ES2939739T3 - Composiciones y métodos de uso de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida - Google Patents

Abstract

En este documento se proporcionan formulaciones y métodos de uso de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2- difluoroacetamida o un estereoisómero o mezcla de estereoisómeros, sal farmacéuticamente aceptable, tautómero, profármaco, solvato, hidrato, cocristal, clatrato o polimorfo del mismo. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Composiciones y métodos de uso de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida

SOLICITUDES RELACIONADAS

La presente solicitud reivindica el beneficio de las solicitudes provisionales de EE. UU. N.° 62/527.744, presentada el 30 de junio de 2017, 62/653.436, presentada el 5 de abril de 2018, y 62/673.064, presentada el 17 de mayo de 2018.

CAMPO

Se proporcionan formulaciones y formas farmacéuticas de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida o un estereoisómero o una mezcla de estereoisómeros, sal farmacéuticamente aceptable, tautómero, solvato, hidrato, cocristal, clatrato o polimorfo de la misma. También se proporcionan en el presente documento formas farmacéuticas para tratar, abordar y/o prevenir el cáncer. Por lo tanto, en el presente documento se proporcionan dichas formulaciones y formas farmacéuticas para su uso en métodos de tratamiento, abordaje y/o prevención del cáncer.

También se proporciona una combinación de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida o un estereoisómero o una mezcla de estereoisómeros, un isotopólogo, sal farmacéuticamente aceptable, tautómero, solvato, hidrato, cocristal, clatrato o polimorfo del mismo y un segundo agente para su uso en el tratamiento, la prevención, el abordaje y/o la mejora de un cáncer. Por lo tanto, en el presente documento se proporciona una combinación de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida o un estereoisómero o una mezcla de estereoisómeros, un isotopólogo, sal farmacéuticamente aceptable, tautómero, solvato, hidrato, cocristal, clatrato o polimorfo de la misma y un segundo agente para su uso en dichos métodos.

ANTECEDENTES

Se ha mostrado que la 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida o un estereoisómero o mezcla de estereoisómeros, sal farmacéuticamente aceptable, tautómero, profármaco, solvato, hidrato, cocristal, clatrato, o polimorfo de la misma, tiene actividades antineoplásicas. Formulaciones a modo de ejemplo del compuesto se desvelan en la publicación de EE. UU. N.° 2017-0196847, presentada el 6 de enero de 2017.

Existe una necesidad de métodos y formulaciones adicionales de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida o un estereoisómero o mezcla de estereoisómeros, sal farmacéuticamente aceptable, tautómero, profármaco, solvato, hidrato, cocristal, clatrato, o polimorfo de la misma, para el tratamiento del cáncer.

BREVE SUMARIO

El compuesto 1 usado en las formulaciones y métodos en el presente documento se describe en la patente de EE. UU. N.° 9.499.514 y la publicación internacional N.° WO 2016/007848. En una realización, el compuesto 1 es la forma polimorfa A, forma B, forma C, forma D, forma E o una forma amorfa de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida. En una realización, el compuesto 1 es la forma polimorfa C de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida. Los polimorfos de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida se describen en el presente ^{documento y en la publicación de EE.} U^u. ^{N.° 2017-0197934, presentada el 6 de enero de 2017.}

En una realización, que no se reivindica, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,2 %, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 3 %-6 %, hidroxipropil p-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 92-98 %, y no más de aproximadamente el 1 % de sulfóxido de dimetilo basado en el peso total de la formulación. En una realización, el tampón citrato comprende ácido cítrico anhidro y citrato de sodio anhidro.

En una realización, que no se reivindica, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,25 %, hidroxipropil p-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 99,1-99,9 %, y no más de aproximadamente el 0,5 % de ácido fórmico basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,01-0,15 %, hidroxipropil p-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 99.1- 99,99 %.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,01-0,15 %, hidroxipropil p-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 99.1- 99,99 %, y no más de aproximadamente el 0,5 % de ácido fórmico basado en el peso total de la formulación.

En una realización, que no se reivindica, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,2 %, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 3 %-6 %, sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 92-98 %, y no más de aproximadamente el 1 % de sulfóxido de dimetilo basado en el peso total de la formulación. En una realización, el tampón citrato comprende ácido cítrico anhidro y citrato de sodio anhidro.

En una realización, que no se reivindica, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,25 %, sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 99,1-99,9 %, y no más de aproximadamente el 0,5 % de ácido fórmico basado en el peso total de la formulación.

En una realización, las formulaciones son para su uso en el tratamiento, la prevención, el abordaje y/o la mejora de cánceres, que incluyen tumores sólidos y cánceres hematológicos, o uno o más síntomas o causas de los mismos, administrando el compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK. Por lo tanto, en el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en dichos métodos, en donde el método comprende administrar el compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK.

En una realización, los usos médicos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK.

En ciertas realizaciones, las formulaciones proporcionadas en el presente documento comprenden una forma sólida de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida. En ciertas realizaciones, las formulaciones proporcionadas en el presente documento comprenden una forma amorfa de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida.

En ciertas realizaciones, en el presente documento se proporciona una forma farmacéutica unitaria que comprende una formulación, en donde la formulación comprende el compuesto 1, un tampón y un agente espesante.

En un aspecto, las formulaciones que contienen concentraciones terapéuticamente eficaces del compuesto 1 se administran a un individuo que presenta los síntomas de la enfermedad o trastorno que se va a tratar. Las cantidades son eficaces para mejorar o eliminar uno o más síntomas de la enfermedad o trastorno.

Se proporciona además, pero no se reivindica, un envase o kit farmacéutico que comprende uno o más recipientes llenos de uno o más de los ingredientes de las composiciones farmacéuticas. Opcionalmente asociado(s) a dicho(s) recipiente(s) puede estar un aviso en la forma prescrita por una agencia gubernamental que regula la fabricación, el uso o la venta de productos farmacéuticos o productos biológicos, aviso que refleja la autorización por la agencia de fabricación, uso o la venta para administración humana. El envase o kit se puede etiquetar con información referente al modo de administración, secuencia de administración de fármacos (por ejemplo, por separado, uno detrás del otro o simultáneamente), o similares.

Estos y otros aspectos de la materia descrita en el presente documento serán evidentes tras la referencia a la siguiente descripción detallada.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS

La FIG. 1 representa un diagrama de apilamiento de difractogramas de rayos X en polvo de las formas A, B, C, D y E del compuesto 1.

La FIG. 2 representa un diagrama de difractogramas de rayos X en polvo (XRPD de la forma A del compuesto 1.

La FIG. 3 representa una imagen de SEM de la forma A del compuesto 1.

La FIG. 4 representa un diagrama del análisis termogravimétrico (TGA) de la forma A del compuesto 1.

La FIG. 5 representa un diagrama del termograma de calorimetría diferencial de barrido (DSC) de la forma A del compuesto 1.

La FIG. 6 proporciona un diagrama de isotermas de sorción dinámica de vapor (DVS) de la forma A del compuesto 1.

La FIG. 7 proporciona un espectro de RMN 1H de la forma A del compuesto 1.

La FIG. 8 representa la comparación de los diagramas de difractogramas de rayos X en polvo de la forma A del compuesto 1 antes (a) y después (b) de la compresión.

La FIG. 9 representa un diagrama de XRPD de la forma B del compuesto 1.

La FIG. 10 representa una imagen de SEM de la forma B del compuesto 1.

La FIG. 11 representa un diagrama del termograma de TGA de la forma B del compuesto 1.

La FIG. 12 representa un diagrama del termograma de DSC de la forma B del compuesto 1.

La FIG. 13 proporciona un diagrama de isotermas de DVS de la forma B del compuesto 1.

La FIG. 14 proporciona un espectro de RMN 1H de la forma B del compuesto 1.

La FIG. 15 representa la comparación de los diagramas de difractogramas de rayos X en polvo de la forma B del compuesto 1 antes (a) y después (b) de la compresión.

La FIG. 16 representa un diagrama de XRPD de la forma C del compuesto 1.

La FIG. 17 representa una imagen de SEM de la forma C del compuesto 1.

La FIG. 18 representa un diagrama del termograma de TGA de la forma C del compuesto 1.

La FIG. 19 representa un termograma de DSC de la forma C del compuesto 1.

La FIG. 20 proporciona un diagrama de isotermas de DVS de la forma C del compuesto 1.

La FIG. 21 proporciona un espectro de RMN 1H de la forma C del compuesto 1.

La FIG. 22 representa la comparación de los diagramas de difractogramas de rayos X en polvo de la forma C del compuesto 1 antes (a) y después (b) de la compresión.

La FIG. 23 representa un diagrama

de XRPD de la forma D del compuesto 1.

La FIG. 24 representa un diagrama del termograma de TGA de la forma D del compuesto 1.

La FIG. 25 representa un diagrama

de XRPD de la forma E del compuesto 1.

La FIG. 26 representa un diagrama del termograma de TGA de la forma E del compuesto 1.

La FIG. 27 representa el diagrama de termograma de DSC modulado del compuesto 1 amorfo.

La FIG. 28 representa un diagrama de XRPD del compuesto 1 amorfo.

La FIG. 29 representa un espectro de RMN 1H del compuesto 1 amorfo.

La FIG. 30 proporciona la solubilidad del compuesto 1 en diversos tipos, marcas y porcentajes de ciclodextrina junto con diferentes disolventes y relación entre disolvente y ciclodextrina.

La FIG. 31 proporciona el pH final de la disolución a granel frente al pH y la concentración del tampón citrato. La FIG. 32 proporciona el perfil de liofilización del lote de primer aumento de escala para la formulación Ib. La FIG. 33 proporciona disolvente residual en función del tiempo del proceso de liofilización para la formulación Ib.

La FIG. 34 proporciona el perfil de liofilización del lote del segundo aumento de escala para la formulación Ib. La FIG. 35 proporciona el diagrama de proceso de la formulación Ia.

La FIG. 36 proporciona el diagrama de proceso de la formulación Ib.

La FIG. 37 muestra el aumento en la solubilidad del compuesto 1 en función de la concentración de Kleptose a 25 °C (de abajo a arriba).

La FIG. 38 demuestra el efecto del aumento en la concentración de Kleptose sobre la precipitación del compuesto 1.

La FIG. 39 muestra la precipitación del compuesto 1 en disoluciones de Kleptose en condición refrigerada. La FIG. 40 ilustra el contorno del espacio de diseño para formulaciones del compuesto 1 y de Kleptose.

La FIG. 41 demuestra la disminución en la retirada de ácido fórmico al aumentar la cantidad de Kleptose por el mismo ciclo de liofilización.

La FIG. 42 demuestra el impacto del espesor de torta sobre el nivel de ácido fórmico residual.

La FIG. 43 muestra el ácido fórmico residual por mg de dosis frente a la concentración de Kleptose en prototipos de formulación Ic.

La FIG. 44 demuestra que la osmolalidad de disoluciones reconstituidas se correlaciona linealmente con la concentración de Kleptose.

La FIG. 45 proporciona perfiles de temperatura de producto para la liofilización de lote 1 a escala de laboratorio para la formulación Ic.

La FIG. 46 proporciona perfiles de temperatura de producto para la liofilización del lote 2 a escala de laboratorio para la formulación Ic.

La FIG. 47 proporciona perfiles de temperatura de producto para la liofilización del lote Ic-1 de desarrollo para la formulación Ic.

La FIG. 48 proporciona perfiles de temperatura de producto para la liofilización del lote Ic-2 de desarrollo para la formulación Ic.

La FIG. 49 proporciona perfiles de temperatura de producto para la liofilización del lote Ic-3 de desarrollo para la formulación Ic.

La FIG. 50 proporciona una diagrama de la humedad residual en función del tiempo del ciclo de liofilización para los lotes Ic-1 -F1, Ic-1 -F2, Ic-2-F1 y Ic-2-F2 de desarrollo, para la formulación Ic.

La FIG. 51 proporciona un diagrama del ácido fórmico residual en función del tiempo de secado secundario para los lotes Ic-1 -F1, Ic-1 -F2, Ic-2-F1, Ic-2-F2, Ic-3-F1 y Ic-3-F2 de desarrollo, para la formulación Ic.

La FIG. 52 proporciona perfiles de temperatura de producto para la liofilización del lote C1 para la formulación Ic. La FIG. 53 proporciona perfiles de temperatura de producto para la liofilización del lote C2 para la formulación Ic. La FIG. 54 ilustra el aspecto de la torta liofilizada para los lotes C1 y C2 para la formulación Ic.

La FIG. 55 proporciona un diagrama de proceso para la preparación de la formulación Ic.

La FIG. 56 proporciona la respuesta a la dosis de proliferación celular (CE⁵⁰) del compuesto 1 en presencia de diversas concentraciones de segundos agentes. Los datos demuestran los desplazamientos de CE⁵⁰ hacia valores más bajos en presencia de los segundos agentes, que indica una actividad sinérgica del compuesto 1 con el segundo agente. La sinergia se confirmó por análisis de Bliss.

La FIG. 57 proporciona curvas de respuesta a la dosis de proliferación celular para combinaciones del compuesto 1 con midostaurina y ruxolitinib en la estirpe celular MOLM-13.

La FIG. 58 proporciona un resumen de la sinergia observada para el compuesto 1 cuando se usa en combinación con everolimus o temsirolimus, como se mide por desplazamientos de CE⁵⁰ y por análisis de Bliss en estirpes celulares de tumor sólido.

La FIG. 59 proporciona curvas de respuesta a la dosis de proliferación celular para combinaciones del compuesto 1 con everolimus en diversas estirpes celulares de tumor sólido.

La FIG. 60 proporciona el efecto del compuesto 1 solo, y en combinaciones con everolimus (RAD, 2 nM, 20 nM y 200 nM) sobre la proliferación de células BON, 24 h después del tratamiento.

La FIG. 61 proporciona el efecto del compuesto 1 solo, y en combinaciones con everolimus (RAD, 2 nM, 20 nM y 200 nM) sobre la proliferación de células BON, 120 h después del tratamiento en placas 2D.

La FIG. 62 proporciona el efecto del compuesto 1 solo, y en combinaciones con everolimus (RAD, 2 nM, 20 nM y 200 nM) sobre la proliferación de células BON, 120 h después del tratamiento.

La FIG. 63 proporciona el efecto del compuesto 1 solo, y en combinaciones con everolimus (RAD, 2 nM, 20 nM y 200 nM) sobre la proliferación de células BON, 96 h después del tratamiento en placas 3D.

Las FIG. 64A y 64B proporcionan el efecto del compuesto 1 solo, y en combinaciones con everolimus (RAD, 2 nM, 20 nM y 200 nM) sobre la proliferación de células BON, 120 h después del tratamiento en placas 3D.

Las FIG. 65A y 65B proporcionan la respuesta a dosis del compuesto 1 y everolimus en un ensayo de proliferación ex vivo 3D que muestra la CI⁵⁰ y la máxima inhibición de los compuestos en el modelo GA0087 en experimentos duplicados.

La FIG. 66 proporciona la respuesta dependiente de la dosis de cisplatino (compuesto de referencia) en un ensayo de proliferación ex vivo 3D de GA0087 que muestra la CI⁵⁰ y la máxima inhibición del modelo de cisplatino (experimentos duplicados).

Las FIG. 67A y 67B proporcionan el efecto del compuesto 1 en un ensayo de combinación de matrices con everolimus en un modelo de proliferación celular 3D de GA0087 (experimentos duplicados).

Las FIG. 68A y 68B proporcionan el índice de combinación como se calcula por el método de Chou y Talalay para el compuesto 1 y everolimus en un modelo de proliferación celular 3D GA0087 (experimentos duplicados).

La FIG. 69 proporciona el efecto del compuesto 1 y everolimus, solos y en combinación, sobre el volumen del tumor en el modelo GA0087.

La FIG. 70 proporciona el efecto del compuesto 1 sobre los números de colonias en muestras de pacientes con mielofibrosis en un ensayo de formación de colonias.

La FIG. 71 proporciona el efecto del compuesto 1 sobre la viabilidad celular de células BaF3 que expresan hCRBN, hCRNB y JAK2 natural, o hCRBN y JAK2-V617F.

La FIG. 72 proporciona el efecto de ruxolitinib sobre la viabilidad celular de células BaF3 que expresan hCRBN, hCRNB y JAK2 natural, o hCRBN y JAK2-V617F.

La FIG. 73 proporciona el efecto de NS-18 sobre la viabilidad celular de células BaF3 que expresan hCRBN, hCRNB y JAK2 natural, o hCRBN y JAK2-V617F.

La FIG. 74 proporciona el efecto de momelotinib sobre la viabilidad celular de células BaF3 que expresan hCRBN, hCRNB y JAK2 natural, o hCRBN y JAK2-V617F.

La FIG. 75 proporciona el efecto de pacritinib sobre la viabilidad celular de células BaF3 que expresan hCRBN, hCRNB y JAK2 natural, o hCRBN y JAK2-V617F.

La FIG. 76 proporciona el efecto de fedratinib sobre la viabilidad celular de células BaF3 que expresan hCRBN, hCRNB y JAK2 natural, o hCRBN y JAK2-V617F.

La FIG. 77 proporciona el efecto de everolimus sobre la viabilidad celular de células BaF3 que expresan hCRBN, hCRNB y JAK2 natural, o hCRBN y JAK2-V617F.

La FIG. 78 proporciona el efecto de una combinación del compuesto 1 y NS-018 sobre la viabilidad celular de hCRBN, JAK2, JAK2-V617F recién transducidas; dependientes de IL3 y JAK2-V617F; estirpes celulares BaF independientes de IL3.

La FIG. 79 proporciona el efecto de una combinación del compuesto 1 y NS-018 a baja dosis sobre la viabilidad celular de hCRBN, JAK2, JAK2-V617F recién transducidas; dependientes de IL3, y JAK2-V617F; estirpes celulares BaF independientes de IL3.

La FIG. 80 proporciona el efecto de una combinación del compuesto 1 y ruxolitinib sobre la viabilidad celular de hCRBN, JAK2, JAK2-V617F recién transducidas; dependientes de IL3 y JAK2-V617F; estirpes celulares BaF independientes de IL3.

La FIG. 81 proporciona el efecto de una combinación del compuesto 1 y ruxolitinib a baja dosis sobre la viabilidad celular de hCRBN, JAK2, JAK2-V617F recién transducidas; dependientes de IL3 y JAK2-V617F; estirpes celulares BaF independientes de IL3.

La FIG. 82 proporciona el efecto de una combinación del compuesto 1 y momelotinib sobre la viabilidad celular de hCRBN, JAK2, JAK2-V617F recién transducidas; dependientes de IL3 y JAK2-V617F; estirpes celulares BaF independientes de IL3.

La FIG. 83 proporciona el efecto de una combinación del compuesto 1 y pacritinib sobre la viabilidad celular de hCRBN, JAK2, JAK2-V617F recién transducidas; dependientes de IL3, y JAK2-V617F; estirpes celulares BaF independientes de IL3.

La FIG. 84 proporciona el efecto de una combinación del compuesto 1 y fedratinib sobre la viabilidad celular de hCRBN, JAK2, JAK2-V617F recién transducidas; dependientes de IL3 y JAK2-V617F; estirpes celulares BaF independientes de IL3.

La FIG. 85 proporciona el efecto de una combinación del compuesto 1 y everolimus sobre la viabilidad celular de hCRBN, JAK2, JAK2-V617F recién transducidas; dependientes de IL3 y JAK2-V617F; estirpes celulares BaF independientes de IL3.

La FIG. 86 proporciona el efecto de NS-018 y ruxolitinib como agentes individuales sobre la viabilidad celular de estirpes celulares JAK2V617F de LMA.

La FIG. 87 proporciona el efecto de una combinación del compuesto 1 y NS-018 sobre la viabilidad celular de JAK2 V617F en estirpes celulares HEL, SET-2 y MUTZ-8 de LMA.

La FIG. 88 proporciona el efecto de una combinación del compuesto 1 y ruxolitinib sobre la viabilidad celular de JAK2 V617F en estirpes celulares HEL, SET-2 y MUTZ-8 de LMA.

La FIG. 89 proporciona el efecto de una combinación del compuesto 1 y everolimus sobre la viabilidad celular de células HEL, SET-2 y MUTZ-8 de LMA.

La FIG. 90 proporciona una visión general del efecto de inhibidores de JAK2 en combinación con el compuesto 1 en células Ja K2 V617F, en donde la sinergia se puntuó por desplazamiento de CE⁵⁰ y el método de Bliss.

La FIG. 91 proporciona programas de administración para una combinación del compuesto 1 y el inhibidor de IDH2 enasidenib (AG-221).

La FIG. 92 proporciona resultados de un análisis cualitativo de fenotipos en un ensayo de citometría de flujo.

La FIG. 93 proporciona el efecto de diferenciación de la combinación del compuesto 1 y enasidenib (AG-221) sobre células madre TF-1:IDH2RI40Q y células progenitoras (CD34+), y células eritroblásticas CD34VCD235+ como se muestra en los diagramas de dispersión del programa A.

La FIG. 94 proporciona el efecto de diferenciación del compuesto 1 y enasidenib sobre células madre TF-1:IDH2RI40Q y células progenitoras (CD34+/CD38+), y HSC (CD34+/c D38‘), y células no madres/progenitoras CD34-/CD38- usando los programas A, B o C.

La FIG. 95 proporciona el efecto de diferenciación del compuesto 1 y enasidenib sobre eritroblastos CD235a+ (glicoforinas A).

La FIG. 96 proporciona el efecto del compuesto 1 y enasidenib sobre la degradación de GSPT1 en varios subconjuntos de células en un ensayo TF1.

La FIG. 97 proporciona el efecto del compuesto 1 y enasidenib sobre la degradación de GSPT1 en varios subconjuntos de células en un ensayo TF1.

La FIG. 98 proporciona el efecto del compuesto 1 y enasidenib sobre la proliferación de células, como se muestra por la cifra total de células y la cifra de células HSC no diferenciadas (CD34+/CD38') y progenitoras (CD34+/CD38+).

La FIG. 99 muestra que el compuesto 1 en combinación con RAD produjo una disminución significativa en la proteína GSPT1 y cambios en proteínas fosforiladas que regulan la traducción y el metabolismo. Se realizó el análisis de transferencia Western en lisados celulares BON tratados durante 120 h con las concentraciones indicadas de vehículo, RAD y/o el compuesto 1 y se sondaron con anticuerpos indicados. Se usó la actina como control de carga.

Las FIG. 100A-100E muestran el efecto de combinación del tratamiento con el compuesto 1 e inhibidores que se dirigen a mTOR, FLT3, JAK2 o JAK3 sobre la proliferación celular en células U937 de LMA. La FIG. 100A muestra le combinación del compuesto 1 con el inhibidor de mTOR everolimus; la FIG. 100B muestra la combinación del compuesto 1 con el inhibidor de FLT3 quizartinib; la FIG. 100C muestra la combinación del compuesto 1 con el inhibidor de JAK2 ruxolitinib; la FIG. 100D muestra la combinación del compuesto 1 con el inhibidor de JAK2 AZD1480; y la FIG. 100E muestra la combinación del compuesto 1 con el inhibidor de JAK3 tofacitinib.

La FIG. 101 muestra el efecto de combinación del tratamiento con el compuesto 1 e inhibidores de mTOR, FLT3, JAK2 o JAK3 sobre la expresión de GSPT1, activación de mTOR, inducción de ATF4 y escisión de caspasa-3 en células U937 de LMA.

Las FIG. 102A-102G muestran el efecto del compuesto 1 con y sin venetoclax en las concentraciones indicadas sobre la proliferación de estirpes celulares de LMA cuando se incubaron durante 48 horas.

La FIG. 103 muestra los niveles relativos de ATP como una medida de la viabilidad en respuesta a varias combinaciones de dosis del compuesto 1 y venetoclax.

La FIG. 104 muestra el análisis de transferencia Western que mide GSPT1, Mcl-1, Bcl-2, caspasa 3 escindida y niveles de proteína GAPDH en células KG-1 16 horas después del tratamiento con un conjunto de dosis del compuesto 1, venetoclax y combinaciones del compuesto 1 y venetoclax.

Las FIG. 105A y 105B muestran los análisis en células vivas de confluencia de KG-1 (FIG. 105A) y recuentos de acontecimientos apoptósicos (FIG. 105B) después del tratamiento con el compuesto 1, venetoclax y combinaciones del compuesto 1 y venetoclax.

La FIG. 106 muestra el efecto de combinación del tratamiento con el compuesto 1 y everolimus sobre la expresión de GSPT1, activación de mTOR, expresión de Mcl-1 y escisión de caspasa-3.

La FIG. 107 muestra el efecto del compuesto 1 sobre células mononucleares de la médula ósea o blastocitos CD34+ aislados de 2 pacientes diferentes con síndrome mielodisplásico ensayado por cultivo líquido.

La FIG. 108 muestra el efecto del compuesto 1 sobre las células mononucleares de la médula ósea de pacientes con síndrome mielodisplásico ensayado por cultivo líquido (A) o ensayo de formación de colonias (B).

La FIG. 109 muestra el efecto del compuesto 1 sobre la activación de caspasa-3 y degradación de GSPT1 en células mononucleares de médula ósea de un paciente con síndrome mielodisplásico, cuando se prueba como un único agente o en combinación con everolimus 111 nM después de 24 horas de exposición al (a los) compuesto(s).

DESCRIPCIÓN DETALLADA

Definiciones

En general, la nomenclatura usada en el presente documento y los procedimientos de laboratorio en química orgánica, química medicinal y farmacología descritos en el presente documento son los bien conocidos y comúnmente empleados en la técnica. A menos que se defina de otro modo, todos los términos técnicos y científicos usados en el presente documento tienen, en general, el mismo significado que comúnmente es entendido por un experto habitual en la técnica a la que pertenece la presente divulgación. En general, la enseñanza técnica de una realización se puede combinar con la desvelada en otras realizaciones proporcionadas en el presente documento.

El uso de la palabra "un" o "una", cuando se usa junto con el término "que comprende" en las reivindicaciones y/o la memoria descriptiva, puede significar "uno", pero también está de acuerdo con el significado de "uno o más", "al menos uno" y "uno o más de uno".

Como se usa en el presente documento, los términos "que comprende" y "que incluye" se pueden usar indistintamente. Los términos "que comprende" y "que incluye" se deben interpretar como que especifican la presencia de las características o componentes establecidos a los que se hace referencia, pero no descarta la presencia o adición de una o más características, o componentes, o grupos de los mismos. Además, los términos "que comprende" y "que incluye" pretenden incluir ejemplos englobados por el término "que consiste en". Por consiguiente, el término "que consiste en" se puede usar en lugar de los términos "que comprende" y "que incluye" para proporcionar realizaciones más específicas de la invención.

El término "que consiste en" significa que una materia tiene al menos el 90 %, 95 %, 97 %, 98 % o 99 % de las características o componentes establecidos que lo componen. En otra realización, el término "que consiste en" excluye el alcance de cualquier citación posterior de cualquier otra característica o componente, exceptuando aquellas que no son esenciales para el efecto técnico a lograr.

Como se usa en el presente documento, el término "o" se debe interpretar como un "o" inclusivo que significa uno cualquiera o cualquier combinación. Por lo tanto, "A, B o C" significa cualquiera de lo siguiente: "A; B; C; A y B; A y C; B y C; A, B y C". Una excepción a esta definición ocurrirá solo cuando una combinación de elementos, funciones, etapas o actos sea de alguna forma inherentemente mutuamente excluyente. Por ejemplo, "tratar, prevenir o abordar" o listados similares significa: "tratar; prevenir; abordar; tratar y prevenir; tratar y abordar; prevenir y abordar; tratar, prevenir y abordar".

El término "compuesto 1" se refiere a "2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida" que tiene la estructura:

y sus estereoisómeros o mezcla de estereoisómeros, sales farmacéuticamente aceptables, tautómeros, profármacos, solvatos, hidratos, cocristales, clatratos, o polimorfos de la misma. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se refiere a 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida y sus tautómeros. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se refiere a un polimorfo de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, tal como la forma A, B, C, D o E, o una mezcla de las mismas. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se refiere a la forma polimorfa C de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se refiere a una forma amorfa de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida. En una realización, el estereoisómero es un enantiómero.

A menos que se establezca específicamente de otro modo, donde un compuesto pueda adoptar formas tautómeras, regioisoméricas y/o estereoisoméricas alternativas, todos los isómeros alternativos pretenden estar englobados dentro del alcance de la materia reivindicada. Por ejemplo, donde un compuesto puede tener una de dos formas tautómeras, se pretende que ambos tautómeros estén englobados en el presente documento.

Por lo tanto, los compuestos en el presente documento pueden ser enantioméricamente puros, o ser mezclas estereoisoméricas o diaestereoméricas. Como se usa en el presente documento y a menos que se indique lo contrario, el término "estereoisoméricamente pura" significa una composición que comprende un estereoisómero de un compuesto y está sustancialmente libre de otros estereoisómeros de ese compuesto. Por ejemplo, una composición estereoisoméricamente pura de un compuesto que tiene un centro quiral estará sustancialmente libre del enantiómero opuesto del compuesto. Una composición estereoisoméricamente pura de un compuesto que tiene dos centros quirales estará sustancialmente libre de otros diaestereómeros del compuesto. Un compuesto estereoisoméricamente puro típico comprende más de aproximadamente el 80 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 20 % en peso de otros estereoisómeros del compuesto, más preferentemente más de aproximadamente el 90 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 10 % en peso de los otros estereoisómeros del compuesto, incluso más preferentemente más de aproximadamente el 95 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 5 % en peso de los otros estereoisómeros del compuesto, y lo más preferentemente más de aproximadamente el 97 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 3 % en peso de los otros estereoisómeros del compuesto. Un compuesto estereoisoméricamente puro como se usa en el presente documento comprende más de aproximadamente el 80 % en peso de un estereoisómero del compuesto, más preferentemente más de aproximadamente el 90 % en peso de un estereoisómero del compuesto, incluso más preferentemente más de aproximadamente el 95 % en peso de un estereoisómero del compuesto, y lo más preferentemente más de aproximadamente el 97 % en peso de un estereoisómero del compuesto. Como se usa en el presente documento y a menos que se indique lo contrario, el término "estereoisoméricamente enriquecida" significa una composición que comprende más de aproximadamente el 60 % en peso de un estereoisómero de un compuesto, preferentemente más de aproximadamente el 70 % en peso, más preferentemente más de aproximadamente el 80 % en peso de un estereoisómero de un compuesto. Como se usa en el presente documento y a menos que se indique lo contrario, el término "enantioméricamente pura" significa una composición estereoisoméricamente pura de un compuesto que tiene un centro quiral. Similarmente, el término "estereoisoméricamente enriquecida" significa una composición estereoisoméricamente enriquecida de un compuesto que tiene un centro quiral. Como se usa en el presente documento, mezclas estereoisoméricas o diaestereoméricas significan una composición que comprende más de un estereoisómero de un compuesto. Una mezcla estereoisomérica típica de un compuesto comprende aproximadamente 50 % en peso de un estereoisómero del compuesto y aproximadamente 50 % en peso de los otros estereoisómeros del compuesto, o comprende más de aproximadamente el 50 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 50 % en peso de otros estereoisómeros del compuesto, o comprende más de aproximadamente el 45 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 55 % en peso de los otros estereoisómeros del compuesto, o comprende más de aproximadamente el 40 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 60 % en peso de los otros estereoisómeros del compuesto, o comprende más de aproximadamente el 35 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 65 % en peso de los otros estereoisómeros del compuesto.

Como se usa en el presente documento, API se refiere al compuesto 1. En ciertas realizaciones, API se refiere a 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida.

Como se usa en el presente documento, las abreviaturas de cualquier grupo protector, aminoácido y otros compuestos están, a menos que se indique lo contrario, de acuerdo con su uso común, abreviaturas reconocidas o la Comisión de Nomenclatura Bioquímica ⁱU^pAC-IUB (véase, Biochem. 1972, 11:942-944).

Como se usa en el presente documento, y a menos que se especifique de otro modo, el término "liofilizar" se refiere al proceso de aislar una sustancia sólida de disolución y/o retirada de disolvente. En algunas realizaciones, esto se puede lograr por diversas técnicas conocidas para un experto en la técnica, que incluyen, por ejemplo, evaporación (por ejemplo, a vacío, por ejemplo por liofilización, y/o congelación de la disolución y vaporización del disolvente congelado en condiciones de vacío o a presión reducida, etc.)

Como se usa en el presente documento, el término "codisolvente" se refiere a un disolvente que ayuda en la solubilización de un agente activo en agua durante la fabricación de una formulación proporcionada en el presente documento. El codisolvente puede ser un disolvente que también proporciona estabilidad suficiente de la formulación intermedia durante la fabricación. El codisolvente también se puede retirar de la formulación, o ser reducido a un nivel aceptable, durante la fabricación. Los ejemplos de codisolventes incluyen acetonitrilo, cloroformo, terc-butanol, metanol, tetrahidrofurano, ácido fórmico, ácido acético, acetona, anisol, butanol, acetato de butilo, terc-butil metil éter, etanol, acetato de etilo, etil éter, formiato de etilo, heptanos, acetato de isobutilo, acetato de isopropilo, acetato de metilo, 3-metil-butanol, metiletil cetona, metilisobutil cetona, 2-metil-1-propanol, pentano, 1-pentanol, 1-propanol, 2-propanol y acetato de propilo.

Como se usa en el presente documento, y a menos que se especifique de otro modo, el término "sustancialmente libre de" significa que contienen no más de una cantidad insignificativa. En algunas realizaciones, una composición o preparado está "sustancialmente libre de" un elemento citado si contiene menos del 5 %, 4 %, 3 %, 2 % o 1 %, en el peso del elemento. En algunas realizaciones, la composición o preparado contiene menos del 0,9 %, 0,8 %, 0,7 %, 0,6 %, 0,5 %, 0,4 %, 0,3 %, 0,2 %, 0,1 % o menos del elemento citado. En algunas realizaciones, la composición o preparado contiene una cantidad indetectable del elemento citado.

Como se usa en el presente documento, "disolución acuosa reconstituida" o "composición acuosa reconstituida" o "formulación acuosa reconstituida" se refiere a una disolución acuosa obtenida disolviendo una formulación liofilizada proporcionada en el presente documento en un disolvente acuoso.

El término "diluyente acuoso" usado en el presente documento se refiere a un líquido acuoso capaz de ser incluido en una formulación parenteral. Dichos diluyentes acuosos pueden incluir, por ejemplo, agua, solución salina, solución salina al 0,45 % o dextrosa si se desea, así como cualquiera de los conservantes o excipientes conocidos secundarios comúnmente encontrados como parte de las formulaciones parenterales. Los diluyentes acuosos a modo de ejemplo incluyen agua, 5 % de disolución de dextrosa y similares.

Como se usa en el presente documento, y a menos que se especifique de otro modo, el término "parenteral" incluye inyección subcutánea, intravenosa, intramuscular, intrartricular, intrasinovial, intraesternal, intratecal, intrahepática, intralesional e intracraneal, o técnicas de infusión.

Como se usa en el presente documento, y a menos que se especifique de otro modo, la expresión "dosis unitaria" se refiere a una unidad físicamente discreta de una formulación apropiada para un sujeto que se va a tratar (por ejemplo, para una dosis única); conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada de un agente activo seleccionado para producir un efecto terapéutico deseado (entendiéndose que se pueden requerir dosis múltiples para lograr un efecto deseado u óptimo), opcionalmente junto con un portador farmacéuticamente aceptable, que se puede proporcionar en una cantidad predeterminada. La dosis unitaria puede ser, por ejemplo, un volumen de líquido (por ejemplo, un portador aceptable) que contiene una cantidad predeterminada de uno o más agentes terapéuticos, una cantidad predeterminada de uno o más agentes terapéuticos en forma sólida, una formulación de liberación sostenida o dispositivo de administración de fármaco que contiene una cantidad predeterminada de uno o más agentes terapéuticos, etc. Se apreciará que una dosis unitaria puede contener una variedad de componentes además de agente(s) terapéutico(s). Por ejemplo, se pueden incluir portadores aceptables (por ejemplo, portadores farmacéuticamente aceptables), diluyentes, estabilizadores, tampones, conservantes, etc., como se describe más adelante. Se entenderá, sin embargo, que el uso diario total de una formulación de la presente divulgación será decidido por el médico adjunto dentro del alcance de criterio médico sensato. El nivel de dosis eficaz específica para cualquier sujeto particular u organismo puede depender de una variedad de factores que incluyen el trastorno que está tratándose y la gravedad del trastorno; la actividad del compuesto activo específico empleado; la composición específica empleada; la edad, el peso corporal, la salud general, el sexo y la dieta del sujeto; el momento de administración y la velocidad de eliminación del compuesto activo específico empleado; la duración del tratamiento; los fármacos y/o terapias adicionales usadas en combinación o coincidentes con el (los) compuesto(s) específico(s) empleado(s), y factores similares bien conocidos en las artes médicas.

Como se usa en el presente documento, el término "forma sólida" se refiere a una forma cristalina o una forma amorfa o una mezcla de las mismas de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida o un estereoisómero o mezcla de estereoisómeros, sal farmacéuticamente aceptable, tautómero, solvato, hidrato, cocristal, clatrato, o polimorfo de la misma.

Como se usa en el presente documento, a menos que se especifique de otro modo, el término "sal(es) farmacéuticamente aceptable(s)", como se usa en el presente documento, incluye, pero no se limita a, sales de restos ácidos o básicos del compuesto 1. Los restos básicos son capaces de formar una amplia variedad de sales con diversos ácidos inorgánicos y orgánicos. Los ácidos que se pueden usar para preparar sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables de dichos compuestos básicos son los que forman sales de adición de ácido no tóxicas, por ejemplo, sales que contienen aniones farmacológicamente aceptables. Los ácidos orgánicos adecuados incluyen, pero no se limitan a, maleico, fumárico, benzoico, ascórbico, succínico, acético, fórmico, oxálico, propiónico, tartárico, salicílico, cítrico, glucónico, láctico, mandélico, cinámico, oleico, tánico, aspártico, esteárico, palmítico, glicólico, glutámico, glucónico, glucarónico, sacárico, isonicotínico, metanosulfónico, etanosulfónico, p-toluenosulfónico, ácidos bencenosulfónicos, o ácidos pamoicos (por ejemplo, 1,1'-metilen-bis-(2-hidroxi-3-naftoato)). Los ácidos inorgánicos adecuados incluyen, pero no se limitan a, ácidos clorhídrico, bromhídrico, yodhídrico, sulfúrico, fosfórico o nítrico. Los compuestos que incluyen un resto de amina pueden formar sales farmacéuticamente aceptables con diversos aminoácidos, además de los ácidos mencionados anteriormente. Los restos químicos que son de naturaleza ácida son capaces de formar sales de base con diversos cationes farmacológicamente aceptables. Los ejemplos de dichas sales son sales de metales alcalinos o metales alcalinotérreos y, particularmente, sales de calcio, magnesio, sodio, litio, cinc, potasio o hierro.

Como se usa en el presente documento, y a menos que se especifique de otro modo, el término "solvato" significa un compuesto proporcionado en el presente documento o una sal del mismo que incluye además una cantidad estequiométrica o no estequiométrica de disolvente unido por fuerzas intermoleculares no covalentes. Donde el disolvente es agua, el solvato es un hidrato.

Como se usa en el presente documento y a menos que se indique lo contrario, el término "profármaco" significa un derivado de un compuesto que puede hidrolizar, oxidar o reaccionar de otro modo en condiciones biológicas (in vitro o in vivo) para proporcionar el compuesto. Los ejemplos de profármacos incluyen, pero no se limitan a, los derivados de compuestos descritos en el presente documento (por ejemplo, el compuesto 1) que incluyen restos biohidrolizables, tales como amidas biohidrolizables, ésteres biohidrolizables, carbamatos biohidrolizables, carbonatos biohidrolizables, ureidos biohidrolizables y análogos de fosfato biohidrolizables.

Un "excipiente farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sustancia que ayuda en la administración de un agente activo a un sujeto, por ejemplo, modificando la estabilidad de un agente activo o modificando la absorción por un sujeto tras la administración. Un excipiente farmacéuticamente aceptable no tiene normalmente un efecto toxicológico adverso significativo sobre el paciente. Los ejemplos de excipientes farmacéuticamente aceptables incluyen, por ejemplo, agua, NaCl (incluyendo disoluciones de sal), soluciones salinas normales, solución salina al 0,45 %, sacarosa, glucosa, agentes espesantes, tampones, aglutinantes, materiales de relleno, disgregantes, lubricantes, recubrimientos, edulcorantes, aromas, alcoholes, aceites, gelatinas, hidratos de carbono, tales como amilosa o almidón, ésteres de ácidos grasos, hidroximetilcelulosa, polivinilpirrolidina, y colorantes, y similares. Un experto en la técnica reconocerá que otros excipientes farmacéuticos conocidos en la técnica son útiles en la presente invención e incluyen los listados en, por ejemplo, the Handbook of Pharmaceutical Excipients, Rowe R.C., Shesky P.J., y Quinn M.E., 6a ed., The Pharmaceutical Press, RPS Publishing (2009). Los términos "agente espesante", y "tampón" se usan según el significado plano y ordinario dentro de la técnica.

Como se usa en el presente documento, y a menos que se especifique de otro modo, el término "aproximadamente", cuando se usa a propósito de dosis, cantidades o porcentaje en peso de componentes de una composición o una forma farmacéutica, significa dosis, cantidad o porcentaje en peso que es reconocido por los expertos habituales en la técnica para proporcionar un efecto farmacológico equivalente al obtenido a partir de la dosis, cantidad o porcentaje en peso especificado que está englobado. Específicamente, el término "aproximadamente" contempla una dosis, cantidad o porcentaje en peso dentro del 10 %, o 5 % de la dosis, cantidad, o porcentaje en peso especificado que está englobado.

Como se usa en el presente documento, y a menos que se especifique de otro modo, el término "estable", cuando se usa a propósito de una formulación líquida o una forma farmacéutica, significa que el principio activo de la formulación o forma farmacéutica sigue solubilizado durante una cantidad especificada de tiempo y no se degrada o agrega significativamente o llega a modificarse de otro modo (por ejemplo, como se determina, por ejemplo, por HPLC). En algunas realizaciones, aproximadamente el 70 % o más, aproximadamente el 80 % o más o aproximadamente el 90 % o más del compuesto sigue solubilizado después del periodo especificado. Estabilidad también puede referirse a la compatibilidad de excipientes farmacéuticamente aceptables descritos en el presente documento. Por consiguiente, una forma farmacéutica se pueden considerar estable cuando los excipientes farmacéuticamente aceptables y agente(s) activo(s) combinados descritos en el presente documento no se degradan o modifican de otro modo (por ejemplo, reaccionan con) la eficacia o valor terapéutico de un agente activo descrito en el presente documento.

Como se usa en el presente documento, y a menos que se especifique de otro modo, el término "estable", cuando se usa a propósito de una formulación sólida o una forma farmacéutica, significa que el principio activo de la formulación o forma farmacéutica no se degrada significativamente, descompone o llega a modificarse de otro modo (por ejemplo, como se determina, por ejemplo, por HPLC). En algunas realizaciones, aproximadamente el 85 % o más, aproximadamente el 90 % o más, aproximadamente el 95 % o más o aproximadamente el 98 % o más del principio activo sigue invariable después del periodo especificado. Estabilidad también puede referirse a la compatibilidad de excipientes farmacéuticamente aceptables descritos en el presente documento. Por consiguiente, una forma farmacéutica se puede considerar estable cuando los excipientes farmacéuticamente aceptables y agente(s) activo(s) combinado(s) descritos en el presente documento no se degradan o modifican de otro modo (por ejemplo, reaccionan con) la eficacia o valor terapéutico de un agente activo descrito en el presente documento.

Como se usa en el presente documento, "administrar" o "administración" se refiere al acto de suministrar físicamente una sustancia como existe fuera del cuerpo en un sujeto. La administración incluye todas las formas conocidas en la técnica para administrar agentes terapéuticos, que incluyen, pero no se limitan a, inyecciones tópicas, mucosas, administración intradérmica, intravenosa, intramuscular u otro método de administración física descrita en el presente documento o conocido en la técnica (por ejemplo, implantación de un dispositivo de liberación lenta, tal como una mini­ bomba osmótica a un sujeto; formulaciones liposomales; yugal; sublingual; palatal; gingival; nasal; vaginal; rectal; intrarterial; intraperitoneal; intraventricular; intracraneal; o transdérmica).

"Antineoplásicos" se refiere a antimetabolitos (por ejemplo, 5-fluoro-uracilo, metotrexato, fludarabina), agentes antimicrotúbulos (por ejemplo, alcaloides de la vinca, tales como vincristina, vinblastina; taxanos, tales como paclitaxel, docetaxel), agentes alquilantes (por ejemplo, ciclofosfamida, melfalán, carmustina, nitrosoureas tales como biscloroetilnitrosurea e hidroxiurea), agentes de platino (por ejemplo, cisplatino, carboplatino, oxaliplatino, JM-216 o satraplatino, CI-973), antraciclinas (por ejemplo, doxorubicina, daunorubicina), antibióticos antitumorales (por ejemplo, mitomicina, idarubicina, adriamicina, daunomicina), inhibidores de la topoisomerasa (por ejemplo, etopósido, camptotecinas), agentes antiangiogénesis (por ejemplo, Sutent®, malato de sunitinib y bevacizumab) o cualquier otro agente citotóxico (fosfato de estramustina, prednimustina), hormonas o agonistas de hormonas, antagonistas, agonistas parciales o antagonistas parciales, inhibidores de cinasas, inhibidores del punto de control y tratamiento con radiación.

Por "coadministrar" se indica que los compuestos, composiciones o agentes descritos en el presente documento se administran al mismo tiempo, justo antes de o justo después de la administración de uno o más compuestos adicionales, composiciones o agentes, que incluyen, por ejemplo, un antineoplásico. La coadministración pretende incluir administración simultánea o secuencial de compuestos, composiciones o agentes individualmente o en combinación (más de un compuesto o agente). La coadministración incluye administrar dos compuestos, composiciones o agentes simultáneamente, aproximadamente simultáneamente (por ejemplo, en aproximadamente 1,5, 10, 15, 20 o 30 minutos entre sí), o uno detrás del otro en cualquier orden. Por lo tanto, la coadministración puede incluir administrar un agente activo (por ejemplo, un compuesto descrito en el presente documento) en 0,5, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 20 o 24 horas de un segundo agente activo. La coadministración también se puede llevar a cabo por coformulación, por ejemplo, preparando una forma farmacéutica única que incluye ambos agentes activos. Los agentes activos se pueden formular por separado. En dichos casos, los agentes activos se mezclan e incluyen juntos en la forma final de la unidad de administración. Alternativamente, la coadministración como se describe en el presente documento puede incluir administrar dos formas farmacéuticas unitarias separadas de al menos dos agentes activos separados (por ejemplo, el compuesto 1 y un segundo agente activo descrito en el presente documento).

Como se usa en el presente documento, el término "diariamente" pretende significar que un compuesto terapéutico, tal como el compuesto 1, se administra una vez o más de una vez cada día durante un periodo de tiempo. El término "continuo" pretende significar que un compuesto terapéutico, tal como el compuesto 1, se administra diariamente durante un periodo ininterrumpido de al menos 10 días a 52 semanas. El término "intermitente" o "intermitentemente", como se usa en el presente documento, pretende significar detener y empezar en o intervalos regulares o irregulares. Por ejemplo, la administración intermitente del compuesto 1 es la administración durante uno a seis días por semana, la administración en ciclos (por ejemplo, administración durante uno a diez días consecutivos de un ciclo de 28 días, luego un periodo de descanso sin administración durante el resto del ciclo de 28 días o administración diaria durante dos a ocho semanas consecutivas, luego un periodo de descanso sin administración durante hasta una semana), o administración en días alternos. El término "cíclico", como se usa en el presente documento, pretende significar que un compuesto terapéutico, tal como el compuesto 1, se administra diariamente o continuamente pero con un periodo de descanso.

Una "terapia cíclica" se refiere a un régimen o terapia que incluye un periodo de administración como se describe en el presente documento y un periodo de descanso como se describe en el presente documento.

El término "periodo de administración" como se usa en el presente documento se refiere a un periodo de tiempo en el que un sujeto se administra continua o activamente con un compuesto o composición descrita en el presente documento.

El término "periodo de descanso" como se usa en el presente documento se refiere a un periodo de tiempo, frecuentemente tras un periodo de administración, donde un sujeto no es administrado con un compuesto o composición descrito en el presente documento (por ejemplo, interrupción del tratamiento). En ciertas realizaciones, un "periodo de descanso" se refiere a un periodo de tiempo donde un agente individual no se administra a un sujeto o se interrumpe el tratamiento usando un compuesto particular. En dichas realizaciones, se puede administrar al sujeto un segundo agente terapéutico (por ejemplo, un agente diferente del compuesto o composición administrado en el periodo de administración previo).

Una "cantidad eficaz" es una cantidad suficiente para lograr el efecto para la que se administra (por ejemplo, tratar una enfermedad o reducir uno o más síntomas de una enfermedad o afección). Por lo tanto, la administración de una "cantidad" de un compuesto descrito en el presente documento a un sujeto se refiere a la administración de "una cantidad eficaz" para lograr el resultado terapéutico deseado. Una "cantidad terapéuticamente eficaz" de un compuesto descrito en el presente documento para los fines en el presente documento se determina así por dichas consideraciones como se conocen en la técnica. El término "cantidad terapéuticamente eficaz" de una composición descrita en el presente documento se refiere a la cantidad de la composición que, cuando se administra, es suficiente para tratar uno o más de los síntomas de una enfermedad descrita en el presente documento (por ejemplo, cáncer, por ejemplo LMA, SMD, NMP o tumores sólidos). La administración de un compuesto descrito en el presente documento se puede determinar según factores tales como, por ejemplo, el estado de enfermedad, la edad, el sexo y el peso del individuo. Una cantidad terapéuticamente eficaz también se refiere a cualquiera en la que los efectos tóxicos o perjudiciales del compuesto 1 son compensados por los efectos terapéuticamente beneficiosos.

Como se usa en el presente documento, y a menos que se especifique de otro modo, los términos "tratar", "que trata" y "tratamiento" se refieren a la erradicación o mejora de una enfermedad o trastorno, o de uno o más síntomas asociados a la enfermedad o trastorno. En ciertas realizaciones, los términos se refieren a minimizar la diseminación o el empeoramiento de la enfermedad o trastorno resultante de la administración de uno o más agentes profilácticos o terapéuticos a un paciente con dicha enfermedad o trastorno. En algunas realizaciones, los términos se refieren a la administración de un compuesto proporcionado en el presente documento, con o sin otro agente activo adicional, después de la aparición de síntomas de la enfermedad particular. En una realización, la enfermedad es leucemia, que incluye, pero no se limita a, leucemia linfocítica crónica (LLC), leucemia mielocítica crónica (LMC), leucemia linfoblástica aguda (LLA), leucemia mieloide aguda o leucemia mieloblástica aguda (LMA). En una realización, la leucemia puede ser recidivante, insensible o resistente a al menos una terapia antineoplásica. En una realización, la enfermedad es LMA, que incluye un subtipo de LMA tratado en el presente documento. En una realización, la enfermedad es síndrome mielodisplásico SMD, que incluye, un subtipo de SMD tratado en el presente documento.

Como se usa en el presente documento, y a menos que se especifique de otro modo, los términos "prevenir", "que previene" y "prevención" se refieren a la prevención de la aparición, reaparición o diseminación de una enfermedad o trastorno, o de uno o más síntomas del mismo. En ciertas realizaciones, los términos se refieren al tratamiento con o la administración de un compuesto proporcionado en el presente documento, con o sin otro compuesto activo adicional, antes de la aparición de síntomas, particularmente a pacientes en riesgo de enfermedades o trastornos proporcionados en el presente documento. Los términos engloban la inhibición o la reducción de un síntoma de la enfermedad particular. Los pacientes con antecedentes familiares de una enfermedad en particular son candidatos para regímenes preventivos en ciertas realizaciones. Además, los pacientes que tienen antecedentes de síntomas recurrentes también son posibles candidatos para la prevención. A este respecto, el término "prevención" se puede usar indistintamente con el término "tratamiento profiláctico". En una realización, la enfermedad es leucemia, que incluye, pero no se limita a, leucemia linfocítica crónica, leucemia mielocítica crónica, leucemia linfoblástica aguda, leucemia mieloide aguda y leucemia mieloblástica aguda. En una realización, la leucemia puede ser recidivante, insensible o resistente a al menos una terapia antineoplásica. En una realización, la enfermedad es LMA, que incluye un subtipo de LMA tratado en el presente documento. En una realización, la enfermedad es SMD, que incluye un subtipo de s Md tratado en el presente documento.

Como se usa en el presente documento, y a menos que se especifique de otro modo, los términos "abordar", "que aborda" y "abordaje" se refieren a prevenir o ralentizar la progresión, diseminación o empeoramiento de una enfermedad o trastorno, o de uno o más síntomas del mismo. Frecuentemente, los efectos beneficiosos que un paciente obtiene de un agente profiláctico y/o terapéutico no producen una cura de la enfermedad o trastorno. A este respecto, el término "abordar" engloba tratar un paciente que había padecido la enfermedad particular en un intento por prevenir o minimizar la reaparición de la enfermedad, o prolongar el tiempo durante el que sigue en remisión. En una realización, la enfermedad es leucemia, que incluye, pero no se limita a, leucemia linfocítica crónica, leucemia mielocítica crónica, leucemia linfoblástica aguda, leucemia mieloide aguda y leucemia mieloblástica aguda. En una realización, la leucemia puede ser recidivante, insensible o resistente a al menos una terapia antineoplásica. En una realización, la enfermedad es LMA, que incluye un subtipo de LMA tratado en el presente documento. En una realización, la enfermedad es SMD, que incluye un subtipo de SMD tratado en el presente documento.

Como se usa en el presente documento, "terapia de inducción" se refiere al primer tratamiento dado para una enfermedad, o al primer tratamiento dado con la intención de inducir la remisión completa en una enfermedad, tal como el cáncer. Cuando se usa por sí mismo, la terapia de inducción es la aceptada como el mejor tratamiento disponible. Por ejemplo, la terapia de inducción para la LMA comprende el tratamiento con citarabina durante 7 días más el tratamiento con una antraciclina, tal como daunorubicina o idarubicina, durante 3 días. Si se detecta leucemia residual, los pacientes se tratan con otro ciclo de quimioterapia, denominada reinducción. Si el paciente está en remisión completa después de la terapia de inducción, entonces se administra terapia de consolidación y/o mantenimiento adicional para prolongar la remisión o para posiblemente curar al paciente.

Como se usa en el presente documento, "terapia de consolidación" se refiere al tratamiento dado para una enfermedad después de que primero se logre la remisión. Por ejemplo, la terapia de consolidación para el cáncer es el tratamiento dado después de que el cáncer haya desaparecido después de la terapia inicial. La terapia de consolidación puede incluir radioterapia, trasplante de células madre o tratamiento con farmacoterapia para el cáncer. La terapia de consolidación también se denomina terapia de intensificación y terapia post-remisión.

Como se usa en el presente documento, "terapia de mantenimiento" se refiere al tratamiento dado para una enfermedad después de logra la remisión o la mejor respuesta, para prevenir o retrasar la recaída. La terapia de mantenimiento puede incluir quimioterapia, terapia con hormonas o terapia dirigida.

"Remisión", como se usa en el presente documento, es una disminución o desaparición de los signos y síntomas de un cáncer, por ejemplo, mieloma múltiple. En la remisión parcial han desaparecido algunos, pero no todos, los signos y síntomas del cáncer. En la remisión completa, han desaparecido todos los signos y síntomas del cáncer, aunque el cáncer todavía puede estar en el cuerpo.

Los términos "sujeto", "paciente", "sujeto en necesidad del mismo" y "paciente en necesidad del mismo" se usan indistintamente en el presente documento y se refieren a un organismo vivo que padece una o más de las enfermedades descritas en el presente documento (por ejemplo, LMA) que se puede tratar por la administración de una composición descrita en el presente documento. Los ejemplos no limitantes de organismos incluyen seres humanos, otros mamíferos, bovinos, ratas, ratones, perros, monos, cabra, ovejas, vacas, renos y otros animales no mamíferos. En realizaciones, un sujeto es humano. Un sujeto humano puede estar entre las edades de aproximadamente 1 año y aproximadamente 100 años. En realizaciones, los sujetos en el presente documento se pueden caracterizar por la enfermedad que está tratándose (por ejemplo, un "sujeto con LMA", un "sujeto con cáncer" o un "sujeto con leucemia").

Como se usa en el presente documento, el término "tumor" se refiere a todo crecimiento y proliferación de células neoplásicas, tanto maligno como benigno, y a todas las células y tejidos precancerosos y cancerosos. "Neoplásico", como se usa en el presente documento, se refiere a cualquier forma de crecimiento celular desregulado o no regulado, tanto maligno como benigno, que da como resultado el crecimiento de tejido anormal. Por lo tanto, las "células neoplásicas" incluyen células malignas y benignas que tienen crecimiento celular desregulado o no regulado.

Como se usa en el presente documento, "tumor maligno hematológico" se refiere a cáncer del sistema hematopoyético e inmunitario del cuerpo - la médula ósea y el tejido linfático. Dichos cánceres incluyen leucemias, linfomas (linfoma no Hodgkin), enfermedad de Hodgkin (también llamada linfoma de Hodgkin) y mieloma. En una realización, el mieloma es mieloma múltiple. En algunas realizaciones, la leucemia es, por ejemplo, leucemia mielógena aguda (LMA), leucemia linfocítica aguda (LLA), leucemia de linfocitos T del adulto, leucemia linfocítica crónica (LLC), leucemia de células pilosas, mielodisplasia, trastornos mieloproliferativos o neoplasia mieloproliferativa (NMP), leucemia mielógena crónica (LMC), síndrome mielodisplásico (SMD), leucemia del virus linfotrópico humano-tipo 1 (HTLV-1), mastocitosis o leucemia linfoblástica aguda de linfocitos B. En algunas realizaciones, el linfoma es, por ejemplo, linfoma difuso de linfocitos B grandes (DLBCL), linfoma inmunoblástico de linfocitos B, linfoma de células pequeñas no hendidas, leucemia/linfoma del virus linfotrópico humano-tipo 1 (HTLV-1), linfoma de linfocitos T del adulto, linfoma de linfocitos T periféricos (PTCL), linfoma de linfocitos T cutáneos (CTCL), linfoma de células del manto (MCL), linfoma de Hodgkin (HL), linfoma no Hodgkin (NHL), linfoma relacionado con el SIDA, linfoma folicular, linfoma linfocítico pequeño, linfoma de linfocitos B grandes rico en histiocitos/linfocitos T, linfoma transformado, linfoma primario de mediastino de linfocitos B grandes (tímico), linfoma esplénico de la zona marginal, transformación de Richter, linfoma nodal de la zona marginal o linfoma de linfocitos B grandes ALK-positivos. En una realización, el cáncer hematológico es linfoma de escasa malignidad que incluye, por ejemplo, DLBCL, linfoma folicular o linfoma de la zona marginal. En una realización, el tumor maligno hematológico es l Ma . En otra realización, el tumor maligno hematológico es SMD.

El término "leucemia" se refiere a neoplasias malignas de los tejidos hematopoyéticos. La leucemia incluye, pero no se limita a, leucemia linfocítica crónica, leucemia mielocítica crónica, leucemia linfoblástica aguda, leucemia mieloide aguda y leucemia mieloblástica aguda. La leucemia puede ser recidivante, insensible o resistente a al menos una terapia antineoplásica.

En una realización, el sujeto tiene LMA, que incluye, por ejemplo, los siguientes subtipos de LMA. El término "leucemia mielógena o mieloide aguda" se refiere a afecciones hematológicas caracterizadas por la proliferación y acumulación de células mieloides principalmente indiferenciadas o mínimamente diferenciadas en la médula ósea, e incluye los subtipos clasificados por cualquiera del sistema de clasificación FAB (francesa, americana, británica) o de la OMS. Como se describe en el presente documento, la LMA incluye los siguientes subtipos basados en la clasificación FAB: M0 (LMA mínimamente diferenciada); M1 (LMA con maduración mínima); M2 (LMA con maduración); M3 (leucemia promielocítica aguda); M4 (leucemia mielomonocítica aguda); M4 eos. (leucemia mielomonocítica aguda con eosinofilia); M5 (leucemia monocítica aguda); M6 (leucemia eritroide aguda); y M7 (leucemia megacarioblástica aguda). Como se describe en el presente documento, la LMA incluye los siguientes subtipos basándose en la clasificación de la OMS: LMA con anomalías genéticas recurrentes (LMA con translocación entre los cromosomas 8 y 21); LMA con translocación o inversión en el cromosoma 16; LMA con translocación entre los cromosomas 9 y 11; APL (M3) con translocación entre los cromosomas 15 y 17; LMA con translocación entre los cromosomas 6 y 9; LMA con translocación o inversión en el cromosoma 3); LMA (megacarioblástica) con translocación entre cromosomas 1 y 22; LMA con cambios relacionados con la mielodisplasia; LMA relacionada con quimioterapia o radiación previa (LMA relacionada con agentes alquilantes; LMA relacionada con inhibidores de la topoisomerasa II); LMA no clasificada de otro modo (LMA que no se clasifica en las categorías anteriores, es decir, LMA mínimamente diferenciada (M0); LMA con maduración mínima (M1); LMA con maduración (M2); leucemia mielomonocítica aguda (M4); leucemia monocítica aguda (M5); leucemia eritroide aguda (M6); leucemia megacarioblástica aguda (M7); leucemia basófila aguda; panmielosis aguda con fibrosis); sarcoma mieloide (también conocido como sarcoma granulocítico, cloroma o mieloblastoma extramedular); y leucemias agudas indiferenciadas y bifenotípicas (también conocidas como leucemias agudas de fenotipo mixto). (véase https://www.cancer.org/cancer/acute-myeloidleukemia/detection-diagnosisstaging/how-classified.html, último acceso 25 de mayo de 2017)

En ciertas realizaciones, los grupos de riesgo para LMA basados en la citogenética son como se describen a continuación:

En una realización, el sujeto tiene SMD, que incluye, por ejemplo, los siguientes subtipos de SMD. El término "síndrome mielodisplásico" se refiere a afecciones hematológicas caracterizadas por anomalías en la producción de uno o más de los componentes celulares de la sangre (glóbulos rojos, glóbulos blancos (distintos de linfocitos) y plaquetas (o sus células progenitoras, megacariocitos)). La ineficaz hematopoyesis en la médula ósea (BM) y las citopenias de sangre periférica en el SMD se manifiestan clínicamente como anemia, neutropenia y/o trombocitopenia de frecuencia e intensidad variable. La anemia es el dato de laboratorio más frecuente y empeora frecuentemente hasta la dependencia de transfusiones de glóbulos rojos (RBC). Otro cuadro clínico menos común que se presenta relacionado con las citopenias son un riesgo elevado de infección y/o hemorragia y una tendencia a empeorar hacia leucemia mieloide aguda (LMA) (Catenacci, et al. Blood Rev 2005;19:301-319).

El SMD incluye los siguientes trastornos: anemia insensible (RA); RA con sideroblastos en anillo (RARS); RA con exceso de blastos (RAEB); citopenia insensible con displasia multilinaje (RCMD), citopenia insensible con displasia unilinaje (RCUD); síndrome mielodisplásico inclasificable (SMD-U), síndrome mielodisplásico asociado a una anomalía aislada del cromosoma del(5q), neoplasias mieloides relacionadas con la terapia y leucemia mielomonocítica crónica (LMMC). El SMD como se usa en el presente documento también incluye SMD de riesgo muy bajo, de riesgo bajo, de riesgo intermedio, de riesgo alto y de riesgo muy alto. En algunas realizaciones, el SMD es SMD primario o de nueva aparición. En otras realizaciones, el SMD es secundario.

En ciertas realizaciones, el SMD se clasifica basándose en la clasificación de la Organización Mundial de la Salud (OMS) de SMD como se describe a continuación:

Clasificaciones de la OMS para SMD

Como se usa en el presente documento, "leucemia promielocítica" o "leucemia promielocítica aguda" se refiere a un tumor maligno de la médula ósea en la que existe una deficiencia de glóbulos sanguíneos maduros en la línea mieloide de células y un exceso de células inmaduras llamadas promielocitos. Suele estar marcada por un intercambio de regiones de cromosomas 15 y 17.

Como se usa en el presente documento, "leucemia linfocítica aguda (LLA)", también conocida como "leucemia linfoblástica aguda", se refiere a una enfermedad maligna causada por el crecimiento y desarrollo anormal de glóbulos blancos no granulares tempranos, o linfocitos

Como se usa en el presente documento, "leucemia de linfocitos T" se refiere a una enfermedad en la que ciertas células del sistema linfoide llamadas linfocitos T o células T son malignas. Los linfocitos T son glóbulos blancos que normalmente pueden atacar a células infectadas por virus, células extrañas y células cancerosas y producir sustancias que regulan la respuesta inmunitaria.

El término "recidivante" se refiere a una situación donde los pacientes que han tenido una remisión de la leucemia después de la terapia tienen un retorno de células de leucemia en la médula ósea y una disminución en los glóbulos sanguíneos normales.

El término "insensible o resistente" se refiere a una circunstancia donde los pacientes, incluso después de un tratamiento intensivo, tienen células de leucemia residuales en su médula ósea.

