FI106717B - Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten 7-aminoasetyylimerkaptoasetyyliamidioktahydro-6-oksopyridiini[2,1a] [2] - bentsatsepiini- ja heksahydro-6-okso-1H- [1,4] -oksatsiini - [3,4-a] [2]bentsatsepiini-ja heksahydro-6-okso-1H-[1,4] - tiatsiini[3,4-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappojen ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi - Google Patents

Description

106717

Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten 7-aminoasetyylimer-kaptoasetyyliamidioktahydro-6-oksopyridiini[2,la][2] -bentsatsepiini- ja heksahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsiini-[3,4-a][2]bentsatsepiini- ja heksahydro-6-okso-lH-[1,4]-5 tiatsiini[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappojen ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi

Keksintö koskee menetelmää enkefalinaasin ja ACE:n 10 inhibiittoreina käyttökelpoisten 7-aminoasetyylimerkapto- asetyyliamidioktahydro-6-oksopyridiini[2,1a][2]bentsatsepiini- ja heksahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsiini[3,4-a]- [2]bentsatsepiini- ja heksahydro-6-okso-lH-[1,4]-tiat-siini[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappojen val-15 mistamiseksi, joilla on kaava I ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi.

Enkefalinaasi tai tarkemmin sanottuna endopeptidaa-si 24.11, on nisäkkäiden ektoentsyymi, joka liittyy tiettyjen kiertävässä veressä olevien säätelypeptidien pilk-20 koutumalla tapahtuvaan metaboloitumiseen. Tämän Zn+2-metal- lopeptidaaseihin kuuluvan entsyymin vaikutuksesta solunul-koiset peptidit pilkkoutuvat hydrofobisten ryhmien amino-ryhmän kohdalta, mikä siten inaktivoi nämä peptidit säätelyssä toimivina lähettimolekyyleinä.

25 Enkefalinaasi liittyy sellaisten useiden erilaisten säätelypeptidien pilkkoutumalla tapahtuvaan metaboloitumiseen, jotka esiintyvät kiertävässä veressä ja joihin kuuluvat endorfiinit, kuten β-endorfiini ja enkefaliinit, eteispeptidi (ANP), bradykiniini ja muut kiertävän veren 30 säätelypeptidit.

Endorfiinit ovat luonnossa esiintyviä polypeptide-jä, jotka sitoutuvat opiaattireseptoreihin useilla aivojen ‘ alueilla ja ne vaikuttavat tämän välityksellä analgeetti- sesti . kipukynnystä kohottamalla. Endorfiinejä esiintyy 35 useissa muodoissa, joihin kuuluvat α-endorfiini, β-endor- • 106717 fiini, γ-endorfiini sekä enkefaliinit. Enkefaliinit, toisin sanoen Met-enkefaliini ja Leu-enkefallini, ovat penta-peptidejä, jotka esiintyvät aivokudoksen, selkäytimen ja ruoansulatuskanavan hermopäätteissä. Muiden endorfiinien 5 tavoin enkefaliinit vaikuttavat analgeettisesti sitoutu malla aivoissa oleviin opiaattireseptoreihin. Enkefalinaa-sin inhibointi estää luonnossa esiintyvien endorfiinien ja enkefaliinien metaboloitumisen pilkkoutumalla, mikä saa aikaan voimakkaan endorfiinien tai enkefaliinien välityk-10 sellä tapahtuvan analgeettisen vaikutuksen. Enkefalinaasin inhibitio olisi siten käyttökelpoista potilaalla, jolla on akuuttia tai kroonista kipua. Enkefalinaasin inhibitio olisi myös käyttökelpoista antidepressiivisen vaikutuksen aikaansaamiseksi ja opiaattien tai morfiinin annostelun 15 lopettamiseen liittyvien vieroitusoireiden vaikeusasteen vähentämiseksi.

ANP tarkoittaa ryhmää luonnossa esiintyviä peptidejä, jotka liittyvät verenpaineen ja sekä natrium- että vesipitoisuuksien homeostaattiseen säätelyyn. ANP:n pituuden 20 on havaittu vaihtelevan noin 21 aminohaposta noin 126 aminohappoon ja sen yleisenä rakennepiirteenä on yksi tai useampi 17 aminohapon mittainen disulfidisilmukkajakso kysteiiniryhmään liittyvien useiden erilaisten amino- ja karboksiterminaalisten jaksojen ohella. ANP:n on havaittu ,, 25 sitoutuvan spesifisiin sitoutumiskohtiin useissa erilai sissa kudoksissa, joihin kuuluvat munuainen, lisämunuainen, aortta ja verisuonten sileä lihas, ja sitoutumisaffi-niteetit ovat 50-pikomolaarisesta (pM) noin 500-nanomolaa-riseen (nM) [Needleman, Hypertension 7 (1985) 469]. ANP:n 30 arvellaan lisäksi sitoutuvan spesifisiin reseptoreihin ai-• voissa ja toimivan mahdollisesti neuromodulattorina sekä tavanomaisena perifeerisenä hormonina.

ANP:n biologisiin ominaisuuksiin liittyy voimakkaita diureettisia/natriureettisia ja verisuonia laajenta-35 via/verenpainetta alentavia vaikutuksia sekä reniinin ja 3 106717 aldosteronin eritykseen kohdistuva inhibitorinen vaikutus. [deBold, Science 230 (1985) 767] . Enkefalinaasin inhiboin-ti estää luonnossa esiintyvän ANP:n metaboloitumista pilkkoutumalla, mistä siten syntyy ANP:n välityksellä tapahtu-5 via voimakkaita diureettisia, natriureettisia, verenpai netta alentavia ja hypoaldosteronemisiä vaikutuksia. Enkefalinaasin inhibitio olisi siten käyttökelpoista potilaalla, jolla on sairauksia, joille on luonteenomaista neste-, elektrolyytti-, verenpaine-, silmänpaine-, reniini- tai 10 aldosteronihomeostaasissa esiintyvät epänormaalit piir teet, kuten verenpaine, munuaissairaudet, hyperaldostero-nemia, sydämen suurentuneisuus, glaukooma ja sydämen vajaatoiminta, mainittuihin kuitenkaan rajoittumatta.

Tämän keksinnön mukaiset yhdisteet ovat lisäksi 15 angiotensiiniä muuttavan entsyymin (ACE) inhibiittoreita.

ACE on peptidyylidipeptidaasi, joka katalysoi angiotensii-ni I :n muuttumista angiotensiini II:ksi sekä saa aikaan bradykiniinin pilkkoutumisen. Angiotensiini II on vaso-konstriktori, joka stimuloi myös lisämunuaisen kuoriker-20 roksen aldosteronin eritystä. ACE:n inhibitio olisi siten käyttökelpoista potilaalla, jolla on sairauksia, kuten verenpaine ja sydämen vajaatoiminta [näitä kysymyksiä on käsitelty artikkelissa William W. Douglas, "Polypeptides -Angiotensin, Plasma Kinins, and Others", joka on luku 27 25 teoksessa Goodman and Gillman's The Pharmacological Basis • · of Therapeutics, 7th edition, 1985, s. 652 - 3, MacMillan Publishing Co., New York, New York). On lisäksi tehty se löytö, että ACE-inhibiitorit ovat käyttökelpoisia kognitiivisten sairauksien hoidossa [DE-patenttihakemusjulkaisu 30 nro 3 901 291-A, joka on julkaistu 3.8.1989].

·; Bradykiniini tarkoittaa luonnossa esiintyvää pepti diä, joka on erittäin voimakas vasodilataattori ja sen vaikutuksesta hiussuonten läpäisevyys lisääntyy. Enkefa-linaasia ja ACErtä inhiboimalla inhiboituu bradykiniinin 1

V

4 106717 metaboloituminen pilkkoutumalla, mikä siten kohottaa bra-dykiniinipitoisuuksia verenkierrossa.

EP-patenttihakemusjulkaisussa nro 0 128 728, joka on julkaistu 19.12.1984, on kuvattu tiettyjä substituoitu-5 ja laktaamijohdannaisia, jotka ovat käyttökelpoisia angio-tensinaasi- tai enkefalinaasi-inhibiittoreina. Lisäksi EP-patenttihakemusjulkaisussa nro 0 249 223, joka on julkaistu 16.12.1987, on kuvattu tiettyjä fuusioituja trisyklisiä laktaamijohdannaisia, ja EP-patenttihakemusjulkaisussa nro 10 0 249 224, joka on julkaistu 16.12.1987, on kuvattu tiet tyjä fuusioituja syklisiä atsepin-2-oneja, jotka molemmat ovat käyttökelpoisia ACE:n inhiboimisessa ja joiden loppu-käyttösovellutuksena on niiden käyttö antihypertensiivisi-nä aineina.

15 Keksinnön yhteenveto

Keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetaan terapeuttisesti käyttökelpoisia 7-aminoasetyylimerkap-toasetyyliamidioktahydro-6-oksopyridiini[2 , la] [2]bents-atsepiini-, heksahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsiini[3,4-a]- 20 [2]bentsatsepiini- ja heksahydro-6-okso-lH-[1,4]-tiat-

siini[3,4-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappoja, joilla on kaava I

.. 25 Γί^Ι h H r"ir ' V T1H (i) 0. /N^\ y 30 / ho2c HC„_ 1

ru ^S-C-(CH2)m-X

35 5 106717 jossa Z on -CH2-, -O-, -S-, m on kokonaisluku 0 - 3 ja X on ryhmä, jolla on kaava

—l/ \) —|/ ~\^JS

I I I

„ -o·· -oc -c.

“O -o- t 1

15 -o -O

\=N N^N

H .

i

*·1 -Q

20 \ N— / sekä niiden farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.

Keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää menetelmässä enkefalinaasin inhiboimiseksi tällaisen inhibi-. 25 tion tarpeessa olevassa potilaassa, joka menetelmä käsit- tää sen, että mainitulle potilaalle annetaan tehokas enkefalinaasia inhiboiva määrä kaavan (I) mukaista yhdistettä. Keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää myös menetelmässä ACE:n inhiboimiseksi tällaisen inhibi-30 tion tarpeessa olevassa potilaassa, joka menetelmä käsit-;· tää sen, että mainitulle potilaalle annetaan tehokas ACE:tä inhiboiva määrä kaavan (I) mukaista yhdistettä.

Keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää koostumuksen valmistamiseen, joka koostumus käsittää määritet-35 tävissä olevan määrän kaavan (I) mukaista yhdistettä · r » » 6 106717 sekoitettuna tai jollakin muulla tavoin yhdistettynä tehottomaan kantaja-aineeseen. Keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan myös käyttää farmaseuttisessa koostumuksessa, joka käsittää inhibitorisesti tehokkaan määrän 5 kaavan (I) mukaista yhdistettä sekoitettuna tai jollakin muulla tavoin yhdistettynä yhteen tai useampaan farmaseuttisesti hyväksyttävään kantaja-aineeseen tai lisäaineeseen .

Keksinnön yksityiskohtainen selitys 10 Termi "C^-alkyyli" tarkoittaa tässä keksinnössä yhdestä neljään hiiliatomista tyydyttynyttä suora- tai haaraketjuista hydrokarbyyliryhmää ja siihen kuuluvat metyyli, etyyli, propyyli, isopropyyli, n-butyyli, isobutyy-li, tertiäärinen butyyli ja muut näitä vastaavat ryhmät.

15 Termi "Ci-io-alkyyli" tarkoittaa yhdestä kymmeneen hiiliatomisia tyydyttyneitä suora- tai haaraketjuisia hydro-karbyyliryhmiä, joihin kuuluvat metyyli, etyyli, propyyli, isopropyyli, n-butyyli, isobutyyli, tertiäärinen butyyli, pentyyli, isopentyyli, heksyyli, 2,3-dimetyyli-2-butyyli, 20 heptyyli, 2,2-dimetyyli-3-pentyyli, 2-metyyli-2-heksyyli, oktyyli, 4-metyyli-3-heptyyli, oktyyli, nonyyli tai dekyy-li ja muut näitä vastaavat ryhmät. Termi "halogeeni", "halo", "halidi" tai "Hai" tarkoittaa kloori-, bromi- tai jo-diatomia. Termi "BOC" tarkoittaa t-butyylioksikarbonyyliä.

25 Termi "C^-alkoksi" tarkoittaa yhdestä neljään hiiliatomis- • i ta tyydyttynyttä suora- tai haaraketjuista hydrokarboksi-ryhmäa ja siihen kuuluvat metoksi, etoksi, propoksi, iso-propoksi, n-butoksi, isobutoksi, tertiäärinen butoksi ja muut näitä vastaavat ryhmät.

30 Termi "Ar-Y-" tarkoittaa tässä keksinnössä ryhmää, *:· jossa Ar on aryyliryhmä ja Y on C0.4-alkyyli. Termi "Ar" tarkoittaa fenyyli- tai naftyyliryhmää, joka on substi-tuoimaton tai substituoitu yhdestä kolmeen substituentilia, jotka ovat metyleenidioksi, hydroksi, C-^-alkoksi, 35 fluori tai kloori. Termi "C0_4-alkyylin tarkoittaa nollasta • r c 7 106717 neljään hiiliatomista tyydyttynyttä suora- tai haaraket-“ juista hydrokarbyyliryhmää ja siihen kuuluvat sidos, metyyli, etyyli, propyyli, isopropyyli, n-butyyli, isobutyy-li, tertiäärinen butyyli ja muut näitä vastaavat ryhmät.

5 Termi "Ar-Y-" kattaa erityisesti fenyylin, naftyylin, fe-nyylimetyylin tai bentsyylin, fenyylietyylin, p-metoksi-bentsyylin, p-fluoribentsyylin ja p-klooribentsyylin.

Merkintä "*>*«/*" tarkoittaa tässä keksinnössä sidosta kiraaliseen atomiin, jonka stereokemiaa ei ole selvitetty. 10 Kaavan (I) mukaiset yhdisteet voivat muodostaa far maseuttisesti hyväksyttäviä suoloja minkä tahansa ei-tok-sisen orgaanisen tai epäorgaanisen hapon kanssa. Kuvaaviin esimerkkeihin sopivia suoloja muodostavista epäorgaanisista hapoista, jotka muodostavat sopivia suoloja, kuuluvat 15 hydrokloori, hydrobromi-, rikki- ja fosforihappo ja happa-met metallisuolat, kuten natriummonovetyortofosfaatti ja kaliumvetysulfaatti. Kuvaaviin esimerkkeihin sopivia suoloja muodostavista orgaanisista hapoista kuuluvat mono-, di- ja trikarboksyylihapot. Kuvaavia esimerkkejä näistä 20 hapoista ovat esimerkiksi etikka-, trifluorietikka-, glykoli-, maito- palorypäle- maloni-, meripihka-, glutaa-ri, fumaari, omena-, viini-, sitruuna-, askorbiini-, ma-leiini-, hydröksimaleiini-, bentsoe-, hydroksibentsoe-, fenyylietikka-, kaneli-, salisyyli-, 2-fenoksibentsoehappo .. 25 sekä sulfonihapot, kuten metaanisulfoni-, trifluorimetaa- nisulfoni-, 2-hydroksietaanisulfonihappo ja p-tolueeni-sulfonihappo.

Keksinnön mukaisia terapeuttisesti käyttökelpoisia 7-aminoasetyylimerkaptoasetyyliamidioktahydro-6-ok-30 sopyridiini[2,la] [2]bentsatsepiini-, heksahydro-6-okso-lH-·; [1,4]-oksatsiini[3,4-a][2]bentsatsepiini- ja heksahydro-6-

okso-lH-[1,4]-tiatsiini[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karbok-syylihappoja, joilla on kaava I

35 8 106717 H'

5 /S

Y y~y^z (I)

/ H02C

/“W ^s-c-tci-ym-x

10 \_/ O

valmistetaan patenttivaatimuksen 1 tunnusmerkkiosassa kuvatulla menetelmällä siten, että 1) trisyklinen bromiasetyyliamidiyhdiste, jolla on 15 kaava 3 H' VTh O. N-\ /< 20 y 'z O) / ° ys

/ HCLC

HC^. 2 25 jossa Z on edellä määritelty, saatetaan HOOC-ryhmän osalta suojatussa muodossa reagoimaan emäksen läsnä ollessa yhdisteen kanssa, jolla on kaava

30 Ph3C-S-C(=0) - (CH2)m-X

• · ♦ jossa m ja X ovat edellä määriteltyjä, jonka jälkeen suojaryhmä poistetaan tai .2) trisyklinen merkaptoasetyyliamidi, jolla on kaa- i 35 va 4 9 106717 h \ VvH (4)

Ov N^\ >C.

/ /~^/z sh jossa Z on edellä määritelty, saatetaan HOOC-ryhmän osalta suojatussa muodossa reagoimaan kytkentäaineen läsnä ollessa yhdisteen kanssa, jolla on kaava

15 HO-C (=0) - (CH2)ra-X

jossa m ja X ovat edellä määriteltyjä, jonka jälkeen suojaryhmä poistetaan ja haluttaessa muutetaan saadut yhdisteet farmaseut-20 tisesti hyväksyttäväksi suolakseen sinänsä tunnetulla tavalla.

Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voidaan myös valmistaa käyttämällä tavanomaisen ammattikokemuksen perusteella tunnettuja ja tällä alalla hyväksyttyjä valmistustapoja ja . 25 menetelmiä. Kaaviossa A on esitetty yleinen synteesikaavio näiden yhdisteiden valmistamiseksi ja tässä kaaviossa ovat kaikki substituentit edellä annettujen määritysten mukaiset ellei toisin ole mainittu. Alf A2, A3, Bx ja B2 ovat kukin vety. 1 » ·

Kaavio A

10 106717 5 Bi VX152 λ/-®>^οΒ (2, η2ν Βγ 10 >/"Ν \ Ä3 -:-►» ® y^—vaihe a COOCHPh2 (1) 15

Bi (| CU-b2 20 H\ H 1 0ν"Ν >.N^S --► / v w ' vaihtoehtoinen / O i Z" / L y vaihe b CH·. COOCHPh2 25 \ Br <3a> A3 2 2 ·

Kaavio A, jatkoa 11 106717

El 5 Jl%-B2 H\ H ΙΛ if T 'f N ' Ph3C-S-C-(CH2)n)-X' {4a tai4b) / ° \ /' -► J vaihe c 10 CH,'I|,. C00CHPh2

Aiv-( (3b) A3 15

Ei 7 || -Lb2 \ H /Ύ

.o ^ N

\ -► 0 t Z vaihe d λ-y CH^ COOCHPh2 \ ^S-^-(CH2)m-X· 25 Aw_( 0 : Az “^p) (5) A3 1 ·

Kaavio A, jatkoa 12 106717

Bi 5 ίί -i-B2 H\ H /Ύ

V"'V/S

1 0 Λ-7-- 10 CH COOH vaihtoehtoinen vaihe e

Aly^\ ~^p/ (6) Ä3 15

Bi 20 B jl ^-B2

H\ H

1 0 ys 25 OH COOR?1

..€ \ ^ S-(j-{CH2)m-X

° <n Ä3 » · < 13 106717

Kaavio A, jatkoa Z" « -CHZ-, -o-, -S-, -NH- tai sidos Z’ « -NR3.- tai -NC(0)R4- R2. « C1_4-alkyyliryhmä, ryhmä Ar-Y- tai 5 -CH20-C(0)C(CH3)3 —o. -o .-o 10 /==N / \ “O . -nw^o»-> .

—/ \-c-r4 —*{ y^· <f\ 15 \_/ . VV . /=/ , _N-(Rr>2 z' // Vv tai R3*—\T\ Y_J V-(CH2)"· R3„ = BOC, C1.4-alkyyliryhmä tai ryhmä Ar-Y-

Vaiheessa a voidaan valmistaa rakenteen (3a) mukainen asianmukainen trisyklinen (R)-bromiyhdiste saattamalla 25 asianmukainen rakenteen (1) mukainen trisyklinen aminoyh- diste reagoimaan asianmukaisen rakenteen (2) mukaisen (R)-bromihappoyhdisteen kanssa. Esimerkiksi asianmukainen rakenteen (1) mukainen trisyklinen aminoyhdiste voidaan saattaa reagoimaan asianmukaisen rakenteen (2) mukaisen 30 (R)-bromihappoyhdisteen kanssa kytkentäreagenssin, kuten ·: EEDQ:n (2-etoksi-2-etoksikarbonyyli-l,2-dihydro-kinolii- nin), DCC:n (1,3-disykloheksyylikarbodi-imidin) tai di-etyylisyaanifosfonaatin, läsnä ollessa sopivassa aprootti-sessa liuottimessa, kuten metyleenikloridissä, mistä saa- 14 106717 daan tulokseksi asianmukaista rakenteen (3a) mukaista tri-syklistä (R)-bromiyhdistettä.

Vaihtoehtoisessa vaiheessa b voidaan niiden sellaisen rakenteen (3a) mukaisten trisyklisten (R)-bromiyhdis-5 teiden, jossa Z on NH, funktionaaliselle aminoryhmälle suorittaa pelkistävä alkylointi asianmukaisella rakenteen R31 (n-D CHO mukaisella aldehydillä natriumsyaaniboorihydri-dillä tällä alalla tunnetulla tavalla sellaisen rakenteen (3b) mukaisen vastaavan trisyklisen (R)-bromiyhdisteen ai-10 kaansaamiseksi, jossa Z on NR3,, jossa R3, on C^-alkyyli tai ryhmä Ar-Y-.

Vaihtoehtoisesti voidaan niiden sellaisen rakenteen (3a) mukaisten trisyklisten (R) - bromiyhdisteiden funktionaalinen aminoryhmä, jossa Z on NH, asyloida käyttäen IB asianmukaista rakenteen R4C0-C1 mukaista asyylikloridia tai asianmukaista rakenteen (R4C0)2-0 mukaista anhydridiä tällä alalla tunnetulla tavalla vastaavan sellaisen rakenteen (3b) mukaisen trisyklisen (R)-bromiyhdisteen aikaansaamiseksi, jossa Z on N-C(0)R4.

20 Vaiheessa c voidaan asianmukainen rakenteen (5) mu kainen trisyklinen (S)-aminoasetyylitioyhdiste valmistaa saattamalla asianmukainen rakenteen (3a tai 3b) mukainen trisyklinen (R)-bromiyhdiste reagoimaan asianmukaisen rakenteen (4a tai 4b) mukaisen trifenyylimetyyliaminotioli-.. 25 asetaatin kanssa emäksisissä olosuhteissa, kuten käyttäen natriumhydridiä tai vetysulfidia, sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten dimetyyliformamidissa.

Vaiheessa d voidaan asianmukaisen rakenteen (5) mukaisen trisyklisen (S)-aminoasetyylitioyhdisteen funktio-30 naalinen difenyylimetyyliesteriryhmä poistaa käyttäen tri- ·; fluorietikkahappoa vastaavan rakenteen (6) mukaisen tri syklinen tio- (S) -aminoasetyyliyhdisteen aikaansaamiseksi.

Niiden sellaisen rakenteen (5) mukaisten trisyklisten (S)-aminoasetyylitioyhdisteiden ollessa kyseessä, jos-35 sa X' on Λ 15 106717 /N-(R3-)2

/“Λ rA

—N N~R3- R31—N I . X/ / \_J ' \^(CH2)n ta , 5 jossa R3« on BOC, voidaan suojaava BOC-ryhmä myös poistaa vaiheen d mukaisen difenyylimetyyliesterin poiston aikana.

Vaihtoehtoisessa vaiheessa e voidaan asianmukaisen rakenteen (6) mukaisen trisyklisen (S)-aminoasetyylitioyh-10 disteen funktionaalinen karboksyylihapporyhmä esteröidä uudelleen tällä alalla tunnetuilla menetelmillä vastaavan rakenteen (7) mukaisen trisyklisen (S)-aminoasetyylitioyh-disteen aikaansaamiseksi.

Lisäksi voidaan niiden sellaisen rakenteen (6) mu-15 kaisten trisyklisten (S)-aminotioyhdisteiden, jossa X on 20 funktionaalinen sulfidiryhmä hapettaa tällä alalla tunnettujen menetelmien ja menettelytapojen mukaisesti, kuten magnesiummonoperoksiftaalihappoheksahydraattia käyttäen, sellaisen rakenteen (6) mukaisten trisyklisten (S)-amino-tioyhdisteiden aikaansaamiseksi, jossa X on 25 ___ :· /\ —N S—1^0)n' N^/ jossa n' on 1 tai 2.

