ES2966827T3 - Compuestos inhibidores del receptor 1 del ácido lisofosfatídico (LPAR1) - Google Patents

Compuestos inhibidores del receptor 1 del ácido lisofosfatídico (LPAR1) Download PDF

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Abstract

La presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéutica del mismo, se describen su uso y métodos para su preparación. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Compuestos inhibidores del receptor 1 del ácido lisofosfatídico (LPAR1)
Esta invención proporciona compuestos inhibidores del receptor 1 del ácido lisofosfatídico (LPAR1) y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, y su uso en terapia.
LPAR1 es el primer receptor de alta afinidad identificado para los ácidos lisofosfatídicos (LPA), que son pequeños glicerofosfolípidos bioactivos. La activación de LPAR1 mediada por LPA está implicada en numerosas respuestas celulares, como la proliferación, la migración y la supervivencia celular. En particular, la vía LPA-LPAR1 puede contribuir al desarrollo de la esteatohepatitis no alcohólica (EHNA), que es una enfermedad hepática caracterizada por depósitos de grasa, inflamación y daño tisular. La progresión de la EHNA conduce a la acumulación de cicatrices, o fibrosis, en el hígado. Si sigue avanzando, la EHNA puede causar cirrosis e hipertensión portal. Aproximadamente 2-5% de los estadounidenses adultos y hasta el 20% de los obesos pueden padecer EHNA. Más allá de la fibrosis y la cirrosis, la EHNA puede evolucionar a carcinoma hepatocelular e insuficiencia hepática.
Se ha sugerido que la inhibición de LPAR1 puede ser útil en el tratamiento de la inflamación, la fibrosis y otras enfermedades o trastornos mediados por LPAR1. Por ejemplo, la patente de EE. UU. No. 9,272,990 divulga antagonistas de LPAR para el tratamiento de la fibrosis.
La publicación PCT No. WO 2017/086430 divulga un compuesto de a halógeno sustituido por tiofeno como antagonista de LPAR1 para el tratamiento y/o profilaxis de la EHNA.
] Existe una necesidad insatisfecha de compuestos antagonistas de LPAR1 que puedan ser útiles para tratar la EHNA, así como otras enfermedades o trastornos mediados por LPAR1. Así, la presente invención proporciona compuestos que muestran actividades antagonistas de LPAR1 potentes y selectivasin vitro,así como eficacia en un modelo animal de inflamación y fibrosis hepáticas. Además, la presente invención proporciona profármacos de éster de dichos compuestos antagonistas de LPAR1. En particular, la presente invención proporciona un compuesto de Fórmula I
en la que,
X1 es N, X2 es CH o N, yX 3 es C-R2 o N, siempre que no más de uno de X2 y X3 pueda ser N;
Y1 e Y2 son CH o N, siempre que sólo uno de Y1 o Y2 pueda ser N;
R1 es
isopropilo,
isobutilo,
t-butilo,
2-hidroxiprop-2-il,
ciclopropilo,
ciclopropiloxi,
t-butiloxi,
ciclobutiloxi,
3,3-difluorociclobutiloxi,
2-fluoroprop-2-ilo,
1,1 -difluoroetilo,
trifluorometilo,
isopropiloxi, o
2-metoxiprop-2-ilo;
R2 es H o fluoro;
R3 es H, halógeno, alquil C1-C3, alcoxi C1-C3, alcoximetil C1-C3, CF3, cianometilo o ciano;
R4 es H, halógeno, alquil C1-C3, CF3 o ciano;
R5 es H, metilo, etilo, propilo, isopropilo o ciclopropilo; o
una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En una realización, Y1 es CH.
En una realización, R1 es isopropilo.
En una realización, R1 es ciclopropiloxi.
En una realización, R3 es H, metilo, metoximetilo, cianometilo o ciano.
En una realización, R4 es H, metilo,CF3 o ciano.
En una realización, R5 es H.
En otra realización, un compuesto de la presente invención es uno cualquiera de los compuestos de los ejemplos, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En otro aspecto de la presente invención se proporciona una composición farmacéutica, que comprende un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y al menos un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable. Este aspecto de la invención también proporciona una composición farmacéutica para tratar EHNA en un mamífero, particularmente un humano, que comprende un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y uno o más excipientes, portadores o diluyentes farmacéuticamente aceptables. Además, este aspecto de la presente invención proporciona una composición farmacéutica para tratar la fibrosis en un mamífero, particularmente un humano, como por ejemplo fibrosis pulmonar, fibrosis hepática, fibrosis renal, fibrosis cardiaca o fibrosis cutánea, que comprende un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y uno o más excipientes, portadores o diluyentes farmacéuticamente aceptables. Además, este aspecto de la presente invención proporciona una composición farmacéutica para tratar enfermedades inflamatorias en un mamífero, particularmente un humano, como por ejemplo enfermedad respiratoria crónica, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), esclerosis múltiple, artritis reumatoide, osteoartritis, psoriasis, lupus eritematoso sistémico, esclerodermia, síndrome de Sjorgen, colitis ulcerosa y enfermedad de Crohn, que comprende un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y uno o más excipientes, portadores o diluyentes farmacéuticamente aceptables.
En otro aspecto de la presente invención se proporciona un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en terapia. Dentro de este aspecto, la invención proporciona un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de EHNA en un mamífero, particularmente un humano. La presente invención también proporciona un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de la fibrosis en un mamífero, particularmente un humano, como por ejemplo fibrosis pulmonar, fibrosis hepática, fibrosis renal, fibrosis cardiaca o fibrosis cutánea. La presente invención también proporciona un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de enfermedades inflamatorias en un mamífero, particularmente un humano. En una realización de este aspecto de la invención dicha enfermedad inflamatoria se selecciona del grupo que consiste en, pero no se limita a, enfermedad respiratoria crónica, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), esclerosis múltiple, artritis reumatoide, osteoartritis, psoriasis, lupus eritematoso sistémico, esclerodermia, síndrome de Sjorgen, colitis ulcerosa y enfermedad de Crohn.
Tal como se utiliza en el presente documento, el término "cantidad eficaz" o "cantidad terapéuticamente eficaz" de un compuesto se refiere a una cantidad, o una dosificación, que es eficaz para tratar un trastorno o una enfermedad, tal como EHNA, fibrosis, enfermedades inflamatorias, otras enfermedades mediadas por LPAR1 o trastornos tal como se describen en el presente documento. El diagnosticador, como experto en la técnica, puede determinar fácilmente una cantidad efectiva mediante el uso de técnicas convencionales y observando los resultados obtenidos en circunstancias análogas. Para determinar la cantidad o dosis eficaz de un compuesto, se tienen en cuenta varios factores, entre otros, el compuesto que se va a administrar; la coadministración de otros agentes, si se utilizan; la especie de mamífero; su tamaño, edad y estado general de salud; el grado de afectación o la gravedad del trastorno; la respuesta de cada paciente; el modo de administración; las características de biodisponibilidad del preparado administrado; el régimen de dosis seleccionado; el uso de otros medicamentos concomitantes; y otras circunstancias pertinentes.
Los términos "tratamiento" y "que trata", tal como se utilizan en el presente documento, se refieren a todos los procedimientos en los que se puede ralentizar, interrumpir, detener, controlar o parar la progresión de un trastorno existente y/o sus síntomas, pero no indican necesariamente la eliminación total de todos los síntomas.
El término "portador, diluyente o excipientes farmacéuticamente aceptables" significa que el portador, el diluyente y los excipientes son farmacéuticamente compatibles con los demás ingredientes de la composición. En una realización particular, las composiciones farmacéuticas se formulan en forma de comprimido o cápsula para administración oral. El comprimido o cápsula puede incluir un compuesto de la presente invención en una cantidad eficaz para tratar fibrosis, enfermedades inflamatorias, EHNA, otras enfermedades o trastornos mediados por LPAR1.
Tal como se utiliza en el presente documento, el término "fibrosis" se refiere a la formación o presencia de tejido conectivo excesivo en un órgano o tejido. La fibrosis puede producirse como respuesta de reparación o sustitución a un estímulo como una lesión tisular o una inflamación. Una característica distintiva de la fibrosis es la producción excesiva de matriz extracelular. La respuesta fisiológica normal a una lesión da lugar al depósito de tejido conjuntivo como parte del procedimiento de cicatrización, pero este depósito de tejido conjuntivo puede persistir y convertirse en patológico, alterando la arquitectura y la función del tejido. En realizaciones ejemplares, la fibrosis es fibrosis pulmonar, fibrosis hepática, fibrosis renal, fibrosis cardíaca o fibrosis cutánea.
Aunque es posible administrar los compuestos de esta invención directamente sin ninguna formulación, los compuestos se administran normalmente en forma de composiciones farmacéuticas que comprenden el compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como principio activo y al menos un portador, diluyente y/o excipiente farmacéuticamente aceptable. Estas composiciones pueden administrarse por diversas vías, como oral, sublingual, nasal, subcutánea, intravenosa e intramuscular. Tales composiciones farmacéuticas y los procedimientos para prepararlas son bien conocidos en la técnica. Véase, por ejemplo, Remington: The Science and Practice of Pharmacy (University of the Sciences in Philadelphia, ed., 21st ed., Lippincott Williams & Wilkins Co., 2005).
Los compuestos de Fórmula I son generalmente efectivos en un amplio intervalo de dosificación. Por ejemplo, las dosificaciones por día normalmente se encuentran dentro del intervalo de aproximadamente 0,2 mg/kg a aproximadamente 15 mg/kg, más habitualmente de aproximadamente 0,7 mg/kg a aproximadamente 7,5 mg/kg, y como por ejemplo aproximadamente 1,5 mg/kg de peso corporal. En algunos casos, los niveles de dosificación por debajo del límite inferior del intervalo mencionado pueden ser más que adecuados, mientras que en otros casos se pueden emplear dosis aún mayores sin causar ningún efecto secundario perjudicial, y por lo tanto los intervalos de dosificación anteriores no pretenden limitar el alcance de la invención de ninguna manera. También puede ser ventajoso administrar la dosis diaria en partes a lo largo de cada día (por ejemplo, A dosis dos veces al día o 1/3 de dosis tres veces al día). Se entenderá que la cantidad del compuesto realmente administrado será determinada por un médico, a la luz de las circunstancias pertinentes, incluyendo la afección que se va a tratar, la vía de administración elegida, el compuesto o compuestos realmente administrados, la edad, el peso y la respuesta del paciente individual, y la gravedad de los síntomas del paciente.
Las composiciones se formulan preferentemente en una forma de dosificación unitaria, conteniendo cada dosificación de aproximadamente 20 a aproximadamente 2000 mg, más habitualmente de aproximadamente 50 a aproximadamente 500 mg, como por ejemplo aproximadamente 200 mg del principio activo. El término "forma de dosificación unitaria" se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosificaciones unitarias para sujetos humanos y otros mamíferos, cada unidad contiene una cantidad predeterminada de material activo calculado para producir el efecto terapéutico deseado, en asociación con al menos un portador, diluyente y/o excipiente farmacéuticamente aceptable adecuado.
Los compuestos de esta invención tienen moléculas básicas y ácidas y, en consecuencia, reaccionan con una serie de ácidos y bases orgánicos e inorgánicos para formar sales farmacéuticamente aceptables. Las sales farmacéuticamente aceptables del compuesto de la presente invención se contemplan dentro del ámbito de la presente solicitud. El término "sal farmacéuticamente aceptable", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a cualquier sal del compuesto de la invención que sea sustancialmente no tóxica para los organismos vivos. Tales sales farmacéuticamente aceptables y la metodología común para prepararlas son bien conocidas en la técnica.Véase, por ejemploP. Stahl, et al., HANDBOOK OF PHARMACEUTICAL SALTS: PROPERTIES, SELECTION AND USE, (VCHA/Wiley-VCH, 2008); y S.M. Berge, et al., "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol 66, No. 1, enero 1977.
Las abreviaturas utilizadas en el presente documento se definen como sigue:
"Salmuera" significa NaCl saturado.
"BSA" significa albúmina de suero bovino
"DAST" significa trifluoruro de dietilaminosulfuro
"DCM" significa diclorometano.
"DMF" significa n,n-dimetilformamida
"DMSO" significa dimetilsulfóxido (perdeuterado [ d6] si es para RMN).
"EtOAc" significa acetato de etilo.
"FLIPR" significa lector de placas de imágenes fluorescentes.
"HBSS" significa solución salina tamponada de Hank.
"HEPES" significa ácido 4-(2-hidroxietil)-1 -piperazina etanosulfónico.
"HPLC" significa cromatografía líquida de alta presión.
"hr." o "h" significa hora u horas.
"IC50" significa la concentración a la que se alcanza 50% de la inhibición máxima.
"LCMS" significa espectrometría de masas por cromatografía líquida.
"MeOH" significa metanol.
"EM" significa espectroscopia de masas o espectro de masas.
"MTBE" significa metil tert-butil éter.
"PE" significa disolvente éter de petróleo.
"THF" significa tetrahidrofurano.
Un compuesto de Fórmula I puede prepararse mediante procedimientos conocidos en las técnicas químicas o mediante un procedimiento novedoso descrito en el presente documento. Un procedimiento para la preparación de un compuesto de Fórmula I e intermedios novedosos para la fabricación de un compuesto de Fórmula I, proporcionan características adicionales de la invención y se ilustran mediante los siguientes procedimientos.
Generalmente, un compuesto de Fórmula I puede prepararse a partir de un compuesto de Fórmula II (Esquema 1). Más específicamente, un compuesto de Fórmula II se hace reaccionar con un compuesto de Fórmula III en presencia de un catalizador de metal de transición adecuado tal como tris(dibenilideneacetona)dipaladio y una base tal como carbonato de cesio en un disolvente adecuado para proporcionar un compuesto de Fórmula I. Entre los disolventes adecuados se incluye el dioxano. Un compuesto de Fórmula III puede prepararse por procedimientos conocidos en las técnicas químicas, así como por los procedimientos previstos en los Preparados y Ejemplos.
Alternativamente, un compuesto de Fórmula I puede prepararse a partir de un compuesto de Fórmula IV (Esquema 1). Más específicamente, un compuesto de Fórmula IV se hace reaccionar con un compuesto reactivo R1-boro adecuado en presencia de un catalizador de metal de transición adecuado tal como tris(dibenilideneacetona)dipaladio y una base tal como carbonato de cesio en un disolvente adecuado para proporcionar un compuesto de Fórmula I. Entre los disolventes adecuados se incluye el dioxano. Un compuesto reactivo R1-boro adecuado puede prepararse por procedimientos conocidos en las técnicas químicas, así como por los procedimientos proporcionados en los Preparados y Ejemplos.
Se entiende que ciertos grupos funcionales empleados durante la preparación de un compuesto de Fórmula I pueden actuar como precursores de grupos finalmente englobados en un compuesto de Fórmula I. Tales grupos son conocidos en las técnicas químicas y pueden divulgarse en los Preparados y Ejemplos. Por ejemplo, el grupo R5-O-(C=O)- de un compuesto de Fórmula I puede adquirirse mediante transformación química un grupo precursor adecuado como el ciano (-CN).
Esquema 1
Alternativamente, un compuesto de Fórmula I puede prepararse a partir de un compuesto de Fórmula V y un compuesto de Fórmula VI (Esquema 2). Más específicamente, un compuesto de Fórmula VI se hace reaccionar primero con bis(pinacolato)diboro en presencia de un catalizador de metal de transición adecuado tal como [1,1'-bis(difenilfosfino) ferroceno]dicloropaladio en un disolvente adecuado tal como dioxano para proporcionar un compuesto de pinacolatoboro intermedio que se hace reaccionar además compuesto de Fórmula V en presencia de una base tal como carbonato sódico para proporcionar un compuesto de Fórmula I. Un compuesto de Fórmula V o un compuesto de Fórmula VI puede prepararse por procedimientos conocidos en las técnicas químicas, así como por procedimientos proporcionados en los Preparados y Ejemplos.
Como se muestra en el Esquema 3, los compuestos de Fórmula II pueden prepararse haciendo reaccionar un compuesto de Fórmula VIII con un compuesto pinacolatoboro de Fórmula VII en presencia de un catalizador de metal de transición adecuado tal como [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio y una base adecuada tal como carbonato sódico en un disolvente adecuado. Entre los disolventes adecuados se incluye el dioxano.
Se entiende que los grupos reaccionantes adecuados para los procedimientos de acoplamiento son conocidos en las técnicas químicas, así como divulgados en los Preparados y Ejemplos. Por ejemplo, el grupo reactivo pinacolatoboro de un compuesto de Fórmula VII puede sustituirse con grupos de acoplamiento alternativos, tal como el tributilstanilo.
Alternativamente, un compuesto de Fórmula II puede prepararse a partir de un compuesto de Fórmula IX (Esquema 3). Más específicamente, un compuesto de Fórmula IX se hace reaccionar con 4-bromo-2-metil-pirazol-3-amina en presencia de un catalizador de metal de transición adecuado tal como tris(dibenilideneacetona)dipaladio y una base tal como carbonato de cesio en un disolvente adecuado para proporcionar un compuesto de Fórmula II. Entre los disolventes adecuados se incluye el dioxano.
Un compuesto de Fórmula VII, Fórmula VIII o Fórmula IX puede prepararse por procedimientos conocidos en las técnicas químicas, así como por procedimientos proporcionados en los Preparados y Ejemplos.
Preparación 1: 2-cloro-6-(ciclopropoxi)pirazina
Se añade hidruro sódico (1,36 g, 34,1 mmol, 60%en masa) a ciclopropanol (1,00 g, 17,0 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) a 0 °C, y la mezcla de reacción se agita a 20 °C durante 30 min. A continuación, se añade 2, 6-didoropirazina (2,57 g, 17,0 mmol) y la mezcla se agita a 20 °C durante 12 h. La mezcla de reacción se vierte en NH4Cl saturado. La mezcla resultante se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las fases orgánicas combinadas se lavan con agua (30 mL), salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro, se filtran y se concentran para obtener el compuesto del título (2,50 g, 81,7%) como sólido blanco. LCMS (m/z): 170,9 [M+H]+.
Preparación 2: 2-cloro-6-(1, 1-difluoroetil)pirazina
1. Síntesis de 1-(6-cloropirazin-2-il)etanona
Se añade 2,6-dicloropirazina (3,00 g, 20,1 mmol) y tetraquis(trifenilfosfina) paladio (2,33 g, 2,01 mmol) a tributil(1-etoxivinil)estanano (8,08 g, 22,2 mmol) en tolueno anhidro (100 mL) bajo atmósfera de N2. A continuación, la mezcla se agita a 100 °C en atmósfera de N2 durante 16 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se vierte en una mezcla de KF ac. sat. (300 mL) y MTBE/EtOAc (1/1,200 mL) y se agita durante 1 h. Los sólidos se filtran sobre celita y se lavan con MTBE/EtOAc (1/1, 150 mL x 2). Se separa el filtrado. La capa acuosa se extrae con EtOAc (200 mL). La capa orgánica combinada se concentra a presión reducida. El residuo se lleva a acetona (200 mL) y se trata con HCl 1 N ac. (120 mL), se agita a 10-15 °C durante 1 h. La mezcla se concentra a presión reducida para eliminar la mayor parte de la acetona, y el residuo se extrae con MTBE/EtOAc (1/1, 100 mL x 3). La capa orgánica combinada se lava con NaHCO3 sat. (150 mL x 2), salmuera (150 mL x 2), secado sobre Na2SO4 anhidro, filtrado, concentrado a presión reducida, el residuo se purifica por cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con 0-10% EtOAc en PE para obtener el compuesto del título (1,0 g, 31,4%) como sólido amarillo.
1H RMN (400 MHz, CDCla): 8 = 9,14 (s, 1H), 8,80 (s, 1H), 2,74 (s, 3H).
