ES2962134T3

ES2962134T3 - Compuestos de 1,3,8-triazaespiro y su uso como medicamentos para el tratamiento de la lesión por reperfusión

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Publication number: ES2962134T3
Application number: ES19761959T
Authority: ES
Inventors: Paolo Pinton; Roberto Ferrari; Carlotta Giorgi; Claudio Trapella; Delia Preti; Giampaolo Morciano
Original assignee: Maria Cecilia Hospital SpA
Current assignee: Maria Cecilia Hospital SpA
Priority date: 2018-07-27
Filing date: 2019-07-12
Publication date: 2024-03-15
Anticipated expiration: 2039-07-12
Also published as: DK3829579T3; EP3829579B1; IT201800007580A1; EP3829579A1; WO2020021378A1; PT3829579T

Abstract

La presente invención se refiere a un compuesto 1,3,8-triazaespiro de Fórmula (I), en la que A es -CH2, -SO2-, -NH-CO-, -NH-CS- o -CO-; la línea discontinua representa un enlace simple o doble; R1 es un sustituyente seleccionado entre alquilo (C1-C3), fenilo, tienilo y ciclohexilo, estando dicho sustituyente opcionalmente sustituido con halógeno o alquilo (C1-C3); y R2 es un sustituyente seleccionado entre H, alquilo (C1-C3), alcoxi (C1-C3), -CF3 y halógeno; y en el que, cuando la línea discontinua es un doble enlace, A es -CH2- y R1 es fenilo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en el tratamiento de enfermedades por lesión por reperfusión. El compuesto 1,3,8-triazaespiro de la invención es un inhibidor selectivo de la subunidad C del complejo F1/Fo-ATP sintasa y un modulador de la actividad del poro de transición de la permeabilidad mitocondrial en células y tejidos de mamíferos, en el tratamiento de la reperfusión. enfermedades de lesiones. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Compuestos de 1,3,8-triazaespiro y su uso como medicamentos para el tratamiento de la lesión por reperfusión

Campo de la invención

La presente invención se refiere a compuestos de 1,3,8-triazaespiro, sus sales farmacéuticamente aceptables y su uso como medicamentos. Los compuestos de la invención muestran una marcada acción contra las enfermedades derivadas de la lesión por reperfusión. Específicamente, la invención proporciona inhibidores selectivos de la subunidad C del complejo F<1>/F<0>-ATP sintasa. Como inhibidores selectivos, los compuestos de la invención son capaces de modular la apertura del poro de transición de permeabilidad mitocondrial en células y tejidos de mamíferos, y por lo tanto se pueden utilizar para el tratamiento de todas las enfermedades que muestran daño por reperfusión, tales como enfermedades cardíacas, neurológicas y nefrológicas.

Estado de la técnica

La muerte celular programada es un evento fisiológico conservado evolutivamente, esencial para el desarrollo intrauterino y post-embrionario, y para la homeostasis tisular mediante la eliminación de células dañadas que de otro modo conducirían a numerosos eventos patológicos (P. Meier, et al. Nature 2000, 407, 796). Por el contrario, en los seres humanos, una apoptosis excesiva puede provocar una larga lista de disfunciones patológicas, tales como trastornos cardiovasculares, neurológicos y nefrológicos. Existen varios tipos de muerte celular programada, incluida la apoptosis mediada por la transición de la permeabilidad mitocondrial (TPM, V. Izzo et al. Trends Cell Biol 2016, 26, 655) lo que da como resultado un aumento de la permeabilidad de la membrana mitocondrial interna (MMI), normalmente muy impermeable, con el consiguiente influjo osmótico de solutos en la matriz mitocondrial y pérdida de las características estructurales y funcionales de las mitocondrias involucradas (M. Bonora et al. Oncogene 2015, 34, 1608). El estado de TPM está mediado por la apertura de un canal llamado poro de transición de permeabilidad mitocondrial (PTPm), una plataforma multiproteica compuesta por proteínas, que físicamente forman un poro dentro de la MMI, y moduladores negativos y positivos que contribuyen a su estado funcional y su mecanismo de formación (A. Halestrap et al. Biochem Soc Trans 2010, 38, 841). Las condiciones que favorecen la apertura de PTPm incluyen el aumento de la concentración de iones calcio ([Ca<2+>]) en la matriz mitocondrial, la restauración de los niveles de pH, el estrés oxidativo y la presencia de fosfatos, todos eventos que aparecen en relación con las lesiones por una afección de isquemia-reperfusión (I/R) (G. Morciano et al. J Mol Cell Cardiol 2015, 78, 142).

Aunque se han descubierto muchos de los componentes y moduladores de PTPm en los últimos años, las proteínas que delimitan el canal siguen siendo objeto de intenso estudio. Entre los moduladores de PTPm se encuentra la conocida ciclofilina D (CypD), una proteína soluble de la matriz mitocondrial (V. Giorgio et al. J Biol Chem 2009, 284, 33982) cuyo agotamiento estable se ha demostrado que conduce a un comportamiento protector y desensibilizante de TPM. En dos estudios recientes (M. Bonora et al. Cell Cycle 2013, 12, 674; M. Bonora et al. EMBO Rep. 2017,18, 1077), se proporciona evidencia experimental de que la subunidad C de la F<1>/F<o>-ATP sintasa desempeña un papel fundamental en la actividad y formación de PTPm, demostrando en particular una fuerte correlación entre la expresión de la subunidad C y el estado funcional de PTPm; de hecho, el agotamiento de esta proteína conduce a una reducción de la apertura del canal en respuesta al estrés oxidativo o al estrés inducido por calcio, mientras que su expresión en exceso estimula la apertura (M. Bonora et al. Cell Cycle 2013, 12, 674). Además, los autores de la presente invención demostraron que la apertura del PTPm es un proceso de varios pasos que involucra i) la disociación de dímeros de F<1>/F<o>-ATP sintasa y ii) una conformación apropiada del anillo proteico que consiste en múltiples subunidades C una vez que estos dímeros se disocian. Otros grupos, tales como los de Alavian, Azarashvili y colaboradores, han confirmado de forma independiente primeras observaciones de los autores de la presente invención añadiendo importantes nociones básicas sobre las propiedades del canal (K.N. Alavia et al. Proc Natl Acad Sci U S A 2014, 111, 10580) y el estado de fosforilación relativo (T. Azarashvili et al. Cell Calcium 2014, 55, 69). La organización molecular de la subunidad C en una estructura anular (anillo C) en la MMI hace que ésta sea identificada como un componente clave en el proceso de ensamblaje de los poros (P.A. et al. Cell Death Discov 2016, 2, 16070; G. Morciano et al. Cell Death Disc 2017, 8, e2698), así como una diana terapéutica prometedora para el tratamiento farmacológico de la muerte celular programada (g . Morciano et al. J Mol Cell Cardiol 2015, 78, 142; R. Ferrari et al. Circ J 2017, 81, 131).

Aunque se han realizado numerosos esfuerzos para sintetizar y probar nuevos inhibidores de la apertura de PTPm (D. Fancelli et al. J Med Chem 2014, 57, 5333; LJ Martin et al. Front Cell Neurosci 2014, 8, 433), hasta donde saben los autores de la presente invención, ninguna de las moléculas identificadas hasta la fecha ha mostrado especificidad de interacción con la subunidad C ni ha sido desarrollada con fines cardioprotectores para el tratamiento del infarto de miocardio (IM). Se estima que aproximadamente 50% del área final del miocardio infartado se debe a la lesión por reperfusión (LR), que consiste en la muerte celular tras la restauración del flujo sanguíneo en la arteria afectada por la isquemia. R. Ferrari et al. Circ J 2017, 81, 131). Hasta la fecha, sólo el uso de terapias moleculares de amplio espectro ha demostrado una eficacia útil para proteger el corazón después de la reperfusión, mientras que los ensayos clínicos aleatorios centrados en dianas farmacológicas más específicas han fracasado.

El compuesto 8-acetil-1-fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona ha sido descrito por Danieli et al: en "Electron impact mas spectrometry of substituted 1,3,8-triazaspiro-4,5-decan-4-ones" Biomedical and Environmental mass spectrometry, 1989, páginas 1000-1004 como herramienta valiosa para mapear los receptores de dopamina en el cerebro. El documento US-A-2005/131 004 divulga derivados de hidronopol como agonistas de ORL1 para su uso en el tratamiento, entre otros, del infarto de miocardio. El documento EP-A-1 254 895 divulga compuestos cíclicos nitrogenados como antagonistas del calcio para su uso en el tratamiento de, entre otras, enfermedades neuronales, incluido el accidente cerebrovascular isquémico, el infarto cerebral y la muerte de las células neuronales.

Por tanto, se aprecia la necesidad de disponer de un nuevo enfoque farmacológico y/o terapéutico para el tratamiento de patologías derivadas de daños relacionados con la reperfusión.

