ES2883155T3

ES2883155T3 - Compuestos heterocíclicos y métodos para su uso

Info

Publication number: ES2883155T3
Application number: ES14823688T
Authority: ES
Inventors: Thomas David Mccarthy; Alan Naylor
Original assignee: Novartis AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 2013-07-08
Filing date: 2014-07-08
Publication date: 2021-12-07
Anticipated expiration: 2034-07-08
Also published as: CN105358532A; JP2016525093A; US9714224B2; EP3019477A1; EP3019477B1; US20160145213A1; CN105358532B; PT3019477T; WO2015003223A1; EP3019477A4; JP6505682B2; PL3019477T3; NZ630908A

Abstract

Un compuesto de fórmula (I): **(Ver fórmula)** donde R1 es -C(=O)CHR6R7, -C(=O)NR6R7, -C(=O)CH2CHR6R7, -C(=O)CH=CR6R7, -C(=S)CHR6R7, -C(=S)NR6R7, - C(=S)CH2CHR6R7, -C(=S)CH=CR6R7, -C(=NR8)CHR6R7, -C(=NR8)NR6R7, -C(=NR8)CH2CHR6R7 y -C(=NR8)CH=CR6R7; R3 es hidrógeno y R2 es -C(=O)NHSO2N(alquilo C1-6)2; R4 es fenilo, benzoxazol, 4-feniloxazol, 1-piperidina, 4-fenil-1-piperidina, -(alquil C1-6)fenilo, -O(alquil C1-6)fenilo, -(alquenil C2-6)fenilo, -O(alquenil C2-6)fenilo, -(alquinil C2-6)fenilo, -O(alquinil C2-6)fenilo, -SO2NHfenilo, -SO2NH(alquil C1-6)fenilo, - SO2NH(alquenil C2-6)fenilo, -SO2NH(alquinil C2-6)fenilo, -NHSO2fenilo, -NHSO2(alquil C1-6)fenilo, -NHSO2(alquenil C2- 6)fenilo, -NHSO2(alquinil C2-6)fenilo, -NHC(=O)NHfenilo, -NHC(=O)NH(alquil C1-6)fenilo, -NHC(=O)NH(alquenil C2-6)fenilo, -NHC(=O)NH(alquinil C2-6)fenilo, -NHCO2fenilo, -NHCO2(alquil C1-6)fenilo, -NHCO2(alquenil C2-6)fenilo, -NHCO2(alquinil C2-6)fenilo; R5 es -OH, -Oalquilo C1-6 u -OC(R10)3; R6 y R7 son independientemente hidrógeno, -alquilo C1-6, cicloalquilo, cicloalquenilo, arilo, heterociclilo, heteroarilo, - CH2arilo, -CH2cicloalquilo, -CH2cicloalquenilo, -CH2heterociclilo o -CH2heteroarilo; siempre que R6 y R7 no sean ambos hidrógeno; R8 es hidrógeno, -alquilo C1-6, arilo o -(alquil C1-6)arilo; cada R10 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y halógeno; y donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, arilo, heterociclilo y heteroarilo puede estar opcionalmente sustituido; o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

Description

DESCRIPCIÓN

Compuestos heterocíclicos y métodos para su uso

Campo de la invención

[0001] La presente invención se refiere en general a compuestos que son útiles en la antagonización del receptor de tipo 2 de la angiotensina II (AT²). Más particularmente, la invención se refiere a compuestos heterocíclicos de fórmula (I) y su uso como antagonistas del receptor AT². Se describen composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos y su uso en la modulación del receptor AT2 y terapias que requieren la modulación del receptor At2.

Antecedentes de la invención

[0002] Aunque el receptor AT2 se conoce desde la década de los 80, el conocimiento sobre su función biológica es mucho más limitado que el del receptor de tipo 1 de la angiotensina II (AT¹), que ha sido objeto de estudio por sus efectos funcionales sobre la vasoconstricción, la liberación de la aldosterona y el crecimiento cardiovascular [Wexler et al., 1996]. Sin embargo, más recientemente el receptor AT²se ha vinculado con la diferenciación y la regeneración del tejido neuronal [Steckelings et al., 2005; Chakrabarty et al., 2008], la proliferación celular y la angiogénesis [Clere et al., 2010], y el mantenimiento de la masa ósea [Izu et al., 2009].

[0003] Los antagonistas del receptor AT²también se han vinculado recientemente con el tratamiento del dolor [Anand et al. 2012; Smith, Woodruff et al., 2013], particularmente el dolor inflamatorio [documento WO 2007/106938; Chakrabarty et al. 2013] y el dolor neuropático [documento WO 2006/066361; Smith et al. 2013], dos tipos de dolor que son difíciles de tratar o aliviar. La alteración de la velocidad de conducción nerviosa también se asocia con el daño neural y se ha vinculado con neuropatías periféricas, el síndrome del túnel carpiano, la neuropatía cubital, el síndrome de Guillain-Barré, la distrofia muscular facioescapulohumeral y la hernia discal. La alteración de la velocidad de conducción nerviosa puede provocar una disminución de las respuestas reflejas y sensación periférica alterada tal como parestesia y en algunos casos dolor, y se ha demostrado que los antagonistas del receptor AT²reestablecen la velocidad de conducción nerviosa [documento WO 2011/088504].

[0004] Aunque existen terapias eficaces para tratar el dolor nociceptivo, el dolor inflamatorio y neuropático suelen ser resistentes a estas terapias. Además, las terapias actuales del dolor neuropático, dolor inflamatorio, la alteración de la velocidad de conducción nerviosa y otros tipos de dolor que son difíciles de tratar, tienen efectos secundarios graves, por ejemplo, trastornos cognitivos, sedación, náuseas y en el caso de los opioides, tolerancia y dependencia. Se necesitan terapias adicionales que traten o prevengan el dolor neuropático, dolor inflamatorio, la alteración de la velocidad de conducción nerviosa y otras afecciones dolorosas que son difíciles de tratar en la actualidad.

[0005] La proliferación celular y la angiogénesis son funciones biológicas importantes en el tejido normal. Sin embargo, la proliferación celular y la angiogénesis descontroladas pueden dar lugar a tumores y otros trastornos proliferativos. Si bien existen algunas quimioterapias eficaces disponibles para tumores, muchas provocan efectos secundarios desagradables y/o tienen una alta toxicidad para las células normales. Se requieren terapias adicionales para reducir o prevenir la proliferación celular anómala de manera controlada y se ha demostrado que los antagonistas del receptor AT²tienen actividad antiproliferativa [Clere et al., 2010].

[0006] La osteoporosis es un problema importante en las poblaciones de edad avanzada, especialmente en las mujeres posmenopáusicas. Las terapias actuales para la osteoporosis se basan en el aporte complementario de calcio. Sin embargo, el control de la osteogénesis y la reabsorción ósea es complejo y se necesitan terapias adicionales para mejorar la masa ósea, y se ha demostrado que los antagonistas del receptor AT²aumentan la masa ósea [Izu et al., 2009].

[0007] El papel del receptor AT²en la modulación de la excrecencia neuronal y efectos asociados de los antagonistas del receptor AT²sobre la reducción de la excrecencia neuronal, indica que los antagonistas del receptor AT²pueden ser agentes terapéuticos útiles en enfermedades caracterizadas por una regeneración nerviosa atípica [Chakrabarty et al., 2008].

[0008] La presente invención se basa en parte en el descubrimiento de compuestos de tetrahidroisoquinolina heterocíclicos que tienen actividad antagonista del receptor AT².

Compendio de la invención

[0009] En un primer aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I):

donde Ri es -C(=O)CHR6R7, -C(=O)NR6R7, -C(=O)CH2CHR6R7, -C(=O)CH=CR6R7, -C(=S)CHR6R7, -C(=S)NR6R7, -C(=S)CH2CHR6R7, -C(=S)CH=CR6R7, -C(=NR8)CHR6R7, -C(=NR8)NR6R7, -C(=NR8)CH2CHR6R7 y -C(=NR8)CH=CR6R7; R3 es hidrógeno y R2 es -C(=O)NHSO2N(alquilo C1-6)2;

R⁴es fenilo, benzoxazol, 4-feniloxazol, 1-piperidina, 4-fenil-1-piperidina, -(alquil C^1-6)fenilo, -O(alquil C^1-6)fenilo, -(alquenil C^2-6)fenilo, -O(alquenil C^2-6)fenilo, -(alquinil C^2-6)fenilo, -O(alquinil C^2-6)fenilo, -SO²NHfenilo, -SO²NH(alquil C^1-6)fenilo, -SO2NH(alquenil C2-6)fenilo, -SO2NH(alquinil C26)fenilo, -NHSO2fenilo, -NHSO2(alquil C1-6)fenilo, -NHSO2(alquenil C2-6)fenilo, -NHSO²(alquinil C²⁶)fenilo, -NHC(=O)NHfenilo, -NHC(=O)NH(alquil C^1-6)fenilo, -NHC(=O)NH(alquenil C^2-6)fenilo, -NHC(=O)NH(alquinil C^2-6)fenilo, -NHCO²fenilo, -NHCO²(alquil C^1-6)fenilo, -NHCO²(alquenil C^2-6)fenilo, -NHCO²(alquinil C^2-6)fenilo;

R⁵es -OH, -Oalquilo C^1-6u -OC(R¹⁰)³;

R6 y R⁷son independientemente hidrógeno, -alquilo C^1-6, cicloalquilo, cicloalquenilo, arilo, heterociclilo, heteroarilo, -CH2arilo, -CH2cicloalquilo, -CH2cicloalquenilo, -CH2heterociclilo o -CH2heteroarilo; siempre que R6 y R7 no sean ambos hidrógeno;

R8 es hidrógeno, -alquilo C^1-6, arilo o -(alquil C^1-6)arilo;

cada R¹⁰se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y halógeno; y

donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, arilo, heterociclilo y heteroarilo puede estar opcionalmente sustituido;

o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

[0010] En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende el compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este y un portador farmacéuticamente aceptable.

[0011] En un aspecto adicional de la invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en el tratamiento o la prevención del dolor neuropático.

[0012] En un aspecto adicional más de la invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en el tratamiento o la prevención de una afección caracterizada por hipersensibilidad neuronal.

[0013] En otro aspecto más de la invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en el tratamiento o la prevención del dolor inflamatorio.

[0014] En un aspecto adicional, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en el tratamiento o la prevención de la alteración de la velocidad de conducción nerviosa.

[0015] En un aspecto adicional más de la invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en la producción de analgesia.

[0016] En otro aspecto más de la invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en el tratamiento o la prevención de un trastorno proliferativo celular.

[0017] En un aspecto adicional, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en el tratamiento o la prevención de un trastorno asociado con un desequilibrio entre la reabsorción ósea y la osteogénesis.

[0018] En otro aspecto más, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en el tratamiento de un trastorno asociado con la regeneración nerviosa atípica.

Descripción de la invención

Definiciones

[0019] A menos que se definan de otro modo, todos los términos técnicos y científicos utilizados en la presente tienen el mismo significado con el que los entienden normalmente los expertos en la técnica a la que pertenece la invención. Aunque se pueden utilizar cualesquiera métodos y materiales similares o equivalentes a los descritos en la presente en la puesta en práctica o evaluación de la presente invención, se describen los métodos y materiales preferidos. A los efectos de la presente invención, a continuación se definen los siguientes términos.

[0020] Los artículos «un» y «una» se utilizan en la presente para referirse a uno o a más de uno (es decir, al menos uno) del objeto gramatical del artículo. A modo de ejemplo, «un elemento» significa un elemento o más de un elemento.

[0021] Tal como se utiliza en la presente, el término «aproximadamente» se refiere a una magnitud, nivel, valor, dimensión, tamaño o cantidad que varía en hasta un 30%, 25%, 20%, 15% o 10% respecto a una magnitud, nivel, valor, dimensión, tamaño o cantidad de referencia.

[0022] Tal como se utiliza en la presente, la expresión «receptor AT²» significa un polipéptido receptor de tipo 2 de la angiotensina II (AT²) que puede unirse a la angiotensina II y/o uno o más ligandos diferentes. La expresión «receptor AT²» engloba homólogos vertebrados de miembros de la familia del receptor AT², que incluyen, sin carácter limitante, homólogos aviares, de mamífero y reptil. Los homólogos de mamífero representativos de miembros de la familia del receptor AT²incluyen, sin carácter limitante, homólogos murinos y humanos.

[0023] El término «antagonista», tal como se utiliza en la presente, se refiere a un compuesto que disminuye o inhibe la actividad biológica y/o función de un receptor AT², que incluye la unión al receptor AT²y el bloqueo del acceso a la angiotensina II, la inhibición de un gen que expresa el receptor AT²o la inhibición de un producto de expresión de ese gen. Por el término «selectivo», se entiende que el compuesto se une a y/o inhibe la actividad del receptor AT²en mayor medida que la unión e inhibición del receptor AT¹. En algunos casos, selectivo se refiere a la unión y/o inhibición del receptor AT²con poca o ninguna unión al receptor AT¹.

[0024] El término «alodinia», tal como se utiliza en la presente, se refiere al dolor provocado por un estímulo no nocivo, es decir, dolor debido a un estímulo que normalmente no provoca dolor. Los ejemplos de alodinia incluyen, sin carácter limitante, alodinia al frío, alodinia táctil (dolor debido a una ligera presión o al tacto) y similares.

[0025] El término «analgesia» se utiliza en la presente para describir estados de percepción reducida del dolor, que incluyen la ausencia de sensaciones de dolor, así como estados de sensibilidad reducida o ausente a estímulos nocivos. Tales estados de percepción reducida o ausente del dolor se inducen mediante la administración de un agente o agentes que controlan el dolor y cursan sin pérdida de consciencia, tal como se entiende normalmente en la técnica. El término analgesia engloba el término «antinocicepción», que se utiliza en la técnica como una medida cuantitativa de la analgesia o sensibilidad reducida al dolor en modelos en animales.

[0026] El término «antialodinia» se utiliza en la presente para describir estados de percepción reducida del dolor, que incluyen la ausencia de sensaciones de dolor, así como estados de sensibilidad reducida o ausente a estímulos no nocivos. Tales estados de percepción reducida o ausente del dolor se inducen mediante la administración de un agente o agentes que controlan el dolor y cursan sin pérdida de consciencia, tal como se entiende normalmente en la técnica.

