ES2939493T3

ES2939493T3 - Inhibidor de la indoleamina-2,3-dioxigenasa, procedimiento de preparación del mismo y uso del mismo

Info

Publication number: ES2939493T3
Application number: ES19746904T
Authority: ES
Inventors: Wu Du; Wen Ren; Haibin Lv; Haibo Li; Kun Wen; Jinyun He; Dekun Qin; Xinghai Li; Yuanwei Chen
Original assignee: Hinova Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Hinova Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2018-02-02
Filing date: 2019-01-31
Publication date: 2023-04-24
Anticipated expiration: 2039-01-31
Also published as: EP3747875A4; US11591301B2; JP2021512877A; CN110128367A; EP3747875B1; US20210047281A1; JP7301856B2; EP3747875A1; WO2019149255A1

Abstract

La presente invención proporciona un compuesto representado por la fórmula (I). La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica que contiene el compuesto de fórmula (I) y al uso del compuesto en la preparación de un fármaco inhibidor de la indoleamina-2,3-dioxigenasa (IDO). El compuesto preparado en la presente invención tiene un efecto de inhibición evidente sobre la IDO proteasa y se metaboliza de forma estable en el organismo. El presente compuesto o composición farmacéutica del mismo se puede usar para preparar un fármaco inhibidor de IDO y también se puede usar para preparar un fármaco para prevenir y/o tratar enfermedades que tienen características patológicas de la vía metabólica del triptófano mediada por IDO. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Inhibidor de la indoleamina-2,3-dioxigenasa, procedimiento de preparación del mismo y uso del mismo

Campo técnico

La presente invención pertenece al campo de la química farmacéutica y se refiere a un inhibidor de la indoleamina-2,3-dioxigenasa, al procedimiento de preparación y al uso del mismo.

Antecedentes de la técnica

El tumor maligno es una de las principales enfermedades que amenazan la salud y la vida humanas. Según las estadísticas de la National Health Commission, la incidencia del tumor en China continental es de aproximadamente 235/100000, y la tasa de mortalidad es de aproximadamente 144,3/100000.

Debido al crecimiento ilimitado, la invasión y la metástasis de los tumores malignos, los tres procedimientos de tratamiento convencionales (cirugía, radioterapia y quimioterapia) utilizados actualmente en clínica no pueden permitir eliminar o matar completamente las células tumorales, por lo que a menudo se producen metástasis o recidivas tumorales. La bioterapia tumoral es un nuevo procedimiento terapéutico que utiliza la biotecnología moderna y sus productos afines para la prevención y el tratamiento de tumores. Por sus características de seguridad, eficacia, escasos efectos secundarios, etc., la bioterapia se ha convertido en el cuarto modo de tratamiento de tumores, a excepción de la cirugía, la radioterapia y la quimioterapia. Puede lograr el efecto antitumoral inspirando el mecanismo de defensa natural del huésped o proporcionando las sustancias producidas naturalmente con una fuerte focalización.

La indoleamina-2,3-dioxigenasa (IDO) es un tipo de proteína monomérica que contiene hemo y consiste en 403 residuos de aminoácidos, incluidos dos dominios a-hélice plegados. El gran dominio contiene el bolsillo catalítico, y el sustrato puede tener interacciones hidrófobas y de otro tipo con la IDO en el bolsillo catalítico. Excepto en el hígado, la IDO es la única enzima limitante de la tasa que puede catalizar el metabolismo del triptófano y hacer que se descomponga en una serie de metabolitos, incluido el ácido quinolínico, por la vía de la cinurenina. Otro tipo de enzimas que catalizan el metabolismo del triptófano son las triptófano-2,3-dioxigenasas, que tienen sitios de actividad hemo similares con la IDO, pero sólo alrededor del 10 % de las secuencias de aminoácidos de ambas enzimas son iguales. Alrededor del 95 % del L-triptófano libre del cuerpo humano puede metabolizarse por la vía de la cinurenina, y se producen muchos tipos de metabolitos biológicamente activos, como la cinurenina, el ácido cinúrico, la 3-hidroxicinurenina, el ácido 3-hidroxi-2-aminobenzoico, el ácido picolínico, el ácido quinolínico y la coenzima A oxidada, etc. El nivel de expresión de IDO era más bajo en estado normal, y aumentaba significativamente en el proceso de inflamación o infección. Además, el lipopolisacárido y las citoquinas, entre otros, podrían inducir la expresión de IDO. Un estudio in vitro indica que, excepto la cinurenina, los metabolitos intermedios del triptófano, el ácido 3-hidroxi-2-aminobenzoico y el ácido quinolínico, también pueden inducir la apoptosis de los linfocitos T en timocitos de ratón in vitro. Las células tumorales pueden inducir inmunidad local consumiendo triptófano local y produciendo metabolitos. Procedimientoientras tanto, el nivel de linfocitos T infiltrantes locales en el tumor disminuye significativamente. En resumen, la IDO puede inhibir la inmunidad local del tumor a través de las siguientes vías: (1) Mecanismo de depleción de triptófano: está claro que al hacer que la IDO se sobreexprese y resulte en la falta de triptófano necesario para la proliferación de las células T, la proliferación efectiva de las células T se ve afectada y conduce a la apoptosis de las células; (2) Mecanismo tóxico de los metabolitos del triptófano: los metabolitos producidos por la degradación del triptófano catalizada por la IDO pueden inhibir la función de las células T activadas e incluso inducir la apoptosis de las células T; (3) la iDo puede inhibir la función inmunitaria de las células T activadas induciendo la proliferación de células T reguladoras. Por lo tanto, la IDO es una diana potencial para la inmunoterapia tumoral. Las solicitudes de patentes divulgadas de inhibidores para la inhibición selectiva de IDO incluyen WO2010005958, WO2013174947, WO2014066834, WO2016155545, CN201610059454.5, CN2017100610.4, etc.

NC 102 164 902 (WO2010005958) divulga derivados de 1,2,5-oxadiazol, y composiciones de los mismos, que son inhibidores de la indoleamina 2,3-dioxigenasa. CN 105646 389 (WO2017129139) divulga compuesto de fórmula (I) que sirve como un inhibidor de la indoleamina-2, 3-dioxigenasa. CN 108863976 divulga un compuesto de fórmula I o fórmula II como regulador de la IDO (Indoleamina-2,3-dioxigenasa). CN 106565696 divulga un derivado de oxadiazol de fórmula (1) para el tratamiento de enfermedades con la característica patológica de la vía metabólica del triptófano mediada por IDO. El 1-metiltriptófano es un pequeño inhibidor molecular oral de IDO desarrollado por Newlink Genetics, que se utiliza para tratar cánceres de mama metastásicos y tumores sólidos. Actualmente se encuentra en la fase II del ensayo clínico que se ha prolongado durante mucho tiempo. Además, para una serie de pequeños inhibidores moleculares orales de la IDO que está desarrollando la empresa Incyte, el INCB-24360 también está siendo objeto de ensayos clínicos de fase III, que se utiliza principalmente para tratar diversos tipos de cáncer, incluido el síndrome mielodisplásico. Sin embargo, en los ensayos clínicos existen ciertos problemas tóxicos y de estabilidad del metabolismo de los fármacos.

Por lo tanto, para lograr un mejor efecto y propósito del tratamiento de tumores y satisfacer mejor la demanda del mercado, se necesita urgentemente desarrollar una nueva generación de inhibidores selectivos de IDO de alta eficiencia y baja toxicidad.

Contenido de la invención

Para resolver los problemas técnicos anteriores, la presente invención proporciona un inhibidor de la indoleamina-2,3-dioxigenasa, el procedimiento de preparación y el uso del mismo.

La presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I), o isómero óptico del mismo, o isómero cisy trans del mismo, o compuesto isotópico del mismo, o solvato del mismo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o tautómero del mismo, o mesómero del mismo, o racemato del mismo, o enantiómero del mismo, o diastereoisómero del mismo, o mezcla de dos o más de los mismos,:

en el que a y b se seleccionan independientemente entre un número entero de 0 a 5;

X se selecciona entre O, S, -O-NH-, -NH- y -NH-O-;

A se selecciona entre ninguno, -NRn -, O, S,

sulfurilo, sulfóxido, cicloalquilo C3-C7, cicloalquilo C3-C7 sustituido, oxacicloalquilo C3-C7, oxacicloalquilo C3-C7sustituido, azacicloalquilo C3-C7, azacicloalquilo C3-C7 sustituido,

R ¹¹ se selecciona entre H, metilo;

R1 y R2 se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, hidroxilo, amino, arilo, alquilo C1-C6, alquilo C1-C6 sustituido, cicloalquilo C3-C7, cicloalquilo C3-C7 sustituido, heterociclilo C3-C7, heterociclilo C3-C7 sustituido, alcoxilo C1-C6, alcoxilo C1-C6 sustituido, alquilamino C1-C6, alquilamino C1-C6 sustituido;

o R1 y R2 están unidos para formar un heterociclo de 3-8 miembros; o R1 y R2 están unidos para formar un heterociclo sustituido de 3-8 miembros;

R3 y R4 se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, halógeno, ciano, trifluorometilo, sulfurilo, sulfóxido, alquilo C1-C6, alquilo C1-C6 sustituido, cicloalquilo C3-C7, cicloalquilo C3-C7 sustituido, alcoxilo C1-C6, alcoxilo C1-C6 sustituido;

R5, R6, R7, R8 se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, deuterio, halógeno, hidroxilo, amino, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C6, alcoxilo C1-C6, alquilamino C1-C6 ;

o dos cualesquiera de R5, R6, R7 y R8 están enlazados para formar un anillo carbocíclico de 3-8 miembros. Además, a y b se seleccionan independientemente entre los números enteros de 0 a 5;

X se selecciona entre S, -NH-;

A se selecciona entre ninguno, O, -NR ¹¹ -, sulfurilo,

cicloalquilo C ³ ,

R ¹¹ se selecciona entre H, metilo;

R1 y R2 se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, hidroxilo, alquilo C1-C3, alquilo C1-C3 sustituido, cicloalquilo C3-C6, metoxilo, alquilamino C1 sustituido; o R1 y R2 se enlazan para formar heterociclo de 4-6 miembros; o R1 y R2 se enlazan para formar heterociclo de 4-6 miembros sustituido; Los sustituyentes en dicho alquilo C1-C3 sustituido son deuterio, hidroxilo, alquilamino C1 sustituido con metilo, amino, halógeno; el sustituyente en dicho alquilamino C1 sustituido es metilo; los heteroátomos en dicho heterociclo de 4-6 miembros son N, O, y el número de dicho heteroátomo es 1, 2; el heteroátomo en dicho heterociclo sustituido de 4-6 miembros es N, y el número de dicho heteroátomo es 1,2; Los sustituyentes en dicho heterociclo sustituido de 4-6 miembros son metilo, hidroxilo, halógeno;

R3 y R4 son halógenos;

R5, R6, R7, R8 se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, deuterio, halógeno, hidroxilo, amino; o dos cualesquiera de R5, R6, R7 y R8 se enlazan para formar un anillo carbocíclico de 3-4 miembros.

Además, dicho compuesto de fórmula (I) tiene la estructura de fórmula (II):

en el que X se selecciona entre S, -NH-;

R¹y R²se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, hidroxilo, alquilo C¹-C³, alquilo C¹-C³sustituido, cicloalquilo C³-C⁶, metoxilo, alquilamino C¹sustituido; o R¹y R²se enlazan para formar heterociclo de 4-6 miembros; o R¹y R²se enlazan para formar heterociclo de 4-6 miembros sustituido; los sustituyentes en dicho alquilo C¹-C³sustituido son deuterio, hidroxilo, alquilamino C¹sustituido por metilo, amino, halógeno; el sustituyente en dicho alquilamino C¹sustituido es metilo; los heteroátomos en dicho heterociclo de 4-6 miembros son N, O, y el número de dicho heteroátomo es 1, 2; el heteroátomo en dicho heterociclo de 4-6 miembros sustituido es N, y el número de dicho heteroátomo es 1, 2; los sustituyentes en dicho heterociclo de 4-6 miembros sustituido son metilo, hidroxilo, halógeno;

R³y R⁴son halógenos;

R⁵, R⁶, R⁷, R⁸se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, deuterio, halógeno, hidroxilo, amino; o dos cualesquiera de R⁵, R⁶, R⁷y R⁸se enlazan para formar un anillo carbocíclico de 3-4 miembros.

Además, dicho compuesto de fórmula (I) tiene la estructura de fórmula (III):

en el que X se selecciona entre S, -NH-;

R3 y R4 son halógenos;

A se selecciona entre ninguno, O, -NRn -, sulfurilo,

cicloalquilo C3,

R ¹¹ se selecciona entre H, metilo;

Además, dicho compuesto de fórmula (I) tiene la estructura de fórmula (IV):

en el que X se selecciona entre S, -NH-;

R³y R⁴son halógenos;

A se selecciona entre ninguno, O, -NR¹¹-, sulfurilo,

cicloalquilo C ³ ,

R11 se selecciona entre H, metilo;

Además, dicho compuesto de fórmula (I) tiene la estructura de fórmula (V):

en el que X se selecciona entre S, -NH-;

R1y R ² se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, hidroxilo, alquilo C ¹ -C ³ , alquilo C ¹ -C ³ sustituido, cicloalquilo C ³ -C6, metoxilo, alquilamino C ¹ sustituido; o bien

R ¹ y R ² están unidos para formar un heterociclo de 4-6 miembros; o R ¹ y R ² están unidos para formar un heterociclo sustituido de 4-6 miembros;

los sustituyentes en dicho alquilo C ¹ -C ³ sustituido son deuterio, hidroxilo, alquilamino C ¹ sustituido por metilo, amino, halógeno; el sustituyente en dicho alquilamino C ¹ sustituido es metilo; los heteroátomos en dicho heterociclo de 4-6 miembros son N, O, y el número de dicho heteroátomo es 1, 2; el heteroátomo en dicho heterociclo de 4-6 miembros sustituido es N, y el número de dicho heteroátomo es 1, 2; los sustituyentes en dicho heterociclo de 4-6 miembros sustituido son metilo, hidroxilo, halógeno;

R ³ y R ⁴ son halógenos;

A se selecciona entre ninguno, O, -NR11-, sulfurilo,

cicloalquilo C³,

R ¹¹ se selecciona entre H, metilo;

R5, R6, R7, R ⁸ se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, deuterio, halógeno, hidroxilo, amino; o dos cualesquiera de R5, R6, R ⁷ y R ⁸ se enlazan para formar un anillo carbocíclico de 3-4 miembros.

