ES2881267T3 - Antagonistas/agonistas parciales selectivos del receptor D3 de dopamina; método de preparación; y uso de los mismos - Google Patents

Antagonistas/agonistas parciales selectivos del receptor D3 de dopamina; método de preparación; y uso de los mismos Download PDF

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Abstract

Un compuesto de Fórmula (I), un estereoisómero del mismo, un radioisótopo del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo **(Ver fórmula)** en donde Ar es un heteroarilo que puede estar opcionalmente sustituido con 1, 2, o 3 sustituyentes donde cada sustituyente es independientemente alquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, haloalcoxi C1-C6, -OH, -COOH, amino, nitro, grupo alcanoílo C2-C3, mono o dialquilamino C1-C3, o halógeno; n es 1 o 2; m es 1 o 2; R1 es H o halógeno; R2 es H, alcoxi C1-C3, o halógeno; R3 es H, halógeno o alcoxi C1-C3; R4 es H, -OH, o halógeno; R5 es H, -OH, o halógeno; y es un enlace sencillo o un enlace doble, con las condiciones a) y b) a) cuando R1 es H entonces al menos uno de R2 y R3 no es H; y b) cuando uno o ambos de R2 y R3 es H entonces R1 no es H.

Description

DESCRIPCIÓN
Antagonistas/agonistas parciales selectivos del receptor D3 de dopamina; método de preparación; y uso de los mismos CAMPO DE LA DIVULGACIÓN
La presente divulgación se refiere a nuevos compuestos antagonistas/agonistas parciales selectivos del receptor D3 de dopamina.
ANTECEDENTES
La dopamina es un neurotransmisor fundamental del sistema nervioso central responsable de numerosos procesos neurológicos, incluyendo sentimientos, cognición, recompensa, motivación y control motor refinado. La señalización de la dopamina está mediada por los receptores de tipo D1 (subtipos de receptor D1 y D5) y de tipo D2 (subtipos de receptor D2, D3 y D4). Los receptores D3 de dopamina (D3R) se han involucrado como dianas farmacoterapéuticas potenciales en trastornos de consumo de sustancias debido a su ubicación restringida en las regiones cerebrales límbicas, eficacia en modelos animales de abuso de drogas y regulación positiva en los cerebros de adictos a la cocaína.
El alto grado de homología de aminoácidos en los sitios de unión de los receptores de dopamina de tipo D2, y en especial entre los subtipos de receptores de dopamina D2 y D3, han proporcionado un reto formidable en la persecución del descubrimiento de compuestos selectivos para dopamina D3 que tengan propiedades farmacológicas.
Por tanto, existe una necesidad bien reconocida en la técnica de antagonistas o agonistas parciales altamente selectivos para D3 que sean metabólicamente estables y tengan propiedades farmacológicas apropiadas para trasladarlos potencialmente al tratamiento de afecciones neuropsiquiátricas que incluyen trastornos de consumo de sustancias. Se ha de observar que el documento de Patente WO2014059265 desvela derivados de urea y amida de aminoalquilpiperazinas y el uso de los mismos, el documento de Patente WO03028728 desvela 4-(4-sustituido-piperazinil-lil)-butilcarboxamidas como ligandos selectivos del subtipo D3 de dopamina, Ananthan et al. (J. Med. Chem. 2014, 57, 16, 7042-7060) desvelan el diseño, síntesis, y estudios de relación estructura-actividad de una serie de [4-(4-carboxamidobutil)]-1-arilpiperazinas, y Kumar et al. (J. Med. Chem. 2016, 59, 16, 7634-7650) desvelan antagonistas y agonistas parciales del receptor D3 de dopamina (D3R) altamente selectivos basándose en eticlopride y la estructura cristalina de D3R.
SUMARIO
La invención reivindicada proporciona un compuesto de Fórmula (I), un estereoisómero del mismo, un radioisótopo del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo
Figure imgf000002_0001
en donde Ar es un heteroarilo que puede estar opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 sustituyentes donde cada sustituyente es independientemente alquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, haloalcoxi C1-C6, -OH, -COOH, amino, nitro, grupo alcanoílo C2-C3, mono o dialquilamino C1-C3, o halógeno; n es 1 o 2; m es 1 o 2; R1 es H o halógeno; R2 es H, alcoxi C1-C3, o halógeno; R3 es H, halógeno o alcoxi C1-C3; R4 es H, -OH, o halógeno; R5 es H, -OH, o halógeno; y — es un enlace sencillo o un enlace doble, con las condiciones a) y b): a) cuando R1 es H entonces al menos uno de R2 y R3 no es H; y b) cuando uno o ambos de R2 y R3 es H entonces R1 no es H.
