ES2886935T3

ES2886935T3 - Inhibidores de FASN para su uso en el tratamiento de esteatohepatitis no alcohólica

Info

Publication number: ES2886935T3
Application number: ES17790287T
Authority: ES
Inventors: David S Millan; Wei Lu; Sailaja Battula; Stephane Soroosh Radfar; Seng-Lai Tan
Original assignee: Forma Therapeutics Inc
Current assignee: Forma Therapeutics Inc
Priority date: 2016-04-25
Filing date: 2017-04-25
Publication date: 2021-12-21
Anticipated expiration: 2037-04-25
Also published as: WO2017189613A1; TW201737943A; EP3458448A4; PT3458448T; EP3458448B1; PL3458448T3; US20190374536A1; EP3458448A1; DK3458448T3; MA45047A; US20170312273A1

Abstract

Un inhibidor de FASN para su uso en un método para tratar esteatohepatitis no alcohólica (NASH), mediante el cual el inhibidor de FASN reduce la esteatosis, la inflamación dependiente de TH17, y la fibrosis, en donde dicho método comprende administrar dicho inhibidor de FASN a dicho paciente, y en donde el inhibidor de FASN es: **(Ver fórmula)** o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

DESCRIPCIÓN

Inhibidores de FASN para su uso en el tratamiento de esteatohepatitis no alcohólica

La presente invención se refiere a un inhibidor de FASN para su uso en un método para tratar la esteatohepatitis no alcohólica (NASH), mediante el cual el inhibidor de FASN reduce la esteatosis, la inflamación dependiente de TH17, y la fibrosis, como se define en la reivindicación 1.

Antecedentes

Se ha informado que la progresión de NAFL a NASH en pacientes humanos se correlaciona con un aumento significativo en la frecuencia de células T^h17 en el hígado, Rau, M., et al., J. Immunol. 2016; 196(1): 97 105. En un modelo de ratón de NAFL, se ha descubierto que la producción de IL-17 impulsada por la obesidad, que es producida por las células T^h17, es fundamental para el desarrollo y la progresión de NAFL a esteatohepatitis.

Se sabe que la activación del receptor de IL-17 induce la secreción de citoquinas proinflamatorias y la IL-17 induce la producción de colágeno tipo I en las células estrelladas hepáticas (Tan, Z., et al., J Immunol. 2013; 191(4): 1835 -44). Por tanto, se espera que la inhibición o neutralización de IL-17 afecte a la inflamación y fibrosis mediadas por IL-17 (Tan, Z., J Immunol. 1835-44).

Los macrófagos de tipo M2 diferenciados con CSF-1 pueden adquirir propiedades profibrogénicas e inmunosupresoras. Los macrófagos de tipo M2 y la transducción de señales de CSF-1 están implicados en la fibrosis y en la evasión de la respuesta antitumoral en el microambiente tumoral.

Por tanto, hay una necesidad de nuevos inhibidores de células T^h17 y macrófagos M2 para el tratamiento de trastornos impulsados por T^h17 y CSF1.

Los derivados de imidazolin-5-ona, composiciones farmacéuticas que los contienen, y sus usos como inhibidores de FASN se describen en la US 2015/166529 A1.

Los derivados de benzaminda, composiciones farmacéuticas que los contienen, y su uso como inhibidores de FASN se describen en la US 2016/009688 A1.

Sumario

Se ha observado sorprendente e inesperadamente que cuando se cultivan células T CD4+ humanas en condiciones de polarización de T^h17 en presencia de inhibidores de FASN, se inhibe significativamente la producción de IL-17.

La invención está definida por las reivindicaciones. Cualquier materia que no entre dentro del alcance de las reivindicaciones se proporciona solamente con propósitos informativos. Cualquier referencia en la descripción a métodos de tratamiento se refiere a los compuestos, composiciones farmacéuticas y medicamentos de la invención para su uso en un método de tratamiento del cuerpo humano o animal mediante terapia. Los aspectos de la divulgación no son parte de la invención reivindicada. La presente invención proporciona un inhibidor de FASN para su uso en un método para tratar esteatohepatitis no alcohólica (NASH), mediante el cual el inhibidor de FASN reduce la esteatosis, la inflamación dependiente de TH17, y la fibrosis, en donde dicho método comprende administrar dicho inhibidor de FASN a dicho paciente, y en donde el inhibidor de FASN es:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Un primer aspecto de la divulgación se refiere a un método para tratar una afección o enfermedad asociada con la inflamación mediada por T^h17. El método comprende administrar a un paciente que necesita un tratamiento para una afección o una enfermedad asociada con la inflamación mediada por T^h17 una cantidad eficaz de un inhibidor de FASN.

Otro aspecto de la presente divulgación se refiere a un método para tratar una afección o enfermedad asociada con la activación del receptor de IL-17. El método comprende administrar a un paciente que necesita un tratamiento para una afección o una enfermedad asociada con la activación del receptor de IL-17 una cantidad eficaz de un inhibidor de FASN.

Otro aspecto de la presente divulgación se refiere a un método para tratar a un paciente de trasplante de órganos para reducir el rechazo de órganos. El método comprende administrar a un paciente que necesita un tratamiento para reducir el rechazo de órganos una cantidad eficaz de un inhibidor de FASN.

Otro aspecto de la presente divulgación se refiere a un método para inhibir la diferenciación de macrófagos dependiente de CSF-1. El método comprende poner en contacto una célula con una cantidad eficaz de un inhibidor de FASN.

Otro aspecto de la presente divulgación se refiere a un método para tratar una afección o enfermedad asociada con la diferenciación de macrófagos dependiente de CSF-1. El método comprende administrar a un paciente que necesita un tratamiento para una afección o una enfermedad asociada con la diferenciación de macrófagos dependiente de CSF-1 una cantidad eficaz de un inhibidor de FASN.

Breve descripción de los dibujos

Figura 1: El Compuesto A redujo la puntuación de esteatosis del hígado del modelo de rata HFD. (A): Se evaluaron portaobjetos de hígado teñido con hematoxilina y eosina para la puntuación de esteatosis mediante el sistema de puntuación de Kleiner (Kleiner, D.E., Brunt, E.M., Van Natta, M., Behling, C., Contos, M.J., Cummings, O.W., Ferrell, L.D., Liu, Y.-C., Torbenson, M.S., Unalp-Arida, A., et al. (2005). Diseño y validación de un sistema de puntuación histológica para la enfermedad del hígado graso no alcohólico. Hepatol. Baltim. Md 41, 1313 -1321). Las puntuaciones de esteatosis se evaluaron mediante una evaluación de potencia media de la afectación parenquimatosa por esteatosis. La gravedad de la esteatosis se definió de la siguiente manera: S0, sin esteatosis, <5% afectación parenquimatosa; S1, esteatosis leve, 5-33% (sección inferior de la barra); S2, esteatosis moderada, >33-66% (sección media de la barra); S3, esteatosis grave, >66% (sección superior de la barra). (B): La puntuación de gravedad del grupo se calculó para ayudar en la evaluación de la gravedad de la esteatosis en cada grupo. Esto se calculó multiplicando la puntuación de esteatosis por el número de animales con esa puntuación y luego sumándolos para obtener la puntuación total. Por ejemplo, hay 2 de puntuación 1, 4 de puntuación 2 y 2 de puntuación 3 en el grupo tratado con vehículo. La puntuación de gravedad del grupo de vehículo es 2X1+4X2+2X3 = 16. La contribución de la puntuación de gravedad del grupo de la puntuación de esteatosis 1,2, 3 está marcada en las secciones inferior, media y superior de cada barra, respectivamente. Figura 2 : Efecto del compuesto A sobre la mejora de la gravedad de la enfermedad en el modelo de ratón EAE a partir de la administración BID (A) o QD (B). Los datos se presentaron como media ± SEM. Los criterios de puntuación clínica se enumeran en la Tabla 6.1.

Figura 3 : El Compuesto A redujo el nivel de expresión génica de mRORc en células esplénicas del modelo EAE. Los datos se presentan como media ± SD. El compuesto A inhibió la mRORc esplénica en un 45%, 62% y 81% para los grupos de 1,3 y 10 mg/kg BID en comparación con el grupo tratado con vehículo.

Figura 4 : El compuesto A redujo la población de células IL17+ CD4+ en muestras de ganglio linfático (A) y de médula espinal y tejido cerebral en el segundo estudio EAE (B). Los datos se presentaron como media ± SD. *P <0,05 **P<0,01 en comparación con el control del vehículo.

Definiciones

Los compuestos de esta divulgación incluyen los descritos en general con anterioridad, y se ilustran adicionalmente mediante las clases, subclases y especies divulgadas en la presente. Como se usa en la presente, se aplicarán las siguientes definiciones a menos que se indique lo contrario. Para los propósitos de esta invención, los elementos químicos se identifican de acuerdo con la Tabla Periódica de los Elementos, versión CAS, Handbook of Chemistry and Physics, 75a Ed. Además, los principios generales de la química orgánica se describen en "Organic Chemistry", Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999, y "March's Advanced Organic Chemistry", 5a Ed., Ed: Smith, M.B. y March, J., John Wiley & Sons, Nueva York: 2001.

Las abreviaturas usadas en la presente tienen su significado convencional dentro de las técnicas química y biológica. Las estructuras químicas expuestas en la presente se construyen de acuerdo con las reglas estándar de valencia química conocidas en las técnicas químicas.

Como se ha usado anteriormente, y a lo largo de esta divulgación, se entenderá que los siguientes términos, a menos que se indique lo contrario, tienen los siguientes significados. Si falta una definición, gobernará la definición de la convención conocida por un experto en la técnica.

El término "aproximadamente", cuando se usa en la presente en referencia a un valor, se refiere a un valor que es similar, en contexto al valor referenciado. En general, los expertos en la técnica, familiarizados con el contexto, apreciarán el grado relevante de variación abarcado por "aproximadamente" en ese contexto. Por ejemplo, en algunas realizaciones, el término "aproximadamente" puede abarcar un intervalo de valores dentro del 25%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% o menos del valor referido.

Como se usa en la presente, el término "administración" se refiere típicamente a la administración de una composición o compuesto a un sujeto o sistema. Los expertos en la técnica conocerán una variedad de rutas que, en circunstancias apropiadas, pueden utilizarse para la administración a un sujeto, por ejemplo, un humano. Por ejemplo, en algunas realizaciones, la administración puede ser ocular, oral, parenteral, tópica, etc. En algunas realizaciones particulares, la administración puede ser bronquial (por ejemplo, por instilación bronquial), bucal, dérmica (que puede ser o comprender, por ejemplo, uno o más de tópica a la dermis, intradérmica, interdérmica, transdérmica, etc.), enteral, intraarterial, intradérmica, intragástrica, intramedular, intramuscular, intranasal, intraperitoneal, intratecal, intravenosa, intraventricular, dentro de un órgano específico (por ejemplo, intrahepática), mucosal, nasal, oral, rectal, subcutánea, sublingual, tópica, traqueal (por ejemplo, mediante instilación intratraqueal), vaginal, vítrea, etc. En algunas realizaciones, la administración puede implicar una dosificación intermitente (por ejemplo, una pluralidad de dosis separadas en el tiempo) y/o dosificación periódica (por ejemplo, dosis individuales separadas por un período de tiempo común). En algunas realizaciones, la administración puede implicar una dosificación continua (por ejemplo, perfusión) durante por lo menos un período de tiempo seleccionado. En algunas realizaciones, la administración de un compuesto particular puede lograrse mediante la administración de una composición que incluye o administra de otro modo el compuesto al sujeto o sistema (o a una parte relevante del mismo o un sitio en el mismo). Por tanto, en algunas realizaciones, la administración de un compuesto puede lograrse mediante la administración de una composición que comprende el compuesto.

