ES2947685T3 - Aplicación del nuevo inhibidor de la tirosinacinasa, anlotinib, en osteosarcoma y condrosarcoma - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a un nuevo uso de anlotinib, pertenece al campo técnico de los fármacos y se refiere en particular a anlotinib que inhibe el crecimiento y la metástasis de osteosarcoma y condrosarcoma. Se ha descubierto por primera vez que anlotinib puede inhibir el crecimiento y la metástasis del osteosarcoma y el condrosarcoma. Anlotinib puede inhibir significativamente el crecimiento de las líneas celulares de osteosarcoma 143B, U2OS, MG63 y SJSA, inducir la detención del ciclo en dichas líneas celulares y también puede inhibir la migración e invasión de líneas celulares de osteosarcoma. También se ha descubierto por primera vez que anlotinib puede potenciar el efecto letal del fármaco de quimioterapia cisplatino en las células del osteosarcoma. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Aplicación del nuevo inhibidor de la tirosinacinasa, anlotinib, en osteosarcoma y condrosarcoma

Campo técnico

La presente descripción se refiere al campo técnico de los fármacos, específicamente, al uso del anlotinib en el osteosarcoma y el condrosarcoma.

Antecedentes

El anlotinib es un inhibidor multidiana de la tirosinacinasa de molécula pequeña desarrollado en China y con derechos de propiedad intelectual independientes, y el número de publicación de la patente del compuesto del mismo es WO2008/112407. La aprobación clínica se obtuvo en 2011, el ensayo clínico de fase I se finalizó en 2013 y actualmente se están realizando ensayos clínicos con anlotinib en distintos cánceres, como el cáncer de pulmón no microcítico, el sarcoma de tejidos blandos, el cáncer gástrico, el cáncer colorrectal, el carcinoma medular de tiroides, el carcinoma de tiroides diferenciado, el carcinoma esofágico de células escamosas y similares.

El documento de patente (publicación internacional n.°: WO2008/112407 y patente china n°: ZL200880007358.X) describe la actividad inhibidora del anlotinib sobre el cáncer de colon, el cáncer de pulmón no microcítico, el cáncer de hígado y el cáncer de mama. Sin embargo, el uso del anlotinib en el osteosarcoma no se ha descrito en la actualidad.

Las publicaciones de Luetke, Anja et al. (Cáncer Treatment Reviews, vol. 40, n ° 4, páginas 523-532); Isakoff, Michael S. et al. (Journal of Clinical Oncology, vol. 33, páginas 3029-3035) y Bishop, Michael W. et al. (Current Opinión in Pediatrics, vol. 28, n.° 1, páginas 26-33) describen y revisan las opciones de tratamiento para el osteosarcoma que no incluyen el compuesto anlotinib. Bovee, J. V. et al. (The Lancet Oncology, Elsevier, Amsterdam, Países Bajos, vol. 6, n ° 8, páginas 599-607) revisa las pocas opciones de tratamiento disponibles para el condrosarcoma (básicamente cirugía) y señala posibles tratamientos específicos prometedores.

Compendio

El objeto de la invención es el expuesto en las reivindicaciones adjuntas.

Un aspecto de la invención se refiere al anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en la inhibición del osteosarcoma y/o el condrosarcoma en un paciente que necesita tratamiento.

Otro aspecto de la invención se refiere al anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso como potenciador del cisplatino en la inhibición del osteosarcoma y/o el condrosarcoma en un paciente que necesita tratamiento.

El objetivo de la presente descripción es proporcionar un nuevo uso del anlotinib que aborde los defectos de la técnica anterior.

Para lograr el objetivo anterior, la solución técnica adoptada por la presente descripción es el uso del anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la preparación de un fármaco para inhibir el osteosarcoma y/o el condrosarcoma.

Se proporciona el uso del anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como potenciador del cisplatino en la inhibición del osteosarcoma y/o el condrosarcoma.

Además, la sal farmacéuticamente aceptable del anlotinib es clorhidrato de anlotinib.

Además, el fármaco inhibe el crecimiento y/o la metástasis del osteosarcoma y/o el condrosarcoma. Aún más, el fármaco inhibe la metástasis pulmonar del osteosarcoma y/o el condrosarcoma.

Además, el fármaco inhibe la recidiva del osteosarcoma y/o el condrosarcoma.

Además, la metástasis del osteosarcoma y/o el condrosarcoma es una migración y/o una invasión.

Además, el osteosarcoma es osteosarcoma primario y/o un osteosarcoma secundario.

Además, el osteosarcoma es un osteosarcoma del tipo osteoblástico y/o del tipo osteolítico.

Además, el osteosarcoma es un osteosarcoma osteoblástico, un osteosarcoma condroblástico y/o un osteosarcoma fibroblástico. Aún más, el osteosarcoma es un osteosarcoma condroblástico.

Además, el condrosarcoma es un condrosarcoma desdiferenciado y/o un condrosarcoma bien diferenciado.

Además, el osteosarcoma es un osteosarcoma avanzado y/o metastásico y el condrosarcoma es un condrosarcoma avanzado y/o metastásico.

Además, un sujeto con osteosarcoma y/o condrosarcoma ha sido tratado con quimioterapia y/o radioterapia. Aún más, el quimioterápico usado en la quimioterapia recibida por el sujeto con osteosarcoma y/o condrosarcoma incluye metotrexato, ifosfamida, cisplatino y doxorrubicina. Aún más, la enfermedad progresa después de que el sujeto con osteosarcoma y/o condrosarcoma haya sido tratado con quimioterapia y/o radioterapia.

Además, el fármaco comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

Los métodos de tratamiento citados en los siguientes párrafos en el contexto de la invención deben entenderse como pertenecientes a la sustancia o sustancias citadas para uso en métodos para tratar las enfermedades/dolencias citadas.

Por otro lado, la presente descripción proporciona un método para tratar el osteosarcoma y/o el condrosarcoma, y el método incluye administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un paciente que necesita tratamiento.

Además, la presente descripción proporciona un método para inhibir el crecimiento y/o la metástasis del osteosarcoma y/o el condrosarcoma, y el método incluye administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un paciente que necesita tratamiento. Aún más, la presente descripción proporciona un método para inhibir la metástasis pulmonar del osteosarcoma y/o el condrosarcoma.

Además, la presente descripción proporciona un método para inhibir la migración y/o la invasión del osteosarcoma y/o el condrosarcoma, y el método incluye administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un paciente que necesita tratamiento.

Además, la presente descripción proporciona un método para tratar el osteosarcoma primario y/o el osteosarcoma secundario, y el método incluye administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un paciente que necesita tratamiento.

Además, la presente descripción proporciona un método para tratar el osteosarcoma osteogénico y/o el osteosarcoma osteolítico, y el método incluye administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un paciente que necesita tratamiento.

Además, la presente descripción proporciona un método para tratar el osteosarcoma osteoblástico, el osteosarcoma condroblástico y/o el osteosarcoma fibroblástico, y el método incluye administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un paciente que necesita tratamiento.

Además, la presente descripción proporciona un método para tratar el condrosarcoma desdiferenciado y/o el condrosarcoma bien diferenciado, y el método incluye administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un paciente que necesita tratamiento.

Además, la presente descripción proporciona un método para tratar el osteosarcoma y/o el condrosarcoma avanzado y/o metastásico, y el método incluye administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un paciente que necesita tratamiento.