30 Lisäksi voidaan niiden sellaisen rakenteen (6) mu kaisten trisyklisten (S)-aminotioyhdisteiden, jossa Ax, A2, • · tai A3 on nitroryhmä, funktionaalinen nitroryhmä pelkistää tällä alalla tunnettujen menetelmien ja menettelytapojen mukaisesti, kuten sinkin ja etikkahapon seoksella, sellai-35 sen rakenteen (6) mukaisten trisyklisten (S)-aminotioyh- 16 106717 disteiden, jossa A1; A2 tai A3 on aminoryhmä, aikaansaamiseksi .

Vaikka kaavion A avulla on mahdollista valmistaa sellaisen kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, jossa funktio-5 naalinen tioasetaattiryhmä on (S)-konfiguraatiossa, voi daan sellaisen kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, jossa funktionaalinen tioasetaattiryhmä on (R)-konfiguraatiossa, valmistaa käyttämällä rakenteen (2) mukaisen vastaavan (S)-bromiyhdisteen tilalla asianmukaista (R)-bromiyhdis-10 tettä.

Kaaviosta B saadaan käyttöön yleinen synteesikaavio rakenteiden (4a ja 4b) mukaisten trifenyylimetyyliamino-tioliasetaattien valmistamiseksi.

« · • < 1 ·

Kaavio B

106717

5 R

Ph3C-SH Br-(CH2).-C-Br (9) jj -Ph3C-S-C-(CH2)m~Br (8) vaihe a (10) 10 X"H W β -Ph3C-S-C- (CH2) m~X " -► vaihe b vaihtoehtoinen vaihe c ft 15 Ph3C-S-C-<CHj)„,-X' (4b) X"=—/ 'o —/ \ ——n/R5

^ ^ * Ny · . V

20 ——H \ . vv · —n ^V—R3* / \ n /7~\ \_/ , —N C R4 ^ XN ' _ N-(R3-)2

Vxv ja R3-— X/7 \^.(CH2)n.

30

x.= —N

VV

n' =1 tai 2 35 R3» BOC-, C^-alkyyli tai ryhmä Ar-Y- 18 106717

Vaiheessa a saatetaan trifenyylimetyylimerkaptaani (8) ja bromiasetyylibromidi (9) reagoimaan emäksisissä olosuhteissa, kuten pyridiinissä, aproottisessa liuotti-messa, kuten metyleenikloridissa, rakenteen (10) mukaisen 5 trifenyylimetyylibromitioliasetaatin aikaansaamiseksi.

Vaiheessa b saatetaan rakenteen (10) mukainen tri-fenyylimetyylibromitioliasetaatti reagoimaan asianmukaisen rakenteen (11) mukaisen aminoyhdisteen kanssa emäksisissä olosuhteissa, kuten pyridiinissä, aproottisessa liuotti-10 messa, kuten metyleenikloridissa, asianmukaisen rakenteen (4a) mukaisen trifenyylimetyyliaminotioliasetaattiyhdis-teen aikaansaamiseksi.

Vaihtoehtoisessa vaiheessa c voidaan niiden sellaisen rakenteen (4a) mukaisten trifenyylimetyyliaminotioli-15 asetaattiyhdisteiden, jossa X:ää edustaa —H \

W

20 funktionaalinen sulfidiryhmä hapettaa tällä alalla tunnet tujen menetelmien ja menettelytapojen mukaisesti, kuten metaklooriperbentsoehapolla, sellaisen rakenteen (4b) mukaisten trifenyylimetyyliaminotioliasetaattiyhdisteiden aikaansaamiseksi, jossa X:ää edustaa 25 " —N'5 —(0)„· w jossa n' on 1 tai 2.

30 Vaihtoehtoisesti voidaan kaavan (I) mukaisia yhdis

teitä valmistaa kaaviossa C kuvatulla tavalla. Kaaviossa C

» · * ovat kaikki substituentit edellä esitettyjen määritelmien mukaiset, ellei toisin ole mainittu.

«

Kaavio C

19 106717

Bi 5 f|—|— b2

H\ H

°s/Nr\ -► 7 f/* N V vaihtoehtoinen / O i Z·' / \ / vaihe a 10 / ' —7 CHl|(i COOCHPh2 Ä2 “^) (3a) 15 Ä3

Bl il -^-b2 b\ Vt» e 20 N li CHiC-SH (12) 0

Jf* N \ - / O t Z' vaihe b / A-v CB., COOCHPh2 ) “ 25 Aiy ( Ä2 (3b) A3 i · · 106717

Kaavio C (jatkoa)

Bl

H\ H

---► //" N l vaihe c 10 1 0 y.v CH . C00CHPh2 \ ^ S-Jj-CH3 ^ 0 03, 15 A 3 Βχ 20 Π —4- B2

h H

\ li H H02C-(CH2)rTrX' (15) --- 7* /7"** N \ vaihe d

° >^Z

25 CH COOCHPh2 : \ ^ sh

Az (14) A3

• L

Kaavio C (jatkoa) 2i 106717

Bi (| ?Sl-B2 5 \ 'jx* / 0 yj

CH^S-C-tCHjim-X· COOCHPh2 10 \ O

i@"Al <5>

Aj R2 15 Z" = CH2, -O-, -S-, NH tai sidos Z' = -NR3. tai -NC(0)R4-

*·— H — (/ \ —H | —/RS

20 w . v7 . vJ . \6 Λ* / \ ——NS-^0)„ : 25 _ΓνΙ-, -/"Λ-λι· $~\ \_Z ^ · Λ=/ N-(R3*)2 0tai R3- —t/''} \^JCH2>n R3- = BOC-, C^-alkyyli tai ryhmä Ar-Y-.

Vaihtoehtoisessa vaiheessa a voidaan niiden sellai-35 sen rakenteen (3a) mukaisten trisyklisten (R)-bromiyhdis- 22 106717 teiden, jossa Z on NH, funktionaaliselle aminoryhmälle suorittaa pelkistävä alkylointi asianmukaisella rakenteen R3,(n-1)CHO mukaisella aldehydillä edellä kaavion A vaihtoehtoisessa vaiheessa b kuvatulla tavalla vastaavan sellaisen 5 rakenteen (3b) mukaisen trisyklisen (R) -bromiyhdisteen aikaansaamiseksi, jossa Z on NR3,, jossa R3, on C^-alkyyli tai ryhmä Ar-Y-.

Vaiheessa b voidaan asianmukainen rakenteen (13) mukainen trisyklinen (S)-asetyylitioyhdiste valmistaa 10 saattamalla asianmukainen rakenteen (3a tai 3b) mukainen trisyklinen (R)-bromiyhdiste reagoimaan tiolietikkahapon (12) kanssa emäksen, kuten keesiumkarbonaatin, kanssa. Lähtöaineet saatetaan tyypillisesti kosketukseen keskenään sopivassa orgaanisessa liuottimessa, kuten dimetyyliform- 15 amidissa. Lähtöaineita sekoitetaan tyypillisesti keskenään huoneenlämmössä 1-8 tunnin ajan. Tulokseksi saatava rakenteen (13) mukainen (S)-tioasetaatti otetaan talteen reaktiovyöhykkeestä tällä alalla tunnetuilla uuttomenetel-millä. Se voidaan puhdistaa kromatografisesti.

20 Vaiheessa c hydrolysoidaan asianmukaisen rakenteen (13) mukaisen trisyklisen (S)-asetyylitioyhdisteen funktionaalinen (S)-tioasetaattiryhmä vastaavaksi rakenteen (14) mukaiseksi (S)-tioliyhdisteeksi ammoniakilla sopivassa proottisessa liuottimessa, kuten etanolissa.

j· 25 Vaiheessa d kytketään asianmukaisen rakenteen (14) mukaisen (S)-tioliyhdisteen funktionaalinen tioliryhmä asianmukaiseen rakenteen (15) mukaiseen happoon sopivan kytkentäaineen läsnä ollessa asianmukaisen rakenteen (5) mukaisen trisyklinen (S)-aminoasetyylitioliyhdisteen ai- 30 kaansaamiseksi. Esimerkiksi asianmukainen rakenteen (14) ’ mukainen (S)-tioliyhdiste voidaan saattaa reagoimaan « asianmukaisen rakenteen (15) mukaisen hapon kanssa kytken-täreagenssin, kuten 2-fluori-l-metyylipyridiini-p-toluee-nisulfaatin, EDCI:n (1-(3-dimetyyliaminopropyyli)-3-etyy-35 likarbodi-imidihydrokloridin), karbonyylidi-imidatsolin, 23 106717 EEDQ:n (l-etoksikarbonyyli-2-etoksi-l,2- dihydrokinoliiriin, DCC:n (1,3-disykloheksyylikarbodi-imidin) tai dietyy-lisyaanifosfonaatin, läsnä ollessa sopivassa aproottisessa liuottiraessa, kuten metyleenikloridissa, asianmukaisen ra-5 kenteen (5) mukaisen trisyklinen (S)-aminoasetyylitioyh-disteen aikaansaamiseksi, jota yhdistettä voidaan käyttää edellä kaavion A vaiheessa d kuvatulla tavalla.

Sellaisen rakenteen (1) mukaisia trisyklisiä amino-yhdisteitä, jossa Z on -O-, voidaan valmistaa kaaviossa D 10 kuvatulla tavalla. Kaikki substituentit kaaviossa D ovat edellä esitettyjen määritelmien mukaiset, ellei toisin ole mainittu.

•.

24 106717

Kaavio D

J%-B2 , J%B2 g 1) oksalyylikloridi r^y

PhthN^X^ 2) jP2Me PhthN^X

OH H0-^,h2 (15) vaihe a (15) | 10 17 C02Me

NH

II (18) wBl \cc, jf^O- B2 p. /"syklisointi - _ vaihe b vaihe c ^

15 PhthNT X

^nh .

(19) C02Me J&* .A*

PhthN X—/=Vn syklisointi ph(hN )/" // Ή O vaihe d ^ \... V1 r ° r - cooch3 4 (20) (21) coocHPh2

Bi 30 (| —X B2 --- suojauksen ®

. poisto V ^ H

-► h2n

vaihe e λ»» N

ο/ ν ο 35 | ^ (1a) COOCHPhj 25 1 0 6 7 1 7

Kaaviosta D saadaan käyttöön yleinen synteesimenetelmä sellaisen rakenteen (1) mukaisten trisyklisten ami-noyhdisteiden valmistamiseksi, jossa Z on -0-.

Vaiheessa a muunnetaan asianmukainen rakenteen (15) 5 mukainen ftaali-imidillä reagoimattomaksi tehty (S)-fenyy- lialaniinijohdannainen vastaavaksi happokloridiksi, jonka jälkeen se saatetaan reagoimaan asianmukaisen rakenteen (16) mukaisen L-seriinimetyyliesterin kanssa vastaavan rakenteen (17) mukaisen l-okso-3-fenyylipropyyli-L-serii- 10 nimetyyliesterin aikaansaamiseksi.

Esimerkiksi asianmukainen rakenteen (15) mukainen ftaali-imidillä reagoimattomaksi tehty (S)-fenyylialaniini johdannainen voidaan saattaa reagoimaan oksalyyliklori-din kanssa sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten 15 metyleenikloridissa. Tulokseksi saatava happokloridi voi daan sitten kytkeä asianmukaiseen rakenteen (16) mukaiseen L-seriinimetyyliesteriin käyttäen N-metyylimorfoliinia sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten dimetyyliform-amidissa, mistä saadaan asianmukaista rakenteen (17) mu-20 kaista l-okso-3-fenyylipropyyli-L-seriinimetyyliesteriä.

Vaiheessa b allyloidaan asianmukaisen rakenteen (17) mukaisen l-okso-3-fenyylipropyyli-L-seriinimetyyli-esterin funktionaalinen hydroksiryhmä rakenteen (18) mukaisella allyyli-imidaatilla vastaavan rakenteen (19) mu- : 25 kaisen l-okso-3-fenyylipropyyli-L-seriini-O-allyylimetyy- « liesterin aikaansaamiseksi.

Esimerkiksi asianmukainen rakenteen (17) mukainen l-okso-3-fenyylipropyyli-L-seriinimetyyliesteri saatetaan kosketukseen 2 mooliekviValentin kanssa rakenteen (18) mu-30 kaista allyyli-imidaattia ja mooliekvivalentin kanssa so pivaa happoa, kuten trifluorimetaanisulfonihappoa. Lähtöaineet saatetaan tyypillisesti kosketukseen sopivassa or-; gaanisten liuottimien, kuten metyleenikloridin ja syklo- heksaanin, seoksessa. Lähtöaineita sekoitetaan tyypilli-35 sesti keskenään huoneenlämmössä inertissä atmosfäärissä « •.

26 106717 2-24 tunnin ajan. Rakenteen (19) mukainen l-okso-3-fe-nyylipropyyli-L-seriini-O-allyylimetyyliesteri otetaan talteen reaktiovyöhykkeestä tällä alalla tunnetuilla uut-tomenetelmillä. Se voidaan puhdistaa silikageelikromato-5 grafiaa tai kiteytystä käyttäen.

Vaiheessa c syklisoidaan asianmukainen rakenteen (19) mukainen l-okso-3-fenyylipropyyli-L-seriini-O-allyy-limetyyliesteri vastaavan rakenteen (20) mukaisen (4S) -eeniamiinin aikaansaamiseksi.

10 Esimerkiksi asianmukainen rakenteen (19) mukainen l-okso-3-fenyylipropyyli-L-seriini-O-allyylimetyyliesteri saatetaan ensin kosketukseen mooliylimäärän kanssa otsonin ja hapon seosta. Lähtöaineet saatetaan tyypillisesti kosketukseen sopivassa orgaanisten liuottimien, kuten mety-15 leenikloridin ja metanolin, seoksessa. Lähtöaineita sekoitetaan tyypillisesti yhdessä 5-30 minuutin ajan tai 'niin pitkään, kunnes seokseen jää sininen väri ja tässä käytetään lämpötila-aluetta, joka on -78 °C - -40 °C. Reaktio lopetetaan metyylisulfidiylimäärää käyttäen ja välituot-20 teeksi saatava aldehydiyhdiste otetaan talteen reaktiovyöhykkeestä tällä alalla tunnetuilla uuttomenetelmillä.

Välituotteeksi saatu aldehydiyhdiste saatetaan sitten kosketukseen trifluorietikkahapon kanssa sopivassa ap-roottisessa liuottimessa, kuten metyleenikloridissa, vas- : 25 taavan rakenteen (20) mukaisen (4S)-eeniamiinin aikaansaa- miseksi.

Vaiheessa d asianmukainen rakenteen (20) mukainen (4S)-eeniamiini syklisoidaan vastaavan rakenteen (21) mukaisen trisyklisen (4S)-yhdisteen aikaansaamiseksi happo-3 0 katalysoitua Friedel-Crafts-reaktiota käyttäen. Esimerkiksi asianmukainen rakenteen (20) mukainen (4S)-eeniamiini voidaan muuntaa vastaavaksi rakenteen (21) mukaiseksi tri-sykliseksi (4S)-yhdisteeksi käsittelemällä tätä seoksella, joka koostuu trifluorimetaanisulfonihaposta ja trifluori- » • V , 27 106717 etikkahappoanhydridistä sopivassa aproottisessa liuotti-messa, kuten raetyleenikloridissa.

Vaiheessa d voi olla tarpeellista esteröidä funktionaalinen karboksiryhmä uudelleen jatkokäsittelyssä val-5 litsevien olosuhteiden vuoksi. Voidaan esimerkiksi käyttää raakatuotteen käsittelyä bromidifenyylimetaanilla sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten dimetyyliformamidissa ei-nukleofiilisen emäksen, kuten keesiumkarbonaatin kanssa, vastaavan (4S) -difenyylimetyyliesterin aikaansaamisek-10 si.

Vaiheessa e poistetaan asianmukaisen rakenteen (21) mukaisen trisyklisen (4S)-yhdisteen suojaava ftaali-imidi-ryhmä vastaavan sellaisen rakenteen (1) mukaisen trisyklisen aminoyhdisteen aikaansaamiseksi, jossa X on -O-. Esi-15 merkiksi asianmukaisen rakenteen (21) mukaisen trisyklisen (4S)-yhdisteen suojaava ftaali-imidiryhmä voidaan poistaa käyttäen hydratsiinimonohydraattia sopivassa proottisessa liuottimessa, kuten metanolissa, vastaavan rakenteen (la) mukaisen trisyklisen aminoyhdisteen aikaansaamiseksi.

20 Sellaisen rakenteen (1) mukaisia trisyklisiä amino- yhdisteitä, jossa Z on -NH-, voidaan valmistaa kaaviossa E kuvatulla tavalla. Kaaviossa E ovat kaikki substituentit edellä esitettyjen määritelmien mukaiset, ellei toisin ole mainittu.

» « • · .

Kaavio E

28 1 0 6 7 1 7 Βχ 1) oksalyylikloridi ÄJr*1 -- 5 J2) C02Me

PhthN*\ CFjCONs. JL

A-oh (15) . (22) 0 n I* vaihe a 10 Bi

PhthN^S. N sykllsointi ^ 15 NH CFa vaihe b (23) C02Me 20 Βχ A‘· -Λ*

PhthN^ /=\ syklisointi phthN jV* tg NCOCFj vaihe c ^ 25 O \ / o' . NCOCF3 Γ l·' (24) coocaphj ^ (25) S»™,,* suojauksen ® r

poisto / T H

-^ h2n^\ JiL

• · vaihe d λ». ^ \

θ' » NH

35 * (1b) coocHPh2 « 29 106717

Kaaviosta E saadaan käyttöön yleinen synteesimenetelmä sellaisen rakenteen (1) mukaisten trisyklisten ami-noyhdisteiden valmistamiseksi, jossa Z on -NH-.

Vaiheessa a muunnetaan asianmukainen rakenteen (15) 5 mukainen ftaali-imidillä reagoimattomaksi tehty (S) -fenyy-lialaniinijohdannainen vastaavaksi happokloridiksi ja se saatetaan sitten reagoimaan asianmukaisen rakenteen (22) mukaisen 3-trifluoriasetyyliamino-3-allyyli-L-2-aminopro-pionihappometyyliesterin kanssa vastaavan rakenteen (23) 10 mukaisen l-okso-3-fenyylipropyyli-N-trifluoriasetyyli-N- allyyli-L-aminohappometyyliesterin aikaansaamiseksi edellä kaavion D vaiheessa a kuvatulla tavalla.

Rakenteen (22) mukaista 3-trifluoriasetyyliamino-3-allyyli-L-2-aminopropionihappometyyliesteriä voidaan val-15 mistaa N“-(bentsyylioksikarbonyyli)-β-(amino)-L-alaniinista nelivaiheisella menetelmällä.

N“-(bentsyylioksikarbonyyli)-β-(amino)-L-alaniini muunnetaan ensin N“-(bentsyylioksikarbonyyli)-β-(amino)-L-alaniinimetyyliesteriksi alan ammattikokemuksen perusteel-20 la tunnettujen ja hyväksyttyjen menetelmien ja menettely tapojen avulla, kuten esteröimällä metanolin ja rikkihapon seoksella.

N“- (bentsyylioksikarbonyyli) - β- (amino) -L-alaniini-metyyliesterin funktionaalinen β-aminoryhmä allyloidaan : 25 sitten allyylitriklooriasetimidaatilla vastaavan N“-(bents yylioksikarbonyyli) -β-(allyyliamino)-L-alaniinimetyylies-terin aikaansaamiseksi käyttäen edellä kaavion D vaiheessa b kuvattuja olosuhteita.

N“- (bentsyylioksikarbonyyli) -β- (allyyliamino) -L-ala-30 niinimetyyliesterin funktionaalinen B-allyyliaminoryhmä ' asyloidaan sitten trifluorietikkahappoanhydridillä tällä alalla tunnetulla tavalla N“-(bentsyylioksikarbonyyli)-β-(trifluoriasetyyli-allyyliamino)-L-alaniinimetyyliesterin aikaansaamiseksi.

·· 30 106717 Tämän jälkeen poistetaan suojaava N“- (bentsyylioksi-karbonyyli) ryhmä käyttäen booritris (trifluoriasetaatin) ja trifluorietikkahapon seosta tällä alalla tunnetulla tavalla rakenteen (22) mukaisen 3-trifluoriasetyyliamino-3-al-5 lyyli-L-2-aminopropionihappometyyliesterin aikaansaamisek si .

Vaiheessa b syklisoidaan asianmukainen rakenteen (23) mukainen l-okso-3-fenyylipropyyli-N-trifluoriasetyy-li-N-allyyli-L-aminohappometyyliesteri vastaavan rakenteen 10 (24) mukaisen eeniamiinin aikaansaamiseksi edellä kaavion D vaiheessa c kuvatulla tavalla.

Vaiheessa c syklisoidaan asianmukainen rakenteen (24) mukainen (4S)-eeniamiini vastaavan rakenteen (25) mukaisen trisyklisen (4S)-yhdisteen aikaansaamiseksi edellä 15 kaavion D vaiheessa d kuvatulla tavalla.

Vaiheessa d poistetaan asianmukaisen rakenteen (25) mukaisen trisyklisen (4S)-yhdisteen suojaava ftaali-imidi-ryhmä vastaavan rakenteen (Ib) mukaisen trisyklisen amino-yhdisteen aikaansaamiseksi edellä kaavion D vaiheessa e 20 kuvatulla tavalla.

Sellaisen rakenteen (1) mukaisia trisyklisiä amino-yhdisteitä, jossa Z on -CH2-, voidaan valmistaa kaaviossa F kuvatulla tavalla. Kaaviossa F ovat kaikki substituentit edellä esitettyjen määritelmien mukaiset, ellei toisin ole : 25 mainittu.

Kaavio F

106717

Bi

Jj j) ^oksaly^ikloridi 5 j--2) ^ Q°2Me

PhthN K HO (26) λ- OH vaihe a o' (15) 10 ®1 JÄ·. r^1 -r—PhthN 1\

is PhthN QyTNH H

o^"v^VOK i II

1 C02Me O

* (28) (27) C02Me a- syklisointi / ^ syklisomtx vaihe c PhthN vaihe d 1 : 25 ° Y1 (29) C02Me

Bi Bi M --4-B2 II -4- B2

30 H rv H

. . PhthN Jil suojauksen poisto ^ N \ vaihe e ^ \ (30) C02CHPh2 (1c) C02CHPh2 32 106717

Kaaviosta F saadaan käyttöön yleinen synteesimenetelmä sellaisen rakenteen (1) mukaisten trisyklisten ami-noyhdisteiden valmistamiseksi, jossa Z on -CH2-.

Vaiheessa a voidaan asianmukainen rakenteen (15) 5 mukainen ftaali-imidillä reagoimattomaksi tehty (S)-fenyy-lialaniinijohdannainen muuntaa vastaavaksi happokloridik-si, ja saattaa se sitten reagoimaan asianmukainen rakenteen (26) mukaisen aminohappometyyliesterin kanssa kytken-täreaktiossa. Esimerkiksi asianmukainen ftaali-imidillä 10 reagoimattomaksi tehty rakenteen (15) mukainen (S)-fenyy-lialaniinijohdannainen voidaan saattaa reagoimaan oksalyy-likloridin kanssa sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten metyleenikloridissa. Tulokseksi saatava happokloridi voidaan sitten kytkeä asianmukaiseen rakenteen (26) mukai-15 seen aminohappometyyliesteriin käyttäen N-metyylimorfolii-nia sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten dimetyyli-formamidissa, asianmukaisen rakenteen (27) mukaisen 1-ok-so-3- fenyylipropyyliaminohappometyyliesterijohdannaisen aikaansaamiseksi.

20 Vaiheessa b voidaan asianmukaisen rakenteen (27) mukaisen l-okso-3-fenyylipropyyliaminohappometyyliesteri-johdannaisen funktionaalinen hydroksimetyleeniryhmä hapettaa asianmukaiseksi rakenteen (28) mukaiseksi aldehydiksi tällä alalla tunnetuilla ja hyväksytyillä hapetusmenetel-: 25 millä. Esimerkiksi asianmukaisen rakenteen (27) mukaisen l-okso-3-fenyylipropyyliaminohappometyyliesterijohdannaisen funktionaalinen hydroksimetyleeniryhmä voidaan hapettaa asianmukaisen rakenteen (28) mukaiseksi aldehydiksi käyttäen Swernin hapetusta oksalyylikloridilla ja dimetyy-30 lisulfoksidilla sopivassa aproottisessa liuottimessa, ku-| ten metyleenikloridissa.