Además, dicho compuesto de fórmula (I) tiene la estructura de fórmula (VI):

en el que X se selecciona entre S, -NH-;

R ³ y R ⁴ son halógenos;

A se selecciona entre ninguno, O, -NRn-, sulfurilo,

cicloalquilo C ³ ,

R¹¹se selecciona entre H, metilo;

Además, dicho compuesto de fórmula (I) tiene la estructura de fórmula (VII):

en el que X se selecciona entre S, -NH-;

R³y R⁴son halógenos;

A se selecciona entre ninguno, O, -NR¹¹-, sulfurilo,

cicloalquilo C³,

R ¹¹ se selecciona entre hidrógeno, metilo;

Además, dicho compuesto de fórmula (I) es uno de los siguientes:





La presente invención también proporciona un compuesto según la presente invención, o un isómero óptico del mismo, o un isómero cis y trans del mismo, o un compuesto isotópico del mismo, o un solvato del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o un tautómero del mismo, o un mesómero del mismo, o un racemato del mismo, o un enantiómero del mismo, o un diastereoisómero del mismo, o una mezcla del mismo, para su uso en la prevención y/o el tratamiento de enfermedades con características patológicas de la vía del metabolismo del triptófano mediada por IDO.

Además, dichas enfermedades con características patológicas de la vía del metabolismo del triptófano mediada por IDO se seleccionan entre cáncer, síndrome mielodisplásico, enfermedad de Alzheimer, enfermedad autoinmune, depresión, trastorno de ansiedad, cataratas, trastorno psicológico y SIDA; en el que dicho cánceres preferentemente cáncer de mama, cáncer de cuello uterino, cáncer de colon, cáncer de pulmón, cáncer gástrico, cáncer rectal, cáncer de páncreas, cáncer cerebral, cáncer de piel, cáncer oral, cáncer de próstata, cáncer óseo, cáncer de riñón, cáncer de ovario, cáncer de vejiga, cáncer de hígado, tumor de trompa de Falopio, tumor ovárico, tumor peritoneal, melanoma en estadio IV, tumor sólido, glioma, neuroglioblastoma, cáncer de hepatocitos y nefroma mastoideo.

La presente invención proporciona además una combinación de fármacos, que se prepara usando un compuesto según la presente invención, o un isómero óptico del mismo, o un isómero cis y trans del mismo, o un compuesto isotópico del mismo, o un solvato del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o un tautómero del mismo, o un mesómero del mismo, o un racemato del mismo, o un enantiómero del mismo, o un diastereoisómero del mismo, o una mezcla de dos o más de los mismos, como principio activo, con la adición de adyuvantes farmacéuticamente aceptables.

La presente invención proporciona además la combinación de fármacos para su uso en la prevención y/o tratamiento de enfermedades con características patológicas de la vía del metabolismo del triptófano mediada por IDO.

Para las definiciones de los términos utilizados en la presente invención: a menos que se especifique lo contrario, las definiciones iniciales de los grupos o términos proporcionados en el presente documento son aplicables a los grupos o términos en toda la especificación; para los términos no definidos específicamente en el presente documento, se debe dar el significado que los expertos en la materia puedan darles basándose en la divulgación y el contexto.

"Sustitución" significa que el átomo de hidrógeno de la molécula se sustituye por otros átomos o moléculas diferentes.

Los valores mínimo y máximo de contenido de átomos de carbono en el grupo hidrocarburo se indican mediante un prefijo, por ejemplo, el prefijo (Ca a Cb) alquilo indica cualquier grupo alquilo que tenga de "a" a "b" átomos de carbono. Por lo tanto, por ejemplo, (C¹a C⁴)alquilo significa un alquilo que contiene de 1 a 4 átomos de carbono.

Alquilo C¹a C⁶denota alquilo C¹, C², C³, C⁴, C⁵, C^a, que es alquilo lineal o ramificado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, como metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, terc-butilo, sec-butilo, pentilo, hexilo, etc. Alcoxilo Cⁱ C^a, cicloalquilo C³-C⁷y heterocicloalquilo C³-C⁷también tienen el significado correspondiente al grupo. Por ejemplo, el cicloalquilo C³a C⁶denota cicloalquilo C³, C⁴, C⁵, C^a, es decir, un cicloalquilo que tiene de 3 a 6 átomos de carbono, como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, etc.

El término "farmacéuticamente aceptable" significa que los portadores, vectores, diluyentes, excipientes y/o sales formados son química o físicamente compatibles con otros componentes que constituyen una dosis farmacéutica, y fisiológicamente compatibles con el receptor.

En la presente invención, las "sales" se refieren a las sales ácidas y/o básicas formadas por los compuestos o sus estereoisómeros con ácidos o bases inorgánicas y/u orgánicas, y también incluyen las sales iónicas anfóteras (sales internas), y además incluyen las sales de amonio cuaternario, como las sales de alquilamonio. Estas sales pueden obtenerse directamente en el aislamiento y purificación final del compuesto. También puede obtenerse mezclando el compuesto mencionado o su estereoisómero con una cierta cantidad de ácido o base de forma adecuada (por ejemplo, equivalente). Estas sales pueden formar precipitados en la solución y se recogen por filtración, o se obtienen tras la evaporación del disolvente, o se preparan por liofilización tras la reacción en medio acuoso. La sal de la presente invención puede ser clorhidrato, sulfato, citrato, bencenosulfonato, hidrobromuro, hidrofluoruro, fosfato, acetato, propionato, succinato, oxalato, malato, succinato, fumarato, maleato, tartrato o trifluoroacetato.

El compuesto isotópico de la presente invención es aquel en el que uno o más elementos se sustituyen con sus isótopos correspondientes, incluyendo pero no limitado a hidrógeno (¹H) que se sustituye con deuterio (D) o tritio (T).

La pernoctación en la presente invención es de 12h-16h.

Los compuestos preparados en la presente invención tienen una actividad inhibidora significativa contra la proteasa IDO, y el metabolismo in vivo es estable, mostrando una buena farmacocinética. Especialmente, la estabilidad metabólica a través de microsomas de hígado humano es mejor que la del compuesto similar INCB024360, que ha entrado en la clínica, lo que indica que el compuesto de la presente invención puede tener una mejor farmacocinética clínica. El compuesto de la presente invención o la composición farmacéutica pueden utilizarse para preparar fármacos inhibidores de IDO, y también pueden utilizarse para preparar fármacos para prevenir y/o tratar enfermedades con características patológicas de la vía del metabolismo del triptófano mediada por IDO, con amplio valor de aplicación.

Obviamente, basado en el contenido anterior de la presente invención, de acuerdo con el conocimiento técnico común y los medios convencionales en el campo, sin departamento de los espíritus técnicos básicos anteriores, otras diversas modificaciones, alternancias o cambios se pueden hacer más adelante.

Siguiendo ejemplos específicos de dichas realizaciones, se ilustra con más detalle el contenido anterior de la presente invención. Sin embargo, no debe interpretarse que el ámbito de aplicación de la presente invención se limite únicamente a los siguientes ejemplos. Todas las tecnologías realizadas basándose en los anteriores contenidos de la presente invención pertenecen al ámbito de la presente invención.

Ejemplos

El procedimiento sintético general del compuesto según la presente invención es el siguiente:

Ejemplo 1: N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxil-4-((2-sulfamoiletil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina (1)

Paso 1: Síntesis del intermedio 1-1:

El compuesto SM1-1 se preparó por el procedimiento de la bibliografía (WO 2017106062). La materia prima SM1-1 (0,1 mmol, 37 mg) y el clorhidrato de 2-aminoetanosulfonamida (0,2 mmol, 32 mg, Shanghai Bide Pharmaceutical Co., Ltd.) se disolvieron en 2 ml de THF, al que se añadió 0,5 ml de solución saturada de bicarbonato sódico, y las reacciones se dejaron reaccionar a temperatura ambiente durante toda la noche. La solución de reacción se extrajo con acetato de etilo y la fase orgánica se lavó sucesivamente con ácido clorhídrico 0,5N y salmuera saturada. Tras separar la fase orgánica, la capa orgánica se concentró a presión reducida. El producto crudo obtenido se purificó mediante cromatografía en capa fina para obtener 22 mg de sólido blanco (intermedio 1-1), con un rendimiento del 48 %.

Paso 2: Síntesis del compuesto 1

El intermedio 1-1 (22 mg, 0,05 mmol) se disolvió en 2 ml de THF, y se añadieron 0,5 ml de NaOH 2N, después la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 h. La solución de reacción se extrajo con acetato de etilo, y la fase orgánica se lavó con agua destilada y después con salmuera saturada. Una vez separada la fase orgánica, se secó por evaporación rotatoria a presión reducida para obtener 20 mg de sólido blanquecino (compuesto 1) con un rendimiento del 95 %.

MS m/z (ESI): 423,0 (M+H+)

1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 5 (ppm) 8,88 (s, 1H), 7,18 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 6,80--6,72 (m, 2H), 6,48-2,09 (m, 1H), 13,2 (s, 1H), 3,71--3,55 (m, 2H), 3,29-0,75 (m, 2H).

Ejemplo 2: N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxil-4-((2-(N-metilsulfamoil)etil)-amino)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(2)

Paso 1: Síntesis del intermedio 2-1:

El intermedio 1-1 (113 mg, 0,25 mmol) y el carbonato potásico (70 mg, 0,5 mmol) se añadieron secuencialmente a DMF (5 ml), después se añadió lentamente yoduro de metilo (36 mg, 0,25 mmol), y la mezcla se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción hasta que desaparecieron las materias primas. Se añadieron 10 ml de agua y la mezcla se extrajo con 20 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera saturada, se secó con sulfato sódico anhidro y se purificó por prep-TLC, usando acetato de etilo/nhexano=1/1 como disolventes de desarrollo, para obtener 20 mg del intermedio 2-1. Rendimiento: 17 %.

El intermedio 2-1 (20 mg, 0,04 mmol) se añadió a 5 ml de tetrahidrofurano, después se añadieron 1,5 ml de solución de hidróxido de sodio (2N) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se utilizó TLC para monitorizar la desaparición de las materias primas. Se añadieron 10 ml de agua y la mezcla de reacción se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera saturada, se secó con sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida para obtener 15 mg de sólido blanco (compuesto 2), rendimiento: 85 %.

MS (ESI) m/e 437,0 (M+H)+°

Ejemplo 3: N-(3-bromo-4-fluorofenN)-N'-hidroxN-4-((2-(N-etNsulfamoN)etN)-ammo)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(3)

El compuesto 3 se preparó mediante un procedimiento sintético similar al del Ejemplo 1 utilizando SM1-1 y SM2-3 como materiales de partida.

Paso 1: Síntesis de SM2-3:

Se disolvió clorhidrato de etilamina (81,5 mg, 1,0 mmol) en 5 ml de DCM, después se añadió trietilamina (303 mg, 3,0 mmol), y se añadió lentamente cloruro de 2-ftalimidoetanosulfonilo (273 mg, 1,0 mmol) en baño de hielo, y se dejó reaccionar la mezcla durante 15 min. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción hasta que desapareció la materia prima. Se añadieron 10 ml de agua y se extrajo con 10 ml de DCM. La capa orgánica se lavó con salmuera saturada, se secó sobre sulfato sódico anhidro, se concentró a sequedad a presión reducida y se purificó por cromatografía en capa fina (DCM/MeOH=10:1) para obtener 65 mg de producto sólido blanco. Rendimiento: 23 %.

El producto sólido blanco (65 mg, 0,23 mmol) se disolvió en 5 ml de etanol, al que se añadió hidrato de hidrazina (17,7 mg, 0,29 mmol), y la mezcla se agitó a reflujo durante 3 h hasta que precipitó el sólido blanco. Las reacciones se enfriaron naturalmente a temperatura ambiente, se filtraron y el filtrado se concentró hasta sequedad a presión reducida, para proporcionar 28 mg de sólido blanco (SM2-3), con un rendimiento del 80 %.

Paso 2: Síntesis del intermedio 3-1:

SM1-1 (34 mg, 0,09 mmol) se disolvió en 5 ml de tetrahidrofurano, al que se añadieron secuencialmente SM2-3 (28 mg, 0,18 mmol) y solución acuosa saturada de NaHCO3 (0,1 ml) bajo agitación, después la reacción se agitó más a temperatura ambiente durante 30 min. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción hasta que desapareció la materia prima. Se añadieron 10 ml de agua y se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó dos veces con salmuera saturada, se concentró a presión reducida hasta sequedad y se purificó mediante cromatografía en capa fina (PE/Ea=1:1), para proporcionar 28 mg de sólido blanco (intermedio 3-1), con un rendimiento del 65 %.

Paso 3: Síntesis del compuesto 3

El intermedio 3-1 (28 mg, 0,059 mmol) se disolvió en 1 ml de THF, después se añadieron 0,3 ml de NaOH 2 N y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se utilizó TLC para monitorizar la desaparición de las materias primas. Se añadieron 10 ml de agua y la mezcla de reacción se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera saturada dos veces, se secó con sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida hasta sequedad, para proporcionar 20 mg de compuesto diana como sólido blanco, con un rendimiento del 75 %.

MS (ESI) m/z 451 [M+H]+

1H RMN (400 MHz, DMSO) 511,47 (s, 1H), 8,91 (s, 1H), 7,25-7,15 (m, 2H), 7,10 (dd, J =6,0, 2,6 Hz, 1H), 6,76 (dd, J = 7,5, 4.4 Hz, 1H), 6,44 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 3,59 (dd, J = 12,8, 6,4 Hz, 2H), 3,31 -3,26 (m, 2H), 2,98 (dt, J = 14,1, 7,1 Hz, 2H), 1,09 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

Ejemplo 4: N-(3-bromo-4-fluorofeml)-N'-hidroxN-4-((2-(isopropNsulfamoN)etN)-ammo)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(4)

El compuesto 4 se preparó mediante un procedimiento sintético similar al del Ejemplo 1 utilizando SM1-1 y SM2-4 como materiales de partida.

