FI105696B - Liukeneva ALDC-johdannainen ja sen käyttö - Google Patents

Liukeneva ALDC-johdannainen ja sen käyttö Download PDF

Info

Publication number
FI105696B
FI105696B FI930654A FI930654A FI105696B FI 105696 B FI105696 B FI 105696B FI 930654 A FI930654 A FI 930654A FI 930654 A FI930654 A FI 930654A FI 105696 B FI105696 B FI 105696B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
aldc
derivative
glutaraldehyde
soluble
pct
Prior art date
Application number
FI930654A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI930654A0 (fi
FI930654A (fi
Inventor
Sven Pedersen
Original Assignee
Novo Nordisk As
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Novo Nordisk As filed Critical Novo Nordisk As
Publication of FI930654A0 publication Critical patent/FI930654A0/fi
Publication of FI930654A publication Critical patent/FI930654A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI105696B publication Critical patent/FI105696B/fi

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12CBEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
    • C12C11/00Fermentation processes for beer
    • C12C11/003Fermentation of beerwort
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12CBEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
    • C12C11/00Fermentation processes for beer
    • C12C11/07Continuous fermentation
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12CBEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
    • C12C11/00Fermentation processes for beer
    • C12C11/09Fermentation with immobilised yeast
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12CBEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
    • C12C5/00Other raw materials for the preparation of beer
    • C12C5/004Enzymes
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12CBEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
    • C12C9/00Methods specially adapted for the making of beerwort
    • C12C9/02Beerwort treatment; Boiling with hops; Hop extraction
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/88Lyases (4.)

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Analysing Materials By The Use Of Radiation (AREA)
  • General Preparation And Processing Of Foods (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)