2. Síntesis de 2-cloro-6-(1,1-difluoroetil)pirazina
Se añade trifluoruro de dietilaminosulfuro (2,81 g, 17,2 mmol) a 1-(6-cloropirazin-2-il)etanona (540 mg, 1,15 mmol) en diclorometano (30 mL) a 0 °C y la solución se agita a 15 °C durante 12 h. La mezcla de reacción se vierte en agua helada (30 mL), y se añade Na2CO3 ac. (10% masa en agua) gota a gota para ajustar el pH = 8. La mezcla de reacción se diluye con 30 mL de agua y se extrae con DCM (40 mL x 3). La capa orgánica se seca sobre Na2SO4, se filtra y se concentra a presión reducida para obtener el producto bruto (800 mg) en forma de aceite amarillo. El producto bruto se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con 0-30% de EA en P<e>para dar el compuesto del título (385 mg, 90 % en masa, 56,3%) como aceite amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCh): 8 = 8,86 (s, 1H), 8,71 (s, 1H), 2,05 (t,J=18,4 Hz, 3H).
Preparación 3: 2-cloro-6-(1-fluoro-1-metil-etil)pirazina
1. Síntesis de 2-(6-cloropirazin-2-il)propan-2-ol
Se añade 6-cloropirazina-2-carboxilato de metilo (20,0 g, 116 mmol) en THF (100 mL) a bromuro de metilmagnesio (3,0 mol/L) en éter dietílico (120 g, 348 mmol, 3,0 mol/L) a 0 °C y la mezcla se agita a esta temperatura durante 2 h. La reacción se apaga con solución de HCl 1,0 M (100 mL) y se extrae con EtOAc (100 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (100 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran para obtener un aceite amarillo. El aceite amarillo se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con 0-30% EA en PE para obtener el compuesto del título (3,80 g, 18,0%) como aceite marrón. LCMS (m/z): 172,8 [M+H]'.
2. Síntesis de 2-cloro-6-(1-fluoro-1-metil-etil)pirazina
Se añade DAST (6,74 g, 41,8 mmol) a 2-(6-cloropirazin-2-il)propan-2-ol (3,80 g, 20,9 mmol) en CH2Ch (30 mL) a 0 °C, después la mezcla de reacción se agita a 0 °C durante 1 h. La reacción se apaga con agua (20 mL) y se extrae con EtOAc (50 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaHCOs sat. (20 mL), HCl 1 M (20 mL) y salmuera (30 mL), y se secó sobre sulfato sódico anhidro y para obtener un aceite amarillo. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con 0-30% de EA en PE para obtener el compuesto del título (3,40 g, 84%) como aceite amarillo. LCMS (m/z): 174,9 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 = 8,75 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 1,76 (d,J=22,4 Hz, 6H)
Preparación 4: 2-doro-6-isopropoxi-pirazina
Se añade hidruro sódico en aceite (1,07 g, 26,8 mmol, 60%en masa) a propan-2-ol (0,807 g, 13,4 mmol) en THF (20 mL) a 0 °C y se agita la mezcla durante 20 min a esta temperatura. A continuación, se añade 2,6-dicloropirazina (2,00 g, 13,4 mmol) y la mezcla se agita a 20 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se vierte en una solución saturada de NH4Cl (100 mL) y se extrae con EtOAc (50 mL x 2). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera, se secan sobre sulfato sódico y se concentran para obtener el compuesto del título (2,20 g, 85,4%) en forma de aceite marrón.
1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 = 7,93 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 5,25-5,04(m, 1H), 1,21 (d,J= 6,4 Hz, 6H).
Preparación 5: 2-cloro-6-isopropil-pirazina
1. Síntesis de 2-cloro-6-isopropenil-pirazina
Se añaden 2-isopropenil-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (6,00 g, 35,4 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno] dicloropaladio(II) (1,32 g, 1,77 mmol) y carbonato sódico (9,37 g, 88,4 mmol) a 2,6-dicloropirazina (10,6 g, 70,7 mmol) en 1,4-dioxano (80 mL) y agua (20 mL) a bajo N2. La mezcla se agita a 100 °C durante 6 horas. El sólido se filtra. La mezcla se diluye con agua (100 mL) y se extrae con EtOAc (200 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (300 mL), se secan sobre Na2SO4 anhidro, se filtran y se evaporan para obtener el producto bruto. El producto bruto se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con 0-50% EtOAc en PE para obtener el compuesto del título (3,0 g, 54,9% de rendimiento) como aceite incoloro.
1H RMN (400 MHz, CDCh,)5= 8,65 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 6,02 (s, 1H), 5,47 (s, 1H), 2,21 (s, 3H).
2. Síntesis de 2-cloro-6-isopropil-pirazina
Añadir paladio sobre carbón activado (500 mg, 10 % en masa) a 2-cloro-6-isopropenil-pirazina (5,00 g, 19,4 mmol, 60 % en masa) en acetato de etilo (40 mL) bajo N2. Se agita a 20 °C bajo hidrógeno molecular (15 psi) durante 12 horas. El sólido se filtra. La mezcla se evapora para obtener el crudo. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo: EtOAc (3:1) para obtener el compuesto del título (1,56 g, 45% de rendimiento) como aceite incoloro. LCMS (m/z): 156,8 [M+H]+.
1H RMN: (400MHz, CDCI3)5 = 8,42(s, 1H), 8,38 (s, 1H), 3,14-3,05 (m, 1H), 1,34 (d,J =7,2 Hz, 6H).
Preparación 6: 2-tert-butoxi-6-doro-pirazina
Se añade 2,6-didoropirazina (2,0 g, 13 mmol) en THF (20 mL) a tert-butóxido potásico (1,0 g, 8,8 mmol) a 0 °C, la mezcla de reacción se agita a 0 °C durante 20 min, después la mezcla de reacción se agita a 20 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se vierte en una solución saturada de NH4Cl (100 mL) y se extrae con EtOAc (50 mL x 2). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera, se secan sobre sulfato sódico y se concentran. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo: EtOAc (3:1) para obtener el compuesto del título (2,18 g, 86%) como sólido blanco. LCMS (m/z): 131,2 [M-CH2=C(CHs)2+H]+.
Preparación 7: 2-cloro-6-(ciclobutoxi)pirazina
Se añade ciclobutanol (2,00 g, 17,0 mmol) a hidruro sódico (0,5 g, 19,8 mmol, 60%en masa) en tetrahidrofurano (20 mL) a 0 °C y la mezcla de reacción se agita a 20 °C durante 30 min. Después se añade 2,6-dicloropirazina (2,0 g, 13,0 mmol) y la mezcla se agita a 20 °C durante 12 h. La mezcla de reacción se vierte en NH4Clsaturado (30 mL). La mezcla resultante se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las fases orgánicas combinadas se lavan con agua (30 mL), salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro, se filtran y se concentran para obtener el compuesto del título (2,1 g, 87%) como sólido blanco. LCMS (m/z): 185,2 [M+H]+.
Preparación 8: 2-cloro-6-(3, 3-difluorociclobutoxi)pirazina
Se añade 3,3-difluorociclobutanol (2,00 g, 17,0 mmol) a hidruro sódico (0,5 g, 19,8 mmol, 60 % en masa) en tetrahidrofurano (20 mL) a 0 °C, después se agita la mezcla a 20 °C durante 30 min, se añade 2,6-dicloropirazina (2,0 g, 13,0 mmol) y se agita la mezcla a 20 °C durante 12 h. La mezcla de reacción se vierte en NH4Cl saturado (30 mL). La mezcla resultante se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las fases orgánicas combinadas se lavan con agua (30 mL), salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro, se filtran y se concentran para obtener el compuesto del título (2,4 g, 85%). LCMS (m/z): 221.,1 [M+H]+.
Preparación 9: 2-cloro-6-(1-metoxi-1-metil-etil)pirazina
. Síntesis de 2-(6-cloropirazin-2-N)propan-2-ol
Se añade bromuro de metilmagnesio (3 mol/L) en éter (28,7 mL, 86,1 mmol, 3 mol/L) a una solución de 6-cloropirazina-2-carboxilato de metilo (5,00 g, 28,7 mmol) en tetrahidrofurano (40 mL) a 0 °C y se agita la mezcla a 0 °C durante 2 horas. La reacción se apaga con solución de HCl 1,0 M (50 mL) y se extrae con EtOAc (50 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran para obtener un aceite amarillo. El aceite amarillo se purificó por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo/ EtOAc (3:1) para obtener el compuesto del título (600 mg, 11,5%) como aceite marrón.
2. Síntesis de 2-cloro-6-(1-metoxi-1-metil-etil)pirazina
Se añade hidruro sódico (0,0792 g, 1,98 mmol, 60% en masa) a una solución de 2-(6-cloropirazin-2-il)propan-2-ol (180 mg, 0,991 mmol) en DMF (1 mL) a 0 °C, y la mezcla se agita durante 30 min, después se añade yodometano (0,213 g, 1,49 mmol) a la solución y la mezcla se agita a 20 °C durante 2 h. La reacción se apaga con agua (20 mL) y se extrae con EtOAc (20 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran para obtener el compuesto del título (150 mg, 77,1%) como aceite marrón. 1H RMN (400 MHz, CDCls)5= 8,75 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 3,25 (s, 3H), 1,57 (s, 6H).
Preparación 10: 4-(5-bromo-2-pyridyl)-2-methyl-pyrazol-3-amina
1. Síntesis de (E)-2-(5-bromo-2-pmdM)-3-etoxi-prop-2-enemtmo
Se añade 2-(5-bromo-2-piridil)acetonitrilo (5,00 g, 25,1 mmol) en ortoformato de trietilo (30 mL) a anhídrido acético (7,93 g,75,4 mmol) y la mezcla se agita a 125 °C durante 36 h. La mezcla de reacción se concentra para obtener el compuesto del título (5,6 g, 88%) como un crudo marrón sin purificación adicional para el siguiente paso. LCMS (m/z): 253,1 [M+H]+.
2. Síntesis de 4-(5-bromo-2-piridil)-2-metil-pirazol-3-amina
Se añade (E)-2-(5-bromo-2-piridil)-3-etoxi-prop-2-enenitrilo (5,5 g, 21,8 mmol) en etanol (10 mL) a metilhidrazina (10 mL). La mezcla de reacción se calienta a 100 °C y se agita durante 3 horas. A continuación, se concentra la mezcla de reacción y se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo: EtOAc (3: 1) para obtener el compuesto del título (3,15 g, 57,1%). LCMS (m/z): 254,8/256,8 [M+H, Br79/Br81]+.
Preparación 11: N-[4-(5-bromo-2-piridil)-2-metil-pirazol-3-il]-6-isopropoxi-pirazin-2-amina
Se añade hidruro sódico (0,585 g, 14,6 mmol, 60% en masa) a una solución de 4-(5-bromo-2-piridil)-2-metil-pirazol-3-amina (1,30 g, 4,88 mmol) en DMF (15 mL). La mezcla de reacción se calienta a 50 °C y a continuación se añade 2-cloro-6-isopropoxi-pirazina (0,975 g, 5,37 mmol). La mezcla de reacción se agita a 50 °C durante 3 horas. La mezcla de reacción se vierte en solución de cloruro amónico (20 ml) y se extrae con EtOAc (30 mL x 2). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (20 mL x 2), se secan sobre sulfato sódico y se concentran para obtener el crudo. El residuo se purifica mediante cromatografía en columna (0-80% EA en PE) para dar el compuesto del título (1,20 g, 60,0%) como aceite amarillo. LCMS (m/z): 389,0/390,8 [M+H, Br79/Br81]+.
Ejemplo 1A 1-[4-[6-[5-[(6-tert-butoxipirazin-2-ii)amino]-1-metii-pirazoi-4-ii]-3-piridiÍ]fenii]ciciopropanocarboxiiato de metilo
1. Síntesis de 1-[4-[6-(5-amino-1-metN-pirazol-4-N)-3-piridN]fenN]ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añade 4-(5-bromo-2-piridil)-2-metil-pirazol-3-amina (0,9 g, 3,56 mmol %), carbonato sódico (0,754 g, 7,11 mmol), 1-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]ciclopropanocarboxilato (1.19 g, 3,73 mmol) en 1,4-dioxano (10,0 mL) y agua (2 mL) a [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II) (0,266 g, 0,356 mmol) bajo N2. A continuación, la mezcla de reacción se agita a 100 °C durante 4 h bajo N2. La mezcla de reacción se concentra para dar un sólido negro, que se purifica por cromatografía flash eludiendo con EtOAc: CH2Cl2 (1: 1) para obtener el compuesto del título (1,1 g, 89,2%) como sólido marrón. LCMS (m/z): 348,9 [M+H]+.
2. Síntesis de 1-[4-[6-[5-[(6-tert-butoxipirazm-2-N)ammo]-1-metN-pirazol-4-N]-3-piridil]fenil]cidopropanocarboxilato de metilo
Se añaden tris(dibencilideneacetona)dipaladio (116 mg, 0,123 mmol) y 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (110 mg, 0,185 mmol) a una solución de 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]fenil]cidopropanocarboxilato de metilo (430 mg, 1,23 mmol), 2-tert-butoxi-6-cloropirazina (254 mg, 1,23 mmol) y carbonato de cesio (1,21 g, 3,7 mmol) en 1,4-dioxano sin O2 (4 ml) a 25 °C. Luego la mezcla se agita a 100°C durante 6 h. La mezcla se filtra a través de una almohadilla de gel de sílice y el filtrado se concentra. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con PE/EtOAc (1: 1) para obtener el compuesto del título (160 mg, 25%). LCMS (m/z): 499,3 [M+H]+.
Ejemplo 1B Ácido 1-[4-[6-[5-[(6-tert-butoxipirazm-2-N)ammo]-1-metN-pirazol-4-N]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico
Se añade hidróxido de litio monohidratado (200 mg, 8,1 mmol) a 1-[4-[6-[5-[(6-tert-butoxipirazin-2-il)amino]-1-metilpirazol-4-il]-3-piridil]fenil] ciclopropanocarboxilato de metilo (160 mg, 0,32 mmol) en MeOH (3 mL) y agua (3 mL). La mezcla resultante se agita durante 12 horas a 25 °C. Se concentra la mezcla y se diluye con agua (5 mL). La mezcla se acidifica con HCl (1M) hasta pH = 4~6. La mezcla se extrae con DCM (5 mL x 5). Las fases orgánicas combinadas se lavan con salmuera (10 mL), se concentran y se purifican por prep-HPLC [Columna SunFire C18, 5^m, 30x100 mm Condición: agua (0,1%FA)-Ac N Inicio B 29 Fin B 44 Tiempo de gradiente(min) 10 100%B Tiempo de mantenimiento(min) 9,0 Caudal (ml/min) 30 ] para obtener el compuesto del título (100 mg, 64%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 485,3 [M+H]+.
1HRMN (500MHz, DMSO-d6)59,15 (s, 1H), 8,80 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,98 (m, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,60 7,57 (m, 3H), 7,54 (s, 1H), 7,43-7,40 (m, 3H), 3,67 (s, 3H), 1,48 (m, 2H), 1,23 - 1,23 (s, 9H), 1,15 (m, 2H).
Ejemplo 2A 1-[4-[6-[5-[[6-(ciclobutoxi)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
En condiciones libres de O2, se añaden tris(dibencilideneacetona)dipaladio (116 mg, 0,123 mmol) y 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (110 mg, 0185 mmol) a la solución de 1,4-dioxano (4 mL) de 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]fenil]ciclopropano carboxilato de metilo (430 mg, 1,23 mmol) (preparado de acuerdo con el Ejemplo 1A), 2-cloro-6-(ciclobutoxi)pirazina (250 mg, 1,36 mmol) y carbonato de cesio (1,21 g, 3,7 mmol)), se agitó a 100 °C durante 6 hr. La mezcla se filtra a través de una almohadilla de gel de sílice (200-300 mush) y se concentra el filtrado. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo: EtOAc (1: 1) para obtener el compuesto del título (260 mg, 41%). LCMS (m/z): 497.3 [M+H]+.
Ejemplo 2B Ácido 1-[4-[6-[5-[[6-(ciclobutoxi)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-pindM]feml]cidopropanocarboxíMco
Se añade hidróxido de litio monohidratado (200 mg, 8,1 mmol) a una solución de 1-[4-[6-[5-[[6-(ciclobutoxi)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (260 mg, 0,51 mmol) en MeOH (3 mL) y agua (3 mL) y se agita la mezcla durante 12 horas a 25 °C. La mezcla se concentra y se diluye con agua (5 mL). La mezcla se acidifica con HCl (1M) hasta pH = 4~6. La mezcla se extrae con DCM (5 mL x 5). Las fases orgánicas combinadas se lavan con salmuera (10 mL), se concentran y se purifican por prep-HPLC [Columna SunFire C18, 5^m, 30x100 mm Condición: agua (0,1%FA)-a Cn Inicio B 29 Fin B 44 Tiempo de gradiente (min) 10 100%B Tiempo de mantenimiento (min) 8,5 Caudal (ml/min) 30] para obtener el compuesto del título (50 mg, 23%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 483.3 [M+H]+.
1H RMN (500MHz, DMSO-d6)59,32 (s, 1H), 8,80 (s, 1H), 8,80 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 8,00 (m, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,63 7,57 (m, 3H), 7,54 (s, 1H), 7,41 (m, 2H), 4,63 (m, 1H) 3,68 (s, 3H), 2,11 (m,2H), 2,02 (m, 2H). 1,68 (m, 1H), 1,49 (m, 1H), 1,46 (m, 2H), 1,14 (m, 2H).
Ejemplo 3A 1-[4-[6-[5-[[6-(ciclopropoxi)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-5-fluoro-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo 1
1. Síntesis de 2-(5-cloro-3-fluoro-2-piridil)acetonitrilo
Añadir n-butilitio en hexanos (110 g, 381 mmol, 2,5 mol/L) a una solución de acetonitrilo (17,2 g, 419 mmol) en THF anhidro (50 mL) a -78 °C bajo nitrógeno. La mezcla se agita a -78 °C durante 30 min. A continuación, se añade una solución de 5-cloro-2,3-difluoro-piridina (60,0 g, 381 mmol) en THF (100 mL) y la mezcla se agita a -78 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se calienta a 20 °C y se agita durante 1 h. La mezcla de reacción se apaga con NH4Cl sat. (300 mL). La mezcla de reacción se extrae con EtOAc (200 mL x 3). Las fases orgánicas combinadas se lavan con agua (100 mL), salmuera (100 mL) y se concentran para obtener un residuo amarillo, que se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con PE:EtOAc (10:1) para obtener el compuesto del título 2-(5-cloro-3-fluoro-2-piridil)acetonitrilo (20,0 g, 30,8%) como un aceite amarillo. LCMS (m/z): 170,8 [M+H]+.
2. Síntesis de (Z)-2-(5-cloro-3-fluoro-2-piridil)-3-etoxi-prop-2-enenitrilo
Se añade 2-(5-cloro-3-fluoro-2-piridil)acetonitrilo (20,0 g, 117 mmol) en anhídrido acético (47,9 g, 469 mmol) a ortoformato de trietilo (100 mL) y se agita la mezcla a 125 °C durante 36 h. La mezcla de reacción se concentra para obtener el compuesto del título (Z)-2-(5-cloro-3-fluoro-2-piridil)-3-etoxi-prop-2-enenitrilo (45,7 g, 117 mmol, 58% en masa, 99,5%) como un aceite marrón que se utiliza directamente para el paso siguiente sin purificación adicional. LCMS (m/z): 226,9 [M+H]+.
3. Síntesis de 4-(5-doro-3-fluoro-2-piridil)-2-metil-pirazol-3-amina
Se añade metilhidrazina (40,4 g, 351 mmol, 40 % en masa) a una solución de 2-(5-cloro-3-fluoro-2-piridil)-3-etoxi-prop-2-enenitrilo (45,7 g, 117 mmol, 58 % en masa) en etanol (100 mL), y la mezcla de reacción se agita a 100 °C durante 3 h. La mezcla de reacción se concentra y se purifica por cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con PE:EtOAc (1:1) para obtener el título (5,50 g, 19,7%) como sólido marrón. LCMS (m/z): 226,9 [M+H]+.
4. Síntesis de 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-5-fluoro-3-piridil]fenil]cidopropanocarboxilato de metilo
Se añaden Pd2(dba)3 (0,576 g, 0,629 mmol) y triciclohexilfosfina (0,184 g, 0,629 mmol) a carbonato sódico (1,33 g, 12,6 mmol), 1-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (1,55 g, 4,61 mmol, 90 % en masa) y 4-(5-cloro-3-fluoro-2-piridil)-2-metil-pirazol-3-amina (1,00 g, 4,19 mmol) en 1,4-dioxano (16 ml) y agua (4 ml), luego la mezcla de reacción se agita a 90 °C durante 1 h en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se concentra para obtener un residuo negro, que se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con PE:EtOAc (2:3) para obtener el título (1,20 g, 74,2%) como sólido marrón. LCMS (m/z): 367,1 [M+H]+.