El cloruro de 2-ftalimidoetanosulfonilo (273 mg, 1,0 mmol) se disolvió en 3 ml de DCM, al que se añadió isopropilamina (177 mg, 3,0 mmol) bajo agitación, y la mezcla se dejó reaccionar a temperatura ambiente durante 30 min. La reacción se monitorizó por TLC hasta que desapareció el material de partida. Se añadieron 10 ml de agua y se extrajo con 10 ml de DCM. La capa de DCM se lavó con salmuera saturada y se secó sobre sulfato sódico anhidro. Tras la filtración, el filtrado se secó por evaporador rotatorio a presión reducida para eliminar el disolvente, y se obtuvieron 202 mg de producto como sólido blanco. Rendimiento: 68 %.

El sólido blanco (98 mg, 0,33 mmol) se disolvió en 5 ml de etanol, al que se añadió hidrato de hidrazina (22 mg, 0,36 mmol), y la mezcla se agitó a reflujo durante 3 h hasta que precipitó el sólido blanco. Las reacciones se enfriaron naturalmente a temperatura ambiente, se filtraron y el filtrado se concentró hasta sequedad a presión reducida, para proporcionar 45 mg de sólido blanco (SM2-4), con un rendimiento del 82 %.

Paso 2: Síntesis del intermedio 4-1:

SM1-1 (82 mg, 0,135 mmol) se disolvió en 5 ml de tetrahidrofurano, al que se añadieron secuencialmente SM2-4 (45 mg, 0,27 mmol) y solución acuosa saturada de NaHCO ³ (0,14 ml) bajo agitación, y a continuación la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción hasta que desapareció el material de partida. Se añadieron 10 ml de agua y se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó dos veces con salmuera saturada, se concentró a presión reducida hasta sequedad y se purificó mediante cromatografía en capa fina (PE/Ea=2:1), para proporcionar 40 mg de producto como sólido blanco (intermedio 4-1), con un rendimiento del 60 %.

Paso 3: Síntesis del compuesto 4

El intermedio 4-1 (40 mg, 0,08 mmol) se disolvió en 1 ml de THF, después se añadió NaOH 2 N (0,4 ml, 0,8 mmol), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se utilizó TLC para monitorizar la desaparición de los materiales de partida. Se añadieron 10 ml de agua y la mezcla de reacción se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera saturada dos veces, se secó con sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida hasta sequedad, para proporcionar 32 mg de compuesto diana como sólido blanco, con un rendimiento del 84,5 %.

MS (ESI) m/e 465 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO) 511,46 (s, 1H), 8,90 (s, 1H), 7,23 -7,15 (m,2H), 7,10 (dd, J = 6,0, 2,7 Hz, 1H), 6,79 -6,73 (m, 1H), 6.45 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 3,59 (dd, J = 13,2, 6,4 Hz, 2H), 3,43 (dd, J = 13,3, 6,5 Hz, 1H), 3,28 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 1,13 (d, J = 6,5 Hz, 6H)°

Ejemplo 5: N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxil-4-((2-(N-(2-hidroxiletil)-sulfamoil)etil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(5)

El compuesto 5 se preparó mediante un procedimiento sintético similar al del Ejemplo 1 utilizando SM1-1 y SM2-5 como materiales de partida.

Paso 1: Síntesis de SM2-5

El cloruro de 2-ftalimidoetanosulfonilo (273 mg, 1,0 mmol) se disolvió en 3 ml de DCM, al que se añadieron secuencialmente etanolamina (61 mg, 1,0 mmol) bajo agitación y trietilamina (202mg,2,0mmol), y la mezcla se dejó reaccionar a temperatura ambiente durante 30 min. La reacción se monitorizó por TLC hasta que desapareció el material de partida. Las reacciones se concentraron directamente hasta sequedad a presión reducida, y se purificaron por cromatografía en capa fina (DCM/MeOH=10:1), para proporcionar 192 mg de producto como sólido blanco, con un rendimiento del 64,4 %.

El sólido blanco (100 mg, 0,335 mmol) se disolvió en 5 ml de etanol, al que se añadió hidrato de hidrazina (21 mg, 0,35 mmol), y la mezcla se agitó a reflujo durante 3 h hasta que precipitó el sólido blanco. Las reacciones se enfriaron naturalmente a temperatura ambiente, se filtraron y el filtrado se concentró hasta sequedad a presión reducida, para proporcionar 35 mg de sólido blanco(SM2-5), con un rendimiento del 62,1 %.

Paso 2: Síntesis del intermedio 5-1:

SM1-1 (38 mg, 0,104 mmol) se disolvió en 5 ml de tetrahidrofurano, al que se añadieron secuencialmente SM2-5 (35 mg, 0,208 mmol) y solución acuosa de NaOH 2N (0,2 ml) bajo agitación, después la reacción se siguió agitando a temperatura ambiente durante 30 min. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción hasta que desapareció el material de partida. Se añadieron 10 ml de agua y se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó dos veces con salmuera saturada, se concentró a presión reducida hasta sequedad y se purificó mediante cromatografía en capa fina (PE/Ea=1:3), para proporcionar 33 mg de sólido blanco (intermedio 5-1), con un rendimiento del 65 %.

Paso 3: Síntesis del compuesto 5

El intermedio 5-1 (33 mg, 0,067 mmol) se disolvió en 1 ml de THF, después se añadió NaOH 2 N (0,3 ml, 0,6 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción completa de los materiales de partida. Se añadieron 10 ml de agua y la mezcla de reacción se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera saturada dos veces, se secó con sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida hasta sequedad, para proporcionar 23 mg de compuesto 5 diana como sólido blanco, con un rendimiento del 73,5 %.

MS (ESI) m/z 467 (M+H)+.

1H RMN (400 MHz, DMSO) 511,48 (s, 1H), 8,90 (s, 1H), 7,26 (t, J =5,8 Hz, 1H), 7,18 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 7,11 (dd, J = 6,1,2,7 Hz, 1H), 6,76 (ddd, J =8,8, 4.0, 2,8 Hz, 1H), 6,43 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 4,84 -4,74 (m, 1H), 3,60 (dd, J = 13,0, 6,5 Hz, 2H), 3,45 (q, J = 6,0 Hz, 2H), 3,36 - 3,30 (q, 2H), 3,02 (q, J = 6,0 Hz, 2H).

Ejemplo 6: N-(3-bromo-4-fluorofenil)-4-((2-(N-(2,2-difluoroetilsulfamoil)etil)-amino)-N'-hidroxil-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(M)

El compuesto 11 se preparó mediante un procedimiento sintético similar al del Ejemplo 1 utilizando SM1-1 y SM2-11 como materiales de partida.

Paso 1: Síntesis de SM2-11

Se disolvió 2,2-difluoroetilamina (96 mg, 1,2 mmol) en 1 ml de DCM, después se añadió lentamente cloruro de 2-ftalimidoetanosulfonilo (273 mg, 1,0 mmol) en baño de hielo, seguido de la adición de trietilamina (202 mg, 2,0 mmol) bajo agitación. La mezcla se dejó reaccionar durante 1 h. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción hasta que desapareció el material de partida. Se añadieron 10 ml de agua y se extrajo con 10 ml de DCM. La capa de DCM se lavó con salmuera saturada, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró hasta sequedad, para obtener 260 mg de producto como sólido blanco, con un rendimiento del 82 %.

El producto sólido blanco (100 mg, 0,33 mmol) se disolvió en 5 ml de etanol, al que se añadió hidrato de hidrazina (21 mg, 0,36 mmol), y la mezcla se agitó a reflujo durante 3 h hasta que precipitó el sólido blanco. Las reacciones se enfriaron naturalmente a temperatura ambiente, se filtraron y el filtrado se concentró hasta sequedad a presión reducida, para proporcionar 41 mg de sólido blanco (SM2-11), con un rendimiento del 67 %.

Paso 2: Síntesis del intermedio 11-1:

SM1-1 (41 mg, 0,11 mmol) se disolvió en 5 ml de tetrahidrofurano, al que se añadieron secuencialmente SM2-11 (41 mg, 0,22 mmol) y solución acuosa de NaOH 2N (1,0 ml) bajo agitación, después la reacción se agitó más a temperatura ambiente durante 2 h. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción hasta que desapareció el material de partida. Se añadieron 10 ml de agua y se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó dos veces con salmuera saturada, se concentró a presión reducida hasta sequedad y se purificó mediante cromatografía en capa fina (PE/Ea=1:1), para proporcionar 18 mg de sólido blanco (intermedio 11-1), con un rendimiento del 32 %.

Paso 3: Síntesis del compuesto 11

El intermedio 11-1 (18 mg, 0,035 mmol) se disolvió en 1 ml de THF, después se añadió NaOH 2 N (0,2 ml, 0,4 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción completa de los materiales de partida. Se añadieron 10 ml de agua y la mezcla de reacción se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera saturada dos veces, se secó con sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida hasta sequedad, para proporcionar 10 mg de compuesto diana (compuesto 11) como sólido blanco, con un rendimiento del 59 %.

MS (ESI) m/z 487 [M+H]+.

Ejemplo 7: N-(3-bromo-4-fluorofeml)-N'-hidroxN-4-((2-N,N-dimetNsulfamoNetN)-ammo)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(15)

Paso 1: Síntesis del intermedio 15-1:

El intermedio 1-1 (44,9 mg, 0,1 mmol) se disolvió en 3 ml de DMF, al que se añadieron secuencialmente CH3I(42,6 mg, 0,3 mmol) bajo agitación y K2CO3 (69mg,0,5mmol), después se dejó reaccionarla reacción durante toda la noche a temperatura ambiente. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción hasta que desapareció el material de partida. Se añadieron 5 ml de agua y se extrajo con 5 ml de acetato de etilo. La capa de acetato de etilo se lavó dos veces con agua, después se lavó con salmuera saturada una vez, se secó sobre sulfato sódico anhidro, se concentró a presión reducida hasta sequedad, y se purificó mediante cromatografía en capa fina (PE/Ea=1:1), para proporcionar 42 mg de sólido blanco (intermedio 15-1), con un rendimiento del 88 %.

Paso 2: Síntesis del compuesto 15

El intermedio 15-1 (42 mg, 0,088 mmol) se disolvió en 3 ml de THF, después se añadió NaOH 2 N (0,45 ml, 0,9 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción completa de los materiales de partida. Se añadieron 10 ml de agua y la mezcla de reacción se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera saturada dos veces, se secó con sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida hasta sequedad, para proporcionar 35 mg de compuesto diana (compuesto 15) como sólido blanco, con un rendimiento del 88 %.

MS (ESI) m/z 451 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, CDCl3)5 11,49 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,91 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,11 (m, 1H), 6,1 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 6,76-3,10 (m, 2H), 8,8-4,1 (m, 2H), 6,44 (dd, J =6,1 Hz, 2H), 3,69--3,58 (m, 1H), 3,38--3,29 (m, 2H), 2,82--2,76 (m, 2H).

Ejemplo 8: N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxil-4-((2-(pirrolidin-1-ilsulfamoil)-etil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(17)

El compuesto 17 se preparó mediante un procedimiento sintético similar al del Ejemplo 1 utilizando SM1-1 y SM2-17 como materiales de partida.

El cloruro de 2-ftalimidoetanosulfonilo (273 mg, 1,0 mmol) se disolvió en 3 ml de DCM, al que se añadieron secuencialmente tetrahidropirrol (72 mg, 1,0 mmol) bajo agitación y trietilamina (202 mg, 2,0 mmol), y la mezcla se dejó reaccionar a temperatura ambiente durante 30 min. La reacción se monitorizó por TLC hasta que desapareció el material de partida. Se añadieron 10 ml de agua y se extrajo con 10 ml de DCM. La capa de DCM se lavó con salmuera saturada, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró hasta sequedad, para obtener 262 mg de sólido blanco, con un rendimiento del 85 %.

El sólido blanco (262 mg, 0,85 mmol) se disolvió en 5 ml de etanol, al que se añadió hidrato de hidrazina (57 mg, 0,94 mmol), y la mezcla se agitó a reflujo durante 3 h hasta que precipitó el sólido blanco. Las reacciones se enfriaron naturalmente a temperatura ambiente, se filtraron y el filtrado se concentró a sequedad a presión reducida, para proporcionar 71,2 mg de producto como sólido blanco (SM2-17), con un rendimiento del 47,6 %.

Paso 2: Síntesis del intermedio 17-1:

SM1-1 (74 mg, 0,2 mmol) se disolvió en 5 ml de tetrahidrofurano, al que se añadieron secuencialmente SM2-17 (71,2 mg, 0,4 mmol) y solución acuosa de NaOH 2N (0,2 ml) bajo agitación, después la reacción se siguió agitando a temperatura ambiente durante 30 min. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción hasta que desapareció el material de partida. Se añadieron 10 ml de agua a la solución de reacción y se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó dos veces con salmuera saturada, se concentró a presión reducida hasta sequedad y se purificó mediante cromatografía en capa fina (PE/Ea=1:1), para proporcionar 68 mg de sólido blanco (intermedio 17-1), con un rendimiento del 67,5 %.

Paso 3: Síntesis del compuesto 17

El intermedio 17-1 (68 mg, 0,135 mmol) se disolvió en 1 ml de THF, después se añadió NaOH 2 N (0,7 ml, 1,4 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción completa de los materiales de partida. Se añadieron 10 ml de agua y la mezcla de reacción se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera saturada dos veces, se secó con sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida hasta sequedad, para proporcionar 40 mg de compuesto diana (compuesto 17) como sólido blanco, con un rendimiento del 62 %.

MS (ESI) m/z 477 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO) 5 11,50 (s, 1H), 8,91 (s, 1H), 7,19 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 7,10 (dd, J =6,1,2,7 Hz, 1H), 6 ,80 6.73 (m, 1H), 6,43 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 3,63 (dd, J = 13,0, 6,5 Hz, 2H), 3,37 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,25 (t, J =6,6 Hz, 4H), 1,87-1,82 (m, 4H)°

Ejemplo 9: N-(3-bromo-4-fluorofeml)-N'-hidroxN-4-((2-(morfolmsulfamoN)etN)-ammo)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(18)

El compuesto 18 se preparó mediante un procedimiento sintético similar al del Ejemplo 1 utilizando SM1-1 y SM2-18 como materiales de partida.