Además, la presente descripción proporciona un método para prevenir y/o tratar la recidiva del osteosarcoma y/o el condrosarcoma, y el método incluye administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un paciente que necesita tratamiento.

Además, la presente descripción proporciona un método para tratar a un sujeto con osteosarcoma y/o condrosarcoma que ha sido tratado con quimioterapia y/o radioterapia. Aún más, el quimioterápico utilizado en la quimioterapia recibida por el sujeto con osteosarcoma y/o condrosarcoma incluye metotrexato, ifosfamida, cisplatino y doxorrubicina. Aún más, la enfermedad progresa después de que el sujeto con osteosarcoma y/o condrosarcoma haya sido tratado con quimioterapia y/o radioterapia.

El anlotinib puede administrarse en forma de una base libre del mismo, o en forma de una sal o un hidrato del mismo.

Por ejemplo, una sal farmacéuticamente aceptable de anlotinib está dentro del alcance de la presente descripción y dicha sal puede producirse a partir de diferentes ácidos orgánicos y ácidos inorgánicos según métodos bien conocidos en la técnica.

En algunas realizaciones específicas de la presente descripción, el anlotinib se administra en forma de la sal clorhidrato del mismo. En algunas realizaciones específicas, el anlotinib se administra en forma de la sal monoclorhidrato o diclorhidrato del mismo. En algunas realizaciones específicas, el anlotinib se administra en una forma cristalina de la sal clorhidrato del mismo. En algunas realizaciones específicas, el anlotinib se administra en una forma cristalina de la sal diclorhidrato de anlotinib.

El anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo puede administrarse por una diversidad de vías y dichas vías incluyen, pero no se limitan a: administración por vía oral, administración por vía parenteral, administración por vía intraperitoneal, administración por vía intravenosa, administración por vía intraarterial, administración por vía transdérmica, administración por vía sublingual, administración por vía intramuscular, administración por vía rectal, administración por vía transbucal, administración por vía intranasal, administración por inhalación, administración por vía vaginal, administración por vía intraocular, administración por vía tópica, administración por vía subcutánea, administración por vía intraadiposa, administración por vía intraarticular y administración por vía intratecal. En algunas realizaciones específicas, el fármaco se administra por vía oral y las formas de dosificación específicas incluyen, pero no se limitan a comprimidos, cápsulas, polvo, gránulos, píldoras, pastas, polvos y similares, preferiblemente comprimidos y cápsulas. Entre estos, los comprimidos pueden ser comprimidos comunes, comprimidos dispersables, comprimidos efervescentes, comprimidos de liberación sostenida, comprimidos de liberación controlada o comprimidos con recubrimiento entérico, y las cápsulas pueden ser cápsulas comunes, cápsulas de liberación sostenida, cápsulas de liberación controlada o cápsulas con recubrimiento entérico. La preparación oral puede prepararse por un método convencional utilizando un vehículo farmacéuticamente aceptable bien conocido en la técnica. El vehículo farmacéuticamente aceptable incluye, pero no se limita a una carga, un absorbente, un humectante, un aglutinante, un disgregante, un lubricante y similares. La carga incluye almidón, lactosa, manitol, celulosa microcristalina y similares; el absorbente incluye, pero no se limita a sulfato de calcio, hidrogenofosfato de calcio, carbonato de calcio y similares; el humectante incluye agua, etanol y similares; el aglutinante incluye, pero no se limita a hidroxipropilmetilcelulosa, povidona, celulosa microcristalina y similares; el disgregante incluye, pero no se limita a croscarmelosa sódica, crospovidona, un tensioactivo, hidroxipropilcelulosa de baja sustitución y similares; y el lubricante incluye, pero no se limita a estearato de magnesio, talco, polietilenglicol, laurilsulfato de sodio, gel de sílice micronizado, talco y similares. El excipiente farmacéutico también incluye un colorante, un edulcorante y similares.

En algunas realizaciones específicas de la presente descripción, la dosis diaria administrada a un paciente puede ser de 2 mg a 20 mg; en algunas realizaciones específicas, la dosis diaria administrada a un paciente puede ser de 5 mg a 20 mg; en algunas realizaciones específicas, la dosis diaria administrada a un paciente puede ser de 10 mg a 16 mg; en algunas realizaciones específicas de la presente descripción, la dosis diaria administrada a un paciente puede ser de 10 mg a 14 mg; y en algunas realizaciones específicas, la dosis diaria administrada a un paciente puede ser de 8 mg, 10 mg, 12 mg, 14 mg o 16 mg.

En los métodos de tratamiento anteriores, el anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo puede administrarse una o más veces al día en una dosis única o en dosis múltiples. En algunas realizaciones específicas de la presente descripción, el anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se administra una vez al día.

La cantidad administrada de anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo puede determinarse en función de la gravedad de la enfermedad, la respuesta de la enfermedad, cualquier toxicidad relacionada con el tratamiento y la edad y el estado de salud del paciente. Preferiblemente, el anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se administra mediante administración intermitente, en donde dicha administración intermitente incluye un periodo de administración y un periodo de descanso, y el anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo puede administrarse una o más veces al día durante el periodo de administración. Por ejemplo, el anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se administra diariamente durante el período de administración, luego se interrumpe la administración durante un tiempo durante el período de descanso, al que sigue el período de administración, seguido luego por el período de descanso, y los procedimientos anteriores pueden repetirse varias veces de esta manera. En ello, la relación entre el período de administración y el período de descanso en términos de días es de 2:0,5 a 5, preferiblemente de 2:0,5 a 3, aún más preferiblemente de 2:0,5 a 2, y más preferiblemente de 2:0,5 a 1.

En algunas realizaciones específicas, la administración es continua durante 2 semanas y se interrumpe durante 2 semanas. En algunas realizaciones específicas, el fármaco se administra una vez al día durante 14 días consecutivos, a los que siguen 14 días de descanso; luego el fármaco se administra una vez al día durante 14 días consecutivos, seguidos de 14 días de descanso, con lo que la administración intermitente puede repetirse varias veces, de manera que la administración dure 14 días consecutivos seguidos de 14 días de descanso.

En algunas realizaciones específicas, la administración es continua durante 2 semanas y se interrumpe durante 1 semana. En algunas realizaciones específicas, el fármaco se administra una vez al día durante 14 días consecutivos, a los que siguen de 7 días de descanso; luego el fármaco se administra una vez al día durante 14 días consecutivos, seguidos de 7 días de descanso, con lo que la administración intermitente puede repetirse varias veces, de manera que la administración dure 14 días consecutivos seguidos de 7 días de descanso.

En algunas realizaciones específicas, la administración es continua durante 5 días y se interrumpe durante 2 días. En algunas realizaciones específicas, el fármaco se administra una vez al día durante 5 días consecutivos, a los que siguen de 2 días de descanso; luego el fármaco se administra una vez al día durante 5 días consecutivos, seguidos de 2 días de descanso, con lo que la administración intermitente puede repetirse varias veces, de manera que la administración dure 5 días consecutivos seguidos de 2 días libres.

En algunas realizaciones, el anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se administra solo como el único ingrediente activo a un paciente con osteosarcoma o condrosarcoma. En algunas realizaciones, el anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se administra a un paciente con osteosarcoma o condrosarcoma junto con otros fármacos antineoplásicos de manera simultánea o secuencial. En algunas realizaciones, los otros fármacos antineoplásicos incluyen, pero no se limitan a un alquilante, un complejo de platino, un derivado de fluoropirimidina, camptotecina y análogos de camptotecina, un antibiótico antineoplásico basado en antraquinona y taxanos. En algunas realizaciones, el otro fármaco antineoplásico es el cisplatino.