Compendio de la invención

Los autores de la presente inventores han descubierto sorprendentemente que algunas moléculas de bajo peso molecular son capaces de inhibir la apertura de PTPm interactuando específicamente con la subunidad C del complejo F<1>/Fo-ATP sintasa. Por tanto, la invención ha permitido la identificación de potentes inhibidores de la apertura del poro de transición de permeabilidad mitocondrial en células vivas de mamíferos, que se dirigen selectivamente a la subunidad C del complejo F<1>/Fo-ATP sintasa. Por lo tanto, la invención se refiere a compuestos de 1,3,8-triazaespiro como se definen en las reivindicaciones, que resultaron ser capaces de tratar enfermedades derivadas del daño por reperfusión.

Por lo tanto, la invención también se refiere a un nuevo enfoque terapéutico que comprende el uso de agentes cardioprotectores, neuroprotectores y nefroprotectores como se definen en las reivindicaciones, útiles para el tratamiento clínico de eventos isquémicos relacionados con ataques cardíacos y accidentes cerebrovasculares. Por tanto, la invención se refiere a un compuesto de 1,3,8-triazaespiro de Fórmula (I):

en donde

A es -CH<2>, -SO<2>-, -NH-CO-, -NH-CS- o -CO-;

la línea discontinua representa un enlace sencillo o doble;

R<1>es un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en alquilo (C<1>-C<3>), fenilo, tienilo y ciclohexilo, estando dicho sustituyente opcionalmente sustituido con halógeno o alquilo (C<1>-C<3>); y

R<2>es un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en H, alquilo (C<1>-C<3>), alcoxi (C<1>-C<3>), -CF<3>y halógeno; y

en donde

cuando la línea discontinua es un doble enlace, A es -CH<2>- y R<1>es fenilo,

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables

para su uso como inhibidor selectivo de la subunidad C del Complejo F<1>/F<0>-ATP sintasa en el tratamiento de enfermedades con lesión por reperfusión.

Por lo tanto, la invención ha proporcionado un compuesto de Fórmula (I) como modulador de la apertura del poro de transición de permeabilidad mitocondrial en células y tejidos de mamíferos.

En la presente invención cuando se utilizan las siguientes definiciones:

- "alquilo (C<1>-C<3>)" significa cadenas hidrocarbonadas lineales o ramificadas que comprenden de 1 a 3 átomos de carbono;

- "alcoxi (C<1>-C<3>)" significa un sustituyente que tiene una estructura (cadena alquílica)-O- con 1 a 3 átomos de carbono; y

- "halógeno" significa flúor, cloro, bromo y yodo.

En otro aspecto de la invención, la invención se refiere a un compuesto de 1,3,8-triazaespiro de Fórmula (I):

en donde

A es -CH<2>, -SO<2>-, -NH-CO-, -NH-CS- o -CO-;

la línea discontinua representa un enlace sencillo o doble;

en donde

cuando A es -CH<2>, R<1>es fenilo y R<2>es isopropilo, o

cuando A es -CH<2>, R<1>es fenilo y R<2>es metoxi, la línea discontinua es un doble enlace

para su uso como medicamento.

En otro aspecto adicional, la invención se refiere a un compuesto de 1,3,8-triazaespiro de Fórmula (I):

en donde

A es -CH<2>, -SO<2>-, -NH-CO- o -NH-CS-;

la línea discontinua representa un enlace sencillo o doble;

R<2>es un sustituyente H, alquilo (C<1>-C<3>), alcoxi (C<1>-C<3>) y halógeno; y

en donde

cuando A es -CH<2>- y la línea discontinua es un enlace sencillo, R<1>es fenilo y R<2>es isopropilo,

cuando A es -CH<2>- y la línea discontinua es un doble enlace, R<1>es fenilo y R<2>es isopropilo o metoxi, y cuando A es -SO<2>-, R<1>es metilo y R<2>es hidrógeno, o R<1>es fenilo o tienilo sustituido con halógeno, y R<2>es hidrógeno o halógeno.

En otro aspecto, la invención se refiere a una composición que comprende un compuesto de Fórmula (I) como se define en la reivindicación 10 o una de sus sales farmacéuticamente aceptables para su uso como medicamento, y aditivos farmacéuticamente aceptables.

Descripción de las figuras

La Figura 1 muestra el esquema de preparación de compuestos de Fórmula (I) para su uso como medicamentos en el tratamiento de enfermedades con daño por reperfusión.

Las Figuras 2 A, B muestran los resultados del Ejemplo 7 en el que el ensayo de cobalto-calceína se realizó en células HeLa no tratadas (barra de color negro) o pretratadas con oligomicina A (barra de color gris) y compuesto 1 (barra de color blanco). La apertura de PTPm se estimuló mediante la administración de lonomicina y la cinética representativa de las diferentes condiciones experimentales se notificó al lado (***: valor p <0,001; ****: valor p <0,0001).

La Figura 3, partes A y B, muestran los resultados del Ejemplo 8, específicamente la Figura 3A muestra la detección de los niveles de las proteínas TIM23 (marcador mitocondrial) y GAPDH (marcador citosólico) en el producto homogeneizado y la porción mitocondrial extraída del hígado de ratón; y la Figura 3B muestra el ensayo de dilatación mitocondrial para el escrutinio de compuestos sintetizados. Los datos se obtuvieron registrando los cambios de absorbancia a 540 nm en el décimo minuto de la medición y posteriormente se convirtieron en porcentaje. Barra de color negro: mitocondrias no tratadas y no estimuladas; barra de control de color negro: mitocondrias no tratadas y estimuladas con Ca2+; barra de color gris oscuro: pretratamiento con CsA y estimulación con Ca2+; barra clara: pretratamiento con RR y estimulación con Ca2+; primera barra de color blanco desde arriba: tratamiento con compuesto 1 y estimulación con Ca2+; barras de color blanco: pretratamiento con los compuestos de la invención y estimulación con Ca2+. C: cinética con estadísticas del ensayo de dilatación mitocondrial en las siguientes condiciones: vehículo, CsA, RR, 5c, 6g y 10.

La Figura 4 muestra los resultados del Ejemplo 9. La localización subcelular del compuesto 1 se estudió mediante análisis HPLC-HRMS de muestras de diferentes compartimentos celulares, antes y después del tratamiento con el compuesto. A: perfil de HPLC-HRMS del compuesto 1 en solución fisiológica, que reveló una banda de absorción amplia (7-8,5 min) con un máximo a un tiempo de retención de 8,03 min (panel superior). La región de color gris del espectro de HPLC corresponde a un único pico de masa en [M+1]+ m/z de 386,1534 (panel inferior, [M+H]+ calculado para el compuesto 1 = 386,1533). B: perfil de HPLC de la fracción mitocondrial recogida de células no tratadas que mostró un área bastante limpia en la región de detección del compuesto 1 (de 7 a 9 min, panel superior). La banda de color gris del espectro de HPLC corresponde a una mezcla de picos de masa detectados mediante el análisis HRMS (panel inferior). C: perfil de HPLC-HRMS de la fracción mitocondrial aislada de células pretratadas con el compuesto 1 que indica claramente la presencia del compuesto con una banda de HPLC a un tiempo de retención de 8,2 min (panel superior). El área de color gris de la señal corresponde a una mezcla de picos de masa (panel inferior) entre los cuales [M+1]+ m/z de 386,1534, que identifica el compuesto 1 indetectable en la fracción no tratada correspondiente (panel B). D: No se observan cantidades detectables del compuesto 1 en la fracción citosólica aislada de células pretratadas con el compuesto.

La Figura 5 muestra los resultados del Ejemplo 10. A: Contenido de ATP mitocondrial en células vivas en condiciones basales, evaluado basándose en el protocolo luciferasa-luciferina. B: Producción de ATP mitocondrial tras la estimulación por un agonista dependiente de Ca2+. "Histamina" indica estímulo con histamina. C: Ensayo de viabilidad de células MTT después de 24 h, 48 h y 72 h de tratamiento de células vivas con compuestos de Fórmula (I) a diferentes concentraciones. En particular, barra de color negro: células tratadas con vehículo; barras de puntos: compuesto a una concentración 1 gM; barras con pequeños cuadrados de color blanco y negro: compuesto a una concentración 5 gM; barras con grandes cuadrados de color blanco y negro: compuesto a una concentración 10 gM. Se realizó una normalización con respecto al vehículo. D: análisis de proteínas para la detección de citocromo c en la fracción mitocondrial de las diferentes condiciones experimentales, u.a.: unidades arbitrarias; Cyt.C: citocromo c; *: valor p<0,05; **: valor p<0,01; ****: valor p<0,0001.

La Figura 6 muestra los resultados del Ejemplo 11. A: Diagrama que representa un experimento en un corazón de rata aislado mediante el sistema Langendorff. B: Presión de perfusión arterial coronaria (PPC) registrada en corazón de rata en condiciones de estabilización, isquemia y reperfusión. C: Presión desarrollada por el ventrículo izquierdo (PDVI) registrada en las mismas condiciones que B. D: Presión telediastólica registrada en las mismas condiciones que B y C. E: Ensayo apoptótico TUNEL para la evaluación del efecto cardioprotector en cardiomiocitos del corazón. **:valor p<0,01; ****: valor p<0,0001.