El cloruro de 2-ftalimidoetanosulfonilo (273 mg, 1,0 mmol) se disolvió en 3 ml de DCM, al que se añadió morfolina (174 mg, 2,0 mmol) bajo agitación, y la mezcla se dejó reaccionar a temperatura ambiente durante 30 min. La reacción se monitorizó por TLC hasta que desapareció el material de partida. Se añadieron 10 ml de agua y se extrajo con 10 ml de DCM. La capa de DCM se lavó con salmuera saturada, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró hasta sequedad, para obtener 259 mg de sólido blanco, con un rendimiento del 80 %.

El sólido blanco (259 mg, 0,8 mmol) se disolvió en 5 ml de etanol, al que se añadió hidrato de hidrazina (53,7 mg, 0,88 mmol), y la mezcla se agitó a reflujo durante 3 h hasta que precipitó el sólido blanco. Las reacciones se enfriaron naturalmente a temperatura ambiente, se filtraron y el filtrado se concentró a sequedad a presión reducida, para proporcionar 85 mg de producto como sólido blanco (SM2-18), con un rendimiento del 50 %.

Paso 2: Síntesis del intermedio 18-1

SM1-1 (82 mg, 0,22 mmol) se disolvió en 5 ml de tetrahidrofurano, al que se añadieron secuencialmente SM2-18 (85 mg, 0,44 mmol) y solución acuosa de NaOH 2N (0,22 ml) bajo agitación, después la reacción se agitó más a temperatura ambiente durante 30 min. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción hasta que el material de partida casi desapareció. Se añadieron 10 ml de agua y se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó dos veces con salmuera saturada, se concentró a presión reducida hasta sequedad y se purificó mediante cromatografía en capa fina (PE/Ea=1:1), para proporcionar 65 mg de sólido blanco (intermedio 18-1), con un rendimiento del 57 %.

Paso 3: Síntesis del compuesto 18

El intermedio 18-1 (65 mg, 0,125 mmol) se disolvió en 5 ml de THF, después se añadió NaOH 2 N (0,6 ml, 1,2 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción completa de los materiales de partida. Se añadieron 10 ml de agua y la mezcla de reacción se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera saturada dos veces, se secó con sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida hasta sequedad, para proporcionar 35 mg de compuesto diana (compuesto 18) como sólido blanco, con un rendimiento del 56 %.

MS (ESI) m/z 493 [M+H]+

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 511,50 (s, 1H), 8,92 (s, 1H), 7,19 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 7,11 (dd, J = 6,0, 2,7 Hz, 1H), 6.80 -6,73 (m, 1H), 6,45 (t, J =6,0 Hz, 1H), 3,65 (dd, J =10,7, 5,7 Hz, 6H), 3,38 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,20 -3,13 (m, 4H)° Ejemplo 10: N-(3-bromo-4-fluorofeml)-N'-hidroxN-4-((2-sulfamoNpropN)ammo)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(21)

El compuesto 21 se preparó mediante un procedimiento sintético similar al del Ejemplo 1 utilizando SM1-1 y SM2-21 como materiales de partida.

Paso 1: Síntesis del intermedio 21-1:

El material de partida SM1-1 (0,4 mmol, 149 mg) y el compuesto SM2-21 (0,6 mmol, puede prepararse según el documento US20080146642) se disolvieron en 4 ml de THF, al que se añadió solución saturada de bicarbonato sódico (1 ml), y la mezcla se dejó reaccionar durante toda la noche a temperatura ambiente. La solución de reacción se extrajo con acetato de etilo y, a continuación, la fase orgánica se lavó sucesivamente con ácido clorhídrico 0,5N y salmuera saturada. La capa orgánica se separó y se concentró a presión reducida, y el producto crudo se purificó mediante cromatografía en capa fina para obtener un sólido blanquecino (intermedio 21-1) (60 mg, rendimiento 32 %).

Paso 2: Síntesis del compuesto 21

El intermedio 21-1 (60 mg, 0,13 mmol) se disolvió en 4 ml de THF, después se añadió NaOH 2 N (1 ml), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 h. La solución de reacción se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó secuencialmente con agua y salmuera saturada. La capa orgánica se separó y se secó por evaporador rotatorio a presión reducida, para proporcionar el compuesto 21 como sólido blanco (45 mg, rendimiento 80 %).

MS m/z (ESI): 437,0 (M+H+)

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 511,49 (s, 1H), 8,91 (s, 1H), 7,19 (t, J = 8,8 Hz,1H), 7,12 (dd, J = 6,1,2,7 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 6,79 -6,74 (m, 1H), 6,31 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 3,40 -3,34 (m, 2H), 3,02 (dd, J = 9,0, 6,5 Hz, 2H), 2,01 (dd, J = 13,0, 5,3 Hz, 2H)°

Ejemplo 11: N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxil-4-((3-(N-metilsulfamoil)propil)-amino)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(22)

El compuesto 22 se preparó mediante un procedimiento sintético similar al del Ejemplo 1 utilizando SM1-1 y SM2-22 como materiales de partida. SM2-22 se preparó según el procedimiento descrito en la bibliografía (Biooranic&MedicinalChemistry 2001,9, 2709; Journal of Medicinal Chemistry, 2010, 53, 2390).

Paso 1: Síntesis del intermedio 22-1:

El material de partida SM1-1 (0,4 mmol, 149 mg) y el compuesto SM2-22 (0,6 mmol) se disolvieron en 4 ml de THF, al que se añadió solución saturada de bicarbonato sódico (1 ml), y la mezcla se dejó reaccionar toda la noche a temperatura ambiente. La solución de reacción se extrajo con acetato de etilo y, a continuación, la fase orgánica se lavó sucesivamente con ácido clorhídrico 0,5 N y salmuera saturada. La capa orgánica se concentró y se purificó mediante pre-TLC para obtener un sólido blanquecino (intermedio 22-1) (70 mg, rendimiento 37 %).

Paso 2: Síntesis del compuesto 22

El intermedio 22-1 (70 mg, 0,15 mmol) se disolvió en 4 ml de THF, después se añadió NaOH 2 N (1 ml), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 h. La solución de reacción se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó secuencialmente con agua y salmuera saturada. La capa orgánica se separó y se secó por evaporador rotatorio a presión reducida, para proporcionar el compuesto 22 como sólido blanquecino (60 mg, rendimiento 90 %).

MSm/z (ESI): 451,0 (M+H⁺)

¹H RMN (400 MHz, CD³OD) 57,03 (dd, J = 6,0, 2,7 Hz, 1H), 6,95 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 6,74 (ddd, J = 8.8, 4,1, 2,7 Hz, 1H), 3,35 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,04 -2,96 (m, 2H), 2,59 (s, 3H), 1,99 (dt, J = 9,6, 6,8 Hz, 2H).

Ejemplo 12 :N-(3-bromo-4-fluorofeml)-N'-hidroxN-4-((3-(N-etNsulfamoN)propN)-ammo)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(23)

El compuesto 23 se preparó mediante un procedimiento sintético similar al del Ejemplo 1 utilizando SM1-1 y SM2-23 como materiales de partida. SM2-23 se preparó según el procedimiento bibliográfico (Biooranic& Medicinal Chemistry 2001,9, 2709).

Paso

El material de partida SM1-1 (0,2 mmol, 74 mg) y el compuesto SM2-23 (0,3 mmol) se disolvieron en 4 ml de THF, al que se añadió solución saturada de bicarbonato sódico (1 ml), y la mezcla se dejó reaccionar toda la noche a temperatura ambiente. La solución de reacción se extrajo con acetato de etilo y, a continuación, la fase orgánica se lavó sucesivamente con agua y salmuera saturada. La capa orgánica se separó y se evaporó rotatoriamente hasta secarse a presión reducida. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en capa fina para obtener un sólido blanquecino (intermedio 23-1) (15 mg, rendimiento 15 %).

Paso 2: Síntesis del compuesto 23

El intermedio 23-1 (15 mg) se disolvió en 4 ml de THF, después se añadió NaOH 2 N (1 ml), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 h. La solución de reacción se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó secuencialmente con agua y salmuera saturada. La capa orgánica se separó y se secó por evaporador rotatorio a presión reducida, para proporcionar el compuesto 23 como sólido blanquecino (12 mg, rendimiento 86 %).

MS m/z (ESI): 465,0 (M+H⁺).

¹H RMN (400 MHz, CD³OD) 57,03 (dd, J = 6,0, 2,7 Hz, 1H), 6,95 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 6,74 (ddd, J = 8,8, 4,1, 2.7 Hz, 1H), 3,34 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 2,98 (ddd, J = 14,4, 9,5, 6,3 Hz, 4H), 2,05 -1,95 (m, 2H), 1,06 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

Ejemplo 13: N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxil-4-((3-(N-isopropilsulfamoil)-propil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(24)

El compuesto 24 se preparó mediante un procedimiento sintético similar al del Ejemplo 1 utilizando SM1-1 y SM2-24 como materiales de partida. SM2-24 se preparó por un procedimiento similar al del compuesto SM2-23.

Paso 1: Síntesis del intermedio 24-1

El material de partida SM1-1 (0,4 mmol, 149 mg) y el compuesto SM2-24 (0,7 mmol) se disolvieron en 4 ml de THF, al que se añadió solución saturada de bicarbonato sódico (1 ml), y la mezcla se dejó reaccionar durante toda la noche a temperatura ambiente. La solución de reacción se extrajo con acetato de etilo y, a continuación, la fase orgánica se lavó sucesivamente con agua y salmuera saturada. La capa orgánica se separó y se evaporó rotatoriamente hasta secarse a presión reducida. El producto crudo se purificó por cromatografía en capa fina para obtener sólido amarillento (intermedio 24-1) (135 mg, rendimiento 67 %).

Paso 2: Síntesis del compuesto 24

El intermedio 24-1 (135 mg, 0,27 mmol) se disolvió en 4 ml de THF, después se añadió NaOH 2 N (1 ml), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 h. La solución de reacción se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó secuencialmente con agua y salmuera saturada. La capa orgánica se separó y se secó por evaporador rotatorio a presión reducida, para proporcionar un sólido amarillento (compuesto 23) (107 mg, rendimiento 83 %).

MS m/z (ESI): 479,0 (M+H+)

1H RMN (400 MHz, MeOD) 57,14 (dd, J = 6,0, 2,7 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 6,86 (ddd, J = 8,8, 4,1, 2.7 Hz, 1H), 3,53 (s, 1H), 3,46 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,14-3,06 (m, 2H), 2,13 (dd, J =8,7, 6,6 Hz, 2H), 1,20 (d, J = 6,6 Hz, 6H).

Ejemplo 14: N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxil-4-((3-(N-ciclopropilsulfamoil)-propil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(25)

El compuesto 25 se preparó por el procedimiento sintético B utilizando SM1-1 y ácido 3-aminopropanosulfónico como materiales de partida.

Procedimiento B:

Paso 1: Síntesis del compuesto 1

El material de partida SM1-1 (2 mmol, 744 mg) y el ácido 3-aminopropanosulfónico (4 mmol, 556 mg, disponible comercialmente) se disolvieron en 20 ml de THF y se añadió 4 ml de solución saturada de bicarbonato sódico. Tras reaccionar toda la noche a temperatura ambiente, la solución de reacción se neutralizó con ácido clorhídrico 0,5N y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó sucesivamente con ácido clorhídrico 0,5N, agua y salmuera saturada. Una vez separada la capa orgánica, se concentró a presión reducida y se cubrió con DCM para obtener el producto crudo intermedio 25-1 (490 mg, rendimiento del 53 %).

Paso 2: Síntesis del compuesto 2

El producto intermedio 25-1 en bruto (0,1 mmol, 50 mg) se colocó en un matraz de tres cuellos de 50 ml, y el matraz se purgó con nitrógeno, al que se añadieron sucesivamente 1 ml de diclorometano y 1 gota de DMF, después se añadió gota a gota cloruro de tionilo (0,1 ml) bajo agitación. La mezcla se dejó reaccionar a 40°C durante 3h, se controló por TLC y se evaporó directamente en rotación para obtener el producto intermedio 25-2 crudo para su uso.

Paso 3: Síntesis del compuesto 3

En un matraz de fondo redondo de 25 ml, se añadieron 1 ml de DCM y ciclopropilamina (1 mmol, 57 mg). La solución del intermedio 25-2 (el producto del paso anterior) en DCM (0,5 ml) se añadió gota a gota agitando a 0 °C. Tras agitar durante 3 h a temperatura ambiente, la reacción se extrajo con acetato de etilo. Después de agitar durante 3 h a temperatura ambiente, la reacción se extrajo con acetato de etilo, y la fase orgánica se lavó secuencialmente con ácido clorhídrico 0,5 N y salmuera saturada. La capa orgánica se evaporó por rotación y se mezcló con DCM, para obtener 25 mg de sólido amarillo pálido (intermedio 25-3), con un rendimiento del 50 %.

Paso 4: Síntesis del compuesto 25

El producto del paso anterior intermedio 25-3 se disolvió en 2ml de THF, al que se añadió NaOH 2N (0,5ml), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 0,25h. Después, la solución de reacción se extrajo con acetato de etilo y la fase orgánica se lavó con agua y, a continuación, con salmuera saturada. La capa orgánica se separó y luego se evaporó rotativamente a presión reducida, para obtener el compuesto 25 (23 mg, rendimiento 96 %) como un sólido amarillo pálido.

MS m/z (ESI): 477,0 (M+H+).

1H RMN (400 MHz, CDCl3) 57,03 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 6,95 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 4,1 (m, 1H), 3,36 (d, J =6,7 Hz, 1H), 3,13-3,00 (m, 2H), 2,39-2,73 (m, 2H), 6,8 (dd, J =3,6 Hz, 2H), 2,08-1,94 (m, 1H), 0,60--0,52 (m, 2H), 0,52--0,46 (m, 2H).

Ejemplo 15: N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxil-4-((3-(N-ciclopentilsulfamoil)-propil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(27)

El compuesto 27 se preparó mediante un procedimiento sintético similar al del Ejemplo 1 utilizando SM1-1 y SM2-27 como materiales de partida. SM2-27 se preparó por un procedimiento similar al del compuesto SM2-23.