El término "resistencia al fármaco" se refiere a la condición cuando una enfermedad no responde al tratamiento con un cierto fármaco o fármacos. La resistencia al fármaco puede ser o intrínseca, que significa que la enfermedad nunca ha sido sensible al fármaco o fármacos particulares, o puede ser adquirida, que significa que la enfermedad deja de responder al fármaco o fármacos particulares a los que la enfermedad había respondido previamente. En ciertas realizaciones, la resistencia al fármaco es intrínseca. En ciertas realizaciones, la resistencia al fármaco es adquirida.

Como se usa en el presente documento, y a menos que se especifique de otro modo, una "cantidad terapéuticamente eficaz" de un compuesto es una cantidad suficiente para proporcionar un beneficio terapéutico en el tratamiento o el abordaje de una enfermedad o trastorno, o para retardar o minimizar uno o más síntomas asociados a la enfermedad o trastorno. Una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto significa una cantidad de agente terapéutico, solo o en combinación con otras terapias, que proporciona un beneficio terapéutico en el tratamiento o el abordaje de la enfermedad o trastorno. El término "cantidad terapéuticamente eficaz" puede englobar una cantidad que mejora la terapia global, reduce o evita síntomas o causas de la enfermedad o trastorno, o potencia la eficacia terapéutica de otro agente terapéutico.

Como se usa en el presente documento, y a menos que se especifique de otro modo, una "cantidad profilácticamente eficaz" de un compuesto es una cantidad suficiente para prevenir una enfermedad o trastorno, o prevenir su reaparición. Una cantidad profilácticamente eficaz de un compuesto significa una cantidad de agente terapéutico, solo o en combinación con otros agentes, que proporciona un beneficio profiláctico en la prevención de la enfermedad. El término "cantidad profilácticamente eficaz" puede englobar una cantidad que mejora la profilaxis global o potencia la eficacia profiláctica de otro agente profiláctico.

Como se usa en el presente documento, el estado de ECOG se refiere al Estado funcional del Grupo Oncológico Cooperativo de la Costa Este (ECOG) (Oken M, et al. Toxicity and response criteria of the Eastern Cooperative Oncology Group. Am J Clin Oncol 1982;5(6):649-655), como se muestra a continuación:

En el contexto de un cáncer, el tratamiento o la inhibición se puede evaluar por la inhibición de la progresión de la enfermedad, la inhibición del crecimiento tumoral, la reducción del tumor primario, el alivio de síntomas relacionados con el tumor, la inhibición de factores secretados por el tumor, la aparición retardada de tumores primarios o secundarios, el desarrollo ralentizado de tumores primarios o secundarios, la disminución de la aparición de tumores primarios o secundarios, el ralentizamiento o la disminución de la intensidad de los efectos secundarios de la enfermedad, la detención del crecimiento tumoral y la regresión de tumores, el aumento del tiempo hasta la progresión (TTP), el aumento de la supervivencia sin progresión (PFS), el aumento de la supervivencia global (OS), entre otros. La OS como se usa en el presente documento significa el tiempo desde el comienzo del tratamiento hasta la muerte de cualquier causa. La TTP como se usa en el presente documento significa el tiempo desde el comienzo del tratamiento hasta la progresión tumoral; la TTP no incluye muertes. El tiempo hasta la remisión (TTR) como se usa en el presente documento significa el tiempo desde el comienzo del tratamiento hasta la remisión, por ejemplo, remisión completa o parcial. Como se usa en el presente documento, PFS significa el tiempo desde el comienzo del tratamiento hasta la progresión tumoral o muerte. En una realización, se calcularán las tasas de PFS usando la estimación de Kaplan-Meier. La supervivencia sin acontecimientos (EFS) significa el tiempo desde la entrada en el estudio hasta cualquier fracaso del tratamiento, que incluye progresión de la enfermedad, interrupción del tratamiento por cualquier motivo, o muerte. La supervivencia sin recaída (RFS) significa la duración de tiempo después del fin del tratamiento que el paciente sobrevive sin signos o síntomas de ese cáncer. La tasa de respuesta global (ORR) significa la suma del porcentaje de pacientes que logran respuestas completas y parciales. La tasa de remisión completa (CRR) se refiere al porcentaje de pacientes que logran la remisión completa (CR). La duración de la respuesta (DoR) es el tiempo desde que se logra una respuesta hasta la recaída o progresión de la enfermedad. La duración de la remisión es el tiempo desde que se logra la remisión, por ejemplo, remisión completa o parcial, hasta la recaída. En el extremo, la inhibición completa se denomina en el presente documento prevención o quimioprevención. En este contexto, el término "prevención" incluye o prevenir la aparición de un cáncer clínicamente evidente por completo o prevenir la aparición de una etapa preclínicamente evidente de un cáncer. También pretende estar englobada por esta definición la prevención de la transformación en células malignas o detener o invertir la progresión de células premalignas a células malignas. Esto incluye tratamiento profiláctico de aquellos en riesgo de desarrollar un cáncer.

Para la leucemia, en particular la LMA, la respuesta al tratamiento se puede evaluar basándose en los criterios de respuesta del grupo internacional de trabajo en LMA (Cheson et al. J Clin Oncol 2003; 21(24):4642-9).

Respuesta hematológica según los criterios de IWG para LMA

El tratamiento de linfoma se puede evaluar por el grupo de seminarios internacionales (IWC) para NHL (véase Cheson BD, et al. J. Clin. Oncol: 2007: (25) 579-586), usando las definiciones de respuestas y criterios de valoración mostrados a continuación:

En una realización, el criterio de valoración para el linfoma es la evidencia de beneficio clínico. El beneficio clínico puede reflejar la mejora en la calidad de vida, o la reducción en los síntomas del paciente, los requisitos de transfusión, frecuencia de infecciones u otros parámetros. También se puede usar en este criterio de valoración el tiempo hasta la reaparición o la progresión de los síntomas relacionados con el linfoma.

El tratamiento de la LLC se puede evaluar por las directrices de seminarios internacionales para LLC (véase Hallek M, et al. Blood, 2008; (111) 12: 5446-5456) usando las definiciones de respuesta y de criterios de valoración mostrados en ellas y en particular:

Los criterios del grupo A definen la carga tumoral; los criterios del grupo B definen la función del sistema hematopoyético (o médula ósea). CR (remisión completa): se han cumplido todos los criterios, y los pacientes tienen que carecer de síntomas constitucionales relacionados con la enfermedad; PR (remisión parcial): se han cumplido al menos dos de los criterios del grupo A más uno de los criterios de grupo B; SD es ausencia de enfermedad progresiva (PD) y fracaso para lograr al menos una PR; PD: se tiene que cumplir al menos uno de los criterios anteriores del grupo A o grupo B. Suma de los productos de múltiples ganglios linfáticos (como se evalúa por barridos de TAC en ensayos clínicos, o por exploración física en la práctica general). Estos parámetros son irrelevantes para algunas categorías de respuesta.

El tratamiento de MM se puede evaluar por los criterios internacionales de respuesta uniforme para mieloma múltiple (IURC) (véase Durie et al. Leukemia, 2006; (10) 10: 1-7), usando las definiciones de respuesta y de criterios de valoración mostradas a continuación:

El tratamiento de un cáncer también se puede evaluar por los criterios de evaluación de respuestas en tumores sólidos (RECIST 1.1) (véase Thereasse P., et al. J. of the National Cancer Institute; 2000; (92) 205-216 y Eisenhauer et al. European J. Cancer; 2009; (45) 228-247). Las respuestas globales para todas las posibles combinaciones de respuestas al tumor en lesiones diana y no diana con o sin la aparición de nuevas lesiones son del siguiente modo:

Con respecto a la evaluación de lesiones diana, la respuesta completa (CR) es la desaparición de todas las lesiones diana, la respuesta parcial (PR) es al menos una disminución del 30 % en la suma del diámetro más largo de lesiones diana, tomando como referencia la suma basal del diámetro más largo, la enfermedad progresiva (PD) es al menos un aumento del 20 % en la suma del diámetro más largo de lesiones diana, tomando como referencia la suma más pequeña del diámetro más largo registrado desde que empezó el tratamiento o la aparición de una o más lesiones nuevas y enfermedad estable (SD) no es una disminución suficiente para calificar para respuesta parcial ni un aumento suficiente para calificar para enfermedad progresiva, tomando como referencia la suma más pequeña del diámetro más largo desde que empezó el tratamiento.

Con respecto a la evaluación de lesiones no diana, la respuesta completa es la desaparición de todas las lesiones no diana y la normalización del nivel de marcador tumoral; respuesta incompleta/enfermedad estable es la persistencia de una o más lesiones no diana y/o el mantenimiento del nivel de marcadores tumorales por encima de los límites normales, y enfermedad progresiva (PD) es la aparición de una o más lesiones nuevas y/o progresión inequívoca de lesiones no diana existentes.

El tratamiento del SMD se puede evaluar por los criterios de respuesta del grupo internacional de trabajo (IWG) para mielodisplasia.

Criterios de respuesta modificados del IWG para SMD

Independencia de la transfusión de RBC y plaquetas

Se usa el sistema internacional revisado de puntuación del pronóstico para el pronóstico de SMD del siguiente modo: Grupo de riesgo citogenético IPSS-R

Valores de puntuación de pronóstico IPSS-R

La puntuación total IPSS-R se calcula como la suma de la citogenética, el porcentaje de blastos de médula ósea, hemoglobina, plaquetas y puntuaciones individuales de ANC

Categorías/Puntuaciones de riesgo de pronóstico IPSS-R

IPSS-R: Resultados de la categoría de riesgo de pronóstico

Compuesto

El compuesto adecuado para su uso en los métodos y las formulaciones proporcionadas en el presente documento es el compuesto 1: 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida que tiene la estructura:

o sus estereoisómeros o mezcla de estereoisómeros, isotopólogos, sales farmacéuticamente aceptables, tautómeros, solvatos, hidratos, cocristales, clatratos, o polimorfos de la misma. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se refiere a 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida.

El compuesto 1 se puede preparar según los métodos descritos en los ejemplos proporcionados en el presente documento o como se describe en la patente de EE. UU. N.° 9.499.514. El compuesto también se puede sintetizar según otros métodos evidentes para los expertos en la técnica basándose en la enseñanza en el presente documento. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 es un sólido. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 es un hidrato. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 está solvatado. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 es anhidro.

En ciertas realizaciones, el compuesto 1 es amorfo. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 es cristalino. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 está en una forma cristalina descrita en la publicación de EE. UU. N.° 2017-0197934 presentada el 6 de enero de 2017. Formas sólidas a modo de ejemplo se describen en las páginas N.° 86-101. Las formas sólidas del compuesto 1 se pueden preparar según los métodos descritos en la divulgación de la publicación de EE. UU. N.° 2017-0197934 presentada el 6 de enero de 2017. Véanse las páginas N.° 86-101. Las formas sólidas también se pueden preparar según otros métodos evidentes para los expertos en la técnica.

En una realización, el compuesto 1 es la forma polimorfa A, forma B, forma C, forma D, forma E o una forma amorfa de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida. Los polimorfos de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida se describen brevemente en el presente documento.

Forma A de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)- 2,2-difluoroacetamida

En ciertas realizaciones, las formulaciones proporcionadas en el presente documento se prepararon a partir de la forma A del compuesto 1.

En una realización, la forma A es una forma anhidra del compuesto 1. En otra realización, la forma A del compuesto 1 es cristalina.

En ciertas realizaciones, la forma A se obtiene por cristalización en ciertos sistemas de disolventes, por ejemplo, sistemas de disolventes que comprenden uno o más de los siguientes disolventes: acetona y la mezcla de disolventes de isopropanol y agua a temperatura ambiente. En ciertas realizaciones, la forma A se obtiene como una forma sólida intermedia de suspensiones a temperatura elevada, por ejemplo aproximadamente 50 °C, en etanol/agua (1:1), acetona o acetonitrilo.

En ciertas realizaciones, la forma A es sustancialmente cristalina, como se indica, por ejemplo, por mediciones de difracción de rayos X de polvo. En una realización, la forma A del compuesto 1 tiene un patrón de difracción de rayos X de polvo sustancialmente como se muestra en la FIG. 2.

En una realización, la forma A del compuesto 1 tiene uno o más picos característicos de difracción de rayos X de polvo en un ángulo dos-theta de aproximadamente 11,5, 15,6, 16,6, 17,2, 18,1, 19,0, 19,6, 21,1,23,2 o 24,8 grados 20 como se representa en la FIG. 2. En otra realización, la forma A del compuesto 1 tiene uno, dos, tres o cuatro picos característicos de difracción de rayos X de polvo en un ángulo dos-theta de aproximadamente 15,6, 16,6, 17,2 o 24,8 grados 20. En otra realización, la forma A del compuesto 1 tiene uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o siete picos característicos de difracción de rayos X de polvo como se exponen en la Tabla A. En otra realización, la forma A del compuesto 1 tiene uno, dos, o tres picos característicos de difracción de rayos X de polvo como se exponen en la Tabla A.

Tabla A

En una realización, la forma A del compuesto 1 tiene el diagrama de SEM como se muestra en la FIG. 3.

En una realización, la forma cristalina del compuesto 1 tiene un termográfico termogravimétrico (TGA) que corresponde sustancialmente a al termograma de TGA representativo como se representa en la FIG. 4. En ciertas realizaciones, no Se observa pérdida de peso por TGA para la forma A.

En una realización, la forma cristalina A del compuesto 1 tiene un termograma de DSC correspondiente sustancialmente como se representa en la FIG. 5. En ciertas realizaciones, la forma A se caracteriza por un diagrama de DSC que comprende un acontecimiento de fusión con una temperatura de aparición de 229 °C y calor de fusión de 118 J/g.

En ciertas realizaciones, la forma A se caracteriza por análisis de sorción dinámica de vapor. Un diagrama representativo de la isoterma de sorción dinámica de vapor (DVS) se muestra en la FIG. 6. En ciertas realizaciones, cuando la humedad relativa ("HR") aumenta desde aproximadamente el 0 % hasta aproximadamente el 90 % de HR, la forma A presenta menos del 1,5 %, menos del 1,2 % o aproximadamente el 1,2 % p/p de captación de agua. En ciertas realizaciones, la forma A comprende menos del 0,1 % de agua como se determina en un titulador coulométrico de Karl Fischer (KF) equipado con un procesador de muestras para horno configurado a 225 °C.

En ciertas realizaciones, no se observa degradación significativa o residual disolvente para la forma A por RMN 1H (FIG. 7).

En ciertas realizaciones, la forma A del compuesto 1 se caracteriza por su perfil de estabilidad tras la compresión. En ciertas realizaciones, la forma A es estable, por ejemplo, su patrón de XRPD sigue sustancialmente invariable con picos de difracción más anchos, tras la aplicación de 13,8 MPa (2000 psi) de presión durante aproximadamente 1 minuto (FIG. 8).

En otra realización adicional, la forma A del compuesto 1 es sustancialmente pura. En ciertas realizaciones, la forma sustancialmente pura A del compuesto 1 está sustancialmente libre de otras formas sólidas, por ejemplo, forma amorfa. En ciertas realizaciones, la pureza de la forma sustancialmente pura A del compuesto 1 es no inferior a aproximadamente el 95 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 96 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 97 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 98 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 98,5 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 99 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 99,5 % de pureza, o no inferior a aproximadamente el 99,8 % de pureza.

En ciertas realizaciones, la forma A del compuesto 1 es sustancialmente pura. En ciertas realizaciones en el presente documento, la forma A del compuesto 1 está sustancialmente libre de otras formas sólidas que comprenden el compuesto 1 que incluyen, por ejemplo, las formas B, C, D, E y/o una forma de sólido amorfo que comprende el compuesto 1. En ciertas realizaciones, la forma A es una mezcla de formas sólidas que comprende el compuesto 1, que incluye, por ejemplo, una mezcla que comprende una o más de las siguientes: formas B, C, D, E y una forma de sólido amorfo que comprende el compuesto 1.

Forma B de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida

En ciertas realizaciones, las formulaciones proporcionadas en el presente documento se prepararon a partir de la forma anhidra B del compuesto 1.

En ciertas realizaciones, la forma B se obtiene por recristalización con antidisolvente en ciertos sistemas de disolventes, por ejemplo, sistemas de disolventes que comprenden uno o más de los siguientes disolventes: metanol/agua, DMSO/isopropanol, DMSO/tolueno y DMSO/agua. En ciertas realizaciones, la forma B se obtiene por recristalización con enfriamiento en THF/agua (1:1).

En ciertas realizaciones, la forma B es cristalina, como se indica, por ejemplo, por mediciones de difracción de rayos X de polvo. En una realización, la forma B del compuesto 1 tiene un patrón de difracción de rayos X de polvo sustancialmente como se muestra en la FIG. 9.

En una realización, la forma B del compuesto 1 tiene uno o más picos característicos de difracción de rayos X de polvo en un ángulo dos-theta de aproximadamente 15,4, 16,3, 16,7, 17,7, 20,4, 25,6 o 27,5, grados 20 como se representa en la FIG. 9. En otra realización, la forma B del compuesto 1 tiene uno, dos, tres o cuatro picos característicos de difracción de rayos X de polvo en un ángulo dos-theta de aproximadamente 16,7, 25,6, 15,4 o 16,3 grados 20. En otra realización, la forma B del compuesto 1 tiene uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o siete picos característicos de difracción de rayos X de polvo como se exponen en la Tabla B. En otra realización, la forma B del compuesto 1 tiene uno, dos, o tres picos característicos de difracción de rayos X de polvo como se exponen en la Tabla B.

Tabla B

En una realización, la forma B del compuesto 1 tiene el diagrama de SEM como se muestra en la FIG. 10. En una realización, una forma cristalina del compuesto 1 tiene un termográfico termogravimétrico (TGA) que corresponde sustancialmente a al termograma de TGA representativo como se representa en la FIG. 11. En ciertas realizaciones, la forma B no muestra pérdida de peso por TGA por debajo de 170 °C. En ciertas realizaciones, la forma B muestra una pérdida de peso por TGA del 0,4 % entre 170~230 °C.

En una realización, la forma cristalina B del compuesto 1 tiene un termograma de DSC que corresponde sustancialmente a como se representa en la FIG. 12. En ciertas realizaciones, la forma B se caracteriza por un diagrama de DSC que comprende un acontecimiento de fusión/recristalización a 219~224 °C y un acontecimiento de fusión importante con una temperatura pico de 231 °C.

En ciertas realizaciones, la forma B se caracteriza por análisis de sorción dinámica de vapor. Un diagrama representativo de la isoterma de sorción dinámica de vapor (DVS) se muestra en la FIG. 13. En ciertas realizaciones, cuando la humedad relativa ("HR") aumenta desde aproximadamente el 0 % hasta aproximadamente el 90 % de HR, la forma B presenta aproximadamente 1,4 % p/p de captación de agua. En ciertas realizaciones, la forma B comprende menos del 0,1 % agua como se determina en un titulador coulométrico de Karl Fischer (KF) equipado con un procesador de muestras para horno configurado a 225 °C.

En ciertas realizaciones, la forma B no muestra degradación significativa o disolvente residual por RMN 1H (FIG. 14).

En ciertas realizaciones, la forma B del compuesto 1 se caracteriza por su perfil de estabilidad tras la compresión. En ciertas realizaciones, la forma B es estable, por ejemplo, su patrón de XRPD sigue sustancialmente invariable con picos de difracción más anchos, tras la aplicación de 13,8 MPa (2000 psi) durante aproximadamente 1 minuto (FIG. 15).

En otra realización adicional, la forma B del compuesto 1 es sustancialmente pura. En ciertas realizaciones, la forma sustancialmente pura B del compuesto 1 está sustancialmente libre de otras formas sólidas, por ejemplo, forma amorfa. En ciertas realizaciones, la pureza de la forma sustancialmente pura B del compuesto 1 es no inferior a aproximadamente el 95 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 96 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 97 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 98 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 98,5 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 99 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 99,5 % de pureza, o no inferior a aproximadamente el 99,8 % de pureza.

En ciertas realizaciones, la forma B del compuesto 1 es sustancialmente pura. En ciertas realizaciones, la forma B del compuesto 1 está sustancialmente libre de otras formas sólidas que comprenden el compuesto 1 que incluye, por ejemplo, las formas A, C, D, E, y/o una forma de sólido amorfo que comprende el compuesto 1. En ciertas realizaciones, la forma B es una mezcla de formas sólidas que comprende el compuesto 1, que incluye, por ejemplo, una mezcla que comprende una o más de las siguientes: formas A, C, D, E, y una forma de sólido amorfo que comprende el compuesto 1.

Forma C de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida

En ciertas realizaciones, las formulaciones proporcionadas en el presente documento se prepararon a partir de la forma anhidra C del compuesto 1. En ciertas realizaciones, la forma C es el anhidrato más termodinámicamente estable de entre las formas cristalinas del compuesto 1.

En ciertas realizaciones, la forma C se obtiene por suspensión del compuesto 1 en ciertos sistemas de disolventes, por ejemplo, sistemas de disolventes que comprenden uno o más de los siguientes disolventes: acetonitrilo/agua, acetona, o etanol/agua, durante un periodo de tiempo prolongado.

En ciertos aspectos, la forma C se obtiene por suspensión de la forma B (1X p) en acetona (30 X vol) a una temperatura elevada, por ejemplo, desde 60-80 °C o 70-75 °C durante al menos 24 horas, y enfriando la mezcla hasta temperatura ambiente. En un aspecto, la suspensión se realiza a una temperatura de 70-75 °C bajo presión de nitrógeno de 0,34­ 0,38 MPa (50-55-psi). En un aspecto, la mezcla se enfría hasta temperatura ambiente durante al menos 6 horas.

En ciertas realizaciones, la forma C es cristalina, como se indica, por ejemplo, por mediciones de difracción de rayos X de polvo. En una realización, la forma C del compuesto 1 tiene un patrón de difracción de rayos X de polvo sustancialmente como se muestra en la FIG. 16.

En una realización, la forma C del compuesto 1 tiene uno o más picos característicos de difracción de rayos X de polvo en un ángulo dos-theta de aproximadamente 7,4, 11,5, 15,8, 16,7, 16,9, 17,7, 18,4, 19,2, 19,5, 21,1,23,4, 24,7 o 29,9, grados 20 como se representa en la FIG. 16. En otra realización, la forma C del compuesto 1 tiene uno, dos, tres o cuatro picos característicos de difracción de rayos X de polvo en un ángulo dos-theta de aproximadamente 16,7, 16,9, 17,7 o 24,7 grados 20. En otra realización, la forma C del compuesto 1 tiene uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o siete picos característicos de difracción de rayos X de polvo como se exponen en la Tabla C. En otra realización, la forma C del compuesto 1 tiene uno, dos, o tres picos característicos de difracción de rayos X de polvo como se exponen en la Tabla C.

Tabla C

En una realización, la forma C del compuesto 1 tiene el diagrama de SEM como se muestra en la FIG. 17. En una realización, una forma cristalina del compuesto 1 tiene un termográfico termogravimétrico (TGA) que corresponde sustancialmente a al termograma de TGA representativo como se representa en la FIG. 18. En ciertas realizaciones, la forma C no muestra pérdida de peso por TGA.

En una realización, la forma cristalina C del compuesto 1 tiene un termograma de DSC que corresponde sustancialmente a como se representa en la FIG. 19. En ciertas realizaciones, la forma C se caracteriza por un diagrama de DSC que comprende un acontecimiento de fusión con una temperatura de aparición de 232 °C y calor de fusión de 126 J/g.

En ciertas realizaciones, la forma C se caracteriza por análisis de sorción dinámica de vapor. Un diagrama representativo de la isoterma de sorción dinámica de vapor (DVS) se muestra en la FIG. 20. En ciertas realizaciones, cuando la humedad relativa ("HR") aumenta desde aproximadamente el 0 % hasta aproximadamente el 90 % de HR, la forma C presenta aproximadamente el 0,6 % p/p de captación de agua. En ciertas realizaciones, la forma C comprende menos del 0,1 % de agua como se determina en un titulador coulométrico de Karl Fischer (KF) equipado con un procesador de muestras para horno configurado a 225 °C.

En ciertas realizaciones, la forma C no muestra degradación significativa o disolvente residual por RMN 1H (FIG. 21).

En ciertas realizaciones, la forma C del compuesto 1 se caracteriza por su perfil de estabilidad tras la compresión. En ciertas realizaciones, la forma C es estable, por ejemplo, su patrón de XRPD sigue sustancialmente invariable con picos de difracción más anchos, tras la aplicación de 13,8 MPa (2000 psi) de presión durante aproximadamente 1 minuto (FIG. 22).

En otra realización adicional, la forma C del compuesto 1 es sustancialmente pura. En ciertas realizaciones, la forma sustancialmente pura C del compuesto 1 está sustancialmente libre de otras formas sólidas, por ejemplo, forma amorfa. En ciertas realizaciones, la pureza de la forma sustancialmente pura C del compuesto 1 es no inferior a aproximadamente el 95 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 96 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 97 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 98 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 98,5 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 99 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 99,5 % de pureza, o no inferior a aproximadamente el 99,8 % de pureza.

En ciertas realizaciones, la forma C del compuesto 1 es sustancialmente pura. En ciertas realizaciones, la forma C del compuesto 1 está sustancialmente libre de otras formas sólidas que comprenden el compuesto 1 que incluye, por ejemplo, las formas A, B, D, E, y/o una forma de sólido amorfo que comprende el compuesto 1. En ciertas realizaciones, la forma C es una mezcla de formas sólidas que comprende el compuesto 1, que incluye, por ejemplo, una mezcla que comprende una o más de las siguientes formas: formas A, B, D, E, y una forma de sólido amorfo que comprende el compuesto 1.

Forma D de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida

En ciertas realizaciones, las formulaciones proporcionadas en el presente documento se prepararon a partir de la forma D del compuesto 1. En ciertas realizaciones, la forma D del compuesto 1 es un solvato de DMSO.

En ciertas realizaciones, la forma D se obtiene calentando la forma B en DMSO/metil isobutil cetona y enfriando la disolución.

En ciertas realizaciones, la forma D es cristalina, como se indica, por ejemplo, por mediciones de difracción de rayos X de polvo. En una realización, la forma D del compuesto 1 tiene un patrón de difracción de rayos X de polvo sustancialmente como se muestra en la FIG. 23.

En una realización, la forma D del compuesto 1 tiene uno o más picos característicos de difracción de rayos X de polvo en un ángulo dos-theta de aproximadamente 14,1, 14,3, 18,8, 19,1, 23,6 o 24,0 grados 20 como se representa en la FIG.23. En otra realización, la forma D del compuesto 1 tiene uno, dos, tres o cuatro picos característicos de difracción de rayos X de polvo en un ángulo dos-theta de aproximadamente 14,1, 14,3, 18,8 o 19,1 grados 20. En otra realización, la forma D del compuesto 1 tiene uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o siete picos característicos de difracción de rayos X de polvo como se exponen en la Tabla D. En otra realización, la forma D del compuesto 1 tiene uno, dos, o tres picos característicos de difracción de rayos X de polvo como se exponen en la Tabla D.

Tabla D

En una realización, en el presente documento se proporciona una forma cristalina del compuesto 1 que tiene un termográfico termogravimétrico (TGA) que corresponde sustancialmente al termograma de TGA representativo como se representa en la FIG. 24. En ciertas realizaciones, la forma D muestra pérdida de peso por TGA de aproximadamente el 14,1 % hasta 140 °C.

En ciertas realizaciones, la forma D comprende DMSO en aproximadamente el 14,3 % en peso como se mide por cromatografía de gases.

En otra realización adicional, la forma D del compuesto 1 es sustancialmente pura. En ciertas realizaciones, la forma sustancialmente pura D del compuesto 1 está sustancialmente libre de otras formas sólidas, por ejemplo, forma amorfa. En ciertas realizaciones, la pureza de la forma sustancialmente pura D del compuesto 1 es no inferior a aproximadamente el 95 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 96 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 97 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 98 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 98,5 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 99 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 99,5 % de pureza, o no inferior a aproximadamente el 99,8 % de pureza.

En ciertas realizaciones, la forma D del compuesto 1 es sustancialmente pura. En ciertas realizaciones, la forma D del compuesto 1 está sustancialmente libre de otras formas sólidas que comprenden el compuesto 1 que incluye, por ejemplo, las formas A, B, C, E, y/o una forma de sólido amorfo que comprende el compuesto 1 como se proporciona en el presente documento. En ciertas realizaciones, la forma D es una mezcla de formas sólidas que comprende el compuesto 1, que incluye, por ejemplo, una mezcla que comprende una o más de las siguientes: formas A, B, C, E, y una forma de sólido amorfo que comprende el compuesto 1.

Forma E de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida

En ciertas realizaciones, las formulaciones proporcionadas en el presente documento se prepararon a partir de la forma E del compuesto 1. En ciertas realizaciones, la forma E del compuesto 1 es un solvato de DMSO.

En ciertas realizaciones, la forma E se obtiene a partir de la forma C en DMSO/MIBK o DMSO/IPA o DMSO/anisol a temperatura ambiente.

En ciertas realizaciones, la forma E es cristalina, como se indica, por ejemplo, por mediciones de difracción de rayos X de polvo. En una realización, la forma E del compuesto 1 tiene un patrón de difracción de rayos X de polvo sustancialmente como se muestra en la FIG. 25.

En una realización, la forma E del compuesto 1 tiene uno o más picos característicos de difracción de rayos X de polvo en un ángulo dos-theta de aproximadamente 10,5, 12,5, 16,1, 17,0, 18,5, 21,2, 21,7, 22,6, 22,9, 23,4, 23,8, 24,1,25,1 o 26,7, grados 20 como se representa en la FIG. 25. En otra realización, la forma E del compuesto 1 tiene uno, dos, tres o cuatro picos característicos de difracción de rayos X de polvo en un ángulo dos-theta de aproximadamente 16,1, 17,0, 21,2 o 22,9 grados 20. En otra realización, la forma E del compuesto 1 tiene uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o siete picos característicos de difracción de rayos X de polvo como se exponen en la Tabla E. En otra realización, la forma E del compuesto 1 tiene uno, dos, o tres picos característicos de difracción de rayos X de polvo como se exponen en la Tabla E.

Tabla E

En una realización, en el presente documento se proporciona una forma cristalina del compuesto 1 que tiene un termográfico termogravimétrico (TGA) que corresponde sustancialmente al termograma de TGA representativo como se representa en la FIG. 26. En ciertas realizaciones, la forma E muestra pérdida de peso por TGA de aproximadamente el 19,4 % hasta 120 °C. En ciertas realizaciones, la forma E muestra pérdida de peso adicional del 24,9 % entre 120 y 220 °C.

En una realización, la forma E del compuesto 1 es sustancialmente pura. En ciertas realizaciones, la forma sustancialmente pura E del compuesto 1 está sustancialmente libre de otras formas sólidas, por ejemplo, forma amorfa. En ciertas realizaciones, la pureza de la forma sustancialmente pura E del compuesto 1 es no inferior a aproximadamente el 95 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 96 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 97 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 98 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 98,5 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 99 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 99,5 % de pureza, o no inferior a aproximadamente el 99,8 % de pureza.

En ciertas realizaciones, la forma E del compuesto 1 es sustancialmente pura. En ciertas realizaciones en el presente documento, la forma E del compuesto 1 está sustancialmente libre de otras formas sólidas que comprenden el compuesto 1 que incluyen, por ejemplo, las formas A, B, C, D y/o una forma de sólido amorfo que comprende el compuesto 1. En ciertas realizaciones, la forma E es una mezcla de formas sólidas que comprende el compuesto 1, que incluye, por ejemplo, una mezcla que comprende una o más de las siguientes: formas A, B, C, D y una forma de sólido amorfo que comprende el compuesto 1.

Forma amorfa de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida

En ciertas realizaciones, las formulaciones proporcionadas en el presente documento comprenden el compuesto 1 amorfo.

En ciertas realizaciones, en el presente documento se proporcionan métodos de preparación de la forma amorfa calentando el compuesto 1 en THF y agua y enfriando la disolución.

En una realización, en el presente documento se proporciona una forma de sólido amorfo del compuesto 1 que tiene un termograma DSC modulado como se representa en la FIG. 27.

En una realización, el compuesto 1 amorfo tiene un patrón de difracción de rayos X de polvo sustancialmente como se muestra en la FIG. 28.

En una realización, el compuesto 1 amorfo tiene un espectro de RMN 1H sustancialmente como se muestra en la FIG.

29.

En otra realización adicional, el compuesto 1 amorfo es sustancialmente puro. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 amorfo sustancialmente puro está sustancialmente libre de otras formas sólidas, por ejemplo, la forma A, la forma B, la forma C, la forma D o la forma E. En ciertas realizaciones, la pureza del compuesto 1 amorfo sustancialmente puro es no inferior a aproximadamente el 95 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 96 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 97 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 98 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 98,5 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 99 % de pureza, no inferior a aproximadamente el 99,5 % de pureza, o no inferior a aproximadamente el 99,8 % de pureza.

Formulaciones del compuesto 1

En un aspecto, en el presente documento se proporcionan formulaciones estables del compuesto 1. En una realización, las formulaciones del compuesto 1 comprenden una forma sólida de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida. En una realización, las formulaciones del compuesto 1 comprenden una forma amorfa de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida.

En ciertas realizaciones, las formulaciones se preparan con sulfóxido de dimetilo como codisolvente o un adyuvante de procesamiento. En ciertas realizaciones, las formulaciones se preparan con ácido fórmico como codisolvente o un adyuvante de procesamiento. En ciertas realizaciones, las formulaciones se preparan sin codisolvente o adyuvante de procesamiento.

En ciertas realizaciones, las formulaciones comprenden sulfóxido de dimetilo como codisolvente o un adyuvante de procesamiento. En ciertas realizaciones, las formulaciones comprenden ácido fórmico como codisolvente o un adyuvante de procesamiento. En ciertas realizaciones, las formulaciones no comprenden codisolvente o adyuvante de procesamiento.

En ciertas realizaciones, las formulaciones proporcionadas en el presente documento son formulaciones liofilizadas. En ciertas realizaciones, las formulaciones proporcionadas en el presente documento son formulaciones reconstituidas obtenidas en un disolvente farmacéuticamente aceptable para producir una disolución farmacéuticamente aceptable.

Formulación Ia (no según la invención)

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,2 %, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 3 %-6 % e hidroxipropil p-ciclodextrina (HPBCD) en una cantidad de aproximadamente el 92-98 % basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,2 %, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 3 %-6 % y sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 92-98 % basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,2 %, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 3 %-6 %, HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 92-98 %, y no más de aproximadamente el 1 % de sulfóxido de dimetilo basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,2 %, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 3 %-6 %, sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 92-98 %, y no más de aproximadamente el 1 % de sulfóxido de dimetilo basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,08-0,15 %, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 3 %-6 % y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 94-96 %, basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,08-0,15 %, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 3 %-6 % y sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 94-96 %, y basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,08-0,15 %, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 3 %-6 %, HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 94-96 %, y no más de aproximadamente el 1 % de sulfóxido de dimetilo basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,08-0,15 %, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 3 %-6 %, sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 94-96 %, y no más de aproximadamente el 1 % de sulfóxido de dimetilo basado en el peso total de la formulación.

En un aspecto, la formulación proporcionada en el presente documento comprende el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,08 a aproximadamente el 0,15 % basado en el peso total de la formulación. En ciertas realizaciones, la cantidad del compuesto 1 es desde aproximadamente el 0,09 % hasta aproximadamente el 0,15 %, aproximadamente el 0,1 % a aproximadamente el 0,13 % o aproximadamente el 0,11 % a aproximadamente el 0,12 % basado en el peso total de la formulación. En ciertas realizaciones, la cantidad del compuesto 1 es aproximadamente el 0,05 %, 0,07 %, 0,09 %, 0,11 %, 0,12 %, 0,13 %, o 0,15 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad del compuesto 1 en la formulación es aproximadamente el 0,12 % basado en el peso total de la formulación.

En otro aspecto, proporcionadas en el presente documento es una formulación que comprende el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 2 mg en un vial de 20 cm3. Aún en otro aspecto es una formulación que comprende el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 1,5 mg, aproximadamente 0,75 mg a aproximadamente 1,25 mg, o aproximadamente 0,8 mg a aproximadamente 1,1 mg en un vial de 20 cm3. En un aspecto, el compuesto 1 está presente en una cantidad de aproximadamente 0,7, 0,75, 0,76, 0,8, 0,9, 1,0, 1,05 o 1,2 mg en un vial de 20 cm3. En un aspecto, el compuesto 1 está presente en una cantidad de aproximadamente 1,05 mg en un vial de 20 cm3.

En un aspecto, las formulaciones proporcionadas en el presente documento contienen un tampón citrato. En un aspecto, la cantidad de tampón citrato en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es desde aproximadamente el 3 % hasta aproximadamente el 6 % basado en el peso total de la formulación. En un aspecto, la cantidad de tampón citrato en las formulaciones proporcionada en el presente documento es aproximadamente el 3 %, 3,5 %, 4 %, 4,2 %, 4,5 % o 5 % basado en el peso total de la formulación. En un aspecto, la cantidad de tampón citrato en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente el 4,2 % basado en el peso total de la formulación. En un aspecto, la cantidad de tampón citrato en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente 37 mg en un vial de 20 cm3.

En una realización, el tampón citrato comprende ácido cítrico anhidro y citrato de sodio anhidro. En ciertas realizaciones, la cantidad de ácido cítrico anhidro es desde aproximadamente el 1,5 % hasta aproximadamente el 3 %, aproximadamente el 1,75 % a aproximadamente el 2,75 %, o aproximadamente el 2 % a aproximadamente el 2,5 % basado en el peso total de la formulación. En ciertas realizaciones, la cantidad de ácido cítrico anhidro en la formulación es aproximadamente el 1,5 %, 1,75 %, 2 %, 2,1 % o 2,5 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de ácido cítrico anhidro en la formulación es aproximadamente el 2 %, 2,1 %, 2,22 % o 2,3 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de ácido cítrico anhidro en la formulación es aproximadamente el 2,10 % basado en el peso total de la formulación.

Aún en otro aspecto es una formulación que comprende ácido cítrico anhidro en una cantidad de aproximadamente 16 mg a aproximadamente 20 mg en un vial de 20 cm3. En una realización, la cantidad de ácido cítrico anhidro es aproximadamente 16, 17, 18, 18,2, 18,4, 18,6, 18,8, 19 o 20 mg en un vial de 20 cm3. En una realización, la cantidad de ácido cítrico anhidro es aproximadamente 18,6 mg en un vial de 20 cm3.

En ciertas realizaciones, la cantidad de citrato de sodio anhidro es desde aproximadamente el 1,5 % hasta aproximadamente el 3 %, aproximadamente el 1,75 % a aproximadamente el 2,75 %, o aproximadamente el 2 % a aproximadamente el 2,5 % basado en el peso total de la formulación. En ciertas realizaciones, la cantidad de citrato de sodio anhidro en la formulación es aproximadamente el 1,5 %, 1,75 %, 2 %, 2,1 % o 2,5 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de citrato de sodio anhidro en la formulación es aproximadamente el 2 %, 2,05 %, 2,08 % o 2,1 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de citrato de sodio anhidro en la formulación es aproximadamente el 2,08 % basado en el peso total de la formulación.

Aún en otro aspecto es una formulación que comprende citrato de sodio anhidro en una cantidad de aproximadamente 16 mg a aproximadamente 20 mg en un vial de 20 cm3. En una realización, la cantidad de citrato de sodio anhidro es aproximadamente 16, 17, 18, 18,2, 18,4, 18,6, 18,8, 19 o 20 mg en un vial de 20 cm3. En una realización, la cantidad de citrato de sodio anhidro es aproximadamente 18,4 mg en un vial de 20 cm3.

En ciertas realizaciones, la cantidad de HPBCD en las formulaciones es aproximadamente del 94 a aproximadamente el 97 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de HPBCD en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente del 94,5 %, 95 %, 95,5 % o 96 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de HPBCD en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente el 95 % basado en el peso total de la formulación.

En ciertas realizaciones, la cantidad de sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente del 94 a aproximadamente el 97 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente el 94,5 %, 95 %, 95,5 % o 96 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente el 95 % basado en el peso total de la formulación.

En otro aspecto es una formulación que comprende HPBCD en una cantidad de aproximadamente 800-900 mg en un vial de 20 cm3. En otro aspecto es una formulación que comprende HPBCD en una cantidad de aproximadamente 810-880 mg, 820-860 mg o 830-850 mg en un vial de 20 cm3. En otro aspecto es una formulación que comprende HPBCD en una cantidad de aproximadamente 840 mg en un vial de 20 cm3.

En otro aspecto es una formulación que comprende sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente 800-900 mg en un vial de 20 cm3. En otro aspecto es una formulación que comprende sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente 810-880 mg, 820-860 mg o 830-850 mg en un vial de 20 cm3. En otro aspecto es una formulación que comprende sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente 840 mg en un vial de 20 cm3.

En otro aspecto es una formulación que comprende Kleptose®HPB en una cantidad de aproximadamente 840 mg en un vial de 20 cm3.

En una realización, las formulaciones comprenden sulfóxido de dimetilo en una cantidad de no más de aproximadamente el 1,5 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, las formulaciones comprenden sulfóxido de dimetilo en una cantidad de hasta el 0,1 %, 0,2 %, 0,3 %, 0,4 %, 0,6 %, 0,7 %, 0,8 %, 0,9 % o 1 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, las formulaciones comprenden no más de aproximadamente el 0,1 %, 0,2 %, 0,3 %, 0,4 %, 0,6 %, 0,7 %, 0,8 %, 0,9 % o 1 % de sulfóxido de dimetilo basado en el peso total de la formulación. En una realización, las formulaciones comprenden sulfóxido de dimetilo en una cantidad de hasta aproximadamente del 0,1 a aproximadamente el 1,5 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de sulfóxido de dimetilo en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente del 0,1 a aproximadamente el 1,3 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de sulfóxido de dimetilo en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente el 0,1 %, 0,2 %, 0,3 %, 0,4 %, 0,6 %, 0,7 %, 0,8 %, 0,9 % o 1 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, las formulaciones proporcionadas en el presente documento no contienen sulfóxido de dimetilo. En una realización, la cantidad de sulfóxido de dimetilo en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente del 0,4 % al 0,8 % basado en el peso total de la formulación.

En otro aspecto es una formulación que comprende sulfóxido de dimetilo en una cantidad de aproximadamente 4 a 7 mg en un vial de 20 cm3. En otro aspecto es una formulación que comprende sulfóxido de dimetilo en una cantidad de aproximadamente 4,5-6,5 mg, o 5 a 6 mg en un vial de 20 cm3.

En ciertas realizaciones, la formulación proporcionada en el presente documento está liofilizada, y la formulación liofilizada tras la reconstitución tiene un pH de aproximadamente 4 a 5. En ciertas realizaciones, la formulación tras la reconstitución tiene un pH de aproximadamente 4,2 a 4,4. En una realización, la formulación liofilizada tras la reconstitución tiene un pH de aproximadamente 4, 4,1, 4,2, 4,3, 4,4, 4,5, 4,6, 4,7, 4,8, 4,9 o 5.

En ciertas realizaciones, la formulación liofilizada tras la reconstitución tiene una osmolalidad de aproximadamente 250-290 mOsm/kg. En ciertas realizaciones, la formulación liofilizada tras la reconstitución tiene una osmolalidad de aproximadamente 260-280 mOsm/kg.

En ciertas realizaciones, en el presente documento se proporcionada un recipiente que comprende una formulación proporcionada en su interior. En un aspecto, el recipiente es un vial de vidrio. En un aspecto, el recipiente es un vial de vidrio de 20 cm3.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación en un vial de 20 cm3 que comprende: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1,05 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida y un portador o excipiente farmacéuticamente aceptable que incluye un agente espesante como se describe en el presente documento. En una realización, la formulación comprende además no más de aproximadamente 7 mg de sulfóxido de dimetilo como disolvente residual. En una realización, la formulación comprende no más de aproximadamente 6 mg de sulfóxido de dimetilo como disolvente residual. En una realización, la formulación comprende no más de aproximadamente 5 mg de sulfóxido de dimetilo como disolvente residual. En una realización, la formulación comprende no más de aproximadamente 4 mg de sulfóxido de dimetilo como disolvente residual. En una realización, la formulación comprende desde aproximadamente 3 mg hasta aproximadamente 7 mg, aproximadamente 4 mg a aproximadamente 6 mg, aproximadamente 4 mg a aproximadamente 5 mg o aproximadamente 5 mg a aproximadamente 6 mg de sulfóxido de dimetilo como disolvente residual. En una realización, la formulación comprende aproximadamente 4, 4,5, 5, 5,3, 5,5, 5,7, 6 o 6,5 mg de sulfóxido de dimetilo como disolvente residual.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que consisten esencialmente en el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,2 %, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 3 %-6 % y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 92-98 % basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que consisten esencialmente en el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,2 %, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 3 %-6 % y sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 92-98 % basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que consisten esencialmente en el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,2 %, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 3 %-6 %, HPBC^d en una cantidad de aproximadamente el 92-98 % y no más de aproximadamente el 1 % de sulfóxido de dimetilo basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que consisten esencialmente en el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,2 %, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 3 %-6 %, sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 92-98 % y no más de aproximadamente el 1 % de sulfóxido de dimetilo basado en el peso total de la formulación.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación en un vial de 20 cm3 que comprende: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1,05 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1 oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, un portador o excipiente farmacéuticamente aceptable que incluye un tampón y agente espesante como se describe en el presente documento, y aproximadamente 5 mg a aproximadamente 6 mg de sulfóxido de dimetilo como disolvente residual. El tampón y agente espesante pueden estar presentes en una cantidad como se describe en el presente documento.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación en un vial de 20 cm3 que comprende: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1,05 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, 18,6 mg de ácido cítrico anhidro, 18,4 mg de citrato de sodio anhidro, 840 mg de HPBCD y aproximadamente 5 mg a aproximadamente 6 mg de sulfóxido de dimetilo como disolvente residual como se describe en el presente documento. En una realización, la formulación en un vial de 20 cm3 se reconstituye con 3,8 ml de agua estéril para inyectables.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación en un vial de 20 cm3 que consiste esencialmente en: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1,05 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, 18,6 mg de ácido cítrico anhidro, 18,4 mg de citrato de sodio anhidro, 840 mg de HPBCD y aproximadamente 5 mg a aproximadamente 6 mg de sulfóxido de dimetilo como disolvente residual como se describe en el presente documento. En una realización, la formulación en un vial de 20 cm3 se reconstituye con 3,8 ml de agua estéril para inyectables.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación en un vial de 20 cm3 que consiste en: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1,05 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, 18,6 mg de ácido cítrico anhidro, 18,4 mg de citrato de sodio anhidro, 840 mg de HPBCD y aproximadamente 5 mg a aproximadamente 6 mg de sulfóxido de dimetilo como disolvente residual como se describe en el presente documento. En una realización, la formulación en un vial de 20 cm3 se reconstituye con 3,8 ml de agua estéril para inyectables.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación acuosa que comprende el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,2 % basado en el peso total de los sólidos, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 3 %-6 % basado en el peso total de los sólidos, HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 92-98 % basado en el peso total de los sólidos, y un diluyente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación acuosa que consiste esencialmente en el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,2 % basado en el peso total de los sólidos, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 3 %-6 % basado en el peso total de los sólidos, HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 92-98 % basado en el peso total de los sólidos, y un diluyente.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación acuosa que comprende: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1,05 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2.2- difluoroacetamida, 18,6 mg de ácido cítrico anhidro, 18,4 mg de citrato de sodio anhidro, 840 mg de HPBCD, y aproximadamente 5 mg a aproximadamente 6 mg de sulfóxido de dimetilo como disolvente residual y aproximadamente 3,8 ml de diluyente.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación acuosa que consiste esencialmente en: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1,05 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, 18,6 mg de ácido cítrico anhidro, 18,4 mg de citrato de sodio anhidro, 840 mg de HPBCD y aproximadamente 5 mg a aproximadamente 6 mg de sulfóxido de dimetilo como disolvente residual y aproximadamente 3,8 ml de diluyente.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación acuosa que consiste en: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1,05 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2.2- difluoroacetamida, 18,6 mg de ácido cítrico anhidro, 18,4 mg de citrato de sodio anhidro, 840 mg de HPBCD y aproximadamente 5 mg a aproximadamente 6 mg de sulfóxido de dimetilo como disolvente residual, y aproximadamente 3,8 ml de diluyente.

En ciertas realizaciones, la formulación tiene una composición como se describe en la Tabla 43.

Formulación Ib

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,01-0,15 %, hidroxipropil p-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 99,1-99,99 %. En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,01-0,15 %, hidroxipropil p-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 99,1-99,99 %, y no más de aproximadamente el 0,5 % de ácido fórmico basado en el peso total de la formulación.

En una realización, que no es parte de las reivindicaciones, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,25 % y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 99,1-99,9 % basado en el peso total de la formulación.

En una realización, que no es parte de las reivindicaciones, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,25 %, Hp Bc D en una cantidad de aproximadamente el 99,1-99,9 %, y no más de aproximadamente el 0,5 % de ácido fórmico basado en el peso total de la formulación.

En una realización, que no es parte de las reivindicaciones, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,25 % y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 99,75-99,9 % basado en el peso total de la formulación.

En una realización, que no es parte de las reivindicaciones, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,25 %, H^p B^c D en una cantidad de aproximadamente el 99,75-99,9 %, y no más de aproximadamente el 0,5 % de ácido fórmico basado en el peso total de la formulación.

En una realización, que no es parte de las reivindicaciones, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,25 %, Hp Bc D en una cantidad de aproximadamente el 99,75-99,9 %, y no más de aproximadamente el 0,2 % de ácido fórmico basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,08-0,15 % y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 99,8-99,9 % basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,08-0,15 %, HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 99,8-99,9 %, y no más de aproximadamente el 0,5 % de ácido fórmico basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,08-0,15 %, HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 99,8-99,9 %, y no más de aproximadamente el 0,12 % de ácido fórmico basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,12 % y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 99,88 % basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,08-0,15 % y sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 99,8-99,9 % basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,08-0,15 %, sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 99,8-99,9 %, y no más de aproximadamente el 0,5 % de ácido fórmico basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,12 % y sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 99,88 % basado en el peso total de la formulación.

En un aspecto, la formulación proporcionada en el presente documento comprende el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,08 a aproximadamente el 0,15 % basado en el peso total de la formulación. En ciertas realizaciones, la cantidad del compuesto 1 es desde aproximadamente el 0,09 % hasta aproximadamente el 0,15 %, aproximadamente el 0,1 % a aproximadamente el 0,13 % o aproximadamente el 0,11 % a aproximadamente el 0,12 % basado en el peso total de la formulación. En ciertas realizaciones, la cantidad del compuesto 1 es aproximadamente el 0,05 %, 0,07 %, 0,09 %, 0,11 %, 0,12 %, 0,13 %, o 0,15 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad del compuesto 1 en la formulación es aproximadamente el 0,12 % basado en el peso total de la formulación.

En otro aspecto, en el presente documento se proporciona una formulación que comprende el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 2 mg en un vial de 20 cm3. Aún en otro aspecto es una formulación que comprende el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 1,5 mg, aproximadamente 0,75 mg a aproximadamente 1,25 mg, o aproximadamente 0,8 mg a aproximadamente 1,1 mg en un vial de 20 cm3. En un aspecto el compuesto 1 está presente en una cantidad de aproximadamente 0,7, 0,75, 0,76, 0,8, 0,9, 1,0, 1,05 o 1,2 mg en un vial de 20 cm3. En un aspecto el compuesto 1 está presente en una cantidad de aproximadamente 1 mg en un vial de 20 cm3.

En una realización, la cantidad de HPBCD en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente el 99,1 %, 99,3 %, 99,5 %, 99,7 % o 99,9 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de HPBCD en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente el 99,5 % basado en el peso total de la formulación. En otro aspecto es una formulación que comprende HPBCD en una cantidad de aproximadamente 750-850 mg en un vial de 20 cm3. En otro aspecto es una formulación que comprende HPBCD en una cantidad de aproximadamente 790-840 mg, 780-830 mg o 790-810 mg en un vial de 20 cm3. En otro aspecto es una formulación que comprende HPBCD en una cantidad de aproximadamente 800 mg en un vial de 20 cm3.

En otro aspecto es una formulación que comprende Kleptose®HPB en una cantidad de aproximadamente 800 mg en un vial de 20 cm3.

En una realización, la cantidad de sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente el 99,1 %, 99,3 %, 99,5 %, 99,7 % o 99,9 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente el 99,5 % basado en el peso total de la formulación.

En otro aspecto es una formulación que comprende sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente 750-850 mg en un vial de 20 cm3. En otro aspecto es una formulación que comprende sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente 790-840 mg, 780-830 mg o 790-810 mg en un vial de 20 cm3. En otro aspecto es una formulación que comprende sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente 800 mg en un vial de 20 cm3.

En otro aspecto es una formulación que comprende Kleptose®HPB en una cantidad de aproximadamente 800 mg en un vial de 20 cm3.

En una realización, las formulaciones comprenden ácido fórmico en no más de aproximadamente el 0,5 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, las formulaciones comprenden ácido fórmico en una cantidad de hasta aproximadamente el 0,05 %, 0,07 %, 0,09 %, 0,1 %, 0,2 %, 0,3 %, 0,4 % o 0,5 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, las formulaciones comprenden ácido fórmico en no más de aproximadamente el 0,05 %, 0,07 %, 0,09 %, 0,1 %, 0,2 %, 0,3 %, 0,4 % o 0,5 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de ácido fórmico en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente del 0,05 a aproximadamente el 0,5 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de ácido fórmico en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente del 0,05 a aproximadamente el 0,1 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de ácido fórmico en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente el 0,05 %, 0,07 %, 0,09 %, 0,1 %, 0,2 %, 0,3 %, 0,4 % o 0,5 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, las formulaciones proporcionadas en el presente documento no contienen ácido fórmico. En una realización, la cantidad de ácido fórmico en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente del 0,05 % al 0,09 % basado en el peso total de la formulación.

En otro aspecto es una formulación que comprende ácido fórmico en una cantidad de no más de aproximadamente 1 mg en un vial de 20 cm3. En otro aspecto es una formulación que comprende ácido fórmico en una cantidad de hasta aproximadamente 0,2, 05, 0,7, 0,9 mg o 1 mg en un vial de 20 cm3. En otro aspecto es una formulación que comprende ácido fórmico en una cantidad de aproximadamente 0,3-0,9 mg, o 0,4 a 0,8 mg en un vial de 20 cm3.

En otro aspecto, en el presente documento se proporciona una formulación que comprende el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente 1 mg y HPBCD en una cantidad de aproximadamente 800 mg en un vial de 20 cm3.

En otro aspecto, en el presente documento se proporciona una formulación que comprende el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente 1 mg, HPBCD en una cantidad de aproximadamente 800 mg y ácido fórmico en una cantidad de aproximadamente el 0,9 mg en un vial de 20 cm3.

En ciertas realizaciones, la formulación tiene una composición como se describe en la Tabla 43.

Formulación Ic

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,01-0,08 % y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 99,40-99,99 % basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,01-0,08 %, HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 99,40-99,99 %, y no más de aproximadamente el 0,5 % de ácido fórmico basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,03-0,06 % y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 99,60-99,99 % basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente el 0,08 %, hidroxipropil p-ciclodextrina desde aproximadamente el 99,40 % a aproximadamente el 99,99 %, y ácido fórmico desde aproximadamente el 0,1 a aproximadamente el 0,3 % basado en el peso total de la formulación

En un aspecto, la formulación proporcionada en el presente documento comprende el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,02 a aproximadamente el 0,06 % basado en el peso total de la formulación. En ciertas realizaciones, la cantidad del compuesto 1 es desde aproximadamente el 0,03 % a aproximadamente el 0,06 %, o aproximadamente el 0,04 % a aproximadamente el 0,06 % basado en el peso total de la formulación. En ciertas realizaciones, la cantidad del compuesto 1 es aproximadamente el 0,03 %, 0,04 %, 0,05 % o 0,06 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad del compuesto 1 en la formulación es aproximadamente el 0,05 % basado en el peso total de la formulación.

En otro aspecto, en el presente documento se proporciona una formulación que comprende el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente 0,75 mg a aproximadamente 1,5 mg en un vial de 20 cm3. Aún en otro aspecto es una formulación que comprende el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente 0,75 mg a aproximadamente 1,25 mg en un vial de 20 cm3. En un aspecto el compuesto 1 está presente en una cantidad de aproximadamente 0,75, 0,8, 0,9, 1,0, 1,05 o 1,2 mg en un vial de 20 cm3. En un aspecto el compuesto 1 está presente en una cantidad de aproximadamente 1 mg en un vial de 20 cm3.

En una realización, la cantidad de HPBCD en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente el 99,40 a aproximadamente el 99,99 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de HPBCD en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente el 99,5, 99,6, 99,7, 99,8, 99,9, 99,95 o 99,99 % basado en el peso total de la formulación. En otro aspecto es una formulación que comprende HPBCD en una cantidad de aproximadamente 1800-1900 mg en un vial de 20 cm3. En otro aspecto es una formulación que comprende HPBCD en una cantidad de aproximadamente 1850­ 1900 mg en un vial de 20 cm3. En otro aspecto es una formulación que comprende HPBCD en una cantidad de aproximadamente 1875 mg en un vial de 20 cm3.

En una realización, las formulaciones comprenden ácido fórmico en no más de aproximadamente el 0,5 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, las formulaciones comprenden ácido fórmico en una cantidad de hasta aproximadamente el 0,05 %, 0,07 %, 0,09 %, 0,1 %, 0,2 %, 0,3 %, 0,4 % o 0,5 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, las formulaciones comprenden ácido fórmico en no más de aproximadamente el 0,05 %, 0,07 %, 0,09 %, 0,1 %, 0,2 %, 0,3 %, 0,4 % o 0,5 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de ácido fórmico en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente el 0,05 a aproximadamente el 0,3 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de ácido fórmico en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente el 0,05 a aproximadamente el 0,25 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, la cantidad de ácido fórmico en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente el 0,05 %, 0,07 %, 0,09 %, 0,1 %, 0,2 %, o 0,3 % basado en el peso total de la formulación. En una realización, las formulaciones proporcionadas en el presente documento no contienen ácido fórmico. En una realización, la cantidad de ácido fórmico en las formulaciones proporcionadas en el presente documento es aproximadamente del 0,11 % al 0,3 % basado en el peso total de la formulación.

En otro aspecto es una formulación que comprende ácido fórmico en una cantidad de no más de aproximadamente 4 mg en un vial de 20 cm3. En otro aspecto es una formulación que comprende ácido fórmico en una cantidad de hasta aproximadamente 1, 1,8, 2, 2,1, 2,5, 3, 3,5, 3,8, 3,9, 4, 4,5, 4,9 mg o 5 mg en un vial de 20 cm3. En otro aspecto es una formulación que comprende ácido fórmico en una cantidad de aproximadamente 1-1,8 mg, 2,1-3,8 mg o 3,9­ 4,9 mg en un vial de 20 cm3.

En otro aspecto, en el presente documento se proporciona una formulación que comprende el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente 1 mg, y HPBCD en una cantidad de aproximadamente 1875 mg en un vial de 20 cm3.

En otro aspecto, en el presente documento se proporciona una formulación que comprende el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente 1 mg, HPBCD en una cantidad de aproximadamente 1875 mg y ácido fórmico en una cantidad de aproximadamente 2,1-3,8 mg en un vial de 20 cm3.

En ciertas realizaciones, la formulación tiene una composición como se describe en la Tabla 64.

Formulaciones sin codisolvente (formulaciones que comprenden 0,01-0,15 % p del compuesto 1 y 99,1-99,99 % p de o hidroxipropil p-ciclodextrina o sulfobutil éter-beta-ciclodextrina se encuentran dentro del alcance de las reivindicaciones)

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,15-0,5 %, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 15 % a aproximadamente el 35 %, y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 92 % a aproximadamente el 98 %, basado en el peso total de la formulación. En una realización, el tampón citrato comprende ácido cítrico anhidro y citrato de sodio anhidro.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,25-0,30 %, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 30-32 % y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 67-69 %, basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que comprenden el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,30-0,33 %, un tampón citrato en una cantidad de aproximadamente el 17-18 % y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 80-85 %, basado en el peso total de la formulación.

Formulaciones a modo de ejemplo

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que consisten esencialmente en el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,25 % y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 99.75- 99,95 % basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que consisten esencialmente en el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,25 % y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 99.75- 99,99 % basado en el peso total de la formulación.

En una realización, en el presente documento se proporcionan formulaciones que consisten esencialmente en el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,25 % y sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 99,75-99,95 %, basado en el peso total de la formulación.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación en un vial de 20 cm3 que comprende: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, 800 mg de HPBCD y aproximadamente 0,6 mg de ácido fórmico como se describe en el presente documento. En una realización, la formulación en un vial de 20 cm3 se reconstituye con 4,5 ml de agua estéril para inyectables.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación en un vial de 20 cm3 que consiste esencialmente en: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, 800 mg de HPBCD y aproximadamente 0,6 mg de ácido fórmico como se describe en el presente documento. En una realización, la formulación en un vial de 20 cm3 se reconstituye con 4,5 ml de agua estéril para inyectables.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación en un vial de 20 cm3 que consiste en: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, 800 mg de HPBCD y aproximadamente 0,6 mg de ácido fórmico como se describe en el presente documento. En una realización, la formulación en un vial de 20 cm3 se reconstituye con 4,5 ml de agua estéril para inyectables.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación en un vial de 20 cm3 que comprende: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, 800 mg de sulfobutil éter-beta-ciclodextrina y aproximadamente 0,6 mg de ácido fórmico como se describe en el presente documento. En una realización, la formulación en un vial de 20 cm3 se reconstituye con 4,5 ml de agua estéril para inyectables.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación en un vial de 20 cm3 que consiste esencialmente en: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, 800 mg de sulfobutil éter-beta-ciclodextrina y aproximadamente 0,6 mg de ácido fórmico como se describe en el presente documento. En una realización, la formulación en un vial de 20 cm3 se reconstituye con 4,5 ml de agua estéril para inyectables.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación en un vial de 20 cm3 que consiste en: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, 800 mg de sulfobutil éter-beta-ciclodextrina y aproximadamente 0,6 mg de ácido fórmico como se describe en el presente documento. En una realización, la formulación en un vial de 20 cm3 se reconstituye con 4,5 ml de agua estéril para inyectables.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación en un vial de 20 cm3 que comprende: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, 1875 mg de HPBCD y aproximadamente 2,1-3,8 mg de ácido fórmico como se describe en el presente documento. En una realización, la formulación en un vial de 20 cm3 se reconstituye con 12,5 ml de solución salina al 0,9 % para inyección.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación en un vial de 20 cm3 que consiste esencialmente en: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, 1875 mg de HPBCD y aproximadamente 2,1-3,8 mg de ácido fórmico como se describe en el presente documento. En una realización, la formulación en un vial de 20 cm3 se reconstituye con 12,5 ml de solución salina al 0,9 % para inyección.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación en un vial de 20 cm3 que consiste en: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, 1875 mg de HPBCD y aproximadamente 2,1-3,8 mg de ácido fórmico como se describe en el presente documento. En una realización, la formulación en un vial de 20 cm3 se reconstituye con 12,5 ml de solución salina al 0,9 % para inyección.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación acuosa que comprende el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,25 % basado en el peso total de los sólidos y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 99,1-99,9 % basado en el peso total de los sólidos, y un diluyente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación acuosa que comprende el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,25 % basado en el peso total de los sólidos y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 99,75-99,95 % basado en el peso total de los sólidos, y un diluyente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación acuosa que consiste esencialmente en el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,05-0,25 % basado en el peso total de los sólidos y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 99,75-99,95 % basado en el peso total de los sólidos, y un diluyente.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación acuosa que comprende: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, 800 mg de HPBCD, aproximadamente 0,6 mg de ácido fórmico y aproximadamente 4,5 ml de diluyente.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación acuosa que consiste en: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, 800 mg de HPBCD, aproximadamente 0,6 mg de ácido fórmico y aproximadamente 4,5 ml de diluyente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación acuosa que comprende el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,01-0,08 % basado en el peso total de los sólidos y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 99,50-99,99 % basado en el peso total de los sólidos, y un diluyente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación acuosa que comprende el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,01-0,08 % basado en el peso total de los sólidos y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 99,50-99,99 % basado en el peso total de los sólidos, y un diluyente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación acuosa que consiste esencialmente en el compuesto 1 en una cantidad de aproximadamente el 0,01-0,08 % basado en el peso total de los sólidos y HPBCD en una cantidad de aproximadamente el 99,50-99,99 % basado en el peso total de los sólidos, y un diluyente.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación acuosa que comprende: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, 800 mg de HPBCD, aproximadamente 0,6 mg de ácido fórmico y aproximadamente 4,5 ml de diluyente.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación acuosa que consiste en: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida, 800 mg de HPBCD, aproximadamente 0,6 mg de ácido fórmico y aproximadamente 4,5 ml de diluyente.

En ciertas realizaciones, la formulación tiene una composición como se describe en la Tabla 43. En ciertas realizaciones, la formulación tiene una composición como se describen en la Tabla 64.