Vaiheessa c voidaan asianmukainen rakenteen (28) mukainen aldehydi syklisoida asianmukaiseksi rakenteen (29) mukaiseksi eeniamiiniksi happokatalyysilla. Esimer-35 kiksi asianmukainen rakenteen (28) mukainen aldehydi voi- 1 « 33 106717 daan syklisoida asianmukaiseksi rakenteen (29) mukaiseksi eeniamiiniksi käsittelemällä tätä trifluorietikkahapolla sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten metyleeniklo-ridissa.

5 Vaiheessa d voidaan asianmukainen rakenteen (29) mukainen eeniamiini muuntaa vastaavaksi rakenteen (30) mukaiseksi trisykliseksi yhdisteeksi hapon katalysoimassa Friedel-Crafts-reaktiossa edellä kaavion D vaiheessa d kuvatulla tavalla.

10 Vaiheessa e voidaan asianmukaisen rakenteen (30) mukaisen trisyklisen yhdisteen suojaava ftaali-imidiryhmä poistaa täyttäen tällä alalla tunnettuja menetelmiä ja menettelytapoja. Asianmukaisen rakenteen (30) mukaisen trisyklisen yhdisteen suojaava ftaali-imidiryhmä voidaan esi-15 merkiksi poistaa käyttäen hydratsiinimonohydraattia sopivassa proottisessa liuottimessa, kuten metanolissa, vastaavan rakenteen (le) mukainen trisyklisen aminoyhdisteen aikaansaamiseksi.

Sellaisen rakenteen (1) mukaisia trisyklisiä amino-20 yhdisteitä, jossa Z on sidos, voidaan valmistaa kaaviossa G kuvatulla tavalla. Kaikki substituentit kaaviossa G ovat edellä esitettyjen määritelmien mukaiset, ellei toisin ole mainittu.

I I

» • I 1 l

Kaavio G

34 1 0 6 7 1 7 34

Ph -1)-LDA_^ Me02Cs^J^

5 2)tjS^?S^^Hal T

(3D m, >

Va 3 (32) ί33) 1

10 HCI EEDQ

vaihe b Me02C>. 1 ...... > 1 X Λ£~ (1 2 3 4 5 6^ 1¾. 7 PhthN (15)

15 ^ foH

O

vaihe c “ A” A- ^I vaihe d /

PhthN Λ. PhthN Λ.

i/~ NH . COjMe Λ--- 25 0 Y or"Yt0lM' (35) N) (36) \ L i

Ν' CHO

Kaaviosta G saadaan käyttöön yleinen synteesimene 2 telmä sellaisen rakenteen (1) mukaisten trisyklisten ami- 3 • noyhdisteiden valmistamiseksi, jossa Z on sidos.

4

Vaiheessa a voidaan rakenteen (31) mukaista N-(fe- 5 nyylimetyleeni)glysiinimetyyliesteriä käsitellä yhdellä 6 ekvivalentilla ei-nukleofiilistä emästä, kuten litiumdi- 7 35 106717 isopropyyliamidia, sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa, minkä jälkeen seokseen lisätään rakenteen (32) mukaista 4-halogeenibuteenia rakenteen (33) mukaisen 2-(3-butenyyli)-N-(fenyylimetyleeni)glysii-5 nimetyyliesterin aikaansaamiseksi.

Vaiheessa b voidaan rakenteen (33) mukaisen 2-(3-butenyyli)-N-(fenyylimetyleeni)glysiinimetyyliesterin funktionaalinen N-(fenyylimetyleeni)ryhmä hydrolysoida happamissa olosuhteissa, kuten käyttäen kloorivetyhappoa 10 sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten etyylieette- rissä, rakenteen (34) mukaisen 2-(3-butenyyli)-glysiini-metyyliesterin aikaansaamiseksi.

Vaiheessa c voidaan asianmukainen rakenteen (35) mukainen amidiyhdiste valmistaa saattamalla asianmukainen 15 ftaali-imidillä suojattu rakenteen (15) mukainen (S)-fe- nyylialaniiniyhdiste reagoimaan rakenteen (34) mukaisen 2-(3-butenyyli)-glysiinimetyyliesterin kanssa kytkentä-reaktiossa käytettävissä olosuhteissa, kuten käyttäen EEDQrta, sopivassa aproottisessa liuottimessa, kuten mety-20 leenikloridissa.

Vaiheessa d voidaan asianmukaisen rakenteen (35) mukaisen amidiyhdisteen funktionaalinen olefiiniryhmä muuntaa asianmukaiseksi rakenteen (36) mukaiseksi aldehy-diyhdisteeksi hapettavaan pilkkomiseen käytettävissä olo-; 25 suhteissa, kuten käyttämällä käsittelyä otsonilla sopivas sa liuotinseoksessa, kuten metyleenikloridin ja metanolin seoksessa.

Sellaisen rakenteen (1) mukaisia trisyklisiä amino-yhdisteitä, jossa Z on sidos, voidaan valmistaa asianmu-30 kaisesta rakenteen (36) mukaisesta aldehydistä menetelmäs sä, joka on kuvattu pääpiirteittäin edellä olevan kaavion F vaiheissa c - e.

Kaavioissa A - G käytettävät lähtöaineet ovat hankittavissa käyttöön vaivatta tämän alan ämmättikokemuk-35 sen perusteella. Esimerkiksi tiettyjä rakenteen (1) mukai- 36 1 0 6 7 1 7 siä trisyklisiä yhdisteitä voidaan valmistaa EP-patent-tijulkaisussa O 249 223 (16.12.1987) kuvatulla tavalla. N°-(bentsyylioksikarbonyyli)-p-(amino)-L-alaniini on kuvattu julkaisussa J. Am. Chem. Soc. 107(24) (1985) 7105, 5 N-(fenyylimetyleeni)glysiinimetyyliesteri on kuvattu julkaisussa J. Org. Chem. 41 (1976) 3491 ja allyylitrikloori-asetimidaatti on kuvattu julkaisussa J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1(11) (1985) 2247.

Seuraavissa esimerkeissä on esitetty kaavioissa A -10 G kuvattuja tyypillisiä synteesejä. Näiden esimerkkien on katsottava olevan ainoastaan kuvaavia esimerkkejä, eikä niiden tarkoituksena ole millään tavalla rajoittaa tämän keksinnön suojapiiriä. Seuraavia termejä käytetään tässä keksinnössä merkityksissä, jotka ovat: "g" tarkoittaa 15 grammoja; "mmol" tarkoittaa millimooleja; "ml” tarkoittaa millilitroja; "kp." tarkoittaa kiehumispistettä; "sp." tarkoittaa sulamispistettä; "°C" tarkoittaa celsius-asteita; "kPa" tarkoittaa kilopascaleita; "μΐ" tarkoittaa mik-rolitroja; "pg" tarkoittaa mikrogrammoja; ja "μΜ" tarkoit-20 taa mikromolaarisuutta.

Esimerkki 1 [4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-morfolii-ni) -asetyylitio-3- f enyylipropyy li) amino] -1,2,3,4,6,7,8,-12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a) [2]bentsatsepiini-4-25 karboksyylihappo·trifluoriasetaatti -- MDL 101 264 \

30 ° N

CH COOB .CF3CO2H

lr^-/ ^ Γ\ 35 s"rH!_w0 37 106717

Menetelmä A

Kaavio F, valhe a: (S)-N-[2-(1,3-di.hydro-l, 3-diok-so-2H-isoindol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-6-hydroksi- (S)-norleusiinlmetyyliesteci 5 Sekoitetaan keskenään ftaalihappoanhydridiä (1,82 kg, 12,3 mol), (S)-fenyylialaniinia (1,84 kg, 11,1 mol) ja vedetöntä dimetyyliformamidia (2,26 1). Seosta sekoitetaan 115 - 120 °C:ssa 2 tuntia typpiatmosfäärissä. Seos yhdistetään veteen (32,6 1) sitä nopeasti sekoittaen ja tämä 10 jäähdytetään yön yli 0 °C:ssa. Seos suodatetaan, pestään kylmällä vedellä (2 x 21) ja kuivataan ilmassa. Tuote liuotetaan 9A-etanolin (8,05 1) ja veden (8,05 1) seokseen ja seosta kuumennetaan palautusjäähdytyslämpötilassa. Seos suodatetaan painovoiman avulla, jäähdytetään ympäristön 15 lämpötilaan ja sitä jäähdytetään yön yli jääkaapissa noin 0 °C:ssa. Kiteytynyt tuote suodatetaan, pestään kylmällä suhteessa 50 : 50 valmistetulla 9A-etanolin ja veden seoksella (2x21) ja kuivataan ilmassa, mistä saadaan 2,96 kg (90,3 %) N-ftaloyyli-(S)-fenyylialaniinia; sp. 177 -20 179 °C.

Sekoitetaan keskenään N-ftaloyyli-(S)-fenyylialaniinia (50,2 g, 0,17 mol), metyleenikloridia (660 ml) ja dimetyyliformamidia (0,5 ml) typpiatmosfäärissä. Seokseen lisätään oksalyylikloridia (17,7 ml, 0,2 mol) noin 5 mi- ; " 25 nuutin aikana seosta samalla sekoittaen. Seosta sekoite- • · taan ympäristön lämpötilassa 3 tuntia ja liuotin haihdutetaan vakuumissa, mistä jää jäljelle N-ftaloyyli-(S)-fe-nyylialaniinihappokloridia kiinteänä aineena (54,3 g, 101,9 %).

30 Sekoitetaan keskenään 6-hydroksi-(S)-norleusiini- metyyliesterin hydrokloridisuolaa (33,5 g, 0,1 mol) ja dimetyyliformamidia (201 ml), seos jäähdytetään noin 0 °C:een ja se siirretään typpiatmosfääriin. Seokseen lisätään pisaroittain N-metyylimorfoliinia (51 ml, 0,46 mol) 35 jäähdyttäen seosta samalla niin, että astian lämpötila py- 38 106717 syy 0-5 °C:ssa. Seosta sekoitetaan 0-5 °C:ssa vielä 10 minuuttia, minkä jälkeen siihen lisätään N-ftaloyyli- (S)-fenyylialaniinihappokloridin (53,5 g, 0,17 mol) liuos metyleenikloridissa (270 ml) 30 minuutin aikana jäähdyt-5 täen seosta samalla niin, että sen lämpötila pysyy 0 -5 °C:ssa. Kylmähaude poistetaan ja seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 18 tuntia. Metyleenikloridi haihdutetaan vakuumissa ja jäljelle jäänyt jäännös laimennetaan etyyliasetaatilla (800 ml) . Tulokseksi saatu seos uutetaan ve-10 della (800 ml), orgaaninen kerros erotetaan ja se uutetaan 1-normaalisella kloorivetyhapolla (270 ml) ja sitten vedellä (3 x 500 ml) . Orgaaninen kerros kuivataan (MgS04) , suodatetaan ja haihdutetaan vakuumissa mistä saadaan raa-katuotetta (76 g, 98 %) . Raakatuote liuotetaan kuumaan to-15 lueeniin (223,5 m), jäähdytetään huoneenlämpöön ja seosta jäähdytetään sitten yön yli noin 0 °C:ssa. Kiteytetty tuote suodatetaan, pestään kylmällä tolueenilla ja kuivataan ilmassa, mistä saadaan 56,6 g (76 %) otsikon mukaista yhdistettä; sp. 128 - 130 °C.

20 Kaavio . F, vaihe b: 2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H- isoindol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli-6-okso-(S)-nor-leusiinimetyyliesteri

Sekoitetaan keskenään oksalyylikloridia (80 ml, 0,92 mol) ja metyleenikloridia (2 1) ja seos siirretään • 25 typpiatmosfääriin. Seos jäähdytetään -50 °C:n alapuolella • < olevaan lämpötilaan ja siihen lisätään dimetyylisulfoksidin (65,4 ml, 0,92 mol) liuos metyleenikloridissa (425 ml) . Seosta sekoitetaan 15 minuuttia ja siihen lisätään liuos, joka sisältää (S)-N-(2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-30 isoindol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-6-hydroksi- (S)-.< norleusiinimetyyliesteriä (200 g, 0,456 mol) metyleeniklo ridissa (800 ml) , noin 45 minuutin aikana pitäen astian lämpötila -50 °C:n alapuolella 30 minuutin ajan. Seokseen lisätään 30 minuutin aikana trietyyliamiinia (420 ml, 35 3,01 mol). Seosta sekoitetaan 1,25 tunnin ajan lämmittäen 39 106717 se samalla O °C:een. Reaktioseos siirretään 12 litran vetoiseen pulloon. Seosta sekoitetaan ja jäähdytetään lisäten siihen samalla Oxone-liuosta (kaliumperoksimonosul-faattiliuosta) (566 g) vedessä (6,74 1) sellaisella nopeu-5 della, että astian lämpötila pysyy alle 15 °C:ssa. Seosta sekoitetaan 5 minuuttia, orgaaninen kerros erotetaan ja vesipitoinen kerros uutetaan metyleenikloridilla (1 1) . Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan (MgS04) ja suodatetaan, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistellä liuokse-10 na.

Kaavio F, vaihe c: [S-(R*,R*)]-N-[2-(1,3-dihydro- 1,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]- 1,2,3,4-tetrahydro-2-pyridiinikarboksyylihappometyylieste-ri 15 Siirretään metyleenikloridissa oleva 2-(1,3-dihyd- ro-1,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyy-li]-6-okso-(S)-norleusiinimetyyliesterin liuos (tämän tilavuus on noin 4,5 1) 12 litran vetoiseen pulloon ja pulloon tehdään typpiatmosfääri. Seosta sekoitetaan ja siihen 20 lisätään yhtenä eränä trifluorietikkahappoa (440 ml, 5,71 mol) . Tulokseksi saatua seosta sekoitetaan huoneenlämmössä yhden tunnin ajan, ja se jäähdytetään sitten nopeasti noin 0 °C:een. Seokseen lisätään veteen (3,4 1) valmistettu natriumhydroksidin (240 g, 6,0 mol) liuos, jota juoksute- • 25 taan siihen hitaasti sellaisella nopeudella, että astian

• · I

lämpötila pysyy noin 0 °C:ssa, seosta samalla voimakkaasti sekoittaen.

Orgaaninen faasi erotetaan ja vesipitoisen faasi uutetaan metyleenikloridilla (1 1) . Orgaaniset faasit yh-30 distetään ja kuivataan (MgS04) . Seos suodatetaan ja liuotin poistetaan vakuumissa, mistä jää jäljelle jäännös (262 g, 137 %) .

“ Edellä oleva jäännös liuotetaan dietyylieetteriin (li) ja pestään vedellä (5 x 500 ml) . Orgaaninen faasi 35 haihdutetaan vakuumissa, mistä jää jäljelle 229 g:n suu- 40 106717 ruinen jäännös. Jäännös laimennetaan metyleenikloridilla (200 ml) ja puhdistetaan kromatografisesti silikageelissä (metyleenikloridi) , mistä saadaan tahmea 225 g:n suuruinen j äännös.

5 Edellä oleva jäännös laimennetaan dietyylieetteril- lä (250 ml) ja sen annetaan olla paikoillaan huoneenlämmössä 24 tuntia. Kiinteä aine suodatetaan, pestään dietyy-lieetterillä, ja kuivataan ilmassa, mistä saadaan tuotetta 123,2 g; sp. 140 - 142,5 °C. Tuote kiteytetään uudelleen 10 [metyleenikloridin (125 ml) ja isopropanolin (615 ml) seos] erottamalla liuotinta kiehuttamalla kunnes astian lämpötila nousee 75 °C:een, ja tulokseksi saadun näytteen annetaan jäädä paikoilleen huoneenlämpöön 24 tunniksi. Seos suodatetaan, pestään kylmällä isopropanolilla ja kui-15 vataan ilmassa,mistä saadaan 101,5 g otsikon mukaista yhdistettä; sp. 144 - 146 °C.

101,5 g:n suuruisesta erästä peräisin oleva suodos haihdutetaan vakuumissa, mistä saadaan 24 g. Tuote kiteytetään uudelleen (isopropanoli), mistä saadaan vielä, uusi 20 3,5 g:n erä otsikon mukaista yhdistettä.

123,2 g:n suuruisesta erästä peräisin oleva suodos haihdutetaan vakuumissa, mistä jää jäljelle 62 g öljyä. Tämä puhdistetaan kromatografisesti silikageelissä (seos, joka sisältää 25 % etyyliasetaattia ja 75 % heksaania), ja 25 tästä otetaan talteen 21 500 ml:n suuruista fraktiota.

* ·

Fraktiot 9 - 2 0 yhdistetään ja haihdutetaan vakuumissa, mistä saadaan 35 g tahmeaa öljyä. Suoritetaan uudelleen-kiteytys kolme kertaa, (5 ml isopropanolia grammaa kohti), mistä saadaan vielä uusi 11,9 g:n suuruinen erä otsikon 30 mukaista yhdistettä; sp. 142,5 - 144,5 °C. Käyttökelpoisen .·' materiaalin kokonaissaanto on 116,9 g (61,3 %) .

• · .

41 106717

Kaavio F, vaihe d: [4S-[4α,7α(R*),12bP]]-7-[(1,3- dihydro-1,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karb-oksyylihappodifenyylimetyyliesteri 5 Sekoitetaan keskenään trifluorimetaanisulfonihappoa (500 g, 3,33 mol) ja trifluorietikkahappoanhydridiä (74,8 ml, 0,53 mol) ja seos siirretään typpiatmosfääriin. Seosta sekoitetaan ja siihen lisätään liuos, joka sisältää (S-(R*, R*)]-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-10 yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-1,2,3,4-tetrahydro-2-pyri-diinikarboksyylihappometyyliesteriä (200 g, 0,48 mol) me-tyleenikloridissa (1 1) sellaisella nopeudella, että astian lämpötila pysyy 35 °C:n alapuolella, seosta samalla jäähdyttäen. Seosta sekoitetaan ympäristön lämpötilassa 15 2 päivää. Seos yhdistetään jääveteen (5 1) seosta samalla voimakkaasti sekoittaen ja sitä sekoitetaan 30 minuuttia. Seos uutetaan etyyliasetaatilla (3 x 1 1), orgaaniset faasit yhdistetään ja seos pestään vedellä (3 x 500 m). Seos haihdutetaan vakuumissa jäännökseksi. Jäännös liuotetaan 20 etyyliasetaattiin (4 1) ja uutetaan neljäsosalla omasta tilavuudestaan kylläisellä kaliumvetykarbonaatilla (1 1), ja sitten kolmasosalla omasta tilavuudestaan kylläisellä kaliumvetykarbonaatilla (7 x li). Vesipitoiset uutteet yhdistetään ja laimennetaan etyyliasetaatilla (2 1) . Tu-• 25 lokseksi saatua seosta sekoitetaan ja se jäähdytetään 5 - 10 °C:een. Seoksen pH säädetään arvoon 2 käyttäen väkevää kloorivetyhappoa (noin 750 ml).

Orgaaninen faasi erotetaan ja vesipitoisen faasi uutetaan etyyliasetaatilla (3x11). Etyyliasetaattiuut-30 teet yhdistetään, pestään vedellä (3 x 1 1), sitten kyl-' .· Iäisellä natriumkloridilla (0,8 1) ja kuivataan (MgS04) .

Seos suodatetaan ja pestään etyyliasetaatilla (3 x 200 ml). Seos haihdutetaan vakuumissa, mistä jää jäljelle (188,3 g, 101,5 %) [4S-[4a,7a(R*),12bp]]-7-[(l,3-dihydro- 35 1,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahyd- 42 106717 ro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyyli-happoa värittömänä vaahtona.

[4S-[4α,7α(R*),12bp]]-7-[(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-5 pyridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappoa (113,9 g, 0,28 mol) liuotetaan metyleenikloridiin (1,2 1) ja liuos kuivataan vedettömän MgS04:n (60 g) päällä. Seos suodatetaan ja pestään metyleenikloridilla (3 x 200 ml) . Seos haihdutetaan vakuumissa jäännökseksi. Jäännös liuote-10 taan vedettömään dimetyyliformamidiin (860 ml) ja siirretään typpiatmosfääriin. Seokseen lisätään yhtenä eränä keesiumkarbonaattia (98,9 g, 0,3 mol). Seosta sekoitetaan 45 minuuttia ympäristön lämpötilassa. Seokseen lisätään bromidifenyylimetaania (164,8 g, 0,67 mol). Tulokseksi 15 saatua seosta sekoitetaan ympäristön lämpötilassa 18 tuntia. Reaktio lopetetaan etyyliasetaatilla (2,464 1) ja vedellä (630 ml) . Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään vedellä (7 x 625 ml) , neljäsosalla omasta tilavuudestaan kylläistä kaliumvetykarbonaattia (625 ml) , vedellä (625 20 ml) ja kylläisellä natriumkloridilla (625 ml). Seos kuivataan (MgS04) , suodatetaan ja haihdutetaan vakuumissa, mistä saadaan 214,4 g öljyä. Yhdistetyt vesipitoiset pesuliuok-set uutetaan etyyliasetaatilla (3 x 500 ml), pestään vedellä (4 x 300 ml) ja kuivataan (MgS04) . Seos suodate- 25 taan ja haihdutetaan vakuumissa, mistä saadaan vielä uusi 20,2 g:n suuruinen erä öljyä.

Raakatuote (234,6 g) liuotetaan metyleenikloridiin (200 ml) ja suodatetaan silikageelikerroksen (213 g) läpi käyttäen eluointiin metyleenikloridia (2 1). Liuotin ero-30 tetaan seosta keittämällä ja sen tilalle lisätään heksaa-nia (3 1) niin, että astian lämpötila nousee korkeintaan 65 °C:een. Seos jäähdytetään ympäristön lämpötilaan, saostunut öljy erotetaan dekantoimalla ja tuote kiteytetään (9A-etanoli), mistä saadaan 96,6 g (60 %) otsikon mukaista 35 yhdistettä; sp. 153 - 155 °C.

43 106717

Kaavio F, vaihe e: [4S-[4a,7a(R*),12bP]]-7-(amino)-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-aJ[2]-bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteri

Sekoitetaan keskenään [4S-[4a,7a(R*),I2bp]]-7-5 [(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-1,2,3,4,6,- 7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyyliraetyyliesteriä (170,9 g, 0,3 mol), hydratsiinimonohydraattia (34,4 g, 0,68 mol) ja me-tanolia (3,4 1) typpiatmosfäärissä. Seosta kuumennetaan 10 palautusjäähdytyslämpötilassa 5 tuntia. Seos jäähdytetään ympäristön lämpötilaan ja suodatetaan ftaloyylihydratsidin poistamiseksi. Suodos haihdutetaan vakuumissa jäännökseksi ja siitä tehdään liete kloroformiin (600 ml) . Liukenematon ftaloyylihydratsidi poistetaan suodattamalla ja seos pes-15 tään kloroformilla (4 x 210 ml) . Suodos pestään vedellä (4 x 429 ml) , kuivataan (MgS04) , ja suodatetaan. Suodos haihdutetaan kiinteäksi jäännökseksi, joka on muodostunut otsikon mukaisesta yhdisteestä, jonka paino on 142 g (107,7 %).

20 Kaavio B, vaiheet a ja b: trifenyylimetyyli-4-mor- foliinitioliasetaatti

Trifenyylimetyylimerkaptaania (27,6 g, 100 mmol) ja pyridiiniä (10 ml) liuotetaan metyleenikloridiin (120 ml) .

Seos jäähdytetään -50 °C:een, siihen lisätään bromiasetyy- • 25 libromidia (8,7 ml, 100 mmol) ja seosta sekoitetaan 20 mi- ·« nuuttia lämmittäen se samalla huoneenlämpöön. Seokseen lisätään morfoliinia (27 ml, 300 mmol) ja sitä jäähdytetään tarvittaessa sen pitämiseksi ympäristön lämpötilassa. Seosta sekoitetaan 3 tuntia, se suodatetaan ja yhdistetään 30 metyleenikloridiin. Seos pestään vedellä ja suolavedellä ja kuivataan (MgS04) . Liuotin haihdutetaan vakuumissa ja puhdistetaan kromatografisesti ja kiteyttämällä, mistä ‘. saadaan otsikon mukaista yhdistettä kiteisenä kiinteänä aineena.