Descripción detallada de la invención

Por tanto, la invención se refiere a un compuesto de 1,3,8-triazaespiro de Fórmula (I):

en donde

A es -CH<2>, -SO<2>-, -NH-CO-, -NH-CS- o -CO-;

la línea discontinua representa un enlace sencillo o doble;

en donde

cuando la línea discontinua es un doble enlace, A es -CH<2>- y R<1>es fenilo,

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables

Por lo tanto, el compuesto es adecuado para modular la apertura del poro de transición de permeabilidad mitocondrial en células y tejidos de mamíferos en el tratamiento de trastornos con lesión por reperfusión.

Por lo tanto, en un primer aspecto, la invención se refiere a un compuesto de 1,3,8-triazaespiro o una de sus sales farmacéuticamente aceptables como se define en la reivindicación 1 para su uso en el tratamiento de enfermedades con lesión por reperfusión.

En este primer aspecto del compuesto de Fórmula (I), en la primera realización, A es preferiblemente -SO<2>-, la línea de puntos es un enlace sencillo, R<1>se selecciona del grupo que consiste en fenilo opcionalmente sustituido con halógeno o alquilo (C<1>-C<3>), tienilo opcionalmente sustituido con halógeno o alquilo (C<1>-C<3>) y R<2>es hidrógeno o halógeno. Más preferiblemente, cuando A es -SO<2>-, R<1>se selecciona entre fenilo sustituido con flúor o metilo, metilo y tienilo sustituido con cloro, y R<2>es hidrógeno o flúor. Aún más preferiblemente, cuando A es SO<2>, R<1>es 4-metilfenilo o 5-clorotienilo, y R<2>es hidrógeno.

En este primer aspecto del compuesto de Fórmula (I), en la segunda realización, A es preferiblemente -CO-, la línea de puntos es un enlace sencillo, R<1>se selecciona del grupo que consiste en fenilo y alquilo (C<1>-C<3>), y R<2>es hidrógeno. Más preferiblemente, cuando A es -CO-, R<1>se selecciona entre fenilo y metilo.

En este primer aspecto del compuesto de Fórmula (I), en la tercera realización, A es preferiblemente -NH-CO- o -NHCS-, la línea de puntos es un enlace sencillo, R<1>se selecciona del grupo que consiste en fenilo y ciclohexilo, y R<2>es hidrógeno.

En este primer aspecto del compuesto de Fórmula (I), en la cuarta realización, A es preferiblemente -CH<2>-, la línea de puntos es un enlace sencillo o doble, R<1>es fenilo y R<2>es hidrógeno, halógeno, alquilo (C<1>-C<3>), alcoxi (C<1>-C<3>) y -CF<3>. Más preferiblemente, cuando A es -CH<2>- y la línea de puntos es un enlace sencillo o doble, R<1>es fenilo y R<2>es hidrógeno, cloro, flúor, metilo, isopropilo, metoxi y -CF3. Ventajosamente, en la cuarta realización, cuando A es -CH<2>-y la línea de puntos es un doble enlace, R<1>es fenilo y R<2>es cloro.

En este primer aspecto, la invención se refiere a un compuesto triazaespiro de Fórmula (I) seleccionado del grupo que consiste en:

8-bencil-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5a)

8-bencil-1 -(4-fluorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5b)

8-bencil-1-(4-clorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5c)

8-bencil-1 -(p-tosil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5d)

8-bencil-1 -(4-isopropilfenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5e)

8-bencil-1 -(4-metoxifenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5f)

8-bencil-1-(3-(trifluorometil)fenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5 g)

8-bencil-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6a)

8-bencil-1 -(4-fluorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6b)

8-bencil-1 -(4-clorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6c)

8-bencil-1 -(p-tosil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6d)

8-bencil-1 -(4-isopropilfenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6e)

8-bencil-1 -(4-metoxifenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6f)

8-bencil-1-(3-(trifluorometil)fenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6 g)

1-fenil-8-tosil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 1)

1-fenil-8-mesil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 8)

8-((4-fluorofenil)sulfonil)-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 9)

8-((5-clorotiofen-2-il)sulfonil)-1-fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 10)

1-(4-fluorofenil)-8-((4-fluorofenil)sulfonil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 11)

8-((5-clorotiofen-2-il)sulfonil)-1-(4-fluorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 12)

8-acetil-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 13)

8-benzoil-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 14)

4-oxo-N-1-difenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decano-8-carboxamida (compuesto 15)

N-ciclohexil-4-oxo-1-fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decano-8-carboxamida (compuesto 16)

N-ciclohexil-4-oxo-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decano-8-carbotioamida (compuesto 17)

En un segundo aspecto de la invención, la invención se refiere a un compuesto de 1,3,8-triazaespiro de Fórmula (I):

en donde

A es -CH<2>, -SO<2>-, -NH-CO-, -NH-CS- o -CO-;

la línea discontinua representa un enlace sencillo o doble;

R<2>es un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en H, alquilo (C<1>-C<3>), alcoxi (C<1>-C<3>), -CF<3>y halógeno; y en donde

cuando A es -CH<2>, R<1>es fenilo y R<2>es isopropilo, o

para su uso como medicamento.

En este segundo aspecto del compuesto de Fórmula (I), en la primera realización, A es preferiblemente -SO<2>-, la línea de puntos es un enlace sencillo, R<1>se selecciona del grupo que consiste en fenilo opcionalmente sustituido con alquilo (C<1>-C<3>), tienilo opcionalmente sustituido por alquilo (C<1>-C<3>), y R2 es hidrógeno o halógeno. Más preferiblemente, cuando A es -SO<2>, R<1>se selecciona entre fenilo sustituido con flúor o metilo, metilo y tienilo sustituido con cloro, y R<2>es hidrógeno o flúor. Aún más preferiblemente, cuando A es SO<2>, R<1>es 4-metilfenilo o 5-clorotienilo, y R<2>es hidrógeno. En este segundo aspecto del compuesto de Fórmula (I), en la segunda realización, A es preferiblemente -CO-, la línea de puntos es un enlace sencillo, R<1>se selecciona del grupo que consiste en fenilo y alquilo (C<1>-C<3>), y R<2>es hidrógeno. Más preferiblemente, cuando A es -CO-, R<1>se selecciona entre fenilo y metilo.

En este segundo aspecto del compuesto de Fórmula (I), en la tercera realización, A es preferiblemente -NH-CO- o -NHCS-, la línea de puntos es un enlace sencillo, R<1>se selecciona del grupo que consiste en fenilo y ciclohexilo, y R<2>es hidrógeno.

En este segundo aspecto del compuesto de Fórmula (I), en la cuarta realización, A es preferiblemente -CH2-, la línea de puntos es un enlace sencillo o doble, R<1>es fenilo y R2 es isopropilo, o cuando A es -CH<2>, R<1>es fenilo y R<2>es metoxi, la línea discontinua es un doble enlace.

En el segundo aspecto de la misma, la invención se refiere a un compuesto de 1,3,8-triazaespiro de Fórmula (I) seleccionado del grupo que consiste en:

8-bencil-1-(4-metoxifenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5f)

8-bencil-1-(4-metoxifenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6f)

1-fenil-8-tosil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 1)

1 -fenil-8-mesil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 8)

1 -(4-fluorofenil)-8-((4-fluorofenil)sulfonil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 11)

8-acetil-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 13)

8-benzoil-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 14)

4-oxo-N-1-difenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decano-8-carboxamida (compuesto 15)

N-ciclohexil-4-oxo-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decano-8-carboxamida (compuesto 16)

En un tercer aspecto, la invención se refiere a un compuesto de 1,3,8-triazaespiro de Fórmula (I):

en donde

A es -CH<2>-, -SO<2>-, -NH-CO- o -NH-CS-;

la línea discontinua representa un enlace sencillo o doble;

R<2>es un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en H, alquilo (C<1>-C<3>), alcoxi (C<1>-C<3>) y halógeno; y en donde

cuando A es -CH<2>- y la línea discontinua es un doble enlace, R<1>es fenilo y R<2>es isopropilo o metoxi, y cuando A es -SO<2>-, R<1>es metilo y R<2>es hidrógeno, o R<1>es fenilo o tienilo sustituido con halógeno y R<2>es hidrógeno o halógeno.

En este tercer aspecto del compuesto de Fórmula (I), en la primera realización, A es preferiblemente -SO<2>-, la línea de puntos es un enlace sencillo, R<1>es metilo o fenilo opcionalmente sustituido con halógeno, y R<2>es hidrógeno o halógeno. Preferiblemente, cuando A es -SO<2>, R<1>se selecciona entre fenilo sustituido con flúor y tienilo sustituido con cloro, y R<2>es flúor. Aún más preferentemente, cuando A es -SO<2>-, R<1>es 4-fluorofenilo o 5-clorotienilo, y R<2>es flúor. En este tercer aspecto del compuesto de Fórmula (I), en la tercera realización, A es preferiblemente -NH-CO- o -NHCS-, la línea de puntos es un enlace sencillo, R<1>se selecciona del grupo que consiste en fenilo y ciclohexilo, y R<2>es hidrógeno.