[0027] El término «causalgia», tal como se utiliza en la presente, se refiere al dolor urente, alodinia e hiperpatía después de una lesión nerviosa traumática, a menudo combinados con una disfunción sudomotora y vasomotora y cambios tróficos posteriores.

[0028] Por «síndromes de dolor regional complejo» se entiende el dolor que incluye, sin carácter limitante, distrofia simpática refleja, causalgia, dolor mantenido simpáticamente y similares.

[0029] Por «afección caracterizada por hipersensibilidad neuronal» se entiende afecciones que tienen síntomas de dolor relacionados con la hipersensibilidad neuronal y/o alodinia. Los ejemplos de este tipo de afección incluyen la fibromialgia y el síndrome del intestino irritable.

[0030] Por «trastorno asociado con una regeneración nerviosa atípica» se entiende trastornos en los que hay una excrecencia axónica anómala en las neuronas. Esta excrecencia anómala puede estar asociada con afecciones dolorosas que incluyen mastalgia, cistitis intersticial, vulvodinia y neuropatías inducidas por la quimioterapia oncológica.

[0031] A lo largo de esta memoria descriptiva, a menos que el contexto requiera lo contrario, se entenderá que las palabras «comprender», «comprende» y «que comprende/n» implican la inclusión de un paso o elemento o grupo de pasos o elementos indicado, pero no la exclusión de ningún otro paso o elemento o grupo de pasos o elementos.

[0032] Por «hiperalgesia» se entiende una hiperrespuesta a un estímulo que normalmente es doloroso. Una afección hiperalgésica es aquella que se asocia con el dolor provocado por un estímulo que normalmente no es doloroso.

[0033] Por «dolor neuropático» se entiende cualquier síndrome de dolor iniciado o provocado por una disfunción o lesión primaria en el sistema nervioso central o periférico. Los ejemplos de dolor neuropático incluyen, sin carácter limitante, hiperalgesia térmica o mecánica, alodinia térmica o mecánica, dolor diabético, dolor compresivo y similares.

[0034] La expresión «dolor nociceptivo» se refiere a la sensación de dolor agudo, normal suscitada por la activación de nocirreceptores situados en la piel no dañada, las vísceras y otros órganos en ausencia de sensibilización.

[0035] Tal como se utiliza en la presente, «dolor inflamatorio» se refiere a dolor inducido por inflamación. Tales tipos de dolor pueden ser agudos o crónicos y pueden deberse a numerosas afecciones caracterizadas por la inflamación que incluyen, sin limitación, quemaduras que incluyen quemaduras químicas, friccionales o térmicas, enfermedades autoinmunitarias tales como la artritis reumatoide, osteoartritis y enfermedad intestinal inflamatoria que incluye la enfermedad de Crohn y la colitis, así como otras enfermedades inflamatorias que incluyen carditis, dermatitis, miositis, neuritis y vasculopatías del tejido conjuntivo.

[0036] Al término «dolor», tal como se utiliza en la presente, se le otorga su sentido más amplio e incluye una experiencia sensorial y emocional desagradable asociada con el daño tisular real o potencial, o se describe en términos de tal daño e incluye la sensación más o menos localizada de malestar, desasosiego o angustia, como resultado de la estimulación de terminaciones nerviosas especializadas. Hay muchos tipos de dolor, que incluyen, sin carácter limitante, dolores fulgurantes, dolores de miembro fantasma, dolores lancinantes, dolor agudo, dolor inflamatorio, dolor neuropático, dolor regional complejo, neuralgia, neuropatía y similares (Dorland's Illustrated Medical Dictionary, 28.a Edición, W. B. Saunders Company, Filadelfia, Pa.). El objetivo del tratamiento del dolor es reducir el grado de intensidad del dolor percibido por un sujeto tratado.

[0037] Por las frases «alteración de VCN» o «alteración de la velocidad de conducción nerviosa» y similares se entiende cualquier conducción nerviosa manifiestamente anómala en uno cualquiera de los parámetros evaluados para la conducción normal de las señales nerviosas. El hecho de que los diferentes parámetros de VCN sean normales es normalmente una evaluación que realiza el profesional sanitario formado relevante. Se describen los antecedentes, la terminología y los procedimientos generales conocidos por los expertos en la técnica para evaluar VCN en «Proper performance and interpretation of electrodiagnostic studies» Muscle Nerve. (2006) 33(3):436-439 y «Electrodiagnostic medicine listing of sensory, motor, and mixed nerves». Anexo J de la Terminología Procedimental Actual (CPT, por sus siglas en inglés) del 2007, redactado por la Asociación Estadounidense de Medicina Neuromuscular y Electrodiagnóstico, y publicado por la Asociación Médica Estadounidense. La alteración o anomalía de la velocidad de conducción nerviosa es un síntoma de daño o disfunción nerviosa y puede ser causante de o un síntoma de un gran número de enfermedades o trastornos, particularmente enfermedades o trastornos que presentan una disminución de las respuestas reflejas y sensación periférica alterada incluida parestesia. Tal como se utiliza en la presente, «parestesia» se refiere a una sensación de hormigueo, pinchazos, debilidad o entumecimiento en la piel de un sujeto. También se conoce como «cosquilleo» o un miembro que se ha «quedado dormido». La parestesia puede ser transitoria, aguda o crónica y puede cursar sola o estar acompañada por otros síntomas tales como dolor.

[0038] Tal como se utiliza en la presente, la expresión «trastorno proliferativo celular» se refiere a enfermedades o afecciones donde no se eliminan las células indeseadas o dañadas mediante un proceso celular normal, o enfermedades o afecciones en las que las células experimentan una proliferación atípica, indeseada o inapropiada. Los trastornos caracterizados por una proliferación celular inapropiada incluyen, por ejemplo, afecciones inflamatorias tales como la inflamación ocasionada por una lesión tisular aguda que incluye, por ejemplo, lesión pulmonar aguda, cáncer que incluye cánceres caracterizados por tumores, trastornos autoinmunitarios, hipertrofia tisular y similares.

[0039] La expresión «trastorno asociado con un desequilibrio entre la reabsorción ósea y la osteogénesis» incluye trastornos donde hay un desarrollo insuficiente de la masa ósea, una reabsorción ósea excesiva y una osteogénesis insuficiente durante la remodelación. Un trastorno asociado con un desequilibrio entre la reabsorción ósea y la osteogénesis a modo de ejemplo es la osteoporosis.

[0040] Tal como se utiliza en la presente, el término «alquilo» se refiere a un grupo hidrocarbonado saturado ramificado o de cadena lineal que tiene de 1 a 10 átomos de carbono. Cuando proceda, el grupo alquilo puede tener un número especificado de átomos de carbono, por ejemplo, alquilo C^1-6que incluye grupos alquilo que tienen 1, 2, 3, 4, 5 o ⁶átomos de carbono en una disposición lineal o ramificada. Los ejemplos de grupos alquilo adecuados incluyen, sin carácter limitante, metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, i-butilo, t-butilo, n-pentilo, 2-metilbutilo, 3-metilbutilo, 4-metilbutilo, n-hexilo, 2-metilpentilo, 3-metilpentilo, 4-metilpentilo, 5-metilpentilo, 2-etilbutilo, 3-etilbutilo, heptilo, octilo, nonilo y decilo.

[0041] Tal como se utiliza en la presente, el término «alquenilo» se refiere a un grupo hidrocarbonado ramificado o de cadena lineal que tiene uno o más dobles enlaces entre átomos de carbono y que tiene de ²a ¹⁰átomos de carbono. Cuando proceda, el grupo alquenilo puede tener un número especificado de átomos de carbono. Por ejemplo, C²-C⁶como en «alquenilo C²-C⁶» incluye grupos que tienen 2, 3, 4, 5 o ⁶átomos de carbono en una disposición lineal o ramificada. Los ejemplos de grupos alquenilo adecuados incluyen, sin carácter limitante, etenilo, propenilo, isopropenilo, butenilo, butadienilo, pentenilo, pentadienilo, hexenilo, hexadienilo, heptenilo, octenilo, nonenilo y decenilo.

[0042] Tal como se utiliza en la presente, el término «alquinilo» se refiere a un grupo hidrocarbonado ramificado o de cadena lineal que tiene uno o más triples enlaces y que tiene de 2 a 10 átomos de carbono. Cuando proceda, el grupo alquinilo puede tener un número especificado de átomos de carbono. Por ejemplo, C²-C⁶como en «alquinilo C²-C⁶» incluye grupos que tienen 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono en una disposición lineal o ramificada. Los ejemplos de grupos alquinilo adecuados incluyen, sin carácter limitante, etinilo, propinilo, butinilo, pentinilo y hexinilo.

[0043] Tal como se utiliza en la presente, el término «cicloalquilo» se refiere a un hidrocarburo cíclico saturado. El anillo de cicloalquilo puede incluir un número especificado de átomos de carbono. Por ejemplo, un grupo cicloalquilo de 3 a 8 miembros incluye 3, 4, 5, 6, 7 u 8 átomos de carbono. Los ejemplos de grupos cicloalquilo adecuados incluyen, sin carácter limitante, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo y ciclooctilo.

[0044] Tal como se utiliza en la presente, el término «cicloalquenilo» se refiere a un hidrocarburo cíclico insaturado. El anillo cicloalquenilo puede incluir un número especificado de átomos de carbono. Por ejemplo, un grupo cicloalquenilo de 5 a 8 miembros incluye 5, 6, 7 u 8 átomos de carbono. El grupo cicloalquenilo tiene uno o más dobles enlaces y cuando hay más de un doble enlace presente, los dobles enlaces pueden estar conjugados o no conjugados, sin embargo, el grupo cicloalquenilo no es aromático. Los ejemplos de grupos cicloalquenilo adecuados incluyen, sin carácter limitante, anillos de ciclopentenilo, ciclohexenilo, ciclohexadienilo, cicloheptenilo, cicloheptadienilo, cicloheptatrienilo, ciclooctenilo, ciclooctadienilo y ciclooctatrienilo.

[0045] Tal como se utiliza en la presente, se pretende que el término «arilo» signifique cualquier sistema anular carbonado monocíclico, bicíclico o tricíclico, estable de hasta 7 átomos en cada anillo, donde al menos un anillo es aromático. Los ejemplos de tales grupos arilo incluyen, sin carácter limitante, fenilo, naftilo, tetrahidronaftilo, indanilo, fluorenilo, fenantrenilo, bifenilo y binaftilo.

[0046] El término «bencilo» cuando se utiliza en la presente se refiere a un grupo fenilmetileno, C⁶H⁵CH²-.

[0047] Tal como se utiliza en la presente, el término «halógeno» o «halo» se refiere a flúor (fluoro), cloro (cloro), bromo (bromo) y yodo (yodo).

[0048] El término «heterocíclico» o «heterociclilo», tal como se utiliza en la presente, se refiere a un hidrocarburo cíclico en el que de uno a cuatro átomos de carbono se han reemplazado por heteroátomos seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, N(R), S, S(O), S(O)2 y O. Un anillo heterocíclico puede estar saturado o insaturado pero no ser aromático. Un grupo heterocíclico también puede formar parte de un grupo espirocíclico que contiene 1, 2 o 3 anillos, dos de los cuales están en una disposición «espiránica». Los ejemplos de grupos heterociclilo adecuados incluyen azetidina, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofenilo, pirrolidinilo, 2-oxopirrolidinilo, pirrolinilo, piranilo, dioxolanilo, piperidinilo, 2-oxopiperidinilo, pirazolinilo, imidazolinilo, tiazolinilo, ditiolilo, oxatiolilo, dioxanilo, dioxinilo, dioxazolilo, oxatiozolilo, oxazolonilo, piperazinilo, morfolino, tiomorfolinilo, 3-oxomorfolinilo, ditianilo, tritianilo y oxazinilo.

[0049] El término «heteroarilo», tal como se utiliza en la presente, representa un anillo monocíclico, bicíclico o tricíclico estable de hasta 7 átomos en cada anillo, donde al menos un anillo es aromático y al menos un anillo contiene de 1 a 4 heteroátomos seleccionados del grupo que consiste en O, N y S. Los grupos heteroarilo dentro del alcance de esta definición incluyen, sin carácter limitante, acridinilo, carbazolilo, cinnolinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, pirazolilo, indolilo, isoindolilo, 1H,3H-1-oxoisoindolilo, benzotriazolilo, furanilo, tienilo, tiofenilo, benzotienilo, benzofuranilo, benzodioxano, benzodioxina, quinolinilo, isoquinolinilo, oxazolilo, isoxazolilo, benzoxazolilo, imidazolilo, pirazinilo, piridazinilo, piridinilo, pirimidinilo, pirrolilo, tetrahidroquinolinilo, tiazolilo, isotiazolilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,2,4-tiadiazolilo, 1,3,5-triazinilo, 1,2,4-triazinilo, 1,2,4,5-tetrazinilo, tetrazolilo, carbazolilo, xantenilo, acridinilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxazinilo, azepinilo, oxepinilo y tiepinilo. Los grupos heteroarilo particulares tienen anillos de 5 o 6 miembros, tales como pirazolilo, furanilo, tienilo, oxazolilo, indolilo, isoindolilo, 1H,3H-1-oxoisoindolilo, isoxazolilo, benzoxazolilo, imidazolilo, pirazinilo, piridazinilo, piridinilo, pirimidinilo, pirrolilo, tiazolilo, isotiazolilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo y 1,2,4-oxadiazolilo, y 1,2,4-tiadiazolilo.