44 106717

Kaavio A, vaihe a: [4S-[4α-7α(R*),12bβ]]-7-[(1-ok-so-2(R)-bromi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]ben.tsatsepiini-4-karb-oksyylihappodifenyylimetyyliesteri 5 Sekoitetaan keskenään [4S-[4α-7α (R*) , 12bP] ]-7-ami- no-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]-bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (10 mmol), (R)-3-fenyyli-2-bromipropionihappoa (2,75 g, 12 mmol), 2-etoksi-2-etoksikarbonyyli-l,2-dihydrokinolii-10 niä (EEDQ) (3,0 g, 12 mmol) ja metyleenikloridia (25 ml). Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 4 tuntia, se laimennetaan metyleenikloridilla, pestään lO-%:isella kloorivety-hapolla, kylläisellä natriumvetykarbonaatilla ja suolavedellä. Seos kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan va-15 kuumissa. Tuote puhdistetaan uudelleenkiteyttämällä (seos, joka sisältää 25 % etyyliasetaattia ja heksaania), mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä valkeana kiinteänä aineena (6,1 g, 94 %); sp. 167 - 168 °C.

Kaavio A, vaihe c: [4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-[(1-ok-20 so-2(S)-(4-morfoliini)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)ami no] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2] -bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteri

Suspendoidaan natriumhydridiä (175 mg 60-%:ista suspensiota, 4,0 mmol) vedettömään dimetyyliformamidiin 25 (4 ml) ja siirretään typpiatmosfääriin. Suspensioon kup- litetaan vetysulfidikaasua, kunnes ainekset ovat liuenneet. Seokseen lisätään trifenyylimetyyli-4-morfoliini-tioliasetaattia (1,61 g, 4,0 mmol) ja sitä kuumennetaan varovasti 1,5 tuntia kuplittaen samalla typpeä liuoksen 30 läpi, minkä tarkoituksena on edistää ylimääräisen vety- ·* sulpoistumista. Seokseen lisätään [4S-[4α-7α (R*) , 12bp] ]-7- • · [(l-okso-2(R)-bromi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,-8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (1,3 g, 2,0 mmol) 35 ja sitä sekoitetaan 2 tuntia. Seos yhdistetään veteen, 45 106717 uutetaan etyyliasetaattiin, pestään suolavedellä ja kuivataan (MgS04) . Liuotin haihdutetaan vakuumissa ja puhdistetaan kroraatografisesti (30 - 60-%:isen etyyliasetaatin ja heksaanin gradientti) mistä saadaan otsikon mukaista yh-5 distettä värittömänä vaahtona (1,3 g, 89 %).

Kaavio A, vaihe d: [4S- [4α-7α (R*) ,12bP] ] -7- [ (1-ok-so-2(S)-(4-morfoliini)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]-bentsatsepiini-4-karboksyylihappo -triflurorasetaatti 10 MDL 101,264

Sekoitetaan keskenään [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[(1-okso-2(S)-(4-morfoliini)asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2] -bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä 15 (1,46 g, 2,0 mmol) , anisolia (0,5 ml) ja metyleenikloridia (6 ml). Seos siirretään typpiatmosfääriin ja jäähdytetään -50 °C:een. Seokseen lisätään trifluroretikkahappoa (3,0 ml) 1 minuutin aikana ja sen annetaan lämmetä huoneenlämpöön 2 tunnin aikana seosta samalla sekoittaen. Liuotin 20 haihdutetaan vakuumissa, jäännös trituroidaan heksaanilla ja metyleenikloridilla ja kuivataan suuressa vakuumissa, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä vaalean keltai-senruskeana vaahtona (1,47 g).

Menetelmä B

• 25 Kaavio C, vaihe b: [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[(1-ok- so-2(S)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,-8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteri

Tiolietikkahappoa (1,1 ml, 15,4 mmol) lisätään kee-30 siumkarbonaatin (2,51 g, 7,7 mmol) liuokseen metanolissa (30 ml). Reaktioseosta sekoitetaan huoneenlämmössä 30 minuuttia, liuotin haihdutetaan vakuumissa ja tuotetta kuivataan vakuumissa 2 tuntia. Oranssinvärinen kiinteä jäännös liuotetaan dimetyyliformamidiin (40 ml) ja tämä li-35 sätään hitaasti liuokseen, joka sisältää [4S- [4α-7α- 46 106717 (R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(R)-bromi-3-fenyylipropyyli)-amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini(2,l-a]- [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyylieste-riä (5,0 g, 7,7 mmol) dimetyyliformamidissa (60 ml). Reak-5 tioseosta sekoitetaan huoneenlämmössä 1 tunti, se laimennetaan etyyliasetaatilla, pestään vedellä ja suolavedellä, kuivataan MgS04:n päällä ja liuotin haihdutetaan vakuumis-sa. Jäännös puhdistetaan kromatografisesti silikageelissä (heksaanin ja etyyliasetaatin seos, seossuhde 6:4) mistä 10 saadaan otsikon mukaista yhdistettä vaahtona (3,74 g, 75 %) .

1H-NMR (CDClj) δ 7,46 (d, 1, J = 9 Hz) , 7,18 - 7,37 (m, 12), 6,89 - 7,13 (m, 6), 6,62 (m, 1), 6,26 (s, 1), 5,56 (m, 1), 5,37 (m, 2), 4,39 (t, 1, J = 7,5 Hz), 3,28 -15 3,43 (m, 2), 3,06 (dd, 1, J = 7,5, 15 Hz), 2,58 - 2,27 (m, 3), 2,40 (s, 3), 2,02 - 1,86 (m, 1), 1,62 - 1,84 (m, 3).

Kaavio C, vaihe c: [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[(l-ok so-2 (S)-tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-ok-tahydro-6-oksopyridiini[2,l-a][2]bentsatsepiini-4-karbok-20 syylihappodifenyylimetyyliesteri [4S-[4α-7α(R*),I2bp]]-7-[(l-okso-2(S)-asetyylitio- 3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-ok-sopyridiini[2,l-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodi-fenyylimetyyliesteriä (3,85 g, 5,95 mmol) suspendoidaan 25 absoluuttiseen etanoliin (100 ml) ja seokseen lisätään kylläistä etanolipitoista ammoniakkia (100 ml). Reaktio-seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 1,5 tuntia, liuotin haihdutetaan ja jäännös liuotetaan metyleenikloridiin. Seos pestään vedellä ja suolavedellä, kuivataan (MgS04) ja 30 liuotin haihdutetaan vakuumissa, mistä saadaan otsikon mu kaista yhdistettä amorfisena kiinteänä aineena (3,38 g, 94 %) .

IR (KBr) 3429, 3393, 3061, 3030, 2943, 1734, 1649, 1495, .1439, 1283, 1250, 747, 700 cm·1; XH-NMR (CDC13) δ 7,61 35 (d, 1, J = 6,6 Hz), 7,14 - 7,37 (m, 12), 6,88 - 7,12 (m, 47 106717 6), 6,63 (m, 1), 6,28 (s, 1), 5,58 (m, 1), 5,29 - 5,44 (m, 2), 3,65 (q, 1, J = 8,1 Hz), 3,38 (dd, 1, J = 6, 17,4 Hz), 3,05 (dd, 1, J = 5,4, 15 Hz), 2,54 (dd, 1, J = 12, 17,4 Hz), 2,34 - 2,47 (m, 2), 2,07 (d, 1, J = 8,7 Hz), 1,85 -5 2,01 (m, 1), 1,61 - 1,85 (m, 3); 13C-NMR (CDC13) δ 171,74, 170,94, 169,61, 139,89, 138,97, 137,47, 136,50, 135,29, 130,81, 129,39, 128,39, 128,27, 128,19, 127,79, 127,71, 127,39, 126,95, 126,91, 126,80, 125,42, 124,66, 78,29, 51,14, 51,03, 48,51, 44,57, 41,34, 36,45, 24,92, 17,10; MS 10 (FAB) m/z 605 [M+ + H], 393, 167.

Alkuaineanalyysi, laskennallinen tulos yhdisteelle C37H36N204S -0,5 H20: C 72,40; H 6,08; N 4,56; Havaittu tulos: C 72,49; H 6,11; N 4,40.

Kaavio C, vaihe d: [4S- [4α-7α (R*) , 12bfl] ] -7-[ (1-ok-15 so-2(S)-(4-morfoliini)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiin±[2,1-a][2]— bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteri

Liuotetaan t-butyylibromiasetaattia (1 ekviv.) tet-rahydrofuraaniin ja seokseen lisätään ruiskulla morfolii-20 nia (2,2 ekviv.). Reaktioseosta sekoitetaan huoneenlämmössä 2 tuntia, se suodatetaan ja suodatinkakku pestään etyyliasetaatilla. Orgaaniset suodokset yhdistetään ja pestään kylläisellä natriumvetykarbonaatilla (2 x), vedellä (2 x) ja suolavedellä. Seos kuivataan (Na2S04), suodatetaan ja . , 25 liuotin haihdutetaan vakuumissa. Öljymäinen jäännös ote taan talteen etyyliasetaattiin, jäähdytetään jäissä ja liuokseen kuplitetaan vetykloridikaasua. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä yön yli, se jäähdytetään ja suodatetaan, mistä saadaan morfoliinietikkahappoa (85 %); 30 sp. 169 - 170 °C; XH-NMR (D20) 6 3,75 - 4,29 (br m, 6), 3,59 (br s, 2), 3,28 (br s, 2).

Morfoliinietikkahappoa (4,9 mmol) suspendoidaan dimetyyliformamidiin (40 ml) , josta liuennut kaasu on 35 poistettu, ja seokseen lisätään karbonyylidi-imidatsolia 48 106717 (0,477 g, 2,94 mmol). Reaktioseosta sekoitetaan huoneenlämmössä 1,5 tuntia. Seokseen lisätään liuos, joka sisältää [4S- [4α-7α(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-tio-3-fenyyli-propyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyri-5 diini[2,l-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyy- limetyyliesteriä (2,45 mmol) tetrahydrofuraanissa, josta liuennut kaasu on poistettu, ja seosta sekoitetaan huoneenlämmössä yön yli. Seos laimennetaan etyyliasetaatilla, pestään vedellä (2 x) ja suolavedellä, kuivataan (MgS04) ja 10 liuotin haihdutetaan vakuumissa. Seos puhdistetaan kroma- tografisesti silikageelissä (heksaanin ja etyyliasetaatin seos, seossuhteesta 1:1 seossuhteeseen 3:7) mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (86 %).

^-NMR (CDC13) 87,44, (d, 1, J = 9 Hz) , 7,15 - 7,35 15 (m, 12), 6,91 - 7,12 (m, 6), 6,63 (m, 1), 6,28 (s, 1), 5,57 (m, 1), 5,30 - 5,43 (m, 2), 4,30 (t, 1, J = 7,5 Hz), 3,74 (t, 4, J = 4,5 Hz), 3,17 - 3,46 (m, 4), 2,33 - 2,68 (m, 7), 1,52 - 2,04 (m, 4) .

Kaavio A, vaihe d: [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[(1-ok- 20 so-2(S)-(4-morfoliini)-asetyylifcio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]-bentsatsepiini-4-karboksyylihappo -trif luoriasetaatti [4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-morfolii-ni)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,-: r 25 12b-oktahydro-6-oksopyridiini(2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (1,86 mmol) ja anisolia (1,5 ml, ylimäärin) liuotetaan metyleenikloridiin (20 ml) , seos jäähdytetään -50 °C:een ja siihen lisätään trifluorietikkahappoa (3 ml) . Reaktioseosta sekoitetaan 30 -50 °C:ssa 2,5 tuntia, liuotin haihdutetaan vakuumissa ja . jäännös trituroidaan heksaanilla (4 x) . Jäännös otetaan talteen mahdollisimman pieneen määrään metyleenikloridia ja tuote saostetaan heksaanista (3 x) , mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (68 %) .

49 106717 ^-NMR (CDC13) δ 7,66 (d, 1, J * 7,5 Hz), 6,97 - 7,39 (m, 9), 5,60 - 5,74 (m, 1), 5,39 - 5,48 (m, 1), 5,03 - 5,12 (m, 1), 4,54 <dd, 1, J = 7,5, 9 Hz), 4,00 (s, 2), 3,88 (t, 4, J = 3 Hz), 2,99 - 3,51 (m, 7), 2,85 (dd, 5 1, J - 12, 18 Hz), 2,43 - 2,57 (m, 1), 2,26 - 2,39 (m, 1), 1,66 - 2,06 (m, 4); 19F-NMR (CDC13) 6 -74,0; MS (Cl, 70 eV) m/z 566 [M+ + H].

Esimerkki 2 [4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-morfolii-10 ni)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli) amino] -1,2,3,4,6,7,8,- 12b-heksahydro-6-okso-lH-[l,4]-oksatsiini[3,4-a][2]bents-atsepiini-4-karboksyylihappo·trifluoriasetaatti

15 H\ H

1 0 yj 20 C00H ecF3c02H <0)^ S- C- CH;-/

0 W

Kaavio D, vaihe a: N-[2-(l,3-dihydro-l,3-diokso-2H-25 isoindol-2-yyli) -l-okso-3-fenyylipropyyli] -L-seriinimetyy- liesteri N-ftaloyyli-(S)-fenyylialaniinia (90 g, 0,3 mol) lietetään metyleenikloridiin (450 ml) ja tähän lisätään pisaroittain oksalyylikloridia (54 ml, 0,62 mol). Seos 30 siirretään kuivaan atmosfääriin (CaS04-putki) ja sitä käsi- - - tellään dimetyyliformamidilla (10 μΐ). Seosta sekoitetaan 5 tuntia, se suodatetaan ja väkevöidään vakuumissa, mistä saadaan N-ftaloyyli-(S)-fenyylialaniinihappokloridia kel-lanvalkeana amorfisena kiinteänä aineena.

50 106717

Seriinimetyyliesterihydrokloridia (56 g, 0,36 mol) liuotetaan tetrahydrofuraaniin (300 ml) , seos jäähdytetään sitten 0 °C:een ja siihen lisätään 4-metyylimorfoliinia (88 ml, 0,8 mol). Seokseen lisätään pisaroittain liuos, 5 joka sisältää N-ftaloyyli- (S) -fenyylialaniinihappokloridia tetrahydrofuraanissa (200 ml) . Seoksen annetaan lämmetä huoneenlämpöön ja sitä sekoitetaan 3 tuntia. Seos suodatetaan ja suodos väkevöidään vakuumissa. Jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin ja orgaaninen faasi erotetaan. Seos pes-10 tään vedellä, sitten kylläisellä natriumkloridilla ja se kuivataan (MgS04) . Liuotin haihdutetaan vakuumissa, mistä saadaan öljyä. Tuote puhdistetaan kromatografisesti sili-kageelissä (gradientti, jonka lähtökoostumus on 50 % etyyliasetaattia heksaanissa ja loppukoostumus etyyliasetaat-15 ti), mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (80,8 g, 67 %), sp. 129 - 132 °C.

Kaavio D, vaihe b: N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli) -l-okso-3-fenyylipropyyli] -O-2-propenyyli-L-seriinimetyyliesteri 20 N- [2- (1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)-1- okso-3-fenyylipropyyli]-L-seriinimetyyliesteriä (25 g, 63 mmol) liuotetaan metyleenikloridin ja sykloheksaanin seokseen (seossuhde 1:1, 600 ml). Seokseen lisätään allyyli-triklooriasetimidaattia (26 g, 128 mmol) ja trifluorime-: 25 taanisulfonihappoa (5 ml), 56,6 mmol). Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä typpiatmosfäärissä 5 tuntia ja se laimennetaan metyleenikloridilla. Seos pestään kylläisellä vesipitoisella natriumvetykarbonaatilla, vedellä, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan vakuumissa. Tuote puhdiste-30 taan kromatografisesti silikageelissä (gradientti, jonka lähtökoostumus on 20 % etyyliasetaattia heksaanissa ja loppukoostumus 35 % etyyliasetaattia heksaanissa), mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä; sp. 95 - 97 °C.

51 106717

Kaavio D, vaihe c: [S-(R*,R*)]-N-[2-(1,3-dihydro- 1.3- diokso-2H-isoindol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]- 3.4- dihydro-2H-l,4-oksatsiini-3-karboksyylihappometyyli-esteri 5 N- [2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)-1- okso-3-fenyylipropyyli]-O-2-propenyyli-L-seriinimetyyli-esteriä (13 g, 29,8 raraol) liuotetaan metyleenikloridin ja metanolin seokseen (seossuhde 10 : 1, 220 ml). Seos jäähdytetään -78 °C:een ja siihen johdetaan otsonin ja hapen 10 seosta noin 10 minuutin ajan siihen asti, kunnes seokseen jää väriltään pysyvästi siniseksi. Seokseen johdetaan typpeä 10 minuutin ajan -78 °C:ssa ylimääräisen otsonin poistamiseksi. Seosta käsitellään metyylisulfidillä (60 ml, 0,82 mol) ja sen annetaan lämmetä huoneenlämpöön. Seosta 15 sekoitetaan huoneenlämmössä 2,5 tuntia, liuotin haihdute taan vakuumissa ja jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin (200 ml). Seos pestään vedellä, kylläisellä natriumklori-dilla, kuivataan (MgSOj ja liuotin haihdutetaan vakuumissa, mistä saadaan vaahtona N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-20 2H-isoindol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-O-2-okso- etyyli-L-seriinimetyyliesterivälituotetta (13,6 g).

N- [2- (1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)-1-okso-3-fenyylipropyyli]-O-2-oksoetyyli-L-seriinimetyyli-esteriä (13,6 g) liuotetaan metyleenikloridin ja trifluo-: 25 rietikkahapon seokseen (seossuhde 10:1, 330 ml). Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 2,5 tuntia ja liuotin haihdutetaan vakuumissa. Tuote puhdistetaan kromatografisesti silikageelissä (35 % etyyliasetaattia heksaanissa) ja se kiteytetään uudelleen (etyyliasetaatin ja heksaanin seos), 30 mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (8,52 g, 68 %); sp. 70 - 72 °C.

52 106717

Kaavio D, vaihe d: [4S-[4a,7a(R*),12bp]]-7-[(1,3- dihydro-1,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-3,4,6,7,8,12b-hek-sahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsiini[3,4-a][2]bentsatsepii-ni-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteri 5 [S-(R*,R*)]-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoin- dol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-3,4-dihydro-2H-l,4-oksatsiini-3-karboksyylihappometyyliesteriä (2,5 g, 5,9 mmol) liuotetaan metyleenikloridiin (5 ml) ja seos lisätään pisaroittain etukäteen valmistettuun liuokseen, joka 10 sisältää trifluorimetaanisulfonihappoa (4,0 ml, 45 mmol) ja trifluorietikkahappoanhydridiä (1,0 ml, 7,1 mmol). Seos siirretään typpiatmosfääriin ja sitä sekoitetaan huoneenlämmössä 123 tuntia. Seos kaadetaan erotussuppiloon, joka sisältää jäitä (200 g) ja etyyliasetaattia (200 ml). Or-15 gaaninen faasi erotetaan, pestään vedellä (3 x 200 ml) ja kylläisellä vesipitoisella natriumkloridilla (100 ml). Orgaaninen faasi uutetaan 10-paino-%:isella kaliumvetykar-bonaatilla (4 x 40 ml) ja vedellä (40 ml). Yhdistettyjen emäksisten vesipitoisten faasien päälle lisätään etyyli-20 asetaattikerros (100 ml) ja yhdistelmä jäähdytetään jää-hauteessa. Seokseen lisätään pisaroittain 6-normaalista kloorivetyhappoa sen pH:n säätämiseksi arvoon 1 pitäen sen lämpötila 5-10 °C:ssa. Orgaaninen faasi erotetaan ja vesipitoisen faasi uutetaan etyyliasetaatilla (3 x 200 ; - 25 ml) , pestään kylläisellä natriumkloridilla ja kuivataan (MgS04) . Liuotin haihdutetaan vakuumissa ja jäännös kuivataan suuressa vakuumissa 56 °C:ssa 24 tuntia, mistä saadaan [4S-[4a,7a(R*),12bp]]-7-[(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-1H-30 [1,4]-oksatsiini[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihap- povälituotetta (1,75 g, 73 %).

[4S-[4a,7a(R*),12bp]]-7-[(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH- [1,4]-oksatsiini[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihap-35 poa (500 mg, 1,23 mmol) liuotetaan metyleenikloridiin 53 106717 (12 ml) ja seosta käsitellään difenyylidiatsometaanilla (360 mg, 1,86 mmol). Seosta sekoitetaan 5,5 tuntia ja liuotin haihdutetaan vakuumissa. Tuote puhdistetaan kromatografisesta silikageelissä (gradientti, jonka alkukoostu-5 mus on 20 % etyyliasetaattia heksaanissa ja loppukoostumus 35 % etyyliasetaattia heksaanissa), mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (563 mg, 80 %); sp 178 - 181 °C (iso-propanoli).

Kaavio D, vaihe e: [4S-[4a,7a(R*),12bP]]-7-(ami- 10 no) -3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsiini-[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyy-liesteri [4S-[4a,7a(R*),12bp]]-7-[(1,3-dihydro-1,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-okso-lH-15 [1,4]-oksatsiini[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihap- podifenyylimetyyliesteriä (296 mg, 0,517 mmol) liuotetaan metanoliin (5 ml) ja seosta käsitellään hydratsiinimono-hydraatilla (1,1 ml 1-molaarista liuosta metanolissa, 1,1 mmol). Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 44 tuntia, liuo-20 tin haihdutetaan vakuumissa ja jäännös lietetään metylee-nikloridiin (10 ml). Seos suodatetaan ja liuotin haihdutetaan vakuumissa, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (218 mg, 95 %).