5. Síntesis de 1-[4-[6-[5-[[6-(ciclopropoxi)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-5-fluoro-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añade Pd2(dba)3 (0,107 g, 0,117 mmol) y 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (0,0675 g, 0,117 mmol) a una solución de 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-5-fluoro-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (300 mg, 0,778 mmol), 2-cloro-6-(ciclopropoxi)pirazina (0,168 g, 0,933 mmol) y carbonato de cesio (0,760 g, 2,33 mmol) en 1,4-dioxano (3 ml), luego la mezcla de reacción se agita a 90 °C durante 1 h bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se concentra y se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con PE:EtOAc (1:2) para obtener el compuesto del título (320 mg, 87 % masa, 71,5%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 501,2 [M+H]+.
Ejemplo 3B Ácido 1-[4-[6-[5-[[6-(ddopropoxi)pirazm-2-N]ammo]-1-metil-pirazol-4-N]-5-fluoro-3-piridM]feml]cidopropanocarboxíMco;dorhidrato
Se añade hidróxido de litio hidratado (0,0461 g, 1,04 mmol) a una solución de 1-[4-[6-[5-[[6-(ciclopropoxi)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-5-fluoro-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (300 mg, 0,521 mmol, 87 % en masa) en metanol (1 mL) y agua (1 mL), y la mezcla se agitó a 60 °C durante 1 h. Luego la mezcla de reacción se acidifica con HCl 1 N hasta pH = 6 y se elimina el disolvente. El producto bruto se purifica mediante HPLC preparativa [columna: YMC-ActusTriart C18 150 x 30mm x 5^m, Condición: 55-85%B (A: agua/ 0,05% HCl, B: CH3CN), caudal: 25 mL/min] y se liofilizó para obtener el compuesto del título (153,0 mg, 55,3%) como sólido amarillo. L<c>M<s>(m/z): 4871 [M+H]+.
1H RMN (400MHz, CD3OD) 5 = 8,65 (s, 1H), 8,00 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 7,95 (br d,J= 12,0 Hz, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,63 (d,J= 8,0 Hz, 2H), 7,60 (s, 1H), 7,49 (d,J= 8,0 Hz, 2H), 3,99 - 3,92 (m, 1H), 3,86 (s, 3H), 1,64 - 1,58 (m, 2H), 1,25 -1,20 (m, 2H), 0,70 -0,58 (m, 4H).
Ejemplo 4A Metil 1-[4-[5-fluoro-6-[5-[[6-(1-fluoro-1-metil-etil)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato
Se añaden carbonato de cesio (1,18 g, 3,63 mmol) y Pd2(dba)3 (85,7 mg, 0,0907 mmol) a 1-[4-[6-(5-amino-1-metilpirazol-4-il)-5-fluoro-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (350 mg, 0,907 mmol) (preparado de acuerdo con el Ejemplo 3A), 2-cloro-6-(1-fluoro-1-metil-etil)pirazina (220 mg, 1,13 mmol, 90 % en masa) y 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (81,0 mg, 0,136 mmol) en 1,4-dioxano (5 mL) bajo N2. La mezcla se agita a 100 °C durante 12 horas. La reacción se apaga con agua (20 mL) y se extrae con EtOAc (20 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran para obtener el producto bruto. El residuo se purifica mediante cromatografía en columna eludiendo con 0-80% EtOAc en PE para obtener el producto del título (350 mg, 60 masa%, 45,9%) como aceite marrón. LCMS (m/z): 505,1 [M+H]+.
Ejemplo 4B Clorhidrato de ácido 1-[4-[5-fluoro-6-[5-[[6-(1-fluoro-1-metil-etil)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico
Se añade hidróxido de litio hidratado (53,5 mg, 1,25 mmol) a 1-[4-[5-fluoro-6-[5-[[6-(1-fluoro-1-metil-etil)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (350 mg, 0,416 mmol, 60% en masa) en tetrahidrofurano (5 mL) y agua (0,5 mL). La reacción se agita a 50 °C durante 14 horas. La mezcla se ajusta a pH=5-6 con HCl 1 N, se extrae con EtOAc (40 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre Na2SO4, se filtran y se concentran. El producto bruto se purifica por prep-HPLC [Columna YMC-Actus Triart C18 100 x 30mm x 5^m Condición: agua (0,o5%HCl)-ACN Inicio B 50 Fin B 80 Tiempo de gradiente(min) 9,5 100%B Tiempo de mantenimiento(min) 2,5 Velocidad de flujo(ml/min) 25 ] para obtener el producto del título (116 mg, 51,6%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 491.1 [M+H]+.
1H RMN (400 MHz, MeOD):5= 8,71 (d,J= 1,6 Hz, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,20 (dd,J= 11,6, 2,0 Hz, 1H), 8,14 (s, 1H), 8,07 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 7,67 (d,J= 8,4 Hz, 2H), 7,53 (d,J= 8,4 Hz, 2H), 3,89 (s, 3H), 1,68-1,61 (m, 2H), 1,44 (d,J= 22,0 Hz, 6H), 1,29-1,22 (m, 2H).
Ejemplo 5A 1-[4-[6-[5-[[6-(3,3-difluorociclobutoxi)pirazm-2-N]ammo]-1-metN-pirazol-4-N]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añaden tris(dibencilideneacetona)dipaladio (116 mg, 0,123 mmol), 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (110 mg, 0,185 mmol) y carbonato de cesio (1,21 g, 3,7 mmol)a una solución de 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (530 mg, 1,52 mmol) (preparado de acuerdo con el Ejemplo 1A) y 2-cloro-6-(ciclobutoxi)pirazina (250 mg, 1,36 mmol) en 1,4-dioxano libre deO2 (4 mL) a 25 °C. La mezcla se agita a 100 °C y se deja enfriar. La mezcla se filtra a través de una almohadilla de gel de sílice (200-300 mush) y se concentra el filtrado. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo: EtOAc (1:1) para obtener el compuesto del título (260 mg, 41%). LCMS (m/z): 497,3 [M+H]+.
Ejemplo 5B Ácido 1-[4-[6-[5-[[6-(3,3-difluorociclobutoxi)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico
Se añade hidróxido de litio monohidratado (200 mg, 8,1 mmol) a una solución de 1-[4-[6-[5-[[6-(3,3-difluorociclobutoxi)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (260 mg, 0,51 mmol) en MeOH (3 mL) y agua (3 mL). La mezcla resultante se agita durante 12 horas a 25 °C. Se concentra la mezcla y se diluye con agua (5 mL). La mezcla se acidifica con HCl (1M) hasta pH = 4~6 y se extrae con DCM (5 mL x 5). Las fases orgánicas combinadas se lavan con salmuera (10 mL), se concentran y se purifican por prep-HPLC [Columna SunFire C18, 5^m, 30x100 mm Condición: agua (0,1%FA)-Ac N Inicio B 29 Fin B 44 Tiempo de gradiente(min) 10 100%B Tiempo de mantenimiento(min) 8,5 Caudal(ml/min) 30 ] para obtener el compuesto del título (50 mg, 23%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 483,3 [M+H]+.
1 RMN (500MHz, DMSO-d6)5= 9,41 (s, 1H), 8,79 (m, 1H), 8,80 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,99 (m, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,63 7,58 (m, 4H), 7,43 (m, 2H), 4,61 (m, 1H) 3,69 (s, 3H), 2,79 (m,2H), 2,57 (m, 2H). 1,45 (m,2H), 1,14 (m, 2H).
Ejemplo 6A Metil 1 -[4-[6-[5-[[6-(1-metoxi-1 -metil-etil)pirazin-2-il]amino]-1 -metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]cidopropanocarboxilato
Se añaden tris(dibencilideneacetona)dipaladio (0,0384 g, 0,0407 mmol), 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (0,0364 g, 0,0611 mmol) y carbonato de cesio (0,398 g, 1,22 mmol) a una solución de 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (0,142 g, 0,387 mmol), 2-doro-6-(1-metoxi-1-metil-etil)pirazina (80,0 mg, 0,407 mmol) en 1,4-dioxano (4 mL) bajo N2. La mezcla se agita a 100 °C durante 4 horas. La reacción se apaga con agua (20 mL) y se extrae con EtOAc (20 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran para obtener el crudo. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo/ EtOAc (1:5) para obtener el compuesto del título (90 mg, 44,3%) como aceite marrón. LCMS (m/z): 521,1[M+Na]+.
Ejemplo 6B Ácido 1-[4-[6-[5-[[6-(1-metN-etN)pirazm-2-N]ammo]-1-metN-pirazol-4-N]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico;clorhidrato
Se añade hidróxido de litio (11,4 mg, 0,271 mmol) a una solución de 1-[4-[6-[5-[[6-(1-metaxi-1-metil-etil)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (90 mg, 0,181 mmol) en tetrahidrofurano (4 mL) y agua (4 mL) a temperatura ambiente. La mezcla se agita a 60 °C durante 2 horas. Se extrae la mezcla con EtOAc (10mL x 3) y se ajusta el acuoso a pH=5-7 con HCl (1M). La mezcla se extrae con EtOAc (30mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30mL), se secan sobre Na2SO4 anhidro, se filtran y se evaporan para obtener el crudo. Se purifica por pre-HPLC [Columna Boston Green ODS 150*30, 5 ^m, Condición agua (0,05%Hcl)-ACN Inicio B 35 Fin B 65 Tiempo de gradiente(min) 3100%B Tiempo de mantenimiento(min) 1,66 Caudal (ml/min) 25] para obtener el compuesto del título (44,1 mg, 45,3%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 485,2 [M+H]+.
1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) 5 = 9,99 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,43 (d,J= 7,2 Hz, 1H), 8,27 (d,J= 4,4 Hz, 2H), 8,09 (s, 1H), 7,81 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 7,68 (d,J= 8,4 Hz, 2H), 7,46 (d,J= 8,0 Hz, 2H), 3,78 (s, 3H), 2,92 (s, 3H), 1,52-1,45 (m, 2H), 1,22-1,09 (m, 2H), 1,09 (s, 6H).
Ejemplo 7A 1-[4-[6-[5-[(6-isopropoxipirazm-2-M)ammo]-1-metil-pirazol-4-M]-3-piridM]-2-metM-fenil]ciclopropanocarboxilato de etilo
1. Síntesis de 2-(4-bromo-2-metil-fenil)acetato de etilo
Se añade ácido sulfúrico (3,68 g, 2 mL) a una mezcla de ácido 2-(4-bromo-2-metil-fenil)acético (2,00 g, 8,73 mmol) en etanol (20 mL), después se agita la mezcla de reacción a 80 °C durante 2 h. Se enfría la mezcla de reacción a 20 °C y se vierte en agua (100 mL). La mezcla resultante se neutraliza por Na2CO3 sat. a pH = 8. La mezcla se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las fases orgánicas combinadas se lavan con agua (20 mL) y salmuera (20 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran para obtener el compuesto del título (2,30 g, 97,3%) como un aceite amarillo.
1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 7,34 (s, 1H), 7,29 (dd,J= 2,0, 8,4 Hz, 1H), 7,07 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 4,16 (q,J= 7,2 Hz, 2H), 3,58 (s, 2H), 2,30 (s, 3H), 1,25 (t,J= 7,2 Hz, 3H)
2. Síntesis de 1-(4-bromo-2-metil-fenil)ciclopropanocarboxilato de etilo
Se añade hidruro sódico (60 % en masa) en aceite (0,296 g, 7,39 mmol, 60 % en masa) a una mezcla de 2-(4-bromo-2-metil-fenil)acetato de etilo (1,00 g, 3,69 mmol) en DMF (5 mL). La mezcla se agita a 20 °C durante 0,5 h y, a continuación, se añade 1,2-dibromoetano (0,764 g, 4,06 mmol) y se agita a 20 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se apaga con NH4Cl sat. (10 mL). La mezcla resultante se extrae con EtOAc (10 mL x 3). Las fases orgánicas combinadas se lavan con agua (20 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro, se filtran y se concentran, purificándose después por cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con PE:EtOAc (10 :1) para obtener el compuesto del título (100 mg, 9,08%) como un aceite incoloro.
1H RMN (400MHz, CDCls) 5 = 7,32 (d,J= 1,6 Hz, 1H), 7,27 (dd,J= 1,6, 8,4 Hz, 1H), 7,10 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 4,10 (q,J= 7,2 Hz, 2H), 2,30 (s, 3H), 1,70 - 1,65 (m, 2H), 1,16 (t,J= 7,2 Hz, 3H), 1,14 - 1,09 (m, 2H)
3. Síntesis de 1-[4-[6-[5-[(6-isopropoxipirazm-2-N)ammo]-1-metN-pirazol-4-N]-3-piridN]-2-metN-fenil]ciclopropanocarboxilato de etilo
Se añaden Pd(dppf)Cl2 (0,0225 g, 0,0302 mmol) y acetato potásico (0,0916 g, 0,906 mmol) a una solución de 1-(4-bromo-2-metil-fenil)ciclopropanocarboxilato de etilo (90 mg, 0,302 mmol) en 1,4-dioxano (0,5 mL).0 mg, 0,302 mmol), bis(pinacolato)diborón (0,0861 g, 0,332 mmol) en 1,4-dioxano (0,5 mL), después se agita la mezcla de reacción a 90 °C durante 1 h bajo nitrógeno. Se añade N-[4-(5-bromo-2-piridil)-2-metil-pirazol-3-il]-6-isopropoxi-pirazin-2-amina (0,136 g, 0,332 mmol), carbonato sódico (0,0960 g, 0,906 mmol) y agua (0,1 mL) a la solución anterior y se agita a 90 °C durante 1 h bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se concentra para obtener un residuo negro, que se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con PE:EtOAc (1:1) para obtener el compuesto del título (90 mg, 58,0%) como aceite amarillo. LCMS (m/z): 513,2 [M+H]+.
Ejemplo 7B Ácido 1-[4-[6-[5-[(6-isopropoxipirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-2-metilfenil]ciclopropanocarboxílico;clorhidrato
Se añade hidróxido de litio hidratado (0,0137 g, 0,323 mmol) a una mezcla de 1-[4-[6-[5-[(6-isopropoxipirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-2-metilfenil]cidopropanocarboxilato de etilo (90 mg, 0,162 mmol) en metanol (1 mL) y agua (1 mL), luego la mezcla de reacción se agita a 60 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se acidifica con HCl 1 N hasta pH = 6 y se extrae con EtOAc (30 ml x 3), se seca sobre sulfato de sodio anhidro, se filtra y se concentra. El producto bruto se purifica por prep-HPLC [columna: YMC-ActusTriart C18 150 x 30mm x 5^m, Condición: 30-60%B (A: agua/ 0,05% HCl, B: CH3CN), caudal: 25 mL/min] y se liofilizó para obtener el compuesto del título (17,9 mg, 20,5%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 485,2 [M+H]+.
1H RMN (400MHz, CD3OD) 5 = 8,90 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 8,71 (dd,J= 2,0, 8,8 Hz, 1H), 8,27 (s, 1H), 8,11 (d,J= 8,8 Hz, 1H), 7,81 (br s, 1H), 7,62 - 7,57 (m, 2H), 7,54 (dd,J= 2,0, 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 4,78 - 4,67 (m, 1H), 3,87 (s, 3H), 2,46 (s, 3H), 1,74 - 1,66 (m, 2H), 1,25 - 1,17 (m, 2H), 1,12 (d,J= 6,4 Hz, 6H).
Ejemplo 8A 1-[4-[6-[5-[[6-(ddopropoxi)pirazm-2-N]ammo]-1-metN-pirazol-4-N]-3-piridN]-2-(trifluorometil)fenil]cidopropanocarboxilato de etilo
1. Síntesis del ácido 2-[4-bromo-2-(trifluorometil)fenil]acético
Se añade ácido clorhídrico (2 mL, 12 M) a una solución de 2-[4-bromo-2-(trifluorometil)fenil]acetonitrilo (600 mg, 2,25 mmol) en ácido acético (2 mL), se agita la mezcla a 100 °C durante 2 h bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se concentra para obtener el compuesto del título (600 mg, 89,5%) como aceite incoloro.
1H RMN (400MHz, CDCls) 5 = 7,82 (d,J= 1,6 Hz, 1H), 7,67 (dd,J= 1,6, 8,4 Hz, 1H), 7,29 (s, 1H), 3,83 (s, 2H).
2. Síntesis de 2-[4-bromo-2-(trifluorometil)fenil]acetato de etilo
Se añade ácido sulfúrico (3,68 g, 2 mL) a una solución de ácido 2-[4-bromo-2-(trifluorometil)fenil]acético (600 mg, 2,0 mmol) en etanol (10 mL), se agita la mezcla a 80 °C durante 3 h bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se diluye con agua (20 mL) y se extrae con EtOAc (20 mL x 2). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaHCO3 sat. (20 mL), salmuera (20 mL x 2), se secó sobre sulfato sódico y se concentró para obtener el compuesto del título (600 mg, 91,0%) como aceite incoloro.
1H RMN (400MHz, CDCh) 5 = 7,80 (d,J= 1,6 Hz, 1H), 7,66 (dd,J= 1,6, 8,0 Hz, 1H), 7,28 (d,J= 9,2 Hz, 1H), 4,17 (q,J= 7,2 Hz, 2H), 3,77 (s, 2H), 1,25 (t,J= 7,2 Hz, 3H).
3. Síntesis de 1-[4-bromo-2-(trifluorometil)fenil]ciclopropano carboxilato de etilo
Se añade hidruro sódico en aceite de parafina (0,148 g, 3,69 mmol, 60 % en masa) a una solución de 2-[4-bromo-2-(trifluorometil)fenil]acetato de etilo (550 mg, 1,68 mmol) en DMF (5 mL), después se calienta la mezcla a 50 °C durante 1 hora. se añade 1 ,2-dibromoetano (0,335 g, 1,76 mmol) y la reacción se agita a 50 °C durante 2 horas. La reacción se apaga con solución saturada de<n>H4CI (30 mL) y se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro, se filtran y se concentran. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo/ EtOAc (20:1) para obtener el crudo. El crudo se purifica por pre-HPLC [columna: Boston Green ODS 150 x 30, 5^m. Condición: 35-65%B (A: agua(0,05%HCl), B:ACN), caudal: 25 mL/min] para obtener el compuesto del título (0,150 g, 25,2%) como aceite incoloro. LCMS (m/z): 336,9/338,8 [M+H, Br79/Br81]+.
1H RMN (400MHz, CDCls) 5 = 7,78 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 7,63 (dd,J= 1,6, 8,4 Hz, 1H), 7,34 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 4,13 -3,96 (m, 2H), 1,65-1,58 (m, 2H), 1,33 -1,19 (m, 2H), 1,12 (t,J= 7,2 Hz, 3H).
4. Síntesis de 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]-2-(trifluorometil) fenil]ciclopropanocarboxilato de etilo
Se añaden Pd(dppf)Cl2 (0,0316 g, 0,0423 mmol) y acetato potásico (0,128 g, 1,27 mmol) a una solución de 1-[4-bromo-2-(trifluorometil)fenil]ciclopropanocarboxilato de etilo (150 mg, 0,423 mmol), bis(pinacolato)diborón (0,120 g, 0,465 mmol) en 1,4-dioxano (4 mL), después se agita la mezcla de reacción a 90 °C durante 1 h bajo nitrógeno. A continuación, se añade 4-(5-bromo-2-piridil)-2-metil-pirazol-3-amina (0,124 g, 0,465 mmol), carbonato sódico (0,134 g, 1,27 mmol) y agua (1 mL) a la solución anterior y se agita a 90 °C durante 1 h bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se concentra para obtener un residuo negro, que se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con PE:EtOAc (1: 1) para obtener el compuesto del título (140 mg, 77,6%) en forma de aceite amarillo. LCMS (m/z): 431,1 [M+H]+.
