transformerad 10 med en plasmid Ye 23/31 och deponerad i CNCM institutio-nen den 2.7.1991 med depositionsnumret 1-1121.
6. En isolerad nukleotidsekvens, kännetecknad därav, att nukleotidsekvensen innehäller sekvensen II helt eller delvis: 15 ooooooooo ΩΩ0οσοοοοοοοοοοίνω^ονοίΝ®'«·ο «SSSoaNevO^NCseOtfOOHMMnrMTUi 9f5!?M^i£<U<<OUOOOHH<0<HOOOOO Η^£μοοΗ0<<<ΗΗ<Η0Η0ΗΗ0Η<<0 R^5<moohu<hhh2ohoh<<<u<<h ^^ί5οθΜ0Η<<0<υ<Η<υ<Η<000Η ^Ηίπυυυϊϋ2ί<οϋδ<Μϋ<ϋ<ΰΗ< <<oÖooohhh<oohhhh<uhuhh<u «e_n «ro o MUOOH<0<<00<<0<<OUPH <2^KtE^rr)MMM<<HHHUOOH2HHHOO<H ^M<HU<UUH<UH<<OHOOHHpHHUOU ?T!5*rriM«M<<<H<2HHHHH<HOUHH< _MHO<OOOUOUO<<<HH<HppppHHO ohouohuu2o2u<<h2uuho2<oo< <hhouuhh<h<oh<<ooo2ho<uho «^«τγιμ o MOOHUH<<HUU<<<U<<HHUH 2ηΗΐΐΗηΗϋ<<δϋϋΗΗΗ2ϋϋ<ϋΟ<«ΰ< v^5muuoouhhhh<h<ohho<u<<<p 5^MHHHUUHHUUH<U0UU<<<UU<< $i5uuh<uSHHUH<<<U<<HC!)p5UO $55Mhu2SH<<H(322t3<2uU<0<<< S5tfhUh«u2uSHH(32HUO<H<HHOC ^mm£um<o2uuo<huu<<ohuhouh O O < U H U U H 2 <UUHHHOOU<HUOU<H _t_1-r--f«f»r3r>^MOHHU<<U<<<HHOUHH ”m82hh<8o<<S'h<ö<ooh<ho<ö<u <SSSuH0H<S«Hey0H0<0<<<<<H _ HUOuS<oÖuHHoiS3HHHH<H^«H5 ESISSS2S££aBSB8ö8Sss&iss8s o5SHHOOHHHOHSStSOO<L>«<L>a<U Χ315ό«υ55"Κό<ΗίΪΗί85ϋίϊ1)2ί< SE^iSSSSsB-scaieaBCBCsaasa £i;«!r5«rfioou«ooo2<H<<oouo<<< — HH<HU<HOH<HOHUO<2U<<HOHUU S88SiSa8GBScSBSSB8CG8SCS8Sa ^ΜΜ2Μ<ΛΕθυΗ<<2ΗΗ<υ<ΗΗ<Η<υθ oho<ouoh<oouu<<hhuu<2o2h< OUOHO<OUHUO<HO<UUH<UOHUUH< HrJ88B^S<<<SSHHuSu212S8uH5 8hhhhhBBSS5ho<uhhohohhö<h <UHOHUO<U<U<<2<H<U<U<UU<U ?«!mmMMHäOHHHOH00<H<0<H<<<U H MMOOO<HH<U<HH<UU2<2<UHUH MO<H<HHH<U<UHUUUUUUHUUUUU OO00UUUUU<<UU<U<UHH<H<H<H OUHUHHUUUHHH<UUUHUH2<<H << _, _. _. . m»i mmi «™j «| «* -«i #H ρΉ fH *"* *H Ψ“* V"* «H r< f*i p·"* *Ή ·“< **·Ι HSNSio«NS^SSNeVOV0Ne«a-0«NttW ΜΜΓΝΠΠ-«ΓΌ·»η«ί®Ρ-ί-*®®®00*Η<>ΙΓ><22^ _ rsiraooOOOOO-QOOOOOOOOOOOfN 88β5θ5Νβ»δ«Νβ»0»Νβ«;0«<ΝΓ ^ΗΗΗΗΗΗΗΝΜΝΝΝΝΝΝΝΝΝΝΓΜΝίΝ t_if)f-<<HHO<HO 000<0<000<00 Ο ££υ<<<υοουΗορΗρρ<Η<ρ<Η νρ μΠ<ΗΟΟΟΗΟΟΟΟ<ΗΟΟ<<<Ρ<Ρ Κ<Η<Ηθθ<ο<Η<θΗθ<ορρρ<ρ <HOOH<HOHOHOO<OOOHOOOO ^goOHH<<o2o<<OoSoHOHOO tftfH<H0<0<C0<0<i<HUUHD<<0 rnf) [ ) gf ä2ooh<<o< < O < O < O < < O<<WOHO<O<OHO<O<OOOOOO <<<O<HHOHOO<O<<OHOO O hhoohooohooohhho<ho<oo m HHHOO<H<H<HH<O<H<<O<<O h<o<ohh<ohhoh<ooo<oo. o U<H000H<0OHOH<O<0O<<00 H00H<H<<0<H0<0<0<<00<0 <O<HO<HOO<OOHOOOOO<<<O H<HHH O<<OOO<<<H<<<<<<O ^_t-,f-iH0<<H<<OO<OOp0<OO<< <HH<<<OH<OO<OOOO<OH<OO f·) <O<OHHHOHHOH<OOOHO<O< O <H<H0<HH<<<H<000<P<P<H v to O H < < H HO<<O<<OHOOO<HOO H<<HH<HHOO<OHH<O<<<OHH t><H00<0HH0<0<0<H<0p0HH HHO<OHHOOH<<<<P<OH<<<O — H<H<00<<0H0<H0HpH0<<H< <HHH<0H<<<00<0<<<jCpppH <OHOH<<<OHO<OOHHOp<Opp OH<H<H<OH<<<O<<O<H<<<< OHOH<H<HHOOOOOHHHpOppO O HHH<00<<H0<<H00H0p00H0 tn HHOH<OH<<H<<OHOHP<<<OH HOHO<<OOHOO<<<<PP<PPP< 0<00<0H0<0000H<0HppH<0 0<H<OHOHOO<HHHOO<P<POO <H<H<<H<<<p<p<pppOOH<0 <HH<HHHOOHHHO<HH<HOp<p