Kaavio A, vaihe a: [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[(1-ok- ; - 25 so-2(R)-bromi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b- * · oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsiini[3,4-a][2]bentsatse-piini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteri [4S-[4a-7a(R*),12bP] ] -7-amino-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsiini[3,4-a][2]bentsatse-30 piini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (10 mmol), (R) - 3 -fenyyli-2-bromipropionihappoa (2,75 g, 12 mmol), **' 2-etoksi-2-etoksikarbonyyli-l, 2-dihydrokinoliiniä (EEDQ) (3,0 g, 12 mmol) ja metyleenikloridia (25 ml) sekoitetaan keskenään. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 4 tuntia, 35 laimennetaan metyleenikloridilla, pestään 10-%:isella 54 106717 kloorivetyhapolla, kylläisellä natriumvetykarbonaatilla ja suolavedellä. Seos kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan vakuumissa. Tuote puhdistetaan kromatografisesti, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

5 Kaavio A, vaihe c: [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[(1-ok- so-2(S)-(4-morfoliini)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)ami-no]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsii-ni[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylime-tyyliesteri 10 Natriumhydridiä (175 mg 60-%:ista suspensiota, 4,0 mmol) suspendoidaan vedettömään dimetyyliformamidiin (4 ml) ja seos siirretään typpiatmosfääriin. Suspensioon kuplitetaan vetysulfidikaasua, kunnes ainekset ovat liuenneet. Seokseen lisätään trifenyylimetyyli-4-morfoliinitio-15 liasetaattia (1,61 g, 4,0 mmol) ja sitä kuumennetaan varovasti 1,5 tuntia kuplittaen samalla typpeä liuoksen läpi, minkä tarkoituksena on edistää ylimääräisen vetysulf idikaasun poistumista. Seokseen lisätään [4S-[4a-7a(R*),120β]]-7- [ (l-okso-2(R)-bromi-3-fenyylipropyyli)ami-20 no]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsii- ni[3,4-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylime-tyyliesteriä (2,0 mmol) ja sitä sekoitetaan 2 tuntia. Seos yhdistetään veteen, uutetaan etyyliasetaattiin, pestään suolavedellä ja kuivataan (MgS04) . Liuotin haihdutetaan 25 vakuumissa ja tuote puhdistetaan kromatografisesti, mistä • « saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

Kaavio A, vaihe d: [4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-[(1-ok-so-2(S)-(4-morfoliini)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-!,2,3,4,6,7,8, 12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsii-30 ni[3,4-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo -trifluori- ·· asetaatti [4S- [4a-7a(R*) ,12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-morfoliini) asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,-8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4] -oksatsiini[3,4-a] [2]bents-35 atsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (2,0 ss 106717 mmol), anisolia (0,5 ml) ja metyleenikloridia (6 ml) sekoitetaan keskenään. Seos siirretään typpiatmosfääriin ja se jäähdytetään -50 eC:een. teokseen lisätään trifluori-etikkahappoa (3,0 ml) 1 minuutin aikana ja sen annetaan 5 lämmetä huoneenlämpöön 2 tunnin aikana seosta samalla sekoittaen. Liuotin haihdutetaan vakuumissa, trituroidaan heksaanilla ja metyleenikloridillä ja kuivataan suuressa vakuumissa, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

Esimerkki 3 10 [4S-[4o-7a(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-morfolii- ni) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli) amino] -1,2,3,4,6,7,8,-12b-heksahydro-6-okso-lH-[l,4]-tiatsiini[3,4-a] [2]bents-atsepiini-4-karboksyylihappo·trifluoriasetaatti H h

0 — VN

7 S /7- N \

0 yJ

CH COOH ·ΟΕ3θθ2Η

<0/ STCH2_ VV

25 Kaavio A, vaihe a: [4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-[(1-ok- SO-2(R)-bromi-3-fenyy1ipropyy1i)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[l,4] -tiatsiini [3,4-a] [2]bentsatsepii-ni-4-karboksyy1ihappodifenyy1imetyy1iesteri [4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-amino-1,2,3,4,6,7,8,12b-30 oktahydro-6-okso-lH-[l,4]-tiatsiini[3,4-a] [2]bentsatsepii- • r ni-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (10 mmol), * (R)-3-fenyyli-2-bromipropionihappoa (2,75 g, 12 mmol), 2-etoksi-2-etoksikarbonyyli-l, 2-dihydrokinoliiniä (EEDQ) (3,0 g, 12 mmol) ja metyleenikloridia (25 ml) sekoitetaan 35 keskenään. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 4 tuntia, ·« 56 106717 se laimennetaan metyleenikloridilla, pestään 10-%:isella kloorivetyhapolla, kylläisellä natriumvetykarbonaatilla ja suolavedellä. Seos kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan vakuumissa. Tuote puhdistetaan kromatografisesti, 5 mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

Kaavio A, vaihe c: [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[(1-ok- so-2(S)-(4-morfoliini)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli) ami-no]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-tiatsiini-[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyy-10 liesteri

Natriumhydridiä (175 mg 60-%:ista suspensiota, 4,0 mmol) suspendoidaan vedettömään dimetyyliformamidiin (4 ml) ja suspensio siirretään typpiatmosfääriin. Suspensioon kuplitetaan vetysulfidikaasua, kunnes ainekset ovat 15 liuenneet. Seokseen lisätään trifenyylimetyyli-4-morfolii- nitioliasetaattia (1,61 g, 4,0 mmol) ja sitä kuumennetaan varovasti 1,5 tuntia kuplittaen samalla typpeä liuoksen läpi, minkä tarkoituksena on edistää ylimääräisen vetysul-fidikaasun poistumista. Seokseen lisätään [4S-[4α-7α(R*),-20 12bP]]-7-[ (l-okso-2(R)-bromi-3-fenyylipropyyli)amino]- 1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-tiatsiini[3,4-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyylies-teriä (2,0 mmol) ja sitä sekoitetaan 2 tuntia. Seos yhdistetään veteen, uutetaan etyyliasetaatti, pestään suolave-25 dellä ja kuivataan (MgS04) . Liuotin haihdutetaan vakuumissa ja tuote puhdistetaan kromatografisesti, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

Kaavio A, vaihe d: [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[(l-okso-2 (S)-(4-morfoliini)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)ami-3 0 no]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-tiatsiini- ... [3,4-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo-trifluoriase- taatti [4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-morfolii-ni)asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-35 oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-tiatsiini[3,4-a][2]bentsatsepii- )·· 57 106717 ni-4-karboksyylihappodif enyylimetyyliesteriä (2,0 mmol), anisolia (0,5 ml) ja metyleenikloridia (6 ml) sekoitetaan keskenään. Seos siirretään typpiatmosfääriin ja se jäähdytetään -50 eC:een. Seokseen lisätään trifluorietikkahap-5 poa (3,0 ml) 1 minuutin aikana ja sen annetaan lämmetä huoneenlämpöön 2 tunnin aikana seosta samalla sekoittaen. Liuotin haihdutetaan vakuumissa, jäännös trituroidaan hek-saanilla ja metyleenikloridilla ja kuivataan suuressa vakuumissa, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

10 Esimerkki 4 [4S- [4a-7a(R*), 12bp] ] -7- [ (l-okso-2(S)-(1-piperidii-ni) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,-12b-heksahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo·trifluoriasetaatti 15 ys.

H\ h

°s/N

20 / ° V /

CH COOH *CF3C02H

s- r 25

Kaavio C, vaihe d: (4S-[4a-7a(R*), 12bp]]-7-[(l-ok-so-2(S)-(1-piperidiini)asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1 , 2 , 3, 4 , 6,7,8,12b-heksahydro-6-oksopyridiini[2,1-a]- [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteri 30 t-butyylibromiasetaattia (1 ekviv.) liuotetaan tet- • ' rahydrofuraaniin ja seokseen lisätään ruiskulla piperidii- ’ · niä (2,2 ekviv.). Reaktioseosta sekoitetaan huoneenlämmös sä 2 tuntia, suodatetaan ja suodatinkakku pestään etyyliasetaatilla. Orgaaniset suodokset yhdistetään ja seos pes- 35 tään kylläisellä natriumvetykarbonaatilla (2 x), vedellä ·< 5s 106717 (2 x) ja suolavedellä. Seos kuivataan (Na2S04) , suodatetaan ja liuotin haihdutetaan vakuumissa. Öljymäinen jäännös otetaan talteen etyyliasetaattiin, seos jäähdytetään jäissä ja liuokseen kuplitetaan vetykloridikaasua. Seosta se-5 koitetaan huoneenlämmössä yön yli, jäähdytetään ja suodatetaan, mistä saadaan 1-piperidiinietikkahapon hydroklori-disuolaa (56 %) ; sp. 215 - 217 °C; 1H-NMR (D20) 6 3,84 (s, 2), 3,41 - 3,51 (m, 2), 2,83 - 2,97 (m, 2), 1,66 - 1,87 (m, 5) , 1,25 - 1,45 (m, 1) .

10 l-piperidiinietikkahapon hydrokloridisuolaa (4,9 mmol) suspendoidaan dimetyyliformamidiin (40 ml) , josta liuenneet kaasut on poistettu, ja seokseen lisätään karbonyylidi-imidatsolia (0,477 g, 2,94 mmol). Reaktio-seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 1,5 tuntia. Seokseen 15 lisätään liuos, joka sisältää [4S-[4α-7α (R*) , 12bp] ]-7-[ (1-okso-2(S)-tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karb-oksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (2,45 mmol) tetrahyd-rofuraanissa, josta liuenneet kaasut on poistettu, ja 20 seosta sekoitetaan huoneenlämmössä yön yli. Seos laimennetaan etyyliasetaatilla, pestään vedellä (2 x) ja suolavedellä, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan vakuumissa, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (96 %).

^-NMR (CDC13) δ 7,42 (d, 1, J = 9 Hz), 7,17 - 7,38 25 (m, 12), 6,90 - 7,15 (m, 6), 6,60 (m, 1), 6,28 (s, 1), 5,56 (m, 1), 5,31 - 5,44 (m, 2), 4,29 (t, 1, J = 6 Hz), 3,14 - 3,42 (m, 4), 2,85 - 3,08 (m, 3), 2,30 - 2,58 (m, 7), 1,54 - 2,05 (m, 6), 1,37 - 1,52 (m, 2).

Kaavio A, vaihe d: [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[(1-ok-30 so-2(S)-(4-piperidiini)asetyylitio-3-fenyylipropyyli)ami- no]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]-bentsatsepiini-4-karboksyylihappo*trifluoriasetaatti [4S- [4α-7α(R*),I2bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-piperidiini) asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-35 oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karb- > · · 106717 oksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (1,86 mmol) ja aniso-lia (1,5 ml, ylimäärin) liuotetaan metyleenikloridiin (20 ml), seos jäähdytetään -50 eC:een ja siihen lisätään tri-fluorietikkahappoa (3 ml). Reaktioseosta sekoitetaan 5 -50 °C:ssa 2,5 tuntia, liuotin haihdutetaan vakuumissa ja jäännös trituroidaan heksaanilla (4 x). Jäännös otetaan talteen mahdollisimman pieneen määrään metyleenikloridia ja tuote seostetaan heksaanista (3 x), mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (40 %).

10 IR (KBr) 3389, 3064, 3029, 2949, 2872, 1672, 1496, 1442, 1342, 1277, 1199, 1136 cm*1, 'H-NMR (CDC13) δ 7,83 (d, 1, J = 7,5 Hz), 6,89 - 7,41 (m, 9), 5,63 - 5,79 (m, 1),

5,39 - 5,50 (m, 1), 5,03 - 5,16 (m, 1), 4,60 (dd, 1, J = 6, 7,5 Hz), 3,98 (s, 2), 3,28 - 3,67 (m, 4), 2,66 - 3,12 15 (m, 4), 2,25 - 2,67 (m, 2), 1,62 - 2,08 (m, 10); 19F-NMR

(DMSO-d6) 6 -73,3; 13C-NMR (DMS0-d6) δ 171,8, 171..3, 168,5, 137,4, 136,8, 136,6, 130,1, 129,3, 128,2, 126,8, 126,7, 125,4, 124,9, 119,3, 53,01 50,6, 49,9, 48,3, 37,5, 35,9, 25,0, 24,7, 22,5, 21,3, 16,9; MS (CI, 70 eV) m/z 564 20 [M+ + H], 144.

Esimerkki 5 [4S- [4a-7a(R*), 12bp] ] -7-[ (l-okso-2(S) - (1-piperidii- ni) asetyylitio-3-fenyylipropyyli) amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b- heksahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsiini[3,4-a][2]bentsatse- ; - 25 piini-4-karboksyylihappo*trifluoriasetaatti «

H\ H

7 0 yJ

CH COOH *CF 3CO2H 1 •.

(O)"7 60 1 0 6 7 1 7

Kaavio A, vaihe c: [4S-[4α-7α(R*),12ϋβ]]-7-[(1-ok-so-2(S)-(1-piperidiini)asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsii-ni[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylime-5 tyyliesteri

Natriumhydridiä (175 mg 60-%:ista suspensiota, 4,0 mmol) suspendoidaan vedettömään dimetyyliformamidiin (4 ml) ja suspensio siirretään typpiatmosfääriin. Suspensioon kuplitetaan vetysulfidikaasua siihen asti, kunnes 10 aine kset ovat liuenneet. Seokseen lisätään trifenyylime-tyyli-4-piperidiinitioliasetaattia (4,0 mmol) ja sitä kuumennetaan varovasti 1,5 tuntia kuplittaen samalla typpeä liuoksen läpi, minkä tarkoituksena on edistää ylimääräisen vetysulfidikaasun poistumista. Seokseen lisätään [4S-[4a-15 7a(R*),12bP]]-7-[(l-okso-2(R)-bromi-3-fenyylipropyyli)ami no] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsii-ni[3,4-a](2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylime-tyyliesteriä (2,0 mmol) ja sitä sekoitetaan 2 tuntia. Seos yhdistetään veteen, uutetaan etyyliasetaattiin, pestään 2 0 suolavedellä ja kuivataan (MgS04) . Liuotin haihdutetaan vakuumissa ja puhdistetaan kromatografisesti, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

Kaavio A, vaihe d: [4S-[4α-7α(R*),12bβ]]-7-[(1-ok-so-2(S)-(1-piperidiini)asetyylitio-3-fenyylipropyyli)ami-: 25 no]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsii- ni[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo [4S- [4α-7α(R*),I2bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(1-piperidiini) asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH- [1,4]-oksatsiini[3,4-a] [2]bentsatse-30 piini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (2,0 .. mmol), anisolia (0,5 ml) ja metyleenikloridia (6 ml) se koitetaan keskenään. Suspensio siirretään typpiatmosfääriin ja se jäähdytetään -50 °C:een. Tähän lisätään tri-fluorietikkahappoa (3,0 ml) 1 minuutin kuluessa ja seoksen 35 annetaan lämmetä huoneenlämpöön 2 tunnin aikana sitä sa- ·»« 106717 maila sekoittaen. Liuotin haihdutetaan vakuumissa, jäännös trituroidaan heksaanilla ja metyleenikloridilla ja kuivataan suuressa vakuumissa, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

5 Esimerkki 6 [4S-[4a-7a(R*) ,12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(l-piperidii-ni)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,-12b-heksahydro-6-okso-lH-[1,4] -tiatsiini[3,4-a] [2]bents-atsepiini-4-karboksyylihappo·trifluoriasetaatti

H\ H / ^1 H

°y* 7 s A" N \

0 yJ

CH COOK »CFsCC^H

20

Kaavio Ä, vaihe c: [4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-[(1-ok-so-2(S)-(l-piperidiini)asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH- [1,4] -tiatsiini-[3,4-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyy-. . 25 liesteri

Natriumhydridiä (175 mg 60-%:ista suspensiota, 4,0 mmol) suspendoidaan vedettömään dimetyyliformamidiin (4 ml) ja suspensio siirretään typpiatmosfääriin. Suspensioon kuplitetaan vetysulfidikaasua siihen asti, kunnes 30 ainekset ovat liuenneet. Seokseen lisätään trifenyylime-tyyli-4-piperidiinitioliasetaattia (4,0 mmol) ja sitä kuu- • · mennetaan varovasti 1,5 tuntia kuplittaen samalla typpeä liuoksen läpi, minkä tarkoituksena on edistää ylimääräisen vetysulfidikaasun poistumista. Seokseen lisätään [4S-[4a-35 7a(R*), 12bp] ]-7-[ (l-okso-2(R)-bromi-3-fenyylipropyyli )ami- ··< 62 1C6717 no] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH- [1,4]-tiatsii-ni[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylime-tyyliesteriä (2,0 mmol) ja sitä sekoitetaan 2 tuntia. Seos yhdistetään veteen, uutetaan etyyliasetaattiin, pestään 5 suolavedellä j a kuivataan (MgS04). Liuotin haihdutetaan vakuumissa ja puhdistetaan kromatografisesti, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

Kaavio A, vaihe d: [4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-[(l-ok-so-2(S)-(1-piperidiini)asetyylitio-3-fenyylipropyyli)ami-10 no]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[l, 4] -tiatsiini- [3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo·trifluoriase-taatti [ 4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(1-piperidiini ) asetyylitio-3-f enyylipropyyli) amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-15 oktahydro-6-okso-lH-[l,4]-tiatsiini[3,4-a] [2]bentsatsepii-ni-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (2,0 mmol), anisolia (0,5 ml) ja metyleenikloridia (6 ml) sekoitetaan keskenään. Suspensio siirretään typpiatmosfääriin ja se jäähdytetään -50 °C:een. Seokseen lisätään trifluorietik-20 kahappoa (3,0 ml) 1 minuutin aikana ja sen annetaan lämmetä huoneenlämpöön 2 tunnin aikana seosta samalla sekoittaen. Liuotin haihdutetaan vakuumissa, trituroidaan hek-saanilla ja metyleenikloridilla ja kuivataan suuressa vakuumissa, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

. 25 Esimerkki 7 [4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-tiomorfo-liini)asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,-12b-heksahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo·trifluoriasetaatti

30 A

H H

. ‘ \ ·. / \ H

7'>0 35 cooh ·ορ3οο2η 63 106717

Kaavio B, vaiheet a ja b: trifenyylimetyyli-4-tio-inocf oliini tioliasetaatti

Trifenyylimetyylimerkaptaania (9,2 g, 33,3 mmol) liuotetaan metyleenikloridiin (50 ml) ja seokseen lisätään 5 pyridiiniä (4 ml). Seos jäähdytetään -50 °C:een ja siihen lisätään bromiasetyylibromidia (2,9 ml) ja seosta sekoitetaan voimakkaasti 20 minuuttia. Jäähaude poistetaan ja seoksen annetaan lämmetä huoneenlämpöön. Seokseen lisätään pisaroittain tiomorfoliinia (10 g, 96,9 mmol) sellaisella 10 nopeudella, että sen lämpötila ei nouse 25 °C:n yläpuolelle. Seosta sekoitetaan 2,5 tuntia, se yhdistetään metyleenikloridiin ja pestään vedellä. Seos kuivataan (MgS04) , suodatetaan, liuotin haihdutetaan vakuumissa ja jäännös puhdistetaan kromatografisesti silikageelissä (heksaanin 15 ja etyyliasetaatin seos, seossuhde 4:1), mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä kiinteänä aineena (5,38 g, 41 %) .

XH-NMR (CDClj) δ 7,28 (m, 5), 3,21 (s, 2), 2,62 - 2,88 (m, 4).

20 Kaavio A, vaihe c: [4S-[4o-7«(R*),12bp]]-7-[(1-ok- so-2(S)-(4-tiomorfOliini)asetyylitio-3-fenyylipropyyli)-amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a]- [2] bentsatsepiini-4-karboksyylihappo, difenyylimetyylies-teri 25 Natriumhydridiä (0,32 g 60-%:ista suspensiota, 8,0 mmol) suspendoidaan vedettömään dimetyyliformamidiin (8 ml) ja suspensio siirretään typpiatmosfääriin. Suspensioon kuplitetaan vetysulfidikaasua siihen asti, kunnes ainekset ovat liuenneet. Seosta sekoitetaan 10 minuuttia 30 ja siihen lisätään trifenyylimetyyli-4-tiomorfoliinitioli- ... asetaattia (3,35 g, 8,0 mmol) ja liuoksen läpi kuplitetaan 1,5 tuntia typpeä, minkä tarkoituksena on edistää ylimääräisen vetysulfidikaasun poistumista. Seokseen lisätään hitaasti liuos, joka sisältää [4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-[(l-35 okso-2(R)-bromi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,- *· · 64 106717 12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (2,6 g, 3,99 mmol) dimetyyliformamidissa (8 ml). Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 3 tuntia, se yhdistetään veteen ja uutetaan etyy-5 liasetaattiin, (3 x) . Seos pestään suolavedellä, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan vakuumissa. Jäännös puhdistetaan kromatografisesti (heksaanin ja etyyliasetaatin seos, seossuhteet 9:1 - 4:1 - 1:1), mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

10 1H-NMR (CDClj) δ 7,44 (d, 1, J = 7,5 Hz), 7,16 - 7,37 (m, 10), 6,89 - 7,14 (m, 8), 6,59 - 6,68 (m, 1), 6,30 (s, 1), 5,51 - 5,63 (m, 1), 5,30 - 5,42 (m, 2), 4,28 (t, 1, J = 6,0 Hz), 3,17 - 3,45 (m, 4), 3,03 (dd, 1, J = 7,5, 12 Hz), 2,63 - 2,88 (m, 8), 2,32 - 2,61 (m, 3), 1,61 -15 2,03 (m, 4); MS (CI, 70 eV) m/z 748 [M+ + H], 572, 178, 167, 116.

Kaavio A, vaihe d: [4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-[(1-ok- so-2(S)-(4-tiomorfOliini)-asetyylitio-3-£enyylipropyyli)-amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a]-2 0 [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo -trifluoriasetaatti [4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-tiomorfo-liini)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,-8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (1,86 mmol) ja 1 ' 25 anisolia (1,5 ml, ylimäärin) liuotetaan metyleenikloridiin (20 ml), seos jäähdytetään -50 °C:een ja siihen lisätään trifluorietikkahappoa (3 ml) . Reaktioseosta sekoitetaan 2,5 tuntia -50 °C:ssa, liuotin haihdutetaan vakuumissa ja jäännös trituroidaan heksaanilla (4 x) . Jäännös otetaan 30 talteen mahdollisimman pieneen määrään metyleenikloridia ... ja tuote saostetaan heksaanista (3 x) , mistä saadaan otsi kon mukaista yhdistettä (75 %).

1H-NMR (CDC13) δ 7,63 (d, 1, J =7,5 Hz), 6,93 - 7,42 (m, 9)., 5,58 - 6,74 (m, 1), 5,38 - 5,50 (m, 1), 5,00 - 35 5,12 (m, l) , 4,51 (dd, 1, J = 6, 9 Hz), 3,90 (s, 2), 65 106717 3,16 - 3,51 (m, 6), 3,06 (dd, 1, J = 9, 15 Hz), 2,68 - 2,95 (m, 6), 2,12 - 2,57 (m, 2), 1,60 - 2,05 (m, 4); 19F-NMR (CDC13) δ -76,3; MS (Cl, 70 eV) m/z 582 [M+ + HJ, 178, 162, 116.

5 Esimerkki 8 [4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-tiomorfo-liini) asetyylitio-3- f enyylipropyyli) amino ]-l,2,3,4,6,7,8,-12b-heksahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsiini[3,4-a][2]bents-atsepiini-4-karboksyylihappo·trifluoriasetaatti 10 ft H\ H Is1

CH COOH «CF3C02H

(c^y \ / \ S-C-CH;—N S· O \_/

Kaavio A, vaihe c: [4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-t(1-ok-20 so-2 (S) - (4-tiomorf oliini) asetyylitio-3- f enyylipropyyli) - amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[l,4]-oksat-siini [3,4-a][2] bent satsepiini - 4 -karboksyylihappodi f enyyli-metyyliesteri

Natriumhydridiä (175 mg 60-%:ista suspensiota, 25 4,0 mmol) suspendoidaan vedettömään dimetyyliformamidiin (4 ml) ja suspensio siirretään typpiatmosfääriin. Suspensioon kuplitetaan vetysulfidikaasua siihen asti, kunnes ainekset ovat liuenneet. Seokseen lisätään trifenyylime-tyyli-4-tiomorfoliinitioliasetaattia (4,0 mmol) ja sitä 30 kuumennetaan varovasti 1,5 tuntia kuplittaen samalla typ-peä liuoksen läpi, minkä tarkoituksena on edistää ylimää-*' * räisen vetysulfidikaasun poistumista. Seokseen lisätään [4S-[4o-7a(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(R)-bromi-3-fenyylipro-pyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,l2b-oktahydro-6-okso-lH-[l,4]-35 oksatsiini [3,4-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodi- fenyylimetyyliesteriä (2,0 mmol) ja seosta sekoitetaan 66 1 0 6 7 1 7 2 tuntia. Seos yhdistetään veteen, uutetaan etyyliasetaattiin, pestään suolavedellä ja kuivataan (MgS04). Liuotin haihdutetaan vakuumissa ja jäännös puhdistetaan kromato-grafisesti, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

5 Kaavio Ä, vaihe d: [4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-[(1-ok- so-2 (S) - ( 4-tiomorf oliini) asetyylitio-3-f enyylipropyyli) -amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksat-siini[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo·trifluo-riasetaatti 10 [4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-tiomorfo- liini)asetyylitio-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,4,6,7,8,-12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsiini[3,4-a] [2]bents-atsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (2,0 mmol), anisolia (0,5 ml) ja metyleenikloridia (6 ml) se- 15 koitetaan keskenään. Suspensio siirretään typpiatmosfääriin ja se jäähdytetään -50 °C:een. Seokseen lisätään tri-fluroretikkahappoa (3,0 ml) 1 minuutin aikana ja sen annetaan lämmetä huoneenlämpöön 2 tunnin aikana seosta samalla sekoittaen. Liuotin haihdutetaan vakuumissa, jäännös tri- 20 turoidaan heksaanilla ja metyleenikloridilla ja kuivataan suuressa vakuumissa, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

Esimerkki 9 [4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-tiomorfo-. 25 liini)asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8, - 12b-heksahydro-6-okso-lH-[1,4] -tiatsiini[3,4-a] [2]bentsat-sepiini-4-karboksyylihappo♦trifluoriasetaatti 30 \ V^ \ h

/ 0 yJ

CH COOH »CF3C02H

35 /Fts-7 x /"\ {yj/ s- jj- CH2—_ S> 106717 67

Kaavio A, vaihe c: [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[(1-ok-so-2 (S) -(4-tiomorfoliini)asetyylitio-3-fenyylipropyyli)-amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[1/4]-tiat-siini[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyyli-5 metyyliesteri

Natriumhydridiä (175 mg 60-%:ista suspensiota, 4,0 mmol) suspendoidaan vedettömään dimetyyliformamidiin (4 ml) ja suspensio siirretään typpiatmosfääriin. Suspensioon kuplitetaan vetysulfidikaasua siihen asti, kunnes 10 ainekset ovat liuenneet. Seokseen lisätään trifenyylime- tyyli-4-tiomorfoliinitioliasetaattia (4,0 mmol) ja sitä kuumennetaan varovasti 1,5 tuntia kuplittaen samalla typpeä liuoksen läpi, minkä tarkoituksena on edistää ylimääräisen vetysulfidikaasun poistumista. Seokseen lisätään 15 [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[(l-okso-2(R)-bromi-3-fenyylipro- pyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-tiatsiini[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodife-nyylimetyyliesteriä (2,0 mmol) ja sitä sekoitetaan 2 tuntia. Seos yhdistetään veteen, uutetaan etyyliasetaattiin, 20 pestään suolavedellä ja kuivataan (MgS04) . Liuotin haihdutetaan vakuumissa ja jäännös puhdistetaan kromatografises-ti, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

Kaavio A, vaihe d: [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[(1-ok-so-2(S)-(4-tiomorfoliini)asetyylitio-3-fenyylipropyyli)-: 25 amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-tiat siini [ 3,4-a] [2] bentsatsepiini-4-karboksyylihappo -trif luo-riasetaatti [4S- [4cc-7oc (R*) , 12bP] ] -7- [ (l-okso-2 (S) - (4-tiomorfoliini) asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,-30 12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-tiatsiini[3,4-a][2]bentsat-] sepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (2,0 mmol), anisolia (0,5 ml) ja metyleenikloridia (6 ml) sekoitetaan keskenään. Suspensio siirretään typpiatmosfääriin ja se jäähdytetään -50 °C:een. Seokseen lisätään tri-35 fluorietikkahappoa (3,0 ml) 1 minuutin aikana ja sen anne- 68 106717 taan lämmetä huoneenlämpöön 2 tunnin aikana seosta samalla sekoittaen. Liuotin haihdutetaan vakuumissa, jäännös tri-turoidaan heksaanilla ja metyleenikloridilla ja kuivataan suuressa vakuumissa, mistä saadaan otsikon mukaista yhdis-5 tettä.