La invención reivindicada también proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula (I), un estereoisómero del mismo, un radioisótopo del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y comprende además al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable.
La invención reivindicada comprende además dicho compuesto o dicha composición farmacéutica para uso en un método para tratar un trastorno de consumo de sustancias, esquizofrenia y trastorno mental relacionado, un trastorno cognitivo, impulsividad, obesidad, depresión, un trastorno bipolar, o una discinesia asociada a enfermedad de Parkinson (PD) o tratamiento de PD con L-DOPA. También se desvelan envases farmacéuticos que comprenden las composiciones farmacéuticas.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS
La Figura 1 ilustra los resultados comparativos del compuesto 29 frente al antagonista del receptor D3 clásico PG648, compuesto 1 en un ensayo de estabilidad microsomal en hígado de mono.
La Figura 2 ilustra los resultados comparativos del compuesto 29 frente a PG648, compuesto 1 en un ensayo de estabilidad microsomal en hígado de rata.
La Figura 3A ilustra los efectos atenuantes de inyección sistémica del compuesto (±)-29 (5-25 mg/kg, i.p.) tras ingesta de oxicodona (autoadministración) en ratas (N = 6-7 en cada grupo. #, P < 0,05 frente a niveles basales de ingesta de droga; * y **, P < 0,05 y 0,01, respectivamente, frente al grupo de vehículo).
La Figura 3B ilustra los efectos de inyección sistémica del compuesto (±)-19 (1-5 mg/kg, i.p.) tras ingesta de oxicodona (autoadministración) en ratas (N = 6-7 en cada grupo. #, P < 0,05 frente a niveles basales de ingesta de droga; * y **, P < 0,05 y 0,01, respectivamente, frente al grupo de vehículo).
La Figura 4 ilustra los efectos atenuantes de inyección sistémica del compuesto (±)-29 en el restablecimiento de búsqueda de drogas provocado por oxicodona en ratas.
La Figura 5 describe el procedimiento para la aversión al lugar condicionada provocada por naloxona en ratas crónicas tratadas con oxicodona.
La Figura 6 ilustra la inhibición de aversión al lugar condicionada provocada por naloxona en ratas crónicas tratadas con oxicodona con el compuesto (±)-29.
La Figura 7 ilustra la atenuación de autoadministración de THC en monos ardilla con la administración del compuesto (±)-29.
La Figura 8 ilustra que el compuesto (±)-29 no tiene ningún efecto en la autoadministración de alimento en monos ardilla.
La Figura 9 ilustra la atenuación del restablecimiento de búsqueda de drogas inducido por THC en monos ardilla con la administración del compuesto (±)-29.
La Figura 10 ilustra los efectos del compuesto (±)-29 en la preferencia al lugar condicionada inducida por oxicodona en ratas.
La Figura 11 ilustra los efectos del compuesto (±)-29 (0, 5, 15 mg/kg, i.p.) en los aumentos en actividad locomotora basales e inducidos por oxicodona en ratones; (Figura 11 gráfico A) efectos de la oxicodona en la locomoción a lo largo del tiempo (del día 2 al día 9) en presencia o ausencia de tratamiento con el compuesto (±)-29; (Figura 11 gráfico B) curso temporal de los cambios inducidos por (±)-29 en la locomoción (día 1), que indica que no tiene ningún efecto en la actividad locomotora por sí mismo; (Figura 11 gráfico C) curso temporal de los cambios inducidos por oxicodona en la locomoción después de la primera inyección de oxicodona (efecto agudo en el día 2), que indica que el pretratamiento con (±)-29 inhibió de forma dependiente a la dosis la hiperactividad inducida por oxicodona (efecto agudo); (Figura 11 gráfico D) curso temporal de los cambios inducidos por cebado de oxicodona en la locomoción en ratones después de 2 días de la retirada de la última administración conjunta (vehículo/(±)-29 oxicodona) (día 9), que indica que el pretratamiento con (±)-29 repetido del día 2 al día 6 produjo una inhibición de larga duración en los aumentos en locomoción inducidos por oxicodona.