En el presente documento se describe una composición farmacéutica para tratar el osteosarcoma y/o el condrosarcoma, que comprende anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable.

En el presente documento se describe un kit que comprende (a) una composición farmacéutica que comprende al menos una dosis unitaria de anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y (b) instrucciones para tratar el osteosarcoma y/o el condrosarcoma.

Las ventajas de la presente descripción son las siguientes.

1. Se ha descubierto por primera vez que el anlotinib puede inhibir el crecimiento y la metástasis del osteosarcoma y/o el condrosarcoma. El anlotinib es capaz de inhibir significativamente el crecimiento de las líneas celulares de osteosarcoma 143B, U2OS, MG63 y SJSA, inducir la detención del ciclo en dichas líneas celulares y, entretanto, inhibir también la migración y la invasión de las líneas celulares de osteosarcoma.

2. Se ha descubierto por primera vez que el anlotinib es capaz de potenciar el efecto letal del fármaco quimioterápico cisplatino sobre las células de osteosarcoma.

3. Se ha descubierto por primera vez que el anlotinib puede usarse para tratar el osteosarcoma y/o el condrosarcoma. A menos que se especifique lo contrario, a los efectos de la presente solicitud, los siguientes términos utilizados en esta especificación y en las reivindicaciones tendrán los siguientes significados.

Un "paciente" se refiere a un mamífero, preferiblemente a un ser humano.

El término "farmacéuticamente aceptable" significa que una sustancia puede usarse para preparar una composición farmacéutica. Dicha composición farmacéutica es generalmente segura, no tóxica, ni biológicamente indeseable ni de otro modo indeseable y aceptable para uso farmacéutico en seres humanos.

Una "sal farmacéuticamente aceptable" incluye, pero no se limita a las sales de adición de ácido formadas con ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares; o las sales de adición de ácido formadas con ácidos orgánicos tales como ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido propiónico, ácido hexanoico, ácido heptanoico, ácido ciclopentanopropiónico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido láctico, ácido malónico, ácido succínico, ácido málico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido cinámico, ácido mandélico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido 1,2-etiónico, ácido 2-isetiónico, ácido bencenosulfónico, ácido p-clorobencenosulfónico, ácido p-toluenosulfónico, ácido 3-fenilpropiónico, ácido trimetilacético, ácido í-butilacético, ácido dodecilsulfúrico, ácido glucónico, ácido glutámico, ácido hidroxinaftoico, ácido salicílico, ácido esteárico y similares.

Una "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a una cantidad de un compuesto que, cuando se administra a un ser humano para el tratamiento de una enfermedad, es suficiente para lograr el control de dicha enfermedad.

"Tratamiento" se refiere a cualquier administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto e incluye:

(1) inhibir una enfermedad en un cuerpo humano que experimenta o muestra la patología o sintomatología de la enfermedad (es decir, prevenir un mayor desarrollo de la patología y/o sintomatología), o

(2) mejorar una enfermedad en un cuerpo humano que experimenta o presenta la patología o sintomatología de la enfermedad (es decir, revertir la patología y/o sintomatología).

"RC" se refiere a una respuesta completa y específicamente significa que la lesión tumoral diana desaparece, no aparece ninguna lesión nueva y el marcador tumoral es normal y se mantiene durante al menos 4 semanas.

"RP" se refiere a una respuesta parcial y específicamente significa que la suma de los diámetros de las lesiones tumorales diana se reduce en el 30 % o más desde el nivel inicial y se mantiene durante al menos 4 semanas. "EP" se refiere a una enfermedad progresiva y específicamente significa que la suma de los diámetros de las lesiones tumorales diana aumenta en el 20 % o más desde el nivel inicial.

"EE" se refiere a una enfermedad estable y específicamente significa que el grado de reducción de la lesión o las lesiones tumorales diana no alcanza el nivel RP, el grado de aumento tampoco alcanza el nivel EP, y el nivel EE está entre el nivel RP y el nivel EP.

"qd" se refiere a tomar los medicamentos una vez al día.

"Avanzado" incluye "avanzado localmente".

Breve descripción de los dibujos

Figura 1: Anlotinib inhibe la proliferación de las células de osteosarcoma.

Figura 2: Anlotinib induce la detención del ciclo celular de las células de osteosarcoma.

Figura 3: Anlotinib induce la detención del ciclo celular de las células de osteosarcoma.

Figura 4: Anlotinib potencia la apoptosis de las células de osteosarcoma inducida por cisplatino (DDP).

Figura 5: Anlotinib potencia la apoptosis de las células de osteosarcoma inducida por cisplatino (DDP).

Figura 6: Anlotinib inhibe la migración y la invasión de las células de osteosarcoma.

Figura 7: Anlotinib inhibe la migración y la invasión de las células de osteosarcoma.

Descripción detallada

A continuación, las realizaciones específicas proporcionadas por la presente descripción se describirán en detalle con referencia a los ejemplos.

Ejemplo 1

1. Materiales y métodos

1.1 Materiales: Las líneas celulares de osteosarcoma humano 143B, U2OS, MG63 y SJSA se adquirieron de la American Type Culture Collection (ATCC). El anlotinib (un nuevo inhibidor de la tirosinacinasa) se obtuvo de Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co., Ltd. El anlotinib se disolvió en dimetilsulfóxido y se formuló en una solución de trabajo con una concentración de 16 mmol/l como solución madre, que se almacenó en un refrigerador a -20 °C para su uso posterior y se ajustó a la concentración deseada con el medio de cultivo DMEM con suero antes del uso. Reactivos experimentales e instrumentos: medio DMEM de alto contenido de glucosa, suero bovino fetal (Thermo, EE. UU.); caspasa 3 escindida, un anticuerpo contra p-PARP, un anticuerpo contra GAPDH, un anticuerpo secundario marcado con peroxidasa de rábano picante (Sixin Biotechnology Co., Ltd.); dimetilsulfóxido (Sigma, EE. UU.); EDTA al 0,02 % tripsina al 0,25 % (Miltenyi Biotec Co., Alemania); incubadora termostática (Shanghai Rongyan Instrument Co., Ltd.); citómetro de flujo (Becton Dickinson Co., EE. UU.); lector de microplacas multifuncional (Molecular Devices Co., EE. UU.).

1.2 Métodos experimentales

1.2.1 Cultivo celular: las líneas celulares de osteosarcoma 143B, U2OS, MG63 y SJSA se cultivaron en el medio de cultivo completo DMEM (con suero fetal bovino en una fracción volumétrica del 10 %, 0,1 g/l de estreptomicina y 100 U/ml de penicilina) y se incubaron en una incubadora termostática con CO² al 5 % (fracción volumétrica) a 37 °C. Cuando se alcanzó una confluencia celular de aproximadamente el 85 %, las células se separaron con una solución de separación de mezclas de células que contenía EDTA al 0,02 % y tripsina al 0,25 %, y luego se recogieron, se centrifugaron a 1000 r/min durante 3 min y se subcultivaron.