Como se usa en la presente, el término "paciente" o "sujeto" se refiere a cualquier organismo al que se administra el compuesto o los compuestos descritos en la presente de acuerdo con la presente divulgación, por ejemplo, con propósitos experimentales, de diagnóstico, profilácticos y/o terapéuticos, e incluye mamíferos y no mamíferos. Los ejemplos de mamíferos incluyen cualquier miembro de la clase de mamíferos: humanos, primates no humanos como chimpancés y otras especies de simios y monos; animales de granja como ganado, caballos, ovejas, cabras, cerdos; animales domésticos como conejos, perros y gatos; animales de laboratorio que incluyen roedores, como ratas, ratones y cobayas, y similares. Los ejemplos de no mamíferos incluyen aves, peces y similares. En una realización de la presente invención, el mamífero es un humano. En algunos aspectos de la divulgación, un sujeto puede padecer y/o ser susceptible a una enfermedad, trastorno, y/o afección.

El término "FASN" se refiere a todas las clases, tipos, subtipos, isotipos, segmentos, variantes y formas mutantes de la sintasa de ácidos grasos.

Como se usa en la presente, el término "inhibidor" se refiere a un agente, afección o evento cuya presencia, nivel, grado, tipo o forma se correlaciona con un nivel o actividad disminuidos de otro agente (es decir, el agente inhibido u objetivo). En general, un inhibidor puede ser o incluir un agente de cualquier clase química incluyendo, por ejemplo, moléculas pequeñas, polipéptidos, ácidos nucleicos, carbohidratos, lípidos, metales y/o cualquier otra entidad, condición o evento que muestre la actividad inhibidora relevante. En algunos aspectos de la divulgación, un inhibidor puede ser directo (en cuyo caso ejerce su influencia directamente sobre su objetivo, por ejemplo, uniéndose al objetivo); en algunos aspectos de la divulgación, un inhibidor puede ser indirecto (en cuyo caso ejerce su influencia interactuando con y/o alterando de otro modo un regulador del objetivo, de tal manera que se reduce el nivel y/o la actividad del objetivo).

Los términos "cantidad eficaz" o "cantidad terapéuticamente eficaz" se refieren a una cantidad suficiente del agente para proporcionar el resultado biológico deseado. Ese resultado puede ser la reducción y/o el alivio de los signos, síntomas o causas de una enfermedad o cualquier otra alteración deseada de un sistema biológico. Por ejemplo, una "cantidad eficaz" para uso terapéutico es la cantidad de la composición que comprende un compuesto como se divulga en la presente que se requiere para proporcionar una disminución clínicamente significativa en una enfermedad, trastorno y/o afección. Una cantidad "eficaz" apropiada en cualquier caso individual puede ser determinada por un experto en la técnica usando experimentación de rutina. Por tanto, la expresión "cantidad eficaz" se refiere generalmente a la cantidad para la que la sustancia activa tiene efectos terapéuticos.

"Mamífero" significa humanos y otros animales mamíferos.

Como se usa en la presente, el término "prevenir" o "prevención", cuando se usa en relación con la aparición de una enfermedad, trastorno y/o afección, se refiere a reducir el riesgo de desarrollar la enfermedad, trastorno y/o afección y/o retrasar la aparición de una o más características o síntomas de la enfermedad, trastorno o afección. La prevención puede considerarse completa cuando la aparición de una enfermedad, trastorno o afección se ha retrasado durante un período de tiempo predefinido.

Como se usa en la presente, los términos "tratar" o "tratamiento" son sinónimos del término "prevenir" y se pretende que indiquen un aplazamiento del desarrollo de enfermedades, prevenir el desarrollo de enfermedades y/o reducir la gravedad de los síntomas que se espera que se desarrollen. Por tanto, estos términos incluyen mejorar los síntomas de la enfermedad existente, prevenir síntomas adicionales, mejorar o prevenir las causas metabólicas subyacentes de los síntomas, inhibir el trastorno o enfermedad, por ejemplo, detener el desarrollo del trastorno o enfermedad, mitigar el trastorno o enfermedad, provocar la regresión del trastorno o enfermedad, aliviar una afección provocada por la enfermedad o trastorno, o detener o aliviar los síntomas de la enfermedad o trastorno.

Por “farmacéuticamente aceptable se entiende un material que no es biológicamente o de otro modo no deseable; el material puede administrarse a un individuo sin provocar ningún efecto biológico indeseable o interactuar de manera perjudicial con cualquiera de los componentes de la composición en la que está contenido.

Los "materiales portadores" o lo que también se denominan "excipientes" incluyen cualquier excipiente usado comúnmente en productos farmacéuticos y deben seleccionarse en base a la compatibilidad y las propiedades del perfil de liberación de la forma de dosificación deseada. Los materiales portadores ejemplares incluyen, por ejemplo, aglutinantes, agentes de suspensión, agentes de disgregación, agentes de relleno, surfactantes, solubilizantes, estabilizadores, lubricantes, agentes humectantes, diluyentes y similares. Los "materiales portadores farmacéuticamente compatibles" pueden comprender, por ejemplo, goma arábiga, gelatina, dióxido de silicio coloidal, glicerofosfato de calcio, lactato de calcio, maltodextrina, glicerina, silicato de magnesio, caseinato de sodio, lecitina de soja, cloruro de sodio, fosfato tricálcico, fosfato dipotásico, estearoil lactilato de sodio, carragenano, monoglicérido, diglicérido, almidón pregelatinizado y similares. Ver, por ejemplo, Hoover, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pa. 1975

El término "alifático" o "grupo alifático", como se usa en la presente, significa una cadena de hidrocarburos de cadena lineal (es decir, no ramificada) o ramificada, sustituida o no sustituida que está completamente saturada o que contiene una o más unidades de insaturación, o un hidrocarburo monocíclico o hidrocarburo bicíclico que está completamente saturado o que contiene una o más unidades de insaturación, pero que no es aromático (también denominado en la presente como "carbociclilo", "cicloalifático" o "cicloalquilo"), que tiene un único punto de unión al resto de la molécula. A menos que se especifique lo contrario, los grupos alifáticos contienen de 1-6 átomos de carbono alifáticos. En algunas realizaciones, los grupos alifáticos contienen de 1-5 átomos de carbono alifáticos. En algunas realizaciones, los grupos alifáticos contienen de 1-4 átomos de carbono alifáticos. En algunas realizaciones, los grupos alifáticos contienen de 1-3 átomos de carbono alifáticos, y en otras realizaciones más, los grupos alifáticos contienen de 1-2 átomos de carbono alifáticos.

El término "heteroátomo" significa uno o más de oxígeno, azufre, nitrógeno, fósforo o silicio (incluyendo, cualquier forma oxidada de nitrógeno, azufre, fósforo o silicio; la forma cuaternizada de cualquier nitrógeno básico o; un nitrógeno sustituible de un anillo heterocíclico, por ejemplo N (como en 3,4-dihidro-2H-pirrolilo), NH (como en pirrolidinilo) o NR+ (como en pirrolidinilo N-sustituido)).

El término "insaturado", como se usa en la presente, significa que una fracción tiene una o más unidades de insaturación.

También debe tenerse en cuenta que se supone que cualquier carbono, así como heteroátomo con valencias insatisfechas en el texto, esquemas, ejemplos y tablas de la presente, tiene el número suficiente de átomos de hidrógeno para satisfacer las valencias.

Como se usa en la presente, el término "composición" se pretende que abarque un producto que comprende los ingredientes especificados en las cantidades especificadas, así como cualquier producto que resulte, directa o indirectamente, de la combinación de los ingredientes especificados en las cantidades especificadas.

El término "deuterio", como se usa en la presente, significa un isótopo estable de hidrógeno que tiene números impares de protones y neutrones.

Como se usa en la presente, el término "parcialmente insaturado" se refiere a una fracción de anillo que incluye por lo menos un enlace doble o triple. Se pretende que el término "parcialmente insaturado" abarque anillos que tienen múltiples sitios de insaturación, pero no se pretende que incluya fracciones de arilo o heteroarilo, como se define en la presente.

Como se usa en la presente, el término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a aquellas sales que, dentro del alcance del buen juicio médico, son adecuadas para su uso en contacto con los tejidos de humanos y animales inferiores sin toxicidad, irritación, respuesta alérgica y similares indebidas, y están en consonancia con una proporción beneficio/riesgo razonable. Las sales farmacéuticamente aceptables son bien conocidas en la técnica. Por ejemplo, S.M. Berge et al., describen sales farmacéuticamente aceptables en detalle en J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19.

Los intervalos numéricos, como se usan en la presente, se pretende que incluyan números enteros secuenciales. Por ejemplo, un intervalo expresado como "de 0 a 4" incluiría 0, 1,2, 3 y 4.

Cabe señalar que, como se usa en la memoria descriptiva y las reivindicaciones adjuntas, las formas singulares "un", "uno" y "el" incluyen referentes plurales a menos que el contexto indique claramente lo contrario.

Cuando se usa como agente terapéutico, los inhibidores del FASN (FASN) descritos en la presente pueden administrarse con uno o más excipientes fisiológicamente aceptables. Un portador o excipiente fisiológicamente aceptable es una formulación a la que puede añadirse el compuesto para disolverlo o facilitar de otro modo su administración.

Las formas de dosificación de la presente invención pueden contener una mezcla de uno o más compuestos de esta invención y pueden incluir materiales adicionales conocidos por los expertos en la técnica como excipientes farmacéuticos. Pueden incorporarse aditivos estabilizantes en la solución del agente de administración. Con algunos fármacos, la presencia de tales aditivos promueve la estabilidad y dispersabilidad del agente en solución. Los aditivos estabilizantes pueden emplearse a una concentración que varía entre aproximadamente el 0,1 y el 5% (p/v), preferiblemente aproximadamente el 0,5% (p/v). Los ejemplos adecuados, pero no limitativos, de aditivos estabilizantes incluyen goma arábiga, gelatina, metilcelulosa, polietilenglicol, ácidos carboxílicos y sales de los mismos, y polilisina. Los aditivos estabilizantes preferidos son goma arábiga, gelatina y metilcelulosa.

