FI115135B - Substituoidut alkyylidiamiinijohdannaiset ja niiden käyttö takykiniinin antagonisteina - Google Patents

Description

115135

Substituoidut alkyylidiamiinijohdannaiset ja niiden käyttö takykiniinin antagonisteina Tämä keksintö koskee uusia substituoituja alkyyli-5 diamiinijohdannaisia (tässä niitä kutsutaan kaavan (1) mukaiseksi yhdisteeksi tai kaavan (1) mukaisiksi yhdisteiksi) ja niiden käyttöä takykiniinireseptorin antagonisteina. Tällaiset antagonistit ovat käyttökelpoisia tässä julkaistujen takykiniinin välittämien tautien ja sairauksien, 10 mukaan luettuna astman, yskän ja keuhkoputkentulehduksen, hoidossa.

Keksinnön yhteenveto Tämä keksintö tuottaa uudet substituoidut alkyylidiamiini johdannaiset, joilla on kaava: 15 /An

Gi /Ns.

Rl G2 lH3

20 1 (CH2)P X

Γ·· I I I

Är3 R2 R3 Är2 ,1 ·, Kaava (1) *· 1 25 ; jossa V · Gx on -CH2- tai -C (0) - ; :V: G2 on -CH2- tai -C(0)-; p on 2 tai 3; «;· 3 0 m on 0 tai 1;

Rx on vety, C1_4-alkyyli, -CHO, -C(0)0R4 tai • t < , -C(0)NHR4, jolloin R4 on vety, bentsyyli tai C1_4-alkyyli; • 1 t ’· : R2 on vety tai C1_4-alkyyli ; ’ ’ R3 on vety tai -C(0)0R5, jossa R5 on bentsyyli tai : 35 C-^4-alkyyli; 115135 2

Arx on radikaali, joka on valittu ryhmästä: jolloin Z± tarkoittaa 1-3 substituenttia, jotka kukin on 10 valittu toisistaan riippumatta ryhmästä, joka koostuu vedystä, halogeenista, bentsyylioksista, hydroksista, CF3-ryhmästä, C1_4-alkyylistä ja C1_4-alkoksista;

Ar2 on radikaali, joka on valittu ryhmästä:

‘ "Q CQ

jolloin 20 Z2 tarkoittaa 1-3 substituenttia, jotka kukin on valittu toisistaan riippumatta ryhmästä, joka koostuu ve-: '· dystä, halogeenista, bentsyylioksista, hydroksista, CF3- V ί ryhmästä, C1.4-alkyylistä ja C1_4-alkoksista; : : Ar3 on radikaali, joka on valittu ryhmästä : : ; 25 * γ\ Λ^ν^Ν ΑΛ ,r ‘ jolloin 6 : ·,: Z3 tarkoittaa 1-3 substituenttia, jotka kukin on ·;·· valittu toisistaan riippumatta ryhmästä, joka koostuu ve- ,\ dystä, halogeenista, bentsyylioksista, hydroksista, CF3- • ‘ 35 ryhmästä, C1.4-alkyylistä ja C1.4-alkoksista; R6 on vety, 3 115135

Ci-4-alkyyli, -CHO, -C(0)NHR7f - (CH2) nNHC (NH) NH2 , -(CH2)nN- (CH3)2, tai -C(0)0R8, jolloin n on 2 tai 3 ja R7 on vety, bentsyyli tai Ci-4-alkyyli ja Rs on bentsyyli tai Ci-4-al-kyyli; 5 tai keksintö tuottaa niiden stereoisomeerit tai farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan.

Kuten alan ammattimies ymmärtää, kaavan (1) mukaiset yhdisteet voivat esiintyä stereoisomeereina riippuen läsnäolevien substituenttien luonteesta. Mikä tahansa 10 viittaus tässä patenttihakemuksessa johonkin kaavan (1) mukaisista yhdisteistä on tarkoitettu sisältämään joko spesifiset stereoisomeerit tai stereoisomeerien seoksen.

Kun stereokemia on osoitettu, yhdisteissä noudatetaan (R)-ja (S)-muotojen Cahn-Ingold-Prelogin nimityksiä kaavan (1) 15 esittämien yhdisteiden stereokemian osalta.

Spesifisiä stereoisomeereja voidaan valmistaa ste- reospesifisen synteesin avulla käyttäen enantiomeerisesti puhtaita tai enantiomeerisesti rikastettuja lähtöaineita, kuten alalla on hyvin tunnettua. Spesifiset stereoisomee- 20 rit voidaan myös erottaa ja ottaa talteen käyttämällä .. alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten kromatografiaa • » •>it käyttäen kiraalisia liikkumattomia faaseja, amidin muo- • * · *·* ' dostusta kiraalisen hapon kanssa ja sen jälkeen tulokseksi • a · • | ·...* saatujen diastereomeeristen amidien erottamista ja hydro-

• I

:,· j 25 lyysiä halutuksi stereoisomeeriksi tai tähän tarkoitukseen käytettyjen reagenssien muodostamien additiosuolojen uudel-leenjakokiteyttämistä, kuten on kuvattu lähteessä "Enantiomers, Racemates and Resolutions", J. Jacques, A. Collet ja H. H. Wilen, Wiley (1981) . Spesifisiä stereoisomeereja

Il I · ,···, 30 voidaan valmistaa tarvittaessa erottamalla stereoisomee- • · ·*’ rit, jolloin erottaminen toteutetaan koskien lähtöaineiden * i prekursoreita, lähtöaineita, välituotteita tai kaavan (1) ♦ ’”· mukaisia lopputuotteita.

.V. Tässä patenttihakemuksessa käytettynä: ; 35 a) termi "halogeeni" viittaa fluoriatomiin, kloo- riatomiin, bromiatomiin tai jodiatomiin; 115135 4 b) termi "C-^-alkyyli" viittaa haaroittuneeseen tai suoraketjuiseen alkyyliradikaaliin, joka sisältää 1-4 hiiliatomia, kuten metyyliin, etyyliin, n-propyyliin, iso-propyyliin, n-butyyliin, isobutyyliin, t-butyyliin jne; 5 c) termi "Cj^-alkoksi" viittaa suoraket juiseen tai haaroittuneeseen aikoksiryhmään, joka sisältää 1-4 hiiliatomia, kuten metoksiin, etoksiin, n-propoksiin, isopro-poksiin, n-butoksiin, isobutoksiin, t-butoksiin jne; d) merkintä -C(O)- viittaa karbonyyliryhmään, jolla 10 on kaava:

O

A.

15 e) merkintä " » viittaa sidokseen, jonka osalta stereokemiaa ei ole osoitettu; f) merkinnät -C02R ja -C(0)0R viittaavat ryhmään, jolla on kaava: 0 20 i l g) merkintä -C(0)NHR viittaa ryhmään, jolla on kaa- i 25 va: q • i ·

H

*!” 30 h) esimerkeissä ja valmistuksissa käytettynä seu- *;*’ raavilla termeillä on annetut merkitykset: g viittaa gram- tt*.j maan, mg viittaa milligrammaan, mmol viittaa millimooliin, :**: ml viittaa millilitraan, °C viittaa celsiusasteeseen, Rf viittaa retentiotekijään, sp. viittaa sulamispisteeseen, I *, 35 haj . viittaa hajoamiseen, THF viittaa tetrahydrofuraaniin, 115135 5 DMF viittaa dimetyyliformamidiin, M viittaa molaariseen, TLC viittaa ohutkerroskromatografiaan, HPLC viittaa suuren erotuskyvyn nestekromatografiaan, HRMS viittaa suuren erotuskyvyn massaspektriin; 5 i) merkinnällä 2 4 10 2 ymmärretään, että radikaali on kiinnittynyt 1-asemaan ja Z:n esittämä substituentti tai substituentit voivat olla kiinnittyneinä mihin tahansa 2-, 3-, 4-, 5- tai 6-asemis-ta; 15 j) merkinnällä 2 7 3 x 6

20 Z

ymmärretään, että radikaali voi olla kiinnittynyt joko ; · 1-asemaan tai 2-asemaan, ja lisäksi ymmärretään, että kun v ’ radikaali on kiinnittynyt 1-asemaan, substituentti tai ; ; substituentit, joita Z esittää, voivat olla kiinnittyneinä • 25 mihin tahansa 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- tai 8-asemista ja . että kun radikaali on kiinnittynyt 2-asemaan, substituent- ti tai substuentit, joita Z esittää, voivat olla kiinnit- • « · tyneinä mihin tahansa 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- tai 8-asemis-. ta; * i * 30 k) merkintä "p-1", jota on käytetty koskien raken- t t ***' teen (3) mukaisia aldehydejä, viittaa rakenteen (3) mukai- : seen aldehydiin, jolla on yksi metyleeni vähemmän kuin on ;··· tarpeen p:n kannalta lopputuotteessa ja joka tuottaa pel kistävän aminoinnin jälkeen yhdisteen, jossa p on kuten ; ’ 35 kaavan (1) mukainen lopputuote edellyttää, näin ollen on

♦ * I

6 115135 ymmärrettävää, että aldehydit, joilla on rakenne (3), jossa p-1 on 1, tuottavat yhdisteitä, joilla on kaava (1), jossa p on 2 ja että aldehydit, joilla on rakenne (3) , jossa p-1 on 2, tuottavat yhdisteitä, joilla on kaava (1), 5 jossa p on 3; 1) termi yhdisteen "farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat" viittaa joko happoadditiosuolaan tai emäsaddi-tiosuolaan.

Ilmaisun "farmaseuttisesti hyväksyttävät happoaddi-10 tiosuolat" on tarkoitus päteä kaavan (1) esittämien emäs-yhdisteiden tai minkä tahansa niiden välituotteen mihin tahansa myrkyttömään orgaaniseen tai epäorgaaniseen happoadditiosuolaan. Kuvaaviin epäorgaanisiin happoihin, jotka muodostavat sopivia suoloja, sisältyvät suolahappo, bromi-15 vetyhappo, rikkihappo ja fosforihappo ja happamat metal-lisuolat, kuten natriumvetyortofosfaatti ja kaliumve-tysulfaatti. Kuvaaviin orgaanisiin happoihin, jotka muodostavat sopivia suoloja, sisältyvät mono-, di- ja trikar-boksyylihapot. Kuvaavia tällaisista hapoista ovat esimer-20 kiksi etikkahappo, glykolihappo, maitohappo, palorypäle-happo, malonihappo, meripihkahappo, glutaarihappo, fumaa-; .. rihappo, omenahappo, viinihappo, sitruunahappo, askorbii- nihappo, maleiinihappo, hydroksimaleiinihappo, bentsoehap-po, hydroksibentsoehappo, fenyylietikkahappo, kanelihappo, : 25 salisyylihappo, 2-fenoksibentsoehappo, p-tolueenisulfoni- • » · happo ja sulfonihapot, kuten metaanisulfonihappo ja 2-hyd-

« ♦ I

I!! roksietaanisulfonihappo. Tällaiset suolat voivat esiintyä ’ joko hydratoituneessa tai olennaisilta osin vedettömässä muodossa. Yleensä näiden yhdisteiden happoadditiosuolat ·: 30 ovat liukoisia veteen ja erilaisiin hydrofiilisiin orgaa- nisiin liuottimiin ja yleensä ne osoittavat korkeampia : sulamispisteitä kuin niiden vapaat emäsmuodot.

Ilmaisun "farmaseuttisesti hyväksyttävät emäsaddi- • t • tiosuolat" on tarkoitus päteä kaavan (1) esittämien yhdis- 35 teiden ja minkä tahansa niiden välituotteiden mihin tähän- I * 115135 7 sa myrkyttömiin orgaanisiin tai epäorgaanisiin emäsaddi-tiosuoloihin. Kuvaaviin emäksiin, jotka muodostavat sopivia suoloja, sisältyvät alkalimetalli- tai maa-alkalime-tallihydroksidit, kuten natrium-, kalium-, kalsium-, mag-5 nesium- tai bariumhydroksidit; ammoniakki, ja alifaatti-set, alisykliset tai aromaattiset orgaaniset amiinit, kuten metyyliamiini, dimetyyliamiini, trimetyyliamiini ja pikoliini. Näiden yhdisteiden kanssa voidaan muodostaa joko yksi- tai kaksiemäksisiä suoloja.

10 Edulliset kaavan (1) mukaiset suoritusmuodot on an nettu seuraavassa: 1) yhdisteet, joissa p on 2, ovat edullisia; 2) yhdisteet, joissa Gx on -CH2- ja G2 on -C(O)- ja Gx on — (C(O) — ja G2 on -CH2-, ovat edullisia ja yhdisteet, 15 joissa Gx on -CH2- ja G2 on -C(0)- ovat edullisempia; 3) yhdisteet, joissa R2 on vety, ovat edullisia; 4) yhdisteet, joissa R3 on vety, ovat edullisia; 5) yhdisteet, joissa Rx on vety, C1_4-alkyyli, -C(0)0R4 tai -C(0)NHR4, ovat edullisia ja yhdisteet, joissa 20 R3 on -C(0)0R4 tai -C(0)NHR4, ovat edullisempia ja yhdisteet, joissa Rj^ on -C(0)0R4, ovat edullisimpia; ; '*· 6) yhdisteet, joissa Ar3 on radikaali i tf, 25 *;;; 30 ovat edullisia.

On ymmärrettävä, että kaavan (1) muut edulliset suoritusmuodot voidaan valita edellyttämällä yhtä tai ·.; useampaa kaavan (1) edullisista suoritusmuodoista 1-6 tai viittaamalla tässä annettuihin esimerkkeihin.

; ·’ 35 Esimerkkeihin tämän keksinnön piiriin kuuluvista ! yhdisteistä sisältyvät seuraavat. Tämä luettelo on tarkoi- 115155 8 tettu vain edustavaksi eikä sen tarkoitus ole rajoittaa keksinnön piiriä millään tavoin: (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- [ (lH-indol-3-yyli) -1-karboksimetyyli] etyyliamino] -N' - (t-butoksikarbo-5 nyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi; (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- [ (1-metyyli-in-dol-3-yyli)-1-karboksimetyyli]etyyliamino]-N'-(t-butoksi-karbonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi; (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2 - [ [ (R) -2 - [ (lH-indol- 3 -10 yyli) -1-karboksimetyyli] etyyliamino] -N' - (t-butoksikarbo- nyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi; (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(S)-2-fenyyli-l-kar-boksimetyyli]etyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino -3 -fenyylipropionamidi; 15 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(S)-1-fenyyli-l-kar- boksimetyylimetyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino] -3-fenyylipropionamidi; (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[2-(lH-indol-3-yy-li) etyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyyli) etyyliamino] -3-fe-2 0 nyylipropionamidi; (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(R ja S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-metyylietyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyyli)-etyyliamino] - 3-fenyylipropionamidi; (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2 - [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yy- ; 25 li)-1-karboksyylihappoamidietyyliamino]-N'- (t-butoksikar- * · · ]'V bonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi; (S) -N- (2-metoksibentsyyli) -N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (1H- t t ’ indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino] -N' - (t-butoksi karbonyyli) etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi; 30 (S)-N-(3,4,5 - trimetoksibent syyli)-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1 -karboks ime tyyli-N' - (t-butok-; sikarbonyyli)etyyliamino]etyyliamino]-3-fenyylipropionami- ,,..; di (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yy-35 li) -1-karboksimetyylietyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyy-/- li)etyyliamino]-3-(naft-2-yyli)propionamidi; 115135 9 (S) -N- (2-metoksibentsyyli) -N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (1H-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] -N' - (t-butoksi-karbonyyli)etyyliamino]-3-(naft-2-yyli)propionamidi; (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yy-5 li) -1-karboksimetyylietyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyy-li)propyyliamino]-3-fenyylipropionamidi; (S)-N-(3,4-diklooribentsyyli)-N-metyyli-2-[[(S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino]-N'-(t-bu-toksikarbonyyli)etyyliamino]-3-(naft-2-yyli)propionamidi; 10 N-metyyli-N- [ (S) -2 - [ [(S) -2 - (lH-indol-3-yyli) -1-kar boksimetyylietyyliamino] -N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino] -3-fenyylipropyyli]-(3,4,5-trimetoksi)bentsamidi; N-metyyli-N- [ (S)-2- [ [ (S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino] -N'-(t-butoksikarbonyyli)etyy-15 liamino]-3-fenyylipropyyli]bentsamidi; N-metyyli-N- [ (S) -2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1-kar-boksimetyylietyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino] -3-fenyylipropyyli]bentsimidi; N-metyyli-N-bentsyyli-N-[(S)-2-[(S)-2-(lH-indol-3-20 yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyy li) etyyliamino]-3-fenyylipropyyliamiini; « ·,, (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[ (R) -2-(lH-indol-3-yy- li) -1-karboksimetyylietyyliamino] etyyliamino] -3-fenyyli-propionamidi; ; t*_ 25 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[ (S) -2-(lH-indol-3-yy- li) -1-karboksimetyylietyyliamino] etyyliamino] - 3-fenyyli-propionamidi; f > | ’·' ' (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(S)-2-[(l-metyyli-in- dol-3-yyli)-1-karboksimetyyli]etyyliamino]etyyliamino]-3- i 3 0 f enyylipropionamidi ; :,tl: (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2-fenyyli-l-kar- i ; boksimetyylietyyliamino] etyyliamino]-3-fenyylipropionami- ! di; •i > i * # ' i l 115135 10 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2 -[[(S)-1-fenyyli-l-kar-boksimetyylimetyyliamino] e tyyli amino] -3 - f enyylipropionami -di; (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [2- (lH-indol-3-yyli) e-5 tyyliamino]]etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi; (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(R ja S)-2-(IH-indol-3 - yyli)-1-metyylietyyliamino]etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi ; (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (IH-indol-3-yy-10 li)-1-karboksyylihappoamidietyyliamino]etyyliamino]-3-fe- nyylipropionamidi; (S) -N-(2-metoksibentsyyli)-N-metyyli-2-[[(S)-2-(1H-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] etyyliamino] -3-fenyylipropionamidi; 15 (S) -N- (3,4,5-trimetoksibentsyyli)-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] -etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi; (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] etyyliamino] -3- (naft-2-20 yyli)propionamidi; (S) -N-(2-metoksibentsyyli)-N-metyyli-2-[[(S)-2-(1H-: ·.. indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino] etyyliamino] -3- (naft-2-yyli) propionamidi ; (S)-N-(3,4-diklooribentsyyli)-N-metyyli-2-[[(S)-2-; 25 (IH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino] etyyliami- , ,·] no]-3-(naft-2-yyli)propionamidi; I 1 | I!! N-metyyli-N- [ (S) -2- [ [ (S) -2- (IH-indol-3-yyli) -1-kar- ♦ » · ‘ boksimetyylietyyliamino] etyyliamino] -3-fenyylipropyyli] - (3,4,5-trimetoksi)bentsamidi; ···:' 30 N-metyyli-N- [ (S) -2-[ [ (S) -2-(IH-indol-3-yyli)-1-kar- boksimetyylietyyliamino] etyyliamino] - 3 - f enyylipropyyli] -bentsamidi; (S) -N-metyyli-N- [ (S) -2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] etyyliamino] - 3 - f enyylipropyy-V·’ 35 li]-bentsimidi; 115135 11 (S) -N-metyyli-N-bentsyyli-N- [ (S) -2- [ (S) -2- (lH-in-dol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] etyyliamino] -3-fenyylipropyyliamiini; (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- [ (1- (3-dimetyy-5 liaminopropyyli)indol-3-yyli)-1-karboksimetyyli]etyy liamino] etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi; (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(S)-2-(1-karboksi-etyyli-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino]etyyliamino] -3-(naft-2-yyli)propionamidi; 10 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (1H-indol-3-yy li) -1-karboksietyyliamino] etyyliamino] -3-fenyylipropionamidi .

Kaavan (1) mukaisia yhdisteitä voidaan syntetisoida käyttämällä seuraavia synteettisiä menetelmiä keksinnön 15 välituotteiden tai lopullisten yhdisteiden tuottamiseksi:

Kaavio A koskee kaavan (1) mukaisten yhdisteiden synteesiä.

Kaavio B koskee kaaviossa A lähtöaineena käytetyn rakenteen (3) mukaisen aldehydin synteesiä, jolloin maini-20 tun aldehydin rakenteessa G-l on -CH2- ja G2 on -C(O)-.

Kaavio C koskee kaaviossa A lähtöaineena käytetyn : ·,. rakenteen (3) mukaisen aldehydin synteesiä, jolloin maini- tun aldehydin rakenteessa Gx on -C(O)- ja G2 on -CH2-. h”. Kaavio D koskee kaaviossa A lähtöaineena käytetyn : 2 5 rakenteen (3) mukaisen aldehydin synteesiä, jolloin maini tun aldehydin rakenteessa G1 on -C(O)- ja G2 on -C(O)-.

!!! Kaavio E koskee kaaviossa A lähtöaineena käytetyn ’ rakenteen (3) mukaisen aldehydin synteesiä, jolloin maini tun aldehydin rakenteessa G-l on -CH2- ja G2 on -CH2-.

···: 3 0 Yleinen synteettinen menetelmä näiden kaavan (1) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi on esitetty kaavios-' : sa A. Reagenssit ja lähtöaineet ovat helposti alan ammat- timiehen saatavissa. Kaaviossa A kaikki substituentit ovat kuten edellä on määritelty ellei toisin mainita.

115135 12

Kaavio A

Λ

5 (CH2)m ΝΗ /V

I j G2 GH3

Αγ3 R2 η (CH2)p1 I

(2) + N7 H C02Rs Ar2 10 .

Vaihe a /An

Gl 15 /N.

Rl G2 CH3 I (CH2)p 1

I I I

20 ΑΓ3 R2 C02Rs Ar2 : .. (4) tai kaava (1) , Mahdollinen /Ari jossa R3 on -CC^R,^ vaihe b Gi i „ Rl G2 >CH3 * ·'f (CH2)p } 0': (CHiU^N^

I I I

. Är3 R2 C02Rs Är2 3Q (5) tai kaava (1), .* jossa R-. on -CO„Rc

ό L· D

Mahdollinen v : vaihe c 13 115135

Kaavio A (jatkuu)

Mahdollinen /An vaihe c Gl

Rl G2 } (CH2)p i

| | H

Ar3 R2 A r2

Kaava (1) , jossa R on vety J

5 Kaavion A vaiheessa a rakenteen (2) mukainen sopiva amiini tai rakenteen (2) mukaisen sopivan amiinin suola saatetaan kosketukseen rakenteen (3) mukaisen sopivan alde-hydin kanssa pelkistävässä aminoinnissa, jolloin saadaan rakenteen (4) mukainen yhdiste. Rakenteen (4) mukaiset 10 yhdisteet ovat yhdisteitä, joilla on kaava (1), jossa R3 on -C(0)0R5.

Rakenteen (2) mukainen sopiva amiini on amiini, *···' jossa stereokemia, Ar3, R3, R2 ja m ovat kuten niiden toi- : votaan olevan kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa. Ra- 15 kenteen (2) mukainen sopiva amiini voi myös olla amiini, : jossa stereokemia on kuten kaavan (1) mukaisessa loppu tuotteessa on toivottua, ja mitkä tahansa ryhmistä Ar3, Ri ··. ja R2 tuottavat suojaamisen poistamisen tai muuntamisen • · « .···, jälkeen ryhmät Ar3, Ri ja R2, jotka ovat kuten kaavan (1) (· # 20 mukaisessa lopputuotteessa on toivottua. Rakenteen (2) mu- *· " kainen sopiva amiini voi olla myös amiini, jossa stereoke- * · mia tuottaa erottamisen jälkeen stereokemian, joka on toi- vottu kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa ja Ar3, Ri, R2 : jam ovat kuten niiden toivotaan olevan kaavan (1) mukai- 25 sessa lopputuotteessa. Rakenteen (2) mukainen sopiva amii- 115135 14 ni voi myös olla amiini, jossa stereokemia tuottaa erottamisen jälkeen stereokemian, joka on toivottu kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa, ja mitkä tahansa ryhmistä Ar3, Rx ja R2 tuottavat suojaamisen poiston ja muuntamisen jäl-5 keen sunbstituentit Ar3, R3 ja R2, jotka ovat kuten niiden toivotaan olevan kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa.

Rakenteen (2) mukaisia amiineja valmistetaan helposti käyttämällä alalla tunnettuja menetelmiä. Joitakin rakenteen (2) mukaisia amiineja valmistetaan a-aminoha-10 poista, joita voidaan saada käyttämällä alalla tunnettuja menetelmiä tai niitä vastaavia menetelmiä, kuten on kuvattu esimerkiksi seuraavissa lähteissä: D. A. Evans, et ai., JACS 112, 4011 - 4030 (1990); S. Ikegami et ai., Tetrahedron 44, 5333 - 5342 (1988); W. Oppolzer et ai., Tet .

15 Lets. 30, 6009 - 6010 (1989); "Synthesis of Optically

Active u-Amino-Acids"; R. M. Williams (Pergamon Press, Oxford 1989); toimittaja M. J. O'Donnell: "a-Amino-Acid-

Synthesis", Tetrahedron Symposia, painossa, No. 33, Tetrahedron 44, No. 17 (1988); U. Schöllkopf, Pure Appi. Chem. 20 55, 1799 (1983); U. Hengartner et al., JOC 44, 3748 - 3752 (1979); M. J. O'Donnell et al., Tet. Lets., 2641 - 2644 : (1978); M. J. O'Donnell et al. , Tet. Lets., 23, 4255 - 4258 (1982); M. J. O'Donnell et al. , JACS 110, 8520 - 8525 (1988) .

: .·. 25 Rakenteen (3) mukainen sopiva aldehydi on aldehydi, ]’V jossa stereokemia, G1# G2, R5, Ar1( Ar2 ja p ovat kuten toivotaan olevan kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa.

* Rakenteen (3) mukainen sopiva aldehydi voi olla myös alde hydi, jossa stereokemia on kuten on toivottua kaavan (1) 3 0 mukaisessa lopputuotteesa ja mitkä tahansa ryhmät Αγ3 ja

Ar2 ja R5 tuottavat suojauksen poistamisen jälkeen ryhmät \ : Ar3 ja Ar2 ja R3, jotka ovat toivottuja kaavan (1) mukai- sessa lopputuotteessa. Rakenteen (3) mukainen sopiva alde- hydi voi myös olla aldehydi, jossa stereokemia tuottaa . 35 erottamisen jälkeen stereokemian, joka on toivottu kaavan 115135 15 (1) mukaisessa lopputuotteessa ja Arx ja Ar2 ja R3 ovat kuten niiden toivotaan olevan kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa. Rakenteen (3) mukainen sopiva aldehydi voi myös olla aldehydi, jossa stereokemia tuottaa erottamisen 5 jälkeen stereokemian kuten on toivottua kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa ja mitkä tahansa ryhmistä Arx ja Ar2 ja R5 tuottavat suojauksen poistamisen jälkeen ryhmät Ar^_ ja Ar2 j a R3, jotka ovat kuten niiden toivotaan olevan kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa. Sellaisten aldehydien 10 (3) käyttö, joissa Rs on t-butyyli, on edullista yhdistei den valmistamiseksi, joilla on kaava (1) , jossa R3 on vety.

Esimerkiksi rakenteen (2) mukainen sopiva amiini tai rakenteen (2) mukaisen sopivan amiinin suola saatetaan kosketukseen rakenteen (3) mukaisen sopivan aldehydin 15 kanssa. Reaktio toteutetaan käyttäen sopivan pelkistimen, kuten natriumboorihydridin tai natriumsyaaniboorihydridin, molaarista ylimäärää, natriumsyaaniboorihydridin ollessa edullinen. Reaktio toteutetaan sopivassa liuottimessa, kuten metanolissa. Yleensä reaktio toteutetaan lämpötilas-20 sa, joka on 0 - 50 °C. Yleensä reaktiot vaativat aikaa 1 -72 tuntia. Tuote voidaan eristää ja puhdistaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten uuttoa, haihdut-tamista, kromatograf iaa ja uudelleenkiteyttämistä .

.·*·. Kaavion A mahdollisessa vaiheessa b rakenteen (5) ; ,·. 25 mukaisen yhdisteen ryhmistä Arlf Ar2, Ar3, Rx ja R2 voidaan poistaa suojaus tai niitä voidaan muuntaa, jotta saadaan !!! ryhmät Ar1# Ar2, Ar3, R-,_ ja R2, jotka ovat toivottuja kaa- ‘ van (1) mukaisessa lopputuotteessa. Rakenteen (5) mukaiset yhdisteet ovat yhdisteitä, joilla on kaava (1), jossa R3 on 30 -c(o)or5.

Suoj auksenpoistoreaktio käsittää estereiden hydro-: lyysin, hydroksisuojaryhmän poistamisen ja amiinisuojaryh- män poistamisen. Sopivan suojaryhmien valinta, käyttö ja poistaminen käytettäessä suojaryhmiä, jotka on kuvattu .* 35 esimerkiksi lähteessä Protecting Groups in Organic 115135 16

Synthesis, T. Greene, Wiley-Interscience (1981), on alalia hyvin tunnettua ja ymmärrettyä.