Description

105696
Liukeneva ALDC-johdannainen ja sen käyttö - Lösligt ALDC-derivat och användning av detta 5 Keksinnön kohteena on liukeneva ALDC-johdannainen ja sen * käyttö. ALDC on lyhenne sanoista acetolactate decarboxylase (asetolaktaattidekarboksylaasi) .
Fermentoitaessa hiilihydraatteja sisältäviä aineita, esim.
10 vierre- tai rypälemehua, halutun alkoholifermentoinnin ohella saattaa syntyä erilaisia sivutuotteita. Eräs tällainen ei-toivottu sivutuote on diasetyyli.
EP 46066:n perusteella ALDCrtä voi käyttää entsyyminä, mikä 15 estää diasetyylin muodostumisen. Kaikkein luonnollisimmin ilmaantuvien ALDC-aineiden pH-optimi on kuitenkin 6:n paikkeilla ja pH-alueella 3,8-4,7, joka on fermentoivan vierteen pH, aktiivisuus on käytännön tarkoituksia varten liian alhainen, varsinkin pH:n ollessa alle 4, mikä on vähän mallas-20 ta sisältävien fermentointivierteiden tavanomainen pH. Tästä syystä oluen tai viinin fermentoinnissa diasetyylin muodostumisen estoprosessi ei ^le vielä löytänyt mitenkään laajamittaisesti tietään käytännön teolliseen tuotantoon. EP 46066:n mukaan todetaan, että ALDC:tä voi muuntaa kemialli-25 sesti siten, että paras aktiivisuus siirtyy alhaisemmille pH-arvoille, viittauksena Biochem., voi. 11, nro 22, 1972 (s. 4022-4084). Biochem.-artikkelissa mainittuihin muuntomene-telmiin kuuluu poly(ornityyli)sivuketjujen kasvattaminen kymotrypsiiniin; Biochem.-artikkeli ei näin olle tarjoa mi-30 tään ehdotuksia ALDC:n muuntamiseksi. Aikaisemman tavan mu- . kainen muuntomenetelmä parhaan aktiivisuuden siirtämiseksi ^ · ..........
.·’ ·' alempien pH-arvojen kohdalle ei ole riittävä teollista so vellusta varten eikä sen lisäksi tiedetä, voiko poly(ornityyli) menetelmän siirtääsellaisenaan kymotrypsiinistä ALDC:-35 hen. Biochem.-artikkelista ei loppujen lopuksi käy myöskään ilmi, onko aikaisemman tavan mukaisesti muunnetun kymotryp-siinin vakavuus alemmilla pH-arvoilla tyydyttävä.
2 105696
Keksinnön tarkoituksena on saada aikaan ALDC-johdannainen, jota voi käyttää edullisella tavalla teollisuudessa, ja jonka vakavuus alhaisilla pH-arvoilla on tyydyttävä.
5 Yllättäen on todettu, että ALDC:n käsittely glutaraldehydil-lä saa aikaan liukenevan muunnetun ALDC:n, jonka pH-kuva on ensinnäkin toivotun mukainen, mutta joka on, toiseksi, myös halpa ja helposti valmistettavissa ja, kolmanneksi, joka on samalla myös tyydyttävän vakaa.
10 Täten tämän keksinnön mukaiselle, liukenevalle ALDC-johdan-naiselle on tunnusomaista, että ALDC:tä käsitellään vesipitoisessa väliaineessa glutaraldehydillä, pitoisuuden vastatessa 0,1 ja 5 g välillä glutaraldehydiä yhtä puhdasta ALDC-15 proteiinigrammaa kohden, mieluiten 0,25 ja 2 g välillä glutaraldehydiä yhtä puhdasta ALDC-proteiinigrammaa kohden. On selvitetty, että tämä ALDC-johdannainen on liukenevaa ellei sitä käsitellä edelleen ja että sitä voi tuottaa erittäin aktiivisen tuotoksen antavana.
20
Julkaisussa Biotechnology Letters voi. 10 nro 5 325-330 (1988) selitetään, että B-glukosidaasin silloittaminen glu-taraldehydin kanssa saa aikaan johdannaisen, jonka lämpöva-kavuus on parantunut. Julkaisussa Adv. Biochem. Eng. 12, s. 25 41-118, 1979, Rolf D. Schmid selittää, että erilaisten ent syymien, kuten esim. papaiinin, glukoosin, oksidaasin, kata-laasin ja urikaasin, vaan ei ALDC:n, silloituksella saadaan aikaan entsyymin johdannaisia, joiden lämpövakavuus on parantunut. Näin ollen aikaisemmassa menettelytavassa ei vii-30 tata glutaraldehydiin vaikuttavana aineena, joka voisi to- . teuttaa keksinnön tarkoituksen.