Como excipientes pueden usarse agentes acidificantes (ácido acético, ácido acético glacial, ácido cítrico, ácido fumárico, ácido clorhídrico, ácido clorhídrico diluido, ácido málico, ácido nítrico, ácido fosfórico, ácido fosfórico diluido, ácido sulfúrico, ácido tartárico); propelentes de aerosoles (butano, diclorodifluorometano, diclorotetrafluoroetano, isobutano, propano, tricloromonofluorometano); desplazamientos de aire (dióxido de carbono, nitrógeno); desnaturalizantes de alcohol (benzoato de denatonio, metil isobutil cetona, octacetato de sacarosa); agentes alcalinizantes (solución de amoniaco fuerte, carbonato de amonio, dietanolamina, diisopropanolamina, hidróxido de potasio, bicarbonato de sodio, borato de sodio, carbonato de sodio, hidróxido de sodio, trolamina); agentes contra el apelmazamiento (ver deslizante); agentes antiespumantes (dimeticona, simeticona); conservantes antimicrobianos (cloruro de benzalconio, solución de cloruro de benzalconio, cloruro de benzeltonio, ácido benzoico, alcohol bencílico, butilparabeno, cloruro de cetilpiridinio, clorobutanol, clorocresol, cresol, ácido deshidroacético, etilparabeno, metilparabeno, metilparabeno sódico, fenol, alcohol feniletílico, acetato fenilmercúrico, nitrato propilfenilmercúrico, benzoato de potasio, sorbato de potasio, propilparabeno, propilparabeno sódico, benzoato de sodio, deshidroacetato de sodio, propionato de sodio, ácido sórbico, timerosal, timol); antioxidantes (ácido ascórbico, palmitato de acorbilo, hidroxianisol butilado, hidroxitolueno butilado, ácido hipofosforoso, monotioglicerol, galato de propilo, formaldehído sulfoxilato de sodio, metabisulfito de sodio, tiosulfato de sodio, dióxido de azufre, tocoferol, excipiente de tocoferoles); agentes tamponadores (ácido acético, carbonato de amonio, fosfato de amonio, ácido bórico, ácido cítrico, ácido láctico, ácido fosfórico, citrato de potasio, metafosfato de potasio, fosfato de potasio monobásico, acetato de sodio, citrato de sodio, solución de lactato de sodio, fosfato de sodio dibásico, fosfato de sodio monobásico); lubricantes en cápsulas (ver lubricantes en comprimidos y cápsulas); agentes quelantes (edetato disódico, ácido etilendiaminotetraacético y sales, ácido edético); agentes de recubrimiento (carboximetilcelulosa sódica, acetato de celulosa, ftalato de acetato de celulosa, etilcelulosa, gelatina, barniz farmacéutico, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa, copolímero de ácido metacrílico, metilcelulosa, polietilenglicol, ftalato de acetato polivinílico, goma laca, sacarosa, dióxido de titanio, cera de carnauba, cera microcristalina, zeína); colorantes (caramelo, rojo, amarillo, negro o mezclas, óxido férrico); agentes complejantes (ácido etilendiaminotetraacético y sales (EDTA), ácido edético, etanolmaida de ácido gentísico, sulfato de oxiquinolina); desecantes (cloruro de calcio, sulfato de calcio, dióxido de silicio); agentes emulsionantes y/o solubilizantes (goma arábiga, colesterol, dietanolamina (adyuvante), monoestearato de glicerilo, alcoholes de lanolina, lecitina, mono y diglicéridos, monoetanolamina (adyuvante), ácido oleico (adyuvante), alcohol oleico (estabilizante), poloxámero, estearato de polioxietileno 50, aceite de ricino de polioxil 35, aceite de ricino hidrogenado de polioxil 40, éter oleílico de polioxil 10, éter cetoestearílico de polioxil 20, estearato de polioxilo 4, polisorbato 20, polisorbato 40, polisorbato 60, polisorbato 80, diacetato de propilenglicol sodio, monoestearato de propilenglicol, lauril sulfato de sodio, estearato de sodio, monolaurato de sorbitán, monooleato de sorbitán, monopalmitato de sorbitán, monoestearato de sorbitán, ácido esteárico, trolamina, cera emulsionante); adyuvantes de filtración (celulosa en polvo, tierra silícea purificada); aromas y perfumes (anetol, benzaldehído, etil vainillina, mentol, salicilato de metilo, glutamato monosódico, aceite de flor de naranja, menta, aceite de menta, alcohol de menta, aceite de rosa, agua de rosas más fuerte, timol, tintura de bálsamo de tolú, vainilla, tintura de vainilla, vainillina); deslizantes y/o agentes antiaglutinantes (silicato de calcio, silicato de magnesio, dióxido de silicio coloidal, talco); humectantes (glicerina, hexilenglicol, propilenglicol, sorbitol); plastificantes (aceite de ricino, monoglicéridos diacetilados, ftalato de dietilo, glicerina, monoglicéridos mono y diacetilados, polietilenglicol, propilenglicol, triacetina, citrato de trietilo); polímeros (por ejemplo, acetato de celulosa, alquilcelulosas, hidroxialquilcelolosas, polímeros y copolímeros acrílicos); solventes (acetona, alcohol, alcohol diluido, hidrato de amileno, benzoato de bencilo, alcohol butílico, tetracloruro de carbono, cloroformo, aceite de maíz, aceite de semilla de algodón, acetato de etilo, glicerina, hexilenglicol, alcohol isopropílico, alcohol metílico, cloruro de metileno, metil isobutil cetona, aceite mineral, aceite de cacahuete, polietilenglicol, carbonato de propileno, propilenglicol, aceite de sésamo, agua para inyección, agua estéril para inyección, agua estéril para riego, agua purificada); sorbentes (celulosa en polvo, carbón vegetal, tierra silícea purificada); absorbentes de dióxido de carbono (cal de hidróxido de bario, cal sodada); agentes endurecedores (aceite de ricino hidrogenado, alcohol cetoestearílico, alcohol cetílico, cera de ésteres cetílicos, grasa dura, parafina, excipiente de polietileno, alcohol estearílico, cera emulsionante, cera blanca, cera amarilla); agentes de suspensión y/o que aumentan la viscosidad (goma arábiga, agar, ácido algínico, monoestearato de aluminio, bentonita, bentonita purificada, bentonita de magma, carbómero 934p, carboximetilcelulosa cálcica, carboximetilcelulosa sódica, carboximetilcelulosa sódica 12, carragenano, celulosa sódica microcristalina y carboximetilcelulosa, dextrina, gelatina, goma guar, hidroxietilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, silicato de magnesio y aluminio, metilcelulosa, pectina, óxido de polietileno, alcohol polivinílico, povidona, alginato de propilenglicol, dióxido de silicio, dióxido de silicio coloidal, alginato de sodio, tragacanto, goma xantana); agentes edulcorantes (aspartamo, dextratos, dextrosa, excipiente de dextrosa, fructosa, manitol, sacarina, sacarina cálcica, sacarina sódica, sorbitol, solución de sorbitol, sacarosa, azúcar comprimible, azúcar de repostería, almíbar); aglutinantes de comprimidos (goma arábiga, ácido algínico, carboximetilcelulosa sódica, celulosa microcristalina, dextrina, etilcelulosa, gelatina, glucosa líquida, goma guar, hidroxipropilmetilcelulosa, metilcelulosa, óxido de polietileno, povidona, almidón pregelatinizado, jarabe); diluyentes en comprimidos y/o cápsulas (carbonato de calcio, fosfato de calcio dibásico, fosfato de calcio tribásico, sulfato de calcio, celulosa microcristalina, celulosa en polvo, dextratos, dextrina, excipiente de dextrosa, fructosa, caolín, lactosa, manitol, sorbitol, almidón, almidón pregelatinizado, sacarosa., azúcar comprimible, azúcar de repostería); disgregantes de comprimidos (ácido algínico, celulosa microcristalina, croscarmelosa sódica, corspovidona, polacrilina potásica, glicolato sódico de almidón, almidón, almidón pregelatinizado); lubricantes para comprimidos y/o cápsulas (estearato de calcio, behenato de glicerilo, estearato de magnesio, aceite mineral ligero, polietilenglicol, estearilfumarato de sodio, ácido esteárico, ácido esteárico purificado, talco, aceite vegetal hidrogenado, estearato de zinc); agente de tonicidad (dextrosa, glicerina, manitol, cloruro de potasio, cloruro de sodio); cehículo: aromatizado y/o edulcorado (elixir aromático, elixir de benzaldehído compuesto, elixir isoalcohólico, agua de menta, solución de sorbitol, jarabe, jarabe de bálsamo de tolú); vehículo: oleaginoso (aceite de almendras, aceite de maíz, aceite de semilla de algodón, oleato de etilo, miristato de isopropilo, palmitato de isopropilo, aceite mineral, aceite mineral ligero, alcohol miristílico, octildodecanol, aceite de oliva, aceite de cacahuete, aceite pérsico, aceite de sesamo, aceite de soja, escualano); vehículo: portador sólido (esferas de azúcar); vehículo: estéril (agua bacteriostática para inyección, inyección de cloruro de sodio bacteriostático); aumento de viscosidad (ver agente de suspensión); agente repelente al agua (ciclometicona, dimeticona, simeticona); y agente humectante y/o solubilizante (cloruro de benzalconio, cloruro de bencetonio, cloruro de cetilpiridinio, docusato sódico, nonoxinol 9, nonoxinol 10, octoxinol 9, poloxámero, aceite de ricino de polioxil 35, polioxilo 40, aceite de ricino hidrogenado, estearato de polioxil 50, éter oleico de polioxil 10, polioxil 20, éter cetoestearílico, estearato de polioxil 40, polisorbato 20, polisorbato 40, polisorbato 60, polisorbato 80, lauril sulfato de sodio, monolaureato de sorbitán, monooleato de sorbitán, monopalmitato de sorbitán, monoestearato de sorbitán, tiloxapol). No se pretende que esta lista sea exclusiva, sino meramente representativa de las clases de excipientes y los excipientes particulares que pueden usarse en formas de dosificación de la presente invención.

Los compuestos pueden formar sales que también están dentro del alcance de esta invención. Se entiende que la referencia a un compuesto de las fórmulas de la presente incluye la referencia a las sales del mismo, a menos que se indique lo contrario. El término "sal o sales", como se emplea en la presente, indica sales ácidas formadas con ácidos inorgánicos y/u orgánicos, así como sales básicas formadas con bases inorgánicas y/u orgánicas. Además, cuando un compuesto de las fórmulas contiene tanto una fracción básica, como, pero no limitado a, una piridina o imidazol, y una fracción ácida, como pero no limitado a, un ácido carboxílico, pueden formarse zwitteriones ("sales internas") y se incluyen dentro del término "sal o sales" como se usa en la presente. Se prefieren las sales farmacéuticamente aceptables (es decir, no tóxicas, fisiológicamente aceptables), aunque también son útiles otras sales. Las sales de los compuestos de una fórmula pueden formarse, por ejemplo, haciendo reaccionar un compuesto de una fórmula con una cantidad de ácido o base, como una cantidad equivalente, en un medio como uno en el que la sal precipita o en un medio acuoso seguido de liofilización.

Las sales de adición de ácido ejemplares incluyen acetatos, ascorbatos, benzoatos, bencenosulfonatos, bisulfatos, boratos, butiratos, citratos, alcanforatos, canforsulfonatos, fumaratos, clorhidratos, bromhidratos, hidroyoduros, lactatos, maleatos, metansulfonatos, naftalensulfonatos, nitratos, oxalatos, fosfatos, propionatos, salicilatos, sulfatos, tartaratos, tiocianatos y toluenosulfonatos (también conocidos como tosilatos). Además, los ácidos que se consideran generalmente adecuados para la formación de sales farmacéuticamente útiles a partir de compuestos farmacéuticos básicos se describen, por ejemplo, en P. Stahl et al., Camille G. (eds.) Handbook of Pharmaceutical Salts. Properties, Selection and Use. (2002) Zúrich: Wiley-VCH; S. Berge et al., Journal of Pharmaceutical Sciences (1977) 66(1) 1-19; P. Gould, International J. of Pharmaceutics (1986) 33 201-217; Anderson et al., The Practice of Medicinal Chemistry (1996), Academic Press, Nueva York; y en The Orange Book (Food & Drug Administration, Washington, D.C. en su página web).

Las sales básicas ejemplares incluyen sales de amonio, sales de metales alcalinos como sales de sodio, litio y potasio, sales de metales alcalinotérreos como sales de calcio y magnesio, sales con bases orgánicas (por ejemplo, aminas orgánicas) como diciclohexilaminas, t-butilaminas, y sales con aminoácidos como arginina y lisina. Los grupos que contienen nitrógeno básico pueden cuaternizarse con agentes como haluros de alquilo inferior (por ejemplo, cloruros, bromuros y yoduros de metilo, etilo y butilo), sulfatos de dialquilo (por ejemplo, sulfatos de dimetilo, dietilo y dibutilo), haluros de cadena larga (por ejemplo, cloruros, bromuros y yoduros de decilo, laurilo y estearilo), haluros de aralquilo (por ejemplo, bromuros de bencilo y fenetilo) y otros.

Se pretende que todas estas sales ácidas y sales básicas sean sales farmacéuticamente aceptables dentro del alcance de la invención y todas las sales ácidas y básicas se consideran equivalentes a las formas libres de los compuestos correspondientes para los propósitos de la invención.

Los compuestos, y sales, solvatos, ésteres y profármacos de los mismos, pueden existir en su forma tautomérica (por ejemplo, como amida o iminoéter). Todas estas formas tautoméricas se contemplan en la presente como parte de la presente divulgación.