5. Síntesis de 1-[4-[6-[5-[[6-(ciclopropoxi)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-2-(trifluorometil)fenil] ciclopropanocarboxilato de etilo
Se añaden tris(dibencilideneacetona)dipaladio (0,0300 g, 0,0328 mmol), 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (0,0190 g, 0,0328 mmol) y carbonato de cesio (0,320 g, 0.984 mmol) a una mezcla de 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]-2-(trifluorometil)fenil]ciclopropanocarboxilato de etilo (140 mg, 0.328 mmol), 2-cloro-6-(ciclopropoxi)pirazina (0,0706 g, 0,393 mmol) en 1,4-dioxano (5 mL), después se agita la mezcla de reacción a 95 °C durante 2 h bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se concentra y se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con PE:EtOAc (4:1) para obtener el compuesto del título (133 mg, 72,0%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 565.1 [M+H]+.
Ejemplo 8B Ácido 1 -[4-[6-[5-[[6-(ciclopropoxi)pirazin-2-il]amino]-1 -metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-2-(trifluorometil)fenil]ciclopropanocarboxílico;clorhidrato
Se añade hidróxido de litio hidratado (0,0187 g, 0,446 mmol) a una mezcla de 1-[4-[6-[5-[[6-(ciclopropoxi)pirazin-2il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-2-(trifluorometil)fenil]ciclopropanocarboxilato de etilo (133 mg, 0,223 mmol) en metanol (2 mL) y agua (2 ml), luego la mezcla de reacción se agita a 60 °C durante 1 h. La mezcla de reacción se acidifica con HCl 1 N hasta pH = 6 y luego se purifica mediante HPLC preparativa [columna: YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5^m, Condición: 40-70%B (A: agua/ 0,05% HCl, B: CH3CN), caudal: 25 mL/min] y se liofilizó para obtener el compuesto del título (34,4 mg, 25,3%) como sólido blanco. LCMS (m/z): 537,0 [M+H]+.
1H RMN (400MHz, CD3OD) 5 = 9,01 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 8,76 (dd,J= 2,4, 8,8 Hz, 1H), 8,27 (s, 1H), 8,15 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,00 (dd,J= 1,6, 8,0 Hz, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,77 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 7,70 (s, 1H), 3,91 - 3,84 (m, 4H), 1,97 - 1,54 (m, 2H), 1,54 - 1,08 (m, 2H), 0,65 - 0,55 (m, 4H)
Ejemplo 9A 1-[2-dano-4-[6-[5-[[6-(ddopropoxi)pirazm-2-N]ammo]-1-metil-pirazol-4-N]-3-piridil]fenil]cidopropanocarboxilato de etilo
1. Síntesis de 2-(4-bromo-2-ciano-fenil)acetato
Se añade clorotrimetilsilano (0,233 g, 2,10 mmol) a una mezcla de zinc (2,55 g, 39,0 mmol) en tetrahidrofurano (20 mL) a 15 °C. La mezcla se agita durante 15 min y después se añade gota a gota una solución de bromoacetato de etilo (5,11 g, 30,0 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL). La reacción se calienta a 40 °C durante 30 min. La mezcla se enfría a 20 °C y el líquido sobrenadante se utiliza como compuesto del título bromo-(2-etoxi-2-oxo-etil)zinc (30 mmol, 1 mol/L, 100%) en el siguiente paso directamente. Se añade bromo-(2-etoxi-2-oxo-etil)zinc (15,4 mL, 15,4 mmol, 1 mol/L) a una mezcla de 5-bromo-2-yodo-benzonitrilo (4,00 g, 12,9 mmol), bis(dibencilideneacetona)paladio (0.187 g, 0,322 mmol,) y 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (0,188 g, 0,322 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) bajo nitrógeno. La reacción se calienta a 65 °C durante 12 horas. La reacción se apaga con solución saturada de NH4Cl (30 mL) y se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro, se filtran y se concentran. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo/EtOAc (10:1) para obtener el compuesto del título (0,520 g, 14,3%) como sólido gris claro.
1H RMN (400MHz,CDCls) 5 = 7,80 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 7,70 (dd,J= 2,0, 8,4 Hz, 1H), 7,32 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 4,21 (q,J= 7,2 Hz, 2H), 3,84 (s, 2H), 1,29 (t,J= 7,2 Hz, 3H).
2. Síntesis de 1-(4-bromo-2-dano-feml)ddopropanocarboxNato de etilo
Se añade hidruro sódico en aceite de parafina (0,162 g, 4,05 mmol, 60% en masa) a una solución de 2-(4-bromo-2-ciano-fenil)acetato de etilo (0,520 g, 1,84 mmol) en DMF (10 mL), y se calienta la mezcla a 50 °C durante 1 hora. A continuación, se añade 1,2-dibromoetano (0,367 g, 1,93 mmol) y la reacción se agita a 50 °C durante 3 horas. La reacción se apaga con solución saturada de NH4Cl (30 mL) y se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro, se filtran y se concentran. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo/ EtOAc (20:1) para obtener el compuesto del título (0,370 g, 64,9%) como sólido gris.
1H RMN (400MHz, CDCls) 5 = 7,79 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 7,67 (dd,J= 2,0, 8,4 Hz, 1H), 7,28 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 4,14 (q,J= 7,2 Hz, 2H), 1,85 - 1,79 (m, 2H), 1,29 - 1,24 (m, 2H), 1,20 (t,J= 7,2 Hz, 3H).
3. Síntesis de 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]-2-cianofenil]ciclopropanocarboxilato de etilo
Se añade [1,1-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(N) (0,0482 g, 0,0646 mmol) a una mezcla de 1-(4-bromo-2-ciano-fenil)ciclopropanocarboxilato de etilo (200 mg, 0.646 mmol), bis(pinacolato)diboro (0,184 g, 0 ,7 ll mmol) y acetato potásico (0,196 g, 1,94 mmol) en 1,4-dioxano (4 mL), después se agita la mezcla de reacción a 90 °C durante 1 h bajo nitrógeno. A continuación, se añaden 4-(5-bromo-2-piridil)-2-metil-pirazol-3-amina (0,189 g, 0,711 mmol), carbonato sódico (0,205 g, 1,94 mmol) y agua (1 mL) a la solución anterior y se agita a 90 °C durante 1 h bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se concentra para obtener un residuo negro, que se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con PE:EtOAc (1:1) para obtener el compuesto del título (230 mg, 87,3%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 388,1 [M+H]+.
1H RMN (400MHz, CDCls) 5 = 8,68 (d,J= 2,4 Hz, 1H), 7,86 (d,J= 1,6 Hz, 1H), 7,80 (dd,J= 2,4, 8,4 Hz, 1H), 7,76 -7,71 (m, 2H), 7,49 (dd,J= 1,6, 8,4 Hz, 2H), 5,62 (br s, 2H), 4,17 (q,J= 7,2 Hz, 2H), 3,71 (s, 3H), 1,88 -1,81 (m, 2H), 1,36 - 1,30 (m, 2H), 1,22 (t,J= 7,2 Hz, 3H).
4. Síntesis de 1-[2-ciano-4-[6-[5-[[6-(cidopropoxi)pirazm-2-M]ammo]-1-metM-pirazol-4-M]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de etilo
Se añaden tris(dibencilideneacetona)dipaladio(0) (0,0695 g, 0,0736 mmol) y 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (0,0434 g, 0,0736 mmol) a una mezcla de 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]-2-cianofenil]ciclopropanocarboxilato de etilo (200 mg, 0.490 mmol), 2-cloro-6-(ciclopropoxi)pirazina (0,106 g, 0,589 mmol) y carbonato de cesio (0,479 g, 1,47 mmol,) en 1,4-dioxano (5 mL, después la mezcla de reacción se agita a 95 °C durante 2 h bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se concentra para obtener un residuo negro, que se purifica por cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con PE:EtOAc (1:4) para obtener el compuesto del título (200 mg, 63% en masa, 49,3%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 522,1 [M+H]+.
Ejemplo 9B Ácido 1-[2-dano-4-[6-[5-[[6-(ddopropoxi)pirazm-2-N]ammo]-1-metN-pirazol-4-N]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico;clorhidrato
Se añadió hidróxido de litio hidratado (0,0203 g, 0,483 mmol) a una mezcla de 1-[2-ciano-4-[6-[5-[[6-(ciclopropoxi)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de etilo (200 mg, 0,242 mmol, 63 % en masa) en metanol (2 mL) y agua (2 mL, luego la mezcla de reacción se agita a 60 °C durante 1 h. La mezcla de reacción se acidifica con HCl 1 N hasta pH = 6 y está concentrado. Después se purificó por prep-HPLC [columna: YMC-Actus Triart C18 150 x 30mm x 5^m, Condición: 35-65%B (A: agua/ 0,05% HCl, B: CH3CN), caudal: 25 mL/min] y se liofilizó para obtener el compuesto del título (49,6 mg, 92,44% en masa, 35,8%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 494.1 [M+H]+.
1H RMN (400MHz, CDCls) 5 = 9,02 (s, 1H), 8,77 (d,J= 7,2 Hz, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,18 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 8,05 (d,J= 7.2 Hz, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,79 - 7,67 (m, 2H), 3,99 - 3,80 (m, 4H), 1,86 - 1,75 (m, 2H), 1,45 - 1,34 (m, 2H), 0,71 -0,54 (m, 4H).
Ejemplo 10A 1-[4-[6-[5-[[6-(ddopropoxi)pirazm-2-N]ammo]-1-metil-pirazol-4-N]-3-piridil]fenil]cidopropanocarboxilato de metilo
Se añaden 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]fenil]cidopropanocarboxilato de metilo (530 mg, 1,377 mmol) (preparado de acuerdo con el Ejemplo 1A), 2-doro-6-(cidopropoxi)pirazina (300 mg, 1,758 mmol) y carbonato de cesio (1,0 g, 3,1 mmol) en 1,4-dioxano sin O2 (10 ml) a tris(dibencilidenacetona)dipaladio (300 mg, 0,33 mmol) y 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (280 mg, 0,483 mmol) a 25 °C. Luego la mezcla se agita a 100°C durante 6 h. La mezcla se filtra a través de una almohadilla de gel de sílice (200-300 mush) y se concentra el filtrado. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo: EtOAc (1: 1) para obtener el compuesto del título (300 mg, 45,2%) en forma de aceite amarillo claro. LCMS (m/z): 483.2 [M+H]+.
Ejemplo 10B Ácido 1-[4-[6-[5-[[6-(ddopropoxi)pirazm-2-N]ammo]-1-metil-pirazol-4-N]-3-piridil]fenil]cidopropanocarboxMico
Se añade 1-[4-[6-[5-[[6-(ciclopropoxi)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (300 mg, 0,621 mmol) en THF (4 mL) y agua (2 mL) a hidróxido de litio monohidratado (200 mg, 8,1 mmol). La mezcla resultante se agita durante 12 horas a 25 °C. Se concentra la mezcla y se diluye con agua (5 mL). La mezcla se acidifica con HCl (1M) hasta pH = 4~6. La mezcla se extrae con DCM (5 mL x 5). Las fases orgánicas combinadas se lavan con salmuera (10 mL), se concentran y se purifican por prep-HPLC [Columna SunFire C18, 5^m, 30x100 mm Condición: agua (0,1%FA)-A<c>N Inicio B 29 Fin B 44 Tiempo de gradiente (min) 10 100%B Tiempo de mantenimiento(min) 7,5 Caudal(ml/min) 30 ] para obtener el compuesto del título (50 mg, 42,1%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 469.2 [M+H]+.
1H RMN (500MHz, DMSO-d6)59,41 (s, 1H), 8,80 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 8,10-7,98 (M,2H), 7,81 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,62-7,60 (m, 3H), 3,94 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 1,45 (m, 2H), 1,13 (m, 2H), 0,60 (d,J= 6,0 Hz, 4H).
Ejemplo 11A 1 -[4-[5-fluoro-6-[5-[(6-isopropoxipirazin-2-il)amino]-1 -metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añaden tris(dibencilideneacetona)dipaladio (0,0712 g, 0,0778 mmol), 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (0,0450 g, 0,0778 mmol) y carbonato de cesio (0.507 g, 3 1,56 mmol) a una solución de 1-[4-[6-(5-amino-1-metilpirazol-4-il)-5-fluoro-3-piridil]fenil] ciclopropanocarboxilato de metilo (200 mg, 0.519 mmol) (preparado de acuerdo con el Ejemplo 3A), 2-cloro-6-isopropoxi-pirazina (0,113 g, 0,622 mmol) en 1,4-dioxano (3 mL), después se agita la mezcla de reacción a 90 °C durante 1 h bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se concentra y se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con PE:EtOAc (1:2) para obtener el compuesto del título (130 mg, 49,9%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 503,2 [M+H]+.
Ejemplo 11B Ácido 1 -[4-[5-fluoro-6-[5-[(6-isopropoxipirazin-2-il)amino]-1 -metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico;clorhidrato
Se añadió hidrato de hidróxido de litio (0,0217 g, 0,517 mmol) a una mezcla de 1-[4-[5-fluoro-6-[5-[(6-isopropoxipirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (200 mg, 0,259 mmol) en metanol (1 mL) y se añadió agua (1 mL); a continuación, la mezcla de reacción se agitó a 60 °C durante 1 h. La mezcla de reacción se acidificó con HCl 1N hasta pH = 6. La mezcla resultante se concentra y se purifica por prep-HPLC [columna: YMC-ActusTriart C18 150 x 30mm x 5^m, Condición: 48-78%B (A: agua/ 0,05% HCl, B: CH3CN), caudal: 25 mL/min] y se liofilizó para obtener el compuesto del título (101,6 mg, 99,69 % en masa, 74,6%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 489,1 [M+H]+.
1H RMN (400MHz, CDCls) 5 = 8,60 (s, 1H), 8,00 (d,J= 2,8 Hz, 1H), 7,84 (dd,J= 2,0, 12,0 Hz, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,60 (d,J= 8,4 Hz, 2H), 7,47 (d,J= 8,4 Hz, 2H), 7,45 (br s, 1H), 4,86 - 4,83 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 1,63 - 1,59 (m, 2H), 1,25 - 1,20 (m, 2H), 1,16 (d,J= 6,4 Hz, 6H)
Ejemplo 12A 1-[4-[6-[5-[[6-(1,1-difluoroetil)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añaden al tris(dibencilideneacetona)dipaladio (0,103 g, 0,109 mmol) y 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (0,0976 g, 0,164 mmol) a 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (0,400, 1,09 mmol) (preparado de acuerdo con el Ejemplo 1A), 2-cloro-6-(1,1-difluoroetil)pirazina (0,325 g, 1,64 mmol, 90 % en masa) y carbonato de cesio (1,42 g, 4,36 mmol) en 1,4-dioxano (8 mL) bajo N2. La mezcla se agita a 100 °C durante 12 horas. La mezcla se diluye con agua (40 mL) y se extrae con EtOAc (50 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (50 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro, se filtran y se concentran. El residuo se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice EtOAc : PE(1: 1) para obtener el título (361 mg, 68,1%). LCMS (m/z): 491,1 [M+H]+.
Ejemplo 12B Ácido 1-[4-[6-[5-[[6-(1,1-difluoroetN)pirazm-2-N]ammo]-1-metN-pirazol-4-N]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxMico;dorhidrato
Se añade hidróxido de litio hidratado (91,0 mg, 2,12 mmol) a una solución de 1-[4-[6-[5-[[6-(1,1-difluoroetil)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]cidopropanocarboxilato de metilo (360 mg, 0,706 mmol) en tetrahidrofurano (5 mL) y agua (0,5 mL). La reacción se agita a 50 °C durante 14 horas. La mezcla se ajusta a pH = 5-6 con HCl 1 N, se extrae con EtOAc (40 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre Na2SO4, se filtran y se concentran. El producto bruto se purifica por prep-HPLC [Columna YMC-Actus Triart C18 100 x 30mm x 5^m Condición: agua (0,05%HCl)-ACN Inicio B 30 Fin B 60 Tiempo de gradiente(min) 9,5 100%B Tiempo de mantenimiento(min) 2,5 Velocidad de flujo(ml/min) 25 ] para obtener el compuesto del título (80,0 mg, 21,0%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 477,0 [M+H]+.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 = 10,06 (br s, 1H), 8,78 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 8,23-8,16 (m, 3H), 7,73 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 7,65 (d,J= 8,4 Hz, 2H), 7,44 (d,J= 8,0 Hz, 2H), 3,75 (s, 3H), 1,65 (t,J= 18,8 Hz, 3H), 1,50-1,43 (m, 2H), 1,23 1,15 (m, 2H).
Ejemplo 13A 1 -[4-[6-[5-[[6-(1 -fluoro-1 -metil-etil)pirazin-2-il]amino]-1 -metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añaden Pd2(dba)3 (1,10 g, 1,20 mmol), 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (1,04 g, 1,80 mmol) y carbonato de cesio (9,80 g, 30,1 mmol) a 2-cloro-6-(1-fluoro-1-metil-etil)pirazina (2,50 g, 12,0 mmol, 84 en masa%), 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (4,19 g, 10,8 mmol, 90% en masa (preparado de acuerdo con el Ejemplo 1A) en 1,4-dioxano (60 mL), luego la mezcla de reacción se agita a 100 °C durante 5 h en atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se concentra para obtener un residuo negro, que se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con PE/EtOAc(1:1) para obtener el compuesto del título (3,10 g, 50,3%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 487,2 [M+H]+.
Ejemplo 13B Ácido 1 -[4-[6-[5-[[6-(1 -fluoro-1 -metil-etil)pirazin-2-il]amino]-1 -metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico;clorhidrato
Se añade hidróxido de litio hidratado (0,750 g, 17,9 mmol) a 1-[4-[6-[5-[[6-(1-fluoro-1-metil-etil)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]cidopropanocarboxilato de metilo (6,10 g, 11,9 mmol) en THF (30 mL) y agua (30 mL).9 mmol) en THF (30 mL) y agua (30 mL), después la mezcla de reacción se agita a 60 °C durante 1 h. El acuoso se acidifica con HCl 1N hasta pH = 6, después se extrae con EtOAc (60 mL x 3), las fases orgánicas combinadas se concentran para obtener el producto bruto. El producto bruto se purifica por prep-HPLC [columna: Phenomenexluna C18 250 x 50mm x 10 ^m, Condición: 20-45%B (A: agua/ 0,05% HCl, B: c H3Cn ), caudal: 25 mL/min] y se liofilizó para obtener el compuesto del título (2,7380 g, 37,8%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 473.1 [M+H]+.
1H RMN (400MHz, CD3OD) 5 = 8,88 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 8,67 (dd,J= 2,4, 8,8 Hz, 1H), 8,36 - 8,28 (m, 1H), 8,26 - 8,22 (m, 1H), 8,19 (s, 1H), 8,12 -8.05 (m, 1H), 7,71 (d,J= 8,4 Hz, 2H), 7,56 (d,J= 8,4 Hz, 2H), 3,91 -3,85 (m, 3H), 1,67 -1,62 (m, 2H), 1,40 - 1,29 (m, 5H), 1,27 - 1,22 (m, 2H), 1,19 (s, 1H)
Ejemplo 14A 1-[4-[6-[5-[(6-isopropNpirazm-2-N)ammo]-1-metN-pirazol-4-N]-3-piridN]-3-(metoximetil)fenil]cidopropanocarboxilato de metilo
1. Síntesis de 2-(4-bromo-3-metil-fenil)acetato de etilo
Se añade ácido sulfúrico (9,2 g, 5 mL) a una mezcla de ácido 2-(4-bromo-3-metil-fenil)acético (5,00 g, 20,7 mmol) en etanol (50 mL) y se calienta la reacción a 80 °C durante 3 horas. La mezcla se enfría a 20 °C y se vierte en solución saturada de NaHCOs (30 mL). La mezcla se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran para obtener el compuesto del título (5,30 g, 94,4%) como aceite incoloro.
1H RMN (400MHz, CDCls) 5 = 7,48 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 7,16 (s, 1H), 6,98 (dd,J= 2,0, 8,0 Hz, 1H), 4,16 (q,J= 7,2 Hz, 2H), 3,54 (s, 2H), 2,39 (s, 3H), 1,26 (t,J= 7,2 Hz, 3H).