Muuntamisreaktio käsittää amidien muodostamisen, amiinin alkyloimisen, esterin pelkistämisen ja sitten saa-5 dun alkoholin hapettamisen aldehydiksi, additioreaktion indoli-typpeen liittyen tai amidaatin muodostamisen. Muun-tamisreaktiot ovat alalla hyvin tunnettuja ja ymmärrettyjä, esimerkkinä reaktiot, jotka on kuvattu kansainvälisessä patenttihakemuksessa W093/14 113, julkaistu tammikuun 10 10. päivä, 1993; ja lähteissä L. H. Werner et ai., JACS

79, 1675 (1957) ; L. H. Zhang ja J. M. Cook, Heterocycles 27, 2795 (1988). Muuntamisreaktio voi edellyttää suojaryh-män käyttöä yhdisteissä, joilla on rakenne (5), jossa R2 on vety. Kun tällaista suojaryhmää edellytetään, voidaan 15 käyttää t-BOC-suojaryhmää tai karbonyylibentsyylioksisuo- jaryhmää (CBZ-suojaryhmää). t-BOC-suojaryhmän tai kar-bonyylibentsyylioksisuojaryhmän (CBZ) tuominen on alalla hyvin tunnettua ja ymmärrettyä ja on kuvattu lähteessä Protecting Groups in Organic Synthesis, T. Greene, Wiley-20 Interscience (1981).

Kaavion A mahdollisessa vaiheessa c -C02R5-ryhmä poistetaan sopivasta yhdisteestä, jolla on rakenne (5), jossa R5 on t-butyyli, saattamalla se reagoimaan proottisen hapon kanssa, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava (1), : 25 jossa R3 on vety, tai kaavan (1) mukaisen yhdisteen suola, jolloin R3 on vety.

OI Esimerkiksi sopiva rakenteen (5) mukainen yhdiste ’·’ ’ saatetaan reagoimaan proottisen hapon kanssa. Reaktio to teutetaan liuottimessa, kuten etyyliasetaatissa, dioksaa-...: 30 nissa, metanolissa tai etanolissa. Yleensä reaktio vaatii aikaa 1-48 tuntia ja se toteutetaan ympäröivässä lämpö-. : tilassa. Tuote voidaan eristää ja puhdistaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten uuttoa, haihduttamista, kromatografiaa ja uudelleenkiteyttämistä.

115135 17

Kuten alan ammattimies ymmärtää, kaaviossa A numero ja järjestys, jossa mahdollinen vaihe b ja mahdollinen vaihe c toteutetaan, riipppuvat kaavan (1) mukaisesta yhdisteestä, joka on toivottu kaavion A tuotteena. Esimer-5 kiksi joitakin kaavan (1) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa peräjälkeen muuntamalla ja poistamalla suojaus, kuten alkyloimalla amiini, mahdollinen vaihe b, poistamalla aminosuojaryhmä, mahdollinen vaihe c, ja sen jälkeen hydrolysoimalla esteri, mahdollinen vaihe b.

10 Seuraavat esimerkit esittävät tyypillisiä synteese jä, kuten kaaviossa A on kuvattu. Näiden esimerkkien ymmärretään olevan pelkästään kuvaavia eikä niitä ole tarkoitettu rajoittamaan keksinnön piiriä millään tavoin. Esimerkki 1 15 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- [ (lH-indol-3- yyli) -1-karboksimetyyli] etyyliamino] -N' - (t-butoksi-karbonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi Kaavio A, vaihe a

Yhdistetään (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[N'-(t-bu-20 toksikarbonyyli)-2-oksoetyyliamino]-3-fenyylipropionamidi (4,87 g, 11,87 mmol) ja (S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karbok- j simetyylietyyliamiinihydrokloridisuola [ (S)-tryptofaani- metyyliesterin hydrokloridisuola] (3,02 g, 11,86 mmol) metanolissa (120 ml) . Seokseen lisätään tipoittain nat- : ,*. 25 riumsyaaniboorihydridin liuos (9,5 ml, 1 M THF:ssa, 9,5

* * » I

, ,·, mmol) ja saatua seosta sekoitetaan inertissä ilmakehässä t « _!!!_ 48 tunnin ajan. Seos väkevöidään tyhjössä, jolloin saadaan jäännös. Jäännös laimennetaan etyyliasetaatilla ja uutetaan vedellä. Kerrokset erotetaan, orgaaninen kerros kui-30 vataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, ' · jolloin saadaan jäännös. Jäännös kromatografoidaan käyt-täen silikageeliä ja eluoiden 3-%:isella metanolilla/di-kloorimetaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,57 (silikageeli, 10-%:inen metanoli/dikloorimetaani).

115135 18

Esimerkki 2 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- [ (1 -metyyli-in-dol-3-yyli) -1-karboksimetyyli] etyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropion-5 amidi

Kaavio A, vaihe a:

Valmistetaan esimerkin 1 menetelmällä käyttäen (S) - 2-(l-metyyli-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamiini-hydrokloridisuolaa [Lin-Hua Zhang ja James M. Cook, Hete-10 rocycles 27, 2795 - 2802 (1988)] (1,0 mmol) ja (S)-N-bent syyli-N-metyyli-2- [Ν' -(t-butoksikarbonyyli)-2-oksoetyyli-amino]-3-fenyylipropionamidia (1,0 mmol), jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 3 15 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (R) - 2- [ (lH-indol-3- yyli) -1-karboksimetyyli] etyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyyli) etyyliamino] -3-fenyylipropionamidi Kaavio A, vaihe a:

Valmistetaan esimerkin 1 menetelmällä käyttäen (R) -20 2- (lH-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamiinihydroklo- ridisuolaa [ (R)-tryptofaanimetyyliesterihydrokloridi-; suolaa] (0,25 g, 1,0 mmol) ja (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- j‘;1. [Ν' - (t-butoksikarbonyyli) -2-oksoetyyliamino] -3-fenyylipro- pionamidia (0,41 g, 1,0 mmol), jolloin saadaan otsikon yh- * « : ,·, 25 diste: TLC Rf = 0,54 (silikageeli, 10-%:inen metanoli/di- # 1 · " V kloorimetaani) .

;’ [ Esimerkki 4 ’· ’ (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(S)-2-fenyyli-l-kar- boksimetyyli] etyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyyli) -30 etyyliamino-3-fenyylipropionamidi

Kaavio A, vaihe a: * ; Valmistetaan esimerkin 1 menetelmällä käyttäen (S)- * t » 2 - amino - 3 - f enyylipropionihappometyyl iesterihydrokloridi - > » . suolaa [ (S)-fenyylialaniinimetyyliesterihydrokloridisuola] * .·, 35 (0,26 g, 1,0 mmol) ja (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2- [Ν'- (t- i s » 115135 19 butoksikarbonyyli) -2-oksoetyyliamino] -3-fenyylipropionami-dia (0,41 g, 1,0 mmol), jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,51 (silikageeli, 10-%:inen metanoli/dikloorime- taani).

5 Esimerkki 5 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(S)-1-fenyy1i-1-kar-boks ime tyyl ime tyyli amino] -N' - (t-butoksikarbonyyli) -etyyliamino]-3 - fenyylipropionamidi Kaavio A, vaihe a: 10 Valmistetaan esimerkin 1 menetelmällä käyttäen (S) - 1-amino-1- fenyylietikkahappometyyliesterihydrokloridi-suolaa [ (S) -fenyyliglysiinimetyyliesterihydrokloridisuola] (1,0 g, 4,96 mmol) ja (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[N'-(t-butoksikarbonyyli) -2-oksoetyyliamino] -3-fenyylipropionami-15 dia (2,04 g, 4,96 mmol), jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,80 (silikageeli, 10-%:inen metanoli/dikloorime-taani).

Esimerkki 6 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [2- (lH-indol-3-yyli)e-20 tyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyyli) etyyliamino] -3- fenyylipropionamidi Kaavio A, vaihe a: * .*:*. Valmistetaan esimerkin 1 menetelmällä käyttäen 2- .*·*. (lH-indol-3-yyli) etyyliamiinihydrokloridisuolaa (trypta- ; 25 miinihydrokloridisuola) (0,197 g, 1,0 mmol) ja (S)-N-bent- • · · [ / syyli-N-metyyli-2- [N- (t-butoksikarbonyyli) -2-oksoetyyli- * · ;;; amino] -3-f enyylipropionamidia (0,41 g, 1,0 mmol), jolloin ’· ‘ saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,69 (silikageeli, 85-%:inen kloroformi/10-%:inen metanoli/5-%:inen etikka-3 0 happo) .

* > » 20 115135

Esimerkki 7 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(R ja S)-2-(lH-indol- 3-yyli)-1-metyylietyyliamino]-N1-(t-butoksikar-bonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi 5 Kaavio A, vaihe a:

Valmistetaan esimerkin 1 menetelmällä käyttäen (R ja S)-2-(1H-indol-3-yyli)-1-metyylietyyliamiinihydrokloridi-suolaa [ (R ja S)-a-metyylitryptamiinihydrokloridisuola] (0,174 g, 1,0 mmol) ja (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[N-(t-10 butoksikarbonyyli)-2-oksoetyyliamino]- 3 - fenyylipropion-amidia (0,41 g, 1,0 mmol), jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,35 (silikageeli, 10-%:inen metanoli/dikloo- rimetaani).

Esimerkki 8 15 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(S)-2-(1H-indol-3-yy li) -1-karboksyylihappoamidietyyliamino]-N'-(t-bu-toksikarbonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi Kaavio A, vaihe a:

Valmistetaan esimerkin 1 menetelmällä käyttäen (S)-20 2-(lH-indol-3-yyli)-1-(karboksyylihappoamidi)etyyliamii- ,, nihydrokloridisuolaa [(S)-tryptofanamidihydrokloridisuola]

• I

itj* (0,24 g, 1,0 mmol) ja (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[Ν'- (t- ' butoksikarbonyyli)-2-oksoetyyliamino]-3-fenyylipropionami- dia (0,41 g, 1,0 mmol). Tuote puhdistetaan kromatografiän • » I 25 avulla eluoiden 3-%:isella metanolilla/dikloorimetaanilla, !,;,·* jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,62 (silikagee- li, 10-%:inen metanoli/dikloorimetaani) .

i

Esimerkki 9 (S) -N- (2-metoksibentsyyli) -N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (1H-

“M

,···. 3 0 indol-3-yyli) - 1-karboksimetyylietyyliamino] -N' - (t- t « butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropionami-:.’’i di '"· Kaavio A, vaihe a:

Valmistetaan esimerkin 1 menetelmällä käyttäen (S)- .·, ; 35 N- (2-metoksibentsyyli) -N-metyyli-2-[Ν' - (t-butoksikarbonyy- 5 * ! · 115135 21 li) -2-oksoetyyliamino]-3-fenyylipropionamidia (0,71 g, 1,6 mmol) ja (S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyy-liamiinihydrokloridisuolaa [(S)-tryptofaanimetyyliesteri-hydrokloridisuola] (0,45 g, 1,76 mmol). Tuote puhdistetaan 5 kromatografiän avulla eluoiden 50-%:isella etyyliasetaa-

tilla/heksaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC

Rf = 0,56 (silikageeli, 50-%:inen etyyliasetaatti/heksaa-ni) .

Esimerkki 10 10 (S)-N-(3,4,5-trimetoksibentsyyli)-N-metyyli-2- [[(S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyli-amino] -N' - (t-butoksikarbonyyli) etyyliamino] -3-fe-nyylipropionamidi Kaavio A, vaihe a: 15 Valmistetaan esimerkin 1 menetelmällä käyttäen (S) - N-(3,4,5-trimetoksibentsyyli)-N-metyyli-2-[N'-(t-butoksikarbonyyli) - 2-oksoetyyliamino]-3-fenyylipropionamidia (0,25 g, 1,0 mmol) ja (S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksi-metyylietyyliamiinihydrokloridisuolaa [(S)-tryptofaani- 20 metyyliesterihydrokloridisuola] (0,41 g, 1,0 mmol). Tuote puhdistetaan kromatografiän avulla eluoiden peräkkäin ; · . l-%:isella metanolilla/dikloorimetaanilla ja 5-%:isella ;'j‘; me t anoi i 11 a/dikloor ime t aani 1 la, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,83 (silikageeli, 10-%: inen metanoli/di-: 25 kloorimetaani) .

] V Esimerkki 11 ;;; (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yy- ’ li) -1-karboksimetyylietyyliamino] -N' - (t-butoksikar bonyyli) etyyliamino] -3-(naft-2-yyli)propionamidi ··.: 3 0 Kaavio A, vaihe a:

Valmistetaan esimerkin 1 menetelmällä käyttäen (S)- .: N-bentsyyli-N-metyyli-2-[N'-(t-butoksikarbonyyli)-2-okso- * * etyyliamino]-3-(2-naftyyli)-propionamidia (0,46 g, 1,0 • mmol) ja (S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyy- ‘ 35 liamiinihydrokloridisuolaa [(S)-tryptofaanimetyyliesteri- * 115135 22 hydrokloridisuola] (0,26 g, 1,0 mmol). Tuote puhdistetaan kromatografiän avulla eluoiden 5-%:isella metanolilla/di-kloorimetaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,34 (silikageeli, 50-%:inen etyyliasetaatti/heksaani).

5 Esimerkki 12 (S) -N- (2-metoksibentsyyli) -N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (1H-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3-(naft-2-yyli)pro-pionamidi 10 Kaavio A, vaihe a:

Valmistetaan esimerkin 1 menetelmällä käyttäen (S) -N- (2-metoksibentsyyli) -N-metyyli-2- [N' - (t - but oksi karbonyy-li) -2-oksoetyyliamino]-3-(naft-2-yyli) -propionamidia (0,47 g, 0,96 mmol) ja (S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksi-15 metyylietyyliamiinihydrokloridisuolaa [(S)-tryptofaanime-tyyliesterihydrokloridisuola] (0,28 g, 1,1 mmol). Tuote puhdistetaan kromatografiän avulla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 13 20 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2 - [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yy li) -1-karboksimetyylietyyliamino] -N' - (t-butoksikar-bonyyli)propyyliamino] - 3-fenyylipropionamidi Kaavio A, vaihe a: , Valmistetaan esimerkin 1 menetelmällä käyttäen (S)- * · » : ,·, 25 N-bentsyyli-N-metyyli-2- [Ν' - (t-butoksikarbonyyli)-3-okso- "V propyyliamino]-3-fenyylipropionamidia (2 mmol) ja (S)-2- (lH-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamiinihydroklori- i > i ’ disuolaa [ (S)-tryptofaanimetyyliesterihydrokloridisuola] (2 mmol). Tuote puhdistetaan kromatografiän avulla, jol-30 loin saadaan otsikon yhdiste.

> * « > * » · i * · > · t » I ·

i I

»

> I

11 51 3 E

23

Esimerkki 14 (S)-N-(3,4-diklooribentsyyli)-N-metyyli-2-[C(S)-2-(lH-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] -N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3 -(naft-2-yyli)-5 propionamidi

Kaavio A, vaihe a:

Valmistetaan esimerkin 1 menetelmällä käyttäen (S)-N- (3,4-diklooribentsyyli) -N-metyyli-2 - [Ν' - (t-butoksikarbonyyli) -2-oksoetyyliamino] -3-(naft-2-yyli)propionamidia 10 (0,29 g, 0,55 mmol) ja (S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksi- metyylietyyliamiinihydrokloridisuolaa [(S)-tryptofaanime-tyyliesterihydrokloridisuola] (0,14 g, 0,55 mmol). Tuote puhdistetaan kromatografiän avulla eluoiden 5-%:isella metanolilla/dikloorimetaanilla, jolloin saadaan otsikon 15 yhdiste: TLC Rf = 0,58 (silikageeli, 50-%:inen etyyliase-taatti/heksaani).

Esimerkki 15 N-metyyli-N- [ (S) -2- [ [ (S) -2- (1H-indol-3-yyli) -1-kar-boksimetyylietyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyy-2 0 li) etyyliamino] -3-fenyylipropyyli] - (3,4,5-trimetok- si)bentsamidi Kaavio A, vaihe a: . Valmistetaan esimerkin 1 menetelmällä käyttäen (S)- N-metyyli-N-[2-[Ν' -(t-butoksikarbonyyli)-3-oksoetyyliami-25 no]-3-fenyylipropyyli] - (3,4,5-trimetoksi) bentsamidia (0,55 j V mmol) ja (S)-2-(1H-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyli- t * t O) amiinihydrokloridisuolaa [(S)-tryptofaanimetyyliesterihyd- ’ rokloridisuola] (0,55 mmol). Tuote puhdistetaan kromato graf iän avulla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

30 Esimerkki 16 N-metyyli-N- [ (S) -2- [ [ (S) -2- (1H-indol-3-yyli) -1-kar-; boksimetyylietyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyy li) etyyliamino]-3-fenyylipropyyli]bentsamidi Kaavio A, vaihe a: : 35 Valmistetaan esimerkin 1 menetelmällä käyttäen (S)- | N-metyyli-N- [ [2- [N'-(t-butoksikarbonyyli)-2-oksoetyyli- 115135 24 amino]-3-fenyylipropyyli]bentsamidia (0,11 g, 0,27 mmol) ja (S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamiini-hydrokloridisuolaa [(S)-tryptofaanimetyyliesterihydroklo-ridisuola) (0,076 g, 0,3 mmol). Tuote puhdistetaan kroma-5 tografian avulla eluoiden 30-%:isella etyyliasetaatilla/ heksaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 17 N-metyyli-N-[(S)-2- [ [ (S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-kar-boksimetyylietyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyy-10 li)etyyliamino]-3-fenyylipropyyli]bentsimidi

Kaavio A, vaihe a:

Valmistetaan esimerkin 1 menetelmällä käyttäen (S) -N-metyyli-N-[ [2-[N'-(t-butoksikarbonyyli)-2-oksoetyyli-amino]-3-fenyylipropyyli]bentsimidia (0,27 mmol) ja (S)-2-15 (lH-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamiinihydroklori- disuolaa [ (S)-tryptofaanimetyyliesterihydrokloridisuola] (0,3 mmol). Tuote puhdistetaan kromatografiän avulla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 18 20 N-metyyli-N-bentsyyli-N-[(S)-2-[(S)-2-(lH-indol-3- yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino]-N'-(t-butoksi-karbonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropyyliamiini : Kaavio A, vaihe a:

Valmistetaan esimerkin 1 menetelmällä käyttäen (S) - : 25 N-metyyli-N-bentsyyli-N-[2-[N'- (t-butoksikarbonyyli)-2-ok- . soetyyliamino]-3-fenyylipropyyliamiinia (0,5 mmol) ja (S)-

Pj! 2- (lH-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamiinihydroklo- ridisuolaa [ (S) -tryptofaanimetyyliesterihydrokloridisuola] (0,55 mmol). Tuote puhdistetaan kromatografiän avulla, *··; 30 jolloin saadaan otsikon yhdiste.

» » f · t • » t > t * · 115135 25

Esimerkki 19 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2 - [ [ (S) - 2 - [ (lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyyli]-NH-(t-butoksikarbonyyli)-etyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-5 3-fenyylipropionamidi

Suojausvaihe:

Yhdistetään (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(S)-2-[ (lH-indol-3-yyli) -1-karboksimetyyli] etyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyyli) etyyliamino] -3-fenyylipropionamidi (10 10 mmol) ja di-t-butyylidikarbonaatti (10 mmol) dikloorime-taanissa (50 ml). Sitten 24 tunnin kuluttua tuote haihdutetaan tyhjössä ja kromatografoidaan silikageelin avulla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 20 15 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2 - [ [ (S) - 2- [ (lH-indol-3- yyli)-1-karboksimetyyli]-N"-(t-butoksikarbonyyli)-etyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]- 3-(naft-2-yyli)propionamidi Suojausvaihe: 20 Valmistetaan esimerkin 19 menetelmällä käyttäen (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1-; **· karboksimetyylietyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyyli) etyy- : liamino] -3-(naft-2-yyli)propionamidia.

Esimerkki 21 : *. 25 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [[ (S)-2- [ (1- (3-dimetyy- . ,·, liaminopropyyli)-indol-3-yyli)-1-karboksimetyyli]- N" - (t-butoksikarbonyyli) etyyliamino] -N7 - (t-butoksi-karbonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi Kaavio Ά, mahdollinen vaihe b: ···· 30 Yhdistetään (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[ (S)-2- [ (lH-indol-3-yyli) -1-karboksimetyyli] -N" - (t-butoksikarbo-nyyli) etyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyyli) etyyliamino] -3 -f enyylipropionamidi (5 mmol) ja natriumamidi (5 mmol, » » 50-%:inen suspensio tolueenissa) tolueenissa (25 ml). Li-V/ 35 sätään 3-dimetyyliamino-1 -klooripropaania (5 mmol) . Sitten 26 115135 24 tunnin kuluttua reaktioseos jaetaan etyyliasetaatin ja veden kesken. Orgaaninen kerros erotetaan, kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan jäännös. Jäännös kromatografoidaan käyttäen sili-5 kageeliä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 22 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2 -[[(S)-2-(1-karboksi-etyyli-indol-3-yyli)-1-karboksimetyyli-N"-(t-butok-sikarbonyyli)etyyliamino]-N1-(t-butoksikarbonyyli)-10 etyyliamino]-3-(naft-2-yyli)propionamidi

Kaavio A, mahdollinen vaihe b:

Valmistetaan esimerkin 20 menetelmällä käyttäen (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyyli-N"-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-N1 -15 (t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3-(naft-2-yyli)propion-amidia ja etyyliklooriformiaattia ja puhdistetaan kromato-grafian avulla.

Esimerkki 23 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(R)~2-(lH-indol-3-yy-20 li)-1-karboksimetyylietyyliamino]etyyliamino]-3 -fe- .. nyylipropionamidi « t ·

Kaavio A, mahdollinen vaihe c: • > * jvj

•»* · I

N— °V0VHl

:T: V I (D1 CH3 H

h ,nV// ( n v yis) ;:ii; W " o^NyCHi il

Ky 25 ’· Yhdistetään (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(R)-2- (lH-indol-3-yyli) -l-karboksimetyylietyyliarnin°l _N " (t_bu_ 115135 27 toksikarbonyy1i)etyyliamino] - 3-fenyylipropionamidi (0,31 g, 0,5 mmol) ja 4 M suolahappo dioksaanissa (10 ml) ja saatua seosta sekoitetaan 1 tunnin ajan. Se haihdutetaan tyhjössä. Jäännös kromatografoidaan peräkkäin 5 5-%:isella metanolilla/dikloorimetaanilla ja 10-%:isella metanolilla/dikloorimetaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,50 (silikageeli, 10-%: inen metanoli/di-kloorimetaani). HRMS: laskettu arvo yhdisteelle C31H37N4O3 513,2865; havaittu arvo 513,2839.

10 Esimerkki 24 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yy-li) -1-karboksimetyylietyyliamino] etyyliamino] -3-fe-nyylipropionamidi Kaavio A, mahdollinen vaihe c:

H o o O

/S °Y°-CH3 h cyA—> 20 oA^CHb s o' : 25 Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen . (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (1H-indol - 3-yyl i) -1- karboksimetyylietyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyyli) etyy- • » · liamino]-3-fenyylipropionamidia (1,15 g, 1,88 mmol), jol-. loin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,54 (silikageeli, "’l 30 10-%:inen metanoli/dikloorimetaani) ; sulamispiste 85 - Ύ 86 °C. HRMS: laskettu arvo yhdisteelle C31H36N403 512,2787; havaittu arvo 512,2784.

• 1 * » » • * I 1 t 115135 28

Esimerkki 25 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (s) -2- [ (1-metyyli-in-dol-3-yyli) -1-karboksimetyyli] etyyliamino] etyyli-amino]-3-fenyylipropionamidi 5 Kaavio A, mahdollinen vaihe c:

h3C I

vv H y &

Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- [ (1-metyyli-indol-3 -yyli)-1-karboksimetyyli]etyyliamino]-N'-(t-butoksikarbon-yyli)etyyliamino]-3-fenyylipropionamidia (0,88 mmol), jol-20 loin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 26 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(S)-2-fenyyli-l-kar-V ’ boksimetyylietyyliamino]etyyliamino]-3-fenyylipro- ·, ,· pionamiditrifluorietikkahapon disuola j : j 25 Kaavio A, mahdollinen vaihe es • * » n °t0"ch3 h y 0 30 1 O" 115135 29

Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(S)-2-fenyyli-l-karboksi-metyylietyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropionamidia (0,28 g, 0,58 mmol) ja puhdistetaan 5 HPLC:n avulla (C-18 Vydac -pylväs, virtausnopeus 10 ml/min); eluoidaan gradientilla 90 % vettä (0,1 % trifluo-rietikkahappoa) , 10 % asetonitriiliä -> 50 % vettä (0,1 % trifluorietikkahappoa), 50 % asetonitriiliä 25 minuutin kuluessa, sitten -* 100 %:iin asetonitriiliä 25 minuutin 10 kuluessa, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,51 (silikageeli, 10-%:inen metanoli/dikloorimetaani). HRMS : laskettu arvo yhdisteelle ^29^^3()3 474,2757; havaittu arvo: 474,2755.

Esimerkki 27 15 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(S)-1-fenyyli-l-kar- boksimetyylimetyyliamino] etyyliamino] -3-fenyylipro-pionamidi

Kaavio A, mahdollinen vaihe c:

; VV H V

? ch

O N

: : : 25 .

s cy . Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen

♦ I I

30 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(S)-1-fenyyli-1-karboksi- * *; · ’ metyylimetyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyyli) etyyliamino] - 3-fenyylipropionamidia (0,2 g, 0,3 6 mmol) ja puhdistetaan kromatografiän avulla eluoiden 5-%:isella metanolilla/di- kloorimetaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste värittö-

t » I

115135 30 mänä öljynä: TLC Rf = 0,76 (silikageeli, 10-%:inen metano-li/dikloorimetaani).

Yhdisteen C28H33N303 · 0,25 H20 alkuaineanalyysi: Laskettu: C 72,47; H 7,23; N 9,05.

5 Havaittu: C 72,47; H 7,53; N 9,10.

Esimerkki 28 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[2-(lH-indol-3-yyli)-e tyyli amino] ] etyyliamino] -3-fenyylipropionamiditri-fluorietikkahapon disuola 10 Kaavio A, mahdollinen vaihe c: /CH3

0 N

σ'

Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen ·' " (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[ [2-(lH-indol-3-yyli) etyyli- ν' amino] ] -N' - (t-butoksikarbonyyli) etyyliamino] -3-fenyylipro- pionamidia (0,13 g, 0,24 mmol) ja puhdistetaan kromatogra-

t I

::: 25 fian avulla eluoiden 5-%:isella metanolilla/dikloorime- ; taanilla ja sitten HPLC:n avulla (C-18 Vydac -pylväs, vir- ;V, tausnopeus 10 ml/min) ; eluoidaan gradientilla 90 % vettä (0,1 % trifluorietikkahappoa) , 10 % asetonitriiliä -» 50 % vettä (0,1 % trifluorietikkahappoa), 50 % asetonitriiliä \\\l 30 25 minuutin kuluessa, sitten -* 100 %:iin asetonitriiliä 25

; minuutin kuluessa, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC

Rf = 0,37 (silikageeli, 10-%:inen metanoli/dikloorimetaa-ni) . HRMS: laskettu arvo yhdisteelle C29H35N40 455,2811; Λ havaittu arvo: 455,2834.

* I

115135 31

Esimerkki 29 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(R ja S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-metyylietyyliamino]etyyliamino]-3 -fenyy-lipropionamiditrifluorietikkahapon disuola 5 Kaavio Ά, mahdollinen vaihe c: r

rCk Λ n J

10 / /''^^'''^"><9 and n ru S) oVHl &

Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(R ja S)-2-(lH-indol-3-yyli ) - 1-metyylietyyliamino]-N'- (t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3-f enyylipropionamidia (0,192 g, 0,39 mmol) ja 20 puhdistetaan kromatografiän avulla eluoiden 5-%:isella metanolilla/dikloorimetaanilla ja sitten HPLC:n avulla : '* (C-18 Vydac -pylväs, virtausnopeus 10 ml/min); eluoidaan v ·* gradientilla 90 % vettä (0,1 % trifluorietikkahappoa) , : .· 10 % asetonitriiliä -* 50 % vettä (0,1 % trifluorietikka- j ; : 25 happoa), 50 % asetonitriiliä 25 minuutin kuluessa, sitten . -> 100 %:iin asetonitriiliä 25 minuutin kuluessa, jolloin saadaan otsikon yhdiste kiinteänä aineena: TLC Rf = 0,38 (silikageeli, 10-%:inen metanoli/dikloorimetaani).

Yhdisteen C30H36N3O-2 C2HF302-0,70 H20 alkuaineana- 30 lyysi: ’ Laskettu: C 57,57; H 5,60; N 7,90.

