FI108135B - Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten 7-okso-8-[2'-(1H-tetrasol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,6,7,8-tetrahydropyrido[2,3-d]pyrimidiinijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

! 10811;-

Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten 7-okso-8-[2'-(1H-tetrasol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,6,7,8-tetrahyd-ropyrido[2,3-d]pyrimidiinijohdannaisten valmistamiseksi 5 Keksinnön tausta Tämä keksintö koskee menetelmää substituoitujen py-ridopyrimidiinien valmistamiseksi, jotka ovat käyttökelpoisia verenpaineen ja kongestiivisen sydämen toiminnan vajavuuden hoitamiseksi.

10 Nämä yhdisteet saavuttavat hemodynaamiset vaikutuk sensa vastustamalla angiotensiini II :n vaikutuksia; renii-ni-angiotensiini-systeemin aktiivinen komponentti. Angio-tensinogeeni muutetaan angiotensiini I-.ksi reniinientsyy-min vaikutuksella. Angiotensiini II (A II) muodostetaan 15 angiotensiinikonvertaasilla (ACE), joka vaikuttaa an giotensiini I:een. A II on tehokas verisuonensupistaja ja sitä tuotetaan korkean verenpaineen seurauksena lukuisissa lajeissa mukaan lukien ihminen. A II saa esiin nämä vaso-pressorivasteet toimimalla spesifisissä reseptorikohdissa. 20 Tässä keksinnössä kuvatut yhdisteet kilpailevat A II:n kanssa näistä reseptorikohdista vastustaen siten A II :n vasopressorivaikutuksia.

R. S. Boger, US-patentissa 5 104 877, ja K. Atwal, julkaisussa EP 481 448 A, kuvaavat metyylibifenyylisubsti-' 25 tuoituja 4-aminopyrimidiinejä. C. Hoornaert, et ai. esit

tävät metyylibifenyyli-4-pyrimidinonijohdannaisia julkaisussa EP 500 409 A. A. M. Venkatesan, et ai. esittävät metyylibif enyylisubstituoituja kinatsolinoneja julkaisussa EP 497 150 A. A.H. Ratcliffe, et ai. esittävät metyylibi-30 fenyylisubstituoituja naftyridiinejä julkaisussa EP

516 3 92 A2. E. Allen, et ai. kuvaavat substituoituja py-ridopyrimidinoneja julkaisussa EP 481 614 A. J. W. Elling-boe, et ai. kuvaavat metyylibifenyylisubstituoituja pyri-dopyrimidiinejä US-patentissa 5 149 699. Kaikki edellä 35 ,, olevat esitetään A II -antagonisteiksi.

108135 2 Tämän keksinnön mukaisella menetlemällä saatavat yhdisteet eroavat edellä mainitusta tunnetusta tekniikasta lukuun ottamatta viimeistä viitettä siinä, että ne sisältävät pyrimidiinirenkaan fuusioituneena pyridinonirenkaa-5 seen metyylibifenyyliryhmän ollessa liittyneenä pyri- dinonirenkaaseen. Yhdisteet, jotka on kuvattu julkaisussa E. Allen, et ai. EP 481 614 A, sisältävät pyrimidinonirenkaan fuusioituneena pyridiinirenkaaseen, ja metyylibi-fenyyliryhmä on liittynyt pyrimidinonirenkaaseen. Tämän 10 keksinnön mukaisella menetelmällä saatavat yhdisteet ero avat J. W. Ellingboe, et al.'n US-patentissa 5 149 699 kuvatuista yhdisteistä siinä, että ne sisältävät vähintään yhden hydroksi-, hydroksialkyyli-, aldehydi-, ketoni- tai karboksiryhmän pyridopyrimidinonirengassysteemissä.

15 Keksinnön kuvaus

Tämä keksintö koskee menetelmää terapeuttise sti aktiivisten 7-okso-8-[2'-(lH-tetrasol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli] -5,6,7,8 -tetrahydropyrido[2,3 -d]pyrimi -diinijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava I

20 O .

25 j ossa R1 ja R2 merkitsevät toisistaan riippumatta vetyä, C1.6-al-30 kyyllä, hydroksi-Cj.g-alkyyliä tai formyyliä; R3 ja R4 merkitsevät toisistaan riippumatta vetyä tai hyd-roksia; edellyttäen, että vähintään toisen ryhmistä R1 ja R2 täytyy olla hydroksi-C^-alkyyli tai formyyli; tai vähintään toi- 35 sen ryhmistä R3 ja R4 täytyy olla hydroksi; 3 108135

Ar2 on n^n/r5

5 / N

jossa Rs on vety, tert-butyyli, tri-n-butyylistannyyli tai trifenyylimetyyli? tai mainitun yhdisteen tautomeerin, 10 tai mainitun yhdisteen tai tautomeerin farmaseuttisesti hyväksyttävä suolan valmistamiseksi.

Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa R1 tai R2 sisältävät karbonyyliryhmän, voivat esiintyä useammassa kuin yhdessä tautomeerisessa muodossa. Kaikki tällaiset tauto-15 meerit sisältyvät tämän keksinnön mukaisella menetelmällä saataviin yhdisteisiin.

Edullisimpia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat: 2-metyyli-7-okso-8-[2'-(lH-tetratsol-5-yyli)bife-nyl-4-yylimetyyli]-5,6,7,8-tetrahydropyrido[2,3-d]pyrimi-20 diini-4-karbaldehydi ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat; 2-hydroksimetyyli-4-metyyli-8-[2'-(lH-tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]-pyrimidin-7-oni ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suo-·: 25 lat; 4-hydroksimetyyli-2-metyyli-8-[21 -(lH-tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]-pyrimidin-7-oni ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat ; 30 2,4-dimetyyli-5-hydroksi-8-[2'-(lH-tetratsol-5- yyli) bifenyl-4-yylimetyyli]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat; , 2,4-dimetyyli-5-hydroksi-8-[2'-(lH-tetratsol-5- yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-6,8-dihydro-5H-pyrido[2,3-d]- 4 10813- pyrimidin-7-oni ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat ; 2,4-dimetyyli-6-hydroksi-8 -[21 -(1H-tetratsoi- 5 -yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5, 8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]-5 pyrimidin-7-oni ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suo lat .

Lisäksi esillä olevan keksinnön mukaisesti 2,4-di-metyyli-5-hydroksi-8-[2'-(1H-tetratsoi-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni (esimerkki 4) 10 ja 5-hydroksi-2,4-dimetyyli-8-[2’-(lH-tetratsol-5-yyli)bi- fenyl-4-yylimetyyli]-6,8-dihydro-5H-pyrido[2,3-d]pyrimi-din-7-oni (esimerkki 6) on identifioitu tutkimuksissa, jotka suoritettiin rotilla, edellä mainitun US-patentin nro 5 149 599 esimerkin 3 yhdisteen merkittäviksi metabo-15 Hiteiksi edellisen ollessa läsnä merkittävästi pidempään ja suuremmissa määrissä kuin jälkimmäisen. Samanlaisissa metabolisissa tutkimuksissa koirilla ei kuitenkaan löydetty merkittäviä metaboliitteja.

Menetelmä 20 Tämä keksintö tarjoaa käyttöön menetelmän edellä kuvatun ja määritellyn kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan tai yhdisteen tai sen suolan tautomeerin valmistamiseksi. Menetelmässä symboleilla on seuraavat merkitykset kaavois-*: " 25 sa, jotka on merkitty kirjaimilla (A) - (F) , jollei toisin ole mainittu. R1 ja R2 ovat kumpikin toisistaan riippumatta vety, C^.g-alkyyli, hydroksi-C^g-alkyyli tai formyyli, R3 ja R4 ovat kumpikin toisistaan riippumatta vety tai hydroksi ja Ar3 on sama kuin Ar2 paitsi että tetratsoyyliryhmä voi 30 olla suojattu poltettavissa olevalla suojaryhmällä.

« < 5 1081,3b

Keksinnön mukaisessa menetelmässä a) yhdiste, jolla on kaava rXa*· 10 (A) tai sen suola saatetaan reagoimaan kaavan Z2 - Ar3 mukaisen yhdisteen kanssa, jolloin Ar3 on sama kuin Ar2 paitsi, että tetra-atsoyyliryhmä voi olla suojattu poistettavissa ole-15 valla suojaryhmällä, Z1 on poistuva ryhmä kuten bromi, kloori, jodi tai organosulfonyylioksi ja Z2 on boronihappo tai trialkyylitina; tai

b) yhdiste, jolla on kaava B

yV-O- " R3 | .

. 25 R2^ ^R‘ (B) jossa toinen ryhmistä R3 ja R4 on vety, tai sen suola hape-30 tetaan vedyn korvaamiseksi hydroksyyliryhmällä; tai a • « 108135 6 c) yhdiste, jolla on kaava HN-CH2 -/ \- Ar3

5 CH3CO v. JL

R2/JXN^\ R‘ 10 (E) tai sen suola syklisoidaan reaktiolla dialkyylikarbonaatin ja emäksen kanssa ja kaavan I mukaisen yhdisteen muodostamiseksi, jossa R3 on hydroksi; ja haluttaessa saatu kaavan (I) mukainen yhdiste, jos-15 sa R1 ja/tai R2 on CH3, hapetetaan, jolloin saadaan yhdiste, jossa R1 ja/tai R2 on formyyliryhmä, tai haluttaessa kaavan I mukainen yhdiste tai sen suola muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi tai suola muutetaan kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi tai sen 20 tautomeeriksi.