En ciertas realizaciones, la formulación proporcionada en el presente documento está liofilizada, y la formulación liofilizada tras la reconstitución tiene un pH de aproximadamente 2,5 a 4. En ciertas realizaciones, la formulación liofilizada tras la reconstitución tiene un pH de aproximadamente 2,5 a 3,5. En ciertas realizaciones, la formulación liofilizada tras la reconstitución tiene un pH de aproximadamente el 3,0 a 3,6. En una realización, la formulación liofilizada tras la reconstitución tiene un pH de aproximadamente 2,5, 3, 3,2, 3,4, 3,6, 3,8 o 4. En una realización, la formulación liofilizada tras la reconstitución tiene un pH de aproximadamente 2,5, 2,8, 3, 3,2, 3,4, 3,6, 3,8 o 4.

En ciertas realizaciones, la formulación liofilizada tras la reconstitución tiene una osmolalidad de aproximadamente 260-290 mOsm/kg. En ciertas realizaciones, la formulación liofilizada tras la reconstitución tiene una osmolalidad de aproximadamente 280 mOsm/kg. En ciertas realizaciones, la formulación liofilizada tras la reconstitución tiene una osmolalidad de aproximadamente 260-370 mOsm/kg. En ciertas realizaciones, la formulación liofilizada tras la reconstitución tiene una osmolalidad de aproximadamente el 360 mOsm/kg. En ciertas realizaciones, la formulación liofilizada tras la reconstitución tiene una osmolalidad de aproximadamente el 350-450 mOsm/kg. En ciertas realizaciones, la formulación liofilizada tras la reconstitución tiene una osmolalidad de aproximadamente 416 mOsm.

En ciertas realizaciones, la formulación liofilizada se reconstituye con solución salina al 0,45 % (disolución estéril para inyección de 0,45 % de cloruro sódico) y tiene una osmolalidad de aproximadamente 280-320 mOsm/kg tras la reconstitución. En ciertas realizaciones, la formulación liofilizada se reconstituye con solución salina al 0,45 % (disolución estéril para inyección de 0,45 % de cloruro sódico), y tiene un pH de 3,0-3,2 y una osmolalidad de aproximadamente 280-320 mOsm/kg tras la reconstitución. En ciertas realizaciones, la formulación liofilizada se reconstituye con 4,5 ml de solución salina al 0,45 % (disolución estéril para inyección de 0,45 % de cloruro sódico), y tiene un pH de 3,0-3,2 y una osmolalidad de aproximadamente 280-320 mOsm/kg tras la reconstitución. En una realización, la disolución reconstituida de la dosis requerida se diluye con solución salina al 0,9 % (disolución estéril para inyección de 0,9 % cloruro sódico) en una bolsa para infusión a un volumen hasta 50 ml para administración intravenosa de 30 minutos.

En ciertas realizaciones, la formulación liofilizada se reconstituye con solución salina al 0,9 % y tiene una osmolalidad de aproximadamente 440 mOsm/kg tras la reconstitución. En una realización, la disolución reconstituida de la dosis requerida se diluye con solución salina al 0,9 % a un volumen hasta 50 ml para obtener una disolución para administración que tiene una osmolalidad de aproximadamente 310-380 mOsm/kg. En una realización, la disolución reconstituida de la dosis requerida se diluye con solución salina al 0,9 % a un volumen hasta 50 ml para obtener una disolución para administración que tiene una osmolalidad de aproximadamente 310-355 mOsm/kg. En una realización, la disolución reconstituida de la dosis requerida se diluye con solución salina al 0,9 % a un volumen hasta 50 ml para obtener una disolución para administración que tiene una osmolalidad de aproximadamente 317-371 mOsm/kg. En una realización, la disolución reconstituida de la dosis requerida se diluye con solución salina al 0,9 % a un volumen hasta 50 ml para obtener una disolución para administración que tiene una osmolalidad de aproximadamente 317 mOsm/kg. En una realización, la disolución reconstituida de la dosis requerida se diluye con solución salina al 0,9 % a un volumen hasta 50 ml para obtener una disolución para administración que tiene una osmolalidad de aproximadamente 371 mOsm/kg. En una realización, la osmolalidad de la disolución de administración es no más de 352 mOsm/kg. En una realización, la osmolalidad de la disolución de administración que tiene una dosis de 4,8 mg del compuesto 1 es 352 mOsm/kg.

En ciertas realizaciones, en el presente documento se proporciona un recipiente que comprende una formulación proporcionada en su interior. En un aspecto, el recipiente es un vial de vidrio. En un aspecto, el recipiente es un vial de vidrio de 20 cm3.

En un aspecto proporcionado en el presente documento es una formulación en un vial de 20 cm3 que comprende: el compuesto 1 en una cantidad que proporciona 1 mg de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida y un agente espesante como se describe en el presente documento. En una realización, la formulación comprende además no más de aproximadamente 5 mg de ácido fórmico como disolvente residual. En una realización, la formulación comprende además no más de aproximadamente 4 mg de ácido fórmico como disolvente residual. En una realización, la formulación comprende además no más de aproximadamente 3 mg de ácido fórmico como disolvente residual. En una realización, la formulación comprende además no más de aproximadamente 2 mg de ácido fórmico como disolvente residual. En una realización, la formulación comprende además no más de aproximadamente 1,5 mg de ácido fórmico como disolvente residual. En una realización, la formulación comprende además no más de aproximadamente 1 mg de ácido fórmico como disolvente residual. En una realización, la formulación comprende además no más de aproximadamente 0,8 mg de ácido fórmico como disolvente residual. En una realización, la formulación comprende desde aproximadamente 0,4 mg a aproximadamente 1,5 mg, aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 1 mg, o aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente el 0,9 mg de ácido fórmico como disolvente residual. En una realización, la formulación comprende aproximadamente 0,4 mg, aproximadamente 0,6 mg, aproximadamente 0,8 mg, aproximadamente 1 mg o aproximadamente 1,5 mg de ácido fórmico como disolvente residual. En una realización, la formulación comprende ácido fórmico como disolvente residual en una cantidad desde aproximadamente 1,0 mg/mg del compuesto 1 hasta aproximadamente 1,8 mg/mg del compuesto 1, aproximadamente 2,1 mg/mg del compuesto 1 a aproximadamente 3,8 mg/mg del compuesto 1, o aproximadamente 3,9 mg/mg del compuesto 1 a aproximadamente 4,9 mg/mg del compuesto 1.

Las formulaciones del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se pueden administrar a un paciente en necesidad del mismo usando métodos terapéuticos habituales para administrar el compuesto 1 que incluyen, pero no se limitan a, los métodos descritos en el presente documento. En una realización, las formulaciones en el presente documento se proporcionan reconstituidas en un disolvente farmacéuticamente aceptable para producir una disolución farmacéuticamente aceptable, en donde la disolución se administra (tal como por inyección intravenosa) al paciente.

En un aspecto, las formulaciones proporcionadas en el presente documento están liofilizadas, y las formulaciones liofilizadas son adecuadas para reconstitución con un diluyente adecuado a la concentración apropiada antes de la administración. En una realización, la formulación liofilizada es estable a temperatura ambiente. En una realización, la formulación liofilizada es estable a temperatura ambiente durante hasta aproximadamente 24 meses. En una realización, la formulación liofilizada es estable a temperatura ambiente durante hasta aproximadamente 24 meses, hasta aproximadamente 18 meses, hasta aproximadamente 12 meses, hasta aproximadamente 6 meses, hasta aproximadamente el 3 meses o hasta aproximadamente 1 mes. En una realización, la formulación liofilizada es estable tras el almacenamiento en condición acelerada de 40 °C/75 % de HR durante hasta aproximadamente 12 meses, hasta aproximadamente 6 meses o hasta aproximadamente 3 meses.

La formulación liofilizada proporcionada en el presente documento se puede reconstituir para administración parenteral a un paciente usando cualquier diluyente farmacéuticamente aceptable. Dichos diluyentes incluyen, pero no se limitan a, agua estéril para inyectables (SWFI), dextrosa 5 % en agua (D5W), o un sistema de codisolventes. Se puede usar cualquier cantidad de diluyente para reconstituir la formulación liofilizada de forma que se prepare una disolución para inyección adecuada. Por consiguiente, la cantidad de diluyente debe ser suficiente para disolver la formulación liofilizada. En una realización, se usan 1-5 ml o 1 a 4 ml de un diluyente para reconstituir la formulación liofilizada para dar una concentración final de aproximadamente 0,05-0,3 mg/ml o aproximadamente 0,15-0,25 mg/ml del compuesto 1. En ciertas realizaciones, la concentración final del compuesto 1 en la disolución reconstituida es aproximadamente 0,25 mg/ml. En ciertas realizaciones, la concentración final del compuesto 1 en la disolución reconstituida es aproximadamente 0,20 mg/ml. En ciertas realizaciones, el volumen del diluyente de reconstitución varía entre 3 ml y 5 ml para dar una concentración final de 0,15-0,3 mg/ml. En ciertas realizaciones, dependiendo de la dosis requerida, se pueden usar múltiples viales para reconstitución.

Las disoluciones reconstituidas de formulación liofilizada se pueden almacenar y usar hasta aproximadamente 24 horas, aproximadamente 12 horas o aproximadamente 8 horas. En una realización, la disolución acuosa reconstituida es estable a temperatura ambiente desde aproximadamente 1-24, 2-20, 2-15, 2-10 horas tras la reconstitución. En una realización, la disolución acuosa reconstituida es estable a temperatura ambiente durante hasta aproximadamente 20, 15, 12, 10, 8, 6, 4 o 2 horas tras la reconstitución. En algunas realizaciones, la disolución se usa en 8 horas desde la preparación. En algunas realizaciones, la disolución se usa en 5 horas desde la preparación. En algunas realizaciones, la disolución se usa en 1 hora desde la preparación.

Proceso de preparación de formulaciones

Las formulaciones proporcionadas en el presente documento se pueden preparar por cualquiera de los métodos conocidos en la técnica y como se describen en el presente documento, pero todos los métodos incluyen la etapa de poner el principio activo en asociación con el excipiente farmacéuticamente aceptable, que constituye uno o más componentes necesarios (tales como agente espesante y/o tampón). Según las reivindicaciones, el compuesto 1 se disuelve en ácido fórmico para obtener una premezcla, y la premezcla se añade a una disolución de hidroxipropil pciclodextrina en agua para obtener una disolución de fármaco.

Alternativamente, las formulaciones proporcionadas en el presente documento se pueden preparar disolviendo el compuesto 1, un agente espesante y un tampón citrato en agua y sulfóxido de dimetilo (^d M^s O) para obtener una disolución, y opcionalmente liofilizando la disolución. Las FIG. 37 y 38 proporcionan diagramas de flujo que ilustran procesos a modo de ejemplo para preparar las formulaciones proporcionadas en el presente documento.

En una realización, que no se reivindica, el proceso de preparación de la formulación comprende:

disolver HPBCD en un tampón citrato para obtener una disolución de tampón, disolver el compuesto 1 en DMSO para obtener una premezcla, añadir la premezcla a la disolución de tampón para obtener una disolución; y opcionalmente liofilizar la disolución para producir la formulación liofilizada.

Por ejemplo, el proceso comprende disolver Kleptose® HPB en un tampón citrato 20 mM, pH 4 - 4,5, para obtener una disolución de tampón, disolver el compuesto 1 en DMSO para obtener una premezcla activa, añadir la premezcla a la disolución de tampón para obtener una mezcla, añadir agua a la mezcla para obtener una disolución a granel, filtrar la disolución a granel a través de uno o más filtros de 0,45 pm y 0,22 pm para obtener una disolución filtrada, llenar la disolución filtrada en un vial y liofilizar la disolución. En una realización, la disolución se filtra a través de un filtro 0,45 pm y dos de 0,22 pm. En una realización, el proceso comprende disolver Kleptose® HPB en un tampón citrato 20 mM, pH 4,3, para obtener una disolución de tampón, disolver el compuesto 1 en DMSO para obtener una premezcla activa, añadir la premezcla a la disolución de tampón para obtener una mezcla, añadir agua a la mezcla para obtener una disolución a granel, filtrar la disolución a granel a través de un filtro de 0,45 pm y dos filtros de 0,22 pm para obtener una disolución filtrada, llenar la disolución filtrada en un vial de vidrio de 20 cm3, y opcionalmente liofilizar la disolución. En una realización, el vial se cierra bajo nitrógeno después de la liofilización.

Según la invención, las formulaciones proporcionadas en el presente documento se prepararon disolviendo el compuesto 1 en ácido fórmico para obtener una premezcla, disolviendo HPBCD en agua para obtener una disolución, añadiendo la premezcla a la disolución para obtener una disolución de fármaco; y opcionalmente liofilizando la disolución de fármaco para producir la formulación liofilizada.

En un aspecto, las formulaciones proporcionadas en el presente documento se prepararon disolviendo el compuesto 1 en ácido fórmico para obtener una premezcla activa, disolviendo Kleptose® HPB en agua para obtener una disolución de Kleptose, añadiendo la premezcla a la disolución de Kleptose para obtener una mezcla, añadiendo agua a la mezcla para obtener una disolución a granel, filtrando la disolución a granel a través de uno o más filtros de 0,45 pm y 0,22 pm para obtener una disolución filtrada, llenando la disolución filtrada en un vial y liofilizando la disolución. En una realización, la disolución se filtra a través de un filtro de 0,45 pm y dos de 0,22 pm. En una realización, el proceso comprende disolver el compuesto 1 en ácido fórmico para obtener una premezcla activa, disolver Kleptose® HPB en agua para obtener una disolución de Kleptose, añadir la premezcla a la disolución de Kleptose para obtener una mezcla, añadir agua a la mezcla para obtener una disolución a granel, filtrar la disolución a granel a través de un filtro de 0,45 pm y dos de 0,22 pm para obtener una disolución filtrada, llenar la disolución filtrada en un vial de vidrio de 20 cm3 y liofilizar la disolución. En una realización, el vial se cierra bajo nitrógeno después de la liofilización.

En un aspecto, el proceso de liofilización contiene tres etapas: congelación, secado primario y secado secundario. Una formulación líquida se transforma en una forma de polvo liofilizado pasando por solidificación completa a través de la etapa de congelación, sublimación de hielo y disolventes a través del secado primario, y desorción de humedad residual y disolventes a través de secado secundario. La temperatura en anaquel y la presión de la cámara en el secado primario y secado secundario están controlados para obtener la calidad deseada del medicamento terminado. En un aspecto del proceso, el aspecto de la torta y la estructura se caracterizó por inspección visual.

Kits (no se reivindica)

También se proporcionan envases o kits farmacéuticos que comprenden composiciones farmacéuticas o formas farmacéuticas proporcionadas en el presente documento. Los kits a modo de ejemplo incluyen un aviso en la forma prescrita por una agencia gubernamental que regula la fabricación, el uso o la venta de productos farmacéuticos, aviso que refleja la autorización por la agencia de fabricación, el uso o la venta para administración humana.

Métodos de uso y el compuesto 1 para su uso en dichos métodos

El compuesto 1 como se proporciona en el presente documento se puede usar en todos los métodos proporcionados en el presente documento. En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en métodos de tratamiento, prevención, abordaje y/o mejora de cánceres, que incluyen tumores sólidos y cánceres hematológicos, o uno o más síntomas o causas de los mismos, en donde el compuesto 1 se administra en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método de tratamiento y prevención de cáncer, que comprende administrar a un paciente una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento.

En otra realización, en el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método de abordaje del cáncer, que comprende administrar a un paciente una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento.

En una realización, las formulaciones para su uso proporcionado en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK.

También se muestran a modo de ejemplo en el presente documento las formulaciones para su uso en métodos de tratamiento de pacientes que han sido previamente tratados para el cáncer, pero que no son sensibles a terapias contra el cáncer, así como los que no han sido tratados previamente. También están englobados métodos de tratamiento de pacientes independientemente de la edad del paciente, aunque algunas enfermedades o trastornos son más comunes en ciertos grupos de edad.

Las formulaciones pueden ser para su uso en métodos de tratamiento de pacientes que se han sometido a cirugía en un intento por tratar la enfermedad o afección en cuestión, así como los que no. Debido a que los pacientes con cáncer tienen manifestaciones clínicas heterogéneas y desenlaces clínicos variables, el tratamiento administrado a un paciente puede variar, dependiendo de su pronóstico. El profesional clínico experto será capaz de determinar fácilmente sin excesiva experimentación agentes secundarios específicos, tipos de cirugía y tipos de terapia habitual no basada en fármacos que se puede usar eficazmente para tratar un paciente individual con cáncer.

En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en métodos para mejorar el Estado funcional del Grupo Oncológico Cooperativo de la Costa Este (ECOG) de un paciente con cáncer, que comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en métodos de mejora del Estado funcional del Grupo Oncológico Cooperativo de la Costa Este (ECOG) de un paciente con cáncer, que comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de ^f LT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en mejorar el Estado funcional del Grupo Oncológico Cooperativo de la Costa Este (ECOG) de un paciente con cáncer, que comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporcionan dichas formulaciones para su uso en métodos para la inhibición de la progresión de la enfermedad, la inhibición del crecimiento tumoral, la reducción del tumor primario, el alivio de síntomas relacionados con el tumor, la inhibición de factores secretados por el tumor, la aparición retardada de tumores primarios o secundarios, el desarrollo ralentizado de tumores primarios o secundarios, la disminución de la aparición de tumores primarios o secundarios, el ralentizamiento o la disminución de la intensidad de los efectos secundarios de la enfermedad, la detención del crecimiento tumoral y la regresión de tumores, el aumento del tiempo hasta la progresión, el aumento de la supervivencia sin progresión, el aumento de la supervivencia global o uno o más de los mismos, en un paciente con cáncer, que comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente. En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en todos dichos métodos en un paciente con cáncer, que comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporcionan dichas formulaciones para su uso en métodos para la inhibición de la progresión de la enfermedad, la inhibición del crecimiento tumoral, la reducción del tumor primario, el alivio de síntomas relacionados con el tumor, la inhibición de factores secretados por el tumor, la aparición retardada de tumores primarios o secundarios, el desarrollo ralentizado de tumores primarios o secundarios, la disminución de la aparición de tumores primarios o secundarios, el ralentizamiento o la disminución de la intensidad de los efectos secundarios de la enfermedad, la detención del crecimiento tumoral y la regresión de tumores, el aumento del tiempo hasta la progresión, el aumento de la supervivencia sin progresión, el aumento de la supervivencia global en un paciente con cáncer, o uno o más de los mismos, que comprenden administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente. En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en todos dichos métodos en un paciente con cáncer, o uno o más de los mismos, que comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporcionan dichas formulaciones para su uso en métodos para la inhibición de la progresión de la enfermedad, la inhibición del crecimiento tumoral, la reducción del tumor primario, el alivio de síntomas relacionados con el tumor, la inhibición de factores secretados por el tumor, la aparición retardada de tumores primarios o secundarios, el desarrollo ralentizado de tumores primarios o secundarios, la disminución de la aparición de tumores primarios o secundarios, el ralentizamiento o la disminución de la intensidad de los efectos secundarios de la enfermedad, la detención del crecimiento tumoral y la regresión de tumores, el aumento del tiempo hasta la progresión, el aumento de la supervivencia sin progresión, el aumento de la supervivencia global en un paciente con cáncer, o uno o más de los mismos, que comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en todos dichos métodos en un paciente con cáncer, o uno o más de los mismos, que comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente.

En ciertas realizaciones, el cáncer es un tumor sólido o un cáncer hematológico. En ciertas realizaciones, el cáncer es independiente de interleucina-3 (IL-3). En ciertas realizaciones, el cáncer es un tumor sólido. En ciertas realizaciones, el tumor sólido es metastásico. En ciertas realizaciones, el tumor sólido es resistente a los fármacos.

En ciertas realizaciones, cáncer se refiere a una enfermedad tejidos de la piel, órganos, sangre y vasos. En ciertas realizaciones, el cáncer es un tumor sólido, que incluye, pero no se limita a, cánceres de la vejiga, hueso, sangre, cerebro, mama, cuello uterino, pecho, colon, endometrio, esófago, ojo, cabeza, riñón, hígado, ganglios linfáticos, pulmón, boca, cuello, ovario, páncreas, próstata, recto, estómago, testículo, garganta y útero. Los cánceres específicos incluyen, pero no se limitan a, tumor maligno avanzado, amiloidosis, neuroblastoma, meningioma, hemangiopericitoma, múltiples metástasis al cerebro, glioblastoma multiforme, glioblastoma, glioma del tronco encefálico, tumor maligno cerebral de mal pronóstico, glioma maligno, glioma maligno recurrente, astrocitoma anaplásico, oligodendroglioma anaplásico, tumor neuroendocrino, adenocarcinoma rectal, cáncer colorrectal, que incluye estadio 3 y estadio 4, carcinoma colorrectal inoperable, carcinoma hepatocelular metastásico, sarcoma de Kaposi, leucemia mieloblástica aguda con cariotipo, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, linfoma cutáneo de linfocitos T, linfoma cutáneo de linfocitos B, linfoma difuso de linfocitos B grandes, linfoma folicular de escasa malignidad, melanoma maligno, mesotelioma maligno, síndrome de mesotelioma con derrame pleural maligno, carcinoma peritoneal, carcinoma seroso papilar, sarcoma ginecológico, sarcoma de tejido blando, esclerodermia, vasculitis cutánea, histiocitosis de células de Langerhans, leiomiosarcoma, fibrodisplasia osificante progresiva, cáncer de próstata resistente a hormonas, sarcoma de tejido blando de alto riesgo extirpado, carcinoma hepatocelular inoperable, macroglobulinemia de Waldenstrom, mieloma asintomático, mieloma de escasa malignidad, cáncer de las trompas de Falopio, cáncer de próstata independiente de andrógenos, cáncer de próstata no metastásico de estadio IV dependiente de andrógenos, cáncer de próstata insensible a hormonas, cáncer de próstata insensible a la quimioterapia, carcinoma, que incluye carcinoma tiroideo papilar, carcinoma tiroideo folicular y carcinoma tiroideo medular, y leiomioma.

En ciertas realizaciones, el cáncer es un tumor sólido, que incluye, pero no se limita a, cánceres de la piel, sistema nervioso central, tejido blando, glándula salival, ovario, riñón, pulmón, hueso, estómago, endometrio, páncreas, vías urinarias, tiroides, tracto aerodigestivo superior, mama, intestino grueso, esófago, próstata, hígado, ganglios neurovegetativos y mesotelioma pleural maligno.

En ciertas realizaciones, el tumor sólido es carcinoma hepatocelular, cáncer de próstata, cáncer de ovario o glioblastoma.

En ciertas realizaciones, el tumor sólido es cáncer de mama, cáncer de riñón, cáncer pancreático, cáncer gastrointestinal, cáncer de pulmón, tumor neuroendocrino (TNE) o carcinoma de células renales (CCR).

En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer hematológico. En ciertas realizaciones, el cáncer hematológico es metastásico. En ciertas realizaciones, el cáncer hematológico es resistente a los fármacos a al menos una terapia antineoplásica. En ciertas realizaciones, el cáncer hematológico es recidivante o insensible a al menos una terapia antineoplásica.

En una realización, el cáncer hematológico es mieloma múltiple (MM). En una realización, el cáncer hematológico es MM recidivante/insensible (R/R). En una realización, el paciente que tiene MM R/R tiene insuficiencia renal.

En una realización proporcionada en el presente documento es la formulación inventiva para su uso en un método para lograr una remisión completa estricta (sCR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente. En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa rigurosa (sCR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización proporcionada en el presente documento es la formulación inventiva para su uso en un método para lograr una remisión completa estricta (sCR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa estricta (sCR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización proporcionada en el presente documento es la formulación inventiva para su uso en un método para lograr una remisión completa estricta (sCR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa estricta (sCR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente.

En una realización proporcionada en el presente documento es la formulación inventiva para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente. En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización proporcionada en el presente documento es la formulación inventiva para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización proporcionada en el presente documento es la formulación inventiva para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente.

En una realización proporcionada en el presente documento es la formulación inventiva para su uso en un método para lograr una respuesta parcial muy buena (VGPR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente. En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una respuesta parcial muy buena (VGPR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización proporcionada en el presente documento es la formulación inventiva para su uso en un método para lograr una respuesta parcial muy buena (VGPR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una respuesta parcial muy buena (VGPR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización proporcionada en el presente documento es la formulación inventiva para su uso en un método para lograr una respuesta parcial muy buena (VGPR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una respuesta parcial muy buena (VGPR) en un paciente con MM.

En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una respuesta parcial (PR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una respuesta parcial (PR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una respuesta parcial (PR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una respuesta parcial (PR) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una respuesta parcial en un paciente con MM.

En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una enfermedad estable (SD) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una enfermedad estable (SD) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una enfermedad estable (SD) en un paciente con MM, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una enfermedad estable en un paciente con MM.

En una realización, el cáncer hematológico es leucemia mielógena aguda (LMA). En una realización, el cáncer hematológico es leucemia linfocítica aguda (LLA). En una realización, el cáncer hematológico es leucemia de linfocitos T del adulto. En una realización, el cáncer hematológico es leucemia linfocítica crónica (LLC). En una realización, el cáncer hematológico es leucemia de células pilosas. En una realización, el cáncer hematológico es mielodisplasia. En una realización, el cáncer hematológico es un trastorno mieloproliferativo o neoplasia mieloproliferativa (NMP). En una realización, el cáncer hematológico es leucemia mielógena crónica (LMC). En una realización, el cáncer hematológico es síndrome mielodisplásico (SMD). En una realización, el cáncer hematológico es leucemia del virus linfotrópico humano-tipo 1 (HTLV-1). En una realización, el cáncer hematológico es mastocitosis. En una realización, el cáncer hematológico es leucemia linfoblástica aguda de linfocitos B. En una realización, el cáncer hematológico es LLC.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en métodos de tratamiento, prevención, abordaje y/o mejora de un cáncer seleccionado de linfoma difuso de linfocitos B grandes (DLBCL), linfoma inmunoblástico de linfocitos T, linfoma de células pequeñas no hendidas, leucemia)/linfoma del virus linfotrópico humano-tipo 1 (HTLV-1), linfoma de linfocitos T del adulto, linfoma de células del manto (MCL), linfoma de Hodgkin (HL), linfoma no Hodgkin (NHL), linfoma relacionado con el SIDA, linfoma folicular, linfoma linfocítico pequeño, linfoma de linfocitos B grandes rico en histiocitos/linfocitos T, linfoma transformado, linfoma primario de mediastino de linfocitos B grandes (tímico), linfoma esplénico de la zona marginal, transformación de Richter, linfoma nodal de la zona marginal o linfoma de linfocitos B grandes ALK-positivos en un sujeto, que comprende la etapa de administrar al sujeto una cantidad de una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento eficaz para tratar, prevenir y/o abordar el cáncer. Por lo tanto, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en todos dichos métodos de tratamiento, prevención, abordaje y/o mejora de un cáncer, en donde el cáncer se selecciona de linfoma difuso de linfocitos B grandes (DLBCL), linfoma inmunoblástico de linfocitos T, linfoma de células pequeñas no hendidas, leucemia)/linfoma del virus linfotrópico humano-tipo 1 (HTLV-1), linfoma de linfocitos T del adulto, linfoma de células del manto (MCL), linfoma de Hodgkin (HL), linfoma no Hodgkin (NHL), linfoma relacionado con el SIDA, linfoma folicular, linfoma linfocítico pequeño, linfoma de linfocitos B grandes rico en histiocitos/linfocitos T, linfoma transformado, linfoma primario de mediastino de linfocitos B grandes (tímico), linfoma esplénico de la zona marginal, transformación de Richter, linfoma nodal de la zona marginal o linfoma de linfocitos B grandes ALK-positivos en un sujeto. En algunas realizaciones, la formulación para su uso en dichos métodos comprende la etapa de administrar al sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en combinación con un segundo agente activo en cantidades eficaces para tratar, prevenir y/o abordar el cáncer. En una realización, el cáncer hematológico es HL. En una realización, el cáncer hematológico es NHL. En una realización, el cáncer hematológico es linfoma de escasa malignidad que incluye, por ejemplo, DLBCL, linfoma folicular y linfoma de la zona marginal.

En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con NHL, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con NHL, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con NHL, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con NHL.

En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión parcial (PR) en un paciente con NHL, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión parcial (PR) en un paciente con NHL, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión parcial (PR) en un paciente con NHL, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión parcial (PR) en un paciente con NHL.

En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una enfermedad estable (SD) en un paciente con NHL, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una enfermedad estable (SD) en un paciente con NHL, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una enfermedad estable (SD) en un paciente con NHL, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una enfermedad estable (SD) en un paciente con NHL.

En una realización, en el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en métodos de tratamiento, prevención, abordaje y/o mejora de la leucemia administrando una cantidad terapéuticamente activa del compuesto 1 a un sujeto. Por lo tanto, en el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en dichos métodos de tratamiento, prevención, abordaje y/o mejora de la leucemia. En una realización, la leucemia es leucemia mieloide aguda (LMA). En una realización, la LMA es LMA recidivante o insensible. En una realización, la LMA es LMA recién diagnosticada. En otra realización, la LMA tiene clasificación FAB M0/1. En otra realización, la LMA tiene clasificación FAB M2. En otra realización, la LMA tiene clasificación FAB M3. En otra realización, la LMA tiene clasificación FAB M4. En otra realización, la LMA tiene clasificación FAB M5. En una realización, la LMA es LMA con al menos una anomalía genética recurrente (por ejemplo, LMA con translocación entre los cromosomas 8 y 21; LMA con translocación o inversión en el cromosoma 16; LMA con translocación entre los cromosomas 9 y 11; APL (M3) con translocación entre los cromosomas 15 y 17; LMA con translocación entre los cromosomas 6 y 9; LMA con translocación o inversión en el cromosoma 3); LMA (megacarioblástica) con una translocación entre los cromosomas 1 y 22; LMA con cambios relacionados con la mielodisplasia; LMA relacionada con quimioterapia o radiación previa (por ejemplo, LMA relacionada con agentes alquilantes; o LMA relacionada con inhibidores de la topoisomerasa II); LMA no clasificada de otro modo (por ejemplo, LMA que no se clasifica en las categorías anteriores, es decir, LMA mínimamente diferenciada (M0); LMA con maduración mínima (M1); LMA con maduración (M2); leucemia mielomonocítica aguda (M4); leucemia monocítica aguda (M5); leucemia eritroide aguda (M6); leucemia megacarioblástica aguda (M7); leucemia basófila aguda; o panmielosis aguda con fibrosis); sarcoma mieloide (también conocido como sarcoma granulocítico, cloroma o mieloblastoma extramedular); o leucemias agudas indiferenciadas y bifenotípicas (también conocidas como leucemias agudas de fenotipo mixto). En una realización, la LMA se caracteriza por un alelo mutante de IDH2. En un aspecto de esta realización, el alelo mutante de IDH2 tiene una mutación R140X. En otro aspecto de esta realización, la mutación R140X es una mutación R140Q. En otro aspecto de esta realización, la mutación R140X es una mutación R140W. En otro aspecto de esta realización, la mutación R140X es una mutación R140L. En otro aspecto de esta realización, el alelo mutante de IDH2 tiene una mutación R172X. En otro aspecto de esta realización, la mutación R172X es una mutación R172K. En otro aspecto de esta realización, la mutación R172X es una mutación R172G.

En una realización, la LMA es LMA recidivante después de HSCT alógeno. En una realización, la LMA es una segunda LMA o de recaída posterior. En una realización, la LMA es insensible al tratamiento de inducción inicial o de reinducción. En ciertas realizaciones, la LMA es insensible a al menos una terapia de inducción/reinducción o de consolidación. En una realización, la LMA es insensible a o recidivante después de agente hipometilante (HMA). Como se usa en el presente documento, el fracaso de HMA se define como progresión primaria o ausencia de beneficio clínico después de un mínimo de 6 ciclos o incapaz de tolerar HMA debido a la toxicidad. En una realización, la LMA es recidivante en 1 año desde el tratamiento inicial (excluyendo LMA con estado de riesgo favorable).

En algunas realizaciones, los métodos comprenden la etapa de administrar al sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en combinación con un segundo agente activo en cantidades eficaces para tratar, prevenir y/o abordar leucemia mieloide aguda.

En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr un estado sin leucemia morfológica en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr un estado sin leucemia morfológica en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr un estado sin leucemia morfológica en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr un estado sin leucemia morfológica en un paciente con LMA.

En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa morfológica en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa morfológica en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa morfológica en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa morfológica en un paciente con LMA.

En una realización proporcionada en el presente documento es el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa citogenética (CRc) en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa citogenética (CRc) en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa citogenética (CRc) en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa citogenética (CRc) en un paciente con LMA.

En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa molecular (CRm) en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa molecular (CRm) en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa molecular (CRm) en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa molecular (CRm) en un paciente con LMA.

En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa morfológica con recuperación de sangre incompleta (CRi) en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa morfológica con recuperación de sangre incompleta (CRi) en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa morfológica con recuperación de sangre incompleta (CRi) en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa morfológica con recuperación de sangre incompleta (CRi) en un paciente con LMA.

En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión parcial en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión parcial (PR) en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión parcial (PR) en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión parcial (PR) en un paciente con LMA.

En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con LMA, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con LMA.

En algunas realizaciones, la formulación del compuesto 1 para su uso en los métodos proporcionados en el presente documento engloba tratar, prevenir y/o abordar leucemia linfocítica aguda (LLA) en un sujeto. En algunas realizaciones, la LLA incluye leucemia que se origina en las células blásticas de la médula ósea (linfocitos B), timo (linfocitos T) y ganglios linfáticos. La LLA se puede clasificar según el Esquema de clasificación morfológico francésamericano-británico (FAB) como L1 - linfoblastos de aspecto maduro (linfocitos T o pre-linfocitos B), L2 - linfoblastos inmaduros y pleomórficos (formados de diversas formas) (linfocitos T o pre-linfocitos B), y L3 - linfoblastos (linfocitos B; células de Burkitt). En una realización, la LLA se origina en las células blásticas de la médula ósea (linfocitos B). En una realización, la LLA se origina en el timo (linfocitos T). En una realización, la LLA se origina en los ganglios linfáticos. En una realización, la LLA es tipo L1 caracterizada por linfoblastos de aspecto maduro (linfocitos T o pre-linfocitos B). En una realización, la LLA es tipo L2 caracterizada por linfoblastos inmaduros y pleomórficos (formados de diversas formas) (linfocitos T o pre-linfocitos B). En una realización, la LLA es tipo L3 caracterizada por linfoblastos (linfocitos B; células de Burkitt). En ciertas realizaciones, la LLA es leucemia de linfocitos T. En una realización, la leucemia de linfocitos T es leucemia periférica de linfocitos T. En otra realización, la leucemia de linfocitos T es leucemia linfoblástica de linfocitos T. En otra realización, la leucemia de linfocitos T es leucemia cutánea de linfocitos T. En otra realización, la leucemia de linfocitos T es leucemia de linfocitos T del adulto. En ciertas realizaciones, los métodos de tratamiento, prevención y/o abordaje de LLA en un sujeto comprenden la etapa de administrar al sujeto una cantidad de una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento eficaz para tratar, prevenir y/o abordar LLA. En algunas realizaciones, los métodos comprenden la etapa de administrar al sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en combinación con un segundo agente activo en cantidades eficaces para tratar, prevenir y/o abordar LLA.

En algunas realizaciones, la formulación del compuesto 1 para su uso en los métodos proporcionados en el presente documento engloba tratar, prevenir y/o abordar leucemia mielógena crónica (LMC) en un sujeto. Los métodos comprenden la etapa de administrar al sujeto una cantidad de una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento eficaz para tratar, prevenir y/o abordar LMC. En algunas realizaciones, los métodos comprenden la etapa de administrar al sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en combinación con un segundo agente activo en cantidades eficaces para tratar, prevenir y/o abordar LMC.

En algunas realizaciones, la formulación del compuesto 1 para su uso en los métodos proporcionados en el presente documento engloba tratar, prevenir y/o abordar leucemia linfocítica crónica (LLC) en un sujeto. Los métodos comprenden la etapa de administrar al sujeto una cantidad de una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento eficaz para tratar, prevenir y/o abordar leucemia linfocítica crónica. En algunas realizaciones, los métodos comprenden la etapa de administrar al sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en combinación con un segundo agente activo en cantidades eficaces para tratar, prevenir y/o abordar LLC.

En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con LLC, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con LLC, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con LLC, en donde la formulación del compuesto 1 para su uso en el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con LLC.

En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión parcial (PR) en un paciente con LLC, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión parcial (PR) en un paciente con LLC, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión parcial (PR) en un paciente con LLC, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión parcial (PR) en un paciente con LLC.

En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una enfermedad estable (SD) en un paciente con LLC, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una enfermedad estable (SD) en un paciente con LLC, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una enfermedad estable (SD) en un paciente con LLC, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una enfermedad estable (SD) en un paciente con LLC.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en métodos de tratamiento, prevención, abordaje y/o mejora de un síndrome mielodisplásico (SMD) administrando una cantidad terapéuticamente activa del compuesto 1 a un sujeto. En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de SMD. Por lo tanto, en el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en dichos métodos de tratamiento, prevención, abordaje y/o mejora del SMD. En una realización, el SMD es SMD recidivante, resistente o insensible. En una realización, el SMD es anemia insensible (RA); RA con sideroblastos en anillo (RARS); RA con exceso de blastos (RAEB); citopenia insensible con displasia multilinaje (RCMD), citopenia insensible con displasia unilinaje (RCUD); síndrome mielodisplásico inclasificable (SMD-U), síndrome mielodisplásico asociado a una anomalía aislada del cromosoma del(5q), neoplasias mieloides relacionadas con la terapia o leucemia mielomonocítica crónica (CMML). En algunas realizaciones, el SMD es SMD de riego muy bajo, de riesgo bajo, de riesgo intermedio, de riesgo alto o riesgo muy alto. En una realización, el SMD es de riesgo muy bajo. En otra realización, el SMD es de riesgo bajo. En otra realización, el SMD es de riesgo intermedio. En otra realización, el SMD es de riesgo alto. En otra realización, el SMD es SMD de riesgo muy alto. En una realización, el SMD es SMD recidivante o de riesgo alto insensible. En una realización, el SMD es con una puntuación > 3,5 puntos en el sistema de puntuación pronóstica internacional revisado (IPSS-R) (por ejemplo, riesgo intermedio de IPSS-R (en combinación con más del 10 % de blastos de médula ósea o riesgo citogenético de IPSS-R malo o muy malo), riesgo alto de IPSS-R y muy alto de IPSS-R]. En una realización, el SMD no es adecuado para otras terapias establecidas (por ejemplo, trasplante o agente hipometilante). En algunas realizaciones, el SMD es SMD primario o de nueva aparición. En otras realizaciones, el SMD es SMD secundario. En una realización, el SMD es insensible al tratamiento de inducción inicial o de reinducción. En ciertas realizaciones, el SMD es insensible a al menos una terapia de inducción/reinducción o de consolidación. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 para su uso en los métodos de tratamiento, prevención y/o abordaje de SMD en un sujeto comprende la etapa de administrar al sujeto una cantidad de una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento eficaz para tratar, prevenir y/o abordar SMD. En algunas realizaciones, los métodos comprenden la etapa de administrar al sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en combinación con un segundo agente activo en cantidades eficaces para tratar, prevenir y/o abordar el SMD.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con SMD, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con SMD, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con SMD, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con SMD, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión completa (CR) en un paciente con SMD.

En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr remisión completa de la médula ósea (mCR) en un paciente con SMD, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr remisión completa de la médula ósea (mCR) en un paciente con SMD, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr remisión completa de la médula ósea (mCR) en un paciente con SMD, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr remisión completa de la médula ósea (mCR) en un paciente con SMD.

En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión parcial (PR) en un paciente con SMD, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión parcial (PR) en un paciente con SMD, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión parcial (PR) en un paciente con SMD, en donde el método comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un método para lograr una remisión parcial (PR) en un paciente con SMD.

En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en métodos para aumentar la supervivencia global, aumentar la supervivencia sin recaída, aumentar la supervivencia sin progresión, aumentar la supervivencia sin acontecimientos, aumentar la duración de la remisión, aumentar duración de la respuesta o aumentar el tiempo para la transformación a LMA en un paciente con SMD, que comprende administrar una cantidad eficaz del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en métodos para aumentar la supervivencia global, aumentar la supervivencia sin recaída, aumentar la supervivencia sin progresión, aumentar la supervivencia sin acontecimientos, aumentar la duración de la remisión, aumentar duración de la respuesta, o aumentar el tiempo para la transformación a LMA en un paciente con SMD, que comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK al paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en métodos para aumentar la supervivencia global, aumentar la supervivencia sin recaída, aumentar la supervivencia sin progresión, aumentar la supervivencia sin acontecimientos, aumentar la duración de la remisión, aumentar la duración de la respuesta, o aumentar el tiempo para la transformación a LMA en un paciente con SMD, que comprende administrar una cantidad eficaz de una formulación del compuesto 1 al paciente. En el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en métodos para aumentar la supervivencia global, aumentar la supervivencia sin recaída, aumentar la supervivencia sin progresión, aumentar la supervivencia sin acontecimientos, aumentar la duración de la remisión, aumentar la duración de la respuesta, o aumentar el tiempo para la transformación a LMA en un paciente con SMD.

En algunas realizaciones, la formulación del compuesto 1 para su uso en los métodos proporcionados en el presente documento engloba tratar, prevenir y/o abordar una neoplasia mieloproliferativa. En una realización, la neoplasia mieloproliferativa es policitemia vera, trombocitemia primaria o esencial, mielofibrosis, leucemia mielógena crónica, leucemia neutrófila crónica, leucemia mielomonocítica juvenil, leucemia eosinofílica crónica o síndrome hipereosinofílico. En una realización, la neoplasia mieloproliferativa es policitemia vera, trombocitemia primaria o esencial, mielofibrosis primaria o idiopática, mielofibrosis secundaria, mielofibrosis pos-policitemia vera, mielofibrosis pos-trombocitemia esencial, leucemia mielógena crónica, leucemia neutrófila crónica, leucemia mielomonocítica juvenil, leucemia eosinofílica crónica o síndrome hipereosinofílico. En una realización, la neoplasia mieloproliferativa es policitemia vera. En una realización, la neoplasia mieloproliferativa es trombocitemia primaria o esencial. En una realización, la neoplasia mieloproliferativa es mielofibrosis. En una realización, la neoplasia mieloproliferativa es mielofibrosis primaria o idiopática. En una realización, la neoplasia mieloproliferativa es mielofibrosis secundaria. En una realización, la neoplasia mieloproliferativa es mielofibrosis pos-policitemia vera. En una realización, la neoplasia mieloproliferativa es mielofibrosis pos-trombocitemia esencial. En una realización, la neoplasia mieloproliferativa es leucemia mielógena crónica. En una realización, la neoplasia mieloproliferativa es leucemia neutrófila crónica. En una realización, la neoplasia mieloproliferativa es leucemia mielomonocítica juvenil. En una realización, la neoplasia mieloproliferativa es leucemia eosinofílica crónica. En una realización, la neoplasia mieloproliferativa es síndrome hipereosinofílico. En ciertas realizaciones, la neoplasia mieloproliferativa es independiente de interleucina-3 (IL-3). En algunas realizaciones, la neoplasia mieloproliferativa se caracteriza por una mutación de JAK, por ejemplo, una mutación V617, tal como V617F.

En ciertas realizaciones, la formulación del compuesto 1 para su uso en los métodos de tratamiento, prevención y/o abordaje de una neoplasia mieloproliferativa en un sujeto comprenden la etapa de administrar al sujeto una cantidad de una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento eficaz para tratar, prevenir y/o abordar neoplasia mieloproliferativa. En algunas realizaciones, los métodos comprenden la etapa de administrar al sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en combinación con un segundo agente activo en cantidades eficaces para tratar, prevenir y/o abordar neoplasia mieloproliferativa.

En una realización, la formulación del compuesto 1 para su uso en los métodos de tratamiento, prevención y/o abordaje del cáncer proporcionado en el presente documento comprenden la administración intravenosa de una formulación del compuesto 1. En una realización, la formulación del compuesto 1 se disuelve en agua para formar una disolución acuosa para administración intravenosa en métodos de tratamiento, prevención y/o abordaje del cáncer proporcionados en el presente documento.

En algunas realizaciones, los métodos comprenden la etapa de administrar al sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en combinación con un segundo agente activo en cantidades eficaces para tratar, prevenir y/o abordar el cáncer.

En ciertas realizaciones, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en métodos de tratamiento, prevención y/o abordaje del cáncer en pacientes con insuficiencia renal. En ciertas realizaciones, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en métodos de proporcionar ajustes de dosis apropiados para pacientes con insuficiencia renal debido a, pero no se limitan a, enfermedad, envejecimiento, u otros factores del paciente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en métodos de reducción de los niveles de GSPT1 en un sujeto, comprendiendo los métodos administrar el compuesto 1 en combinación con un segundo agente como se describe en el presente documento, al sujeto. Por lo tanto, en el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en métodos de reducción de los niveles de GSPT1 en un sujeto, comprendiendo los métodos administrar el compuesto 1 en combinación con un segundo agente como se describe en el presente documento, al sujeto. En algunas realizaciones, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en un monitorización de la eficacia del tratamiento con el compuesto 1 en combinación con un segundo agente en el tratamiento del cáncer en un sujeto, que comprende: (a) administrar el compuesto 1 y un segundo agente al sujeto; (b) obtener una muestra del sujeto; (c) determinar el nivel de GSPT1 en la muestra; (d) comparar el nivel de GSPT1 en la muestra con el nivel de GSPT1 en una muestra de referencia, en donde una disminución en el nivel de GSPT1 en la muestra en comparación con en la muestra de referencia es indicativa de la eficacia del tratamiento con el compuesto 1 y el segundo agente del cáncer en el sujeto. Por lo tanto, en el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en dicha monitorización de la eficacia del tratamiento con el compuesto 1 en combinación con un segundo agente en el tratamiento del cáncer en un sujeto. En otro aspecto más, en el presente documento se proporciona un método de predicción de la sensibilidad de un sujeto que tiene o que se sospecha que tiene cáncer al tratamiento con el compuesto 1 y un segundo agente, comprendiendo el método (a) administrar el compuesto 1 y un segundo agente al sujeto; (b) obtener una muestra del sujeto; (c) determinar el nivel de GSPT1 en la muestra; (d) diagnosticar que el sujeto es probablemente sensible al tratamiento del cáncer con el compuesto 1 y el segundo agente si el nivel de GSPT1 en la muestra se reduce en comparación con el nivel de GSPT 1 en una muestra de referencia. Por lo tanto, en el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método de predicción de la sensibilidad de un sujeto que tiene o que se sospecha que tiene cáncer al tratamiento con el compuesto 1 y un segundo agente.

En una realización, en el presente documento se proporciona una formulación del compuesto 1 para su uso en métodos de reducción de los niveles de Mcl-1 en un sujeto, comprendiendo los métodos administrar el compuesto 1 en combinación con un segundo agente como se describe en el presente documento, al sujeto. Por lo tanto, en el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en dichos métodos de reducción de los niveles de Mcl-1 en un sujeto, comprendiendo los métodos administrar el compuesto 1 en combinación con un segundo agente como se describe en el presente documento, al sujeto. En el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en la monitorización de la eficacia del tratamiento con el compuesto 1 en combinación con un segundo agente en el tratamiento del cáncer en un sujeto. En otro aspecto más, en el presente documento se proporciona un método de predicción de la sensibilidad de un sujeto que tiene o que se sospecha que tiene cáncer al tratamiento con el compuesto 1 y un segundo agente, comprendiendo el método (a) administrar el compuesto 1 y un segundo agente al sujeto; (b) obtener una muestra del sujeto; (c) determinar el nivel de Mcl-1 en la muestra; (d) diagnosticar que el sujeto es probablemente sensible al tratamiento del cáncer con el compuesto 1 y el segundo agente si el nivel de Mcl-1 en la muestra se reduce en comparación con el nivel de Mcl-1 en una muestra de referencia. Por lo tanto, en el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método de predicción de la sensibilidad de un sujeto que tiene o que se sospecha que tiene cáncer al tratamiento con el compuesto 1 y un segundo agente.

En algunas realizaciones de los métodos proporcionados en el presente documento, la muestra de referencia se obtiene del sujeto antes de la administración del compuesto 1 y el segundo agente al sujeto, y la muestra de referencia es de la misma fuente que la muestra. En otras realizaciones de los métodos proporcionados en el presente documento, la muestra de referencia se obtiene de un segunda sujeto que tiene cáncer, y la muestra de referencia es de la misma fuente que la muestra. En otras realizaciones más de los métodos proporcionados en el presente documento, la muestra de referencia se obtiene de un grupo de sujetos que tiene cáncer, y la muestra de referencia es de la misma fuente que la muestra.

En una realización, que no se reivindica, en el presente documento se proporciona un método de identificación de un sujeto con cáncer adecuado para el tratamiento con el compuesto 1 y un segundo agente que comprende: (a) obtener una muestra de un sujeto que tiene cáncer; (b) determinar el nivel de GSPT1 en la muestra; (c) poner en contacto la muestra con el compuesto 1 y el segundo agente; (d) determinar el nivel de GSPT 1 en la muestra después de la etapa de poner en contacto; (e) identificar que el sujeto es probablemente sensible al tratamiento del cáncer con el compuesto 1 y el segundo agente si el nivel de GSPT1 en la etapa (d) se reduce en comparación con el nivel de GSPT1 en la etapa (b).

En una realización, que no se reivindica, en el presente documento se proporciona un método de identificación de un sujeto con cáncer adecuado para el tratamiento con el compuesto 1 y un segundo agente que comprende: (a) obtener una muestra de un sujeto que tiene cáncer; (b) determinar el nivel de Mcl-1 en la muestra; (c) poner en contacto la muestra con el compuesto 1 y el segundo agente; (d) determinar el nivel de Mcl-1 en la muestra después de la etapa de poner en contacto; (e) identificar que el sujeto es probablemente sensible al tratamiento del cáncer con el compuesto 1 y el segundo agente si el nivel de Mcl-1 en la etapa (d) se reduce en comparación con el nivel de Mcl-1 en la etapa (b). Por lo tanto, en el presente documento se proporciona el compuesto 1 para su uso en un método de identificación de un sujeto con cáncer adecuado para el tratamiento con el compuesto 1 y un segundo agente.

El término "muestra", como se usa en el presente documento, se refiere a un material o mezcla de materiales obtenido de un sujeto, que incluye una muestra de tejido u origen de líquido, obtenido, conseguido o recogido in vivo o in situ. Una muestra también incluye muestras de una región de un sujeto que contiene células o tejidos precancerosos o cancerosos. Dichas muestras pueden ser, pero no se limitan a, órganos, tejidos y células aisladas de un mamífero. Las muestras a modo de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, lisado celular, un cultivo celular, una estirpe celular, un tejido, tejido bucal, tejido gastrointestinal, un órgano, un orgánulo, un líquido biológico, una muestra de sangre, una muestra de orina, una muestra de piel y similares. En una realización, las muestras incluyen, pero no se limitan a, sangre completa, sangre parcialmente purificada, CMSP, biopsias de tejido que incluyen biopsia con aguja gruesa de médula ósea, aspirado de médula ósea, células mononucleares de médula ósea aisladas, células tumorales circulantes y similares.

En algunas de dichas realizaciones, el segundo agente se selecciona de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK, como se describe en el presente documento.

En ciertas realizaciones, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,005 hasta aproximadamente 20 mg por día, desde aproximadamente 0,05 hasta 20 mg por día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 10 mg por día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 7 mg por día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 5 mg por día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 3 mg por día, desde aproximadamente 0,05 hasta aproximadamente 10 mg por día, desde aproximadamente 0,05 hasta aproximadamente 7 mg por día, desde aproximadamente 0,05 hasta aproximadamente 5 mg por día, desde aproximadamente 0,05 hasta aproximadamente 3 mg por día, desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 15 mg por día, desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 10 mg por día, desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 7 mg por día, desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 5 mg por día, desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 3 mg por día, desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 10 mg por día, desde aproximadamente 0,05 hasta aproximadamente 5 mg por día, desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 3 mg por día, desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 2 mg por día, desde aproximadamente 0,3 hasta aproximadamente 10 mg por día, desde aproximadamente 0,3 hasta aproximadamente 8,5 mg por día, desde aproximadamente 0,3 hasta aproximadamente 8,1 mg por día, desde aproximadamente 0,6 hasta aproximadamente 10 mg por día o desde aproximadamente 0,6 hasta aproximadamente 5 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,005 hasta aproximadamente 20 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,05 hasta 20 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 10 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 7 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 5 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 3 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,05 hasta aproximadamente 10 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,05 hasta aproximadamente 7 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,05 hasta aproximadamente 5 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,05 hasta aproximadamente 3 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 15 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 10 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 7 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 5 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 3 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 10 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 5 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 3 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 2 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,3 hasta aproximadamente 10 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,3 hasta aproximadamente 8,5 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,3 hasta aproximadamente 8,1 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto 1 es desde aproximadamente 0,6 hasta aproximadamente 10 mg por día o desde aproximadamente 0,6 hasta aproximadamente 5 mg por día.

En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente 0,1, aproximadamente 0,2, aproximadamente 0,5, aproximadamente 1, aproximadamente 2, aproximadamente 3, aproximadamente 4, aproximadamente 5, aproximadamente 6, aproximadamente 7, aproximadamente 8, aproximadamente 9, o aproximadamente 10 mg por día. En algunas de dichas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente 0,5, aproximadamente 0,6, aproximadamente 0,75, aproximadamente 1, aproximadamente 2, aproximadamente 3, aproximadamente 4, aproximadamente 5, aproximadamente 6 o aproximadamente 7 mg por día. En algunas de dichas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente 0,6, aproximadamente 1,2, aproximadamente 1,8, aproximadamente 2,4, o aproximadamente 3,6 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente 0,1 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente 0,2 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente 0,5 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente aproximadamente 1 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente aproximadamente 2 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente aproximadamente 3 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente aproximadamente 4 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente aproximadamente 5 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente aproximadamente 6 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente aproximadamente 7 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente aproximadamente 8 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente aproximadamente 9 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente aproximadamente 10 mg por día.

En una realización, el intervalo de dosis diaria recomendada del compuesto 1, para las condiciones descritas en el presente documento, se encuentra dentro del intervalo de desde aproximadamente 0,01 mg hasta aproximadamente 20 mg por día, preferentemente administrada como una dosis única una vez al día, o en dosis divididas durante un día. En una realización, el intervalo de dosis diaria recomendada del compuesto 1, para las condiciones descritas en el presente documento, se encuentra dentro del intervalo de desde aproximadamente 0,01 mg hasta aproximadamente 15 mg por día, preferentemente administrada como una dosis única una vez al día, o en dosis divididas durante un día. En una realización, el intervalo de dosis diaria recomendada del compuesto 1, para las condiciones descritas en el presente documento, se encuentra dentro del intervalo de desde aproximadamente 0,01 mg hasta aproximadamente 12 mg por día, preferentemente administrada como una dosis única una vez al día, o en dosis divididas durante un día. En algunas realizaciones, los intervalos de dosificación desde aproximadamente 0,1 mg hasta aproximadamente 10 mg por día. En otras realizaciones, la dosis oscila desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 5 mg por día. Dosis específicas por día incluyen 0,1, 0,2, 0,5, 0,6, 1, 1,2, 1,5, 1,8, 2, 2,4, 2,5, 3, 3,5, 3,6, 4, 4,5, 5, 5,5, 6, 6,5, 7, 7,2, 7,5, 8, 8,5, 9, 9,5, 10, 10,5, 11, 11,5, 12, 12,5, 13, 13,5, 14, 14,4, 14,5 o 15 mg por día. En otras realizaciones, la dosis oscila desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 5 mg por día. Dosis específicas por día incluyen 0,1, 0. 2, 0,5, 0,6, 1, 1,2, 1,5, 1,8, 2, 2,4, 2,5, 3, 3,5, 3,6, 4, 4,5, 5, 5,5, 6, 6,5, 7, 7,5, 8, 8,5, 9, 9,5 o 10 mg por día. En una realización, la dosis por día es 0,1 mg por día. En una realización, la dosis por día es 0,2 mg por día. En una realización, la dosis por día es 0,5 mg por día. En una realización, la dosis por día es 0,6 mg por día. En una realización, la dosis por día es 1 mg por día. En una realización, la dosis por día es 1,2 mg por día. En una realización, la dosis por día es 1.5 mg por día. En una realización, la dosis por día es 1,8 mg por día. En una realización, la dosis por día es 2 mg por día. En una realización, la dosis por día es 2,4 mg por día. En una realización, la dosis por día es 2,5 mg por día. En una realización, la dosis por día es 3 mg por día. En una realización, la dosis por día es 3,5 mg por día. En una realización, la dosis por día es 3,6 mg por día. En una realización, la dosis por día es 4 mg por día. En una realización, la dosis por día es 4,5 mg por día. En una realización, la dosis por día es 5 mg por día. En una realización, la dosis por día es 5,5 mg por día. En una realización, la dosis por día es 6 mg por día. En una realización, la dosis por día es 6.5 mg por día. En una realización, la dosis por día es 7 mg por día. En una realización, la dosis por día es 7,2 mg por día. En una realización, la dosis por día es 7,5 mg por día. En una realización, la dosis por día es 8 mg por día. En una realización, la dosis por día es 8,5 mg por día. En una realización, la dosis por día es 9 mg por día. En una realización, la dosis por día es 9,5 mg por día. En una realización, la dosis por día es 10 mg por día. En una realización, la dosis por día es 12 mg por día. En una realización, la dosis por día es 10 mg por día. En una realización, la dosis por día es 12 mg por día. En una realización, la dosis por día es 14,4 mg por día. En una realización, la dosis por día es 15 mg por día.

En una realización específica, la dosis inicial recomendada puede ser 0,1, 0,5, 0,6, 0,7, 1, 1,2, 1,5, 1,8, 2, 2,4, 2,5, 3, 3,5, 3,6, 4, 4,5, 5, 5,5, 6, 6,5 o 7 mg por día. En otra realización, la dosis inicial recomendada puede ser 0,1, 0,5, 0,6, 1, 1,2, 1,8, 2, 2,4, 3, 3,6, 4 o 5 mg por día. En una realización, la dosis puede ser aumentada hasta 7, 8, 9 10, 12, o 15 mg/día. En una realización, la dosis puede ser aumentada hasta7, 8, 9 o 10 mg/día.

En una realización específica, el compuesto 1 se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 0,1 mg/día a pacientes con leucemia, que incluye LMA. En una realización particular, el compuesto 1 se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 1 mg/día a pacientes con leucemia, que incluye LMA En una realización particular, el compuesto 1 se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 3 mg/día a pacientes con leucemia, que incluye LMA. En una realización particular, el compuesto 1 se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 4 mg/día a pacientes con leucemia, que incluye LMA. En una realización particular, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 5 mg/día a pacientes con leucemia, que incluye LMA. En una realización particular, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 6 mg/día a pacientes con leucemia, que incluye LMA. En una realización particular, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 7 mg/día a pacientes con leucemia, que incluye LMA. En una realización particular, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 10 mg/día a pacientes con leucemia, que incluye LMA. En una realización particular, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 12 mg/día a pacientes con leucemia, que incluye LMA. En una realización particular, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 15 mg/día a pacientes con leucemia, que incluye LMA

En una realización específica, el compuesto 1 se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 0,1 mg/día a pacientes con SMD. En una realización particular, el compuesto 1 se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 1 mg/día a pacientes con SMD. En una realización particular, el compuesto 1 se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 3 mg/día a pacientes con SMD. En una realización particular, el compuesto 1 se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 4 mg/día a pacientes con SMD. En una realización particular, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 5 mg/día a pacientes con SMD. En una realización particular, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 6 mg/día a pacientes con SMD. En una realización particular, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 7 mg/día a pacientes con SMD. En una realización particular, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 10 mg/día a pacientes con SMD. En una realización particular, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 12 mg/día a pacientes con SMD. En una realización particular, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 15 mg/día a pacientes con SMD.

En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 20 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 15 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 10 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 9 mg/kg/día, 0,01 a aproximadamente 8 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 7 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 6 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 5 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 4 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 3 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 2 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 1 mg/kg/día, o desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 0,05 mg/kg/día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 20 mg/kg/día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 15 mg/kg/día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 10 mg/kg/día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 9 mg/kg/día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es 0,01 a aproximadamente 8 mg/kg/día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 7 mg/kg/día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 6 mg/kg/día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 5 mg/kg/día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 4 mg/kg/día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente el 3 mg/kg/día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 2 mg/kg/día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 1 mg/kg/día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 0,05 mg/kg/día.

La dosis administrada también se puede expresar en unidades distintas de mg/kg/día. Por ejemplo, las dosis para administración parenteral se pueden expresar como mg/m2/día. Un experto habitual en la técnica sabría fácilmente cómo convertir dosis de mg/kg/día en mg/m2/día en función de la estatura o el peso de un sujeto o ambos (véase, www.fda.gov/cder/cancer/animalframe.htm). Por ejemplo, una dosis de 1 mg/kg/día para un humano de 65 kg es aproximadamente igual a 38 mg/m2/día.

En ciertas realizaciones, la cantidad del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática del compuesto en estado estacionario, que varía desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 500 pM, aproximadamente 0,002 a aproximadamente 200 pM, aproximadamente 0,005 hasta aproximadamente 100 pM, aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 50 pM, desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 50 pM, aproximadamente 0,02 a aproximadamente 25 pM, desde aproximadamente 0,05 hasta aproximadamente 20 pM, desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 20 pM, desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 20 pM, o desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 20 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática del compuesto en estado estacionario, que varía desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 500 pM, aproximadamente 0,002 a aproximadamente 200 pM, aproximadamente 0,005 a aproximadamente 100 pM, aproximadamente 0,01 a aproximadamente 50 pM, desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 50 pM, aproximadamente 0,02 a aproximadamente 25 pM, desde aproximadamente 0,05 hasta aproximadamente 20 pM, desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 20 pM, desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 20 pM, o desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 20 pM.

En otras realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática del compuesto en estado estacionario, que varía desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 100 nM, aproximadamente 5 a aproximadamente 50 nM, aproximadamente 10 a aproximadamente 100 nM, aproximadamente 10 a aproximadamente 50 nM o desde aproximadamente 50 hasta aproximadamente 100 nM. En otras realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática del compuesto en estado estacionario, que varía desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 100 nM. En otras realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrado es suficiente para proporcionar una concentración plasmática del compuesto en estado estacionario, que varía desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 50 nM. En otras realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática del compuesto en estado estacionario, que varía desde aproximadamente 10 hasta aproximadamente 100 nM. En otras realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática del compuesto en estado estacionario, que varía desde aproximadamente 10 hasta aproximadamente 50 nM. En otras realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática del compuesto en estado estacionario, que varía desde aproximadamente 50 hasta aproximadamente 100 nM.

Como se usa en el presente documento, el término "concentración plasmática en estado estacionario" es la concentración alcanzada después de un periodo de administración de una formulación proporcionada en el presente documento. Una vez se alcanza el estado estacionario, hay picos secundarios y valles en la curva dependiente del tiempo de la concentración plasmática de la forma sólida.

En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática máxima (concentración pico) del compuesto, que varía desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 500 pM, aproximadamente 0,002 a aproximadamente 200 pM, aproximadamente 0,005 a aproximadamente 100 pM, aproximadamente 0,01 a aproximadamente 50 pM, desde aproximadamente 1 a aproximadamente 50 pM, aproximadamente 0,02 a aproximadamente 25 pM, desde aproximadamente 0,05 hasta aproximadamente 20 pM, desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 20 pM, desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 20 pM, o desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 20 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática máxima (concentración pico) del compuesto, que varía desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 500 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática máxima (concentración pico) del compuesto, que varía desde aproximadamente 0,002 hasta aproximadamente 200 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática máxima (concentración pico) del compuesto, que varía desde aproximadamente 0,005 hasta aproximadamente 100 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática máxima (concentración pico) del compuesto, que varía desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 50 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática máxima (concentración pico) del compuesto, que varía desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 50 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática máxima (concentración pico) del compuesto, que varía desde aproximadamente 0,02 hasta aproximadamente 25 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática máxima (concentración pico) del compuesto, que varía desde aproximadamente 0,05 hasta aproximadamente 20 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática máxima (concentración pico) del compuesto, que varía desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 20 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática máxima (concentración pico) del compuesto, que varía desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 20 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática máxima (concentración pico) del compuesto, que varía desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 20 pM.

En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática mínima (concentración valle) del compuesto, que varía desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 500 pM, aproximadamente 0,002 a aproximadamente 200 pM, aproximadamente 0,005 a aproximadamente 100 pM, aproximadamente 0,01 a aproximadamente 50 pM, desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 50 pM, aproximadamente 0,01 a aproximadamente 25 pM, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 20 pM, desde aproximadamente 0,02 hasta aproximadamente 20 pM, desde aproximadamente 0,02 hasta aproximadamente 20 pM, o desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 20 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática mínima (concentración valle) del compuesto, que varía desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 500 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática mínima (concentración valle) del compuesto, que varía desde aproximadamente 0,002 hasta aproximadamente 200 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática mínima (concentración valle) del compuesto, que varía desde aproximadamente 0,005 hasta aproximadamente 100 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática mínima (concentración valle) del compuesto, que varía desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 50 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática mínima (concentración valle) del compuesto, que varía desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 50 pM, aproximadamente 0,01 a aproximadamente 25 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática mínima (concentración valle) del compuesto, que varía desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 20 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática mínima (concentración valle) del compuesto, que varía desde aproximadamente 0,02 hasta aproximadamente 20 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática mínima (concentración valle) del compuesto, que varía desde aproximadamente 0,02 hasta aproximadamente 20 pM. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar una concentración plasmática mínima (concentración valle) del compuesto, que varía desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 20 pM.