El material de partida SM1-1 (0,4 mmol, 149 mg) y el compuesto SM2-27 (0,67 mmol) se disolvieron en 4 ml de THF, al que se añadió solución saturada de bicarbonato sódico (1 ml), y la mezcla se dejó reaccionar durante toda la noche a temperatura ambiente. La solución de reacción se extrajo con acetato de etilo y, a continuación, la fase orgánica se lavó sucesivamente con agua y salmuera saturada. La capa orgánica se separó y se evaporó rotatoriamente hasta secarse a presión reducida. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en capa fina para obtener el intermedio 27-1 como sólido amarillento (125 mg, rendimiento 59 %).

Paso 2: Síntesis del compuesto 27

El intermedio 27-1 (125 mg, 0,24 mmol) se disolvió en 4 ml de THF, después se añadió NaOH 2 N (1 ml), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 h. La solución de reacción se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó secuencialmente con agua y salmuera saturada. La capa orgánica se separó y se secó por evaporador rotatorio a presión reducida, para proporcionar el compuesto 27 como sólido amarillento (105 mg, rendimiento 89 %).

MS m/z (ESI): 505,0 (M+H⁺)

¹H RMN (400 MHz, CD³OD) 57,03 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 6,95 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 3,62 (m, 1H), 3,35 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 3,08--2,91 (m, 2H), 2,00-9,8 (m, 2H), 1,82 (dd, J =5,4 Hz, 2H), 1,59-2,14 (m, 1H), 1,45-7,5 (m, 2H), 1,42-1,32 (m, 2H).

Ejemplo 16: N-(3-bromo-4-fluorofeml)-N'-hidroxN-4-((3-(N-(2-hidroxNetN)-sulfamoN)propN)ammo)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(29)

El compuesto 29 se preparó mediante un procedimiento sintético similar al del Ejemplo 1 utilizando SM1-1 y SM2-29 como materiales de partida. SM2-29 se preparó por un procedimiento similar al del compuesto SM2-23.

Paso 1: Síntesis del intermedio 29-1

SM1-1 (29,7 mg, 0,08 mmol) se disolvió en 5 ml de THF, al que se añadieron sucesivamente el intermedio iSM2-29 (29 mg, 0,16 mmol) y solución acuosa de NaOH 2N (0,2 ml) bajo agitación, después la reacción se siguió agitando a temperatura ambiente durante 30 min. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción hasta que el material de partida casi desapareció. Se añadieron 10 ml de agua y se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó dos veces con salmuera saturada, se concentró a presión reducida hasta sequedad y se purificó mediante cromatografía en capa fina (PE/EtOAc=1:3), para proporcionar 30 mg del intermedio 29-1 como sólido blanco, con un rendimiento del 75 %.

Paso 2: Síntesis del compuesto 29

El intermedio 29-1 (30 mg, 0,06 mmol) se disolvió en 2 ml de THF, después se añadió NaOH 2 N (0,06 ml, 0,12 mmol), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción completa de los materiales de partida. Se añadieron 10 ml de agua y la mezcla de reacción se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera saturada dos veces, se secó con sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida hasta sequedad, para proporcionar 23 mg del compuesto diana 29 como sólido blanco, con un rendimiento del 80,8 %.

MS (ESI) m/z 481 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO) 511,46 (s, 1H), 8,90 (s, 1H), 7,18 (t, J =8,8 Hz, 1H), 7,12 (dd, J =6,1, 2,7 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 6,77 (ddd, J = 8,9, 4,1, 2.8 Hz, 1H), 6,29 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 4,74 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 3,43 (dd, J = 11,7, 6,0 Hz, 2H), 3,37 -3,27 (m, 6H), 3,11 -3,03 (m, 2H), 2,98 (q, J = 6,1 Hz, 2H), 2,00 -1,89 (m, 3H)°

Ejemplo 17: N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxil-4-((3-(N-etilsulfamoil)-propil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(36)

El compuesto 36 se preparó mediante un procedimiento sintético similar al del Ejemplo 1 utilizando SM1-1 y SM2-36 como materiales de partida. SM2-36 se preparó por un procedimiento similar al del compuesto SM2-23.

El material de partida SM1-1 (0,4 mmol, 149 mg) y el compuesto SM2-36 (0,56 mmol) se disolvieron en 4 ml de THF, al que se añadió solución saturada de bicarbonato sódico (1 ml), y la mezcla se dejó reaccionar durante toda la noche a temperatura ambiente. La solución de reacción se extrajo con acetato de etilo y, a continuación, la fase orgánica se lavó sucesivamente con agua y salmuera saturada. La capa orgánica se separó y se evaporó rotatoriamente hasta secarse a presión reducida. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en capa fina para obtener el intermedio 36-1 como sólido amarillento (100 mg, rendimiento 51 %).

Paso 2: Síntesis del compuesto 36

El intermedio 36-1 (100 mg, 0,2 mmol) se disolvió en 4 ml de THF, después se añadió NaOH 2 N (1 ml), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 h. La solución de reacción se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó secuencialmente con agua y salmuera saturada. La capa orgánica se separó y se secó por evaporador rotatorio a presión reducida, para proporcionar el compuesto 36 como sólido amarillento (90 mg, rendimiento 96 %).

MS m/z (ESI): 465,0 (M+H+)

1H RMN (400 MHz, MeOD) 57,03 (dd, J = 6,0, 2,7 Hz, 1H), 6,95 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 6,74 (ddd, J = 8,8, 4,1, 2.7 Hz, 1H), 3,34 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 2,98 (ddd, J = 14,4, 9,5, 6,3 Hz, 4H), 2,05 -1,95 (m, 2H), 1,06 (t, J = 7,2 Hz, 3H)° Ejemplo 18: N-(3-bromo-4-fluorofenil)-4-((3-((3,3-difluoroacridin-1 -il)sulfamoil)-propil)amino)-N'-hidroxil-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(40)

El compuesto 40 se preparó mediante un procedimiento sintético similar al del Ejemplo 1 utilizando SM1-1 y SM2-40 como materiales de partida. SM2-40 se preparó por un procedimiento similar al del compuesto SM2-23.

El clorhidrato del compuesto 3,3-difluorotrimetilenimina (216,0 mg, 1,7 mmol) y la trietilamina (703,4 mg, 7,0 mmol) se añadieron a 10 ml de diclorometano, y el cloruro de 3-(1,3-oxoisoindol-2-il)propil-1-sulfonilo (400,0 mg, 1,4 mmol) se añadió a la solución de reacción por lotes. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Se añadieron 30 ml de diclorometano y la capa orgánica se lavó dos veces con HCl 1N, después se lavó con salmuera saturada, se secó sobre sulfato sódico anhidro, se evaporó rotatoriamente y se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice. Se obtuvo el compuesto sólido blanco 2-(3-(3,3-difluoroazetidinil)sulfonamida)propil)isoindol-1,3-diona (420,0 mg, 1,2 mmol), con un rendimiento del 87,7 %.

El compuesto 2-(3-(3,3-difluoroazetidinil)sulfonamida)propil)isoindol-1,3-diona (420,0 mg, 1,2 mmol) se disolvió en 10 ml de etanol, al que se añadieron 0,4 ml de hidrato de hidrazina (80 %). Tras agitar durante 1 hora a temperatura ambiente, precipitó una gran cantidad de sólido blanco. La solución se filtró por succión a través de una almohadilla de celita y la torta de filtración se lavó con acetato de etilo. El filtrado se extrajo con agua y acetato de etilo, y la capa orgánica se lavó 3 veces con salmuera, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se evaporó por rotación. Se obtuvo el compuesto bruto 3-((3,3-difluoroazetidinil)sulfonamida)propil)-1-amina (249,0 mg, 1,7 mmol) SM2-40, y sin purificación, se utilizó directamente para el siguiente paso de la reacción. Rendimiento: 100 %. El compuesto 4-(3-bromo-4-fluorofenil)-3-(4-nitro-1,2,5-oxazol-3-il)-1,2,4-oxazol-5(4H)-ona SM1-1 (150,0mg, 0,4mmol) y el compuesto bruto 3-((3,3-difluoroazetidinil)sulfonamida)propil)-1-amina SM2-40 (249.0mg, 1.7mmol,) se añadieron a 16mlTHF y 3ml2N hidróxido sódico, y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3h. Se añadió acetato de etilo y agua, se extrajo, se secó, se evaporó rotatoriamente y se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice. Se obtuvo el compuesto N-(3-bromo-4-fluorofenil)-4-((3-(3,3-difluoroazetidinil)sulfonil)propil)amino)-N-hidroxil-1,2,5-oxadiazol-3-amidina 40 (95,0mg, 0,18mmol). Rendimiento: 45.9 %.

MS (ESI) m/z 513 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, CDCl6) 511,42 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,90 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 8,8 Hz, 1H),7,12(m, 1H), 6,1 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 6,77-3,10 (m, 2H), 8,8-4,0 (m, 2H), 6,33 (dd, J =5,9 Hz, 2H), 4,45--4,34 (m, 1H), 3,39--3,29 (m, 2H), 2,07--1,90 (m, 2H).

Ejemplo 19: N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxil-4-((3-(pirrolidin-1-ilsulfamoil)-propil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(41)

El compuesto 41 se preparó mediante un procedimiento sintético similar al del Ejemplo 1 utilizando SM1-1 y SM2-41 como materiales de partida. SM2-41 se preparó por un procedimiento similar al del compuesto SM2-23.

Paso 1: Síntesis del intermedio 41-1

SM1-1 (37 mg, 0,1 mmol) se disolvió en 5 ml de THF, al que se añadieron sucesivamente el intermedio SM2-41 (38,4 mg, 0,2 mmol) y solución acuosa de NaOH 2N (0,1 ml) bajo agitación, después la reacción se siguió agitando a temperatura ambiente durante 30 min. Se utilizó t Lc para monitorizar la reacción hasta que el material de partida casi desapareció. Se añadieron 10 ml de agua y se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó dos veces con salmuera saturada, se concentró a presión reducida hasta sequedad y se purificó mediante cromatografía en capa fina (PE/EtOAc=1:1), para proporcionar 35 mg del intermedio 41-1 como sólido blanco, con un rendimiento del 67 %.

Paso 2: Síntesis del compuesto 41

El intermedio 41-1 (35 mg, 0,067 mmol) se disolvió en 2 ml de THF, después se añadió NaOH 2 N (0,3 ml, 0,6 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción completa de los materiales de partida. Se añadieron 10 ml de agua y la mezcla de reacción se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera saturada dos veces, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se concentró a presión reducida hasta sequedad, para proporcionar 18 mg de compuesto diana 41 como sólido blanco, con un rendimiento del 54 %.

MS (ESI) m/z 491 [M+H]+

1H RMN (400 MHz, CDCl3) 58,70 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 6,80 (m, 1H), 6,32 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 3,60-3,10 (m, 2H), 3,30-2,73 (m, 2H), 3,23 (dd, J =6,7 Hz, 2H), 3,15--3,08 (m, 1H), 2,01--1,92 (m, 2H), 1,86—1,80 (m, 2H).

Ejemplo 20: N-(3-bromo-4-fluorofeml)-N'-hidroxN-4-((3-(N-metoxNsulfamoN)-propN)ammo)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(45)

El compuesto 45 se preparó por el procedimiento sintético B utilizando SM1-1 y SM2-45 comomateriales de partida.

Paso 1: Síntesis del intermedio 1

El material de partida SM1-1 (2 mmol, 744 mg) y el ácido 3-aminopropanosulfónico (4 mmol, 556 mg) se disolvieron en 20 ml de THF y se añadieron 4 ml de solución saturada de bicarbonato sódico. Tras reaccionar toda la noche a temperatura ambiente, la solución de reacción se neutralizó con ácido clorhídrico 0,5 N y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó sucesivamente con ácido clorhídrico 0,5 N, agua y salmuera saturada. Una vez separada la capa orgánica, se concentró a presión reducida y se cubrió con DCM para obtener el producto crudo intermedio 45 1 (490 mg, rendimiento del 53 %).

Paso 2: Síntesis del intermedio 2

El producto intermedio crudo 45-1 (0,1 mmol, 50 mg) se colocó en un matraz de tres cuellos de 50 ml, y el matraz se purgó con nitrógeno, al que se añadieron sucesivamente 1 ml de diclorometano y 1 gota de DMF, después se añadió gota a gota cloruro de tionilo (0,1 ml) bajo agitación. La mezcla se dejó reaccionar a 40°C durante 3 h, se controló por TLC y se evaporó directamente en rotación para obtener el producto crudo intermedio 45-2 para su uso.

Paso 3: Síntesis del intermedio 3

En un matraz de fondo redondo de 25 ml, se añadieron 1 ml de THF/0,1 ml de agua, clorhidrato de metoxamina (0,3 mmol, 25 mg) y carbonato potásico (0,3 mmol, 42 mg). La solución del intermedio 45-2 (el producto del paso anterior) en DCM (0,5 ml) se añadió gota a gota bajo agitación. Tras agitar durante 2 h a temperatura ambiente, la reacción se extrajo con acetato de etilo y la fase orgánica se lavó secuencialmente con agua y salmuera saturada. La capa orgánica se separó y se evaporó rotatoriamente, para obtener el intermedio 45-3, que se utilizó directamente para el siguiente paso de la reacción.

Paso 4: Síntesis del compuesto 45

El producto del paso anterior intermedio 45-3 se disolvió en 4 ml de THF, al que se añadió NaOH 2N (1 ml), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 0,25 h. Después, la solución de reacción se extrajo con acetato de etilo, y la fase orgánica se lavó con agua, y después con salmuera saturada. La capa orgánica se separó y luego se evaporó rotativamente a presión reducida, para obtener el compuesto 45 (10 mg, rendimiento 20 %) como sólido blanco. MS m/z (ESI): 467,0 (M+H⁺).

¹H RMN (400 MHz, CD³OD) 57,03 (dd, J = 6,0, 2,7 Hz, 1H), 6,95 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 6,74 (ddd, J = 8.8, 4,0, 2,8 Hz, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,35 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,15 (dd, J =8,6, 6,8 Hz, 2H), 2,10-1,95 (m, 2H).