Kun suojaryhmää käytetään karboksyyliryhmän suojaamiseksi, on edullista, että suojaus toteutetaan käyttämällä karboksyylihappoa esterin muodossa. Nämä esterit voidaan muuuttaa karboksyylihapoksi tunnetulla tavalla, esi-*: 25 merkiksi saippuoimalla, tai tert-butyyli- tai trifenyyli- metyyliestereiden ollessa kyseessä asidolyysillä. Kun tet-ratsolyyliryhmä on suojattava, on edullista, että suoja-ryhmä on tert-butyyli, tri-n-butyylistannaani tai trife-nyylimetyyli. Tetratsolyyliryhmän suojaryhmät voidaan 30 poistaa alalla tunnetulla tavalla, esimerkiksi kuten jäl- jempänä esimerkissä 2, vaiheessa 6, on esitetty tert-bu- tyylin poistamiseksi.

Esillä oleva keksintö voi sisältää kaavan I mukaisen yhdisteen (tai sen tautomeerin) muuttamisen suolaksi 35 tai päinvastoin. Kaavan I mukaisissa yhdisteissä on emäk- 108135 7 sinen typpiatomi, ja siten ne muodostavat happoadditiosuo-loja happoa lisättäessä. Happoadditiosuola voidaan muuttaa kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi (tai sen tautomeeriksi) reaktiolla emäksen kanssa. Kaavan I mukaiset yhdisteet 5 (tai sen tautomeerit) , joissa R1 tai R2 on karboksi tai karboksi-C^g-alkyyli, ovat karboksyylihappoja, jotka voidaan muuttaa farmaseuttisesti hyväksyttäviksi suoloiksi neutraloimalla emäksellä. Karboksylaattisuolat voidaan muuttaa karboksyylihapoksi hapon avulla.

10 Menetelmävaihe a) voidaan suorittaa tunnetulla ta valla kaksi aromaattista ryhmää suoraan toisiinsa yhdistettyinä sisältävien yhdisteiden valmistamiseksi . Esimerkkeinä poistuvasta ryhmästä Z1 voidaan mainita bromi, kloori, jodi tai organosulfonyylioksi, esimerkiksi trifluori-15 metyylisulfonyylioksi. Z2 voi olla boronihappo tai trial- kyylitina palladiumkatalyytin läsnä ollessa. Menetelmä-vaihtoehdossa a) käytettäviä lähtöaineita voidaan valmistaa kuten jäljempänä kaavion I yhteydessä on kuvattu.

Menetelmävaihtoehdossa b) käytettävä kaavan B mu-20 kainen yhdiste voidaan valmistaa vaiheella a), jossa toi nen symboleista R3 ja R4 on hydroksi. Hydroksiyhdisteen muuttaminen karbonyyliyhdisteeksi vaiheen b) mukaan voidaan suorittaa tunnettujen, ketonien valmistamiseksi käytettyjen hapetusmenetelmien mukaan. Esityisesti 6-asemassa : 25 olevan hydroksiryhmän hapetus okso-ryhmäksi voidaan to- > teuttaa käyttäen pyridimiinikloorikromaattia Corey et al.'n, Tetrahedron Letters 31 (1975) 247 - 250, menetelmän mukaan.

Menetelmävaihtoehto e) voidaan suorittaa kuten täs-

S

30 sä jäljempänä kaavion II ja vastaavasti III yhteydessä on • kuvattu.

Yhdisteet, joissa X ryhmässä Ar2 on tetratsolyyli, voidaan valmistaa vastaavan nitriilin reaktiolla atsidi-reagenssin kanssa.

8 10815:

Yksityiskohtaisemmin kuvattuna kaavan I mukaiset yhdisteet valmistetaan alla esitettyjen yleisten reak-tiosekvenssien mukaan:

Kaavio I

5 0 Ε,ο^γΒο „2Χχο2ει + nh ^ Β3ΑΛνη 10 R’V02Et NH2 rA^R- h4 2 3 POCI3 . s r 15 * R4Y^N^CH2)^ Hf(CH2)^ Et°2CYR4C‘ z^~ R3li 20 rAA RsAN r' 6 4 1) Ar2-M (7)

Pd -katalyytti .25 0.

suojauksen poisto RV^N'<CH^ , 30 li ^Ar2 r3 II N r2^n^R1 35 108135 9 R1, R2, R3, R4 ja Ar2 ovat edellä määritellyt; n on 1; Ar1 on Z οη^^ίοί^ΐ^ bromi, jodi tai trifluorimetaanisulfonaatti; 5 ja M on boronihappo tai trialkyylitina.

Kuten kaaviossa I on havainnollistettu, β-ketoeste-ri 1 kondensoidaan amidiinin 2 kanssa emäksen, kuten nat-riumetoksidin, läsnä ollessa alkoholiliuottimessa, kuten etanolissa, lämpötiloissa, jotka ovat alueella ympäristön 10 lämpötila - palautusjäähdytyslämpötila, jolloin saadaan pyrimidinoni 3. Pyrimidinonin 3 käsittelystä fosforioksi-kloridilla käyttäen palautusjäähdytystä saadaan klooripy-rimidiini 4. Yhdisteen 4 reaktiosta amiinin 5 kanssa orgaanisen emäksen, kuten trietyyliamiinin, tai epäorgaani-15 sen emäksen, kuten kaliumkarbonaatin, läsnä ollessa polaa risessa liuottimessa, kuten etanolissa, butanolissa tai dimetyylisulfoksidissa, lämpötiloissa, jotka ovat alueella ympäristön lämpötila - palautusjäähdytyslämpötila, saadaan pyridopyrimidiini 6. Yhdisteen 6 reaktiosta aryyliboroni-20 hapon tai aryylitrialkyylitinan 7 kanssa palladiumkatalyy- tin läsnä ollessa liuottimessa, kuten dimetyyliformamidis-sa tai tolueenissa, saadaan suojaryhmien poiston jälkeen, kun R5 on tert-butyyli, tri-n-butyylistannyyli tai trife-nyylimetyyli, pyridopyrimidiini I. Tapauksessa, jossa • 25 substituentti (X) Ar2:ssa on nitriili, se voidaan muuntaa tetratsoliksi standardiolosuhteissa käyttäen atsidirea-genssia.

Kaavio II

30 r^N'(CHVAr2 1) e-äs HOYJLNi(CH2WA[2 R3Yn 2) sulfonyyli- R3 ^ M Λ oksatsiridiini- R?^NAR1 reagenssi R2 N R1

3) suojauksen H

* poisto 35 R1, R2, R3, n, Ar1 ja Ar2 ovat edellä määritellyt.

108135 10

Happisubstituentti voidaan liittää 6-asemaan kaaviossa II havainnollistettujen reaktioiden mukaisesti. Siten pyridopyrimidiiniä Ia, jossa on suojaryhmä Ar2:n kar-boksyylihappo- tai tetratsoliryhmässä, käsitellään emäk-5 sellä, kuten litiumdi-isopropyyliamidilla tai natriumhek- sametyylidisilatsidilla aproottisessa liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa tai dimetoksietaanissa, alhaisissa lämpötiloissa (-78 - 0 °C) ja sitten sulfonyylioksatsiri-diinireagenssilla, kuten fenyylisulfonyylioksatsiridiinil-10 la. Ar2:n tetratsoli- tai karboksyylihapporyhmän suojauksen poistosta hapolla tai emäksellä saadaan pyridopyrimidiini Ib. 6-aseman hydroksyyliryhmän hapetus oksoryhmäksi voidaan suorittaa käyttäen pyridimiinikloorikromaattia Corey et al.'n, Tetrahedron Letters 31 (1975) 247 - 250, mene-15 telmän mukaisesti.

Kaavio III

2 n 01

[( NH '»· M-nh POCb K^L

R^N^R' R^N^Rt rJQV

20 8 '9 ,0ch2 11

EtO~SnBu3 i f Pd-katalyytti ohn-<ch^'2 t)H!N.(CH2)M ch2ci

..... 25 ~ BO'SfS

R R1 2) happohydrolyysi ίΑ|2-Μ (7) 11

Pd-katalyyttl 3 0 O HN*^CH2W’ , (CH2)q. i Γμ ΛΛμ ^ 1) (ΕΙΟ)2°°· NaH A 1

• π V —-►HO

.· R2^M^nl 2) su°jauksen Λ Λ Π N R' poisto R1 13 le R1, R2, n, Ar1, Ar2, Z ja M ovat edellä määritellyt.