En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar un área bajo la curva (ABC) del compuesto, que varía desde aproximadamente 100 hasta aproximadamente 100.000 ng*h/ml, desde aproximadamente 1.000 hasta aproximadamente 50.000 ng*h/ml, desde aproximadamente 5.000 hasta aproximadamente 25.000 ng*h/ml, o desde aproximadamente 5.000 hasta aproximadamente 10.000 ng*h/ml. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar un área bajo la curva (ABC) del compuesto, que varía desde aproximadamente 100 hasta aproximadamente 100.000 ng*h/ml. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar un área bajo la curva (ABC) del compuesto, que varía desde aproximadamente 1.000 hasta aproximadamente 50.000 ng*h/ml. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar un área bajo la curva (ABC) del compuesto, que varía desde aproximadamente 5.000 hasta aproximadamente 25.000 ng*h/ml. En ciertas realizaciones, la cantidad de una formulación del compuesto 1 administrada es suficiente para proporcionar un área bajo la curva (ABC) del compuesto, que varía desde aproximadamente 5.000 hasta aproximadamente 10.000 ng*h/ml.

En ciertas realizaciones, el paciente que se va a tratar con uno de los métodos proporcionados en el presente documento no ha sido tratado con terapia antineoplásica antes de la administración de una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento. En ciertas realizaciones, el paciente que se va a tratar con uno de los métodos proporcionados en el presente documento ha sido tratado con terapia antineoplásica antes de la administración de una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento. En ciertas realizaciones, el paciente que se va a tratar con uno de los métodos proporcionados en el presente documento ha desarrollado resistencia al fármaco a la terapia antineoplásica.

La formulación del compuesto 1 para su uso en los métodos proporcionados en el presente documento engloban tratar un paciente independientemente de la edad del paciente, aunque algunas enfermedades o trastornos son más comunes en ciertos grupos de edad.

La formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se puede administrar como una dosis única tal como, por ejemplo, una única inyección en bolo, o con el tiempo, tal como, por ejemplo, infusión continua con el tiempo o dosis en bolo divididas con el tiempo. La formulación del compuesto 1 se puede administrar repetidamente si fuera necesario, por ejemplo, hasta que el paciente experimente enfermedad estable o regresión, o hasta que el paciente experimente progresión de la enfermedad o toxicidad inaceptable. Por ejemplo, enfermedad estable para tumores sólidos significa, en general, que el diámetro perpendicular de lesiones medibles no ha aumentado 25 % o más desde la última medición. Response Evaluation Criteria in Solid Tumors (RECIST) Guidelines, Journal of the National Cancer Institute 92(3): 205-216 (2000). La enfermedad estable o ausencia de la misma se determina por métodos conocidos en la técnica, tales como evaluación de los síntomas del paciente, exploración física, visualización del tumor del que se han obtenido imágenes usando rayos X, TAC, TEP o IRM y otras modalidades de evaluación comúnmente aceptadas.

La formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se puede administrar una vez al día (QD), o dividida en múltiples dosis diarias, tal como dos veces al día (BID), tres veces al día (TID) y cuatro veces al día (QID).

Además, la administración puede ser continua (es decir, diariamente durante días consecutivos o cada día), intermitente, por ejemplo, en ciclos (es decir, que incluye días, semanas o meses de descanso sin fármaco). Como se usa en el presente documento, el término "diariamente" pretende significar que un compuesto terapéutico se administra una vez o más de una vez cada día, por ejemplo, durante un periodo de tiempo. El término "continuo" pretende significar que un compuesto terapéutico se administra diariamente durante un periodo ininterrumpido de al menos 10 días a 52 semanas. El término "intermitente" o "intermitentemente" como se usa en el presente documento pretende significar parar y empezar en intervalos regulares o irregulares. Por ejemplo, la administración intermitente de la formulación del compuesto 1 es administración durante uno a seis días por semana, administración en ciclos (por ejemplo, administración diaria durante uno a diez días consecutivos de un ciclo de 28 días, luego un periodo de descanso sin administración durante el resto del ciclo de 28 días; o administración diaria durante dos a ocho semanas consecutivas, luego un periodo de descanso sin administración durante hasta una semana), o administración en días alternos. La terapia cíclica con el compuesto 1 se trata en cualquier parte en el presente documento.

En algunas realizaciones, la frecuencia de administración está en el intervalo de aproximadamente una dosis diaria a aproximadamente una dosis mensual. En ciertas realizaciones, la administración es una vez al día, dos veces al día, tres veces al día, cuatro veces al día, una vez cada dos días, dos veces a la semana, una vez cada semana, una vez cada dos semanas, una vez cada tres semanas, o una vez cada cuatro semanas. En una realización, el compuesto 1 se administra una vez al día. En otra realización, el compuesto 1 se administra dos veces al día. En otra realización más, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra tres veces al día. En otra realización adicional, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra cuatro veces al día. En otra realización adicional, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra una vez cada dos días. En otra realización adicional, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra dos veces a la semana. En otra realización adicional, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra una vez cada semana. En otra realización adicional, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra una vez cada dos semanas. En otra realización adicional, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra una vez cada tres semanas. En otra realización adicional, el compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra una vez cada cuatro semanas.

En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra una vez por día desde un día hasta seis meses, desde una semana hasta tres meses, desde una semana hasta cuatro semanas, desde una semana hasta tres semanas, o desde una semana hasta dos semanas. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra una vez por día durante una semana, dos semanas, tres semanas o cuatro semanas. En una realización, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra una vez por día durante 1 día. En una realización, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra una vez por día durante 2 días. En una realización, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra una vez por día durante 3 días. En una realización, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra una vez por día durante 4 días. En una realización, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra una vez por día durante 5 días. En una realización, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra una vez por día durante 6 días. En una realización, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra una vez por día durante una semana. En una realización, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra una vez por día durante hasta 10 días. En otra realización, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra una vez por día durante dos semanas. En otra realización más, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra una vez por día durante tres semanas. En otra realización adicional, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra una vez por día durante cuatro semanas.

Terapia de combinación Todos los métodos de tratamiento proporcionados en el presente documento se deben entender como una formulación del compuesto 1 para su uso en dichos métodos de tratamiento.

En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento, prevención y/o abordaje del cáncer, que comprende administrar a un paciente el compuesto 1 en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK, y opcionalmente en combinación con radioterapia, transfusiones de sangre o cirugía. Los ejemplos de segundos agentes activos se desvelan en el presente documento.

En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento, prevención y/o abordaje del cáncer, que comprende administrar a un paciente una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en combinación con uno o más segundos agentes activos, y opcionalmente en combinación con radioterapia, transfusiones de sangre o cirugía. Los ejemplos de segundos agentes activos se desvelan en el presente documento.

Como se usa en el presente documento, el término "en combinación" incluye el uso de más de una terapia (por ejemplo, uno o más agentes profilácticos y/o terapéuticos). Sin embargo, el uso del término "en combinación" no restringe el orden en el que las terapias (por ejemplo, agentes profilácticos y/o terapéuticos) se administran a un paciente con una enfermedad o trastorno. Por ejemplo, "en combinación" puede incluir administración como una mezcla, administración simultánea usando formulaciones separadas y administración consecutiva en cualquier orden. "Consecutiva" significa que un tiempo específico ha pasado entre la administración de los agentes activos. Por ejemplo, "consecutiva" puede ser que más de 10 minutos han pasado entre la administración de los agentes activos separados. El periodo de tiempo puede ser entonces más de 10 min, más de 30 minutos, más de 1 hora, más de 3 horas, más de 6 horas o más de 12 horas. Por ejemplo, una primera terapia (por ejemplo, un agente profiláctico o terapéutico, tal como una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento) se puede administrar antes de (por ejemplo, 5 minutos, 15 minutos, 30 minutos, 45 minutos, 1 hora, 2 horas, 4 horas, 6 horas, 12 horas, 24 horas, 48 horas, 72 horas, 96 horas, 1 semana, 2 semanas, 3 semanas, 4 semanas, 5 semanas, 6 semanas, 8 semanas o 12 semanas antes), concomitantemente con, o posterior a (por ejemplo, 5 minutos, 15 minutos, 30 minutos, 45 minutos, 1 hora, 2 horas, 4 horas, 6 horas, 12 horas, 24 horas, 48 horas, 72 horas, 96 horas, 1 semana, 2 semanas, 3 semanas, 4 semanas, 5 semanas, 6 semanas, 8 semanas o 12 semanas después) de la administración de una segunda terapia (por ejemplo, un agente profiláctico o terapéutico) al sujeto. También se contempla terapia triple en el presente documento.

En una realización, la administración del compuesto 1, que incluye una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, y uno o más segundos agentes activos a un paciente, puede ocurrir simultáneamente o uno detrás del otro por las mismas vías de administración o diferentes. En una realización, la administración del compuesto 1, que incluye una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, y uno o más segundos agentes activos a un paciente puede ocurrir simultáneamente o uno detrás del otro por las mismas vías de administración o diferentes. La idoneidad de una vía de administración particular empleada para un agente activo particular dependerá del agente activo en sí (por ejemplo, si se puede administrar por vía oral sin descomposición antes de entrar en la corriente sanguínea) y el cáncer que está tratándose.

La vía de administración del compuesto 1, que incluye una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, es independiente de la vía de administración de una segunda terapia. Por lo tanto, en una realización, el compuesto 1, que incluye una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, se administra por vía intravenosa, y la segunda terapia se puede administrar por vía oral, por vía parenteral, por vía intraperitoneal, por vía intravenosa, por vía intrarterial, por vía transdérmica, por vía sublingual, por vía intramuscular, por vía rectal, por vía transyugal, por vía intranasal, por vía liposomal, por inhalación, por vía vaginal, por vía intraocular, por administración local por catéter o prótesis endovascular, por vía subcutánea, por vía intradiposa, por vía intrarticular, por vía intratecal, o en una forma farmacéutica de liberación lenta. En una realización, el compuesto 1, que incluye una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, y una segunda terapia se administran por el mismo modo de administración, por IV. En otra realización, el compuesto 1, que incluye una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, se administra por un modo de administración, por ejemplo, por IV, mientras que el segundo agente (un antineoplásico) se administra por otra modo de administración, por ejemplo, por vía oral.

En una realización, el segundo agente activo se administra por vía intravenosa o por vía subcutánea y una vez o dos veces al día en una cantidad de desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 1000 mg, desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 500 mg, desde aproximadamente 10 hasta aproximadamente 350 mg, o desde aproximadamente 50 hasta aproximadamente 200 mg. La cantidad específica del segundo agente activo dependerá del agente específico usado, el tipo de enfermedad que está tratándose y/o abordándose, la gravedad y estadio de la enfermedad, y la cantidad del compuesto 1 y cualquier agente activo adicional opcional administrado simultáneamente al paciente.

Se pueden usar uno o más segundos principios activos o agentes junto con el compuesto 1 en los métodos y composiciones proporcionados en el presente documento. Los segundos agentes activos pueden ser moléculas grandes (por ejemplo, proteínas) o moléculas pequeñas (por ejemplo, moléculas inorgánicas sintéticas, organometálicas u orgánicas).

Los ejemplos de agentes activos de molécula grande incluyen, pero no se limitan a, factores de crecimiento hepatopoyéticos, citocinas y anticuerpos monoclonales y policlonales, particularmente, anticuerpos terapéuticos contra antígenos del cáncer. Los agentes activos de moléculas grandes típicos son moléculas biológicas, tales como proteínas que existen de forma natural o sintéticas o recombinantes. Proteínas que son particularmente útiles en los métodos y composiciones proporcionados en el presente documento incluyen proteínas que estimulan la supervivencia y/o la proliferación de células precursoras hematopoyéticas y células poyéticas inmunológicamente activas in vitro o in vivo. Otras proteínas útiles estimulan la división y diferenciación de progenitores eritroides diferenciados en células in vitro o in vivo. Proteínas particulares incluyen, pero no se limitan a: interleucinas, tales como IL-2 (incluyendo IL-II recombinante ("rIL2") y IL-2 de la viruela del canario), IL-10, IL-12 e IL-18; interferones, tales como interferón alfa-2a, interferón alfa-2b, interferón alfa-nl, interferón alfa-n3, interferón beta-I a e interferón gamma-I b; GM-CF y GM-CSF; y EPO.

En ciertas realizaciones, GM-CSF, G-CSF, SCF o EPO se administra por vía subcutánea durante aproximadamente cinco días en un ciclo de cuatro o seis semanas en una cantidad que varía desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 750 mg/m2/día, desde aproximadamente 25 hasta aproximadamente 500 mg/m2/día, desde aproximadamente 50 hasta aproximadamente 250 mg/m2/día, o desde aproximadamente 50 hasta aproximadamente 200 mg/m2/día. En ciertas realizaciones, GM-CSF se puede administrar en una cantidad de desde aproximadamente 60 hasta aproximadamente 500 mcg/m2 por vía intravenosa durante 2 horas o desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 12 mcg/m2/día por vía subcutánea. En ciertas realizaciones, G-CSF se puede administrar por vía subcutánea en una cantidad de aproximadamente 1 mcg/kg/día inicialmente y se puede ajustar dependiendo del aumento de cifras de granulocitos totales. La dosis de mantenimiento de G-CSF se puede administrar en una cantidad de aproximadamente 300 (en pacientes más pequeños) o 480 mcg por vía subcutánea. En ciertas realizaciones, EPO se puede administrar por vía subcutánea en una cantidad de 10.000 unidades 3 veces por semana.

Proteínas particulares que se pueden usar en los métodos y composiciones incluyen, pero no se limitan a: filgrastim, que se comercializa en los Estados Unidos con el nombre comercial Neupogen® (Amgen, Thousand Oaks, CA); sargramostim, que se comercializa en los Estados Unidos con el nombre comercial Leukine® (Immunex, Seattle, WA); y EPO recombinante, que se comercializa en los Estados Unidos con el nombre comercial Epogen® (Amgen, Thousand Oaks, CA).

Se pueden preparar formas recombinantes y mutadas de GM-CSF como se describe en las patentes de EE. UU. N.° 5.391.485; 5.393.870; y 5.229.496. Se pueden preparar formas recombinantes y mutadas de G-CSF como se describe en las patentes de EE. UU. N.° 4.810.643; 4.999.291; 5.528.823; y 5.580.755.

También se proporcionan para su uso en combinación con el compuesto 1, que incluye una formulación del compuesto 1, proteínas nativas, que existen de la forma natural y recombinantes. Se engloban además mutantes y derivados (por ejemplo, formas modificadas) de proteínas que existen de forma natural que presentan, in vivo, al menos algo de la actividad farmacológica de las proteínas en las que se basan. Los ejemplos de mutantes incluyen, pero no se limitan a, proteínas que tienen uno o más restos de aminoácidos que se diferencian de los restos correspondientes en las formas que existen de la forma natural de las proteínas. También están englobadas por el término "mutantes" las proteínas que carecen de restos de hidrato de carbono normalmente presentes en sus formas que existen de la forma natural (por ejemplo, formas no glucosiladas). Los ejemplos de derivados incluyen, pero no se limitan a, derivados pegilados y proteínas de fusión, tales como proteínas formadas fusionando IgG1 o IgG3 a la proteína o porción activa de la proteína de interés. Véase, por ejemplo, Penichet, M.L. y Morrison, S.L., J. Immunol. Methods 248:91-101 (2001).

Los anticuerpos que se pueden usar en combinación con el compuesto 1, que incluye una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, incluyen anticuerpos monoclonales y policlonales. Los ejemplos de anticuerpos incluyen, pero no se limitan a, trastuzumab (Herceptin®), rituximab (Rituxan®), bevacizumab (Avastin™), pertuzumab (Omnitarg™), tositumomab (Bexxar®), edrecolomab (Panorex®) y G250. La formulación del compuesto 1 también se puede combinar con, o usar en combinación con, anticuerpos anti-TNF-a y/o anticuerpos anti-EGFR, tales como, por ejemplo, Erbitux® o panitumumab.

Se pueden administrar agentes activos de molécula grande en forma de vacunas antineoplásicas. Por ejemplo, se pueden usar vacunas que secretan, o provocan la secreción de, citocinas tales como IL-2, G-CSF y GM-CSF en los métodos y composiciones farmacéuticas proporcionadas. Véase, por ejemplo, Emens, L.A., et al., Curr. Opinion Mol. Ther. 3(1):77-84 (2001).

También se pueden usar segundos agentes activos que son moléculas pequeñas para aliviar los efectos adversos asociados a la administración de una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento. Sin embargo, al igual que algunas moléculas grandes, se cree que muchas son capaces de proporcionar un efecto sinérgico cuando se administran con (por ejemplo, antes, después o simultáneamente) el compuesto 1, que incluye una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento. Los ejemplos de segundos agentes activos de molécula pequeña incluyen, pero no se limitan a, antineoplásicos, antibióticos, agentes inmunosupresores y esteroides.

En ciertas realizaciones, el segundo agente es un inhibidor de HSP, un inhibidor del proteasoma, un inhibidor de FLT3 o un inhibidor de mTOR. En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR es un inhibidor de cinasas mTOR.

Los ejemplos de antineoplásicos que se van a usar dentro de los métodos o composiciones descritos en el presente documento incluyen, pero no se limitan a: acivicina; aclarubicina; clorhidrato de acodazol; acronina; adozelesina; aldesleucina; altretamina; ambomicina; acetato de ametantrona; amsacrina; anastrozol; antramicina; asparaginasa; asperlina; azacitidina; azetepa; azotomicina; batimastat; benzodepa; bicalutamida; clorhidrato de bisantreno; dimesilato de bisnafida; bizelesina; sulfato de bleomicina; brequinar sodio; bropirimina; busulfán; cactinomicina; calusterona; caracemida; carbetimer; carboplatino; carmustina; clorhidrato de carubicina; carzelesina; cedefingol; celecoxib (inhibidor de COX-2); clorambucilo; cirolemicina; cisplatino; cladribina; clofarabina; mesilato de crisnatol; ciclofosfamida; Ara-C; dacarbazina; dactinomicina; clorhidrato de daunorubicina; decitabina; dexormaplatino; dezaguanina; mesilato de dezaguanina; diazicuona; docetaxel; doxorubicina; clorhidrato de doxorubicina; droloxifeno; citrato de droloxifeno; propionato de dromostanolona; duazomicina; edatrexato; clorhidrato de eflornitina; elsamitrucina; enloplatino; enpromato; epipropidina; clorhidrato de epirubicina; erbulozol; clorhidrato de esorubicina; estramustina; fosfato sódico de estramustina; etanidazol; etopósido; fosfato de etopósido; etoprina; clorhidrato de fadrozol; fazarabina; fenretinida; floxuridina; fosfato de fludarabina; fluorouracilo; flurocitabina; fosquidona; fostriecina sódica; gemcitabina; clorhidrato de gemcitabina; hidroxiurea; clorhidrato de idarubicina; ifosfamida; ilmofosina; iproplatino; irinotecán; clorhidrato de irinotecán; acetato de lanreotida; letrozol; acetato de leuprolida; clorhidrato de liarozol; lometrexol sódico; lomustina; clorhidrato de losoxantrona; masoprocol; maitansina; clorhidrato de mecloretamina; acetato de megestrol; acetato de melengestrol; melfalán; menogarilo; mercaptopurina; metotrexato; metotrexato sódico; metoprina; meturedepa; mitindomida; mitocarcina; mitocromina; mitogilina; mitomalcina; mitomicina; mitosper; mitotano; clorhidrato de mitoxantrona; ácido micofenólico; nocodazol; nogalamicina; omacetaxina; ormaplatino; oxisuran; paclitaxel; pegaspargasa; peliomicina; pentamustina; sulfato de peplomicina; perfosfamida; pipobromano; piposulfán; clorhidrato de piroxantrona; plicamicina; plomestano; porfimer sódico; porfiromicina; prednimustina; clorhidrato de procarbazina; puromicina; clorhidrato de puromicina; pirazofurina; riboprina; safingol; clorhidrato de safingol; semustina; simtrazeno; sorafenib; esparfosato sódico; esparsomicina; clorhidrato de espirogermanio; espiromustina; espiroplatino; estreptonigrina; estreptozocina; sulofenur; talisomicina; tecogalan sódico; taxotere; tegafur; clorhidrato de teloxantrona; temoporfin; tenipósido; teroxirona; testolactona; tiamiprina; tioguanina; tiotepa; tiazofurina; tirapazamina; citrato de toremifeno; acetato de trestolona; fosfato de triciribina; trimetrexato; glucuronato de trimetrexato; triptorelina; clorhidrato de tubulozol; mostaza de uracilo; uredepa; vapreotida; verteporfina; sulfato de vinblastina; sulfato de vincristina; vindesina; sulfato de vindesina; sulfato de vinepidina; sulfato de vinglicinato; sulfato de vinleurosina; tartrato de vinorelbina; sulfato de vinrosidina; sulfato de vinzolidina; vorozol; zeniplatino; zinostatina; clorhidrato de zorubicina.

Otros fármacos antineoplásicos a incluir dentro de los métodos en el presente documento incluyen, pero no se limitan a: 20-epi-1,25-dihidroxivitamina D3; 5-etiniluracilo; abiraterona; aclarubicina; acilfulveno; adecipenol; adozelesina; aldesleucina; antagonistas de ALL-TK; altretamina; ambamustina; amidox; amifostina; ácido aminolevulínico; amrubicina; amsacrina; anagrelida; anastrozol; andrografolida; inhibidores de la angiogénesis; antagonista D; antagonista G; antarelix; proteína-1 morfogenética anti-dorsalizante; antiandrógeno, carcinoma prostático; antiestrógeno; antineoplastona; oligonucleótidos antisentido; glicinato de afidicolina; moduladores de los genes de la apoptosis; reguladores de la apoptosis; ácido apurínico; ara-CDP-DL-PTBA; arginina desaminasa; asulacrina; atamestano; atrimustina; axinastatina 1; axinastatina 2; axinastatina 3; azasetrón; azatoxina; azatirosina; derivados de bacatina III; balanol; batimastat; antagonistas de BCR/ABL; benzoclorinas; benzoilestaurosporina; derivados de betalactama; beta-aletina; beta-clamicina B; ácido betulínico; inhibidor de bFGF; bicalutamida; bisantreno; bisaziridinilspermina; bisnafida; bistrateno A; bizelesina; breflato; bropirimina; budotitano; butionina sulfoximina; calcipotriol; calfostina C; derivados de camptotecina; capecitabina; carboxamida-amino-triazol; carboxiamidotriazol; CaRest M3; CARN 700; inhibidor derivado de cartílago; carzelesina; inhibidores de caseína cinasas (ICOS); castanospermina; cecropina B; cetrorelix; clorinas; cloroquinoxalina sulfonamida; cicaprost; cis-porfirina; cladribina; análogos de clomifeno; clotrimazol; colismicina A; colismicina B; combretastatina A4; análogo de combretastatina; conagenina; crambescidina 816; crisnatol; criptoficina 8; derivados de criptoficina A; curacina A; ciclopentantraquinonas; cicloplatam; cipemicina; ocfosfato de Ara-C; factor citolítico; citostatina; dacliximab; decitabina; deshidrodidemnina B; deslorelina; dexametasona; dexifosfamida; dexrazoxano; dexverapamilo; diacicuona; didemnina B; didox; dietilnorespermina; dihidro-5-azacitidina; dihidrotaxol 9-; dioxamicina; difenilespiromustina; docetaxel; docosanol; dolasetrón; doxifluridina; doxorubicina; droloxifeno; dronabinol; duocarmicina SA; ebselen; ecomustina; edelfosina; edrecolomab; eflornitina; elemeno; emitefur; epirubicina; epristerida; análogo de estramustina; agonistas de estrógenos; antagonistas de estrógenos; etanidazol; fosfato de etopósido; exemestano; fadrozol; fazarabina; fenretinida; filgrastim; finasterida; flavopiridol; flezelastina; fluasterona; fludarabina; clorhidrato de fluorodaunorunicina; forfenimex; formestano; fostriecina; fotemustina; texafirina de gadolinio; nitrato de galio; galocitabina; ganirelix; inhibidores de gelatinasa; gemcitabina; inhibidores de glutatión; hepsulfam; heregulina; hexametileno bisacetamida; hipericina; ácido ibandrónico; idarubicina; idoxifeno; idramantona; ilmofosina; ilomastat; imatinib (por ejemplo, Gleevec®); imiquimod; péptidos inmunoestimulantes; inhibidor de los receptores del factor de crecimiento 1 similar a la insulina; agonistas de interferón; interferones; interleucinas; iobenguano; yododoxorubicina; ipomeanol, 4-; iroplact; irsogladina; isobengazol; isohomohalicondrina B; itasetrón; jasplaquinolida; kahalalida F; triacetato de lamelarina-N; lanreotida; leinamicina; lenograstim; sulfato de lentinano; leptolstatina; letrozol; factor inhibidor de la leucemia; interferón alfa de leucocitos; leuprolida+estrógeno+progesterona; leuprorelina; levamisol; liarozol; análogo de poliamina lineal; péptido disacárido lipófilo; compuestos de platino lipófilos; lisoclinamida 7; lobaplatino; lombricina; lometrexol; lonidamina; losoxantrona; loxoribina; lurtotecan; texafirina de lutecio; lisofilina; péptidos líticos; maitansina; manostatina A; marimastat; masoprocol; maspina; inhibidores de matrilisina; inhibidores de metaloproteinasa de matriz; menogarilo; merbarona; meterilina; metioninasa; metoclopramida; inhibidor de MIF; mifepristona; miltefosina; mirimostim; mitoguazona; mitolactol; análogos de mitomicina; mitonafida; mitotoxina factor de crecimiento de fibroblastos-saporina; mitoxantrona; mofaroteno; molgramostim; Erbitux, gonadotrofina coriónica humana; monofosforil lípido A+estreptocinasa de pared celular de miobacteria; mopidamol; antineoplásico de mostaza; micaperóxido B; extracto de pared celular micobacteriana; miriaporona; N-acetildinalina; benzamidas N-sustituidas; nafarelina; nagrestip; naloxona+pentazocina; napavina; nafterpina; nartograstim; nedaplatino; nemorubicina; ácido neridrónico; nilutamida; nisamicina; moduladores del óxido nítrico; antioxidante de nitróxido; nitrulina; oblimersen (Genasense®); O6-bencilguanina; octreotida; oquicenona; oligonucleótidos; onapristona; ondansetrón; ondansetrón; oracina; inductor de citocina oral; ormaplatino; osaterona; oxaliplatino; oxaunomicina; paclitaxel; análogos de paclitaxel; derivados de paclitaxel; palaumina; palmitoilrizoxina; ácido pamidrónico; panaxitriol; panomifeno; parabactina; paceliptina; pegaspargasa; peldesina; polisulfato de pentosán sódico; pentostatina; pentrozol; perflubron; perfosfamida, alcohol perilílico; fenacinomicina; acetato de fenilo; inhibidores de fosfatasa; picibanilo; clorhidrato de pilocarpina; pirarubicina; piritrexim; placetina A; placetina B; inhibidor de los activadores del plasminógeno; complejo de platino; compuestos de platino; complejo de platino-triamina; porfimer sódico; porfiromicina; prednisona; propil bis-acridona; prostaglandina J2; inhibidores de proteasoma; modulador inmune basado en proteína A; inhibidor de proteína cinasa C; inhibidores de proteína cinasa C, microalgal; inhibidores de proteína tirosina fosfatasa; inhibidores de purina nucleósido fosforilasa; purpurinas; pirazoloacridina; conjugado de polioxietileno y hemoglobina piridoxilada; antagonistas de raf; raltitrexed; ramosetrón; inhibidores de ras farnesil proteína transferasa; inhibidores de ras; inhibidor de ras-GAP; reteliptina desmetilada; etidronato de renio Re 186; rizoxina; ribozimas; retinamida RII; rohituquina; romurtida; roquinimex; rubiginona B1; ruboxil; safingol; saintopina; SarCNU; sarcofitol A; sargramostim; miméticos de Sdi 1; semustina; inhibidor 1 derivado de la senescencia; oligonucleótidos sentido; inhibidores de la transducción de señales; sizofiran; sobuzoxano; borocaptato sódico; fenilacetato sódico, solverol; proteína de unión a somatomedina; sonermina; ácido esparfósico; espicarnicina D; espiromustina; esplenopentina; espongiastina 1; escualamina; estipiamida; inhibidores de estromelisina; sulfinosina; antagonista de los péptidos intestinales vasoactivos superactivo; suradista; suramina; swainsonina; talimustina; metyoduro de tamoxifeno; tauromustina; tazaroteno; tecogalan sódico; tegafur; telurapirilio; inhibidores de la telomerasa; temoporfina; tenipósido; tetraclorodecaóxido; tetrazomina; taliblastina; tiocoralina; trombopoyetina; mimético de trombopoyetina; timalfasina; agonista de receptores de timopoyetina; timotrinano; hormona estimulante de la tiroides; etiopurpurina de etilo de estaño; tirapazamina; bicloruro de titanoceno; topsentina; toremifeno; inhibidores de la traducción; tretinoína; triacetiluridina; triciribina; trimetrexato; triptorelina; tropisetrón; turosterida; inhibidores de tirosina cinasas; tirfostinas; inhibidores de UBC; ubenimex; factor inhibidor del crecimiento derivado del seno urogenital, antagonistas de receptores de urocinasa; vapreotida; variolina B; velaresol; veramina; verdinas; verteporfina; vinorelbina; vinxaltina; vitaxin; vorozol; zanoterona; zeniplatino; zilascorb y zinostatina estimalámero.

En ciertas realizaciones, el segundo agente se selecciona de uno o más inhibidores del punto de control. En una realización, un inhibidor del punto de control se usa en combinación con el compuesto 1 o una formulación del compuesto 1 en los métodos proporcionados en el presente documento. En otra realización, dos inhibidores del punto de control se usan en combinación con el compuesto 1 o una formulación del compuesto 1 a propósito de los métodos proporcionados en el presente documento. En otra realización más, tres o más inhibidores del punto de control se usan en combinación con el compuesto 1 o una formulación del compuesto 1 a propósito de los métodos proporcionados en el presente documento.

Como se usa en el presente documento, el término "inhibidor del punto de control inmunitario" o "inhibidor del punto de control" se refiere a moléculas que reducen, inhiben, interfieren con o modulan totalmente o parcialmente una o más proteínas del punto de control. Sin estar limitado a teoría particular, las proteínas del punto de control regulan la activación o función de linfocitos T. Se conocen numerosas proteínas del punto de control, tales como CTLA-4 y sus ligandos CD80 y CD86; y PD-1 con sus ligandos PD-L1 y PD-L2 (Pardoll, Nature Reviews Cancer, 2012, 12, 252-264). Estas proteínas parecen ser responsables de interacciones coestimulantes o inhibidoras de respuestas de linfocitos T. Las proteínas del punto de control inmunitarias parecen regular y mantener la autotolerancia y la duración y amplitud de respuestas inmunitarias fisiológicas. Los inhibidores del punto de control inmunitario incluyen anticuerpos o derivan de anticuerpos.

En una realización, el inhibidor del punto de control es un inhibidor de CTLA-4. En una realización, el inhibidor de CTLA-4 es un anticuerpo anti-CTLA-4. Los ejemplos de anticuerpos anti-CTLA-4 incluyen, pero no se limitan a, aquellos descritos en las patentes de EE. UU. N.°: 5.811.097; 5.811.097; 5.855.887; 6.051.227; 6.207.157; 6.682.736; 6.984.720; y 7.605.238, todas las cuales se incorporan en el presente documento en sus totalidades. En una realización, el anticuerpo anti-CTLA-4 es tremelimumab (también conocido como ticilimumab o CP-675,206). En otra realización, el anticuerpo anti-CTLA-4 es ipilimumab (también conocido como MDX-010 o MDX-101). Ipilimumab es un anticuerpo monoclonal IgG completamente humano que se une a CTLA-4. Ipilimumab se comercializa con el nombre comercial Yervoy™.

En una realización, el inhibidor del punto de control es un inhibidor de PD-1/PD-L1. Los ejemplos de inhibidores de PD-1/PD-L1 incluyen, pero no se limitan a, aquellos descritos en las patentes de EE. UU. N.° 7.488.802; 7.943.743; 8.008.449; 8.168.757; 8.217.149, y la publicación de solicitud de patente PCT N.° WO2003042402, WO2008156712, WO2010089411, WO2010036959, WO2011066342, WO2011159877, WO2011082400, y WO2011161699.

En una realización, el inhibidor del punto de control es un inhibidor de PD-1. En una realización, el inhibidor de PD-1 es un anticuerpo anti-PD-1. En una realización, el anticuerpo anti-PD-1 BGB-A317, nivolumab (también conocido como ONO-4538, BMS-936558 o MDX1106) o pembrolizumab (también conocido como MK-3475, SCH 900475 o lambrolizumab). En una realización, el anticuerpo anti-PD-1 es nivolumab. Nivolumab es un anticuerpo monoclonal anti-PD-1 IgG4 humana, y se comercializa con el nombre comercial Opdivo™. En otra realización, el anticuerpo anti-PD-1 es pembrolizumab. Pembrolizumab es un anticuerpo monoclonal IgG4 humanizado y se comercializa con el nombre comercial Keytruda™. En otra realización más, el anticuerpo anti-PD-1 es CT-011, un anticuerpo humanizado. CT-011 administrado solo ha fracasado en mostrar respuesta en el tratamiento de leucemia mieloide aguda (LMA) en la recaída. En otra realización más, el anticuerpo anti-PD-1 es AMP-224, una proteína de fusión. En otra realización, el anticuerpo PD-1 es BGB-A317. BGB-A317 es un anticuerpo monoclonal en el que la capacidad para unirse al receptor I de Fc gamma está específicamente diseñado, y que tiene un distintivo de unión único a PD-1 con alta afinidad y especificidad superior por diana.

En una realización, el inhibidor del punto de control es un inhibidor de PD-L1. En una realización, el inhibidor de PD-L1 es un anticuerpo anti-PD-Ll. En una realización, el anticuerpo anti-PD-Ll es MEDI4736 (durvalumab). En otra realización, el anticuerpo anti-PD-Ll es BMS-936559 (también conocido como MDX-1105-01). En otra realización más, el inhibidor de PD-L1 es atezolizumab (también conocido como MPDL3280A, y Tecentriq®).

En una realización, el inhibidor del punto de control es un inhibidor de PD-L2. En una realización, el inhibidor de PD-L2 es un anticuerpo anti-PD-L2. En una realización, el anticuerpo anti-PD-L2 es rHIgM12B7A.

En una realización, el inhibidor del punto de control es un inhibidor del gen de activación de linfocitos-3 (LAG-3). En una realización, el inhibidor de LAG-3 es IMP321, una proteína de fusión de Ig soluble (Brignone et al., J. Immunol., 2007, 179, 4202-4211). En otra realización, el inhibidor de LAG-3 es BMS-986016.

En una realización, el inhibidor del punto de control es un inhibidor de B7. En una realización, el inhibidor de B7 es un inhibidor de B7-H3 o un inhibidor de B7-H4. En una realización, el inhibidor de B7-H3 es MGA271, un anticuerpo anti-B7-H3 (Loo et al., Clin. Cancer Res., 2012, 3834).

En una realización, el inhibidor del punto de control es un inhibidor de TIM3 (dominio de inmunoglobulina de linfocito T y dominio 3 de mucina) (Fourcade et al., J. Exp. Med., 2010, 207, 2175-86; Sakuishi et al., J. Exp. Med., 2010, 207, 2187-94).

En una realización, el inhibidor del punto de control es un agonista de OX40 (CD134). En una realización, el inhibidor del punto de control es un anticuerpo anti-OX40. En una realización, el anticuerpo anti-OX40 es antiOX-40. En otra realización, el anticuerpo anti-OX40 es MEDI6469.

En una realización, el inhibidor del punto de control es un agonista de GITR. En una realización, el inhibidor del punto de control es un anticuerpo anti-GITR. En una realización, el anticuerpo anti-GITR es TRX518.

En una realización, el inhibidor del punto de control es un agonista de CD137. En una realización, el inhibidor del punto de control es un anticuerpo anti-CD137. En una realización, el anticuerpo anti-CD137 es urelumab. En otra realización, el anticuerpo anti-CD137 es PF-05082566.

En una realización, el inhibidor del punto de control es un agonista de CD40. En una realización, el inhibidor del punto de control es un anticuerpo anti-CD40. En una realización, el anticuerpo anti-CD40 es CF-870,893.

En una realización, el inhibidor del punto de control es interleucina-15 humana recombinante (rhIL-15).

En una realización, el inhibidor del punto de control es un inhibidor de IDO. En una realización, el inhibidor de IDO es INCB024360. En otra realización, el inhibidor de IDO es indoximod.

En ciertas realizaciones, las terapias de combinación proporcionadas en el presente documento incluyen dos o más de los inhibidores del punto de control descritos en el presente documento (incluyendo inhibidores del punto de control de la misma clase o diferente). Además, las terapias de combinación descritas en el presente documento se pueden usar en combinación con segundos agentes activos como se describe en el presente documento cuando corresponda para tratar las enfermedades descritas en el presente documento y entendidas en la técnica.

En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se puede usar en combinación con una o más células inmunitarias que expresan uno o más receptores quiméricos para el antígeno (CAR) sobre su superficie (por ejemplo, una célula inmunitaria modificada). En general, los CAR comprenden un dominio extracelular de una primera proteína, por ejemplo, una proteína de unión al antígeno, un dominio transmembranario y un dominio de señalización intracelular. En ciertas realizaciones, una vez el dominio extracelular se une a una proteína diana, tal como un antígeno asociado a tumor (TAA) o antígeno específico de tumor (TSA), se genera una señal por el dominio de señalización intracelular que activa la célula inmunitaria, por ejemplo, para dirigir y destruir una célula que expresa la proteína diana.

Dominios extracelulares: Los dominios extracelulares de los CAR se unen a un antígeno de interés. En ciertas realizaciones, el dominio extracelular del CAR comprende un receptor, o una porción de un receptor, que se une a dicho antígeno. En ciertas realizaciones, el dominio extracelular comprende, o es, un anticuerpo o una porción de unión al antígeno del mismo. En realizaciones específicas, el dominio extracelular comprende, o es, una dominio Fv monocatenario (scFv). El dominio Fv monocatenario puede comprender, por ejemplo, un V^l unido a V^h por un conector flexible, en donde dichos V^l y V^h son de un anticuerpo que se une a dicho antígeno.

En ciertas realizaciones, el antígeno reconocido por el dominio extracelular de un polipéptido descrito en el presente documento es un antígeno asociado a tumor (TAA) o un antígeno específico de tumor (TSA). En diversas realizaciones específicas, el antígeno asociado a tumor o antígeno específico de tumor es, sin limitación, Her2, antígeno de células madre prostáticas (PSCA), alfa-fetoproteína (AFP), antígeno carcinoembrionario (CEA), antígeno-125 del cáncer (CA-125), CA19-9, calretinina, MUC-1, antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA), proteína de la membrana epitelial (EMA), antígeno de tumor epitelial (ETA), tirosinasa, antígeno asociado al melanoma-24 (MAGE), CD19, CD22, CD27, CD30, CD34, CD45, CD70, CD99, CD117, EGFRvIII (factor de crecimiento epidérmico variante III), mesotelina, PAP (fosfatasa ácida prostática), prosteína, TARP (proteína del marco de lectura alterno del receptor de linfocitos T gamma), Trp-p8, STEAPI (antígeno epitelial de 6 dominios transmembranarios de la próstata 1), cromogranina, citoqueratina, desmina, proteína ácida fibrilar de la glía (GFAP), proteína del líquido de la enfermedad quística macroscópica (GCDFP-15), antígeno HMB-45, proteína melan-A (antígeno de melanoma reconocido por linfocitos T; MART-I), mio-D1, actina específica de músculo (MSA), neurofilamento, enolasa específica de neurona (NSE), fosfatasa alcalina placentaria, sinaptofisina, tiroglobulina, factor de transcripción-1 de tiroides, la forma dimérica de la isoenzima piruvato cinasa tipo M2 (M2-PK de tumor), una proteína ras anormal, o una proteína p53 anormal. En ciertas otras realizaciones, el TAA o TSA reconocido por el dominio extracelular de un CAR es integrina avp3 (CD61), galactina o Ral-B.

En ciertas realizaciones, el TAA o TSA reconocido por el dominio extracelular de un CAR es un antígeno de cáncer/testículo (CT), por ejemplo, BAGE, CAGE, CTAGE, FATE, GAGE, HCA661, HOM-TES-85, MAGEA, MAGEB, MAGEC, NA88, NY-ES0-1, NY-SAR-35, OY-TES-1, SPANXBI, SPA17, SSX, SYCPI o TPTE.

En ciertas otras realizaciones, el TAA o TSA reconocido por el dominio extracelular de un CAR es un hidrato de carbono o gangliósido, por ejemplo, fuc-GMI, GM2 (antígeno oncofetal-inmunogénico-1; OFA-I-1); GD2 (OFA-I-2), GM3, GD3 y similares.

En ciertas otras realizaciones, el TAA o TSA reconocido por el dominio extracelular de un CAR es alfa-actinina-4, Bage-l, BCR-ABL, proteína de fusión Bcr-Abl, beta-catenina, CA 125, CA 15-3 (CA 27,29\BCAA), CA 195, CA 242, CA-50, CAM43, Casp-8, cdc27, cdk4, cdkn2a, CEA, coa-l, proteína de fusión dek-can, EBNA, EF2, antígenos del virus de Epstein Barr, proteína de fusión ETV6-AML1, HLA-A2, HLA-All, hsp70-2, KIAA0205, Mart2, Mum-1, 2 y 3, neo-PAP, miosina clase I, OS-9, proteína de fusión pml-RARa, PTPRK, K-ras, N-ras, triosafosfato isomerasa, Gage 3,4,5,6,7, GnTV, Herv-K-mel, Lage-1, NA-88, NY-Eso-1/Lage-2, SP17, SSX-2, TRP2-Int2, gp100 (Pmel17), tyrosinase, TRP-1, TRP-2, MAGE-1, MAGE-3, RAGE, GAGE-1, GAGE-2, p15(58), RAGE, SCP-1, Hom/Mel-40, PRAME, p53, HRas, HER-2/neu, E2A-PRL, H4-RET, IGH-IGK, MYL-RAR, antígenos E6 y E7 del virus del papiloma humano (VPH), TSP-180, MAGE-4, MAGE-5, MAGE-6, p185erbB2, p180erbB-3, c-met, nm-23H1, PSA, TAG-72-4, CA 19-9, CA 72­ 4, CAM 17,1, NuMa, K-ras, 13-Catenin, Mum-1, p16, TAGE, PSMA, CT7, telomerasa, 43-9F, 5T4, 791Tgp72, 13HCG, BCA225, BTAA, CD68\KP1, C0-029, FGF-5, G250, Ga733 (EpCAM), HTgp-175, M344, MA-50, MG7-Ag, MOV18, NB\70K, NY-C0-1, RCAS1, SDCCAG16, TA-90, TAAL6, TAG72, TLP o TPS

En diversas realizaciones específicas, el antígeno asociado a tumor o antígeno específico de tumor es un antígeno de tumor relacionado con LMA, como se describen en S. Anguille et al, Leukemia (2012), 26, 2186-2196.

Otros antígenos asociados a tumor y específicos de tumor son conocidos por los expertos en la técnica.

Se conocen en la técnica receptores, anticuerpos y scFv que se unen a TSA y TAA, útiles en construir receptores quiméricos para el antígeno, al igual que las secuencias de nucleótidos que los codifica.

En ciertas realizaciones específicas, el antígeno reconocido por el dominio extracelular de un receptor quimérico para el antígeno es un antígeno que, en general, no se considera que sea TSA o a TAA, pero que está asociado, sin embargo, a células tumorales, o daño provocado por un tumor. En ciertas realizaciones, por ejemplo, el antígeno es, por ejemplo, un factor de crecimiento, citocina o interleucina, por ejemplo, un factor de crecimiento, citocina, o interleucina asociado a angiogénesis o vasculogénesis. Dichos factores de crecimiento, citocinas o interleucinas pueden incluir, por ejemplo, factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), factor de crecimiento de fibroblastos básico (bFGF), factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), factor de crecimiento de hepatocitos (HGF), factor de crecimiento similar a la insulina (IGF) o interleucina-8 (IL-8). Los tumores también pueden crear un entorno hipóxico local al tumor. Como tales, en otras realizaciones específicas, el antígeno es un factor asociado a hipoxia, por ejemplo, HIF-1a, HIF-1 p, HIF-2a, HIF-2p, HIF-3a o HIP-3p. Los tumores también pueden causar daño localizado al tejido normal, causando la liberación de moléculas conocidas como moléculas de patrón molecular asociado al daño (DAMP; también conocidas como alarminas). En ciertas otras realizaciones específicas, por lo tanto, el antígeno es un DAMP, por ejemplo, una proteína de choque térmico, caja 1 del grupo de alta movilidad de proteínas asociadas a cromatina (H^m G^b 1), S100A8 (MRP8, calgranulina A), S100A9 (MRP14, calgranulina B), amiloide de suero A (SAA), o puede ser un ácido desoxirribonucleico, trifosfato de adenosina, ácido úrico o sulfato de heparina.

Dominio transmembranario: En ciertas realizaciones, el dominio extracelular del CAR está unido al dominio transmembranario del polipéptido por un conector, espaciador o secuencia de polipéptidos bisagra, por ejemplo, una secuencia de CD28 o una secuencia de CTLA4. El dominio transmembranario se puede obtener o derivar del dominio transmembranario de cualquier proteína transmembranaria, y puede incluir toda o una porción de dicho dominio transmembranario. En realizaciones específicas, el dominio transmembranario se puede obtener o derivar de, por ejemplo, CD8, CD 16, un receptor de citocina y receptor de interleucina, o un receptor de factor de crecimiento, o similares.

Dominios de señalización intracelular: En ciertas realizaciones, el dominio intracelular de un CAR es o comprende un dominio intracelular o motivo de una proteína que se expresa sobre la superficie de linfocitos T y desencadena la activación y/o proliferación de dichos linfocitos T. Dicho dominio o motivo es capaz de transmitir una unión primaria al antígeno señal que es necesaria para la activación de un linfocito T en respuesta a la unión del antígeno a la porción extracelular del CAR. Normalmente, este dominio o motivo comprende, o es, un ITAM (motivo de activación basado en tirosina de inmunorreceptor). Los polipéptidos que contienen ITAM adecuados para CAR incluyen, por ejemplo, la cadena zeta de CD3 (CD3Z) o porciones que contienen ITAM de la misma. En una realización específica, el dominio intracelular es un dominio de señalización intracelular de CD3Z. En otras realizaciones específicas, el dominio intracelular es de una cadena de receptores de linfocitos, una proteína compleja TCR/CD3, una subunidad del receptor de Fe o una subunidad del receptor de IL-2. En ciertas realizaciones, el CAR comprende además uno o más dominios o motivos coestimulantes, por ejemplo, como parte del dominio intracelular del polipéptido. El uno o más dominios o motivos coestimulantes pueden ser, o pueden comprender, uno o más de una secuencia de polipéptidos de CD27 coestimulante, una secuencia de polipéptidos de CD28 coestimulante, una secuencia de polipéptidos de OX40 (CD134) coestimulante, una secuencia de polipéptidos de 4-1BB (CD137) coestimulante, o una secuencia de polipéptidos coestimulante de linfocitos T inducibles coestimulantes (ICOS), u otro dominio o motivo coestimulante, o cualquier combinación de los mismos.

El CAR también puede comprender un motivo de supervivencia de linfocitos T. El motivo de supervivencia de linfocitos T puede ser cualquier secuencia o motivo de polipéptidos que facilite la supervivencia del linfocito T después de la estimulación por un antígeno. En ciertas realizaciones, el motivo de supervivencia de linfocitos T es, o deriva de, CD3, CD28, un dominio de señalización intracelular del receptor de IL-7 (IL-7R), un dominio de señalización intracelular del receptor de IL-12, un dominio de señalización intracelular del receptor de IL-15, un dominio de señalización intracelular del receptor de IL-21, o un dominio de señalización intracelular del receptor del factor de crecimiento transformante p (TGFp).

Las células inmunitarias modificadas que expresan los CAR pueden ser, por ejemplo, linfocitos T (linfocitos T, por ejemplo, linfocitos T CD4+ o linfocitos T CD8+), linfocitos citotóxicos (CTL) o linfocitos citolíticos naturales (NK). Los linfocitos T usados en las composiciones y métodos proporcionados en el presente documento pueden ser linfocitos T intactos o linfocitos T restringidos por MHC. En ciertas realizaciones, los linfocitos T son linfocitos infiltrantes de tumores (TIL). En ciertas realizaciones, los linfocitos T han sido aislados de una biopsia de tumor, o se han expandido de linfocitos T aislados de una biopsia de tumor. En ciertas otras realizaciones, los linfocitos T han sido aislados de, o se expanden de linfocitos T aislados de, sangre periférica, sangre del cordón o linfa. Las células inmunitarias que se van a usar para generar células inmunitarias modificadas que expresan un CAR se pueden aislar usando métodos rutinarios aceptados en la técnica, por ejemplo, extracción de sangre seguido por aféresis y opcionalmente aislamiento de células mediado por anticuerpo o clasificación.

Las células inmunitarias modificadas son preferentemente autólogas a un individuo al que se van a administrar las células inmunitarias modificadas. En ciertas otras realizaciones, las células inmunitarias modificadas son alógenas a un individuo al que se van a administrar las células inmunitarias modificadas. Donde se usan linfocitos T alógenos o células NK para preparar linfocitos T modificados, es preferible seleccionar linfocitos T o células NK que reducirán la posibilidad de la enfermedad injerto contra huésped (GVHD) en el individuo. Por ejemplo, en ciertas realizaciones, se seleccionan linfocitos T específicos de virus para la preparación de linfocitos T modificados; se espera que dichos linfocitos tengan una capacidad nativa enormemente reducida para unirse a, y así ser activados por, cualquier antígeno de receptor. En ciertas realizaciones, el rechazo mediado por receptor de linfocitos T alógenos se puede reducir por la coadministración al hospedador de uno o más agentes inmunosupresores, por ejemplo, ciclosporina, tacrolimus, sirolimus, ciclofosfamida o similares.

Los linfocitos T, por ejemplo, linfocitos T sin modificar, o linfocitos T que expresan CD3 y CD28, o que comprenden un polipéptido que comprende un dominio de señalización de CD3Z y un dominio coestimulante de CD28, se pueden expandir usando anticuerpos contra CD3 y CD28, por ejemplo, anticuerpos unidos a perlas; véanse, por ejemplo, las patentes de EE. UU. N.° 5.948.893; 6.534.055; 6.352.694; 6.692.964; 6.887.466; y 6.905.681.

Las células inmunitarias modificadas, por ejemplo, linfocitos T modificados, pueden comprender opcionalmente un "gen suicida" o "interruptor de seguridad" que permite la destrucción de sustancialmente todas las células inmunitarias modificadas cuando se desee. Por ejemplo, los linfocitos T modificados, en ciertas realizaciones, pueden comprender un gen de timidina cinasa del VHS (HSV-TK), que provoca la muerte de los linfocitos T modificados tras el contacto con ganciclovir. En otra realización, los linfocitos T modificados comprenden una caspasa inducible, por ejemplo, una caspasa inducible 9 (caspasa9i), por ejemplo, una proteína de fusión entre la caspasa 9 y la proteína de unión FK506 humana que permite la dimerización usando un fármaco de molécula pequeña específico. Véase Straathof et al., Blood 105(11):4247-4254 (2005).

Los segundos agentes activos específicos útiles en los métodos o composiciones incluyen, pero no se limitan a, rituximab, oblimersen (Genasense®), remicade, docetaxel, celecoxib, melfalán, dexametasona (Decadron®), esteroides, gemcitabina, cisplatino, temozolomida, etopósido, ciclofosfamida, temodar, carboplatino, procarbazina, gliadel, tamoxifeno, topotecán, metotrexato, Arisa®, taxol, taxotere, fluorouracilo, leucovorina, irinotecán, xeloda, interferón alfa, interferón alfa pegilado (por ejemplo, PEG INTRON-A), capecitabina, cisplatino, tiotepa, fludarabina, carboplatino, daunorubicina liposómica, Ara-C, doxetaxol, pacilitaxel, vinblastina, IL-2, GM-CSF, dacarbazina, vinorelbina, ácido zoledrónico, palmitronato, biaxina, busulfán, prednisona, bisfosfonato, trióxido de arsénico, vincristina, doxorubicina (Doxil®), paclitaxel, ganciclovir, adriamicina, fosfato sódico de estramustina (Emcyt®), sulindac y etopósido.

En ciertas realizaciones de los métodos proporcionados en el presente documento, el uso de un segundo agente activo en combinación con el compuesto 1, que incluye una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, se pueden modificar o retrasar durante o poco después de la administración del compuesto 1, que incluye una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, según se considere apropiado por el médico experto en la técnica. En ciertas realizaciones, los sujetos que se administran con el compuesto 1, que incluye una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, solo o en combinación con otras terapias, pueden recibir tratamiento paliativo que incluye antieméticos, factores de crecimiento mieloides y transfusiones de plaquetas, cuando convenga. En algunas realizaciones, los sujetos que se administran con el compuesto 1, que incluye una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, se pueden administrar con un factor de crecimiento como un segundo agente activo según el criterio del médico experto en la técnica. En algunas realizaciones, se proporciona administración del compuesto 1, que incluye una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, en combinación con eritropoyetina o darbepoetina (Aranesp).

En un aspecto, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento, prevención, abordaje y/o mejora de cáncer de vejiga de células de transición localmente avanzado o metastásico que comprende administrar una formulación del compuesto 1 con gemcitabina, cisplatino, 5-fluorouracilo, mitomicina, metotrexato, vinblastina, doxorubicina, carboplatino, tiotepa, paclitaxel, docetaxel, atezolizumab, avelumab, durvalumab, keytruda (pembrolizumab) y/o nivolumab.

En un aspecto, los métodos de tratamiento, prevención, abordaje y/o mejora de un cáncer proporcionado en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 en combinación con un segundo principio activo del siguiente modo: temozolomida a pacientes pediátricos con tumores cerebrales recidivantes o progresivos o neuroblastoma recurrente; celecoxib, etopósido y ciclofosfamida para cáncer del SNC recidivante o progresivo; temodar a pacientes con meningioma recurrente o progresivo, meningioma maligno, hemangiopericitoma, múltiples metástasis al cerebro, tumores cerebrales recidivantes o glioblastoma multiforme recién diagnosticado; irinotecán a pacientes con glioblastoma recurrente; carboplatino a pacientes pediátricos con glioma del tronco encefálico; procarbazina a pacientes pediátricos con gliomas malignos progresivos; ciclofosfamida a pacientes con tumores malignos cerebrales de mal pronóstico, glioblastoma multiforme recién diagnosticado o recurrente; Gliadel® para gliomas malignos recurrentes de gran malignidad; temozolomida y tamoxifeno para astrocitoma anaplásico; o topotecán para gliomas, glioblastoma, astrocitoma anaplásico u oligodendroglioma anaplásico.

En un aspecto, los métodos de tratamiento, prevención, abordaje y/o mejora de un cáncer de mama metastásico proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con metotrexato, ciclofosfamida, capecitabina, 5-fluorouracilo, taxano, temsirolimus, ABRAXANE® (partículas unidas a proteína de paclitaxel para suspensión inyectable) (unida a albúmina), lapatinib, herceptin, pamidronato disódico, mesilato de eribulina, everolimus, gemcitabina, palbociclib, ixabepilona, kadcila, pertuzumab, teotepa, anastrozol, docetaxel, clorhidrato de doxorubicina, clorhidrato de epirubicina, toremifeno, fulvestrant, acetato de goserelina, ribociclib, acetato de megestrol, vinblastina, inhibidores de la aromatasa, tales como letrozol, exemestano, moduladores selectivos de estrógenos, antagonistas de receptores de estrógeno, antraciclinas, emtansina y/o pexidartinib a pacientes con cáncer de mama metastásico.

En un aspecto, los métodos de tratamiento, prevención, abordaje y/o mejora de los tumores neuroendocrinos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con al menos uno de everolimus, avelumab, sunitinib, nexavar, leucovorina, oxaliplatino, temozolomida, capecitabina, bevacizumab, doxorubicina (Adriamicina), fluorouracilo (Adrucil, 5-fluorouracilo), estreptozocina (Zanosar), dacarbazina, sandostatina, lanreotida y/o pasireotida a pacientes con tumores neuroendocrinos.

En un aspecto, los métodos de tratamiento, prevención, abordaje y/o mejora de un cáncer de mama metastásico proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con metotrexato, gemcitabina, cisplatino, cetuximab, 5-fluorouracilo, bleomicina, docetaxel, carboplatino, hidroxiurea, pembrolizumab y/o nivolumab a pacientes con cáncer de cabeza o cuello recurrente o metastásico.

En un aspecto, los métodos de tratamiento, prevención, abordaje y/o mejora de un cáncer pancreático proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con gemcitabina, ABRAXANE®, 5-fluorouracilo, afinitor, irinotecán, mitomicina C, sunitinib, malato de sunitinib y/o tarceva a pacientes con cáncer pancreático.

En un aspecto, los métodos de tratamiento, prevención, abordaje y/o mejora de un cáncer de colon o recto proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con ARISA®, avastatina, oxaliplatino, 5-fluorouracilo, irinotecán, capecitabina, cetuximab, ramucirumab, panitumumab, bevacizumab, leucovorina cálcica, lonsurf, regorafenib, ziv-aflibercept, taxol y/o taxotere.

En un aspecto, los métodos de tratamiento, prevención, abordaje y/o mejora de un cáncer colorrectal insensible proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con capecitabina y/o vemurafenib a pacientes con cáncer colorrectal insensible, o pacientes que fracasan a terapia de primera línea o tienen un mal rendimiento en el adenocarcinoma de colon o rectal.

En un aspecto, los métodos de tratamiento, prevención, abordaje y/o mejora de un cáncer colorrectal proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con fluorouracilo, leucovorina y/o irinotecán a pacientes con cáncer colorrectal, que incluye estadio 3 y estadio 4, o a pacientes que han sido tratados previamente para cáncer colorrectal metastásico.

En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con cáncer colorrectal insensible en combinación con capecitabina, xeloda y/o irinotecán.

En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra con capecitabina e irinotecán a pacientes con cáncer colorrectal insensible o a pacientes con carcinoma colorrectal inoperable o metastásico.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1con interferón alfa o capecitabina a pacientes con carcinoma hepatocelular inoperable o metastásico; o con cisplatino y tiotepa, o con tosilato de sorafenib a pacientes con cáncer de hígado primario o metastásico.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con doxorubicina, paclitaxel, vinblastina, interferón alfa pegilado y/o interferón alfa-2b recombinante a pacientes con sarcoma de Kaposi.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con al menos uno de enasidenib, trióxido de arsénico, fludarabina, carboplatino, daunorubicina, ciclofosfamida, citarabina, doxorubicina, idarubicina, clorhidrato de mitoxantrona, tioguanina, vincristina, midostaurina y/o topotecán a pacientes con leucemia mieloide aguda, que incluye leucemia mieloide aguda insensible o recidivante o de alto riesgo.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con al menos uno de enasidenib, daunorubicina liposómica, topotecán y/o citarabina a pacientes con leucemia mieloblástica aguda de cariotipo no favorable.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 con un inhibidor de IDH2 a un paciente que tiene leucemia, en donde la leucemia se caracteriza por la presencia de un alelo mutante de IDH2. Los inhibidores de IDH2 a modo de ejemplo se desvelan en las patentes de EE. UU. N.° 9.732.062; 9.724.350; 9.738.625; y 9.579.324; y la publicación de EE. UU. N.° 2016-0159771 y US 2016-0158230 A1. En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 con enasidenib a un paciente que tiene leucemia, en donde la leucemia se caracteriza por la presencia de un alelo mutante de IDH2. En ciertas realizaciones, la combinación del compuesto 1 y un inhibidor de IDH2 aumenta las células diferenciadas (CD34-/CD38) y eritroblastos en un paciente que tiene leucemia mieloide aguda, en donde la leucemia mieloide aguda se caracteriza por la presencia de IDH2 R140Q. En ciertas realizaciones, la combinación del compuesto 1 y un inhibidor de IDH2 reduce las células progenitoras (CD34+/CD38+) y HSC en un paciente que tiene leucemia mieloide aguda, en donde la leucemia mieloide aguda se caracteriza por la presencia de IDH2 R140Q.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 con enasidenib a un paciente que tiene leucemia mieloide aguda, en donde la leucemia mieloide aguda se caracteriza por la presencia de un alelo mutante de IDH2. En una realización, el alelo mutante de IDH2 es IDH2 R140Q o R172K.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con enasidenib a un paciente que tiene leucemia, en donde la leucemia se caracteriza por la presencia de un alelo mutante de IDH2. En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con enasidenib a un paciente que tiene leucemia mieloide aguda, en donde la leucemia mieloide aguda se caracteriza por la presencia de un alelo mutante de IDH2. En una realización, el alelo mutante de IDH2 es IDH2 R140Q o R172K.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 con 6-(6-(trifluorometil)piridin-2-il)-N2-(2-(trifluorometil)piridin-4-il)-1,3,5-triazina-2,4-diamina (compuesto 2) a un paciente que tiene leucemia, en donde la leucemia se caracteriza por la presencia de un alelo mutante de IDH2. En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 con el compuesto 2 a un paciente que tiene leucemia mieloide aguda, en donde la leucemia mieloide aguda se caracteriza por la presencia de un alelo mutante de IDH2. En una realización, el alelo mutante de IDH2 es IDH2 R140Q o R172K.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con el compuesto 2 a un paciente que tiene leucemia, en donde la leucemia se caracteriza por la presencia de un alelo mutante de IDH2. En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con el compuesto 2 a un paciente que tiene leucemia mieloide aguda, en donde la leucemia mieloide aguda se caracteriza por la presencia de un alelo mutante de IDH2. En una realización, el alelo mutante de IDH2 es IDH2 R140Q o R172K.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con metotrexato, clorhidrato de mecloretamina, dimaleato de afatinib, pemetrexed, bevacizumab, carboplatino, cisplatino, ceritinib, crizotinib, ramucirumab, pembrolizumab, docetaxel, tartrato de vinorelbina, gemcitabina, ABRAXANE®, erlotinib, geftinib, irinotecán, everolimus, alectinib, brigatinib, nivolumab, osimertinib, atezolizumab, necitumumab y/o a pacientes con cáncer de pulmón de células no pequeñas.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con carboplatino e irinotecán a pacientes con cáncer de pulmón de células no pequeñas.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con doxetaxol a pacientes con cáncer de pulmón de células no pequeñas que han sido tratadas previamente con carbo/etopósido y radioterapia.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con carboplatino y/o taxotere, o en combinación con carboplatino, pacilitaxel y/o radioterapia torácica a pacientes con cáncer de pulmón de células no pequeñas.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con taxotere a pacientes con cáncer de pulmón de células no pequeñas de estadio IIIB o IV.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con oblimersen (Genasense®), metotrexato, clorhidrato de mecloretamina, etopósido, topotecán y/o doxorubicina a pacientes con cáncer de pulmón de células pequeñas.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con venetoclax, ABT-737 (Abbott Laboratories) y/o obatoclax (GX15-070) a pacientes con linfoma y otros cánceres de la sangre.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con un segundo principio activo tal como vinblastina o fludarabina adcetris, amboclorina, becenum, bleomicina, brentuximab vedotina, carmustinem clorambucilo, ciclofosfamida, dacarbazina, doxorubicina, lomustina, Matulane, clorhidrato de mecloretamina, prednisona, clorhidrato de procarbazina, vincristina, metotrexato, nelarabina, belinostat, HCl de bendamustina, tositumomab y yodo 131 asitumomab, denileucina diftitox, dexametasona, pralatrexato, prelixafor, obinutuzumab, ibritumomab, tiuxetán, ibritinib, idelasib, intrón A, romidepsina, lenalidomida, rituximab y/o vorinostat a pacientes con diversos tipos de linfoma, que incluyen, pero no se limitan a, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, linfoma cutáneo de linfocitos T, linfoma cutáneo de linfocitos B, linfoma difuso de linfocitos B grandes o linfoma folicular de escasa malignidad recidivante o insensible.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con taxotere, dabrafenib, imlygic, ipilimumab, pembrolizumab, nivolumab, trametinib, vemurafenib, talimogén laherparepvec, IL-2, IFN, GM-CSF y/o dacarbazina, aldesleucina, cobimetinib, Intron A®, peginterferón Alfa-2b y/o trametinib a pacientes con diversos tipos o estadios de melanoma.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con vinorelbina o pemetrexed disodio a pacientes con mesotelioma maligno, o cáncer de pulmón de células no pequeñas de estadio IIIB con implantes pleurales o síndrome de mesotelioma con derrame pleural maligno.