[0050] Cada alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, arilo, heterociclilo y heteroarilo, ya sea una entidad individual o como parte de una entidad más grande, puede estar opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes opcionales seleccionados del grupo que consiste en alquilo C^1-6, alquenilo C^2-6, cicloalquilo C^3-6, oxo (=O), -OH, -SH, (alquil C^1-6)O-, (alquenil C^2-6)O-, (cicloalquil C^3-6)O-, (alquil C^1-6)S-, (alquenil C^2-6)S-, (cicloalquil C^3-6)S-, -CO²H, -CO²(alquilo C^1.6), -NH², -NH(alquilo C^1.6), -N(alquilo C ^h , -NH(fenilo), -N(fenilo)², -N(alquil C^1-6)(fenilo), -CN, -NO², -halógeno, -CF3, -OCF3, -SCF3, -CHF2, -OCHF2, -SCHF2, -fenilo, -heterociclilo, -heteroarilo, -Oheteroarilo, -Oheterociclilo, -Ofenilo, -C(O)fenilo y -C(O)(alquilo C1-6). Los ejemplos de sustituyentes adecuados incluyen, sin carácter limitante, metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, sec-butilo, fert-butilo, vinilo, metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, metiltio, etiltio, propiltio, isopropiltio, butiltio, hidroxi, hidroximetilo, hidroxietilo, hidroxipropilo, hidroxibutilo, fluoro, cloro, bromo, yodo, ciano, nitro, -CO²H, -CO²CH3, trifluorometilo, trifluorometoxi, trifluorometiltio, difluorometilo, difluorometoxi, difluorometiltio, morfolino, amino, metilamino, dimetilamino, fenilo, fenoxi, fenilcarbonilo, bencilo y acetilo.

[0051]La expresión «bioisóstero de ácido carboxílico» se refiere a un grupo que es fisioquímicamente o topológicamente similar al grupo ácido carboxílico o carboxilato. Los ejemplos de bioisósteros de ácido carboxílico adecuados incluyen, sin carácter limitante, tetrazol, tetrazolato, -CONH-tetrazol, oxadiazol, fosfato (-PO3H2), -C(OH)(CF3)2, alquilsulfonamidas, N-(aril o heteroaril)sulfonamidas, acilsulfonamidas y ácido sulfónico (-SO³H) [remítase a Patani y LaVoie, 1996]. Los ejemplos de equivalentes isostéricos sulfonamídicos de grupos carboxi incluyen -C(=O)NHSO2Ra, -C(=O)NHSO²N(Ra)², -C(=O)NHSO²NH(Ra), -SO²NHC(=O)Ra, -SO²NHC(=O)NHRa, -SO²NHRa y -NHSO²Ra, donde Ra se selecciona del grupo que consiste en alquilo C1_6, alquenilo C2_6, cicloalquilo C3-8, arilo, heterociclilo, heteroarilo, -CF3 y -CHF2.

[0052] Los compuestos de la invención pueden estar en forma de sales farmacéuticamente aceptables. Sin embargo, se apreciará que las sales no farmacéuticamente aceptables también entran dentro del alcance de la invención ya que estas pueden ser útiles como intermedios en la preparación de sales farmacéuticamente aceptables o pueden ser útiles durante su almacenamiento o transporte. Las sales farmacéuticamente aceptables adecuadas incluyen, sin carácter limitante, sales de ácidos inorgánicos farmacéuticamente aceptables tales como ácido clorhídrico, sulfúrico, fosfórico, nítrico, carbónico, bórico, sulfámico y bromhídrico, o sales de ácidos orgánicos farmacéuticamente aceptables tales como ácido acético, propiónico, butírico, tartárico, maleico, hidroximaleico, fumárico, cítrico, láctico, múcico, glucónico, benzoico, succínico, oxálico, fenilacético, metanosulfónico, toluenosulfónico, bencenosulfónico, salicílico sulfanílico, aspártico, glutámico, edético, esteárico, palmítico, oleico, láurico, pantoténico, tánico, ascórbico y valérico.

[0053] Las sales de bases incluyen, sin carácter limitante, las formadas con cationes farmacéuticamente aceptables, tales como sodio, potasio, litio, calcio, magnesio, amonio y alquilamonio.

[0054] Los grupos que contienen nitrógeno de carácter básico se pueden cuaternizar con agentes tales como un haluro de alquilo inferior, tal como cloruros, bromuros y yoduros de metilo, etilo, propilo y butilo; sulfatos de dialquilo como sulfato de dimetilo y dietilo; y otros.

[0055] También se reconocerá que los compuestos de la invención pueden poseer centros asimétricos y, por lo tanto, pueden existir en más de una forma estereoisomérica. La invención también se refiere, por tanto, a compuestos en forma isomérica sustancialmente pura en uno o más centros asimétricos, por ejemplo, más de aproximadamente un 90% de ee, tal como aproximadamente un 95% o 97% de ee o más de un 99% de ee, así como mezclas, incluidas mezclas racémicas, de estos. Tales isómeros se pueden preparar mediante síntesis asimétrica, por ejemplo, utilizando intermedios quirales, o mediante resolución quiral. Los compuestos de la invención pueden existir como isómeros geométricos. La invención también se refiere a compuestos en cis (Z) o trans (E) sustancialmente puros, o mezclas de estos.

Compuestos de la invención

[0056]En un primer aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I):

donde R¹es -C(=O)CHR6Rz, -C(=O)NR6Rz, -C(=O)CH²CHR⁶Rz, -C(=O)CH=CR6Rz, -C(=S)CHR6Rz, -C(=S)NR6Rz, -C(=S)CH2CHR6R7, -C(=S)CH=CR6R7, -C(=NR8)CHR6R7, -C(=NR8)NR6R7, -C(=NR8)CH2CHR6R7 y -C(=NR8)CH=CR6R7; R3 es hidrógeno y R2 es -C(=O)NHSO²N(alquilo C^1-6)²;

R4 es fenilo, benzoxazol, 4-feniloxazol, 1 -piperidina, 4-fenil-1 -piperidina, -(alquil C1-6)fenilo, -O(alquil C1-6)fenilo, -(alquenil C^2-6)fenilo, -O(alquenil C^2-6)fenilo, -(alquinil C^2-6)fenilo, -O(alquinil C^2-6)fenilo, -SO²NHfenilo, -SO²NH(alquil C^1-6)fenilo, -SO2NH(alquenil C2-6)fenilo, -SO2NH(alquinil C26)fenilo, -NHSO2fenilo, -NHSO2(alquil C1-6)fenilo, -NHSO2(alquenil C2-6)fenilo, -NHSO²(alquinil C²⁶)fenilo, -NHC(=O)NHfenilo, -NHC(=O)NH(alquil C^1-6)fenilo, -NHC(=O)NH(alquenil C^2-6)fenilo, -NHC(=O)NH(alquinil C2-6)fenilo, -NHCO2fenilo, -NHCO2(alquil C1-6)fenilo, -NHCO2(alquenil C2-6)fenilo, -NHCO2(alquinil C2-6)fenilo;

R⁵es -OH, -Oalquilo C^1-6u -OC(R10)3;

R6 y R7 son independientemente hidrógeno, -alquilo C1-6, cicloalquilo, cicloalquenilo, arilo, heterociclilo, heteroarilo, -CH²arilo, -CH²cicloalquilo, -CH²cicloalquenilo, -CH²heterociclilo o -CH²heteroarilo; siempre que R6 y R⁷no sean ambos hidrógeno;

Re es hidrógeno, -alquilo Ci-6, arilo o -(alquil Ci-6)arilo;

cada R10 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y halógeno; y

o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

[0057] En realizaciones particulares de fórmula (I), se aplican uno o más de los siguientes:

R1 es -C(=O)CHR6R7, -C(=O)NR6R7, especialmente -C(=O)CH(aril)(arilo), -C(=O)CH(aril)(cicloalquilo), -C(=O)CH(cicloalquil)(cicloalquilo), -C(=O)CH(aril)(alquilo), -C(=O)N(aril)(arilo), -C(=O)N(aril)(cicloalquilo), -C(=O)N(cicloalquil)(cicloalquilo) o -C(=O)N(aril)(alquilo), donde cada grupo arilo o cicloalquilo está opcionalmente sustituido; más especialmente -C(=O)CH(fenil)(fenilo), -C(=O)CH(fenil)(ciclohexilo), -C(=O)N(fenil)(fenilo) o -C(=O)N(fenil)(ciclohexilo), donde cada grupo fenilo o ciclohexilo está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados entre -alquilo C^1-3, -Oalquilo C^1-3y halo, especialmente metilo, metoxi y fluoro; de la forma más especial donde R1 es -C(=O)CH(fenil)(fenilo) y -C(=O)N(fenil)(fenilo);

R⁵es hidrógeno, -OH, -Oalquilo C^1-6u -OC(R¹⁰)³; especialmente -OH, -Oalquilo C^1-6u OC(R¹⁰)³, más especialmente -OH, -Oalquilo C1-3, -OCF3 u -OCHF2; de la forma más especial, -OH, -OCH3, -OCF3 u -OCHF2;

R6 y R7 se seleccionan independientemente entre fenilo y ciclohexilo, especialmente donde R6 y R7 son ambos fenilo; y R8 es hidrógeno, metilo, etilo o fenilo.

[0058] En algunas realizaciones, R2 tiene una estereoquímica S.

[0059] En algunas realizaciones, R4 no es -(alquil C^1-6)arilo ni -O(alquil C^1-6)arilo. En algunas realizaciones, R5 no es -Oalquilo C1-6.

[0060] Son compuestos particulares:

[0061]Los compuestos particulares de fórmula (I) incluyen los compuestos de la Referencia 33, Referencia 34, 40, Referencia 41, 48, 49, Referencia 50 y Referencia 51, especialmente Referencia 33, Referencia 34, 40, 48, 49, Referencia 50 y Referencia 51, más especialmente Referencia 34, 40, 48 y Referencia 50.

[0062]En algunas realizaciones, los compuestos de fórmula (I) son antagonistas selectivos del receptor AT². En realizaciones particulares, los antagonistas selectivos del receptor AT²tienen una CI⁵⁰en el receptor AT²< ^{1 00}nM y una CI50 en el receptor AT1> 100 000 nM (10 pM) utilizando las metodologías de ensayo descritas en los Ejemplos biológicos.

[0063]Los compuestos de la invención se preparan mediante métodos conocidos en la técnica a partir de materiales de partida comercializados y mediante métodos conocidos en la técnica. Por ejemplo, un benzaldehído disustituido en las posiciones 2,3 adecuado tal como 2,3-dihidroxibenzaldehído se puede funcionar para proporcionar los sustituyentes adecuados para R⁴y R⁵tal como se muestra en el Es uema 1:

Esquema 1

[0064] Por ejemplo, la reacción del grupo 2-hidroxi con un haluro de arilalquilo tal como bromuro de bencilo, en presencia de una base suave tal como Na²CO³o K²CO³en un disolvente polar tal como metanol o etanol o acetona proporciona el benzaldehído disustituido.

[0065] A continuación, el aldehído se condensa con hidantoína en condiciones ligeramente ácidas y se somete a una reducción tal como se describe en el documento US 5246943 se muestra en el Es uema 2:

Esquema 2

[0066]Otra opción es el uso de la reacción de Horner-Wadsworth-Emmons donde el aldehído se hace reaccionar con un carbanión de tipo fosfonato estabilizado, seguido de una reducción asimétrica utilizando un catalizador. Los derivados de fenilalanina disustituidos se pueden preparar mediante síntesis asimétrica, por ejemplo, mediante los métodos de Burk. et al., 1993.

[0067]El derivado de fenilalanina se puede ciclar para obtener una tetrahidroisoquinolina utilizando la reacción de Pictet-Spengler tal como se describe en el documento US 5246943 y se muestra en el Esquema 3:

1

[0068] R se puede introducir mediante la formación de una amida con un ácido carboxílico adecuado y el nitrógeno anular. La formación de amidas es muy conocida en la técnica y puede implicar la activación del ácido carboxílico, por ejemplo, el grupo carboxi se activa mediante la formación de un cloruro de acilo, carbodiimida, triazol o una sal de uronio o fosfonio de un anión no nucleófilo. En la técnica se conocen los grupos activantes adecuados, que incluyen diciclohexilcarbodiimida (DCC), diisopropilcarbodiimida (DIC), 1-etil-3-(dimetilaminopropil)carbodiimida (EDCI), 1-hidroxibenzotriazol (HOBt), 1-hidroxi-7-azabenzotriazol (HOAt), 2-ciano-2-(hidroxiimino)acetato de etilo (Oxyma Pure), hexafluorofosfato de 0-benzotriazol-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HBTU), hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HATU), tetrafluorofosfato de 0-(6-cloro-1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (HCTU), tetrafluoroborato de 0-benzotriazol-1-il-N,N,N'N'-tetrametiluronio (TBTU), hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tripirrolidinofosfonio (PyBOP); hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)-tris-(dimetilamino)fosfonio (BOP), hexafluorofosfato de (1-ciano-2-etoxi-2-oxoetilidenaminooxi)dimetilaminomorfolinocarbenio (COMU) y tetrafluoroborato de 0-[(etoxicarbonil)cianometilenamino]-N,N,N ',N'-tetrametiluronio (TOTU).

[0069] El ácido carboxílico de la tetrahidroisoquinolina puede requerir protección durante la amidación del átomo de nitrógeno de la tetrahidroisoquinolina. En la técnica se conocen los grupos protectores adecuados y se pueden consultar en Greene y Wutz, Protective Groups in 0rganic Synthesis, 3.a Edición, John Wiley & Sons.

[0070] En algunos casos, el ácido carboxílico utilizado para introducir Ri puede activarse en forma de una amida activa cíclica. El uso de una amida activa cíclica del ácido 2,2-difeniletanoico reduce la necesidad de esta protección temporal del ácido isoquinolincarboxílico ya que la amida activa cíclica es más selectiva para la reacción con el nitrógeno de la isoquinolina. La amida activa cíclica se puede formar mediante la reacción del cloruro del ácido ²,²-difeniletanoico con un heterociclo que contiene nitrógeno de 5 miembros. Los ejemplos de heterociclos adecuados incluyen pirazol, pirrol, imidazol, 1,2,3-triazol y 1,2,4-triazol.

[0071] El ácido carboxílico en R²o R³puede modificarse para proporcionar un bioisóstero de ácido carboxílico u otro grupo tal como un alcohol, amida o nitrilo. La conversión de un ácido carboxílico en alcohol mediante reducción, amida mediante amidación y nitrilo mediante calentamiento con un halonitrilo son métodos muy conocidos en la técnica.