11 108135

Kaaviossa III havainnollistetaan happi substituent in liittäminen 5-asemaan. Pyrimidinoni 8 jodinoidaan 5-ase-maan jodilla ja vesipitoisella hydroksidilla, jotta saadaan 5-jodipyrimidinoni 9. Yhdisteen 9 kloorauksesta fos-5 forioksikloridilla käyttäen palautusjäähdytystä saadaan klooripyrimidiini 10. Yhdisteen 10 reaktiosta (1-etoksi-vinyyli)tributyylitinan kanssa palladiumkatalyytin läsnä ollessa liuottimessa, kuten dioksaanissa, tetrahydrofuraanissa tai dimetyyliformamidissa, lämpötiloissa, jotka ovat 10 alueella ympäristön lämpötila - palautusjäähdytyslämpöti la, saadaan pyrimidiini 11. Yhdisteen 11 reaktiosta amiinin 5 kanssa orgaanisen emäksen, kuten trietyyliamiinin, tai epäorgaanisen emäksen, kuten kaliumkarbonaatin, läsnä ollessa polaarisessa liuottimessa, kuten etanolissa, buta-15 nolissa tai dimetyylisulfoksidissa, lämpötiloissa, jotka ovat alueella ympäristön lämpötila - palautusjäähdytysläm-pötila, ja enolin hydrolyysistä vesipitoisen hapon kanssa saadaan 5-ketopyrimidiini 12. Yhdisteen 12 reaktiosta aryyliboronihapon tai aryylitrialkyylitinan 7 kanssa pal-20 ladiumkatalyytin läsnä ollessa liuottimessa, kuten dime tyyliformamidissa tai tolueenissa, saadaan 5-ketopyrimidiini 13. Yhdisteen 13 käsittelystä dialkyylikarbonaatilla ja emäksellä, kuten natriumhydridillä, aproottisessa liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa tai tolueenissa, ;· 25 lämpötiloissa, jotka ovat alueella ympäristön lämpötila - palautusjäähdytyslämpötila, Ar2:n tetratsoli- tai karbok-syylihapporyhmän suojauksen poistosta hapolla tai emäksellä saadaan pyridopyrimidiini Ie. Muita hapettavia aineita, kuten kaliumpermangaattia, voidaan käyttää hydroksiryhmän 30 viemiseksi 5-asemaan, jolloin saadaan pyridopyrimidiini I, jossa R3 on hydroksiryhmä.

i 12 108135

Kaavio IV

• Aa z Γχΐ « »AA· t*"’ 6

NaBH4 10 ''

O II

R4-^AN.(CH2)„Arl ^/-r<CH\

15 r3—JL X Ar^ 1) Ai^-M (7) L

Pd-katalyytti J| N

Η6ν^Χ.Μ*^ο1 * 2) suojauksen I N Π poisto I .

OH Id OH 15 108135 13 saadaan suojaryhmien poiston jälkeen pyridopyrimidiini Id. Pyridopyrimidiini I, jossa R2 on C^g-alkyyli, voidaan hapettaa myös suoraan hapetusreagenssilla, kuten seleenidi-oksidilla.

5 Kaavan I mukaiset yhdisteet voivat myös muodostaa suoloja epäorgaanisten tai orgaanisten emästen kanssa. Mitkä tahansa näiden yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat ovat tämän keksinnön piirissä. Nämä suolat voivat olla, mutteivät rajoitu mainittuihin, ammoniumsuo-10 loja, alkalimetallisuoloja, kuten natrium tai kalium, maa- alkalimetallisuoloja, kuten kalsium, disykioheksyyliamiini suoloja, TRIS-suoloja ja aminohappojen suoloja. Nämä yhdisteet voidaan myös muuttaa N-oksideiksi käsittelemällä vetyperoksidilla tavanomisilla keinoilla. Kaavan I mu-15 kaiset yhdisteet, joissa R5 on tert-butyyli, tri-n-butyy- listannyyli tai trifenyylimetyyli, on tarkoitettu välituotteiksi valmistettaessa muita kaavan I mukaisia yhdisteitä .

Kaavan I mukaista yhdistettä voidaan käyttää myös 20 farmaseuttisen koostumukseen, joka käsittää kaavan I mu kaista yhdistettä ja farmaseuttisesti hyväksyttävää kantajaa. Erityisesti kaavan I mukaista yhdistettä voidaan käyttää korkean verenpaineen vastaisen farmaseuttisen koostumukseen, joka käsittää korkean verenpaineen vastai-• 25 sesti vaikuttavan määrän kaavan I mukaista yhdistettä ja farmasettisesti hyväksyttävän kantajan.

Koostumukset on edullisesti sovellettu oraalista antamista varten. Niitä voidaan kuitenkin käyttää muita antamismalleja varten, esimerkiksi parenteraalista anta-30 mistä varten potilaille, jotka kärsivät sydämen toiminnan vajavuudesta.

Annon yhdenmukaisuuden saamiseksi, on edullista, että koostumus on yksikköannoksen muodossa. Sopiviin yk-sikköannosmuotoihin kuuluvat tabletit, kapselit ja jauheet 35 lääkepusseissa tai lääkepulloissa. Tällaiset yksikköannos- 1081 ~ '· 14 ' muodot voivat sisältää 0,1 - 100 mg kaavan I mukaista yhdistettä ja edullisesti 1-50 mg. Näitä yhdisteitä voidaan antaa oraalisesti annosalueella noin 0,01 - 100 mg/kg tai edullisesti annosalueella 0,1 - 10 mg/kg. Tällaisia 5 koostumuksia voidaan antaa 1-6 kertaa vuorokaudessa, tavallisemmin 1-4 kertaa vuorokaudessa. Yhdisteet voidaan antaa myös parenteraalisessa annosmuodossa.

Koostumukset voidaan formuloida tavanomaisten lisäaineiden, kuten täyteaineiden, hajotusaineiden, sideainei-10 den, voiteluaineiden, makuaineiden ja niiden kaltaisten aineiden kanssa. Ne formuloidaan tavanomaisella tavalla, esimerkiksi tavalla, joka on samanlainen kuin se, jota käytetään tunnetuille korkean verenpaineen vastaisille aineille, diureettisille aineille, β-salpaajille tai ACE-15 inhibiittoreille.

Kaavan I mukaista yhdistettä voidaan edelleen käyttää aktiivisena terapeuttisena aineena. Tässä keksinnössä kuvatut yhdisteet ovat erityisen hyödyllisiä korkean verenpaineen hoidossa. Niitä voidaan käyttää myös kongestii-20 visen sydämen toiminnan vajavuuden hoidossa tai restenoo- sin ehkäisyssä.

Farmakologia

Yhdisteiden korkea affiniteetti angiotensiini II -reseptorille osoitettiin käyttäen rotan lisämunuaisresep-25 torin sitomisanalyysiä mittaamalla radiomerkityn angioten siini II:n siirtymä reseptorista, mikä on kuvattu seuraa-vassa: Nukuta Sprague-Dawley-koirasrotat (300 - 400 g kehonpaino) C02:lla ja tapa saattamalla niska sijoiltaan. Dissektoi lisämunuaiset ja pidä jääkylmässä sakkaroosipus-30 kurissa (0,2 M sakkaroosi, 1 mM EDTA, 10 mM Trizma-emäs, pH 7,2). Poista ydin murskaamalla. Jauha kuoriosa, huuh-tele ja homogenisoi viilennetyssä hiottua lasia olevassa kudosjauhimessa 15 ml:n kanssa sakkaroosipuskuria. Sentri-fugoi kiihtyvyydellä 3 000 x g 10 minuuttia. (Sorvali RCSC 35 sentrifugi, SS34-roottori 6 200 rpm.) Dekantoi superna- 16 108135 laimennuksen jälkeen. Analyysipä!vana sulata pakastettu erä ja säädä tilavuus, jolloin saadaan pitoisuus 5 pmol/ml (tai 0,25 pmol/50 μΐ) analyysipuskurin kanssa (+ proteaa-siton BSA) . Lopullista pitoisuutta, 1 nM 125I-A II :a, ana-5 lyysissä varten, lisää 50 μΐ (tai 25 pmol) koeputkea kohti lopulliseen tilavuuteen 250 μΐ. Tulokset näistä sitomis-analyyseistä raportoidaan koeyhdisteen inhibiittoripitoi-suutena, joka tarvitaan saavuttamaan radiomerkityn angio-tensiini II :n 50 %:n siirtymä reseptoristaan (IC50) , tai A 10 II:n sitomisen siirtymäprosentti reseptorissaan koeyhdis teen pitoisuudessa ΙΟ'8 M (% I) . Kaikki tässä keksinnössä mainitut esimerkit inhiboivat merkittävästi A II -sitomista tässä analyysissä. Tyypillisesti näillä yhdisteillä oli tässä analyysissä IC50-arvo, joka on pienempi tai yhtä 15 suuri kuin 50 μΜ.

Niiden kyvyn vastustaa angiotensiini II:a mukaisesti, keksinnön yhdisteillä on korkean verenpaineen vastaista vaikutusta seuraavassa A II -infusoidussa rottamallis-sa. Rotat nukutetaan Dial-Urethanella (0,60 ml/kg, ip) ja 20 henkitorvi kanyloidaan PE 240:llä. Kumpi tahansa reisival- timosta ja molemmat reisilaskimot tai kaulavaltimo ja vastaava kaulalaskimo kanyloidaan PE 50:llä. Jos kaulalaskimo on kanyloitu, kaksi kanyyliä asetetaan yhteen laskimoon. Pohjukaissuolen (vain etäisempi vatsaan nähden) alkuosa 25 kanyloidaan PE 50:llä pienen keskiviivan aukaisun kautta.