1.2.2 Detección de la proliferación celular mediante cck-8: las células 143B, U2OS, MG63 y SJSA se recogieron en fase de crecimiento logarítmico, se enjuagaron con PBS, se contaron y se distribuyeron en tubos separados. Las células se sembraron en una placa de 96 pocillos (3000 células/pocillo) y se cultivaron durante 24 h para permitir la unión de las dichas células. A continuación, se añadió anlotinib en diferentes concentraciones de la cantidad de sustancia (0 μM, 1 μM, 2 μM, 4 μM, 8 μM, 16 μM, 32 μM y 64 μM), la mezcla se incubó durante 24 h y luego se llevó a cabo la detección. Se añadieron a cada pocillo 100 μl del reactivo cck-8 diluido 10 veces con el medio de cultivo DMEM y la mezcla resultante se incubó a 37 °C durante 45 minutos. El valor de la absorbancia a 450 nm de la mezcla resultante en cada pocillo se detectó mediante un lector de microplacas.

1.2.3 Experimento de clonación en placa: las células 143B, U2OS, MG63 y SJSA se trataron con anlotinib 1 μM y se aspiró el sobrenadante. Las células se fijaron con paraformaldehído al 4 % durante 15 min, se enjuagaron 3 veces con PBS, se tiñeron con cristal violeta al 0,1 % durante 10 min, se enjuagaron dos veces con PBS y se fotografiaron después de su secado al aire.

1.2.4 Detección del ciclo celular mediante un citómetro de flujo: las células 143B, U2OS, MG63 y SJSA se añadieron a medios de cultivo líquidos que contenían diferentes concentraciones de cantidad de sustancia de anlotinib (0 μM, 1 μM, 2 μM y 4 μM) para su cultivo. Las células se recogieron después de 24 h, se centrifugaron a 1000 r/min durante 1 min, se enjuagaron con PBS y se fijaron con etanol al 70 %. Se añadió la solución de tinción PI del kit de análisis del ciclo celular, la mezcla se incubó en la oscuridad a temperatura ambiente durante 15 min y la detección se llevó a cabo con un citómetro de flujo. Las imágenes se analizaron con el software ModFit. El experimento se repitió 3 veces.

1.3.5 Detección de la apoptosis celular mediante un citómetro de flujo: las células 143B, U2OS, MG63 y SJSA se añadieron al medio de cultivo líquido que contenía anlotinib 2 μM (con o sin cisplatino (DDP) 10 μM) para su cultivo. Las células se recogieron después de 24 h, se centrifugaron a 1000 r/min durante 1 min y se enjuagaron con PBS. A continuación, se usó un kit con anexina V-FITC/PI para detectar la apoptosis de las células. Las células se añadieron a 100 μl del tampón de unión 1x y se resuspendieron, se añadieron 5 μl de anexina V-FITC y 2,5 μl del reactivo de tinción PI, y la mezcla se agitó y mezcló uniformemente en la oscuridad. La mezcla resultante se dejó reaccionar a temperatura ambiente durante 15 min, luego se añadieron 300 μl del tampón de unión 1x, la mezcla resultante se mezcló uniformemente y la detección se llevó a cabo con un citómetro de flujo. El experimento se repitió 3 veces.

1.3.6 Análisis experimental de la migración y la invasión celular mediante el sistema Transwell: las células se sembraron en la parte superior de la cámara Transwell (5 x 104 células/pocillo). Las células 143B, U2OS, MG63 y SJSA se trataron con anlotinib 1 μM. Se añadió a la parte superior de la cámara Transwell un medio de cultivo que contenía suero al 2 % (en el experimento de invasión se requirieron 4 horas de pretratamiento con Matrigel al 10 %) y a la parte inferior un medio de cultivo que contenía suero al 10 %. Después de 24 horas, las células se fijaron con paraformaldehído al 4 %, se tiñeron con cristal violeta y se fotografiaron al microscopio.

1.4 Principales índices de observación. El anlotinib fue capaz de ejercer un efecto inhibidor significativo sobre el crecimiento y la metástasis de las células de osteosarcoma, al tiempo que fue capaz de potenciar los efectos letales de fármacos quimioterápicos sobre las células de osteosarcoma.

2. Resultados

2.1 El anlotinib inhibió la proliferación de las células de osteosarcoma

Para evaluar los efectos antiproliferativos del anlotinib en las líneas celulares de osteosarcoma 143B, U2OS, MG63 y SJSA, estas líneas celulares de osteosarcoma se trataron con anlotinib en una concentración de 0 μM, 1 μM, 2 μM o 4 μM durante 24 horas o 48 horas. Los resultados indicaron que la tasa de proliferación de las células disminuía con el aumento de la concentración de anlotinib y el anlotinib también tuvo un efecto inhibidor significativo sobre la proliferación de las líneas celulares de osteosarcoma a la misma concentración, con diferente duración de la acción del fármaco. Los resultados anteriores indicaron que el anlotinib tenía un efecto inhibidor significativo sobre la proliferación de las líneas celulares de osteosarcoma y el efecto inhibidor se mostró dependiente del tiempo y la concentración.

Tabla 1

2.2 El anlotinib detuvo el ciclo celular en las células de osteosarcoma

Para estudiar el mecanismo por el cual el anlotinib inhibía la proliferación de las células de osteosarcoma, se realizó la detección del ciclo celular utilizando las líneas celulares de osteosarcoma 143B, U2OS, MG63 y SJSA como células diana. Los resultados indicaron que, después del tratamiento con anlotinib, se producía la detención del ciclo G2/M en las células, lo que estuvo acompañado por una disminución al mismo tiempo de las células en fase G1.

2.3 El anlotinib potenció la apoptosis de las células de osteosarcoma causada por el cisplatino (DDP)

A continuación, los inventores exploraron el efecto de quimiosensibilización del anlotinib en las líneas celulares de osteosarcoma; se usó anlotinib 2 μM y el ensayo clásico de apoptosis celular con anexina V-FITC/PI. Los resultados indicaron que el anlotinib era capaz de potenciar significativamente la apoptosis de las líneas celulares de osteosarcoma causada por el cisplatino.

2.4 El anlotinib inhibió la migración y la invasión de células de osteosarcoma

Para estudiar el efecto del anlotinib sobre la migración y la invasión de líneas celulares de osteosarcoma, los inventores utilizaron el sistema Transwell. Los resultados indicaron que el anlotinib inhibía en gran medida la migración y la invasión de las líneas celulares de osteosarcoma después de 24 horas de tratamiento con anlotinib.

3. Conclusiones

El anlotinib fue capaz de inhibir significativamente el crecimiento de las líneas celulares de osteosarcoma 143B, U2OS, MG63 y SJSA, inducir la detención del ciclo celular de las mismas y, entretanto, inhibir también la migración y la invasión de las líneas celulares de osteosarcoma. Las investigaciones posteriores indicaron que el anlotinib también era capaz de potenciar el efecto letal del fármaco quimioterápico cisplatino en las células de osteosarcoma.

Ejemplo 2

Cápsulas con diclorhidrato de 1-[[[4-(4-fluoro-2-metil-1H-indol-5-il)oxi-6-metoxiquinolin-7-il]oxi]metil]ciclopropilamina (diclorhidrato de anlotinib)

El diclorhidrato de anlotinib se pulverizó, se pasó a través de un tamiz de malla 80 y luego se mezcló uniformemente con manitol e hidroxipropilcelulosa. A continuación, se añadió la cantidad prescrita de celulosa microcristalina, se mezcló uniformemente y la mezcla se pasó a través de un tamiz de 0,8 mm. Finalmente, se añadió la cantidad prescrita de estearato de magnesio, se mezcló uniformemente y la mezcla resultante se envasó en cápsulas.