A menos que se indique lo contrario, también se pretende que las estructuras representadas en la presente incluyan todas las formas isoméricas (por ejemplo, enantioméricas, diastereoméricas y geométricas (o conformacionales)) de la estructura; por ejemplo, las configuraciones R y S para cada centro asimétrico, isómeros de doble enlace Z y E, e isómeros conformacionales Z y E. Por lo tanto, los isómeros estereoquímicos individuales así como las mezclas enantioméricas, diastereoméricas y geométricas (o conformacionales) de los presentes compuestos están dentro del alcance de la invención. A menos que se indique lo contrario, todas las formas tautoméricas de los compuestos de la invención están dentro del alcance de la invención. Además, a menos que se indique lo contrario, también se pretende que las estructuras representadas en la presente incluyan compuestos que difieren solo en la presencia de uno o más átomos enriquecidos isotópicamente. Por ejemplo, los compuestos que tienen las presentes estructuras incluyendo el reemplazo de hidrógeno por deuterio o tritio, o el reemplazo de un carbono por carbono enriquecido con 13C o 14C están dentro del alcance de esta invención. Tales compuestos son útiles, por ejemplo, como herramientas analíticas, como sondas en ensayos biológicos o como agentes terapéuticos de acuerdo con la presente invención.

El símbolo excepto cuando se usa como enlace para representar una estereoquímica mixta o desconocida, indica el punto de unión de una fracción química al resto de una molécula o fórmula química.

Descripción detallada de ciertas realizaciones

La presente divulgación se refiere, entre otros, a métodos para tratar, prevenir o mejorar una enfermedad o trastorno mediado por T^h17 o CSF1 mediante la administración a un paciente con necesidad de ello de una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de FASN, o una sal farmacéuticamente aceptable, hidrato, solvato, profármaco, estereoisómero o tautómero del mismo. En algunos aspectos, los métodos de la presente divulgación pueden usarse en el tratamiento de una variedad de enfermedades y trastornos dependientes de T^h17 o CSF1. La inhibición de FASN para el tratamiento de enfermedades o trastornos mediados por T^h17 o CSF1 proporciona un enfoque novedoso para el tratamiento, prevención o mejora de enfermedades que incluyen, pero no se limitan a, cáncer, trastornos inmunológicos y obesidad.

En algunos aspectos, la presente divulgación proporciona métodos para inhibir la secreción de IL-17, que comprenden poner en contacto células capaces de secretar IL-17 con un inhibidor de FASN. Aunque no se desea estar limitado por ninguna teoría en particular, la presente divulgación abarca el reconocimiento de que los inhibidores de FASN pueden actuar sobre la producción de IL-17 a través del bloqueo de la diferenciación de T^h17. La presente divulgación también abarca el reconocimiento de que los inhibidores de FASN que actúan para bloquear la diferenciación de T^h17 y/o la secreción de IL-17 son particularmente útiles en el tratamiento de enfermedades, trastornos o afecciones asociadas con tales vías, por ejemplo, NASH.

La presente divulgación también abarca el reconocimiento de que la inhibición de FASN es útil para reducir la tasa de lipogénesis de novo (DNL), que, sin desear estar limitados por ninguna teoría en particular, afecta a la acumulación de lípidos en el hígado provocando daño celular, inflamación y fibrosis asociados con NASH. En ciertos aspectos, la presente divulgación proporciona un método para tratar una afección o enfermedad asociada con la reducción de la tasa de DNL. En ciertos aspectos, el método comprende administrar a un paciente con necesidad de un tratamiento para una afección o enfermedad asociada con la reducción de la tasa de DNL, una cantidad eficaz de un inhibidor de FASN.

En algunos aspectos, la presente divulgación proporciona métodos para tratar afecciones y enfermedades asociadas con IL-17 que comprenden administrar a un paciente con necesidad de ello un inhibidor de FASN. En algunos aspectos, los inhibidores de FASN útiles en tales métodos son aquellos que, cuando se incuban con células T CD4+ activadas, cultivadas en condiciones de polarización de T^h17, inhiben la producción de IL-17 en presencia de citoquinas.

En un aspecto, la divulgación se refiere a un método para tratar una afección o enfermedad asociada con la inflamación mediada por T^h17. En algunos aspectos, el método comprende administrar a un paciente con necesidad de un tratamiento para una afección o enfermedad asociada con la inflamación mediada por T^h17 una cantidad eficaz de un inhibidor de FASN.

Otro aspecto de la presente divulgación se refiere a un método para tratar una afección o enfermedad asociada con la activación del receptor de IL-17. En algunos aspectos, el método comprende administrar a un paciente con necesidad de un tratamiento para una afección o enfermedad asociada con la activación del receptor de IL-17 una cantidad eficaz de un inhibidor de FASN.

Otro aspecto de la presente divulgación se refiere a un método para tratar una afección o enfermedad asociada con la diferenciación de T^h17. En algunos aspectos, el método comprende administrar a un paciente con necesidad de un tratamiento para una afección o enfermedad asociada con la activación del receptor de IL-17 una cantidad eficaz de un inhibidor de FASN.

En algunos aspectos, la secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 1%. En algunos aspectos, la secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 5%. En algunos aspectos, la secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 10%. En algunos aspectos, la secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 25%. En algunos aspectos, la secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 30%. En algunos aspectos, la secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 35%. En algunos aspectos, la secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 40%. En algunos aspectos, la secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 45%. En algunos aspectos, la secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 50%. En algunos aspectos, la secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 55%. En algunos aspectos, la secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 60%. En algunos aspectos, la secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 65%. En algunos aspectos, La secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 70%. En algunos aspectos, la secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 75%. En algunos aspectos, la secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 80%. En algunos aspectos, la secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 85%. En algunos aspectos, la secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 90%. En algunos aspectos, la secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 95%. En algunos aspectos, la secreción de IL-17 se inhibe en por lo menos un 99%.

En algunos aspectos, los inhibidores de FASN son los divulgados en laWO 2014/164749.

Los compuestos divulgados en la presente pueden prepararse de una manera similar a los procedimientos descritos en la ^uS 2016/0002188.

En algunos aspectos de la divulgación, los inhibidores de FASN útiles en los métodos proporcionados se seleccionan del grupo que consiste de

Compuesto 7 Compuesto 8

o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. De acuerdo con la invención, el inhibidor de FASN es el compuesto 4.

En algunos aspectos de la divulgación, el Compuesto A se selecciona de uno de los Compuestos 1-14 mostrados anteriormente.

En otros aspectos, los inhibidores de FASN incluyen, pero no se limitan a, TVB-2640; GSK2194069; GSK1995010; GSK837149A; JNJ54302833; B100179; IPI-9119; Orlistat; Cerulenina y C75 (ácido 4-metilen-2-octil-5-oxotetrahidrofuran-3-carboxílico); así como los inhibidores de FASN divulgados en la WO 2014/146747.

En algunos aspectos de la divulgación, los inhibidores de FASN son los divulgados en la WO 2014/164749. En algunos aspectos, las afecciones y enfermedades asociadas con IL-17 son afecciones y enfermedades asociadas con la inflamación mediada por T^h17.

En algunos aspectos, las afecciones y enfermedades asociadas con IL-17 son afecciones y enfermedades asociadas con la activación del receptor de IL-17.

En algunos aspectos, una enfermedad tratada mediante los métodos proporcionados es cáncer. En algunos aspectos, el cáncer se selecciona del grupo que consiste de cánceres de próstata, ovario, páncreas, esófago, tiroides, vejiga, hueso, conducto biliar, testículo, útero, cabeza, cuello, glándula salival, cuello uterino, colon, mama, pulmón, estómago, cáncer hematológico, como pero no limitado a, leucemia, linfoma y mieloma múltiple; carcinomas de la línea media, tumores mesenquimales, hepáticos, renales y neurológicos; y melanoma, carcinoma de células escamosas y linfoma cutáneo de células T; y cáncer de pulmón de células pequeñas y no pequeñas, cáncer de próstata resistente a la castración, glioblastoma, astrocitoma, mebulloblastoma, neuroblastoma, neurofibromatosis, carcinoma de células de Merkel, sarcoma de tejido blando, osteosarcoma, sarcoma de Ewing y colangiocarcinoma.

Usos para el tratamiento de NASH

La NASH es una enfermedad hepática crónica con grados variables de inflamación y fibrosis que puede progresar a cirrosis y complicaciones hepáticas en etapa terminal. La enfermedad afecta a más de 16 millones de personas en los Estados Unidos y es la segunda causa principal de trasplantes de hígado en los Estados Unidos. Además, la NASH es un fuerte predictor para la diabetes tipo 2, enfermedad cardiovascular y enfermedad renal en etapa terminal. Actualmente no hay agentes farmacológicos aprobados para el tratamiento de la NASH, lo que representa una carga sanitaria sustancial. La patogenia de la NASH se ha asociado con obesidad o síndrome metabólico aberrante. Las estrategias que se dirigen a los tres procesos patológicos (esteatosis, inflamación y fibrosis) pueden controlar de manera más eficaz esta enfermedad.

La FASN es una enzima importante que cataliza el paso final de DNL utilizando malonil-CoA como sustrato para sintetizar palmitato. La ablación específica del hígado del gen que codifica FASN en ratones (ratones FASNLKO) da como resultado aumentos de malonil-CoA y disminuciones de palmitato en el hígado. Además, en ratones obesos con deficiencia de leptina (ratones ob/ob), tanto la expresión del gen de FASN hepático como la actividad de FASN hepática aumentan en comparación con los controles de ratones delgados. Se producen reducciones adicionales de la acumulación de lípidos hepáticos y de la DNL hepática tras la inhibición específica del hígado de la proteína de unión al elemento de respuesta a carbohidratos del factor de transcripción lipogénico (ChREBP) en ratones ob/ob. Sorprendentemente, los ratones FASNLKO muestran un contenido normal de triglicéridos en el hígado, lo que sugiere que la DNL puede ser prescindible en un hígado sano y que la inhibición de FASN puede no afectar negativamente a la función hepática no enferma.

La FASN controla el último paso de la DNL, y su nivel de expresión génica está aberrantemente elevado en pacientes con NASH en comparación con voluntarios sanos. La DNL incontrolada es un factor clave para la esteatosis hepática. La activación crónica del DNL hepática y el aumento del tráfico de ácidos grasos libres dentro de los hepatocitos pueden llevar a la generación de metabolitos lipídicos tóxicos. Estos metabolitos lipotóxicos actúan como especies reactivas de oxígeno (ROS), desencadenando estrés en el retículo endoplásmico (ER), apoptosis y necrosis en las células residentes del hígado, hepatocitos, células de Kupffer y células estrelladas hepáticas (HSC). Por lo tanto, la actividad elevada de FASN puede ser un contribuyente importante para la NASH a través de la lesión tisular mediada por lipotoxicidad y la muerte celular.

Además del papel de FASN en la esteatosis y la lipotoxicidad, puede contribuir a la inflamación y los procesos de fibrosis. El palmitato, el producto final de la vía de síntesis de ácidos grasos, regula por incremento la producción de TLR4, citoquinas proinflamatorias y factor de necrosis tumoral-a (TNF-a) en hepatocitos primarios y células de Kupffer. Por lo tanto, la DNL genera los ácidos grasos necesarios para la diferenciación y función de las células TH17. Los niveles elevados de células TH17 en el hígado humano están asociados con la progresión del hígado graso no alcohólico (NAFL) a NASH. La IL-17 también promueve la fibrosis hepática en un modelo de ratón de enfermedad hepática (modelo de lesión hepática inducida por tetracloruro de carbono (CC14)) a través de la activación de las células estrelladas hepáticas y la posterior producción de colágeno. La estimulación de la activación de HSC se produce tanto por la elevación de IL-17 como por palmitato en ratones.