En este tercer aspecto del compuesto de Fórmula (I), en la cuarta realización, A es preferiblemente -CH<2>-, y la línea de puntos es un enlace sencillo, R<1>es fenilo y R<2>es isopropilo o la línea de puntos es un doble enlace, R<1>es fenilo y R<2>es isopropilo o metoxi.

En el tercer aspecto de la misma, la invención se refiere a un compuesto de 1,3,8-triazaespiro de Fórmula (I) seleccionado del grupo que consiste en:

8-bencil-1-(4-metoxifenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5f)

1 -fenil-8-mesil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 8)

4-oxo-N-1-difenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decano-8-carboxamida (compuesto 15)

En un aspecto aún más preferido y ventajoso, la invención se refiere a un compuesto de Fórmula (I) seleccionado del grupo que consiste en:

1-fenil-8-tosil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 1)

8-bencil-1-(4-clorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5c)

para su uso en el tratamiento de enfermedades con lesión por reperfusión. La invención también se refiere más preferiblemente a un compuesto de Fórmula (I) seleccionado del grupo que consiste en el compuesto 1 y el compuesto 10 para su uso como medicamento. Preferiblemente, A es -SO<2>- o -CH<2>-.

Preferiblemente R<1>es fenilo o tienilo opcionalmente sustituido con halógeno o alquilo (C<1>-C<3>), más preferentemente, es fenilo o tienilo opcionalmente sustituido con cloro o metilo.

Preferiblemente R<2>es hidrógeno, -CF<3>o halógeno, más preferiblemente el halógeno es cloro.

La invención comprende adicionalmente una sal farmacéuticamente aceptable del compuesto de Fórmula (I) seleccionada del grupo que consiste en hidrocloruro, hidrobromuro, sulfato, fosfato, acetato, succinato, oxalato, ascorbato, tartrato, gluconato, benzoato, maleato, fumarato y estearato.

La divulgación también incluye un compuesto de Fórmula (I) marcado con al menos un radioisótopo tal como, por ejemplo, tritio (3H), carbono (14C), yodo (125I) o con sondas fluorescentes, PET (Tomografía por Emisión de Positrones) o SP<e>C<t>. (Tomografía por Emisión de Fotón Único) (no forma parte de la invención reivindicada).

En un aspecto adicional, la invención se refiere a un compuesto de Fórmula (I) como se define en la reivindicación 10 para su uso como medicamento y excipientes farmacológicamente aceptables.

Por lo tanto, para fines de aplicación terapéutica, los compuestos descritos en el presente documento pueden formularse adecuadamente para fines de administración a mamíferos (en particular a sujetos humanos), como tales o asociados en una composición farmacéutica adecuada con uno o más excipientes y/o vehículos farmacéuticamente aceptables. Las composiciones de la invención incluyen aquellas destinadas a la administración oral, nasal, sublingual y particularmente parenteral (subcutánea, intramuscular, intravenosa e intradérmica) en forma de preparaciones (soluciones o suspensiones) inyectables estériles acuosas y no acuosas.

La dosificación terapéutica para la modulación de la apertura del poro de transición de permeabilidad mitocondrial por las moléculas objeto de la invención puede extrapolarse in vitro utilizando las mismas moléculas en líneas celulares que expresan la diana celular. En vista del perfil de actividad biológica que muestran los compuestos de Fórmula (I) de la presente invención, las composiciones farmacéuticas que los comprenden se pueden utilizar para el tratamiento de enfermedades y trastornos o afecciones asociados con la necesidad de inducir cardioprotección que incluyen ataque cardíaco y lesión por isquemia-reperfusión. En general, la divulgación se refiere a un método potencialmente útil para el tratamiento de enfermedades mediadas por la alteración de la funcionalidad de PTPm (que no forma parte de la invención reivindicada).

La invención se ilustrará ahora con referencia a ejemplos de preparación de compuestos de Fórmula (I) de la invención y evaluación de los efectos terapéuticos/médicos de los compuestos como ejemplos ilustrativos y no limitantes.

Parte experimental

Los compuestos de la invención se prepararon según el esquema mostrado en la Figura 1.

Los compuestos de a-aminonitrilo 3a-g se sintetizaron mediante la reacción de Strecker de N-bencilpiperidona 2 (disponible comercialmente) con anilinas sustituidas de diversas formas en presencia de cianuro de trimetilsililo (TMSCN). El tratamiento posterior con ácido sulfúrico concentrado condujo a los derivados de amida (compuestos 4ag) que después se ciclaron con dimetilacetal dimetilformamida (DMF-DMA) para proporcionar los biciclos (compuestos 5a-g). A continuación, se redujo el núcleo de imidazolinona mediante tratamiento con NaBH4para obtener los compuestos 6a-g. Los compuestos 6a y 6b se sometieron a desbencilación, mediada por hidrógeno y catalizada por Pd/C, para proporcionar los biciclos correspondientes, el compuesto 7a y el compuesto 7b. Estos se utilizaron como intermedios clave para la funcionalización de la posición N8. Específicamente, los derivados de sulfonamida, compuestos 1 y 8-12, se obtuvieron tratando los compuestos 7a-b con cloruros de sulfonilo adecuados. La acetilación (compuesto 13) o benzoilación (compuesto 14) en la posición N8 se realizaron mediante tratamientos convencionales en anhídrido acético y cloruro de benzoilo, respectivamente. Los derivados de urea, compuestos 15-16 y tiourea (compuesto 17) se prepararon a partir del compuesto 7a mediante reacción con isocianatos o isotiocianatos adecuados.

Ejemplo 1: Preparación de los compuestos 5a-g

Procedimiento general para la síntesis de los compuestos 3a-g

A una solución de N1-bencil-piperidona (1,5 g, 7,9 mmoles) en CH<3>COOH glacial (20 ml) a 0 °C, se le añadieron la anilina apropiada (1 eq) y TMSCN (3 eq). La reacción continuó con agitación a temperatura ambiente durante 2,5 h, después la mezcla se alcalinizó (pH > 10) con NaOH 2 N. Se suspendió con CH<2>Cl<2>(20 ml) y la fase orgánica se lavó con agua (2 x 10 mL) y salmuera (1 x 10 mL). Después de secar sobre Na2SO4, el disolvente orgánico se evaporó hasta obtener un residuo sólido, que se trituró con Et<2>O y se filtró para proporcionar los compuestos 3a-g en forma de sólidos de color amarillo pálido, que se utilizaron en las reacciones posteriores sin purificaciones adicionales.

Procedimiento general para la Síntesis de 4a-g

Los compuestos 3a-g (4,8 mmoles) se disolvieron en H<2>SO<4>(96% p/p, 7 mL) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. A continuación, se alcalinizó la reacción (pH > 10) mediante la adición gradual de NH<4>OH (30% p/p), manteniendo la temperatura por debajo de 0°C. La fase acuosa se extrajo con CH<2>Cl<2>(20 mL) y el extracto orgánico se lavó con agua (2 x 10 mL) y salmuera (1 x 10 mL). Después de secar sobre Na2SO4, el disolvente orgánico se evaporó hasta obtener un residuo sólido, que se trituró con Et<2>O y se filtró para proporcionar los compuestos 4a-g en forma de sólidos de color amarillo pálido que se utilizaron en las reacciones posteriores sin purificación adicional.

Procedimiento general para la síntesis de 5a-g

A una solución de los compuestos 4a-g (4,8 mmoles) en MeOH (10 mL) se le añadió DMF-DMA (3 eq.) y la mezcla obtenida se calentó a 55°C durante 16 h. Los disolventes se evaporaron hasta obtener un residuo sólido, el cual se cristalizó con Et<2>O para proporcionar los biciclos, compuestos 5a-g, en forma de sólidos de color blanco.

8-bencil-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (5a).

Rendimiento: 92%; pf: 158-159°C; RMN1H (400 MHz, CDCl<a>) 5 8,24 (s, 1H), 7,48-7,43 (m, 3H), 7,35-7,11 (m, 7H), 3,55 (s, 2H), 3,13-2,95 (m, 2H), 2,79-2,65 (m, 2H) ), 2,15-1,95 (m, 2H), 1,81-1,78 (m, 2H).

8-bencil-1 -(4-fluorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (5b).

Rendimiento: 90%; pf 224-225°C; RMN1H (400 MHz, CDCl<s>)58,19 (s, 1H), 7,40-7,21 (m, 4H), 7,17-6,98 (m, 5H), 3,59 (s, 2H), 3,02-2,98 (m, 2H), 2,72-2,68 (m, 2H), 1,89-1,84 (m, 2H), 1,80-1,77 (m, 2H).

8-bencil-1 -(4-clorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (5c).