Cápsulas con otros contenidos de diclorhidrato de anlotinib podrían prepararse y obtenerse con referencia a la misma proporción y prescripción descrita anteriormente.

Ejemplo 3

Un paciente de 22 años acudió a consulta, los hallazgos anatomopatológicos posoperatorios sugirieron un osteosarcoma en el húmero proximal izquierdo y la TAC de tórax mostró metástasis pulmonar.

El paciente experimentaba dolor e hinchazón en el hombro izquierdo sin un factor predisponente obvio y los síntomas empeoraban por la noche. Tras la consulta, las imágenes de RM del húmero izquierdo mostraron un tumor óseo maligno en las partes media y superior del húmero izquierdo. Se realizó la amputación de la cintura escapular. Los hallazgos anatomopatológicos postoperatorios sugirieron un osteosarcoma en el húmero proximal (izquierdo) con invasión del eje del húmero y el tejido muscular estriado circundante y sin compromiso del músculo y los tejidos de la piel en el extremo amputado resultado de la intervención quirúrgica, y tampoco se encontró ningún tumor metastásico en los ganglios linfáticos. La TAC de tórax mostró sombras nodulares en los dos pulmones, por lo que se recomendó un nuevo examen. Se administró al paciente metotrexato y epirrubicina (1 ciclo) durante un mes desde el día de la consulta, y la pauta posológica se cambió a una quimioterapia con epirrubicina y cisplatino (1 ciclo) al cabo de un mes debido a una función hepática anormal. Posteriormente, la TAC de tórax mostró múltiples nódulos en los pulmones, que se consideraron metástasis y la pauta posológica se cambió a una quimioterapia con epirrubicina, cisplatino e ifosfamida (4 ciclos). El efecto terapéutico óptimo fue EE.

Nueve meses después de la consulta, el paciente fue tratado con diclorhidrato de anlotinib en cápsulas (12 mg) una vez al día por vía oral (2 semanas de administración continua y 1 semana de suspensión se consideran un ciclo de tratamiento).

Después de administrar 2 ciclos al paciente, la TAC de tórax, abdomen y pelvis mostró que el efecto terapéutico se evaluaba como EE (pequeño) según los criterios RECIST1.1 y que el tamaño total de las lesiones diana era de 40 mm, que no suponía mucho cambio en comparación con el valor inicial (41 mm). Después de 3 ciclos de administración, la TAC de tórax, abdomen y pelvis mostró que el tamaño total de las lesiones diana era de 37 mm, ligeramente reducido en comparación con el anterior. Tras 5 ciclos de administración, la TAC de tórax, abdomen y pelvis mostró que las lesiones se habían reducido en comparación con las anteriores y el tamaño total de las lesiones diana era de 34 mm. Después de 8 ciclos de administración, la TAC de tórax, abdomen y pelvis mostró que el tamaño total de las lesiones diana era de 30 mm. Después de 12 ciclos de administración, la TAC de tórax y abdomen mostró que las lesiones diana se habían reducido aún más y el efecto terapéutico se evaluó como RP según los criterios RECIST1.1, y el tamaño total de las lesiones diana fue de 27 mm. Después de 15 ciclos de administración, la TAC de tórax y abdomen mostró que el tamaño total de las lesiones diana era de 27 mm y el efecto terapéutico se evaluó como RP. Después de 18 ciclos de administración, la TAC de tórax y abdomen mostró que las lesiones diana se habían reducido aún más y el tamaño total de las lesiones diana era de 20 mm. Tras 21 ciclos de administración, la TAC de tórax y abdomen mostró que el tamaño total de las lesiones diana era de 24 mm, ligeramente incrementado en comparación con el anterior, y el efecto terapéutico se evaluó como RP.

Ejemplo 4

A una paciente de 38 años se le diagnosticó un condrosarcoma en la columna cérvico-torácica mediante punción guiada por TAC. La TEP-TAC mostró múltiples metástasis en los dos pulmones, la glándula suprarrenal derecha y la cola pancreática.

La paciente experimentaba dolor en la parte derecha de la espalda, los hombros y la extremidad superior derecha acompañado de entumecimiento e hinchazón de la extremidad superior derecha sin un factor predisponente obvio. La paciente acudió a consulta y la RM cervical mostró lesiones ocupantes de espacio en el mediastino superior derecho y el espacio paravertebral. Se realizó una punción guiada por TAC y los hallazgos anatomopatológicos fueron coherentes con un condrosarcoma desdiferenciado. Posteriormente, se realizaron las siguientes operaciones quirúrgicas, es decir, la extirpación de los anejos de T1-2 y el tumor en el agujero intervertebral por la vía posterior; la fijación de C6, 7-T2; la toracotomía axilar derecha asistida por vídeo; y la resección del tumor del mediastino posterior. Todos los exámenes anatomopatológicos postoperatorios sugirieron un condrosarcoma. Posteriormente, se realizó una radioterapia local dirigida a la columna cervical y la columna torácica con 50 Gy/25 f. A los 16 meses se presentaron dolor y molestias regionales y la paciente recibió quimioterapia con gemcitabina y endostar (3 ciclos) y bioterapia (2 ciclos). Después de 2 meses, un nuevo examen de RM del cuello mostró una recidiva de la lesión y la lesión recidivante se trató con un acelerador estereotáctico. A los 6 meses, un nuevo examen de TEP-TAC mostró: recidiva tumoral y metástasis en una parte del conducto raquídeo y el agujero intervertebral; la invasión de algunos huesos adyacentes; múltiples tumores metastásicos en los dos pulmones, la pleura derecha, el hilio del pulmón izquierdo, la glándula suprarrenal derecha y la cola pancreática; y no pudo descartarse la invasión del músculo psoas mayor izquierdo. A continuación, se realizó el tratamiento de las lesiones en el cuerpo vertebral mediante un acelerador estereotáctico. El tratamiento no alivió el dolor en el cuello y los hombros de la paciente y se le administró mescontin (30 mg) por vía oral dos veces al día.

Después de un mes, la paciente fue tratada con cápsulas de diclorhidrato de anlotinib (12 mg) una vez al día por vía oral (2 semanas de administración continua y 1 semana de suspensión se consideran un ciclo de tratamiento).

Tras administrar 2 ciclos a la paciente, la TAC mostró múltiples nódulos y masas dispersas en los dos pulmones y en la pleura, algunos de los cuales eran similares a los anteriores y otros se mostraban ligeramente reducidos en comparación con los anteriores. La masa en la pleura inferior derecha invadía el diafragma derecho y la pared torácica, tenía un límite menos claro con la glándula suprarrenal derecha y se mostraba ligeramente reducida en comparación con la anterior. En el límite inferior del campo de exploración, la masa de baja densidad en el músculo psoas izquierdo se mostró reducida en comparación con la anterior. El tamaño total de las lesiones diana era de 148 mm, que se había reducido en 25 mm en comparación con el valor inicial (173 mm), y el efecto terapéutico se evaluó como EE (pequeño) según los criterios RECIST1.1. Después de administrar 4 ciclos a la paciente, la TAC mostró que el tamaño total de las lesiones diana era de 139 mm, ligeramente reducido en comparación con el anterior. Después de administrar 6 ciclos a la paciente, la TAC mostró que el tamaño total de las lesiones diana era de 126 mm, reducido en 13 mm en comparación con el anterior. Después de administrar 7 ciclos a la paciente, la TAC mostró que el tamaño total de las lesiones diana era de 131 mm, ligeramente incrementado en comparación con el anterior. Después de administrar 11 ciclos a la paciente, la TAC mostró que el tamaño total de las lesiones diana era de 127 mm, ligeramente reducido en comparación con el anterior. Después de administrar 14 ciclos a la paciente, la TAC mostró que el tamaño total de las lesiones diana era de 129 mm, que no suponía mucho cambio en comparación con el anterior. Después de administrar 17 ciclos a la paciente, la TAC mostró que el tamaño total de las lesiones diana era de 131 mm, que no suponía mucho cambio en comparación con el anterior. Después de administrar 21 ciclos a la paciente, la TAC mostró que el tamaño total de las lesiones diana era de 138 mm, ligeramente incrementado en comparación con el anterior. Después de administrar 25 ciclos a la paciente, la TAC mostró que el tamaño total de las lesiones diana era de 129 mm, ligeramente reducido en comparación con el anterior.