En un aspecto, los métodos de tratamiento de pacientes con diversos tipos o estadios de mieloma múltiple proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 con dexametasona, ácido zoledrónico, palmitronato, GM-CSF, biaxin, vinblastina, melfalán, busulfán, ciclofosfamida, IFN, prednisona, bisfosfonato, celecoxib, trióxido de arsénico, PEG INTRON-A, vincristina, becenum, bortezomib, carfilzomib, doxorubicina, panobinostat, lenalidomida, pomalidomida, talidomida, mozobil, carmustina, daratumumab, elotuzumab, citrato de ixazomib, plerixafor o una combinación de los mismos.

En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con diversos tipos o estadios de mieloma múltiple en combinación con linfocitos T de receptor quimérico para el antígeno (CAR). En ciertas realizaciones, el linfocito T de CAR en la combinación se dirige al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA), y en más realizaciones específicas, el linfocito T de CAR es bb2121 o bb21217. En algunas realizaciones, el linfocito T de CAR es JCARH125.

En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con mieloma múltiple recidivante o insensible en combinación con doxorubicina (Doxil®), vincristina y/o dexametasona (Decadron®).

En ciertas realizaciones, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 a pacientes con diversos tipos o estadios de cáncer de ovario, tales como carcinoma peritoneal, carcinoma seroso papilar, cáncer de ovario insensible o cáncer de ovario recurrente, en combinación con taxol, carboplatino, doxorubicina, gemcitabina, cisplatino, xeloda, paclitaxel, dexametasona, avastin, ciclofosfamida, topotecán, olaparib, tiotepa, melfalán, tosilato de niraparib monohidratado, rubraca o una combinación de los mismos.

En ciertas realizaciones, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 a pacientes con diversos tipos o estadios de cáncer de próstata, en combinación con xeloda, 5 FU/LV, gemcitabina, irinotecán más gemcitabina, ciclofosfamida, vincristina, dexametasona, GM-CSF, celecoxib, taxotere, ganciclovir, paclitaxel, adriamicina, docetaxel, estramustina, Emcyt, denderon, zytiga, bicalutamida, cabazitaxel, degarelix, enzalutamida, zoladex, acetato de leuprolida, clorhidrato de mitoxantrona, prednisona, sipuleucel-T, dicloruro de radio 223, o una combinación de los mismos.

En ciertas realizaciones, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 a pacientes con diversos tipos o estadios de cáncer de células renales, en combinación con capecitabina, iFn , tamoxifeno, IL-2, GM-CSF, Celebrex®, flutamida, acetato de goserelina, nilutamida o una combinación de los mismos.

En ciertas realizaciones, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 a pacientes con diversos tipos o estadios de cáncer ginecológico, de útero o sarcoma de tejido blando en combinación con IFN, dactinomicina, doxorubicina, mesilato de imatinib, pazopanib, clorhidrato, trabectedina, mesilato de eribulina, olaratumab, un inhibidor de COX-2, tal como celecoxib, y/o sulindaco.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 a pacientes con diversos tipos o estadios de tumores sólidos en combinación con celecoxib, etopósido, ciclofosfamida, docetaxel, apecitabina, iFn , tamoxifeno, IL-2, GM-CSF, o una combinación de los mismos.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 a pacientes con esclerodermia o vasculitis cutánea en combinación con celebrex, etopósido, ciclofosfamida, docetaxel, apecitabina, IFN, tamoxifeno, IL-2, GM-CSF, o una combinación de los mismos.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 a pacientes con s Md en combinación con azacitidina, citarabina, daunorubicina, decitabina, idarubicina, lenalidomida, enasidenib, o una combinación de los mismos.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 a pacientes con cáncer hematológico en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK. En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar una formulación del compuesto 1 a pacientes con un cáncer hematológico en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 a pacientes con leucemia en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con leucemia en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 a pacientes con LMA en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con LMA en combinación con uno o más segundos agentes seleccionados de inhibidores de JAK, inhibidores de FLT3, inhibidores de mTOR, inhibidores del espliceosoma, inhibidores de BET, inhibidores de SMG1, inhibidores de ERK, inhibidores de LSD1, miméticos de BH3, inhibidores de la topoisomerasa e inhibidores de RTK.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 a pacientes con leucemia en combinación con un inhibidor de mTOR. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con leucemia en combinación con un inhibidor de mTOR. En ciertas realizaciones, el inhibidor de mTOR se selecciona de everolimus, MLN-0128 y AZD8055. En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR es un inhibidor de cinasas de mTOR. En ciertas realizaciones, el inhibidor de cinasas de mTOR se selecciona de 7-(6-(2-hidroxipropan-2-il)piridin-3-il)-1-((trans)-4-metoxiciclohexil)-3,4-dihidropirazino[2,3-b]pirazin-2(1H)-ona (CC-223) y 1-etil-7-(2-metil-6-(1H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-3-il)-3,4-dihidropirazino[2,3-b]pirazin-2(1H)-ona (CC-115). En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con 7-(6-(2-hidroxipropan-2-il)piridin-3-il)-1-((trans)-4-metoxiciclohexil)-3,4-dihidropirazino[2,3-b]pirazin-2(1H)-ona (CC-223). En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con 1-etil-7-(2-metil-6-(1H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-3-il)-3,4-dihidropirazino[2,3-b]pirazin-2(1H)-ona (CC-115). En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con everolimus. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con MLN-0128. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con AZD8055.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 a pacientes con LMA en combinación con un inhibidor de mTOR. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con LMA en combinación con un inhibidor de mTOR. En ciertas realizaciones, el inhibidor de mTOR se selecciona de everolimus, MLN-0128 y AZD8055. En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR es un inhibidor de cinasas de mTOR. En ciertas realizaciones, el inhibidor de cinasas de mTOR se selecciona de 7-(6-(2-hidroxipropan-2-il)piridin-3-il)-1-((trans)-4-metoxiciclohexil)-3,4-dihidropirazino[2,3-b]pirazin-2(1H)-ona (CC-223) y 1-etil-7-(2-metil-6-(1H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-3-il)-3,4-dihidropirazino[2,3-b]pirazin-2(1H)-ona (CC-115). En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con 1-etil-7-(2-metil-6-(1H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-3-il)-3,4-dihidropirazino[2,3-b]pirazin-2(1H)-ona. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con everolimus. En ciertas realizaciones, everolimus se administra a pacientes con LMA antes de la administración del compuesto 1. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con MLN-0128. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con AZD8055.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 a pacientes con NMP en combinación con un inhibidor de JAK. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con NMP en combinación con un inhibidor de jA k . En un aspecto, el inhibidor de JAK se selecciona de un inhibidor de JAK1, un inhibidor de JAK2 y un inhibidor de JAK3. En ciertas realizaciones, el inhibidor de JAK se selecciona de tofacitinib, momelotinib, filgotinib, decernotinib, barcitinib, ruxolitinib, fedratinib, NS-018 y pacritinib. En ciertas realizaciones, el inhibidor de JAK se selecciona de tofacitinib, momelotinib, ruxolitinib, fedratinib, NS-018 y pacritinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con NMP en combinación con tofacitinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con NMP en combinación con momelotinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con NMP en combinación con filgotinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con NMP en combinación con decernotinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con NMP en combinación con barcitinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con NMP en combinación con ruxolitinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con NMP en combinación con fedratinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con NMP en combinación con NS-018. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con NMP en combinación con pacritinib. En ciertas realizaciones, la NMP es independiente de IL-3. En ciertas realizaciones, la NMP se caracteriza por una mutación de JAK 2, por ejemplo, una mutación JAK2V617F.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 a pacientes con mielofibrosis en combinación con un inhibidor de JAK. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con mielofibrosis en combinación con un inhibidor de JAK. En un aspecto, el inhibidor de JAK se selecciona de un inhibidor de JAK1, un inhibidor de JAK2 y un inhibidor de JAK3. En ciertas realizaciones, el inhibidor de JAK se selecciona de tofacitinib, momelotinib, ruxolitinib, fedratinib, NS-018 y pacritinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con mielofibrosis en combinación con tofacitinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con mielofibrosis en combinación con momelotinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con mielofibrosis en combinación con ruxolitinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con mielofibrosis en combinación con fedratinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con mielofibrosis en combinación con NS-018. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con mielofibrosis en combinación con pacritinib. En ciertas realizaciones, la mielofibrosis se caracteriza por una mutación de JAK 2, por ejemplo, una mutación JAK2V617F. En algunas realizaciones, la mielofibrosis es mielofibrosis primaria. En otras realizaciones, la mielofibrosis es mielofibrosis secundaria. En algunas de dichas realizaciones, la mielofibrosis secundaria es mielofibrosis pos-policitemia vera. En otras realizaciones, la mielofibrosis secundaria es mielofibrosis pos-trombocitemia esencial.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 a pacientes con leucemia en combinación con un inhibidor de JAK. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con leucemia en combinación con un inhibidor de jA k . En un aspecto, el inhibidor de JAK se selecciona de un inhibidor de JAK1, un inhibidor de JAK2 y un inhibidor de JAK3. En ciertas realizaciones, el inhibidor de JAK se selecciona de tofacitinib, momelotinib, filgotinib, decernotinib, barcitinib, ruxolitinib, fedratinib, NS-018 y pacritinib. En ciertas realizaciones, el inhibidor de JAK se selecciona de momelotinib, ruxolitinib, fedratinib, NS-018 y pacritinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con tofacitinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con momelotinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con filgotinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con decernotinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con barcitinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con ruxolitinib.

n ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con fedratinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con NS-018. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con pacritinib. En ciertas realizaciones, la NMP se caracteriza por una mutación JAK 2, por ejemplo, una mutación JAK2V617F.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 a pacientes con LMA en combinación con un inhibidor de JAK. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con LMA en combinación con un inhibidor de JAK. En un aspecto el inhibidor de JAK se selecciona de un inhibidor de JAK1, un inhibidor de JAK2 y un inhibidor de JAK3. En ciertas realizaciones, el inhibidor de JAK se selecciona de tofacitinib, momelotinib, filgotinib, decernotinib, barcitinib, ruxolitinib, fedratinib, NS-018 y pacritinib. En ciertas realizaciones, el inhibidor de JAK se selecciona de momelotinib, ruxolitinib, fedratinib, NS-018 y pacritinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con tofacitinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con momelotinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con

filgotinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con decernotinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con

barcitinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con

ruxolitinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con fedratinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con NS-018. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con pacritinib. En ciertas realizaciones, la NMP se caracteriza por una mutación de JAK 2, por ejemplo, una mutación JAK2V617F.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 a pacientes con leucemia en combinación con un inhibidor de cinasas de FLT3. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con leucemia en combinación con un inhibidor de cinasas de FLT3. En ciertas realizaciones, el inhibidor de cinasas de FLT3 se selecciona de quizartinib, sunitinib, sunitinib malato, midostaurina, pexidartinib, lestaurtinib, tandutinib y crenolanib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con quizartinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con sunitinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con midostaurina. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con pexidartinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con lestaurtinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con tandutinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con crenolanib. En ciertas realizaciones, el paciente porta una mutación FLT3-ITD.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 a pacientes con LMA en combinación con un inhibidor de cinasas de FLT3. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con LMA en combinación con un inhibidor de cinasas de FLT3. En ciertas realizaciones, el inhibidor de cinasas de FLT3 se selecciona de quizartinib, sunitinib, sunitinib malato, midostaurina, pexidartinib, lestaurtinib, tandutinib, quizartinib y crenolanib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con quizartinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con sunitinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con midostaurina. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con pexidartinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con lestaurtinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con tandutinib. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con crenolanib. En ciertas realizaciones, el paciente porta una mutación FLT3-ITD.

En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con un inhibidor del espliceosoma. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con un inhibidor del espliceosoma. En ciertas realizaciones, el inhibidor del espliceosoma es pladienolida B, 6-desoxipladienolida D o H3B-8800.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 a pacientes con leucemia en combinación con un inhibidor de cinasas de SMG1. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con leucemia en combinación con un inhibidor de cinasas de SMG1. En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 a pacientes con LMA en combinación con un inhibidor de cinasas de SMG1. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con LMA en combinación con un inhibidor de cinasas de SMG1. En ciertas realizaciones, el inhibidor de SMG1 es 1-etil-7-(2-metil-6-(1H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-3-il)-3,4-dihidropirazino[2,3-b]pirazin-2(1H)-ona, cloro-N,N-dietil-5-((4-(2-(4-(3-metilureido)fenil)piridin-4-il)pirimidin-2-il)amino)bencenosulfonamida (compuesto Ii), o un compuesto desvelado en A. Gopalsamy et al, Bioorg. Med Chem Lett. 2012, 22:6636-66412 (por ejemplo, cloro-N,N-dietil-5-((4-(2-(4-(3-metilureido)fenil)piridin-4-il)pirimidin-2-il)amino)bencenosulfonamida.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 a pacientes con leucemia en combinación con un inhibidor de BCL2. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con leucemia en combinación con un inhibidor de BCL2. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con un inhibidor de BCL2. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con LMA en combinación con un inhibidor de BCL2, por ejemplo, venetoclax o navitoclax. En ciertas realizaciones, el inhibidor de BCL2 es venetoclax.

En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de LMA que es resistente al tratamiento con un inhibidor de BCL2, que comprende administrar el compuesto 1. En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de LMA que tiene resistencia adquirida al tratamiento con venetoclax, que comprende administrar el compuesto 1. En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de LMA que tiene resistencia adquirida al tratamiento con venetoclax, que comprende administrar una combinación del compuesto 1 y un inhibidor de BCL2. En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de LMA que tiene resistencia adquirida al tratamiento con venetoclax, que comprende administrar una combinación del compuesto 1 y venetoclax.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 a pacientes con leucemia en combinación con un inhibidor de la topoisomerasa. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con leucemia en combinación con un inhibidor de la topoisomerasa. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con un inhibidor de la topoisomerasa. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con LMA en combinación con un inhibidor de la topoisomerasa, por ejemplo, irinotecán, topotecán, camptotecina, lamelarina D, etopósido, tenipósido, doxorubicina, daunorubicina, mitoxantrona, amsacrina, elipticinas, ácido aurintricarboxílico o HU-331. En ciertas realizaciones, el inhibidor de la topoisomerasa es topotecán.

En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con un inhibidor de BET. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con un inhibidor de BET. En ciertas realizaciones, el inhibidor de BET se selecciona de GSK525762A, OTX015, BMS-986158, TEN-010, CPI-0610 , INCB54329, BAY1238097, FT-1101, C90010, ABBV-075, BI 894999, GS-5829, GSK1210151A (I-BET-151), CPI-203, RVX 208, XD46, MS436, PFI-1, RVX2135, ZEN3365, XD14, ARV-771, MZ-1, PLX5117, 4-[2-(ciclopropilmetoxi)-5-(metanosulonil)fenil]-2-metilisoquinolin-1(2H)-ona (Compuesto A), documentos de patente EP11313yEP11336.

En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con leucemia en combinación con un inhibidor de LSD1. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con LMA en combinación con un inhibidor de LSD1. En ciertas realizaciones, el inhibidor de LSD1 se selecciona de ORY-1001, ORY-2001, INCB-59872, IMG-7289, TAK 418, GSK-2879552 y 4-[2-(4-amino-piperidin-1-il)-5-(3-fluoro-4-metoxi-fenil)-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-4-il]-2-fluoro-benzonitrilo o una sal del mismo (por ejemplo, sal de besilato, compuesto B).

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 a pacientes con leucemia en combinación con triptolida, retaspimicina, alvespimicina, 7-(6-(2-hidroxipropan-2-il)piridin-3-il)-1-((trans)-4-metoxiciclohexil)-3,4-dihidropirazino[2,3-b]pirazin-2(1H)-ona (CC-223), 1 -etil-7-(2-metil-6-(1 H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-3-il)-3,4-dihidropirazino[2,3-b]pirazin-2(1 H)-ona (Cc -115), rapamicina, MLN-0128, everolimus, AZD8055, pladienolida B, topotecán, tioguanina, mitoxantrona, etopósido, decitabina, daunorubicina, clofarabina, cladribina, 6-mercaptopurina, cloro-N,N-dietil-5-((4-(2-(4-(3-metilureido)fenil)piridin-4-il)pirimidin-2-il)amino)bencenosulfonamida (compuesto Ii), fedratinib, sunitinib, pexidartinib, midostaurina, lestaurtinib, momelotinib, quizartinib y crenolanib.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 a pacientes con LMA en combinación con triptolida, retaspimicina, alvespimicina, 7-(6-(2-hidroxipropan-2-il)piridin-3-il)-1-((trans)-4-metoxiciclohexil)-3,4-dihidropirazino[2,3-b]pirazin-2(1H)-ona (CC-223), 1 -etil-7-(2-metil-6-(1 H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-3-il)-3,4-dihidropirazino[2,3-b]pirazin-2(1H)-ona (CC-115), rapamicina, MLN-0128, everolimus, AZD8055, pladienolida B, topotecán, tioguanina, mitoxantrona, etopósido, decitabina, daunorubicina, clofarabina, cladribina, 6-mercaptopurina, cloro-N,N-dietil-5-((4-(2-(4-(3-metilureido)fenil)piridin-4-il)pirimidin-2-il)amino)bencenosulfonamida (compuesto Ii), fedratinib, sunitinib, pexidartinib, midostaurina, lestaurtinib, momelotinib, quizartinib y crenolanib.

En un aspecto, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden administrar el compuesto 1 a pacientes con cáncer en combinación con un inhibidor de mTOR, en donde el cáncer se selecciona de cáncer de mama, cáncer de riñón, cáncer pancreático, cáncer gastrointestinal, cáncer de pulmón, tumor neuroendocrino (TNE) y carcinoma de células renales (CCR). En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con cáncer en combinación con un inhibidor de la topoisomerasa. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con cáncer en combinación con un inhibidor de mTOR, en donde el cáncer se selecciona de cáncer de mama, cáncer de riñón, cáncer pancreático, cáncer gastrointestinal, cáncer de pulmón, tumor neuroendocrino (TNE) y carcinoma de células renales. En ciertas realizaciones, el inhibidor de mTOR se selecciona de everolimus, MLN-0128 y AZD8055. En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR es un inhibidor de cinasas de mTOR. En ciertas realizaciones, el inhibidor de cinasas de mTOR se selecciona de 7-(6-(2-hidroxipropan-2-il)piridin-3-il)-1-((trans)-4-metoxiciclohexil)-3,4-dihidropirazino[2,3-b]pirazin-2(1H)-ona (CC-223) y 1-etil-7-(2-metil-6-(1H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-3-il)-3,4-dihidropirazino[2,3-b]pirazin-2(1H)-ona (CC-115). En una realización, el inhibidor de cinasas de mTOR es 7-(6-(2-hidroxipropan-2-il)piridin-3-il)-1-((trans)-4-metoxiciclohexil)-3,4-dihidropirazino[2,3-b]pirazin-2(1H)-ona (CC-223). En una realización, el inhibidor de cinasas de mTOR es 1-etil-7-(2-metil-6-(1H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-3-il)-3,4-dihidropirazino[2,3-b]pirazin-2(1H)-ona (CC-115). En una realización, el inhibidor de mTOR es everolimus. En una realización, el inhibidor de mTOR es temsirolimus. En una realización, el inhibidor de mTOR es MLN-0128. En una realización, el inhibidor de mTOR es AZD8055.

En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con cáncer de mama en combinación con everolimus. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con cáncer de mama en combinación con everolimus.

En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con cáncer de riñón en combinación con everolimus. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con cáncer de riñón en combinación con everolimus.

En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con cáncer pancreático en combinación con everolimus. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con cáncer pancreático en combinación con everolimus.

En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con cáncer gastrointestinal en combinación con everolimus. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con cáncer gastrointestinal en combinación con everolimus.

En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con cáncer de pulmón en combinación con everolimus. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con cáncer de pulmón en combinación con everolimus.

En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con tumor neuroendocrino en combinación con everolimus. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con tumor neuroendocrino en combinación con everolimus.

En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra a pacientes con carcinoma de células renales en combinación con everolimus. En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a pacientes con carcinoma de células renales en combinación con everolimus.

También está englobado en el presente documento un método de aumento de la dosis de un fármaco o agente antineoplásico que puede ser administrado de forma segura y eficaz a un paciente, que comprende administrar al paciente (por ejemplo, un humano) el compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en combinación con el segundo fármaco antineoplásico. Los pacientes que pueden beneficiarse por este método son probablemente los que padecen un efecto adverso asociado a fármacos antineoplásicos para tratar un cáncer específico de la piel, tejido subcutáneo, ganglios linfáticos, cerebro, pulmón, hígado, hueso, intestino, colon, corazón, páncreas, suprarrenal, riñón, próstata, mama, colorrectal, o combinaciones de los mismos. La administración del compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, alivia o reduce los efectos adversos que son de tal intensidad que limitarían de otro modo la cantidad de fármaco antineoplásico.

También está englobado en el presente documento un método de disminución de la dosis de un fármaco o agente antineoplásico que puede ser administrado de forma segura y eficaz a un paciente, que comprende administrar al paciente (por ejemplo, un humano) el compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en combinación con el segundo fármaco antineoplásico. Los pacientes que pueden beneficiarse por este método son probablemente los que padecen un efecto adverso asociado a fármacos antineoplásicos para tratar un cáncer específico de la piel, tejido subcutáneo, ganglios linfáticos, cerebro, pulmón, hígado, hueso, intestino, colon, corazón, páncreas, suprerrenal, riñón, próstata, mama, colorrectal, o combinaciones de los mismos. La administración del compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, potencia la actividad del fármaco antineoplásico, que permite una reducción en la dosis del fármaco antineoplásico a la vez que se mantiene la eficacia, que a su vez puede aliviar o reducir los efectos adversos que son de tal intensidad que limitarían de otro modo la cantidad de fármaco antineoplásico.

En una realización, el compuesto 1 se administra diariamente en una cantidad que varía desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 20 mg, desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 15 mg, desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg, o desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 15 mg antes, durante, o después de la aparición del efecto adverso asociado a la administración de un fármaco antineoplásico a un paciente. En ciertas realizaciones, el compuesto 1 se administra en combinación con agentes específicos, tales como heparina, aspirina, coumadina o G-CSF para evitar efectos adversos que están asociados con fármacos antineoplásicos, tales como, pero no se limitan a, neutropenia o trombocitopenia.

En una realización, el compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, se administra a pacientes con enfermedades y trastornos asociados a o caracterizados por angiogénesis no deseada en combinación con principios activos adicionales, que incluyen, pero no se limitan a, fármacos antineoplásicos, antiinflamatorios, antihistamínicos, antibióticos y esteroides.

En otra realización, en el presente documento se engloba un método de tratamiento, prevención y/o abordaje del cáncer, que comprende administrar el compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, junto con (por ejemplo antes, durante o después) al menos una terapia antineoplásica que incluye, pero no se limitan a, cirugía, inmunoterapia, terapia biológica, radioterapia, u otra terapia no basada en fármaco usada actualmente para tratar, prevenir y/o abordar el cáncer. El uso combinado del compuesto proporcionado en el presente documento y otra terapia antineoplásica puede proporcionar una pauta de tratamiento única que es inesperadamente eficaz en ciertos pacientes. Sin estar limitado por teoría, se cree que el compuesto 1 puede proporcionar efectos aditivos o sinérgicos cuando se administra simultáneamente con al menos una terapia antineoplásica.

Como se trata en cualquier parte en el presente documento, en el presente documento se engloba un método de reducción, tratamiento y/o prevención de efectos adversos o no deseados asociados a otra terapia antineoplásica que incluye, pero no se limitan a, cirugía, quimioterapia, radioterapia, terapia hormonal, terapia biológica e inmunoterapia. El compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, y otro principio activo se pueden administrar a un paciente antes, durante o después de la aparición del efecto adverso asociado a otra terapia antineoplásica.

En ciertas realizaciones, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden la administración de uno o más de aporte suplementario de calcio, calcitriol o vitamina D con el compuesto 1. En ciertas realizaciones, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden la administración de aporte suplementario de calcio, calcitriol y vitamina D antes del tratamiento con el compuesto 1. En ciertas realizaciones, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden la administración de aporte suplementario de calcio, calcitriol y vitamina D antes de la administración de la primera dosis del compuesto 1 en cada ciclo. En ciertas realizaciones, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden la administración de aporte suplementario de calcio, calcitriol y vitamina D al menos hasta 3 días antes del tratamiento con el compuesto 1. En ciertas realizaciones, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden la administración de aporte suplementario de calcio, calcitriol y vitamina D antes de la administración de la primera dosis del compuesto 1 en cada ciclo. En ciertas realizaciones, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden la administración de aporte suplementario de calcio, calcitriol y vitamina D al menos hasta 3 días antes de la administración de la primera dosis del compuesto 1 en cada ciclo. En ciertas realizaciones, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden la administración de aporte suplementario de calcio, calcitriol y vitamina D antes de la administración de la primera dosis del compuesto 1 en cada ciclo y continúa después de la administración de la última dosis del compuesto 1 en cada ciclo. En ciertas realizaciones, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden la administración de aporte suplementario de calcio, calcitriol y vitamina D al menos hasta 3 días antes de la administración de la primera dosis del compuesto 1 en cada ciclo y continúa hasta al menos hasta 3 días después de administración de la última dosis del compuesto 1 en cada ciclo (por ejemplo, al menos hasta el día 8 cuando el compuesto 1 se administra en los días 1-5). En una realización, los métodos proporcionados en el presente documento comprenden la administración de aporte suplementario de calcio, calcitriol y vitamina D al menos hasta 3 días antes de la administración del día 1 de cada ciclo y continúan hasta > 3 días después de la última dosis del compuesto 1 en cada ciclo (por ejemplo, > día 8 cuando el compuesto 1 se administra en los días 1-5, > día 13 cuando el compuesto 1 se administra en los días 1-3 y días 8-10).

En ciertas realizaciones, el aporte suplementario de calcio se administra para administrar al menos 1200 mg de calcio elemental por día administrado en dosis divididas. En ciertas realizaciones, el aporte suplementario de calcio se administra como carbonato cálcico en una dosis de 500 mg administrado tres veces al día por vía oral (PO).

En ciertas realizaciones, el aporte suplementario de calcitriol se administra para administrar 0,25 pg de calcitriol (PO) una vez al día.

En ciertas realizaciones, el aporte suplementario de vitamina D se administra para administrar aproximadamente 500 UI a aproximadamente 50.000 UI de vitamina D una vez al día. En ciertas realizaciones, el aporte suplementario de vitamina D se administra para administrar aproximadamente 1000 UI de vitamina D una vez al día. En ciertas realizaciones, el aporte suplementario de vitamina D se administra para administrar aproximadamente 50.000 UI de vitamina D semanalmente. En ciertas realizaciones, el aporte suplementario de vitamina D se administra para administrar aproximadamente 1000 UI de vitamina D2 o D3 una vez al día. En ciertas realizaciones, el aporte suplementario de vitamina D se administra para administrar aproximadamente 500 UI de vitamina D una vez al día. En ciertas realizaciones, el aporte suplementario de vitamina D se administra para administrar aproximadamente 50.000 UI de vitamina D semanalmente. En ciertas realizaciones, el aporte suplementario de vitamina D se administra para administrar aproximadamente 20.000 UI de vitamina D semanalmente. En ciertas realizaciones, el aporte suplementario de vitamina D se administra para administrar aproximadamente 1000 UI de vitamina D2 o D3 una vez al día. En ciertas realizaciones, el aporte suplementario de vitamina D se administra para administrar aproximadamente 50.000 UI de vitamina D2 o D3 semanalmente. En ciertas realizaciones, el aporte suplementario de vitamina D se administra para administrar aproximadamente 20.000 UI de vitamina D2 o D3 semanalmente.

En ciertas realizaciones, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento y doxetaxol se administra a pacientes con cáncer de pulmón de células no pequeñas que fueron tratados previamente con carbo/VP 16 y radioterapia.

Uso con terapia de trasplante

El compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, se puede usar para reducir el riesgo de enfermedad injerto contra huésped (GVHD). Por lo tanto, en el presente documento se engloba un método de tratamiento, prevención y/o abordaje del cáncer, que comprende administrar el compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, junto con terapia de trasplante.

Como conocen los expertos habituales en la técnica, el tratamiento del cáncer se basa frecuentemente en los estadios y el mecanismo de la enfermedad. Por ejemplo, como en ciertos estadios del cáncer se desarrolla una inevitable transformación leucémica, puede ser necesario el trasplante de células madre de sangre periférica, preparado de células madre hematopoyéticas o médula ósea. El uso combinado del compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, y terapia de trasplante proporciona una sinergia única e inesperada. En particular, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento presenta actividad inmunomoduladora que puede proporcionar efectos aditivos o sinérgicos cuando se administran simultáneamente con terapia de trasplante en pacientes con cáncer.

El compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, puede funcionar en combinación con la terapia de trasplante reduciendo las complicaciones asociadas al procedimiento invasivo de trasplante y riesgo de GVHD. En el presente documento se engloba un método de tratamiento, prevención y/o abordaje del cáncer que comprende administrar a un paciente (por ejemplo, un humano) una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento antes, durante o después del trasplante de sangre del cordón umbilical, sangre placentaria, célula madre de sangre periférica, preparado de células madre hematopoyéticas, o médula ósea. Algunos ejemplos de células madre adecuadas para su uso en los métodos proporcionados en el presente documento se desvelan en la patente de EE. UU. N.° 7.498.171.

En una realización, el compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, se administra a pacientes con leucemia mieloide aguda antes, durante o después del trasplante.

En una realización, el compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, se administra a pacientes con mieloma múltiple antes, durante o después del trasplante de células progenitoras autólogas de sangre periférica.

En una realización, el compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, se administra a pacientes con NHL (por ejemplo, DLBCL) antes, durante o después del trasplante de células progenitoras autólogas de sangre periférica.

Terapia cíclica

En ciertas realizaciones, el compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, se administra de forma cíclica a un paciente independiente del cáncer tratado. La terapia cíclica implica la administración de un agente activo durante un periodo de tiempo, seguido por un descanso durante un periodo de tiempo, y repetición de esta administración secuencial. La terapia cíclica puede reducir el desarrollo de resistencia a una o más de las terapias, evitar o reducir los efectos secundarios de una de las terapias, y/o mejorar la eficacia del tratamiento.

En ciertas realizaciones, el compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, se administra diariamente en una dosis única o dividida en un ciclo de cuatro a seis semanas con un periodo de descanso de aproximadamente una semana o dos semanas. En ciertas realizaciones, el compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, se administra diariamente en una dosis única o dividida durante uno a diez días consecutivos de un ciclo de 28 días, luego un periodo de descanso sin administración para descansar del ciclo de 28 días. El método cíclico permite además aumentar la frecuencia, el número y la duración de los ciclos de administración. Por lo tanto, en el presente documento en ciertas realizaciones se engloba la administración del compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, durante más ciclos que son típicos cuando se administra solo. En ciertas realizaciones, el compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, se administra durante un mayor número de ciclos de los que normalmente provocarían la toxicidad limitante de la dosis en un paciente al que no se administra también un segundo principio activo.

En una realización, el compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, se administra diariamente y continuamente durante tres o cuatro semanas para administrar una dosis del compuesto 1 desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 20 mg/d seguido por un descanso de una o dos semanas.

En otra realización, el compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, se administra por vía intravenosa y un segundo principio activo se administra por vía oral, ocurriendo la administración del compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, 30 a 60 minutos antes de un segundo principio activo, durante un ciclo de cuatro a seis semanas. En ciertas realizaciones, la combinación del compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, y un segundo principio activo se administra por infusión intravenosa durante aproximadamente 90 minutos cada ciclo. En ciertas realizaciones, un ciclo comprende la administración desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 150 mg/día del compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, y desde aproximadamente 50 hasta aproximadamente 200 mg/m2/día de un segundo principio activo diariamente durante tres a cuatro semanas y luego una o dos semanas de descanso. En ciertas realizaciones, el número de ciclos durante el que se administra el tratamiento combinatorio a un paciente varía desde aproximadamente uno a aproximadamente 24 ciclos, desde aproximadamente dos a aproximadamente 16 ciclos, o desde aproximadamente cuatro a aproximadamente tres ciclos.

En una realización, una terapia cíclica proporcionada en el presente documento comprende administrar el compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, en un ciclo de tratamiento que incluye un periodo de administración de hasta 5 días seguido por un periodo de descanso. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de 5 días seguido por un periodo de descanso. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 10 días seguido por un periodo de descanso. En una realización, el periodo de descanso es desde aproximadamente 10 días hasta aproximadamente 40 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 10 días seguido por un periodo de descanso desde aproximadamente 10 días hasta aproximadamente 40 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 10 días seguido por un periodo de descanso desde aproximadamente 23 días hasta aproximadamente el 37 días. En una realización, el periodo de descanso es desde aproximadamente 23 días hasta aproximadamente el 37 días. En una realización, el periodo de descanso es 23 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 10 días seguido por un periodo de descanso de 23 días. En una realización, el periodo de descanso es 37 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 10 días seguido por un periodo de descanso de 37 días.

En una realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración del compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, en los días 1 a 5 de un ciclo de 28 días. En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración del compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, en los días 1 - 10 de un ciclo de 28 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración en los días 1 a 5 de un ciclo de 42 días . En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración en los días 1 - 10 de un ciclo de 42 días . En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración en los días 1 - 5 y 15 - 19 de un ciclo de 28 días. En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración en los días 1 - 3 y 8 - 10 de un ciclo de 28 días.

En una realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración del compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, en los días 1 a 21 de un ciclo de 28 días. En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración en los días 1 a 5 de un ciclo de 7 días. En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración en los días 1 a 7 de un ciclo de 7 días.

Cualquier ciclo de tratamiento descrito en el presente documento se puede repetir durante al menos 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 o más ciclos. En ciertos casos, el ciclo de tratamiento como se describe en el presente documento incluye desde 1 hasta aproximadamente 24 ciclos, desde aproximadamente 2 hasta aproximadamente 16 ciclos, o desde aproximadamente 2 hasta aproximadamente 4 ciclos. En ciertos casos, un ciclo de tratamiento como se describe en el presente documento incluye desde 1 hasta aproximadamente 4 ciclos. En ciertas realizaciones, el ciclo 1 a 4 son todos ciclos de 28 días. En ciertas realizaciones, el ciclo 1 es un ciclo de 42 días y los ciclos 2 a 4 son ciclos de 28 días. En algunas realizaciones, el compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, se administra durante 1 a 13 ciclos de 28 días (por ejemplo aproximadamente 1 año). En ciertos casos, la terapia cíclica no se limita al número de ciclos, y la terapia continúa hasta la progresión de la enfermedad. Los ciclos pueden, en ciertos casos, incluir variar la duración de los periodos de administración y/o periodos de descanso descritos en el presente documento.

En una realización, el ciclo de tratamiento incluye administrar el compuesto 1 en una cantidad de dosis de aproximadamente 0,3 mg/día, 0,6 mg/día, 1,2 mg/día, 1,8 mg/día, 2,4 mg/día, 3,6 mg/día, 5,4 mg/día, 7,2 mg/día, 8,1 mg/día, 9,0 mg/día, 10,0 mg/día, 10,8 mg/día, o 12,2 mg/día administrada una vez por día. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye administrar el compuesto 1 en una cantidad de dosis de aproximadamente 0,3 mg/día, 0,6 mg/día, 1,2 mg/día, 1,8 mg/día, 2,4 mg/día, 3,6 mg/día, 5,4 mg/día, 7,2 mg/día, 8,1 mg/día, 9,0 mg/día, 10,0 mg/día, 10,8 mg/día, 12,2 mg/día o 20 mg/día administrada una vez por día. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye administrar el compuesto 1 en una cantidad de dosis de aproximadamente 0,6 mg/día, 1,2 mg/día, 1,8 mg/día, 2,4 mg/día o 3,6 mg/día, administrada una vez por día. En algunas de dichas realizaciones, el ciclo de tratamiento incluye administrar el compuesto 1 en una cantidad de dosis de aproximadamente 0,6 mg, 1,2 mg, 1,8 mg, 2,4 mg o 3,6 mg en los días 1 a 3 de un ciclo de 28 días. En otras realizaciones, el ciclo de tratamiento incluye administrar el compuesto 1 en una cantidad de dosis de aproximadamente 0,6 mg, 1,2 mg, 1,8 mg, 2,4 mg o 3,6 mg en los días 1 a 5 y 15 a 19 de un ciclo de 28 días. En otras realizaciones, el ciclo de tratamiento incluye administrar el compuesto 1 en una cantidad de dosis de aproximadamente 0,6 mg, 1,2 mg, 1,8 mg, 2,4 mg, 3,6 mg, 5,4 mg/día, 7,2 mg/día, 8,1 mg/día, 9,0 mg/día o 10,0 mg/día, en los días 1 a 5 y 15 a 19 de un ciclo de 28 días.

El compuesto 1, por ejemplo, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento, se puede administrar en la misma cantidad durante todos los periodos de administración en un ciclo de tratamiento. Alternativamente, en una realización, el compuesto se administra en diferentes dosis en los periodos de administración.

En una realización, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a un sujeto en un ciclo, en donde el ciclo comprende administrar la formulación durante al menos 5 días en un ciclo de 28 días. En una realización, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a un sujeto en un ciclo, en donde el ciclo comprende administrar la formulación en los días 1 a 5 de un ciclo de 28 días. En una realización, la formulación se administra para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 20 mg en los días 1 a 5 de un ciclo de 28 días. En una realización, la formulación se administra para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 5 mg en los días 1 a 5 de un ciclo de 28 días. En una realización, la formulación se administra para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 10 mg en los días 1 a 5 de un ciclo de 28 días. En una realización, una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento se administra a un sujeto en un ciclo, en donde el ciclo comprende administrar la formulación en los días 1 a 5 y 15 a 19 de un ciclo de 28 días. En una realización, la formulación se administra para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 20 mg en los días 1 a 5 y 15 a 19 de un ciclo de 28 días. En una realización, la formulación se administra para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 5 mg en los días 1 a 5 y 15 a 19 de un ciclo de 28 días. En una realización, la formulación se administra para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 10 mg en los días 1 a 5 y 15 a 19 de un ciclo de 28 días.

En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de LMA administrando a un sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en un ciclo, en donde el ciclo comprende administrar la formulación para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 20 mg durante al menos 5 días en un ciclo de 28 días. En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de LMA administrando a un sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en un ciclo, en donde el ciclo comprende administrar la formulación para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 20 mg en los días 1 a 5 de un ciclo de 28 días. En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de LMA administrando a un sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en un ciclo, en donde el ciclo comprende administrar la formulación para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 5 mg en los días 1 a 5 de un ciclo de 28 días. En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de LMA administrando a un sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en un ciclo, en donde el ciclo comprende administrar la formulación para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 5 mg en los días 1 a 5 de un ciclo de 28 días. En otra realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de LMA administrando a un sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en un ciclo, en donde el ciclo comprende administrar la formulación para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 20 mg en los días 1 a 5 y 15 a 19 de un ciclo de 28 días. En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de LMA administrando a un sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en un ciclo, en donde el ciclo comprende administrar la formulación para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 5 mg en los días 1 a 5 y 15 a 19 de un ciclo de 28 días. En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de LMA administrando a un sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en un ciclo, en donde el ciclo comprende administrar la formulación para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 5 mg en los días 1 a 5 y 15 a 19 de un ciclo de 28 días.

En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de SMD administrando a un sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en un ciclo, en donde el ciclo comprende administrar la formulación para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 20 mg durante al menos 5 días en un ciclo de 28 días. En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de SMD administrando a un sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en un ciclo, en donde el ciclo comprende administrar la formulación para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 20 mg en los días 1 a 5 de un ciclo de 28 días. En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de SMD administrando a un sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en un ciclo, en donde el ciclo comprende administrar la formulación para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 5 mg en los días 1 a 5 de un ciclo de 28 días. En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de SMD administrando a un sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en un ciclo, en donde el ciclo comprende administrar la formulación para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 5 mg en los días 1 a 5 de un ciclo de 28 días. En otra realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de SMD administrando a un sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en un ciclo, en donde el ciclo comprende administrar la formulación para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 20 mg en los días 1 a 5 y 15 a 19 de un ciclo de 28 días. En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de SMD administrando a un sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en un ciclo, en donde el ciclo comprende administrar la formulación para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 5 mg en los días 1 a 5 y 15 a 19 de un ciclo de 28 días. En una realización, en el presente documento se proporciona un método de tratamiento de SMD administrando a un sujeto una formulación del compuesto 1 proporcionado en el presente documento en un ciclo, en donde el ciclo comprende administrar la formulación para administrar el compuesto 1 en una dosis de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 5 mg en los días 1 a 5 y 15 a 19 de un ciclo de 28 días.

Población de pacientes

En ciertas realizaciones de los métodos proporcionados en el presente documento, el sujeto es un animal, preferentemente un mamífero, más preferentemente un primate no humano. En realizaciones particulares, el sujeto es un ser humano. El sujeto pueden ser un hombre o una mujer.

Los sujetos particularmente útiles para los métodos proporcionados en el presente documento incluyen pacientes humanos con cáncer, por ejemplo, los que han sido diagnosticados con leucemia, que incluye leucemia mieloide aguda, leucemia linfocítica aguda, leucemia mielógena crónica y leucemia mielógena crónica. En ciertas realizaciones, el sujeto no ha sido diagnosticado con leucemia promielocítica aguda.

En algunas realizaciones, el sujeto tiene una población de blastos superior a la normal. En algunas realizaciones, el sujeto tiene una población de blastos de al menos el 10 %. En algunas realizaciones, el sujeto tiene una población de blastos de entre el 10 y el 15 %. En algunas realizaciones, el sujeto tiene una población de blastos de al menos el 15 %. En algunas realizaciones, el sujeto tiene una población de blastos de entre el 15 y el 20 %. En algunas realizaciones, el sujeto tiene una población de blastos de al menos el 20 %. En algunas realizaciones, el sujeto tiene una población de blastos de aproximadamente el 10-15 %, aproximadamente el 15-20 %, o aproximadamente el 20­ 25 %. En otras realizaciones, el sujeto tiene una población de blastos inferior al 10 %. En el contexto de los métodos descritos en el presente documento, sujetos útiles que tienen una población de blastos inferior al 10 % incluye los sujetos que, por cualquier motivo según el criterio del médico habitual en la técnica, están en necesidad de tratamiento con un compuesto proporcionado en el presente documento, solo o en combinación con un segundo agente activo.

En algunas realizaciones, el sujeto se trata basándose en la puntuación del estado funcional del Grupo Oncológico Cooperativo de la Costa Este (ECOG) del sujeto para leucemia. El estado funcional ECOG se puede puntuar en una escala de 0 a 5, indicando 0 asintomático; indicando 1 sintomático pero completamente ambulante; indicando 2 sintomático y <50 % en lecho durante el día; indicando 3 sintomático y >50 % en cama, pero no postrado en cama; indicando 4 postrado en cama; e indicando 5 muerte. En algunas realizaciones, el sujeto tiene una puntuación del estado funcional ECOG de 0 o 1. En algunas realizaciones, el sujeto tiene una puntuación del estado funcional ECOG de 0. En algunas realizaciones, el sujeto tiene una puntuación del estado funcional ECOG de 1. En otras realizaciones, el sujeto tiene una puntuación del estado funcional ECOG de 2.

En ciertas realizaciones, los métodos proporcionados en el presente documento engloban el tratamiento de sujetos que no han sido tratado previamente tratados para leucemia. En algunas realizaciones, el sujeto no ha recibido un trasplante alógeno de médula ósea. En algunas realizaciones, el sujeto no ha recibido un trasplante de células madre. En algunas realizaciones, el sujeto no ha recibido tratamiento con hidroxiurea. En algunas realizaciones, el sujeto no ha sido tratado con ningún producto en investigación para la leucemia. En algunas realizaciones, el sujeto no ha sido tratado con glucocorticoides sistémicos.

En otras realizaciones, los métodos engloban el tratamiento de sujetos que han sido tratados previamente o que están siendo tratados actualmente para la leucemia. Por ejemplo, el sujeto puede haber sido tratado previamente o está siendo tratado actualmente con una pauta de tratamiento habitual para la leucemia. El sujeto puede haber sido tratado con cualquier pauta de tratamiento habitual para la leucemia conocida para el médico experto en la técnica. En ciertas realizaciones, el sujeto puede haber sido tratado previamente con al menos un régimen para LMA de inducción/reinducción o de consolidación. En algunas realizaciones, el sujeto ha recibido un trasplante de médula ósea autólogo o trasplante de células madre como parte de un régimen de consolidación. En algunas realizaciones, el trasplante de médula ósea o de células madre ocurrió al menos 3 meses antes del tratamiento según los métodos proporcionados en el presente documento. En algunas realizaciones, el sujeto ha recibido tratamiento con hidroxiurea. En algunas realizaciones, el tratamiento con hidroxiurea ocurrió no después de 24 horas antes del tratamiento según los métodos proporcionados en el presente documento. En algunas realizaciones, el sujeto ha recibido terapia de inducción o de consolidación previa con citarabina (Ara-C). En algunas realizaciones, el sujeto ha recibido tratamiento con glucocorticosteroides sistémicos. En algunas realizaciones, el tratamiento con glucocorticosteroides ocurrió no después 24 horas antes del tratamiento según los métodos descritos en el presente documento. En otras realizaciones, los métodos engloban tratar sujetos que han sido tratados previamente para el cáncer, pero que son insensibles a las terapias habituales.

También se engloban métodos de tratamiento de sujetos que tienen leucemia recidivante o insensible. En algunas realizaciones, el sujeto ha sido diagnosticado con un subtipo recidivante o insensible de LMA, como se define por la Organización Mundial de la Salud (OMS). La enfermedad recidivante o insensible pueden ser LMA de nueva aparición o LMA secundaria, por ejemplo, LMA relacionada con la terapia (t-LMA).

En algunas realizaciones, los métodos proporcionados en el presente documento se usan para tratar leucemia, caracterizada por la presencia de un alelo mutante de IDH2. En una realización, el alelo mutante de IDH2 es IDH2 R140Q o R172K.

En algunas realizaciones, los métodos proporcionados en el presente documento se usan para tratar LMA, caracterizados por la presencia de un alelo mutante de IDH2. En una realización, el alelo mutante de IDH2 es IDH2 R140Q o R172K.

Por lo tanto, el tratamiento con un compuesto proporcionado en el presente documento podría proporcionar una alternativa para los pacientes que no responden a otros métodos de tratamiento. En algunas realizaciones, dichos otros métodos de tratamiento engloban el tratamiento con Gleevec® (mesilato de imatinib). En algunas realizaciones, en el presente documento se proporcionan métodos de tratamiento de leucemia mielógena crónica positiva para el cromosoma Filadelfia (LMC Ph+). En algunas realizaciones, en el presente documento se proporcionan métodos de tratamiento de leucemia mielógena crónica positiva para el cromosoma Filadelfia (LMC Ph+) resistente a Gleevec® (mesilato de imatinib).

En algunas realizaciones, los métodos proporcionados en el presente documento se usan para tratar leucemias resistentes a fármacos, tales como LMC. Por lo tanto, el tratamiento con un compuesto proporcionado en el presente documento podría proporcionar una alternativa para pacientes que no responden a otros métodos de tratamiento. En algunas realizaciones, dichos otros métodos de tratamiento engloban el tratamiento con Gleevec® (mesilato de imatinib). En algunas realizaciones, en el presente documento se proporcionan métodos de tratamiento de LMC Ph+. En algunas realizaciones, en el presente documento se proporcionan métodos de tratamiento de LMC Ph+ resistente a Gleevec® (mesilato de imatinib).

También se engloban métodos de tratamiento de un sujeto independientemente de la edad del sujeto, aunque algunas enfermedades o trastornos son más comunes en ciertos grupos de edad. En algunas realizaciones, el sujeto tiene al menos 18 años de edad. En algunas realizaciones, el sujeto tiene más de 18, 25, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, o 70 años de edad. En otras realizaciones, el sujeto tiene menos de 65 años de edad. En algunas realizaciones, el sujeto tiene menos de 18 años de edad. En algunas realizaciones, el sujeto tiene menos de 18, 15, 12, 10, 9, 8 o 7 años de edad.

En algunas realizaciones, los métodos pueden encontrar uso en sujetos de al menos 50 años de edad, aunque sujetos más jóvenes también podrían beneficiarse del método. En otras realizaciones, los sujetos tienen menos 55, al menos 60, al menos 65 y al menos 70 años de edad. En otra realización, el sujeto tiene un cáncer con citogenética adversa. "Citogenética adversa" se define como cualquier cariotipo no diploide, o superior o igual a 3 anomalías cromosómicas. En otra realización, los sujetos tienen al menos 60 años de edad y tienen un cáncer con citogenética adversa. En otra realización, los sujetos tienen 60-65 años de edad y tienen un cáncer con citogenética adversa. En otra realización, los sujetos tienen 65-70 años de edad y tienen un cáncer con citogenética adversa.

En ciertas realizaciones, el sujeto tratado no tiene antecedentes de infarto de miocardio en los tres meses desde el tratamiento según los métodos proporcionados en el presente documento. En algunas realizaciones, el sujeto no tiene antecedentes de accidente cerebrovascular o ataque isquémico transitorio en los tres meses desde el tratamiento según los métodos proporcionados en el presente documento. En algunas realizaciones, el sujeto no ha sufrido ningún acontecimiento tromboembólico, que incluye trombosis venosa profunda o embolia pulmonar, en los 28 días desde el tratamiento según los métodos proporcionados en el presente documento. En otras realizaciones, el sujeto no ha padecido o no está padeciendo coagulación intravascular diseminada incontrolada.

Debido a que los sujetos con cáncer tienen manifestaciones clínicas heterogéneas y desenlaces clínicos variables, el tratamiento administrado a un paciente puede variar, dependiendo de su pronóstico. El profesional clínico experto será capaz de determinar fácilmente sin excesiva experimentación agentes secundarios específicos, tipos de cirugía y tipos de terapia habitual no basada en fármacos que se pueden usar eficazmente para tratar un sujeto individual con cáncer.

Se apreciará que en el presente documento se contempla cada combinación adecuada de los compuestos proporcionados en el presente documento con uno o más de los compuestos anteriormente mencionados y opcionalmente una o más sustancias farmacológicamente activas adicionales.

Evaluación de actividad

Están disponibles procedimientos fisiológicos, farmacológicos y bioquímicos habituales para probar los compuestos para identificar los que poseen la actividad deseada.

Dichos ensayos incluyen, por ejemplo, ensayos basados en células, que incluye el ensayo descrito en la sección de ejemplos.

Las realizaciones proporcionadas en el presente documento pueden ser entendidas más completamente con referencia a los siguientes ejemplos. Estos ejemplos se indican para ser ilustrativos de composiciones farmacéuticas y formas farmacéuticas proporcionadas en el presente documento, pero no limitan en modo alguno.

EJEMPLOS

Los siguientes ejemplos se presentan a modo de ilustración, no de limitación. Los ejemplos de formulaciones del compuesto 1 y HPBCD o SBEpCD en intervalos de concentración definidos en las reivindicaciones son según la invención. Cualquier ejemplo se debe entender como que es para referencia solo.

Se usan las siguientes abreviaturas en las descripciones y los ejemplos.

SWFI - Agua estéril para inyectables

WFI - Agua para inyectables

D5W - Dextrosa 5 % en agua

HPpCD o HPBCD - Hidroxipropil-beta-ciclodextrina

SBEpCD - Sal de sodio de sulfobutil éter-p-ciclodextrina

CD - Ciclodextrina

DMSO - Sulfóxido de dimetilo

FDM - Microscopio de liofilización

SEM - Microscopio electrónico de barrido

LT-DSC - Calorimetría diferencial de barrido a baja temperatura

DSC - Calorimetría diferencial de barrido

DVS - Sorción dinámica de vapor

TGA - Análisis termogravimétrico

GC - Cromatografía de gases

KF - Karl Fisher

"Compuesto 1, forma C" o "forma C" o "API" " en los ejemplos en el presente documento se refiere a la forma polimorfa C de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida. "Compuesto 1, forma A" o "forma A" en los ejemplos en el presente documento se refiere a la forma polimorfa A de 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida. Las propiedades físicas y químicas de la 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida se resumen en la Tabla 1.

Tabla 1: Resumen de propiedades físicas y químicas de la 2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida

Ejemplo 1: Selección de disolventes

Se realizó un cribado de disolventes para identificar los disolventes de clase 3 adecuados listados en la Guía Q3C de la ICH (Conferencia Internacional sobre Armonización) ya que los disolventes de clase 3 tienen un mayor nivel de exposición diaria permitida (PDE) de 50 mg/día. Se consideró que un buen candidato a disolvente tenía 1) buena miscibilidad con agua y 2) punto de ebullición suficientemente bajo de manera que pudiera ser fácilmente retirado durante el proceso de liofilización. La solubilidad del compuesto 1 se probó en una serie de mezclas de disolventes con tampón citrato 20 mM, pH 4,2; los resultados se muestran en la Tabla 2.

Tabla 2: Solubilidad del compuesto 1 en mezclas de disolvente y tampón

Se encontró que la solubilidad del fármaco en la mayoría de los sistemas de disolventes probados era inferior a 10 mg/ml, excepto para aquél de 100 % de ácido fórmico o 100 % de DMSO, que proporcionan una solubilidad del fármaco superior a 100 mg/ml. El objetivo era lograr una alta solubilidad en el disolvente de manera que una pequeña cantidad de disolvente se usara durante el procesamiento (y así se necesita retirada limitada de disolvente). Por lo tanto, se identificaron ácido fórmico y DMSO como dos disolventes principales para el posterior desarrollo de formulaciones.

Se hizo una prueba de solubilidad posterior en las mezclas de ácido fórmico/DMSO de diferentes relaciones para evaluar si hubo sinergia mediante el uso de dos disolventes.

Tabla 3: Solubilidad del compuesto 1 en mezclas de ácido fórmico y DMSO

Como se muestra en la Tabla 3, las solubilidades de todas las mezclas de ácido fórmico/DMSO fueron muy inferior a las de cualquier disolvente solo. Por lo tanto, se decidió que la premezcla de API se debía preparar en o ácido fórmico o DMSO solo.

Ejemplo 2: Selección de solubilizantes

Las ciclodextrinas (CD) son los agentes complejantes más comúnmente usados para aumentar la solubilidad acuosa de compuestos de fármaco poco solubles en agua. Entre todos los derivados de ciclodextrina, solo la hidroxipropil-pciclodextrina (HPpCD) y la sulfobutil éter beta-ciclodextrina (SBEpCD) se han usado en productos parenterales autorizados. Por consiguiente, solo estos dos tipos de ciclodextrina se evaluaron en este estudio.

Como una primera etapa, la solubilidad del fármaco en disoluciones acuosas en función de la concentración de o HPpCD (Kleptose® de Roquette) o SBEpCD (Dexolve® de Cyclolab) se midió a temperatura ambiente durante el momento de tiempo de 1,2 y 6 días. Los resultados se muestran en la Tabla 4.

Tabla 4: Solubilidad del compuesto 1 en disolución acuosa que contiene Dexolve o Kleptose

En general, fue comparable la solubilidad del compuesto 1 en ambos tipos de CD. La solubilidad del compuesto 1 aumentó a medida que aumentó la concentración de CD. Cuando se usó concentración de CD del 40 % o superior, la disolución se volvió muy viscosa, que probablemente impidió la solubilidad cinética del fármaco en la disolución. En general, es difícil liofilizar una disolución que contiene > 25 % de CD. Por lo tanto, se realizaron estudios de solubilidad posteriores en cuatro niveles de concentración de CD: 3, 9, 15 y 25 % p/p. Además de Kleptose® y Dexolve®, se evaluaron otras dos marcas de CD comercialmente disponibles, concretamente Captisol® de Ligand (SBEpCD) y una versión genérica de la CD HP® proporcionada por Acros Organics. El impacto del tipo de disolvente y el nivel sobre la solubilidad del fármaco también se evaluaron en este estudio. Se añadieron ácido fórmico o DMSO en diversas relaciones molares entre disolvente y CD a la disolución (0,4:1, 1:1, 2,5:1, 5:1 y 10:1). Se recogieron los datos de solubilidad a las 24 h y 48 h; no se consideraron periodos más largos debido al riesgo de estabilidad química del fármaco. Por consiguiente, aquí solo se presentan los datos de 48 h. La FIG. 30 muestra la solubilidad del compuesto 1 con diferentes marcas y concentraciones de ciclodextrina, diferentes tipos de disolvente y relaciones variadas entre disolvente y ciclodextrina. Se encontró que la solubilidad del compuesto 1 se ve afectada predominantemente por la concentración de CD en la disolución, mientras que el tipo y la marca de CD tuvieron un impacto mínimo sobre la solubilidad. Con respecto al tipo de disolvente, el compuesto 1 mostró una solubilidad ligeramente mayor cuando se añadió ácido fórmico, en vez de DMSO, a la disolución de ciclodextrina. Para tanto el ácido fórmico como DMSO, hubo un ligero aumento en la solubilidad del fármaco con el aumento de la relación entre disolvente y ciclodextrina. El efecto del disolvente sobre la solubilidad del fármaco fue mínima a diferencia del efecto de la concentración de CD.

Ejemplo 3: Selección de tampones

Se prefiere que el pH de la disolución del fármaco tras la administración IV esté, en general, en un intervalo de 4 - 7, y o en un intervalo de 5 - 7. Se consideró adicionalmente una variedad de sistemas tampón farmacéuticamente aceptables que incluyen acetato, benzoato, citrato, lactato y tartrato con respecto a su capacidad de tampón y su impacto sobre la solubilidad del fármaco. Como los tampones acetato pueden ser sublimados durante el proceso de liofilización y dan como resultado un desplazamiento del pH, este tampón se sacó posteriormente de la evaluación.

Para evaluar tampones alternativos, se preparó una serie de disoluciones de fármaco con Kleptose al 3 % o 20 %. Se añadió ácido fórmico o DMSO a la disolución a aproximadamente el 0,1 % p/p correspondiente a su concentración de premezcla de API. Como una concentración de tampón de más de 50 mM puede provocar irritación al paciente, se evaluaron el benzoato, el citrato, el lactato y el tartrato en diversas concentraciones de tampón que variaban desde 2 hasta 20 mM. También se añadió a la disolución tampón citrato, tartrato, benzoato o lactato 20 mM con un pH inicial de 4,2 o 4,7. El pH final y la solubilidad de cada disolución se midieron posteriormente. Los resultados se muestran en la Tabla 5 y la Tabla 6.

Tabla 5: Valores de pH de disoluciones que contienen Kleptose, disolvente y diferentes tampones

Tabla 6: Solubilidad del compuesto 1 en disoluciones que contienen Kleptose, disolvente y diferentes tampones

Se observó que al mismo de nivel de Kleptose, independientemente del tipo de disolvente, todas las disoluciones tamponadas tenían solubilidad comparable, excepto la disolución de benzoato que presentó una solubilidad mucho menor. Además, en presencia de ácido fórmico, la solubilidad del fármaco en las disoluciones tamponadas fue ligeramente menor que en la disolución sin tamponar. A diferencia, la solubilidad de las disoluciones tamponadas en presencia de DMSO fue ligeramente mayor que en las sin tamponar. Esto implica que diferentes tipos de sal tampón pueden tener diferentes interacciones moleculares con las moléculas de disolvente que, por consiguiente, pueden afectar la complejación del fármaco en cavidades de la CD. Las disoluciones que contienen DMSO presentaron un pH bien mantenido a 4,2 o 4,7 con todos los tampones probados, excepto el benzoato. Sin embargo, todas las disoluciones probadas que contenían ácido fórmico mostraron un pH inferior a 4 independientemente del tipo de tampón y pH inicial. Para mantener el pH final de la disolución a granel por encima de 4 en presencia de ácido fórmico, es probable que se requiera un pH de tampón superior a 4,7 para soportar el cambio en pH. Como un tampón ofrece la mejor capacidad de tamponamiento cuando el pH es próximo o es igual a su pKa y puesto que el benzoato, el lactato y el tartrato tienen pKa de 4,2, 3,86 y 4,4, respectivamente, se consideró que era muy poco probable que éstos fueran capaces de soportar pH superiores a 4. Como resultado, los tampones benzoato, lactato y tartrato se quitaron de consideración. El citrato tiene tres pKa, 3,13, 4,76 y 6,39, dando una buena capacidad de tamponamiento a altos valores de pH. Por lo tanto, se seleccionó el tampón citrato en el posterior desarrollo de formulaciones.

En el estudio posterior, se disolvió 10 % de Dexolve en tampones citrato de diversos pH y concentraciones, junto con una cantidad de ácido fórmico que igualaba a una concentración de premezcla de API de 150 mg/ml. La FIG. 31 muestra el pH de disolución final en función de la concentración de tampón citrato que variaba desde 2 hasta 20 mM y pH de tampón inicial que variaba desde 4,2 hasta 5,3. El pH de la disolución aumento con el pH de la disolución tamponada y la concentración como era de esperar. Cuando se usó un tampón citrato 20 mM a pH 5,3, el pH de la disolución fue capaz de mantener un pH final de 4,3 después de la adición del ácido fórmico. Como resultado, cuando se usó ácido fórmico como disolvente, se recomendó añadir un tampón citrato 20 mM a pH 5,3 a la formulación para mantener el pH de la disolución reconstituida por encima de 4.

Ejemplo 4: Análisis térmico de formulaciones de liofilización

En este estudio, se realizaron una serie de análisis térmicos con el microscopio de liofilización (FDM) y la calorimetría diferencial de barrido a baja temperatura (LT-DSC) para determinar la temperatura de colapso y las Tg' de las diversas formulaciones a granel en disolución que contenían diferentes tipos de CD, concentraciones de CD, tipos de disolvente, concentraciones de disolvente y concentraciones de tampón. En general, el tiempo del ciclo de liofilización se reduce y se obtiene una buena estabilidad de la torta durante la liofilización a medida que aumentan Tg' y la temperatura de colapso del sistema de formulación.

La Tabla 7 resume los resultados de la caracterización térmica obtenida como parte de este estudio, junto con formulaciones a modo de ejemplo desveladas en la publicación de EE. UU. N.° 2017-0196847.

Tabla 7: Temperatura de colapso de formulaciones basadas en ciclodextrina

Las cuatro últimas formulaciones desveladas en la Tabla 7 se describen en la publicación de EE. UU. N.° US 2017­ 0196847.

Como se muestra en la Tabla 7, las Tg de todas las formulaciones probadas medidas por LT-DSC estuvieron muy próximas a las temperaturas de colapso determinadas por FDM. En general, las Tg fueron 1-2 °C inferiores a sus temperaturas de colapso correspondientes. La temperatura de colapso aumentó desde -14,7 °C hasta -8,6 °C con el aumento de la concentración de Kleptose desde el 3 % hasta el 15 % y luego siguió invariable cuando la concentración de Kleptose aumentó desde el 15 % hasta el 25 %. Al mismo nivel de Kleptose del 10 %, la temperatura de colapso disminuyó desde -7,7 °C hasta -10,7 °C al aumentar la concentración de tampón desde 2 mM hasta 20 mM. El tipo de disolvente y el nivel de disolvente mostraron un impacto mínimo sobre la temperatura de colapso sin tendencias obvias observadas. El tipo de ciclodextrina resultó ser la variable que tenía el impacto más significativo sobre la temperatura de colapso, presentando las formulaciones de SBEpCD (Captisol® o Dexolve®) las temperaturas de colapso inferiores a sus homólogos de HPpCD (Kleptose®). En comparación con la formulación desvelada en la publicación de EE. UU. N.° 2017-0196847, que tiene una temperatura de colapso de -18 °C, las formulaciones desveladas en el presente documento, que contuvieron 10 % de Kleptose, presentaron una mayor temperatura de colapso de -8,2 °C a -11,1 °C. Esto indicó que el ciclo de liofilización que tenía una temperatura en anaquel en el secado primario de -16 °C es muy conservativa para las formulaciones desveladas en el presente documento. Sin embargo, se usó el mismo de liofilización como punto de partida para minimizar los riesgos relacionados con el procesamiento, con una opción de modificarlo más según se necesite.

Ejemplo 5: Evaluación de la formulación y del proceso de la formulación la

Se preparó un lote a escala de laboratorio de 3 kg de tamaño de lote que tiene la composición de formulación mostrada en la Tabla 8.

Tabla 8: Composición de formulación del lote de ensayo de 3 kg

El compuesto 1 se preparó en premezcla de DMSO primero a 220 mg/ml y luego se añadió gota a gota a la disolución tamponada de Kleptose. Tras completarse la incorporación mediante mezclado, la disolución se filtró a través de un filtro de PVDF de 0,22 pm y se envasó en viales de vidrio de 20 cm3 de tipo I con un peso de llenado de 8,4 g/vial, y luego se cargaron al liofilizador con los parámetros del ciclo de liofilización mostrados en la Tabla 9.

Las muestras se sacaron después del secado primario y durante el secado secundario para entender el nivel de disolvente en función del tiempo de secado. Los resultados analíticos del medicamento terminado se muestran en la Tabla 10. El nivel de DMSO residual fue aproximadamente 6 mg/vial después de 24 horas de secado secundario a 67 °C, ascendiendo la retirada a aproximadamente el 29 % (nivel inicial: ~ 8,6 mg/ml). Se observó que la mayor parte de la retirada de disolvente fue durante el secado primario, con una reducción mínima en el nivel de disolvente durante el secado secundario. Se observó el aspecto de las tortas liofilizadas y las disoluciones reconstituidas, y se encontró que era aceptable.