La importancia de la vía DNL en NASH está validada por inhibidores de otras enzimas en la vía, como acetil-CoA carboxilasa 1/2 (ACC). ACC1 es una enzima directamente en sentido ascendente de FASN que cataliza la producción de malonil-CoA a partir de acetil-CoA. Los inhibidores de moléculas pequeñas de ACC1/2, como NDI-010976 (Nimbus Therapeutics/Gilead), redujeron la esteatosis y la fibrosis en modelos de NASH preclínicos, aunque pueden conllevar un riesgo mecanicista de p-oxidación no deseada de ácidos grasos.

Sin desear estar limitados por ninguna teoría particular, se cree que dirigirse a FASN representa un enfoque multimodal potencialmente poderoso para tratar la NASH, reduciendo la esteatosis, y la inflamación y fibrosis dependientes de TH17.

En ciertos aspectos, la presente divulgación proporciona un método para tratar una enfermedad, trastorno o afección seleccionada de una enfermedad fibrótica o fibrosis, una enfermedad, trastorno o afección inflamatoria, o una enfermedad, trastorno o afección autoinmune, que comprende administrar a un paciente con necesidad del mismo un inhibidor de FASN.

En ciertos aspectos, la presente divulgación proporciona un método para tratar NASH que comprende administrar a un paciente con necesidad del mismo un inhibidor de FASN.

En algunos aspectos, los métodos divulgados en la presente comprenden además un paso de medir uno o más biomarcadores con el propósitos de seleccionar un paciente para la terapia, monitorizar la terapia del paciente y/o ajustar o finalizar la terapia del paciente. En algunas realizaciones, un biomarcador es un lípido marcado con 13C. En algunos aspectos, un biomarcador es palmitato de 13C. En algunos aspectos, un método proporcionado comprende además el paso de administrar a un paciente acetato de 13C (por ejemplo, acetato de sodio de 13C) antes o simultáneamente con la administración de un inhibidor de FASN.

En algunas realizaciones, los pacientes pueden seleccionarse para los tratamientos descritos en la presente basándose en una o más características. En algunas realizaciones, un paciente seleccionado para el tratamiento (por ejemplo, para el tratamiento de NASH) tiene una o más de las características siguientes:

i) sobrepeso (por ejemplo, IMC > 25 kg/m 2,

ii) hombre,

iii) un nivel de colesterol total de 400 mg/dl o menos,

iv) un nivel de triglicéridos de 500 mg/dl o menos,

v) sin antecedentes de sensibilidad cutánea u ocular,

vi) sin evidencia de insuficiencia hepática o renal clínicamente significativa,

vii) sin antecedentes de reacción alérgica grave (incluyendo anafilaxia) a cualquier sustancia, o estado asmático previo,

viii) sin antecedentes de psoriasis o dermatitis que requieran corticosteroides orales o tópicos en los últimos 12 meses,

ix) sin antecedentes de síndrome de Sjogren o antecedentes de sequedad ocular o conjuntivitis alérgica, que requieran lágrimas artificiales o gotas para los ojos medicadas en los últimos 12 meses,

x) no ha usado medicamentos de venta libre en los siete días anteriores a la primera administración y medicamentos recetados y productos naturales para la salud (excepto suplementos de vitaminas o minerales y reemplazo hormonal) en el plazo de 14 días antes de la primera administración,

xi) sin antecedentes de intolerancia o malabsorción de fructosa,

xii) no es positivo para hepatitis B, hepatitis C o virus de inmunodeficiencia humana.

En algunas realizaciones, un paciente seleccionado para tratamiento (por ejemplo, para NASH) tiene, o durante el tratamiento, se somete a una dieta eucalórica o una dieta alta en fructosa.

Usos adicionales

En algunos aspectos, la presente divulgación proporciona un método para tratar una enfermedad, trastorno o afección asociada con la inflamación mediada por T^h17, el método comprendiendo administrar a un paciente con necesidad de ello un inhibidor de FASN.

En algunos aspectos, la presente divulgación proporciona un método para tratar una enfermedad, trastorno o afección asociada con la activación del receptor de IL-17, el método comprendiendo administrar a un paciente con necesidad de ello un inhibidor de FASN.

De acuerdo con la invención, la enfermedad es NASH.

En algunos aspectos de la divulgación, la afección o enfermedad es obesidad (Berndt, et al., Diabetologia, 2007, 50: 1472-1480; Lodhi, et al., Cell Metabolism, 2012, 16, 189-201.). En otras realizaciones, la afección o enfermedad es diabetes de tipo II.

En algunos aspectos, la enfermedad se selecciona del grupo que consiste de enfermedad inflamatoria intestinal y enfermedad pulmonar obstructiva crónica.

En algunos aspectos, la enfermedad se selecciona del grupo que consiste de dermatitis alérgica de contacto; y miositis autoinmune.

En otro aspecto, la enfermedad se selecciona del grupo que consiste de inflamación sistémica o tisular, respuestas inflamatorias a infección o hipoxia, activación y proliferación celular, metabolismo de lípidos, fibrosis y en la prevención y tratamiento de infecciones víricas.

En otro aspecto, la enfermedad se selecciona del grupo que consiste de afecciones crónicas e inflamatorias, que incluyen pero no se limitan a, artritis reumatoide, osteoartritis, periodontitis, gota aguda, psoriasis, artritis psoriásica, espondilitis anquilosante, nefropatía asociada al VIH, esclerosis lateral amiotrófica, hipertensión arterial pulmonar, rechazo agudo de aloinjerto, rechazo crónico de trasplante de órganos, lupus eritematoso sistémico, nefritis lúpica, esclerosis múltiple, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, enfermedad celíaca/celiaquía grave, asma, enfermedad obstructiva crónica de las vías respiratorias, neumonitis, miocarditis, pericarditis, miositis, eccema, dermatitis, alopecia, vitiligo, enfermedad cutánea ampollosa, nefrititis, vasculitis, aterosclerosis, enfermedad de Alzheimer, depresión, síndrome de Sjogren, siloadenitis, oclusión de la vena central de la retina, oclusión de la vena retiniana ramificada, síndrome de Irvine-Gass, telangiectasia parafoveal, retinitis pigmentosa, pars planitis, retinocoroidopatía en forma de ave, membrana epirretiniana, edema macular quístico, maculopatías, síndromes de tracción vitreomacular, desprendimiento de retina, neurorretinitis, edema macular idiopático, retinitis, ojo seco, queratoconjuntivitis vernal, queratoconjuntivitis atópica, uveítis anterior, pan uveítis, uveítis posterior, edema macular asociado a uveítis, escleritis, retinopatía diabética, edema macular diabético, distrofia macular relacionada con la edad, hepatitis, pancreatitis, cirrosis biliar primaria, colangitis esclerosante, enfermedad de Addison, hipofisitis, tiroiditis, diabetes tipo I y rechazo agudo de organismos trasplantados.

En otro aspecto de la divulgación, la enfermedad se selecciona del grupo que consiste de afecciones inflamatorias agudas como gota aguda, arteritis de células gigantes, nefritis incluyendo nefritis lúpica, vasculitis con afectación de órganos como glomerulonefritis, vasculitis incluyendo arteritis de células gigantes, granulomatosis de Wegner, poliarteritis nodosa, enfermedad de Becet, enfermedad de Kawasaki, arteritis de Takayasu, pioderma gangrenoso, vasculitis con afectación de órganos y rechazo agudo de órganos trasplantados.

En otro aspecto, la enfermedad se selecciona del grupo que consiste de respuestas inflamatorias a infecciones con bacterias, virus, hongos, parásitos o sus toxinas, como pero no limitado a, sepsis, síndrome de sepsis, choque séptico, endotoxemia, síndrome de respuesta inflamatoria sistémica, síndrome de disfunción multiorgánica, síndrome de choque tóxico, lesión pulmonar aguda, síndrome de dificultad respiratoria aguda, insuficiencia renal aguda, hepatitis fulminante, quemaduras, pancreatitis aguda, síndromes posquirúrgicos, sarcoidosis, reacciones de Herxheimer, encefalitis, mielitis, meningitis, malaria, respuestas inflamatorias sistémicas asociadas con infecciones virales, como pero no limitado a, gripe, herpes zoster, herpes simplex y coronavirus.

Otro aspecto de la presente divulgación se refiere a un método para tratar una enfermedad asociada con el síndrome de respuesta inflamatoria sistémica, como, pero no limitado a, sepsis, quemaduras, pancreatitis, traumatismo mayor, hemorragia e isquemia, el método comprendiendo administrar un inhibidor de FASN.

También se proporcionan métodos para tratar a un paciente de trasplante de órganos para reducir el rechazo de órganos, el método comprendiendo administrar a un paciente con necesidad de ello un inhibidor de FASN.

Otro aspecto de la presente divulgación se refiere a un método de tratamiento de un paciente de trasplante de órganos para reducir el rechazo de órganos. El método comprende administrar a un paciente con necesidad de ello un tratamiento para reducir el rechazo de órganos una cantidad eficaz de un inhibidor de FASN.

Otro aspecto de la presente divulgación se refiere a un método para tratar una afección o enfermedad asociada con la diferenciación de macrófagos dependiente de CSF-1. El método comprende administrar a un paciente con necesidad de ello un tratamiento para una afección o una enfermedad asociada con la diferenciación de macrófagos dependiente de CSF-1 una cantidad eficaz de un inhibidor de FASN.

En algunos aspectos, las afecciones y enfermedades se seleccionan del grupo que consiste de osteoartritis y dolor.

En algunos aspectos, la afección o enfermedad es un melanoma maligno.

En algunos aspectos, la afección o enfermedad es una enfermedad inflamatoria.

En algunos aspectos, la afección o enfermedad es una enfermedad inflamatoria intestinal. En un aspecto, la enfermedad inflamatoria intestinal es la enfermedad de Crohn. En otro aspecto, la enfermedad inflamatoria intestinal es la colitis ulcerosa. En otro aspecto, la enfermedad inflamatoria es la artritis reumatoide.

En otro aspecto de la divulgación, un inhibidor de FASN se selecciona de los compuestos que mostrados en la Tabla A, que enumera los nombres de la IUPAC y las estructuras de los compuestos. El tercer compuesto en la p. 188 se corresponde al compuesto 4, que es el compuesto reivindicado. Los otros compuestos son por referencia.

Composiciones farmacéuticas

En otro aspecto, la presente divulgación comprende tratar afecciones y enfermedades que pueden estar asociadas a IL-17 o T^h17, o como se describe de otro modo en la presente, que comprende administrar una composición farmacéutica que comprende un compuesto proporcionado opcionalmente en combinación con un excipiente farmacéuticamente aceptable (por ejemplo, portador).

Las composiciones farmacéuticas adecuadas incluyen isómeros ópticos, diastereómeros o sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos divulgados en la presente. Por ejemplo, en algunas realizaciones, las composiciones farmacéuticas incluyen una sal farmacéuticamente aceptable. Un compuesto incluido en la composición farmacéutica puede unirse covalentemente a un portador farmacéuticamente aceptable.

El compuesto de la invención incluido en la composición farmacéutica no está enlazado covalentemente a un portador farmacéuticamente aceptable.

Un "portador farmacéuticamente aceptable", como se usa en la presente, se refiere a excipientes farmacéuticos, por ejemplo, sustancias transportadoras orgánicas o inorgánicas farmacéuticamente, fisiológicamente aceptables adecuadas para aplicación enteral o parenteral que no reaccionan de manera perjudicial con los compuestos usados de acuerdo con los métodos proporcionados. Los portadores farmacéuticamente aceptables adecuados incluyen agua, soluciones salinas (como solución de Ringer), alcoholes, aceites, gelatinas y carbohidratos como lactosa, amilosa o almidón, ésteres de ácidos grasos, hidroximetilcelulosa y polivinilpirrolidina. Tales preparaciones pueden esterilizarse y, si se desea, mezclarlas con agentes auxiliares como lubricantes, conservantes, estabilizadores, agentes humectantes, emulsionantes, sales para influir en la presión osmótica, tampones, colorantes, y/o sustancias aromáticas que no reaccionan perjudicialmente con los compuestos usados de acuerdo con los métodos proporcionados.