:\i Havaittu: C 57,59; H 5,74; N 7,89.

f < i < I » · • ( 32 115135

Esimerkki 30 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yy- li) -l-karboksyylihappoamidietyyliamino] etyyliami-no]-3-fenyylipropionamidi 5 Kaavio A, mahdollinen vaihe c:

H I

Ο^ΝΗ2 10 > o^CHi

(V

,s ^

Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1-karboksyylihappoamidietyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyy-li)etyyliamino]-3-fenyylipropionamidia (0,36 g, 0,59 mmol) 20 ja puhdistetaan kromatografiän avulla eluoiden 5-%:isella metanolilla/dikloorimetaanilla, jolloin saadaan otsikon : *· yhdiste: TLC Rf = 0,56 (silikageeli, 10-% : inen metanoli/di- V : kloorimetaani). HRMS: laskettu arvo yhdisteelle ε30Η36Ν5Ο2 •‘t 498,2869; havaittu arvo 498,2865.

• t i t » t t « » t * > · t

» I

115135 33

Esimerkki 31 (S) -N- (2-metoksibentsyyli) -N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (1H-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino]etyy-liamino]-3-fenyylipropionamidi 5 Kaavio A, mahdollinen vaihe c:

/“η °Y0"CH3 H J

O N

(V

15 ^ och3

Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen (S)-N-(2-metoksibentsyyli)-N-metyyli-2-[[(S)-2-(lH-indol-20 3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino]-N'-(t-butoksikar- bonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropionamidia (0,15 g, 0,24 " mmol) ja puhdistetaan kromatografiän avulla eluoiden *·' ' 10-%:isella metanolilla/dikloorimetaanilla, jolloin saa- '·1·' daan otsikon yhdiste. HRMS: laskettu arvo yhdisteelle M: 25 C32H39N4°4 543,2971; havaittu arvo: 543,2980.

* 1 1 • 1 » * ' » * » t 115135 34

Esimerkki 32 (S) -N- (3,4,5-trimetoksibentsyyli)-N-metyyli-2-[[(S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyy-liamino]etyyliamino]-3 - fenyylipropionamidi 5 Kaavio A, mahdollinen vaihe c: 10 Γ /CH3

O N

h3co

Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen (S) -N- (3,4,5-trimetoksibentsyyli) -N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (1H-20 indol-3-yyli)-1-karboksimetyyli-N'-(t-butoksikarbonyyli)-etyyliamino]etyyliamino]-3-fenyylipropionamidia (0,48 g, ' 0,69 mmol) ja puhdistetaan kromatografiän avulla eluoiden * 3-%:isella metanolilla/dikloorimetaanilla, jolloin saadaan ’·,,/ otsikon yhdiste.

: j ; 25 Yhdisteen C34H42N406 alkuaineanalyysi:

Laskettu: C 67,75; H 7,02; N 9,29.

Havaittu: C 67,36; H 6,98; N 9,12.

* · t | 115135 35

Esimerkki 33 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-γγ-li) -1-karboksimefcyylietyyliamino]etyyliamino]-3-(naft-2-yyli)propionamidi 5 Kaavio A, mahdollinen vaihe es

/YY0'- H

10 Γ oA^"3 cy 15

Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino] -3-(naft-2-yyli)propionamidia (0,34 g, 0,46 mmol) 20 ja puhdistetaan kromatografiän avulla eluoiden 5-%:isella metanolilla/dikloorimetaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste. TLC Rf = 0,75 (silikageeli, 85-%:inen kloroformi, ; . ; 10-%:inen metanoli, 5-%:inen etikkahappo) . HRMS: laskettu : arvo yhdisteelle C35H39N4°3 563,3022; havaittu arvo: : .·. 25 563,2996.

• t » 36 115135

Esimerkki 34 (S) -N- (2-metoksibentsyyli) -N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (1H-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino]etyyli-amino]-3-(naft-2-yyli)propionamidi 5 Kaavio A, mahdollinen vaihe c: 10 W H oA^

cA

15

Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen (S)-N-(2-metoksibentsyyli)-N-metyyli-2-[[(S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino]-N'-(t-butoksikar-bonyyli)etyyliamino]-3-(naft-2-yyli)propionamidia (1 20 mmol). Haihdutetaan tyhjössä. Kromatografoidaan, jolloin saadaan otsikon yhdiste. HRMS: laskettu arvo yhdisteelle : ’·· c32h39N4°4 543,2971; havaittu arvo: 543,2980.

v · Esimerkki 35 : (S)-N-(3,4-diklooribentsyyli)-N-metyyli-2-[[(S)-2- ! 25 (lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino] - * * I * ; ; . etyyliamino]-3-(naft-2-yyli)propionamiditrifluori- , etikkahapon disuola

Kaavio A, mahdollinen vaihe c: ·:· h y Ί y CH3 h ο·ι sK /CH3

O N

35 115135 37

Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen (S)-N-(3,4-diklooribentsyyli)-N-metyyli-2 -[[(S)-2-(lH-in-dol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] -N' - (t-butoksi-karbonyyli) etyyliamino] -3- (naf t-2-yyli) propionamidia (0,29 5 g, 0,39 mmol) ja puhdistetaan kromatografiän avulla eluoi-den 5-%:isella metanolilla/dikloorimetaanilla ja sitten HPLC:n avulla (C-18 Vydac -pylväs, virtausnopeus 10 ml/min); eluoidaan gradientilla 90 % vettä (0,1 % trifluo-rietikkahappoa) , 10 % asetonitriiliä -» 50 % vettä (0,1 % 10 trifluorietikkahappoa), 50 % asetonitriiliä 25 minuutin kuluessa, sitten -> 100 %:iin asetonitriiliä 25 minuutin kuluessa, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,57 (silikageeli, 10-%:inen metanoli/dikloorimetaani). Esimerkki 36 15 N-metyyli-N- [ (S) - 2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1-kar boksimetyylietyyliamino] etyyliamino]-3-fenyylipro-pyyli] - (3,4,5-trimetoksi)bentsamiditrifluorietikka-hapon disuola

Kaavio A, mahdollinen vaihe c:

20 /V

1·. __N η, 0;V'0''CH3 h li „ Cr-V-Y c„, ^CH3 • * » 0"·· 4 30 H 3θ/γ

H3CO

• ·

Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen (S) -N-metyyli-N- [2- [N' - (t-butoksikarbonyyli) -2-oksoetyyli-amino]-3-fenyylipropyyli] - (3,4,5-trimetoksi) bentsamidia ja ; 35 puhdistetaan kromatografiän avulla eluoiden 5-%:isella 115135 38 metanolilla/dikloorimetaanilla ja sitten HPLC:n avulla (C-18 Vydac -pylväs, virtausnopeus 10 ml/min); eluoidaan gradientilla 90 % vettä (0,1 % trifluorietikkahappoa), 10 % asetonitriiliä -» 50 % vettä (0,1 % trifluorietikka-5 happoa), 50 % asetonitriiliä 25 minuutin kuluessa, sitten -» 100 %:iin asetonitriiliä 25 minuutin kuluessa, jolloin saadaan otsikon yhdiste: HRMS: laskettu arvo yhdisteelle C34H43N4°6 603,3182; havaittu arvo: 603,3187.

Esimerkki 37 10 N-metyyli-N- [ (S) -2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1-kar- boksimetyylietyyliamino]etyyliamino]-3-fenyylipro-pyyli]bentsamiditrifluorietikkahapon disuola Kaavio A, mahdollinen vaihe c: /s

15 h II I

n__ cu .0^

rCk Ϊ CH3 N J

^' H k /CH3

20 N

e > I » : : Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen : 25 N-metyyl i-N- [ ( S ) - 2 - [ [ ( S ) - 2 - (1H-indol - 3 - yy 1 i ) - 1 - tl1 · : karboksimetyylietyyliamino]-N'- (t-butoksikarbonyyli) etyy- liamino]-3-fenyylipropyyli] bentsamidia (0,16 g, 0,26 mmol) ja puhdistetaan kromatografiän avulla eluoiden 5-%:isella metanolilla/dikloorimetaanilla ja sitten HPLC:n avulla 30 (C-18 Vydac -pylväs, virtausnopeus 10 ml/min); eluoidaan * » gradientilla 90 % vettä (0,1 % trif luorietikkahappoa) , 10 % asetonitriiliä -» 50 % vettä (0,1 % trifluorietikka-*:1·1 happoa), 50 % asetonitriiliä 25 minuutin kuluessa, sitten -1 100 %:iin asetonitriiliä 25 minuutin kuluessa, jolloin » ♦ 4 · t 115135 39 saadaan otsikon yhdiste: HRMS: laskettu arvo yhdisteelle C31H37N403 513,2865; havaittu arvo: 513,2872.

Esimerkki 38 (S) -N-metyyli-N- [ (S) -2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1- 5 karboksimetyylietyyliamino]etyyliamino]-3-fenyyli- propyyli]bentsimidi

Kaavio A, mahdollinen vaihe c: 10 JS °Y°^h3 γ ( / v (S) W H o^n"CH3 15 /'v'kj u

Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen (S) -N-metyyli-N- [ (S) -2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1-karbok-20 simetyylietyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyyli) etyyliami no]-3-fenyylipropyyli] bentsimidiä (0,26 mmol) ja puhdis-: " tetaan kromatografiän avulla, jolloin saadaan otsikon yh- : : diste.

t t I · * I · 1 J » t 40 115135

Esimerkki 39 (S) -N-metyyli-N-bentsyyli-N- [ (S) -2- [ (S) -2- (lH-in-dol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino]etyyli-amino]-3-fenyylipropyyliamiini 5 Kaavio A, mahdollinen vaihe c: N O^JO^

Y

H ζ^Η3 ex'

Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen (S)-N-metyyli-N-bentsyyli-N-[(S)-2-[(S)-2-(lH-indol-3-yy-li) -1-karboksimetyylietyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyy-20 li)etyyliamino]-3-fenyylipropyyliamiinia (0,40 mmol) ja puhdistetaan kromatografiän avulla, jolloin saadaan otsi- · kon yhdiste.

: Esimerkki 40 : : (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2-[ [ (S) -2-[ (1- (3-dimetyy- 25 liaminopropyyli) indol-3-yyli)-1-karboks ime tyyli] - . .·. etyyliamino] etyyliamino]-3-fenyylipropionamiditri- fluorietikkahapon trisuola Kaavio A, mahdollinen vaihe es

3 0 N—. ί J

: : ta _°ίγ'0^Η3 H

V. X·**' H /CH3

3 5 ON

o" / 115135 41

Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- [ (1- (3-dimetyyliamino-propyyli)-indol-3-yyli)-1-karboksimetyyli]-N"-(t-butoksi-karbonyyli)etyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyli -5 amino]-3-fenyylipropionamidia (0,40 mmol) ja puhdistetaan HPLC-kromatografiän avulla, jolloin saadaan otsikon yhdiste .

Esimerkki 41 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(S)-2-(1-karboksi-10 etyyli-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] - etyyliamino]-3-((naft-2-yyli))propionamiditrifluo-rietikkahapon disuola Kaavio A, mahdollinen vaihe c:

O

γΧ ν'»· h /-Γ) /γΛΛ —C )—' YJr \^(s)tr ^ Ys) \_/ H oAX"3 2 0 | : ; Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen ; 25 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(S)-2-(1-karboksietyyli-in- . , 1, dol-3-yyli) -1-karboksimetyyli-N" - (t-butoksikarbonyyli) - ,·;1, etyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3 - I I | ((naft-2-yyli))propionamidia (0,40 mmol) ja puhdistetaan , kromatografiän avulla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

» ' i 42 115135

Esimerkki 42 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- f f (S) -2- (lH-indol-3-yy-li) -1-karboksietyyliamino] etyyliamino] -3-fenyyli-propionamidi 5 Kaavio A# mahdollinen vaihe b: H ΡΊ iL °γΟΗ cA/*5 cy

Yhdistetään (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[S)-2-(1H-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] etyyliamino] -3-fenyylipropionamidi (0,48 g, 0,93 mmol) ja 1 M natriumhy-20 droksidi (10 ml, 10 mmol) etanolissa (20 ml) ja saatua seosta sekoitetaan inertissä ilmakehässä 18 tunnin ajan.

* * · Se laimennetaan vedellä ja uutetaan etyyliasetaatilla.

• « ' Vesipitoinen kerros tehdään happamaksi 1 N suolahapolla ja uutetaan etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros kuivataan • ; : 25 MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin . . . saadaan otsikon yhdiste kiinteänä aineena: TLC Rf = 0,43 (silikageeli, 85-%:inen kloroformi, 10-%:inen metanoli, 5-%:inen etikkahappo). HRMS: laskettu arvo yhdisteelle , ^30^35^4^3 499,2709; havaittu arvo: 499,2696.

43 115155

Esimerkki 43 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (s) -2- (lH-indol-3-yy-li)-1-karboksimetyylietyyliamino]propyyliamino]-3-f enyy1ipropionamidi 5 Kaavio A, mahdollinen vaihe c s r

Λ\ (S) N H

10 Mhrr ύ®.

V 0^0'CH3 „ " σ'

Valmistetaan esimerkin 23 menetelmällä käyttäen (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2 - [ [ (S) - 2- (1H-indol-3-yyli) -1-ka rboksi me tyyl ie tyyli amino] -N' - (t-butoksikarbonyyli) propyyliamino] -3-fenyylipropionamidia (2 mmol). Puhdistetaan 20 kromatografiän avulla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Yleinen synteettinen menetelmä on esitetty kaavios-: " sa B kaaviossa A lähtöaineena käytetyn aldehydin valmista- v ' miseksi, jolla on rakenne (3), jossa Gx on -CH2- ja G2 on -C (0) - . Reagenssit ja lähtöaineet ovat helposti alan am-j.j : 25 mattimiehen saatavissa. Kaaviossa B kaikki substituentit ; ovat kuten edellä on määritelty ellei toisin mainita.

* * I

44 Λ -, r 115135 ί

Kaavio B

Os*^.OCH3 0^/OCHj h2n/"^

Mahdollinen H

Ar2 vaihe-3. > Ar2 (11) <’2> 10

Mahdollinen Mahdollinen i vaihe c vaihe b f j ! 15 o. .och3 °y0CK! j 1 Mahdollinen „n vaihe d 7 20 H hl > -~ | | C02R5 Ar2 CO2R5 Ar2 : : 04) · : (13) : 25

Vaihe e : ' °γ0Η l i (15) ^°2R5 Arz V.: 35 '· Vaihe f 115135 45

Kaavio B (jatkuu)

X

η2νγ ^ ΑΓ2

Vaihe f 10

Mahdollinen/ vaihe j / ' .Ar,

15 °^/0H

I °YNN:h3

HN^ I

20 CO2R5 A r2 (13) C02R5 Ar2 ·’ (16) i, : 25 Mahdollinen / \ vaihe 1 /

Ar ' ·;;; 30 Ύ XH3 •,o | . . CO2R5 Ar2 v-: 35 :X: (17) I « 115135 I Kaavio B (jatkuu) .An _^Ar i 5 OH Y XH3 CH3

10 I Mahdollinen I

CO2R5 Ar2 „_ CO2R5 ^2 vaihe h (18) (16) 15

Mahdollinen Mahdollinen vaihe i vaihe g 2 0 An ^An :T; O. .N.

O XH3 ch3 i.:'i 25 JL °\X\ A.

I I I

CO2R5 Ar2 H CO2R5 ΑΓ2 (3), jossa p-1 on 2, (3), jossa p-1 on 1, ·· on -CH2- ja ,G^ on -CH^- ja *··, 30 G2 on -C(O)-. G2 on -C(OH)-.

47 115135

Kaavion B mahdollisessa vaiheessa rakenteen (11) mukainen sopiva aminoesteri tai rakenteen (11) mukaisen sopivan aminoesterin suola allyloidaan rakenteen (12) mukaisen allyyliaminoesterin saamiseksi.

5 Rakenteen (11) mukainen sopiva aminoesteri on aminoesteri, jonka stereokemia ja Ar2 ovat kuten on toivottua kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa. Rakenteen (11) mukainen sopiva aminoesteri voi myös olla aminoesteri, jonka stereokemia on kuten on toivottua kaavan (1) mukai-10 sessa lopputuotteessa ja Ar2 tuottaa suojauksen poistamisen jälkeen Ar2-ryhmän, joka on toivottu kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa. Rakenteen (11) mukainen sopiva aminoesteri voi myös olla aminoesteri, jonka stereokemia tuottaa erottamisen jälkeen stereokemian, joka on toivottu kaavan 15 (1) mukaisessa lopputuotteessa, ja Ar2 on kuten sen toivo taan olevan kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa. Rakenteen (11) mukainen sopiva aminoesteri voi myös olla aminoesteri, jonka stereokemia tuottaa erottamisen jälkeen stereokemian, joka on toivottu kaavan (1) mukaisessa loppu-20 tuotteessa, ja Ar2 tuottaa suojauksen poistamisen jälkeen Ar2-ryhmän, joka on toivottu kaavan (1) mukaisessa loppu-: tuotteessa.

Rakenteen (11) mukaisia aminoestereitä valmistetaan .'1 helposti a-aminohapoista käyttämällä alalla tunnettuja : 2 5 menetelmiä. Tarvittavat a-aminohapot voidaan saada käyttä-

• I I

mällä alalla tunnettuja menetelmiä tai niitä vastaavia !!! menetelmiä, kuten esimerkiksi on selostettu lähteissä: D.

A. Evans, et ai., JACS 112, 4011 - 4030 (1990); S. Ikegami et ai., Tetrahedron 44, 5333 - 5342 (1988); W. Oppolzer et “· 30 ai., Tet. Lets. 30, 6009 - 6010; "Synthesis of Optically ',,,· Active a-Amino-Acids" ,· R. M. Williams (Pergamon Press,

Oxford 1989); toimittaja M. J. O'Donnell: "a-Amino-Acid- ,,,.: Synthesis", Tetrahedron Symposia, painossa, No. 33, Tetra hedron 44, No. 17 (1988); U. Schöllkopf, Pure Appi. Chem.

V.: 35 55, 1799 (1983); U. Hengartner et al. , JOC 44, 3748 - 3752 • * 48 115135 (1979); M. J. O'Donnell et ai., Tet. Lets., 2641 - 2644 (1978); M. J. O'Donnell et ai., Tet. Lets., 23, 4255 -4258 (1982); M. J. O'Donnell et ai., JAOS 110, 8520 - 8525 (1988).

5 Esimerkiksi rakenteen (11) mukainen sopiva amino- esteri tai rakenteen (11) mukaisen sopivan aminoesterin suola saatetaan kosketukseen 1-3 mooliekvivalentin kanssa allyylibromidia tai allyylikloridia. Allyylibromidi tai allyylikloridi lisätään edullisesti annoksittain reaktion 10 aikana. Käytettäessä rakenteen (11) mukaisen sopivan aminoesterin suolaa reaktio toteutetaan siten, että läsnä on ekvimolaarinen määrä sopivaa emästä, kuten trietyyliamii-nia tai di-isopropyylietyyliamiinia. Reaktio toteutetaan sopivassa liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa. Yleen-15 sä reaktio toteutetaan lämpötilassa, joka on 0 °C:sta liuottimen palautusjäähdytyslämpötilaan. Yleensä reaktiot vaativat aikaa 1-72 tuntia. Tuote voidaan eristää ja puhdistaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten uuttoa, haihduttamista, kromatografiaa ja uudelleen-20 kiteyttämistä.

,, Kaavion B mahdollisessa vaiheessa b rakenteen (12) 5 “ mukaisen allyyliaminoesterin tai rakenteen (12) mukaisen « · *· · allyyliaminoesterin suolan allyyliamidiryhmä muutetaan

• I

*...· karbamaatiksi käyttämällä sopivaa karbamaatin muodostavaa · 25 reagenssia, jolloin saadaan rakenteen (14) mukainen yhdis- te.

Sopiva karbamaatin muodostava reagenssi on reagens-si, joka siirtää -C02R5-ryhmän amiiniin, kuten metyylikloo-riformiaatti, etyyliklooriformiaatti, propyyliklooriformi- »»· · .·*·, 30 aatti, isobutyyliklooriformiaatti, bentsyyliklooriformiaat- * t ti ja di-t-butyylidikarbonaatti jne.

* > · ’· Esimerkiksi rakenteen (12) mukainen allyyliaminoes- *”* teri tai rakenteen (12) mukaisen allyyliaminoesterin suola t saatetaan kosketukseen reagenssin kanssa, joka siirtää ; 35 -CC>2R5-ryhmän amiiniin. Käytettäessä rakenteen (12) mukai- ' * * > » 49 115135 sen allyyliaminoesterin suolaa reaktio toteutetaan siten, että läsnä on ekvimolaarinen määrä sopivaa emästä, kuten trietyyliamiinia tai di-isopropyylietyyliamiinia. Kun reaktio toteutetaan käyttäen karbamaatin muodostavaa rea-5 genssia, joka vapauttaa hapon karbamaatin muodostuessa, kuten metyyliklooriformiaattia, etyyliklooriformiaattia, propyyliklooriformiaattia, isobutyyliklooriformiaattia jne, niin käytetään ekvimolaarista määrää sopivaa emästä, kuten trietyyliamiinia tai di-isopropyylietyyliamiinia, vapautu-10 van hapon neutraloimiseksi. Reaktio toteutetaan sopivassa liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa, dimetyyliform-amidissa, etyyliasetaatissa tai dimetyyliformamidi/etyyliasetaatti-seoksissa . Yleensä reaktiot toteutetaan ympäröivässä lämpötilassa. Tuote voidaan eristää ja puhdistaa 15 käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten uut-toa, haihduttamista, kromatografiaa ja uudelleenkiteyttä-mistä.

Vaihtoehtoisesti karbamaatti, jolla on rakenne (14), jossa Rs on t-butyyli, voidaan valmistaa käyttämällä 20 kaavion B mahdollisia vaiheita c ja d.

Kaavion B mahdollisessa vaiheessa c rakenteen (11) ; ‘ mukainen sopiva aminoesteri tai rakenteen (11) mukaisen ' * sopivan aminoesterin suola saatetaan kosketukseen sopivan 1 , karbamaatin muodostavan reagenssin kanssa rakenteen (13) > ; I 25 mukaisen yhdisteen saamiseksi.

: : : Sopiva karbamaatin muodostava reagenssi käytettä- väksi tässä vaihtoehtoisessa tavassa rakenteen (14) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi on reagenssi, joka siirtää t-butyylikarbamaatin, kuten di-t-butyylidikar-30 bonaatti.

Rakenteen (11) mukaisessa sopivassa aminoesterissä */·· tai rakenteen (11) mukaisen sopivan aminoesterin suolassa stereokemia ja Ar2 ovat kuten niiden toivotaan olevan kaa-van (1) mukaisessa tuotteessa tai ne tuottavat erottamisen 35 tai suojauksen poistamisen jälkeen stereokemian tai Ar2- 50 Π5135 ryhmän, jotka ovat kuten niiden toivotaan olevan kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa.

Esimerkiksi rakenteen (11) mukainen aminoesteri tai rakenteen (11) mukaisen aminoesterin suola saatetaan kos-5 ketukseen reagenssin kanssa, joka siirtää t-butoksikarbo-nyyliryhmän, esimerkkinä di-t-butyylidikarbonaatti. Käytettäessä rakenteen (11) mukaisen aminoesterin suolaa reaktio toteutetaan siten, että läsnä on ekvimolaarinen määrä sopivaa emästä, kuten trietyyliamiinia tai di-iso-10 propyylietyyliamiinia. Reaktio toteutetaan sopivassa liuottimessa, kuten dimetyyliformamidissa, etyyliasetaatissa tai dimetyyliformamidi/etyyliasetaatti-seoksissa. Yleensä reaktiot toteutetaan ympäröivässä lämpötilassa. Tuote voidaan eristää ja puhdistaa käyttämällä alalla hy-15 vin tunnettuaa tekniikkaa, kuten uuttoa, haihduttamista, kromatografiaa ja uudelleenkiteyttämistä.

Kaavion B mahdollisessa vaiheessa d karbamaatties-teri, jolla on rakenne (13), jossa R5 on t-butyyli, ally-loidaan, jolloin saadaan allyylikarbamaattiesteri, jolla 20 on rakenne (14), jossa R5 on t-butyyli.

Esimerkiksi rakenteen (13) mukainen karbamaatti-: . esteri saatetaan kosketukseen allyylibromidin tai allyyli- : : kloridin kanssa. Reaktio toteutetaan sopivan emäksen, ku- . ten natriumhydridin tai natriumbis(trimetyylisilyyli)ami- : 25 din, läsnä ollessa. Reaktio toteutetaan sopivassa liuotti- t Γ ? * V messa, kuten tetrahydrofuraanissa, dimetyyliformamidissa * <' » tai tetrahydrofuraani/dimetyyliformamidi-seoksissa. Reak- * » * > * • tio toteutetaan lämpötilassa, joka on 0 °C-.sta liuottimen palautusjäähdytyslämpötilaan. Tuote voidaan eristää ja i i * >·.: 30 puhdistaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten uuttoa, haihduttamista, kromatograf iaa tai uudel- : leenkiteyttämistä.

» » .Kaavion B vaiheessa e rakenteen (14) mukainen ai- * · • lyylikarbamaattiesteri hydrolysoidaan, jolloin saadaan 35 rakenteen (15) mukainen allyylikarbamaattihappo.

t > 51 115135

Esimerkiksi rakenteen (14) mukainen allyylikarba-maattiesteri saatetaan kosketukseen sopivan emäksen, kuten natriumhydroksidin, litiumhydroksidin tai kaliumhydroksi-din, kanssa. Reaktio toteutetaan sopivassa liuottimessa, 5 kuten metanolissa, etanolissa, vedessä, metanoli/vesi-seoksissa, etanoli/vesiseoksissa tai tetrahydrofuraani/ vesiseoksissa. Yleensä reaktio toteutetaan ympäröivässä lämpötilassa. Yleensä reaktio vaatii aikaa 2-72 tuntia. Tuote voidaan eristää ja puhdistaa käyttämällä alalla hy-10 vin tunnettua tekniikkaa, kuten happamaksi tekemistä, suodatusta, uuttoa, haihduttamista tai uudelleenkiteyttämis-tä.

Kaavion B vaiheessa f rakenteen (15) mukainen al-lyylikarbamaattihappo saatetaan amidointireaktioon sopivan 15 amiinin kanssa rakenteen (16) mukaisen allyylikarbamaat-tiamidin saamiseksi.

Rakenteen HN (CH3) CH2Ari mukainen sopiva amiini on amiini, jossa Ari-ryhmä on kuten on toivottua kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa tai se tuottaa suojauksen pois-20 tamisen jälkeen Arx-ryhmän, joka on kuten on toivottua kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa.

* “ Amidointireaktio voi edetä aktivoidun välituotteen, V · kuten seka-anhydridin tai (0)-hydroksibentsotriatsolin,

* t I

kautta, joka voidaan valmistaa, mutta ei välttämättä eris-: 25 tää, ennen sopivan amiinin, HN (CH3) CH2Ari:n, lisäämistä.

; Esimerkiksi rakenteen (15) mukainen allyylikarba- maattihappo saatetaan kosketukseen 1,2 - 1,7 ekvivalentin kanssa sopivaa emästä, kuten N-metyylimorfoliinia, sopi-vassa liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa. Yleensä '!!! 30 reaktioseos jäähdytetään noin -50 - 0 °C:n lämpötilaan, ;* edullisesti -25 - 20 °C:n lämpötilaan, ennen kuin lisätään 1,2 - 1,7 ekvivalenttia isobutyyliklooriformiaattia. Reak-tioseosta sekoitetaan noin 30 minuutin - 3 tunnin ajan mahdollistaen seka-anhydridin, aktivoidun välituotteen,

* I

! 35 muodostumisen. Pitäen lämpötila välillä -50 - 0 °C lisä- * » » > » 52 115735 tään rakenteen HN (CH3)CH2Ar1 mukainen sopiva amiini. Reak-tioseos voidaan lämmittää huoneenlämpötilaan amiinin lisäämisen tapahduttua. Reaktio vaatii aikaa 2-48 tuntia.

Tuote voidaan eristää ja puhdistaa käyttämällä alalla hy-5 vin tunnettua tekniikkaa, kuten uuttoa, haihduttamista, kromatografiaa tai uudelleenkiteyttämistä.

Vaihtoehtoisesti esimerkiksi rakenteen (15) mukainen allyylikarbamaattihappo saatetaan kosketukseen lievän ylimäärän kanssa sopivaa amiinia, HN (CH3)CH2Ar1: a, ja 10 1-hydroksibentsotriatsolihydraatin kanssa, kun läsnä on lievä molaarinen ylimäärä kytkentäainetta, kuten disyklo-heksyylikarbodi-imidiä tai 1-(3-dimetyyliaminopropyyli)-3-etyylikarbodi-imidiä. Reaktio toteutetaan sopivan emäksen, kuten di-isopropyylietyyliamiinin, läsnä ollessa. Reaktio 15 toteutetaan sopivassa liuottimessa, kuten dimetyyliform-amidissa, dikloorimetaanissa tai kloroformissa. Tuote voidaan eristää ja puhdistaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten uuttoa, haihduttamista, kromatogra-fiaa tai uudelleenkiteyttämistä.