* ·
On ymmärrettävä, että tämän keksinnön mukaisesti kaikkia ALDC-entsyymejä, t.s. mistä tahansa mikro-organismeista teh-35 tyjä ALDC-aineita voi käyttää tarkoitukseen. Parhaaksi katsottujen ALDC-aineiden lähtökohdat ovat Bacillus brevis ja Bacillus licheniformis.
3 105696
Viittauksen kohteeksi käy myös EP 131251, jossa selitetään erityistä epäorgaanista alustaa, johon entsyymit, esim. ALDC, adsorboidaan liikkumattomiksi ja silloitetaan glutaraldehy-dillä. Erotuksena siihen tämä keksintö käsittää ainoastaan 5 liukenevan ALDC-johdannaisen. Mainittu EP ei myöskään selitä ♦ . --------- ALDC:n pH-aktiivisuuskäyrän pH:n siirtymää, mikä on tämän keksinnön tärkeimpiä ominaispiirteitä. Toinen tämän keksinnön tärkeä ominaispiirre, jota ei EP:ssä selitetä, on ALDC:n käsittely glutaraldehydillä määritetyn pientä pitoisuutta 10 käyttäen.
Tämä keksintö käsittää myös keksinnön mukaisen liukenevan ALDC-johdannaisen käytön oluen fermentoinnissa.
15 Tämän keksinnön mukaisen käytön parhaana pidetyn toteutus- muodon tunnusomainen piirre on, että liukenevaa ALDC-johdannaista käytetään yhdessä tavallisen hiivan kanssa eräfer-mentoinnin yhteydessä. Tämä on keksinnön mukaan yksinkertaisin tapa käyttää liukenevaa ALDC-johdannaista.
20
Keksintöä valaistaan seuraavien esimerkkien avulla. Näissä esimerkeissä käytetään ALDC-valmistetta, joka on tuotettu viljelemällä Bacillus_^ubtilis -kantaa, joka sisältää geenin, joka koodaa ja ilmentää Bacillus brevis'in ALDC:n ominaisuuk-25 sineen DK 149335B:n selityksen mukaan.
• ·
Esimerkki 1 100 ml ALDC-liuosta (erä EDF 212:ta, fermentointinestelin-koustuote, jonka ALDC-aktiivisuus on 1700 ADU/ml) sekoitet-30 tiin 2,5 ml:aan 2% glutaraldehydiliuosta (lopullinen glu- taraldehydipitoisuus 0,05% (p/p, vastaten määrää 0,5 g glu-.· taraldehydiä/l g ALDC:tä). Reagointiseosta jäähdytettiin jäällä kolme tuntia. pH säädettiin pysyvästi 7,5:een.
35 ALDC-aktiivisuus (ADU/ml) mitattiin Novo Analysis -menetelmällä AF 278/l-GB (saatavissa pyynnöstä osoitteesta Novo Nordisk A/S, Novo Allö, DK-2880 Bagsvaerd) ja alustojen pH
, 105696 4 säädettiin arvoihin alueella 3,6-6,0. pH-aktiivisuuskäyrät on esitetty kuviossa l.
ALDC:n ja johdannaisnäytteen vakavuus mitattiin tavallisessa 5 pastöroidussa tanskalaisoluessa (HOF). 20 ADU lisättiin yhtä oluen ml:aa kohden ja siinä pH säädettiin vastaavasti 4,0:aan ja 6,0:aan. Oluista otettiin näyte joka päivä ja ALDC:n jää-mäaktiivisuus mitattiin pH-luvun ollessa 6,0. Tulokset on esitetty kuvioissa 2 ja 3.
10
Johtopäätöksenä on, että glutaraldehydi parantaa, pH:n ollessa 4,0, sekä ALDC:n aktiivisuutta että vakavuutta.
Esimerkki 2 15 Johdannais-ALDC:n testaus perinteisessä eräfermentoinnissa.
Käytettiin ALDC:tä (erä EDF 212; 1700 ADU/ml) (valmiste 1) ja glutaraldehydillä käsiteltyä ALDC:tä (valmiste 2) esimerkin 1 mukaisesti valmistettuna (1100 ADU/ml).
20
Fermentoinnit suoritettiin panimomallasvierteellä (FAXE) ja samalla vierteellä lisämäärin (10, 20, 30 ja 40% p/p) lisäainetta (sakkaroosia). Hiivaa lisättiin 2,5 g vierrelitraa kohden. ALDC lisättiin yhdessä hiivan kanssa (46 ADU/litra). 25 Fermentointi toteutettiin lämpötilassa 12°C ja sitä kesti 7 ·* päivää. pH (kuvio 4), ALDC:n jäämäaktiivisuus (kuvio 5) ja kokonaisdiasetyyli (α-asetolaktidihappo + diasetyyli) (kuviot 6-9) mitattiin joka päivä.
30 Tulokset osoittavat, että kokonaisdiasetyylin vähentyminen on suurempi käytettäessä johdannais-ALDC:tä (valmiste 2) kuin • käytettäessä käsittelemätöntä ALDCrtä ja että johdannaisval- miste on myös vakaampi.