Los compuestos pueden administrarse solos o pueden coadministrarse a un paciente junto con uno o más de otros fármacos. Se pretende que la coadministración incluya la administración simultánea o secuencial de los compuestos individualmente o en combinación (más de un compuesto). En algunas realizaciones, las preparaciones se combinan con otras sustancias activas (por ejemplo, para reducir la degradación metabólica).

Formulaciones

En otro aspecto, la presente divulgación comprende el tratamiento de afecciones y enfermedades que pueden estar asociadas a IL-17 o T^h17, o como se describe de otro modo en la presente, que comprende la administración de una formulación de un compuesto o composición descritos en la presente. Pueden prepararse y administrarse formulaciones adecuadas en una amplia variedad de formas de dosificación oral, parenteral y tópica. En algunos aspectos, los compuestos proporcionados se administran mediante inyección (por ejemplo, por vía intravenosa, intramuscular, intracutánea, subcutánea, intraduodenal o intraperitoneal). En algunas realizaciones, los compuestos descritos en la presente se administran por inhalación, por ejemplo, intranasalmente. En algunas realizaciones, los compuestos proporcionados se administran por vía transdérmica. También se prevé que se puedan usar múltiples vías de administración (por ejemplo, intramuscular, oral, transdérmica) para administrar los compuestos de la invención. La presente invención también proporciona composiciones farmacéuticas que comprende uno o más compuestos proporcionados y uno o más portadores o excipientes farmacéuticamente aceptables.

Los portadores farmacéuticamente aceptables pueden ser o sólidos o líquidos. Las preparaciones en forma sólida incluyen polvos, comprimidos, píldoras, cápsulas, obleas, supositorios y gránulos dispersables. En algunas realizaciones, un portador sólido es una o más sustancias, que también pueden actuar como diluyentes, agentes aromatizantes, aglutinantes, conservantes, agentes disgregadores de comprimidos o un material encapsulante.

En algunas realizaciones, cuando una composición es un polvo, un portador es un sólido finamente dividido en una mezcla con el componente activo finamente dividido. En algunas realizaciones, cuando se formula una composición para un comprimido, se mezcla un componente activo con el portador que tiene las propiedades aglutinantes necesarias en proporciones adecuadas y se compacta en la forma y tamaño deseados.

En algunas realizaciones, los polvos y comprimidos contienen del 5% al 70% del compuesto activo. Los portadores adecuados incluyen carbonato de magnesio, estearato de magnesio, talco, azúcar, lactosa, pectina, dextrina, almidón, gelatina, tragacanto, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, una cera de bajo punto de fusión, y manteca de cacao. En algunas realizaciones, la composición se formula para una oblea o gragea. En algunas realizaciones, se usan comprimidos, polvos, cápsulas, píldoras, obleas y/o grageas como formas de dosificación sólidas adecuadas para la administración oral.

En algunas realizaciones, para preparar supositorios, primero se funde una cera de bajo punto de fusión, como una mezcla de glicéridos de ácidos grasos o manteca de cacao, y el componente activo se dispersa homogéneamente en la misma. La mezcla homogénea fundida se vierte luego en moldes de tamaño conveniente, se deja enfriar y solidificar.

Las preparaciones en forma líquida incluyen soluciones, suspensiones y emulsiones, por ejemplo, soluciones de agua o de agua/propilenglicol. En algunas realizaciones, para inyección parenteral, las preparaciones líquidas pueden formularse en solución en una solución acuosa de polietilenglicol.

Cuando se necesita o se desea una aplicación parenteral, las mezclas particularmente adecuadas para los compuestos de la invención son soluciones estériles inyectables, preferiblemente soluciones aceitosas o acuosas, así como suspensiones, emulsiones o implantes, incluyendo supositorios. En particular, los portadores para administración parenteral incluyen soluciones acuosas de dextrosa, solución salina, agua pura, etanol, glicerol, propilenglicol, aceite de cacahuete, aceite de sésamo, o polímeros de bloque de polioxietileno. Las ampollas son dosificaciones unitarias convenientes. Los compuestos útiles en los métodos proporcionados también pueden incorporarse en liposomas o administrarse mediante bombas transdérmicas o parches. Las mezclas farmacéuticas adecuadas para su uso en la presente invención incluyen las descritas, por ejemplo, en Pharmaceutical Sciences (17a Ed., Mack Pub. Co., Easton, PA) y la WO 96/05309.

Pueden prepararse soluciones acuosas adecuadas para uso oral disolviendo el componente activo en agua y añadiendo colorantes, aromatizantes, estabilizadores y agentes espesantes adecuados según se desee. Pueden elaborarse suspensiones acuosas adecuadas para uso oral dispersando el componente activo finamente dividido en agua con material viscoso, como gomas naturales o sintéticas, resinas, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio y otros agentes de suspensión bien conocidos.

También se incluyen preparaciones en forma sólida destinadas a la conversión poco antes de su uso en preparaciones en forma líquida para administración oral. Tales formas líquidas incluyen soluciones, suspensiones y emulsiones. Estas preparaciones pueden contener, además del componente activo, colorantes, aromatizantes, estabilizantes, tampones, edulcorantes artificiales y naturales, dispersantes, espesantes, o agentes solubilizantes.

En algunas realizaciones, las composiciones farmacéuticas están en forma de dosificación unitaria. En tal forma, la composición se subdivide en dosis unitarias que contienen cantidades apropiadas del componente activo. La forma de dosificación unitaria puede ser una preparación envasada, el envase conteniendo cantidades discretas de una composición farmacéutica, como comprimidos, cápsulas y polvos envasados en viales o ampollas. En algunas realizaciones, la forma de dosificación unitaria es una cápsula, comprimido, oblea o gragea en sí misma, o es el número apropiado de cualquiera de estos en forma envasada.

La cantidad de componente activo en una forma de dosificación unitaria puede variarse o ajustarse de 0,1 mg a 10000 mg, más típicamente de 1,0 mg a 1000 mg, lo más típico de 10 mg a 500 mg, de acuerdo con la aplicación particular y la potencia del componente activo.. En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas contienen otros agentes terapéuticos compatibles.

Algunos compuestos pueden tener una solubilidad limitada en agua y pueden requerir un surfactante u otro cosolvente apropiado en la composición. Tales cosolventes incluyen: polisorbato 20, 60 y 80, Pluronic F-⁶⁸, F-84 y P-103, ciclodextrina y aceite de ricino polioxil 35. Tales cosolventes se emplean típicamente a un nivel entre aproximadamente el ⁰,⁰¹% y aproximadamente el ²% en peso.

En algunas realizaciones, puede ser deseable una viscosidad mayor que la de las soluciones acuosas simples para disminuir la variabilidad en la dispensación de las formulaciones, disminuir la separación física de los componentes de una suspensión o emulsión de la formulación y/o de otra manera mejorar la formulación. Tales agentes que aumentan la viscosidad incluyen, por ejemplo, alcohol polivinílico, polivinilpirrolidona, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, hidroxietilcelulosa, carboximetilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, sulfato de condroitina y sales de los mismos, ácido hialurónico y sales del mismo, y combinaciones de los anteriores. Tales agentes se emplean típicamente a un nivel entre aproximadamente el ⁰,⁰¹% y aproximadamente el ²% en peso.

Las composiciones usadas en los métodos proporcionados pueden incluir adicionalmente componentes para proporcionar una liberación sostenida y/o comodidad. Tales componentes incluyen polímeros mucomiméticos aniónicos de alto peso molecular, polisacáridos gelificantes y sustratos portadores de fármacos finamente divididos. Estos componentes se analizan con mayor detalle en las Patentes de Estados Unidos N° 4.911.920; 5.403.841; 5.212.162; y 4.861.760.

Combinaciones

En algunas realizaciones, un método proporcionado comprende además la administración de un agente terapéutico adicional. En algunos aspectos, la presente divulgación comprende el tratamiento de afecciones y enfermedades que pueden estar asociadas a IL-17 o T^h17, o como se describe de otro modo en la presente, que comprende administrar un inhibidor de FASN en combinación con agentes terapéuticos adicionales. En una realización, el agente terapéutico adicional es un inhibidor de BRAF. En otro aspecto, el agente terapéutico adicional es un inhibidor de PD1/PDL1.

En algunas realizaciones, un inhibidor de BRAF es GDC-0879, SB590885; Encorafenib (LGX818); RAF265 (CHIR-265); Dabrafenib (GSK2118436); TAK-632; PLX-4720; CEp-32496; tosilato de sorafenib; sorafenib; vemurafenib (PLX4032, RG7204); AZ ⁶²⁸; o vemurafenib.

En algunas realizaciones, un inhibidor de PD1/PDL1 se selecciona del grupo que consiste de inhibidores de PD1 Pembrolizumab y Nivolumab; e inhibidores de PDL1 Atezolizumab, MEDI4736, Avelumab y PDR001.

La divulgación proporciona por tanto, en un aspecto adicional, una combinación que comprende un compuesto descrito en la presente o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo junto con por lo menos un agente terapéutico adicional. En un aspecto ejemplar, el agente terapéutico adicional es un compuesto de la divulgación.

Cuando se usa un compuesto descrito en la presente en combinación con un segundo agente terapéutico activo contra el mismo estado de enfermedad, la dosis de cada compuesto puede diferir de la que se usa cuando el compuesto se usa solo. Los expertos en la técnica apreciarán fácilmente las dosis apropiadas. Se apreciará que la cantidad de compuesto requerida para su uso en el tratamiento variará con la naturaleza de la afección que se esté tratando y la edad y la afección del paciente y, en última instancia, quedará a discreción del médico asistente.

Dosificación eficaz

Las composiciones farmacéuticas de la presente divulgación incluyen composiciones en las que el ingrediente activo está contenido en una cantidad terapéuticamente eficaz, es decir, en una cantidad eficaz para lograr su propósito pretendido. La cantidad real eficaz para una aplicación particular dependerá, entre otras cosas, de la afección que se esté tratando.

La dosificación y la frecuencia (dosis única o múltiples) del compuesto administrado pueden variar dependiendo de una variedad de factores, incluyendo la vía de administración; tamaño, edad, sexo, salud, peso corporal, índice de masa corporal y dieta del receptor; naturaleza y alcance de los síntomas de la enfermedad que se está tratando; presencia de otras enfermedades u otros problemas relacionados con la salud; tipo de tratamiento concurrente; y complicaciones de cualquier enfermedad o régimen de tratamiento. Pueden usarse otros regímenes o agentes terapéuticos junto con los métodos y compuestos de la invención.

Para cualquier compuesto descrito en la presente, la cantidad terapéuticamente eficaz puede determinarse inicialmente a partir de ensayos de cultivo celular. Las concentraciones objetivo serán aquellas concentraciones del o de los compuestos activos que sean capaces de matar parásitos y/o controlar su crecimiento o reproducción como se mide, por ejemplo, usando los métodos descritos.

Las cantidades terapéuticamente eficaces para su uso en humanos pueden determinarse a partir de modelos animales. Por ejemplo, puede formularse una dosis para humanos para lograr una concentración que se ha descubierto que es eficaz en animales. La dosificación en humanos puede ajustarse monitorizando la inhibición de quinasas y ajustando la dosis hacia arriba o hacia abajo, como se ha descrito anteriormente. Las cantidades terapéuticamente eficaces para su uso en animales (por ejemplo, ganado) pueden determinarse a partir de modelos animales (por ejemplo, modelos de ratón).