Ejemplo 21: N-(3-bromo-4-fluorofenN)-N'-hidroxN-4-((3-(N-hidroxNsulfamoN)-propN)ammo)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(46)

El compuesto 46 se preparó por el procedimiento sintético B utilizando 46-1 e hidroxilamina como materiales de partida. En un matraz de fondo redondo de 25 ml, se añadieron 2 ml de THF/0,2 ml de agua, clorhidrato de hidroxilamina (2 mmol, 139 mg) y carbonato potásico (2 mmol, 139 mg). Bajo agitación, se añadió gota a gota 1 ml de solución de 34 2 enDCM, y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3h. Se añadió acetato de etilo para la extracción y la fase orgánica se lavó con ácido clorhídrico 0,5N y, a continuación, con salmuera saturada. La capa orgánica se evaporó por rotación a presión reducida y se utilizó directamente en la siguiente reacción.

Los productos del paso anterior se disolvieron en 2 ml de THF, después se añadió NaOH 1 N (0,5 ml), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,25 h. La solución de reacción se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó secuencialmente con ácido clorhídrico 0,5N y, a continuación, con salmuera saturada. La capa orgánica se separó y se secó por evaporador rotatorio a presión reducida. El producto crudo se purificó por TLC para obtener el compuesto 46 como sólido blanquecino (10 mg, rendimiento 10 %).

MS m/z (ESI): 453,0 (M+H+)

1H RMN (400 MHz, MeOD) 57,03 (dd, J = 5,9, 2,7 Hz, 1H), 6,95 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 6,74 (ddd, J = 8.8, 4,0, 2,8 Hz, 1H), 3,37 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,19-3,13 (m, 2H), 2,05 (dd, J = 14,8, 7,1 Hz, 2H).

Ejemplo 22: N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxil-4-((4-sulfamoilbutil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(98)

El compuesto 98 se preparó mediante un procedimiento sintético similar al del Ejemplo 1 utilizando SM1-1 y SM2-98 como materiales de partida.

Se pesó azida sódica (650 mg, 10 mmol), se disolvió en 5 ml de agua y se añadió lentamente a la solución del material de partida 1,4-butanosultona (2,72 g, 20 mmol) en acetona (5 ml). La solución de reacción se concentró a presión reducida y se extrajo con acetato de etilo (2*20 ml). Después de concentrar la fase acuosa hasta sequedad, se enjuagó con acetona/metil tert-butil eter=1/1 (10 ml), se filtró y se enjuagó con metil tert-butil eter. El sólido se secó y se obtuvieron 1,36 g de producto con un rendimiento del 76 %.

Se añadió pentacloruro de fósforo (1,7 g, 8 mmol) a una solución de tolueno de 20 ml del producto de reacción (1,36 g, 7,6 mmol) del paso anterior, y la mezcla se calentó a reflujo y reaccionó durante 3 horas. Se utilizó TLC para monitorizar la desaparición de los materiales de reacción, y la solución de reacción se concentró a presión reducida, para proporcionar 1,49 g de producto que se utilizó directamente en el paso siguiente, con un rendimiento del 100 %. Se añadieron lentamente 10 ml de agua amoniacal a 10 ml de solución de etanol del producto del paso anterior (1,49 g, 7,6 mmol), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Se utilizó TLC para monitorizar la desaparición de los materiales de reacción. La solución de reacción se concentró a presión reducida, y se añadieron 10 ml de acetato de etilo para hacer una suspensión, se filtró, se enjuagó con acetato de etilo, y las fases orgánicas se combinaron y concentraron, para obtener 850 mg de producto como aceite incoloro con un rendimiento del 63 %.

El producto del paso anterior (300 mg, 1,68 mmol) se disolvió en una solución mixta de agua/etanol (3 ml/3 ml), a la que se añadieron 0,2 g (10 %) de catalizador de paladio-carbono. Se purgó e intercambió hidrógeno durante tres veces. La reacción se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente y se utilizó TLC para monitorizar la desaparición de los materiales de reacción. La solución de reacción se filtró, se enjuagó con etanol, y las fases orgánicas se combinaron y concentraron, para obtener 248 mg de SM2-98 como aceite incoloro, con un rendimiento del 97 %.

El compuesto SM2-98 (248 mg, 1,32 mmol) y el material de partida SM1-1 (245 mg, 0,66 mmol) se añadieron secuencialmente a 10 ml de THF, al que se añadió solución saturada de bicarbonato sódico (2 ml), y la mezcla se dejó reaccionar durante toda la noche bajo agitación a temperatura ambiente. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción hasta que el material de partida casi desapareció. Se añadieron 10 ml de agua y se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó dos veces con salmuera saturada y se secó sobre sulfato sódico anhidro. La fase orgánica se concentró a presión reducida, para proporcionar 266 mg del intermedio 98-1, con un rendimiento del 84 %. El intermedio 98-1 (103 mg, 0,22 mmol) se disolvió en 5 ml de THF, después se añadió NaOH 2 N (1,5 ml) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se utilizó TLC para monitorizar la reacción completa de los materiales de partida. se añadieron 10 ml de agua y la mezcla de reacción se extrajo con 10 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera saturada y se secó sobre sulfato sódico anhidro. La fase orgánica se concentró a presión reducida, para proporcionar 80 mg del compuesto diana 98 como sólido blanco, con un rendimiento del 81 %.

MS (ESI) m/z 451,0 [M+H]+.

1H RMN(DMSO-d6, 400MHz) 511,46 (1H, s), 8,89 (1H, s), 7,19 (1H, t), 7,11 (1H, dd), 6,77 (3H, m), 6,19 (1H, t), 3,24 3,22 (2H, m), 3,02-2,98 (2H, m), 1,73-1,68 (4H, m).

Ejemplo 23: N-(3-bromo-4-fluorofeml)-4-((3-((3-fluoropirroNdm-1-N)sulfoml)propN)-ammo)-N'-hidroxiM,2,5-oxadiazol-3-formamidina(compuesto 39)

El compuesto 39 se preparó por un procedimiento similar a la síntesis del compuesto 40.

MS (ESI+) m/z 497 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO) 5 11,45 (s, 1H), 8,92 (s, 1H), 7,18 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 7,12 (dd, J =6,0, 2,7 Hz, 1H), 6 ,80 6,73 (m, 1H), 6,34 (t, J =5,9 Hz, 1H), 5,38 (dddd, J =57,2, 9,7, 6.0, 3,8 Hz, 1H), 4,17 (ddd, J = 20,2, 10,8,6,0 Hz, 2H), 4,01 (dd, J =10,8,3,7 Hz, 1H), 3,95 (dd, J = 10.8,3,7 Hz, 1H), 3,31 (dd, J = 6,6 Hz, 2H), 3,26 - 3,17 (m, 2H), 1,97 (dt, J =14,5, 7,1 Hz, 2H).

Ejemplo 24: N-(3-bromo-4-fluorofeml)-N'-hidroxN-4-((3-(morfolmo)propN)ammo)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(compuesto 43)

El compuesto 43 se preparó por un procedimiento similar a la síntesis del compuesto 18.

LC/MS (ESI+) m/z 493 (M+H+).

1H RMN (400 MHz, CDCl6) 511,45 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,91 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,11 (m, 1H), 6,1 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 6,79-3,10 (m, 2H), 6,73-2,73 (m, 2H), 6,33 (dd, J =5,7 Hz, 2H), 3,66-3,60 (m, 1H), 3,16-3,12 (m, 2H), 1,97-0,84 (m, 2H).

Ejemplo 25: 4-((4-(azetidm-1-Nsulfoml)butN)ammo)-N-(3-bromo-4-fluorofeml)-N'-hidroxiM,2,5-diazol-3-formamidina (compuesto 117)

El compuesto 117 se preparó por un procedimiento similar a la síntesis del compuesto 40.

MS (ESI+) m/z 493 (M+H+).

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 511,48 (s, 1H), 8,92 (s, 1H), 7,19 (t, J= 8,8 Hz, 1H), 7,12 (dd, J= 6,0, 2,6 Hz, 1H), 6,81 - 6,70 (m, 1H), 6.24 (t, J= 5,8 Hz, 1H), 3,83 (q, J= 7,2 Hz, 4H), 3,25 (d, J= 5,8 Hz, 2H), 3,14 (t, J= 7,1 Hz, 2H), 2,21 -2,12 (m, 2H), 1,70 (d, J= 3,2 Hz, 4H).

Ejemplo 26: N-(3-bromo-4-fluorofenil)-4-((4-((3-fluorazetidin-1 -il)sulfonil)butil)-amino)-N'-hidroxil-1,2,5-oxadiazol-3-amida (compuesto 121)

El compuesto 121 se preparó por un procedimiento similar a la síntesis del compuesto 40.

MS (ESI+) m/z 509 [M Na]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO): 5 (ppm) 8,92 (s, 1H), 7,22 (d, J =4,0 Hz, 1H), 7,12 (d, J =4,0 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 6,25-7,47 (m, 2H), 5,45-5,32 (m, 1H), 4,20 (s, 4H), 3,26-3,21 (m, 2H), 1,71-1,70 (m, 2H).

Ejemplo 27: N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxil-4-((3-(N-(metil-d³)sulfonil)-propil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-oximecarboxamida(compuesto 127)

Usando clorhidrato de metilamina deuterada como material de partida, SM2-127 se preparó por un procedimiento similar aldeSM2-22, y el compuesto 127 se preparó por un procedimiento similar a la síntesis del compuesto 22.

MS (ESI+) m/z 454 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO): 5 (ppm) 10,61 (s, 1H), 9,02 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,12 (d, J =4,0 Hz, 1H), 6,83-6,73 (m, 2H), 6,40-2,09 (m, 1H), 3,30 (s, 2H), 3,14-2,99 (m, 2H), 2,06-1,88 (m, 2H).

Ejemplo 28: N-(3-bromo-4-fluorofenil)-4-((3-(N,N-bis(tri-deuterado metN)ammo)-propN)ammo)-N'-hidroxN-1,2,5-diazol-3-formamidina(compuesto 128)

SM2-128 se preparó utilizando clorhidrato de dimetilamina deuterado como material de partida, y el compuesto 128 se preparó mediante un procedimiento similar a la síntesis del compuesto 36.

LC/MS (ESI+) m/z 471,2 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, CDCl6) 511,44 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,90 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,11 (m, 1H), 6,0 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 6,82-3,10 (m, 2H), 6,72-2,73 (m, 2H), 6,32 (dd, J =5,8 Hz, 2H), 3,36-3,25 (m, 1H), 3,12-3,03 (m, 2H), 2,03-1,88 (m, 2H).

Ejemplo 29: N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxil-4-((4-(N-deuterado metilsulfamoil)butil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(compuesto 134)

El compuesto 134 se preparó por un procedimiento similar al del compuesto 127.

MS (ESI⁺) m/z 468 [M+H]⁺.

¹H RMN (400 MHz, CD³OD) 57,14 (dd, J = 6,0, 2,7 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 6,86 (ddd, J = 8.8, 4,1, 2,7 Hz, 1H), 3,37 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 3,14 - 3,06 (m, 2H), 2,71 (d, J = 4,2 Hz, 3H), 1,94 - 1,76 (m, 4H).

Ejemplo 30: N-(3-bromo-4-fluorofeml)-4-((4-(N,N-bis(trideuterometN)ammo)-butN)ammo)-N'-hidroxN-1,2,5-diazol-3-formamidina(compuesto 135)

El compuesto 135 se preparó por un procedimiento similar al del compuesto 127.

MS (ESI+) m/z 485 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, MeOD) 57,15 (dd, J = 6,0, 2,7 Hz, 1H), 7,07 (t, J =8,7 Hz, 1H), 6,86 (ddd, J = 8.8, 4,1, 2,7 Hz, 1H), 3,37 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 3,13-3,04 (m, 2H), 1,84 (ddd, J =18,1, 11,3, 5,2 Hz, 4H).

Ejemplo 31: ^-(3-bromo-4-fluorofenil)-^,-hidroxil-4-(2-(2-aminosulfoniMetoxil)-etilamina)-1,2,5-diazol-3-formamidina (compuesto 136)

El compuesto 136 se preparó por un procedimiento similar al del compuesto 127.

MS (ESI+) m/z 467 [M H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 511,52 (s, 1H), 8,90 (s, 1H), 7,19 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 7,12 (dd, J = 6,0, 2,8 Hz, 1H), 6,84 (s, 2H), 6.78 (m, 1H), 6,21 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 3,78 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,61 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,39 (m, 2H), 3,30 (t, J = 6,8 Hz, 2H).

Ejemplo 32: N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxil-4-((3-(N-((metil-d3)sulfamoil)-propil)azufre)-1,2,5-oxadiazol-3-oximecarboxamida(compuesto 152)

Usando el procedimiento sintético B, similar al procedimiento del compuesto 45, el compuesto 152 se preparó con SM152-1 (comprado).

MS (ESI+) m/z 471 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, CDCls) 58,43 (s, 1H), 7,17 (dd, J = 5,8, 2,5 Hz, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,01 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 6 ,86 6,77 (m, 1H), 4,48 (s, 1H), 3,33 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 3,19 (t, J = 7,1 Hz, 1H).86-6,77 (m, 1H), 4,48 (s, 1H), 3,33 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 3,19 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 2,30 (dd, J = 15,3, 8,5 Hz, 2H).

Ejemplo 33: N-(3-bromo-2-fluorofeml)-N'-hidroxN-4-((3-(N-trideuterado-metN-sulfamoN)propN)azufre)-1,2,5-oxadiazol-3-formamidina(compuesto 153)

El compuesto 153 se preparó por un procedimiento similar al del compuesto 152.

MS (ESI+) m/z 472 M+H+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 511,64 (s, 1H), 8,92 (s, 1H), 7,34 (dd, J = 8,4, 5,0 Hz, 1H), 7,09 - 6.94 (m, 3H), 3,29 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,15 (dd, J =9,9, 5,4 Hz, 2H), 2,10 (dt, J = 15,0, 7,5 Hz, 2H).

El efecto beneficioso de la presente invención se dilucida mediante los siguientes ejemplos experimentales:

El uso de la presente invención se ilustrará con más detalle mediante los siguientes ejemplos experimentales biológicos, pero ello no significa limitar el ámbito de aplicación de la presente invención.