20 Vaihtoehtoisesti rakenteen (16) mukainen allyyli- karbamaattiamidi voidaan valmistaa aminohaposta kaavion B mahdollisten vaiheiden j, k ja 1 mukaisesti.

Kaavion B mahdollisessa vaiheessa j rakenteen (11) mukainen sopiva aminohappo tai rakenteen (11) mukaisen ; 2 5 sopivan aminohapon suola saatetaan kosketukseen sopivan /V karbamaatin muodostavan reagenssin kanssa rakenteen (17) ,'!! mukaisen yhdisteen saamiseksi.

• Sopiva karbamaatin muodostava reagenssi käytettä väksi tässä vaihtoehtoisessa tavassa rakenteen (13) mu- » I * · >·.: 30 kaisten yhdisteiden valmistamiseksi on reagenssi, joka siirtää t-butyylikarbamaatin, kuten di -1-butyylidikarbo-: naatti.

1 t ·

Rakenteen (11) mukaisessa sopivassa aminohapossa tai rakenteen (11) mukaisen sopivan aminohapon suolassa 35 stereokemia ja Ar2 ovat kuten on toivottua kaavan (1) mu- 53 11 5135 kaisessa lopputuotteessa tai ne tuottavat erottamisen tai suojauksen poistamisen jälkeen stereokemian tai Ar2-ryhmän, jotka ovat toivottuja kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa .

5 Esimerkiksi rakenteen (11) mukainen sopiva amino happo tai rakenteen (11) mukaisen sopivan aminohapon suola saatetaan kosketukseen reagenssin kanssa, joka siirtää t-butoksikarbonyyliryhmän, kuten esimerkiksi di-t-butyylidikarbonaatin kanssa. Reaktio toteutetaan siten, 10 että läsnä on ekvimolaarinen määrä sopivaa emästä, kuten trietyyliamiinia tai di-isopropyylietyyliamiinia. Käytettäessä rakenteen (11) mukaisen sopivan aminohapon suolaa käytetään ylimääräistä ekvimolaarista määrää sopivaa emästä. Reaktio toteutetaan sopivassa liuottimessa, kuten di-15 metyyliformamidissa, etyyliasetaatissa tai dimetyyliform- amidi/etyyliasetaatti-seoksissa. Yleensä reaktiot toteu-teaan ympäröivässä lämpötilassa. Tuote voidaan eristää ja puhdistaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten uuttoa, haihduttamista, kromatografiaa ja uudelleen-20 kiteyttämistä.

Kaavion B vaiheessa k rakenteen (13) mukainen : . t-BOC:lla suojattu aminohappo saatetaan amidointireaktioon ; sopivan amiinin kanssa, kuten yleisesti on opetettu kaa- vion B vaiheessa f, rakenteen (17) mukaisen t-BOC:lla suo-

• P

t P

; 25 jatun aminoamidin saamiseksi.

• · ’ V Rakenteen HN(CH3) CH2Ar± mukainen sopiva amiini on ;;; amiini, jossa Arx on kuten kaavan (1) mukaisessa tuotteessa i » • ’ on toivottua tai se tuottaa suojauksen poistamisen jälkeen

Ar1-ryhmän, joka on kuten on toivottua kaavan (1) mukaises-30 sa lopputuotteessa.

·,,,· Kaavion B vaiheessa 1 rakenteen (17) mukainen : t-B0C:lla suojattu aminoamidi allyloidaan, kuten yleisesti on opetettu kaavion B mahdollisessa vaiheessa d, jolloin • « - saadaan allyylikarbamaattiamidi, jolla on rakenne (16) , ‘-V 35 jossa R5 on t-butyyli.

115135 54

Kaavion B mahdollisessa vaiheessa g rakenteen (16) mukainen allyylikarbamaattiamidi muutetaan aldehydiksi, jolla on rakenne (3), jossa p-1 on 1. Rakenteen (16) mukainen allyylikarbamaattiamidi voidaan muuttaa aldehydik-5 si, jolla on rakenne (3), jossa p-1 on 1, joko otsonolyy-sin avulla metanolin läsnä ollessa ja sen jälkeen pelkistämällä, tai muodostamalla välituotedioli osmiumtetraoksi-din välittämänä ja sen jälkeen pilkkomalla se hapettamalla lyijytetra-asetaatilla tai natriummetaperjodaatilla.

10 Esimerkiksi rakenteen (16) mukainen allyylikar bamaattiamidi saatetaan kosketukseen otsonin kanssa metanolin läsnä ollessa. Reaktio toteutetaan sopivassa liuot-timessa, kuten dikloorimetaanissa. Yleensä reaktio toteutetaan lämpötilassa, joka on -100 - -60 °C, edullisesti 15 70 °C. Reaktioseos pelkistetään lisäämällä sopivaa pelkis- tintä, kuten tributyylifosfiinia tai dimetyylisulfidia. Tuote voidaan eristää reaktiovyöhykkeestä haihduttamalla ja se voidaan käyttää puhdistamatta enempää. Tuote voidaan puhdistaa käyttämällä alalla tunnettua tekniikkaa, kuten 20 kromatografiaa ja uudelleenkiteyttämistä.

Vaihtoehtoisesti rakenteen (3) mukainen aldehydi voidaan valmistaa hapettamalla rakenteen (16) mukainen ; allyylikarbamaattiamidi välituotedioliksi ja sitten käsit- , telemällä se lyijytetra-asetaatilla.

; 25 Esimerkiksi rakenteen (16) mukainen allyylikar- ] V bamaattiamidi saatetaan kosketukseen osmiumtetraoksidin ;;; kanssa välituotediolin saamiseksi. Reaktio voidaan toteut- i * t ·' ' taa käyttäen 0,01 - 0,05 mooliekvivalenttia osmiumtetraok- sidia ja lievää ylimäärää hapetinta, kuten N-metyylimor- * 1 » 30 foliini-N-oksidia tai t-butyylihydroperoksidia. Reaktio ' toteutetaan liuottimessa, kuten asetonin ja veden seoksis- ; sa. Yleensä reaktio toteutetaan ympäröivässä lämpötilassa 1 li ja se vaatii aikaa 1-48 tuntia. Reaktioseos lisätään natriumbisulfiitin tai natriumtiosulfaatin kyllästettyyn W 35 liuokseen ja välituotedioli eristetään uuttamalla ja haih- • t 55 Π513Ε duttamalla ja käytetään puhdistamatta enempää. Välituote-dioli saatetaan kosketukseen lievän ylimäärän kanssa lyi-jytetra-asetaattia. Reaktio toteutetaan liuottimessa, kuten kloroformissa. Reaktio toteutetaan ympäröivässä lämpö-5 tilassa ja se vaatii aikaa 30 minuutista 8 tuntiin. Tuote voidaan eristää reaktiovyöhykkeestä uuttamalla ja haihduttamalla ja se voidaan käyttää puhdistamatta enempää. Tuote voidaan puhdistaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten kromatografiaa ja uudelleenkiteyttämistä.

10 Kaavion B mahdollisessa vaiheessa h rakenteen (16) mukainen allyylikarbamaattiamidi saatetaan kosketukseen sopivan boraanireagenssin kanssa ja sen jälkeen hapettamalla tuote peroksidilla, jolloin saadaan rakenteen (18) mukainen alkoholi.

15 Sopiva boraanireagenssi, kuten disykloheksyylibo- raani on reagenssi, joka reagoi rakenteen (16) mukaisen allyylikarbamaattiamidin kanssa siten, että vetyperoksidi-hapetus tuottaa rakenteen (18) mukaisen alkoholin.

Esimerkiksi rakenteen (16) mukainen allyylikarba- 20 maattiamidi saatetaan kosketukseen sopivan boraanireagenssin, kuten disykloheksyyliboraanin, kanssa. Reaktio to-: ' . teutetaan sopivassa liuottimessa, kuten tetrahydrofuraa- :'· : nissa. Reaktioseosta pidetään -20 - 10 °C:n lämpötilassa reagoivien aineiden yhdistämisen aikana. Reaktio toteute-;.·, 25 taan ympävöivässä lämpötilassa. Boraaninmuodostusreaktio [' vaatii aikaa 1-8 tuntia. Lisätään fosfaattipuskuria, pH- !.'! arvo 7, sopivassa liuottimessa, kuten etanolissa, ennen t * * ' vetyperoksidin ylimäärän lisäämistä. Yleensä hapettaminen vaatii aikaa 8 - 48 tuntia ja toteutetaan ympäröivässä .*·: 30 lämpötilassa. Tuote voidaan eristää ja puhdistaa käyttä- mällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten uuttoa, : haihduttamista, kromatograf iaa ja uudelleenkiteyttämistä.

Kaavion B mahdollisessa vaiheessa 1 rakenteen (18) • mukainen alkoholi hapetetaan, jolloin saadaan aldehydi, V>‘ 35 jolla on rakenne (3), jossa p-1 on 2.

56 11513 5

Esimerkiksi kaksi mooliekvivalenttia dimetyylisul-foksidia lisätään tipoittain oksalyylikloridin, pyridiini-rikkitrioksidikompleksin tai trifluorietikkahappoanhydri-din liuokseen dikloorimetaanissa noin -60 °C:n lämpötilas-5 sa. Lisäyksen jälkeen reaktioseosta sekoitetaan noin kahden minuutin ajan. Mooliekvivalentti rakenteen (18) mukaista alkoholia liuoksena dikloorimetaanissa lisätään tipoittain. Lisäyksen jälkeen reaktioseosta sekoitetaan noin 40 minuutin ajan, sitten siihen lisätään 3 - 5-kertainen 10 ylimäärä trietyyliamiinia. Reaktioseosta sekoitetaan lämmittäen se ympäröivään lämpötilaan 1-5 tunnin kuluessa. Tuote voidaan eristää ja puhdistaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten uuttoa, haihduttamista, kromatografiaa ja uudelleenkiteyttämistä.

15 Seuraavat esimerkit esittävät tyypillisiä syntee sejä, kuten ne on kuvattu kaaviossa B. Näiden esimerkkien ja valmistusten ymmärretään olevan pelkästään kuvaavia eikä niitä ole tarkoitettu keksinnön piirin rajoittamiseksi millään tavoin.

20 Esimerkki 44 2 - (metoksi) bentsyylimetyyliamiini Lähtöaine esimerkkejä 50 ja 55 varten ; Yhdistetään o-anisoyylikloridi-(2-metoksibentsoyy- . likloridi) (2,9 g, 17,0 mmol) ja tetrahydrofuraani (170 ; . , 2 5 ml) ja seos jäähdytetään 0 °C:n lämpötilaan. Lisätään di- /’[ isopropyylietyyliamiinia (5,92 ml, 34 mmol). Lisätään me- tyyliamiinihydrokloridia (1,26 g, 18,7 mmol). Seosta se-’ koitetaan yhden tunnin ajan ja se väkevöidään tyhjössä.

Jäännös kromatografoidaan käyttäen silikageeliä ja eluoi-··.: 30 den peräkkäin 50-%:isella etyyliasetaatilla/heksaanilla, jolloin saadaan N-metyyli-metoksibentsamidi; TLC Rf = 0,45 : (silikageeli, 50-%:inen etyyliasetaatti/heksaani) .

Yhdistetään N-metyyli-2-metoksibentsamidi (1,55 g, • 9,36 mmol) ja tetrahydrofuraani (100 ml) ja seosta kuumen- 35 netaan palautusjäähdyttäen. Lisätään hitaasti boraanidi- » · » 115135 57 metyylisulfidikompleksin liuos (28,1 ml, 2,0 M tetrahyd.ro-furaanissa, 56,2 mmol) tipoittain. Seosta kuumennetaan 1 tunnin ajan palautusjäähdyttäen lisäyksen jälkeen. Seos jäähdytetään ympäröivään lämpötilaan ja väkevöidään tyh-5 jössä, jolloin saadaan jäännös. Jäännös jäähdytetään 0 °C:n lämpötilaan. Lisätään hitaasti 6 M suolahappoliuos-ta. Lisäyksen jälkeen seosta kuumennetaan palautusjäähdyttäen 1 tunnin ajan. Se jäähdytetään 0 °C:n lämpötilaan ja siihen lisätään 6 M natriumhydroksidiliuosta, kunnes pH 10 saavuttaa arvon 7. Reaktioseos uutetaan etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 45 3,4,5-(trimetoksi)bentsyylimetyyliamiini 15 Lähtöaine esimerkkiä 51 varten

Yhdistetään 3,4,5 -trimetoksibentsoyylikloridi (2,9 g, 17,0 mmol) ja tetrahydrofuraani (170 ml) ja seos jäähdytetään 0 °C:n lämpötilaan. Lisätään di-isopropyyli-etyyliamiinia (5,92 ml, 34 mmol). Lisätään metyyliamiini-20 hydrokloridia (1,26 g, 18,7 mmol). Seosta sekoitetaan 1 tunnin ajan ja se väkevöidään tyhjössä. Jäännös kromato-grafoidaan käyttäen silikageeliä ja eluoiden peräkkäin 50-%:isella etyyliasetaatilla/heksaanilla, jolloin saadaan . N-metyyli-3,4,5-trimetoksibentsamidi: TLC Rf = 0,45 (sili- ; . 25 kageeli, 50-%:inen etyyliasetaatti/heksaani).

Yhdistetään N-metyyli-3,4,5-trimetoksibentsamidi (1,55 g, 9,36 mmol) ja t et rahydrof uraani (100 ml) ja seos-* ta kuumennetaan palautusjäähdyttäen. Lisätään hitaasti bo- raanidimetyylisulfidikompleksin liuos (28,1 ml, 2,0 M tet-··.: 30 rahydrof uraanissa, 56,2 mmol) tipoittain. Seosta kuumenne- taan palautusjäähdyttäen 1 tunnin ajan lisäyksen jälkeen. Seos jäähdytetään ympäröivään lämpötilaan ja väkevöidään tyhjössä, jolloin saadaan jäännös. Jäännös jäähdytetään 0 °C-.n lämpötilaan. Lisätään hitaasti 6 M suolahappoliuos-35 ta. Lisäyksen jälkeen seosta kuumennetaan palautusjäähdyt- ϊ τ s 135 i 58 täen 1 tunnin ajan. Se jäähdytetään O °C:n lämpötilaan ja siihen lisätään 6 M natriumhydroksidiliuosta, kunnes pH saavuttaa arvon 7. Reaktioseos uutetaan etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros kuivataan MgS04.-lla, suodatetaan ja haih-5 dutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste. Esimerkki 46 (S) - 2 - allyyliamino - 3 - f enyylipropionihappometyyli -esteri

Kaavio B, mahdollinen vaihe a: 10 Yhdistetään (S)-2-amino-3 - fenyylipropionihappome- tyyliesterihydrokloridisuola [(S)-fenyylialaniinimetyyli-esterihydrokloridisuola] (8,63 g, 40,0 mmol), di-isopro-pyylietyyliamiini (6,8 ml, 40,0 mmol) ja allyylibromidi (1,8 ml, 20,0 mmol) THF:ssa (200 ml). Seosta sekoitetaan 15 inertissä ilmakehässä 16 tunnin ajan. Lisätään allyylibro-midia (1,8 ml, 20,0 mmol) ja seosta sekoitetaan vielä 24 tunnin ajan. Se väkevöidään tyhjössä, jolloin saadaan jäännös. Jäännös laimennetaan etyyliasetaatilla ja uutetaan vedellä. Kerrokset erotetaan, orgaaninen kerros kui-20 vataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. Kromatografia käyttäen silikageeliä ja eluoiden 30-%:isel-: ’*· la etyyliasetaatilla/heksaanilla tuottaa otsikon yhdis- ; ; : teen: TLC Rf =* 0,43 (silikageeli, 30-%:inen etyyliasetaat- ! ti/heksaani) .

1 2 5 Esimerkki 47 » ' ·

* » » I

. , (S)-2-[N-(t-butoksikarbonyyli) allyyliamino]-3-fe- ,*; ·, nyylipropionihappometyyliesteri

Kaavio B, mahdollinen vaihe b: , Yhdistetään (S)-2-allyyliamino-3-fenyylipropioni- • * · ·;;; 30 happometyyliesteri (6,62 g, 30,4 mmol) ja di-t-butyylidi- * * *' karbonaatti (7,29 g, 33,5 mmol) DMF:ssa/etyyliasetaatissa (30 ml/30 ml) . Seosta sekoitetaan 16 tunnin ajan inertissä ·;·· ilmakehässä. Reaktioseos laimennetaan etyyliasetaatilla ja uutetaan vedellä. Kerrokset erotetaan, orgaaninen kerros 35 kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä.

59 115135 Jäännös kromatografoidaan käyttäen silikageeliä ja eluoi-den 10-%:isella etyyliasetaatilla/heksaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 48 5 (S)-2- [N- (t-butoksikarbonyyli)allyyliamino]-3-fe- nyy1ipropionihappo Kaavio B, vaihe e: yhdistetään (S)-2-[N-(t-butoksikarbonyyli)ailyyli-amino-3-fenyylipropionihappometyyliesteri (0,32 g, 1,0 10 mmol) ja 1 M natriumhydroksidi (10 ml, 10 mmol) etanolissa (10 ml) . Reaktioseosta sekoitetaan 4 tunnin ajan. Reaktio-seos tehdään happamaksi 1 M suolahapolla ja uutetaan etyyliasetaatilla. Kerrokset erotetaan, orgaaninen kerros kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä.

15 Jäännös kromatografoidaan käyttäen silikageeliä ja eluoi-den 3-%:isella metanolilla/dikloorimetaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,40 (silikageeli, 5-%:inen metanoli/dikloorimetaani).

Esimerkki 49 20 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2 -[N-(t-butoksikarbonyy li) allyyliamino] -3-fenyylipropionamidi Kaavio B, vaihe f: ·',· Yhdistetään (S)-2-[N-(t-butoksikarbonyyli) allyyli-

amino-3-f enyyl ipropionihappo (11,1 g, 36,35 mmol) ja THF

: :’: 25 (360 ml) . Seos jäähdytetään -22 °C:n lämpötilaan. Lisätään ; N-metyylimorfoliinia (7,09 ml, 54,53 mmol) ja sitten seosta sekoitetaan 10 minuutin ajan. Lisätään isobutyylikloori- formiaattia (7,09 ml, 54,53 mmol) ja seosta sekoitetaan 30 minuutin ajan -22 °C:n lämpötilassa. Lisätään N-metyyli-N- *!” 30 bentsyyliamiinia (7,09 ml, 54,53 mmol). Reaktioseos lämmi- • · *;*’ tetään ympäröivään lämpötilaan ja sitä sekoitetaan 2 tun- • · ί/.j nin ajan. Reaktioseos laimennetaan etyyliasetaatilla ja uu- ·:*·· tetaan vedellä. Kerrokset erotetaan, orgaaninen kerros kui- vataan MgSO-iilla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä.

• * i ! *. 35 Jäännös kromatografoidaan käyttäen silikageeliä ja eluoi- • > · • · 60 115135 den 10-%:isella etyyliasetaatilla/heksaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 50 (S) -N- (2-metoksibentsyyli) -N-metyyli-2- [Ν' - (t-bu-5 toksikarbonyyli) allyyliamino] - 3 - f enyylipropionamidi

Kaavio B, vaihe g:

Yhdistetään (S)-2-[N-(t-butoksikarbonyyli)allyyliamino] -3 -f enyylipropionihappo (1,59 g, 5,20 mmol), (2-me toksibentsyyli) metyyliamiini (0,79 g, 5,20 mmol), 1 - (3 — 10 dimetyyliaminopropyyli)-3-etyylikarbodi-imidihydrokloridi (1,12 g, 5,72 mmol), 1-hydroksibentsotriatsoli (0,38 g, 2,52 mmol) ja di-isopropyylietyyliamiini (1,34 ml, 6,5 mmol) dikloorimetaanissa (50 ml) ja saatua seosta sekoitetaan 18 tunnin ajan. Se laimennetaan etyyliasetaatilla ja 15 uutetaan 1 M suolahapolla, kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella. Erotettu orgaaninen kerros kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. Jäännös kromatografoidaan käyttäen silikageeliä ja eluoiden peräk-20 käin 5-%:isella etyyliasetaatilla/heksaanilla ja 10-%:isella etyyliasetaatilla/heksaanilla, jolloin saadaan { ' otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,55 (silikageeli, 30-%:inen : etyyliasetaatti/heksaani) .

Esimerkki 51 25 (S)-N-(3,4,5-trimetoksibentsyyli)-N-metyyli-2-[N'- , (t-butoksikarbonyyli)allyyliamino]-3-fenyylipro- < |. pionamidi

Kaavio B, vaihe g:

Yhdistetään (S)-2-[N-(t-butoksikarbonyyli)allyyli- t t t ··’ 30 amino]-3-fenyylipropionihappo (0,91 g, 2,97 mmol), (3,4,5- trimetoksi) bentsyylimetyyliamiini (0,63 g, 2,97 mmol), 1-(3-dimetyyliaminopropyyli)-3-etyylikarbodi-imidihydroklo-ridi (0,63 g, 3,27 mmol), 1-hydroksibentsotriatsoli (0,349 g, 3,27 mmol) ja di-isopropyylietyyliamiini (0,77 35 ml, 6,27 mmol) dikloorimetaanissa (30 ml) ja saatua seosta 115135 61 sekoitetaan 18 tunnin ajan. Se laimennetaan etyyliasetaatilla ja uutetaan 1 M suolahapolla, kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja kyllästetyllä natriumklo-ridin vesiliuoksella. Erotettu orgaaninen kerros kuivataan 5 MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. Jäännös kromatografoidaan käyttäen silikageeliä ja eluoiden 30-%:isella etyyliasetaatilla/heksaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,30 (silikageeli, 30-%:inen etyyliasetaatti/heksaani).

10 Esimerkki 52 (S)-2-[N-(t-butoksikarbonyyli)amino]-3-(naft-2-yy- li)propionihappo

Kaavio B, mahdollinen vaihe j:

Yhdistetään (S)-2-amino-3-(naft-2-yyli)propionihap-15 po [(S)-(2-naftyyli)alaniini] (2,0 g, 9,29 mmol) ja di-t-butyylidikarbonaatti (2,23 g, 10,22 mmol) DMF:n/etyyli-asetaatin 1/l-seoksessa (200 ml) . Lisätään di-isopropyyli-etyyliamiinia (2,0 ml) (S)-2-amino-3-(2-naftyyli)propioni-hapon liuottamiseksi ja seosta sekoitetaan 18 tunnin ajan. 20 Se laimennetaan etyyliasetaatilla ja uutetaan 1 M suola-happoliuoksella. Erotettu orgaaninen kerros kuivataan : ·.. MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,47 (silikageeli, 10-%:inen metanoli/dikloorimetaani).

: 25 Esimerkki 53 V (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [N# - (t-butoksikarbonyy- !!( li) amino] -3- (naft-2-yyli)propionamidi ' Kaavio B, mahdollinen vaihe k:

Yhdistetään (S) -2-[N-(t-butoksikarbonyyli)amino]-3-«·.' 30 (naft-2-yyli) propionihappo (2,92 g, 9,3 mmol), 1-(3-di- *... ’’ metyyl iaminopropyyl i) - 3 -etyylikarbodi - imidihydrokloridi (1,96 g, 10,22 mmol), 1-hydroksibentsotriatsoli (1,38 g, 10,22 mmol), N-metyyli-N-bentsyyliamiini (9,3 mmol) ja di-isopropyylietyyliamiini (1,78 ml, 10,22 mmol) dikloorime-'·'·* 35 taanissa (100 ml) ja saatua seosta sekoitetaan 18 tunnin 115135 62 ajan. Se laimennetaan etyyliasetaatilla ja uutetaan 1 M suolahapolla, kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella. Erotettu orgaaninen kerros kuivataan MgS04:lla, suodatetaan 5 ja haihdutetaan tyhjössä. Jäännös kromatografoidaan käyttäen silikageeliä ja eluoiden 20-%:isella etyyliasetaatil-la/heksaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,29 (silikageeli, 20-%:inen etyyliasetaatti/heksaani). Esimerkki 54 10 (S) -N- (3,4-diklooribentsyyli) -N-metyyli-2 - [N' - (t- butoksikarbonyyli) amino] -3- (naft-2-yyli)propionami-di

Kaavio B, mahdollinen vaihe k:

Yhdistetään (S)-2-[N- (t-butoksikarbonyyli)amino]-3-15 (naft-2-yyli)propionihappo (1,23 g, 3,93 mmol), l-(3-dime-tyyliaminopropyyli)-3-etyylikarbodi-imidihydrokloridi (0,435 g, 2,2 mmol), 1-hydroksibentsotriatsoli (0,297 g, 2,2 mmol), N-metyyli-N-(3,4-diklooribentsyyli)amiini (0,382 g, 2,0 mmol) ja di-isopropyylietyyliamiini (0,53 20 ml, 2,2 mmol) dikloorimetaanissa (20 ml) ja saatua seosta sekoitetaan 72 tunnin ajan. Se laimennetaan etyyliasetaa-: . tiliä ja uutetaan 1 M suolahapolla, kyllästetyllä natrium- :*: ; bikarbonaatin vesiliuoksella ja kyllästetyllä natriumklo- . ridin vesiliuoksella. Erotettu orgaaninen kerros kuivataan I » : : 2 5 MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. Jäännös , kromatografoidaan käyttäen silikageeliä ja eluoiden 10-%:isella etyyliasetaatilla/heksaanilla, jolloin saadaan ’ otsikon yhdiste.

Esimerkki 55 > J 30 (S) -N- (2-metoksibentsyyli) -N-metyyli-2-[Ν' - (t-bu- toksikarbonyyli)amino] -3- (naft-2-yyli)propionamidi J.J Kaavio B, mahdollinen vaihe k:

Yhdistetään (S)-2-[N-(t-butoksikarbonyyli) amino]-3- • · (naft-2-yyli)propionihappo (1,89 g, 6,0 mmol), (2-metoksi->'·' 35 bentsyyli) metyyliamiini (1,67 g, 11,1 mmol), 1-(3-dimetyy- » t I » » 115135 63 1iaminopropyyli) - 3 -etyylikarbodi-imidihydrokloridi (1,30 g, 6,6 mmol), 1-hydroksibentsotriatsoli (0,89 g, 6,6 mmol) ja di-isopropyylietyyliamiini (1,59 ml, 6,6 mmol) dikloorimetaanissa (60 ml) ja saatua seosta sekoitetaan 18 5 tunnin ajan. Se laimennetaan etyyliasetaatilla ja uutetaan 1 M suolahapolla, kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesi-liuoksella ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella. Erotettu orgaaninen kerros kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon 10 yhdiste värittömänä öljynä.

Esimerkki 56 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [Ν' - (t-butoksikarbonyy-li)allyyliamino]-3-(naft-2-yyli)propionamidi Kaavio B, mahdollinen vaihe 1: 15 Yhdistetään (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[Ν'-(t-bu- toksikarbonyyli)amino]-3-(naft-2-yyli)propionamidi (3,3g, 7,9 mmol) ja THF/DMF (70 ml/7 ml) ja seos jäähdytetään jäähauteessa 0 °C:n lämpötilassa. Reaktioseokseen lisätään natriumhydridiä (0,42 g, 17,38 mmol) ja allyylibromidia 20 (4,1 ml, 47,4 mmol). Reaktioseoksen annetaan lämmetä ympä röivään lämpötilaan ja sitä kuumennetaan palautusjäähdyttäen 18 tunnin ajan. Reaktioseos kaadetaan kyllästettyyn ammoniumkloridin vesiliuokseen. Kerrokset erotetaan ja vesipitoinen kerros uutetaan dikloorimetaanilla. Orgaani-25 set kerrokset yhdistetään. Ne kuivataan MgS04 :11a, suodate-taan ja haihdutetaan tyhjössä. Jäännös kromatografoidaan !! käyttäen silikageeliä ja eluoiden peräkkäin 10-%:isella

etyyliasetaatilla/heksaanilla ja 20-%:isella etyyliasetaa-tilla/heksaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC

30 Rf = 0,59 (silikageeli, 20-%:inen etyyliasetaatti/heksaa-ni) .

I t »

t t I

115135 64

Esimerkki 57 (S) -N- (3/4-diklooribentsyyli) -N-metyyli-2- [Ν' - (t-butoksikarbonyyli) allyyliamino] -3- (naft-2-yyli)pro-pionamidi 5 Kaavio B, mahdollinen vaihe 1:

Yhdistetään (S)-N-(3,4-diklooribentsyyli)-N-metyy-li-2- [Ν' - (t-butoksikarbonyyli) amino] -3- (naft-2-yyli) pro-pionamidi (0,48 g, 0,99 mmol) ja THF/DMF (9 ml/1 ml) ja seos jäähdytetään jäähauteessa 0 °C:n lämpötilassa. Reak-10 tioseokseen lisätään natriumhydridiä (0,048 g, 2,0 mmol) ja allyylibromidia (0,52 ml) . Reaktioseoksen annetaan lämmetä ympäröivään lämpötilaan ja sitten sitä kuumennetaan palautusjäähdyttäen 18 tunnin ajan. Reaktioseos kaadetaan kyllästettyyn ammoniumkloridin vesiliuokseen. Kerrokset 15 erotetaan ja vesipitoinen kerros uutetaan dikloorimetaa-nilla. Orgaaniset kerrokset yhdistetään. Ne kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. Jäännös kromatografoidaan käyttäen silikageeliä ja eluoiden peräkkäin 10-%:isella etyyliasetaatilla/heksaanilla ja 20 20-%:isella etyyliasetaatilla/heksaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste kiinteänä aineena.