Esimerkki 10 [4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-tiomorfo-liini-l-oksidi)asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,-3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-oksopyridiini [2,l-a][2] bentsat-10 sepiini-4-karboksyylihappo·trifluoriasetaatti \ y-O.

15 °Y

CH COOH *CF3C02H

O N_/

20 Menetelmä A

Kaavio B, vaihtoehtoinen vaihe c: trifenyylimetyy-li-4-tiomorfoliini-l-oksidi-tioliasetaatti

Trifenyylimetyyli-4-tiomorf oliinitioliasetaat-tia (5,39 mmol) liuotetaan metyleenikloridiin (25 ml), . . 25 seos siirretään typpiatmosfääriin ja se jäähdytetään -20 °C:een. Seokseen lisätään pisaroittain metaklooriper- bentsoehapon (930 mg, 5,39 mmol) liuos metyleenikloridissa (25 ml). Seosta sekoitetaan yön yli huoneenlämmössä. Seos suodatetaan ja sitä käsitellään vesipitoisella natriumme- 30 tavetysulfiitilla (siihen asti kunnes seoksesta saadaan • negatiivinen tulos tärkkelys-jodiditestissä) ja kerrokset « * erotetaan. Orgaaninen faasi pestään 5-normaalisella nat- riumhydroksidilla, kunnes se on emäksinen ja se kuivataan (MgS04). Liuotin haihdutetaan vakuumissa, mistä saadaan ot-35 sikon mukaista yhdistettä.

« 106717

Kaavio A, vaihe c: [4S-[4α-7α(R1),12bp]]-7-[(1-ok- so-2(S)-(4-tiomorfoliini-l-oksidi)asetyylitio-3-fenyyli-propyyli) amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridii-ni[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylime-5 tyyliesteri

Natriumhydridiä (175 mg 60-%:ista suspensiota, 4,0 mmol) suspendoidaan vedettömään dimetyyliformamidiin (4 ml) ja suspensio siirretään typpiatmosfääriin. Suspensioon kuplitetaan vetysulfidikaasua siihen asti, kunnes 10 ainekset ovat liuenneet. Seokseen lisätään trifenyylime-tyyli-4-tiomorfoliini-l-oksidi-tioliasetaattia (4,0 mmol) ja sitä kuumennetaan varovasti 1,5 tuntia kuplittaen samalla typpeä liuoksen läpi, minkä tarkoituksena on edistää ylimääräisen vetysulfidikaasun poistumista. Seokseen lisä-15 tään [4S-[4α-7α(R1),12bp]]-7-[(l-okso-2(R)-bromi-3-fenyy- lipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyri-diini[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyy-limetyyliesteriä (1,3 g, 2,0 mmol) ja sitä sekoitetaan 2 tuntia. Seos yhdistetään veteen, uutetaan etyyliasetaat-20 tiin, pestään suolavedellä ja kuivataan (MgS04) . Liuotin haihdutetaan vakuumissa ja jäännös puhdistetaan kromatografisesta, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

Kaavio A, vaihe d: [4S-[4α-7α(R1),12bp]]-7-[(l-okso-2 (S)-(4-tiomorfoliini-l-oksidi)-asetyylitio-3-fenyyli-:25 propyyli)amino]-l,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridii- ni[2,l-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo -trifluori-asetaatti [4S-[4α-7α(R1),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-tiomorfo-liini-l-oksidi)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,-30 3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]bentsat- ^ ' sepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (2,0 mmol), anisolia (0,5 ml) ja metyleenikloridia (6 ml) sekoitetaan keskenään. Suspensio siirretään typpiatmosfääriin ja se jäähdytetään -50 °C:een. Seokseen lisätään tri-35 fluorietikkahappoa (3,0 ml) 1 minuutin aikana ja sen anne- • i 70 1 0 6 7 1 7 taan lämmetä huoneenlämpöön 2 tunnin aikana seosta samalla sekoittaen. Liuotin haihdutetaan vakuumissa ja jäännös puhdistetaan kromatografisesti, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

5 Menetelmä B

[4S-[4α-7α(R1),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-tiomorfo-liini-l-oksidi)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,-3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]bentsat-sepiini-4-karboksyylihappo -trifluoriasetaatti 10 [4S- [4α-7α(R1),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-tiomorfo- liini)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7, -8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappoa (1,52 g, 2,19 mmol) liuotetaan etanolin ja veden seokseen (40 ml/10 ml) ja tähän lisätään magne-15 siummonoperoksiftaalihappoheksahydraattia (0,603 g, 1,22 mmol) . Reaktioseosta sekoitetaan huoneenlämmössä 3 0 minuuttia, liuotin haihdutetaan vakuumissa 40 °C:ssa ja jäännös otetaan talteen metyleenikloridiin. Seos kuivataan (MgS04) , liuotin haihdutetaan vakuumissa ja jäännös puhdis-20 tetaan kromatografisesti silikageelissä (metyleenikloridin ja isopropanolin seos, seossuhde 8:2 - 6:4) mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä amorfisena kiinteänä aineena (0,53 g, 41 %).

IR (KBr) 3384, 3029, 2936, 2871, 1651, 1495, 1440, : 25 1054, 1015, 756 cm'1; ^-NMR (CDC13) δ 7,51 (d, 1, J = 4,8 Hz), 6,91 - 7,40 (m, 9), 5,58 (m, 1), 5,36 - 5,48 (m, 1) , 5,08 - 5,20 (m, 1), 4,30 (t, 1, J = 7,8 Hz), 3,51 (dd, 1, J = 6, 16,5 Hz), 3,25 - 3,44 (m, 3), 3,09 - 3,25 (m, 2) , 3,02 (dd, 1, J = 8,4, 14,1 Hz), 2,65 - 2,94 (m, 6), 30 2,28 - 2,65 (m, 3), 1,52 - 2,04 (m, 3); 19F-NMR (CDCl3) δ -75,8; 13C-NMR (CDC13) δ 199,2, 172,8, 171,9, 169,7, 137.6, 136,8, 135,6, 130,5, 129,4, 128,4, 127,4, 126,9, 125.6, 125,0, 66,6, 51,2, 51,1, 48,7, 47,7, 45,9, 44,2, 36,9, 36,7, 25,1, 17,2; MS (FAB) m/z 598 [M+ + H], 580, 35 552, 232.

106717 71

Alkuaineanalyysi, laskennallinen -tulos yhdisteelle C3oH35N306S2·CF3C02H: C 53,95; H 5,09; N 5,90; havaittu tulos; C 53,98, H 5,29; N 5,78,

Esimerkki 11 5 [4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-tiomorfo- liini-1,1-dioksidi)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-heksahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]-bentsatsepiini-4-karboksyylihappo·trifluoriasetaatti

10 H\ H /V

/ o^N \ 15 CH COOK ·0Γ30Ο2Η (O)" S- fj- oU~\c O \ /

Menetelmä A

Kaavio B, vaihtoehtoinen vaihe c; trifenyylimetyy-20 li-4-tioraorfoliini-l,l-dioksidi-tioliasetaatti

Trifenyylimetyyli-4-tiomorfoliinitioliasetaattia (4,43 mmol) liuotetaan metyleenikloridiin (25 ml) ja suspensio siirretään typpiatmosfääriin. Seokseen lisätään liuos, joka sisältää metaklooriperbentsoehappoa (1,53 g, . 25 8,85 mmol) metyleenikloridissa (25 ml). Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä yön yli. Seosta käsitellään vesipitoisella natriummetavetysulfiitilla (siihen asti, kunnes tärkkelys-jodiditestistä saadaan negatiivinen tulos) ja kerrokset erotetaan. Orgaaninen faasi pestään 5-normaalisella nat-30 riumhydroksidilla, kunnes se antaa emäksisen reaktion ja ; se kuivataan (MgS04). Liuotin haihdutetaan vakuumissa, mis tä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

72 106717

Kaavio A, vaihe c: [4S-[4α-7α(R*),12ϋβ]]-7-[(1-ok-so-2(S)-(4-tiomorfoliini-1,1-dioksidi)-asetyylitio-3-fe-nyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-pyridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodife-5 nyylimetyyliesteri

Natriumhydridiä (175 mg 60-%:ista suspensiota, 4,0 mmol) suspendoidaan vedettömään dimetyyliformamidiin (4 ml) ja suspensio siirretään typpiatmosfääriin. Suspensioon kuplitetaan vetysulfidikaasua siihen asti, kunnes 10 ainekset ovat liuenneet. Seokseen lisätään trifenyylime-tyyli-4-tiomorfoliini-l,1-dioksidi-tioliasetaattia (4,0 mmol) ja sitä kuumennetaan varovasti 1,5 tuntia kuplittaen samalla typpeä liuoksen läpi, minkä tarkoituksena on edistää ylimääräisen vetysulfidikaasun poistumista. Seokseen 15 lisätään [4S-[4α-7α(R*) ,12bP] ]-7-[(l-okso-2(R)-bromi-3- fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-ökso-pyridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodife-nyylimetyyliesteriä (1,3 g, 2,0 mmol) ja sitä sekoitetaan 2 tuntia. Seos yhdistetään veteen, uutetaan etyyliasetaat-20 tiin, pestään suolavedellä ja kuivataan (MgS04) . Liuotin haihdutetaan vakuumissa ja jäännös puhdistetaan kromato-grafisesti, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

Kaavio A, vaihe d: [4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-[(1-ok-so-2(S)-(4-tiomorfoliini-l,1-dioksidi-)-asetyylitio-3-fe-j 25 nyylipropyyli) amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso- pyridiini[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo -tri-fluoriasetaatti [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-tiomorfoliini-l, 1-dioksidi) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-30 1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]- . bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä Φ (2,0 mmol), anisolia (0,5 ml) ja metyleenikloridia (6 ml) sekoitetaan keskenään. Suspensio siirretään typpiatmosfääriin ja se jäähdytetään -50 °C:een. Seokseen lisätään tri-35 fluorietikkahappoa (3,0 ml) 1 minuutin aikana ja sen anne- •.

73 106717 taan lämmetä huoneenlämpöön 2 tunnin aikana seosta samalla sekoittaen. Liuotin haihdutetaan vakuumissa ja puhdistetaan kromatografisesti, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

5 Menetelmä B

Kaavio C, vaihe d: [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[(1-ok-so-2 (S) -(4-tiomorfoliini-l,1-dioksidi)-asetyylitio-3-fe-nyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopy-ridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyy-10 limetyyliesteci

Glysiiniä (20 g, 0,266 mol) suspendoidaan veteen (50 ml) ja suspensioon lisätään divinyylisulfonia (26,7 ml, 0,2664 mol). Seosta kuumennetaan 100 °C:ssa 1,5 tuntia ja se jäähdytetään huoneenlämpöön. Saostuma kootaan tal-15 teen imusuodattamalla, pestään perusteellisesti vedellä ja kuivataan vakuumissa 50 °C:ssa yön yli, mistä saadaan tiomorfoliini-1,1-dioksidietikkahappoa (26,1 g, 51 %) ; sp. 177 - 180 °C; IR (KBr) 3587, 3367, 3252, 3026, 2994, 1725, 1640, 1451, 1408, 1366, 1343, 1312, 1277, 1180, 20 1160, 1138, 1123, 1071, 1061 cm'1; ^-NMR (DMSO-d6) δ 3,36 (s, 2), 3,05 (s, 4); 13C-NMR (DMSO-d6) δ 171,7, 56,8, 50,7, 49,6; MS (EI, 70 eV) m/z 193 (M+), 175, 148.

Alkuaineanalyysi, laskennallinen tulos yhdisteelle C6H1;LN04S-H20: C 34,12; H 6,20; N 6,63; havaittu tulos: • 25 C 34,09; H 6,21; N 6,70.

Tiomorfoliini-1,1-dioksidietikkahappoa (0,947 g, 4,9 mmol) suspendoidaan dimetyyliformamidiin, josta liuenneet kaasut on poistettu, (40 ml) ja seokseen lisätään karbonyylidi-imidatsolia (0,477 g, 2,94 mmol). Reaktio-30 seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 1,5 tuntia. Seokseen * lisätään liuos, joka sisältää [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[ (1- okso-2(S)-tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karb-oksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (1,483 g, 2,45 mmol) 35 tetrahydrofuraanissa, josta liuenneet kaasut on poistettu, « .

106717 ja reaktioseosta sekoitetaan huoneenlämmössä yön yli. Seos laimennetaan etyyliasetaatilla, pestään vedellä (2 x) ja suolavedellä, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan vakuumissa. Jäännös puhdistetaan kromatografisesti silika-5 geelissä (heksaanin ja etyyliasetaatin seos, 1:1 - 3:7), mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä amorfisena kiinteänä aineena (1,52 g, 80 %).

IR (CHC13) 3381, 3032, 3011, 1736, 1651, 1497, 1439, 1308, 1128 cm'1; ^-NMR (CDC13) δ 7,48 (d, 1, J = 6,6 Hz), 10 7,17 - 7,38 (m, 12), 6,92 - 7,12 (m, 6), 6,68 (d, 1, J = 6,9 Hz), 6,33 (s, 1), 5,57 (m, 1), 5,39 (m, 1), 5,32 (m, 1), 4,31 (dd, 1, J = 6,3, 8,7 Hz), 3,39 (m, 4), 2,96 - 3,28 (m, 9), 2,59 (dd, 1, J = 15, 18 Hz), 2,36 - 2,51 (m, 1), 1,88 - 2,03 (m, 1), 1,58 - 1,88 (m, 3); 13C-NMR (CDCl3) 15 δ 198,5, 171,7, 169,5, 169,4, 139,9, 139,1, 137,4, 136,4, 135.4, 130,7, 129,3, 128,4, 128,3, 128,2, 127,8, 127,7, 127.4, 127,0, 126,9, 126,8, 125,5, 124,7, 78,2, 65,7, 51,6, 51,4, 51,2, 51,1, 48,6, 48,1, 37,0, 36,6, 25,1, 25,0, 17,2; MS (FAB) M/z 780 [M+ + H], 752, 614, 572, 406, 20 167, 148; HRMS, laskennallinen tulos yhdisteelle C43H45N307S2 [M+ + H] 780,2777, havaittu tulos: 780,2764.

Kaavio A, vaihe d: [4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-[(1-ok-so-2(S)-(4-tiomorfoliini-l,1-dioksidi)-asetyylitio-3-fe-nyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-• 25 pyridiini[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo-tri- fluoriasetaatti [4S-[4α-7α(R*) ,12bp] ] -7-[(l-okso-2(S)-(4-tiomorfoliini-l, 1-dioksidi) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a] [2]-30 bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä . (1,45 g, 1,86 mmol) ja anisolia (1,5 ml, ylimäärin) liuo tetaan metyleenikloridiin (20 ml). Seokseen lisätään tri-fluorietikkahappoa (3 ml) ja sitä sekoitetaan huoneenlämmössä .2,5 tuntia. Liuotin haihdutetaan vakuumissa ja tri-35 turoidaan heksaanilla (4 x). Jäännös otetaan talteen mah- •.

106717 75 dollisimman pieneen määrään metyleenikloridia ja seostetaan heksaanista (3 x), mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä vaalean kellanruskean värisenä jauheena (1,29 g, 95 %).

5 IR (CHC13) 3370, 3065, 3032, 2953, 1782, 1759, 1653, 1495, 1443, 1325, 1308, 1170, 1128 cm-1; Hi-NMR (CDC13)

δ 7,71 (d, 1, J - 6,6 Hz), 6,91 - 7,39 (m, 9), 5,67 (m, 1), 5,45 (m, 1), 5,13 (m, 1), 4,36 (dd, 1, J = 6,6, 8,4 Hz), 3,29 - 3,60 (m, 4), 2,97 - 3,29 (m, 9), 2,82 (dd, 1, 10 J = 12,9, 17,1 Hz), 2,44 - 2,60 (m, 1), 2,27 - 2,44 (m, 1), 1,67 - 2,09 (m, 4); 19F-NMR (CDC13) δ -76,3; 13C-NMR

(CDC13) δ 197,6, 174,4, 172,1, 170,8, 136,7, 136,1, 135,1, 130,6, 129,2, 128,6, 127,7, 127,2, 125,8, 125,0, 64,9, 51,3, 51,2, 48,9, 48,4, 36,8, 36,4, 25,0, 24,9, 17,0; MS 15 (FAB) m/z 614 [M* + H], 596, 568.

Alkuaineanalyysi, laskennallinen tulos yhdisteelle C3oH35N307S2*CF3C02H: C 52,81; H 4,99; N 5,77; havaittu tulos: C 53,09; H 5,29; N 5,77.

Esimerkki 12 [ 20 4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(dietyyliami- no) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli) amino] -1,2,3,4,6,7,8,-12b-heksahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo·trifluoriasetaatti r 25 jfö

H\ H

o — V N \ 30 CH COOH ·ΟΓ3θθ2Η s- jj- ch2-/ o \ 76 106717

Kaavio C, vaihe d: [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[(1-ok-so-2(S)-(dietyyliamino)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]-bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteri fe 5 butyylibromiasetaattia (1 ekviv.) liuotetaan tetrahydrofu-raaniin ja seokseen lisätään dietyyliamiinia (2,2 ekviv.) ruiskulla. Reaktioseosta sekoitetaan huoneenlämmössä 2 tuntia, suodatetaan ja suodatinkakku pestään etyyliasetaatilla. Orgaaniset suodokset yhdistetään ja pestään kyl-10 Iäisellä natriumvetykarbonaatilla (2 x), vedellä (2 x) ja suolavedellä. Seos kuivataan (Na2S04), suodatetaan ja liuotin haihdutetaan vakuumissa. Öljymäinen jäännös otetaan talteen etyyliasetaattiin, liuos jäähdytetään jäissä ja siihen kuplitetaan vetykloridikaasua. Seosta sekoitetaan 15 huoneenlämmössä yön yli, ja se jäähdytetään ja suodatetaan, mistä saadaan dietyyliaminoetikkahapon hydrokloridi-suolaa öljynä (88 %) ; 1H-NMR (D20) δ 3,86 (s, 2), 3,17 (q, 4, J = 9 Hz), 1,17 (t, 6, J = 9 Hz).

Dietyyliaminoetikkahapon hydrokloridisuolaa (4,9 20 mmol) suspendoidaan dimetyyliformamidiin, josta liuenneet kaasut on poistettu (40 ml) , ja seokseen lisätään karbonyylidi-imidatsolia (0,477 g, 2,94 mmol). Reaktio-seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 1,5 tuntia. Seokseen lisätään liuos, joka sisältää [4S-[4α-7α (R*) , 12bP] ]-7-[ (1-: 25 okso-2(S)-tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b- oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karb-oksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (2,45 mmol) tetrahyd-rofuraanissa, josta liuenneet kaasut on poistettu, ja seosta sekoitetaan huoneenlämmössä yön yli. Seos laimenne-30 taan etyyliasetaatilla, pestään vedellä (2 x) ja suolavedellä, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan vakuumissa, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (77 %) .

"H-NMR (CDClj) δ 7,43, (d, 1, J = 6 Hz) , 7,16 - 7,35 (m, 12), 6,90 - 7,30 (m, 6), 6,59 (m, 1), 6,27 (s, 1), 35 6,19 (m, 1), 5,33 - 5,43 (m, 2), 4,28 (t, 1, J = 7,5 Hz), • i 77 1 0 6 7 1 7 3,25 - 3,42 (m, 3), 2,87 - 3,08 (m, 2), 2,31 - 2,70 (m, 7), 1,54 - 2,02 (m, 4). 1,07 (t, 6, J = 9 Hz); MS (CI, 70 eV) m/z 718 (M+ + H], 622, 605.

Kaavio A, vaihe d; [4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-[ (1-ok-5 so-2 (S) - (dietyyliamino) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli) ami no] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]-bentsatsepiini-4-karboksyylihappo -trifluoriasetaatti [4S- [4α-7α(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(dietyyliamino) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,-10 12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (1,86 mmol) ja anisolia (1,5 ml, ylimäärin) liuotetaan metyleenikloridiin (20 ml) , seos jäähdytetään -50 °C:een ja siihen lisätään trifluorietikkahappoa (3 ml) . Reaktioseosta sekoitetaan 15 -50 °C:ssa 2,5 tuntia, liuotin haihdutetaan vakuumissa ja trituroidaan heksaanilla (4 x) . Jäännös otetaan talteen mahdollisimman pieneen määrään metyleenikloridia ja saos-tetaan heksaanista (3 x) , mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (59 %).

20 ^-NMR .(CDC13) δ 7,85 (d, 1, J = 9 Hz) , 6,90 - 7,35 (m, 9), 5,64 - 5,80 (m, 1), 5,39 - 5,51 (m, 1) , 5,08 -5,18 (m, 1), 4,61 (dd, 1, J = 6, 10,5 Hz), 3,87 - 4,06 (m, 2), 3,32 - 3,48 (m, 2), 2,81 - 3,24 (m, 6), 2,28 - 2,56 (m, 2), 1,62 - 2,03 (m, 4), 1,18 (t, 6, J = 7,5 Hz) ; 25 19F-NMR (CDCI3) δ -76,3; MS (CI, 70 eV) m/z 552 [M+ + H], 439.

78 106717

Esimerkki 13 [4S-[4a-7a(R*), 12bp] ] -7- [ (l-okso-2(S)- (dietyy 1 iami-no)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,-12b-heksahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsiini[3,4-a][2]bents-5 atsepiini-4-karboksyylihappo·trifluoriasetaatti

hx .jö / 0 yJ

CH COOK «CF3C02H

15 -r—<3

Kaavio A, vaihe c: [4S-[4o-7a(R*),12bp]]-7-[(1-ok-so-2 (S) - (dietyyliamino) -asetyylitio-3-f enyylipropyyli) amino]-!,2,3,4,6,7,8, 12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsii-20 ni[3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylime- -tyyliesteri

Natriumhydridiä (175 mg 60-%:ista suspensiota, 4,0 mmol) suspendoidaan vedettömään dimetyyliformamidiin (4 ml) ja suspensio siirretään typpiatmosfääriin. Suspen-. 25 sioon kuplitetaan vetysulfidikaasua siihen asti, kunnes ainekset ovat liuenneet. Seokseen lisätään trifenyylime-tyylidietyyliamiinitioliasetaattia (4,0 mmol) ja sitä kuumennetaan varovasti 1,5 tuntia kuplittaen samalla typpeä liuoksen läpi, minkä tarkoituksena on edistää ylimääräisen 30 vetysulfidikaasun poistumista. Seokseen lisätään [4S-[4a- -t 7a(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(R)-bromi-3-fenyylipropyyli)ami- no]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[l,4]-oksatsiini [3, 4-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylime-tyyliesteriä (2,0 mmol) ja sitä sekoitetaan 2 tuntia. Seos 35 yhdistetään veteen, uutetaan etyyliasetaattiin, pestään a 79 106717 suolavedellä ja kuivataan (MgS04). Liuotin haihdutetaan vakuumissa ja puhdistetaan kromatografisesti, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

Kaavio A, vaihe d: [4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-[(1-ok-5 so-2(S)-(dietyyliamino)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)ami-no]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsii-ni[3,4-a][2] bent satsepi ini-4 -karboksyy 1 ihappo ♦ tri £ luori-asetaatti [4S- [4a-7a(R*), 12bp] ] -7- [ (l-okso-2 (S) - (dietyyliami-10 no) -asetyylitio-3-f enyylipropyyli) amino] -1,2,3,4,6,7,8,- 12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-oksatsiini[3,4-a] [2]bents-atsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (2,0 mmol), anisolia (0,5 ml) ja metyleenikloridia (6 ml) sekoitetaan keskenään. Suspensio siirretään typpiatmosfää-15 riin ja se jäähdytetään -50 °C:een. Seokseen lisätään tri-fluorietikkahappoa (3,0 ml) 1 minuutin aikana ja sen annetaan lämmetä huoneenlämpöön 2 tunnin aikana seosta samalla sekoittaen. Liuotin haihdutetaan vakuumissa, trituroidaan heksaanilla ja metyleenikloridilla ja kuivataan suuressa 20 vakuumissa, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

Esimerkki 14 [4S- [4a-7a(R* ) , 12bp] ] -7- [ (l-okso-2(S)-(dietyyliami-no) -asetyylitio-3-f enyylipropyyli) amino] -1,2,3,4,6,7,8,-12b-heksahydro-6-okso-lH-[1,4] -tiatsiini[3,4-a] [2]bents-. - 25 atsepiini-4-karboksyylihappo·trifluoriasetaatti

\ H

30 °v/N,^Vn ) / ° CH COOT *CF3C02H 1 • .