Rendimiento: 88%; pf 224-226°C; RMN1H (400 MHz, CDCl<s>)58,23 (s, 1H), 7,47-7,32 (m, 2H), 7,31-7,25 (m, 5H), 7,15-7,12 (m, 2H), 3,58 (s, 2H), 3,14-2,94 (m, 2H)), 2,78-2,71 (m, 2H), 2,10-2,01 (m, 2H), 1,78 (d, J = 13,5 Hz, 2H).

8-bencil-1 -(p-tosil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (5d).

Rendimiento: 88%; pf 221-223°C; RMN1H (400 MHz, CDCl<a>)58,20 (s, 1H), 7,35-7,28 (m, 6H), 7,06 (d, J = 8,1 Hz, 3H), 3,53 (s, 2H), 3-11-2,99 (m, 2H), 2,73- 2,68 (m, 2H), 2,40 (s, 3H), 2,11-1,97 (m, 2H), 1,72-1,69 (m, 2H).

8-bencil-1 -(4-isopropilfenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (5e).

Rendimiento: 82%; pf 139-140°C; RMN1H (400 MHz, CDCl<s>)58,20 (s, 1H), 7,44-7,22 (m, 7H), 7,11-7,01 (d, J = 8,00 Hz, 2H), 3,59 (s, 2H), 3,01-2,97 (m, 3H), 2,80- 2,70 (m, 2H), 2,05-1,98 (m, 2H), 1,78 (d, J = 12,4 Hz, 2H), 1,27 (d, J = 6,9 Hz, 6H).

8-bencil-1 -(4-metoxifenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (5f).

Rendimiento: 92%; pf 200-201°C; RMN1H (400 MHz, CDCl<s>)58,17 (s, 1H), 7,18-7,22 (m, 5H), 7,15 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 6,89 (d, J = 8 Hz, 2H), 3,84 (s, 3H), 3,59 (s, 2H), 3,15-3,01 (m, 2H), 2,78-2,68 (m, 2H), 2,01-1,98 (m, 2H), 1,83 1,78 (m, 2H).

8-bencil-1-(3-(trifluorometil)fenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (5 g). Rendimiento: 26%; pf 154-155°C; RMN1H (400 MHz, CDCl<s>)58,29 (s, 1H), 7,75 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,65 (t, J = 8 Hz, 1H), 7,43-7,27 (m, 7H), 3,62 (s, 2H), 3,11 -3,01 (m, 2H), 2,84-2,74 (m, 2H), 2,19-1,66 (m, 4H).

Ejemplo 2: Preparación de los Compuestos 6a-g.

A una solución de los compuestos 5a-g (3,4 mmoles) en MeOH (15 mL), se le añadió NaBH4(1,25 eq) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Se añadió agua con cuidado, después el volumen de la reacción se redujo a la mitad en un rotavapor y el residuo resultante se extrajo con EtOAc (3 x 15 mL). A continuación, se lavó el extracto orgánico con agua (1 x 10 mL) y salmuera (1 x 10 mL) y se secó sobre Na2SO4. Finalmente se evaporó el disolvente hasta que se obtuvo un residuo sólido, que se cristalizó con MeOH para proporcionar los compuestos 6a-g en forma de sólidos de color blanco.

8-bencil-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (6a).

Rendimiento: 96%; pf 158-160°C; RMN1H (400 MHz, DMSO-d<s>)58,65 (s, 1H), 7,42-7,32 (m, 4H), 7,28-7,23 (m, 3H), 6,86 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 6,76 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 4,57 (s, 2H), 3,52 (s, 2H), 2,83-2,36 (m, 6H), 1,57 (d, J = 13,5 Hz, 2H).

8-bencil-1 -(4-fluorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (6b).

Rendimiento: 84%; pf 214-216°C; RMN1H (400 MHz, CDCl<s>)57,34 - 7,25 (m, 6H), 7,04 - 6,93 (m, 4H), 4,68 (s, 2H), 3,58 (bs, 2H), 2,77 (bs, 4H), 2,34 (bs, 2H), 1,75 (d, J = 14,2 Hz, 2H).

8-bencil-1 -(4-clorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (6c).

Rendimiento 79%; pf 231-232°C; RMN1H (400 MHz, DMSO-d<s>)58,68 (s, 1H), 7,36-7,24 (m, 7H), 6,85 (d, J = 9,1 Hz, 2H), 4,56 (s, 2H), 3,52 (s, 2H), 2,71 (d, J = 7,3 Hz, 4H), 2,53-2,47 (m, 2H), 1,57 (d, J = 13,6 Hz, 2H).

8-bencil-1 -(p-tosil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (6d).

Rendimiento: 85%; pf 226-227°C; RMN1H (400 MHz, DMSO-d6)58,58 (s, 1H), 7,33-7,32 (m, 4H), 7,27- 7,21 (m, 1H), 7,07 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,81 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 4,52 (s, 2H), 3,49 (s, 2H), 2,70 (m, 4H), 2,40-2,30 (m, 2H), 2,21 (s, 3H), 1,56 (d, J = 13,7 Hz, 2H).

8-bencil-1 -(4-isopropilfenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (6e).

Rendimiento: 45%; pf 189-190°C; RMN1H (400 MHz, CDCl<a>)57,36-7,17 (m, 7H), 6,92-6,83 (m, 3H), 4,72 (s, 2H), 3,64-3,51 (m, 2H), 2,89-2,73 (m, 4H), 2,57 (bs, 1H)), 2,17 (s, 2H), 1,74-171 (m, 2H), 1,23 (d, J = 6,9 Hz, 6H).

8-bencil-1 -(4-metoxifenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (6f).

Rendimiento: 83%; pf 205-2072C; RMN1H (400 MHz, DMSO-d<s>)58,49 (s, 1H), 7,32-7,20 (m, 5H), 6,96 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 6,88 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 4,49 (s, 2H), 3,71 (s, 3H), 3,45 (s, 2H), 2,70-2,54 (m, 4H), 2,00-1,95 (m, 2H), 1,62 (d, J = 13,7 Hz, 2H).

8-bencil-1 -(3-(trifluorometil)fenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (6 g).

Rendimiento: 76%; pf 198-200°C; RMN1H (400 MHz, CDCl<a>)57,40-7,26 (m, 6H), 7,12-7,07 (m, 4H), 4,78 (s, 2H), 3,60 (s, 2H), 2,83-2,73 (m, 6H), 1,72 (d, J = 12,6 Hz, 2H).

Ejemplo 3: Preparación de los Compuestos 1,8-12:

Procedimiento General para la Síntesis de 7a-b

Los compuestos 6a y 6b (1 mmol) se disolvieron en MeOH (30 mL) y CH<3>COOH glacial (1 mL), la solución se trató con una cantidad catalítica (0,1 mmoles) de paladio sobre carbono (Pd al 10%) y se colocó en una atmósfera de hidrógeno. Después de 36 h, la mezcla se filtró a través de celite y el producto filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se recogió con agua y se alcalinizó añadiendo una solución acuosa saturada de NaHCO3. La solución se extrajo con CH<2>CL (4 x 10 mL) y los extractos orgánicos se combinaron y secaron sobre Na2SO4. Después de la filtración, el disolvente orgánico se evaporó para proporcionar los compuestos 7a y 7b en forma de sólidos de color blanco.

1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (7 a)

Rendimiento: 86%; pf 172-173°C; RMN1H (400 MHz, DMSO-d<s>)58,78 (s, 1H), 7,29-7,23 (m, 2H), 6,82-6,79 (m, 3H), 4,58 (s, 2H), 3,18-3,16 (m, 2H), 2,95-2,91 m, 2H), 2,34-2,28 (m, 2H), 1,55-1,46 (m, 2H); EM (ESI): [MH]+ = 232,16. 1-(4-fluorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (7b)

Rendimiento: 78%; RMN1H (400 MHz, DMSO-d6)58,72 (s, 1H), 7,09-7,03 (m, 2H), 6,97-6,93 (m, 2H), 5,4 (bs, 1H), 4,55 (s, 2H), 3,26-3,19 (m, 2H), 2,97-2,93 m, 2H), 2,38-2,30 (m, 2H), 1,60-1,56 (m, 2H). EM (ESI): [<m h>]+ = 250,39.

Procedimiento para la síntesis de 1, 8-12

A una solución de los compuestos 7a y 7b (0,4 mmoles) en THF (5 mL), se le añadieron DIPEA (1 eq) y el cloruro de sulfonilo apropiado (1,2 eq). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, después se diluyó con EtOAc y la fase orgánica se lavó con agua (1 x 5 mL) y salmuera (1 x 5 mL). El extracto orgánico se secó sobre Na2SO4y, después de la filtración, el disolvente se evaporó para proporcionar un residuo sólido que se purificó mediante una columna cromatográfica (EtOAc al 100%) para proporcionar los derivados finales 1,8-12 en forma de sólidos de color blanco.

1 -fenil-8-tosil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (1).