OH<HH<<<<OH<<pHOpH<<OOH HHOHHOO<OHHH<H<<HOOO<00 u<hohSh2hh53u<uuuououo< <<<H<0<0H000H<H<0<ppH<H SggSäScisaiBBgiggggysgg ^E^5t:§So8Sg5?S3uu8Stj^ <<<H<<HOO<HH<HOH<P<<HHHO <0<HHO<HOOOOOO<HOPP<P<< <OOO<OO<<OHHOHHHHH<O<PP <<H<H<00H<0<0p<<ppp0Hpp SSSu§u5<<u^i!uijKu<g|t<g<< o§-ihhooo<<<h<hohho<oo<oo HHrtHHHHrtrtrtHHHrtrirlrlHHHHHfH OVOrMO^OVOCMe-VO^OrMCDVO^CNO^O^^ ihin«i«rB)ooiCi»OrtHN(NnvTinin«^e rtHHHHHrtfHHNNNNNNNNNNNNNN eller att nukleotidsekvensen har sekvensen II eller att nukleotidsekvensen hybridiseras med en för sekvensen II komplementär sekvens under mycket svära förhällanden (0.1 x SSC, 0.1 % SDS, 65 °C) , under förutsättning, att 5 en dylik nukleotidsekvens har ätminstone en av följande egenskaper: - den kodar ett cykloheximidresistentprotein och/eller - den kodar en aminosyrasekvens, vilken kan identifieras med antikroppar riktade mot cykloheximidresistentprote- 10 in, vilken aminosyrasekvens har följande sekvens: SEKVENS A * «I * £ ? S -4 *4 ~i ,. n. ) Μ β S, Hl Ή <Ä ^ O* Ä O» ·«. e β fl « « m o, * H * * 5 >. >. 5* * d o -< rt y f? M 3 el ^ o» ·* °* s, e >» « tj, j5* ,3 ^ B O» >. m £ £ iT Ä 8 5 & «** * * ,5 3 ® £ * * * * >, ?, *-i '2* +* » o* -» u- ^^ * t £*^ Y, «4 *fc« *-4 θ' ® % M ^ ΓΖ i ^ u f* X s fr m *££ 0*?: a«i * ^ -2 2 S “ S ^ 4 * -e n n >> ri ? ^ O' J* ^ g- i, u H O M >» g £ n1 e ti e> > « m C e - £ 5 ΐ Ϊ Ä · ö « ** 2 >, >. λ % V M "* * °» _ j rj( H 9 *· a 5 s 5 " Ϊ J s· 5 5 I 5 -Γ <9 ^ 19 ^ C Λ u S. u »2 S 2 Ϊ * 1,5 2 5^ Ϊ-Η j'« *5S 5 5 ^ 0» ν -ί Ό * ® ·* Γ* °* . ijCi « *-» O* »"« m r-t Z ΓΜ U CO >«· -CO "* n χ vo «r-. <9 ^ ^ w ** och/eller - den reglerar en sekvens enligt nägot av patentkraven 1 - 4, vilken kodar protein, expression i Kluyveromyces lactis.
7. Nukleotidsekvens enligt patentkrav 6, kännetecknad därav, att den har nukleotid-sekvensen ORF A, vilken omfattar nukleotiderna 1 - 1560 i sekvensen i figur 2 eller att den hybridiseras med en för ORF A komplementär sekvens under mycket svära för-10 hällanden (0,1 x SSC, 0.1 % SDS, 65 °C) .
8. Nukleotidsekvens enligt patentkrav 7, kännetecknad därav, att den har en ORF A kodande sekvens I: Sekvens I 15 AT GGTTAACGTT CCAAAGACCA GAAAGACTTA CTGTAAGGGT aaggagtgcc gtaagcacgc ccaacacaag gttacccaat acaaggctgg TAAGGCTTGC TTGTACGCTC AAGGTAAGAG AAGATATGAC CGTAAACAAT CTGGTTTCGG TGGTCAAACC AAGCAAATTT TCCACAAGAA AGCTAAGACT ACCAAGAAGG TCGTTTTGAG ATTGGAATGT ATGTCCTGTA AGACCAAGAC CCAATTGGCT TTGAAGAGAT GTAAGCACTT CGAATTGGGT GGTGAAAAGA AGCAAAAGGG TCAAGCTTTG CAATTCTGA
9. Nukleotidsekvens enligt patentkrav 6, kännetecknad därav, att den har nukleotid-sekvensen III, vilken omfattar nukleotiderna 1 - 628 i 20 sekvensen i figur 2 eller ett promotoromräde, vilket ingär i nämnda nukleotidsekvens III, för ORF A sekven-sens transkription.