Tabla 9: Parámetros del ciclo de liofilización

Tabla 10: Caracterización de medicamentos del lote de ensayo

Se observó que el ensayo de la torta liofilizada estaba en el extremo inferior, con el valor de ensayo real del 91,9 %, teniendo en cuenta el 5 % de sobrellenado. Con un disolvente residual de ~ 6 mg/ml, esta formulación podría posiblemente soportar una dosis de hasta 8 mg/día (como se describe antes, el nivel de PDE para DMS^o es 50 mg/día).

Basándose en los resultados de estudios anteriores, se prepararon algunos lotes de ensayo adicionales de la misma formulación a escala de laboratorio de 1 kg para incorporación mediante mezclado solo para evaluar los posibles riesgos de precipitación de fármaco. La información de formulación y los resultados del ensayo se muestran en la Tabla 11. Los tres primeros lotes del ensayo no fueron satisfactorios con el ensayo bajo al principio y el ensayo decreciente con el tiempo en 8 horas desde el almacenamiento en condicionales ambientales. Las partículas de fármaco precipitado se observaron visualmente en el fondo del recipiente después de 4 horas de almacenamiento. En los tres lotes de ensayo posteriores, el proceso de incorporación mediante mezclado se modificó con cantidad reducida de carga de agua inicial, volumen de dispensación de premezcla de API reducido y mezcla moderada durante la adición de la premezcla de API. Como resultado, los ensayos iniciales de los tres últimos lotes mejoraron enormemente. Sin embargo, se observó una disminución de ensayo significativa después de 19 horas de almacenamiento en condicionales ambientales para los tres lotes. Conjuntamente, los datos indicaron que la formulación no era físicamente estable y el riesgo de precipitación de fármaco era bastante alto. Por lo tanto, la formulación de 'cambio de disolvente' usando 3 % de nivel de CD no se consideró para evaluación posterior.

Tabla 11: Evaluación de la estabilidad de la disolución a granel de la formulación de 'intercambio de disolvente' (3 % de CD y 135 mg/ml de API en DMSO)

Los siguientes lotes de ensayo de 1 kg (1-B, 1-C y 1-D) aumentaron el nivel de Kleptose hasta el 10-20 % basado en el estudio de solubilidad previo. Las composiciones de formulación de cada disolución a granel se describen en la Tabla 12. Siendo la concentración de fármaco y las composiciones de tampón constantes, las únicas variables de las tres formulaciones fueron el nivel de Kleptose y la carga de DMSO inicial correspondiente a la concentración de premezcla de API. Los parámetros del ciclo de liofilización se muestran en la Tabla 13; se usó una temperatura de secado secundario más baja de 50 °C.

Tabla 12: Composiciones de formulación de lotes de ensayo de 1 kg

Tabla 13: Parámetros del ciclo de liofilización del lote de ensayo de 1 kg

Las disoluciones a granel después de la filtración de los tres lotes se almacenaron en condicionales ambientales durante hasta 8 horas. El ensayo de cada lote se midió a t=0, 4 y 8 horas. Los resultados se muestran en la Tabla 14. Las disoluciones a granel de los tres lotes parecieron ser claras con la inspección visual y el ensayo siguió siendo estable durante la duración de 8 horas. Las tortas liofilizadas de los tres lotes se analizaron y los resultados se muestran en la Tabla 15. Los ensayos de los tres fueron todos de ~ 100 % y los degradantes/impurezas individuales en cada formulación estuvieron todos por debajo del 0,1 %. El nivel de DMS^o residual de estos tres lotes disminuyó hasta aproximadamente 4 mg/vial, que muestra ~ 25 - 40 % de retirada de disolvente.

Tabla 14: Evaluación de la estabilidad de la disolución a granel del lote de ensayo

Tabla 15: Caracterización de las formulaciones basadas en DMSO

Además de los lotes anteriores, también se prepararon dos lotes de ensayo por duplicado de tamaño de lote 1 kg, 3-B1 y 3-B2, con la misma formulación que el lote 1-B (10 % de Kleptose, 170 mg/ml de premezcla de DMSO) para la incorporación mediante mezclado solo para evaluar el tiempo de mantenimiento de las disoluciones a granel. Las disoluciones a granel después de la filtración se almacenaron en condicionales ambientales durante la duración de 19 horas. La disolución siguió clara sin partículas no disueltas visibles y el ensayo siguió siendo estable como se muestra en la Tabla 16. Similarmente, se prepararon otros dos lotes de ensayo por duplicado de tamaño de lote de 1 kg, 4-C1 y 4-C2, con el mismo lote de formulación que el lote 1-C (10 % de Kleptose, 220 mg/ml de premezcla de DMSO) para la incorporación mediante mezclado solo para evaluar el tiempo de mantenimiento de las disoluciones a granel. Las disoluciones a granel posteriores a la filtración se almacenaron en condicionales ambientales durante la duración de 8 horas. La disolución siguió siendo clara sin partículas no disueltas visibles y el ensayo siguió siendo estable como se muestra en la Tabla 17. Los estudios de incorporación mediante mezclado confirmaron que las disoluciones a granel con 10 % de Kleptose en la formulación pueden proporcionar estabilidad suficiente durante el periodo de fabricación. Por consiguiente, 1-C se seleccionó como la formulación final, con 10 % de nivel de CD.

Tabla 16: Evaluación de la estabilidad de la disolución a granel del lote de ensayo

Tabla 17: Evaluación de la estabilidad de la disolución a granel del lote de ensayo

Con los resultados anteriores de la estabilidad en disolución y los niveles de disolvente residual, se realizaron más esfuerzos para reducir más el nivel de DMSO residual disminuyendo la cantidad de DMSO inicial en la formulación y usando diferentes tipos de ciclodextrina. Se prepararon dos lotes de ensayo de 10 l aumentando la concentración de premezcla de API-DMSO desde 220 mg/ml hasta 270 mg/ml (con aclarado de 1 ml usando DMSO). Ambos lotes tuvieron las mismas composiciones de formulación (10 % de CD y tampón citrato 20 mM, pH 5,3), pero usaron diferentes tipos de ciclodextrina, como se muestra en la Tabla 18. Los parámetros del ciclo de liofilización y las propiedades del medicamento liofilizado se presentan en la Tabla 19 y la Tabla 20, respectivamente. Independientemente del tipo de CD, ambos lotes obtuvieron el mismo nivel de DMSO residual de 4,6 mg/vial, correspondiente al 11 % de retirada de carga de DMSO inicial de 5,2 mg/vial. Como no se logró una mejora importante en la reducción de disolvente residual a partir de estas dos series de ensayo en comparación con los ensayos previos, no se persiguió más este enfoque y la concentración de premezcla de API-DMSO se fijó como 220 mg/ml en el trabajo de desarrollo de proceso posterior.

Tabla 18: Composiciones de formulación de lotes de ensayo basados en DMSO

Tabla 19: Parámetros del ciclo de liofilización de lotes de ensayo

Tabla 20: Caracterización de los lotes de ensayo liofilizados basados en DMSO

Se preparó un lote de ensayo adicional, 7-Dex1, con 10 % de Dexolve y 220 mg/ml de premezcla de DMSO a escala de laboratorio de 500 ml, usando la misma formulación (excepto CD) y proceso que el lote 1-C. La disolución a granel se almacenó en condiciones ambiente durante hasta 24 horas y no se observó precipitación de fármaco por inspección visual. El resultado de las pruebas del medicamento terminado se incluyó en la Tabla 21 para dar una comparación directa con el del Lote 1-C. Las características de medicamentos comparables entre los dos lotes indicaron que el ciclo de liofilización real también se puede aplicar a la formulación basada en SBEpCD, aunque la liofilia basada en SBEpCD tuvo una temperatura de colapso mucho menor que su homólogo basado en Kleptose. Aun cuando se obtuvieron resultados comparables para tanto las formulaciones basadas en Dexolve como en Kleptose, se seleccionó Kleptose como la ciclodextrina de elección debido a más experiencia con este tipo de formulación y que tiene mejor perfil de temperatura de colapso que Dexolve.

Tabla 21: Caracterización de la formulación basada en Dexolve y DMSO

Ejemplo 6: Esquema de reconstitución de la formulación la

Al finalizar la composición de la formulación la basada en DMSO, se evaluó el esquema de reconstitución para garantizar que la disolución reconstituida presentara pH y osmolalidad aceptables para la administración IV. Preferentemente, el pH debía permanecer en el intervalo de 4-7 y la osmolalidad debía permanecer tan próxima como fuera posible a la osmolalidad del plasma humano de 285-295 mOsm/kg. Se evaluaron los tres líquidos IV más comúnmente usados comercialmente disponibles que incluyen agua para inyectables (WFI), solución salina al 0,9 % (NS) y 5 % de dextrosa (D5W). La osmolalidad y los valores de pH de las disoluciones reconstituidas con esquemas de reconstitución variados se muestran en la Tabla 22. Se encontró que o NS o D5W solos con un volumen de 5-15 ml proporcionó un valor de osmolalidad superior a 370 mOsm/kg. Entre todos los vehículos probados, solo 4 ml de WFI, o una mezcla de 4 ml de WFI con el volumen igual de NS o D5W, fue capaz de proporcionar una disolución reconstituida con un valor de osmolalidad de 260-280 mOsm/kg. Los pH de todas las disoluciones reconstituidas estuvieron en el intervalo de 4,2-4,5. Para hacer el esquema de reconstitución tan simple como fuera posible, se consideró que 4 ml de WFI era la opción más favorable. En definitiva, el volumen de vehículo de reconstitución se ajustó a 3,8 ml de manera que la concentración de la disolución reconstituida fuera un número redondo de 0,25 mg/ml con la carga de fármaco real de 1,05 mg/vial (con 5 % de sobrellenado) y el volumen de disolución reconstituida final de 4,2 ml/vial.

Tabla 22: Medición de la osmolalidad y pH de disoluciones reconstituidas de formulación Ia

Ejemplo 7: Aumento de escala del proceso de la formulación la

Una vez se ha demostrado la viabilidad de la formulación la en los ensayos de laboratorio, se fabricó un lote manipulado a la escala de 8,5 l (lote A). Se usa el mismo ciclo de liofilización que el presentado en la Tabla 13. Para asegurar un aumento de escala satisfactorio de la formulación Ia, se llevó a cabo una exhaustiva evaluación de riesgos de los procedimientos operativos críticos del proceso desvelado en la publicación de EE. UU. N.° 2017-0196847. Los riesgos identificados y las mejoras de proceso implementadas se resumen en la Tabla 23 que sigue.

Tabla 23: Mejoras de proceso implementadas en los lotes de aumento de escala de la formulación Ia

Los resultados de la prueba de liberación del lote se muestran en la Tabla 24.

Tabla 24: Resultados del análisis de lotes de los lotes de aumento de escala de la formulación la

Las siguientes mejoras de proceso resumidas en la Tabla 25 que sigue se implementaron en los lotes de aumento de escala adicionales:

Tabla 25: Mejoras de proceso implementadas en los lotes de aumento de escala de la formulación la

Los resultados del análisis de lotes de lotes a modo de ejemplo se muestran en la Tabla 26.

Tabla 26: Resultados del análisis de lotes de la formulación Ia

Ejemplo 8: Evaluación de la formulación y el proceso de la formulación Ib

Se prepararon dos lotes de ensayo, 1-Dex2 y 1-Dex3, en una escala de laboratorio de 500 ml en formulaciones que contenían ácido fórmico como codisolvente y 10 % de Dexolve como ciclodextrina. Dexolve se usó en ambos lotes, ya que había demostrado rendimiento de formulación comparable con Kleptose en los ensayos previos. Como la solubilidad del fármaco en ácido fórmico es aproximadamente 170 mg/ml, la premezcla de a Pi en ácido fórmico se preparó a una concentración de 150 mg/ml (equivalente a 8,54 mg/vial) y 100 mg/ml (equivalente a 12,81 mg/vial), respectivamente, en los dos lotes. El pH del tampón citrato aumentó desde 4,2 hasta 5,3 para para hacer que la disolución reconstituida tuviera un pH superior a 4,0. El ciclo de liofilización permaneció igual que se usa en la formulación desvelada en la publicación de EE. UU. N.° 2017-0196847. La composición de formulación de los dos lotes se muestra en la Tabla 27. Los resultados analíticos de los medicamentos terminados se muestran en la Tabla 28.

Tabla 27: Composiciones de formulación de los lotes de ensayo basados en ácido fórmico a escala de laboratorio

Tabla 28: Caracterización de los medicamentos liofilizados de lotes de ensayo basados en ácido fórmico

Como el ácido fórmico tiene un punto de ebullición de 100,8 °C, muy inferior al del DMA (165 °C) o DMSO (189 °C), se supuso que se retiraba más fácilmente durante la liofilización. Se encontró que la tasa de reducción del ácido fórmico era solo aproximadamente del 35 %. Un análisis adicional indica que esto era probablemente debido a la formación de formiato de sodio. Puesto que el ácido fórmico tiene un pKa de 3,75, que es próximo al pH de la disolución a granel, el ácido fórmico se puede disociar en su forma iónica. Ahora, en presencia de tampones, estos iones pueden reaccionar con los iones metálicos libres para formar un producto más estable. En este caso, se usa citrato de sodio como parte del sistema tampón, y así puede conducir a la formación de formiato de sodio. Una vez se forma el formiato de sodio, puede ser muy difícil de retirar por sublimación, ya que tiene un punto de fusión muy alto (253 °C). Para retirar el ácido fórmico eficientemente, la clave es evitar la formación de formiato de sodio y tener ácido fórmico en su forma nativa. Esto puede ser logrado o manteniendo el pH de la disolución a granel bajo (al menos 1 a 2 unidades por debajo de su pKa), o más bien evitando la presencia de contraiones, tales como sodio en el sistema (por ejemplo, retirando tampones del sistema). Después de considerar ambas opciones, se decidió evaluar primero la retirada de los tampones del sistema.

Se realizaron estudios de viabilidad posteriores para investigar el efecto del pH de la disolución sobre la retirada de disolvente. En el primer lote de ensayo 1-F2 se usó 10 % de Captisol y el tampón se retiró de la formulación. El segundo lote de ensayo 2-F2 tuvo las mismas composiciones de formulación que el lote 1-F2, excepto que se sustituyó el 10 % de Captisol con 10 % de Kleptose. Las composiciones de formulación se muestran en la Tabla 29. La composición de disolvente se calculó con la adición de un aclarado de 1 ml de disolvente por lote de 10 l. El ciclo de liofilización se muestra en la Tabla 19. Los resultados analíticos de los medicamentos terminados se muestran en la Tabla 30. Se observó que la ausencia de tampón en el lote 1-F2, que produjo un pH de disolución a granel inferior a 3, redujo significativamente el nivel de ácido fórmico residual desde los 5,6 mg/vial previos hasta 2,3 mg/vial. Se observó un resultado incluso más alentador en la formulación 2-F2, que mostró un nivel de ácido fórmico residual de tan solo 0,4 mg/vial, o 95 % de reducción de disolvente.

Sin desear quedar ligado a teoría alguna, la diferencia en el nivel de ácido fórmico residual entre las dos series de ensayo se atribuyó a las diferencias en la estructura química entre Captisol y Kleptose. Captisol es una mezcla de derivados de beta-ciclodextrina de una sal de sulfonato de sodio unida a la cavidad lipófila por un grupo butil éter. La presencia de iones sodio en las moléculas de Captisol puede conducir a la formación de formiato de sodio de algún modo incluso en una condición de pH bajo. A diferencia, Kleptose es un poli-hidroxipropil éter parcialmente sustituido de beta-ciclodextrina sin asociación con iones sodio. Basándose en el resultado del disolvente residual del segundo lote de ensayo, la formulación 2-F2 se seleccionó como la formulación final Ib.

Tabla 29: Composiciones de formulación de series de ensayos de 10 kg basados en ácido fórmico

Tabla 30: Caracterización de los medicamentos liofilizados de lotes de ensayo basados en ácido fórmico

Las disoluciones a granel de ambos lotes de ensayo se almacenaron en condicionales ambientales durante una duración de siete días y se evaluaron sus estabilidades físicas y químicas. La Tabla 31 muestra los resultados del ensayo y de impurezas de cada formulación en el momento de tiempo inicial y después de siete días. Ambas formulaciones siguieron siendo físicamente y químicamente estables durante un mínimo de 7 días en condicionales ambientales.

Tabla 31: Evaluación de la estabilidad de la disolución a granel de los lotes de ensayo

Aparte de la formulación basada en ácido fórmico, también se evaluó la viabilidad de una formulación con 'disolventes dobles' durante el desarrollo. Aquí, la suposición era que cada disolvente se dejaba para un nivel de PDE de 50 mg/día. Se prepararon cuatro formulaciones con 'disolventes dobles' en la escala de 10 l, con la mitad del API disuelto en 270 mg/ml de disolución de DMSO y la otra mitad disuelta en 150 mg/ml de disolución de ácido fórmico. Las dos disoluciones de premezcla de API se añadieron entonces a la disolución a granel en secuencia. La Tabla 32 muestra las composiciones de las cuatro formulaciones. El lote 1-F3 y 1-F4 usaron ambos 10 % de Captisol. La única diferencia entre ellos fue que F3 se tamponó a pH 5,3 mientras que F4 no se tamponó. El lote 2-F3 y 2-F4 usaron 10 % de Kleptose, con f 3 tamponado a pH 5,3 y F4 no tamponado.

Tabla 32: Composiciones de formulaciones con 'disolventes dobles'

Las propiedades del medicamento liofilizado de las cuatro formulaciones se muestran en la Tabla 33. Aunque la cantidad inicial de o DMSO o ácido fórmico se redujo a diferencia de las formulaciones usando el disolvente individual solo, los niveles de DMSO residual en las cuatro formulaciones apenas fueron de aproximadamente 2,5 mg/vial, mientras que el nivel de ácido fórmico residual fue muy próximo al de la formulación Ib. Basándose en este resultado, las formulaciones con 'disolventes dobles' no se tomaron más en consideración, ya que no ofrecieron ninguna ventaja con respecto a la formulación Ib.

Tabla 33: Caracterización de las formulaciones con 'disolventes dobles' liofilizadas

Ejemplo 9: Esquema de reconstitución de la formulación Ib

Se llevó a cabo un estudio de reconstitución usando líquidos IV comercialmente disponibles que incluyen WFI, NS, D5W y lactato de Ringer (LR). Se midieron la osmolalidad de las disoluciones reconstituidas con y sin dilución con NS. Los resultados se muestran en la Tabla 34. WFI de 3 ml o por encima proporcionó una osmolalidad inferior a 220 mOsm/kg, mientras que D5W o LR de 4-20 ml proporcionó una osmolalidad por encima de 400 mOsm/kg. NS sola con un volumen inferior a 13 ml también dio una osmolalidad por encima de 300 mOsm/kg. Cuando se usaron 13-19 ml de NS para la reconstitución, la osmolalidad fue próxima a 290 mOsm/kg. Sin embargo, daría como resultado un volumen de administración total próximo a 400 ml para una dosis hasta 20 mg, que requeriría un largo tiempo de infusión. Como se deseó un menor volumen de reconstitución, también se evaluó otro líquido IV comercialmente disponible, solución salina al 0,45 % (0,45 % de cloruro sódico). Se encontró que 4-5 ml de solución salina al 0,45 % fue capaz de lograr una osmolalidad de 290 mOsm/kg. Se determinó que el esquema de reconstitución final para la formulación Ib era 4,5 ml de solución salina al 0,45 % para administrar una disolución reconstituida en la concentración exacta de 0,2 mg/ml, dado el volumen de disolución final de 5,0 ml en el vial tras la reconstitución y la carga de fármaco de 1,0 mg/vial (sin exceso de llenado).

Tabla 34: Medición de la osmolalidad y el pH de disoluciones reconstituidas de la formulación Ib

Se observó que el pH de la disolución reconstituida de la formulación Ib estaba en un lado inferior (< 3,6), pero esto se consideró aceptable.

Ejemplo 10: Aumento de escala del proceso de la formulación Ib

Se fabricaron tres series de liofilización de desarrollo, con múltiples lotes en cada lote de liofilización, para aumentar de escala el tamaño del lote desde 10 l hasta el tamaño de lote clínico de 30 l.

Lote del 1° aumento de escala:

En el lote del primer aumento de escala, se prepararon un lote de incorporación mediante mezclado de 30 l y dos de 10 l. Las composiciones de formulación se muestran en la Tabla 35. El lote 3-F2-1 se preparó con 150 mg/ml de premezcla de API en ácido fórmico en un tamaño de lote de 30 l. La premezcla se añadió al recipiente de incorporación mediante mezclado a través una bomba peristáltica y una tubería de silicona de 0,6 mm, a una tasa de 50 pl por adición cada 10 segundos. El lote 3-F2-2 y 3-F2-3 se prepararon con 100 mg/ml de premezcla de API en ácido fórmico en un tamaño de lote de 10 l. La única diferencia entre F2-2 y F2-3 fue el método de adición de premezcla de API. En F2-2, la adición de premezcla de API fue muy rápida (la premezcla se vertió instantáneamente directamente al recipiente de incorporación mediante mezclado de una vez para probar en el peor de los casos) mientras que F2-3 siguió el mismo procedimiento de adición de premezcla de API que el lote F2-1. Los tres lotes se liofilizaron en un liofilizador de laboratorio usando el mismo ciclo de liofilización que se muestra en la Tabla 19. Para el lote de aumento de escala F2-1, muestras de disolución a granel se sacaron del recipiente de incorporación mediante mezclado, así como del comienzo, el centro y el final del reciente de recepción para la prueba del ensayo durante el proceso. También se probó el ensayo de disolución en masa pre- y post- filtración del lote F2-2 y F2-3. Las disoluciones a granel filtradas de F2-1 y F2-2 se almacenaron en el recipiente de recepción en condicionales ambientales durante siete días. Se inspeccionó la estabilidad física y química de ambos lotes.

Tabla 35: Composiciones de formulación de la serie del 1° aumento de escala

La Tabla 36 y la Tabla 37 presentan la estabilidad a granel y los resultados de medicamentos terminados, respectivamente. En general, los tres lotes presentaron atributos de calidad aceptables. El lote F2-2, a pesar de su extrema tasa de adición de premezcla de API, logró un buen ensayo durante el proceso y estabilidad de disolución a granel comparable a la de los otros dos lotes. Esto indica que el proceso de incorporación mediante mezclado es robusto y no es sensible a la tasa de adición de premezcla de API. Todos los tres lotes tuvieron nivel de ácido fórmico residual < 2,5 mg/vial como objetivo independientemente de la cantidad inicial de carga de ácido fórmico. Se especuló que la cinética de retirada del ácido fórmico residual podía haber alcanzado una meseta determinada por la condición del proceso de liofilización en vez del nivel de disolvente inicial. Además, el aumento de escala hasta un tamaño de lote de incorporación mediante mezclado de 30 l se hizo satisfactoriamente (3-F2-1).

Se observó que el nivel de ácido fórmico residual de estos lotes era el más observado para el lote de desarrollo de formulaciones, 2-F2. Hubo diferencias menores en estos lotes de escala con respecto al lote de desarrollo de formulación, sin embargo 3-F2-3 y 2-F2 tuvieron la misma formulación y el mismo proceso, aunque los niveles de disolvente residual fueron muy diferentes (1,4 mg/vial frente a 0,4 mg/vial). Como parte de encontrar una posible causa para esto, se evaluó el perfil de datos de liofilización, como se ilustra en la FIG. 32. El perfil mostró que la presión de pirani no convergía completamente con la presión de la cámara presión (medida por el manómetro de capacitancia) al final del secado primario, que implica que la sublimación no era completa. Por lo tanto, en el lote del siguiente aumento de escala, se hicieron más esfuerzos por entender la variabilidad residual del disolvente.

Tabla 36: Estabilidad de la disolución a granel del lote del 1° aumento de escala

Tabla 37: Caracterización de medicamentos del lote del 1° aumento de escala

Lote del 2° aumento de escala:

Se evaluó la concentración del compuesto 1 de 100 mg/ml y 50 mg/ml con dos lotes de incorporación mediante mezclado, 4-F1 y 4-F2. La composiciones de formulación de estos dos lotes se muestran en la Tabla 38.

Tabla 38: Composiciones de la formulación de serie de 2° aumento de escala

Se evaluó un ciclo de liofilización más conservativo (para minimizar el riesgo de procesamiento, y así que permita una fabricación directa de un lote clínico en el paquete de GMP). Como se muestra en la Tabla 40, se hicieron tres cambios importantes en el proceso de liofilización: 1) el tiempo de mantenimiento de la congelación se amplió de 4 horas a 6 horas; 2) el tiempo de mantenimiento del secado primario se amplió de 70 horas a 90 horas; 3) el tiempo de secado secundario se amplió de 12 horas a 18 horas.

Tabla 39: Parámetros del ciclo de liofilización de lotes del 2° ensayo

Se extrajeron muestras de diversas localizaciones y momentos de tiempo de la cámara del liofilizador. Más específicamente, un ladrón sacó tres viales del borde delantero del anaquel central a las 65 horas, 75 horas y 90 horas de mantenimiento de secado primario, y en cada momento de tiempo de 6 horas, 12 horas y 18 horas de mantenimiento de secado secundario.

El lote se preparó en una condición de biocarga controlada para permitir el desarrollo de métodos de biocarga.

El lote se procesó satisfactoriamente. Los resultados de los medicamentos terminados se muestran en la Tabla 40. Se encontró que todos los atributos de calidad eran aceptables. Se observó que los dos lotes de incorporación mediante mezclado tenían el mismo nivel de disolvente residual de 0,6 mg/vial, a pesar de los diferentes niveles de disolvente inicial. También se encontró que el nivel de disolvente residual era inferior al lote del 1° aumento de escala, probablemente debido a 6 h adicionales de tiempo de secado secundario. Como se ha descrito anteriormente, este lote también investigó el cambio en el nivel de disolvente residual con el tiempo; los resultados se muestran en la FIG.

33.

Tabla 40: Caracterización de medicamentos del lote de 2° aumento de escala

Con el nivel de disolvente inicial de 13,2 mg/vial, el disolvente residual en los viales liofilizados se redujo a 4,5 mg/vial después de 65 horas de mantenimiento de secado primario, con cambio mínimo después de eso durante el secado primario. Con secado secundario posterior, el disolvente residual disminuyó continuamente, logrando ~ 0,6 mg/vial después de 18 h de secado. Este resultado soporta que aumentar el tiempo de mantenimiento de secado secundario hasta 18 horas puede ser útil en reducir el nivel de disolvente residual. El perfil de datos de liofilización, como se ilustra en la FIG. 34, mostró que la presión de pirani convergió completamente con la presión de la cámara como se mide por un manómetro de capacitancia al final del secado primario, que indica una sublimación completa. Por lo tanto, se recomendó un tiempo de mantenimiento de secado primario de 90 horas para el lote clínico que estaba en el lado conservativo (como se mencionó nates, el liofilizador para el lote clínico es ~ 3X del lote de desarrollo).

En este lote, también se investigó el nivel de disolvente residual de las diferentes localizaciones en la bandeja (centro frente a borde) y diferentes localizaciones en el anaquel (anaquel del centro e inferior solo, los tres anaqueles superiores colapsaron debido al posicionamiento del ladrón). Los viales centrales contuvieron un nivel ligeramente mayor de disolvente residual que los viales del borde debido a que los viales del borde reciben, en general, más radiación de calor de la puerta y las paredes del liofilizador. En general, el nivel de disolvente residual no varió mucho con las localizaciones de los viales en la cámara de liofilización. Esto mostró que la localización de muestreo no era la causa probable de los niveles variables de disolvente residual observados para lotes anteriores.

Lote del 3° aumento de escala:

El tercer y el último aumento de escala era un lote de confirmación en la escala de lotes de 30 l con las mismas composiciones de formulación y parámetros de proceso que el lote 4-F1. El lote se preparó en condición de biocarga controlada y se usó para soportar el estudio de estabilidad de ICH posteriormente. Los resultados de la prueba de liberación de lotes se muestran en la Tabla 41.

Tabla 41: Caracterización de medicamentos del lote de aumento de escala

Se cribaron formulaciones adicionales variando la carga de fármaco, el tamaño del vial, la concentración de fármaco y la concentración de Kleptose en varias series de ensayo de liofilización. Todas las formulaciones probadas mostraron atributos de calidad de producto aceptables como se muestra en la Tabla 42.

Tabla 42

Ejemplo 11: Evaluación de la estabilidad de formulaciones

Las formulaciones seleccionadas (la y Ib) se proporcionan en la Tabla 43 que sigue:

Tabla 43: Composiciones de las formulaciones Ia y Ib

Se evaluaron adicionalmente las formulaciones Ia y Ib para 1) estabilidad física y química de medicamentos terminados, 2) estabilidad en uso del medicamento tras la reconstitución, y 3) estudios de compatibilidad de materiales durante la administración. Aquí el objetivo era tener un mínimo de estabilidad de 12 meses en almacén para el medicamento. Para la disolución de fármaco tras la reconstitución, se deseó un mínimo de estabilidad de 8 horas para permitir a los profesionales clínicos un tiempo de preparación suficiente antes de la administración a los pacientes. Además, se espera que esta disolución reconstituida tras la dilución (en caso necesario) tenga estabilidad química y física aceptable con material de contacto tal como jeringas, tubos IV, bolsas de infusión, heparina, filtros en línea, etc., durante el periodo de administración.

Estabilidad de medicamentos terminados

Se evaluó la estabilidad del medicamento de la formulación Ia y los resultados de la estabilidad a 1 meses y 3 meses se muestran en la Tabla 44. Los medicamentos siguieron siendo estables sin cambios importantes en el aspecto, el ensayo y las impurezas, y la reconstitución después de 3 meses de almacenamiento en condición acelerada a 40 °C/75 % de HR. Se considera que este resultado soporta una estabilidad en almacén de hasta 12 meses en condicionales ambientales para la formulación Ia.

Tabla 44: Estabilidad del fármaco de la formulación Ia

Similarmente, se evaluó la estabilidad del medicamento de la formulación Ib. Como se muestra en la Tabla 45, no se observaron cambios importantes en el aspecto, ensayo e impurezas, y la reconstitución después de un mes de almacenamiento en condición acelerada a 40 °C/75 % de HR.

Tabla 45: Estabilidad del medicamento de la formulación Ib

Como la estabilidad del medicamento de la formulación Ia se estableció antes que la de la formulación Ib, se puso en marcha un programa de evaluación de la estabilidad acelerada (ASAP) para comparar la formulación Ib con la formulación Ia. El estudio se realizó intencionadamente en viales abiertos en varias condiciones de temperatura alta / baja humedad durante un corto periodo de tiempo para predecir el potencial de degradación y la sensibilidad a la temperatura/humedad de cada formulación. Los resultados del ensayo y de impurezas se muestran en la Tabla 46. El porcentaje de impurezas aumentó al aumentar la temperatura, la humedad y el tiempo de almacenamiento según lo previsto. En general, las formulaciones Ia y Ib mostraron un perfil de degradación muy similar para todas las condiciones probadas. Solo en la condición más estresante de 80 °C/21 % de HR, la formulación Ib mostró una degradación ligeramente mayor (5 %) que la formulación Ia (3 %) en el momento de tiempo de 7 días. Después se confirmó por espectrómetro de masas que todos los degradantes resultaron de la degradación por hidrólisis y no estuvo implicado ningún mecanismo de degradación desconocido. Basándose en el resultado de ASAP, se llegó a la conclusión de que la formulación Ib tenía estabilidad del medicamento comparable a la de la formulación Ia. Por lo tanto, se espera que la formulación Ib tenga la misma estabilidad en almacén y la misma condición de almacenamiento que la formulación Ia.

Tabla 46: Resultados de la estabilidad de ASAP de las formulaciones Ia y Ib

Estabilidad en uso de disoluciones reconstituidas

Se evaluaron ampliamente las estabilidades en uso de las disoluciones reconstituidas en los viales de producto, así como en jeringas, líneas IV y bolsas IV. Para ambas formulaciones la y Ib, se encontró que la disolución era físicamente y químicamente estable en los viales de producto durante hasta 8 horas en condicionales ambientales y a 5 °C. Además, la disolución reconstituida demostró estabilidad química y física aceptable en jeringas, tubos IV y bolsas de infusión sin problemas de compatibilidad con heparina, diluyente o filtros en línea durante el periodo de administración de dosis simuladas.

Se realizó un estudio de estabilidad adicional en la disolución reconstituida en viales de producto para ambas formulaciones Ia y Ib para entender el riesgo de estabilidad física de la disolución. Los viales de ambas formulaciones se almacenaron a 5 °C y se probaron el ensayo/impurezas relacionadas en diferentes momentos de tiempo. Los datos de 3 meses no muestran un cambio importante en el ensayo para todas las muestras probadas (Tabla 47). La degradación total siguió siendo inferior al 1 % para ambas formulaciones Ia y Ib después de 55 días de almacenamiento para las disoluciones refrigeradas. Con los dos degradantes de hidrólisis creciendo con el tiempo, la formulación Ia mostró impureza total > 1 % más allá de 62 días, mientras que la formulación Ib, debido al bajo pH de su disolución reconstituida, todavía mantuvo su impureza total inferior al 1 % hasta 96 días. Estos resultados muestran un bajo riesgo de precipitación de fármaco en las disoluciones reconstituidas de formulaciones Ia y Ib basadas en los datos.

Tabla 47: Estabilidad de la disolución reconstituida en viales a 5 °C (formulaciones Ia y Ib)

Ejemplo 12: Procedimientos de proceso de formulaciones Ia y Ib

Una descripción detallada del procedimiento de proceso de la formulación Ia es del siguiente modo:

Incorporación mediante mezclado: se disuelve ácido cítrico, citrato de sodio e hidroxipropil-beta-ciclodextrina (Kleptose®) en agua para inyectables (WFI) en un recipiente de tamaño apropiado (recipiente 1). El compuesto 1 se disuelve en sulfóxido de dimetilo (DMSO) en un recipiente separado (recipiente 2). Esta disolución de premezcla de compuesto 1-DMSO se añade entonces al recipiente 1 a través de una pipeta electrónica o una bomba peristáltica a una tasa constante (~ 50 pl por adición cada 10 segundos) mientras que la disolución en el recipiente 1 se mezcla con buen vórtex. La disolución se inspecciona visualmente para estar seguros de que no están presentes partículas sin disolver en el recipiente 1. Tras la mezcla, el peso del lote se ajusta al peso objetivo con WFI.

Filtración: la disolución a granel se filtra entonces usando dos filtros estériles de 0,2 pm en serie. Antes de esta etapa, la disolución a granel puede ser opcionalmente prefiltrada usando un filtro estéril de 0,45 pm o 0,2 pm.

Llenado aséptico, liofilización y tapado de viales: el envasado aséptico se realiza en un vial de 20 ml con un volumen de llenado objetivo de 8,40 ml (con 5 % de sobrellenado). Entonces se ponen parcialmente los tapones de liofilización (hasta la primera muesca) en cada vial lleno. Entonces se carga el liofilizador y se realiza el ciclo de liofilización (Tabla 13). Después de completarse la liofilización, los viales se tapan a presión reducida en una atmósfera de nitrógeno y se cierran.

El diagrama de flujo del proceso de formulación la se ilustra en la FIG. 35 y los parámetros del proceso de liofilización de la formulación la se muestran en la Tabla 48.

Tabla 48: Parámetros del ciclo de liofilización de la formulación la

Una descripción detallada de los procedimientos de proceso de la formulación Ib es del siguiente modo:

Incorporación mediante mezclado: se disuelve hidroxipropil-beta-ciclodextrina (Kleptose®) en agua para inyectables (WFI) en un recipiente de tamaño apropiado (recipiente 1). El compuesto 1 se disuelve en ácido fórmico (Fa ) en un recipiente separado (recipiente 2). Esta disolución de premezcla del compuesto 1-FA se añade entonces al recipiente 1 a través de una pipeta electrónica o una bomba peristáltica a una tasa constante (~ 50 pl por adición cada 10 segundos) mientras que la disolución en el recipiente 1 se mezcla con buen vórtex. La disolución se inspecciona visualmente para estar seguros de que no están presentes partículas sin disolver en el recipiente 1. Tras la mezcla, el peso del lote se ajusta al peso objetivo con WFI.

Filtración: la disolución a granel se filtra entonces usando dos filtros estériles de 0,2 pm en serie. Antes de esta etapa, la disolución a granel puede ser opcionalmente prefiltrada usando un filtro estéril de 0,45 pm o 0,2 pm.

Llenado aséptico, liofilización y tapado de viales: el envasado aséptico se realiza en un vial de 20 ml con un peso de llenado objetivo de 8,0 ml (sin sobrellenado). Entonces se ponen parcialmente los tapones de liofilización (hasta la primera muesca) en cada vial lleno. Entonces se carga el liofilizador y se realiza el ciclo de liofilización. Después de completarse la liofilización, los viales se tapan a presión reducida en una atmósfera de nitrógeno y se cierran.

El diagrama de flujo del proceso de formulación Ib se ilustra en la FIG. 36 y los parámetros del proceso de MofiMzación de la formulación Ib se muestran en la Tabla 49.

Tabla 49: Parámetros del ciclo de liofilización de la formulación Ib

Ejemplo 13: Evaluación del riesgo de supersaturación de la formulación Ib

En la formulación Ib descrita en el Ejemplo 11, la disolución a granel y la disolución reconstituida están supersaturadas aproximadamente 2 veces por encima de su solubilidad en equilibrio. Se realizaron dos estudios para evaluar los riesgos de supersaturación de las formulaciones basadas en Kleptose. El objetivo del primer estudio es determinar la solubilidad en equilibrio del compuesto 1 en disoluciones de Kleptose de diferentes concentraciones usando tanto los enfoque 'de arriba abajo' como 'de abajo a arriba'. Está previsto que el segundo estudio evalúe la cinética de la precipitación de fármacos en la formulación Ib.

Determinación de la solubilidad en equilibrio del compuesto 1 en disoluciones de Kleptose

Se empleó un enfoque 'de abajo a arriba' para medir la solubilidad en equilibrio del compuesto 1 en disoluciones de Kleptose. En este experimento, se prepararon diez disoluciones disolviendo Kleptose y ácido fórmico en WFI. La concentración de Kleptose en las diez disoluciones varió desde 30 mg/ml hasta 250 mg/ml, mientras que la concentración de ácido fórmico se mantuvo constante a 1,65 mg/ml como se usa en la disolución a granel de la formulación Ib. El exceso del compuesto 1 de aproximadamente 25 mg se añadió a cada una de las disoluciones de 100 ml preparadas y se mezcló durante 48 o 72 horas a 25 °C. Entonces, se sacó una muestra de cada disolución y se centrifugó para la prueba del ensayo. La solubilidad del compuesto 1 en cada vehículo se lista en la Tabla 50.

Tabla 50: Solubilidad del compuesto 1 en disoluciones de Kleptose

Se encontró que la solubilidad del compuesto 1 aumentó linealmente con la concentración de Kleptose, como se muestra en la FIG. 37.

Se llevó a cabo otro experimento de solubilidad usando un enfoque 'de arriba a abajo', es decir, añadiendo el compuesto 1 cristalino a una disolución supersaturada para inducir la precipitación del compuesto 1 hasta que la disolución alcance la solubilidad en equilibrio. En el experimento, se prepararon seis formulaciones en disolución añadiendo 100 mg/ml del compuesto 1 en la premezcla de ácido fórmico a una disolución de Kleptose para preparar la concentración de fármaco final de aproximadamente 125 pg/ml. La concentración de Kleptose varió de 30 a 100 mg/ml. Entonces se añadió 1 ml de la suspensión del compuesto 1 en agua que contenía 6,25 mg del compuesto 1 (representó aproximadamente el 10 % del compuesto 1 total en disolución) a 500 ml del compuesto 1/ disolución de Kleptose y se mezcló continuamente durante 9 días a 25 °C. El ensayo de la disolución se probó al final de los 9 días y los resultados se muestran en la Tabla 51. A diferencia, el ensayo de la misma disolución sin adición de la suspensión del compuesto 1 también se monitorizó durante hasta 4 semanas a 25 °C. Los resultados del ensayo al final de las 4 semanas se muestran en la Tabla 51.

Tabla 51 Solubilidad del compuesto 1 en el enfoque 'de abajo a arriba'

Los resultados mostraron que las seis disoluciones, excepto una con 30 mg/ml de Kleptose, siguieron siendo relativamente estables a 25 °C sin cambio en el ensayo después de 4 semanas sin la adición de cristales del compuesto 1 en las disoluciones. Cuando el material del compuesto 1 cristalino se añadió a la disolución, en las disoluciones con 30-80 mg/ml de Kleptose se observó una obvia precipitación del fármaco. Cuanto más baja fuera la concentración de Kleptose en la disolución, más reducción de ensayo ocurrió después de 9 días de mezcla. No hubo cambio del ensayo en las disoluciones con 90-100 mg/ml de Kleptose incluso en presencia de cristales del compuesto 1. Se confirmó que el compuesto 1 precipitado era la forma B en lugar de la forma C del material de partida por XRPD (datos no mostrados). Sugiere que la solubilidad medida a partir del enfoque 'de arriba a abajo' era la de la forma B. Por lo tanto, los valores fueron más altos que la solubilidad de la forma C obtenida del enfoque 'de abajo a arriba'. Puede requerir más tiempo que el enfoque 'de arriba a abajo' para alcanzar la solubilidad en equilibrio de la forma de compuesto 1 más termodinámicamente estable (forma C).

Cinética de la precipitación del fármaco en disoluciones supersaturadas de Kleptose

En el primer estudio de precipitación, se prepararon cuatro formulaciones en disolución en una concentración de Kleptose de 100 mg/ml. La concentración de fármaco del compuesto 1 varió desde 50 pg/ml hasta 480 pg/ml en cada formulación. La misma cantidad de material de compuesto 1 cristalino se añadió a cada formulación (1,25 mg del compuesto 1 a 500 g de disolución) tras la finalización de la incorporación mediante mezclado. Entonces las disoluciones se almacenaron en tres condiciones: (1) en condicionales ambientales con agitación suave; (2) en condicionales ambientales sin mezcla; (3) a 2-8 °C sin mezcla. Se probó el ensayo de cada disolución a t=48 horas. Los resultados se muestran en la Tabla 52.

Tabla 52: Precipitación de fármaco del compuesto 1 en disoluciones de 100 mg/ml de Kleptose

La formulación F1 siguió siendo estable en las tres condiciones de almacenamiento sin cambio del ensayo en 48 horas. La formulación F2 finalizó con una concentración de aproximadamente 148 pg/ml, con una reducción del ensayo del 2-3 % desde t=0 después de 48 horas de almacenamiento para las tres condiciones de almacenamiento. La formulación F3 y F4, a pesar de una menor relación de la siembra del compuesto 1, mostró una significativa reducción del ensayo desde el inicio. La mezcla aceleró la cinética de precipitación del fármaco en ambas formulaciones. Se llegó a la conclusión de que los riesgos de precipitación del fármaco en disoluciones de 100 mg/ml de Kleptose aumentaron a una mayor relación de supersaturación y cuando la mezcla se aplicó a la disolución.

En el segundo estudio de precipitación, se prepararon tres formulaciones en disolución con la concentración de Kleptose del 10 %, 15 % y 20 % en cada formulación, respectivamente. La concentración de fármaco correspondiente de cada formulación fue 300, 400 y 500 pg/ml de manera que la relación de supersaturación fuera aproximadamente 5x para las tres formulaciones. Después de la adición de 2 % de las semillas de cristal del compuesto 1, cada formulación de disolución se almacenó en dos condiciones diferentes: (1) en condicionales ambientales con agitación suave; (2) a 2-8 °C sin mezcla. El ensayo de todas las disoluciones se monitorizó durante hasta 34 días. En el estudio, los mismos experimentos se repitieron dos veces para evaluar la reproducibilidad de los resultados. Los resultados del ensayo se muestran en la FIG. 38 y la FIG. 39.

Como se muestra en la FIG. 38, la precipitación del fármaco fue más lenta al aumentar la concentración de Kleptose. Para la formulación F1 con 10 % de Kleptose, la concentración de fármaco alcanzó una meseta en aproximadamente 98 pg/ml después de 7 días a temperatura ambiente. La formulación F2 con 15 % de Kleptose pareció alcanzar una concentración meseta de 184 pg/ml después de 34 días, mientras que la concentración de la formulación F3 con 20 % de Kleptose disminuyó hasta 290 pg/ml y siguió una tendencia descendente. Cuando la disolución supersaturada se almacenó a 2-8 °C sin mezcla, la tasa de precipitación del fármaco fue incluso más lenta, como se muestra en la FIG.

39. Los valores del ensayo de las tres formulaciones después de 34 días fueron 97 pg/ml, 133 pg/ml y 385 pg/ml, respectivamente.

Basándose en estos dos estudios de precipitación más el realizado en el estudio de solubilidad 'de arriba a abajo', la solubilidad aparente del compuesto 1 en una disolución al 10 % de Kleptose a temperatura ambiente fue 135 pg/ml después de 2 días, 115 pg/ml después de 9 días y 98 pg/ml después de 34 días. Se indicó que la formulación Ib que consiste en 10 % de Kleptose y una concentración de fármaco de 125 pg/ml, aunque en un estado supersaturado, puede experimentar una cinética de precipitación muy baja para alcanzar su solubilidad en equilibrio de días a semanas, debido al efecto de estabilización de Kleptose como agente complejante.

Estabilidad física de la disolución a granel de la formulación Ib y disolución reconstituida

En este estudio, se prepararon la disolución a granel (10 % de Kleptose, 125 pg/ml del compuesto 1) y la disolución reconstituida (16 % de Kleptose, 200 pg/ml del compuesto 1) para la formulación Ib y entonces se expusieron a 0,5 % de semillas del compuesto 1. Ambas disoluciones se almacenaron a temperatura ambiente con mezcla continua durante 48 horas. Los ensayos de las disoluciones se monitorizaron en diferentes momentos de tiempo. Posteriormente, el experimento se repitió con 2,5 % de semillas del compuesto 1. Los resultados de los dos experimentos se muestran en la Tabla 53.

Tabla 53: Ensayo de la disolución a granel y disolución reconstituida para la formulación Ib con las semillas del compuesto 1

Se mostró que incluso en presencia de semillas del compuesto 1, tanto la disolución a granel como la disolución reconstituida siguieron siendo relativamente estables a temperatura ambiente en 48 horas, sin tendencia obvia de reducción del ensayo con el tiempo, independientemente de las cantidades de semillas del compuesto 1 (0,5 % o 2,5 %) añadidas a la formulación. El cambio del ensayo desde T0 es del 3 % o menos, perfectamente dentro de las especificaciones del ensayo del 90-110 %. Implicó que los riesgos de precipitación de fármaco de la formulación Ib durante la fabricación y la administración en uso en el paciente fueron bastante bajos, especialmente cuando las disoluciones estuvieron esencialmente libres de participantes extraños en una condición aséptica bien controlada.

Ejemplo 14: Desarrollo de formulación de la formulación Ic

Definición del espacio de diseño de la formulación

Hay dos limitaciones principales en el diseño de la formulación ICP: (1) la relación de supersaturación de la formulación, que afecta a la estabilidad del medicamento; (2) la cantidad total de ingesta de Kleptose en la dosis final, que afecta al perfil de seguridad del medicamento. La relación de supersaturación y la cantidad total de ingesta de Kleptose se pueden expresar en función de la concentración de fármaco, concentración de Kleptose y la dosis de fármaco total en las siguientes ecuaciones:

C o n c e n trac ió n d e f á r m a c o

R e la c ió n d e s u p e r s a t u a c ió n = -----, , , ,—------------—

S o lu b il id a d en e q u ilib-- r- i-o--

D o s is d e f á r m a c o to ta l

I n g e s t a t o ta l d e K le p to se = -----------------;— -——--------- x C o n c e n trac ió n d e K le p to se C o n c e n trac ió n d e f á r m a c o

Basándose en los datos de solubilidad mostrados en la FIG. 40, la solubilidad en equilibrio se correlaciona linealmente con la concentración de Kleptose y se puede calcular por:

/m g \ (™ -9\

S o lu b il id a d en e q u ilib r io ( — - ) = 0,0007 x C o n c e n trac ió n d e K le p to se ( — - ) 0,0014

Siempre que el volumen de llenado máximo sea 50 ml en un vial de 100 cm3 y se pueda administrar un máximo de 2 viales a un paciente, la interdependencia entre la relación de supersaturación, la ingesta total de Kleptose y la máxima dosis a administrar se representó en la FIG. 40.

Preferentemente, la relación de supersaturación de la formulación debe ser inferior a 1 (es decir, no supersaturada). La ingesta de Kleptose debe ser inferior a su umbral de exposición diaria permitida (PDE) de 300 mg/kg/día. Una evaluación de toxicología basada en un medicamento IV comercial indicó una dosis diaria de Kleptose inferior a 8 g/día. La dosis máxima que se puede administrar dentro del espacio de diseño de la formulación fue inferior a 6 mg. Como la dosis superior de la formulación de producto comercial previsto (ICP) se fijó en 3,6 mg/día, se puede identificar una formulación basada en Kleptose dentro del espacio de diseño para equilibrar entre el nivel de supersaturación y la ingesta de Kleptose total.

Evaluación de formulaciones prototipo

Se fabricaron una serie de lotes de viabilidad a escala de laboratorio (3-15 l) con concentración variada de fármaco, concentración de Kleptose, volumen de llenado y tamaño de vial. Se adoptó el mismo ciclo de liofilización que se usa en la formulación Ib para todos los lotes de viabilidad. El estudio tiene dos objetivos: (1) demostrar la viabilidad de la administración de una dosis que varía desde 1 mg hasta 6 mg en una formulación basada en Kleptose; (2) evaluar el impacto de la presentación de la formulación (volumen de llenado y tamaño del vial) sobre los atributos críticos de la calidad del medicamento, tales como el aspecto de la torta, el tiempo de reconstitución y el nivel de ácido fórmico residual. Las composiciones de formulación se muestran en la Tabla 54.

Tabla 54: Formulaciones prototipo evaluadas en los lotes de factibilidad

Se probaron las muestras liofilizadas de cada formulación con respecto al aspecto de la torta, el ensayo y las impurezas, el disolvente residual y el tiempo de reconstitución. Los resultados de las pruebas se resumen en la Tabla 55. Como los componentes de formulación y el proceso de fabricación de las formulaciones prototipo son muy similares a los de la formulación Ib, cabía esperar que los perfiles de estabilidad de los medicamentos liofilizados fueran comparables a los de la formulación Ib. Por lo tanto, la evaluación de la estabilidad no se realizó en estos lotes de factibilidad.

Tabla 55: Resultados de pruebas de formulaciones prototipo en los lotes de viabilidad

Las veinticinco formulaciones prototipo cubrieron un amplio intervalo de carga de fármaco de 1-6,25 mg/vial. La concentración de Kleptose varió desde el 10 % hasta el 20 %, la concentración de fármaco varió desde 0,075 mg/ml hasta 0,125 mg/ml y el volumen de llenado varió desde 8 ml hasta 50 ml en diferentes tamaños de vial. Todos los viales liofilizados mostraron aspectos de torta elegante y valores de ensayo/impurezas aceptables. El tiempo de reconstitución fue inferior a 5 minutos para todas las formulaciones prototipo. Las formulaciones con 20 % de Kleptose tendieron a tener un tiempo de reconstitución más largo que aquellas con 10 % o 15 % de Kleptose, que se puede atribuir al aumento de la viscosidad de la disolución reconstituida a una mayor concentración de Kleptose. En general, la formulación basada en Kleptose demostró su robustez, a pesar de las diferencias en la concentración de Kleptose, concentración de fármaco, volumen de llenado y tamaño del vial.

El nivel de ácido fórmico residual varió en un amplio intervalo en las diferentes formulaciones prototipo. Se encontró que la eficiencia de retirada del ácido fórmico residual guardaba una correlación negativa con la cantidad total de Kleptose en el vial. Como se muestra en la FIG. 41, el porcentaje de ácido fórmico retirado por el mismo ciclo de liofilización disminuyó al aumentar la cantidad de Kleptose. Se puede explicar por la tendencia del disolvente de atrapar Kleptose en su compleja cavidad.

También se investigó el impacto del espesor de la torta sobre el nivel de ácido fórmico residual. Como se muestra en la FIG. 42, el nivel de ácido fórmico residual era independiente de la altura de llenado dada la misma cantidad de Kleptose en el vial. Indica que el aumento de la resistencia a la transferencia de masa en una torta liofilizada más gruesa puede tener un impacto mínimo sobre el nivel de ácido fórmico residual. Más bien, el nivel de ácido fórmico residual aumentó al aumentar la cantidad de Kleptose, que está de acuerdo con la tendencia observada en la FIG. 41.

Se conoce que el nivel de ácido fórmico residual en la formulación Ib es aproximadamente 0,9 mg/vial para 1 mg de dosis en la presentación de vial de 20 cm3 y la especificación de liberación del ácido fórmico residual es NMT 2,5 mg por mg de API de manera que la ingesta diaria total de ácido fórmico se puede mantener por debajo del límite de ICH de 50 mg/día para una dosis superior de 20 mg. Como una comparación con la formulación Ib, el ácido fórmico residual por mg del compuesto 1 de las 25 formulaciones prototipo se representa en función de la concentración de Kleptose en la FIG. 43. Teniendo en cuenta las diversas cargas de fármaco y las presentaciones de tamaño del vial, el nivel de ácido fórmico residual es 1,0-1,8 mg/mg del compuesto 1 en una concentración de Kleptose de 100 mg/ml (misma que la formulación Ib), 2,1-3,8 mg/mg del compuesto 1 en una concentración de Kleptose de 150 mg/ml y 3,9-4,9 mg/mg del compuesto 1 en una concentración de Kleptose de 200 mg/ml. Por lo tanto, el ácido fórmico residual de las formulaciones prototipo, independientemente de la concentración de Kleptose, debe estar muy por debajo del umbral de ICH para una dosis superior de 3,6 mg.

Selección de la formulación final

Como todas las formulaciones prototipo se consideraron viables con ensayo e impureza aceptable, nivel de disolvente residual y tiempo de reconstitución, el equipo de DPD seleccionó una formulación en la que 0,08 mg/ml del compuesto 1 se disolvieron en 150 mg/ml de Kleptose con la ayuda de ácido fórmico. Con concentración reducida de fármaco y elevada concentración de Kleptose, esta nueva formulación convirtió la solución a granel en subsaturada y disolución reconstituida. Como resultado, elimina los posibles riesgos de precipitación de fármaco planteados en la formulación Ib. La formulación se refiere como la formulación Ic. Alternativamente, también se puede considerar una formulación en la que 0,08 mg/ml de API se disolvieron en 100 mg/ml de Kleptose con la ayuda de ácido fórmico. Esta formulación se refiere como la formulación Ibm, redujo la relación de supersaturación de la formulación Ib de 2x a 1x, aliviando así los posibles riesgos de precipitación de fármaco. Las composiciones de formulación de la formulación Ic se enumeran en la Tabla 56 en comparación con la formulación Ibm.

Tabla 56: Composición de la formulación Ic en comparación con la formulación Ibm

Ejemplo 15: Evaluación de la estabilidad de la formulación

La evaluación de la estabilidad de la formulación contiene tres partes: (1) la estabilidad física y química de la disolución a granel, que determina el tiempo de mantenimiento máximo en el proceso de fabricación; (2) la prueba de estabilidad de ICH de la torta liofilizada, que determina la estabilidad en almacén del medicamento terminado; (3) la estabilidad física y química de la disolución de fármaco reconstituido en el vial y en la bolsa IV, que determina el tiempo de uso para la administración de fármaco a un paciente.

Estabilidad de las disoluciones a granel

La disolución a granel de la formulación Ic consistió en 150 mg/ml de Kleptose, 0,08 mg/ml del compuesto 1 y 0,98 mg/ml de ácido fórmico. La disolución a granel tuvo un pH de 2,8, y la concentración de fármaco de la disolución a granel estuvo por debajo de su solubilidad en equilibrio, de manera que se eliminaron los riesgos de supersaturación integrados en la formulación Ib en la formulación Ic. Por lo tanto, cabía esperar que la estabilidad física y química de la disolución a granel Ic fuera superior a la de la formulación Ib. El estudio del 'tiempo de mantenimiento' de la disolución a granel se realizó en el lote modificado después y confirmó una estabilidad en disolución de hasta 24 horas en condicionales ambientales.

Estabilidad de medicamentos terminados

La estabilidad del medicamento de la formulación Ic se evaluó usando los viales de un lote de desarrollo. Los resultados de estabilidad se muestran en la Tabla 57. Los medicamentos siguieron siendo estables sin cambios importantes en el aspecto, el ensayo y las impurezas, y el tiempo de reconstitución después de 6 meses de almacenamiento en condición de tanto 25 °C/60 % de HR como de 40 °C/75 % de HR. Este resultado se usa para soportar la estabilidad en almacén de hasta 18 meses en condicionales ambientales para la formulación Ic.

Tabla 57: Estabilidad del medicamento de la formulación Ic

Ejemplo 16: Optimización del proceso de liofilización de la formulación Ic

I. Caracterización térmica de la formulación Ic

El análisis térmico se realizó con el microscopio de liofilización (FDM) y la calorimetría diferencial de barrido (LT-DSC) a baja temperatura en las formulaciones Ib y Ic. La formulación Ic tuvo una concentración de fármaco de 0,125 mg/ml. Un resumen de los resultados se muestra en la Tabla 58. La formulación Ic presentó una temperatura de colapso y Tg' similares a la formulación Ib. Basándose en este resultado, la temperatura de producto recomendada durante el secado primario del proceso de liofilización es -11 °C a -12 °C, 2-3 grados por debajo de la temperatura de colapso.

Tabla 58: Temperatura de colapso y Tg' de las formulaciones Ib y Ic:

II. Modelado de la liofilización

En lugar de realizar experimentos de liofilización de ensayo y error, se utilizó en primer lugar un modelo de liofilización desarrollado por el profesor Michael Pikal para predecir los perfiles de temperatura de producto en diferentes condiciones de secado. Se usaron los datos de termopares existentes recogidos de tres lotes de desarrollo de formulación Ib como entrada del modelo para inferir el coeficiente de resistencia a la transferencia de masa (Rp) en función del espesor de capa seca (Lseca), así como el coeficiente de transferencia de calor (kv). Entonces, los coeficientes R0, A1 y A2 derivaron del ajuste de curva basado en la ecuación que sigue. Los parámetros calculados se muestran en la Tabla 59.

Tabla 59: Coeficiente de transferencia de calor calculado y resistencia del producto

Debido a Tg' y temperatura de colapso similares entre las formulaciones Ib y Ic, los valores calculados de Rp y Kv de la Tabla 59 se aplicaron en la predicción del modelo de la formulación Gen2c, junto con otros parámetros conocidos como se lista en la Tabla 60.

Como los viales del centro tienen menor Kv que los viales de los bordes (4,04 * 10-4 frente a 9,49 * 10-4), los viales del centro requieren más tiempo de secado que los viales de los bordes, mientras que los viales de los bordes tienden a tener mayor temperatura de producto que los viales del centro, dando como resultado un mayor riesgo de colapso de la torta. Por lo tanto, se usó Kv de los viales del centro para estimar el tiempo de secado y se usó Kv de los viales de los bordes para estimar la temperatura del producto en diferentes condiciones de temperatura en anaquel (Ts) en el peor de los casos en el modelado. Como se muestra en la Tabla 61, a una temperatura en anaquel de 10 °C, la temperatura de producto predicha es aproximadamente -12 °C, próxima a la temperatura de producto recomendada del estudio FDM anterior. En la misma condición en anaquel, el tiempo de secado primario predicho es aproximadamente 20 horas para dosis de 1,0 mg en un vial de 20 cm3, a diferencia de 70 horas en el ciclo de liofilización de la formulación Ib.

Tabla 60: Parámetros de entrada clave usados en el modelado de la liofilización

Tabla 61: Tiempo de secado primario y temperatura del producto predichos

Ejemplo 17: Desarrollo del ciclo de liofilización para el lote de 3 l

Basándose en los resultados del modelado, se fabricó un lote de liofilización de 3 l de la formulación Ic usando un liofilizador a escala de laboratorio (modelo SP Virtis Genesis 25 EL). Los medicamentos fueron 2 mg/vial de carga de fármaco, o 25 ml de llenado en un vial de 50 cm3. Los parámetros del ciclo de liofilización se muestran en la Tabla 62. La temperatura en anaquel y la presión de la cámara en la etapa de secado primario se establecieron en 10 °C y 250 micrómetros, respectivamente.

Tabla 62: Parámetros del ciclo de liofilización para el lote 1 a escala de laboratorio

Se pusieron cuatro termopares en dos viales del centro y dos viales del borde, respectivamente. El perfil de temperatura del producto para el lote 1 a escala de laboratorio se muestra en la FIG. 45. Los dos viales del borde presentaron una temperatura de producto de — 11 °C a diferencia de — 14 °C de los dos viales del centro durante el secado primario. El 'punto de rotura', o el momento de tiempo cuando la temperatura del producto empezó a aproximarse a la temperatura del anaquel, fue 24 horas para los viales del borde y 35 horas para los viales del centro. No se observó colapso de la torta al final del ciclo de liofilización. Este resultado experimental concordó bien con los resultados del modelado predictivo mostrados en la Tabla 61.

Posteriormente, para tener un mejor entendimiento del cambio en la temperatura de producto en función de la temperatura del anaquel, los mismos viales llenos se sometieron a otro ciclo de liofilización, en el que la temperatura del anaquel del secado primario aumentó escalonadamente desde 5 °C hasta 14 °C. El tiempo de mantenimiento de cada etapa fue 2-6 horas y la temperatura aumentó 3 °C en cada etapa. Entonces se redujo la temperatura del anaquel hasta 10 °C y se mantuvo durante 30 horas. Los parámetros del ciclo de liofilización se muestran en la Tabla 63.

Tabla 63: Parámetros del ciclo de liofilización para el lote 2 a escala de laboratorio

Se colocaron tres termopares en un vial del borde, un vial del centro y un vial entre el borde y el centro, respectivamente. El perfil de temperatura del producto para el lote 2 a escala de laboratorio se muestra en la FIG. 46. Las temperaturas de producto medidas por cada termopar en cada condición de temperatura del anaquel se resumieron en la Tabla 64¡Error! Fuente de referencia no encontrada. Se encontró que la temperatura del producto aumentó 1 °C para cada aumento incremental de 3 °C en la temperatura del anaquel. Cuando la temperatura del anaquel alcanzó 11 °C, los viales en el medio y el centro todavía tenían temperatura de producto inferior a -11 °C, mientras que el vial del borde mostró una temperatura de producto de -9,6 °C, que superaba la temperatura de colapso. Sin embargo, no se observaron signos de colapso de la torta en ninguno de los viales liofilizados, que incluyen los viales del borde. Cuando la temperatura del anaquel aumentó hasta 14 °C, la temperatura del producto ya había superado el 'punto de rotura', que implica que el secado primario es próximo a su finalización. Por lo tanto, la temperatura elevada no causó colapso de la torta.

Tabla 64: Parámetros del ciclo de liofilización para el lote 2 a escala de laboratorio

Combinando los resultados de las dos series de liofilización, se determinó que la temperatura recomendada del anaquel y la presión en la cámara de secado primario era 10 °C y 250 micrómetros, respectivamente.

Ejemplo 18: Desarrollo del ciclo de liofilización para lotes de aumento de escala

Tras las dos series de ensayos, se fabricaron tres lotes de 15 l (Ic-1, Ic-2 y Ic-3) de formulación Ic usando un liofilizador de laboratorio (modelo: Millrock Magnum®). Cada lote incluyó dos sublotes, una para una dosis de 1 mg/vial y el otro para una dosis de 4 mg/vial. El lote Ic-1 y Ic-2 usaron un vial de 20 cm3 para la dosis de 1,0 mg y un vial de 100 cm3 para la dosis de 4 mg. Como se observó un pequeño porcentaje de rotura de viales en el sublote de dosis de 1,0 mg en ambos lotes y se atribuyó al volumen de llenado relativamente alto en el vial de 20 cm3, se usó en su lugar un tamaño de vial más grande de 50 cm3 para la dosis de 1,0 mg en el lote Ic-3. La composición de formulación y la presentación de cada sublote se muestran en la Tabla 65.

Tabla 65: Presentaciones de la formulación de lotes de desarrollo

Las principales variables que se evaluaron en los tres lotes de desarrollo son: temperatura del anaquel y presión de la cámara de secado primario, así como la temperatura del anaquel y el tiempo de mantenimiento del secado secundario. Las condiciones del ciclo de liofilización de cada lote se resumen en la Tabla 66.

Tabla 66: Parámetros del ciclo de liofilización de lotes de desarrollo

I. Impacto del secado primario sobre la temperatura del producto y el tiempo de ciclo

Los perfiles de temperatura de producto de los tres lotes de desarrollo se muestran en la FIG. 47- FIG. 49. Las características clave, que incluyen la temperatura de producto durante el secado primario y el tiempo para alcanzar el punto final del secado primario, se resumen en la Tabla 67. La temperatura de producto fue -10 °C, -11 °C y -13 °C, respectivamente, en correspondencia con una temperatura del anaquel de 14 °C, 10 °C y 8 °C, que estuvieron de acuerdo con los resultados de los lotes previos descritos en el Ejemplo 37. No se observó colapso de la torta en ninguno de los tres lotes, que incluyen aquél con una temperatura del anaquel de 14 °C que tiene una temperatura de producto correspondiente de -10 °C. Esto es una evidencia que muestra la robustez del proceso de la formulación Ic.