Valtimopaine ja sydämen lyöntitiheys mitataan valtimoka-nyylistä. Annetaan valtimopaineen stabiloitua 10 - 15 minuuttia leikkauksen jälkeen. Hermosolmun estäminen saadaan sitten aikaan antamalla mekamyyliamiinia laskimonsisäises-30 ti 3 mg/kg (1 ml/kg 3 mg/ml:n liuosta). Hermosolmun estä- • .. minen aiheuttaa valtimon paineen laskemisen noin 50 mmHg.

Mekamyyliamiinia annetaan joka 90 minuutin kuluttua koko loppukokeen ajan. A II -infuusio aloitetaan sitten toiseen laskimokanyyliin annoksena 0,25 μg/kg/min (9,6 μΐ/min). A 35 ,II -infuusio palauttaa valtimopaineen kontrollitasolle tai 1Γ5017- 17 hieman sen yläpuolelle. Kun valtimopaine on stabiloitunut A II -infuusiolla, perustasoarvot valtimon keskipaineelle (MAP) ja sydämen lyöntitiheys mitataan. Koeyhdistettä, joka on suspendoitu metyyliselluloosaan, annetaan sitten 5 pohjukaissuolikanyylin läpi annoksena 0,1, 3 tai 30 mg/kg tilavuudessa 1 ml/kg. Valtimon keskipaine ja sydämen lyön-titiheydet taulukoidaan 15, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210 ja 240 minuuttia koeyhdisteen antamisen jälkeen. Esimerkiksi esimerkin 2 tuote, jota annetaan 3 mg/kg id, alensi 10 A II -riippuvaista verenpainetta keskimäärin 30 % neljä tuntia antamisen jälkeen.

Lisäksi kykynsä vastustaa angiotensiini II:a mukaisesti kaavan I mukaisilla yhdisteillä on korkean verenpaineen vastaista vaikutusta seuraavassa Goldblatt (2K-1C) 15 korkean verenpaineen rottamallissa. Sprague-Dawley-rotat, jotka painoivat 150 g, nukutettiin pentobarbitaalilla (50 mg/kg ip), ja vasenta munuaisvaltimoa puristettiin hopeisella langalla, joka taivutettiin sisähalkaisijaltaan 0,2 mm:iin. Korkea verenpaine määritettiin 4-7 viikon puris-20 tuksen jälkeen. Silloin eläimet nukutettiin pentobarbitaa lilla (50 mg/kg ip) ja oikea kaulavaltimo kanyloitiin. Katetri vietiin ihonalaisesti kaulan selkäpuolelle ja tuotiin ulos. Eläimiä paastotettiin yön yli mutta sallittiin pääsy vedelle ja koe suoritettiin seuraavana aamuna. Kau-25 lakatetri liitettiin verenpaineanturiin, joka liitettiin MI2-tietokoneen tiedonhankintasysteemiin tai Grass- tai Beckman-tallentimeen valtimon kesikipaineen (MAP) ja sydämen lyöntitiheyden tallentamiseksi. Oraalista antamista varten, rotille annettiin joko kaavan I mukaista yhdistet-30 tä (1, 3 tai 10 mg/kg), losartaania (30 mg/kg) standardina tai vehikkeliä (0,5-%:inen metyyliselluloosa tislatussa vedessä) mahan kautta (gastric gavage (ig)) tilavuudessa 5 ml/kg. Laskimonsisäistä antamista varten, rotille annettiin joko kaavan I mukaista yhdistettä (0,03, 0,1, 1, 3 35 tai 10 mg/kg) tai vehikkeliä {<, 50-%:inen NaHC03 tislatussa 19 108135 munuaissiirroterapian ja muiden hoidossa. Nämä yhdisteet ovat käyttökelpoisia myös restenoosin, vasemman kammiodys-funktion, diabeettisen retinopatian, Alzheimerin taudin hoidossa, havainnon lisäämisessä, kohonneen silmän sisäi-5 sen paineen hoidossa, ja verkkokalvoveren virtauksen li säämisessä. Tämän keksinnön mukaisella menetelmällä saatavien yhdisteiden käyttö näitä ja samanlaisia sairauksia varten on ilmeistä alan ammattimiehille.

Spesifisiä menetelmiä kuvataan seuraavissa esimer-10 keissä. Nämä esimerkit annetaan havainnollistamaan keksin töä, eikä niitä tulisi pitää liitetyissä vaatimuksissa ilmaistua keksintöä rajoittavina.

Esimerkit

Esimerkki 1 15 2-metyyli-7-okso-8-[2'-(lH-tetratsol-5-yyli)bife- nyl-4-yylimetyyli] -5,6,7,8-tetrahydropyrido [2,3-d]pyrimi-diini-4-karbaldehydi

Seosta, jonka muodostivat 2,4-dimetyyli-8-[2'-(1H-tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,8-dihydro-6H-20 pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni (822 mg, 2,00 mmol) (valmis tettu julkaisun J. W. Ellingboe, et ai. US-patentti nro 5 149 699 mukaan), seleenidioksidi (222 mg, 2,00 mmol) ja dioksaani (10 ml), kuumennettiin käyttäen palautusjäähdytystä 6 tuntia. Lisättiin vielä seleenidioksidia (222 mg, 25 2,00 mmol) ja kuumennusta jatkettiin 18 tuntia. Seos suo datettiin ja suodos väkevöitiin. Puhdistuksesta flash-kro-matografiällä (10-%:inen MeOH/CH2Cl2) saatiin 316 mg keltaista vaahtoa. Vaahto trituroitiin asetohilla ja suodos jäähdytettiin pakastimessa, jolloin saatiin 102 mg (12 %) 30 tuotetta luonnonvalkoisena kiinteänä aineena, sp. 246 - • .. 247 °C.

^-NMR (DMSO-d6) δ 2,47 (s, 3H) , 2,74 (t, J = 7,1

Hz, 2H), 2,90 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 5,18 (s, 2H), 7,00 (d, J = 8,3 Hz, 2H) , 7,20 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,54 (m, 2H) , 35 7,64 (m, 2H), 8,38 (s, 1H).

108135 20 IR (KBr, cm'1) 1710.

Anal, laskettu C23H19N702 : lie C,64,93; H, 4,50; N, 23,05; todettu: C, 65,00; H, 4,90; N, 23,41.

Esimerkki 2 5 2-hydroksimetyyli-4-metyyli-8“[2'-(lH-tetratsol-5- yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]-pyrimidin-7-oni

Vaihe 1

Etyyli-3-(6-metyyli-2-metoksimetyyli-3H-pyrimidin-10 4-on-5-yyli)propionaatti

Seosta, jonka muodostivat NaOEt (0,088 mol) EtOH:ssa (valmistettu 2,0 g:sta natriumia ja 70 ml:sta EtOH:a), metoksiasetamidiinivetykloridi (5,4 g, 0,044 mol) ja di-etyyliasetyyliglutaraatti (10,0 g, 0,044 mol), kuu-15 mennettiin palautusjäähdyttäen 24 tuntia. Seos väkevöi- tiin, otettiin talteen veteen, tehtiin happamaksi arvoon pH 4 väkevällä HClilla ja uutettiin CH2Cl2:lla. Uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin. Trituroinnista eetterin kanssa saatiin 4,6 g (42 %) tuo-20 tetta luonnonvalkoisena kiinteänä aineena, sp.87 - 90 °C.

XH-NMR (DMSO-d6) δ 1,15 (t, J = 7,2 Hz, 3H) , 2,22 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,63 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 3,30 (s, 3H), 4,08 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 4,18 (s, 2H), 12,40 (leveä S, 1H) .

2 5 Vaihe 2

Etyyli-3-(4-kloori-6-metyyli-2-metoksimetyylipyri-midin-5-yyli)propionaatti

Etyyli-3-(6-metyyli-2-metoksimetyyli-3H-pyrimidin- 4-on-5-yyli)propionaatin (4,00 g, 15,6 mmol) ja fosforiok-30 sikloridin (25 ml) seosta kuumennettiin palautusjäähdyt täen 2 tuntia. Seos väkevöitiin, jäähdytettiin ja kaadettiin jäähän. 1 N NaOH:a lisättiin, jolloin pH vietiin arvoon 6 ja seosta uutettiin EtOAc:lla. Uutteet kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin 3,6 g (84 %) tuo-35 tetta ruskeana öljynä.

21 10813: ^-NMR (DMSO-d6) δ 1,18 (t, J = 7,0 Hz, 3H) , 2,60 (S, 3H), 3,01 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 3,36 (s, 3H), 3,36 (s, 3H), 4,05 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 4,48 (s, 2H).