10. En kofaktor, som förmär oka cykloheximid-resistensen, vilken har ästadkommits av ett protein, som 25 är kodad i nukleotidsekvensen enligt nägot av patentkrav 7 eller 8, kännetecknad därav, att den är mellan nukleotiderna 1561 och 2740 i sekvensen i figur 2, under förutsättning, att den producerar en resistens mot en cykloheximidhaltnivä over 100 pg i en eukaryot 30 värd, som är modifierad genom infogande av nämnda nukle-insyrasekvens och en nukleinsyrasekvens som kodar ett resistensprotein under förhällanden, vilka möjliggör produktionen av dessa proteiner.
10 EcoRI: +3200 bp, Hindlll: +3300 bp, EcoriRI: +3700 bp, Hindlll: +4500 bp, Hindlll: +4540 bp, Sail: +5100 bp.
11. Ett cykloheximidresistensprotein, k ä n -netecknat därav, att proteinet motsvarar amino-5 syrasekvensen A: SEKVENS A _ - M *1 ® . >, >* 5y 2 * * H >, Μ Μ β v, h ^ ’ll <rl ‘kl «· il m %#· *·** ^ w _ e a} ·( ·* o* 5 js >, >, % e* o* ** *"♦ « 3 * £ i g- * 3 o -< — C i4 3 5 », Λ o -h σ* $ σ* * ^ * g SL $ * >· .8 * i o· >» i; ξ n* «h
12. Cykloheximidresistensprotein, känne-t e c k n a t därav, att proteinet kodar nukleotidsek-vensen I: Sekvensen I AT GGTTAACGTT CCAAAGACCA GAAAGACTTA CTGTAAGGGT AAGGAGTGCC GTAAGCACGC CCAACACAAG GTTACCCAAT ACAAGGCTGG taaggcttgc TTGTACGCTC AAGGTAAGAG AAGATATGAC CGTAAACAAT CTGGTTTCGG TGGTCAAACC AAGCAAATTT TCCACAAGAA AGCTAAGACT ACCAAGAAGG tcgttttgag ATTGGAATGT ATGTCCTGTA AGACCAAGAC CCAATTGGCT ttgaagagat gtaagcactt cgaattgggt GGTGAAAAGA AGCAAAAGGG TCAAGCTTTG CAATTCTGA 15 en del av sekvensen I eller sekvensen, som hybridiseras med en för sekvensen I komplementär sekvens under mycket svära förhällanden (0.1 x SSC, 0.1 % SDS, 65 °C) , under förutsättning, att en del av en dylik protein kodande 20 sekvens eller sekvensen, som hybridiseras med en för sekvensen I komplementär sekvens under mycket svära förhällanden (0.1 x SSC, 0.1 % SDS, 65 °C) förmär ästad-komma en resistens mot en cykloheximidhalt som är lika med eller över 100 pg, dä den införs i den eukaryota 25 värden under förhällande som möjliggör dess expression.
13. Protein enligt patentkrav 11 eller 12, vilket utgörs av en frän Kluyveromyces lactis erhällen protein.
14. En rekombinantvektor speciellt för kloning 30 och/eller expression och speciellt är av plasmidtyp, kännetecknad därav, att den innehäller ät-minstone en nukleotidsekvens enligt ett av patentkraven 1-10 under kontroll av reglerelement, tili vilka re-glerelement hör en promotor, vilken möjligen kan induce-5 ras, samt en transkriptions termineringssekvens.