[0072]El ácido carboxílico también se puede convertir fácilmente en una sulfonamida mediante la reacción con una sulfonamlda o sulfonllurea adecuada. En el esquema 4 se muestra un ejemplo:

O o

Esquema 4

donde R es la tetrahidroisoquinolina y cada R' es independientemente un grupo tal como hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heteroarilo o heterociclilo.

[0073]Se pueden preparar bioisósteros de ácido tetrazolcarboxílico mediante el tratamiento de un nitrilo con una azida en presencia de yodo tal como se muestra en el esquema 5:

Esquema 5

[0074]Durante cualquier procedimiento sintético, los grupos funcionales reactivos pueden requerir protección para evitar una reacción indeseada y para garantizar la reacción en un sitio especificado. En la técnica se conocen los grupos protectores adecuados y se pueden consultar en Greene y Wutz, ibid.

Métodos de la invención

[0075] En un aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en el tratamiento o la prevención de los síntomas de una afección neuropática.

[0076] Los compuestos de fórmula (I) son eficaces en la prevención o atenuación de los síntomas de afecciones neuropáticas que incluyen afecciones neuropáticas primarias y secundarias. De acuerdo con la presente invención, los compuestos de fórmula (I) pueden actuar para tratar, prevenir o atenuar uno o más síntomas asociados con afecciones neuropáticas que incluyen, sin carácter limitante, dolor neuropático, hiperestesia, hiperalgesia, alodinia y/o dolor urente espontáneo. En algunas realizaciones, el compuesto de fórmula (I) se utiliza para prevenir o atenuar uno o más síntomas asociados con afecciones neuropáticas periféricas, cuyos ejemplos ilustrativos incluyen entumecimiento, debilidad, dolor urente, dolor lancinante y pérdida de reflejos. El dolor puede ser intenso e incapacitante. En algunas realizaciones, el síntoma, que es el objeto de la prevención y/o atenuación, es dolor neuropático. Por consiguiente, en un aspecto relacionado, la invención proporciona un compuesto para su uso en métodos para prevenir y/o atenuar el dolor neuropático en un individuo, que comprenden administrar al individuo una cantidad eficaz que previene o atenúa el dolor de un antagonista del receptor AT², que está convenientemente en forma de una composición farmacéutica.

[0077] Hay muchas causas posibles de la neuropatía y el dolor neuropático, y se comprenderá que la presente invención contempla el uso en el tratamiento o la prevención de síntomas de cualquier afección neuropática independientemente de la causa. En algunas realizaciones, las afecciones neuropáticas son el resultado de enfermedades de los nervios (neuropatía primaria) y neuropatía que es provocada por una enfermedad sistémica (neuropatía secundaria) tal como, sin carácter limitante: neuropatía diabética; neuropatía asociada con el herpes zóster (culebrilla); neuropatía asociada con la insuficiencia renal crónica; neuropatía amiloidea; neuropatías sensitivas asociadas al VIH; neuropatías hereditarias sensitivas y motoras (HMSN, por sus siglas en inglés); neuropatías hereditarias sensitivas (HSN, por sus siglas en inglés); neuropatías hereditarias sensitivas y neurovegetativas; neuropatías hereditarias con ulceromutilación; neuropatía por nitrofurantoína; neuropatía tomacular; neuropatía provocada por una carencia alimenticia, neuropatía provocada por una insuficiencia renal y el síndrome de dolor regional complejo. Otras causas incluyen actividades repetitivas tales como mecanografiar o trabajar en una cadena de montaje, medicaciones que se sabe que provocan neuropatía periférica tales como varios antirretrovíricos (ddC (zalcitabina) y ddI (didanosina), antibióticos (metronidazol, un antibiótico utilizado para la enfermedad de Crohn, isoniazida utilizada para la tuberculosis), compuestos áuricos (utilizados para la artritis reumatoide), algunos antineoplásicos (tales como vincristina y otros) y muchos otros. También hay constancia de compuestos químicos que provocan neuropatía periférica que incluyen alcohol, plomo, arsénico, mercurio y plaguicidas organofosforados. Algunas neuropatías periféricas se asocian con procesos infecciosos (tales como el síndrome de Guillain-Barré). En ciertas realizaciones, la afección neuropática es una afección neuropática periférica, que es convenientemente dolor a consecuencia de una lesión nerviosa mecánica o neuropatía diabética dolorosa (PDN, por sus siglas en inglés) o una afección relacionada.

[0078] La afección neuropática puede ser aguda o crónica y, con respecto a esto, las personas expertas en la técnica comprenderán que la evolución temporal de una neuropatía variará, en función de su causa subyacente. Con un traumatismo, la aparición de los síntomas puede ser súbita o repentina; sin embargo, los síntomas más graves pueden desarrollarse con el tiempo y persistir durante años. Las neuropatías inflamatorias y algunas metabólicas tienen una evolución semitardía que se prolonga a lo largo de días a semanas. Una evolución prolongada a lo largo de semanas a meses normalmente indica una neuropatía tóxica o metabólica. Una neuropatía crónica, lentamente progresiva a lo largo de muchos años tal como ocurre con una neuropatía diabética dolorosa o con la mayoría de las neuropatías hereditarias o con una afección denominada polirradiculoneuropatía desmielinizante inflamatoria crónica (CIDP, por sus siglas en inglés). Las condiciones neuropáticas con síntomas que recurren y remiten incluyen el síndrome de Guillain-Barré.

[0079] En otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en el tratamiento o la prevención de una afección caracterizada por hipersensibilidad neuronal.

[0080] En algunas realizaciones, la afección caracterizada por hipersensibilidad neuronal es una afección hiperalgésica tal como la fibromialgia. En otras realizaciones, la afección es el síndrome del intestino irritable que se caracteriza por hipersensibilidad neuronal en el intestino.

[0081] En otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso en el tratamiento o la prevención de un trastorno asociado con una regeneración nerviosa atípica.

[0082] En algunas realizaciones, el trastorno asociado con una regeneración nerviosa atípica también incluye la hipersensibilidad neuronal. Los ejemplos de trastornos asociados con una regeneración nerviosa atípica son mastalgia, cistitis intersticial y vulvodinia. En otras realizaciones, el trastorno es una neuropatía inducida por quimioterapia oncológica.

[0083] En otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en el tratamiento o la prevención del dolor inflamatorio.

[0084] El dolor relacionado con la inflamación puede ser agudo o crónico y puede deberse a numerosas afecciones que se caracterizan por la inflamación que incluyen, sin limitación, quemaduras tales como quemaduras químicas, friccionales o químicas, enfermedades autoinmunitarias tales como la artritis reumatoide y osteoartritis, enfermedad intestinal inflamatoria tal como la enfermedad de Crohn y la colitis, y otras enfermedades inflamatorias tales como la enfermedad intestinal inflamatoria, carditis, dermatitis, miositis, neuritis y vasculopatías del tejido conjuntivo.

[0085] En un aspecto adicional, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en el tratamiento o la prevención de la alteración de la velocidad de conducción nerviosa.

[0086] La alteración de la velocidad de conducción nerviosa es un síntoma de daño o disfunción nerviosa y puede estar presente como síntoma de un gran número de enfermedades o trastornos, particularmente enfermedades o trastornos que presentan parestesia como síntoma. En algunas realizaciones, la alteración de la velocidad de conducción nerviosa está asociada con una afección neuropática tal como se ha descrito anteriormente. En otras realizaciones, la alteración de la velocidad de conducción nerviosa está asociada con el síndrome del túnel carpiano, la neuropatía cubital, el síndrome de Guillain-Barré, la distrofia muscular facioescapulohumeral y la hernia discal. En algunas realizaciones, los síntomas de la alteración de la velocidad de conducción nerviosa son síntomas no dolorosos.

[0087] La velocidad de conducción nerviosa se determina evaluando la conducción eléctrica de nervios motores y sensitivos en el cuerpo. La velocidad de conducción de los nervios motores se mide mediante la estimulación de un nervio periférico y midiendo el tiempo que se tarda en detectar el impulso eléctrico en el músculo asociado con el nervio. El tiempo que se tarda se mide en milisegundos y se convierte en una velocidad (m/s) teniendo en cuenta la distancia recorrida. La conducción de los nervios sensitivos se evalúa de un modo similar mediante la estimulación de un nervio periférico y el registro en un sitio sensitivo tal como un dedo o una almohadilla plantar.

[0088] En un aspecto adicional más de la invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en la producción de analgesia.

[0089] En algunas realizaciones, el sujeto es un sujeto que padece una afección neuropática, una afección inflamatoria, una alteración de la velocidad de conducción nerviosa, una afección caracterizada por hipersensibilidad neuronal o un trastorno asociado con una regeneración nerviosa atípica. En otras realizaciones, el sujeto es un sujeto que corre el riesgo de desarrollar dolor neuropático, dolor inflamatorio, dolor relacionado con una alteración de la velocidad de conducción nerviosa, una afección caracterizada por hipersensibilidad neuronal o un trastorno asociado con una regeneración nerviosa atípica.

[0090] En otro aspecto más de la invención, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en el tratamiento o la prevención de un trastorno proliferativo celular.

[0091] En algunas realizaciones, el trastorno proliferativo celular es un cáncer, especialmente donde el cáncer se selecciona entre leucemia, melanoma, cáncer de próstata, cáncer de mama, cáncer ovárico, carcinoma basocelular, carcinoma escamocelular, sarcoides, fibrosarcoma, cáncer de colon, cáncer broncopulmonar y otros cánceres de tumor sólido.

[0092] En otras realizaciones, el trastorno proliferativo celular es un trastorno proliferativo no canceroso. Los ejemplos de tales trastornos proliferativos no cancerosos incluyen trastornos dermatológicos tales como verrugas, queloides, psoriasis, hipersarcosis y también la reducción en el tejido cicatricial y la remodelación cosmética.

[0093] En un aspecto adicional, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en el tratamiento o la prevención de un trastorno asociado con un desequilibrio entre la reabsorción ósea y la osteogénesis.

[0094] En algunas realizaciones, el trastorno asociado con un desequilibrio entre la reabsorción ósea y la osteogénesis es la osteoporosis.

[0095] Los sujetos, individuos o pacientes que se van a tratar son sujetos mamíferos que incluyen, sin carácter limitante, seres humanos, primates, animales de ganadería tales como ovejas, vacas, cerdos, caballos, burros y cabras; animales de experimentación de laboratorio tales como ratones, ratas, conejos y cobayas; animales de compañía tales como gatos y perros o animales salvajes en cautividad tales como los cautivos en zoológicos. En una realización particular, el sujeto es un ser humano.

[0096] Una «cantidad eficaz» significa una cantidad necesaria para conseguir la respuesta deseada al menos parcialmente, o para retrasar el inicio o inhibir la evolución o detener por completo, el inicio o la evolución de una afección particular que se esté tratando. La cantidad varía dependiendo de la salud y el estado físico del individuo que se vaya a tratar, el grupo taxonómico del individuo que se vaya a tratar, el grado de protección deseado, la formulación de la composición, la evaluación de la situación médica y otros factores relevantes. Cabe esperar que la cantidad entre dentro de un intervalo relativamente amplio que se puede determinar a través de ensayos rutinarios. Una cantidad eficaz en relación con un paciente humano, por ejemplo, puede entrar en el intervalo de aproximadamente 0,1 ng por kg de peso corporal a 1 g por kg de peso corporal por dosificación. La dosificación está preferentemente en el intervalo de 1 pg a 1 g por kg de peso corporal por dosificación, tal como en el intervalo de 1 mg a 1 g por kg de peso corporal por dosificación. En una realización, la dosificación está en el intervalo de 1

500 mg por kg de peso cor dosificación. En otra realización, la dosificación está en el intervalo de 1 mg a 250 mg por kg de peso cor dosificación. En otra realización más, la dosificación está en el intervalo de 1 mg a 100 mg por kg de peso corporal por dosificación, tal como hasta 50 mg por kg de peso corporal por dosificación. En otra realización más, la dosificación está en el intervalo de 1 pg a 1 mg por kg de peso corporal por dosificación. Las pautas posológicas se pueden ajustar para proporcionar la respuesta terapéutica óptima. Por ejemplo, se pueden administrar varias dosis divididas a diario, semanalmente, mensualmente o en otros intervalos de tiempo adecuados, o la dosis se puede reducir proporcionalmente según indiquen las exigencias de la situación.

[0097] La referencia en la presente a «tratamiento» y «prevención» se ha de considerar en su contexto más amplio. El término «tratamiento» no implica necesariamente que un sujeto se trate hasta su recuperación total. El «tratamiento» también puede reducir la gravedad de una afección existente. El término «prevención» no significa necesariamente que el sujeto no acabe por contraer una afección patológica. Se puede considerar que el término «prevención» incluye retrasar el inicio de una afección particular. Por consiguiente, el tratamiento y la prevención incluyen la mejoría de los síntomas de una afección particular o prevenir o reducir de otro modo el riesgo de desarrollar una afección particular.

[0098] En algunas realizaciones, los compuestos de fórmula (I) o sus sales farmacéuticamente aceptables de estos se pueden administrar junto con otra terapia. La administración puede ser en una única composición o en composiciones separadas de forma simultánea o secuencial de tal modo que ambos compuestos o terapias sean activos a la vez en el cuerpo.

[0099] En algunas realizaciones, los compuestos de fórmula (I) o sus sales farmacéuticamente aceptables se administran junto con otra terapia para tratar el dolor neuropático o inflamatorio o la afección preexistente que esté provocando el dolor neuropático o inflamatorio, u otra terapia para tratar afecciones caracterizadas por hipersensibilidad neuronal, trastornos asociados con una regeneración nerviosa atípica, trastornos proliferativos o trastornos asociados con un desequilibrio entre la reabsorción ósea y la osteogénesis. En algunas realizaciones, la cantidad del segundo fármaco se puede reducir cuando la administración es junto con un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

[0100] Los fármacos adicionales adecuados para tratar el dolor incluyen opiáceos tales como morfina, codeína, dihidrocodeína, hidrocodona, acetildihidrocodeína, oxicodona, oximorfona y buprenorfina, y fármacos antinflamatorios no esteroideos (AINE) tales como aspirina, ibuprofeno, naproxeno, acetaminofeno, diflunisal, salsalato, fenacetina, fenoprofeno, cetoprofeno, flurbiprofeno, oxaprozina, loxoprofeno, indometacina, sulindaco, etodolaco, cetorolaco, diclofenaco, nabumetona, ácido mefenámico, ácido meclofenámico, ácido flufenámico, ácido tolfenámico, celecoxib, parecoxib, lumaricoxib, etoricoxib, firocoxib, rimesulida y licofelona.