Vaihe 3 5 8-[(4-bromifenyyli)metyyli]-4-metyyli-2-metoksime- tyyli-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni

Seosta, jonka muodostivat etyyli-3-(4-kloori-6-me-tyyli-2-metoksimetyylipyrimidin-5-yyli)propionaatti (3,6 g, 0,013 mol), 4-bromibentsyyliamiinivetykloridi 10 (3,0 g, 0,013 mol), NaHC03 (2,4 g, 0,028 mol) ja nBuOH

(25 ml), kuumennettiin palautus jäähdyttäen 24 tuntia. Seos väkevöitiin, otettiin talteen veteen ja uutettiin CH2Cl2:lla. Yhdistetyt uutteet kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin ruskea öljy. Puhdistuksesta 15 f lash-kromatograf iällä (5-% : inen MeOH/CH2Cl2) saatiin 3,6 g (72 %) tuotetta luonnonvalkoisena kiinteänä aineena, sp. 64 - 66 °C.

^-NMR (DMSO-d6) δ 2,40 (s, 3H) , 2,77 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 2,91 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 3,26 (s, 3H), 4,38 (s, 20 2H), 5,15 (s, 2H), 7,26 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,46 (d, J = 8,3 Hz, 2H).

Anal, laskettu C17H18BrN302: lie: C, 54,27; H, 4,82; N, 11,17; todettu: C, 54,31; H, 4,76; N, 11,03.

Vaihe 4 25 8-[ (4-bromifenyyli)metyyli] -2-hydroksimetyyli-4- • · metyyli-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni

Liuokseen, jonka muodostivat 8-[(4-bromifenyyli)metyyli] -6-metyyli-2-metoksimetyyli-5,8-dihydro-6H-pyrido-[2,3-d]pyrimidin-7-oni (1,00 g, 2,70 mmol) ja pyridiini 30 (0,11 g, 1,30 mmol) CHCl3:ssa (9 ml), lisättiin joditrime- • .* tyylisilaani (0,77 g, 3,80 mmol). Seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 30 tuntia ja MeOH (0,5 ml) lisättiin. Seos väkevöitiin, otettiin talteen CH2Cl2:iin, pestiin vesipitoisella Na2S03:lla ja suolaliuoksella, kuivattiin 35 (MgSOj ja väkevöitiin. Puhdistuksesta flash-kromatogra- 108135 22 f iällä (5-%:inen MeOH/CH2Cl2) saatiin 0,54 g (56 %) tuotetta värittömänä vaahtona.

^-NMR (DMSO-d6) δ 2,40 (s, 3H) , 2,73 (t, J = 7,6 Hz, 2H) , 2,87 (t, J = 7,6 Hz, 2H) , 4,43 (d, J = 6,2 Hz, 5 2H), 5,09 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 5,19 (s, 2H), 7,27 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,43 (d, J = 8,2 Hz, 2H).

Vaihe 5 2-hydroksimetyyli-4-metyyli-8-[2'-(1-tert-butyyli-lH-tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,8-dihydro-6H-10 pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni

Seosta, jonka muodostivat 8-[(4-bromifenyyli)metyyli] -2-hydroksimetyyli-4-metyyli-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3- d] pyrimidin-7-oni (0,95 g, 2,62 mmol), 2-[(1-tert-butyy- li)-lH-tetratsol-5-yyli]fenyyliboronihappo (0,72 g, 2,90 15 mmol) (valmistettu J.W. Ellingboe, et ai.'n US-patentin 5 149 699 mukaisesti), 2 M Na2C03 (5,5 ml), tetrakis(tri-fenyylifosfiini)palladium(O) (100 mg, 0,086 mmol), EtOH (3 ml) ja tolueeni (16 ml) , kuumennettiin palautusjäähdyttäen 20 tuntia. Seos laimennettiin CH2Cl2:lla ja kerrokset ero-20 tettiin. Orgaaninen faasi kuivattiin (MgS04) ja väkevöi- tiin, jolloin saatiin oranssi öljy. Puhdistuksesta flash-kromatografiällä (4-%:inen MeOH/CH2Cl2) saatiin 1,20 g (90 %) tuotetta värittömänä vaahtona.

1H-NMR (DMS0-d6) δ 1,42 (s, 9H) , 2,41 (s, 3H) , 2,72 '25 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,89 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 4,44 (d, J

= 6,0 Hz, 2H) , 5,08 (t, J = 6,0 Hz, 1H) , 5,23 (s, 2H) , 6,98 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 7,23 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 7,54 (m, 3H), 7,78 (d, J = 7,5 Hz, 1H).

Vaihe 6 30 2-hydroksimetyyli-4-metyyli-8-[2'-(lH-tetratsol-5- . yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]- pyrimidin-7-oni

Seosta, jonka muodostivat 2-hydroksimetyyli-4-me-tyyli-8-[2'-(l-tert-butyyli-lH-tetratsol-5-yyli)bifenyl-4 -35 yylimetyyli]-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni 23 1 08135 (1,2 g, 2,50 mmol), metaanisulfonihappo (2,40 g, 25,0 mmol) ja tolueeni (14 ml), kuumennettiin palautusjäähdyttäen 20 tuntia. Seos väkevöitiin, otettiin talteen veteen, ja pH säädettiin arvoon 7-8 IN NaOH:lla. Vesipitoista 5 seosta uutettiin EtOAc:lla (heitettiin pois) , tehtiin hap pamaksi pH-arvoon 4 1 N HCl:lla ja uutettiin CHCl3:lla. CHCI3-kerrokset kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin 1,10 g vaahtoa. Trituroinnista EtOAc/asetonin kanssa ja uudelleenkiteytyksestä EtOH:sta saatiin 0,45 g 10 (46 %) tuotetta valkoisena kiinteänä aineena, sp. 218 - 220 °C.

XH-NMR (DMSO-d6) 6 2,41 (s, 3H) , 2,74 (t, J = 7,0

Hz, 2H), 2,91 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 4,43 (s, 2H), 5,15 (leveä s, 1H), 5,24 (s, 2H), 7,00 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,23 15 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,57 (m, 4H).

Anal, laskettu C23H21N702:lle: C, 64,43; H, 4,95; N, 22,94; todettu: C, 64,73; H, 5,15; N, 22,55.

Esimerkki 3 4-hydroksimetyyli-2-metyyli-8-[2'-(1H-tetratsol-5-20 yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]- pyrimidin-7-oni

Vaihe 1 8-[(4-bromifenyyli)metyyli]-2-metyyli-7-okso-5,6,7,8-tetrahydropyrido[2,3-d]pyrimidiini-4-karbaldehydi '25 Seosta, jonka muodostivat 8-[(4-bromifenyyli)me tyyli] -2,4-dimetyyli-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]pyrimi-din-7-oni (692 mg, 2,00 mmol) (valmistettu esimerkin 2 vaiheissa 1-3 kuvattujen menetelmien mukaisesti), selee-nidioksidi (244 mg, 2,20 mmol) ja dioksaani (10 ml), kuu-30 mennettiin palautusjäähdyttäen 17 tuntia. Seos suodatet tiin ja suodos väkevöitiin. Puhdistuksesta flash-kromato-grafiällä (30-%:inen EtOAc/heksaani) saatiin 576 mg (80 %) tuotetta keltaisena kiinteänä aineena, sp. 124 - 126 °C.

108135 24 "H-NMR (CDC13) δ 2,70 (s, 3H) , 2,73 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 3,37 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 5,27 (s, 2H), 7,31 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,39 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 10,02 (s, 1H).

IR (KBr, cm’1) 1710, 1695.

5 Anal, laskettu ClsH14BrN302: lie: C, 53,35; H, 3,92; N, 11,66; Todettu: C, 53,16; H, 3,78; N, 11,51.

Vaihe 2 8-[(4-bromifenyyli)metyyli]-4-hydroksimetyyli-2-metyyli-5,8-dihydro-6H*-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni 10 Liuokseen, jonka muodosti 8-[(4-bromifenyyli)metyy li] -2-metyyli-7-okso-5,6,7,8-tetrahydropyrido[2,3-d]pyri-midiini-4-karbaldehydi (550 mg, 1,53 mmol) tetrahydrofu-raanissa (5 ml) ja isopropanolissa (2 ml), lisättiin nat-riumboorihydridi (116 mg, 3,05 mmol). 45 minuutin kuluttua 15 seos jäähdytettiin 0 °C:seen ja C02:a kuplitettiin 5 minuu tin ajan. Seos suodatettiin ja suodos väkevöitiin, jolloin saatiin 677 mg keltaista vaahtoa. Puhdistuksesta flash-kromatografiällä (5-%:inen MeOH/CH2Cl2) saatiin 496 mg (90 %) tuotetta luonnonvalkoisena kiinteänä aineena, sp. 20 159 - 160 °C.

1H-NMR (CDCI3) δ 2,65 (s, 3H) , 2,75 (s, 4H) , 4,40 (leveä s, 1H) , 4,63 (s, 2H) , 5,26 (s, 2H) , 7,31 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,39 (d, J = 8,3 Hz, 2H).

Anal, laskettu C16H16BrN302: lie: C, 53,05; H, 4,45; N, 25 11,60; todettu: C, 52,60; H, 4,37; N, 11,47.