15. Vektor enligt patentkrav 14, kännetecknad därav, att vektorn lämpar sig för expression i jäst, säsom Pichia pastoris, eller vektorn lämpar sig för expression i en djurcell, t.ex. baculovirus, 10 eller vektorn lämpar sig för expression i en växtcell.
16. Vektor enligt nägot av patentkraven 14 eller 15, kännetecknad därav, att den ytter-ligare innehäller en specifik nukleinsyra, vilken man vill utrycka i den valda eukaryota värden och vilken 15 star under kontroll av reglerelementen, vilka reglerelement är nödvändiga för dess uttryckande i värdcellen.
17. Vektor enligt patentkrav 16, kännetecknad därav, att nukleinsyran kontrolleras av reglerelementen, vilka kontrollerar transkriptionen av 20 sekvensen enligt nägot av patentkraven 1-10.
18. En eukaryot cell, kännetecknad därav, att cellen är transformerad med en vektor enligt nägot av patentkraven 14 - 17 och speciellt utgörs av en jästcell, säsom Pichia pastoris, djurcell, t.ex. en 25 insektcell eller en cell av ett däggdjur, speciellt en cell av ett möss eller en apa, en människocell, eller en växtcell.
19. Rekombinantvektor enligt patentkrav 14, kännetecknad därav, att rekombinantvektorn 30 ingär i E. coli DH5a stammen, vilken är deponerad i CNCM institutet den 2.7.1991 med depositionsnumret 1-1121.
20. Användningen av en vektor enligt nägot av patentkraven 14 - 17 i ett selektivitetssystem, som grundar sig pä en specifik markör av cykloheximidtyp i 35 eukaryot-värden och speciellt är ämnad för identifieran- de av en tili denna värd förenad specifik heterologisk nukleinsyra.
21. Förfarande för identifiering av närvaron av en heterologisk nukleinsyra i värdcellen, känne-t e c k n a t därav, att tili förfarandet hör skedena: - transformering av värdcellen med en expressionsvektor, 5 vilken i en av för dess replikation oväsentliga positioner innehäller en heterologisk nukleinsyra, under kon-troll av reglerelement för nukleotidsekvensen enligt nägot av patentkraven 1 - 10, vilka reglerelement är nödvändiga för expressionen av en dylik sekvens i den 10 valda värdcellen, - en odling av en pä detta sätt transformerad värdcell, - bringande av värden i kontakt med en i en bestämd hait varande cykloheximid och identifierande av värden resis-tent mot denna antibiotika.
FI940036A 1991-07-15 1994-01-04 Isolerade nukleotidsekvenser och cykloheximidresistenta proteiner FI120358B (sv)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR9108906 1991-07-15
FR919108906A FR2679253B1 (fr) 1991-07-15 1991-07-15 Proteines de resistance a la cycloheximide. utilisation comme marqueur de selection par exemple pour controler le transfert d'acides nucleiques.
FR9200685 1992-07-15
PCT/FR1992/000685 WO1993002201A1 (fr) 1991-07-15 1992-07-15 Sequences nucleotidiques et proteines de resistance a la cycloheximide