[0101] Los ejemplos de fármacos para tratar neuropatías incluyen duloxetina, pregabalina, gabapentina, fenitoína, carbamazepina, levocarnitina, antidepresivos tricíclicos tales como amitriptilina y bloqueantes de los canales de sodio tales como lidocaína.

[0102] Los ejemplos de fármacos quimioterápicos para trastornos proliferativos incluyen cisplatino, carboplatino, camptotecina, carmustina, ciclofosfamida, dactinomicina, daunorrubicina, dexametasona, docetaxel, doxorrubicina, etopósido, epirrubicina, everolimus, gemcitibina, goserelina, trastuzumab (Herceptin®), idarrubicina, interferón-alfa, irinotecán, metotrexato, mitomicina, oxaliplatino, paclitaxel, raloxifeno, estreptozocina, tamoxifeno, topotecán, vinblastina, vincristina, abiraterona, fluorouracilo, denosumab, imatinib, geftinib, lapatinib, pazopanib, rituximab, sunitinib, erlotinib y vorinistat.

[0103] Los ejemplos de fármacos para tratar trastornos asociados con un desequilibrio entre la osteogénesis y la reabsorción ósea incluyen bisfosfonatos tales como alendronato, risedronato e ibandronato de sodio, raloxifeno, calcitonina, teriparatida, ranelato de estroncio o complementos de calcio.

[0104] Los ejemplos de fármacos utilizados para tratar afecciones caracterizadas por hipersensibilidad neuronal, tales como el síndrome del intestino irritable, incluyen antagonistas del receptor ⁵HT³tales como alosetrón (Lotronex®).

[0105] Los antagonistas del receptor AT²de la invención también son útiles en combinación con radioterapia en pacientes con cáncer.

Composiciones de la invención

[0106] Aunque es posible que, para su uso en terapia, un compuesto de la invención se pueda administrar como un agente químico puro, es preferible presentar el principio activo como una composición farmacéutica.

[0107] Por tanto, en un aspecto adicional de la invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este y al menos un portador farmacéuticamente aceptable.

[0108] El portador o portadores deben ser «aceptables» en el sentido de ser compatibles con los otros ingredientes de la composición y no perjudiciales para su receptor.

[0109] Las formulaciones farmacéuticas incluyen aquellas adecuadas para la administración oral, rectal, nasal, tópica (que incluye yugal y sublingual), vaginal o parenteral (que incluye intramuscular, subcutánea e intravenosa) o en una forma adecuada para la administración por inhalación o insuflación. Por tanto, los compuestos de la invención, junto con un adyuvante, portador, excipiente o diluyente convencional, se pueden conformar en forma de composiciones farmacéuticas y dosificaciones unitarias de estas, y en tal forma se pueden emplear como sólidos, tales como comprimidos o cápsulas rellenas, o líquidos tales como disoluciones, suspensiones, emulsiones, elixires o cápsulas rellenas de estos, todos ellos para el uso oral, en forma de supositorios para la administración rectal; o en forma de disoluciones inyectables estériles para el uso parenteral (que incluye el subcutáneo). Tales composiciones farmacéuticas y formas farmacéuticas unitarias de estas pueden comprender ingredientes convencionales en proporciones convencionales, con o sin compuestos o principios activos adicionales, y tales formas farmacéuticas unitarias pueden contener cualquier cantidad eficaz adecuada del principio activo acorde con el intervalo de dosificación diaria previsto que se vaya a emplear. Las formulaciones que contienen diez (10) miligramos de principio activo o, en términos más amplios, de 0,1 a dos cientos (200) miligramos, por comprimido, son, por consiguiente, formas farmacéuticas unitarias representativas adecuadas. Los compuestos de la presente invención se pueden administrar en una amplia variedad de formas farmacéuticas orales y parenterales. Será obvio para los expertos en la técnica que las siguientes formas farmacéuticas pueden comprender, como componente activo, ya sea un compuesto de la invención o una sal o derivado farmacéuticamente aceptable del compuesto de la invención.

[0110] Para preparar composiciones farmacéuticas a partir de los compuestos de la presente invención, los portadores farmacéuticamente aceptables pueden ser sólidos o líquidos. Los preparados en forma sólida incluyen polvos, comprimidos, pastillas, cápsulas, obleas, supositorios y gránulos dispersables. Un portador sólido puede ser una o más sustancias que también pueden actuar como diluyentes, agentes saborizantes, solubilizantes, lubricantes, agentes de suspensión, aglutinantes, conservantes, agentes disgregantes de comprimidos o un material encapsulante.

[0111] En los polvos, el portador es un sólido finamente dividido que está en una mezcla con el componente activo finamente dividido.

[0112] En los comprimidos, el componente activo está mezclado con el portador que tiene la capacidad de unión necesaria en proporciones adecuadas y compactado en la forma y el tamaño deseados.

[0113] Los polvos y comprimidos contienen preferentemente de un cinco o diez a aproximadamente un setenta por ciento del compuesto activo. Los portadores adecuados son carbonato de magnesio, estearato de magnesio, talco, azúcar, lactosa, pectina, dextrina, almidón, gelatina, tragacanto, metilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica, una cera de bajo punto de fusión, manteca de cacao y similares. Se pretende que el término «preparado» incluya la formulación del compuesto activo con material encapsulante como portador que proporciona una cápsula en la que el componente activo, con o sin portadores, está rodeado por un portador, que, por tanto, está asociado con él. De forma similar, se incluyen obleas y grageas. Los comprimidos, polvos, cápsulas, pastillas, obleas y grageas se pueden utilizar como formas sólidas adecuadas para la administración oral.

[0114] Para preparar supositorios, en primer lugar se funde una cera de bajo punto de fusión, tal como una mezcla de glicéridos de ácidos grasos o manteca de cacao, y el componente activo se dispersa en ella de forma homogénea, tal como agitando. La mezcla homogénea fundida se vierte entonces en moldes de tamaño conveniente, se deja enfriar y de este modo solidificar.

[0115] Las formulaciones adecuadas para la administración vaginal se pueden presentar como óvulos vaginales, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o espráis que contienen, además del principio activo, portadores tales como los conocidos en la técnica como apropiados.

[0116] Los preparados en forma líquida incluyen disoluciones, suspensiones y emulsiones, por ejemplo, disoluciones acuosas o de agua-propilenglicol. Por ejemplo, los preparados líquidos de inyección parenteral se pueden formular como disoluciones en disolución acuosa de polietilenglicol.

[0117] Los compuestos de acuerdo con la presente invención se pueden formular, por tanto, para la administración parenteral (por ejemplo, mediante inyección, por ejemplo, inyección en bolo o infusión continua) y se pueden presentar en forma de dosis unitaria en ampollas, jeringas precargadas, infusión de bajo volumen o en recipientes multidosis con un conservante añadido. Las composiciones pueden adoptar formas tales como suspensiones, disoluciones o emulsiones en vehículos oleosos o acuosos, y pueden contener agentes de formulación tales como agentes de suspensión, estabilizantes y/o dispersantes. Como alternativa, el principio activo puede estar en forma de polvo, obtenido mediante el aislamiento aséptico de un sólido estéril o mediante la liofilización de una disolución, para su constitución con un vehículo adecuado, por ejemplo, agua estéril sin pirógenos, antes de su uso.

[0118] Se pueden preparar disoluciones acuosas adecuadas para el uso oral disolviendo el componente activo en agua y añadiendo colorantes, saborizantes, agentes estabilizantes y espesantes adecuados, según se desee.

[0119] Las suspensiones acuosas adecuadas para el uso oral se pueden preparar dispersando el componente activo finamente dividido en agua con material viscoso, tal como gomas naturales o sintéticas, resinas, metilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica u otros agentes de suspensión muy conocidos.

[0120] También se incluyen preparados en forma sólida que están diseñados para convertirlos, poco antes de su uso, en preparados en forma líquida para la administración oral. Tales formas líquidas incluyen disoluciones, suspensiones y emulsiones. Estos preparados pueden contener, además del componente activo, colorantes, saborizantes, estabilizantes, tampones, edulcorantes artificiales y naturales, dispersantes, espesantes, agentes solubilizantes y similares.

[0121] Para la administración tópica a la epidermis, los compuestos de acuerdo con la invención se pueden formular como pomadas, cremas o lociones, o como un parche transdérmico. Las pomadas y cremas se pueden formular, por ejemplo, con una base acuosa u oleosa con la adición de agentes espesantes y/o gelificantes adecuados. Las lociones se pueden formular con una base acuosa u oleosa, y en general también contendrán uno o más agentes emulsionantes, agentes estabilizantes, agentes dispersantes, agentes de suspensión, agentes espesantes o agentes colorantes.

[0122] Las formulaciones adecuadas para la administración tópica en la boca incluyen grageas que comprenden el agente activo en una base con sabor, normalmente sacarosa y goma arábiga o tragacanto; pastillas que comprenden el principio activo en una base inerte tal como gelatina y glicerina o sacarosa y goma arábiga; y colutorios que comprenden el principio activo en un portador líquido adecuado.

[0123] Las disoluciones o suspensiones se aplican directamente en las fosas nasales por medios convencionales, por ejemplo, con un cuentagotas, pipeta o espray. Las formulaciones se pueden proporcionar en forma de monodosis o multidosis. En el último caso de un cuentagotas o pipeta, el paciente puede conseguir esto administrando un volumen predeterminado, apropiado de la disolución o suspensión. En el caso de un espray, esto se puede conseguir, por ejemplo, por medio de una bomba dosificadora de espray atomizante. Para mejorar el suministro y la retención nasales, los compuestos de acuerdo con la invención se pueden encapsular con ciclodextrinas o formular con sus agentes que se espera que mejoren el suministro y la retención en la mucosa nasal.

[0124] La administración al aparato respiratorio también se puede conseguir por medio de una formulación en aerosol en la que el principio activo se proporciona en un envase presurizado con un propulsor adecuado tal como un clorofluorocarburo (CFC), por ejemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano o diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono u otro gas adecuado. El aerosol también puede contener convenientemente un tensioactivo tal como lecitina. La dosis de fármaco se puede controlar proporcionando una válvula dosificadora.

[0125] Como alternativa, los principios activos se pueden proporcionar en forma de un polvo seco, por ejemplo, una mezcla en polvo del compuesto en una base de polvo adecuada tal como lactosa, almidón, derivados amiláceos tales como hidroxipropilmetilcelulosa y polivinilpirrolidona (PVP).

[0126] Convenientemente, el portador en polvo formará un gel en las fosas nasales. La composición en polvo se puede presentar en forma de dosis unitaria, por ejemplo, en cápsulas o cartuchos de, por ejemplo, gelatina, o en blísteres a partir de los cuales se puede administrar el polvo por medio de un inhalador.

[0127] En formulaciones diseñadas para la administración al aparato respiratorio, incluidas las formulaciones intranasales, el compuesto generalmente tendrá un tamaño de partícula pequeño, por ejemplo, del orden de 1 a 10 micrómetros o menos. Un tamaño de partícula de este tipo se puede obtener por medios conocidos en la técnica, por ejemplo, mediante micronización.

[0128] Cuando se desee, se pueden emplear formulaciones adaptadas para proporcionar una liberación sostenida del principio activo.

[0129] Los preparados farmacéuticos están preferentemente en formas farmacéuticas unitarias. En tal forma, el preparado se subdivide en dosis unitarias que contienen cantidades apropiadas del componente activo. La forma farmacéutica unitaria puede ser un preparado envasado, conteniendo el envase cantidades discretas de preparado, tal como comprimidos, cápsulas y polvos envasados en viales o ampollas. Además, la forma farmacéutica unitaria puede ser una cápsula, comprimido, oblea o gragea de por sí, o puede ser el número apropiado de cualquiera de estos en forma envasada.

[0130] Las composiciones de la invención pueden comprender además principios activos tales como terapias para tratar el dolor neuropático o inflamatorio o la afección preexistente que provoca el dolor neuropático o inflamatorio o terapias para tratar la alteración de la velocidad de conducción nerviosa, afecciones caracterizadas por hipersensibilidad neuronal, trastornos asociados con una regeneración nerviosa atípica, trastornos de proliferación o un trastorno asociado con un desequilibrio entre la reabsorción ósea y la osteogénesis.

[0131] La invención se describirá ahora haciendo referencia a los siguientes Ejemplos que ilustran algunos aspectos preferidos de la presente invención. Sin embargo, se ha de entender que la particularidad de la siguiente descripción de la invención no ha de reemplazar la generalidad de la descripción precedente de la invención.

EJEMPLOS

Abreviaturas:

0132

Métodos generales utilizados en los ejemplos de síntesis

[0133]LC-MS (Agilent):

1. LC: serie 1200 de Agilent Technologies, bomba binaria, detector de haz de diodos. Columna Ultimate AQ-C18, 3 |jm, 2,1*50 mm. Fase móvil: B (MeOH) y A (solución acuosa de HCOOH al 0,07 %). Caudal: 0,4 mL/min a 25 °C. ama:

2. MS: G6110A, LC/MS de cuadrupolo, fuente de iones: ES-API, TIC: 50-900 m/z, fragmentador: 60, flujo del gas de secado: 10 L/min, presión del nebulizador: 35 psi, temperatura del gas de secado: 350 °C, Vcap: 3500 V.

3. Preparación de las muestras: las muestras se disolvieron en metanol a 1-10 jg/mL, después se filtraron a través de una membrana de filtración de 0,22 jm. Volumen de inyección: 1-10 jL.