2. Síntesis de 1-(4-bromo-3-metil-fenil)ciclopropanocarboxilato de etilo
Se añade NaH (1,63 g, 40,6 mmol, 60 % en masa) a una mezcla de 2-(4-bromo-3-metilfenil)acetato de etilo (5,00 g, 18,5 mmol) en Dm F (50 mL) a 20 °C y se agita la mezcla a 50 °C durante 1 hora. A continuación, se añade 1, 2-dibromoetano (3,68 g, 19,4 mmol) y la reacción se agita a 50 °C durante 12 horas. La reacción se apaga con solución saturada de<n>H4CI (30 mL) y se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo/ EtOAc (50:1) para obtener el compuesto del título (550 mg, 9,99%) como aceite incoloro. 1H RMN (400MHz, CDCI3) 5 = 7,46 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 7,21 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 7,03 (dd,J= 2,0, 8,4 Hz, 1H), 4,11 (q,J= 7,2 Hz, 2H), 2,39 (s, 3H), 1,63 - 1,56 (m, 2H), 1,22 -1,11 (m, 5H).
3. Síntesis de 1-[4-bromo-3-(bromometil)fenil]ciclopropanocarboxilato de etilo
Se añade NBS (0,369 g, 2,03 mmol) y 2,2'-azobis(2-metilpropionitrilo) (31,0 mg, 0,184 mmol) en tetracloruro de carbono (10 mL) a una mezcla de 1-(4-bromo-3-metilfenil)ciclopropanocarboxilato de etilo (550 mg, 1,84 mmol) en tetracloruro de carbono (10 mL) y se calienta la mezcla a 70 °C durante 12 horas. La mezcla se diluye con agua (20 mL) y se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo/ EtOAc (20:1) para obtener el compuesto del título (500 mg, 71,1%) como aceite incoloro.
1H RMN (400MHz, CDCls)5= 7,51 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 7,44 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 7,16 (dd,J= 2,0, 8,4 Hz, 1H), 4,59 (s, 2H), 4,10 (q,J= 7,2 Hz, 2H), 1,65 - 1,60 (m, 2H), 1,21 -1,13 (m, 5H).
4. Síntesis de 1-[4-bromo-3-(metoximetil)fenil]ciclopropano carboxilato de metilo
Se añade metóxido sódico (0,0515 g, 0,944 mmol) a una solución de 1-[4-bromo-3-(bromometil)fenil]ciclopropanocarboxilato de etilo (300 mg, 0,787 mmol) en metanol (5 mL) a 20 °C y se agita la reacción a 50 °C durante 2 horas. La mezcla se diluye con agua (20 mL) y se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro, se filtran y se concentran. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo/ EtOAc (20:1) para obtener el compuesto del título (200 mg, 80,7%) como aceite incoloro.
1H RMN (400MHz, CDCls) 5 = 7,48 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d,J= 1,6 Hz, 1H), 7,14 (dd,J= 2,0, 8,0 Hz, 1H), 4,51 (s, 2H), 3,63 (s, 3H), 3,49 (s, 3H), 1,65 - 1,58 (m, 2H), 1,22 - 1,14 (m, 2H).
5. Síntesis de N-[4-(5-bromo-2-piridil)-2-metil-pirazol-3-il]-6-isopropil-pirazin-2-amina
Se añade hidruro sódico en aceite (1,26 g, 31,5 mmol, 60% en masa) a una suspensión de 4-(5-bromo-2-piridil)-2-metil-pirazol-3-amina (1,68 g, 6,31 mmol) en DMF (8 mL). La mezcla de reacción se calienta a 50 °C y a continuación se añade 2-cloro-6-isopropil-pirazina (1,12 g, 6,94 mmol). La mezcla de reacción se agita a 50 °C durante 1 hora. La mezcla de reacción se vierte en solución saturada de cloruro amónico (20 mL) y se extrae con EtOAc (30 mL*2). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (20 mL x 2), se secan sobre sulfato sódico, se filtran y se concentran para obtener el residuo. El residuo se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (0-30% EtOAc en PE) para obtener el compuesto del título (850 mg, 34,3%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 373,0 [M+H]+.
6. Síntesis de 1-[4-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-3-(metoximetil)fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añade [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(N) (0,0356 g, 0,0476 mmol) a una mezcla de 1-[4-bromo-3-(metoximetil)fenil]cido propanocarboxilato de metilo (150 mg, 0.476 mmol), bis(pinacolato)diboro (0,l28 g, 0,500 mmol) y acetato potásico (0,142 g, 1,43 mmol) en 1,4-dioxano (5 mL) bajo nitrógeno. La reacción se calienta a 100 °C durante 1 hora. La mezcla se enfría a 20 °C y, a continuación, se añade N-[4-(5-bromo-2-piridil)-2-metil-pirazol-3-il]-6-isopropil-pirazin-2-amina (0,196 g, 0500 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II) (0,0356 g, 0,0476 mmol), carbonato sódico (0,153 g, 1,43 mmol) y agua (0,5 mL) se añaden bajo nitrógeno. La reacción se calienta a 100 °C durante 12 horas. La mezcla se diluye con EtOAc (30 mL) y el sólido se filtra. El filtrado se diluye con agua (30 mL) y se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo/ EtOAc (1:2) para obtener el compuesto del título (153 mg, 62,7%) como aceite amarillo. LCMS (m/z): 513.3 [M+H]+.
1H RMN (400MHz, CDCls) 5 = 9,38 (s, 1H), 8,54 (d,J= 1,6 Hz, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,74 (dd,J= 2,0, 8,0 Hz, 1H), 7,54 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 7,51 (d,J= 1.6 Hz, 1H), 7,38 (dd,J= 2,0, 8,0 Hz, 1H), 7,25 (d,J= 7,6 Hz, 1H), 4,31 (s, 2H), 3,87 (s, 3H), 3,66 (s, 3H), 3,37 (s, 3H), 3,00 - 2,92 (m, 1H), 1,68 - 1,63 (m, 2H), 1,27 - 1,25 (m, 8H).
Ejemplo 14B Ácido 1 -[4-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1 -metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-3-(metoximetil)fenil]cidopropanocarboxMico;dorhidrato
Se añade hidróxido de litio hidratado (0,0380 g, 0,895 mmol) a una mezcla de 1-[4-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-3-(metoximetil)fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (0,170 g, 0,298 mmol, 90 % en masa) en THF (3 mL) y agua (0,5 mL) y se calienta la mezcla a 50 °C durante 12 horas. Se ajusta el pH de la mezcla a 5-6 con solución de HCl 1,0M y se extrae la mezcla con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro, se filtran y se concentran. La mezcla se purifica por prep-HPLC (columna: YMC-Actus Triart C18 100 x 30mm x 5^m, Gradiente: 32-62% B (A = agua/0,05% Hcl, B= acetonitrilo), Caudal: 25 mL/min). Las fracciones deseadas se liofilizan para obtener el compuesto del título (59,5 mg, 36,9%) como sólido blanco. LCMS (m/z): 499,1 [M+H]+.
1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 5 = 10,09 (br s, 1H), 8,64 (br s, 1H), 8,36 (br s, 1H), 8,31 -8,19 (m, 2H), 7,97 -7,80 (m, 2H), 7,50 (br s, 1H), 7,42 (br d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,27 (br s, 2H), 3,78 (br s, 3H), 3,22 (s, 3H), 2,77 - 2,63 (m, 1H), 1,56 - 1,42 (m, 2H), 1,24 - 1,09 (m, 2H), 0,93 (d, J = 6,4 Hz, 6H).
Ejemplo 15A 1-[3-(cianometil)-4-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de etilo
1. Síntesis de 1-[4-bromo-3-(cianometil)fenil]ciclopropanocarboxilato de etilo
Se añade trimetilsililcianuro (0,0637 g, 0,630 mmol) y fluoruro de tetrabutilamonio (1,0 mol/L) en THF (0,63 mL, 0,630 mmol, 1,0 mol/L) a una solución de 1-[4-bromo-3-(bromometil)fenil]ciclopropanocarboxilato de etilo (0,200 g, 0,525 mmol) (preparado de acuerdo con el Ejemplo 14A) en THF (5 mL), y se agita la reacción a 20 °C durante 3 horas. La mezcla se diluye con agua (20 mL) y se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo/ EtOAc (20:1) para obtener el compuesto del título (100 mg, 58,7%) como aceite incoloro.
1H RMN (400MHz, CDCls) 5 = 7,54 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 7,51 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 7,21 (dd,J= 2,0, 8,4 Hz, 1H), 4,11 (q,J= 7,2 Hz, 2H), 3,84 (s, 2H), 1,69 -1,61 (m, 2H), 1,24 -1,14 (m, 5H).
2. Síntesis de 1-[3-(cianometil)-4-[6-[5-[(6-isopropilpirazm-2-il)ammo]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]cidopropanocarboxilato de etilo
Se añade Pd(dppf)Cl2 (0,023 g, 0,031 mmol) acetato potásico (0,0917 g, 0,925 mmol) a una mezcla de 1-[4-bromo-3-(cianometil)fenil]cidopropanocarboxilato de etilo (0,100 g, 0,308 mmol), bis(pinacolato)diboro (0,083 g, 0,324 mmol) y acetato potásico (0,0917 g, 0,925 mmol) en 1,4-dioxano (3 mL) bajo nitrógeno. La reacción se calienta a 100 °C durante 3 horas. La mezcla se enfría a 20 °C y se añaden N-[4-(5-bromo-2-piridil)-2-metil-pirazol-3-il]-6-isopropil-pirazin-2-amina (0,127 g, 0,324 mmol) (preparada de acuerdo con el Ejemplo 14A), Pd(dppf)Cl2 (0,0230 g, 0,0308 mmol), carbonato sódico (0,0990 g, 0,925 mmol) y agua (0,3 mL). La reacción se calienta a 100 °C durante 3 horas. El sólido se filtra y el filtrado se diluye con agua (20 mL). La mezcla se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (30 mL), se secaron sobre sulfato sódico anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo/ EtOAc (1:2) para obtener el compuesto del título (81,0 mg, 50,4%) como un sólido amarillo claro. LCMS (m/z): 522,1 [M+H]+.
Ejemplo 15B Ácido 1-[3 -(cianometil)-4-[6-[5-[(6-isopropilpirazm-2-il)ammo]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]feml]cidopropanocarboxílico;clorhidrato
Se añade hidrato de hidróxido de litio (0,0079 g, 0,186 mmol) a una mezcla de 1-[3-(cianometil)-4-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de etilo (90,0 mg, 0,155 mmol, 90 % en masa) en THF (2 mL) y agua (0,2 mL) y se calienta la mezcla a 50 °C durante 12 horas. Se ajusta el pH de la mezcla a 5-6 con solución de HCl 1,0M y se extrae la mezcla con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro, se filtran y se concentran. La mezcla se purifica por prep-HPLC (columna: YMC-Actus Triart C18 100 x 30mm x 5^m, Gradiente: 35-65% B (A = agua/0,05% Hcl, B= acetonitrilo), Caudal: 25mL/min). Las fracciones deseadas se liofilizaron para obtener el compuesto del título (27,6 mg, 33,2%) como sólido blanco. LCMS (m/z): 494.1 [M+H]+.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) 5 = 9,91 (br s, 1H), 8,62 (d,J= 1,6 Hz, 1H), 8,30 (s, 1H), 8,20 - 8,12 (m, 2H), 7,92 (s, 1H), 7,88 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,43 (dd,J= 1,6, 8,0 Hz, 1H), 7,27 (d,J= 7,6 Hz, 1H), 4,00 (s, 2H), 3,75 (s, 3H), 2,81 - 2,70 (m, 1H), 1,57 - 1,45 (m, 2H), 1,24 -1,14 (m, 2H), 0,98 (d,J= 6,8 Hz, 6H).
Ejemplo 16A 1-[3-ciano-4-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de etilo;clorhidrato
1. Síntesis de 2-(4-bromo-3-ciano-fenil)acetato de etilo
Se añade bromo-(2-etoxi-2-oxo-etil)zinc (2,97 g, 12,7 mmol) (preparado de acuerdo con el Ejemplo 9A) a una mezcla de 2-bromo-5-yodo-benzonitrilo (2,60 g, 8,44 mmol), bis(dibencilideneacetona)paladio (0,121 g, 0,211 mmol) y 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (0,122 g, 0,211 mmol) en THF (20 ml), luego la mezcla de reacción se agita a 65 °C durante 1 h en nitrógeno. La mezcla de reacción se enfría con agua (10 mL). La mezcla resultante se extrae con EtOAc (10 mL x 3). Las fases orgánicas combinadas se lavan con agua (10 mL), se concentran para obtener un residuo negro, que se purifica por cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con PE:EtOAc (20:1) para obtener el compuesto del título (1,00 g, 42,0% de rendimiento) como un sólido amarillo.
1H RMN (400MHz, CDCls) 5 = 7,65 (d, J= 8,4 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,39 (dd, J = 2,0, 8,4 Hz, 1H), 4,18 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,61 (s, 2H), 1,28 (t, J = 7,2 Hz, 3H)
2. Síntesis de 1-(4-bromo-3-ciano-fenil)ciclopropanocarboxilato de etilo
Se añade hidruro sódico en aceite (0,142 g, 3,54 mmol, 60 % en masa) a una solución de 2-(4-bromo-3-cianofenil)acetato de etilo (500 mg, 1,77 mmol) en DMF (5 mL), la mezcla se agita a 20 °C durante 1 h, luego se añade 1,2-dibromoetano (0,333 g, 1,77 mmol) a la solución anterior y se agita a 20 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se inactiva con MeOH (5 ml) y se diluye con EtOAc (20 ml). La mezcla resultante se lava con agua (10 mL x 2), se concentra para obtener un residuo amarillo claro, que se purifica por cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con PE:EtOAc (20 :1) para obtener el compuesto del título (260 mg, 47,4%) como sólido amarillo.
1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 7,68 - 7,58 (m, 2H), 7,44 (dd, J = 2,0, 8,4 Hz, 1H), 4,11 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 1,70 - 1,65 (m, 2H), 1,21 - 1,15 (m, 5H)
3. Síntesis de 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]-3-cianofenil]ciclopropanocarboxilato de etilo
Se añade [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II) (0,0482 g, 0,0646 mmol) a una solución de 1-(4-bromo-3-ciano-fenil)ciclopropanocarboxilato de etilo (200 mg, 0,646 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3-dioxolan-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (0,182 g, 0,711 mmol) y acetato de potasio (0,190 g, 1,94 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml), luego la mezcla de reacción se agita a 90 °C durante 1 h en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se enfría a 20 °C, después se añaden 4-(5-bromo-2-piridil)-2-metil-pirazol-3-amina (0,189 g, 0,711 mmol), carbonato sódico (0,205 g, 1,94 mmol) y agua (1 mL) a la solución anterior y se agita a 90 °C durante 1 h bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se concentra para obtener un residuo negro, que se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con EtOAc para obtener el compuesto del título (130 mg, 46,7%) en forma de aceite amarillo. LCMS (m/z): 388,1 [M+H]+.
4. Síntesis de 1-[3-ciano-4-[6-[5-[(6-isopropNpirazm-2-N)ammo]-1-metN-pirazol-4-N]-3-piridil]fenil]cidopropanocarboxilato de etilo;clorhidrato
Se añaden tris(dibencilideneacetona)dipaladio (0,0277 g, 0,0302 mmol) y 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (0,0262 g, 0,0453 mmol) a una suspensión de 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]-3-cianofenil]ciclopropanocarboxilato de etilo (130 mg, 0,302 mmol), 2-doro-6-isopropil-pirazina (0,0585 g, 0,362 mmol) y carbonato de cesio (0,295 g, 0,906 mmol) en 1,4-dioxano (5 ml), luego la mezcla de reacción se agitó a 100 °C durante 3 h en atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se concentra para obtener un residuo negro, que se purifica por cromatografía en columna sobre gel de sílice eludiendo con EtOAc para obtener el producto bruto, que se purifica por prep-HPLC [columna: YMC-ActusTriart C18 150 x 30mm x 5^m, Condición: 45-75%B (A: agua/ 0,05% HCl, B: CH3CN), caudal: 25 mL/min] para obtener el compuesto del título (60,0 mg, 35,1%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 508,2 [M+H]+.
Ejemplo 16B Ácido 1-[3-ciano-4-[6-[5-[(6-isopropNpirazm-2-N)ammo]-1-metN-pirazol-4-N]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico;clorhidrato
Se añade hidrato de hidróxido de litio (4,4 mg, 0,106 mmol) a una solución de 1-[3-ciano-4-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de etilo; clorhidrato (60,0 mg, 0,106 mmol) en metanol (1 mL) y agua (1 mL).0 mg, 0,106 mmol) en metanol (1 mL) y agua (1 mL), después la mezcla de reacción se agita a 60 °C durante 1 h. La mezcla de reacción se diluye con agua (10 mL), se acidifica con HCl 1N hasta pH =4. El precipitado se filtra y se seca al vacío para obtener el compuesto del título (29,5 mg, 96,9% en masa, 52,3%) en forma de sólido blanco. LCMS (m/z): 480.1 [M+H]+.
1H RMN(400MHz, CDCls) 5 = 8,65 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,92 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 7,85 (s, 2H), 7,74 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 7,67 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 7,53 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 3,80 (s, 3H), 2,89 - 2,80 (m, 1H), 1,67 - 1,60 (m, 2H), 1,28 - 1,20 (m, 2H), 1,10 (d,J= 7,2 Hz, 6H)
Ejemplo 17 Ácido 1-[4-[4-[5-[(6-isobutilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]fenil]fenil]ciclopropanocarboxílico 1
1. Síntesis de 1-(4-bromofenil)ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añade ácido 1-(4-bromofenil)ciclopropanocarboxílico (10,0 g, 41,5 mmol) en DMF (50,0 mL, 646 mmol) a carbonato potásico (11,5 g., 83,0 mmol) y yodometano (11,7 g, 83,0 mmol). A continuación, la mezcla de reacción se agita a 20 °C durante 0,5 h. La mezcla de reacción se añade con agua (50 mL) y la mezcla resultante se extrae con EtOAc (50 mL x3), después las fases orgánicas combinadas se lavan con agua (30 mL x 2), se secan sobre sulfato sódico anhidro, se filtran y se concentran para dar el compuesto del título (10,0 g, 94,5%) como un aceite incoloro. LCMS (m/z): 254,8/256,8 [M+H, Br79/Br81]+.
2. Síntesis de 1-[4-(4,4,5,5-tetrametiM,3,2-dioxaborolan-2-N)fenil]ciclo propanocarboxilato de metilo
Se añaden 1-(4-bromofenil)ciclopropanocarboxilato de metilo (10,0 g, 39,2 mmol) y 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (10,5 g., 41,2 mmol) en dioxano (50,0 mL) a acetato de potasio (18,9 g, 137 mmol) y [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (2,9 g, 3,92 mmol). A continuación, la mezcla de reacción se agita a 100 °C durante 2 h bajo N2. A la mezcla de reacción se le añade agua (50 mL) y EtOAc (100 mL). La solución se separa y el acuoso se extrae con EtOAc (50 mL x 3). Las fases orgánicas combinadas se lavan con salmuera (50 mL x 2), agua (50 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro, se filtran y se concentran para dar el compuesto del título (10,0 g, 84,4%) como sólido blanco. LCMS (m/z): 303,1 [M+H]+.
3. Síntesis de 1-[4-(4-bromofenil)fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añade 1-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]ciclo propanocarboxilato (10,0 g, 33,1 mmol), 1-bromo-4-yodo-benceno (10,5 g, 34,7 mmol) en dioxano (50,0 mL) y agua (10,0 mL) a carbonato potásico (9,1 g., 66,2 mmol) y [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (2,4 g, 3,31 mmol). La mezcla de reacción se agita a 100 °C durante 2 h bajo N2. La mezcla de reacción se concentra para dar un sólido negro, que se purificó por cromatografía en columna (PE:EtOAc = 10:1) para dar el compuesto del título (10,0 g, 91,2%) como sólido blanco.
1H RMN (400MHz, CDCls) 5 = 7,56-7,40 (m, 8H), 3,65 (s, 3H), 1,64 (m, 2H), 1,22 (m, 2H).