• . Esimerkki 58 ; (S) -N- (2-metoksibentsyyli) -N-metyyli-2- [Ν' - (t-bu- toksikarbonyyli) allyyliamino] -3-(naft-2-yyli)pro-: ,·. 2 5 pionamidi t I 1 , Kaavio B, mahdollinen vaihe 1: * » 1 !!.’ Yhdistetään (S) -N- (2-metoksibentsyyli) -N-metyyli-2- ’ (N' -(t-butoksikarbonyyli)amino]-3-(naft-2-yyli)propion- amidi (0,63 g, 1,41 mmol) ja THF/DMF (15 ml/5 ml) ja seos I t * <*: 3 0 jäähdytetään jäähauteessa 0 °C:n lämpötilassa. Reaktio- * ,,· seokseen lisätään natriumhydridiä (0,067 g, 2,82 mmol) ja /. j allyylibromidia (0,73 ml, 8,46 mmol) . Reaktioseoksen anne- taan lämmetä ympäröivään lämpötilaan ja sitä kuumennetaan palautusjäähdyttäen 18 tunnin ajan. Reaktioseos kaadetaan 35 kyllästettyyn ammoniumkloridin vesiliuokseen. Kerrokset 115135 65 erotetaan ja vesipitoinen kerros uutetaan dikloorimetaa-nilla. Orgaaniset kerrokset yhdistetään. Ne kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. Jäännös kromatografoidaan käyttäen silikageeliä ja eluoiden 5 10-%:isella etyyliasetaatilla/heksaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,55 (silikageeli, 20-%:inen etyyliasetaatti/heksaani) .

Esimerkki 59 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [Ν' - (t-butoksikarbonyy-10 li)-2-oksoetyyliamino]-3-fenyylipropionamidi

Kaavio B, vaihe q:

Yhdistetään (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[Ν' -(t-bu-toksikarbonyyli)ailyyliamino] - 3 - fenyylipropionamidi (10,04 g, 24,5 mmol) ja pyridiini (0,13 ml) dikloorime-15 taanissa/metanolissa (300 ml/30 ml) . Seos jäähdytetään -78 °C:n lämpötilaan. Otsonoitua happea päästetään liuoksen läpi, kunnes saadaan pysyvä vaaleansininen väri. Typpeä päästetään liuoksen läpi, kunnes sininen väri häviää. Lisätään dimetyylisulfidia (55 ml) . Reaktioseoksen anne-20 taan lämmetä ympäröivään lämpötilaan ja sitä sekoitetaan 16 tunnin ajan. Se väkevöidään tyhjössä, jolloin saadaan jäännös. Jäännös laimennetaan etyyliasetaatilla ja uute-; taan vedellä. Kerrokset erotetaan, orgaaninen kerros kui- , vataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä.

: , , 25 Jäännös kromatografoidan käyttäen silikageeliä ja eluoiden ^ 10-%:isella etyyliasetaatilla/heksaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,53 (silikageeli, 10-%:inen etyyliasetaatti/heksaani).

Esimerkki 60 30 (S) -N- (2-metoksibentsyyli) -N-metyyli-2- [Ν' - (t-bu- toksikarbonyyli)-2-oksoetyyliamino] - 3-fenyylipropionamidi ____ Kaavio D, vaihe q:

Yhdistetään (S)-N-(2-metoksibentsyyli)-N-metyyli-2- V.‘ 35 [N' - (t-butoksikarbonyyli) allyyliamino] -3-fenyylipropion- 66 115135 amidi (0,66 g, 1,52 mmol), N-metyylimorfoliini-N-oksidi (0,20 g, 1,67 mmol), asetoni (5 ml) ja vesi (5 ml). Seokseen lisätään osmiumtetraoksidia (0,78 ml, 0,04 M THFissa, 0,032 mmol) ja sitä sekoitetaan inertissä ilmakehässä 18 5 tunnin ajan. Reaktioseos kaadetaan natriumbisulfiitin kyllästettyyn liuokseen ja välituotedioli uutetaan etyyliasetaattiin. Erotettu orgaaninen kerros kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan raaka dioli, joka käytetään puhdistamatta enempää.

10 Raaka dioli liuotetaan kloroformiin (10 ml) . Saatuun liuokseen lisätään lyijytetra-asetaatin (0,74 g, 1,67 mmol) liuos kloroformissa (10 ml). Reaktioseosta sekoitetaan 30 minuutin ajan ja sitten se kaadetaan kyllästettyyn natriumbikarbonaatin vesiliuokseen. Seos uutetaan dikloo- 15 rimetaanilla ja orgaaninen kerros erotetaan. Erotettu orgaaninen kerros kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste, joka voidaan käyttää puhdistamatta enempää.

Esimerkki 61 20 (S)-N- (3,4,5-trimetoksibentsyyli)-N-metyyli-2-[Ν' - (t-butoksikarbonyyli) -2-oksoetyyliamino] -3-fenyyli-: *,, propionamidi ; >'> Kaavio B, vaihe q: , Yhdistetään (S)-N-(3,4,5-trimetoksibentsyyli)-N-me- ; ,·, 25 tyyli-2-[N' - (t-butoksikarbonyyli)-2-allyyliamino] -3-fenyy- \ lipropionamidi (0,50 g, 1,0 mmol), N-metyylimorfoliini-N-

oksidi (0,13 g, 1,1 mmol), asetoni (15 ml) ja vesi (20 ’ ’ ml). Seokseen lisätään osmiumtetraoksidia (0,51 ml, 0,04 M

THF:ssa, 0,021 mmol) ja sitä sekoitetaan inertissä ilmake- • t » 3 0 hässä 18 tunnin ajan. Reaktioseos kaadetaan natriumbisul-f iitin kyllästettyyn liuokseen ja välituotedioli uutetaan : etyyliasetaattiin. Erotettu orgaaninen kerros kuivataan

MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin * saadaan raaka dioli, joka käytetään puhdistamatta enempää.

’.V 35 Raaka dioli liuotetaan kloroformiin (10 ml). Saatuun 67 115155 liuokseen lisätään lyijytetra-asetaattia (0,48 g, 1,1 mmol) liuoksena kloroformissa (10 ml) . Reaktioseosta sekoitetaan 30 minuutin ajan. Se kaadetaan kyllästettyyn natriumbikarbonaattiliuokseen ja uutetaan dikloorimetaa-5 nilla. Erotettu orgaaninen kerros kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste. Otsikon yhdiste voidaan käyttää puhdistamatta enempää.

Esimerkki 62 10 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [N7 - (t-butoksikarbonyy- li)-2-oksoetyyliamino]-3-(naft-2-yyli)propionamidi Kaavio B, vaihe g:

Yhdistetään (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[Ν' -(t-bu-toksikarbonyyli)allyyliamino]-3-(naft-2-yyli)propionamidi 15 (3,34 g, 7,29 mmol) ja pyridiini (0,03 ml) dikloorimetaa- nissa/metanolissa (66 ml/7 ml). Seos jäähdytetään -78 °C:n lämpötilaan. Otsonoitia happea päästetään liuoksen läpi, kunnes saadaan pysyvä vaaleansininen väri. Typpeä päästetään liuoksen läpi, kunnes sininen väri häviää. Lisätään 2 0 dimetyylisulfidia (12 ml) . Reaktioseoksen annetaan lämmetä ympäröivään lämpötilaan ja sitä sekoitetaan 16 tunnin ; ’ . ajan. Se väkevöidään tyhjössä, jolloin saadaan jäännös.

Jäännös laimennetaan etyyliasetaatilla ja uutetaan vedel-: lä. Kerrokset erotetaan, orgaaninen kerros kuivataan 25 MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. Jäännös . .·, kromatografoidaan käyttäen silikageeliä ja eluoiden

« * I

20-%: isella etyyliasetaatilla/heksaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,70 (silikageeli, 50-%:inen . etyyliasetaatti/heksaani).

i * * * • » 115135 68

Esimerkki 63 (S) -N- (3,4-diklooribentsyyli) -N-metyyli-2- [Ν' - (t-butoksikarbonyyli)-2-oksoetyyliamino]-3-(naft-2-yyli)propionamidi 5 Kaavio B, vaihe q:

Yhdistetään (S)-N-(3,4-diklooribentsyyli)-N-metyyli-2 - [Ν' -(t-butoksikarbonyyli)allyyliamino]-3-(naft-2-yy-li)propionamidi (0,26 g, 0,50 mmol), N-metyylimorfoliini-N-oksidi (0,065 g, 0,55 mmol), asetoni (10 ml), tetrahyd-10 rofuraani (5 ml) ja vesi (25 ml) . Seokseen lisätään osmiumtetraoksidia (0,26 ml, 0,04 M THF:ssa, 0,042 mmol) ja sitä sekoitetaan inertissä ilmakehässä 18 tunnin ajan. Reaktioseos kaadetaan natriumbisulfiitin kyllästettyyn liuokseen ja välituotedioli uutetaan etyyliasetaattiin. 15 Erotettu orgaaninen kerros kuivataan MgS04 :11a, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan raaka dioli, joka käytetään puhdistamatta enempää. Raaka dioli liuotetaan kloroformiin (10 ml) . Saatuun liuokseen lisätään lyi-jytetra-asetaatin (0,24 g, 0,55 mmol) liuos kloroformissa 20 (10 ml) . Reaktioseosta sekoitetaan 30 minuutin ajan ja sitten se kaadetaan kyllästettyyn natriumbikarbonaatti-liuokseen. Se uutetaan dikloorimetaanilla ja orgaaninen . kerros erotetaan. Erotettu orgaaninen kerros kuivataan . MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin ; 25 saadaan otsikon yhdiste, joka voidaan käyttää puhdistamat- » i ta enempää.

Esimerkki 64 *·’ ' (S)-N-(2-metoksibentsyyli)-N-metyyli-2-[Ν'- (t-bu toksikarbonyyli) -2-oksoetyyliamino]-3-(naft-2-yy-30 li) propionamidi

Kaavio B, vaihe q: ; Yhdistetään (S)-N-(2-metoksibentsyyli)-N-metyyli-2- • · i tiii; [Ν' - (t-butoksikarbonyyli) allyyliamino] -3- (naft-2-yyli) pro- . pionamidi (0,46 g, 0,96 mmol), N-metyylimorfoliini-N-ok- \\* 35 sidi (0,12 g, 1,06 mmol), asetoni (20 ml) ja vesi (10 ml).

115135 69

Seokseen lisätään osmiumtetraoksidia (0,50 ml, 0,04 M THF:ssa, 0,02 mmol) ja sitä sekoitetaan inertissä ilmakehässä 18 tunnin ajan. Reaktioseos kaadetaan natriumbisul-fiitin kyllästettyyn liuokseen ja välituotedioli uutetaan 5 etyyliasetaattiin. Erotettu orgaaninen kerros kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan raaka dioli, joka käytetään puhdistamatta enempää. Raaka dioli liuotetaan kloroformiin (10 ml) . Saatuun liuokseen lisätään lyijytetra-asetaatin (0,46 g, 1,06 10 mmol) liuos kloroformissa (10 ml). Reaktioseosta sekoitetaan 30 minuutin ajan ja sitten se kaadetaan kyllästettyyn natriumbikarbonaatin vesiliuokseen. Uutetaan dikloorime-taanilla ja orgaaninen kerros erotetaan. Erotettu orgaaninen kerros kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan 15 tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste, joka voidaan käyttää puhdistamatta enempää.

Esimerkki 65 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [N' - (t-butoksikarbonyy- li)-3-hydroksipropyyliamino]-3-fenyylipropionamidi 20 Kaavio B, mahdollinen vaihe h: Jäähdytetään boraaniliuos (1,5 ml, IM THF:ssa, 1,5 mmol) 0 °C:n lämpötilaan jäähauteessa inertissä ilmakehäs-; sä. Lisätään syklohekseeniä (0,31 ml, 3,1 mmol) ja seosta . sekoitetaan 15 minuutin ajan jäähdyttäen jatkuvasti. Lisä- : 25 tään edellä valmistetun disykloheksyyliboraanin suspensio THF:ssa (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[Ν'- (t-butoksikarbo-k! nyyli)allyyliamino]-3-fenyylipropionamidiin (2 mmol) ja ’ ’ saatua seosta sekoitetaan jäähauteessa 15 minuutin ajan.

Seos lämmitetään ympäröivään lämpötilaan ja sitä sekoite-3 0 taan 2 tunnin ajan. Seos laimennetaan fosfaattipuskurilla, : pH-arvo 7, (40 ml) ja etanolilla (20 ml) . Lisätään \ : 30-%:ista vetyperoksidia (8 ml). Saatua seosta sekoitetaan ympäröivässä lämpötilassa 20 tunnin ajan. Se väkevöidään . tyhjössä, jolloin saadaan jäännös. Reaktioseos laimenne- ·.· 35 taan etyyliasetaatilla ja uutetaan vedellä. Kerrokset ero- < t 115135 70 tetaan, orgaaninen kerros kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. Jäännös kromatografoidaan käyttäen silikageeliä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 66 5 (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-2- [N' - (t-butoksikarbonyy- li) -3-oksopropyyliamino] -3-fenyylipropionamidi Kaavio B, mahdollinen vaihe i:

Yhdistetään (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[Ν' -(t-bu-toksikarbonyyli)-3-hydroksipropyyliamino]-3-fenyylipro-10 pionamidi (20 mmol), trietyyliamiini (10 mmol) ja dimetyy-lisulfoksidi (4 ml) . Lisätään edellä valmistettu liuos liuokseen, jossa on pyridiini/rikkitrioksidikompleksia (6,4 mmol) dimetyylisulfoksidissa (12 ml). Reaktioseosta sekoitetaan 1 tunnin ajan. Se laimennetaan etyyliasetaa-15 tiliä ja uutetaan vedellä. Kerrokset erotetaan, orgaaninen kerros kuivataan MgS04:11a, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste, joka otetaan seuraavaan vaiheeseen puhdistamatta enempää.

Yleinen synteettinen menetelmä on esitetty kaavios-20 sa C kaaviossa A lähtöaineena käytetyn aldehydin valmistamiseksi, jolla on rakenne (3), jossa G-l on -C(0)-ja G2 on -CH2-. Reagenssit ja lähtöaineet ovat helposti alan ammat-timiehen saatavissa. Kaaviossa E kaikki substituentit ovat kuten edellä on määritelty ellei toisin mainita.

• » · «li • · * ti » » t 115135 71

Kaavio C

O^^OH O^^NHCH3 w( • Vaihe a i

| -► I

CO2R5 Ar2 CO2R5 Ar2 10 (,5) «'9) 05^ί^^/ΑΓι Vaihe b .NHCH3

15 .NCH3 I

. _ X A

I Vaihe c CO2R5 Ar2 20 CO2R5 Ar2 (20) (21) i . ; 25 \

Mahdollinen q ^ri n. vaihe d \ .NCH3 *::: 3o f : : (k Λ.

. Mahdollinen ^5»/^ vaihe e | H CO2R5 Ar2

» I t I I

; 35 (3), jossa p-1 on 1, ·/· on -C (O) - ja G2 on -CH2~.

115135 72

Kaavio C (jatkuu)

Mahdollinen vaihe e °wAr' °V/A'' XNCH3 /NCH3 ? f

Mahdollinen i vaihe f ϊ I i C02R5 Ar2 C°2Rs Ar2 (3), jossa p-1 on 2, G^ on -C (O) - ja 15 G„ on -CH0-.

(22) 2 2

Kaavion C vaiheessa a rakenteen (15) mukainen sopi-20 va allyylikarbamaattihappo, joka on valmistettu käyttäen kaavion B menetelmiä, saatetaan amidointireaktioon metyy-. ' liamiinin kanssa tai metyyliamiinin suolan kanssa, jolloin ·' saadaan rakenteen 19 mukainen allyylikarbamaattihappo-N- ti- metyyliamidi.

; 25 Rakenteen (15) mukainen sopiva allyylikarbamaatti- ; happo on happo, jonka stereokemia, R5- ja Ar2-ryhmät ovat .·; . kuten niiden toivotaan olevan kaavan (1) mukaisessa loppu tuotteessa. Rakenteen (15) mukainen sopiva allyylikarba-. maattihappo voi myös olla happo, jonka stereokemia on ku- 30 ten on toivottua kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa ja

Ar2 ja R5 tuottavat suojauksen poistamisen jälkeen Ar2-ryh-:t‘·· män ja R3-ryhmän, jotka ovat kuten niiden toivotaan olevan ’:’‘: kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa. Rakenteen (15) mu- t·’. kainen sopiva allyylikarbamaattihappo voi myös olla happo, 35 jonka stereokemia tuottaa erottamisen jälkeen stereoke- 115135 73 mian, joka on toivottu kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa ja R5 ja Ar2 ovat kuten niiden toivotaan olevaan kaavan (1) mukaisessa tuotteessa. Rakenteen (15) mukainen sopiva allyylikarbamaattihappo voi myös olla happo, jonka 5 stereokemia tuottaa erottamisen jälkeen stereokemian, joka on toivottu kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa ja Ar2 ja R5 tuottavat suojauksen poistamisen jälkeen Ar2-ryhmän ja R3-ryhmän, jotka ovat kuten niiden toivotaan olevan kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa.

10 Amidointireaktio voi edetä aktivoidun välituotteen, kuten seka-anhydridin tai (O)-hydroksibentsotriatsolin, kautta, joka voidaan valmistaa, mutta ei välttämättä eristää, ennen metyyliamiinin tai rnetyyliamiinin suolan lisäämistä .

15 Esimerkiksi rakenteen (15) mukainen sopiva allyylikarbamaattihappo saatetaan kosketukseen 1,2 - 1,7 ekviva lentin kanssa sopivaa emästä, kuten N-metyylimorfoliinia, sopivassa liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa. Yleensä reaktioseos jäähdytetään noin -50 - 0 °C:n lämpötilaan, 20 edullisesti -25 - -20 °C:n lämpötilaan, ennen kuin lisätään 1,2 - 1,7 ekvivalenttia isobutyyliklooriformiaattia.

: · Yleensä reaktioseosta sekoitetaan noin 30 minuutin - 3 V · tunnin ajan mahdollistaen seka-anhydridin, aktivoidun väli-

: : tuotteen, muodostumisen. Pitäen lämpötila välillä -50 - 0 °C

• 25 lisätään metyyliamiini tai metyyliamiinin suola. Reak- . tioseos voidaan lämmittää huoneenlämpötilaan amiinin lisää- • * · misen tapahduttua. Reaktio vaatii aikaa 2-48 tuntia. Tuo-te voidaan eristää ja puhdistaa käyttämällä alalla tunnet-, tua hyvin tekniikkaa, kuten uuttoa, haihduttamista, kroma- 30 tografiaa tai uudelleenkiteyttämistä.

» » ·;·’ Vaihtoehtoisesti esimerkiksi rakenteen (15) mukai- nen sopiva allyylikarbamaattihappo saatetaan kosketukseen ·;·· lievän ylimäärän kanssa metyyli amiini a tai metyyliamiinin suolaa ja 1-hydroksibentsotriatsolihydraatin kanssa, kun ; 35 läsnä on lievä ylimäärä kytkentäainetta, kuten disyklohek- » » » 115135 74 syylikarbodi-imidiä tai 1-(3-dimetyyliaminopropyyli)-3 -etyylikarbodi-imidiä. Reaktio toteutetaan sopivan emäksen, kuten di-isopropyylietyyliamiinin, läsnä ollessa. Reaktio toteutetaan sopivassa liuottimessa, kuten dikloorimetaa-5 nissa tai kloroformissa. Tuote voidaan eristää ja puhdistaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten uuttoa, haihduttamista, kromatografiaa tai uudelleenki-teyttämistä.

Kaavion C vaiheessa b rakenteen (19) mukainen al-10 lyylikarbamaattihappo-N-metyyliamidi pelkistetään, jolloin saadaan rakenteen (20) mukainen N-metyyliaminoyhdiste.

Esimerkiksi rakenteen (19) mukainen allyylikarba- maattihappo-N-metyyliamidi saatetaan kosketukseen sopivan pelkistimen, kuten di-isobutyylialumiinihydridin tai li- 15 tiumalumiinihydridin, kanssa, jolloin di-isobutyylialumii- nihydridi on edullinen. Reaktio toteutetaan sopivassa liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa tai tolueenissa.

Yleensä reaktio toteutetaan lämpötilassa, joka on -20 °C:sta liuottimen palautusjäähdytyslämpötilaan. Tar- 20 koituksenmukaisen työskentelyn jälkeen, kuten on alalla tunnettua työskentely riipppu tuotettavasta tuotteesta ja : ’ . käytettävästä pelkistimestä, tuote voidaan eristää ja puh- distaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, ku- ten uuttoa, haihduttamista, kromatografiaa tai uudelleen- : 25 kiteyttämistä.

« · *

Kaavion C vaiheessa c rakenteen (20) mukainen N-me-tyyliaminoyhdiste käsitellään aroyylin muodostamiseksi * * · ' sopivalla aroyylihappokloridilla, jolloin saadaan raken teen (21) mukainen N-metyyliaroyyliamidi.

> i » ··: 30 Sopiva aroyylihappokloridi, Ar1C(0)Cl, on aroyyli- ·...·’ happokloridi, jossa Ar-L on kuten sen toivotaan olevan kaa- j van (1) mukaisessa lopputuotteessa tai se tuottaa suojauk- sen poiston jälkeen Ar-,-ryhmän, joka on toivottu kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa.

115135 75

Esimerkiksi rakenteen (20) mukainen N-metyyliamino-yhdiste saatetaan kosketukseen sopivan aroyylihappoklori-din, Ar1C(0)Cl:n, kanssa. Reaktio toteutetaan sopivan emäksen, kuten trietyyliamiinin, di -isopropyylietyyliamiinin 5 tai pyridiinin, läsnä ollessa. Reaktio toteutetaan sopivassa liuottimessa, kuten dikloorimetaanissa, kloroformissa, pyridiinissa, dioksaanissa, tetrahydrofuraanissa tai vedessä. Yleensä reaktio toteutetaan lämpötilassa, joka on -20 °C:sta liuottimen palautusjäähdytyslämpötilaan. Tuote 10 voidaan eristää ja puhdistaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten uuttoa, haihduttamista, kromato-grafiaa ja uudelleenkiteyttämistä.

Kaavion C mahdollisessa vaiheessa d rakenteen (21) mukainen N-metyyliaroyyliamidi muutetaan aldehydiksi, jol-15 la on rakenne (3), jossa G2 on -C(0)-, G2 on -CH2- ja p-1 on 1. Rakenteen (21) mukainen N-metyyliaroyyliamidi voidaan muuttaa aldehydiksi, jolla on rakenne (3) , jossaG-|_ on -C(O)-, G2 on -CH2- ja p-1 on 1, joko otsonolyysin avulla metanolin läsnä ollessa ja sen jälkeen pelkistämällä, tai 20 muodostamalla välituotedioli osmiumtetraoksidin välittämänä ja sen jälkeen pilkkomalla se hapettamalla lyijytetra-asetaatilla tai natriummetaperjodaatilla.

Esimerkiksi rakenteen (21) mukainen N-metyyliaroyy- liamidi saatetaan kosketukseen otsonin kanssa metanolin :.·, 25 läsnä ollessa. Reaktio toteutetaan sopivassa liuottimessa, * » » kuten dikloorimetaanissa. Yleensä reaktio toteutetaan läm-!!! Potilassa, joka on -100 - -60 °C, edullisesti -70 °C.

‘ Reaktioseos pelkistetään lisäämällä sopivaa pelkistintä, kuten tributyylifosfiinia tai dimetyylisulfidia. Tuote ·'··’ 30 voidaan eristää reaktiovyöhykkeestä haihduttamalla ja se voidaan käyttää puhdistamatta enempää. Tuote voidaan puh-distaa käyttämällä alalla tunnettua tekniikkaa, kuten kro-matografiaa ja uudelleenkiteyttämistä.

Vaihtoehtoisesti esimerkiksi rakenteen (21) mukai-35 nen N-metyyliaroyyliamidi saatetaan kosketukseen osmium- 115135 76 tetraoksidin kanssa välituotediolin saamiseksi. Reaktio voidaan toteuttaa käyttäen 0,01 - 0,05 mooliekvivalenttia osmiumtetraoksidia ja lievää ylimäärää hapetinta, kuten N-metyylimorfOliini-N-oksidia. Reaktio toteutetaan li-5 uottimessa, kuten asetonin ja veden seoksissa. Reaktio toteutetaan ympäröivässä lämpötilassa ja se vaatii aikaa 12 - 48 tuntia. Reaktioseos lisätään natriumbisulfiitin kyllästettyyn liuokseen ja välituotedioli eristetään uuttamalla ja haihduttamalla ja käytetään puhdistamatta enem-10 pää. Välituotedioli saatetaan kosketukseen lievän molaari-sen ylimäärän kanssa lyijytetra-asetaattia tai natriumme-taperjodaattia. Yleensä reaktio toteutetaan liuottimessa, kuten kloroformissa. Reaktio toteutetaan ympäröivässä lämpötilassa ja se vaatii aikaa 30 minuutista 8 tuntiin. Tuo-15 te voidaan eristää reaktiovyöhykkeestä uuttamalla ja haihduttamalla ja se voidaan käyttää puhdistamatta enempää. Tuote voidaan puhdistaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten kromatografiaa ja uudelleenkiteyttämis-tä.

20 Kaavion C mahdollisessa vaiheessa e rakenteen (21) mukainen N-metyyliaroyyliamidi saatetaan kosketukseen so-pivan boraanireagenssin kanssa ja sen jälkeen tuote hape-tetaan peroksidilla, jolloin saadaan rakenteen (22) mukai-nen N-metyyliaroyyliamidoalkoholi.

: 25 Sopiva boraanireagenssi, kuten disykloheksyyli- * · boraani on reagenssi, joka reagoi rakenteen (21) mukaisen t < · N-metyyliaroyyliamidin kanssa siten, että vetyperoksidilla -petus tuottaa rakenteen (22) mukaisen N-metyyliaroyyliami-doalkoholin.

S 1 * ·.: 30 Esimerkiksi rakenteen (21) mukainen N-metyyliaroyy- *...* liamidi saatetaan kosketukseen sopivan boraanireagenssin, ’.j kuten disykloheksyyliboraanin, kanssa. Reaktio toteutetaan • * sopivassa liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa. Yleensä reaktioseosta pidetään -20 - 10 °C:n lämpötilassa rea-'·*·* 35 goivien aineiden yhdistämisen aikana. Yleensä reaktio to- 115135 77 teutetaan ympävöivässä lämpötilassa. Yleensä boraaninmuo-dostusreaktio vaatii aikaa 1-8 tuntia. Lisätään fosfaattipuskuria, pH-arvo 7, sopivassa liuottimessa, kuten etanolissa, ennen vetyperoksidin ylimäärän lisäämistä. Yleen-5 sä hapettaminen vaatii 8-48 tuntia ja toteutetaan ympäröivässä lämpötilassa. Tuote voidaan eristää ja puhdistaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten uut-toa, haihduttamista, kromatografiaa ja uudelleenkiteyttä-mistä.

10 Kaavion C mahdollisessa vaiheessa f rakenteen (22) mukainen N-metyyliaroyyliamidoalkoholi hapetetaan, jolloin saadaan aldehydi, jolla on rakenne (3), jossa on -C(0)-, G2 on -CH2- ja p-1 on 2.

Esimerkiksi kaksi mooliekvivalenttia dimetyylisul-15 foksidia lisätään tipoittain oksalyylikloridin, pyridiini-rikkitrioksidikompleksin tai trifluorietikkahappoanhydri-din liuokseen dikloorimetaanissa noin -60 °C:n lämpötilassa. Lisäyksen jälkeen reaktioseosta sekoitetaan noin kahden minuutin ajan. Mooliekvivalentti rakenteen (22) mu-20 kaista N-metyyliaroyyliamidoalkoholia liuoksena dikloorimetaanissa lisätään tipoittain. Lisäyksen jälkeen reaktio-! seosta sekoitetaan noin 40 minuutin ajan, sitten siihen '; : lisätään 3 - 5-kertainen ylimäärä trietyyliamiinia. Reak- ;‘”t. tioseosta sekoitetaan lämmittäen se ympäröivään lämpöti- : 25 laan 1-5 tunnin kuluessa. Tuote voidaan eristää ja puh- , ,-f distaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, ku- p ten uuttoa, haihduttamista, kromatografiaa ja uudelleenki- teyttämistä.