Tabla 67: Caracterización de los lotes de desarrollo de liofilización

Hay diferentes enfoques para determinar el punto final del secado primario. La forma más conservativa es mirar el momento de tiempo cuando la curva de presión del medidor de pirani converge completamente con la curva de presión del manómetro de capacitancia, que indica que no sublima más vapor de agua de la torta seca. Una forma alternativa es mirar el momento de tiempo cuando la temperatura de producto se cruza con la temperatura del anaquel, que también indica la finalización de la sublimación. Las únicas advertencias de este último enfoque son que el termopar debe colocarse en la parte inferior del vial y los viales con termopar tienden a tener una temperatura de producto ligeramente mayor que los viales sin. Por lo tanto, siempre se añade un tiempo de secado adicional del 10-30 % del tiempo de secado después de que se alcance la temperatura de cruce como un colchón al final del secado primario. En este estudio, como cada lote contuvo dos sublotes con diferente volumen de llenado y tamaño de vial, el primer enfoque fue incapaz de reflejar el punto final del secado primario para cada sublote, el segundo enfoque se empleó para determinar el tiempo de secado primario de cada sublote individual. Como se muestra en la Tabla 67, en los dos primeros dos lotes, los sublotes Ic-1 -F2 y Ic-2-F2 (dosis de 4 mg) requirieron aproximadamente 1,5 veces el tiempo de secado de los sublotes Ic-1 -F1 y Ic-2-F1 (dosis de 1,0 mg) debido al aumento del espesor de la torta. El lote Ic-2 mostró un tiempo de secado adicional del 20-40 % que el lote Ic-1 debido a una menor temperatura del anaquel. En el lote Ic-3, el tiempo de secado del sublote Ic-3-F1 se acortó hasta 17 horas a diferencia de 27 horas en el lote Ic-1 -F1 a pesar de una menor temperatura del anaquel de 10 °C, principalmente debido al reducido espesor de la torta de 10 mm en un tamaño de vial mayor de 50 cm3 a diferencia de un espesor de torta de 18 mm en un vial de 20 cm3. Basándose en este resultado, la condición de secado primario recomendada es una temperatura del anaquel de 10 °C, una presión de la cámara de 250 micrómetros y un tiempo de mantenimiento de 20 horas para una dosis de 1,0 mg llenada en un vial de 50 cm3

II. Impacto de la condición del ciclo sobre el agua residual

Dos atributos de calidad críticos del medicamento liofilizado final son el contenido de agua y el nivel de disolvente residual. Para evaluar la tasa de retirada de agua y ácido fórmico durante la liofilización, los viales de muestra se sacaron en diferentes momentos de tiempo de la etapa de secado en el lote Ic-1 y Ic-2. El contenido de agua residual de cada muestra se midió por el método de Karl Fisher y los resultados se muestran en la FIG. 50. Las cuatro primeras muestras se sacaron en la etapa de secado primario entre el momento de tiempo cuando se alcanzó la temperatura de cruce y el momento de tiempo cuando terminó el secado primario. Las dos o tres últimas muestras se sacaron en la etapa de secado secundario entre el momento de tiempo cuando el secado secundario duró durante cuatro a seis horas y el fin del secado secundario. Los datos mostraron que para cuando se alcanzó la temperatura de cruce, la humedad residual en la torta liofilizada ya estaba por debajo del 0,2 %. El tiempo de secado primario adicional permitió reducir la humedad residual al 0,06 %. Esto sugirió que la mayor parte de la retirada de agua tuvo lugar durante la etapa de secado primario. En la etapa de secado secundario, el nivel de humedad residual disminuyó adicionalmente hasta el 0,04 % en las primeras cuatro a seis horas y luego alcanzó una meseta. La humedad residual de los medicamentos terminados de ambos lotes terminó estando al mismo nivel del 0,04 % independientemente del tamaño de la torta o la diferencia de temperaturas de secado. Asimismo, en el lote Ic-3, el nivel de humedad residual de los medicamentos terminados fue del 0,03 % para ambos sublotes, a pesar de un tiempo de secado secundario prolongado de 36 horas. En conclusión, un tiempo de secado secundario de 18 horas y una temperatura de secado de 40 °C-60 °C fueron suficientes para la retirada de humedad residual de la formulación Ic.

III. Impacto de la condición del ciclo sobre el ácido fórmico residual

El cambio del ácido fórmico residual con el tiempo de secado también se evaluó sacando viales de muestra en diferentes momentos de tiempo desde el fin del secado primario hasta el fin del secado secundario. Los resultados se muestran en la FIG. 51. El lote Ic-1 y Ic-2 tuvieron ambos un tiempo de secado secundario de 18 horas. Sin embargo, el lote Ic-1 tuvo una mayor temperatura de secado secundario de 60 °C en vez de 40 °C del lote Ic-2. Como resultado, el lote Ic-1 presentó una tasa de retirada de ácido fórmico residual más rápida que el lote Ic-2. El ácido fórmico residual final en Ic-1 fue solo el 60 % de aquél en el lote Ic-2 para ambos sublotes. Por lo tanto, la temperatura de secado secundaria fue un parámetro de proceso crítico con impacto significativo sobre el nivel de disolvente residual del medicamento terminado. El nivel de ácido fórmico residual también varió entre los dos sublotes en el mismo lote de liofilización. En ambos lotes, el sublote F1 (dosis de 1,0 mg) solo mostró el 80 % del nivel de ácido fórmico residual que en el sublote F2 (dosis de 4 mg). No fue sorprendente, debido a que se encontró que el nivel de ácido fórmico residual aumentaba al aumentar la cantidad de Kleptose en el vial de liofilización.

También se observó de los dos primeros lotes que el nivel de ácido fórmico residual no alcanzó una meseta al final del secado secundario de 18 h. Por lo tanto, el secado secundario se amplió hasta 36 horas a 60 °C en el lote Ic-3. Como se muestra en la FIG. 51, el nivel de ácido fórmico residual se redujo desde el 0,15 % hasta el 0,08 % en el sublote F1 cuando el tiempo de secado se duplicó hasta 36 horas. El sublote F2 siguió la misma tendencia. Después de que los viales se descargaran del liofilizador tras la finalización del ciclo de liofilización, algunos viales F1 y F2 se colocaron en una estufa de vacío a 60 °C durante 24 horas adicionales. El ácido fórmico residual empezó a mostrar una meseta en el momento de tiempo de 16 h en la estufa de vacío y alcanzó el nivel más bajo del 0,01 % y 0,03 % para el sublote F1 y F2, respectivamente, al final del secado en estufa de 24 horas.

Según la guía Q3 de ICH, la PDE de ácido fórmico es 50 mg/día como un disolvente de clase 3. Dada una dosis superior de 4 mg/día, el máximo nivel tolerable de ácido fórmico residual es 12,5 mg/mg de API, o 0,6 % p/p del peso de la torta. Basándose en los datos mostrados en la FIG. 51, el nivel de ácido fórmico residual fue inferior al 0,2 % después de 18 horas de secado secundario, muy por debajo del umbral de ICH. Duplicar el tiempo de secado a 36 horas solo proporciona una reducción limitada del ácido fórmico residual desde el 0,2 % hasta aproximadamente el 0,1 %. Por lo tanto, el equipo recomendó un tiempo de secado secundario de 18-24 horas a 60 °C para la formulación Ic de diferentes presentaciones de vial para mantener el nivel de ácido fórmico residual por debajo del 0,4 % p/p. Este nivel de ácido fórmico residual de la formulación Ic fue comparable a la especificación de liberación de NMT del 0,3 % p/p en la formulación Ib.

IV. Impacto de la tasa de congelación sobre el tiempo de ciclo y el ácido fórmico residual

Se informó en alguna bibliografía que la tasa de congelación puede tener un impacto sobre la eficiencia del secado primario y/o secundario debido a los cambios en las morfologías de los cristales de hielo. Por lo tanto, se realizó un estudio para evaluar el efecto de la tasa de congelación sobre el tiempo de secado y el nivel de disolvente residual de los medicamentos terminados. Se fabricaron dos lotes de liofilización de 10 l de formulación Ic. Cada lote de liofilización contuvo tres sublotes, concretamente 1,0 mg en vial de 50 cm3, 2 mg en vial de 50 cm3 y 4 mg en vial de 100 cm3. Las tasas de congelación usadas en los dos lotes de liofilización fueron 0,1 °C/min y 1,0 °C/min, respectivamente, a diferencia de la tasa de congelación de 0,5 °C/min usada en lotes de liofilización previos. Los parámetros del ciclo de liofilización de los dos lotes se describen en la Tabla 68.

Tabla 68: Parámetros del ciclo de liofilización

Como se muestra en la FIG. 52 y FIG. 53, los perfiles de temperatura del producto de los dos lotes fueron comparables entre sí a pesar de la diferencia de tasas de congelación. Las temperaturas del producto y el tiempo de secado primario de todos los sublotes en el punto de 'rotura' se resumen en la Tabla 69. Las temperaturas de 'rotura' del producto fueron similares en los diferentes sublotes. Como era de esperar, el tiempo de 'rotura' aumentó al aumentar la dosis o el tamaño de la torta, y los viales del centro presentaron un tiempo de sublimación más largo que los viales del borde en ambos lotes. El lote C1, con una mayor tasa de congelación, mostró un tiempo de secado primario ligeramente más corto que el lote C2.

Tabla 69: Temperatura del 'punto de rotura' del producto y tiempo de secado

Los viales de liofilización terminados de los dos lotes mostraron un aspecto de torta similar, como se muestra en la FIG. 54. También se probaron el ácido fórmico residual, la humedad residual y el tiempo de reconstitución de los viales de liofilización terminados de los dos lotes. Los resultados de las pruebas se muestran en la Tabla 70. El tiempo de reconstitución fue comparable entre los dos lotes. Los niveles de ácido fórmico residual de cada sublote en el lote C2 fueron ligeramente inferiores a sus homólogos del lote C1. Es interesante señalar que los niveles de humedad residual demostraron una tendencia opuesta, mostrando un mayor nivel en el lote C2. Se sabe que una tasa de congelación más rápida conduce a cristales de hielo más pequeños debido al tiempo de nucleación más corto. Como resultado, la resistencia a la transferencia de masa durante el secado primario se puede aumentar debido a tamaños de poro más pequeños de la torta seca. Por otra parte, la eficiencia de desorción del secado secundario se puede aumentar debido a la elevada área superficial de la torta secada. Se supone que la retirada de agua se basa principalmente en el secado primario y la retirada de ácido fórmico se basa más en el secado secundario. Esto puede explicar las diferencias en los niveles de ácido fórmico residual y la humedad residual entre los dos lotes. Sin embargo, la diferencia entre los dos lotes no se consideró sustancial, lo que indica que la tasa de congelación no tuvo un impacto significativo sobre los atributos de calidad críticos del medicamento terminado. Como resultado, el equipo decidió mantener la tasa de congelación a 0,5°C/min para futuros lotes.

Tabla 70: Prueba de medicamento terminado de los lotes C1 y C2

Ejemplo 19: Proceso final para la formulación Ic

Una descripción detallada de los procedimientos de proceso de la formulación Ic es del siguiente modo:

Incorporación mediante mezclado: se disuelve Kleptose® en agua para inyectables (WFI) en un recipiente de tamaño apropiado (recipiente 1). El compuesto 1 se disuelve en ácido fórmico (FA) en un recipiente separado (recipiente 2). Esta disolución de premezcla de compuesto 1-FA se añade entonces al recipiente 1 a través de una pipeta electrónica o una bomba peristáltica a una tasa constante (~ 50 pl por adición cada 10 segundos) mientras que la disolución en el recipiente 1 se mezcla con buen vórtex. La disolución se inspecciona visualmente para estar seguros de que no están presentes partículas sin disolver en el recipiente 1. Tras la mezcla, el peso del lote se ajusta al peso objetivo con WFI.

Filtración: la disolución a granel se filtra entonces usando dos filtros estériles de 0,2 pm en serie. Antes de esta etapa, la disolución a granel puede ser opcionalmente prefiltrada usando un filtro estéril de 0,45 pm o 0,2 pm.

Llenado aséptico, liofilización y tapado de viales: el envasado aséptico se realiza en un vial de 50 cm3 con un peso de llenado objetivo de 12,5 ml para una concentración de dosis de 1,0 mg. Entonces se ponen parcialmente los tapones de liofilización (hasta la primera muesca) en cada vial lleno. Entonces se carga el liofilizador y se realiza el ciclo de liofilización. Después de completarse la liofilización, los viales se tapan a presión reducida en una atmósfera de nitrógeno y se cierran.

Los parámetros del proceso de liofilización de la formulación Ic (concentración de dosis de 1,0 mg) se muestran en la Tabla 71. El tiempo total del ciclo de liofilización de la formulación Ic (concentración de dosis de 1,0 mg) es aproximadamente 2,6 días, solo la mitad del tiempo del ciclo de liofilización de la formulación Ib.

Tabla 71: Parámetros del ciclo de liofilización de la formulación Ic

Los diagramas de flujo de proceso de la formulación Ic se ilustra en la FIG. 55.

Ejemplo 20: Osmolalidad de formulaciones reconstituidas con solución salina al 0,9 %

Se usó la formulación 1b (1 mg/vial) en el estudio. Cada vial se reconstituyó con 4,5 ml de solución salina al 0,9 % (NS) para dar una disolución de fármaco con una concentración de 0,2 mg/ml (el volumen de disolución final tras la reconstitución fue 5 ml). Se midió la osmolalidad de la disolución reconstituida en el vial por un osmómetro (Advanced® modelo 3250, Advanced Instruments Inc.) y se obtuvo un valor de osmolalidad de 440 mOsm/kg. Entonces se extrajeron 12 ml de disolución reconstituida de tres viales y se diluyeron con 38 ml de solución salina al 0,9 % hasta un volumen final de 50 ml para obtener una disolución para administración representativa de la dosis clínica de 2,4 mg. Se midió que la osmolalidad de la disolución de administración diluida era 317 mOsm/kg. Posteriormente, se extrajeron 30 ml de disolución reconstituida de seis viales y se diluyeron con 20 ml de solución salina al 0,9 % hasta un volumen final de 50 ml para obtener una disolución para administración representativa de la dosis clínica de 6,0 mg. Se midió que la osmolalidad de la disolución de administración diluida era 371 mOsm/kg. Los resultados de medición de la osmolalidad se resumen en la Tabla 72 que sigue.

Además, el vial de medicamento se reconstituyó con 10 ml de solución salina al 0,9 %. Se midió que la osmolalidad de la disolución reconstituida era 352 mOsm/kg (muestra 4 en la Tabla 72). Produjo aproximadamente 50 ml de la disolución reconstituida para una dosis de 4,8 mg.

Tabla 72: Osmolalidad de las disoluciones reconstituidas de la formulación Ib

Se midió que la osmolalidad de la solución salina al 0,9 % pura era 285 mOsm/kg. Se encontró que la osmolalidad de la disolución reconstituida guardaba una correlación lineal con la concentración de Kleptose en la disolución, como se muestra en la FIG. 44.

Por lo tanto, la formulación Ib, cuando se reconstituyó con 4,5 ml de solución salina al 0,9 %, se transforma en una disolución reconstituida de 440 mOsm/kg. Para un intervalo de dosis de 2,4-6 mg, la disolución de administración final en la bolsa de 50 ml de solución salina al 0,9 % tiene un intervalo de osmolalidad de 318-371 mOsm/kg. Cuando el volumen de la NS reconstituida o NS diluida se cambia por una dosis específica, la osmolalidad de la disolución resultante puede ser interpolada de la FIG. 44 basándose en la concentración de HPBCD calculada.

Basándose en estos datos, a condición de que la concentración de fármaco tenga poca contribución a la osmolalidad, se puede calcular la osmolalidad de la disolución reconstituida de la formulación Ic en solución salina al 0,9 %. Para la formulación Ic, cada vial contiene 1 mg de fármaco y 1875 mg de Kleptose. Cuando un vial se reconstituye con 12,5 ml de solución salina al 0,9 %, la disolución reconstituida tiene una osmolalidad de aproximadamente 416 mOsm/kg con 150 mg/ml de Kleptose en el vial de producto. Cuando la disolución reconstituida de 45 ml de 3,6 mg de fármaco se diluyó con solución salina al 0,9 % hasta 50 ml, la disolución de administración en la bolsa IV tenía una osmolalidad de aproximadamente 383 mOsm/kg con 112,5 mg/ml de Kleptose. Este intervalo de osmolalidad, aunque mayor que la osmolalidad del plasma, se consideró aceptable para la infusión IV.

La disolución reconstituida de la formulación Ic consistió en 0,08 mg/ml del compuesto 1 y 150 mg/ml de Kleptose. Comparando con la disolución reconstituida para la formulación Ib, tiene un pH de disolución similar y mayor relación Kleptose: fármaco. En ciertas realizaciones, la disolución reconstituida para la formulación Ic tiene un perfil de estabilidad química comparable y mejor estabilidad física que la disolución reconstituida de la formulación Ib.

Ejemplo 21: Combinación sin disolvente

Se prepararon dos lotes de ensayo de 1 kg de formulaciones de compuesto 1 sin disolvente como se muestra en las Tablas 73 y 74. El lote B-1 se preparó con 10 % p/p de Kleptose en una concentración de fármaco objetivo de 40 pg/ml. El lote B-2 se preparó con 20 % p/p de Kleptose en una concentración de fármaco objetivo de 80 pg/ml. Las concentraciones de fármaco objetivo de ambos lotes son ~60 % de su solubilidad de saturación a temperatura ambiente. Se usó tampón citrato en la formulación para ajustar el pH de la disolución a 4,2, ya que se sabe que el compuesto 1 es químicamente inestable en disolución por encima de pH 5.

Tabla 73: Composiciones de formulación de lotes de viabilidad sin disolvente

En el proceso de incorporación mediante mezclado sin disolvente, primero se disolvió Kleptose en agua. Entonces se añadió directamente el polvo del compuesto 1 en disolución de Kleptose y se mezcló con un homogeneizador superior de mesa (POLYTRON PT 3100, Kinematica AG, Suiza) a 6800 rpm. Se usó un recipiente de incorporación mediante mezclado encamisado para mantener la temperatura de la disolución a 20-25 °C durante el proceso de mezcla. Para el lote B-1, la mezcla continuó durante 24 horas. Entonces la disolución se mantuvo a temperatura ambiente sin mezcla durante otras 24 horas. Para el lote B-2, la mezcla continuó durante 48 horas. Se tomaron muestras de disolución a t=4, 24 y 48 horas para la prueba del ensayo en el proceso. Los resultados del ensayo se muestran en la Tabla 74.

Tabla 74: Resultados del ensayo en el proceso de lotes de viabilidad sin disolvente

E jem p lo 22: E s tu d io s de co m b in a c ió n in vitro

Se realizaron estudios de combinación in vitro para evaluar la actividad del compuesto 1 en las siguientes estirpes celulares de LMA y de tumor sólido:

Estirpes celulares de LMA: MOLM-13, MV-4-11, OCI-LMA-2, F-36-P, OCT-LMA-3, NOMO-1, ML-2, KG-1, HNT-34 y HL-60.

Estirpes celulares de cáncer de mama: AU565, ZR-75-30, SK-BR-3, MCF-7 (E545K), BT-474 (K111N) Y CAL-51 (E542K).

Estirpes celulares de tumor neuroendocrino (TNE): COLO320DM, NCI-H727 y QGP-1; y

Estirpes celulares de carcinoma de células renales (CCR): 786-O, A-498, ACHN y CAKI-1.

Se sembraron células en placas de cultivo de tejido de 384 pocillos a densidades de siembra optimizadas (50 microlitros por pocillo). Las células se cultivaron a 37 °C con 5 % de CO² durante 1 día, luego se trataron con compuestos añadiendo 5 microlitros de disoluciones concentradas de compuesto a cada pocillo, e incubando a 37 °C con 5 % de dióxido de carbono durante 3 días. Entonces se midió la viabilidad celular añadiendo el reactivo de viabilidad celular luminiscente CellTitre-Glo® a las células tratadas con el compuesto (20 microlitros por pocillo), incubando a temperatura ambiente durante al menos 20 minutos, luego cuantificando la señal luminiscente con un luminómetro.

Para el análisis de sinergia preliminar, se usó el índice de combinación de independencia de Bliss para calcular la sinergia para cada tratamiento de combinación con el compuesto 1 usando la siguiente ecuación (Foucquier, Pharma Res Per, 3(3), 2015):

EA E^b-E^aE^b

^{c i} = ------------------EAb

donde EA y EB representan el efecto de cada agente individual y EAB representa el efecto de la combinación en una dosis dada.

Se hizo un análisis de sinergia posterior usando modelos de aditividad de Loewe, independencia de Bliss, agente individual superior (HSA) y sinergia de efecto cooperativo (CES) como se describe previamente (Veroli G., Bioinformatics, 32(18), 2016; Geary N., Am J Physiol Endocrinol Metab, 2012).

Todos los datos se analizaron usando la ecuación de CES:

CES = Eab - máx (Ea,Eb)

En los casos en los que la respuesta a la dosis con el agente individual se ajustó a la pendiente de Hill, el análisis de CES se comparó con los modelos Loewe, Bliss y HSA.

La FIG. 56A proporciona el efecto de combinaciones del compuesto 1 con 1) everolimus, 2) fedratinib, 3) midostaurina y 4) pladienolida B. Como se observa en la FIG. 56A, las curvas de respuesta a dosis muestran desplazamientos de CE⁵⁰ con los compuestos probados. Por ejemplo, en todos los niveles de dosis probados, las combinaciones con everolimus tuvieron menos CE⁵⁰ que el agente individual, el compuesto 1.

La FIG. 56B proporciona el efecto de combinaciones del compuesto 1 con pladienolida B en estirpes celulares de LMA. La FIG. 56C proporciona el efecto de combinaciones del compuesto 1 con el compuesto A en estirpes celulares de LMA.

La FIG. 56D proporciona el efecto de combinaciones del compuesto 1 con el compuesto B en estirpes celulares de LMA.

La Tabla 75 proporciona un resumen de análisis de sinergia para las combinaciones del compuesto 1 con segundos agentes a modo de ejemplo, que incluyen inhibidores de mTOR, JAK2, FLT3, espliceosoma, BET y LSD-1 en estirpes celulares de LMA.

Tabla 75: Análisis de la sinergia para combinaciones con el compuesto 1

La Tabla 76 proporciona una lista de inhibidores de FLT3 y JAK que se probaron en combinación con el compuesto 1 en las estirpes celulares MOLM-13 y NOMO-1.

Tabla 76

Como se observa anteriormente, la mayoría de las combinaciones probadas demostraron sinergia en las estirpes celulares MOLM-13 y NOMO-1 de LMA. La FIG. 57 ilustra sinergia para combinaciones de compuestos 1 con midostaurina (inhibidor de FLT3) y ruxolitinib (inhibidor de JAK) en estirpes celulares activadas con FLT3, tales como estirpes celulares que llevan una mutación de duplicación interna en tándem (ITD) de FLT3 .

Los tratamientos de combinación del compuesto 1 e inhibidores de TOR, everolimus, temsirolimus, 1 -etil-7-(2-metil-6-(1H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-3-il)-3,4-dihidropirazino[2,3-b]pirazin-2(1H)-ona (CC-115) y 7-(6-(2-hidroxipropan-2-il)piridin-3-il)-1-((trans)-4-metoxiciclohexil)-3,4-dihidropirazino[2,3-b]pirazin-2(1H)-ona (CC-223) mostraron sinergia en las estirpes celulares BrCa (5/6), CCR (4/4) y TNE (² /³ ), como se ilustra en las F ⁱG. 58 y 59.

E je m p lo 23: E s tu d io s in vitro en c é lu la s BO N

Se realizaron estudios in vitro para evaluar la actividad del compuesto 1 sobre la señalización y proliferación de estirpes celulares BON, administrado como un agente individual y en combinación con everolimus (referido como RAD en las FIG. 60-74), usando un ensayo CellTiter-Glo®.

Se estudió el efecto del compuesto 1 solo y en combinación con everolimus sobre la señalización y proliferación a las 24 horas después del tratamiento en placas 2D, 120 horas después del tratamiento en placas 2D, 120 horas después del tratamiento en placas 3D y 96 horas después del tratamiento en placas 2D.

La FIG. 60 proporciona valores de unidades relativas de luminiscencia (URL) para el compuesto 1 solo, y en combinaciones con everolimus a 2 nM, 20 nM y 200 nM.

La FIG. 61 proporciona valores de unidades relativas de luminiscencia (URL) para el compuesto 1 solo, y en combinaciones con everolimus a 2 nM, 20 nM y 200 nM.

La FIG. 62 proporciona valores de unidades relativas de luminiscencia (URL) para el compuesto 1 solo, y en combinaciones con everolimus a 2 nM, 20 nM y 200 nM.

La FIG. 63 proporciona valores de unidades relativas de luminiscencia (URL) para el compuesto 1 solo, y en combinaciones con everolimus a 2 nM, 20 nM y 200 nM.

Las FIG. 64A y 64B proporcionan diagramas para dos series que representan valores de unidades relativas de luminiscencia (URL) para el compuesto 1 solo, y en combinaciones con everolimus a 2 nM, 20 nM y 200 nM.

Los datos demuestran que el compuesto 1 no tiene actividad independiente sobre BON1. El tratamiento de combinación del compuesto 1 con everolimus da como resultado sinergia en la inhibición del crecimiento, como se observa por la parada del crecimiento al nivel de prefármaco, sin apoptosis.

E je m p lo 24: E fec to d e l c o m p u e s to 1 y e v e ro lim u s en un m o d e lo d e G A 0087 P D X - E n sa yo e x vivo

Se investigó el efecto de combinación del compuesto 1 y everolimus sobre la viabilidad celular del modelo GA0087 PDX, usando un ensayo 3D ex vivo. Se determinó la concentración de inhibición al 50 % (CI⁵⁰) de los dos compuestos usando un ensayo de metilcelulosa 3D ex vivo, seguido por determinación del efecto de sinergia en la combinación de matriz usando el índice de combinación.

Diseño del estudio: cada estirpe celular se sembró y trató con el compuesto 1 solo, combinación de matrices con el compuesto 1 y everolimus, y un compuesto de control de referencia en dosis requeridas.

Materiales y métodos: Se usó la estirpe celular de cáncer de estómago GA0087 en este estudio. Se usó el medio de crecimiento que contenía DMEM/F12 10 % de FBS Pen/Strep factores de crecimiento complementarios para cultivar las células a la temperatura de 37 °C, 5 % de CO² y 95 % de humedad. El medio de cultivo se compró de GIBCO o Sigma, EE. UU.

Se usaron los siguientes materiales y reactivos:

Ensayo de viabilidad celular luminiscente CellTiter-Glo® (Cat. N.°: G7572, Promega. Almacenar a - 20 °C) Microplacas de poliestireno de 96 pocillos (Cat N.° 655096, Greiner bio-one)

Tapa para microplacas (Cat N.° 656171, Greiner bio-one)

Metilcelulosa (Cat N.° M0512, Sigma)

Junta inferior adhesiva negra BackSeal (Cat N.° 6005189, Perkin Elmer)

Colagenasas (Cat N.°: 17100-017, Invitrogen)

Filtro de células Falcon (Cat N.° 352340, BD Falcon)

El compuesto 1 se reconstituyó en DMSO para preparar una disolución 5 mM, para 15 pl de alícuota por uso. Se obtuvo everolimus de Selleck. Se usó cisplatino como fármaco de referencia, y se obtuvo de Hospira Australia pty Ltd. Métodos:

1 % de preparado de metilcelulosa: se midió 1 g de metilcelulosa en un recipiente de vidrio con tapa. El recipiente se esterilizó en autoclave en condiciones de esterilización habituales. El recipiente se enfrió, y se añadieron 100 ml de medio de cultivo celular apropiado. Se retiró cualquier metilcelulosa restante de la parte inferior con un rascador de células estéril y el contenido se mezcló vigorosamente. El recipiente se almacenó en una plataforma con balanceo a 4 °C para completar la disolución durante hasta 48 horas, para lograr la disolución completa. La disolución de metilcelulosa se almacenó a 4 °C.

1. Aislamiento de células individuales

1. Se mantuvieron modelos de tumor PDX en la instalación de animales Crownbio HuPrime. El crecimiento tumoral se monitorizó semanalmente. Los volúmenes de tumor se midieron en dos dimensiones usando un compás calibrador, y el volumen se expresó en mm3 usando la fórmula: V = 0,5 a x b2 donde a y b son los diámetros largo y corto del tumor, respectivamente.

2. Se alojaron xenoinjertos de ratón en un volumen de tumor de alrededor 800 mm3 con herramientas quirúrgicas estériles y el tejido tumoral se troceó en trozos minúsculos con tijeras en una pequeña cantidad de PBS en una nueva placa de cultivo de tejido.

3. La suspensión de células se filtró a través de un filtro de células Falcon. La malla de nailon se lavó 3-5 veces con PBS.

4. La suspensión de células se centrifugó a 1000 rpm durante 5 minutos y el sedimento se lavó con PBS y se centrifugó otra vez.

5. Se retiraron los glóbulos rojos usando un tampón de lisis de glóbulos rojos.

6. La suspensión de células se centrifugó a 1000 rpm durante 5 minutos y el sedimento se lavó con PBS y se centrifugó otra vez.

7. El sedimento de células se resuspendió con medio de cultivo celular apropiado para diferentes células.

8. Las células se contaron con Countstar por exclusión con azul de tripano.

2. Ensayo de viabilidad celular CellTiter-Glo® (formato de metilcelulosa 3D)

Día -1: Siembra de células

1. Las células se recogieron durante el periodo de crecimiento logarítmico. Las células recogidas se cultivaron con medios celulares apropiados y se centrifugaron a 1000 rpm durante 3 minutos. Las células se resuspendieron y se contaron usando CountStar (la viabilidad celular debe cumplir la norma de > 90 % por el ensayo de exclusión con azul de tripano).

2. Las concentraciones de células se ajustaron a 2x105 células/ml con medio respectivo (la concentración de células se ajustó según la base de datos o el ensayo de optimización de densidad).

3. Se mezclaron 3,5 ml de suspensión de células con 6,5 ml de 1 % de metilcelulosa. Esta etapa dio 10 ml de suspensión de células en 0,65 % de disolución de metilcelulosa.

4. Se añadieron 90 pl de suspensiones de células a placas de 96 pocillos según el mapa de placas con densidad celular final. Se establecieron dos placas duplicadas: una para la lectura del día 0 (T0) y la otra se cultivó en estufa de incubación para la lectura del punto final.

Las placas se incubaron durante la noche en la estufa de incubación humidificada a 37 °C con 5 % de CO².

Día 0: Lectura de placa a T0 y tratamiento del compuesto

5. Se añadieron 10 pl de medio de cultivo a la placa de T0 en cada pocillo para la lectura de T0.

6. Se añadieron 100 pl del reactivo CellTiter-Glo® a cada pocillo.

7. El contenido se mezcló durante 2 minutos en un agitador orbital para facilitar la lisis de las células.

8. Se dejó que las placas se incubaran a temperatura ambiente durante 10 minutos para estabilizar la señal luminiscente.

9. Se puso un adhesivo negro Backseal sobre la parte inferior de cada placa.

10. La luminiscencia se leyó usando un lector EnVision Multi Label.

11. Las disoluciones del compuesto 1, de everolimus y del fármaco de referencia se diluyeron a la concentración indicada a continuación.

El compuesto 1 y everolimus se disolvieron en DMSO para preparar disoluciones madre 10 mM y alícuotas. Las disoluciones se almacenaron a -20 °C. Se combinaron nueve concentraciones del compuesto 1 (en dilución 3x) con 6 concentraciones de everolimus. La puntuación de respuesta se calculó normalizando al control de DMSO. El índice de combinación (IC) se calculó usando el método de Chou y Talalay, en donde un IC inferior a 1 indica sinergia. Se usó cisplatino como control en la respuesta a dosis del compuesto individual, pero no se incluyó en la prueba de combinación.

Día 7: Lectura de placa del tratamiento con compuesto a los 7 días.

12. Después de la incubación del fármaco, se tomaron imágenes de pocillos representativos usando un microscopio de contraste de fase.

13. Se añadieron 100 pl del reactivo CellTiter-Glo® a cada pocillo.

14. Los contenidos se mezclaron durante 2 minutos en un agitador orbital para facilitar la lisis celular.

15. Se dejó que las placas se incubaran a temperatura ambiente durante 10 minutos para estabilizar la señal luminiscente.

16. Se puso adhesivo negro Backseal sobre la parte inferior de cada placa.

17. La luminiscencia se registró usando el lector EnVision Multi Label.

Análisis de datos

Los datos se presentaron gráficamente usando GraphPad Prism 5.0. Para calcular CI⁵⁰, se ajustó una curva de dosisrespuesta usando el modelo de regresión no lineal con una respuesta a dosis sigmoide. La fórmula de la tasa de supervivencia se muestra a continuación, y la CI⁵⁰ se produjo automáticamente por GraphPad Prism 5.0.

Tasa de supervivencia (%) = (LumArtículo de prueba — LumControl de medio) / (LumNinguno tratado — LumControl de medio) X 100 % Determinación de la sinergia

Se calcularon las interacciones de compuestos por el análisis del efecto de múltiples fármacos y se realizaron por el principio de ecuación de la mediana según la metodología descrita por Chou y Talalay. Fa es la fracción afectada por la dosis. Se calculó el índice de combinación (CI) por la ecuación de Chou et al. que tiene en cuenta tanto la potencia (Dm o CI⁵⁰) como la forma de la curva dosis-efecto (el valor de m).

La ecuación general para el CI de los dos compuestos viene dada por:

donde: (Dx)¹ y (Dx)² en los denominadores son las dosis (o concentraciones) para el compuesto 1 y el compuesto 2 solos que demuestran x % de inhibición. Mientras que (D)¹ y (D)² en los numeradores son las dosis de ambos compuestos (1 y 2) en combinación que también inhiben x % (iso-eficaz). CI<1, =1, y >1 indican sinergia, efecto aditivo y antagonismo, respectivamente.

(Dx)¹ y (Dx)² se pueden calcular a partir de la ecuación del efecto de la mediana de Chou et al. :

donde: Dm es la dosis de efecto de la mediana que se obtiene a partir del anti-log de la abscisa en el origen del diagrama de efecto de la mediana, x = log(D) frente a y = log{/á/(1 -/a)}, o Dm = 10-(-intersección)/m; y m es la pendiente del diagrama del efecto de la mediana y fa es la fracción de células afectadas por el tratamiento.

Cada CI se calculó con el software CalcuSyn a partir de la fracción afectada media en cada concentración de relación de fármaco. Para la combinación de relación fija de 2 compuestos a 7 concentraciones, se obtuvieron 7 valores de CI.

Tabla 77

DRI es una medida de cuántas veces la dosis de cada fármaco en una combinación sinérgica se puede reducir en un nivel de efecto dado en comparación con las dosis de cada fármaco solo. Para combinaciones de dos fármacos

y para n-combinaciones de fármacos

Por lo tanto,

(DRI)² Cada DRI se calculó con el software CalcuSyn a partir de la fracción afectada media en cada concentración de relación de fármaco de cada fármaco. Para una combinación de relación de fármaco fija de 2 fármacos a 7 concentraciones, se obtuvieron 7 x 2 = 14 valores de DRI.

Resultados: La Tabla 78 a continuación proporciona un resumen de CI⁵⁰ e inhibición máxima para el modelo de GA0087.

T a b la 78

T a b la 79

Las FIG. 65A y 65B proporcionan curvas de dosis-respuesta (ensayo clonogénico ex vivo 3D) que representa la máxima inhibición del compuesto 1 y everolimus en el modelo GA0087 para 2 experimentos. La FIG. 66 proporciona la CI⁵⁰ y la máxima inhibición del compuesto de referencia en el modelo GA0087, por duplicado.

Las FIG. 67A y 67B proporcionan el efecto de inhibición del ensayo de combinación de matrices para los dos experimentos, y las FIG. 68A y 68B proporcionan el índice de combinación para los dos experimentos.

Como se observa a partir de los datos, el compuesto 1 muestra actividad en el modelo GA0087, y muestra sinergia con everolimus en la mayoría de las concentraciones probadas. En particular, el compuesto 1 muestra sinergia con everolimus en múltiples concentraciones de dosis intermedias del compuesto 1 (0,5 -111,1 nM).

E je m p lo 25: E fec to d e l c o m p u e s to 1 y e v e ro lim u s en el m o d e lo G A 0087 P D X - E n sa yo in vivo

El tratamiento de combinación del compuesto 1 y everolimus se probó en un modelo de xenoinjerto de cáncer gástrico HuPrime® GA-0087 (un tumor neuroendocrino) en ratones sin pelo BALB/c hembra. Los fragmentos de tumor de ratones de reserva se recogieron y se usaron para la inoculación en ratones. Cada ratón se inoculó por vía subcutánea en el flanco izquierdo con el fragmento de tumor GA0087 del modelo de xenoinjerto de tumor humano primario (P7,2-3 mm de diámetro) para el desarrollo del tumor. Para el estudio de eficacia, cuando el volumen medio del tumor alcanzó aproximadamente 196 mm3, los ratones se asignaron aleatoriamente a 9 grupos (10 ratones en cada grupo, 1 grupo de control de vehículo, 2 everolimus y 3 grupos de tratamiento con el agente individual del compuesto 1 y 3 grupos de tratamiento de combinación) basándose en el volumen del tumor y el peso corporal con administración que empezó el mismo día (día de estudio 0). La dosis y los programas se muestran en la f Ig .69. Después de la inoculación del tumor, los animales se comprobaron diariamente para morbilidad y mortalidad. En el momento de la monitorización rutinaria, los animales se comprobaron para cualquier efecto de crecimiento tumoral y tratamientos sobre el comportamiento normal tales como movilidad, consumo de comida y agua, aumento/pérdida de peso corporal, ojos pegados/pelo enmarañado y cualquier otro efecto anormal. Se registró la muerte del ratón sacrificado. Todos los grupos se sacrificaron en el día 40. Se recogieron tres tumores en cada grupo, con volumen del tumor próximo a la mediana de cada grupo. Se recogió plasma de los mismos ratones. Para comparación entre tres o más grupos, se realizó ANOVA unifactorial seguido por procedimientos de múltiples comparaciones. Todos los datos se analizaron usando SPSS 18.0. Se considera que valores de p < 0,05 son estadísticamente significativos.

La FIG. 69 proporciona el volumen medio del tumor para el compuesto 1 y everolimus, solos y en combinación. Como se observa a partir de los datos, el compuesto 1 mostró inhibición del crecimiento tumoral. Una combinación del compuesto 1 con 1,25 mg/kg de everolimus aumentó significativamente la inhibición del crecimiento tumoral en comparación con cualquier agente solo. Se logró una regresión tumoral transitoria con la combinación de 5 mg/kg del compuesto 1 y everolimus 1,25 mg/kg.

En resumen, los tratamientos con un único agente con everolimus (1,25 mg/kg y 5 mg/kg) y el compuesto 1 (1,25 mg/kg y 2,5 mg/kg) produjeron actividad antitumoral moderada, mientras que el tratamiento con un único agente con el compuesto 1 (5 mg/kg) y con los tratamientos de combinación (everolimus, 1,25 mg/kg y el compuesto 1, 1,25 mg/kg, 2,5 mg/kg y 5 mg/kg) produjo una importante actividad antitumoral contra el modelo de xenoinjerto de cáncer gástrico HuPrime® GA0087.

Ejemplo 26: Efecto del compuesto 1 sobre los progenitores de la mielofibrosis

Se estudió el efecto del compuesto 1 en un ensayo de formación de colonias usando muestras de paciente con mielofibrosis. Se sembraron células mononucleares de sangre periférica (CMSP) de pacientes con mielofibrosis en medio Methocult con y sin el compuesto 1 durante 14 días, después de lo cual se determinó el número de células formadoras de colonias.

Se usaron las siguientes muestras se:

MF13: MF de nueva aparición, caracterizada por JAK2wt, FLT3wt, NPM1 wt, CEBPA wt

MF14: MF de nueva aparición, caracterizada por JAK2wt, CALR exon9 mut, ASXL1 wt, MPLwt

Los datos proporcionados en la FIG. 70 demuestran que el número de células formadoras de colonias se redujo por el compuesto 1 en un modo dependiente de la dosis en muestras de pacientes con mielofibrosis. Las CI⁵⁰ logradas en estas muestras fueron inferiores a las CI⁵⁰ observadas en muestras de voluntarios sanos, lo que indica el potencial del compuesto 1 como un tratamiento para la mielofibrosis.

Ejemplo 27: Estudios de combinación en neoplasias mieloproliferativas

Se realizaron estudios de combinación in vitro para evaluar la actividad del compuesto 1 en combinación con los siguientes inhibidores de JAK2 en células BaF3 manipuladas para expresar establemente proteínas exógenas. Se usaron las siguiente estirpes celulares: hCRBN es un CRBN humano que expresa la estirpe celular BaF3; EF1a-GFP-P2A-Nluc-P2A-JAK2 es hCRBN, y JAK2 wt que expresa la estirpe celular BaF3; EF1a-GFP-P2A-Nluc-P2A-JAK2-V617F recién transducida dependiente de IL3, es un hCRBN y JAK2V617F mutante que es todavía dependiente de IL3 que expresa la estirpe celular BaF3; y EF1a-GFP-P2A-Nluc-P2A-JAK2-V617F; el clon independiente de IL3 es hCRBN y JAK2V617F mutante que se ha adaptado para llegar a ser independiente de la estirpe celular IL3 BaF3. Los inhibidores de JAK2 usados en el ensayo fueron NS-018, INCB018424 (Ruxolitinib; Jakafi), CYT387 (Momelotinib), TG101348 (Fedratinib) y pacritinib.

Las células se trataron con compuestos añadiendo una dilución sucesiva del compuesto 1 (empezando a 50 nM) en combinación con una dilución sucesiva de inhibidores de JAK2 (concentración inicial 10 pM para todos los inhibidores de JAK2). Everolimus se incluyó como control. Entonces se midió la viabilidad celular por CellTiter-Glo® después de 3 días.

Como se demuestra por datos en las FIG. 71-77, no se observó diferencia en el compuesto 1 o inhibidor de JAK2 cuando se usa como agente individual en líneas BaF3 dependientes de IL3. Las células JAK2 V617F independientes de IL3 fueron más sensibles a la mayoría de los inhibidores de JAK2, el compuesto 1 y everolimus.

Como se demuestra en la FIG. 78, una combinación del compuesto 1 y NS-018 mostró un desplazamiento de CE⁵⁰ en células parentales, JAK2 wt y JAK2V617F. No se observó diferencia aparente en los perfiles de sinergia entre las líneas hCRBN, wt y JAK2 V617F recién transducidas. Las células JAK2 V617F independientes de IL3 fueron más sensibles al agente individual NS-018 en comparación con las tres líneas dependientes de IL3. Se observó sinergia a Cmáx clínica para NS-018 (2,57 pM, como se describe en un estudio de fase I, en abierto, de aumento de la dosis y multicéntrico del inhibidor de JAK2 NS-018 en pacientes con mielofibrosis, Leukemia (2017) 31, 393-402).

Como se muestra en la FIG. 79, a menos de 100 nM de NS-018, no se observó desplazamiento evidente de CE⁵⁰ para las 4 estirpes celulares.

Como se demuestra en la FIG. 80, una combinación del compuesto 1 y ruxolitinib mostró un fuerte desplazamiento de CE⁵⁰ en células parentales, JAK2 wt y JAK2V617F. No se observó diferencia evidente en perfiles de sinergia entre líneas hCRBN, wt y JAK2 V617F recién transducidas. Las células JAK2 V617F independientes de IL3 fueron más sensibles al agente individual ruxolitinib en comparación con las tres líneas dependientes de IL3. Se observó sinergia a Cmáx clínica para ruxolitinib (~0,5-1 pM, como se describe en Blood (2011) 118:5162).

Como se muestra en la FIG. 81, a menos de 100 nM de ruxolitinib, no se observó desplazamiento evidente de CE⁵⁰ para las 4 estirpes celulares.

Como se demuestra en la FIG. 82, una combinación del compuesto 1 y momelotinib mostró un fuerte desplazamiento de CE⁵⁰ en células parentales, JAK2 wt y JAK2V617F. No se observó diferencia evidente en perfiles de sinergia entre líneas hCRBN, wt y JAK2 V617F recién transducidas. Las células JAK2 V617F independientes de IL3 fueron más sensibles al agente individual momelotinib en comparación con las tres líneas dependientes de IL3.

Como se demuestra en la FIG. 83, una combinación del compuesto 1 y pacritinib mostró un fuerte desplazamiento de CE⁵⁰ en células parentales, JAK2 wt y JAK2V617F. No se observó diferencia evidente en perfiles de sinergia entre líneas hCRBN, wt y JAK2 V617F recién transducidas.

Como se demuestra en la FIG. 84, una combinación del compuesto 1 y fedratinib mostró un fuerte desplazamiento de CE⁵⁰ en células parentales, JAK2 wt y JAK2V617F. No se observó diferencia evidente en perfiles de sinergia entre líneas hCRBN, wt y JAK2 V617F recién transducidas.

Como se demuestra en la FIG. 85, una combinación del compuesto 1 y everolimus mostró un ligero desplazamiento de CE⁵⁰ en células parentales, JAK2 wt y JAK2V617F. Se observó un desplazamiento más fuerte de CE⁵⁰ en células JAK2 V617F independientes de IL3. El grado de desplazamiento de CE⁵⁰ con everolimus fue más débil que las combinaciones con inhibidores de JAK2 en todas las líneas BaF3, lo que indica que la actividad de mTOR no es el principal mecanismo aguas abajo responsable de la sinergia entre inhibidores de JAK2 y el compuesto 1.

Conclusión: Estos datos demuestran sinergia entre el compuesto 1 y los inhibidores de JAK2 en células BaF3 manipuladas para expresar hCRBN con o WT JAK2 o JAK2V617F. Puesto que la combinación con el inhibidor de mTOR everolimus mostró sinergia reducida en comparación con la combinación con los inhibidores de JAK2, estos resultados indican que la sinergia mediada por JAK2 con el compuesto 1 es probable mediante otros mecanismos, además de o como complemento de la actividad de mTOR.

Ejemplo 28: Estudios de combinación con el compuesto 1 e inhibidores de JAK2 en las estirpes celulares de LMA

Se realizaron estudios de combinación in vitro para evaluar la actividad del compuesto 1 en combinación con los siguientes inhibidores de JAK2 NS-018, INCB018424 (Ruxolitinib; Jakafi), CYT387 (Momelotinib), TG101348 (Fedratinib) y pacritinib en 12 estirpes celulares de LMA.

Se usaron las siguientes estirpes celulares de LMA:

JAK2V617F: HEL, SET-2, MUTZ-8

JAK natural (WT): HL-60, HNT-34, KG-1, ML-2, NOMO-1, MOLM-13, MV4-11, F36P, OCI-AML2

Se midió la viabilidad celular por CellTiter-Glo® después de 3 días como se describe en cualquier parte en el presente documento.

Como se demuestra por los datos en la FIG. 86, NS-018 y ruxolitinib inhiben la viabilidad celular de las estirpes celulares JAK2V617F de LMA como agentes individuales.

Como se demuestra en la FIG. 87, una combinación del compuesto 1 y NS-018 mostró sinergia en la inhibición de la viabilidad de JAK2 V617F en estirpes celulares HEL, SET-2 y MUTZ-8.

Como se demuestra en la FIG. 88, una combinación del compuesto 1 y ruxolitinib mostró sinergia en la inhibición de la viabilidad de JAK2 V617F en estirpes celulares HEL, SET-2 y MUTZ-8. La sinergia fue más evidente en estirpes celulares (HEL) que fueron menos sensibles al agente individual, el compuesto 1.

Como se demuestra en la FIG. 89, una combinación del compuesto 1 y everolimus mostró sinergia en la inhibición de la viabilidad de células HEL, pero no se observó desplazamiento evidente de CI⁵⁰ en células SET-2 o MUTZ-8. Como se demuestra en la FIG. 90, los cinco inhibidores de JAK2 mostraron sinergia con el compuesto 1 en la inhibición de la viabilidad de células JAK2 V617F.

Conclusión: Se demostró una fuerte sinergia con el compuesto 1 con los 5 inhibidores de JAK2 del estado clínico. Ejemplo 29: Estudios de combinación con el compuesto 1 e inhibidores de IDH2

Se realizaron estudios de combinación in vitro para evaluar la actividad del compuesto 1 en combinación con el inhibidor de IDH2 enasidenib (AG-221) en la estirpe celular mutante IDH2 TF1-R140Q.

Las células se sembraron a una densidad de 0,2e6 células/ml de 2 ml de cultivo en 6 placas de pocillos. Enasidenib se probó a una concentración 0, 200 nM, y 1000 nM, mientras que el compuesto 1 se probó a una concentración de 0, 10 nM, 30 nM, 100 nM.

La FIG. 91 proporciona los programas de administración usados en este estudio.

Se cultivaron células TF1 en los siguientes medios: RPMI que contenía HEPES y L-glutamina, 10 % de FBS, Pen/Strep, G418 (conc. final 500 pg/ml) y GM-CSF (conc. final 5 ng/ml). Las células se cultivaron durante 7 días, con o sin tratamiento con compuesto como se describe en la FIG. 91.

Para el ensayo de hemoglobinización, se lavaron células TF1 tres veces con PBS para retirar GM-CSF residual, entonces se sembraron a (100.000 células/ml). Entonces se indujeron células para la diferenciación usando EPO (2 unidades/ml). La inducción continuó durante 7 días cambiando de medio en el 4° día y añadiendo medio con EPO recién preparada. Los sedimentos de células se recogieron y se obtuvieron imágenes para el contenido de hemoglobinización (como un sustituto para la diferenciación en linaje de sangre). Las células se sedimentaron, se lavaron, se tiñeron con un panel de anticuerpos y se analizaron por citometría de flujo, usando los siguientes anticuerpos:

En el ensayo de hemoglobinización, enasidenib y el compuesto 2 dieron el efecto esperado de aumento en la expresión de hemoglobina, como se observa en la FIG. 92. Además, el tratamiento de combinación con el compuesto 1 y enasidenib mostró un aumento de la hemoglobinización y diferenciación celular, como se muestra por células HSC (CD34+/CD38-) y progenitoras CD34+/CD38+ reducidas, y células eritroblásticas CD34-/CD38- y CD34-/CD235a+ elevadas mostradas en las FIG. 93-97.

Los resultados del ensayo de diferenciación inducido por EPO proporcionado en las FIG. 93-94 demuestran el efecto potenciado del compuesto 1 y enasidenib en reducir las células progenitoras TF-1:IDH2R140Q (CD34+/CD38+) y células madre hematopoyéticas (HSC) (CD34+/CD38-), y aumentar las células CD34-/CD38- y eritroblastos diferenciados. La FIG. 95 muestra el aumento en CD235a+ (glicoforinas A), un marcador de la población de eritrocitos. La potenciación fue predominante en los programas A y C.

Las FIG. 96 y 97 muestran la degradación preferencial de GSPT1 en células CD34+ con respecto a las células diferenciadas en el ensayo de TF1. El programa A (compuesto 1 añadido 24 horas antes de enasidenib) produjo la cifra absoluta más baja de CD34+ debido a la elevada diferenciación (también observada en el programa C) y el efecto duradero de la destrucción preferencial de células CD34+.

La FIG. 98 demuestra la inhibición de la proliferación de la cifra de células totales y la cifra de HSC (CD34+/CD38-) y la cifra de progenitores (CD34+/CD38+) por el compuesto 1. Como se observa, el programa A tiene una inhibición fuerte y de larga duración de la proliferación celular, y el programa A da como resultado el número de células más bajo de células CD34+ no diferenciadas. La FIG. 98 muestra que enasidenib tiene un leve efecto promotor del crecimiento, pero la combinación con el compuesto 1 produjo una clara reducción de la cifra de células para los grupos total (izquierda) y de células madre y progenitoras (dos paneles derechos).

Conclusión: Los datos demuestran que la combinación de enasidenib y el compuesto 1 produjo menores niveles de GSPT1 en células madre y progenitoras en comparación con el subconjunto más diferenciado de CD34-/CD38- y eritroblastos. Además, se muestra que enasidenib tiene un leve efecto promotor del crecimiento, pero la combinación con el compuesto 1 produjo una reducción de la cifra de células para los grupos total y de células madre y progenitoras. La pérdida neta de cifras de células madre y progenitoras puede ser debida a la muerte de estas células, o a diferenciación de células CD34+ en células CD34-.

Ejemplo 30: Efecto del compuesto 1 en estirpes celulares de tumor sólido

Se probó el compuesto 1 para su actividad en 563 estirpes celulares de tumor sólido por un ensayo Luminex. Los valores de ABC proporcionados en la Tabla 80 a continuación se calcularon basándose en los valores de la mediana de la intensidad fluorescente, la lectura principal del ensayo Luminex en PRISM. Se usaron los siguientes parámetros en este ensayo:

- se usó una dosis de 8 puntos por triplicado

- se usó la concentración máx. de 10 pM con diluciones cuádruples sucesivas (mínima de -1 nM)

- 563 líneas de células adherentes en 23 conjuntos.

- la duración del tratamiento fue 5 días.

Tabla 80:

Conclusión: Estos datos demostraron la actividad del compuesto 1 en estirpes celulares de tumor sólido, con la mayor actividad en estirpes celulares de pulmón, intestino, estómago, hígado, pancreáticas y de riñón.

E je m p lo 31: E fec to d e l c o m p u e s to 1 y e v e ro lim u s en el m o d e lo Q G P1 - E n sa yo in vivo

El tratamiento de combinación del compuesto 1 y everolimus se probó en xenoinjertos humanos de somatostatinoma pancreático QGP1 en ratones NOD/SCID hembra. El tratamiento empezó en el día 1 en nueve grupos de ratones (n = 10) con tumores QGP1 subcutáneos establecidos. Se administró everolimus a 3 o 10 mg/kg, por vía intraperitoneal (i.p.) diariamente durante 21 días (qd * 21). Se administraron el vehículo (5 % de NMP/45 % de PEG400/50 % de solución salina) y el compuesto 1 (2,5, 5 o 10 mg/kg) por vía intraperitoneal (i.p.) dos veces al día (bid * 21), separados tres horas. El grupo 1 recibió vehículo; los grupos 2 y 3 recibieron 3 y 10 mg/kg de everolimus, respectivamente; los grupos 4, 5 y 6 recibieron 2,5, 5 y 10 mg/kg del compuesto 1, respectivamente; los grupos 7, 8 y 9 recibieron 3 mg/kg de everolimus más 2,5, 5 y 10 mg/kg del compuesto 1, respectivamente. Los tumores se midieron dos veces cada semana usando un compás calibrador hasta el final del estudio en el día 52. Se muestrearon tres tumores en o cerca del punto final de la mediana del volumen tumoral del grupo de 2000 mm3 de cada grupo.

La eficacia del tratamiento se basó en la inhibición del crecimiento tumoral (TGI), definida como la diferencia entre la mediana de volúmenes de tumor (MTV) finales (día 52) de ratones tratados y de control. Los resultados se analizaron utilizando la prueba de la U de Mann-Whitney, y se consideraron estadísticamente significativos a P < 0,05. Se evaluó la tolerabilidad del fármaco por mediciones de peso corporal y por observación frecuente de animales tratados.

La mediana de volumen del tumor (MTV) del día 52 del grupo 1 ratones tratados con control de vehículo fue 2181 mm3, con volúmenes de tumor individuales que variaban desde 650 hasta 5000 mm3. Los grupos 2 y 3 de monoterapia con everolimus produjeron la inhibición del crecimiento tumoral del 41 y 39 %, respectivamente. Además, el grupo 2 fue más eficaz que los grupos 4, 5 y 6 de monoterapia con el compuesto 1 (P < 0,01 frente a los grupos 4 y 5, P < 0,001), aun cuando los grupos 2 y 3 no alcanzaron la significación estadística en comparación con los controles. La única pauta de tratamiento para alcanzar la eficacia estadísticamente significativa fue el grupo 9 (3 mg/kg de everolimus y 10 mg/kg del compuesto 1), que logró dos regresiones tumorales parciales (PR) y la inhibición del crecimiento tumoral (TGI) del 70 % en comparación con los controles, con una ^m T^v del día 52 de 650 mm3 y volúmenes de tumor individuales que variaban desde 446 hasta 1688 mm3. Todos los regímenes fueron todos bien tolerados con pérdida de peso moderada (1,6 al 6,8 %) entre los días 14 y 17 en todos los grupos que recibieron el compuesto 1.

Conclusión: en las condiciones de este estudio, los grupos administrados con everolimus demostraron cierta inhibición del crecimiento tumoral que no fue estadísticamente significativa. Además, la combinación de everolimus (3 mg/kg) y el compuesto 1 (10 mg/kg) retrasó significativamente el crecimiento de xenoinjertos de somatostatinoma pancreático QGP1 humano en NOD/SCID hembra con respecto a las monoterapias correspondientes.

Ejemplo 32: Reducción de los niveles de GSPT1 en células BON tras el tratamiento con combinaciones del compuesto 1 y everolimus

Métodos: Se cultivaron células BON en DMEM: medio F12K que contenía 10 % de suero bovino fetal y los antibióticos penicilina/estreptomicina. Las células se sembraron a 3e6 células en placa de 10 cm y se trataron diariamente con vehículo, RAD (everolimus) y/o concentraciones crecientes del compuesto 1 solo durante 120 h. Las células se recogieron y se sondaron con anticuerpos para transferencias Western y se obtuvieron imágenes usando un sistema de obtención de imágenes Li-Cor Odyssey. Todos los anticuerpos totales y fosforilados se obtuvieron de Cell Signaling Technology.

Resultados: El compuesto 1 causó la degradación de GSPT1 dependiente de la dosis y no tiene efecto directo sobre efectores de mTORC1, tales como la fosforilación mediada por p4EBP1 o S6K1 de la proteína ribosómica S6. A diferencia, RAD disminuyó espectacularmente la fosforilación de S6 y la fosforilación de 4EBP1 mediante la inhibición de mTORC1, y aumentó pAKT mediante retroalimentación negativa FIG. 99. En comparación con el compuesto individual solo, una combinación de RAD y el compuesto 1 aumentó significativamente la degradación de GSPT1, aumentó la inhibición del crecimiento celular (pS6) y la traducción deficiente de cap (disminución en p4EBP1, p-elF2, pAKT, elFG1 y ciclina D1) y activó la vía de AMPK (aumento en pAMPK).

Conclusión: El tratamiento de células tumorales neuroendocrinas pancreáticas con una combinación de RAD y el compuesto 1 produjo una elevada degradación de GSPT1 en comparación con el tratamiento con RAD o el compuesto 1 solo, que puede conducir a un aumento del efecto del RAD en el crecimiento celular, la traducción dependiente de cap y la actividad metabólica.

Ejemplo 33: Efecto sobre células de LMA del tratamiento de combinación con everolimus o inhibidores de cinasas y el compuesto 1

Para evaluar si la inhibición de mTOR, FLT3, JAK2 o JAK3 podría potenciar la respuesta de células LMA al compuesto 1, se trataron células U937 de LMA con el compuesto 1 solo o en combinación con un panel de inhibidores de cinasas. Las células se trataron con control de vehículo de DMSO o el compuesto 1 en presencia o ausencia de diversos inhibidores en concentraciones especificadas (véanse las FIG. 101A-101E) durante 5 días. Se midió la proliferación celular por CellTiter Glo, y el porcentaje de proliferación celular se normalizó a las células parentales tratadas con control de DMSO.

Además, se trataron células U937 de LMA con compuesto 1100 nM solo o en combinación con everolimus, quizartinib, ruxolitinib, AZD1480 y tofacitinib en concentraciones especificadas (véase la FIG. 102) durante 16 horas. Se recogieron extractos de células completas y se sometieron a análisis de inmunotransferencia.

Resultados: Los 5 inhibidores de cinasas y everolimus aumentaron el efecto antiproliferativo del compuesto 1, como se muestra por un desplazamiento hacia la izquierda del valor de CI⁵⁰ de proliferación (FIG. 100A a FIG. 100E). El efecto inhibidor del crecimiento del compuesto 1 se potenció por el tratamiento de combinación con everolimus, ruxolitinib, AZD 1480 y tofacitinib y se asoció al elevado agotamiento de GSPT1 y la escisión de caspasa-3 (FIG. 101).

Conclusión: El tratamiento de células de LMA con una combinación del compuesto 1 e inhibidores de mTOR, FLT3, JAK2 o JAK3 produjo una elevada degradación de GSPT1 y aumentó la apoptosis en comparación con el tratamiento con el compuesto 1 o los inhibidores solos.

Ejemplo 34: Tratamiento de las estirpes celulares de LMA con el compuesto 1 como agente individual o en combinación con venetoclax.

Métodos: Célula TitreGlo. Se sembraron 5000 células en 50 pl por pocillo en placas de 384 pocillos que contenían combinaciones de compuestos en las concentraciones indicadas. Después de 48 h de tratamiento, se midieron los niveles relativos de ATP añadiendo el reactivo CellTiter-Glo, incubando en la oscuridad durante 30 min, y luego midiendo la luminiscencia en un lector de placas Envision.

Resultados: Se mostró la sinergia para el tratamiento de combinación de múltiples estirpes celulares de LMA con el compuesto 1 y venetoclax.

Conclusión: El tratamiento con venetoclax sensibilizó las células de LMA al tratamiento con el compuesto 1. Este efecto sinérgico se mostró por el desplazamiento hacia la izquierda de las curvas de respuesta a dosis del compuesto 1 en presencia de subdosis letales de venetoclax. Las FIG. 102A-102G muestran el efecto sobre la proliferación de la estirpe celular de LMA cuando se incuba durante 48 h con elevadas concentraciones del compuesto 1 con y sin venetoclax en las concentraciones indicadas.

Ejemplo 35: Tratamiento de combinación de células de LMA con el compuesto 1 y venetoclax.

Métodos: CellTiterGIo: Se sembraron células KG-1 (200.000 células por ml, 0,05 ml por pocillo) en placas de cultivo de tejido de 384 pocillos (Corning, 3764), y luego se cultivaron durante 1 día a 37 °C, 5 % de CO². Las células se trataron entonces con las concentraciones indicadas de venetoclax y/o el compuesto 1 durante 3 días a 37 °C, 5 % de CO². Después del tratamiento, se midieron los niveles relativos de ATP añadiendo el reactivo CellTiterGlo (0,025 ml por pocillo), incubando en la oscuridad durante 20 min, y luego midiendo la luminiscencia en un lector de placas Envision.

Transferencias Western: Se sembraron células KG-1 en placas de cultivo de tejido de 6 pocillos a 500.000 células por ml, 4 ml por pocillo. Las células se trataron con las dosis indicadas de venetoclax y/o el compuesto 1 durante 16 h a 37 °C, 5 % de CO². Entonces se lavaron las células dos veces con PBS frío y se lisaron con tampón de lisis M-PER (Thermo) complementado con NaCl 150 mM y proteasa Halt y mezcla de inhibidores de la fosfatasa (Thermo) sobre hielo durante 30 min. Se clarificaron por centrifugación los lisados en bruto (14000 rpm, 10 min, 4 °C) y la proteína total se cuantificó por ensayo de BCA. Se sondaron los niveles de GSPT1 (Abcam, ab49878), Mcl-1 (c St , 4572), Bcl-2 (CST, 4223), caspasa 3 escindida (CST, 9664) y GAPDH (Santa Cruz, sc-47724) por western y se obtuvieron imágenes en un dispositivo de infrarrojos LiCor.

Análisis de caspasa 3/7 y de confluencia de células vivas: Se sembraron células KG-1 (200.000 células por ml, 0,05 ml por pocillo) en placas de cultivo de tejido de 384 pocillos (Corning, 3764) previamente recubiertas con fibronectina (Sigma, F1141), y se cultivaron durante 1 día a 37 °C, 5 % de CO². Entonces se trataron las células con concentraciones indicadas de venetoclax y/o el compuesto 1 y el reactivo del ensayo de apóptosis verde caspasa-3/7 (Incucyte, 4440). Se obtuvieron imágenes de las células cada 4 h con un sistema de obtención de imágenes del análisis de células vivas de Incucyte durante el transcurso de 3 días mientras se incubaban a 37 °C, 5 % de CO². La FIG. 103 muestra los niveles relativos de ATP como una medida de la viabilidad en respuesta a varias combinaciones de dosis del compuesto 1 y venetoclax. La FIG. 104 muestra el análisis de transferencia Western que mide GSPT1, Mcl-1, Bcl-2, caspasa 3 escindida y niveles de proteína GAPDH en células KG-1 16 horas después del tratamiento con un conjunto de dosis del compuesto 1, venetoclax o la combinación del compuesto 1 y cenetoclax. Las FIG. 105A y 105B muestran los análisis de células vivas de confluencia de KG-1 (FIG. 106A) y los recuentos de acontecimientos apoptósicos (FIG. 106B) que muestran que el tratamiento de combinación con el compuesto 1 y venetoclax potencia la apoptosis en comparación con el tratamiento con un agente individual.

Resultados: Se mostró la sinergia para el tratamiento de combinación de la estirpe celular FLT3-ITD de LMA (KG-1) con el compuesto 1 y venetoclax. Se mostró que el compuesto 1 solo, y en combinación con venetoclax, redujo los niveles de Mcl-1 en células KG-1. Además, el tratamiento de combinación con el compuesto 1 y venetoclax de células KG-1 potenció la apoptosis en comparación con el tratamiento con los agentes individuales.