Ejemplo 5

A una paciente de 27 años se le diagnosticó un condrosarcoma pélvico mediante TAC y el examen anatomopatológico postoperatorio, y la lesión progresó después de múltiples tratamientos.

La paciente encontró una masa en el bajo vientre y acudió a consulta. La TAC mostró que podía verse la sombra de una enorme masa irregular de densidad mixta en la cavidad pélvica, el útero y la parte anterior inferior de la vejiga, y la masa tenía una sección transversal máxima de 16 cm x 11 cm x 13 cm. Posteriormente se realizó una resección quirúrgica. Examen anatomopatológico postoperatorio: condrosarcoma bien diferenciado. La paciente no recibió quimiorradioterapia postoperatoria. Un nuevo examen realizado 15 meses después de la consulta reveló la recidiva de la masa pélvica. Seis meses después se realizó un tratamiento quirúrgico y el tumor resultó irresecable debido a las extensas adherencias que se encontraron durante la intervención. Examen anatomopatológico postoperatorio: condrosarcoma bien diferenciado. Posteriormente, la paciente se sometió a quimioterapia por infusión arterial para el tumor pélvico y se le administró pirarrubicina (60 mg), cisplatino (60 mg) e interleucina-2 (2 millones de U). Después de un mes, la paciente se sometió continuadamente a la quimioterapia de infusión arterial para el tumor abdominal y pélvico, y se le administró pirarrubicina (60 mg), cisplatino (60 mg) e interleucina-2 (2 millones de U). La paciente presentó un empeoramiento del dolor lumbosacro que se irradiaba al muslo izquierdo, y el dolor era tan intenso que la paciente no podía sentarse ni caminar. La TAC mostró la progresión de la masa abdominal y pélvica.

Después de 2 meses, la paciente fue tratada con cápsulas de diclorhidrato de anlotinib (12 mg) una vez al día por vía oral (2 semanas de administración continua y 1 semana de suspensión se consideran un ciclo de tratamiento).

Después de 2 ciclos de administración, se realizó una TAC y los resultados mostraron que el tamaño total de las lesiones diana era de 210 mm, sin modificación con respecto al valor inicial (210 mm), y el efecto terapéutico se evaluó como EE. Después de 4 ciclos de administración, el nuevo examen por TAC mostró que el tamaño total de las lesiones diana era de 210 mm, sin modificación con respecto al anterior. Tras 6 ciclos de administración, el tamaño total de las lesiones diana fue de 220 mm, incrementado en 10 mm en comparación con el anterior. Después de 8 ciclos de administración, el nuevo examen por TAC mostró que el tamaño total de las lesiones diana era de 240 mm, incrementado en 20 mm en comparación con el anterior. Después de 11 ciclos de administración, el nuevo examen por TAC mostró que el tamaño total de las lesiones diana era de 240 mm, sin modificación con respecto al anterior. Después de 14 ciclos de administración, el nuevo examen por TAC mostró que el tamaño total de las lesiones diana era de 240 mm, sin modificación con respecto al anterior.

Ejemplo 6

A un paciente de 25 años se le realizó la extirpación quirúrgica de una lesión de osteosarcoma en el húmero proximal derecho y la sustitución por una prótesis de cabeza humeral el 27 de abril de 2013. Los hallazgos anatomopatológicos postoperatorios sugirieron un osteosarcoma (tipo condroblástico) en el húmero proximal derecho con compromiso de la cavidad de la médula ósea e invasión de la corteza ósea y los tejidos blandos, se observó necrosis focal y necrosis grasa en el tumor y no se observó infiltración de tejido tumoral en los bordes epifisario e incisivo inferior. Después de la operación quirúrgica se le administró doxorrubicina e ifosfamida. El paciente se sometió a 4 ciclos de quimioterapia, durante los cuales se produjo una depresión grave de la médula ósea. En el descanso de la quimioterapia se le administró un tratamiento de apoyo para la médula ósea hasta el final de la quimioterapia en agosto de 2013. Durante la quimioterapia, el nuevo examen de TEP/TAC de cuerpo entero realizado en junio de 2013 mostró las siguientes condiciones. 1. Después de la extirpación del osteosarcoma del húmero derecho y la quimioterapia, apareció una sombra en forma de franja con un metabolismo ligeramente incrementado alrededor del hueso implantado artificialmente en la parte superior del brazo derecho. 2. Había ganglios linfáticos agrandados en la axila derecha con un ligero incremento metabólico. Después de finalizar la quimioterapia, el paciente fue tratado mediante la administración de células CIK por infusión. A fines de 2015, el paciente experimentaba dolor en la parte superior del húmero izquierdo, sin que se observara una masa evidente, y el paciente padecía dolor recurrente. La RM realizada en mayo de 2016 mostró un cambio anormal en las partes media y superior del húmero izquierdo, que era una lesión infecciosa o una lesión hinchada y dolorosa. La TEP/TAC realizada el 12 de mayo de 2016 mostró las siguientes condiciones. 1. No había signos de recidiva tumoral en el húmero derecho tras la extirpación del osteosarcoma del húmero derecho y el tratamiento integral, y había una lesión hipermetabólica en forma de franja en la parte superior del húmero izquierdo. 2. No había signos de metástasis en los ganglios linfáticos axilares bilaterales. 3. Había ganglios linfáticos ligeramente hipermetabólicos y agrandados en las dos axilas, posteriormente se realizó una biopsia de la masa en el húmero izquierdo y los hallazgos anatomopatológicos sugirieron un tumor de células redondas que era más probable que se diagnosticara como osteosarcoma condroblástico. El 7 de junio de 2016 y el 1 de julio de 2016, el paciente se sometió a dos ciclos de quimioterapia con doxorrubicina e ifosfamida y el proceso fue bien. El nuevo examen de RM realizado después de la quimioterapia mostró que el tumor era ligeramente mayor que antes. La inactivación con microondas del tumor del húmero proximal izquierdo y la fijación interna del injerto óseo se realizaron el 22 de julio de 2016. Los hallazgos anatomopatológicos postoperatorios mostraron coherencia con los cambios anatomopatológicos de la recidiva de un osteosarcoma, y se pudo ver que los tejidos musculares adyacentes al tumor estaban comprometidos. El 17 de agosto, el 8 de septiembre, el 8 de octubre, el 31 de octubre, el 28 de noviembre y el 21 de diciembre de 2016 se le administraron altas dosis de metotrexato. El paciente se sometió a 6 ciclos de quimioterapia y el proceso fue bien. Después de finalizar la quimioterapia, la depresión de la médula ósea se calificó como del grado I a II. En noviembre de 2017 se encontró metástasis pulmonar bilateral, la enfermedad había progresado y no se continuó con la quimioterapia. El nuevo examen por TAC realizado el 20 de octubre de 2018 mostró que había múltiples sombras nodulares dispersas de diverso tamaño en los dos pulmones y que dichas sombras nodulares suponían un incremento en número y tamaño en comparación con las anteriores y la enfermedad había progresado.