Rendimiento: 72%; pf 250-251°C; RMN1H (400 MHz, DMSO-d6)58,78 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,47 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7,23 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 6,80-6,71 (m, 3H), 4,56 (s, 2H), 3,65 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 3,04-2,99 (m, 2H), 2,52 2,35 (m, 5H), 1,68 (d, J = 13,8 Hz, 2H).

1 -fenil-8-mesil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (8).

Rendimiento: 87%; pf 248-249°C; RMN1H (400 MHz, DMSO-d6)58,90 (s, 1H), 7,25 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 6,83-6,78 (m, 3H), 4,61 (s, 2H), 3,59-3,55 (m, 2H), 3,44-3,37 (m, 2H), 2,92 (s, 3H), 2,58-2,51 (m, 2H), 1,74 (d, J = 13,9 Hz, 2H). 8-((4-fluorofenil)sulfonil)-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (9).

Rendimiento: 78%; pf 251-252°C;1RMN H (400 MHz, DMSO-d6)58,77 (s, 1H), 7,89-7,82 (m, 2H), 7,51 (t, J = 8,8 Hz, 2H), 7,23 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 6,81 -6,70 (m, 3H) , 4,56 (s, 2H), 3,68 (dd, J = 11,4, 4,8 Hz, 2H), 3,10-3,04 (m, 2H), 2,49 2,48 (m, 2H), 1,69 (d, J = 13,8 Hz, 2H ).

8-((5-clorotiofen-2-il)sulfonil)-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (10).

Rendimiento: 71%; pf 258-259°C; RMN1H (400 MHz, DMSO-d6)58,82 (s, 1H), 7,61 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 7,25 (dd, J = 8,6, 7,4 Hz, 2H), 6,81-6,73 (m, 3H), 4,58 (s, 2H), 3,66 (dd, J = 11,4, 4,9 Hz, 2H), 3,21 (dd, J = 12,2, 9,3 Hz, 2H), 2,55-2,49 (m, 2H), 1,74 (d, J = 14,1 Hz, 2H).

1 -(4-fluorofenil)-8-((4-fluorofenil)sulfonil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (11).

Rendimiento: 51%; pf 259-260°C; RMN1H (400 MHz, DMSO-d6)58,74 (s, 1H), 7,87-7,82 (m, 2H), 7,52-7,47 (m, 2H), 7,12-7,08 (m, 2H), 6,83-6,80 (m, 2H), 4,52 (s, 2H)), 3,61 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 3,05 (td, J = 12,2, 2,9 Hz, 2H), 2,21 (td, J = 13,5, 5,2 Hz, 2H), 1,72 (d, J = 14,0 Hz, 2H).

8-((5-clorotiofen-2-il)sulfonil)-1 -(4-fluorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (12).

Rendimiento: 75%; pf 244-2452C; RMN 1H (400 MHz, DMSO-d<s>) 58,79 (s, 1H), 7,60 (dd, J = 10,4, 4,1 Hz, 1H), 7,41 (dd, J = 8,1,4,1 Hz, 1H), 7,15-7,08 (m, 2H), 6,87-6,81 (m, 2H), 4,55 (s, 2H), 3,60 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 3,20 (td, J = 12,1, 2,9 Hz, 2H), 2,27 (td, J = 13,5, 5,2 Hz, 2H), 1,77 (d, J = 14,1 Hz, 2H).

Ejemplo 4: Preparación del compuesto 8-acet¡l-1-fenil-1,3,8-tr¡azaesp¡ro[4,5]decan-4-ona (13)

A una solución del compuesto 7a (0,4 mmoles) en CH<2>Cl<2>(25 mL), se le añadieron TEA (1 eq) y AC<2>O (1 eq) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. Se diluyó con CH<2>Cl<2>(30 mL) y la fase orgánica se lavó con HCl 1 M (1 x 10 mL), agua (1 x 10 mL) y salmuera (1 x 10 mL). Se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró el disolvente. El residuo se purificó mediante una columna cromatográfica (EtOAc al 100%) para proporcionar el compuesto 13 en forma de un sólido de coloro blanco. Rendimiento: 93%; pf 197-198°C; RMN 1H (400 MHz, CD<3>DO) 5 7,26-7,22 (m, 2H), 6,85-6,81 (m, 3H), 4,88 (s, 2H), 4,41-4,36 (m, 1H), 3,89-3,86 (m, 2H), 3,45 (td, J = 12,8, 3,6 Hz, 1H), 2,54-2,39 (m, 2H), 2,14 (s, 3H), 1,83-1,78 (m, 2H).

Ejemplo 5: Preparación del compuesto 8-benzoil-1-fenil-1,3,8-tr¡azaesp¡ro[4,5]decan-4-ona (14)

A una solución del compuesto 7a (0,4 mmoles) en CH<2>Cl<2>(10 mL), se le añadieron TEA (1 eq) y cloruro de benzoilo (1 eq), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla se diluyó con CH<2>Cl<2>(30 mL) y se lavó con HCl 1 M (1 x 10 mL), agua (1 x 10 mL) y salmuera (1 x 10 mL). Se diluyó con CH<2>Cl<2>(30 mL) y la fase orgánica se lavó con HCl 1 M (1 x 10 mL), agua (1 x 10 mL) y salmuera (1 x 10 mL). Se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró el disolvente. El residuo se purificó mediante una columna cromatográfica (EtOAc al 100%) para proporcionar el compuesto 14 en forma de un sólido de color blanco.

Rendimiento: 80%; pf 215-217°C; RMN 1H (400 MHz, CDsOD) 57,49-7,45 (m, 5H), 7,31-7,26 (m, 2H), 6,89-6,86 (m, 3H), 4,70 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 4,52 ( d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,87 (t, J = 11,8 Hz, 1H), 3,67 (t, J = 11,4 Hz, 2H), 2,61 (td, J = 13,4, 5,2 Hz, 1H), 2,39 ( td, J = 13,5, 5,0 Hz, 1H), 1,86 (d, J = 13,8 Hz, 1H), 1,68 (d, J = 14,1 Hz, 1H).

Ejemplo 6: Preparación de los compuestos 15-17

Preparación de Compuestos 15-16.

A una solución del compuesto 7a (0,4 mmoles) en CH<2>Cl<2>(20 mL), se le añadió el isocianato apropiado (1 eq) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. El disolvente orgánico se evaporó hasta que se obtuvo un residuo sólido, que se repartió entre agua (10 mL) y EtOAc (10 mL). La fase acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc (2 x 10 mL) y los extractos combinados se secaron sobre Na2SO4. Después de la filtración, se evaporó el disolvente y el residuo se purificó mediante una columna cromatográfica (EtOAc) para proporcionar los compuestos 15 y 16 en forma de sólidos de color blanco.

4-oxo-N-1 -difenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decano-8-carboxamida (15).

Rendimiento: 72%; pf 250-251°C; RMN 1H (400 MHz, DMSO-ds) 58,79-8,65 (m, 2H), 7,45-7,44 (m, 2H), 7,24-7,15 (m, 4H), 6,94-6,92 (m, 1H), 6,70-6,69 (m, 2H), 4,59 (s, 2H), 4,03 (sb, 2H), 3,48 (sb, 2H), 2,47 (sb, 3H), 1,60 (d, J = 12,5 Hz, 2H).

N-ciclohexil-4-oxo-1-fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decano-8-carboxamida (16). Rendimiento: 65%, pf: 253-254°C; RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 58,74 (s, 1H), 7,13 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 6,72-6,60 (m, 3H), 6,33 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,57 (s, 2H), 3,88 (dd, J = 12,8, 3,9 Hz, 2H), 3,49-3,47 (m, 1H), 2,43-2,37 (m, 4H), 1,78-1,67 (m, 4H), 1,58-1,47 (m, 2H),

1,44 -1, (m, 6H).

Preparación del compuesto 17

A una solución del compuesto 7a (0,4 mmoles) en 1,2-dicloroetano (20 mL), se le añadieron TEA (1 eq) e isotiocianato (1 eq), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. Se diluyó con CH<2>Cl<2>y la fase orgánica se lavó con HCl 2 N, agua y salmuera. Después de secar sobre Na2SO4, el disolvente orgánico se filtró y se evaporó para obtener un residuo que se purificó mediante una columna cromatográfica (éter de petróleo/EtOAc 1:2) hasta que se obtuvo el compuesto 17 en forma de un sólido de color blanco.

N-ciclohexil-4-oxo-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decano-8-carbotioamida (17)

Rendimiento: 72%; pf: 247-248°C; RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 58,81 (s, 1H), 7,36 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,15-7,11 (m, 2H), 6,70 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,58 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 4,58-4,49 (m, 4H), 4,28 (bs, 1H), 3,62 (dd, J = 12,7, 10,2 Hz, 2H), 2,53-3,50 (m, 2H), 1,87-1,52 (m, 6H) ), 1,29-0,99 (m, 6H).