Vaihe 3 4-hydroksimetyyli~2-metyyli-8-[2'-(1-tert-butyyli-lH-tetratsol-5-yyli)bifenyl“4-yylimetyyli]-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni 30 Seosta, jonka muodostivat 8-[(4-bromifenyyli)metyy- . li]-4-hydroksimetyyli-2-metyyli-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3- d]pyrimidin-7-oni (490 mg, 1,35 mmol), 2-[(1-tert-butyy-li)-lH-tetratsol-5-yli]fenyyliboronihappo (367 mg, 1,49 mmol) (valmistettu J.W. Ellingboe, et ai. US-patentin 35 ,5 149 699 mukaisesti), Na2C03 (287 mg, 2,71 mmol), tetra- 108135 25 kis(trifenyylifosfiini)palladium(0) (78 mg, 0,07 mmol),

EtOH (1 ml), vesi (2 ml) ja tolueeni (6 ml), kuumennettiin palautusjäähdyttäen 23 tuntia. Seos laimennettiin

EtOAc-.lla, pestiin kylläisellä vesipitoisella NaHC03:lla, 5 suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin keltainen öljy. Puhdistuksesta flash-kromatogra-fiällä (5-%:inen MeOH/CH2Cl2) saatiin 590 mg (90 %) tuotetta luonnonvalkoisena vaahtona. Analyyttinen näyte (40 mg) kiteytettiin eetteri/asetonista, sp. 164 - 166 °C.

10 1H-NMR (CDC13) δ 1,50 (s, 9H) , 2,63 (s, 3H) , 2,74 (s, 4H) , 4,40 (leveä s, 1H) , 4,63 (s, 2H) , 5,31 (s, 2H) , 7,06 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,31 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,45 (m, 3H), 7,84 (m, 1H).

Anal, laskettu C27H29N702 : lie: C, 67,06; H, 6,04; N, 15 20,28; todettu: C, 66,99; H, 6,07; N, 19,91.

Vaihe 4 4-hydroksimetyyli-2-metyyli-8-[2'-(lH-tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]-pyrimidin-7-oni 20 Seosta, jonka muodostivat 4-hydroksimetyyli-2-me- tyyli-8-[2'-(l-tert-butyyli-lH-tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni (550 mg, 1,14 mmol) , metaanisulfonihappo (1,10 g, 11,40 mmol) ja tolueeni (10 ml), kuumennettiin palautusjäähdyt-25 täen 4 vuorokautta. Seos väkevöitiin, 1 N KOH (11,4 ml) lisättiin, ja seosta uutettiin CHCl3:lla (heitettiin pois). Vesifaasi tehtiin happamaksi pH-arvoon 4 - 5 1 N HCltlla ja sitä uutettiin CHCl3:lla. Uutteet kuivattiin ja väkevöitiin, jolloin saatiin 94 mg keltaista vaahtoa. Trituroin-30 nista asetonin kanssa ja uudelleenkiteytyksestä EtOH:sta saatiin 46 mg (9 %) tuotetta valkoisena kiinteänä aineena, sp. 246 - 247 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) δ 2,47 (s, 3H) , 2,72 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 2,97 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 4,51 (s, 2H), 5,20 (s, 108135 26 2H) , 5,26 (leveä s, 1H) , 7,00>(d, J = 8,1 Hz, 2H) , 7,20 (d, J = 8,1 Hz,. 2H), 7,55 (m, 2H), 7,65 (m, 2H) .

Anal, laskettu C23H21N702: lie: C, 64,63; H, 4,95; N, 22,94; todettu: C, 64,41; H, 4,88; N, 22,20.

5 Esimerkki 4 2,4-dimetyyli-5-hydroksi-8-[2'-(lH-tetratsol-5-yyli) bifenyl-4-yylimetyyli] -8H-pyrido [2,3-d] pyrimidin-7-oni Seskvihydraatti

Vaihe 1 10 2,6-dimetyyli-5- jodi-4-hydroksipyrimidiini

Mekaanisesti sekoitettua seosta, jonka muodostivat 2,6-dimetyyli-4-hydroksipyrimidiini (50,0 g, 0,403 mol), jodi (102,2 g, 0,403 mol) ja 1 N NaOH (503 ml), kuumennettiin palautusjäähdyttäen 2 tuntia. Seosta uutettiin 15 CHCl3:lla (osa tuotteesta jätettiin liuoksesta ja se otettiin talteen suodattamalla: 24,5 g). Uutteet kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin 40,9 g oranssia kiinteää ainetta, joka sisälsi lähtöainetta ja tuotetta. Trituroinnista EtOAc:n kanssa saatiin 26,0 g tuotetta.

20 Tuotteen kokonaissaanto oli 50,5 g (50 %) , sp. 208 - 210 (haj.). Analyyttinen näyte uudelleenkiteytettiin EtOH:sta, sp. 216 - 218 °C.

^-NMR (DMSO-d6) δ 2,21 (s, 3H) , 2,39 (s, 3H) , 12,58 (leveä s, 1H).

25 Anal, laskettu C6H7IN20: lie: C, 28,82; H, 2,82; N, 11,20; Todettu: C, 28,85; H, 2,76; N, 10,98.

Vaihe 2 4-kloori-2,6-dimetyyli-5-jodipyrimidiini

Seosta, jonka muodostivat 2,6-dimetyyli-5-jodi-4- 30 hydroksipyrimidiini (24,5 g, 0,098 mol), fosforioksiklori- . di (30,0 g, 0,196 mol) ja tolueeni (200 ml), kuumennettiin » palautusjäähdyttäen 1 tunti. Seos väkevöitiin ja jäävettä (100 ml) lisättiin. pH säädettiin arvoon 5 2,5 N NaOH:11a ja seosta uutettiin CH2Cl2:lla. Yhdistetyt uutteet pestiin 35 suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin 27 10813·: saatiin 24,6 g ruskeaa kiinteää ainetta. Raaka tuote yhdistettiin 26,0 g:n kanssa samalla tavalla valmistettua ainetta ja suodatettiin lyhyen silikageelipylvään läpi eluoiden CH2Cl2:lla, jolloin saatiin 33,8 g (62 %) tuotetta 5 keltaisena kiinteänä aineena. Analyyttinen näyte uudel- leenkiteytettiin heksaani/CH2Cl2:sta, sp. 62 - 64 °C.

1H-NMR (CDClj) δ 2,61 (s, 3H) , 2,73 (s, 2H) .

Anal, laskettu CeH6ClIN2: lie: C, 26,84; H, 2,26; N, 10,44; todettu: C, 27,04; H, 2,15; N, 10,14.

10 Vaihe 3 4-kloori-2,6-dimetyyli-5-(l-etoksivinyyli)pyrimi- diini

Seosta, jonka muodostivat 4-kloori-2,6-dimetyyli-5-jodipyrimidiini (13,5 g, 0,050 mol), (1-eto'ksivinyyli) tri-15 butyylitina (20,0 g, 0,055 mol), litiumkloridi (6,4 g, 0,150 mol), tetrakis(trifenyylifosfiini)palladium(0) (1,7 g, 0,0015 mol) ja dioksaani (100 ml), kuumennettiin palautusjäähdyttäen 23 tuntia. Lisättiin vielä tetrakis-(trifenyylifosfiini)palladium(O) (1,1 g, 0,0010 mol) ja 20 kuumennusta jatkettiin 25 tuntia. Seos jäähdytettiin, lai mennettiin EtOAc:lla ja 1 N KF (100 ml) lisättiin. Kiinteät aineet poistettiin suodattamalla Celiten läpi ja kerrokset erotettiin. Orgaaninen faasi pestiin pH 7 fosfaattipuskurilla (100 ml) , suolaliuoksella (100 ml) , kuivat-25 tiin (MgS04) ja väkevöitiin. Puhdistuksesta flash-kromato- grafialla (kahdesti; 5 - 10-%:inen EtOAc/heksaani) saatiin 6,44 g (61 %) tuotetta värittömänä öljynä.

'H-NMR (CDCI3) δ 1,35 (t, J = 7,0 Hz, 3H) , 2,49 (s, 3H), 2,65 (s, 3H), 3,91 (q, J = 7,0 Hz, 3H), 4,21 (d, J = 30 2,8 Hz, 1H), 4,52 (d, J = 2,8 Hz, 1H).

- . ’ Anal, laskettu C10H13ClN2O: lie: C, 56,47; H, 6,16; N, ‘ 13,17; todettu: C, 55,13; H, 5,97; N, 13,16.