Las dosificaciones pueden variarse dependiendo de los requisitos del paciente y del compuesto que se esté empleando. La dosis administrada a un paciente, en el contexto de la presente invención, debería ser suficiente para lograr una respuesta terapéutica beneficiosa en el paciente a lo largo del tiempo. El tamaño de la dosis también estará determinado por la existencia, naturaleza y alcance de los efectos secundarios adversos. Generalmente, el tratamiento se inicia a dosificaciones más pequeñas, que son menores que la dosis óptima del compuesto. A partir de entonces, la dosificación se aumenta en pequeños incrementos hasta que se alcanza el efecto óptimo en las circunstancias. En algunas realizaciones, el intervalo de dosificación es del 0,001% al 10% p/v. En algunas realizaciones, el intervalo de dosificación es del 0,1% al 5% p/v.

En algunas realizaciones, una dosis administrada a un paciente humano varía de aproximadamente 0,3 mg/kg a aproximadamente 9 mg/kg. En algunas realizaciones, una dosis administrada a un paciente humano es de aproximadamente 0,3, aproximadamente 1, aproximadamente 1,5, aproximadamente 2, aproximadamente 3, aproximadamente 4, aproximadamente 5, aproximadamente 6, aproximadamente 7, aproximadamente 8 o aproximadamente 9 mg/kg.

En algunas realizaciones, una dosis administrada a un paciente humano es una dosificación correspondiente a una dosis en un ratón de aproximadamente 1 mg/kg a aproximadamente 20 mg/kg. En algunas realizaciones, una dosis administrada a un paciente humano es una dosificación correspondiente a una dosis en un ratón de aproximadamente 1, aproximadamente 2, aproximadamente 3, aproximadamente 6, aproximadamente 10 o aproximadamente 20 mg/kg. En algunas realizaciones, una dosis administrada a un paciente humano es una dosificación correspondiente a una dosis en una rata de aproximadamente 0,125 mg/kg a aproximadamente 12 mg/kg. En algunas realizaciones, una dosis administrada a un paciente humano es una dosificación correspondiente a una dosis en una rata de aproximadamente 0,125, aproximadamente 0,2, aproximadamente 0,4, aproximadamente 0,6, aproximadamente 1, aproximadamente 1,2, aproximadamente 2, aproximadamente 2,4, aproximadamente 6 o aproximadamente 12 mg/kg.

Las cantidades e intervalos de dosificación pueden ajustarse individualmente para proporcionar niveles del compuesto administrado eficaces para la indicación clínica particular que se está tratando. Esto proporcionará un régimen terapéutico acorde con la gravedad del estado de enfermedad del individuo.

En algunas realizaciones, se administra una dosis una vez al día, dos veces al día o una vez cada dos días. La divulgación se ilustra además mediante los siguientes ejemplos, que no deben interpretarse como limitativos de esta divulgación para los procedimientos específicos descritos en la presente. Debe entenderse que los ejemplos se proporcionan para ilustrar ciertas realizaciones y que no se pretende limitar el alcance de la divulgación con los mismos.

Ejemplos

Los siguientes son ejemplos ilustrativos, pero no limitativos, de ciertas realizaciones de la presente invención. Se describen el proceso y los resultados de los ensayos que prueban la inhibición de la secreción de IL-17 en células TH17 diferenciadas in vitro y evalúan el efecto de los inhibidores de FASN sobre la diferenciación de macrófagos M2 mediada por CSF-1.

Ejemplo 1. Ensayo de diferenciación de Th17:

Se aislaron células T CD4+ usando el kit de aislamiento de células T CD4+ (Miltenyi Biotech), se activaron con microperlas CD3/CD28 y se cultivaron durante 7-10 días en presencia de IL-1 p, IL-6, IL-21, IL-23 y TGFp. y compuestos de prueba. Como controles negativos se usaron células cultivadas con DMSO o sin citoquinas y/o microperlas.

Lectura: (1) En el día 7-10, se recogieron los sobrenadantes y se probaron para detectar IL-17 soluble. (2) Las células también se recogieron y se tiñeron para IL-17A intracelular. (3) Las células también se tiñeron por separado con anexina/PI para determinar la viabilidad celular. (4) Se tomaron fotografías de cultivos para cada condición.

Tabla 1.1: Inhlbclón de la secreción de IL-17 en células TH17 diferenciadas in -v iiro

(continuación)

Ejemplo 2. Protocolo para evaluar el efecto de los inhibidores de FASN sobre la diferenciación de macrófagos M2 mediada por CSF-1

Se aislaron monocitos humanos primarios de las PBMC usando un kit de aislamiento de monocitos (Miltenyi Biotec Inc.). Los monocitos se siembran en placas en la placa de 6 pocillos a 1,5 x 106 células/pocillo en presencia de hMCSF (50 ng/ml) en medio de cultivo celular. Las células se tratan con varias concentraciones de inhibidor de FASN o cerulenina (0,001 pM, 0,01 pM, 0,1 pM, 1 pM o 10 pM) en el momento de la siembra en placas. Las células con DMSO al 0,1% actúan como control. Las células se mantienen durante 6 días para facilitar la diferenciación en macrófagos. El día 6, las células se recogieron para qPCR y se analizaron en busca de marcador M1 (IL-1 p), marcador M2 (CD206) y TBP que actúa como control de mantenimiento.

Ejemplo 3: Modelos de HSD/HFD y datos relacionados

Actividad en ratas alimentadas con dieta alta en grasas (HFD)

Para investigar la relación entre la dosis y la exposición que da como resultado cambios en la actividad clínica, se evaluó un compuesto de prueba (compuesto A) en un modelo de rata HFD. El modelo HFD se usa ampliamente en modelos animales preclínicos para inducir esteatosis hepática como un componente patológico clave de NASH (Takahashi, Y., Soejima, Y. y Fukusato, T. (2012). Animal models of nonalcoholic fatty liver disease/nonalcoholic steatohepatitis. World J. Gastroenterol. 18, 2300-2308). La esteatosis está provocada por la acumulación de triglicéridos (TG) en el hígado y, como tal, las disminuciones en TG pueden representar un marcador potencial de actividad sobre la esteatosis. El fenotipo obeso del modelo HFD depende de la incorporación de grasas dietéticas altas y grasas derivadas de DNL. Como estos animales tienen grandes cantidades de grasa exógena de la dieta, este modelo representa una barra alta para el éxito y la actividad en este modelo puede demostrar la importancia potencial de la actividad de FASN como un mediador clave de la esteatosis. Los criterios de valoración claves de este estudio fueron evaluar la relación entre el esquema de dosis y la exposición con cambios en la puntuación de esteatosis hepática y TG hepáticos. Para estos estudios, se alimentaron ratas SD macho (de 6 a 8 semanas de edad) con una dieta alta en grasas (D124942, Research Diets Inc.) durante cuatro semanas para desarrollar el fenotipo de obesidad y luego se clasificaron en grupos de tratamiento (N = 8) en base al peso corporal medio. Las ratas se trataron por vía oral con compuesto A o vehículo (PEG400:EtOH 9:1) durante cuatro semanas. Se incluyó rosiglitazona 5 mg/kg QD como control positivo. Se recogieron muestras de plasma y suero semanalmente durante todo el estudio. Después de 28 días de tratamiento, se sacrificaron los animales y se recogieron muestras de hígado y plasma. Los hígados se fijaron en formalina, se procesaron para tinción H&E, y se evaluaron por un patólogo especializado en NASH.

Se realizaron dos estudios HFD. El primer estudio HFD se diseñó para demostrar la actividad preliminar del tratamiento con el compuesto A sobre los marcadores de esteatosis hepática. El segundo estudio HFD investigó los criterios de valoración de la esteatosis y los marcadores de lipogénesis en el hígado y el plasma (incluyendo TG y FFA).

En el primer estudio HFD, los animales fueron tratados con vehículo, rosiglitazona y compuesto A (0,6, 2, 6 mg/kg QD y 1 mg/kg BID; N = 8 animales por grupo de tratamiento) Los niveles de dosis se ajustaron después de los primeros 14 días de tratamiento según lo indicado.

En el estudio HFD 2 se evaluó un intervalo más bajo de niveles de dosis de compuesto A en ratas HFD obesas establecidas. A las ratas se les administró por vía oral el compuesto A a 0,125, 0,4 y 1,2 mg/kg QD durante 4 semanas. Este estudio también investigó el intervalo de dosis en los programas BID (0,2 y 0,6 mg/kg BID) y Q2D (2,4 y 12 mg/kg en días alternos) para evaluar el impacto del programa sobre la actividad del compuesto A.

En ambos estudios de HFD, los TG hepáticos se elevaron significativamente en comparación con los controles con dieta normal, lo que concuerda con la acumulación de TG en el hígado y la presencia de esteatosis en este modelo de enfermedad. El efecto del compuesto A sobre la esteatosis se determinó evaluando la histología hepática después del tratamiento. Un patólogo independiente evaluó los especímenes de hígado de manera ciega. En particular, se observó una disminución significativa en el grado y la gravedad de la esteatosis hepática en todos los grupos de tratamiento QD, incluyendo la cohorte de dosis de 0,125 mg/kg QD. Aunque la mayor disminución en la puntuación de esteatosis se observó con 1,2 mg/kg QD, no se observó una clara dependencia de la dosis para este criterio de valoración (Figura 1). También se observó una reducción de la esteatosis hepática en el grupo de tratamiento con 0,6 mg/kg QD del estudio 1 de HFD (datos no mostrados). Aunque la esteatosis está impulsada principalmente por la grasa de la dieta en el modelo HFD, la inhibición de DNL por el compuesto A mostró un beneficio claro en la mejora de la esteatosis y puede tener un beneficio terapéutico en la NASH. Además, la dosis más baja de compuesto A probada (0,125 mg/kg; AUC: 3228 h*ng/ml) fue potencialmente tan eficaz como las dosis y exposiciones hasta 10 veces más altas. Es de destacar que la AUClast de 0,125 mg/kg es 9 veces y 12 veces menor que la AUClast de la dosis de NOAEL determinada en el estudio DRF de rata y MTD de rata, respectivamente.

No se observó una inhibición aumentada de la esteatosis por el compuesto A en los programas de dosificación BID en comparación con las dosis diarias equivalentes (y exposiciones similares). Por el contrario, la inhibición de la esteatosis se redujo con la dosificación en días alternos (Figura 1).

La esteatosis está provocada por la acumulación de TG en el hígado y, como tal, las disminuciones de TG pueden representar un marcador potencial de esteatosis. En el modelo HFD, los TG hepáticos estaban significativamente elevados en los controles HFD en comparación con los controles de dieta normal, lo que es consistente con la acumulación de TG en el hígado y la presencia de esteatosis en este modelo de enfermedad. Se demostraron disminuciones en los TG hepáticos en todos los grupos de dosificación QD y, consistente con las puntuaciones de esteatosis, no se observó un efecto claro dependiente de la dosis (Tabla 3.1). La falta de una respuesta dependiente de la dosis del compuesto A en los TG hepáticos puede deberse a la variación dentro del modelo y al tamaño de muestra más pequeño, pero también refleja una actividad significativa del Compuesto A a dosis bajas y exposiciones en los hígados de animales HFD. Por el contrario, los niveles de TG en plasma no se elevaron significativamente en este modelo, en comparación con los controles de dieta normal; sin embargo, se demostró una disminución de los TG en plasma dependiente de la dosis con la dosificación diaria (Tabla 3.1).