El paciente fue tratado con cápsulas de diclorhidrato de anlotinib (12 mg) una vez al día por vía oral (2 semanas de administración continua y 1 semana de suspensión se consideran un ciclo de tratamiento) a partir del 10 de noviembre de 2018. El 21 de diciembre de 2018, el paciente había recibido 2 ciclos de tratamiento y una TAC simple mostró múltiples nódulos y masas en los dos pulmones, en donde la lesión de mayor tamaño (3,2 cm) se localizaba en el lóbulo medio del pulmón derecho. El efecto terapéutico se evaluó como EE (pequeño) según los criterios RECIST1.1. El tamaño total de las lesiones diana era de 53,5 mm, reducido en 5,5 mm en comparación con el valor inicial. El paciente está recibiendo tratamiento continuo en la actualidad.

Ejemplo 7

Una paciente de 18 años a la que se le realizó la resección de una lesión el 7 de noviembre de 2016. El 15 de noviembre de 2016, los hallazgos anatomopatológicos sugirieron un osteosarcoma en la tibia derecha. El 29 de noviembre de 2016 se le implantó un catéter de acceso venoso con anestesia general y se llevó a cabo una quimioterapia adyuvante sistémica posoperatoria por vía intravenosa. El 1 de diciembre de 2016 se le administraron doxorrubicina y cisplatino (1 ciclo de quimioterapia) y del 16 de diciembre de 2016 al 5 de enero de 2017 metotrexato (2 ciclos de quimioterapia). El nuevo examen por TAC realizado el 19 de enero de 2017 mostró que la lesión en la tibia derecha era ligeramente mayor que antes. El 19 de enero de 2017 se le administró ifosfamida (1 ciclo de quimioterapia) y la quimioterapia fue bien sin ninguna reacción gastrointestinal obvia ni depresión de la médula ósea. El 7 de febrero de 2017 se realizaron con anestesia general la resección segmentaria del tumor en la tibia proximal derecha, la sustitución de la articulación y la transposición de un colgajo del músculo gastrocnemio. Diagnóstico intraoperatorio: osteosarcoma maligno en la tibia proximal derecha. Examen anatomopatológico postoperatorio: (margen incisivo de la cavidad medular tibial derecha) pequeña cantidad de huesos rotos y tejido adiposo intramedular. Informe anatomopatológico del segmento tumoral: (tibia proximal derecha) osteosarcoma, con invasión y penetración del tumor en el cartílago de la superficie articular, penetración extensa en el hueso cortical e invasión del tejido blando circundante, y observación de un trombo tumoral en el vaso. El 24 de febrero de 2017 se le administraron doxorrubicina y cisplatino (1 ciclo de quimioterapia) y, después de la quimioterapia, la paciente presentó leucocitopenia (grado III). El 10 de marzo de 2017 se le administró ifosfamida (1 ciclo de quimioterapia) y, después de la quimioterapia, la paciente presentó leucocitopenia (grado II) y no experimentó efectos secundarios evidentes como resultado de la quimioterapia. El 31 de marzo de 2017 se le administró metotrexato y la paciente presentó lesiones hepáticas (grado IV) que mejoraron después del tratamiento sintomático. El 15 de abril de 2017 se le administró doxorrubicina y cisplatino (1 ciclo de quimioterapia). Después de la profilaxis de los vómitos, la paciente experimentó vómitos (grado II) que mejoraron después del tratamiento sintomático. El 3 de mayo de 2017 se le administró quimioterapia con ifosfamida y la paciente presentó leucocitopenia (grado IV) después de la quimioterapia. El 20 de mayo de 2017 se le administró quimioterapia con metotrexato y la paciente presentó lesiones hepáticas (grado II) después de la quimioterapia. El 4 de junio de 2017 se le administró quimioterapia con doxorrubicina y cisplatino y el 19 de junio de 2017 se le administró quimioterapia con ifosfamida y la paciente presentó leucocitopenia (grado IV). El 11 de julio de 2017 se le administró quimioterapia con metotrexato y la paciente presentó lesiones hepáticas (grado I). El 29 de julio de 2017 se le administró quimioterapia con doxorrubicina y cisplatino y la paciente presentó leucocitopenia (grado II). El 16 de agosto de 2017 se le administró quimioterapia con ifosfamida y después la paciente experimentó leucocitopenia (grado IV). El 6 de septiembre de 2017 se le administró quimioterapia con metotrexato y la paciente experimentó una depresión de la médula ósea (grado II). El nuevo examen por TAC realizado el 3 de enero de 2018 mostró que los pequeños nódulos en la base del lóbulo inferior del pulmón izquierdo eran aproximadamente similares a los nódulos anteriores y que se habían formado recientemente nódulos delgados y pequeños en el segmento dorsal del lóbulo inferior del pulmón izquierdo. El nuevo examen por TAC realizado en octubre de 2018 mostró metástasis pulmonar, metástasis pélvica y una masa detrás del fémur derecho, lo que indicaba la posibilidad de una recidiva. El 30 de octubre de 2018 se realizó una biopsia por punción de la masa del fémur derecho y los hallazgos anatomopatológicos sugirieron un sarcoma de células fusiformes de alto grado con necrosis coagulativa masiva (en el tejido blando del fémur inferior derecho).

La paciente fue tratada con cápsulas de diclorhidrato de anlotinib (12 mg) una vez al día por vía oral (2 semanas de administración continua y 1 semana de suspensión se consideran un ciclo de tratamiento) a partir del 16 de noviembre de 2018. Para el 26 de diciembre de 2018, la paciente había recibido 2 ciclos de tratamiento. La TAC mostró nódulos de densidad mixta en el lóbulo inferior del pulmón derecho, pequeños nódulos en la base del lóbulo inferior del pulmón izquierdo que eran más o menos similares a los nódulos anteriores y la sombra de una masa en la pared pélvica derecha que iba acompañada de osificación y necrosis y era de menor tamaño que antes. Además, la TAC mostró que el estado de la tibia derecha era aproximadamente similar al anterior. El efecto terapéutico se evaluó como EE (pequeño) según los criterios RECIST1.1. El tamaño total de las lesiones diana era de 218 mm, reducido en 13 mm en comparación con el valor inicial. La paciente está recibiendo tratamiento continuo en la actualidad.