λ- O N_ 80 106717

Kaavio A, vaihe c: [4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-[(1-ok-so-2(S)-(dietyyliamino)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-tiatsiini-[3,4-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyy-5 liesteri

Natriumhydridiä (175 mg 60-%:ista suspensiota, 4,0 mmol) suspendoidaan vedettömään dimetyyliformamidiin (4 ml) ja suspensio siirretään typpiatmosfääriin. Suspensioon kuplitetaan vetysulfidikaasua siihen asti, kunnes 10 ainekset ovat liuenneet. Seokseen lisätään trifenyylime-tyylidietyyliamiinitioliasetaattia (4,0 mmol) ja sitä kuumennetaan varovasti 1,5 tuntia kuplittaen samalla typpeä liuoksen läpi, minkä tarkoituksena on edistää ylimääräisen vetysulfidikaasun poistumista. Seokseen lisätään [4S- [4a-15 7a(R*),12bP]]-7- [ (l-okso-2(R)-bromi-3-fenyylipropyyli)ami no] -l,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-tiatsiini-[3,4-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyy-liesteriä (2,0 mmol) ja sitä sekoitetaan 2 tuntia. Seos yhdistetään veteen, uutetaan etyyliasetaattiin, pestään 20 suolavedellä ja kuivataan (MgSOj . Liuotin haihdutetaan vakuumissa ja jäännös puhdistetaan kromatografisesti, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

Kaavio A, vaihe d: [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[(1-ok-so-2(S)-(dietyyliamino)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)ami-. 25 no]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-tiatsiini- [3,4-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo -trifluoriase-taatti [4S- [4α-7α(R*),12bP]]-7-[(l-okso-2(S)-(dietyyliamino) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,-30 12b-oktahydro-6-okso-lH-[1,4]-tiatsiini[3,4-a] [2]bentsat-sepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (2,0 mmol), anisolia (0,5 ml) ja metyleenikloridia (6 ml) sekoitetaan keskenään. Suspensio siirretään typpiatmosfääriin ja se jäähdytetään -50 °C:een. Seokseen lisätään tri-35 fluorietikkahappoa (3,0 ml) 1 minuutin aikana ja sen anne- • r .

81 106717 taan lämmetä huoneenlämpöön 2 tunnin aikana seosta samalla sekoittaan. Liuotin haihdutetaan vakuumissa, trituroidaan heksaanilla ja metyleenikloridilla ja kuivataan suuressa vakuumissa, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä.

5 Esimerkki 15 [4S- [4a- 7a(R*), 12bp] ] -7- [ (1 -okso-2 ( S) - (4-metyyli- 1,4-piperatsiini)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]-bentsatsepiini-4-karboksyylihappo·trifluoriasetaatti 10

. .JO

C5 COOH «CF3C02H

/n)^ \ / \ \U/ S-jj-CH2-N n-ch3 o . \_/ 20

Kaavio C, vaihe d: [4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-[(1-ok-so-2(S)-(4-metyyli-l,4-piperatsiini)-asetyylitio-3-fenyy-lipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyri-diini [ 2,1-a] [ 2 ] bentsatsepiini -4-karboksyylihappodi f enyy li -25 metyyliesteri N-metyylipiperatsiinia (5,0 ml, 45,09 mmol) liuotetaan dietyylieetteriin tulpalla suljetussa pullossa ja seosta käsitellään laimentamattomalla etyylibromiasetaa-tilla (3,012 g, 18,036 mmol). Reaktioseosta sekoitetaan 30 huoneenlämmössä yön yli, suodatetaan ja suodatinkakku pes- : tään dietyylieetterillä. Orgaaniset suodokset yhdistetään ja liuotin haihdutetaan vakuumissa, mistä saadaan vaaleankeltaista öljyä. Tämä otetaan talteen veteen (60 ml) ja seosta kuumennetaan 95 eC:ssa 4 tuntia, seoksen annetaan 35 jäähtyä huoneenlämpöön ja sitä sekoitetaan yön yli. Liuo- 82 106717 tin haihdutetaan vakuumissa ja jäännös liuotetaan aseto-nitriiliin ja liuotin haihdutetaan vakuumissa (kaksi kertaa) atseotrooppisen seoksen muodostamiseksi jäljellä olevan veden kanssa. Seos liuotetaan mahdollisimman pieneen 5 määrään metanolia, laimennetaan dietyylieetterillä ja asetetaan pakastimeen. Muodostuvat kiteet eristetään dekan-toimalla supernatantti ja ne pestään dietyylieetterillä. Emäliuoksesta saadaan vielä kaksi erää kiteitä, jotka ovat aikaansaatua 4-metyylipiperatsiini-l-etikkahappoa 10 (2,345 g, 82 %) ; sp. 158 - 160 °C (kirjallisuusarvo 159,5 - 161 °C) , 1H-NMR (D20) 6 3,98 (s, 2), 3,81 - 3,32 (m, 8), 2,89 (s, 3).

4-metyylipiperatsiini-l-etikkahappoa (4,9 mmol) suspendoidaan dimetyyliformamidiin, josta liuenneet kaasut 15 on poistettu (40 ml), ja seokseen lisätään karbonyylidi-imidatsolia (0,477 g, 2,94 mmol). Reaktioseosta sekoitetaan huoneenlämmössä 1,5 tuntia. Seokseen lisätään liuos, joka sisältää [4S- [4α-7α(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,l2b-oktahydro-6-okso-20 pyridiini [2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodife-nyylimetyyliesteriä (2,45 mmol) tetrahydrofuraanissa, josta liuenneet kaasut on poistettu ja seosta sekoitetaan huoneenlämmössä yön yli. Seos laimennetaan etyyliasetaatilla, pestään vedellä (2 x) ja suolavedellä, kuivataan t' ' 25 (MgS04) ja liuotin haihdutetaan vakuumissa, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (90 %).

^-NMR (CDC13) δ 7,41, (d, 1, J = 6,7 Hz), 7,33 -6,92 (m, 17), 6,61 (m, 1), 6,27 (s, 1), 5,56 (quint, 1, J = 6,3 Hz), 5,37 (m, 2), 4,29 (t, 1, J = 7,6 Hz), 3,41 -30 3,22 (m, 4), 3,02 (dd, 1, J = 7,8, 13,8 Hz), 2,66 - 2,34 V " (m, 10), 2,32 (s, 3), 2,03 - 1,66 (m, 6) 13C-NMR (CDC13) δ 171,67, 169,76, 169,68, 158,79, 141,38, 139,92, 139,77, 139,71, 139,01, 136,48, 135,38, 130,75, 130,21, 129,00, 128,25, 128,16, 127,76, 127,71, 127,31, 126,94, 126,86, 35 126,80, 125,35, 124,63, 124,12, 123,78, 123,02, 122,14, • 83 106717 114,00, 78,22, 55,20, 53,40, 51,05, 51,02, 49,95, 48,43, 36,79, 35,74, 33,41, 25,02, 24,91, 17,12; MS (CI/CH4) m/z 745 [M+ + H, peruspiikki] , 605, 572, 405, 203, 187, 175, 159, 113.

5 Kaavio A, vaihe d: [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[(1-ok- so-2(S)-(4-metyyli-l,4-piperatsiini)-asetyylitio-3-fenyy-lipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyri-diini[2,l-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo -trifluo-riasetaatti 10 [4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-metyyli- 1,4-piperatsiini)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]bent-sat sepi ini- 4 -karboksyylihappodifenyy lime tyylies teriä (500 mg, 0,690 mmol) ja anisolia (0,5 ml) liuotetaan mety-15 leenikloridiin (15 ml) . Seokseen lisätään trifluorietikka-happoa (1,0 ml) ja sitä sekoitetaan huoneenlämmössä 2 tuntia. Haihtuvat yhdisteet haihdutetaan typpivirrassa noin 35 °C:ssa. Jäännös liuotetaan metyleenikloridiin ja seos haihdutetaan uudelleen samalla tavalla. Materiaali otetaan 20 talteen metyleenikloridiin ja se laimennetaan dietyylieet-terillä, jota käytetään noin nelinkertainen määrä sen omaa tilavuutta. Tulokseksi saadun saostuman annetaan laskeutua yön yli, supernatantti dekantoidaan ja kiinteä aine pestään 4 kertaa dietyylieetterillä dekantoiden supernatantti / ' 25 jokaisella kerralla. Jäännös kuivataan ensin ilmassa ja sitten suuressa vakuumissa, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (382 mg, 69 %).

^-NMR (CDC13) δ 7,56 (d, 1, J = 8,6 Hz), 7,37 - 6,98 (m, 7), 5,51 (m, 1), 5,38 (m, 1), 5,04 (m, 1), 4,33 30 (t, 1, J = 8,4 Hz), 3,55 (dd, 1, J = 6,2, 16,9 Hz), 3,49 - • V ' 3,25 (m, 3), 3,02 (dd, 1, J = 9,3, 13,8 Hz), 2,94 - 2,79 (m, 8), 2,67 (s, 3), 2,59 - 2,30 (m, 2), 2,01 - 1,70 (m, 6); 13C-NMR (CDCI3) δ 196,49, 173,44, 171,94, 170,13, 136,88, 136,28, 135,72, 130,51, 129,33, 129,18, 128,53, 35 128,46, 127,52, 127,17, 125,82, 125,14, 64,56, 53,07, a .

84 106717

51,90, 51,31, 49,54, 49,49, 48,87, 48,18, 43,26, 36,67, 36,32, 25,18, 25,13, 17,13; 19F-NMR (CDC13) δ -76,1; MS

(CI/CH4) m/z 579 [M+ + H], 517, 439, 406, 377, 343, 296, 257, 199, 187, 175, 159 (peruspiikki), 115.

5 Alkuaineanalyysi, laskennallinen tulos yhdisteelle C31H38N4°5S·CF3C02H: c 57,22; H 5,67; N 8,09; havaittu tulos: C 57,15; H 5,83, N 7,73.

Esimerkki 16 [4S- [4a-7a(R*), ] -7- [ (l-okso-2(S) - (1-imidatso- 10 liini)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,-8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo·trifluoriasetaatti N y$

°T

CH COOH *CF3C02H

20 ir^-/ \ \Cj/ S-|j-CH2-N^

Kaavio C, vaihe d: [4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2 (S) - (1-imidatsoliini) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli)-/ ' 25 amino]-l,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,l-a]- [ 2 ] bentsatsepiini-4-karboksyylihappodif enyylimetyyliesteri t-butyylibromiasetaattia (1 ekviv.) liuotetaan tet-rahydrofuraaniin ja seokseen lisätään imidatsolia (2,2 ekviv.). Reaktioseosta sekoitetaan huoneenlämmössä 2 tun-30 tia, se suodatetaan ja suodatinkakku pestään etyyliasetaa-*· tiliä. Orgaaniset suodokset yhdistetään ja pestään kylläi sellä natriumvetykarbonaatilla (2 x), vedellä (2 x) ja suolavedellä. Seos kuivataan (Na2S04), suodatetaan ja liuotin haihdutetaan vakuumissa. Öljymäinen jäännös otetaan 35 talteen etyyliasetaattiin, jäähdytetään jäissä ja liuok- 106717 85 seen kuplitetaan vetykloridikaasua. seosta Sekoitetaan huoneenlämmössä yön yli, jäähdytetään ja suodatetaan, mistä saadaan 1-imidatsoliinietikkahapon hydrokloridisuolaa (57 %) ; sp. 195 - 205 °C (haj .) (kirjallisuusarvo 193 -5 195 °C, EtOH); XH-NMR (DaO) δ 8,66 (s, 1), 7,37 (d, 2, J = 3,9 Hz), 4,99 (S, 2).

1-imidatsoliinietikkahapon hydrokloridisuolaa (4,9 mmol) suspendoidaan dimetyyliformamidiin, josta liuenneet kaasut on poistettu (40 ml) , ja seokseen lisätään 10 karbonyylidi-imidatsolia (0,477 g, 2,94 mmol). Reaktio-seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 1,5 tuntia. Seokseen lisätään liuos, joka sisältää [4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7- [ (1-okso-2(S)-tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karb-15 oksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (2,45 mmol) tetrahyd-rofuraanissa, josta liuenneet kaasut on poistettu, ja seosta sekoitetaan huoneenlämmössä yön yli. Seos laimennetaan etyyliasetaatilla, pestään vedellä (2 x) ja suolavedellä, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan vakuumis-20 sa, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (99 %).

1H-NMR (CDClj) δ 7,52 (s, 1), 7,42 (d, 1, J = 8,1 Hz), 7,34 - 6,91 (m, 19), 6,66 (m, 1), 6,32 (s, 1), 5,54 (quint, 1, J = 6,9 Hz), 5,36 (m, 2), 4,82 (s, 2, 4,37 (t, 1, J = 8,4 Hz), 3,38 - 3,28 (m, 2), 3,03 (dd, 1, J = . ; 25 8,9, 13,8 Hz), 2,54 (dd, 1, J = 13,1, 16,9 Hz), 2,97 - 2,86 (m, 2), 2,03 - 1,68 (m, 5); 13C-NMR (CDC13) δ 193,80, 171,56, 169,55, 168,35, 139,88, 139,01, 138,23, 136,80, 136,35, 135,31, 130,76, 130,18, 129,23, 128,51, 128,31, 128,25, 127,82, 127,77, 127,43, 127,15, 126,99, 126,84, 30 125,51, 124,69, 120,21, 78,26, 55,23, 51,16, 51,08, 49,08, - ' 48,58, 37,05, 36,54, 25,02, 24,94, 17,13; MS (CI/CH4) m/z 713 [M+ + H], 605, 545, 501, 437, 406, 393, 359, 257, 217, 184, 167 (peruspiikki), 155, 127.

106717

Kaavio A, vaihe d: [4S-[4α-7α(R*),12Ββ]]-7-[(1-ok-so-2 (S) - (1-ixnidatsoliini) asetyylitio-3-fenyylipropyyli) -amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a]-[2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo -trifluoriasetaatti 5 [4S- [4α-7α(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(l-imidatso- liini)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,-8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (685 mg, 0,962 mmol) ja anisolia (0,5 ml) liuotetaan metyleenikloridiin 10 (15 ml). Seokseen lisätään trifluorietikkahappoa (1,0 ml) ja sitä sekoitetaan huoneenlämmössä 2 tuntia. Haihtuvat yhdisteet haihdutetaan typpivirrassa noin 35 °C:ssa. Jäännös liuotetaan metyleenikloridiin ja seos haihdutetaan uudelleen samalla tavoin. Materiaali otetaan talteen mety-15 leenikloridiin ja laimennetaan dietyylieetterillä, jota käytetään noin nelinkertainen määrä tämän omasta tilavuudesta. Tulokseksi saadun saostuman annetaan laskeutua yön yli, supernatantti dekantoidaan ja kiinteä aine pestään 4 kertaa dietyylieetterillä dekantoiden supernatantti kul-20 lakin kerralla. Jäännös kuivataan ensin ilmassa ja sitten suuressa vakuumissa, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä valkeana jauheena (518 mg, 82 %).

^-NMR (CDClj) δ 8,67 (br s, 1), 7,59 (br s, 1), 7,33 - 6,99 (m, 10), 5,55 (m, 1), 5,38 (m, 1), 5,11 (br d, . 25 1, J = 18,4 Hz), 4,99 (br d, 1, J = 18,4 Hz), 4,94 (m, 1), 4,47 (br t, 1, J = 8,1 Hz), 3,44 - 3,30 (m, 2), 3,06 (br dd, 1, J = 10,8, 14,5 Hz), 2,81 (m, 1), 2,49 (m, 1), 2,28 (m, 1), 2,01 - 1,68 (m, 5); 13C-NMR (CDC13) δ 198,44, 172,87, 171,71, 169,62, 137,50, 136,78, 136,20, 130,40, 30 129,21, 128,43, 127,28, 126,94, 125,68, 125,18, 65,60, *· 53,49, 52,12, 51,43, 49,74, 48,80, 47,65, 43,06, 36,71, 36,69, 25,34, 17,34,; 19F-NMR (CDCl3) δ -75,9; MS (CI/CHj m/z 547 [M+ + H], 529, 485, 449, 439, 421, 405, 377, 376, 343, 301, 274, 239, 227, 167, 155, 127, 115 (peruspiikki).

• c -- 87 106717

Esimerkki 17 [4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-[ (l-okso-2 (S) - ( 4-dimetyyli-aminobutyryylit io-3- f enyylipropyy li) amino ]-1,2,3,4,6,7,8,-12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-5 karboksyylihappo·trifluoriasetaatti \.JÖ 10 O 5^/N '""'Λ / 0 yy

COOH *CF3C02H

<Q) S- jj- (CH2)3-N(CH3)2 15 o

Suspendoidaan 4-dimetyyliaminovoihappoa (4,9 mmol) dimetyyliformamidiin, josta liuenneet kaasut on poistettu (40 ml), ja seokseen lisätään karbonyylidi-imidatsolia 20 (0,477 g, 2,94 mmol). Reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämmössä 1,5 tuntia. Seokseen lisätään liuos, joka sisältää [4S-[4α-7α(R*), 120β] ] -7- [ (l-okso-2(S)-tio-3-fenyyli-propyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyri-diini[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyyli-: 25 metyyliesteriä (2,45 mmol) tetrahydrofuraanissa, josta liuenneet kaasut on poistettu, ja seosta sekoitetaan huoneenlämmössä yön yli. Seos laimennetaan etyyliasetaatilla, pestään vedellä (2 x) ja suolavedellä, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan vakuumissa. Jäännös puhdistetaan kro-30 matografisesti silikageelissä (heksaanin ja etyyliasetaa tin seos, seossuhteet 1:1 - 3:7), mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (60 %).

IR (KBr) 3384, 3062, 3030, 2942, 2868, 1735, 1680, 1651, 1495, 1438, 1421, 1199, 1185, 1154, 748 cm-1; Hi-NMR 35 (CDC13) 6 7,44, (d, 1, J - 6,3 Hz), 7,15 - 7,36 (m, 12), 88 1 0 6 7 1 7 6,87 - 7,13 (m, 6), 6,62 (m, 1), 6,28 (s, 1), 5,57 (m, 1), 5,31 - 5,43 (m, 2), 4,38 (t, 1, J = 7,5 Hz), 3,29 - 3,44 (m, 2), 3,05 (dd, 1, J = 10,5, 14,1 Hz), 2,65 (t, 2, J =

7,8 Hz), 2,54 (dd, 1, J = 12, 18 Hz), 2,43 (m, 2), 2,29 5 (t, J = 7,2 Hz), 2,21 (s, 6), 1,63 - 2,02 (m, 6) ; 13C-NMR

(CDClj) δ 197,9, 171,6, 169,7, 169,4, 140,0, 139,1, 137,5, 136.6, 135,4, 130,8, 129,3, 128,4, 128,3, 128,2, 127,8, 127.7, 127,4, 127,0, 126,91 125,4, 124,7, 78,2, 58,2, 51,1, 51,0, 48,5, 48,0, 45,1, 41,7, 36,9, 36,5, 25,0, 10 24,9, 23,2, 17,1; MS (FAB) M/Z 718 [M+ + H], 267, 167; HRMS, laskennallinen tulos yhdisteelle C43H48N305S [M+ + H] : 718,3315, havaittu tulos: 718,3317.

Kaavio A, vaihe d: [4S-[4α-7α(R*),12bβ]]-7-[(1-ok- so-2(S)-(4-dimetyyliaminobutyryylitio)-asetyylitio-3-fe-15 nyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso- pyridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihapon tri-fluoriasetaattisuola [4S- [4α-7α(R*),12bP]]-7-[(l-okso-2(S)-(4-dimetyyli-aminobutyryylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,-20 12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4- karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (1,86 mmol) ja anisolia (1,5 ml, ylimäärin) liuotetaan metyleenikloridiin (20 ml) ja seokseen lisätään trifluorietikkahappoa (3 ml). Reaktioseosta sekoitetaan 2,5 tuntia, liuotin haihdutetaan : 25 vakuumissa ja jäännös trituroidaan heksaanilla (4 x).

Jäännös otetaan talteen mahdollisimman pieneen määrään metyleenikloridia ja tuote saostetaan heksaanista (3 x) , mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (79 %).

IR (KBr) 3394, 3061, 3030, 2951, 1731, 1678, 1651, 30 1495, 1441, 1199, 1141 cm-1; 1H-NMR (CDC13) δ 10,68 (br s, 1) 7,59 (m, 1), 6,89 - 7,60 (m, 9), 5,58 (m, 1), 5,42 (m, 1), 5,02 (s, 1), 4,39 (m, 1), 3,26 - 3,67 (m, 2), 2,88 -3,22 (m, 3), 2,20 - 2,88 (m, 11), 1,54 - 2,19 (m, 6); 19F-NMR (CDC13) δ -76,2; 13C-NMR (CDCl3) δ 197,2, 173,1, 35 172,0, 169,5, 137,2, 136,4, 130,5, 129,3, 128,5, 127,5, 106717 89 127,1, 125,8, 125,1, 56,3, 51,9, 51,2, 48,8, 48,2, 43,0, 42,6, 39,8, 36,4, 36,1, 25,3, 25,2, 19,8, 17,1; MS (FAB) m/z 552 [M+ + H].

Esimerkki 18 5 [4S- [4a-7a(R*) ,12bp] ] -7- [ (l-okso-2(S)-(1-pyrroli- diini)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,-8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo·trifluoriasetaatti 10 (l Ί \ ηΓΥη

/ ° W

15 CH COOH #CF3C02H

{Ο)" S- CHj-/ 0 \_ 1

Kaavio C, vaihe d: [4S-[4o-7o(R*),12bβ]]-7-[(l-ok- so-2 (S) - (1-pyrrolidiini) -asetyylitio-3-f enyylipropyyli) -amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a] - [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteri t-butyylibromiasetaattia (1 ekviv.) liuotetaan tet-: -- 25 rahydrofuraaniin ja seokseen lisätään ruiskulla pyrroli-

• I

diiniä (2,2 ekviv.). Reaktioseosta sekoitetaan huoneenlämmössä 2 tuntia, se suodatetaan ja suodatinkakku pestään etyyliasetaatilla. Orgaaniset suodokset yhdistetään ja seos pestään kylläisellä natriumvetykarbonaatilla (2 x), 30 vedellä (2 x) ja suolavedellä. Seos kuivataan (Na2S04), suodatetaan ja liuotin haihdutetaan vakuumissa. Öljymäinen jäännös otetaan talteen etyyliasetaattiin, seos jäähdytetään jäissä ja liuokseen kuplitetaan vetykloridikaasua. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä yön yli, se jäähdyte- 35 tään ja suodatetaan, mistä saadaan 1-pyrrolidiinietikka- 90 106717 happoa (86 %) ; sp. 188 - 190 °C; ^-NMR (D20) 6 3,93 (s, 2), 3,50 - 3,64 (m, 2), 2,97 - 3,04 (m, 2), 1,74 - 2,03 (m, 4) .