Ejemplo 7: Evaluación de la inhibición de la apertura de PTPm in vitro

El compuesto 1-fenil-8-tosil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (Compuesto 1) y los compuestos de fórmula (I) son capaces de inhibir la apertura de PTPm in vitro. Para determinar el efecto de la 1 -fenil-8-tosil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 1) sobre la apertura de PTPm inducida por Ca<2+>, se realizó un ensayo de cobalto-calceína en células HeLa (M. Bonora et al. Nat Protoc 2016, 11, 1067). La apertura de PTPm se estimuló mediante la adición del ionóforo ionomicina y se comparó la cinética resultante. Como se muestra en la Figura 2A, el tratamiento previo con el compuesto 1 (1 pM) dio como resultado aproximadamente 50% de desensibilización de la apertura de PTPm, según lo evaluado por la pendiente cinética después de la estimulación, que fue significativamente menor en comparación con las células no tratadas (Figura 2B). Además, se demostró que el compuesto 1 era capaz de inhibir la apertura de PTPm de forma similar a la Oligomicina (C. Chinopoulos et al. Front Oncol 2013, 3, 25; J. Symersky et al. Proc Natl Acad Sci U S A 2012, 109, 13961; L. Blanchet et al. PLoS One 2014, 9, e114090), pero a una concentración diez veces menor. Estos datos mostraron que el compuesto 1 es capaz de inhibir la apertura de PTPm de forma más eficaz que el inhibidor conocido Oligomicina. Para estudiar la eficacia de la inhibición de los compuestos de Fórmula (I) en términos de apertura de PTPm, se utilizó el ensayo de dilatación mitocondrial descrito anteriormente (F. Di Lisa et al. escrutinio de múltiples compuestos J Biol Chem 2001,276, 2571), siendo un protocolo más rápido que el correspondiente análisis microscópico para el escrutinio de múltiples compuestos. Todos los compuestos preparados anteriormente resultaron ser capaces de desensibilizar la apertura de PTPm.

Ejemplo 8: Evaluación de efectos de los compuestos.

Para demostrar la especificidad en la medición de la apertura de PTPm inducida por Ca<2+>, los autores de la presente invención añadieron dos controles positivos, tal como el uso de ciclosporina A (CsA) y Rojo Rutenio (RR): el primero es un inhibidor conocido de PTPm, mientras que el segundo es un bloqueador de la acumulación de calcio mitocondrial. Se verificaron la pureza (Figura 3A) y la funcionalidad de las mitocondrias aisladas de hígado de ratón, y después se estimularon con Ca<2+>; la disminución de la absorbancia a 540 nm, indicativa de dilatación mitocondrial, se controló durante 10 minutos. En estas condiciones, las mitocondrias tratadas con el vehículo mostraron una dilatación constante del orgánulo, mientras que este proceso se evitó mediante el tratamiento previo con CsA y RR (Figura 3B, C). Como se muestra en la Figura 3B, la mayoría de los compuestos de la invención demostraron una buena potencia de inhibición en comparación con la muestra de control de mitocondrias (barra de color negro). En particular, los compuestos 5c, 6g y 10 demostraron tener un rendimiento significativamente mayor que el compuesto 1, ya que devolvieron las mitocondrias a un estado fisiológico (panel B, barra de color negro), desde el punto de vista estructural y funcional.

Ejemplo 9: Evaluación de efectos de los compuestos.

La 1-fenil-8-tosil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 1) se acumuló en las mitocondrias y se unió a la subunidad C del complejo F1/FO-ATP sintasa. Para controlar y caracterizar mejor la actividad biológica del compuesto 1, se estudió su localización subcelular con mayor interés para el compartimento mitocondrial, hipotético sitio de acción. Se realizó fraccionamiento subcelular (JM Suski et al. Nat Protoc 2014, 9, 312) en un intento de aislar fracciones puras de mitocondrias, citosol y retículo endoplásmico a partir de células pretratadas o no con el compuesto 1. Se sometieron muestras representativas de cada compartimento subcelular a análisis HPLC-HRMS para la detección del compuesto. Como se muestra en la Figura 4, el pretratamiento con el compuesto 1 condujo a una acumulación selectiva del compuesto en las mitocondrias sin rastros detectables en las otras fracciones subcelulares. Además, para resaltar la diana intracelular del compuesto 1, se llevó a cabo un Ensayo de Cambio Térmico Celular (CETSA en sus siglas en inglés) (R. Jafari et al. Nat Protoc 2014, 9, 2100; D. Martínez Molina et al. Science 2013, 341,84), un protocolo basado en la estabilización térmica inducida por el ligando en la proteína diana, en este caso la subunidad C de la F1/FO-ATP sintasa. Dado que los cambios térmicos a altas concentraciones de ligando se correlacionaban con valores de CI<50>promedio y afinidades medidas por otros métodos (O. Fedorov et al. Proc Natl Acad Sci U S A 2007, 104, 20523; E. Wahlberg et al. Nat Biotechnol 2012, 30, 283), fue posible establecer la unión selectiva del compuesto 1 a la subunidad C de la F1/FO-ATP sintasa entre 53 y 65°C. En conjunto, estos datos confirmaron la capacidad del compuesto 1 para entrar selectivamente en las mitocondrias y unirse a la subunidad C para ejercer la inhibición de PTPm.

Ejemplo 10: Perfil de citotoxicidad de las moléculas 1 ,5c, 6g y 10

Los compuestos 5c, 6g y 10 resultaron ser muy potentes para inhibir PTPm en las pruebas in vitro. Para identificar posibles efectos secundarios en el uso de estos compuestos en células vivas que pudieran excluir su futuro desarrollo en terapia, y dado el papel crucial de la subunidad C de la ATP sintasa en la producción de energía, se evaluaron dos parámetros importantes, tales como la viabilidad celular y el contenido de ATP mitocondrial, en condiciones basales y después del estímulo dependiente de Ca<2+>(Figura 5A-C). El tratamiento de las células con concentraciones micromolares de 5c, 6g y 10 durante 24 h y 48 h no indujo una reducción significativa del bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio (MTT) en comparación con el control. Ninguna de las concentraciones consideradas resultó tóxica in vitro, aunque se percibió algún efecto negativo a las 72 h (Figura 5C).

El compuesto 1, al igual que la Oligomicina, inhibió significativamente el flujo de protones y la síntesis de ATP, según lo establecido por el ensayo de luciferina-luciferasa (28683062). Sorprendentemente, 5c, 6g y 10 dieron resultados positivos ya que, al unirse a la subunidad C e inhibir PTPm, no redujeron los niveles de ATP in vitro.

Se sabe que la apertura de PTPm desempeña un papel clave en la liberación de citocromo C (Cyt.C) de las mitocondrias al citosol (15800627). Por este motivo, también se investigó la capacidad de 5c, 6g y 10 para contrarrestar la liberación de esta proteína desde las crestas mitocondriales. La Figura 5D muestra la acción protectora de compuestos seleccionados del estudio ya que, en condiciones de estrés dependientes de Ca2+, impiden la liberación de Cyt.C de las mitocondrias y, por tanto, la activación de la cascada apoptótica.

Ejemplo 11: Efecto cardioprotector del compuesto 10 en corazón aislado de rata

Considerando el potencial de los inhibidores reivindicados en el presente documento con relación a: i) la capacidad de desensibilizar la apertura de PTPm; ii) la capacidad para proteger contra la muerte celular mediante la inhibición de la liberación de Cyt.C; iii) la capacidad para preservar la viabilidad celular, y iv) el contenido de ATP mitocondrial, se estudiaron los efectos del compuesto 10 en un modelo animal de isquemia-reperfusión cardíaca. Se aislaron corazones de rata latiendo y se insertaron en un sistema Langendorff, bajo perfusión continua con tampón Krebs Henseleit (KHB) a 37 °C, en presencia de oxígeno. El protocolo ex vivo incluyó 20 minutos de estabilización cardíaca, después se detuvo progresivamente la perfusión retrógrada para inducir 30 minutos de isquemia general seguida de 1 hora de reperfusión (Figura 6A). Como se indica en el panel A, el compuesto 10 se administró en la fase de reperfusión durante los primeros 10 minutos de reperfusión. La dosis del compuesto 10 se eligió basándose en experimentos previos destinados a escrutar y determinar la dosis más alta y no citotóxica para infundir en el corazón. En corazones aislados, la perfusión a volumen constante del compuesto 10 a 10 pM dio como resultado una disminución de la presión de perfusión coronaria (PPC) y de la presión diastólica (PD) con un aumento de la presión diastólica del ventrículo izquierdo (PDVI), que resumió una reducción de la rigidez muscular, la vasoconstricción y el deterioro del rendimiento miocárdico (Figura 6B-D). Al final del procedimiento, los corazones también se analizaron para determinar la muerte celular mediante el ensayo de marcaje de extremo mellado dUTP con desoxinucleotidil transferasa terminal (TUNEL). En el corazón de rata sometido a lesión por reperfusión, 64% de los cardiomiocitos resultaron positivos para TUNEL y por lo tanto se clasificaron como apoptóticos, porcentaje que se redujo significativamente en presencia del compuesto 10 a 10 pM) (Figura 6E).