Figuras 12A y 12B: estudios farmacocinéticos en R- y S-29 (Figura 12A) y R- y S-19 (Figura 12B) en ratas Long Evans después de administración oral de 10 mg/kg, que demuestran la alta penetración cerebral de los cuatro enantiómeros.
Figura 13: el pretratamiento con compuesto (±)-29 no mostró ningún efecto significativo en la respuesta térmica de los animales sometidos a ensayo 30 minutos después de estimulación con solución salina (1 ml/kg, i.p.) u oxicodona (2 mg/kg, i.p.) que indica que (±)-29 no tiene ningún efecto en la analgesia inducida por oxicodona y no tiene efectos analgésicos por sí mismo.
DESCRIPCIÓN DETALLADA
Se desvelan nuevos compuestos antagonistas/agonistas parciales selectivos del receptor D3 de dopamina de acuerdo con la Fórmula (I) que tienen inesperadamente tanto alta afinidad por el receptor D3 como excelente estabilidad metabólica no conseguidas por antagonistas/agonistas parciales selectivos del receptor D3 de dopamina anteriores. Muchos de los compuestos de Fórmula (I) exhiben alta selectividad con respecto a los miembros homólogos de la familia de receptores D2, por ejemplo los receptores D2 y D4. Los compuestos de Fórmula (I) desvelados en el presente documento exhiben propiedades farmacológicas, biodisponibilidad, y estabilidad metabólica in vitro mejoradas con respecto a los ligandos del receptor D3 derivados de 4-fenilpiperazina anteriores. Los compuestos de Fórmula (I) son útiles para el tratamiento de trastornos neuropsiquiátricos. Se ha descubierto que los nuevos compuestos son eficaces en modelos de comportamiento de abuso y abstinencia de drogas, incluyendo oxicodona y cannabis. Debido a su alta potencia y selectividad frente al receptor D3, pueden ser eficaces dosis inferiores de los compuestos de Fórmula (I) y de ese modo se limitan los efectos secundarios potenciales.
También se proporcionan composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Tales composiciones farmacéuticas pueden contener un compuesto de Fórmula (I) como único agente activo o pueden contener una combinación de un compuesto de Fórmula (I) y otro agente farmacéuticamente activo. Se desvelan métodos para el tratamiento de un trastorno neuropsiquiátrico en un paciente con necesidad de tal tratamiento por administración de un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica del mismo.
Un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, un radioisótopo del mismo, o un estereoisómero del mismo:
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en donde Ar es un heteroarilo que puede estar opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 sustituyentes donde cada sustituyente es independientemente alquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, haloalcoxi C1-C6, -OH, -COOH, amino, nitro, grupo alcanoílo C2-C3, mono o dialquilamino C1-C3, o halógeno; específicamente Ar es benzofuranilo, benzotienilo, imidazolilo, imidazo[1,2-a]piridinilo, imidazo[2,1-b]tiazolilo, o indolilo; y más específicamente Ar es benzofuranilo, benzotienilo, 4-etil-1H-imidazolilo, 4-metil-1H-imidazolilo, imidazo[1,2-a]piridinilo, 6-metilimidazo[2,1-b]tiazolilo, o indolilo;
n es 1 o 2;
m es 1 o 2;
R1 es H o halógeno (Cl, F, Br, I), específicamente H o Cl;
R2 es H, alcoxi C1-C3, o halógeno (Cl, F, Br, I), específicamente H u -OMe;
R3 es H, halógeno (Cl, F, Br, I), o alcoxi C1-C3, específicamente H o Cl;
R4 es H, -OH, o halógeno, específicamente H, -OH o -F;
R5 es H, -OH, o halógeno, específicamente H, -OH o -F; y
— es un enlace sencillo o un enlace doble (por ejemplo, un enlace doble trans o c/'s, preferentemente trans), con las condiciones a) y b):
a) cuando R1 es H entonces al menos uno de R2 y R3 no es H, específicamente R2 es alcoxi C1-C3 (por ejemplo, -OMe) y R3 es halógeno (por ejemplo, Cl); y
b) cuando uno o ambos de R2 y R3 es H entonces R1 no es H, específicamente R1 es halógeno (por ejemplo, Cl).
En una realización, un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en donde R1 es H, R2 es -OMe, y R3 es Cl.