1-pyrrolidiinietikkahappoa (4,9 mmol) suspendoidaan 5 dimetyyliformamidiin, josta liuenneet kaasut on poistettu (40 ml) , ja seokseen lisätään karbonyylidi-imidatsolia (0,477 g, 2,94 mmol). Reaktioseosta sekoitetaan huoneenlämmössä 1,5 tuntia. Seokseen lisätään liuos, joka sisältää [4S- [4α-7α (R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-tio-3-fenyyli-10 propyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridii- ni[2,l-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyyli-metyyliesteriä (2,45 mmol) tetrahydrofuraanissa, josta liuenneet kaasut on poistettu, ja seosta sekoitetaan huoneenlämmössä yön yli. Seos laimennetaan etyyliasetaatilla, 15 pestään vedellä (2 x) ja suolavedellä, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan vakuumissa, mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (60 %) . 1H-NMR (CDC13) δ 7,42 (d, 1, J = 7,5 Hz), 7,16 - 7,38 (m, 12), 6,90 - 7,12 (m, 6), 6,59 (m, 1), 6,26 (s, 1), 5,56 (m, 1), 5,32 - 5,42 (m, 2), 4,31 (t, 20 1, J = 7,5 Hz), 3,28 - 3,45 (m, 4), 3,03 (dd, 1, J = 7,5, 12 Hz), 3,60 - 3,76 (m, 4), 2,32 - 2,69 (m, 9), 1,57 - 2,02 (m, 10).

Kaavio A, vaihe d: [4S-[4α-7α(R*),12bβ]]-7-[(1-ok-so-2(S)-(1-pyrrolidiini)asetyylitio-3-fenyylipropyyli)ami-• 25 no]-l,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,l-a][2]- bentsatsepiini-4-karboksyylihapon trif luoriasetaattisuola

Liuotetaan [4S- [4a-7a(R*),12bβ]]-7-[(l-okso-2(S)-(1-pyrrolidiini)asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,-3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,l-a] [2]bentsat-30 sepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (1,86 .* mmol) ja anisolia (1,5 ml), ylimäärin) metyleenikloridiin (20 ml), seos jäähdytetään -50 °C:een ja siihen lisätään trifluorietikkahappoa (3 ml) . Reaktioseosta sekoitetaan -50 °C:ssa 2,5 tuntia, liuotin haihdutetaan vakuumissa ja 3 5 jäännös trituroidaan heksaanilla (4 x) . Jäännös otetaan 91 106717 talteen mahdollisimman pieneen määrään metyleenikloridia * ja saostetaan heksaanlsta (3 x), mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (86 %).

Hi-NMR (CDC13) δ 7,85 (d, 1, J = 7,5 Hz), 6,87 - 5 7,39 (m, 9), 5,65 - 5,80 (m, 1), 5,38 - 5,49 (m, 1), 4,98 - 5,11 (m, 1), 4,63 (dd, 1, J - 7,5, 9 Hz), 3,95 - 4,11 (m, 2), 3,29 - 3,48 (m, 4), 2,76 - 3,11 (m, 4), 2,23 - 2,54 (m, 2), 1,59 - 2,09 (m, 8); 19F-NMR (CDC13) 6 -76,1; 13C-NMR (CDCI3) 6 190,5, 172,8, 172,1, 168,6, 10 136,6, 136,5, 135,7, 130,6, 129,4, 128,5, 127,3, 127,2, 125,7, 125,0, 55,9, 51,5, 51,1, 49,5, 48,8, 37,2, 36,6, 25,4, 25,2, 17,2; MS (FAB) m/z 550 [M+ + H].

Esimerkki 19 [4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-[(1-okso-2(S)-3-pyridinyy-15 1iasetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b- oktahydro-6-oksopyridiini[2,l-a][2]bentsatsepiini-4-karb-oksyylihappo·trifluoriasetaatti 20 \ / <r15 \ ; 25 CH COOH ·0Ρ30Ο2Η

Vt#

O M

[4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-tio-3-fenyy-30 lipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyri- diini[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyy-limetyyliesteriä (1,20 g, 1,98 mmol) ja nikotiinihappoa (0,244 g, 1,98 mmol) suspendoidaan metyleeniklorIdiin (50 ml). Seokseen lisätään EDCI:tä (0,418 g, 2,18 mmol). 35 Reaktioseosta sekoitetaan huoneenlämmössä yön yli. Seos 106717 92 laimennetaan metyleenikloridilla, ja se pestään kylläisellä natriumvetykarbonaatilla, vedellä, 0,5-molaarisella kloorivetyhapolla, vedellä ja suolavedellä. Seos kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan vakuumissa. Jäännös puhdis-5 tetaan kromatografisesti silikageelissä (etyyliasetaatti), mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä amorfisena kiinteänä aineena (0,93 g, 63 %) .

IR (KBr) 3430, 3062, 3031, 2943, 1736, 1656, 1584, 1495, 1438, 1419, 1219, 1155, 912 cm·1; ^-NMR (CDC13) 10 δ 9,21 (d, 1, J = 1,8 Hz), 8,82 (dd, 1, J = 1,8, 5,1 Hz), 8,23 (m, 1), 7,55 (d, 1, J = 6,6 Hz), 7,42 (m, 1), 7,20 - 7,37 (m, 12), 6,83 - 7,20 (m, 6), 6,57 (m, 1), 6,24 (s,' 1), 5,59 (m, 1), 5,32 - 5,43 (m, 2), 4,63 (t, 1, J = 7,8 Hz), 3,46 (dd, 1, J = 7,8, 14,4 Hz), 3,38 (dd, 1, J = 6,3, 15 18 Hz), 3,18 (dd, 1, J = 7,8, 14,4 Hz), 2,35 - 2,63 (m, 3), 1,59 - 2,07 (m, 4); 13C-NMR (CDCl3) δ 189,8, 171,8, 170,0, 169,4, 154,5, 148,9, 140,1, 139,2, 137,5, 136,7, 135,5, 135,0, 132,1, 131,0, 129,5, 128,7, 128,5, 128,4, 127,9, 127,8, 127,6, 127,2, 127,1, 127,0, 125,6, 124,9, 20 123,8, 78,3, 51,0, 50,9, 48,5, 48,1, 36,8, 36,2, 24,8, 16,9; MS (CI, 70 eV) m/z 710 [M+ + H], 542, 498, 167, 140, 106; HRMS, laskennallinen tulos yhdisteelle C43H40N3O5S: 710,2689, havaittu tulos: 710,2680.

Kaavio A, vaihe d: [4S-[4a-7a (R*) ,12Β>β] ]-7-[ (1-ok- • 25 so-2(S)-3-pyridinyyliastyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]- 1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a] [2]-bentsatsepiini-4-karboksyylihappo -trifluoriasetaatti [4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-3-pyridinyy-1iasetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-30 oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a] (2]bentsatsepiini-4-karb- . oksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (1,86 mmol) ja aniso- lia (1,5 ml, ylimäärin) liuotetaan metyleenikloridiin (20 ml) ja seokseen lisätään trifluorietikkahappoa (3 ml) . Reaktioseosta sekoitetaan 2,5 tuntia, liuotin haihdutetaan 35 vakuumissa ja jäännös trituroidaan heksaanilla (4 x).

106717 93 Jäännös otetaan talteen mahdollisimman pieneen määrään me-tyleenikloridia ja seostetaan heksaanista (3 x), mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (96·%).

IR (KBr) 3394, 3064, 3033, 2950, 1729, 1669, 1517, 5 1496, 1444, 1190 cm-1; 1H-NMR (CDC13) δ 9,14 (s, 1), 8,87

(dd, 1, J = 1,2, 4,5 Hz), 8,51 (d, 1, J = 3,9 Hz), 7,73 (m, 2), 6,79 - 7,46 (m, 9), 5,63 (m, 1) 5,43 (m, 1), 5,15 (m, 1), 4,66 (t, 1, J = 7,5 Hz), 3,33 - 3,58 (m, 2), 3,17 (dd, 1, J - 8,4, 14,1 Hz), 2,73 - 2,91 (m, 1), 2,24 - 2,58 10 (m, 1), 1,64 - 2,08 (m, 4); 19F-NMR (CDC13) 6 -76,9; 13C-NMR

(CDC13) 6 187,6, 173,9, 171,9, 169,2, 149,3, 144,5, 139,0, 136,6, 136,3, 135,3, 133,6, 130,5, 129,2, 128,6, 127,4, 127,3, 125,6, 125,5, 124,9, 51,1, 51,0, 49,2, 48,8, 36,9, 36,5, 25,0, 24,9, 17,1; MS (FAB) m/z 544 [M* + H], 498; 15 HRMS, laskennallinen tulos yhdisteelle C30H30N3O5S [M* + H]; 544,1906, havaittu tulos: 544,1889.

Esimerkki 20 [4S-[4a-7a(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-3-dimetyyli-aminobentsoyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,-20 8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4- karboksyylihappo·trifluoriasetaatti \

♦ 25 \ \ H

ΥΉ>

CH COOH #CF3C02H

.... ” ©τ' ° N(CH3)j 94 106717

Kaavio C, vaihe d: [4S-[4α-7α(R*),12bP]]-7-[(1-ok-so-2(S)-3-dimetyyliaminobentsoyylitio-3-fenyylipropyyli)-amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a]-[2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteri 5 3-dimetyyliaminobentsoehappoa (0,451 g, 2,73 mmol) ja trietyyliamiinia (0,38 ml) liuotetaan metyleeniklori-diin (50 ml) ja seos jäähdytetään -20 °C:een. Seokseen lisätään 2-fluori-l-metyylipyridiini-p-tolueenisulfo- naattia (0,773 g, 2,73 mmol). Reaktioseosta sekoi-10 tetaan -20 °C:ssa 1 tunnin ajan, siihen lisätään kiinteää [4S-(4α-7α(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-tio-3-fenyylipropyy-li)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini-[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyy-liesteriä (1,5 g, 2,48 mmol) ja trietyyliamiinia (0,38 ml, 15 2,73 mmol). Kylmähaude poistetaan ja seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 2,5 tuntia, seos laimennetaan metyleeni-kloridilla, pestään vedellä (2 x) ja suolavedellä. Seos kuivataan (MgS04) , liuotin haihdutetaan vakuumissa ja jäännös puhdistetaan kromatografisesti silikageelissä (heksaa-20 nin ja etyyliasetaatin seos, seossuhteet 7:3 - 6,5:3,5), mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (1,38 g, 70 %).

IR (CHC13) 3385, 3067, 3034, 3011, 2949, 1734, 1655, 1601, 1497, 1437, 1356, 1198, 1157, 922 cm'1; ^-NMR (CDCl3) δ 7,58 (d, 1, J = 9 Hz), 6,85 - 7,42 (m, 18), 6,48 (d, 1, 25 J = 12 Hz), 6,19 (s, 1), 5,58 (m, 1), 5,37 (m, 2), 4,59 (t, 1, J = 7,5 Hz), 3,45 (dd, 1, J = 9, 15 Hz), 3,34 (dd, 1, J = 6, 16,5 Hz), 3,15 (dd, 1, J = 7,5, 13,5 Hz), 2,98 (s, 6), 2,35 - 2,49 (m, 3), 1,63 - 2,02 (m, 4); 13C-NMR (CDClj) δ 191,5, 171,5, 169,8, 169,7, 150,5, 140,0, 139,0, 30 137,8, 137,1, 136,7, 135,3, 130,8, 129,3, 129,2, 128,4, 128,3, 128,2, 127,7, 127,6, 127,3, 126,9, 126,8, 125,3, 124,6, 117,5, 115,6, 110,4, 78,4, 51,0, 50,9, 48,5, 47,6, 40,4, 36,8, 36,2, 25,0, 17,1; MS (FAB) m/z 752 [M+ + H] , 587, 167.

95 106717

Alkuaineanalyysi, laskennallinen tulos yhdisteelle C46H4SN305S *0,3 H20: C 72,95; H 6,07; N 5,55; havaittu tulos: C 72,61, H 6,07; N 5,32.

Kaavio A, vaihe d: [4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-[(1-ok-5 so-2(S)-3-dimetyyliaminobentsoyylitio-3-fenyylipropyyli)- amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a]-[2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo -trifluoriasetaatti [4S- [4α-7α(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-3-dimetyyli-aminobentsoyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,-10 8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a] [2]bentsatsepiini- 4-karboksyylihappodifenyylimetyyliesteriä (1,86 mmol) ja anisolia (1,5 ml, ylimäärin) liuotetaan metyleenikloridiin (20 ml) ja seokseen lisätään trifluorietikkahappoa (3 ml). Reaktioseosta sekoitetaan 2,5 tuntia, liuotin haihdutetaan 15 vakuumissa ja trituroidaan heksaanilla (4 x) . Jäännös otetaan talteen mahdollisimman pieneen määrään metyleeniklo-ridia ja saostetaan heksaanista (3 x), mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (94 %) .

IR (CDC13) 3374, 3065, 3032, 2953, 1780, 1759, 1721, 20 1657, 1601, 1497, 1441, 1233, 1169 cm'1; Ή-NMR (CDCl3) 6 7,71 - 7,83 (m, 2), 7,66 (d, 1, J = 6,6 Hz), 7,42 - 7,59 (m, 2), 7,17 - 7,40 (m, 5), 6,85 - 7,17 (m, 4), 5,63 (m, 1), 5,41 (m, 1), 5,12 (m, 1), 4,57 (t, 1, J = 7,5 Hz), 3,35 - 3,55 (m, 2), 3,17 (m, 1), 3,09 (s, 6), 2,74 (dd, 1, ; 25 J = 12,9, 17,1 Hz), 2,21 - 2,55 (m, 2), 1,62 - 2,05 (m, 4); 19F-NMR (CDC13) δ -76,18; 13C-NMR (CDC13) δ 190,2, 173,9, 171,9, 169,8, 146,3, 137,8, 137,1, 136,4, 135,3, 130,6, 130,5, 129,3, 128,6, 127,4, 127,1, 125,6, 124,9, 124,1, 123,4 115,7, 51,0, 48,7, 48,5, 44,2, 36,8, 36,5, 25,1, 30 25,0, 17,1; MS (CI, 70 eV) m/z 586 [M+ + H], 182, 166.

. « 96 106717

Esimerkki 21

Kaavio C, vaihe d ja kaavio A, vaihe d: [4S-[4a-7a-(R*),12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-(2-pyrrolidiini)-asetyylitio- 3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-5 oksopyridiini[2,l-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihap-po*trifluoriasetaatti hx , jö °y

CH COOH «CFaCC^H

o ή N-t-butyylioksikarbonyyliproliinia (4,9 mmol) sus-20 pendoidaan dimetyyliformamidiin, josta liuenneet kaasut on poistettu (40 ml), ja seokseen lisätään karbonyylidi-imi-datsolia (0,477 g, 2,94 mmol). Reaktioseosta sekoitetaan huoneenlämmössä 1,5 tuntia. Seokseen lisätään liuos, joka sisältää [4S-[4a-7a(R*), 12bp] ] -7- [ (l-okso-2( S) -tio-3-fe-• 25 nyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso- pyridiini[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodife-nyylimetyyliesteriä (2,45 mmol) tetrahydrofuraanissa, josta liuenneet kaasut on poistettu, ja seosta sekoitetaan huoneenlämmössä yön yli. Seos laimennetaan etyyliasetaa-30 tiliä, pestään vedellä (2 x) ja suolavedellä, kuivataan (MgS04) ja liuotin haihdutetaan vakuumissa, mistä saadaan [4S- [4α-7α( R*), 12bp] ] -7- [ (l-okso-2( S )-(2-( 1-t-butyylioksi-karbonyyli )pyrrolidiini) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli) -amino]-1,2,3,4, 6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridiini[2,1-a]- 57 106717 [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylimetyylieste-riä (65 %).

^-NMR (CDC13) δ 7,16 - 7,46 (m, 10), 6,89 (m, 10), 6,56 - 6,68 (m, 1), 6,24 - 6,38 (m, 1), 5,51 - 5,69 (m, 5 1), 5,33 - 5,47 (m, 2), 4,25 - 4,56 (m, 2), 3,23 - 3,59 (m, 4), 2,94 - 3,11 (m, 1), 2,51 - 2,71 (m, 1), 2,28 - 2,51 (ra, 2), 2,05 - 2,23 (m, 1), 1,55 - 2,03 (m, 7), 1,38 - 1,52 (ra, 9); MS (FAB) ra/z 802 [M+ + H], 746, 702, 605, 167, 113.

10 [4S-[4α-7α(R*),12bp]]-7-((l-okso-2(S)-(2-(1-t-bu- tyylioksikarbonyyli)pyrrolidiini)-asetyylitio-3-fenyyli-propyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridi i-ni[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappodifenyylime-tyyliesteriä (1,86 mmol) ja anisolia (1,5 ml, ylimäärin) 15 Liuotetaan metyleenikloridiin (20 ml), seos jäähdyte tään -50 °C:een ja siihen lisätään trifluorietikkahappoa (3 ml). Reaktioseosta sekoitetaan -50 °C:ssa 2,5 tuntia, liuotin haihdutetaan vakuumissa ja jäännös trituroidaan heksaanilla (4 x). Jäännös otetaan talteen mahdollisimman 20 pieneen määrään metyleenikloridia ja saostetaan heksaa-nista (3 x) , mistä saadaan otsikon mukaista yhdistettä (73 %) .

^-NMR (CDCI3) δ 7,59 - 7,69 (m, 1), 6,90 - 7,40 (m, 9), 5,63 - 5,69 (m, 1), 5,38 - 5,51 (m, 1), 5,08 - 5,19 • 25 (m, 1), 4,55 - 4,68 (m, 1), 4,36 - 4,48 (m, 1), 3,22 - • 1 3,49 (m, 2), 3,01 - 3,15 (m, 1), 2,34 - 2,95 (m, 5), 1,65 - 2,16 (m, 8); 19F~NMR (CDC13) Ö -76,0; 13C-NMR (CDCl3) δ 195,5, 173,0, 172,3, 168,8, 136,7, 136,6, 136,0, 130,6, 129,3, 128,6, 127,2, 127,1, 125,8, 125,3, 65,9, 51,7, 30 51,1, 48,4, 48,2, 45,5, 36,4, 35,9, 28,8, 25,5, 25,3, 23,2, 17,3; MS (FAB) m/z 536 [M+ + H].

Lisäksi seuraavat kokeelliset tiedot osoittavat vaatimuksissa esitettyjen yhdisteiden aktiivisuuden enkefalinaasin ja ACE:n inhiboinnissa.

35 Menetelm: Harlon Spraque Dawley Inc.:Itä, In dianapolis, Indiana, saatiin spontaanisti yliherkkiä (spontaneously hypersensitive rats, SHR) 15 viikon ikäisiä 98 1 0 6 7 1 7 urosrottia. Suoritettaessa näitä kokeita eläimet olivat noin 9-10 kuukauden ikäisiä, eikä niitä ollut aikaisemmin hoidettu lääkkeillä.

Kaikille eläimille syötettiin rotan muonaa (0,4 % 5 natriumia) standardiruokavaliolla ja niille annettiin vesijohtovettä kaikkien näiden kokeiden aikana.

Systolinen verenpaine saatiin rottien hännistä epäsuoralla menetelmällä. Rotat pantiin yksittäisiin pleksilasitelineisiin lämpötilakontrolloidussa huoneessa 10 (31,0±0,5°C). Kunkin rotan hännän ympärille asetettiin paineanturi ja se liu'utettiin tyveen. Muovialustalle asennettu valokennoanturi pantiin hännän yläpuolelle aivan hännän paineanturin taakse. Systolinen verenpaine rekisteröitiin tavanomaisella tavalla Grass Model 7P8 15 Sphygmomanometer EKG-pulssin esivahvistimella ja Grass

Model 7B polygrafilia. Rottien annettiin sopeutua näihin olosuhteisiin, jotta mahdollistettaisiin riittävä hännän-puoleisen valtimon vasodilaatio ja saataisiin systolisen verenpaineen hyväksyttävä mittaus. Tämän sopeutumisajan-20 jakson jälkeen systolisen verenpaineen mittaus saatiin kuudelta rotalta samanaikaisesti ja tämän jälkeen mittauslaitteet vaihdettiin seuraaville kuudelle rotalle. Tätä sarjaa toistettiin, kunnes saatiin hyväksyttäviä tuloksia kaikille eläimille.

·' 25 Päivää ennen annostusta systoliset verenpaineet mitattiin rotilta. Eläimet jaettiin verenpaineensa mukaisesti tasapuolisesti jaettuihin hoitoryhmiin käyttäen Rando-tietokoneohjelmaa tasaisen jakautumisen varmistamiseksi .

30 Eläimet lääkittiin suun kautta 10 mg/kg testiyh- .· distettä ja verenpaine mitattiin kuten yllä on esitetty.

Nämä testitulokset, jotka on koottu seuraavaan taulukkoon, jossa verenpaineen muutoksia verrataan vehikkelillä hoidettuun ryhmään spontaanisti yliherkkiä rottia (SHR), 35 ovat tilastollisesti merkittäviä (p<0,05, yksi hännällinen Dunnett T).

99 106717

Taulukko 1.

ACE/NEP inhibiittoreiden vaikutus 10 mg/kg suun kautta annettuna spontaanisti yliherkillä rotilla (SHR)

Verenpaine (mmHg)

Esimerkki no Esiannostus Huippuarvonpudotus Minuutteja huippuarvon ± S.E. pudotukseen Ϊ 2ÖM2 -27,62 ± 6,62 12Ö 7 203,42 -16,35 + 3,57 180 10 193,24 -24,90 + 3,81 180 12 208,35 -33,20 ±4,70 180 m • · • - 3 1 l

Claims (8)

106717 100

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 7-aminoasetyylimerkaptoasetyyliamidioktahydro-6 - ok -5 sopyridiini [2,la] [2]bentsatsepiini-, heksahydro-6-okso-lH- [1,4]-oksatsiini [3,4-a] [2]bentsatsepiini- ja heksahydro-6-okso-lH- [1,4]-tiatsiini[3,4-a] [2]bentsatsepiini-4-karbok-syylihappojen valmistamiseksi, joilla on kaava I 10 / HO^ ^S-C-(CH2)m-X jossa 20. on -CH2-, -0-, -S-, m on kokonaisluku 0 - 3 ja X on ryhmä, jolla on kaava n / \ r\ “V_/° “O ~V_ys : 25 , • 1 / \ / \ 10 /— Uo Nv_ t t . 30 -< , -O _tO_cH’ . ' . —O “O — N— '==N \^N H tai —1Q? N— / 35 ' 106717 101 sekä niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että 1. trisyklinen bromiasetyyliamidiyhdiste, jolla on kaava 3 H H f \ jJ T*H O. /S / h/ H0*C 15 jossa Z on edellä määritelty, saatetaan HOOC-ryhmän osalta suojatussa muodossa reagoimaan emäksen läsnä ollessa yhdisteen kanssa, jolla on kaava Ph3C-S-C (=0) - (CH2) m-X 20 jossa m ja X ovat edellä määriteltyjä, jonka jälkeen suojaryhmä poistetaan tai 2. trisyklinen merkaptoasetyyliamidi, jolla on kaava 4 H η,ΓΎη o v\ X y bn '* <4i 30 / ° )-y / H02C ryj^ sh 1 jossa Z on edellä määritelty, saatetaan HOOC-ryhmän osalta suojatussa muodossa reagoimaan kytkentäaineen läsnä ollessa yhdisteen kanssa, jolla on kaava 102 106717 HO-C(-O) - (CH2) m-X jossa m ja X ovat edellä määriteltyjä, jonka jälkeen suojaryhmä poistetaan ja 5 haluttaessa muutetaan saadut yhdisteet farmaseut tisesti hyväksyttäväksi suolakseen sinänsä tunnetulla tavalla.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan aminoasetyyli- 10 merkaptoasetyyliamidiyhdiste, jolla on kaava H\ ^TYh 15 v >-νΛ

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan aminoasetyyli-merkaptoasetyyliamidiyhdiste, jolla on kaava : ' 25 H\ o N^\ /1^ 30. y-N \ 35 \=/ 103 106717

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan aminoasetyyli-merkaptoasetyyliamidiyhdiste, jolla on kaava u h a>Q< y rp

10. HOp O"0

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, että valmistetaan aminoasetyyli- tunnettu siita' merkaptoasetyyliamidiyhdiste' jolla on kaava

20. H H\ 3/ \>.H V/v / ho2c ; 25 --, np-^s-C-CH,—H ry ö ^ · 1 • ·. · 106717 104