Seuraavat esimerkit esittävät tyypillisiä synteese-30 jä, kuten ne on kuvattu kaaviossa C. Näiden esimerkkien ‘ ·.’ ymmärretään olevan pelkästään kuvaavia eikä niitä ole tar- | koitettu keksinnön piirin rajoittamiseksi millään tavoin.

* t 78 115155

Esimerkki 67 (S)-N-metyyli-2-[Ν' -(t-butoksikarbonyyli)allyy-li amino]-3-fenyylipropionamidi Kaavio C, vaihe a: 5 Yhdistetään (S)-2- [N-(t-butoksikarbonyyli)allyy- liamino]-3-fenyylipropionihappo (0,7 g, 2,29 mmol), l-(3-dimetyyliaminopropyyli)-3 -etyylikarbodi-imidihydrokloridi (0,50 g, 2,52 mmol), 1-hydroksibentsotriatsoli (0,38 g, 2,52 mmol), metyyliamiinihydrokloridi (0,17 g, 2,52 mmol) 10 ja di-isopropyylietyyliamiini (0,59 ml, 2,52 mmol) dikloo-rimetaanissa (23 ml) ja saatua seosta sekoitetaan 18 tunnin ajan. Seos laimennetaan etyyliasetaatilla ja uutetaan 1 M suolahapolla, kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesi-liuoksella ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksel-15 la. Erotettu orgaaninen kerros kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. Jäännös kromatografoidaan käyttäen silikageeliä ja eluoiden peräjälkeen 5-%:isella metanolilla/dikloorimetaanilla ja 10-%:isella metanolil-la/dikloorimetaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste: 20 TLC Rf = 0,44 (silikageeli, 30-%:inen etyyliasetaatti/hek-saani).

Esimerkki 68 (S)-N-metyyli-2-[Ν' -(t-butoksikarbonyyli)allyy-liamino]-3 - f enyylipropyyliamiini 25 Kaavio C, vaihe b:

Liuotetaan (S)-N-metyyli-2-[Ν' -(t-butoksikarbonyy-X li)allyyliamino]-3-fenyylipropionamidi (0,31 g, 0,98 mmol) ’ * dikloorimetaaniin (10 ml) ja liuos jäähdytetään kuiva jää/asetoni-hauteessa -78 °C:n lämpötilaan. Lisätään di-30 isobutyylialumiinihydridiä (1,96 ml, 1,5 M tolueenissa, 2,94 mmol). Seoksen annetaan lämmetä hitaasti ympäröivään lämpötilaan ja sitä sekoitetaan 16 tunnin ajan. Lisätään t ; t ; hitaasti 15-%:ista natriumhydroksidin vesiliuosta (3,0

I I

• ml) . Seos uutetaan dikloorimetaanilla, orgaaninen kerros v\: 35 kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, I I i 115135 79 jolloin saadaan otsikon yhdiste seoksena, joka otetaan seuraavaan vaiheeseen puhdistamatta enempää.

Esimerkki 69 (S) -N-metyyli-N- [ [2- [N# - (t-butoksikarbonyyli) allyy-5 li amino] -3-fenyylipropyyli]bentsamidi

Kaavio C, vaihe c:

Yhdistetään (S) -N-metyyli-2-[N'-(t-butoksikarbonyyli) allyyliamino]-3-fenyylipropyyliamiini (1,23 g, 4,25 mmol) ja di-isopropyylietyyliamiini (0,36 ml, 2,0 mmol) 10 dikloorimetaanissa (20 ml). Seos jäähdytetään 0 °C:n lämpötilaan jäähauteessa. Reaktioseokseen lisätään bentsoyy-likloridia (0,24 ml, 2,0 mmol) ja sitä sekoitetaan 0 °C:n lämpötilassa 2 tunnin ajan. Reaktioseos uutetaan vedellä, orgaaninen kerros kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haih-15 dutetaan tyhjössä. Jäännös kromatografoidaan käyttäen si-likageeliä ja eluoiden 20-%:isella etyyliasetaatilla/hek-saanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,59 (silikageeli, 20-%:inen etyyliasetaatti/heksaani). Esimerkki 70 20 (S) -N-metyyli-N- [ [2- [N' - (t-butoksikarbonyyli) allyy liamino] - 3 - fenyylipropyyli]-(3,4,5-trimetoksi)-bentsamidi Kaavio C, vaihe c: ,*·, Yhdistetään (S) -N-metyyli-2- [Ν' - (t-butoksikarbonyy- ; 25 li) allyyliamino]-3-fenyylipropyyliamiini (0,57 g, 1,87 mmol) ja di-isopropyylietyyliamiini (0,65 ml, 3,74 mmol) dikloorimetaanissa (40 ml). Seos jäähdytetään 0 °C-.n läm-’’’ * potilaan jäähauteessa. Reaktioseokseen lisätään 3,4,5-tri- metoksibentsoyylikloridia (0,43 g, 1,87 mmol) ja sitä se-30 koitetaan 0 °C:n lämpötilassa 4 tunnin ajan. Reaktioseos uutetaan vedellä, orgaaninen kerros kuivataan MgS04:lla, .·, ; suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. Jäännös kromatogra-

• I

foidaan käyttäen silikageeliä ja eluoiden peräjälkeen . 5-%:isella etyyliasetaatilla/heksaanilla, 20-%:isella 115135 80 etyyliasetaatilla/heksaanilla ja 35-%:isella etyyliase-taatilla/heksaanilla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 71 (S) -N-metyyli-N- [ [2- [Ν' - (t-butoksikarbonyyli) -2-ok-5 soetyyliamino]-3 -femyylipropyyli]-(3,4,5-trimetok- si)bentsamidi

Kaavio C, vaihe d:

Yhdistetään (S)-N-metyyli-N-[[2-[N'-(t-butoksikarbonyyli) ailyyliamino]-3-fenyylipropyyli]-(3,4,5-trimetok-10 si)bentsamidi (0,145 g, 0,29 mmol), N-metyylimorfOliini-N-oksidi (0,037 g, 0,32 mmol), asetoni (5 ml) ja vesi (5 ml). Seokseen lisätään osmiumtetraoksidia (0,15 ml, 0,04 M THF:ssa, 0,006 mmol) ja sitä sekoitetaan inertissä ilmakehässä 18 tunnin ajan. Reaktioseos kaadetaan natrium-15 bisulfiitin kyllästettyyn liuokseen ja välituotedioli uutetaan etyyliasetaattiin. Erotettu orgaaninen kerros kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan raaka dioli, joka käytetään puhdistamatta enempää. Raaka dioli liuotetaan kloroformiin (10 ml) . Saa-20 tuun liuokseen lisätään lyijytetra-asetaattia (0,32 g, 0,32 mmol) liuoksena kloroformissa (10 ml). Reaktioseosta sekoitetaan 30 minuutin ajan. Se kaadetaan kyllästettyyn natriumbikarbonaatin vesiliuokseen ja uutetaan dikloorime-täänillä. Erotettu orgaaninen kerros kuivataan MgS04:lla, 25 suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,79 (silikageeli, 10-%:inen meta-;; noli/dikloorimetaani). Otsikon yhdiste voidaan käyttää ' ’ puhdistamatta enempää.

Esimerkki 72 30 (S)-N-metyyli-N-[ [2-[Ν'- (t-butoksikarbonyyli)-2-ok- ·...· soetyyliamino] - 3-femyylipropyyli]bentsamidi : Kaavio C, mahdollinen vaihe d: * » *

Yhdistetään (S)-N-metyyli-N-[ [2-[N'- (t-butoksikar-

• I

. bonyyli)ailyy1i amino] - 3 - fenyylipropyy1i]bentsamidi 35 (0,14 g, 0,35 mmol), N-metyylimorfoliini-N-oksidi (0,044

• I

SI

115135 g, 0,38 mmol), asetoni (5 ml) ja vesi (5 ml). Seokseen lisätään osmiumtetraoksidia (0,18 ml, 0,04 M THF:ssa, 0,0074 mmol) ja sitä sekoitetaan inertissä ilmakehässä 18 tunnin ajan. Reaktioseos kaadetaan natriumbisulfiitin kyl-5 lästettyyn liuokseen ja välituotedioli uutetaan etyyliasetaattiin. Erotettu orgaaninen kerros kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan raaka dioli, joka käytetään puhdistamatta enempää. Raaka dioli liuotetaan kloroformiin (5 ml) . Saatuun liuok-10 seen lisätään lyijytetra-asetaattia (0,16 g, 0,38 mmol) liuoksena kloroformissa (5 ml). Reaktioseosta sekoitetaan 30 minuutin ajan. Se kaadetaan kyllästettyyn natriumbikarbonaatin vesiliuokseen ja uutetaan dikloorimetaanilla. Erotettu orgaaninen kerros kuivataan MgS04:lla, suodatetaan 15 ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste: TLC Rf = 0,76 (silikageeli, 50-%:inen etyyliasetaatti/hek-saani). Otsikon yhdiste voidaan käyttää puhdistamatta enempää.

Yleinen synteettinen menetelmä on esitetty kaavios-20 sa D kaaviossa A lähtöaineena käytetyn aldehydin valmistamiseksi, jolla on rakenne (3), jossa G± on -C(0)-ja G2 on -C (0) - . Reagenssit ja lähtöaineet ovat helposti alan am-mattimiehen saatavissa. Kaaviossa D kaikki substituentit ovat kuten edellä on määritelty ellei toisin mainita.

» » # · 115135 82

Kaavio D

CK /Ari o^^mcHs 5 i Vaihe a 0¾. /-NCH3

"-Vy ~uX

C02R5 Ar2 ^1 in (19) CO2R5 Ar2 10 (23)

Mahdollinen / vaihe c /

Mahdollinen 15 vaihe b 0¾. ^r1 /NCH3

OH

y^a orcB'

I I

CO2R5 Ar2 n I

(24) H £^2R5 Ar2 !.. (3), jossa p-1 on 1, G^ on -C(0)- ja I 25 G~ on -C (O) - °^Ari ·> Mahdollinen ; ; : vaihe d ' /NCH3 1 ° ]

30 I

:'i I

; ; CO2R5 Ar2 : ; ; (3), jossa p-1 on 2, ^ ; 35 on —C(O)— ja ’ * G2 on -C(O)- 115135 83

Kaavion D vaiheessa rakenteen (19) mukainen sopiva allyylikarbamaattihappo-N-metyyliamidi, joka on valmistettu käyttäen kaavion C menetelmiä, saatetaan imidointireak-tioon sopivan happokloridin kanssa, jolla on rakenne Ar-,^-5 (0)C1, jolloin saadaan rakenteen (23) mukainen N-metyyli- imidi.

Rakenteen (19) mukainen sopiva allyylikarbamaatti-happo-N-metyyliamidi on amidi, jonka stereokemia, R5- ja Ar2-ryhmät ovat kuten on niiden toivotaan olevan kaavan (1) 10 mukaisessa lopputuotteessa. Rakenteen (19) mukainen sopiva allyylikarbamaattihappo-N-metyyliamidi voi myös olla amidi, jonka stereokemia on kuten on toivottua kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa ja Ar2 ja R5 tuottavat suojauksen poistamisen jälkeen Ar2-ryhmän ja R3-ryhmän, jotka ovat 15 toivottuja kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa. Rakenteen (19) mukainen sopiva allyylikarbamaattihappo-N-metyy-liamidi voi myös olla amidi, jonka stereokemia tuottaa erottamisen jälkeen stereokemian, joka on toivottu kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa, ja R5 ja Ar2 ovat kuten 20 niiden toivotaan olevaan kaavan (1) mukaisessa tuotteessa. Rakenteen (19) mukainen sopiva allyylikarbamaattihappo-N-metyyliamidi voi myös olla amidi, jonka stereokemia tuot-taa erottamisen jälkeen stereokemian, joka on toivottu kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa, ja Ar2 ja R5 tuotta-.·. 25 vat suojauksen poistamisen jälkeen Ar2-ryhmän ja R3-ryhmän, jotka ovat toivottuja kaavan (1) mukaisessa lopputuottees-sa.

Sopiva rakenteen ArxC (O) Cl mukainen happokloridi on happokloridi, jossa Ar-L-ryhmä on kuten sen toivotaan olevan ··*: 3 0 kaavan (1) mukaisessa tuotteessa, tai se voi tuottaa suo- jauksen poistamisen jälkeen Ar-^ryhmän, joka on toivottu j kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa.

Imidointireaktiot ovat alalla hyvin tunnettuja ja ne on kuvattu lähteissä Tull, R. et ai, J. Org. Chem., 29, 115135 84 2425 (1964) ja Nagata, W. et ai., Annalen der Chemie, 641, 184 (1964) .

Esimerkiksi rakenteen (19) mukainen sopiva allyyli-karbamaattihappo-N-metyyliamidi saatetaan kosketukseen ra-5 kenteen Α^0(0)01 mukaisen sopivan happokloridin kanssa. Reaktio toteutetaan Ν,Ν-dimetyylianiliinissa. Yleensä reaktio toteutetaan 60 - 120 °C:n lämpötilassa. Tuote voidaan eristää ja puhdistaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten uuttoa, haihduttamista, kromatogra-10 fiaa ja uudelleenkiteyttämistä.

Vaihtoehtoisesti esimerkiksi rakenteen (19) mukainen sopiva allyylikarbamaattihappo-N-metyyliamidi saatetaan kosketukseen sopivassa liuottimessa, kuten tolueenis-sa tai tetrahydrofuraanissa, sopivan emäksen, kuten nat-15 riumhydridin, kanssa. Edellä saatu liuos saatetaan kosketukseen rakenteen Ar2C(0)Cl mukaisen sopivan happokloridin kanssa ja sitten reaktioseos kuumennetaan yleensä lämpötilaan, joka on 50 °C:sta liuottimen palautusjäähdytyslämpö-tilaan.

20 Tuote voidaan eristää ja puhdistaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten uuttoa, haihdut-: tamista, kromatografiaa ja uudelleenkiteyttämistä.

Kaavion D mahdollisessa vaiheessa b rakenteen (23) mukainen N-metyyli-imidi muutetaan aldehydiksi, jolla on 25 rakenne (3), jossa p-1 on 1, G]_ on -C (O) - ja G2 on -C(0)-.

] V Reaktio toteutetaan käyttämällä menetelmiä, jotka on ylei- ; sesti opetettu kaavion C mahdollisessa vaiheessa d.

Kaavion D mahdollisessa vaiheessa c rakenteen (23) mukainen N-metyyli-imidi saatetaan kosketukseen sopivan 3 0 boraanireagenssin kanssa ja sitten tuote hapetetaan perok- ' sidilla, jolloin saadaan rakenteen (24) mukainen alkoholi.

:\j Reaktio toteutetaan käyttämällä menetelmiä, jotka on ope- : tettu kaavion C mahdollisessa vaiheessa e.

Kaavion D mahdollisessa vaiheessa d rakenteen (24) * 35 mukainen alkoholi hapetetaan, jolloin saadaan aldehydi, 85 Π5135 jolla on rakenne (3), jossa p-1 on 2, G-l on -C(0)- ja G2 on -C(0)-. Reaktio toteutetaan käyttämällä menetelmiä, jotka on opetettu kaavion C mahdollisessa vaiheessa f.

Seuraavat esimerkit esittävät tyypillisiä synteese-5 jä, kuten kaaviossa D on kuvattu. Näiden esimerkkien ymmärretään olevan pelkästään kuvaavia eikä niitä ole tarkoitettu rajoittamaan keksinnön piiriä millään tavoin. Esimerkki 73 (S) -N-metyyli-N- [ [2- [Ν' - (t-butoksikarbonyyli) allyy-10 liamino]-3-fenyylipropyyli]bentsimidi

Kaavio D, vaihe a:

Yhdistetään (S) -N-metyyli-2- [N' - (t-butoksikarbonyyli) allyyliamino]-3-fenyylipropionamidi (5 mmol) ja bentso-yylikloridi (5 mmol) N,N-dimetyylianiliinissa (20 ml) . 15 Seos kuumennetaan 90 °C:n lämpötilaan ja sitä sekoitetaan 24 tuntia. Reaktioseos haihdutetaan tyhjössä. Reaktioseos jaetaan dikloorimetaanin ja veden kesken. Orgaaninen kerros erotetaan, kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä. Jäännös kromatografoidaan käyttäen sili-20 kageeliä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 74 : (S) -N-metyyli-N- [ [2- [Ν' - (t-butoksikarbonyyli) -2-ok- soetyyliamino] -3-fenyylipropyyli]bentsimidi Kaavio D, mahdollinen vaihe b: : 25 Yhdistetään (S)-N-metyyli-N-[ [2- [Ν'- (t-butoksikar- t"V bonyyli) allyyliamino]-3-fenyylipropyyli] bentsimidi (1 • i » !!', mmol), N-metyylimorf oliini-N-oksidi (1,1 mmol), asetoni (15 ml) ja vesi (15 ml). Seokseen lisätään osmiumtetraok-sidia (0,48 ml, 0,04 M THF:ssa, 0,021 mmol) ja sitä sekoi-30 tetaan inertissä ilmakehässä 18 tunnin ajan. Reaktioseos : ,,,* kaadetaan natriumbisulf iitin kyllästettyyn liuokseen ja ; välituotedioli uutetaan etyyliasetaattiin. Erotettu orgaa- ninen kerros kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdute-• taan tyhjössä. Raaka dioli käytetään puhdistamatta enem- 35 pää. Raaka dioli liuotetaan kloroformiin (15 ml) . Saatuun 115135 86 liuokseen lisätään lyijytetra-asetaattia (1,1 mmol) liuoksena kloroformissa (15 ml) . Reaktioseosta sekoitetaan 30 minuutin ajan. Se kaadetaan kyllästettyyn natriumbikarbonaatin vesiliuokseen ja uutetaan dikloorimetaanilla.

5 Erotettu orgaaninen kerros kuivataan MgS04 :11a, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Yleinen synteettinen menetelmä on esitetty kaaviossa E kaaviossa A lähtöaineena käytetyn aldehydin valmistamiseksi, jolla on rakenne (3), jossa Gx on -CH2- ja G2 on 10 -CH2-. Reagenssit ja lähtöaineet ovat helposti alan ammat timiehen saatavissa. Kaaviossa E kaikki substituentit ovat kuten edellä on määritelty ellei toisin mainita.

I I I

• I · I i * • * • t · t # * * t · t » » * » « I * » » » m n i » · » < ♦ < » 115135 87

Kaavio E JkX\

Vaihe a °V/\ γ xh3 ch3

(CH2)p-1 f (CH2)p-1 I

Y VY ^ \^S

10 | I

H CO2R5 Ar2 (25) CO2R5 Ar2 (3), jossa p-1 on 1, on ja G2 on “CH2_ Vaihe b 15 .^Ari .Άη

XN. O. .N

Yh3 tVaxh& c ^H3

(CH2)p-1 I

! P9'Y VN

I' <27> CO2R5 Ar2 (26) CO2R5 Ar2 H 25 vaihe d Y'1 γΓ1 :;i: /\Hi YCH3 •:i|· 30 H0 <CH2>p-’ ! <28> L2rs αΓ2 h C02Rs Ar2 > · (3), jossa on V,* ~CH2~ 3a G2 on ;\i -ch2- 115135 88

Kaavion E vaiheessa a rakenteen (3) mukainen sopiva aldehydi pelkistetään käyttäen sopivaa pelkistintä, jolloin saadaan rakenteen (25) mukainen alkoholiamidi.

Rakenteen (3) mukainen sopiva aldehydi on aldehydi, 5 jossa p-1 on 1 ja Gx on -CH2-, G2 on -C(0)-, ja stereoke-mia, R5, Αγ-l ja Ar2 ovat kuten niiden toivotaan olevan kaavan (1) mukaisessa tuotteessa. Rakenteen (3) mukainen sopiva aldehydi voi olla myös aldehydi, jossa p-1 on 1 ja G-l on -CH2-, G2 on -C(0)- ja stereokemia on kuten toivottua 10 kaavan (1) mukaisessa lopputuotteesa ja Ar1# Ar2 ja R5 tuottavat suojauksen poistamisen jälkeen ryhmät Ar1 ja Ar2 ja R3, jotka ovat toivottuja kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa. Rakenteen (3) mukainen sopiva aldehydi voi myös olla aldehydi, jossa p-1 on 1 ja Gx on -CH2-, G2 on 15 -C (0) -, ja Ar1; Ar2 ja R3 ovat kuten niiden toivotaan olevan kaavan (I) mukaisessa lopputuotteessa ja stereokemia tuottaa erottamisen jälkeen stereokemian, joka on toivottu kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa. Rakenteen (3) mukainen sopiva aldehydi voi myös olla aldehydi, jossa p-1 20 on 1 ja G-l on -CH2-, G2 on -C(O)- ja ne ovat kuten niiden toivotaan olevan kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa ja : stereokemia tuottaa erottamisen jälkeen stereokemian joka ; on toivottu kaavan (1) mukaisessa lopputuotteessa ja Ar-L ja

Ar2 ja R5 tuottavat suojauksen poistamisen jälkeen ryhmät : ,·. 25 Ar-L ja Ar2 ja R3, jotka ovat toivottuja kaavan (1) mukai sessa lopputuotteessa. Sellaisten yhdisteiden käyttö, !!! joissa R5 on t-butyyli, on edullista aldehydien valmistami seksi, joilla on rakenne (3) , jossa G-l on -CH2- ja G2 on -CH2-, aldehydeistä (3), joissa Gx on -CH2- ja G2 on 30 -C(O)-.

.* Esimerkiksi rakenteen (3) mukainen sopiva aldehydi j saatetaan kosketukseen 1-4 ekvivalentin kanssa sopivaa pelkistintä, kuten natriumboorihydridiä. Sopiva pelkistin on pelkistin, joka pelkistää aldehydin eikä vaikuta min-35 kään mahdollisesti läsnäolevan suojaryhmän amidiin. Reak- » •k » 115135 89 tio toteutetaan sopivassa liuottimessa, kuten metanolissa tai etanolissa. Yleensä reaktio toteutetaan lämpötilassa, joka on 0 °C:sta liuottimen palautusjäähdytyslämpötilaan. Yleensä reaktiot vaativat aikaa 1-72 tuntia. Tuote voi-5 daan eristää ja puhdistaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten jäähdyttämistä, uuttoa, haihduttamista, kromatografiaa ja uudelleenkiteyttämistä.

Kaavion E vaiheessa b rakenteen (25) mukainen alko-holiamidi suojataan käyttäen sopivaa hydroksisuojaryhmää, 10 Pg-j^ryhmää, jolloin saadaan rakenteen (26) mukainen suojattu hydroksiamidiyhdiste. Alkoholiamidi, jolla on rakenne (25), jossa p-1 on 2, valmistetaan kuten on opetettu kaaviossa B rakenteen (18) mukaisen alkoholin valmistamiseksi. Alkoholiamidi, jolla on rakenne (25), jossa p-1 on 2, 15 on sama kuin kaaviossa B valmistettu rakenteen (18) mukainen alkoholi.

Sopiva hydroksisuojaryhmä on ryhmä, joka sallii amidin pelkistämisen, ja tällaisiin suojaryhmiin sisältyvät, rajoittamatta kuitenkaan niihin, tetrahydropyran-2-20 yyli, t-butyylidimetyylisilyyli tai t-butyylidifenyylisi-lyyli. Sopivien hydroksisuojaryhmien valinta ja käyttö on alalla hyvin tunnettua ja ymmärrettyä ja on kuvattu läh-teessä Protecting Groups in Organic Synthesis, T. Greene, Wiley-Interscience (1981) .

; ,·, 25 Kaavion E vaiheessa c rakenteen (26) mukainen suo- jattu hydroksiamidiyhdiste pelkistetään käyttäen sopivaa !!! amidipelkistintä, jolloin saadaan rakenteen (27) mukainen ' suojattu hydroksiamiiniyhdiste.

Esimerkiksi rakenteen (26) mukainen suojattu hyd- • i » 3 0 roksiamidiyhdiste saatetaan kosketukseen 1-5 ekvivalen-. tin kanssa sopivaa amidipelkistintä, kuten litiumalumiini- hydridiä, di-isobutyylialumiinihydridiä tai boraanidime-tyylisulf idikompleksia. Reaktio toteutetaan sopivassa liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa, tolueenissa tai ’ 35 dietyylieetterissä. Yleensä reaktio toteutetaan lämpöti- ’ » 115135 90 lassa, joka on 0 °C:sta liuottimen palautusjäähdytyslämpötilaan. Yleensä reaktiot vaativat aikaa 1-72 tuntia. Tuote voidaan eristää ja puhdistaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten jäähdyttämistä, uuttoa, 5 haihduttamista, kromatografiaa ja uudelleenkiteyttämistä.

Kaavion E vaiheessa d rakenteen (27) mukaisesta suojatusta hydroksiamiiniyhdisteestä poistetaan suojaus, jolloin saadaan rakenteen (28) mukainen hydroksiamiiniyh-diste.

10 Sopivien hydroksisuojaryhmien käyttö ja poistaminen on alalla hyvin tunnettua ja ymmärrettyä ja kuvattu lähteessä Protecting Groups in Organic Synthesis, T. Greene, Wiley-Interscience (1981).

Kuten alan ammattimiehet hyvin ymmärtävät, joko 15 aldehydi, jolla on rakenne (3), jossa G1 on -CH2- ja G2 on -C(O)-, tai rakenteen (25) mukainen alkoholi voitaisiin pelkistää suoraan rakenteen (28) mukaiseksi hydroksiamii-niyhdisteeksi käyttäen sopivaa amidipelkistintä, kuten litiumalumiinihydridiä, di-isobutyylialumiinihydridiä tai 20 boraanidimetyylisulfidikompleksia, kuten on opetettu kaavion E mahdollisessa vaiheessa d.

Kaavion E vaiheessa e rakenteen (28) mukainen hyd-; roksiamiiniyhdiste hapetetaan, jolloin saadaan aldehydi, jolla on rakenne (3), jossa G-l on -CH2-, G2 on -CH2-.

: 25 Alkoholien hapettaminen yhdisteissä, jotka sisältä- *’V vät tertiaarisia amiineja, on alalla hyvin tunnettua ja « · ymmärrettyä ja kuvattu lähteissä T. P. Burkholder ja P. L.

* Fuchs, JACS, 112, 9601 (1990) ja M. P. Kotick et ai., J.

Med. Chem., 26, 1050 (1983).

,,ΙΓ 30 Esimerkiksi kaksi mooliekvivalenttia dimetyylisul- ’,.,* foksidia lisätään tipoittain trifluorietikkahappoanhydri- ,·, ; din liuokseen dikloorimetaanissa noin -60 °C:n lämpötilas- t>iij sa. Lisäyksen jälkeen reaktioseosta sekoitetaan noin kah- . den minuutin ajan. Mooliekvivalentti rakenteen (28) mu- v,‘ 35 kaista hydroksiamiiniyhdistettä liuoksena dikloorimetaa- »

< I

91 115135 nissa lisätään tipoittain. Lisäyksen jälkeen reaktioseosta sekoitetaan noin 40 minuutin ajan, sitten siihen lisätään 3 - 5-kertainen ylimäärä trietyyliamiinia. Reaktioseosta sekoitetaan lämmittäen se ympäröivään lämpötilaan 1-5 5 tunnin kuluessa. Tuote voidaan eristää ja puhdistaa käyttämällä alalla hyvin tunnettua tekniikkaa, kuten uuttoa, haihduttamista, kromatografiaa ja uudelleenkiteyttämistä.

Seuraavat esimerkit esittävät tyypillisiä synteesejä, kuten ne on kuvattu kaaviossa E. Näiden esimerkkien 10 ymmärretään olevan pelkästään kuvaavia eikä niitä ole tarkoitettu keksinnön piirin rajoittamiseksi millään tavoin. Esimerkki 75 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[N-(t-butoksikarbonyy-li) - 2-hydroks ie tyyli amino] -3-fenyylipropionamidi 15 Kaavio E, vaihe a:

Yhdistetään (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[N-(t-bu-toksikarbonyyli)-2-oksoetyyliamino]-3-fenyylipropionamidi (5,0 mmol) ja natriumboorihydridi (5,0 mmol) etanolissa (20 ml). Seosta sekoitetaan 16 tunnin ajan. Se väkevöidään 20 tyhjössä, jolloin saadaan jäännös. Jäännös laimennetaan etyyliasetaatilla ja uutetaan 0,5 M suolahappoliuoksella • ja vedellä. Kerrokset erotetaan, orgaaninen kerros kuiva- :T: taan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jol- loin saadaan otsikon yhdiste.