[0134]LC-MS (Agilent, P-2) (modo de iones positivos) o LC-MS (Agilent, N-2) (modo de iones negativos):

1. LC: serie 1200 de Agilent Technologies, bomba binaria, detector de haz de diodos. Columna Xbridge-C18, 2,5 jm, 2,1*30 mm. Fase móvil: B (MeOH) y A (solución acuosa de HCOOH al 0,07 %). Caudal: 0,5 mL/min a 30 °C. Detector:

1. Preparación de las muestras: las muestras se disolvieron en metanol a 1-10 jg/mL, después se filtraron a través de una membrana de filtración de 0,22 jm. Volumen de inyección: 1-10 jL.

[0135]HPLC analítica:

1. (Se denomina «Aligent») serie 1200 de Agilent Technologies, bomba cuaternaria, detector de haz de diodos.

Columna Ultimate AQ-C18, 5 gm, 4,6x250 mm. Fase móvil: B (MeOH) y A (solución acuosa de TFA al 0,07%). Ca l: 1 mLmin ° . D r: 214 nm 2 4 nm. Ti m r del gradiente: 20 min. Programa:

2. Preparación de las muestras: las muestras se disolvieron en metanol a ~1 mg/mL, después se filtraron a través de una membrana de filtración de 0,22 gm. Volumen de inyección: 1 ~ 10 gL.

[0136]Se denomina «JULY-L»

1. Serie 1200 de Agilent Technologies, bomba cuaternaria, detector de haz de diodos. Columna Nova-pak C18 de Waters, 4 gm, 3,9 x 150 mm. Fase móvil: C (MeOH) y D (solución acuosa de TFA al 0,07%). Caudal: 1,00 mL/min a 30 °C. Detector: 214 nm, 254 nm. Tiempo de parada del gradiente: 15 min. Programas:

Nombre del método: J LY-L l ri r m i

Ejemplo de referencia 1: Preparación del compuesto de referencia 33

1. Procedimiento para la preparación del compuesto 33b

[0138]A una disolución del compuesto 33a (39,95 kg, 262 mol) y carbonato de potasio (39,9 kg, 288 mol) en 300 kg de acetona, se añadió bromuro de bencilo (47,2 kg, 276 mol) a una temperatura comprendida entre 10 y 15 °C. La mezcla se calentó hasta reflujo a 60 °C durante 1,5-2,5 horas y se controló la conversión mediante TLC. Después del consumo del compuesto 33a, se añadieron a la mezcla agua (53 L) y tolueno (115 kg). La fase orgánica se lavó dos veces con salmuera (2 x 59 L) y se evaporó a presión reducida. Se añadió éter isopropílico (232 kg) al sólido residual a 40 °C y, cuando se completó la disolución, se añadieron 427 kg de hexano y la disolución se enfrió hasta 2 °C. El sólido se separó por filtración, se lavó con hexano y se secó a 35 °C durante 56 horas para obtener 35,7 kg del compuesto 33b. La extracción de nuevo de las aguas madre proporcionó otros 7,75 kg de compuesto 33b, que fueron analíticamente idénticos a los de la extracción inicial. Se obtuvo un rendimiento combinado de 43,45 kg (68,3%).

[0140]A una disolución agitada de fosfonato 33c (61,3 kg, 206 mol) y tetrametilguanidina (24,8 kg, 215 mol) en 100 kg de THF, se añadió una disolución del compuesto 33b (43,45 kg, 179 mol) en 100 kg de THF a una temperatura comprendida entre 0 y 5 °C durante un período de 100 minutos. Después de la adición completa de los reactivos, la TLC mostró un consumo completo del compuesto 33b. Se eliminó el THF a presión reducida y se añadió acetato de etilo (129 kg) a la mezcla oleosa remanente. La fase de acetato de etilo se lavó con ácido cítrico al 10% (143 L) y con salmuera al 10% (4 x 39 L). La purificación se realizó mediante cromatografía en columna de sílice con 140 kg de sílice. El producto se eluyó con acetato de etilo:hexano (1:4 p/p). Se evaporaron los disolventes a presión reducida para proporcionar aproximadamente 70 kg (94,4%) del compuesto 33d. La TLC mostró una pureza > 99%.

[0142] En un recipiente a presión de 250 L, se introdujo una disolución que contenía 150 kg de tolueno y aproximadamente 15 kg (36,2 mol) del compuesto 33d. La disolución se desgasificó con nitrógeno 3 veces a 5 bar y se enfrió hasta 15 °C. Durante este tiempo, se preparó una disolución de catalizador combinando el ligando BoPhoz (150 g, 245 mmol, 1.07 eq) y tetrafluoroborato de bis(1,5-ciclooctadieno)rodio (I) (92,6 g, 228 mmol, 1,00 eq.) en 5,0 L de THF con un flujo constante de nitrógeno. Después de la formación completa del complejo, se obtuvo una disolución de color rojo oscuro, se añadió el catalizador preformado a la disolución del compuesto 33d.

[0143] A continuación, el recipiente de 250 L se presurizó dos veces con nitrógeno y tres veces con hidrógeno y la temperatura del recipiente se mantuvo a 15 °C. La reacción se siguió controlando la captación de hidrógeno utilizando un caudalímetro másico. La reacción se agitó a una presión de hidrógeno de 2 bar durante un total de 12 h. El análisis por HPLC quiral de la mezcla de reacción indicó una conversión > 99,9% en el compuesto 33e con más de un 99,5% de ee.

[0144] La disolución se trató con carbón vegetal (0,76 kg) y se filtró a través de sílice (10 kg). El disolvente se eliminó por destilación a presión y el aceite resultante se disolvió con éter isopropílico (234 kg) y se filtró a través de un filtro de 1,2 gm para eliminar cualquier traza de BoPhoz/óxido de BoPhoz. La disolución se evaporó a presión reducida para obtener el compuesto 33e.

[0146]A una disolución de hidróxido de litio (12,2 kg, 290 mol) en 314 L de agua, se añadió una disolución del compuesto 33e (60,3 kg, 145 mol) en THF (200 L) a 17 °C. La reacción se agitó durante una hora y el análisis de TLC indicó una conversión > 99% en el compuesto 33f. Después de la neutralización con ácido cítrico hasta obtener un pH de 5, se evaporó el THF a presión reducida a 33 °C y la mezcla se disolvió con acetato de etilo (272 kg), se lavó con una disolución de ácido cítrico al 10% (160 L) y una disolución de salmuera al 10% (4 x, 118 L en total) para alcanzar un pH de 5. La fase de acetato de etilo se evaporó a presión reducida hasta un volumen final de 100 L. Se añadieron 215 kg de acetato de etilo y se eliminó de nuevo por destilación para reducir el contenido de agua hasta aproximadamente un 0,04%. La TLC mostró que el compuesto 33f se obtuvo con una pureza superior a un 99%.

[0148]Se combinó una disolución del compuesto 33f (55,3 kg) en 320 L de acetato de etilo con HCl 3,9 M en acetato de etilo (241 kg) a 10 °C. Después de 2 horas, el análisis por TLC mostró una conversión > 99% en el compuesto 33g. Se añadió éter isopropílico (160 kg) y, después de agitar durante una hora a 10 °C, la mezcla de reacción se filtró y se lavó con éter isopropílico (2 x 46 L). Se obtuvo un sólido húmedo (123 kg) y se secó en un secador de cono de vacío con purga de nitrógeno a 35 °C durante aproximadamente 60 horas. Se obtuvo el compuesto 33 g (50,45 kg, 83,3%) como un polvo blanco.

[0150]A una disolución agitada del compuesto 33g (60,0 g, 195 mmol) en 990 mL de agua, se añadió una disolución de Na2CO3 (10,7 g, 101 mmol) en 60 mL de agua para alcanzar un pH de 5. La suspensión blanca se diluyó con 300 mL de agua, la mezcla se filtró y el sólido blanco se lavó con 200 mL de agua. El producto húmedo se suspendió en 540 mL de agua, con ácido fosfórico (al 85%, 21 mL) y formaldehído acuoso (al 37%, 22 mL). La mezcla de reacción blanca se calentó hasta 60 °C. A 50 °C, la mezcla se volvió homogénea y después de otros 30 minutos a 60 °C, se formó un precipitado blanco. La suspensión se calentó durante 12 horas y la reacción se controló mediante TLC. Después de conseguir una conversión completa, la suspensión se enfrió hasta 22 °C y se añadió una disolución de acetato de sodio (24,5 g) en agua (74 mL) para alcanzar un pH de 3. Después de filtrar y lavar con agua (3 x 150 mL) y con acetona (100 mL), el sólido blanco se secó a 30 °C a presión reducida para obtener el compuesto 33h como un polvo blanco homogéneo (43,4 g, 71%).

Formación de un éster pirazólico activo

[0152]

i. NMM, EtOAc, pirazol

ii. ácido

iii. NaHCC>3

iv. heptano, cristalización

[0153] Un recipiente con camisa de vidrio o acero inoxidable se sometió a una atmósfera inerte. En el recipiente, se introdujo pirazol (1,1 eq), N-metilmorfolina (NMM) (1,3 eq) y acetato de etilo. Se añadió gradualmente una disolución en acetato de etilo de cloruro de difenilacetilo (1,0 eq). Se aplicó un enfriamiento del recipiente de reacción para mantener la temperatura interna por debajo de 30 °C. Después de la adición completa, se agitó el contenido durante un mínimo de 20 minutos. La mezcla de reacción se lavó con agua, ácido sulfúrico 1 M (2x), bicarbonato de sodio acuoso saturado (2x), agua y salmuera. La fase de acetato de etilo se concentró y el residuo se trató con heptano.

[0154] El residuo se calentó hasta 70 °C en heptano para disolver todos los sólidos. La disolución resultante se enfrió y se mantuvo a 15 ± 5 °C durante 1 h con cristalización concomitante. Los cristales se filtraron y se secaron durante un mínimo de 16 h. Rendimiento: 80-90% a partir del cloruro de difenilacetilo.

Acilación de la isoquinolina

[0155] Un recipiente de acero inoxidable o revestido de vidrio se sometió a una atmósfera inerte. En el recipiente, se introdujo DMF, tetrametilguanidina (1,03 eq) y compuesto 33h (1,0 eq). La mezcla se agitó durante aproximadamente 1 h para permitir que ocurriera la disolución (solo cabía esperar una disolución parcial en este estadio). Se añadió el éster pirazólico activo a la mezcla de reaccion (1,2 eq). La mezcla de reacción se agitó durante un mínimo de 16 h. Se realizó una IPC (HPLC) para verificar el alcance de la reacción. Se añadió dimetiletilendiamina (0,3 eq) a la mezcla de reacción y se continuó agitando durante 2 h más.

[0156] La mezcla de reacción se diluyó con tolueno y se lavó con ácido sulfúrico 1 M (2x) y agua (2x). Se redujo el volumen de la fase orgánica mediante la evaporación del disolvente. Se añadió etóxido de sodio (1,0 eq) a la mezcla de reacción. El disolvente remanente se evaporó de la mezcla de reacción. El residuo se sometió a un evaporación en acetato de etilo.

[0157] El producto crudo se agitó en acetato de etilo y la mezcla se transfirió a un recipiente con agitación. Se añadió isopropanol a la disolución de acetato de etilo en una adición controlada, lo cual provocó una cristalización. La mezcla se agitó durante un mínimo de 1 h. Los cristales se filtraron y lavaron con un volumen pequeño de isopropanol. Los cristales se secaron al vacío durante un mínimo de 16 h para obtener el compuesto 33i.

[0159]Una disolución de ácido D-glucurónico (2,0 g, 10,3 mmol) en DMF (20 mL) se trató con DBU (1,69 mL, 11,33 mmol) y a continuación bromuro de alilo (1,07 mL, 12,4 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Se evaporó el disolvente y el residuo se diluyó con acetona (40 mL), lo cual provocó que se depositara un residuo oleoso. El sobrenadante se aplicó a una columna de sílice y se eluyó con tolueno al 25% en acetona para obtener un aceite. El aceite se cristalizó en acetona/tolueno y los cristales blancos resultantes se secaron para obtener 1,026 g (43%) del compuesto 33j.

9. Procedimiento para la preparación del compuesto 33k

[0160]

evaporación en acetonitrilo (2 X 30 mL) para eliminar el agua residual presente. El residuo se disolvió en acetonitrilo (30 mL) y se trató con NMM (0,67 mL, 6,05 mmol) y a continuación TBTU (971 mg, 3,02 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se trató con aproximadamente 3 g de la resina fuertemente ácida Amberjet™. Se filtró la resina y se evaporaron los filtrados. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en sílice, eluyendo con de un 3% en aumento a un 5% de etanol en diclorometano. La evaporación de las fracciones que contenían el producto proporcionó 1,671 g (76%) de un aceite naranja. El análisis por HPLC indicó la presencia del compuesto deseado 33k como una mezcla de productos diastereoméricos con una pureza satisfactoria.

[0163]El compuesto 33k (1,661 g, 2,30 mmol) y el ácido N,N-dimetilbarbitutico (358 mg, 2,30 mmol) se disolvieron en THF (20 mL) y se desgasificaron. Se añadió tetrakis(trifenilfosfina)paladio (27 mg, 0,023 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente en atmósfera de argón. Después de 2 horas, la mezcla de reacción se evaporó sobre sílice (8 g) y el residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en sílice, eluyendo en primer lugar con un 5% de etanol en diclorometano y a continuación con [etanol: DCM: ácido acético] 20:79:1 para eluir el producto. La evaporación del disolvente proporcionó un aceite naranja que cristalizó al dejarlo en reposo. El material se agitó en metanol:agua 1:1 (30 mL) durante 1 hora. La mezcla resultante se filtró y el sólido se secó para obtener 42 mg del compuesto de referencia 33 como un polvo blanco.

Ejemplo de referencia 2: Preparación del compuesto de referencia 34

2. Procedimiento para la preparación del compuesto 34b

[0165] Se agitó dihidroxibenzaldehído, compuesto 34a (1 g, 7,24 mmol), en THF (15 mL) y se añadió NaH (290 mg, 7,24 mmol), con lo que se formó un precipitado amarillo espeso. Después de 20 minutos, la mezcla se enfrió hasta 0 °C y se añadió gota a gota bromuro de bencilo (0,87 mL, 7,23 mmol). Se dejó que la mezcla se calentara hasta temperatura ambiente; siguió habiendo una suspensión espesa de color amarillo. La mezcla se diluyó con DMF (10 mL). Después de agitar durante 16 horas, la TLC sugirió que se había producido solo una reacción parcial.