En una realización, un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en donde R1 es Cl, R2 es H, y R3 es H.
En una realización, un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en donde R1 es H, R2 es -OMe, R3 es Cl, y Ar es benzofuranilo, benzotienilo, imidazolilo, imidazo[1,2-a]piridinilo, imidazo[2,1-b]tiazolilo, o indolilo, donde Ar está además opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 sustituyentes donde cada sustituyente es independientemente alquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, haloalcoxi C1-C6, -OH, -COOH, amino, nitro, grupo alcanoílo C2-C3, o halógeno.
En una realización, un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en donde R1 es Cl, R2 es H, R3 es H, y Ar es benzofuranilo, benzotienilo, imidazolilo, imidazo[1,2-a]piridinilo, imidazo[2,1-b]tiazolilo, o indolilo, donde Ar está además opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 sustituyentes donde cada sustituyente es independientemente alquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, haloalcoxi C1-C6, -OH, -COOH, amino, nitro, grupo alcanoílo C2-C3, o halógeno.
En una realización, un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en donde R1 es H, R2 es -OMe, R3 es Cl, y Ar es benzofuranilo, benzotienilo, 4-etil-1H-imidazolilo, 4-metil-1H-imidazolilo, imidazo[1,2-a]piridinilo, 6-metilimidazo[2,1-b]tiazolilo, o indolilo. Además, en esta realización, m es 1 y n es 1.
En una realización, un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en donde R1 es Cl, R2 es H, R3 es H, y Ar es benzofuranilo, benzotienilo, 4-etil-1H-imidazolilo, 4-metil-1H-imidazolilo, imidazo[1,2-a]piridinilo, 6-metilimidazo[2,1-b]tiazolilo, o indolilo. Además, en esta realización, m es 1 y n es 1.
En una realización, un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en donde R1 es H, R2 es -OMe, R3 es Cl, y Ar es benzofuranilo, benzotienilo, 4-etil-1H-imidazolilo, 4-metil-1H-imidazolilo, imidazo[1,2-a]piridinilo, 6-metilimidazo[2,1-b]tiazolilo, o indolilo. Además, en esta realización uno de R4 y R5 es H y el otro es -OH o -F.
En una realización, un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en donde R1 es Cl, R2 es H, R3 es H, y Ar es benzofuranilo, benzotienilo, 4-etil-1H-imidazolilo, 4-metil-1H-imidazolilo, imidazo[1,2-a]piridinilo, 6-metilimidazo[2,1-b]tiazolilo, o indolilo. Además, en esta realización uno de R4 y R5 es H y el otro es -OH o -F.
En una realización, un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en donde R1 es H; R2 es -OMe; R3 es Cl; Ar es benzofuranilo o indolilo; n es 1 o 2; m es 1 o 2; R4 es H, -OH, o halógeno, específicamente H, -OH, o F; R5 es H, -OH, o halógeno, específicamente H, -OH o F; y ~ es un enlace sencillo o un enlace doble (por ejemplo, un enlace doble trans o cis, preferentemente trans).
En una realización, un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en donde R1 es Cl; R2 es H; R3 es H; Ar es benzofuranilo o indolilo; n es 1 o 2; m es 1 o 2; R4 es H, -OH, o halógeno, específicamente H, -OH, o F; R5 es H, OH, o halógeno, específicamente H, -OH, o F; y — es un enlace sencillo o un enlace doble (por ejemplo, un enlace doble trans o cis, preferentemente trans).
En la presente divulgación también se incluyen compuestos de Fórmula (I) que tienen estructuras específicas que se exponen en las Tablas 1A y 1B en el presente documento y se exponen en la siguiente tabla.