: 25 Esimerkki 76 , , (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[N-(t-butoksikarbonyy- li) -2 -tetrahydropyran-2-yylioksietyyliamino]-3-fe- ► > t nyylipropionamidi Kaavio E, vaihe b: ‘•J 30 Yhdistetään (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[N-(t-bu- toksikarbonyyli)-2-hydroksietyyliamino]-3-fenyylipropion-amidi (4,0 mmol), p-tolueenisulfonihappo (50 mg) ja dihyd-ropyraani (4 mmol) vedettömässä dikloorimetaanissa. Sitten * » 8 tunnin kuluttua reaktioseos jaetaan dikloorimetaanin ja 35 0,5 M natriumhydroksidiliuoksen kesken. Orgaaninen kerros • » 115135 92 erotetaan ja kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 77 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2 -[N-(t-butoksikarbonyy-5 li) -2-tetrahydropyran-2-yylioksipropyyliamino] -3- fenyylipropionamidi Kaavio E, vaihe b:

Yhdistetään (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[N'-(t-bu-toksikarbonyyli)-2-hydroksipropyyliamino]- 3 - fenyylipro-10 pionamidi (4,0 mmol), p-tolueenisulfonihappo (50 mg) ja dihydropyraani (4 mmol) vedettömässä dikloorimetaanissa. Sitten 8 tunnin kuluttua reaktioseos jaetaan dikloorime-taanin ja 0,5 M natriumhydroksidiliuoksen kesken. Orgaaninen kerros erotetaan ja kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja 15 haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste. Esimerkki 78 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-N-[N-(t-butoksikarbonyy-li)-2-tetrahydropyran-2-yylioksietyyliamino]-3-fe-nyy1ipropyy1iami ini 20 Kaavio E, vaihe c:

Yhdistetään (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[N-(t-bu-toksikarbonyyli) -2-tetrahydropyran-2-yylioksietyyliamino] -3-fenyylipropionamidi (4 mmol) ja litiumalumiinihydridi (8 mmol) tetrahydrofuraanissa (20 mmol). Seosta kuumennetaan 25 palautusjäähdyttäen 48 tunnin ajan. Se jäähdytetään ympä röivään lämpötilaan, siihen lisätään hitaasti vettä (0,3 !(.' ml), 15-%:ista natriumhydroksidiliuosta (0,3 ml) ja vettä (0,9 ml) . Saatua seosta sekoitetaan, kunnes kaikki rea-genssi on käytetty. Seos suodatetaan ja haihdutetaan tyh-··- 30 jössä, jolloin saadaan jäännös. Jäännös jaetaan etyyliase- taatin ja veden kesken. Orgaaninen kerros erotetaan ja ! kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, i,,,; jolloin saadaan otsikon yhdiste.

t * · i ' 1 * I » l a » 93 115135

Esimerkki 79 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-N-[N-(t-butoksikarbonyy-li) -2-tetrahydropyran-2-yylioksipropyyliamino] - 3-f enyy1ipropyy1iami ini 5 Kaavio E, vaihe c:

Yhdistetään (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[N-(t-bu-t oks ikarbonyy1i)-2 -1etrahydropyran-2-yylioksipropyyliami-no]-3-fenyylipropionamidi (4 mmol) ja litiumalumiinihydri-di (8 mmol) tetrahydrofuraanissa (20 mmol). Seosta kuumen-10 netaan palautusjäähdyttäen 48 tunnin ajan. Se jäähdytetään ympäröivään lämpötilaan, siihen lisätään hitaasti vettä (0,3 ml), 15 - %:ista natriumhydroksidiliuosta (0,3 ml) ja vettä (0,9 ml). Saatua seosta sekoitetaan, kunnes kaikki reagenssi on käytetty. Seos suodatetaan ja haihdutetaan 15 tyhjössä, jolloin saadaan jäännös. Jäännös jaetaan etyyliasetaatin ja veden kesken. Orgaaninen kerros erotetaan ja kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 80 20 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-N-[N-(t-butoksikarbonyy- li) -2-hydroksietyyliamino]-3-fenyylipropyyliamiini Kaavio E, vaihe d:

Yhdistetään (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-N-[N-(t-bu-. , toksikarbonyyli) -2-tetrahydropyran-2-yylioksietyyliamino] - ; . 25 3-fenyylipropyyliamiini (2,0 mmol) ja p-tolueenisulfoni- happo (3 mmol) metanolissa (20 ml) . Sitten 8 tunnin kulut-M tua reaktioseos haihdutetaan tyhjössä. Jäännös jaetaan dikloorimetaanin ja 0,5 M natriumhydroksidiliuoksen kesken. Orgaaninen kerros erotetaan ja kuivataan MgS04:lla, ( ! > ···! 30 suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan ot- sikon yhdiste.

* i » »

1 1 I M

1 » I

» ! I

115135 94

Esimerkki 81 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-N-[N-(t-butoksikarbonyy-li) -2-hydroksipropyyliamino] -3-fenyylipropyyliamii-ni 5 Kaavio E, vaihe d:

Yhdistetään (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-N-[N-(t-bu-toksikarbonyyli)-2 -1etrahydropyran-2-yylioksipropyyliami-no]-3-fenyylipropyyliamiini (2,0 mmol) ja p-tolueenisul-fonihappo (3 mmol) metanolissa (20 ml) . Sitten 8 tunnin 10 kuluttua reaktioseos haihdutetaan tyhjössä. Jäännös jaetaan dikloorimetaanin ja 0,5 M natriumhydroksidiliuoksen kesken. Orgaaninen kerros erotetaan ja kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

15 Esimerkki 82 (S) -N-metyyli-N-bentsyyli-N- [2- [Ν' - (t-butoksikar-bonyyli) -2-oksoetyyliamino] -3-fenyylipropyyliamiini Kaavio E, vaihe e:

Yhdistetään trifluorietikkahappoanhydridi (4,8 20 mmol) ja dikloorimetaani (10 ml) ja seos jäähdytetään -60 °C:n lämpötilaan. Lisätään tipoittain dimetyylisulfoksidin (9,6 mmol) liuos dikloorimetaanissa (1 ml) samalla pitäen lämpötila alle -55 °C:ssa. Lisäyksen jälkeen seosta ·, sekoitetaan kahden minuutin ajan. Lisätään liuos, jossa on 25 (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-N-[N-(t-butoksikarbonyyli)-2- ·[ hydroksietyyliamino]-3-fenyylipropyyliamiinia (2 mmol) dikloorimetaanissa, ja saatua seosta sekoitetaan 45 minuu- ♦ I · ’ tin ajan. Reaktioseos jäähdytetään -78 °C:n lämpötilaan ja siihen lisätään trietyyliamiinia (10 mmol) tipoittain. ···! 3 0 Reaktioseoksen annetaan lämmetä ympäröivään lämpötilaan ja sitä sekoitetaan 45 minuutin ajan. Reaktioseos kaadetaan .*. : veteen. Tämä seos uutetaan dietyylieetterillä. Orgaaninen ; kerros erotetaan ja kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja • haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

115135 95

Esimerkki 83 (S) -N-metyyli-N-bentsyyli-N- [2- [N' - (t-butoksikar-bonyyli)-2-oksopropyyliamino]-3-fenyylipropyyli-amiini 5 Yhdistetään trifluorietikkahappoanhydridi (4,8 mmol) ja dikloorimetaani (10 ml) ja seos jäähdytetään -60 °C:n lämpötilaan. Lisätään tipoittain dimetyylisulfok-sidin (9,6 mmol) liuos dikloorimetaanissa (1 ml) samalla pitäen lämpötila alle -55 °C:ssa. Lisäyksen jälkeen seosta 10 sekoitetaan kahden minuutin ajan. Lisätään liuos, jossa on (S) -N-bentsyyli-N-metyyli-N-[N-(t-butoksikarbonyyli)-2-hydroksipropyyliamino]-3-fenyylipropyyliamiinia (2 mmol) dikloorimetaanissa, ja saatua seosta sekoitetaan 45 minuutin ajan. Reaktioseos jäähdytetään -78 °C:n lämpötilaan ja 15 siihen lisätään trietyyliamiinia (10 mmol) tipoittain. Reaktioseoksen annetaan lämmetä ympäröivään lämpötilaan ja sitä sekoitetaan 45 minuutin ajan. Reaktioseos kaadetaan veteen. Tämä seos uutetaan dietyylieetterillä. Orgaaninen kerros erotetaan ja kuivataan MgS04:lla, suodatetaan ja 20 haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Takykiniinit ovat luokka neuropeptidejä, joille on yhteistä C-päätteen sekvenssi, Phe-Xaa-Gly-Leu-Met-NH2. Takykiniinit ovat laajasti jakautuneina ääreishermostossa ja keskushermostossa, joissa ne sitoutuvat ainakin kolmeen : 25 reseptori tyyppi in. ΝΚΧ-, NK2- ja NK3-reseptorit ovat määri- V teltyjä vastaavasti substanssi P:n, neurokiini A:n (NKA) ;; ja neurokiniini B:n (NKB) ensisijaisen sitoutumisaffini- teetin mukaan.

Substanssi P:n vaikutusten antagonismi sen ensisi-30 jäiseen reseptoriin eli NK^-reseptoriin ei estä NKA:n vaikutuksia sen ensisijaiseen reseptoriin eli NK2-reseptoriin.

, : Sen vuoksi sellaisen antagonistin edut, jolla on affini- ____; teetti kumpaankin NK-l- ja NK2-reseptoriin, olisivat näiden . molempien reseptoreiden välittämien tautien ja sairauksien V,’ 35 kliinisten oireiden vähentäminen tai estäminen.

115135 96

Takykiniiniantagonistien käytölle on tarvetta erilaisten takykiniinin välittämien tautien ja sairauksien hoidossa, mukaan luettuna virtsarakon tulehdus; keuhkoputken laajentuma; yliherkkyysreaktiot; kivun hoito; perifee-5 rinen neuropatia; herpeksen jälkeinen neuralgia; haitalliset immunologiset reaktiot; hengityselinten taudit, kuten astma, keuhkoputkentulehdus, yskä, nuha ja allergiat ja vastaavat; silmätaudit, kuten sidekalvontulehdus ja keväinen sidekalvontulehdus; ihotaudit, kuten kosketusihottuma, 10 atooppinen ihottuma ja nokkosrokko; tulehdustaudit, kuten nivelreuma ja nivelrikko ja vastaavat; gastrointestinaali-set sairaudet, kuten Crohnin tauti, oksentaminen ja haavainen paksusuolen tulehdus; verisuonten laajenemisesta johtuvat sairaudet, kuten rasitusrintakipu ja migreeni; ja 15 keskushermoston taudit ja sairaudet, kuten ahdistuneisuus, depressio, psykoosi, skitrofrenia, dementia.

On ymmärrettävää, että takykiniinin välittämät taudit ja sairaudet ovat tauteja ja sairauksia, joissa taky-kiniinit ovat osallisina joko kokonaan tai osittain niiden 20 kliinisissä oireissa. Lisäksi takykiniinien osallisuus ei ole välttämättä tietyn takykiniinin välittämän taudin tai sairauden syy. Takykiniinin antagonistit ovat hyödyllisiä näiden takykiniinin välittämien tautien ja sairauksien kontrolloimisessa tai hoidollisen lievityksen tuottamises-25 sa.

t-t Tämä keksintö tuottaa kaavan (1) mukaiset uudet ja » ) · käyttökelpoiset takykiniiniantagonistit tai niiden ste-’ reoisomeerit tai farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat.

Tarkemmin sanottuna tämä keksintö tuottaa kaavan (1) mu-··>: 30 kaiset yhdisteet, jotka ovat N^-reseptoriantagonisteja, NK2-reseptoriantagonisteja sekä molempien NK^- ja NK2-re-: septoreiden antagonisteja.

; Muussa suoritusmuodossa tämä keksintö tuottaa mene- • telmän takykiniinin välittämien tautien ja sairauksien ’ 35 hoitamiseksi tällaisen hoidon tarpeessa olevalla potilaal- 115135 97 la, jolloin mainitulle potilaalle annetaan hoidollisesti tehokas määrä kaavan (1) mukaista yhdistettä. Erilaiset taudit ja sairaudet, jotka on kuvattu tässä hoidettaviksi, ovat alan ammattimiesten hyvin tuntemia ja ymmärtämiä. On 5 myös tiedossa, että alan ammattimies voi vaikuttaa asiaan liittyviin tauteihin ja sairauksiin hoitamalla potilasta, joka on hiljattain sairastunut näihin tauteihin tai sairauksiin tai hoitamalla ennalta ehkäisevästi potilasta, joka sairastunut näihin tauteihin ja sairauksiin, käyttä-10 mällä hoidollisesti tehokasta määrää kaavan (1) mukaisia yhdisteitä.

Tässä käytettynä termi "potilas" viittaa lämminveriseen eläimeen, kuten nisäkkääseen, joka sairastaa määrättyä takykiniinin välittämää tautia tai sairautta. Ym-15 märretään, että marsut, koirat, kissat, rotat, hiiret, hevoset, nautakarja, lampaat ja ihminen ovat esimerkkejä eläimistä, jotka sisältyvät tämän termin merkityksen piiriin.

Tässä käytettynä termi "hoidollisesti tehokas mää-20 rä" kaavan (1) mukaista yhdistettä viittaa määrään, joka on tehokas takykiniinin välittämisen tautien ja sairauksien kontrolloimiseksi. Termin "kontrolloiminen" on tar-koitus viitata kaikkiin prosesseihin, joissa voi ilmetä tässä kuvattujen tautien ja sairauksien etenemisen hidas-25 tumista, keskeytymistä, pysähdystä tai lakkaamista, mutta , se ei välttämättä osoita kaikkien taudin tai sairauden t..i oireiden totaalista eliminointia ja sen on tarkoitus si sältää takykiniinin välittämien tautien ja sairauksien ennalta ehkäisevä hoito.

< I * 30 Hoitava diagnostikko alan ammattimiehenä osaa hel- posti määrittää hoidollisesti tehokkaan määrän käyttämällä ;'· tavanomaista tekniikkaa ja ottamalla huomioon vastaavissa : olosuhteissa saadut tulokset. Hoidollisesti tehokkaan mää rän, annoksen, määrittämisessä hoitava diagnostikko ottaa ‘ ' 35 huomioon erilaiset tekijät, mukaan luettuna, rajoittumatta

i I

115135 98 kuitenkaan niihin, nisäkäslaji; sen koko, ikä ja yleinen terveys; kysymyksessä oleva erityinen tauti; taudin aste tai osallisuus tai ankaruus; yksittäisen potilaan vaste; nimenomainen annettava yhdiste; lääkkeen antotapa; annet-5 tavan valmisteen biologista käyttökelpoisuutta koskevat tunnuspiirteet; valittu annostusohje; samanaikaisen lääkityksen käyttö; ja muut asiaankuuluvat olosuhteet.

Kaavan (1) mukaisen yhdisteen hoidollisesti tehokkaan määrän odotetaan vaihtelevan noin 0,1 mg:sta/ruu-10 miinpaino-kg/päivä (mg/kg/päivä) noin 100 mg:aan/kg/päivä. Alan ammattimies kykenee määrittämään edulliset määrät.

Toteutettaessa edellä kuvattuja takykiniinin välittämiä tauteja tai sairauksia sairastavan potilaan hoitoa, kaavan (1) mukainen yhdiste voidaan antaa missä tahansa 15 muodossa tai millä tahansa tavalla, joka tekee yhdisteen biologisesti käyttökelpoiseksi tehokkaassa määrin, mukaan luettuna lääkkeen antaminen suun kautta, sisäänhengityksen kautta ja ruuansulatuskanavan ulkopuolisesti. Esimerkiksi kaavan (1) mukaisia yhdisteitä voidaan antaa potilaalle 20 suun kautta, antamalla aerosolia tai kuivaa jauhetta sisäänhengityksen kautta, ihonalaisesti, lihaksensisäisesti, laskimonsisäisesti, transdermaalisesti, nenänsisäisesti, peräsuolen kautta ja vastaavasti. Lääkkeen antaminen suun kautta tai sisäänhengityksen kautta on yleensä edullista 25 hengitysteiden tautien ja sairauksien, esim. astman, hoitamiseksi. Valmisteiden valmistuksen alan ammattimies voi helposti valita sopivan antomuodon ja -tavan riippuen va-

• I

1 litun yhdisteen erityisistä tunnusmerkeistä, hoidettavasta taudista tai sairaudesta, taudin tai sairauden vaiheesta ··.: 3 0 ja muista asiaankuuluvista olosuhteista. [Reminton's

Pharmaceutical Sciences, 18. painos, Mack Publishing Co.

: (1990) ] .

.Tämän keksinnön yhdisteet voidaan antaa potilaalle yksin tai farmaseuttisen koostumuksen muodossa yhdistel-V.‘ 35 mässä farmaseuttisesti hyväksyttävien kantajien tai täyte- 115155 99 aineiden kanssa, joiden osuuden ja luonteen määräävät valitun yhdisteen liukoisuus ja kemialliset ominaisuudet, lääkkeen valittu antotapa ja standardimainen farmaseuttinen käytäntö. Tämän keksinnön yhdisteet, vaikka ne ovat 5 tehokkaita sinällään, voidaan formuloida ja antaa potilaalle niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen muodossa, kuten happoadditiosuolojen ja emäsadditiosuolo-jen muodossa, stabiilisuuden, kiteyttämisen mukavuuden, lisääntyneen liukoisuuden ja vastaavan vuoksi.

10 Muussa suoritusmuodossa tämä keksintö tuottaa far maseuttiset koostumukset, jotka sisältävät hoidollisesti tehokkaan määrän kaavan (1) mukaista yhdistettä seoksessa tai muuten yhteydessä yhden tai useamman farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan tai täyteaineen kanssa.

15 Farmaseuttiset koostumukset valmistetaan farmaseut tisella alalla hyvin tunnetulla tavalla. Kantaja tai täyteaine voi olla kiinteä, puolikiinteä tai nestemäinen aine, joka voi toimia aktiivisen aineen vehikkelinä tai väliaineena. Sopivat kantajat tai täyteaineet ovat hyvin 20 tunnettuja alalla. Farmaseuttinen koostumus voidaan sovittaa käytettäväksi suun kautta, sisäänhengityksen kautta, ruuansulatuskanavan ulkopuolisesti tai paikallisesti, ja se voidaan antaa potilaalle tablettien, kapseleiden, aero-;solien, hengitettävien lääkkeiden, peräpuikkojen, liuok-: 25 sen, suspensioiden ja vastaavien muodossa.

Tämän keksinnön yhdisteet voidaan antaa potilaalle ! suun kautta esimerkiksi inertin laimennusaineen tai syötä- ‘ väksi kelpaavan kantaja-aineen kanssa. Ne voidaan sulkea gelatiinikapseleihin tai puristaa tableteiksi. Suun kautta ··>·’ 3 0 tapahtuvaa hoidollista käyttöä varten yhdisteet voidaan ',,,· sekoittaa täyteaineiden kanssa ja käyttää tablettien, ; suussa liukenevien tablettien, kapseleiden, eliksiirien, .suspensioiden, siirappien, vohveleiden, purukumien ja vas- taavien muodossa. Näiden valmisteiden pitäisi sisältää ' 35 vähintään 4 % tämän keksinnön yhdistettä, aktiivista ai- 100

11 SI 3E

netta, mutta määrä voi vaihdella riippuen nimenomaisesta muodosta ja se voi olla tarkoituksenmukaisesti 4 - noin 70 % yksikön painosta. Koostumuksissa läsnäolevan yhdisteen määrä on sellainen, että saavutetaan sopiva annostus.

5 Tämän keksinnön mukaiset edulliset koostumukset ja valmisteet voi määrittää alan ammattimies.

Tabletit, pillerit, kapselit, suussa liukenevat tabletit ja vastaavat voivat myös sisältää yhden tai useamman seuraavista apuaineista: sideaineita, kuten mik-10 rokiteistä selluloosaa, traganttikumia tai gelatiinia; täyteaineita, kuten tärkkelystä tai laktoosia, hajotusai-neita, kuten alginiinihappoa, Primogeliä, maissitärkkelys-tä ja vastaavaa: voiteluaineita, kuten magnesiumstearaat-tia tai Sterotexiä; liukuaineita, kuten kolloidista pii-15 dioksidia; ja makeutusaineita, kuten sakkaroosia tai sak-kariinia voidaan lisätä tai makuainetta, kuten piparminttua, metyylisalisylaattia tai appelsiinimakuainetta. Kun annostusyksikkömuoto on kapseli, se voi sisältää edellisten tyyppisten aineiden lisäksi nestemäisen kantajan, ku-20 ten polyeteeniglykolin tai rasvaöljyn. Muut annostusyksik-kömuodot voivat sisältää muita erilaisia aineita, jotka muuntavat annostusyksikön fysikaalista muotoa, esimerkiksi päällysteitä. Siten tabletit tai pillerit voidaan päällys-tää sokerilla, shellakalla tai muilla enteerisillä pääl-25 lystysaineilla. Siirappi voi sisältää näiden yhdisteiden lisäksi sakkaroosia makeutusaineena ja tiettyjä säilöntä- i · . ! aineita, väriaineita ja värejä ja makuaineita. Näiden eri- » · ‘ laisten koostumusten valmistuksessa käytettävien aineiden pitäisi olla farmaseuttisesti puhtaita ja myrkyttömiä käy-*·.·’ 30 tettävissä määrissä.

Ruuansulatuskanavan ulkopuolista hoidollista käyt-: töä varten tämän keksinnön yhdisteet voidaan sisällyttää .; liuokseen tai suspensioon. Näiden valmisteiden pitäisi sisältää vähintään 0,1 % keksinnön yhdistettä, mutta määrä 35 voi vaihdella välillä 0,1 - noin 50 % valmisteen painosta.

115155 101 Tällaisissa koostumuksissa läsnäolevan kaavan (1) mukaisen yhdisteen määrä on sellainen, että saadaan sopiva annostus. Alan ammattimies kykenee määrittämään edulliset koostumukset ja valmisteet.

5 Tämän keksinnön yhdisteet voidaan antaa potilaalle myös sisäänhengityksen kautta, kuten aerosolina tai kuivana jauheena. Lääkkeen vapauttaminen voi tapahtua nestey-tetyn tai puristetun kaasun avulla tai sopivan pumppujär-jestelmän avulla, joka jakaa tämän keksinnön yhdisteet tai 10 niiden valmisteen. Kaavan (1) mukaisten yhdisteiden valmisteet otettavaksi sisäänhengityksen kautta voidaan vapauttaa yhden faasin, kaksi faasia tai kolme faasia käsittävässä järjestelmässä. Erilaisia järjestelmiä on saatavissa kaavan (1) mukaisten yhdisteiden antamiseksi aeroso-15 Iina. Kuivajauhevalmisteet valmistetaan joko pelletoimalla tai jauhamalla kaavan (1) mukainen yhdiste sopivaan hiuk-kaskokoon tai sekoittamalla pelletoitu tai jauhettu kaavan (1) mukainen yhdiste sopivan kantaja-aineen, kuten laktoosin ja vastaavan kanssa. Vapauttaminen sisäänhengityksen 20 kautta käsittää välttämättömän säiliön, aktivaattorit, venttiilit, alasäiliöt ja vastaavat. Alan ammattimies osaa määrätä edulliset aerosoli- ja kuivajauhevalmisteet annet-: : tavaksi potilaalle sisäänhengityksen kautta.

Tämän keksinnön yhdisteet voidaan antaa potilaalle j . 25 myös paikallisesti ja kun näin tehdään, niin kantaja voi . ·. käsittää sopivasti liuoksen, voiteen tai geelin perusai- t'"t neen. Perusaine voi käsittää esimerkiksi yhden tai useam- » f » man seuraavista: vaseliinin, lanoliinin, polyeteeniglyko-leja, mehiläisvahan, kivennäisöljyn, laimennusaineita, ·; 30 kuten vettä ja alkoholia, ja emulgointiaineita ja stabi- loimisaineita. Paikalliset valmisteet voivat sisältää kaa-van (1) mukaisen yhdisteen tai sen farmaseuttisen suolan konsentraation, joka on noin 0,1 - 10 % (paino/yksikköti-lavuus).

115135 102

Liuokset tai suspensiot voivat myös sisältää yhden tai useamman seuraavista apuaineista: steriilejä laimen-nusaineita, kuten vettä ruisketta varten, suolaliuosta, rasvaöljyjä, polyeteeniglykoleja, glyseriiniä, propeenig-5 lykolia tai muita synteettisiä liuottimia; antibakteerisia aineita, kuten bentsyylialkoholia tai metyyliparabenia; hapettumisenestoaineita, kuten askorbiinihappoa tai nat-riumbisulfiittia; kelaatin muodostavia aineita, kuten eteenidiamiinitetraetikkahappoa; puskuriaineita, kuten 10 asetaatteja, sitraatteja tai fosfaatteja, ja aineita tooni suuden säätämiseksi, kuten natriumkloridia tai dekstroo-sia. Ruuansulatuskanavan ulkopuolisesti käytettävä valmiste voidaan sulkea ampulleihin, kertakäyttöruiskuihin tai moniannospulloihin, jotka on valmistettu lasista tai muo-15 vista.

Esimerkki 84

Otaksuttujen antagonistien tuottama antagonismi, joka kohdistuu jodatun takykiniinin sitoutumiseen NK^- ja NK2-reseptoreihin 20 Ehdotettujen takykiniiniantagonistien NK-^resepto- riaffiniteetti arvioitiin marsun keuhkoissa (Keystone Biologicals, Cleveland, OH) ja affiniteetti NK2-reseptoriin : arvioitiin HSKR-l-soluissa (jotka ovat hiiren 3T3-fibro- blasteja, jotka ilmentävät ihmisen tyhj äsuolen NK2-resepto-25 rin). Kudokset tai solut homogenoitiin Polytron-laitteella , ·, 15 tilavuuteen 50 mM Tris-HCl-puskuria (pH-arvo 7,4, 4 °C) ja sentrifugoitiin. Pelletti suspendoitiin uudelleen Tris-HCl-puskuriin ja sentrifugoitiin; pelletti pestiin kahdesti suspendoimalla se uudelleen. Lopullinen pelletti sus-;;; 30 pendoitiin uudelleen, jolloin kudoksen tapauksessa kon-

sentraatioksi saatiin 40 mg/ml ja solujen tapauksessa 20 mg/ml inkubointipuskuriin, ja suspensiot jätettiin huo-neenlämpötilaan vähintään 15 minuutiksi ennen käyttöä. Reseptorisitoutuminen aloitettiin lisäämällä 250 ui mem-35 braanivalmistetta kahtena kerranteena seuraaviin 0,1 nM

I i 115155 103 radioligandeihin: 125I-Bolton Hunter Lys-3 -leimattu substanssi P ja 125jodihistidyyli-l-neurokiniini A; 500 ul:n lopullisessa tilavuudessa puskuria, joka sisälsi 50 mmol/1 Tris-HCl-puskuria (pH-arvo 7,4 huoneenlämpötilassa), 0,1 % 5 nautaeläimen seerumin albumiinia, 2 mmol/1 MnCl2:a, 40 ug/ml basitrasiinia, 4 μπ/ΓηΙ leupeptiiniä ja kymostatii-nia, 1 μιηοΐ/ΐ tiorfaania ja erilaisia annoksia otaksuttuja takykiniiniantagonisteja. Inkuboinnit toteutettiin huoneenlämpötilassa 90 minuutin kuluessa (NK^-reseptorimääri-10 tykset) tai 2 tunnin kuluessa (NK2-reseptorimääritys) ; sitoutuminen lopetettiin lisäämällä 50 mM Tris-HCl-puskuria (pH-arvo 7,4, 4 °C) ja suodattamalla tyhjössä GF/B-suodat-timien läpi, joita oli esiliotettu 0,l-%:isessa polyetee-ni-imiinissä (NK^-reseptorimääri tykset) tai 0,5-%:isessa 15 nautaeläimen seerumin albumiinissa (NK2-reseptorimääritys) . Suodattimeen sitoutuneen radioaktiivisuuden määrä laskettiin gamma-laskimella. Ei-spesifinen sitoutuminen määritettiin sitoutumisena, kun läsnä oli 1 μΜ substanssi P tai neurokiniini A. Spesifinen sitoutuminen laskettiin vähen-2 0 tämällä ei-spesif inen sitoutuminen kokonaissitoutumisesta.

Tutkittavien yhdisteiden tai standardien jodatun SP:n tai NKA:n kilpaileva sitominen ilmaistiin prosenttina tästä ; maksimaalisesta kilpailusta. IC50-arvot (konsetraatio, joka tarvitaan estämään 50 % reseptorisitoutumisesta) tuotet-. 25 tiin kullekin tutkittavalle yhdisteelle ei-lineaarisen regression avulla käyttäen toistuvaa käyränsovitusohjelmaa (GraphPAD Inplot, San Diego, CA).