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI940036A0 FI940036A0 (sv) 1994-01-04
FI940036A FI940036A (sv) 1994-02-25
FI120358B true FI120358B (sv) 2009-09-30

Family

ID=9415112

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI940036A FI120358B (sv) 1991-07-15 1994-01-04 Isolerade nukleotidsekvenser och cykloheximidresistenta proteiner

Country Status (11)

Country Link
US (3) US5641674A (sv)
EP (1) EP0594771B1 (sv)
JP (1) JPH06509229A (sv)
AT (1) ATE255638T1 (sv)
AU (1) AU669483B2 (sv)
DE (1) DE69233263T2 (sv)
DK (1) DK0594771T3 (sv)
ES (1) ES2211859T3 (sv)
FI (1) FI120358B (sv)
FR (1) FR2679253B1 (sv)
WO (1) WO1993002201A1 (sv)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH08173170A (ja) * 1994-05-25 1996-07-09 Kirin Brewery Co Ltd キャンディダ・ユティリス酵母の形質転換系、およびそれによる異種遺伝子の発現
US6114108A (en) * 1995-08-29 2000-09-05 V.I. Technologies, Inc. Methods and compositions for the selective modification of viral nucleic acids
JP4817514B2 (ja) * 2001-03-09 2011-11-16 協和発酵キリン株式会社 新規動物細胞用ベクターおよびその使用
DE10132423C5 (de) * 2001-07-04 2005-07-28 Hjb Rolling Mill Technology Gmbh Baustein
US7332365B2 (en) * 2004-05-18 2008-02-19 Cree, Inc. Method for fabricating group-III nitride devices and devices fabricated using method
US7534633B2 (en) * 2004-07-02 2009-05-19 Cree, Inc. LED with substrate modifications for enhanced light extraction and method of making same
US7932111B2 (en) * 2005-02-23 2011-04-26 Cree, Inc. Substrate removal process for high light extraction LEDs
US8674375B2 (en) * 2005-07-21 2014-03-18 Cree, Inc. Roughened high refractive index layer/LED for high light extraction
KR20090048640A (ko) * 2006-08-23 2009-05-14 크리 엘이디 라이팅 솔루션즈, 인크. 조명 장치 및 조명 방법
US20100224890A1 (en) * 2006-09-18 2010-09-09 Cree, Inc. Light emitting diode chip with electrical insulation element
WO2008070604A1 (en) * 2006-12-04 2008-06-12 Cree Led Lighting Solutions, Inc. Lighting device and lighting method
US8617997B2 (en) * 2007-08-21 2013-12-31 Cree, Inc. Selective wet etching of gold-tin based solder
US11114594B2 (en) 2007-08-24 2021-09-07 Creeled, Inc. Light emitting device packages using light scattering particles of different size