Conclusión: El tratamiento de células de LMA con el compuesto 1 disminuyó los niveles de MCL-1. El tratamiento de combinación con venetoclax y el compuesto 1 fue sinérgico, y produjo apoptosis potenciada, en comparación con el tratamiento con venetoclax o el compuesto 1 solo.

Ejemplo 36: Efecto del tratamiento de combinación con everolimus y el compuesto 1 sobre las estirpes celulares de LMA

Para determinar si la inhibición de mTOR podría promover el agotamiento de GSPT1 inducido por el compuesto 1 e inducir la apoptosis, se trataron células de LMA con el compuesto 1 solo, everolimus solo o con la combinación de everolimus y el compuesto 1. Se recogieron extractos de células completas y se sometieron a análisis de inmunotransferencia.

Resultados: Aunque el tratamiento con everolimus bloqueó significativamente la activación de la vía de mTOR, mostrado por los reducidos niveles de fosforilación de S6K1 y 4E-BP1, tuvo un efecto mínimo sobre la expresión de GPST1 y la escisión de caspasa-3 (véase la FIG. 106). Sin embargo, el everolimus potenció espectacularmente el efecto del compuesto 1 sobre la degradación de GSPT1, pérdida de Mcl-1 e inducción de apoptosis, en comparación con el tratamiento con el compuesto 1 solo.

La sensibilización al compuesto 1 conferida por el everolimus se observó en múltiples estirpes celulares de LMA (MOLM-13, MV-4-11, NB-4, U937, UT-7, OCI-AML2 y F-36P). En las estirpes celulares de LMA HNT-34 y KG1, el tratamiento con el compuesto 1 solo fue suficiente para inducir la robusta degradación de GSPT1, escisión de caspasa-3 y pérdida de Mcl-1.

Conclusión: El tratamiento de células de LMA con una combinación del compuesto 1 y everolimus produjo la elevada degradación de GSPT 1, elevada apoptosis y pérdida de Mcl-1, en comparación con el tratamiento con el compuesto 1 solo.

Ejemplo 37: Efecto del compuesto 1 sobre células de pacientes con SMD

Métodos. Se cultivaron ex vivo células mononucleares de médula ósea (CMMO) de pacientes con SMD o células CD34+ equivalentes aisladas de CMMO de las mismas muestras de paciente para evaluar su sensibilidad al compuesto 1. Las CMMO se sembraron en medio completo (medio CellGenix complementado con LDL, FLT3L, IL-6, IL-3 y TPO) a 106 células/ml y las células CD34+ se sembraron en medio de células madre completo (medio Serum Free StemSpan complementado con mezcla de citocinas CC100) a 5*105 células/ml. Todos los cultivos se expusieron al compuesto 1 a 0, 37 y 111 nM durante hasta 10 días y las células se recogieron dos veces a la semana para la sustitución de medio de células y la evaluación de la cifra de células.

Resultados. Como se muestra en la FIG. 107, la exposición al compuesto 1 redujo los números de células en CMMO totales, pero también en células blásticas CD34+ en muestras de 2 pacientes diferentes con SMD. La cinética y las concentraciones requeridas fueron diferentes entre pacientes y tipos de células.

Conclusión. El compuesto 1 produjo una disminución en el número de células en muestras de SMD mostrando un espectro de sensibilidad diferente entre CMMO en masa y células blásticas CD34+ aisladas.

Ejemplo 38: Efecto del tratamiento con el compuesto 1 y everolimus sobre células de pacientes con SMD

Métodos. Se cultivaron ex vivo CMMO de pacientes con SMD para evaluar su sensibilidad al tratamiento con el compuesto 1 en combinación con everolimus. Para evaluar el efecto global sobre las células de la médula ósea de SMD, se sembraron CMMO totales en medio completo (medio CellGenix complementado con LDL, FLT3L, IL-6, IL-3 y TPO) a 106 células/ml y se expusieron al compuesto 1 (0, 37, 111 y 333 nM) solo o en combinación con everolimus en una concentración fijada de 111 nM. Los cultivos se mantuvieron durante 1 semana y los números de células se midieron por la cifra de células viables en los días 1, 3 y 7 de cultivo. El efecto sobre la apoptosis y la degradación de GSPT1 se midió por citometría de flujo 24 horas después de la exposición.

Para definir mejor el efecto del compuesto 1 sobre células progenitoras/madre de SMD, estas CMMO se sembraron en medio Methocult y se expusieron al compuesto 1 (0, 37, 111,333 y 1000 nM) solo o en combinación con everolimus a 111 nM para evaluar su potencial clonogénico. Se puntuaron los números de colonias después de 14 días de cultivo usando Stem Vision.

Resultados. La FIG. 108A muestra el efecto del tratamiento con el compuesto 1 en CMMO de una muestra del paciente con SMD. El tratamiento con compuesto 137 nM redujo los números de células en ~70 % después de 3 días de cultivo y este efecto se potenció hasta una disminución del número de células del 95 % a mayores concentraciones. No se observó efecto del agente individual a 37 nM. Es interesante señalar que, cuando se combina con everolimus, este efecto aumentó significativamente y el tratamiento a esta baja dosis de 37 nM del compuesto 1 combinado con everolimus logró efectos inhibidores similares como se observa para el tratamiento con el agente individual, el compuesto 1 111 nM. La FIG. 108B muestra las mismas tendencias en células progenitoras/madre de SMD. Se degradó GSPT1 después de 24 horas de exposición al compuesto 1 y este efecto aumentó ligeramente a menores dosis por el tratamiento de combinación con everolimus (^f I^g . 109). La caspasa 3 se activó tras la exposición al compuesto 1 y este efecto aumentó por combinación con everolimus.

Conclusión. En resumen, el tratamiento de combinación con everolimus aumentó la sensibilidad a las bajas dosis del compuesto 1 en muestras de pacientes con SMD y puede mejorar el índice terapéutico. Este efecto estuvo mediado por la inducción de apoptosis como consecuencia de la degradación de GSPT1.

Ejemplo 39: Un estudio de fase 1, en abierto y de determinación de la dosis del compuesto 1, un novedoso fármaco modulador de la cereblon E3 ligasa, en sujetos con leucemia mieloide aguda recidivante o insensible

Objetivos principales: Determinar la seguridad y la tolerabilidad del compuesto 1. Definir la dosis no tolerada (NTD), la dosis máxima tolerada (MTD) y/o la dosis de fase 2 recomendada (RP2D) del compuesto 1.

Objetivos secundarios: Proporcionar información sobre la eficacia preliminar del compuesto 1. Caracterizar la farmacocinética (FC) del compuesto 1.

Diseño del estudio: Este estudio es un estudio clínico en abierto, de fase 1, de aumento de la dosis y ampliación, el primero en humanos, del compuesto 1 en sujetos con LMA recidivante o insensible. La parte de aumento de la dosis (Parte A) del estudio evaluará la seguridad y tolerabilidad de las dosis de aumento del compuesto 1, administrado por vía intravenosa, y determinará la MTD del compuesto 1. En la Parte A, se probarán dos formulaciones. La parte de ampliación (Parte B) evaluará adicionalmente la seguridad y eficacia del compuesto 1 administrado a MTD o por debajo en cohortes de ampliación seleccionadas de hasta aproximadamente 20 sujetos evaluables para determinar la RP2D. Se pueden seleccionar una o más pautas posológicas para la ampliación de cohortes. Las Partes A y B consistirán en 3 periodos: Selección, tratamiento y seguimiento. La respuesta de la leucemia será determinada por el investigador. La evaluación de la enfermedad se basará en los criterios de respuesta del Grupo internacional de trabajo en LMA (Cheson, et al, J Clin Oncol 2003; 21(24):4642-9).

Periodo de selección: El periodo de selección empieza 28 días antes de la primera dosis del compuesto 1. El sujeto y el personal que realice las administraciones deberán firmar y fechar el documento de consentimiento informado antes de empezar cualquier otro procedimiento del estudio. Todas las pruebas y procedimientos de selección deberán ser terminadas 28 días antes de la primera dosis del compuesto 1.

Periodo de tratamiento: En el periodo de tratamiento, el compuesto 1 se administrará por vía intravenosa en los días 1-5 de cada ciclo de 28 días durante hasta 4 ciclos en ausencia de progresión de la enfermedad, recaída, toxicidad inaceptable o decisión de retirada del sujeto/médico (la progresión de la enfermedad se define como: un aumento > 50 % en el porcentaje de cifras de blastos de la médula ósea de la cifra de blastos de la médula ósea basal (selección) que persiste durante al menos 2 evaluaciones de médula ósea separadas al menos 1 mes, a menos que la cifra de blastos de la médula ósea basal sea > 70 %, en cuyo caso un resultado de > 70 % de blastos que persisten durante 2 evaluaciones de la medula ósea posteriores a la basal separadas al menos 1 mes se consideraría progresión, o una duplicación de la cifra de blastos de sangre periférica absoluta basal que persiste durante > 7 días la cifra de blastos de sangre periférica absoluta final es > 10 * 109/l.) Durante la Parte A se podrán permitir 2 ciclos de tratamiento adicionales más allá del ciclo 4 si el sujeto está mostrando beneficio clínico (SD o PR) y tolerando el fármaco del estudio sin toxicidad inaceptable. Se pueden evaluar programas de administración modificados (por ejemplo, aumento de 5 días a hasta 10 días de dosis o aumento de la duración de infusión) en cohortes adicionales, si fuera necesario, basándose en la toxicidad, perfiles FC y resultados FD. Se requerirá que todos los sujetos empiecen el aporte suplementario de calcio, calcitriol y vitamina D al menos 3 días antes del día 1 de cada ciclo y continúen hasta > 3 días después de la última dosis del compuesto 1 en cada ciclo (por ejemplo, > día 8 cuando el compuesto 1 se administra en los días 1-5).

En el ciclo 1, se realizará una evaluación de la médula ósea en el día 28 (± 3 días). Basándose en la evaluación de la médula ósea del día 28, se seguirá a los sujetos con médula ósea hipoplástica, sin evidencia de leucemia persistente, que tienen neutropenia de grado > 3 durante 2 semanas adicionales para monitorizar la seguridad en el ciclo 1 (duración total de 42 días). Se realizará una evaluación adicional de la médula ósea en el momento de la recuperación hematológica o el día 42 (± 3 días). Por lo tanto, en la Parte A, la ventana para la evaluación de la toxicidad limitante de la dosis (DLT) durante el ciclo 1 será hasta 42 días (28 o 42 días). Los ciclos > 2 serán de 28 días de duración. Los ciclos posteriores deberían empezar < 7 días después del último día del ciclo previo.

Periodo de seguimiento: En el periodo de seguimiento, se seguirá a todos los sujetos durante 28 días (± 3 días) después de la última dosis del compuesto 1 para seguridad. Los sujetos sin progresión documentada de la enfermedad (o recaída) tendrán evaluaciones de eficacia de hemogramas completos y frotis de sangre periférica realizados cada 8 semanas (± 1 semana) durante el primer año y cada 12 semanas (± 2 semanas) durante el 2° año o hasta la progresión de enfermedad (o recaída), inicio de una nueva terapia antineoplásica, retirada del consentimiento del estudio, muerte, o el final del estudio, lo que ocurra primero. Se hará una evaluación de la médula ósea al final del primer año y como se indique clínicamente durante el periodo de seguimiento.

Todos los sujetos serán seguidos para el seguimiento de supervivencia según el programa para el seguimiento a largo plazo de la eficacia durante hasta 2 años o hasta la muerte, pérdida de vista durante el seguimiento, o el final del estudio, lo que ocurra primero. El seguimiento de la supervivencia se puede realizar por revisión de registros (incluyendo registros públicos) y/o contacto telefónico con el sujeto, la familia o el médico responsable del sujeto.

Parte A - Aumento de la dosis. Durante la fase de aumento (Parte A), se usará un diseño de valoración acelerada modificada (Simon et al., J Natl Cancer Inst 1997; 89(15): 1138-47) para establecer la toxicidad inicial. Se administrará a las cohortes de uno o más sujetos con el compuesto 1 a dosis que aumentarán en incrementos del 100 % por cohorte hasta que > 2 sujetos experimenten un acontecimiento adverso de grado > 2 relacionado con el compuesto 1 en la ventana de DLT (pueden ser cohortes diferentes), o > 1 sujeto experimente una DLT dentro de la ventana de DLT. En ese momento, la cohorte actual y las cohortes posteriores se ampliarán incluyendo de 3 a 6 sujetos. Se iniciará simultáneamente un programa de aumento de la dosis con incrementos de dosis que no superen el 50 % para establecer la NTD y la MTD. La dosis inicial será 0,3 mg. En el inicio del estudio se utilizará una formulación inicial del compuesto 1 (formulación A), y durante el aumento de la dosis se introducirá una segunda formulación del compuesto 1 (formulación Ib descrita en la Tabla 43) para sustituir la formulación A. La formulación A tiene la siguiente composición (véase la publicación de EE. UU. N.° 2017/0196847-A1).

El disolvente residual de DMA en la formulación A no deberá superar los límites de exposición diaria permitida (PDE) fijados en ICH Q3C Impurities: Residual Solvents para proceder con las cohortes de aumento de la dosis por encima de una dosis diaria del compuesto 1 de 2,4 mg. El nivel de disolvente residual (ácido fórmico) en la formulación Ib permite dosis diarias del compuesto 1 de hasta 20 mg sin superar su PDE fijada en la guía Q3C de ICH.

La formulación Ib se introducirá en un nueva cohorte de dosis (según las pautas de aumento de la dosis del estudio) después de revisar las toxicidades observadas vistas en los niveles de dosis inicial de la formulación A.

Se puede decidir evaluar una cohorte de dosis más alta, sujetos adicionales dentro de una cohorte de dosis, cohortes de dosis intermedia, incrementos de dosis más pequeños, programas de administración alternos (por ejemplo, aumentando desde 5 hasta 10 días la administración del compuesto 1 o tiempos de infusión más largos) y/o declarar una MTD basándose en la revisión de datos clínicos y de seguridad del laboratorio disponibles, perfiles FC y resultados FD. En el supuesto caso de que se evalúe un programa de administración alternativo, la dosis inicial y el programa no superarán la concentración de dosis de una cohorte de dosis que ha cumplido previamente los criterios para aumento de la dosis.

Después de administrar la primera dosis en cualquier cohorte durante el aumento de la dosis, los sujetos en cada cohorte se observan durante al menos 28 días y hasta 42 días (ciclo 1, ventana de DLT) antes de que pueda empezar la siguiente cohorte de dosis más alta. No se incluirá más de un sujeto por día en una cohorte de aumento de la dosis dada. Un sujeto evaluable para DLT se define como uno que: ha recibido al menos el 80 % de la dosis del ciclo 1 planeada total (por ejemplo, 4 dosis completas del compuesto 1 durante un programa de dosis de 5 días; en caso de que se olvide una dosis, se completarán > 4 dosis en el día 7 o antes) del compuesto 1 durante el ciclo 1 sin experimentar una DLT, o experimentada una DLT después de recibir al menos una dosis (o fracción de la misma) del compuesto 1.

En el supuesto caso de que se evalúe un programa de dosis alternas (por ejemplo, aumentar desde 5 días hasta 10 días de administración) en la Parte A, se aplicarán los mismos criterios para determinar sujetos evaluables para DLT. Los sujetos no evaluables para DLT serán sustituidos.

Una dosis se considerará intolerable si > 33 % de los sujetos evaluables en una cohorte de dosis experimentan DLT durante el ciclo 1. La MTD se definirá como la última dosis por debajo de la NTD, a la que < 33 % de sujetos evaluables experimentaron DLT durante el ciclo 1. Si 2 o más de 6 sujetos evaluable experimentan DLT en la primera cohorte de dosis, se puede explorar una cohorte de dosis más baja (es decir, 0,1 mg del compuesto 1). Se puede evaluar una dosis intermedia del compuesto 1 (una entre la NTD y el nivel de la última dosis antes de la NTD) para determinar con exactitud la MTD.

No se permitirá el aumento intraindividual de la dosis durante el periodo de evaluación de DLT; sin embargo, en ciclos > 2, los sujetos sin evidencia de progresión de la enfermedad que están tolerando sus dosis asignadas del compuesto 1 pueden pasar al nivel de dosis más alto que se ha mostrado que es tolerado de forma adecuada por al menos una cohorte de sujetos en este estudio (es decir, < 33 % de sujetos evaluables que han experimentado una DLT a ese nivel de dosis). Si el nivel de dosis tolerado más alto es la formulación Ib, se permite que un sujeto actualmente incluido en la formulación A cambie a la nueva formulación.

Parte B - Ampliación de la cohorte: Después de terminar el aumento de la dosis (Parte A), sujetos adicionales pueden ser incluidos en una fase de ampliación (Parte B) con hasta aproximadamente 20 sujetos evaluables en cada cohorte. La ampliación puede ocurrir a la MTD y el programa establecido en la fase de aumento de la dosis, y/o a una dosis y programa tolerable alterno, basado en la revisión de datos de seguridad, FC y FD de la Parte A. Se pueden seleccionar una o más pautas posológicas (dosis, programas) para la ampliación de la cohorte.

Población del estudio: Se incluirá en el estudio a hombres y mujeres, 18 años o mayores, con LMA recidivante o insensible, como se define por los criterios de la Organización Mundial de la Salud (OMS), que no son adecuados para otras terapias establecidas.

Duración del estudio. Se espera que la inclusión necesite aproximadamente 18 a 24 meses para completarse (12 a 15 meses para el aumento de la dosis, y 6 a 9 meses para la ampliación). Se espera que la finalización del tratamiento activo y el seguimiento después del tratamiento necesiten 6 a 24 meses adicionales. Se espera que todo el estudio dure hasta aproximadamente 3 a 4 años. El final del estudio se define como o la fecha de la última visita del último sujeto para completar el seguimiento después del tratamiento, o la fecha de recepción del último punto de datos del último sujeto que se requiere para el análisis primario, secundario y/o exploratorio, como se especifica previamente en el protocolo, cualquiera que sea la fecha posterior.

Tratamientos del estudio. Se proporcionará el producto en investigación, el compuesto 1 para inyección IV, etiquetado apropiadamente para su uso en investigación, según las reglamentaciones de la autoridad sanitaria del país pertinente. El fármaco del estudio se administrará como se ha expuesto brevemente en la sección anterior de Periodo de tratamiento.

El tratamiento del estudio puede ser interrumpido si existe evidencia de progresión clínicamente significativa de la enfermedad (o recaída), toxicidad inaceptable o decisión de retirada del sujeto/médico. Los sujetos pueden seguir recibiendo los fármacos del estudio más allá de la progresión de la enfermedad a criterio del investigador en colaboración con el supervisor médico de Celgene.

Visión general de las evaluaciones de eficacia clave. La variable de eficacia principal es la tasa de respuesta a la leucemia. Todos los sujetos tratados se incluirán en los análisis de eficacia. La respuesta de la leucemia será determinada por el investigador. La evaluación se basará en los criterios de respuesta del Grupo internacional de trabajo en LMA (Cheson, et al, J Clin Oncol 2003;21(24):4642-9).

Se proporcionará un análisis descriptivo de evidencia de actividad antileucémica basado en evaluaciones clínicas, de laboratorio, moleculares y citogenéticas por el investigador, que incluyen la evaluación del porcentaje de blastos de la médula ósea, citogenética de la médula ósea, estudios genéticos moleculares para evaluar respuestas moleculares, citometría de flujo de la médula ósea, número de plaquetas y cifra absoluta de neutrófilos. Los criterios de respuesta se resumirán por las categorías de mejor respuesta global: tasa de remisión completa (CRR) y tasa de respuesta objetiva (ORR). La ORR incluye todas las respuestas de remisión completa (CR) (es decir, estado morfológico sin leucemia, CR morfológica, CR citogenética, CR molecular y CR morfológica con recuperación de sangre incompleta) y remisión parcial.

La variable de eficacia de interés será la ORR y la CRR. Se resumirán otras medidas de actividad clínica, que incluyen supervivencia global (OS), supervivencia sin recaída (RFS), supervivencia sin progresión (PFS), supervivencia sin acontecimientos, duración de la remisión, duración de la respuesta y tiempo hasta la remisión/respuesta.

Visión general de evaluaciones de seguridad clave. Las variables de seguridad para este estudio incluyen acontecimientos adversos, variables del laboratorio clínico de seguridad, electrocardiogramas de 12 derivaciones, estado funcional del Grupo Oncológico Cooperativo de la Costa Este, evaluaciones de la fracción expulsada ventricular izquierda, exploraciones físicas, constantes vitales, exposición al tratamiento del estudio, evaluación de medicaciones concomitantes y prueba de embarazo para mujeres que pueden quedarse embarazadas.

Visión general de las evaluaciones farmacocinéticas clave. Los parámetros FC en plasma determinados para el compuesto 1 serán la concentración plasmática observada máxima (Cmáx), área bajo la curva de concentración plasmática-tiempo desde tiempo 0 hasta 24 horas después de la dosis (ABC²⁴), semivida de eliminación de la fase terminal (t^1/2), depuración plasmática total (CL), tiempo hasta la concentración plasmática pico (máxima) (tmáx), volumen de distribución en el estado estacionario (Vss). Los parámetros FC seleccionados (por ejemplo, Cmáx, ABC²⁴, t i ^/2) se estimarán para los enantiómeros R y S del compuesto 1 según convenga.

Métodos estadísticos. Los análisis estadísticos se realizará por nivel de dosis (Parte A) y cohorte (Parte B) según se necesite o proceda. Todos los análisis serán de naturaleza descriptiva. Todos los resúmenes de datos de seguridad serán realizados usando sujetos que recibieron cualquier compuesto 1 (la población tratada).

Las variables de eficacia de interés principal son ORR y CRR. Se resumirán otras variables de eficacia preliminares que incluyen OS, RFS, PFS, supervivencia sin acontecimientos, duración de la remisión, duración de la respuesta y tiempo hasta la remisión/respuesta. El análisis de eficacia se repetirá para la población tratada y la población evaluable por eficacia (recibió una evaluación del cálculo de la leucemia basal, al menos un ciclo de tratamiento del estudio o al menos 80 % de dosis programada en el ciclo 1, y una evaluación del cálculo de leucemia en el estudio), con el resultado usando la población tratada considerada primaria.

Todas las presentaciones de datos relacionados con el biomarcador se basarán en sujetos tratados con al menos una evaluación de biomarcador, a menos que se especifique lo contrario. Se presentará estadística descriptiva para el nivel basal y cambio desde el nivel basal de criterios de valoración de biomarcadores continuos, por pautas posológicas y/o subconjuntos de enfermedad, y global.

El estudio se realizará en cumplimiento con los Conferencia Internacional sobre armonización de requisitos técnicos para el registro de productos farmacéuticos para uso humano (ICH)/Prácticas clínicas correctas y requisitos reglamentarios aplicables.

Criterios de inclusión. Los sujetos deben cumplen los criterios que siguen para ser incluidos en la fase de aumento de la dosis (Parte A) o de ampliación de dosis (Parte B) de este estudio.

1. Hombres y mujeres > 18 años de edad, en el momento de firmar el documento de consentimiento informado (ICD).

2. El sujeto debe entender y firmar voluntariamente un ICD antes de cualquier evaluación/procedimiento relacionado con el estudio que se realice.

3. El sujeto está dispuesto y con capacidad para adherirse al programa de visitas del estudio y otros requisitos del protocolo.

4. LMA recidivante o insensible como se define por los criterios de la Organización Mundial de la Salud (OMS) que no son adecuados para otras terapias establecidas.

5. Estado funcional del Grupo Oncológico Cooperativo de la Costa Este (ECOG PS) de 0 a 2.

6. Han trascurrido al menos 4 semanas (desde la primera dosis) desde la infusión de linfocitos de donante (DLI) sin acondicionamiento.

7. Los sujetos deben tener los siguientes valores de laboratorio en la selección:

• Ca sérico corregido o Ca sérico libre (ionizado) dentro de los límites de la normalidad (WNL).

o Ca sérico (mg/dl) = Ca total (mg/dl) - 0,8 (albúmina [g/dl] - 4)

• Número total de leucocitos (WBC) < 25 * 109/l antes de la primera infusión. Se permite tratamiento previo o concurrente con hidroxiurea para lograr este nivel.

• Potasio y magnesio dentro de los límites de la normalidad o corregible con suplementos.

• Aspartato aminotransferasa/transaminasa glutámico-oxalacética sérica (AST/SGOT) o alanina aminotransferasa/transaminasa glutámico-pirúvica sérica (ALT/SGPT) < 2,5 * límite superior de la normalidad (ULN).

• Ácido úrico < 7,5 mg/dl (446 pmol/l). Se permite tratamiento previo y/o concurrente con agentes hipouricémicos (por ejemplo, alopurinol, rasburicasa).

• Bilirrubina sérica < 1,5 * ULN.

• Depuración de creatinina sérica estimada de > 60 ml/min usando la ecuación de Cockcroft-Gault.

• INR < 1,5 * ULN y PTT < 1,5 * ULN.

8. Por el plan de prevención del embarazo (PPP) el compuesto 1:

• Mujeres que pueden quedarse embarazadas (FCBP) deben presentar una prueba de embarazo basada en la frecuencia expuesta brevemente en PPP y los resultados del embarazo deben ser negativos.

• A menos que practiquen la abstinencia total de relaciones heterosexuales, las FCBP sexualmente activas deben comprometerse a usar métodos anticonceptivos adecuados, como se especifica en el PPP.

° Las FCBP deben comprometerse a usar dos métodos anticonceptivos fiables simultáneamente (o a practicar la abstinencia completa), sin interrupción, durante 28 días antes de iniciar el compuesto 1, durante toda la duración del tratamiento con el compuesto 1, durante las interrupciones de la dosis y durante al menos 28 días después de la última dosis del compuesto 1.

° La abstinencia completa solo es aceptable en los casos en que éste sea el estilo de vida preferido y habitual del sujeto.

° La abstinencia periódica (métodos de ovulación por calendario, sintotérmicos, postovulatorios) y la retirada no son aceptables.

• A menos que practiquen la abstinencia total de relaciones heterosexuales, los varones sexualmente activos (incluyendo aquellos que se han hecho una vasectomía), deben usar métodos anticonceptivos de barrera (preservativos) cuando mantengan relaciones sexuales con FCBP, como se especifica en el PPP.

° La abstinencia completa solo es aceptable en los casos en que éste sea el estilo de vida preferido y habitual del sujeto.

• Las mujeres deben comprometerse a abstenerse de amamantar o suministrar leche materna durante la duración especificada en el APP.

• Los varones deben comprometerse a no donar semen ni esperma durante la duración especificada en el APP.

• Todos los sujetos debe:

° Entender que el compuesto 1 podría tener un posible riesgo teratogénico.

° Comprometerse a abstenerse de donar sangre durante la duración especificada en el PPP. ° Recibir asesoramiento sobre las precauciones durante el embarazo y los riesgos de exposición fetal (consulte el PPP).

Criterios de exclusión. La presencia de cualquiera de los siguientes excluirá la inclusión del sujeto:

1. Sujetos con leucemia promielocítica aguda (LPA)

2. Sujetos con síntomas clínicos que indican leucemia del sistema nervioso central (SNC) activa o leucemia del SNC conocida. La evaluación de líquido cefalorraquídeo solo se requiere si existe la sospecha clínica de participación del SNC por leucemia durante la selección.

3. Sujetos con complicaciones graves inmediatamente potencialmente mortales de la leucemia, tales como infección diseminada/incontrolada, hemorragia incontrolada y/o coagulación intravascular diseminada incontrolada.

4. Trastornos o afecciones que alteran la homeostasis normal del calcio o que previenen el aporte suplementario de calcio que incluyen:

• Cualquier afección conocida que altere la absorción del calcio.

• Evidencia clínica de hipo- o hiperparatiroidismo.

• Terapia con bisfosfonato o denosumab en las últimas 4 semanas antes de empezar el compuesto 1.

• Cálculos renales activos o recientes (< 1 año antes de empezar el compuesto 1).

• Nivel de 25-hidroxivitamina D sérica < 12 ng/ml (30 nmol/l).

5. Alteración de la función cardíaca o enfermedades cardiacas clínicamente significativas, que incluyen cualquiera de las siguientes:

• Fracción expulsada ventricular izquierda (LVEF) < 45 % como se ha determinado por adquisición por puerta múltiple (MUGA) o ecocardiograma (ECHO).

• Bloqueo completo de la rama izquierda del haz o bifascicular.

• Síndrome congénito de QT largo.

• Arritmias ventriculares persistentes o clínicamente significativas.

• QTcF > 470 ms en el electrocardiograma (ECG) de selección (media de registros por triplicado realizados > 72 horas antes del día 1).

• Angina de pecho inestable o infarto de miocardio < 3 meses antes de empezar el compuesto 1. 6. Pacientes con trasplante autólogo de células madre hematopoyéticas previo que, a juicio del investigador, no se hayan recuperados totalmente de los efectos del último trasplante (por ejemplo, efectos secundarios relacionados con el trasplante).

7. Trasplante alógeno previo de células madre hematopoyéticas (HSCT) con acondicionamiento habitual o de intensidad reducida < 6 meses antes de empezar el compuesto 1.

8. Sujetos en terapia inmunosupresora sistémica posterior a HSCT en el momento de la selección, o con enfermedad injerto contra huésped (GVHD) clínicamente significativa. Se permite el uso de esteroides tópicos para la GVHD cutánea u ocular en curso.

9. T ratamientos sistémicos previos dirigidos contra el cáncer o modalidades en investigación < 5 semividas o 4 semanas antes de empezar el compuesto 1, el que sea más corto. Se permite hidroxiurea para controlar los blastos de la leucemia periférica.

10. Leucaféresis < 2 semanas antes de empezar el compuesto 1.

11. Cirugía mayor < 2 semanas antes de empezar el compuesto 1. Los sujetos deben haberse recuperado de cualquier efecto clínicamente significativo de una cirugía reciente.

12. Mujeres embarazadas o en periodo de lactancia.

13. Infección conocida por el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH).

14. Infección crónica y activa conocida por hepatitis B o C (VHB/VHC).

15. Tratamiento en curso con dosis terapéuticas crónicas de anticoagulantes (por ejemplo, warfarina, heparina de bajo peso molecular, inhibidores del factor Xa).

16. Antecedentes de segundos cánceres concurrentes que requieran tratamiento sistémico activo y continuo.

17. El sujeto tiene alergia/hipersensibilidad conocida al calcio, calcitriol y/o suplementos de vitamina D o a cualquiera de sus ingredientes.

18. El sujeto tiene alguna afección significativa, anomalía de laboratorio o enfermedad psiquiátrica que le impediría participar en el estudio.

19. El sujeto tiene alguna afección, incluida la presencia de anomalías de laboratorio, que lo exponga a un riesgo inaceptable en caso de participar en el estudio.

20. El sujeto tiene alguna afección que le impide interpretar los datos del estudio

Ejemplo 40: Un estudio de fase 1, en abierto y de determinación de la dosis del compuesto 1, un novedoso fármaco modulador de la cereblon E3 ligasa, en sujetos con leucemia mieloide aguda recidivante o insensible, síndromes mielodisplásicos de alto riesgo recidivantes o insensibles

Objetivos principales: Determinar la seguridad y la tolerabilidad del compuesto 1. Definir la dosis no tolerada (NTD), la dosis máxima tolerada (MTD) y/o la dosis de fase 2 recomendada (RP2D) del compuesto 1.

Objetivos secundarios: Proporcionar información sobre la eficacia preliminar del compuesto 1 en LMA R/R y HR-SMD R/R. Caracterizar la farmacocinética (FC) del compuesto 1 en plasma y orina.

Diseño del estudio: Este estudio es un estudio clínico en abierto, de fase 1, de aumento de la dosis y ampliación, el primero en humanos, del compuesto 1 en sujetos con LMA recidivante o insensible o en sujetos con SMD de alto riesgo recidivante o insensible. La parte de aumento de la dosis (Parte A) del estudio evaluará la seguridad y tolerabilidad de la dosis de aumento del compuesto 1, administrado por vía intravenosa, y determinará la MTD del compuesto 1. En la Parte A, se probarán dos formulaciones. La parte de ampliación (Parte B) evaluará adicionalmente la seguridad y eficacia del compuesto 1 administrado a MTD o por debajo en cohortes de ampliación seleccionadas de hasta aproximadamente 20 sujetos evaluables para determinar la RP2D. Se pueden seleccionar una o más pautas posológicas para la ampliación de cohortes (como mínimo, una en LMA R/R y una en HR-SMD R/R). Los sujetos con SMD solo se incluirán durante la Parte B. Las Partes A y B consistirán en 3 periodos: Selección, tratamiento y seguimiento. La respuesta de la leucemia será determinada por el investigador. La evaluación de la enfermedad se basará en los criterios de respuesta del Grupo internacional de trabajo (IWG) en LMA (Cheson, et al, J Clin Oncol 2003;21(24):4642-9). La respuesta del SMD se basará en los criterios de respuesta de IWG para mielodisplasia (Cheson BD, et al., Blood. 2006; 108(2):419-25).

Periodo de selección: El periodo de selección empieza 28 días antes de la primera dosis del compuesto 1. El sujeto y el personal que realice las administraciones deberán firmar y fechar el documento de consentimiento informado antes de empezar cualquier otro procedimiento del estudio. Todas las pruebas y procedimientos de selección deberán ser terminadas 28 días antes de la primera dosis del compuesto 1. Para la Parte B del estudio, los sujetos serán asignados a cualquiera de la corte de LMA R/R o HR-SMD R/R basándose en una confirmación de diagnóstico por el laboratorio central.

Periodo de tratamiento: En el periodo de tratamiento, el compuesto 1 se administrará por vía intravenosa en los días 1-5 de cada ciclo de 28 días durante hasta 4 ciclos en ausencia de progresión de la enfermedad, recaída, toxicidad inaceptable o decisión de retirada del sujeto/médico (la progresión de la enfermedad se define como: un aumento > 50 % en el porcentaje de cifras de blastos de la médula ósea de la cifra de blastos de la médula ósea basal (selección) que persiste durante al menos 2 evaluaciones de médula ósea separadas al menos 1 mes, a menos que la cifra de blastos de la médula ósea basal sea > 70 %, en cuyo caso un resultado de > 70 % de blastos que persisten durante 2 evaluaciones de la medula ósea posteriores a la basal separadas al menos 1 mes se consideraría progresión, o una duplicación de la cifra de blastos de sangre periférica absoluta basal que persiste durante > 7 días la cifra de blastos de sangre periférica absoluta final es > 10 * 109/l.) Se pueden evaluar programas de administración modificados (por ejemplo, aumento de 5 días a hasta 10 días de dosis o aumento de la duración de infusión) en cohortes adicionales, si fuera necesario, basándose en la toxicidad, perfiles FC y resultados FD. Se puede explorar un programa adicional del compuesto 1 administrado una vez al día en los días 1-3 y días 810 de cada ciclo de 28 días. Los que demuestren beneficio del tratamiento sin toxicidad inaceptable (remisión completa [CR], remisión parcial [PR], o enfermedad estable con discusión con el supervisor médico) pueden continuar el tratamiento más allá del ciclo 4 hasta la pérdida de ese beneficio, toxicidad inaceptable, o decisión del sujeto/médico de retirada. Se requerirá que todos los sujetos empiecen el aporte suplementario de calcio, calcitriol y vitamina D al menos 3 días antes del día 1 de cada ciclo y continúen hasta > 3 días después de la última dosis del compuesto 1 en cada ciclo (por ejemplo, > día 8 cuando el compuesto 1 se administra en los días 1-5, > día 13 cuando el compuesto 1 se administre en los días 1-3/días 8-10).

En el ciclo 1 de la Parte A, se realizará una evaluación de la médula ósea en el día 28 (± 3 días). Basándose en la evaluación de la médula ósea del día 28, se seguirá a los sujetos con médula ósea hipoplástica, sin evidencia de leucemia persistente, que tienen neutropenia de grado > 3 durante 2 semanas adicionales para monitorizar la seguridad en el ciclo 1 (duración total de 42 días). Se realizará una evaluación adicional de la médula ósea en el momento de la recuperación hematológica o el día 42 (± 3 días). Por lo tanto, en la Parte A, la ventana para la evaluación de la toxicidad limitante de la dosis (DLT) durante el ciclo 1 será hasta 42 días (28 o 42 días). En la Parte B, el ciclo 1 será de 28 días de duración. Los ciclos > 2 serán de 28 días de duración. Los ciclos posteriores deberían empezar < 7 días después del último día del ciclo previo.

Periodo de seguimiento: En el periodo de seguimiento, se seguirá a todos los sujetos durante 28 días (± 3 días) después de la última dosis del compuesto 1 para seguridad. Los sujetos sin progresión documentada de la enfermedad (o recaída) tendrán evaluaciones de eficacia de hemogramas completos y frotis de sangre periférica realizados cada 8 semanas (± 1 semana) durante el primer año y cada 12 semanas (± 2 semanas) durante el 2° año o hasta la progresión de enfermedad (o recaída), inicio de una nueva terapia antineoplásica, retirada del consentimiento del estudio, muerte, o el final del estudio, lo que ocurra primero. Se hará una evaluación de la médula ósea al final del primer año y como se indique clínicamente durante el periodo de seguimiento.

Todos los sujetos serán seguidos para el seguimiento de supervivencia según el programa para el seguimiento a largo plazo de la eficacia durante hasta 2 años o hasta la muerte, pérdida de vista durante el seguimiento, o el final del estudio, lo que ocurra primero. El seguimiento de la supervivencia se puede realizar por revisión de registros (incluyendo registros públicos) y/o contacto telefónico con el sujeto, la familia o el médico responsable del sujeto.

Parte A - Aumento de la dosis. Durante la fase de aumento (Parte A), se usará un diseño de valoración acelerada modificada (Simon et al., J Natl Cancer Inst 1997; 89(15): 1138-47) para establecer la toxicidad inicial. Se administrará a las cohortes de uno o más sujetos con el compuesto 1 a dosis que aumentarán en incrementos del 100 % por cohorte hasta que > 2 sujetos experimenten un acontecimiento adverso de grado > 2 relacionado con el compuesto 1 en la ventana de DLT (pueden ser cohortes diferentes), o > 1 sujeto experimente una DLT dentro de la ventana de DLT. En ese momento, la cohorte actual y las cohortes posteriores se ampliarán incluyendo de 3 a 6 sujetos. Se iniciará simultáneamente un programa de aumento de la dosis con incrementos de dosis que no superen el 50 % para establecer la NTD y la MTD. La dosis inicial será 0,3 mg. En el inicio del estudio se utilizará una formulación inicial (formulación A), y durante el aumento de la dosis se introducirá una segunda formulación (formulación Ib descrita en la Tabla 43) para sustituir la formulación A. La formulación A tiene la siguiente composición (véase la publicación de EE. UU. N.° 2017/0196847-A1).

El disolvente residual de DMA en la formulación A no deberá superar los límites de exposición diaria permitida (PDE) fijados en ICH Q3C Impurities: Residual Solvents para proceder con las cohortes de aumento de la dosis por encima de una dosis diaria del compuesto 1 de 2,4 mg. El nivel de disolvente residual (ácido fórmico) en la formulación Ib permite dosis diarias del compuesto 1 de hasta 20 mg sin superar su PDE fijada en la guía Q3C de ICH.

La formulación Ib se introducirá en un nueva cohorte de dosis (según las pautas de aumento de la dosis del estudio) después de revisar las toxicidades observadas vistas en los niveles de dosis inicial de la formulación A.

Se puede decidir evaluar una cohorte de dosis más alta, sujetos adicionales dentro de una cohorte de dosis, cohortes de dosis intermedia, incrementos de dosis más pequeños, programas de administración alternos (por ejemplo, aumentando desde 5 hasta 10 días la administración del compuesto 1 o tiempos de infusión más largos) y/o declarar una MTD basándose en la revisión de datos clínicos y de seguridad del laboratorio disponibles, perfiles FC y resultados FD. En el supuesto caso de que se evalúe un programa de administración alternativo, la dosis inicial y el programa no superarán la concentración de dosis de una cohorte de dosis que ha cumplido previamente los criterios para aumento de la dosis. Se puede explorar un programa adicional de compuesto 1 administrado una vez al día en los días 1-3 y días 8-10 de cada programa de 28 días.

Después de administrar la primera dosis en cualquier cohorte durante el aumento de la dosis, los sujetos en cada cohorte se observan durante al menos 28 días y hasta 42 días (ciclo 1, ventana de DLT) antes de que pueda empezar la siguiente cohorte de dosis más alta. No se incluirá más de un sujeto por día en una cohorte de aumento de la dosis dada. Un sujeto evaluable para DLT se define como uno que: ha recibido al menos el 80 % de la dosis del ciclo 1 planeada total (por ejemplo, > 4 dosis del compuesto 1 para un programa de dosis de 5 días; en caso de que se olvide una dosis, se completarán > 4 en el día 10 o antes o > 5 dosis para el día 14 para el programa de D1-3/D8-10) del compuesto 1 durante el ciclo 1 sin experimentar una DLT, o experimentada una DLT después de recibir al menos una dosis (o fracción de la misma) del compuesto 1.

En el supuesto caso de que se evalúe un programa de dosis alternas (por ejemplo, aumentar desde 5 días hasta 10 días de administración) en la Parte A, se aplicarán los mismos criterios para determinar sujetos evaluables para DLT. Los sujetos no evaluables para DLT serán sustituidos.

Un nivel de dosis (dosis/programa) se considerará intolerable si > 33 % de los sujetos evaluables en una cohorte de dosis experimentan DLT durante el ciclo 1. La MTD se definirá como la última dosis por debajo de la NTD, a la que < 33 % de sujetos evaluables experimentaron DLT durante el ciclo 1. Si 2 o más de 6 sujetos evaluable experimentan DLT en la primera cohorte de dosis, se puede explorar una cohorte de dosis más baja (es decir, 0,1 mg del compuesto 1). Se puede evaluar una dosis intermedia del compuesto 1 (una entre la NTD y el nivel de la última dosis antes de la NTD) para determinar con exactitud la MTD.

No se permitirá el aumento intraindividual de la dosis durante el periodo de evaluación de DLT; sin embargo, en ciclos > 2, los sujetos sin evidencia de progresión de la enfermedad que están tolerando sus dosis asignadas del compuesto 1 pueden pasar al nivel de dosis más alto que se ha mostrado que es tolerado suficientemente por al menos un cohorte de sujetos en este estudio (es decir, < 33 % de sujetos evaluables que han experimentado una DLT a ese nivel de dosis). Si el nivel de dosis tolerado más alto es la formulación Ib, se permite que un sujeto actualmente incluido en la formulación A cambie a la nueva formulación.

Parte B - Ampliación de la cohorte: Después de terminar el aumento de la dosis (Parte A), sujetos adicionales pueden ser incluidos en una fase de ampliación (Parte B) con hasta aproximadamente 20 sujetos evaluables en cada cohorte. La ampliación puede ocurrir a la MTD y el programa establecido en la fase de aumento de la dosis, y/o a una dosis y programa tolerable alterno, basado en la revisión de datos de seguridad, FC y FD de la Parte A. Se pueden seleccionar una o más pautas posológicas (dosis, programas) para la ampliación de la cohorte.

Población del estudio: Se incluirá en el estudio a hombres y mujeres, 18 años o mayores, con LMA recidivante o insensible o SMD de alto riesgo recidivante o insensible, como se define por los criterios de la Organización Mundial de la Salud (OMS), que no son adecuados para otras terapias establecidas.

En la Parte A, solo se incluirá a sujetos con LMA R/R LMA. En la Parte B, al menos una cohorte incluirá sujetos con LMA R/R, que incluye sujetos que recayeron después del HSCT alógeno, que está en la segunda recaída o posterior, que son insensibles al tratamiento de inducción inicial o de reinducción, que son insensibles a o recayeron después de un agente hipometilante (fracaso de HMA definido como progresión primaria o falta de beneficio clínico después de un mínimo de 6 ciclos o incapaz de tolerar HMA debido a toxicidad), o que recayeron en 1 año desde el tratamiento inicial (excluyendo aquellos con estado de riesgo favorable).

En la Parte B, se tratará a al menos una cohorte de sujetos con HR-SMD R/R que incluye sujetos que puntúan > 3,5 puntos en el Sistema de puntuación pronóstica internacional revisado (IPSS-R) [por ejemplo, riesgo intermedio de IPSS-R (en combinación con más del 10 % de blastos de médula ósea o riesgo citogenético de IPSS-R malo o muy malo), riesgo alto de IPSS-R y muy alto de IPSS-R] y no son adecuados para otras terapias establecidas (por ejemplo, trasplante o agente hipometilante).

Duración del estudio. Se espera que la inclusión necesite aproximadamente 27 a 36 meses para completarse (18 a 24 meses para el aumento de la dosis, y 9 a 12 meses para la ampliación). Se espera que la finalización del tratamiento activo y el seguimiento después del tratamiento necesiten 6 a 24 meses adicionales. Se espera que todo el estudio dure hasta aproximadamente 3 a 5 años. El final del estudio se define como o la fecha de la última visita del último sujeto para completar el seguimiento después del tratamiento, o la fecha de recepción del último punto de datos del último sujeto que se requiere para el análisis primario, secundario y/o exploratorio, como se especifica previamente en el protocolo, cualquiera que sea la fecha posterior.

Tratamientos del estudio. Se proporcionará el producto en investigación, el compuesto 1 para inyección IV, etiquetado apropiadamente para su uso en investigación, según las reglamentaciones de la autoridad sanitaria del país pertinente. El fármaco del estudio se administrará como se ha expuesto brevemente en la sección anterior de Periodo de tratamiento.

El tratamiento del estudio puede ser interrumpido si existe evidencia de progresión clínicamente significativa de la enfermedad (o recaída), toxicidad inaceptable o decisión de retirada del sujeto/médico. Los sujetos pueden seguir recibiendo los fármacos del estudio más allá de la progresión de la enfermedad a criterio del investigador en colaboración con el supervisor médico de Celgene.

Visión general de las evaluaciones de eficacia clave. La variable de eficacia principal es la tasa de respuesta. Todos los sujetos tratados se incluirán en los análisis de eficacia. La respuesta de la leucemia será determinada por el investigador. La evaluación de la enfermedad se basará en los criterios de respuesta del Grupo internacional de trabajo (IWG) en LMA (Cheson, et al, J Clin Oncol 2003;21(24):4642-9). La respuesta global será determinada usando los criterios de respuesta de IWG para mielodisplasia para la cohorte de HR-SMD (Cheson BD, et al., Blood. 2006; 108(2):419-25).

Se proporcionará un análisis descriptivo de evidencia de actividad antileucémica basado en evaluaciones clínicas, de laboratorio, moleculares y citogenéticas por el investigador, que incluyen la evaluación del porcentaje de blastos de la médula ósea, citogenética de la médula ósea, estudios genéticos moleculares para evaluar respuestas moleculares, citometría de flujo de la médula ósea, número de plaquetas y cifra absoluta de neutrófilos. Los criterios de respuesta de LMA se resumirán por las categorías de mejor respuesta global: tasa de remisión completa (CRR) y tasa de respuesta objetiva (o Rr ). La ORR incluye todas las respuestas de remisión completa (CR) (es decir, estado morfológico sin leucemia, CR morfológica, CR citogenética, CR molecular y CR morfológica con recuperación de sangre incompleta) y remisión parcial. Para SMD, la ORR incluye todas las respuestas (CR, remisión completa de médula ósea mCR y PR).

La variable de eficacia de interés será la ORR y la CRR. Se resumirán otras medidas de actividad clínica, que incluyen supervivencia global (OS), supervivencia sin recaída (RFS), supervivencia sin progresión (PFS), supervivencia sin acontecimientos, duración de la remisión, duración de la respuesta, tiempo hasta la transformación en LMA (solo sujetos con HR-SMD) y tiempo hasta la remisión/respuesta.

Visión general de evaluaciones de seguridad clave. Las variables de seguridad para este estudio incluyen acontecimientos adversos, variables del laboratorio clínico de seguridad, electrocardiogramas de 12 derivaciones, estado funcional del Grupo Oncológico Cooperativo de la Costa Este, evaluaciones de la fracción expulsada ventricular izquierda, exploraciones físicas, constantes vitales, exposición al tratamiento del estudio, evaluación de medicaciones concomitantes y prueba de embarazo para mujeres que pueden quedarse embarazadas.

Visión general de las evaluaciones farmacocinéticas clave. Los parámetros FC en plasma clave determinados para el compuesto 1 incluirán la concentración plasmática observada máxima (Cmáx), área bajo la curva de concentración plasmática-tiempo desde tiempo 0 hasta 24 horas después de la dosis (ABC²⁴), semivida de eliminación de la fase terminal (ti^/2), depuración plasmática total (CL), tiempo hasta la concentración plasmática pico (máxima) (tmáx), volumen de distribución en el estado estacionario (Vss), porcentaje de dosis excretada en la orina como invariable (Fe) y depuración renal (CLR). Los parámetros FC seleccionados (por ejemplo, Cmáx, ABC²⁴, t^1/2) se estimarán para los enantiómeros R y S del compuesto 1 según convenga. Los parámetros FC clave en plasma y orina como se ha descrito anteriormente también se estimarán para HPBCD.

Métodos estadísticos. Los análisis estadísticos se realizará por nivel de dosis (Parte A) y cohorte (Parte B) según se necesite o proceda. Todos los análisis serán de naturaleza descriptiva. Todos los resúmenes de datos de seguridad serán realizados usando sujetos que recibieron cualquier compuesto 1 (la población tratada).

Las variables de eficacia de interés principal son ORR y CRR. Se resumirán otras variables de eficacia preliminares que incluyen OS, RFS, PFS, supervivencia sin acontecimientos, duración de la remisión, duración de la respuesta y tiempo hasta la remisión/respuesta. El análisis de eficacia se repetirá para la población tratada y la población evaluable por eficacia (recibió una evaluación del cálculo de la leucemia basal, al menos un ciclo de tratamiento del estudio o al menos 80 % de dosis programada en el ciclo 1, y una evaluación del cálculo de leucemia en el estudio), con el resultado usando la población tratada considerada primaria.

Todas las presentaciones de datos relacionados con el biomarcador se basarán en sujetos tratados con al menos una evaluación de biomarcador, a menos que se especifique lo contrario. Se presentará estadística descriptiva para el nivel basal y cambio desde el nivel basal de criterios de valoración de biomarcadores continuos, por pautas posológicas y/o subconjuntos de enfermedad, y global.

El estudio se realizará en cumplimiento con los Conferencia Internacional sobre armonización de requisitos técnicos para el registro de productos farmacéuticos para uso humano (ICH)/Prácticas clínicas correctas y requisitos reglamentarios aplicables.

Criterios de inclusión. Los sujetos deben cumplen los criterios que siguen para ser incluidos en la fase de aumento de la dosis (Parte A) o de ampliación de dosis (Parte B) de este estudio.

1. Hombres y mujeres > 18 años de edad, en el momento de firmar el ICD.

2. El sujeto debe entender y firmar voluntariamente un ICD antes de cualquier evaluación/procedimiento relacionado con el estudio que se realice.

3. El sujeto está dispuesto y con capacidad para adherirse al programa de visitas del estudio y otros requisitos del protocolo.

4. LMA recidivante o insensible (Partes A y B) o HR-SMD R/R (solo Parte B) como se define por los criterios de la Organización Mundial de la Salud (OMS) que no son adecuados para otras terapias establecidas.

a. En la Parte A, LMA R/R

b. En la Parte B, LMA R/R que incluye

- Recidivante después de HSCT alógeno o

- En segunda recaída o posterior o

- Insensible al tratamiento de inducción inicial o de reinducción o

- Insensible o recaída después de tratamiento de HMA (fracaso de HMA definido como progresión primaria o falta de beneficio clínico después de un mínimo de 6 ciclos o incapaz de tolerar HMA debido a toxicidad) o

- Recidivante en 1 año desde el tratamiento inicial (excluyendo aquellos con riesgo favorable basado en citogenética)

c. En la Parte B, HR-SMD R/R (IPSS-R > 3,5 puntos):

- Riesgo intermedio de IPSS-R (en combinación con más del 10 % de blastos de médula ósea o riesgo citogenético de IPSS-R malo o muy malo) o

- IPSS-R alto o

- Riesgo de IPSS-R muy alto.

5. Estado funcional del Grupo Oncológico Cooperativo de la Costa Este (ECOG PS) de 0 a 2.

6. Han trascurrido al menos 4 semanas (desde la primera dosis) desde la infusión de linfocitos de donante (DLI) sin acondicionamiento.

7. Los sujetos deben tener los siguientes valores de laboratorio en la selección:

• Ca sérico corregido o Ca sérico libre (ionizado) dentro de los límites de la normalidad (WNL).

o Ca sérico (mg/dl) = Ca total (mg/dl) - 0,8 (albúmina [g/dl] - 4)

• Número total de leucocitos (WBC) < 25 x 109/l antes de la primera infusión. Se permite tratamiento previo o concurrente con hidroxiurea para lograr este nivel.

• Potasio y magnesio dentro de los límites de la normalidad o corregible con suplementos.

• Aspartato aminotransferasa/transaminasa glutámico-oxalacética sérica (AST/SGOT) o alanina aminotransferasa/transaminasa glutámico-pirúvica sérica (ALT/SGPT) < 2,5 x límite superior de la normalidad (ULN).

• Ácido úrico < 7,5 mg/dl (446 pmol/l). Se permite tratamiento previo y/o concurrente con agentes hipouricémicos (por ejemplo, alopurinol, rasburicasa).

• Bilirrubina sérica < 1,5 x ULN.

• Depuración de creatinina sérica estimada de > 60 ml/min usando la ecuación de Cockcroft-Gault. La depuración de creatinina medida de un recogida de orina de 24 horas es aceptable si se indica clínicamente.

• INR < 1,5 x ULN y PTT < 1,5 x ULN.

8. Por el plan de prevención del embarazo (PPP) el compuesto 1:

• Mujeres que pueden quedarse embarazadas (FCBP) deben presentar una prueba de embarazo basada en la frecuencia expuesta brevemente en PPP y los resultados del embarazo deben ser negativos.

• A menos que practiquen la abstinencia total de relaciones heterosexuales, las FCBP sexualmente activas deben comprometerse a usar métodos anticonceptivos adecuados, como se especifica en el PPP.

° Las FCBP deben comprometerse a usar dos métodos anticonceptivos fiables simultáneamente (o a practicar la abstinencia completa), sin interrupción, durante 28 días antes de iniciar el compuesto 1, durante toda la duración del tratamiento con el compuesto 1, durante las interrupciones de la dosis y durante al menos 28 días después de la última dosis del compuesto 1.

° La abstinencia completa solo es aceptable en los casos en que éste sea el estilo de vida preferido y habitual del sujeto.

° La abstinencia periódica (métodos de ovulación por calendario, sintotérmicos, postovulatorios) y la retirada no son aceptables. •

• A menos que practiquen la abstinencia total de relaciones heterosexuales, los varones sexualmente activos (incluyendo aquellos que se han hecho una vasectomía), deben usar métodos anticonceptivos de barrera (preservativos) cuando mantengan relaciones sexuales con FCBP, como se especifica en el PPP.

° La abstinencia completa solo es aceptable en los casos en que éste sea el estilo de vida preferido y habitual del sujeto.

° Los pacientes varones deben informar a sus parejas que sean mujeres que pueden quedarse embarazadas de que utilicen dos métodos de anticoncepción fiable durante toda la duración del tratamiento, durante las interrupciones de la dosis y durante al menos 90 días después de la última dosis del compuesto 1, como se especifica en PPP.

• Las mujeres deben comprometerse a abstenerse de amamantar o suministrar leche materna durante la duración especificada en el APP.

• Los varones deben comprometerse a no donar semen ni esperma durante la duración especificada en el APP.

• Todos los sujetos debe:

° Entender que el compuesto 1 podría tener un posible riesgo teratogénico.

° Comprometerse a abstenerse de donar sangre durante la duración especificada en el PPP. ° Recibir asesoramiento sobre las precauciones durante el embarazo y los riesgos de exposición fetal (consulte el PPP).

Criterios de exclusión.

La presencia de cualquiera de los siguientes excluirá la inclusión del sujeto:

1. Sujetos con leucemia promielocítica aguda (LPA)

2. Sujetos con síntomas clínicos que indican leucemia del sistema nervioso central (SNC) activa o leucemia del SNC conocida. La evaluación de líquido cefalorraquídeo solo se requiere si existe la sospecha clínica de participación del SNC por leucemia durante la selección.

3. Sujetos con complicaciones graves inmediatamente potencialmente mortales de la leucemia, tales como infección diseminada/incontrolada, hemorragia incontrolada y/o coagulación intravascular diseminada incontrolada.

4. Trastornos o afecciones que alteran la homeostasis normal del calcio o que previenen el aporte suplementario de calcio que incluyen:

• Cualquier afección conocida que altere la absorción del calcio.

• Evidencia clínica de hipo- o hiperparatiroidismo.

• Terapia con bisfosfonato o denosumab en las últimas 4 semanas antes de empezar el compuesto 1.

• Cálculos renales activos o recientes (< 1 año antes de empezar el compuesto 1).

• Nivel de 25-hidroxivitamina D sérica < 12 ng/ml (30 nmol/l).

5. Alteración de la función cardíaca o enfermedades cardiacas clínicamente significativas, que incluyen cualquiera de las siguientes:

• Fracción expulsada ventricular izquierda (LVEF) < 45 % como se ha determinado por adquisición por puerta múltiple (MUGA) o ecocardiograma (ECHO).

• Bloqueo completo de la rama izquierda del haz o bifascicular.

• Síndrome congénito de QT largo.

• Arritmias ventriculares persistentes o clínicamente significativas.

• QTcF > 470 ms en el electrocardiograma (ECG) de selección (media de registros por triplicado realizados > 72 horas antes del día 1). •

• Angina de pecho inestable o infarto de miocardio < 3 meses antes de empezar el compuesto 1.

6. Pacientes con trasplante autólogo de células madre hematopoyéticas previo que, a juicio del investigador, no se hayan recuperados totalmente de los efectos del último trasplante (por ejemplo, efectos secundarios relacionados con el trasplante).

7. Trasplante alógeno previo de células madre hematopoyéticas (HSCT) con acondicionamiento habitual o de intensidad reducida < 6 meses antes de empezar el compuesto 1.

8. Sujetos en terapia inmunosupresora sistémica posterior a HSCT en el momento de la selección, o con enfermedad injerto contra huésped (GVHD) clínicamente significativa. Se permite el uso de esteroides tópicos para la GVHD cutánea u ocular en curso.

9. T ratamientos sistémicos previos dirigidos contra el cáncer o modalidades en investigación < 5 semividas o 4 semanas antes de empezar el compuesto 1, el que sea más corto. Se permite hidroxiurea para controlar los blastos de la leucemia periférica.

10. Leucaféresis < 2 semanas antes de empezar el compuesto 1.

11. Cirugía mayor < 2 semanas antes de empezar el compuesto 1. Los sujetos deben haberse recuperado de cualquier efecto clínicamente significativo de una cirugía reciente.

12. Mujeres embarazadas o en periodo de lactancia.

13. Infección conocida por el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH).

14. Infección crónica y activa conocida por hepatitis B o C (VHB/VHC).

15. Tratamiento en curso con dosis terapéuticas crónicas de anticoagulantes (por ejemplo, warfarina, heparina de bajo peso molecular, inhibidores del factor Xa).

16. Antecedentes de segundos cánceres concurrentes que requieran tratamiento sistémico activo y continuo.

17. El sujeto tiene alergia/hipersensibilidad conocida al calcio, calcitriol y/o suplementos de vitamina D o a cualquiera de sus ingredientes.

18. El sujeto tiene alguna afección significativa, anomalía de laboratorio o enfermedad psiquiátrica que le impediría participar en el estudio.

19. El sujeto tiene alguna afección, incluida la presencia de anomalías de laboratorio, que lo exponga a un riesgo inaceptable en caso de participar en el estudio.

20. El sujeto tiene alguna afección que le impide interpretar los datos del estudio

Claims (17)

REIVINDICACIONES

1. Una formulación que comprende: (2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida), o un estereoisómero o mezcla de estereoisómeros, sal farmacéuticamente aceptable, tautómero, solvato, hidrato, cocristal, clatrato o polimorfo de la misma en una cantidad de aproximadamente el 0,01 a aproximadamente el 0,15 % e hidroxipropil p-ciclodextrina o sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 99,1 a aproximadamente el 99,99 %, basado en el peso total de la formulación, en donde el término "aproximadamente" contempla el porcentaje en peso dentro del 10 %, o el 5 % del porcentaje en peso que está englobado.

2. La formulación de la reivindicación 1 que comprende: (2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida), o un estereoisómero o mezcla de estereoisómeros, sal farmacéuticamente aceptable, tautómero, solvato, hidrato, cocristal, clatrato o polimorfo de la misma en una cantidad de aproximadamente el 0,08 a aproximadamente el 0,15 % e hidroxipropil p-ciclodextrina o sulfobutil éter-beta-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 99,1 a aproximadamente el 99,9 %, basado en el peso total de la formulación.

3. La formulación de la reivindicación 1, que comprende (2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida), o un estereoisómero o mezcla de estereoisómeros, sal farmacéuticamente aceptable, tautómero, solvato, hidrato, cocristal, clatrato o polimorfo de la misma en la cantidad desde aproximadamente el 0,1 hasta aproximadamente el 0,13 %, o en donde la (2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida), o un estereoisómero o mezcla de estereoisómeros, sal farmacéuticamente aceptable, tautómero, solvato, hidrato, cocristal, clatrato o polimorfo de la misma está presente en una cantidad de aproximadamente el 0,12 % basado en el peso total de la formulación.

4. La formulación de la reivindicación 1 que comprende: (2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida), o un estereoisómero o mezcla de estereoisómeros, sal farmacéuticamente aceptable, tautómero, solvato, hidrato, cocristal, clatrato o polimorfo de la misma en una cantidad de aproximadamente el 0,01 a aproximadamente el 0,08 % e hidroxipropil p-ciclodextrina en una cantidad de aproximadamente el 99,40 a aproximadamente el 99,99 %.

5. La formulación de la reivindicación 1, que comprende (2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida), o un estereoisómero o mezcla de estereoisómeros, sal farmacéuticamente aceptable, tautómero, solvato, hidrato, cocristal, clatrato o polimorfo de la misma desde aproximadamente el 0,01 hasta aproximadamente el 0,08 %, hidroxipropil p-ciclodextrina desde aproximadamente el 99,40 % hasta aproximadamente el 99,99 % y ácido fórmico desde aproximadamente el 0,1 hasta aproximadamente el 0,3 % basado en el peso total de la formulación.

6. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 que comprende además ácido fórmico en una cantidad de no más de aproximadamente el 0,5 % basado en el peso total de la composición

7. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, que comprende una forma sólida de (2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida) o una forma amorfa de (2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida).

8. Una formulación acuosa que comprende la formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 y un diluyente, opcionalmente en donde el diluyente es agua o solución salina al 0,45 %, o en donde el diluyente es solución salina al 0,9 %.

9. La formulación acuosa de la reivindicación 8, que comprende (2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida), o un estereoisómero o mezcla de estereoisómeros, sal farmacéuticamente aceptable, tautómero, solvato, hidrato, cocristal, clatrato o polimorfo de la misma en una cantidad de aproximadamente 0,1 a 0,3 mg/ml.

10. La formulación acuosa de la reivindicación 8, en donde la disolución acuosa tiene un pH en un intervalo desde aproximadamente 3,0 hasta aproximadamente 3,6, o en donde la disolución acuosa tiene un pH en un intervalo desde aproximadamente 4,2 hasta aproximadamente 4,4.

11. La formulación acuosa de la reivindicación 8, en donde la disolución acuosa tiene una osmolalidad de aproximadamente 260-280 mOsm/kg o en donde la disolución acuosa tiene una osmolalidad de aproximadamente 310-380 mOsm/kg.

12. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o la formulación acuosa de la reivindicación 8 para su uso en un método de tratamiento de un cáncer en un mamífero.

13. La formulación acuosa para su uso de la reivindicación 12, en donde el método comprende administrar la formulación acuosa por vía intravenosa.

14. La formulación para el uso de la reivindicación 12 o la formulación acuosa para el uso de la reivindicación 12 o 13, en donde el cáncer es leucemia, opcionalmente la leucemia es leucemia linfocítica crónica, leucemia mielocítica crónica, leucemia linfoblástica aguda o leucemia mieloide aguda.

15. La formulación para el uso de la reivindicación 12, o la formulación acuosa para el uso de la reivindicación 12 o 13, que comprende además administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de otro segundo agente activo o una terapia de cuidados paliativos, opcionalmente en donde el otro segundo agente activo es un anticuerpo terapéutico que se une específicamente a un antígeno del cáncer, factor de crecimiento hepatopoyético, citocina, agente antineoplásico, antibiótico, inhibidor de cox-2, agente inmunomodulador, agente inmunosupresor, corticosteroide o un mutante farmacológicamente activo o derivado del mismo.

16. Un proceso de preparación de la formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 que comprende: disolver (2-(4-clorofenil)-N-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-5-il)metil)-2,2-difluoroacetamida) en ácido fórmico para obtener una premezcla, disolver hidroxipropil p-ciclodextrina en agua para obtener una disolución, añadir la premezcla a la disolución para obtener una disolución de fármaco.

17. El proceso de la reivindicación 16 que comprende además liofilizar la disolución para producir una formulación liofilizada.