Tabla 3.1. Efectos del compuesto A sobre TG en plasma e hígado de modelo de rata HFD. Los datos se resentan como media ±SEM.

continuación

Tabla 3.2 Efecto del compuesto A sobre la leptina en plasma del modelo de rata HFD. Los datos se

Ejemplo 4. Actividad en ratas alimentadas con dieta alta en sacarosa (HSD)

Una HSD representa un modelo experimental alternativo para la obesidad y la esteatosis. En este modelo, el 60-70% de la ingesta calórica proviene de carbohidratos simples y, por lo tanto, la fuente principal de aumento de TG es a través del DNL. Se esperaría que la inhibición de FASN y, por tanto, DNL por el compuesto A tuviera un impacto significativo sobre la producción de TG y la esteatosis en este modelo.

El objetivo del estudio HSD fue evaluar la potencia in vivo del compuesto A en el bloqueo de la síntesis de FA para reducir el depósito de grasa en el hígado monitorizado por las puntuaciones de esteatosis, así como los cambios en los TG hepáticos y plasmáticos y los FFA hepáticos. También se usó un estudio adicional de PK/PD de administración única en ratas HSD para determinar la relación entre la inducción de malonil-carnitina en el hígado y el plasma y el compuesto A en este modelo de enfermedad.

Se alimentaron ratas SD macho (6-8 semanas de edad) con una HSD (D10001, Research Diets Inc.) durante seis semanas para desarrollar el fenotipo obeso y luego se clasificaron en grupos de tratamiento (N = 8 cada uno) en base al peso corporal medio. Las ratas se trataron con 0,15, 0,3, 0,6 o 1,2 mg/kg de Compuesto A o vehículo (PEG400:EtOH 9:1) por vía oral una vez al día durante cuatro semanas y con una única administración de 0,3, 1,2 y 3 mg/kg de compuesto A o vehículo.

En consonancia con el grado mínimo de esteatosis en este modelo, el grupo de tratamiento con vehículo HSD tenía niveles de TG hepáticos significativamente más bajos en comparación con el grupo con vehículo HFD al final del estudio (14,5 ± 2,0 |jmol/g en HSD frente a 57,3 ± 7,7 |jmol/g en HFD). El tratamiento con el compuesto A con dosis tan bajas como 0,3 mg/kg dio como resultado una reducción de TG hepáticos a niveles cercanos a los observados en animales de dieta normal, consistente con DNL como la principal fuente de exceso de TG en este modelo (Tabla 4.1). De manera similar, los TG plasmáticos se redujeron después del tratamiento con el compuesto A (hasta un 30%) en comparación con los controles de vehículo de una manera dependiente de la dosis después de 28 días de tratamiento. En particular, en este modelo, se observó una reducción aumentada de los TG plasmáticos con 28 días de tratamiento en comparación con 14 días.

Tabla 4.1. Efecto del compuesto A sobre triglicéridos en plasma e hígado de modelo de rata HSD. Los datos se resentan como media ±SEM.

De manera similar al modelo HFD, el compuesto A redujo los niveles de leptina en plasma a niveles iguales o cercanos a los observados en animales de control de dieta normal (Tabla 4.2).

Tabla 4.2. Efecto del compuesto A sobre la leptina en plasma del modelo de rata HSD. Las muestras

Ejemplo 5. Célula estrellada de rata

Además de la fibrosis mediada por IL-17, la acumulación de lípidos inducida por palmitato en los hepatocitos puede liberar factores que promueven la activación y proliferación de las células estrelladas hepáticas (HSC). Las HSC son mediadores centrales de la fibrosis hepática. Cuando se produce un daño hepático, las HSC pasan de un estado inactivo a un estado activado. Las HSC activadas secretan matriz extracelular y citoquinas fibrogénicas, que llevan a fibrosis y cirrosis. Para comenzar a evaluar el papel de DNL como un vínculo fisiopatológico potencial entre la esteatosis hepática y la fibrosis, evaluamos el efecto del compuesto A sobre la proliferación de HSC de rata activadas en cultivo de células primarias. Después de un tratamiento de 72 horas, el compuesto A inhibió la proliferación de HSC de rata de una manera dependiente de la concentración con una IC50 de 0,42 pM. Estos datos respaldan el potencial de los compuestos de la invención para reducir la fibrosis hepática bloqueando la proliferación de HSC activadas, además de mitigar la fibrosis mediada por TH17.

Ejemplo 6. Datos de EAE

Para demostrar que el compuesto A tiene propiedades antiinflamatorias in vivo e investigar la relación entre la inhibición de FASN y las respuestas de células T mediadas por TH17, se evaluó el modelo de ratón de encefalomielitis autoinmune experimental (EAE) inducida por glicoproteína de oligodendrocitos de mielina (MOG). En este modelo, los animales se inmunizan con el péptido MOG (35-55) en combinación con la toxina de la toxina de tosferina, lo que da como resultado la descomposición de la barrera hematoencefálica y promueve la infiltración de células T en el SNC. Las células TH17 productoras de IL-17 autorreactivas son muy potentes para inducir patología inmune del SNC. Cabe destacar que la inhibición de la vía de DNL, ya sea usando de la deleción específica de células T del gen ACC1 o el inhibidor farmacológico de ACC1/2, llevó a una reducción significativa de los biomarcadores TH17 y la patología de la enfermedad en este modelo. Por lo tanto, el modelo de EAR es un modelo animal relevante validado y mecanicista para evaluar el potencial antiinflamatorio del compuesto A.

En el modelo EAE de ratón, se inmunizaron ratones C57BL6 (hembra de 8-10 semanas de edad) por vía subcutánea con MOG (35-55) el día 1, seguido de una inyección intravenosa (IV) de toxina de tosferina los días 1 y 3. A partir del día 4 hasta el día 29, los ratones se trataron con vehículo, prednisolona (10 mg/kg QD) o compuesto A (N = 12 por grupo) a las dosis y el programa indicados. Los síntomas clínicos de EAE se puntuaron de forma ciega diariamente y se registraron como la puntuación clínica diaria media. El día 29, los animales se sacrificaron y se recogieron tejidos para evaluar si había evidencia de infiltración de células inflamatorias en los tejidos del SNC. Para confirmar la implicación del objetivo, se recogieron muestras de hígado para medir los niveles de malonil-carnitina. Además, para demostrar los efectos de PD relacionados con TH17, se midieron los ARNm esplénicos para determinar la expresión de mRORc, que codifica el receptor gamma huérfano relacionado con el factor de transcripción RAR clave, isoforma específica del timo (RORyT) esencial para la diferenciación de células TH17 murinas

Se realizaron dos estudios de EAE en ratones. El primer estudio se diseñó para evaluar los efectos antiinflamatorios del compuesto A en términos de reducción de las puntuaciones clínicas de EAE y la patología a la conclusión del estudio el día 29. Además, se evaluaron las relaciones de la exposición al compuesto A, la PD y la actividad clínica. Para demostrar mejor los efectos de PD del compuesto A sobre los biomarcadores TH17 en los tejidos relevantes, se realizó un segundo estudio de EAE en el que se analizaron los tejidos de los ganglios linfáticos y del SNC para determinar la presencia de células IL-17+CD4+ en el pico de la enfermedad (en base a puntuaciones clínicas) el día 15.

En el Estudio 1 de EAE, los impactos del compuesto A sobre la puntuación clínica y la patología de EAE se evaluaron a dosis de 2, 6 y 20 mg/kg QD y a 1,3 y 10 mg/kg. BID.

El compuesto A tuvo un impacto significativo y dependiente de la dosis sobre las puntuaciones clínicas medidas tanto por el inicio como por la gravedad de la enfermedad en comparación con el grupo de vehículo. En particular, los regímenes BID fueron significativos para mejorar las puntuaciones clínicas en comparación con el grupo de vehículo (p<0,05; RM-ANOVA de 2 vías) (Figura 2) mientras que los regímenes QD redujeron las puntuaciones pero no alcanzaron significancia estadística.

El impacto del tratamiento sobre los estados patológicos en el modelo EAE se caracteriza por el grado de infiltración de células inflamatorias en los tejidos del SNC. Para determinar si las puntuaciones clínicas reducidas en los grupos tratados con el compuesto A se asociaron con una reducción de la inflamación del SNC, se evaluó la desmielinización de la médula espinal y la inflamación del SNC de los animales tratados. Las médulas espinales de los animales tratados con compuesto A mostraron signos visibles significativamente reducidos de lesiones desmielinizantes o inflamación como se juzgaron los infiltrados celulares por tinción con azul rápido Luxol y tinción con H&E (Tabla 6.2). Las reducciones en la inflamación del cerebro y la médula espinal se correspondieron con las puntuaciones clínicas y se observaron con el compuesto A en dosis tan bajas como 1 mg/kg BID, y alcanzaron significancia estadística a 3 y 10 mg/kg BID.

Finalmente, los efectos del compuesto A sobre las células TH17, que son importantes para el desarrollo de EAE, se examinaron midiendo los niveles de ARNm de mRORc esplénico como biomarcador de TH17, mediante análisis cuantitativo de RT-PCR TaqMan. El compuesto A redujo marcadamente el nivel de expresión génica de mRORc esplénico de una manera dependiente de la dosis. En resumen, en el estudio 1 de EAE, el compuesto A fue eficaz para reducir las puntuaciones clínicas de EAE y la inflamación del SNC, lo que se corroboró con una reducción de TH17 esplénico, lo que respalda la idea de que dirigirse a FASN afectará a las respuestas de células T mediadas por TH17 in vivo (Figura 3).

Tabla 6.2. Efecto del compuesto A sobre la desmielinización de la médula espinal, inflamación de la médula espinal e inflamación cerebral en modelo EAE. Los datos se presentan como media ± SD. *P<0.05 con respecto a grupo de

-

Tabla 6.3. Evaluación de inflamación de la médula espinal y el cerebro para el modelo de EAE Escala l ifi i n r mi liniz i n l m l inl l m l EAE z l r i Luxol)

E l l ifi i n r inflm i n l m l inl l m l EAE H E

E l l ifi i n r inflm i n r rl l m l EAE H E

En el segundo estudio, para evaluar mejor el impacto del tratamiento con el compuesto A sobre las respuestas de TH17 y en los tejidos relevantes, se recogieron los ganglios linfáticos y la médula espinal para el análisis de citometría de flujo de las células IL-17+ CD4+ en el pico de la enfermedad de EAE. El estado de enfermedad de EAE se indujo en animales como se ha descrito anteriormente y los animales se sacrificaron el día 15. Los ratones se trataron en un programa BID con control de vehículo o compuesto A a 0,3, 1, 3 y 10 mg/kg desde el día 4 hasta el día 15.

El compuesto A redujo la población de células T IL-17+ CD4+ en los ganglios linfáticos y el SNC a dosis tan bajas como 0,3 mg/kg BID y alcanzó significancia estadística a 3 y 10 mg/kg BID (Figura 4). Estos datos son consistentes con el papel de FASN en el desarrollo de células TH17 e indican que la inhibición farmacológica de FASN podría ser un medio eficaz para reducir las respuestas inflamatorias impulsadas por TH17, como las informadas en pacientes con NASH.

En resumen, el compuesto A redujo la progresión y la gravedad de la enfermedad en el modelo de EAE de ratón, con evidencia de una disminución de la inflamación del SNC, así como efectos sistémicos de PD sobre los biomarcadores relevantes de TH17. La evidencia de esto vino a través de una expresión génica reducida de mRORc en el bazo, una disminución de las células T IL-17+ y CD4+ en los ganglios linfáticos y los tejidos del SNC. Dado el papel de las respuestas inflamatorias en la patogénesis de la NASH, estos datos apoyan aún más la utilidad terapéutica del compuesto A, por lo menos al atenuar la inflamación impulsada por TH17 y potencialmente la fibrosis resultante.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un inhibidor de FASN para su uso en un método para tratar esteatohepatitis no alcohólica (NASH), mediante el cual el inhibidor de FASN reduce la esteatosis, la inflamación dependiente de TH17, y la fibrosis, en donde dicho método comprende administrar dicho inhibidor de FASN a dicho paciente, y en donde el inhibidor de FASN es:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.