[0166] Se evaporó el disolvente y el residuo se disolvió en DMF (10 mL) y se trató con más bromuro de bencilo (0,87 mL, 7,24 mmol). En 10 minutos, la disolución había comenzado a decolorarse y se volvió homogénea. Después de 4 horas, la disolución se diluyó con tolueno y se lavó con agua (3x), se secó (MgSO⁴) y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en sílice, eluyendo con EA:PE (60/80) 8:1 y a continuación 6:1. Se evaporaron las fracciones que contenían el producto para obtener el compuesto 34b (1,031 g, 62%) como un sólido blanco.

[0168]A una disolución agitada del fosfonato 34c (1,611 g, 5,42 mmol) y el aldehído 34b (1,031 g, 4,52 mmol) en THF (10 mL), se añadió tetrametilguanidina (1,25 mL, 9,94 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se evaporó el THF. El residuo se acidificó utilizando ácido clorhídrico acuoso 1 M y se extrajo con acetato de etilo. El extracto orgánico se secó (MgSO4) y se evaporó para obtener un aceite marrón. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en sílice, eluyendo con PE (60/80):EA 4:1 y a continuación 3:1 para proporcionar el compuesto 34d como un sólido blanco (1,59 g, 88%).

[0170] Una disolución del compuesto 34d (1,59 g, 3,97 mmol) y [COD]OTf de [(S,S)-diEtDuPhos]rodio (57 mg, 0,079 mmol) se desgasificó en metanol (90 mL). La disolución resultante se agitó bajo la presión de un globo de hidrógeno durante 2 horas. El análisis de 1H RMN de la mezcla de reacción indicó que no se había producido ninguna reacción.

[0171] La mezcla de reacción se introdujo en un recipiente de reacción de alta presión y se desgasificó. Se añadió más catalizador (57 mg, 0,079 mmol) y la disolución se desgasificó y se agitó a una presión de hidrógeno de 5 bar durante 3 horas. La mezcla de reacción se evaporó y el residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida, eluyendo con un 25% de EA en PE (60/80), para proporcionar el compuesto 34e como un aceite incoloro (1,46 g, 91%).

[0173]El compuesto 34e (1,46 g, 3,63 mmol) se agitó en THF (15 mL) y se añadió hidróxido de litio monohidratado (380 mg, 9,07 mmol) en una sola porción. Se continuó agitando durante 1 hora. Se añadió más hidróxido de litio monohidratado (76 mg, 1,81 mmol) y se continuó agitando durante 30 minutos. La mezcla se acidificó con ácido clorhídrico acuoso 1 M y se extrajo con acetato de etilo (2x), se secó con MgSO4 y se evaporó para obtener el compuesto 34f como un aceite incoloro (1,44 g, 102%).

[0175]El compuesto 34f (0,73 g, 1,88 mmol) se agitó en 1,4-dioxano (10 mL) y se trató con cloruro de hidrógeno gaseoso (aproximadamente 0,04 mol). La disolución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Se burbujeó cloruro de hidrógeno gaseoso adicional (aproximadamente 0,04 mol) a través de la disolución. El residuo se secó bajo un vacío elevado para proporcionar el compuesto 34g como un aceite incoloro (608 mg, 100%).

[0177]A una disolución del compuesto 34g (608 mg, 1,88 mmol) en ácido clorhídrico acuoso 1 M (10 mL), se añadió formaldehído acuoso (0,84 mL, 11,3 mmol, 37% p/p). La disolución resultante se calentó a 60 °C durante 1 hora y se trató con una disolución de acetato de sodio (1,23 g, 15 mmol) en agua (5 mL). La mezcla se mantuvo a 4 °C durante 2 horas, lo cual provocó la formación de un sólido blanco. El sólido se filtró y se secó por coevaporación con etanol para obtener el compuesto 34h como un sólido blanco (330 mg, 59%)

[0179]Una suspensión del compuesto 34h (313 mg, 1,05 mmol) en DCM (10 mL) a 0 °C se trató con piridina (0,59 mL, 7,32 mmol) y clorotrimetilsilano (0,66 g, 5,23 mmol). Después de 5 minutos, se añadió el cloruro de ácido 34i (224 mg, 0,97 mmol) en una sola porción. La mezcla de reacción se calentó hasta temperatura ambiente, se diluyó con acetato de etilo y se extrajo con ácido clorhídrico acuoso 1 M (2 x), se secó (MgSO4) y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en sílice, eluyendo con un 50% de EA en PE (+1% de ácido acético) para proporcionar un aceite incoloro. El análisis de 1H RMN y MS indicó que el 6-fenol no se había desililado por completo.

[0180]El aceite se disolvió en THF (10 mL) y se trató con fluoruro de tetrabutilamonio (0,84 mL, 1,0 M en THF). Después de 2 horas, la mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico acuoso 1 M, se secó (MgSO4) y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en sílice, eluyendo con PE (60/80):EA (+0.5% de ácido acético) 2:1 y a continuación 1:1. Se evaporaron las fracciones que contenían el producto para obtener un aceite incoloro. El aceite se sometió a una evaporación con EA (3 x) y se secó para obtener el compuesto de referencia 34 como una espuma amarilla (4,14 mg, 80%).

Ejemplo 3 Preparación del compuesto 40

[0181]

[0182]A una disolución del compuesto 33h (2,50 g, 4,83 mmol) en DCM (30 mL), se añadió N,N-dimetilmetanosulfonamida (0,60 g, 4,83 mmol), Dc C (1,20 g, 5,80 mmol) y DMAP (0,17 g, 1,45 mmol) y la mezcla se agitó a TA durante toda la noche, la TLC (DCM: MeOH = 20: 1) indicó que se había consumido la mayor parte del material de partida. La mezcla se lavó con una disolución acuosa saturada de NaHCO3 (30 mL), salmuera (30 mL x 2), se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía (PE: eA = de 1:0 a 3:1) para obtener el compuesto 40 (1,68 g, 55%) como un sólido blanco. LC-MS (Agilent, SYN-LC^mS-P-2): tR 3,16 min; m/z calculado para C³⁴H³⁵NsO⁶S[M+H]+ 614,2, experimental [M+H]+ 614,3. HPLC (JULY-L) (214 y 254 nm): tR 9,22 min.

Ejemplo de referencia 4: Preparación del compuesto de referencia 41

[0183]

[0184]Una mezcla del compuesto 40 (1,50 g, 2,44 mmol) y Pd (OH)2/C al 10% (100 mg) en MeOH (30 mL) se agitó a TA en una atmósfera de H2 (1 atm) durante toda la noche, la TLC (PE: EA = 1 : 2) indicó que el material de partida se había consumido. El catalizador se eliminó por filtración y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se recristalizó en PE/EA para obtener el compuesto de referencia 41 (1,21 g, 95%) como un sólido blanco. LC-MS (Agilent, SYN-LCMS-P-2): tR 3,00 min; m/z calculado para C²⁷H2⁹N³O⁶S[M+H]+ 524,2, [M+Na]+ 546,2, experimental [M+H]+ 524,2, [M+Na]+ 546,2. HPLC (JULY-L) (214 y 254 nm): tR 8,89 min.

Ejemplo 5 Preparación del compuesto 48

0185

[0186]Una mezcla del compuesto 50 (150 mg, 0,27 mmol), W,W-dimetilsulfamida (41 mg, 0,33 mmol), DMAP (10 mg, 0,08 mmol) y DCC (68 mg, 0,33 mmol) en DCM (3 mL) se agitó a TA durante toda la noche, la TLC (DCM: MeOH = 10:1) indicó que se había consumido la mayor parte del material de partida. La mezcla se diluyó con DCM (30 mL), se lavó con salmuera, se secó con Na²SO⁴, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía (DCM:MeOH = de 1:0 a 50:1) para obtener el compuesto 48 (75 mg, 43%) como un sólido blanco LC-MS (Agilent, SYN-Lc MS-P-2): tR 2,89 min; m/z calculado para C³⁶H³⁵N³O⁶S [M+H]+ 638,2, [M+Na]+ 660,2, experimental [m H]+ 638,3, [M+Na]+ 660,3. HPLC (JULY-L) (214 y 254 nm): tR 9,59 min.

Ejemplo 6 Preparación del compuesto 49

[0187

[0188] Una mezcla del compuesto 51 (70 mg, 0,127 mmol), W,W-dimetilsulfamida (19 mg, 0,153 mmol), DMAP (5 mg, 0,038 mmol) y DCC (32 mg, 0,153 mmol) en DCM (1 mL) se agitó a TA durante toda la noche, la TLC (DCM: MeOH = 10:1) indicó que se había consumido la mayor parte del material de partida. La mezcla se diluyó con DCM (30 mL), se lavó con salmuera, se secó con Na²SO⁴, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa para obtener el compuesto 49 (40 mg, 48%) como un sólido blanco. LC-MS (Agilent, SYN-LCMS-P-2): tR 2,95 min; m/z calculado para C³⁶H³⁴FN³O⁶S [M+H]+ 656,2, [M+Na]+ 678,2, experimental [M+H]+ 656,2, [M+Na]+ 678,2. HPLC (JULY-L) (214 y 254 nm): tR 9,597 min.

Ejemplo de referencia 7: Preparación del compuesto de referencia 50

1. Procedimiento ara la re aración del com uesto 50a

[0190]Una mezcla de la sal sódica del compuesto 33h (10,0 g, 18,8 mmol) y Pd/C al 10% (1,0 g) en MeOH (150 mL) se agitó a TA en una atmósfera de H2 (1 atm) durante toda la noche, la TLC (DCM: MeOH = 10:1) indicó que el material de partida se había consumido. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró al vacío para obtener el compuesto 50a (8,5 g, 117%) como un sólido blanco, el cual se utilizó en el siguiente paso sin purificación. LC-MS (Agilent, SYN-LCMS-P-2): tR 2,97 min; m/z calculado para C²⁵H²³NO⁵[M+H]+ 418,2, [M+Na]+ 440,2, experimental [M+H]+ 418,2, [M+Na]+ 440,1

[0192]A una disolución agitada del compuesto 50a (2,00 g, 4,55 mmol) en MeOH (30 mL), se añadió SOCh (0,5 mL) y la mezcla se calentó a reflujo durante 3 h, la TLC (DCM:MeOH = 10:1) indicó que el material de partida se había consumido. La mezcla se enfrió hasta TA, se concentró al vacío y el residuo se repartió entre EA y agua. La fase orgánica se separó, se lavó con una disolución acuosa saturada de NaHCO³y a continuación salmuera, se secó con Na²SO⁴, se filtró y se concentró al vacío para obtener el compuesto 50b (1,98 g, 100%) como un sólido blanco. LC-MS (Agilent, SYN-LCMS-P-2): tR 3,01 min; m/z calculado para C²⁶H²⁵NO⁵[M+H]+ 432,2, [M+Na]+ 454,2, experimental [M+H]+ 432,2, [M+Na]+ 454,2.

3. Procedimiento para la preparación del compuesto 50c

[0193]

[0194]Una mezcla del compuesto 50b (300 mg, 0,69 mmol), 1-(3-bromoprop-1-inil)benceno (163 mg, 0,83 mmol) y K²CO³(143 mg, 1,04 mmol) en DMF (10 mL) se calentó a 50 ° C durante toda la noche, la TLC (PE:EA = 1: 1) indicó que el material de partida se había consumido. La mezcla se enfrió hasta TA, se vertió en hielo-agua (100 mL) y se extrajo con éter (30 mL x 3). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron con Na²SO⁴, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía (PE:EA = de 1: 0 a 4: 1) para obtener el compuesto 50c (270 mg, 71%) como un sólido blanco. LC-MS (Agilent, SYN-LCMS-P-2): tR 3,26 min; m/z calculado para C³⁵H³¹NO⁵[M+H]+ 546,2, experimental [M+H]+ 546,2.

[0196]Una mezcla del compuesto 50c (270 mg, 0,49 mmol) y LOH.H²O (79 mg, 1,88 mmol) en THF/H²O (3 mL/1 mL) se agitó a TA durante toda la noche, la TLC (PE: EA = 1:1) indicó que el material de partida se había consumido. La mezcla se concentró al vacío para eliminar el THF y el residuo se disolvió en agua (30 mL) y se acidificó hasta un pH ~ 4 con una disolución acuosa de HCl 3 M. El precipitado resultante se recolectó mediante filtración y el sólido obtenido se disolvió en DCM, se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se recristalizó en PE/EA para obtener el compuesto de referencia 50 (210 mg, 80%) como un sólido blanco. LC-MS (Agilent, SYNLCMS-P-2): tp 2.81 min; m/z calculado para C³⁴H²⁹NO⁵[M+H]+ 532,2, experimental [M+H]+ 532,2. HPLC (JULY-L) (214 y 254 nm): tR 9,63 min.

Ejemplo de referencia 8: Preparación del compuesto de referencia 51

1. Procedimiento para la preparación del compuesto 51a

[0197]

[0198]A una disolución agitada de 4-fluorofenilacetileno (5,0 g, 41,7 mmol) en THF (30 mL) a -65 °C en una atmósfera de N2, se añadió n-BuLi (2,5 M en hexano, 18,3 mL, 45,8 mmol) y la mezcla se agitó a -65 °C durante 1 h. Se añadió paraformaldehído (2,5 g, 83,3 mmol) y se dejó que la mezcla se calentara lentamente hasta TA y se agitó durante toda la noche, la TLC (PE:EA = 4:1) indicó que el material de partida se había consumido. Se añadió agua y la mezcla se extrajo con EA (30 mL). El extracto orgánico se lavó con agua (20 mL x 2) y salmuera (20 mL), se secó con Na²SO⁴, se filtró y se concentró al vacío para obtener el compuesto 51a (6,5 g, 100 %) como un aceite marrón, el cual se utilizó en el siguiente paso directamente.