4. Síntesis de 1-[4-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añaden 1-[4-(4-bromofenil)fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (10,0 g, 30,2 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (8,1 g, 31,7 mmol) en 1,4-dioxano (50,0 mL) a acetato potásico (14,6 g, 106 mmol) y [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (2,2 g, 3,02 mmol). A continuación, la mezcla de reacción se agita a 100 °C durante 2 h bajo N2. La mezcla de reacción se concentra para dar un sólido negro. El sólido negro se purifica por cromatografía en columna (PE:EtOAc = 10:1) para dar el compuesto del título (8,00 g, 70,0%) como sólido amarillo claro. 1H RMN (400MHz, CDCls) 5 = 7,87 (m, 2H), 7,61-7,57 (m, 4H), 7,41 (m, 2H), 3,65 (s, 3H), 1,64 (m, 2H), 1,22 (m, 2H).
5. Síntesis de 1-[4-[4-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)fenil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añade 1-[4-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]fenil] ciclopropanocarboxilato (2,00 g, 5,29 mmol), 4-bromo-2-metil-pirazol-3-amina (1,1 g, 6.34 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0,60 g, 0,529 mmol) en etanol (4,00 mL), tolueno (20,0 mL) y agua (3,00 mL) a carbonato sódico (2,3 g, 21,1 mmol). La mezcla se agita a 110 °C durante 4 h bajo N2. La mezcla de reacción se concentra para dar un residuo amarillo. El residuo se purifica por cromatografía en columna (DCM:MeOH = 10:1) para dar el compuesto del título (1,12 g, 61,0%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 347,9 [M+H]+.
6. Síntesis del ácido 1-[4-[4-[(6-doropirazm-2-M)ammo]-1-metM-pirazol-4-M]feml]feml]cidopropanocarboxíMco
Se añade hidruro sódico (60 % en masa) en aceite (0,131 g, 3,28 mmol, 60 % en masa) a la solución de 1-[4-[4-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)fenil]fenil]cidopropanocarboxilato de metilo (300 mg, 0,820 mmol) en DMF (3 mL). La mezcla de reacción se calienta a 50 °C y a continuación se añade 2, 6-dicloropirazina (0,123 g, 0,820 mmol). La mezcla de reacción se agita a 50 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se vierte en solución de cloruro amónico (50 ml) y se extrae con EtOAc (50 mL x 2). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (40 mL x 3), se secan sobre sulfato sódico, se filtran y se concentran para obtener el producto bruto. El producto bruto se purifica por prep-HPLC (columna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10 ^m, Gradiente: 36-66% B (A = agua/0,05% HCl, B = acetontrilo), Caudal: 25mL/min) para obtener el producto del título (75,0 mg, 20,8%) como sólido amarillo. LCMS (m/z) 446,0 [M+H]+.
7. Síntesis del ácido 1-[4-[4-[1-metil-5-[[6-(2-metilprop-1-enil)pirazin-2-il]amino]pirazol-4-il]fenil]fenil]cidopropanocarboxílico
Se añade [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (0,0127 g, 0,0170 mmol) a una solución de 4,4,5,5-tetrametil-2-(2-metilprop-1-enil)-1,3,2-dioxaborolano (0,0329 g, 0,179 mmol), carbonato sódico (0,0361 g, 0,341 mmol) y ácido 1-[4-[4-[(6-cloropirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]fenil]fenil]ciclopropanocarboxílico (75,0 mg, 0,170 mmol) en 1,4-dioxano (6 mL) y agua (1 mL) bajoN2. A continuación, la mezcla de reacción se agita a 100 °C durante 2 h bajo N2. La mezcla se diluye con agua (30 mL) y se extrae con EtOAc (40mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (40mL), se secaron sobre Na2SO anhidro, se filtraron y se evaporaron para obtener el producto del título (63,0 mg79,4%) como sólido amarillo. LCMS: (m/z) 466,2 [M+H]+.
8. Síntesis del ácido 1-[4-[4-[5-[(6-isobutilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]fenil]fenil]ciclopropanocarboxílico
Se añade paladio sobre carbón activado (10,0 mg, 10 % en masa) a una solución de ácido 1-[4-[4-[1-metil-5-[[6-(2-metilprop-1-enil)pirazin-2-il]amino]pirazol-4-il]fenil]fenil]cidopropanocarboxílico (70,0 mg, 0,135 mmol, 90 % en masa) en metanol (5 mL). A continuación, la mezcla de reacción se agita bajo hidrógeno molecular (15 psi, globo) a 25 °C durante 1 h. La mezcla se filtra y el filtrado se concentra para obtener el producto bruto. El producto bruto se purifica por prep-HPLC [Columna: YMC-Actus Triart C18 150 x 305^m; Condición: 43-73%B (A=0,05%HCl, B= acetonitrilo); Caudal:25 mL/min] para obtener el producto del título (22,0 mg, 34,8%) como sólido amarillo.
LCMS: (m/z) 468,4 [M+H]+.
1H RMN: (400MHz, DMSO-d6) 5 = 9,17 (s, 1H), 7,92-7,85 (m, 2H), 7,78 (s, 1H), 7,58-7,51 (m, 6H), 7,40-7,32 (m, 2H), 3,65 (s, 3H), 2,34 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 1,87-1,74 (m, 1H), 1,50-1,42 (m, 2H), 1,18-1,11 (m, 2H), 0,75 (d, J = 6,8 Hz, 6H).
Ejemplo 18A 1-[4-[2-[5-[(6-isopropN-pirazm-2-N)ammo]-1-metN-pirazol-4-N]pirimidm-5-il]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
1. Síntesis de (E)-2-(5-bromopirimidin-2-il)-3-etoxi-prop-2-enenitrilo
Se añade anhídrido acético (2,50 g, 23,7 mmol) a una solución de 2-(5-bromopirimidin-2-il)acetonitrilo (950 mg, 4,75 mmol) y ortoformato de trietilo (3 mL, 17,7 mmol), la mezcla de reacción se agita a 120 °C durante 5 h. La mezcla de reacción se concentra para obtener el compuesto del título (0,96 g, 79,6%) en forma de crudo marrón. LCMS (m/z): 255,9 [M+H]+.
2. Síntesis de 4-(5-bromopirimidin-2-il)-2-metil-pirazol-3-amina
Se añade metilhidrazina (2,18 g, 18,9 mmol, 40% en masa) a una solución de (E)-2-(5-bromopirimidin-2-il)-3-etoxiprop-2-enenitrilo (0,96 g, 3,78 mmol) disuelta en etanol (3 mL). La mezcla de reacción se calienta a 100 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentra y se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo: EtOAc (3:1) para obtener el compuesto del título (0,7 g, 72,9%) en forma de crudo marrón.
1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) 5 = 8,74 (s, 2H), 8,02 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 6,50 (br s, 2H), 4,87 - 4,72 (m, 1H), 4,79 (br s, 1H), 3,57 (s, 3H), 2,90 (s, 2H).
3. Síntesis de N-[4-(5-bromopirimidin-2-il)-2-metil-pirazol-3-il]-6-isopropil-pirazin-2-amina
Se añade hidruro sódico en aceite (0,165 g, 4,13 mmol, 60% en masa) a la suspensión de 4-(5-bromopirimidin-2-il)-2-metil-pirazol-3-amina (210 mg, 0,826 mmol) en N,N-dimetilformamida (3 mL). La mezcla de reacción se calienta a 50 °C y a continuación se añade 2-cloro-6-isopropil-pirazina (0,140 g, 0,909 mmol). La mezcla de reacción se agita a 50 °C durante 3 horas. La mezcla de reacción se vierte en solución de cloruro amónico (50 ml) y se extrae con EtOAc (50 mL x 2). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (20 mL), se secan sobre sulfato sódico y se concentran para obtener el producto bruto. El producto bruto se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo: EtOAc (1:3) para obtener el compuesto del título (140 mg, 45,3%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 374,0 [M+H]+.
4. Síntesis de 1-[4-[2-[5-[(6-isopropN-pirazm-2-N)ammo]-1-metN-pirazol-4-N]pirimidm-5-il]fenil]cidopropanocarboxilato de metilo
Se añade [1,1-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(N) (0,0140 g, 0,0187 mmol) a una suspensión de 1-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (0,125 g, 0,393 mmol), carbonato de sodio (0,0793 g, 0,748 mmol) y N-[4-(5-bromopirimidin-2-il)-2-metil-pirazol-3-il]-6-isopropil-pirazin-2-amina (200 mg, 0,374 mmol, 70 % en masa) en 1,4-dioxano (4 mL) y agua (1 mL) en atmósfera de N2. A continuación, la mezcla de reacción se agita a 100 °C durante 3 h bajo N2. La mezcla de reacción se concentra para dar un sólido negro. La mezcla se diluye con agua (20 mL) y se extrae con EA (30mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (20 mL), se secan sobre Na2SO4 anhidro, se filtran y se evaporan para obtener el producto bruto. El producto bruto se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo: EtOAc (1:2) para obtener el compuesto del título (90 mg, 51,2%) como sólido amarillo, LCMS (m/z): 470,2 [M+H]+.
Ejemplo 18B Ácido 1-[4-[2-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]pirimidin-5-il]fenil]ciclopropanocarboxílico
Se añade hidrato de hidróxido de litio (0,0205 g, 0,479 mmol) a una solución de 1-[4-[2-[5-[(6-isopropil-pirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]pirimidin-5-il]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (90 mg, 0,192 mmol,) en THF (4 mL) y agua (2 mL). La mezcla de reacción se agita a 50 °C durante 12 horas. La mezcla se ajusta a pH=5-6 con HCl 1 N, se extrae con EtOAc (40 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre Na2SO4, se filtran y se concentran. El producto bruto se purifica por prep-HPLC [Columna: YMC-Actus Triart C18 150 x 30, 5^m; Condición: 36-66%B (A=0,05%HCl, B= acetonitrilo); Caudal:25 mL/min] para obtener el compuesto del título (44,3 mg, 50,7% de rendimiento) como sólido blanco, Lc Ms (m/z): 456,2 [M+H]+.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 = 9,43 (s, 1H), 8,92 (s, 2H), 8,12 (s, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,64 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,42 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 3,71 (s, 3H), 2,79 -2,71 (m, 1H), 1,49 - 1,43 (m, 2H), 1,18 -1,13 (m, 2H), 0,98 (d, J = 6,8 Hz, 6H).
Ejemplo 19A 1-[4-[5-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]pirazin-2-il]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
1. Síntesis de 1-[4-(5-cloropirazin-2-il)fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añade [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II) (0,445 g, 0,596 mmol) a las suspensiones de 1-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]ciclo propanocarboxilato de metilo (2.00 g, 5,4 mmol,), carbonato sódico (1,26 g, 11,9 mmol) y 2,5-dicloropirazina (8,93 mmol) en 1,4-dioxano (20 mL) y agua (4 mL) bajo N2. A continuación, la mezcla de reacción se agita a 100 °C durante 3 h bajo N2. La mezcla de reacción se concentra para dar un sólido negro. La mezcla se diluye con agua (20 mL) y se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (20 mL), se secan sobre Na2SO4 anhidro, se filtran y se evaporan para obtener el producto bruto.
El producto bruto se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo: EtOAc (1:2) para obtener el compuesto del título (1,0 g 57,6%) como sólido amarillo, LCMS (m/z): 288,9 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) 5 = 8,80 (d,J= 1,2 Hz, 1H), 8,65 (d,J= 1,2 Hz, 1H), 7,96 (d,J= 8,4 Hz, 2H), 7,51 (d,J= 8,4 Hz, 2H), 3,67 (s, 3H), 1,72 -1,66 (m, 2H), 1,28 - 1,23 (m, 2H).
2. Síntesis de 1-[4-(5-tributilstanilpirazin-2-il)fenil]cidopropanocarboxilato de metilo
Se añaden tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0) (0,108 g, 0,0935 mmol) y triciclohexilfosfina (0,0535 g, 0,187 mmol) a una solución de 1-[4-(5-cloropirazin-2-il)fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (540 mg, 1,87 mmol) y cloruro de litio (0,481 g, 11,2 mmol) en 1,4-dioxano.87 mmol), hexabutilditina (1,71 g, 2,81 mmol) y cloruro de litio (0,481 g, 11,2 mmol) en 1,4-dioxano (3 mL) bajo N2. La mezcla se agita a 100 °C durante 12 horas. El sólido se filtra. La mezcla se diluye con KF sat. (20 mL) y se extrajo con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre Na2SO4 anhidro, se filtran y se evaporan para obtener el producto bruto. El producto bruto se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo: EtOAc (3: 1) para obtener el compuesto del título (288 mg, 28,3%) como sólido marrón, LCMS (m/z): 545,1 [M+H]+.
3. Síntesis de 1-[4-[5-[5-(tert-butoxicarbonilamino)-1-metil-pirazol-4-il]pirazin-2-il]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añade paladio(0) bis(tri-tert-butilfosfina) (0,0276 g, 0,0530 mmol) a las suspensiones de 1-[4-(5-tributilestannilpirazin-2-il)fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (288 mg, 0,530 mmol) y N-(4-yodo-2-metil-pirazol-3-il)carbamato de tert-butilo (0,256 g, 0,795 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml) en atmósfera de N2. La mezcla se agita a 80 °C durante 16 horas. El sólido se filtra. La mezcla se diluye con Kf sat. (20 mL) y se extrajo con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre Na2SO4 anhidro, se filtran y se evaporan para obtener el producto bruto. El producto bruto se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo: EtOAc (1:3) para obtener el compuesto del título (67,0 mg, 28,3%) como sólido marrón, LCMS (m/z): 450.2 [M+H]+.
4. Síntesis de 1-[4-[5-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)pirazin-2-il]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añade ácido trifluoroacético (1 mL) a una solución de 1-[4-[5-[5-(tert-butoxicarbonilamino)-1-metil-pirazol-4-il]pirazin-2-il]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (67,0 mg, 0,150 mmol) en diclorometano (3 mL. La solución se agita a 25 °C durante 2 horas. La reacción se concentra a presión reducida. El residuo se añade a solución de Na2CO3 sat. (10 mL) y se extrajo con CH2Cl2(15 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico, se filtran y se concentran para obtener el compuesto del título (32,0 mg, 60,0%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 350,1 [M+H]+.
5. Síntesis de 1-[4-[5-[5-[(6-isopropN-pirazm-2-N)ammo]-1-metN-pirazol-4-N]pirazm-2-il]fenil]cidopropanocarboxilato de metilo
Se añaden tris(dibencilideneacetona)dipaladio(0) (0,00730 g, 0,00773 mmol) y 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (0,00691 g, 0,0116 mmol) a las suspensiones de 1-[4-[5-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il) pirazin-2-il]fenil]cidopropanocarboxilato de metilo (27,0 mg, 0,0773 mmol), 2-doro-6-isopropil-pirazina (0,0136 g, 0,0850 mmol) y carbonato de cesio (0,0504 g, 0,155 mmol) en 1,4-dioxano (4 mL) bajo atmosfera de N2. La mezcla se agita a 100 °C durante 2 horas. El sólido se filtra. La mezcla se diluye con agua (20 mL) y se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre Na2SO4 anhidro, se filtran y se evaporan para obtener el producto bruto. El producto bruto se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo EtOAc (1:3) para obtener el compuesto del título (16,0 mg, 44,1%) como sólido marrón, LCMS (m/z): 470,2 [M+H]+.
Ejemplo 19B Ácido 1-[4-[5-[5-[(6-isopropNpirazm-2-N)ammo]-1-metN-pirazol-4-N]pirazm-2-M]feml]ciclopropanocarboxMico;dorhidrato
Se añade hidrato de hidróxido de litio (0,00433 g, 0,102 mmol) a una mezcla de 1-[4-[5-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]pirazin-2-il]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (16 mg, 0,0341 mmol, 80% en masa) en THF (1 mL) y agua (0,5 mL) y se agita a 60 °C durante 4 horas. Se ajusta el pH de la mezcla a 5-6 con solución de HCl 1,0M y se extrae la mezcla con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran para obtener el crudo. El producto bruto se purifica por prep-HPLC [Columna: YMC-Actus Triart C18 150 x 30, 5^m; Condición: 36-66%B (A=0,05%HCl, B= acetonitrilo); caudal:25 mL/min] para obtener el compuesto del título (6,3 mg, 37%) como sólido blanquecino. LCMS (m/z): 456,0 [M+H]+.
1H RMN (METANOL-d4, 400 MHz) 5 = 8,93 (s, 1H), 8,85 (s, 1H),8,59 - 7,70 (m, 5H), 7,51 (d,J= 8,4 Hz, 2H), 3,86(s, 3H), 3,00 -2,92 (m, 1H), 1,65 -1,61 (m, 2H), 1,28 -1,21 (m, 2H), 1,10 (d,J= 6,8 Hz, 6H).
Ejemplo 20A 1 -[4-[6-[5-[(6-isopropoxipirazin-2-il)amino]-1 -metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añaden 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (240 mg, 0,654 mmol) (preparado de acuerdo con el Ejemplo 1A), 2-cloro-6-isopropoxi-pirazina (138 mg, 0.720 mmol) y carbonato de cesio (427 mg, 1,31 mmol) en 1,4-dioxano libre de O2(10 mL) a tris(dibencilideneacetona)dipaladio (61,8 mg, 0,0654 mmol) y 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (58,6 mg, 0,0982 mmol) a 25 °C. A continuación, se agita la mezcla a 100 °C durante 6 horas. La mezcla se filtra a través de una almohadilla de gel de sílice (200-300 mush) y se concentra el filtrado. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo: EtOAc = 1: 1 para obtener el compuesto del título (200 mg, 59,3%) en forma de aceite marrón. LCMS (m/z): 485,2 [M+H]+.
Ejemplo 20B Ácido 1-[4-[6-[5-[(6-isopropoxipirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridM]feml]ddopropanocarboxíMco;dorhidrato
Se añade 1-[4-[6-[5-[(6-isopropoxipirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (200 mg, 0,388 mmol) en THF (4 mL) y agua (2 mL) a hidróxido de litio monohidratado (48,8 mg, 1,16 mmol). La mezcla resultante se agita durante 12 horas a 25 °C. Se concentra la mezcla y se diluye con agua (5 mL). La mezcla se acidifica con HCl (1M) hasta pH = ~6. La mezcla se extrae con DCM (5 mL x 5). Las fases orgánicas combinadas se lavan con salmuera (10 mL), se concentran. El residuo se purifica por prep-HPLC [columna: DYA-5 C18 150 x 25mm x 5^m, Condición: 18-48%B (A: agua/ 0,05% HCl, B: acetonitrilo), caudal: 25 mL/min] para obtener el compuesto del título ácido 1-[4-[6-[(6-isopropoxipirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico (48,0 mg, 24,4%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 471,2 [M+H]".
1H RMN (400MHz, DMSO-d6)59,75 (s, 1H), 8,87 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 8,45 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 8,31 (s, 1H), 7,86 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,71 (d,J= 8,0 Hz, 2H), 7,54 (s, 1H), 7,47 (d,J= 8,0 Hz, 2H), 4,73 - 4,59 (m, 1H), 3,76 (s, 3H), 1,54-1,45 (m, 2H), 1,23 -1,14 (m, 2H), 1,05 (d,J= 6,0 Hz, 6H).
Ejemplo 21A 1-[4-[6-[1-metil-5-[[6-(trifluorometil)pirazin-2-il]amino]pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añaden 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (240 mg, 0,654 mmol) (preparado de acuerdo con el Ejemplo 1A), 2-cloro-6-(trifluorometil)pirazina (131 mg, 0.720 mmol) y carbonato de cesio (427 mg, 1,31 mmol) en 1,4-dioxano libre de O2(10 mL) a tris(dibencilideneacetona)dipaladio(0) (61,8 mg, 0,0654 mmol) y 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (58,6 mg, 0,0982 mmol) a 25 °C. A continuación, se agita la mezcla a 100 °C durante 6 h. La mezcla se filtra a través de una almohadilla de gel de sílice (200-300 mush) y se concentra el filtrado. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo: EtOAc (1: 1) para obtener el compuesto del título (280 mg, 65,8%) en forma de aceite amarillo claro. LCMS (m/z): 495.2 [M+H]+.