Claims

REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de 1,3,8-triazaespiro de Fórmula (I):

en donde A es -CH<2>, -SO<2>-, -NH-CO-, -NH-CS- o -CO-; la línea discontinua representa un enlace sencillo o doble; R<1>es un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en alquilo (C<1>-C<3>), fenilo, tienilo y ciclohexilo, estando dicho sustituyente opcionalmente sustituido con halógeno o alquilo (C<1>-C<3>); y R<2>es un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en H, alquilo (C<1>-C<3>), alcoxi (C<1>-C<3>), -CF<3>y halógeno; y en donde cuando la línea discontinua es un doble enlace, A es -CH<2>- y R<1>es fenilo, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables para su uso en el tratamiento de enfermedades con lesión por reperfusión.
2. El compuesto 1,3,8-triazaespiro para su uso según la reivindicación 1, en donde el compuesto es un inhibidor selectivo de la subunidad C del complejo F<1>/F<0>-ATP sintasa y un modulador de la actividad de los poros de transición de permeabilidad mitocondrial en células y tejidos de mamíferos, en el tratamiento de enfermedades con lesión por reperfusión.
3. El compuesto de 1,3,8-triazaespiro para su uso según la reivindicación 1 o 2, en donde las enfermedades con lesión por reperfusión son enfermedades cardíacas, neurológicas y nefrológicas.
4. El compuesto de 1,3,8-triazaespiro para su uso según la reivindicación 1 o 2, en donde dichas enfermedades con lesión por reperfusión son enfermedades cardíacas y nefrológicas derivadas de eventos isquémicos relacionados con ataques cardíacos y accidentes cerebrovasculares.
5. El compuesto de 1,3,8-triazaespiro para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde A es -SO<2>-, la línea discontinua es un enlace sencillo, R<1>se selecciona del grupo que consiste en fenilo opcionalmente sustituido con halógeno o alquilo (C<1>-C<3>), tienilo opcionalmente sustituido con halógeno o alquilo (C<1>-C<3>), y R<2>es hidrógeno o halógeno.
6. El compuesto de 1,3,8-triazaespiro para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde A es -CO-, la línea discontinua es un enlace sencillo, R<1>se selecciona del grupo que consiste en fenilo y alquilo (C<1>-C<3>), y R<2>es hidrógeno.
7. El compuesto de 1,3,8-triazaespiro para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde A es -NH-CO- o -NHCS-, la línea discontinua es un enlace sencillo, R<1>se selecciona del grupo que consiste en fenilo y ciclohexilo, y R<2>es hidrógeno.
8. El compuesto de 1,3,8-triazaespiro para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde A es -CH<2>-, la línea discontinua es un enlace sencillo o doble, R<1>es fenilo y R<2>es hidrógeno, halógeno, alquilo (C<1>-C<3>), alcoxi (C<1>-C<3>) o -CF<3>.
9. El compuesto de 1,3,8-triazaespiro para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1-4 seleccionado del grupo que consiste en: 8-bencil-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5a), 8-bencil-1 -(4-fluorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5b), 8-bencil-1-(4-clorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2en-4-ona (compuesto 5c), 8-bencil-1 -(p-tosil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5d), 8-bencil-1 -(4-isopropilfenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5e), 8-bencil-1 -(4-metoxifenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5f), 8-bencil-1-(3-(trifluorometil)fenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5 g), 8-bencil-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6a), 8-bencil-1 -(4-fluorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6b), 8-bencil-1-(4-clorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6c), 8-bencil-1 -(p-tosil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6d), 8-bencil-1 -(4-isopropilfenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6e), 8-bencil-1 -(4-metoxifenil)-1,3,8 triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6f), 8-bencil-1-(3-(trifluorometil)fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6 g), 1 -fenil-8-tosil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 1), 1-fenil-8-mesil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 8), 8-((4-fluorofenil)sulfonil)-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 9), 8-((5-clorotiofen-2-il)sulfonil)-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 10), 1 -(4-fluorofenil)-8-((4-fluorofenil)sulfonil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 11), 8-((5-clorotiofen-2-il)sulfonil)-1 -(4-fluorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 12), 8-acetil-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 13), 8-benzoil-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 14), 4-oxo-N-1-difenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decano-8-carboxamida (compuesto 15), N-ciclohexil-4-oxo-1-fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decano-8-carboxamida (compuesto 16), y N-ciclohexil-4-oxo-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decano-8-carbotioamida (compuesto 17).
10. Un compuesto de 1,3,8-triazaespiro de Fórmula (I):

en donde A es -CH<2>, -SO<2>-, -NH-CO-, -NH-CS- o -CO-; la línea discontinua representa un enlace sencillo o doble; R<1>es un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en alquilo (C<1>-C<3>), fenilo, tienilo y ciclohexilo, estando dicho sustituyente opcionalmente sustituido con halógeno o alquilo (C<1>-C<3>); y R<2>es un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en H, alquilo (C<1>-C<3>), alcoxi (C<1>-C<3>), -CF<3>y halógeno; y en donde cuando A es -CH<2>, R<i>es fenilo y R<2>es isopropilo, o cuando A es -CH<2>, R<1>es fenilo y R<2>es metoxi, la línea discontinua es un doble enlace para su uso como medicamento.
11. El compuesto de 1,3,8-triazaespiro para su uso según la reivindicación 10, seleccionado del grupo que consiste en: 8-bencil-1-(4-isopropilfenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5e), 8-bencil-1-(4-metoxifenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5f), 8-bencil-1-(4-isopropilfenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6e), 8-bencil-1-(4-metoxifenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6f), 1-fenil-8-tosil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 1), 1 -fenil-8-mesil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 8), 8-((4-fluorofenil)sulfonil)-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 9), 8-((5-clorotiofen-2-il)sulfonil)-1-fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 10), 1 -(4-fluorofenil)-8-((4-fluorofenil)sulfonil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 11), 8-((5-clorotiofen-2-il)sulfonil)-1-(4-fluorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 12), 8-acetil-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 13), 8-benzoil-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 14), 4-oxo-N-1-difenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decano-8-carboxamida (compuesto 15), N-ciclohexil-4-oxo-1-fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decano-8-carboxamida (compuesto 16), y N-ciclohexil-4-oxo-1-fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decano-8-carbotioamida (compuesto 17).
12. Un compuesto de 1,3,8-triazaespiro de Fórmula (I):

en donde A es -CH<2>-, -SO<2>-, -NH-CO- o -NH-CS-; la línea discontinua representa un enlace sencillo o doble; R<1>es un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en alquilo (C<1>-C<3>), fenilo, tienilo y ciclohexilo, estando dicho sustituyente opcionalmente sustituido con halógeno o alquilo (C<1>-C<3>); y R<2>es un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en H, alquilo (C<1>-C<3>), alcoxi (C<1>-C<3>) y halógeno; y en donde cuando A es -CH<2>- y la línea discontinua es un enlace sencillo, R<1>es fenilo y R<2>es isopropilo, cuando A es -CH<2>- y la línea discontinua es un doble enlace, R<1>es fenilo y R<2>es isopropilo o metoxi, y cuando A es -SO<2>-, R<1>es metilo y R<2>es hidrógeno, o R<1>es fenilo o tienilo sustituido con halógeno y R<2>es hidrógeno o halógeno.
13. El compuesto según la reivindicación 12, seleccionado del grupo que consiste en 8-bencil-1 -(4-isopropilfenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5e), 8-bencil-1 -(4-metoxifenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]dec-2-en-4-ona (compuesto 5f), 8-bencil-1 -(4-isopropilfenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6e), 8-bencil-1 -(4-metoxifenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 6f), 1 -fenil-8-mesil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 8), 1 -(4-fluorofenil)-8-((4-fluorofenil)sulfonil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 11), 8-((5-clorotiofen-2-il)sulfonil)-1-(4-fluorofenil)-1,3,8-triazaespiro[4,5]decan-4-ona (compuesto 12), 4-oxo-N-1 -difenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decano-8-carboxamida (compuesto 15), N-ciclohexil-4-oxo-1-fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decano-8-carboxamida (compuesto 16), y N-ciclohexil-4-oxo-1 -fenil-1,3,8-triazaespiro[4,5]decano-8-carbotioamida (compuesto 17).
14. El compuesto para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1-4 o la reivindicación 10, en donde A es -SO<2>- o -CH<2>-.
15. El compuesto para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1-4 o la reivindicación 10, en donde la sal farmacéuticamente aceptable se selecciona del grupo que consiste en hidrocloruro, hidrobromuro, sulfato, fosfato, acetato, succinato, oxalato, ascorbato, tartrato, gluconato, benzoato, maleato, fumarato y estearato.
16. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 10-11 y excipientes farmacológicamente aceptables, para el tratamiento de enfermedades y trastornos o afecciones asociados con la necesidad de inducir cardioprotección, en donde las enfermedades y trastornos o afecciones asociados con la necesidad de inducir cardioprotección incluyen ataque cardíaco y lesión por isquemia-reperfusión.