Claims (5)

105696
1. Liukeneva ALDC-johdannainen (ALDC on lyhenne sanoista acetolactate decarboxylase), tunnettu siitä, että ALDC:tä on * 5 vesipitoisessa väliaineessa käsitelty glutaraldehydillä, pi toisuuden vastatessa 0,1-5 g glutaraldehydiä yhtä grammaa puhdasta ALDC-proteiinia kohden.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen ALDC-johdannainen, tunnet-10 tu siitä, että glutaraldehydipitoisuus on välillä 0,25-2 g glutaraldehydiä yhtä grammaa puhdasta ALDC-proteiinia kohden.
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukaisen liukenevan ALDC-johdannaisen käyttö oluen fermentoinnissa. 15
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen käyttö, tunnettu siitä, että ALDC-johdannaista käytetään eräfermentoinnin yhteydessä yhdessä tavallisen hiivan kanssa.
5. Menetelmä liukenevan asetolaktaattikarboksylaasi (ALDC) -johdannaisen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että ALDC:tä käsitellään vesipitoisessa väliaineessa glutaraldehydillä, jonka pitoisuus vastaa 0,1-5 g glutaraldehydiä yhtä grammaa puhdasta ALDC-proteiinia kohden, edullisesti 0,25-2 g glutar-·- 25 aldehydiä yhtä grammaa puhdasta ALDC-proteiinia kohden. p '·· _________ ... 1 · « Ψ -----.li.™:' 6 105696
FI930654A 1990-08-16 1993-02-15 Liukeneva ALDC-johdannainen ja sen käyttö FI105696B (fi)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DK194990 1990-08-16
DK194990A DK194990D0 (da) 1990-08-16 1990-08-16 Aldc-derivat og anvendelse deraf
PCT/DK1991/000222 WO1992003543A1 (en) 1990-08-16 1991-08-09 Aldc derivative and use thereof
DK9100222 1991-08-09

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI930654A0 FI930654A0 (fi) 1993-02-15
FI930654A FI930654A (fi) 1993-02-15
FI105696B true FI105696B (fi) 2000-09-29

Family

ID=8109101

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI930654A FI105696B (fi) 1990-08-16 1993-02-15 Liukeneva ALDC-johdannainen ja sen käyttö

Country Status (14)

Country Link
US (1) US5306634A (fi)
EP (1) EP0575323B1 (fi)
JP (1) JP3126730B2 (fi)
CN (2) CN1054638C (fi)
AT (1) ATE117368T1 (fi)
AU (1) AU645343B2 (fi)
BR (1) BR9106762A (fi)
CA (1) CA2089498C (fi)
DE (1) DE69106896T2 (fi)
DK (2) DK194990D0 (fi)
FI (1) FI105696B (fi)
GR (1) GR3014933T3 (fi)
MX (1) MX9100626A (fi)
WO (1) WO1992003543A1 (fi)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101759755B1 (ko) 2010-01-19 2017-07-19 바스프 코포레이션 스킨 케어에서 사용하기 위한 안정화된 프로테아제
JP5917166B2 (ja) * 2012-01-25 2016-05-11 アサヒビール株式会社 発酵麦芽飲料の製造方法
EP3126509A1 (en) 2014-04-01 2017-02-08 DuPont Nutrition Biosciences ApS Method for increasing crude palm oil yields
BR112017013025A2 (pt) 2014-12-19 2018-01-02 Dupont Nutrition Biosci Aps recuperação de óleo da lama de palma
EP4155399A1 (en) * 2015-05-22 2023-03-29 DuPont Nutrition Biosciences ApS Acetolactate decarboxylase

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4241185A (en) * 1979-02-23 1980-12-23 The Great Western Sugar Company Method of stabilizing α-galactosidase
DK145502C (da) * 1980-08-07 1983-05-02 Forenede Bryggerier As Fremgangsmaade til fremstilling af fermenterede alkoholiske produkter
DK252483D0 (da) * 1983-06-03 1983-06-03 Novo Industri As Alpha-acetolactate decarboxylaseemzymprodukt og fremstilling deraf
DK317483D0 (da) * 1983-07-08 1983-07-08 Superfos As Immobiliseret enzympraeparat og fremgangsmade til fremstilling deraf
JPH0614865B2 (ja) * 1985-12-13 1994-03-02 麒麟麦酒株式会社 α―アセト乳酸脱炭酸酵素をコードするDNA鎖およびこのDNA鎖により形質転換された酵母
FI92333C (fi) * 1987-03-17 1994-10-25 Panimolaboratorio Bryggerilabo -asetolaktaattidekarboksylaasiaktiivisuutta omaavaa entsyymiä koodaava DNA-sekvenssi ja sen käyttö nopeutettuun oluen valmistukseen soveltuvien hiivakantojen rakentamiseksi
US5043276A (en) * 1988-04-22 1991-08-27 Kirin Beer Kabushiki Kaisha DNA strand coding for alpha-acetolactate decarboxylase and yeast transformed with the DNA strand