Ejemplo 8

Una paciente de 32 años experimentaba un dolor en el lado externo de la parte inferior de la pierna derecha sin un factor predisponente obvio desde hacía 6 meses. El dolor era persistente, no estaba relacionado con movimientos como caminar y no podía aliviarse después del reposo. La paciente no recibió diagnóstico ni tratamiento y el dolor se agravó gradualmente y se presentaba por la noche. Se realizó una radiografía y la película mostró una lesión osteolítica en el extremo proximal del peroné derecho. La paciente acudió a consulta el 1 de diciembre de 2017 y el 5 de diciembre se le realizó una biopsia incisional del tumor de la extremidad. El diagnóstico anatomopatológico del 7 de diciembre sugirió un tumor maligno mesenquimatoso no microcítico en el peroné proximal derecho y, al combinar el diagnóstico anatomopatológico con la imagen clínica, no pudo descartarse un osteosarcoma. El 19 de abril de 2018, los hallazgos anatomopatológicos posoperatorios sugirieron un osteosarcoma en el peroné proximal derecho, acompañado de cambios ocurridos después de la quimioterapia, y la tasa de necrosis tumoral fue inferior al 90 %.

Se le administró quimioterapia con metotrexato durante 1 día el 12 de diciembre de 2017, el 7 de febrero de 2018, el 4 de mayo de 2018 y el 6 de julio de 2018, respectivamente. Se le administró quimioterapia IFO (1 ciclo) durante los siguientes períodos de tiempo: del 16 de diciembre de 2017 al 30 de diciembre de 2017, del 2 de marzo de 2018 al 7 de marzo de 2018 (el efecto terapéutico se evaluó como EE), del 18 de abril de 2018 al 22 de abril de 2018 (reducción de plaquetas (grado IV)), del 14 de junio de 2018 al 18 de junio de 2018 (el efecto terapéutico se evaluó como EE), del 30 de agosto de 2018 al 3 de septiembre de 2018 (el efecto terapéutico se evaluó como EP). Se administró quimioterapia con cisplatino y amrubicina (1 ciclo), respectivamente, durante los siguientes períodos: del 17 de enero de 2018 al 20 de enero de 2018, del 24 de mayo de 2018 al 27 de mayo de 2018 y del 20 de julio de 2018 al 23 de julio de 2018 (el efecto terapéutico se evaluó como EE). La evaluación integral reveló que la quimioterapia de primera línea fue tolerable para la paciente al principio (de diciembre de 2017 a marzo de 2018), la quimioterapia de segunda línea la toleró mal en un período posterior (después de abril de 2018), la depresión de la médula ósea fue evidente y la enfermedad de la paciente había progresado.

El historial médico de la paciente cumplía con los requisitos del ensayo clínico del clorhidrato de anlotinib como indicación para el tratamiento del osteosarcoma. La paciente fue tratada con diclorhidrato de anlotinib en cápsulas (12 mg) una vez al día por vía oral (2 semanas de administración continua y 1 semana de suspensión se consideran un ciclo de tratamiento) a partir el 12 de octubre de 2018. La primera evaluación del tumor, el 23 de noviembre de 2018, se realizó después de que la paciente había recibido 2 ciclos. En comparación con el valor inicial (37 mm) (el tamaño de las lesiones diana en el lóbulo medio del pulmón derecho era de 24 mm y el tamaño de las lesiones diana en el lóbulo inferior del pulmón derecho era de 13 mm), el tamaño de las lesiones diana se redujo a 20 mm (el tamaño de las lesiones diana en el lóbulo medio del pulmón derecho era de 10 mm y el tamaño de las lesiones diana en el lóbulo inferior del pulmón derecho era de 10 mm). El 3 de enero de 2019 se realizó la evaluación del tumor tras 4 ciclos de administración. La longitud total del diámetro de las lesiones diana fue de 16 mm (el tamaño de las lesiones diana en el lóbulo medio del pulmón derecho era de 10 mm y el tamaño de las lesiones diana en el lóbulo inferior del pulmón derecho era de 6 mm). La paciente está recibiendo tratamiento continuo en la actualidad.

Las descritas anteriormente son solo las realizaciones preferidas de la presente descripción.

Claims (15)

REIVINDICACIONES

1. Anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso en la inhibición del osteosarcoma y/o el condrosarcoma en un paciente que necesita tratamiento.

2. Anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso como potenciador del cisplatino en la inhibición del osteosarcoma y/o el condrosarcoma en un paciente que necesita tratamiento.

3. Anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso según la reivindicación 1 o 2, en donde la sal farmacéuticamente aceptable de anlotinib es clorhidrato de anlotinib, preferiblemente diclorhidrato.

4. Anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso según la reivindicación 1 o 2, en donde el fármaco inhibe el crecimiento y/o la metástasis y/o la recidiva del osteosarcoma y/o el condrosarcoma.

5. Anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso según la reivindicación 4, en donde la metástasis del osteosarcoma y/o el condrosarcoma es una migración y/o una invasión.

6. Anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso según la reivindicación 1 o 2, en donde el osteosarcoma es un osteosarcoma primario y/o un osteosarcoma secundario.

7. Anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso según la reivindicación 1 o 2, en donde el osteosarcoma es un osteosarcoma osteogénico y/o un osteosarcoma osteolítico.

8. Anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso según la reivindicación 1 o 2, en donde el osteosarcoma es un osteosarcoma osteoblástico, un osteosarcoma condroblástico y/o un osteosarcoma fibroblástico.

9. Anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso según la reivindicación 1 o 2, en donde el condrosarcoma es un condrosarcoma desdiferenciado y/o un condrosarcoma bien diferenciado.

10. Anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso según la reivindicación 1 o 2, en donde el osteosarcoma y/o el condrosarcoma es un osteosarcoma y/o un condrosarcoma avanzado y/o metastásico; preferiblemente, el osteosarcoma y/o el condrosarcoma metastásico es un osteosarcoma y/o un condrosarcoma con metástasis pulmonar.

11. Anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso según la reivindicación 1 o 2, en donde un sujeto con osteosarcoma y/o condrosarcoma ha sido tratado con quimioterapia y/o radioterapia; preferiblemente, el quimioterápico usado en la quimioterapia recibida por el sujeto con osteosarcoma y/o condrosarcoma incluye metotrexato, ifosfamida, cisplatino y doxorrubicina; y más preferiblemente, la enfermedad progresa después de que el sujeto con osteosarcoma y/o condrosarcoma haya sido tratado con quimioterapia y/o radioterapia.

12. Anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso según la reivindicación 1 o 2, en donde una dosis diaria de dicho anlotinib o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo administrada a un paciente se selecciona de entre 2 a 20 mg, 5 a 20 mg, 10 a 16 mg o 10 a 14 mg; preferiblemente 8 mg, 10 mg, 12 mg, 14 mg o 16 mg.

13. Anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso según la reivindicación 1 o 2, en donde el anlotinib o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo se administra a un paciente mediante administración intermitente, en donde la administración intermitente incluye un período de administración y un período de descanso, en donde la relación entre el período de administración y el período de descanso en términos de días se selecciona de entre las siguientes relaciones, de 2:0,5 a 5, 2:0,5 a 3, 2:0,5 a 2, 2:0,5 a 1; preferiblemente, la forma de administración intermitente es una administración continua durante 2 semanas y una suspensión durante 1 semana.

14. Anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso según la reivindicación 1, en donde el anlotinib o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo se administra a un paciente con osteosarcoma o condrosarcoma junto con otro u otros fármacos antineoplásicos de manera simultánea o secuencial, y dicho otro fármaco antineoplásico incluye un alquilante, un complejo de platino, un derivado de fluoropirimidina, camptotecina y un análogo de camptotecina, un antibiótico antineoplásico basado en antraquinona y taxanos; preferiblemente, dicho otro fármaco antineoplásico es el cisplatino.

15. Anlotinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso según la reivindicación 1, en donde el fármaco comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de anlotinib y un vehículo farmacéuticamente aceptable.