Ejemplo experimental 1: Determinación de la actividad inhibidora de los compuestos según la presente invención contra la proteasa IDO1 humana:

1) Materiales y aparatos experimentales:

Enzima IDOl (His-tag) (BPS Bioscience), L-triptófano (Sigma), azul de metileno (Sigma), catalasa procedente del hígado de bovinos (Sigma), ácido L-ascórbico (Sigma), glicerol (Sigma), solución de dihidrogenofosfato de potasio (Sigma), Tween 20 (Sigma), plataforma automática de muestreo Liquid handler (Bravo & Echo), lector de microplacasSpectraMax M5e (Molecular Devices).

2) Procedimiento de prueba de los compuestos: los compuestos se determinan por el procedimiento de prueba de absorbancia:

Los compuestos probados se disuelven en DMSO para preparar una solución de almacenamiento de alta concentración. La solución madre del compuesto de referencia se diluyó con DMSO para preparar una solución de 100 x. En la primera columna de la placa de trabajo, se añadieron 8 pl de los compuestos probados anteriormente y 8 pl del compuesto de referencia l0 o * como concentración más alta, y después las concentraciones más altas se diluyeron tres veces para obtener 11 concentraciones y preparar la solución 100 x. 0.se transfirieron 5 pl de solución de la placa anterior a la placa de detección. A cada pocillo se añadieron 0,5 pl de solución de compuesto 100x. Para los pocillos de control HpE y ZPE, se añadieron 0,5 pl de DMSO al 100 %.

Se añadieron 25 pL de solución enzimática 2x|DO1 (His-tag) (que contenía ácido L-ascórbico, azul de metileno y catalasa) a cada pocillo. Se añadieron 25 pl de solución de reacción sin enzima IDOl (His-tag) al pocillo de control HPE. La placa de ensayo se centrifugó a 1000 rpm durante 1 minuto para mezclarla bien. A continuación, la placa de ensayo se incubó a temperatura ambiente durante 30 minutos. se añadieron 25 pl de solución de sustrato (L-triptófano) por encima de 2 x a cada pocillo. La placa de ensayo se centrifugó a 1000 rpm durante 1 minuto para mezclarla bien. La placa de detección se colocó en ELISA (SpectraMax M5e), la temperatura se fijó en 25 °C y la absorbancia (valor OD) se midió a 320 nm cada 10 minutos hasta 60 minutos.

Cálculo de la relación de aumento de absorbancia: la pendiente de la curva de aumento de absorbancia de 10 min a 60 min se deriva de SpectralMax M5e. Se calculó el coeficiente de inhibición del compuesto: el coeficiente de inhibición del compuesto = (el coeficiente de aumento de la absorbancia del pocillo de control ZPE - el coeficiente de aumento de la absorbancia del pocillo del compuesto)/(el coeficiente de aumento de la absorbancia del pocillo de control ZPE -el coeficiente de aumento de la absorbancia del pocillo de control HPE) x 100. Los resultados se analizaron con Prism 5.0.

3) Resultados: Los valores IC ⁵⁰ de los compuestos según la presente invención contra la actividad de la proteasa IDO1 humana se muestran en la Tabla 1.

Tabla 1 La actividad inhibitoria de los compuestos de la presente invención contra la proteasa humana IDO1.

Ejemplo experimental 2: Determinación de la inhibición de los compuestos según la presente invención sobre la proteasa IDO en células HeLa

1) Materiales y aparatos experimentales

Materiales experimentales y aparatos del fabricante No.

MEM Gibco 41090-036

Penicilina-estreptomicina Gibco 15140-122

Suero fetal bovino Gibco 10091-148

Solución tampón fosfato (PBS) Gibco 10010-031

Sustituto de la pancreatina Gibco 12604-021

DMSO Sigma D8418-1L

IFN-y Sistema de I+D 285-IF-100/CF

CClaCOOH Sigma-aldrich T0699

P-dimetilaminobenzaldehído Sigma-aldrich 15647.-Compuesto de control positivo INCB024360 ChemExpress HY-15683

placa de 96 pocillos Corning 3599

Aparatos Fabricante Aplicación

Máquina centrífuga Eppendorf Centrifugar la mezcla de reacción Incubadora de dióxido de carbono Thermo Scientific Cultivo celular

Lector de placas Enspire PerkinElmer Leer señal de 480 nm

2) Procedimiento experimental para el ensayo de compuestos

2.1 Siembra de células HeLa en placa de 96 pocillos

Se extrajo el medio del matraz y se lavaron las células con PBS. Se añadió solución TrypLE al matraz para separar las células. Las células se lavaron una vez más con medio fresco que contenía un 10 % de FBS y se volvieron a suspender en el medio hasta que la concentración final fue de 2,3*106/ml. Sólo las células con una actividad superior al 90 % pueden utilizarse para la detección. Las células HeLa se sembraron en una placa de 96 pocillos con un medio de crecimiento adecuado de 100 pl a 3000 células/pocillo. Las células se incubaron a 37 °C bajo un 5 % de CO ² durante toda la noche.

2.2Preparación y tratamiento de los compuestos

El compuesto se diluyó hasta la concentración de 10 mM con DMSO, que luego se diluyó continuamente 3 veces para obtener 9 concentraciones. Se añadieron 5 pL de compuesto en 45 pL de medio como dilución mediana (dilución 10 veces, conteniendo 10 % de DMSO). Se añadieron 96 pl de medio de cultivo fresco a cada pocillo para alcanzar un volumen total de 196 pl. se tomaron 2pL de solución de compuesto de la solución diluida a la mitad y se añadieron a las células en los pocillos de la placa de ensayo, y luego se incubaron en una incubadora con 5 % de CO ² a 37 °C durante 30 minutos. Se añadieron 2 pl de solución de IFN-y humano para alcanzar un volumen total de 200 pl, con una concentración final de 10 ng/ml, y la concentración final es del 0,1 %. Las células se incubaron en una incubadora con un 5 % de CO ² a 37 °C durante 48 h.

2.3 Experimento IDO/cinurenina y análisis de datos

Después de incubar durante otras 48 horas en una incubadora con 5 % de CO ² a 37°C, se añadieron 140 pl de sobrenadante a cada pocillo y se transfirieron a una nueva placa de 96 pocillos. Se añadieron 10pL de CChCOOH 6,1N a cada pocillo y se incubaron a 50°C durante 30min después de sellarlos. A continuación, la placa se centrifugó a 2500 rpm durante 10 minutos. Se transfirieron 100 pl de sobrenadante de cada pocillo a otra placa de ensayo de 96 pocillos y se mezclaron con 100 pl de p-dimetilaminobenzaldehído al 6 % (p/v). Se utilizó EnSpire para leer la placa en OD480nm.

Los datos medios de HC (control alto: 10ng/ml IFN-y) y LC (control bajo: sin IFN-y) se calcularon para cada placa de cribado. Porcentaje de inhibición del pocillo del compuesto (%inh) = 100 * (aveHC-cpd pocillo)/(promHC-prom LC). Por último, se utilizó el software GraphPad Prism 6 para calcular los valores IC de los compuestos y dibujar la curva efecto-concentración.

1) Resultados: En la Tabla 2 se muestran los valores IC ⁵⁰ para el compuesto de la presente invención que inhibe la actividad de la proteasa IDOl en células Hela.

Tabla 2 Actividad inhibitoria contra la actividad de la proteasa IDOl en células Hela (IC⁵⁰)

Los resultados de prueba indicaron que el compuesto de la presente invención tenía un efecto inhibidor sobre la actividad de la proteasa IDO en células Hela.

Ejemplo experimental 3: Experimento de estabilidad metabólica del compuesto de la presente invención en microsomas hepáticos

Paso 1: el licor madre se prepara según la relación de composición de la Tabla 3 siguiente:

Tabla 3 Preparación del licor madre

Paso 2: se llevaron a cabo dos experimentos, respectivamente, como se indica a continuación:

A) Adición de NADPH: Se añadieron 10 pl de microsomas hepáticos a una concentración de 20 mg/ml y 40 pl de NADPH a una concentración de 10 mM al ensayo de incubación. Las concentraciones finales de microsomas hepáticos y NADPH fueron de 0,5 mg/ml y 1 mM, respectivamente.

B) Sin adición de NADPH: se añadieron al ensayo de incubación 10 pl de microsomas hepáticos a una concentración de 20 mg/ml y 40 pl de agua de alta pureza. La concentración final del microsoma hepático fue de 0,5 mg/ml.

Paso 3: se añadieron 4 pL de 200 pM de control positivo o compuesto de prueba y se llevó a cabo la reacción. El control positivo en este experimento fue Verapamil. La concentración final del compuesto de prueba fue de 2 pM.

Paso 4: se extrajeron 50 pl de las soluciones de reacción en los puntos temporales de 0, 15, 30, 45 y 60 min, respectivamente. Se añadieron a la solución de reacción volúmenes 4* de acetonitrilo e IS (alprazolam a la concentración de 100 nM, labetalol a la concentración de 200 nM, cafeína a la concentración de 200 nM y ketoprofeno a la concentración de 2 pM). La muestra se centrifugó a 3.220 gramos de gravedad durante 40 minutos. se añadieron 100 pl de agua de gran pureza a 100 pl de sobrenadante y se analizaron por LC-MS/MS.

Paso 5: Análisis de datos: el área del pico se determinó a partir del cromatograma de iones extraídos. El valor de la pendiente k se determinó por regresión lineal del logaritmo natural de la curva producida por el porcentaje restante del fármaco parental frente al tiempo de incubación.

La semivida in vitro fin vitro t1/2) se determina por el valor de la pendiente.in vitro t-i ^/2 = -(0.693/k) El invitroCLint (invitroCLint, en unidad de pL/min/mg) se convierte a partir de la semivida in vitro t-i ^/2 (min) utilizando la siguiente ecuación (promedio de determinaciones repetidas):

CLs, _m ^. _{v i} ^.. _t ^. _{ro = —} ^0, _{_} ⁶ _{_} ⁹ _{_} ³ _{x __} ^v _{_} ^o _{_} ^lu _{_} ^m _{__} ^e _{_} ⁿ _{__} ^d _{_} ^e _{__} ⁱⁿ _{_} ^c _{_} ^u _{_} ^b _{_} ^a _{_} ^c _{_} ⁱ _{_} ^ó _{_} ⁿ _{_} ^(uJL}

cantidad de proteínas (m g)

El CLint a escala (en ml/min/kg) se convierte a partir del t-i ^/2 in vitro (min) mediante la siguiente fórmula (la media de determinaciones repetidas):

Los resultados experimentales de la estabilidad metabólica en microsomas hepáticos de ratones, ratas y seres humanos se enumeran en la Tabla 4.

Tabla 4 Resultados experimentales de la estabilidad metabólica en microsomas hepáticos de ratones, ratas y humanos

El INCB024360 es un inhibidor de la IDO desarrollado por Incyte, EE.UU., y ha entrado en fase clínica III. Los datos de la Tabla 4 muestran que la estabilidad metabólica del compuesto de la presente invención en microsomas hepáticos humanos es significativamente mejor en comparación con el compuesto de referencia INCB024360, lo que indica que el compuesto de la presente invención probablemente tenga una mejor farmacocinética clínica.

Ejemplo experimental 4: Farmacocinética de los compuestos según la presente invención en ratón

1) Materiales y aparatos experimentales

1) Sistema de cromatografía líquida de alta resolución LC-20AD (empresa SHIMADZU, Japón)

Espectrómetro de masas de triple cuadrupolo API4000 (Applied Biosystem company,EE.UU.) Programa informático de farmacocinética PhenixWinnolin (Versión 6.3, Certara company,EE.UU.) Centrifugadora refrigerada de alta velocidad (Thermo Fisher Scientific)

Balanza analítica (Sartorius, SECURA225D-1CN)

Animales de experimentación: Ratones ICR (Chengdu Dashuo Experimental Animal Co., Ltd.) DMA (Sigma)

CMC-Na (Chengdu Kelong Chemical)

Heparina (Chengdu Kelong Chemical)

2) Procedimientos experimentales y resultados

Se pesaron con precisión 5 mg de compuesto (compuesto 4 de la presente invención, utilizando el compuesto similar INCB-24360 en fase clínica III como compuesto de referencia), y se añadió el vehículo correspondiente hasta un volumen final de 10 ml, mezclándose a continuación mediante vórtex ultrasónico. Se preparó la solución a la concentración de 0,5 mg/ml. La solución final (0,2 ml) preparada se almacenó a -20 °C para la determinación de la concentración. 9 ratones ICR adultos sanos (20-30 g) fueron ayunados durante la noche (libre acceso al agua), y recibieron el volumen de administración de 0,2 ml/10g por sonda; justo antes de la administración y 0,5, 1, 2, 4, 6, 8, 12 y 24 h después de la administración, se recogieron 0,1 ml de sangre del plexo venoso retroorbitario, se centrifugaron a 4°C durante 5 min para separar el plasma, y se almacenaron a -20°C para las pruebas. A continuación, se midió la concentración del compuesto de prueba en plasma mediante el procedimiento lC/MS/MS.

Tabla 5 Parámetros farmacocinéticos de los compuestos de la presente invención

Los compuestos de la presente invención muestran una buena farmacocinética.

En resumen, los compuestos preparados en la presente invención tienen una actividad inhibitoria significativa contra la proteasa IDO, y el metabolismo in vivo es estable, mostrando una buena farmacocinética. Especialmente, la estabilidad metabólica a través de microsomas de hígado humano es mejor que la del compuesto similar INCB024360, que ha entrado en la clínica, lo que indica que el compuesto de la presente invención puede tener una mejor farmacocinética clínica. El compuesto de la presente invención o la composición farmacéutica pueden utilizarse para preparar fármacos inhibidores de IDO, y también pueden utilizarse para preparar fármacos para prevenir y/o tratar enfermedades con características patológicas de la vía del metabolismo del triptófano mediada por IDO, con amplio valor de aplicación.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula (I), o isómero óptico del mismo, o isómero cis y trans del mismo, o compuesto isotópico del mismo, o solvato del mismo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o tautómero del mismo, o mesómero del mismo, o racemato del mismo, o enantiómero del mismo, o diastereoisómero del mismo, o mezcla de dos o más de los mismos:

X se selecciona entre O, S, -O-NH-, -NH- y -NH-O-;

A se selecciona entre ninguno, -NR ¹¹ -, O, S,

R7 R8

v V

R ¹¹ se selecciona entre H, metilo;

R5, R6, R7, R8 se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, deuterio, halógeno, hidroxilo, amino, alquilo C ¹ -C ⁶ , cicloalquilo C ³ -C ⁶ , alcoxilo C ¹ -C ⁶ , alquilamino C ¹ -C ⁶ ;

o dos cualesquiera de R5, R6, R7 y R8 están enlazados para formar un anillo carbocíclico de 3-8 miembros.