Ejemplo 21B Ácido 1-[4-[6-[1-metil-5-[[6-(trifluorometil)pirazin-2-il]amino]pirazol-4-il]-3-piridM]feml]cidopropanocarboxíMco
Se añade 1-[4-[6-[1-metil-5-[[6-(trifluorometil)pirazin-2-il]amino]pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]cidopropanocarboxilato de metilo (280 mg, 0,430 mmol) en THF (4 mL) y agua (2 mL) a hidróxido de litio monohidratado (54,2 mg, 1,29 mmol). La mezcla resultante se agita durante 12 horas a 25 °C. Se concentra la mezcla y se diluye con agua (5 mL). La mezcla se acidifica con HCl (1M) hasta pH = 4~6. La mezcla se extrae con DCM (5 mL x 5). Las fases orgánicas combinadas se lavan con salmuera (10 mL), se concentran y se liofilizan para obtener el compuesto del título (92,0 mg, 42,1%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 481,2 [M+H]+. 1H RMN (400MHz, DMSO-d6)510,13 (br s, 1H), 8,70 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 8,04 - 7,93 (m, 1H), 7,70 - 7,58 (m, 3H), 7,41 (d,J= 8,0 Hz, 2H), 3,71 (s, 3H), 1,51 -1,43 (m, 2H), 1,20 -1,13 (m, 2H).
Ejemplo 22 Ácido 1 -[4-[6-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1 -metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-3-metilfenil]cidopropanocarboxílico;dorhidrato
1. Síntesis de 1-(4-bromo-3-metil-fenil)ciclopropanocarbonitrilo
Se añade hidruro sódico en aceite de parafina (952 mg, 23,8 mmol, 60% en masa) a una solución de 2-(4-bromo-3-metil-fenil)acetonitrilo (1,00 g, 4,76 mmol) en THF (5 mL) a 0°C bajo atmosfera N2. La mezcla se agita a 20°C durante 1 hora. A la mezcla anterior se añade 1, 2-dibromoetano (1,07 g, 5,71 mmol). La mezcla se agita a 20 °C durante 3 horas. La mezcla se diluye con NH4Cl saturado (30 mL) y se extrae con EtOAc (40 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (40 mL), se secan sobre Na2SO4 anhidro, se filtran y se evaporan para obtener el producto bruto. El producto bruto se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (0-8%, EtOAc en PE) para obtener el compuesto del título (576 mg, 51,2%) como sólido amarillo.
1H RMN (400MHz, CDCls) 5 = 7,50 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,20 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,94 (dd, J = 8,0, 2,0 Hz, 1H), 2,41 (s, 3H), 1,79 - 1,66 (m, 2H), 1,44 - 1,33 (m, 2H).
2. Síntesis de 1 -[3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]ciclopropanocarbonitrilo
Se añade Pd(dppf)Cl2 (182 mg, 0,244 mmol) a una mezcla de 1-(4-bromo-3-metilfenil)ciclopropanocarbonitrilo (576 mg, 2.44 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (650 mg, 2,56 mmol) y KOAc (479 mg, 4,88 mmol) en 1,4-dioxano (6 mL) bajo atmosfera de N2. La mezcla se agita a 100 °C durante 3 horas. El sólido se filtra. La mezcla se diluye con agua (20 mL) y se extrae con EtOAc (40 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (40 mL), se secan sobre Na2SO4 anhidro, se filtran y se evaporan para obtener el producto bruto. El producto bruto se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (0-8%, EtOAc en Pe ) para obtener el producto del título (700 mg, 70 % en masa, 71%) como sólido amarillo.
1H RMN (400MHz, CDCls)5= 7,74 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 7,04 (dd, J = 8,0, 1,2 Hz, 1H), 2,54 (s, 3H), 1,78 - 1,68 (m, 2H), 1,45 - 1,39 (m, 2H), 1,34 (s, 12H)
3. Síntesis de 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]-3-metilfenil]ciclopropanocarbonitrilo
Se añade Pd(dppf)Cl2 (27,7 mg, 0,0371 mmol) a una mezcla de 1-[3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]cidopropanocarbonitrilo (300 mg, 0,742 mmol, 70 % en masa), 4-(5-bromo-2-piridil)-2-metil-pirazol-3-amina (229 mg, 0,816 mmol, 90 % en masa) y Na2CO3 (196 mg, 1,85 mmol) en agua (1 mL) y 1,4-dioxano (4 mL) bajo atmosfera de N2. La mezcla se agita a 100 °C durante 5 horas. El sólido se filtra. El filtrado se diluye con agua (20 mL) y se extrae con EtOAc (40 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (40 mL), se secan sobre Na2SO4 anhidro, se filtran y se evaporan para obtener el producto bruto. El producto bruto se purifica mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (0-70%, EtOAc en PE) para obtener el producto del título (200 mg, 85,2%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 330,1 [M+H]-.
1H RMN (400MHz, CDCls)5= 8,42 (d,J= 1,6 Hz, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,56 (dd,J= 8,4, 2,4 Hz, 1H), 7,46 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 7,27 - 7,25 (m, 1H), 7,22 (d,J= 7,6 Hz, 1H), 7,17 (dd,J= 8,0, 1,6 Hz, 1H), 5,72 - 5,46 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 2,32 (s, 3H), 1,85 - 1,69 (m, 2H), 1,50 - 1,42 (m, 2H).
4. Síntesis del ácido 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]-3-metilfenil]ciclopropanocarboxílico
Se añade NaOH (300 mg) en agua (3 mL) a una solución de 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]-3-metilfenil]ciclopropanocarbonitrilo (200 mg, 0,631 mmol) en etanol (3 mL). La mezcla se agita a 80 °C durante 3 horas. La mezcla se neutraliza con HCl (1M, 20 mL) y se extrae con CH2Cl2 (40 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (40 mL), se secan sobre Na2SO4 anhidro, se filtran y se evaporan para obtener el producto del título (140 mg, 63,6%) como sólido amarillo. LMCS (m/z): 349.0 [M+H]+.
1H RMN (400MHz, DMSO-d6,)5= 12,34 (br s, 1H), 8,41 (d,J= 1,6 Hz, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,68 (dd,J= 8,4,2,4 Hz, 1H), 7,63 - 7,55 (m, 1H), 7,36 - 7,14 (m, 3H), 6,49 (s, 2H), 3,59 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 1,52 -1,41 (m, 2H), 1,21 - 1,12 (m, 2H)
5. Síntesis del ácido 1-[4-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-3-metilfenil]cidopropanocarboxílico;dorhidrato
Se añade hidruro sódico en aceite (92,0 mg, 2,3 mmol, 60 % en masa) a una solución de ácido 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]-3-metil-fenil]ciclopropanocarboxílico (200 mg, 0,46 mmol, 80 % en masa) en DMF (4 mL) a 0°C bajo atmosfera de N2 y se agita la mezcla a 50°C durante 10min. Se añade a la mezcla anterior una solución de 2-cloro-6-isopropil-pirazina (110 mg, 0,51 mmol, 70% en masa) en DMF (1 mL). La mezcla se agita a 50 °C durante 3 horas. La mezcla se neutraliza con HCl (1M) y se extrae con C<h>2CI2 (30 mL*3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre Na2SO4 anhidro, se filtran y se evaporan para obtener el producto bruto. El producto bruto se purifica por pre-HPLC [columna: YMC-Actus Triart C18 150*30, 5^m, condición: 25-55%B, A: agua(0,05%HCl), B:a Cn , caudal:25mL/min] para obtener el producto del título (24,8 mg, 99,1% en masa, 28,6%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 469,1 [M H]+.
1H RMN (400MHz, DMSO-d6)5= 9,78 (s, br, 1H), 8,59 (s, br, 1H), 8,28 - 8,18 (m, 1H), 8,17 - 8,00 (m, 2H), 7,90 (s, 1H), 7,84 - 7,69 (m, 1H), 7,31 (s, 1H), 7.26 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 7,18 (d,J= 7,6 Hz, 1H), 3,75 (s, 3H), 2,79 - 2,68 (m, 1H), 2,23 (s, 3H), 1,52 - 1,40 (m, 2H), 1,19 - 1,11 (m, 2H), 0,95 (d,J= 6,8 Hz, 6H).
Ejemplo 23 Amoníaco; ácido 1-[5-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-2-piridil]ciclopropanocarboxílico
1. Síntesis de 1-[5-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]-2-piridil]ciclopropanocarbonitrilo
Se añade [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (0,251 g, 0,336 mmol) a una solución de 4-(5-bromo-2-piridil)-2-metil-pirazol-3-amina (0,90 g, 3,53 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (0,915 g, 3,53 mmol), 1-(5-bromo-2-piridil)ciclopropanocarbonitrilo (0,75 g, 3,36 mmol) y acetato potásico (0,842 g, 8,41 mmol) en 1,4-dioxano (8 mL) y agua (1 mL) bajo atmosfera de N2. A continuación, la mezcla de reacción se agita a 100 °C durante 12 h bajo N2. La mezcla de reacción se concentra para dar un sólido negro, que se purifica por cromatografía flash eludiendo con EtOAc: PE(3:1) para dar el compuesto del título (150 mg, 13,4%) como sólido marrón. LCMS (m/z): 317,0 [M+H]+.
2. Síntesis del ácido 1-[5-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]-2-piridil]ciclopropanocarboxílico
Se añade hidróxido sódico (32,0% en masa) en agua (3 mL) a una solución de 1-[5-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]-2-piridil]ciclopropanocarbonitrilo (150 mg, 0,450 mmol) en etanol (3,00 mL) y agua (1,00 mL). La mezcla de reacción se agita a 80 °C durante 12 horas. La mezcla se ajusta a pH=6-7 con HCl 1 N y se extrae con CH2Cl2 (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran para obtener el compuesto del título (68,0 mg, 40,6%) como sólido marrón, LCMS (m/z): 336,0 [M+H]-.
3. Síntesis de amoníaco1-[5-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-2-piridil]ciclopropanocarboxilato
Se añaden tris(dibencilideneacetona)dipaladio (0,0173 g, 0,0183 mmol) y 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (0,0164 g, 0,0274 mmol) a una solución de ácido 1-[5-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]-2-piridil]ciclopropanocarboxílico;clorhidrato (68 mg, 0,183 mmol), 2-cloro-6-isopropil-pirazina (0,032 g, 0,201 mmol) y carbonato de cesio (0,179 g, 0,549 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml) en atmósfera de N2. La mezcla se agita a 100 °C durante 2 horas. El sólido se filtra. La mezcla se acidifica hasta pH=5-6, se filtra y se evapora para obtener el crudo. Se purifica por prep-HPLC [Columna: YMC-Actus Triart C18 150 x 30, 5^m; Condición: 36-66%B (A=0,05%HCl, B= acetonitrilo); Caudal :25 mL/min] para obtener el producto (90 mg). A continuación se purifica por prep-HPLC [Columna: YMC-Actus Triart C18 150 x 30, 5^m; Condición: 36-66%B (A=0,05% NH3.H2O, B= acetonitrilo); Caudal :25 mL/min] para obtener el compuesto del título (30 mg, 34,9%) como sólido blanco, LCMS (m/z): 456,3 [M+H]+.
1H RMN (400 MHz, CD3OD) 5 = 8,82 - 8,68 (m, 2H), 8,11 - 7,99 (m, 4H), 7,87 (s, 1H), 7,68 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 7,59 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 3,82 (s, 3H), 2,91-2,85 (m, 1H), 1,78 - 1,67 (m, 2H), 1,44-1,41 (m, 2H), 1,12 (d,J= 6,8 Hz, 6H).
Ejemplo 24 Ácido 1-[6-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-3-piridil]ciclopropanocarboxílico;dihidrodoruro
1. Síntesis de 1-(6-cloro-3-piridil)cidopropanocarbonitrilo
Se añade hidruro sódico (3,89 g, 97,3 mmol, 60% en masa) a la solución de 2-(6-cloro-3-piridil)acetonitrilo (5,00 g, 32,4 mmol) en tetrahidrofurano (50 mL) a 0 °C. Se agita la reacción a 20 °C durante 20 min. La reacción se agita a 20 °C durante 20 min y después se añade 1-bromo-2-cloro-etano (5,64 g, 38,9 mmol). La reacción se agita a 10 °C durante 3 horas. La mezcla se añade a NaCl ac. (20 mL). La mezcla se extrae con EtOAc (20 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (10 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran para obtener (4,20 g, 72,5%) como sólido amarillo, LCMS (m/z): 178,9 [M+H]+.
2. Síntesis de 1-(6-tributilstanil-3-piridil)ciclopropanocarbonitrilo
Se añaden 1-(6-cloro-3-piridil)ciclopropanocarbonitrilo (1,2 g, 6,72 mmol), cloruro de litio (1,73 g, 40,3 mmol) y hexabutilditina (6,15 g, 10,1 mmol) en 1 , 4-dioxano (20 mL) a tris(dibencilideneacetona)dipaladio (0,317 g, 0,336 mmol) y triciclohexilfosfina (0,192 g, 0,672 mmol) bajo atmosfera de N2. La mezcla se agita a 100 °C durante 12 horas. El sólido se filtra. La mezcla se diluye con KF sat (20 mL) y se extrajo con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre Na2SO4 anhidro, se filtran y se evaporan para obtener el producto bruto. El producto bruto se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo: EtOAc (3: 1) para obtener el compuesto del título (9,6 g, 33,0%) como sólido marrón, LCMS (m/z): 435,1 [M+H]+.
3. Síntesis de 1-[6-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]-3-piridil]ciclopropanocarbonitrilo;clorhidrato
Se añaden 1-(6-tributilstanil-3-piridil)ciclopropanocarbonitrilo (0,240 g, 0,560 mmol), cloruro de litio (0,0685 g, 1,60 mmol) y 4-(5-bromo-2-piridil)-2-metil-pirazol-3-amina (135 mg, 0,533 mmol) en N, N-dimetilformamida (2 mL) a [1, 1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (0,0398 g, 0,0533 mmol) y yoduro cuproso (0,207 g, 1,07 mmol) bajo atmosfera de N2. La mezcla se agita a 100 °C durante 2 horas. La mezcla se ajusta a pH=6-7 con HCl 1 N y se extrae con EtOAc (20mL x 3). La fase acuosa se diluye con solución de EDTA al 10% (30 mL), y se agita a 20 °C durante 1,5h, se filtra y se extrae con EtOAc (30mLx3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran para obtener el compuesto del título (112 mg, 66,4%) como sólido marrón, LCMS (m/z): 317,1 [M+H]+.
4. Síntesis del ácido 1-[6-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]-3-piridil]ciclopropanocarboxílico
Se añade 1-[6-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]-3-piridil]ciclopropano carbonitrilo (112 mg, 0,354 mmol) en etanol (3,00 mL) y agua (1,00 mL) a hidróxido sódico (32,0% en masa) en H2O (3 mL). La mezcla de reacción se agita a 100 °C durante 12 horas. La mezcla se ajusta a pH=6-7 con HCl 1 N y se concentra para obtener el crudo. Se purifica por prep-HPLC [Columna: YMC-Actus Triart C18 150*30, 5^m; Condición: 36-66%B (A=0,05%HCl, B= acetonitrilo); Caudal:25 mL/min] para obtener el compuesto del título (70,0 mg, 50,0%) como sólido blanco, LCMS (m/z): 336.0 [M+H]+.
5. Síntesis del ácido 1-[6-[6-[5-[(6-isopropNpirazm-2-N)ammo]-1-metN-pirazol-4-N]-3-piridN]-3-piridM]cidopropanocarboxíMco;dihidroclomro
Se añaden ácido 1-[6-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]-3-piridil]cidopropanocarboxílico (70,0 mg, 0,177 mmol), 2-doro-6-isopropil-pirazina (0,031 g, 0,195 mmol) y carbonato de cesio (0.173 g, 0,531 mmol) en 1 , 4-dioxano (4 mL) a tris(dibencilideneacetona)dipaladio (0,0167 g, 0,0177 mmol) y 4, 5-bis(difenilfosfino)-9, 9-dimetilxanteno (0,0158 g, 0. 0265 mmol) bajo N2. La mezcla se agita a 100 °C durante 5 horas. El sólido se filtra. La mezcla se acidifica hasta pH=5-6, se filtra y se evapora para obtener el crudo. Se purifica por prep-HPLC [Columna: YMC-Actus Triart C18 150 x 30, 5^m; Condición: 36-66%B (A=0,05%HCl, B= acetonitrilo); Caudal:25 mL/min] para obtener el compuesto del título (14,8 mg, 15,2%) como sólido blanco, Lc Ms (m/z): 456,2 [M+H]+.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 = 9,93 (br s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,73 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 8,69 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 8,09 (d,J= 8.4 Hz, 1H), 7,97 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 7,91 - 7,84 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 2,71-2,63 (m, 1H), 1,54 1,50 (m, 2H), 1,28-1,25 (m, 2H), 0,89 (d,J= 6,8 Hz, 5H).
Ejemplo 25 1-[4-[4-[5-[(6-ciclopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]fenil]fenil]ciclopropanocarboxilato de amonio
1. Síntesis del ácido 1-[4-[4-[(6-cloropirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]fenil]fenil]ciclopropanocarboxílico
Se añade hidruro de sodio en aceite de parafina (0,273 g, 6,84 mmol) a una solución de 1-[4-[4-(5-amino-1-metilpirazol-4-il)fenil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (500 mg, 1,37 mmol) (preparado de acuerdo con el Ejemplo 17A) en DMF (5 mL) a 10 °C. Se agita la reacción a 50 °C durante 20 min. La reacción se agita a 50 °C durante 20 min y luego se añade 2,6-dicloropirazina (0,247 g, 1,64 mmol). La reacción se agita a 50 °C durante 3 horas. La mezcla se añade a NH4Cl ac. (20 mL). La mezcla se extrae con EtoAc (20 mL x 3). A continuación, la fase acuosa se acidifica con HCl 1 M hasta pH =4-5. La mezcla se extrae con CH2Cl2 (20 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran para obtener (490 mg, 80,4%) como sólido amarillo, LCMS (m/z): 446,1 [M+H]+.
2. Síntesis de amoníaco; ácido 1-[4-[4-[5-[(6-ciclopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]fenil]fenil]ciclopropanocarboxílico
Se añade [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II) (0,0230 g, 0,0314 mmol) a una mezcla de ácido 1-[4-[4-[5-[(6-cloropirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]fenil]fenil]ciclopropanocarboxílico (200 mg, 0,314 mmol, 70 % en masa), ácido ciclopropilborónico (0,0327 g, 0,377 mmol) y carbonato de cesio (0,205 g, 0,628 mmol) en agua (0,5 mL) y 1,4dioxano (5 mL) bajo nitrógeno. La reacción se calienta a 90 °C durante 3 horas. La mezcla se diluye con agua (20 mL) y se ajusta el pH=5-6 con HCl 1 M, se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran. El producto bruto se purifica por prep-HPLC [Columna: YMC-Actus Triart C18 150 x 30, 5^m; Condición: 36-66%B (A=0,05% amoníaco, B= acetonitrilo); Caudal: 25 mL/min] para obtener el compuesto del título (l8 ,5 mg, 12,3%) como sólido blanco. LCMS (m/z): 452,2 [M+H]+.
1H RMN(400 MHz, DMSO-d6) 5 = 7,89 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,59 - 7,53 (m, 2H), 7,52 - 7,45 (m, 4H), 7,29 (d,J= 8,0 Hz, 2H), 6,08 (br s, 4H), 3,60(s, 1H), 1,95 - 1,90 (m, 1H), 1,28-1,26 (m, 2H), 0,88-0,85 (m, 2H), 0,83-0,80 (m,2H), 0,63-0,60 (m, 2H).