Also Published As

Publication number Publication date
EP0575323B1 (en) 1995-01-18
DE69106896D1 (de) 1995-03-02
DE69106896T2 (de) 1995-06-14
CN1059168A (zh) 1992-03-04
JP3126730B2 (ja) 2001-01-22
JPH06500013A (ja) 1994-01-06
FI930654A0 (fi) 1993-02-15
CA2089498C (en) 2002-07-16
WO1992003543A1 (en) 1992-03-05
CA2089498A1 (en) 1992-02-17
US5306634A (en) 1994-04-26
DK0575323T3 (da) 1995-05-01
MX9100626A (es) 1992-04-01
CN1113093C (zh) 2003-07-02
DK194990D0 (da) 1990-08-16
AU8390891A (en) 1992-03-17
CN1257913A (zh) 2000-06-28
FI930654A (fi) 1993-02-15
AU645343B2 (en) 1994-01-13
ATE117368T1 (de) 1995-02-15
BR9106762A (pt) 1993-07-20
CN1054638C (zh) 2000-07-19
GR3014933T3 (en) 1995-05-31
EP0575323A1 (en) 1993-12-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Anwar et al. Calcium alginate: a support material for immobilization of proteases from newly isolated strain of Bacillus subtilis KIBGE-HAS
Van Rensburg et al. Enzymes in winemaking: harnessing natural catalysts for efficient biotransformations
EP0494207B1 (en) Thermostable purified cellulase from thermophilic bacterium acidothermus cellulolyticus
FI79345C (fi) Enzymprodukt innehaollande en -1,6-glukosidas och foerfarande foer framstaellning av denna.
US5437989A (en) Alcohol/aldehyde dehydrogenase from Gluconobacter oxydans DSM 4025 FERM BP-3812
JPH0740939B2 (ja) 粒状澱粉から直接グルコースを生成する方法、同方法に用いる酵素製剤
Sestelo et al. β-Glucosidase activity in a Lactobacillus plantarum wine strain
Aracri et al. Extracellular tannase from Aspergillus ochraceus: influence of the culture conditions on biofilm formation, enzyme production, and application
Sahay Wine enzymes: Potential and practices
Rossi et al. L-malic acid catabolism by polyacrylamide gel entrapped Leuconostoc oenos
FI105696B (fi) Liukeneva ALDC-johdannainen ja sen käyttö
Gao et al. The degradation of malic acid by high density cell suspensions of Leuconostoc oenos
EP0128714A2 (en) Alpha-acetolactate decarboxylase enzyme and preparation thereof
KR950006812B1 (ko) 알콜성 음료의 품질 향상 방법
NL8403600A (nl) Werkwijze voor de bioafbraak van pentosanen.
Yanai et al. Purification and characterization of a novel α-L-arabinofuranosidase from Pichia capsulata X91
US5962276A (en) Purified acid-stable alpha-amylase from fungal origin
JPH0365753B2 (fi)
JPH0783706B2 (ja) 酒類の品質改良法
CA1108077A (en) High potency glucamylase and alapha amylase enzyme system by cultivation of aspergillus niger
US5597704A (en) Bioconversion of cephalosporin C to glutaryl-7-aminocephalosporanic acid
US11578316B2 (en) Acetolactate decarboxylase variants having improved specific activity
Mirzarakhmetova et al. Enzymatic conversion of invertase substrates in a water-organic medium
DK149335B (da) Alpha-acetolactat-decarboxylase samt fremgangsmaade til fremstilling deraf
CN115521927A (zh) 一种可降低高级醇含量的复合酶制剂及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
MA Patent expired