28 ^08135

Vaihe 4 4-(4-bromibentsyyliamino)-2,6-dimetyyli-5-(1-etok-sivinyyli)pyrimidiini

Seosta, jonka muodostivat 4-kloori-2,6-dimetyyli-5-5 (1-etoksivinyyli)pyrimidiini (3,00 g, 0,0141 mol), 4-bro- mibentsyyliamiinivetykloridi (3,45 g, 0,0155 mol), NaHC03 (2,37 g, 0,0282 mol) ja n-butanoli (20 ml), kuumennettiin palautusjäähdyttäen 70 tuntia. Seos väkevöitiin, otettiin talteen EtOAc:iin, pestiin vedellä, kuivattiin (MgS04) ja 10 väkevöitiin. Trituroinnista eetteri/heksaanin kanssa saa tiin 2,84 g (56 %) tuotetta valkoisena kiinteänä aineena. Analyyttinen näyte uudelleenkiteytettiin eetteri/heksaa-nista, sp. 111 - 113 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) 6 1,24 (t, J = 6,9 Hz, 3H) , 2,15 15 (S, 3H), 2,24 (s, 3H), 3,84 (q, J = 6,9 Hz, 2H), 4,18 (d, J = 1,7 Hz, 1H) , 4,50 (d, J = 6,2 Hz, 2H) , 4,53 (d, J = 1,7 Hz, 1H) , 6,91 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 7,22 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,46 (d, J = 8,3 Hz, 2H).

Anal, laskettu C17H20BrN3O: Ile: C, 56,36; H, 5,56; N, 20 11,60; todettu: C, 56,64; H, 5,64; N, 11,48.

Vaihe 5

Metyyli- (4- (4-bromibentsyyliamino) -2,6-dimetyylipy-rimidin-5-yyli)ketoni

Liuosta, jonka muodostivat 4-(4-bromibentsyyliami-25 no)-2,6-dimetyyli-5-(1-etoksivinyyli)pyrimidiini (2,72 g, 7,51 mol), 1 N HC1 (8,3 ml) ja asetoni (8 ml), kuumennettiin palautusjäähdyttäen 2,5 tuntia. Asetoni poistettiin käyttäen alennettua painetta ja vesifaasi säädettiin pH-arvoon 4 1 N KOH:lla. Saatu valkoinen sakka otettiin tal-30 teen suodattamalla, jolloin saatiin 2,24 g (89 %) tuotetta ; valkoisena kiinteänä aineena. Analyyttinen näyte uudel leenkiteytettiin heksaanista, sp. 78 - 80 °C.

^-NMR (DMSO-d6) δ 2,30 (s, 3H) , 2,36 (s, 3H) , 2,50 (S, 3H) , 4,57 (d, J = 5,8 Hz, 2H) , 7,25 (d, J = 8,3 Hz, 35 2H), 7,49 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 8,34 (t, J = 5,8 Hz, 1H).

7°δ735 29

Anal, laskettu C15H16BrN3‘0:lle: C, 53,91; H, 4,83; N, 12,57; todettu: C, 53,87; H, 4,77; N, 12,55.

Vaihe 6

Metyyli [2,6-dimetyyli-4- [ (2 ' - (1-tert-butyyli-lH-5 tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli) amino]pyrimidin-5- yyli]ketoni

Kuumennettuun liuokseen, jonka muodostivat metyyli (4-(4-bromibentsyyliamino)-2,6-dimetyyli-pyrimidin-5-yyli)ketoni (1,67 g, 5,00 mmol) ja tetrakis(trifenyylifosio fiini)palladium(O) (0,29 g, 0,25 mmol) tolueenissa (20 ml), lisättiin osittainen liuos, jonka muodostivat 2 - [ (1-tert-butyyli)-lH-tetratsol-5-yyli]fenyyliboronihappo (1,50 g, 6,10 mmol) (valmistettu J.W. Ellingboe, et al.'n US-patentin 5 149 699 mukaan) ja Na2C03 (1,06 g, 10,00 15 mmol) vedessä (10 ml) ja EtOH:ssa (5 ml), useissa erissä 1 tunnin aikana. Kuumennusta jatkettiin 2,5 tuntia. Seos laimennettiin EtOAc:lla ja kerrokset erotettiin. Orgaaninen faasi pestiin 0,1 N NaOHrlla, suolaliuoksella, kuivattiin (MgSOj ja väkevöitiin. Puhdistuksesta flash-kroma-20 tografiällä (40 - 50-%:inen EtOAc/heksaani) ja'trituroin- nista heksaanin kanssa saatiin 1,71 g (75 %) tuotetta valkoisena kiinteänä aineena. Analyyttinen näyte uudelleen-kiteytettiin eetteristä, sp. 131 - 132 °C.

1H-NMR (CDClj) δ 1,54 (s, 9H) , 2,51 (s, 3H) , 2,56 25 (s, 3H), 2,64 (s, 3H), 4,71 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 7,12 (d, J = 8,3 Hz, 2H) , 7,22 (d, J = 8,3 Hz, 2H) , 7,45 (m, 3H) , 7,88 (m, 1H), 9,0 (leveä s, 1H).

Anal, laskettu C26H29N70: lie: C, 68,55; H, 6,42; N, 21,52; todettu: C, 68,56; H, 6,40; N, 21,19.

30 Vaihe 7 .. 2,4-dimetyyli-5-hydroksi-8-[2'-(1-tert-butyyli-lH- tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-8H-pyrido[2,3-d]-pyramidin-7-oni

Kuumennettuun NaH:n (60-%:inen dispersio mineraa-35 liöljyssä; 0,24 g, 5,93 mmol) suspensioon dietyylikarbo- 30 '08135 naatissa (1,40 g, 11,85 mmol) ja THF:ssa (10 ml) lisättiin metyyli[2,6-dimetyyli-4-[(2'-(1-tert-butyyli-lH-tetratsol- 5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli)amino]pyrimidin-5-yyli]keto-nin (1,08 g, 2,37 mmol) liuos THF:ssa (10 ml) 10 minuutin 5 aikana. Kuumennusta jatkettiin 1,5 tuntia. Seos väkevöi- tiin, otettiin talteen veteen ja uutettiin kahdesti eetterillä (heitettiin pois). Vesifaasi tehtiin happamaksi arvoon pH 4 ja sakka otettiin talteen suodattamalla, jolloin saatiin 965 mg (85 %) tuotetta. Analyyttinen näyte 10 uudelleenkiteytettiin asetonista, sp. 235 - 237 °C.

"H-NMR (CDC13) δ 1,47 (s, 9H) , 2,72 (s, 3H) , 2,89 (S, 3H), 5,52 (s, 2H), 6,18 (s, 1H), 7,04 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,31 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,44 (m, 3H), 7,84 (m, 1H).

Anal, laskettu C27H27N702: lie: C, 67,34; H, 5,65; N, 15 20,36; todettu: C, 66,97; H, 5,58; N, 20,06.

Vaihe 8 2;4-dimetyyli-5-hydroksi-8-[2'-(lH-tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni, seskvihydraatti 20 Seosta, jonka muodostivat 2,4-dimetyyli-5-hydroksi- 8-[2'-(l-tert-butyyli-lH-tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yyli-metyyli]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni (925 mg, 1,92 mmol), metaanisulfonihappo (1,84 g, 19,2 mmol) ja tolueeni (10 ml), kuumennettiin palautusjäähdyttäen 28 tuntia. 1 N 25 KOH (25 ml) lisättiin ja seosta uutettiin kahdesti

EtOAc:lla (heitettiin pois). Vesifaasi tehtiin happamaksi pH-arvoon 4 1 N HClrlla ja sakka (560 mg) otettiin talteen suodattamalla. Uudelleenkiteytyksestä EtOH/vedestä saatiin 424 mg (52 %) tuotetta luonnonvalkoisena kiinteänä ainee-30 na, sp. 278 - 280 °C (haj.).

. "H-NMR (DMS0-ds) δ 2,55 (s, 3H) , 2,80 (s, 3H) , 5,43 : (s, 2H), 5,86 (s, 1H), 6,99 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,14 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,42 (m, 1H), 7,47 (dd, J = 7,7, 1,5 Hz, 1H), 7,54 (m, 1H), 7,58 (dd, J = 7,5, 1,5 Hz, 1H).

31 7 °8 7 35

Anal, laskettu C23H19N702 -1,5 H20:lle: C, 61,05; H, 4,90; N, 21,67; Todettu: C, 60,74; H, 4,94; N, 21,25.

Esimerkki 5 2.4- dimetyyli-6-hydroksi-8-[2'-(lH-tetratsol-5- 5 yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]- pyrimidin-7-oni

Vaihe 1 2.4- dimetyyli-8- [2' - (1-trifenyylimetyyli-lH-tetrat-sol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli] -5,8-dihydro-6H-pyri- 10 do[2,3-d]pyrimidin-7-oni

Liuokseen, jonka muodosti 2,4-dimetyyli-8-[2'-(1H-tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni (2,00 g, 4,86 mmol) (valmistettu J.W. Ellingboe, et al.'n US-patentin 5 149 699 mu-15 kaan) CHCl3:ssa (50 ml), lisättiin trietyyliamiini (0,49 g, 4,86 mmol) ja trifenyylimetyylikloridi (1,36 g, 4,86 mmol). 2,5 vuorokauden kuluttua, seos pestiin 0,1 N NaOH:lla, suolaliuoksella, kuivattiin (MgS0„) ja väkevöi-tiin, jolloin saatiin valkoinen vaahto. Trituroinnista 20 heksaanin kanssa saatiin 2,64 g (85 %) tuotetta valkoisena kiinteänä aineena, sp. 160 - 161 °C.