Tämän keksinnön joidenkin yhdisteiden IC50-arvot on esitetty taulukossa 1 ja ne edustavat useiden kokeiden 30 keskiarvoa.

T · t i I | 1 1 51 3r 104

Taulukko 1

Sitoutumisaffiniteetti ΝΚ-^ ja NK2-reseptoreihin Yhdiste nro Reseptorisitoutumisaffiniteetti NKX IC50 (M) NK2 IC50 (M) I 2,57 X 10~8 6,09 x 10~7 5 2 6,15 X 10~8 6,32 x 10"7 3 9,29 x 10~7 2,15 x 10~7 4 1,46 X 10“7 2,71 x 10~7 5 7,81 X 10"8 2,84 x 10'7 6 2,94 x 10"7 2,28 x 10-7 10 7 4,72 X 10'7 2,11 x 10-7 8 7,11 x 10'7 1,99 x 10-6 9 7,78 x 10'7 1,14 x 10-7 10 6,31 x 10"7 2,56 X 10'6 II 9,53 x 10'7 1,31 X 10"7 " 15 12 1,43 x 10~6 1,44 X 10'6 13 2,41 x 10~6 4,71 X 10'6 » ‘l 14 1,0 x 10"5 1,22 x 10'6 15 > 1,0 x 10-5 2,56 x 10'6 16 3,8 X 10'6 1,58 x 10'6 20 t-·^ Yhdiste nro 1 on (S)-N-(2-metoksibentsyyli)-N-me- ’!* tyyli-2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1 -karboksimetyylietyy-

* I

•i li amino] etyyliamino] - 3 - (naf t-2 - yyli) propionamidi ; ‘ί‘ I Yhdiste nro 2 on (S)-N-(3,4-diklooribentsyyli)-N- ,/, 25 metyyli-2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyy- • . liamino]etyyliamino]-3-(naft-2-yyli)propionamidi; 115135 105

Yhdiste nro 3 on (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(R)-2- (lH-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] etyyli-amino]-3-fenyylipropionamidi;

Yhdiste nro 4 on (S)-N-(2-metoksibentsyyli)-N-me-5 tyyli-2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyli amino] etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi;

Yhdiste nro 5 on (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [(S)-2- (1H-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] etyyliamino] -3-(naft-2-yyli)propionamidi; 10 Yhdiste nro 6 on (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(S)- 2- (1H-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] etyyliamino] -3-fenyylipropionamidi;

Yhdiste nro 7 on (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[(S)-2- (1H-indol-3-yyli) -1-karboksyy1ihappoamidietyy-15 liamino]etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi;

Yhdiste nro 8 on (S)-N-(3,4,5-trimetoksibentsyyli)-N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi;

Yhdiste nro 9 on (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[2-20 (1H-indol-3-yyli) etyyliamino] ] etyyliamino]-3-fenyylipro pionamidi ; : Yhdiste nro 10 on N-metyyli-N- [ (S) -2-[ [ (S) -2-(1H- indol - 3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] etyyliamino] -3-fenyylipropyyli]-(3,4,5-trimetoksi)bentsamidi;

; ,·. 25 Yhdiste nro 11 on (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[[ (R

’’V ja S)-2-(1H-indol-3-yyli)-1-metyylietyyliamino]etyyliami- * * no]-3-fenyylipropionamidi; ’’ ’ Yhdiste nro 12 on (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S) -2 - f enyyli-1-karboksimetyylietyyliamino] etyyliamino] -3 0 3-fenyylipropionamidi;

Yhdiste nro 13 on (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-; [ [ (S) -1 - f enyyl i-1-karboks ime tyyl ime tyyli amino] etyyliami- no] -3-fenyylipropionamidi;

! I

115135 106

Yhdiste nro 14 on N-metyyli-N-[(S)-2-[[(S)-2-(1H-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] etyyliamino] -3-fenyylipropyyli]bentsamidi;

Yhdiste nro 15 on (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-5 [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] - etyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyyli) etyyliamino] -3- (naft-2-yyli)propionamidi;

Yhdiste nro 16 on (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2-[ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1-karboksietyyliamino] etyyliami-10 no]-3-fenyylipropionamidi.

Esimerkki 85

Otaksuttujen antagonistien aiheuttama takykiniinin indusoiman fosfatidyyli-inositolin (PI) vaihtumisen (turnover) antagonismi in vitro 15 Takykiniinin välittämä fosfatidyyli-inositolin (PI, isositolifosfaatti) kerääntyminen mitattiin UC11- tai SKLKB82#3-soluissa vastaavasti ΝΚΧ- tai NK2-reseptorianta-gonistien läsnä ollessa tai puuttuessa. Kudoksia inkuboi-tiin Krebs-Henseleit-puskurissa 37 °C:n lämpötilassa kaa-20 sutuksen ollessa 95 % 02:ta - 5 % C02:a. Kudoksia inkuboi-tiin sitten tuoreen puskurin kanssa, joka sisälsi 100 μΟϊ myo- [2-3H(N)]-inositolia, 37 °C:n lämpötilassa 60 minuutin ajan lievän kaasutuksen vallitessa. Sen jälkeen kun kudokset oli pesty kahdesti 5 mlrssa huoneenlämpötilassa 25 olevaa puskuria, joka sisälsi 10 mmol/1 LiCl:a, niitä in-, Λ kuboitiin 30 minuutin ajan huoneenlämpötilassa vaihtaen puskuri 15 minuutin kuluttua. Puskuri poistettiin ja lisättiin Krebs-Henseleit-puskuria (joka sisälsi 40 μg/ml basitrasiinia, 4 jug/ml sekä leupeptiiniä että kymostatii- » ·"* 30 nia, 0,1 % nautaeläimen seerumin albumiinia ja 10 mmol/1 \. ’ sekä tiorfaania että LiCl:a), joka sisälsi tutkittavan I yhdisteen. Sitten 15 minuutin kuluttua SP lisättiin UC11- » > : soluihin tai NKA SKLKB82#3-soluihin eri konsentraatioina » i • reaktion aloittamiseksi. Sitten 60 minuutin inkuboinnin » ( 1 ’ 35 jälkeen reaktio pysäytettiin lisäämällä 930 μΐ klorofor- 115135 107 mia/metanolia (1:2 tilavuuden mukaan) jokaiseen putkeen ja sen jälkeen 310 μΐ kloroformia ja 310 μΐ kahdesti tislattua vettä. Näytteitä sekoitettiin, ne sentrifugoitiin ja 0,9 ml vesipitoista faasia (pinnalta) poistettiin ja li-5 sättiin 2 ml:aan kahdesti tislattua vettä. Seosta sekoitettiin ja se pantiin 50-%:iseen Bio-Rad AG 1-X8 (formaat-timuoto, raekoko 100 - 200 mesh-yksikköä) -vaihtopylvää-seen (BioRad Laboratories, Hercules, CA). Pylväät pestiin järjestyksessä 1) 10 ml :11a kahdesti tislattua vettä, 2) 10 5 ml:11a 5 mM dinatriumtetraboraattia/60 mM natriumfor- maattia ja 3) 5 ml :11a 1 M ammoniumformaattia/0,1 M muurahaishappoa. Kolmas eluointi kerättiin talteen ja 1 ml:sta suoritettiin laskenta 7 ml:ssa tuikenestettä. Poistettiin 50 μ1:η näyte orgaanista faasia (pohjalta), kuivattiin 15 tuikepullossa ja suoritettiin laskenta 7 ml:ssa tuikenestettä .

DPM:n suhde vesipitoisen faasin näytteessä (inosi-tolifosfaatit yhteensä) DPM:ään 50 μΐ-.ssa orgaanisen faasin näytettä (liittynyt [3H]inositoli yhteensä) laskettiin 20 kustakin näytteestä. Tiedot on ilmoitettu prosenttina ago-nistin aiheuttamasta [3H]inositolifosfaattien kerääntymi-> sestä perustasoihin verrattuna. Suhteita tutkittavan yh- : disteen ja/tai standardien läsnä ollessa on verrattu kont- rollinäytteiden (so. ei stimuloivaa agonistia) suhteisiin.

. 25 Annos-vaste-käyrät muodostettiin ja tutkittavien yhdistei- , den kyky estää takykiniinin aiheuttama fosfatidyyli-ino- #·; _ sitolin vaihtuminen määritettiin tietokoneohjelman avulla.

Tiedot on ilmoitettu stimulaatioprosenttina isositolifos-faatin kokonaiskerääntymisestä verrattuna perustasoihin ja ·*;· 30 normalisoituna SP-.n tuottamaan maksimivasteeseen. Schild- *···' analyysi toteutettiin käyttäen annos-vaste-käyriä kilpai- levän antagonistin vahvuutta osoittavan arvon saamiseksi ja se on ilmoitettu pA2-arvona, joka on antagonistin sen molaarisen konsentraation negatiivinen logaritmi, joka 115135 108 vähentää agonistin annoksen vaikutuksen puoleen odotetusta agonistiannoksen vaikutuksesta.

Tiedot, jotka osoittavat yhdisteen 1, (S)-N-(2-me- toksibentsyyli) -N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1-5 karboksimetyylietyyliamino] etyyliamino] -3- (naft-2-yyli) -propionamidin, in vitro -vaikutusta, sisältyvät taulukkoon 2. Tämä yhdiste ei tuottanut lainkaan PI:n vaihtumista, kun sen annettiin sinällään, viitaten agonistiaktiivisuu-den puuttumiseen. Schild-analyysin avulla saatujen viivo-10 jen kaltevuus ei poikkea merkitsevästi yhdestä yhdisteestä (1), joka toimii kilpailevana antagonistina. Tiedot ovat keskiarvo ± SEM (keskiarvon keskivirhe). Tiedot ovat peräisin kolmestä kokeesta. ΝΚΧ-reseptorin lähde on UCll-so-lut ja NK2-reseptorin lähde on SKLKB82#3-solut.

15

Taulukko 2

Yhdisteen 1 vaikutus takykiniinin aiheuttamaan PI:n vaihtumiseen (turnover) in vitro

Aktiivisuus in vitro pA2 -kaltevuus 2 0 NK-l" reseptori 7,34 1,28 NK2-reseptori 6,70 1,11 , , Esimerkki 86 ΝΚ·|_- ja NK2-antagonismin arviointi in vivo 25 Alan ammattimies voi määrittää, että tämän keksin nön yhdisteet ovat NK^-reseptoriantagonisteja in vivo ar-··;; vioimalla yhdisteiden kyky estää SP:n indusoimaa plasman '·· proteiinin tihkumista suonista ulos marsun henkitorvessa.

SP: n indusoima proteiini vuoto postkapillaarisista hiuslas-·...: 3 0 kimoista arvioidaan mittaamalla Evans Blue -väriaineen ,·. kerääntyminen marsun henkitorveen. Eläimet nukutetaan pen- tobarbitaalilla, sitten niihin ruiskutetaan Evans Blue 115135 109 -väriainetta (20 mg/kg laskimonsisäisesti, valmistettu 0,9-%:iseen NaCl-liuokseen). Minuutin kuluttua väriaineen antamisesta annetaan antagonisti (laskimonsisäisesti) ja sen jälkeen SP (0,3 nmol/kg, laskimonsisäisesti) ja 5 mi-5 nuutin kuluttua ylimääräinen väriaine poistetaan verenkierrosta sydämen läpi virtaavan perfuusion avulla käyttäen 50 ml 0,9-%:ista NaCl-liuosta. Henkitorvi ja primaariset keuhkoputket poistetaan, kuivataan imupaperilla ja punnitaan. Värin määrän määrittäminen toteutetaan spektro-10 fotometrisesti (620 nM) kudosten uuttamisen jälkeen form-amidissa 24 tunnin ajan 50 °C:n lämpötilassa. Arvot vähennetään taustavaikutuksesta (vain väriaine, ei agonistia). ED50-arvo (yhdisteen annos, joka estää SP:n aiheuttamaa plasman proteiinin tihkumista 50 %:lla) lasketaan lineaa-15 risesta regressioanalyysistä.

Alan ammattimies voi määrittää, että tämän keksinnön yhdisteet ovat NK2-reseptorianiagonisteja in vivo arvioimalla yhdisteiden kyky estää NKA:n aiheuttamia hengi-tysvaikutuksia. Lisäksi sekä NK-l- että NK2-antagonismi voi-20 daan arvioida sen jälkeen, kun kohteelle on annettu kap-saisiinia, jonka tiedetään vapauttavan sekä SP:tä että NKA:ta ilmateiden tuntohermoista. NKA:n ja kapsaisiinin ; aiheuttamat hengitysvaikutukset tajuttomilla marsuilla ; toteutetaan seuraavasti. In vivo -kokeet toteutetaan käyt- : 25 täen urospuolisia Duncan Hartley -marsuja (250 - 350 g) .

Tajuttomien marsujen hengitysmallin muutoksia seurataan neljällä eläimellä samanaikaisesti käyttäen muunnettua * koko kehon pletysmografia, joka koostuu neljästä pienestä pleksilasilaatikosta, jotka kukin on kytketty vertailu-···· 30 laatikkoon Validyne DP 45-16-paine-eroantureiden avulla.

Neljä laatikkoa on varustettu ilmansyöttöputkella (jota käytetään myös aerosolin vapauttamiseen) ja poistoilmaput-keila. Syöttö- ja poistoputket ovat samanpituisia ja ka-peakaliiperisia ja saavat alkunsa yhteisestä syöttökam-‘•V 35 miosta ja vapautetaan yhteiseen poistokammioon. Tätä jär- 115135 110 jestelmää käytetään varmistamaan, että vaihtelut ilmansyö-tössä ja ilmakehän paineessa pysyvät samassa tahdissa ja pain-eroanturit eliminoinat ne nettosignaalista. Analogiset painesignaalint digitalisoidaan Data Translation 5 DT2821 A:n kautta D-taululle. Tiedot kerätään nopeudella 100 näytettä/sekunti/eläin. Jokainen paineenmuutossykli analysoidaan käyttäen seuraavia parametreja: nouseva ja laskeva kaltevuus määritettynä minimi- ja maksimipaineen välillä, nousevan ja laskevan kaltevuuden suhde ja muutok-10 sen suuruus ensimmäisen läpikulkevan paineen ja huippusyk-lin paineen välillä. Käyttäen näitä arvoja (ja tekemällä havaintoja eläimistä) painesyklit karakterisoidsaan normaaleiksi hengityksiksi, pakotetuiksi uloshengityksiksi (ilmenee vatsan sisäänvetämisenä), merkittäviksi hengitys-15 tapahtumiksi (SRE; tavallisesti yskät, harvemmin aivastukset tai huohotukset, jotka ovat tunnettuja tilapäisistä, äärimmäisen suurista paineen lisäyksistä, jotka ovat erotettavissa hälystä) ja liike/hälyksi PCAT 286:n avulla, jota käyttää System V UNIX -käyttöjärjestelmä. Hengenah-20 distus määritellään merkittävänä pitkittyneenä paineen lisäyksenä pletysmografissa, mikä liittyy havaittavaan siirtymiseen kohti vaivalloista hengitystä eläimellä.

Tyypillisen kokeen aikana, jolloin tutkitaan ilma-teiden reagoivuutta erilaisiin keuhkoputkia supistaviin 25 aineisiin, aerosoleja vapautetaan 19 minuutin ajan (0,33 , ml/min) käyttäen DeVilBiss Ultraneb 99 -ultraäänisumutinta y,‘, ja eläimiä seurataan tänä aikana. Ennen sumuttamista 1 minuutin lepohengitys kerätään peruspaineen määrittämiseksi. Alustavissa kokeissa arvioidaan keuhkoputkia supista-···’* 30 vien aineiden eri konsentraatioita ja valitaan konsentraa- tio, joka maksimoi hengenahdistusta osoittavien eläinten lukumäärän, mutta minimoi vasteen ankaruuden. Siten neuro-kiniini A: ta vapautetaan lopullisessa konsentraatiossa 0,05 % ja kapsaisiinia konsentraatiossa 0,001 %. Vehikkeli 35 kaikkien keuhkoputkia supistavien aineiden sumuttamista 115135 m varten on fosfaatilla puskuroitu suolaliuos (pH 7,4), joka itsessään ei herätä hengitysvaikutuksia. Otaksuttuja taky-kiniiniantagonisteja annetaan (laskimonsisäisesti) 20 minuuttia ennen aerosolialtistuksen aloittamista.

> t >

Claims (39)

115135 112

1. Yhdiste, tunnettu siitä, että sillä on kaava ^ Ari Gi r, g2/NN:h3 1 (CHJp 1 ΑΓ3 R2 R3 Ar2 5 jossa Gi on —CH2- tai -C(0)-; G2 on -CH2- tai -C(0)-; p on 2 tai 3; 10. on 0 tai 1; Ri on vety, Ci-4-alkyyli, -CHO, -C(0)0R4 tai -C(0)NHR4, jolloin R4 on vety, bentsyyli tai Ci-4-alkyyli; R2 on vety tai Ci_4-alkyyli; • R3 on vety tai -C(0)0Rs, jossa R5 on bentsyyli tai

15 Ci-4-alkyyli; f I Ari on radikaali, joka on valittu ryhmästä: * · o m * » * I 1 • * * ! jolloin , Zi tarkoittaa 1-3 substituenttia, jotka kukin on v,: 20 valittu toisistaan riippumatta ryhmästä, joka koostuu ve- 115135 113 dystä, halogeenista, bentsyylioksista, hydroksista, CF3- ryhmästä, Ci-4-alkyylistä ja Ci-4-alkoksista; Ar2 on radikaali, joka on valittu ryhmästä: m, jolloin Z2 tarkoittaa 1-3 substituenttia, jotka kukin on valittu toisistaan riippumatta ryhmästä, joka koostuu ve-10 dystä, halogeenista, bentsyylioksista, hydroksista, CF3- ryhmästä, Ci-4-alkyylistä ja Ci-4-alkoksista; Ar3 on radikaali, joka on valittu ryhmästä ;; y ; *^6 : , 15 jolloin Z3 tarkoittaa 1-3 substituenttia, jotka kukin on valittu toisistaan riippumatta ryhmästä, joka koostuu ve- • I • dystä, halogeenista, bentsyylioksista, hydroksista, CF3- ryhmästä, Ci_4-alkyylistä ja Ci_4-alkoksista; Rö on vety, Ci_4-20 alkyyli, -CHO, -C(0)NHR7, - (CH2) nNHC (NH) NH2, - (CH2) nN (CH3) 2, tai -C(0)0Re, jolloin n on 2 tai 3 ja R7 on vety, bentsyyli tai Ci-4-alkyyli ja Rg on bentsyyli tai Ci_4-alkyyli; tai sen stereoisomeerit tai farmaseuttisesti hyväksyttävä suola. V : 25 115135 114

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että R3 on vety.

3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että R2 on vety.

4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen yhdiste, tun nettu siitä, että p on 2.

5 Gi on -CH2- tai —C (0) —; G2 on -CH2- tai -C(0)-; p on 2 tai 3; m on 0 tai 1; Rx on vety, Ci-4-alkyyli, -CHO, -C(0)0R4 tai

5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että Gi on -CH2- ja G2 on -C(O)-.

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, t u n - 10. e t t u siitä, että se on (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [(S)-2-[(lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyyli]etyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2- 15 [ [ (R)-2-[(lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyyli]etyyliamino]- N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi.

8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2- [ [ (S)-2-fenyyli-l-karboksimetyyli]etyyliamino]-N'-(t-butok- 20 sikarbonyyli)etyyliamino-3-fenyylipropionamidi.

9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, t u n - • '* n e t t u siitä, että se on (S)-N-bentsyyli-N-metyyli-2- ' [[ (S)-1-fenyyli-l-karboksimetyylimetyyliamino]-N'- (t-butok- ... · sikarbonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi. ·,; *25 10. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, : tunnettu siitä, että se on (S)-N-bentsyyli-N- metyyli-2- [ [2- (lH-indol-3-yyli) etyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyyli) etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi.

11. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, 30 tunnettu siitä, että se on (S)-N-bentsyyli-N-metyy-li-2-[[(R ja S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-metyylietyyliamino]-*.·· N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi. '<“> 12. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on (S)-N-bentsyyli-N-me- 35 tyyli-2-[[(S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksyylihappoamidi- • 1 * 115135 115 etyyliamino]-Ν' -(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3-fenyy-lipropionamidi.

13. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on (S)-N-(2-metoksibent- 5 syyli)-N-metyyli-2-[[(S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksime-tyylietyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi.

14. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on (S)-N-(3,4,5-trimetok- 10 sibentsyyli)-N-metyyli-2-[[(S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-kar-boksimetyyli-N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]etyyliamino] -3-fenyylipropionamidi.

15. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on (S)-N-bentsyyli-N-me- 15 tyyli-2-[[(S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyli-amino]-N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3-(naft-2-yy-li)propionamidi.

16. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on (S)-N-(2-metoksibent- 20 syyli)-N-metyyli-2-[[(S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksime-tyylietyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3-(naft-2-yyli)propionamidi.

17. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, ,* tunnettu siitä, että se on (S) -N- (3,4-dikloori- • 25 bentsyyli)-N-metyyli-2-[[(S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karbok simetyylietyyliamino] -N' - (t-butoksikarbonyyli) etyyliamino] -3-(naft-2-yyli)propionamidi.

18. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on N-metyyli-N-[(S)-2- ,**·, 30 [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1-karboksimetyylietyyliamino] - 1 » N'- (t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropyyli]- * * ’·: (3, 4,5-trimetoksi) bentsamidi.

19. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on N-metyyli-N-[(S)-2- : 35 [( (S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino] - 115135 116 N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropyyli]-bentsamidi.

20. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on (S)-N-bentsyyli-N-me- 5 tyyli-2-[[(S)-2-[(lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyyli]etyyliamino] etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi.

21. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on (S)-N-bentsyyli-N-me- tyyli-2-[[(R)-2-[(lH-indol-3-yyli)-Ι- ΙΟ karboksimetyyli]etyyliamino]etyyliamino]-3- fenyylipropionamidi.

22. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on (S)-N-bentsyyli-N-me- tyyli-2-[[(S)-2-fenyyli-l-karboksimetyyli]etyyliamino]- 15 etyyliamino-3-fenyylipropionamidi.

23. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on (S)-N-bentsyyli-N-me- tyyli-2-[[(S)-1-fenyyli-l-karboksimetyylimetyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi.

24. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on (S)-N-bentsyyli-N-me- ’’ tyyli-2-[[2-(lH-indol-3-yyli)etyyliamino]etyyliamino]-3- ’ fenyylipropionamidi.

25. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, ; · 25 tunnettu siitä, että se on (S)-N-bentsyyli-N-me- : tyyli-2-[[(R ja S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-metyylietyyli- amino]etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi.

26. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on (S) -N-bentsyyli-N-me- 30 tyyli-2-[[(S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksyylihappoamidi- ♦ t ') ‘ etyyliamino]etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi. * ·

27. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on (S)-N-(2-metoksibent- syyli) -N-metyyli-2- [ [ (S) -2- (lH-indol-3-yyli) -1-karboksime- . . 35 tyylietyyliamino]etyyliamino]-3-fenyylipropionamidi. 115135 117

28. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on (S)-N-(3,4,5-trimetok-sibentsyyli)-N-metyyli-2-[[(S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino] etyyliamino ] -3-fenyylipropionamidi.

29. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on (S)-N-bentsyyli-N-me-tyyli-2-[[(S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino] etyyliamino] -3-(naft-2-yyli)propionamidi.

30. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, 10 tunnettu siitä, että se on (S)-N-(2-metoksibent- syyli) -N-metyyli-2- [ [ (S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksime-tyylietyyliamino]etyyliamino]-3-(naft-2-yyli)propionamidi.

31. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on (S)-N-(3,4-dikloori- 15 bentsyyli)-N-metyyli-2-[[(S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karbok-simetyylietyyliamino]-N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3-(naft-2-yyli)propionamidi.

32. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on N-metyyli-N-[ (S)-2- 20 [ [ (S)-2-{lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino]- N'-(t-butoksikarbonyyli)etyyliamino]-3-fenyylipropyyli]-’’ (3,4,5-trimetoksi)bentsamidi.

33. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että se on N-metyyli-N- [ (S) -2- * 25 [[(S)-2-(lH-indol-3-yyli)-1-karboksimetyylietyyliamino]- : : etyyliamino]-3-fenyylipropyyli]bentsamidi. : 34. Farmaseuttinen koostumus, tunnettu sii tä, että se sisältää patenttivaatimuksen 1 mukaisen yhdis-teen. i·’ 30 35. Patenttivaatimuksen 34 mukainen farmaseuttinen i' koostumus, tunnettu siitä, että se sisältää pa- s I ‘,'Ί tenttivaatimuksen 1 mukaisen yhdisteen ja farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan. . 36. Patenttivaatimuksen 35 mukainen farmaseuttinen 35 koostumus, tunnettu siitä, että se sisältää pa- 115135 118 tenttivaatimusten 2-5 mukaisen yhdisteen ja farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan.

37. Patenttivaatimuksen 35 mukainen farmaseuttinen koostumus, tunnettu siitä, että se sisältää pa- 5 tenttivaatimusten 6-33 mukaisen yhdisteen ja farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan.

38. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste käytettäväksi farmaseuttisesti aktiivisena yhdisteenä.

39. Patenttivaatimuksen 38 mukainen yhdiste käytet-10 täväksi takykiniinin välittämien tautien ja sairauksien hoidossa.

40. Patenttivaatimuksen 38 mukainen yhdiste käytettäväksi astman hoidossa.

41. Patenttivaatimuksen 38 mukainen yhdiste käytet-15 täväksi yskän hoidossa.

42. Patenttivaatimuksen 38 mukainen yhdiste käytettäväksi keuhkoputkentulehduksen hoidossa.

43. Patenttivaatimuksen 34 mukainen farmaseuttinen koostumus takykiniinin välittämien tautien ja sairauksien 20 hoitamiseksi.

44. Patenttivaatimuksen 43 mukainen farmaseuttinen koostumus astman hoitamiseksi.

45. Patenttivaatimuksen 43 mukainen farmaseuttinen koostumus yskän hoitamiseksi. : 25 46. Patenttivaatimuksen 43 mukainen farmaseuttinen koostumus keuhkoputkentulehduksen hoitamiseksi. ‘. 47. Patenttivaatimuksen 1 mukaisen yhdisteen käyttö mahdollisesti yhdistelmässä farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan kanssa farmaseuttisen koostumuksen valmistamiseksi 1!! 30 takykiniinin välittämien tautien ja sairauksien hoitamisek si.

48. Patenttivaatimuksen 1 mukaisen yhdisteen käyttö mahdollisesti yhdistelmässä farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan kanssa farmaseuttisen koostumuksen valmistamiseksi 1 i 35 astman, yskän ja keuhkoputkentulehduksen hoitamiseksi. * t 115135 119

49. Menetelmä yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava /An Gi R, i (CH2)p 1 γΝ I I I ΑΓ3 R2 ^3 ΑΓ2 jossa

10 -C (0) NHR4, jolloin R4 on vety, bentsyyli tai Ci_4-alkyyli; R2 on vety tai Ci-4-alkyyli; R3 on vety tai -C(0)0R5, jossa R5 on bentsyyli tai Ci-4-alkyyli; : Ari on radikaali, joka on valittu ryhmästä: 15 ,,,·' jolloin Zi tarkoittaa 1-3 substituenttia, jotka kukin on . valittu toisistaan riippumatta ryhmästä, joka koostuu ve- ' i dystä, halogeenista, bentsyylioksista, hydroksista, CF3- • I I I I , 20 ryhmästä, Ci_4-alkyylistä ja Ci-4-alkoksista; 115135 120 Ar2 on radikaali, joka on valittu ryhmästä: jolloin Z2 tarkoittaa 1-3 substituenttia, jotka kukin on 5 valittu toisistaan riippumatta ryhmästä, joka koostuu vedystä, halogeenista, bentsyylioksista, hydroksista, CF3-ryhmästä, Ci-4-alkyylistä ja Ci-4-alkoksista; Ar3 on radikaali, joka on valittu ryhmästä Κβ 10 jolloin Ζ3 tarkoittaa 1-3 substituenttia, jotka kukin on '1 valittu toisistaan riippumatta ryhmästä, joka koostuu ve- « dystä, halogeenista, bentsyylioksista, hydroksista, CF3-,2 ryhmästä, Ci_4-alkyylistä ja Ci_4-alkoksista; R6 on vety, • 15 Ci-4-alkyyli, -CHO, -C(0)NHR7, - (CH2) nNHC (NH) NH2, : : - (0Η2)nN (CH3) 2, tai -C(0)0Re, jolloin n on 2 tai 3 ja R7 on . vety, bentsyyli tai Cx_4-alkyyli ja Rs on bentsyyli tai Ci-4-alkyyli; tai sen stereoisomeerien tai farmaseuttisesti hy- t -1 * 1 ♦ > ,11, 20 väksyttävän suolan valmistamiseksi, tunnettu sii- *’ tä, että j · I f

» 1 1 · Iitit t »