Ejemplo 26A 1-[4-[4-[5-[(6-isopropN-pirazm-2-N)ammo]-1-metN-pirazol-4-N]feml]feml]ciclopropanocarboxNato de metilo
1. Síntesis de 1-[4-[4-[5-[(6-cloropirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]fenil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añade hidruro sódico (0,0709 g, 1,77 mmol, 60 % en masa) a una solución de 1-[4-[4-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)fenil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (540 mg, 1,48 mmol) (preparado de acuerdo con el Ejemplo 17A) en DMF (10 mL) a 0 °C. Se agita la reacción a 0 °C durante 10 min. La reacción se agita a 0 °C durante 10 min y después se añade 2,6-dicloropirazina (0,267 g, 1,77 mmol). La reacción se calienta a 30 °C durante 6 horas. La mezcla se diluye con agua (20 mL) y se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró y se concentró para dar el residuo y se purificó por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo: EtOAc (1: 1) para obtener el compuesto del título (160 mg, 90 % en masa) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 460,1 [M+H]+.
2. Síntesis de 1-[4-[4-[5-[(6-isopropenil-pirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]fenil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añaden Pd(dppf)Cl2 (0,0487 g, 0,0665 mmol) y Cs2CO3 (0,651 g, 2,00 mmol) a 1-[4-[4-[5-[(6-cloropirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]fenil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (340 mg, 0,665 mmol, 90 % en masa) y 2-isopropenil-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (0,169 g, 0,998 mmol) en agua (0,5 ml) y 1,4 -dioxano (5 ml) en atmósfera de nitrógeno. La reacción se calienta a 90 °C durante 5 horas. La mezcla se diluye con agua (20 mL) y se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran. El residuo se purifica por cromatografía flash eludiendo con éter de petróleo: EtOAc (1: 1) para obtener el compuesto del título (325 mg, 72,6%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 466,2 [m H]+.
3. Síntesis de 1-[4-[4-[5-[(6-isopropil-pirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]fenil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo
Se añade 1-[4-[4-[5-[(6-isopropenil-pirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]fenil]fenil]cidopropanocarboxilato de metilo (315 mg, 0,677 mmol, 90%en masa) en MeOH (10 mL) a Pd/C (20,0 mg, l0%en masa) y se agita la mezcla bajo hidrógeno (15 psi) durante 18 horas. El sólido se filtra y el filtrado se evapora para obtener el compuesto del título (297 mg, 93,9%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 468,1 [M+H]+.
Ejemplo 26B Ácido 1-[4-[4-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]fenil]fenil]ciclopropanocarboxílico
Se añade 1-[4-[4-[5-[(6-isopropil-pirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]fenil]fenil]ciclopropanocarboxilato de metilo (295 mg, 0,635 mmol) en THF (5 mL) y agua (0,5 mL) a hidrato de hidróxido de litio (0,0808 g, 1,91 mmol), se agita la mezcla a 50 °C durante 18 horas. A continuación, se ajusta el pH de la mezcla a 5-6 con solución de HCl 1,0M y se extrae la mezcla con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran. El producto bruto se purifica por prep-HPLC (columna: Phenomenex Gemini 150 x 25mm x 10^m, Gradiente: 50-80% B (A=agua/0,05% HCl, B = acetonitrilo), Caudal: 25 mL/min). Las fracciones deseadas se liofilizan para obtener el compuesto del título (112,6 mg, 38,3%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 454,2 [M H]+.
1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 5 = 9,19 (s, 1H), 7,91 - 7,83 (m, 3H), 7,61 - 7,51 (m, 6H), 7,36 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 3,65 (s, 3H), 2,84 -2,74 (m, 1H), 1,48 - 1,43 (m, 2H), 1,17 -1,13 (m, 2H), 1,07 (d, J = 6,8 Hz, 6H).
Ejemplo 27 Ácido 1-[4-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico
1. Síntesis del ácido 1-[4-[6-[5-[(6-cloropirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico
Se añade hidruro sódico (0,293 g, 7,32 mmol, 60% en aceite de parafina) a la solución de ácido 1-[4-[6-(5-amino-1-metil-pirazol-4-il)-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico (0,600 g, 1,46 mmol, 85% en masa) (preparado de acuerdo con el Ejemplo 1A) en DMF (2 mL) a 20 °C. La reacción se agita a 50 °C durante 20 minutos y luego se añade 2,6dicloropirazina (0,264 g, 1,76 mmol). La reacción se agita a 50 °C durante 3 horas. La mezcla se añade al agua (20 mL). La mezcla se extrae con EtOAc (20 mL x 3). A continuación, la fase acuosa se acidifica con HCl 1 M hasta pH =4-5. La mezcla se extrae con EtOAc (20 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran, para obtener el compuesto del título (495 mg, 75%) como sólido amarillo. LCMS (m/z): 447,0 [M+H]+.
2. Síntesis del ácido 1-[4-[6-[5-[(6-isopropenil-pirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico
Se añade Pd(dppf)Cl2 (0,081 g, 0,111 mmol) a las suspensiones de 2-isopropenil-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (0,282 g, 1.66 mmol), ácido 1-[4-[6-[5-[(6-cloropirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico (495 mg, 1,11 mmol) y carbonato sódico (352 mg, 3,32 mmol) en agua (0,5 mL) y 1,4-dioxano (5 mL) bajo nitrógeno. La reacción se calienta a 90 °C durante 3 horas. La mezcla se diluye con agua (20 mL) y se ajusta el pH=5-6 con HCl 1 M, se extrae con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (30 mL), se secan sobre sulfato sódico anhidro y se concentran. El residuo se purifica mediante cromatografía flash sobre gel de sílice eludiendo con éter de petróleo: EtOAc (2: 1) para obtener el compuesto (293 mg, 58%) como un sólido amarillo. LCMS (m/z): 453,0 [M+H]+.
3. Síntesis del ácido 1-[4-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico
Se añade ácido 1-[4-[6-[5-[(6-isopropenil-pirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico (400 mg, 0,575 mmol, 65 % en masa) en metanol (10 mL) a paladio sobre carbón activado (120 mg, 10 % en masa) a temperatura ambiente y se agita la mezcla bajo hidrógeno molecular (15 psi) a 10 °C durante 18 horas. El sólido se filtra y el filtrado se evapora para obtener el crudo. El producto bruto se purifica por prep-HPLC [Columna: YMC-Actus Triart C18 150*30, 5^m; Condición: 36-66%B (A= 0,05%HCl, B= acetonitrilo); caudal: 25 mL/min] para obtener el compuesto del título (31,1 mg, 11 %) como sólido blanco. LCMS (m/z): 455,0 [M+H]+.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 = 9,98 (s, 1H), 8,87 (d,J= 2,0 Hz, 1H), 8,50 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 8,32 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,89 - 7.83 (m, 1H), 7,71 (d,J= 8,4 Hz, 2H), 7,48 (d,J= 8,4 Hz, 2H), 3,78 (s, 3H), 2,75 - 2,66 (m, 1H), 1,53 - 1,46 (m, 2H), 1,21 - 1,16 (m, 2H), 0,97 - 0,86 (m, 6H).
Ensayos de flujo de calcio LPAR1
Se sintetiza un ADNc que codifica el receptor humano LPAR1 y se clona en un plásmido de expresión pADN3. El plásmido se transfecta en células U937 utilizando Lipofectamine 2000 (Invitrogen Corp., EE.UU.). Los clones que expresan de forma estable LPAR1 humano se seleccionan utilizando puromicina y se identifican como células que muestran flujo de Ca en respuesta al LPA.
Las células U937 que sobreexpresan LPAR1 humano se siembran a 100.000 células por pocillo en una placa de 96 pocillos recubierta de fibronectina (10 ug/ml) en 60 ^l de tampón de ensayo (HBSS que contiene 20 mM de HEPES y 0,2% de BSA) y luego se incuban durante 60 minutos. A continuación, se añaden 50 ^l de un colorante indicador de calcio (Fluo-4 NW, Molecular Probes) a cada pocillo y se continúa la incubación durante 30 minutos a 37 °C y después 30 minutos a temperatura ambiente. Se añaden 50 |jl de compuestos de ensayo en DMSO al 4% a las células y se continúa la incubación a temperatura ambiente durante 40 minutos. Las células se estimulan mediante la adición de 50 j l de 128 nM de LPA y el calcio intracelular se mide utilizando el FLIPR TETRA (Molecular Devices). Los valores IC50 se determinan utilizando la herramienta de análisis "Genedata Screener".
Ensayos de flujo de calcio LPAR3
Se sintetiza un ADNc que codifica el receptor humano LPAR3 y se clona en un plásmido de expresión pADN3. El plásmido se transfecta en células U2OS utilizando Lipofectamine 2000 (Invitrogen Corp., EE.UU.). Los clones que expresan de forma estable LPAR3 humano se seleccionan utilizando neomicina y se identifican como células que muestran flujo de Ca en respuesta al LPA.
Las células U2OS que sobreexpresan LPAR3 humano se siembran a 20.000-40.000 células por pocillo en una placa de 96 pocillos recubierta de poli-D-lisina un día antes del ensayo. Antes del ensayo, las células se lavan una vez con tampón de ensayo (HBSS que contiene 20 mM de HEPES y 0,2% de BSA) y luego se incuban en 50 j l de tampón de ensayo durante 60 minutos. A continuación, se añaden 50 j l de un colorante indicador de calcio (Fluo-4 NW, Molecular Probes) a cada pocillo y se continúa la incubación durante 30 minutos a 37 °C y después 30 minutos a temperatura ambiente. Se añaden 50 j l de compuestos de ensayo en DMSO al 4% a las células y se continúa la incubación a temperatura ambiente durante 40 minutos. Las células se estimulan mediante la adición de 50 j l de LPA 128 nM y el calcio intracelular se mide utilizando el FLIPR TETRA (Molecular Devices). Los valores IC50 se determinan utilizando la herramienta de análisis "Genedata Screener".
Ensayo de unión a membrana de LPAR1
La capacidad de un compuesto para inhibir la unión de un ligando (ácido 1-(4'-(4-(((benciloxi)carbonil)amino)-3-metilisoxazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-il)ciclopropano-1-carboxílico) a LPAR1 se evalúa mediante un ensayo de unión a membrana. La membrana que contenía LPAR1 se adquirió a Cerep (Cat. No. 290312RB). Antes del ensayo, se descongela la membrana y se homogeneiza durante 15 segundos. Se añaden 50 j l de compuestos de ensayo y 50 j l de ligando radioetiquetado a las placas de 96 pocillos y, a continuación, se añaden 50 de j l de membrana (50-400 ug/ml). A continuación, se añaden 50 j l de microesferas SPA PVT WGA (1-5mg/ml), se sellan las placas y se incuban a temperatura ambiente durante 5 minutos. La actividad radioactiva se mide mediante un contador beta y los valores IC50 se determinan utilizando la herramienta de análisis "Genedata Screener".
Influjo de calcio en células estrelladas hepáticas humanas (LX-2)
La línea de células estrelladas hepáticas humanas LX-2 se adquiere a EMD Millpore. Las células LX-2 se siembran a 20.000-40.000 células por pocillo en una placa de 96 pocillos recubierta de poli-D-lisina un día antes del ensayo. Antes del ensayo, las células se lavan una vez con tampón de ensayo (HBSS que contiene 20 mM de HEPES y 0,2% de BSA) y luego se incuban en 50 j l de tampón de ensayo durante 60 minutos. A continuación, se añaden 50 j l de un colorante indicador de calcio (Fluo-4 NW, Molecular Probes) a cada pocillo y se continúa la incubación durante 30 minutos a 37 °C y después 30 minutos a temperatura ambiente. Se añaden a las células 50 j l de compuestos de ensayo en DMSO al 4% y se continúa la incubación a temperatura ambiente durante 40 minutos. Las células se estimulan mediante la adición de 50 j l de LPA 128 nM y el calcio intracelular se mide utilizando el FLIPR TETRA (Molecular Devices). Los valores IC50 se determinan utilizando la herramienta de análisis "Genedata Screener".
Ensayo de liberación de citoquinas LPAR1
Las células MG63 humanas se siembran a 20.000 por pocillo en placas de 96 pocillos y se incuban en medio MEM. Un día después, se retira el medio de cultivo celular y se añaden 60 j l de compuestos de ensayo a cada pocillo. 30 minutos después, se añaden 60 j l de LPA (10 jM ) a cada pocillo. 24 horas después, se toman 50 j l de sobrenadante de cada pocillo y se miden los niveles de IL-6 mediante un kit ELISA (R&D Systems, Cat. No. D6050). Los valores IC50 se determinan utilizando la herramienta de análisis "Genedata Screener".
Los compuestos activos representativos de la presente invención (Ejemplos "B", a diferencia de los profármacos de éster, Ejemplos "A") se ensayaron en esencia como se describió anteriormente y los resultados se resumieron en la Tabla 1 a continuación:
T l 1
(continuación)
Farmacocinética en roedores
La farmacocinética de los compuestos se determina en ratas macho Sprague-Dawley o ratones C57. Se administra a las ratas una dosis única de 1 mg/kg por vía intravenosa (IV) y 10 mg/kg por vía oral (PO). Los vehículos son 20% Captisol p/v en tampón 25 mM NaPO4, pH8 y 1% hidroxietilcelulosa / 0,25% polisorbato 80 y 0,05% antiespumante 1510-US en agua destilada para la dosis intravenosa y oral, respectivamente. Las muestras de sangre se recogen antes de la dosis (sólo PO), 0,08 (sólo IV), 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 8, 12 y 24 horas después del inicio de la administración del compuesto. Las muestras de sangre se centrifugan para obtener plasma. Las muestras de plasma se analizan mediante LC-MS/MS para determinar las concentraciones de compuestos.
Los compuestos activos representativos (a diferencia de los profármacos de éster) de la presente invención se ensayaron en esencia como se describió anteriormente y los resultados se resumieron en la Tabla 2A y 2B a continuación:
T l 2A
T l 2B
Inflamación hepática y fibrosis inducidas por la dieta
A los ratones macho C57B1/6 (7-8 semanas de edad) se les da libre acceso a comida y agua. Se alimenta a los ratones con comida rica en grasas, sacarosa y colesterol durante 196 días. A continuación, se administrará a los animales por vía oral el vehículo o los compuestos de ensayo una vez al día durante 77 días a un volumen de 5 ml/kg. El peso corporal y la ingesta de alimentos se medirán dos veces por semana y, al cabo de dos semanas, el peso corporal y la ingesta de alimentos se medirán una vez por semana. Al final del estudio, los animales serán eutanasiados por asfixia con CO2. Se recogen muestras de hígado de los animales y se fijan en NBF al 10%. Las muestras de hígado se preparan tras 20 a 24 horas de fijación en NBF al 10% y se preparan en bloques FFPE. Las secciones de portaobjetos de bloques FFPE se procesan con tinción de H&E y Tricrómico de Masson. La interpretación histopatológica y los resultados serán proporcionados por patólogos cualificados. Los datos se representan gráficamente con Graphpad prism y se determinan las diferencias estadísticas entre los grupos.
El compuesto activo Ejemplo no. 27 (a diferencia del profármaco de éster) se ensayó en esencia como se describió anteriormente y los resultados se resumieron en la Tabla 3 a continuación:
T l
Liberación de histamina y eicosanoides inducida por LPA intravenoso en ratones
Se utiliza un modelo de liberación de histamina y eicosanoides inducida por LPA intravenoso en ratón para determinar la potenciain vivode los compuestos de la presente invención. Los ratones macho C57BL/6J que pesan entre 20 y 25 gramos tienen libre acceso al pienso estándar para ratones y al agua. El LPA se disuelve en albúmina de suero bovino sin ácidos grasos al 0,1% para generar una solución a 2mg/mL. Los compuestos de ensayo se formulan en metilcelulosa al 0,5% más Tween 80 al 0,25% para generar las concentraciones requeridas un día antes del experimento y se almacenan en un frigorífico hasta su uso. Los animales son dosificados oralmente con compuestos de prueba a 10ml/kg 2 horas antes de la dosificación intravenosa de LPA (300 ug por ratón) con agujas de calibre 30 a través de la cola. Dos horas después de la dosificación de LPA, los animales son eutanasiados por asfixia con CO2. La sangre se extraerá por punción cardíaca. Las muestras de sangre se mantienen en hielo durante más de 5 minutos y se centrifugan a 4000rpm durante 10 minutos a 4°C para generar plasma sobrenadante. Los niveles plasmáticos de histamina, ácido metilimidazol acético y eicosanoides se miden por LC/MS.
El compuesto activo Ejemplo Nos. 20 y 27 (a diferencia del profármaco de éster) se ensayó en esencia como se describió anteriormente y los resultados se resumieron en la Tabla 4 a continuación:
T l 4

Claims (14)

  1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de la fórmula
    X1 es N, X2 es CH o N, y X3 es C-R2 o N, siempre que no más de uno de X2 yX 3 pueden ser N; Y1 e Y2 son CH o N, siempre que sólo uno de Y1 o Y2 pueda ser N; R1 es isopropilo, isobutilo, t-butilo, 2-hidroxiprop-2-il, ciclopropilo, ciclopropiloxi, t-butiloxi, ciclobutiloxi, 3,3-difluorociclobutiloxi, 2-fluoroprop-2-ilo, 1,1 -difluoroetilo, trifluorometilo, isopropiloxi, o 2-metoxiprop-2-ilo; R2 es H o fluoro; R3 es H, halógeno, alquil C1-C3, alcoxi C1-C3, alcoximetil C1-C3, CF3, cianometilo o ciano; R4 es H, halógeno, alquilo C1-C3, CF3 o ciano; R5 es H, metilo, etilo, propilo, isopropilo o ciclopropilo; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  2. 2. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que Y1 es CH, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  3. 3. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el que R1 es isopropilo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  4. 4. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el que R1 es ciclopropiloxi, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  5. 5. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que R5 es hidrógeno, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  6. 6. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que es: ácido 1-[4-[6-[5-[(6-tert-butoxipirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1-[4-[6-[5-[[6-(ciclobutoxi)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1 -[4-[6-[5-[[6-(ciclopropoxi)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-5-fluoro-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1-[4-[5-fluoro-6-[5-[[6-(1-fluoro-1-metil-etil)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]- 3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1-[4-[6-[5-[[6-(3,3-difluorociclobutoxi)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]cidopropanocarboxílico, ácido 1-[4-[6-[5-[[6-(1-metoxi-1-metil-etil)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil] fenil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1-[4-[6-[5-[(6-isopropoxipirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-2-metilfenil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1-[4-[6-[5-[[6-(ciclopropoxi)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-2-(trifluorometil)fenil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1 -[2-dano-4-[6-[5-[[6-(ddopropoxi)pirazin-2-N]amino-1 -metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1-[4-[6-[5-[[6-(ciclopropoxi)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico, ácido H4-[5-fluoro-6-[5-[(6-isopropoxipirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1-[4-[6-[5-[[6-(1,1-difluoroetil)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1-[4-[6-[5-[[6-(1-fluoro-1-metil-etil)pirazin-2-il]amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1-[4-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-3-(metoximetil)fenil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1-[3-(cianometil)-4-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1-[3-ciano-4-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1-[4-[2-[5-[(6-isopropil-pirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]pirimidin-5-il]fenil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1-[4-[5-[5-[(6-isopropil-pirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]pirazin-2-il]fenil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1-[4-[6-[5-[(6-isopropoxipirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1-[4-[6-[1-metil-5-[[6-(trifluorometil)pirazin-2-il]amino]pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1-[4-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-3-metilfenil]ciclopropanocarboxílico, Amoníaco; ácido 1 -[5-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1 -metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-2-piridil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1-[6-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]-3-piridil]ciclopropanocarboxílico, ácido 1-[4-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  7. 7. El compuesto de la reivindicación 1 que es, ácido 1-[4-[6-[5-[(6-isopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]-3-piridil]fenil]ciclopropanocarboxílico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  8. 8. Un compuesto que es el ácido H4-[4-[5-[(6-isopropil-pirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]fenil]fenil]ciclopropanocarboxílico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  9. 9. Un compuesto seleccionado de: ácido 1-[4-[4-[5-[(6-isobutil-pirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]fenil]fenil]ciclopropanocarboxílico, y 1-[4-[4-[5-[(6-ciclopropilpirazin-2-il)amino]-1-metil-pirazol-4-il]fenil]fenil]ciclopropanocarboxilato de amonio.
  10. 10. Una composición farmacéutica, que comprende un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y al menos un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.
  11. 11. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en terapia.
  12. 12. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de la EHNA.
  13. 13. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de la fibrosis.
  14. 14. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de enfermedades inflamatorias.
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