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6248385A (ja) * 1985-08-27 1987-03-03 Nikka Uisukii Kk シクロヘキシミド耐性遺伝子、その製造方法、該遺伝子を含む組み換えベクタ−及び該遺伝子を含む形質転換体

Also Published As

Publication number Publication date
US5958687A (en) 1999-09-28
WO1993002201A1 (fr) 1993-02-04
EP0594771B1 (fr) 2003-12-03
FR2679253A1 (fr) 1993-01-22
FI940036A0 (sv) 1994-01-04
FI940036A (sv) 1994-02-25
DE69233263T2 (de) 2004-09-23
FR2679253B1 (fr) 1994-09-02
ES2211859T3 (es) 2004-07-16
DE69233263D1 (de) 2004-01-15
DK0594771T3 (da) 2004-04-05
ATE255638T1 (de) 2003-12-15
EP0594771A1 (fr) 1994-05-04
US5641674A (en) 1997-06-24
AU2387892A (en) 1993-02-23
JPH06509229A (ja) 1994-10-20
US5830997A (en) 1998-11-03
AU669483B2 (en) 1996-06-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI120358B (sv) Isolerade nukleotidsekvenser och cykloheximidresistenta proteiner
Coppolecchia et al. A new yeast translation initiation factor suppresses a mutation in the eIF‐4A RNA helicase.
Honore et al. Molecular cloning and expression of a transformation-sensitive human protein containing the TPR motif and sharing identity to the stress-inducible yeast protein STI1.
Araki et al. Cloning DPB3, the gene encoding the third subunit of DNA polymerase II of Saccharomyces cerevisiae
ES2665258T3 (es) Producción de metabolitos
Lee et al. A transcriptional mediator protein that is required for activation of many RNA polymerase II promoters and is conserved from yeast to humans
Punt et al. Identification and characterization of a family of secretion‐related small GTPase‐encoding genes from the filamentous fungus Aspergillus niger: a putative SEC4 homologue is not essential for growth
Stasyk et al. Sterol glucosyltransferases have different functional roles inPichia pastoris and Yarrowia lipolytica
JP4198753B2 (ja) 転写因子
JP2007532115A (ja) 大腸菌転写能を実質的に欠如したクルイベロマイセス・ラクチスにおけるクルイベロマイセス・ラクチス−プロモーター変異株の構築および使用方法
Omura et al. The N-terminal domain of the yeast permease Bap2p plays a role in its degradation
WO2014195377A2 (en) Polypeptides with permease activity
Gatherar et al. Identification of a novel gene hbrB required for polarised growth in Aspergillus nidulans
Ptushkina et al. Schizosaccharomyces pombe has a novel eukaryotic initiation factor 4F complex containing a cap-binding protein with the human eIF4E C-terminal motif KSGST
WO2011078351A1 (ja) 分泌シグナル配列およびこれを利用したタンパク質発現系
Talebkhan et al. Expression of granulocyte colony stimulating factor (GCSF) in Hansenula polymorpha
WO2014195522A2 (en) Polypeptides with permease activity
Lee et al. Yarrowia lipolytica SRP54 homolog and translocation of Kar2p
JP4587750B2 (ja) 転写活性化タンパク質をコードするキャンディダユティリス由来の遺伝子
Sandini et al. Gene expression of 70 kDa heat shock protein of Candida albicans: transcriptional activation and response to heat shock
Mokhonova et al. Forceful large-scale expression of “problematic” membrane proteins
Imazawa et al. Isolation and characterization of the fission yeast gene Sprpa12+ reveals that the conserved C-terminal zinc-finger region is dispensable for the function of its product
Varma et al. Characterization of the L41 gene in Cryptococcus neoformans: its application as a selectable transformation marker for cycloheximide resistance
Kusuda et al. Characterization and expression of a Neurospora crassa ribosomal protein gene, crp-7
AU5735499A (en) Drug targets in candida albicans

Legal Events

Date Code Title Description
FG Patent granted

Ref document number: 120358

Country of ref document: FI