1H-NMR (DMSO-d6) δ 2,35 (s, 3H) , 2,36 (s, 3H) , 2,66 (t, J = 7,8 Hz, 2H) , 2,82 (t, J = 7,8 Hz, 2H) , 5,15 (s, 2H), 6,81 (d, J = 6,9 HZ, 6H), 6,98 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 25 7,14 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,31 (m, 9H), 7,41 (d, J = 7,6

Hz, 1H) , 7,55 (m, 2H) , 7,77 (d, J = 7,2 Hz, 1H) .

Anal, laskettu C42H35N70: lie: C, 77,16; H, 5,40; N, 15,00; todettu: C, 77,32; H, 5,34; N, 14,86.

Vaihe 2 30 2,4-dimetyyli-6-hydroksi-8-[2'-(1H-tetratsol-5-yy- ; li)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]py- rimidin-7-oni Jäähdytettyyn (-78 °C) 2,4-dimetyyli-8-[2'-(l-tri-fenyylimetyyli-1H-tetratsoi-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-35 μ5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onin (1,57 g, 2,41 32 108135 mmol) liuokseen THF:ssa (5 ml) lisättiin 0,5 M kaliumhek-sametyylidisilatsidia tolueenissa (5,5 ml, 2,75 mmol). 45 minuutin kuluttua lisättiin (+)-kamforisulfonyylioksatsi-ridiinin liuos THF:ssa (5 ml) . Seoksen annettiin lämmetä 5 5 °C:seen 5 tunnin aikana. Vettä (2 ml) ja CF3C02H:a (2 ml) lisättiin ja sekoitusta jatkettiin 1 tunti. 1 N NaOH (30 ml) lisättiin ja seosta uutettiin EtOAc:lla (heitettiin pois) . Vesifaasi tehtiin happamaksi arvoon pH 4 1 N HCl:lla ja sitä uutettiin CHCl3:lla. Uutteet kuivattiin 10 (MgS04) ja väkevöitiin. Puhdistuksesta flash-kromatogra- fiällä (5 - 10-%:inen MeOH/CHCl3) saatiin 377 mg keltaista öljyä. Kiteytyksestä asetonista saatiin 234 mg (23 %) tuotetta luonnonvalkoisena kiinteänä aineena, sp. 154 -156 °C.

15 Ή-NMR (DMSO-d6) 6 2,37 (s, 3H) , 2,46 (s,’ 3H) , 2,80 (dd, J = 15,8, 10,7 Hz, 1H), 3,11 (dd, J = 15,8, 6,2 Hz, 1H), 4,34 (m, 1H), 5,12 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 5,20 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 5,92 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,01 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,10 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,28 (dd, J = 6,8, 2,1 20 Hz, 1H), 7,35 (m, 2H), 7,50 (dd, J = 7,3, 1,7 Hz, 1H).

Esimerkki 6 5-hydroksi-2,4-dimetyyli-8-[2'-(lH-tetratsol-5-yy-li)bifenyl-4-yylimetyyli]-6,8-dihydro-5H-pyrido[2,3-d]py-rimidiini-7-oni, hydraatti-0,4-eteraatti 25 Jäähdytettyyn (0 °C), mekaanisesti sekoitettuun seokseen, jonka muodostivat 2,4-dimetyyli-8-[2'-(lH-tet-ratsol-5-yyli)bi fenyl-4-yylimetyyli]-5,8-dihydro-6H-pyri -do[2,3-d]pyrimidin-7-oni (8,2 g, 0,020 mol) (valmistettu J.W. Ellingboe, et ai.'n US-patentin 5 149 699 mukaises-30 ti), MgS04 (14,4 g, 0,120 mol) ja vesi (285 ml), lisättiin 2,5 N NaOH:a (8,78 ml). Saatu seos säädettiin pH-arvoon 7,0 - 7,5 2 N HClilla (0,7 ml). KMn04:n (6,3 g, 0,040 mol) liuos vedessä (362 ml) lisättiin tipoittain 2 tunnin 40 minuutin aikana ja seoksen annettiin lämmetä huoneenlämpö-35 tilaan. 24 tunnin kuluttua lisättiin vielä MgS04 (5,04 g, 108135 0,042 mol) ja KMn04 (2,2 g, 0,014 mol) ja sekoitusta jatkettiin 24 tuntia. Reaktioseos suodatettiin Solka Flocin läpi ja suodos väkevöitiin noin 200 ml:aan. pH säädettiin arvoon noin 4 KH2P04:lla (13,6 g) ja sakka otettiin talteen * 5 suodattamalla. Aine otettiin talteen metanoliin ja suoda tettiin, jolloin saatiin 1,96 g. Suodattamalla Solka Flocin läpi saatu Mn02 sekoitettiin veteen (400 ml) ja suodatettiin. Suodosta käsiteltiin KH2P04:lla, jolloin pH vietiin arvoon 4 ja sakka otettiin talteen suodattamalla.

10 Aine otettiin talteen metanoliin ja suodatettiin, jolloin saatiin 1,36 g. Yhdistetty aine puhdistettiin flash-kroma-tografialla (10 - 30-%:inen MeOHJ/CHCl3) , trituroitiin EtO-Ac:n ja MeOH:n kanssa, ja trituroinnista veden kanssa saatiin 0,67 g (8 %) tuotetta valkoisena kiinteänä aineena, 15 sp. 154 - 167 °C.

Anal, laskettu C23H21N702 -H20-0,4 C4H10O:lie: C, 62,18; H, 5,73; N, 20,64; todettu: C, 62,24; H, 5,73; N, 20,41.

Claims (7)

34 7 0S7 35

1. Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten 7-okso-8-[2'-(lH-tetrasol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,6,7,8-5 tetrahydropyrido[2,3-d]pyrimidiinijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava I o ”·\Λ/£"!γν R2 10 jossa R1 ja R2 merkitsevät toisistaan riippumatta vetyä, C -al- kyyliä, hydroksi-C1_g-alkyyliä tai formyyliä; 3 · 4 R ja R merkitsevät toisistaan riippumatta vetyä tai hydro ks ia ; 1 2 15 edellyttäen, että vähintään toisen ryhmistä R ja R täytyy olla hydroksi-C16-alkyyli tai formyyli; tai vähintään 3 4 toisen ryhmistä R ja R täytyy olla hydroksi; Ar2 on R5 jossa R5 on vety, tert-butyyli, tri-n-butyylistannyyli tai trifenyylimetyyli; tai mainitun yhdisteen tautomeerin, tai mainitun yhdisteen tai tautomeerin farmaseuttisesti 25 hyväksyttävä suolan valmistamiseksi, tunnettu siitä, että 108135 35 a) yhdiste, jolla on kaava 0 RV^N—CH2—^ —z1 Aa. 5 (A) tai sen suola saatetaan reagoimaan kaavan Z2 - Ar3 mukaisen yhdisteen kanssa, jolloin Ar3 on sama kuin Ar2 paitsi, että tetra-atsoyyliryhmä voi olla suojattu poistettavissa olevalla suojaryhmällä, Z1 on on poistuva ryhmä kuten bro-10 mi, kloori, jodi tai organosulfonyylioksi ja Z2 on boroni-happo tai trialkyylitina; tai b) yhdiste, jolla on kaava B O Κγ^Ν-°Π2-f \- Ar> Aä.· 15 (B) 3 4 jossa toinen ryhmistä R ja R on vety, tai sen suola hapetetaan vedyn korvaamiseksi hydroksiryhmällä; tai c) yhdiste, jolla on kaava . 20 _ HN-CH2-^- Ar3 CH3CO \ R* (E) 36 W8h3r tai sen suola syklisoidaan reaktiolla dialkyylikarbonaa-tin ja emäksen kanssa ja kaavan I mukaisen yhdisteen muodostamiseksi, jossa R3 on hydroksi; ja haluttaessa saatu kaavan (I) mukainen yhdiste, 5 jossa R1 ja/tai R2 on CH3, hapetetaan, jolloin saadaan yhdiste, jossa R1 ja/tai R2 on formyyliryhmä, tai haluttaessa kaavan I mukainen yhdiste tai sen suola muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi tai suola muutetaan kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi tai 10 sen tautomeeriksi.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2-metyyli-7- okso-8-[2'-(lH-tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,6,7,8-tetrahydropyrido[2,3-d]pyrimidiini-4-karbaldehydi 15 tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2-hydroksi- metyyli-4-metyyli-8-[2'-(1H-tetratsoi-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni 20 tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 4-hydroksi- metyyli-2-metyyli-8-[2'-(lH-tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni 25 tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2,4-dimetyyli- 5-hydroksi-8-[2'-(lH-tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni tai sen far- 30 maseuttisesti hyväksyttävä suola.

: 6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2,4-dimetyyli- 5-hydroksi-8-[2'-(lH-tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-6,8-dihydro-5H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni 35 tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola. 108135 37

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 2,4-dimetyyli- 6-hydroksi-8-[2'-(lH-tetratsol-5-yyli)bifenyl-4-yylimetyyli]-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-oni 5 tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola. • · 38 TO 8135