[0200]A una disolución del compuesto 51a (1,0 g, 6,67 mmol) en THF (15 mL), se añadió PPh³(1,92 g, 7,34 mmol), a continuación CBr⁴(2,21 g, 6,67 mmol) y la mezcla se agitó a TA durante toda la noche, la TLC (PE:EA = 4:1) indicó que el material de partida se había consumido. Se añadió PE (30 mL) y la mezcla se filtró. El filtrado se concentró al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía (100% de PE) para obtener el compuesto 51b (1,5 g, 100 %) como un aceite incoloro.

3. Procedimiento para la preparación del compuesto 51c

[0201

[0202]Una mezcla del compuesto 50b (300 mg, 0,69 mmol), el compuesto 51b (177 mg, 0,83 mmol) y K2CO3 (143 mg, 1,04 mmol) en DMF (10 mL) se calentó a 50 °C durante toda la noche, la TLC (PE:EA = 1:1) indicó que el material de partida se había consumido. La mezcla se enfrió hasta TA, se vertió en hielo-agua (80 mL) y se extrajo con éter (30 mL x 3). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron con Na²SO⁴, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía (PE:EA = de 1: 0 a 4: 1) para obtener el compuesto 51c (280 mg, 72%) como un sólido blanco. LC-MS (Agilent, sYn-LCMS-P-2): tR 3,41 min; m/z calculado para C³⁵H³⁰FNO⁵[M+H]+ 564,2, [M+Na]+ 586,2, experimental [M+H]+ 564,2, [M+Na]+ 586,2.

[0204]Una mezcla del compuesto 51c (280 mg, 0,49 mmol) y L¡OH.H2O (63 mg, 1,49 mmol) en THF/H2O (3 mL/1 mL) se agitó a TA durante toda la noche, la TLC (PE:EA= 1:1) indicó que el material de partida se había consumido. La mezcla se concentró al vacío para eliminar el THF y el residuo se disolvió en agua (30 mL), se acidificó hasta un pH ~ 3 con una disolución acuosa de HCl 3 M y se extrajo con DCM. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron con Na2SO4, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía (DCM:MeOH = de 1:0 a 100:1) para obtener el compuesto de referencia 51 (120 mg, 44%) como un sólido blanco. LC-MS (Agilent, SYN-LCMS-P-2): tR 3,48 min; m/z calculado para C³⁴H²⁸FNO⁵[M+H]+ 550,2, [M+Na]+ 572,2, experimental [M+H]+ 550,2, [M+Na]+ 572,2. HPLC (JULY-L) (214 y 254 nm): tR 9,64 min.

Ejemplo biológico 1: Unión al receptor AT²

Medios y soluciones

1. Tripsina-EDTA (para la preparación de 100 mL)

[0205]

Tripsina 0,25 g

EDTA al 2% 2 mL

PBS 98 mL

[0206] Disolver tripsina en EDTA al 2% y PBS por completo; esterilizar la disolución haciéndola pasar a través de un filtro de membrana de 0,20 pM; almacenar a 4 °C.

2. Medio DMEM (para la preparación de 1L)

[0207] El polvo se disolvió en 950 mL de agua destilada con agitación suave hasta que la disolución se volvió transparente.

[0208] Añadir 1,176 g de NaHCO³para el medio DMEM.

[0209] Ajustar el pH del medio a 0,2-0,3 por debajo del pH de trabajo final utilizando NaOH 1 M o HCl 1 M. Añadir lentamente con agitación.

[0210] Diluir hasta 1 litro con ddH²O.

[0211] Esterilizar el medio de inmediato por filtración.

[0212] Almacenar a 4 °C.

3. Tampón TE

[0213]

Tris-HCl 20 mM, pH 7,4,

EDTA 5 mM

4. Tampón del ensayo de unión

[0214]

Hepes 50 mM, pH 7,4

MgCl²5 mM

CaCl²1 mM

BSA al 0,2%

5. Tampón de lavado

[0215]Hepes 50 mM, pH 7,4

Procedimientos para célula transitoria HEK293/receptor AT²

Transfección

[0216]

□ Las células se sembraron en una placa de 150 mm con una densidad de un 50% para la transfección transitoria. Las células estaban listas para la transfección después de su incubación durante toda la noche (la confluencia alcanza aproximadamente un 80%).

□ Se mezclaron suavemente 75 pL de LipofectamineTM2000 diluidos en 6,25 mL de medio de suero reducido OptiMEM I y se incubaron a temperatura ambiente durante 5 minutos. Se mezclaron suavemente 50 pg del ADN plasmídico de expresión diluidos en 6,25 mL de medio de suero reducido OptiMEM I sin suero.

□ Después de la incubación de 5 minutos, el ADN diluido se combinó con la LipofectamineTM2000 diluida (el volumen total es 12,5 mL). La mezcla se mezcló suavemente y se incubó durante 30 minutos a temperatura ambiente para permitir que se formasen los complejos de ADN- LipofectamineTM2000.

□ Los 12,5 mL de complejos de ADN- LipofectamineTM2000 se añadieron a la placa de 150 mm y se mezclaron suavemente por balanceo de la placa hacia delante y atrás.

□ Las células se incubaron a 37 °C con un 5% de CO²durante 48 horas.

□ Se recogieron las células y se almacenaron a -80 °C.

Procedimientos para la preparación de membranas de células HEK293/receptor AT²

[0217]

□ Se homogeneizaron células HEK293/receptor AT²(transfectadas transitorias) congeladas en tampón TE enfriado con hielo durante 10 s.

□ El homogeneizado se centrifugó a 25000 g durante 30 minutos.

□ El sedimento se resuspendió en tampón tisular enfriado con hielo.

□ Las concentraciones de proteína se determinaron utilizando el método de ensayo Bradford con BSA como patrón.

□ La proteína membranaria se congeló por debajo de -80 °C.

Preparación de los compuestos

[0218] Se prepararon disoluciones de todos los compuestos con un equipo de manipulación de líquidos en microplacas tal como Janus o Precision 2000. Los compuestos, disueltos en DMSO, se almacenaron en un congelador. Los compuestos se prepararon a partir de una concentración 30 mM en DMSO al 100%.

Paso 1: Preparación de la placa de dosis (placa de 96 pocillos)

[0219]

□ Añadir los 3 pL de disolución madre [30 mM] de compuesto a la columna 1 en la placa.

□ Anadir 15 pL de DMSO al 100% a la columna 1.

□ Anadir 10,81 pL de DMSO al 100% a la columna 2-12.

□ Transferir 5 pL de la columna 1 a la columna 2 (dilución semilogarítmica).

□ Transferir 5 pL de la columna 2 a la columna 3 (dilución semilogarítmica).

□ Transferir 5 pL de la columna 3 a la columna 4 (dilución semilogarítmica).

□ Transferir 5 pL de la columna 4 a la columna 5 (dilución semilogarítmica).

□ Transferir 5 pL de la columna 5 a la columna 6 (dilución semilogarítmica).

□ Transferir 5 pL de la columna 6 a la columna 7 (dilución semilogarítmica).

□ Transferir 5 pL de la columna 7 a la columna 8 (dilución semilogarítmica).

□ Transferir 5 pL de la columna 8 a la columna 9 (dilución semilogarítmica).

□ Transferir 5 pL de la columna 9 a la columna 10 (dilución semilogarítmica).

□ T ransferir 5 pL de la columna 10 a la columna 11 (dilución semilogarítmica).

□ Transferir 5 pL de la columna 11 a la columna 12 (dilución semilogarítmica).

[0220] Todos los compuestos se diluyeron utilizando un equipo de manipulación de líquidos en microplacas Precision 2000. La concentración máxima de compuesto fue de 5 mM con un 100% de DMSO.

Paso 2: Preparación de la placa de trabajo (placa de 96 pocilios)

[0221]

□ Los compuestos se diluyeron en un factor de 50 con tampón.

□ Se añadieron 49 pL de tampón al pocillo de la placa de 96 pocillos.

□ Se transfirió 1 pL de la disolución de compuesto de la placa de dosis al pocillo correspondiente de la placa de trabajo.

□ La concentración máxima de compuesto fue de 100 pM con un 2% de DMSO.

Paso 3: Preparación de la placa de ensayo (placa de 96 pocillos)

[0222]Se transfirieron 15 pL de la disolución de compuesto de cada pocillo de la placa de trabajo al pocillo de la placa de ensayo con Janus. Cada compuesto se evaluó por duplicado en cada placa y había 4 compuestos por placa.

Procedimientos para el ensayo de unión al receptor AT2

^[°223□^]Se incubaron 120 pL de membrana (5 mg de proteína/pocillo) con 15 pL de [ ¹²⁵I]-CGP42112A y 15 pL de compuesto a TA durante 1,5 h.

□ La reacción de unión se detuvo mediante una filtración rápida a través de placas Unifilter GF/C (preempapadas en BSA al 0,3% (v:v)).

□ La placa se lavó tres veces con tampón de lavado enfriado con hielo.

□ Las placas de filtración se secaron a 37 °C durante toda la noche.

□ Se añadieron 50 pL de líquido de centelleo a cada pocillo.

□ La radioactividad se determinó utilizando un lector de centelleo para microplacas MicroBetaTrilux.

Análisis de datos

[0224] Los datos se analizaron mediante un ajuste logístico de 4 parámetros utilizando el programa informático Prism 5.0.

[0225] Los resultados se muestran en la siguiente tabla:

Compuesto CI50 (nM)

Referencia 33 431,3

Referencia 34 33,54

40 10,86

Referencia 41 1793

48 79,53

49 205,8

Referencia 50 96,15

Referencia 51 133,2

REFERENCIAS

[0226]

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Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula (I):

donde R¹es -C(=O)CHR⁶R⁷, -C(=O)NR⁶R⁷, -C(=O)CH²CHR⁶R⁷, -C(=O)CH=CR⁶R⁷, -C(=S)CHR⁶R⁷, -C(=S)NR⁶R⁷, -C(=S)CH2CHR6R7, -C(=S)CH=CR6R7, -C(=NR8)CHR6R7, -C(=NR8)NR6R7, -C(=NR8)CH2CHR6R7 y -C(=NR8)CH=CR6R7; R³es hidrógeno y R²es -C(=O)NHSO²N(alquilo C^1-6)²;

R⁴es fenilo, benzoxazol, 4-feniloxazol, 1 -piperidina, 4-fenil-1 -piperidina, -(alquil C^1-6)fenilo, -O(alquil C^1-6)fenilo, -(alquenil C^2-6)fenilo, -O(alquenil C^2-6)fenilo, -(alquinil C^2-6)fenilo, -O(alquinil C^2-6)fenilo, -SO²NHfenilo, -SO²NH(alquil C^1-6)fenilo, -SO2NH(alquenil C2-6)fenilo, -SO2NH(alquinil C2-6)fenilo, -NHSO2fenilo, -NHSO2(alquil C1-6)fenilo, -NHSO2(alquenil C2-6)fenilo, -NHSO²(alquinil C^2-6)fenilo, -NHC(=O)NHfenilo, -NHC(=O)NH(alquil C^fenilo, -NHC(=O)NH(alquenil C^2-6)fenilo, -NHC(=O)NH(alquinil C^2-6)fenilo, -NHCO²fenilo, -NHCO²(alquil C^1-6)fenilo, -NHCO²(alquenil C^2-6)fenilo, -NHCO²(alquinil C^2-6)fenilo;

R⁵es -OH, -Oalquilo C^1-6u -OC(R¹⁰)³;

R8 es hidrógeno, -alquilo C1-6, arilo o -(alquil C1-6)arilo;

o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, donde R1 es -C(=O)CH(aril)(arilo), -C(=O)CH(aril)(cicloalquilo), -C(=O)CH(cicloalquil)(cicloalquilo), -C(=O)N(aril)(arilo), -C(=O)N(aril)(cicloalquilo) o -C(=O)N(cicloalquil)(cicloalquilo).

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, donde R es -C(=O)CH(fenil)(fenilo), -C(=O)CH(fenil)(ciclohexilo), -C(=O)CH(ciclohexil)(ciclohexilo), -C(=O)N(fenil)(fenilo), -C(=O)N(fenil)(ciclohexilo) o -C(=O)N(ciclohexil)(ciclohexilo) donde cada fenilo o ciclohexilo está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados entre -alquilo C1-3, -Oalquilo C1-3 y halo.

4. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, donde R⁴es fenilo, benzoxazol, 4-feniloxazol, 1-piperidina, 4-fenil-1 -piperidina, -(alquil C^1-3)fenilo, -O(alquil C¹-³)fenilo, -(alquenil C^2-3)fenilo, -O(alquenil C^2-3)fenilo, -(alquinil C^2-3)fenilo, -O(alquinil C^2-3)fenilo, -SO²NHfenilo, -SO²NH(alquil C^1-3)fenilo, -SO²NH(alquenil C^2-3)fenilo, -SO²NH(alquinil C^2-3)fenilo, -NHSO²fenilo, -NHSO²(alquil C¹-³)fenilo, -NHSO²(alquenil C^2-3)fenilo, -NHSO²(alquinil C^2-3)fenilo, -NHC(=O)NHfenilo, -NHC(=O)NH(alquil C^fenilo, -NHC(=O)NH(alquenil C^2-3)fenilo, -NHC(=O)NH(alquinil C^2-3)fenilo, -NHCO²fenilo, -NHCO²(alquil C^fenilo, -NHCO²(alquenil C^2-3)fenilo o -NHCO²(alquinil C^2-3)fenilo.

5. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, donde R⁵es -OH, -OCH³, -OCF³o -OCHF².

6. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 seleccionado del grupo que consiste en

o sales farmacéuticamente aceptables de estos.

7. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, y un portador farmacéuticamente aceptable.

8. Un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso en el tratamiento o la prevención del dolor neuropático.

9.Un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso en el tratamiento o la prevención de la alteración de la velocidad de conducción nerviosa, para su uso en el tratamiento o la prevención de una afección caracterizada por hipersensibilidad neuronal, para su uso en el tratamiento o la prevención de un trastorno proliferativo celular, para su uso en el tratamiento o la prevención de un trastorno asociado con un desequilibrio entre la reabsorción ósea y la osteogénesis, para su uso en el tratamiento o la prevención de un trastorno asociado con una regeneración nerviosa atípica o para su uso en la producción de analgesia.

10.Un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso en el tratamiento o la prevención del dolor inflamatorio.