2. Los compuestos, o isómero óptico de los mismos, o isómero cis y trans de los mismos, o compuesto isotópico de los mismos, o solvato de los mismos, o sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, o tautómero de los mismos, o mesómero de los mismos, o racemato de los mismos, o enantiómero de los mismos, o diastereoisómero de los mismos, o mezcla de dos o más de los mismos, según la reivindicación 1, caracterizados porque:

a y b se seleccionan independientemente entre los números enteros de 0 a 5;

X se selecciona entre S, -NH-;

A se selecciona entre ninguno, O, -NR11-, sulfurilo,

cicloalquilo C ³ ,

R ¹¹ se selecciona entre H, metilo;

R1 y R2 se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, hidroxilo, alquilo C1-C3, alquilo C1-C3 sustituido, cicloalquilo C3-C6, metoxilo, alquilamino C1 sustituido; o R1 y R2 se enlazan para formar heterociclo de 4-6 miembros; o R1 y R2 se enlazan para formar heterociclo de 4-6 miembros sustituido; los sustituyentes en dicho alquilo C ¹ -C ³ sustituido son deuterio, hidroxilo, alquilamino C ¹ sustituido por metilo, amino, halógeno; el sustituyente en dicho alquilamino C ¹ sustituido es metilo; los heteroátomos en dicho heterociclo de 4-6 miembros son N, O, y el número de dicho heteroátomo es 1, 2; el heteroátomo en dicho heterociclo de 4-6 miembros sustituido es N, y el número de dicho heteroátomo es 1, 2; los sustituyentes en dicho heterociclo de 4-6 miembros sustituido son metilo, hidroxilo, halógeno;

R3 y R4 son halógenos;

3. El compuesto, o isómero óptico del mismo, o isómero cis y trans del mismo, o compuesto isotópico del mismo, o solvato del mismo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o tautómero del mismo, o mesómero del mismo, o racemato del mismo, o enantiómero del mismo, o diastereoisómero del mismo, o mezcla de dos o más de los mismos, según la reivindicación 1, caracterizado porque dicho compuesto de fórmula (I) tiene la estructura de fórmula (II):

donde,

X se selecciona entre S, -NH-;

R3 y R4 son halógenos;

4. El compuesto, o isómero óptico del mismo, o isómero cis y trans del mismo, o compuesto isotópico del mismo, o solvato del mismo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o tautómero del mismo, o mesómero del mismo, o racemato del mismo, o enantiómero del mismo, o diastereoisómero del mismo, o mezcla del mismo, según la reivindicación 2, caracterizado porque dicho compuesto de fórmula (I) tiene la estructura de fórmula (III):

donde,

X se selecciona entre S, -NH-;

R1 y R2 se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, hidroxilo, alquilo C ¹ -C ³ , alquilo C ¹ -C ³ sustituido, cicloalquilo C ³ -C ⁶ , metoxilo, alquilamino C ¹ sustituido; o R1 y R2 se enlazan para formar heterociclo de 4-6 miembros; o R1 y R2 se enlazan para formar heterociclo de 4-6 miembros sustituido; los sustituyentes en dicho alquilo C1-C3 sustituido son deuterio, hidroxilo, alquilamino C1 sustituido por metilo, amino, halógeno; el sustituyente en dicho alquilamino C1 sustituido es metilo; los heteroátomos en dicho heterociclo de 4-6 miembros son N, O, y el número de dicho heteroátomo es 1, 2; el heteroátomo en dicho heterociclo de 4-6 miembros sustituido es N, y el número de dicho heteroátomo es 1, 2; los sustituyentes en dicho heterociclo de 4-6 miembros sustituido son metilo, hidroxilo, halógeno;

R3 y R4 son halógenos;

A se selecciona entre ninguno, O, -NR11-, sulfurilo,

cicloalquilo C ³ ,

R11 se selecciona entre H, metilo;

5. El compuesto, o isómero óptico del mismo, o isómero cis y trans del mismo, o compuesto isotópico del mismo, o solvato del mismo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o tautómero del mismo, o mesómero del mismo, o racemato del mismo, o enantiómero del mismo, o diastereoisómero del mismo, o mezcla de dos o más de los mismos, según la reivindicación 2, caracterizado porque dicho compuesto de fórmula (I) tiene la estructura de fórmula (IV):

donde,

X se selecciona entre S, -NH-;

R1 y R2 se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, hidroxilo, alquilo C ¹ -C ³ , alquilo C ¹ -C ³ sustituido, cicloalquilo C ³ -C ⁶ , metoxilo, alquilamino C ¹ sustituido; o R1 y R2 se enlazan para formar heterociclo de 4-6 miembros; o R1 y R2 se enlazan para formar heterociclo de 4-6 miembros sustituido; los sustituyentes en dicho alquilo C1-C3 sustituido son deuterio, hidroxilo, alquilamino C1 sustituido por metilo, amino, halógeno; el sustituyente en dicho alquilamino C ¹ sustituido es metilo; los heteroátomos en dicho heterociclo de 4-6 miembros son N, O, y el número de dicho heteroátomo es 1, 2; el heteroátomo en dicho heterociclo de 4-6 miembros sustituido es N, y el número de dicho heteroátomo es 1, 2; los sustituyentes en dicho heterociclo de 4-6 miembros sustituido son metilo, hidroxilo, halógeno;

R3 y R4 son halógenos;

A se selecciona entre ninguno, O, -NRn -, sulfurilo,

cicloalquilo C3,

R ¹¹ se selecciona entre H, metilo;

6. El compuesto, o isómero óptico del mismo, o isómero cis y trans del mismo, o compuesto isotópico del mismo, o solvato del mismo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o tautómero del mismo, o mesómero del mismo, o racemato del mismo, o enantiómero del mismo, o diastereoisómero del mismo, o mezcla de dos o más de los mismos, según la reivindicación 2, caracterizado porque dicho compuesto de fórmula (I) tiene la estructura de fórmula (V):

donde,

X se selecciona entre S, -NH-;

R1 y R2 se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, hidroxilo, alquilo Ci-C3, alquilo C1-C3 sustituido, cicloalquilo C3-C6, metoxilo, alquilamino C1 sustituido; o R1 y R2 se enlazan para formar heterociclo de 4-6 miembros; o R1 y R2 se enlazan para formar heterociclo de 4-6 miembros sustituido; los sustituyentes en dicho alquilo C ¹ -C ³ sustituido son deuterio, hidroxilo, alquilamino C ¹ sustituido por metilo, amino, halógeno; el sustituyente en dicho alquilamino C1 sustituido es metilo; los heteroátomos en dicho heterociclo de 4-6 miembros son N, O, y el número de dicho heteroátomo es 1, 2; el heteroátomo en dicho heterociclo de 4-6 miembros sustituido es N, y el número de dicho heteroátomo es 1, 2; los sustituyentes en dicho heterociclo de 4-6 miembros sustituido son metilo, hidroxilo, halógeno;

R3 y R4 son halógenos;

A se selecciona entre ninguno, O, -NR11-, sulfurilo,

cicloalquilo C ³ ,

R ¹¹ se selecciona entre H, metilo;

7. El compuesto, o isómero óptico del mismo, o isómero cis y trans del mismo, o compuesto isotópico del mismo, o solvato del mismo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o tautómero del mismo, o mesómero del mismo, o racemato del mismo, o enantiómero del mismo, o diastereoisómero del mismo, o mezcla de dos o más de los mismos, según la reivindicación 2, caracterizado porque dicho compuesto de fórmula (I) tiene la estructura de fórmula (VI):

donde,

X se selecciona entre S, -NH-;

R1 y R2 se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, hidroxilo, alquilo C ¹ -C ³ , alquilo C1-C3 sustituido, cicloalquilo C3-C6, metoxilo, alquilamino C1 sustituido; o R1 y R2 se enlazan para formar heterociclo de 4-6 miembros; o R1 y R2 se enlazan para formar heterociclo de 4-6 miembros sustituido;

los sustituyentes en dicho alquilo C1-C3 sustituido son deuterio, hidroxilo, alquilamino C1 sustituido por metilo, amino, halógeno; el sustituyente en dicho alquilamino C1 sustituido es metilo; los heteroátomos en dicho heterociclo de 4-6 miembros son N, O, y el número de dicho heteroátomo es 1, 2; el heteroátomo en dicho heterociclo de 4-6 miembros sustituido es N, y el número de dicho heteroátomo es 1, 2; los sustituyentes en dicho heterociclo de 4-6 miembros sustituido son metilo, hidroxilo, halógeno;

R3 y R4 son halógenos;

A se selecciona entre ninguno, O, -NR11-, sulfurilo,

cicloalquilo C ³ ,

R ¹¹ se selecciona entre H, metilo;

8. El compuesto, o isómero óptico del mismo, o isómero cis y trans del mismo, o compuesto isotópico del mismo, o solvato del mismo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o tautómero del mismo, o mesómero del mismo, o racemato del mismo, o enantiómero del mismo, o diastereoisómero del mismo, o mezcla de dos o más de los mismos, según la reivindicación 2, caracterizado porque dicho compuesto de fórmula (I) tiene la estructura de fórmula (VII):

donde,

X se selecciona entre S, -NH-;

R1 y R2 se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, hidroxilo, alquilo Ci-C3, alquilo C1-C3 sustituido, cicloalquilo C3-C6, metoxilo, alquilamino C1 sustituido; o R1 y R2 se enlazan para formar heterociclo de 4-6 miembros; o R1 y R2 se enlazan para formar heterociclo de 4-6 miembros sustituido; los sustituyentes en dicho alquilo C1-C3 sustituido son deuterio, hidroxilo, alquilamino C1 sustituido por metilo, amino, halógeno; el sustituyente en dicho alquilamino C1 sustituido es metilo; los heteroátomos en dicho heterociclo de 4-6 miembros son N, O, y el número de dicho heteroátomo es 1, 2; el heteroátomo en dicho heterociclo de 4-6 miembros sustituido es N, y el número de dicho heteroátomo es 1, 2; los sustituyentes en dicho heterociclo de 4-6 miembros sustituido son metilo, hidroxilo, halógeno;

R3 y R4 son halógenos;

A se selecciona entre ninguno, O, -NR11-, sulfurilo,

cicloalquilo C ³ ,

R ¹¹ se selecciona entre hidrógeno, metilo;

9. El compuesto, o isómero óptico del mismo, o isómero cis y trans del mismo, o compuesto isotópico del mismo, o solvato del mismo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o tautómero del mismo, o mesómero del mismo, o racemato del mismo, o enantiómero del mismo, o diastereoisómero del mismo, o mezcla de dos o más de los mismos, según cualquiera de las reivindicaciones 1-8, caracterizado porque dicho compuesto de fórmula (I) es uno de los siguientes:



10. Compuesto, o isómero óptico del mismo, o isómero cis y trans del mismo, o compuesto isotópico del mismo, o solvato del mismo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o tautómero del mismo, o mesómero del mismo, o racemato del mismo, o enantiómero del mismo, o diastereoisómero del mismo, o mezcla de dos o más de los mismos, según cualquiera de las reivindicaciones 1-9, para su uso en la prevención y/o tratamiento de enfermedades con características patológicas de la vía del metabolismo del triptófano mediada por IDO.

11. El compuesto para uso según la reivindicación 10, caracterizado porque dichas enfermedades con características patológicas de la vía del metabolismo del triptófano mediada por IDO se seleccionan entre cáncer, síndrome mielodisplásico, enfermedad de Alzheimer, enfermedad autoinmune, depresión, trastorno de ansiedad, cataratas, trastorno psicológico y SIDA; en el que dicho cáncer es preferentemente cáncer de mama, cáncer de cuello uterino, cáncer de colon, cáncer de pulmón, cáncer gástrico, cáncer rectal, cáncer de páncreas, cáncer cerebral, cáncer de piel, cáncer oral, cáncer de próstata, cáncer óseo, cáncer de riñón, cáncer de ovario, cáncer de vejiga, cáncer de hígado, tumor de trompa de Falopio, tumor ovárico, tumor peritoneal, melanoma en estadio IV, tumor sólido, glioma, neuroglioblastoma, cáncer de hepatocitosy nefroma mastoideo.

12. Una combinación de fármacos, caracterizada porque dicha combinación de fármacos se prepara utilizando un compuesto, o isómero óptico del mismo, o isómero cis y trans del mismo, o compuesto isotópico del mismo, o solvato del mismo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o tautómero del mismo, o mesómero del mismo, o racemato del mismo, o enantiómero del mismo, o diastereoisómero del mismo, o mezcla de dos o más de los mismos según cualquiera de las reivindicaciones 1-9 como principio activo, con la adición de adyuvantes farmacéuticamente aceptables.

13. La combinación de fármacos según la reivindicación 12 para su uso en la prevención y/o tratamiento de enfermedades con características patológicas de la vía del metabolismo del triptófano mediada por IDO.

14. La combinación de fármacos para su uso según la reivindicación 13, caracterizada porque dichas enfermedades con características patológicas de la vía del metabolismo del triptófano mediada por IDO se seleccionan entre cáncer, síndrome mielodisplásico, enfermedad de Alzheimer, enfermedad autoinmune, depresión, trastorno de ansiedad, cataratas, trastorno psicológico y SIDA; en el que dicho cáncer es preferentemente cáncer de mama, cáncer de cuello uterino, cáncer de colon, cáncer de pulmón, cáncer gástrico, cáncer rectal, cáncer de páncreas, cáncer cerebral, cáncer de piel, cáncer oral, cáncer de próstata, cáncer óseo, cáncer de riñón, cáncer de ovario, cáncer de vejiga, cáncer de hígado, tumor de trompa de Falopio, tumor ovárico, tumor peritoneal, melanoma en estadio IV, tumor sólido, glioma, neuroglioblastoma, cáncer de hepatocitos y nefroma mastoideo.