Figure imgf000005_0001
continuación
Figure imgf000006_0001
N-(4-(4-(2-cloro-3
Figure imgf000006_0002
(R)-N-(4-(4-(2-cloro-
Figure imgf000006_0003
(S)-N-(4-(4-(2-cloro-3-et¡lfen¡l)p¡peraz¡n-1-il)-3-h¡drox¡but¡l)-1H-¡ndol-2-carboxam¡da ((S)-19)
N-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-carboxamida
Figure imgf000006_0004
(R)-N-(4-(4-(3-cloro-5
(continuación)
(S)-N-(4-(4-(3-doro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-carboxamida
Figure imgf000007_0001
N-(4-(4-(3-cloro-5-et¡l-2-metox¡fen¡l)p¡peraz¡n-1-¡l)-3-fluorobut¡l)benzofuran-2-carboxamida
Figure imgf000007_0002
(R)-N-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)benzofuran-2-carboxamida
Figure imgf000007_0003
(S)-N-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metox¡fen¡l)p¡peraz¡n-1-¡l)-3-fluorobut¡l)benzofuran-2-carboxam¡da continuación
Figure imgf000008_0001
Los compuestos se describen usando nomenclatura convencional. A menos que se definan de otro modo, todos los términos técnicos y científicos usados en el presente documento tienen el mismo significado que entiende habitualmente el experto habitual en la materia a la que pertenece la divulgación. A menos que quede indicado claramente de otro modo por el contexto, cada nombre de compuesto incluye la forma de ácido libre o base libre del compuesto así como hidratos del compuesto y todas las sales farmacéuticamente aceptables del compuesto.
La expresión "Fórmula (I)", como se usa en el presente documento, incluye todos los compuestos que satisfacen la Fórmula (I), incluyendo cualquier enantiómero, racemato y estereoisómero, así como todas las sales farmacéuticamente aceptables y radioisótopos de tales compuestos. La expresión "un compuesto de Fórmula (I)" incluye todos los grupos subgenéricos de la Fórmula (I), etc., así como todas las formas de tales compuestos, incluyendo sales e hidratos, a menos que quede indicado claramente de otro modo por el contexto en el que se usa esta expresión.15*20
La Fórmula (I) incluye todas las subfórmulas de la misma. En ciertas situaciones, los compuestos de Fórmula (I) pueden contener uno o más elementos asimétricos tales como centros estereogénicos, ejes estereogénicos y similares, por ejemplo, átomos de carbono asimétricos, de modo que los compuestos pueden existir en diferentes formas estereoisoméricas. Estos compuestos pueden ser, por ejemplo, racematos o formas ópticamente activas. Para los compuestos con dos o más elementos asimétricos, se ha de entender que se incluyen todos los isómeros y mezclas de los mismos. En estas situaciones, pueden obtenerse enantiómeros individuales, es decir, formas ópticamente activas, mediante síntesis asimétrica, síntesis a partir de precursores ópticamente puros, o mediante resolución de los racematos. La resolución de los racematos puede conseguirse, por ejemplo, mediante métodos convencionales tales como cristalización en presencia de un agente de resolución, o cromatografía, usando, por ejemplo, una columna de cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) quiral.
Cuando un compuesto existe en diversas formas tautoméricas, el compuesto no se limita a uno cualquiera de los tautómeros específicos, sino que en su lugar incluye todas las formas tautoméricas. Se contemplan todos los isótopos de los átomos que aparecen en los presentes compuestos. Los isótopos incluyen átomos que tienen el mismo número atómico pero diferente número másico. A modo de ejemplo, y sin limitación, los isótopos de hidrógeno incluyen tritio y deuterio; los isótopos de carbono incluyen 11C, 13C, y 14C; y un isótopo de flúor incluye 18F.
La expresión "agente activo", como se usa en el presente documento, significa un compuesto de Fórmula (I) que, cuando se administra a un paciente, solo o en combinación con otro compuesto, elemento, o mezcla, confiere, directa o indirectamente, un efecto fisiológico al paciente. El efecto fisiológico indirecto puede producirse mediante un metabolito u otro mecanismo indirecto. Cuando el agente activo es un compuesto, entonces están incluidas sales, solvatos (incluyendo hidratos) del compuesto libre, formas cristalinas, formas no cristalinas, y cualquier polimorfo del compuesto. Todas las formas se contemplan en el presente documento independientemente de los métodos usados para obtenerlas.
Un guion ("-") que no está entre dos letras o símbolos se usa para indicar un punto de unión a un sustituyente. Por ejemplo -(CH2)cicloalquilo C3-C8 está unido a través de un carbono del grupo metileno (CH2).
"Alcanoílo" es un grupo alquilo como se define en el presente documento, unido covalentemente al grupo que sustituye mediante un puente ceto (-(C=O)-). Los grupos alcanoílo tienen el número indicado de átomos de carbono, estando incluido el carbono del grupo ceto en los átomos de carbono numerados. Por ejemplo, un grupo alcanoílo C2 es un grupo acetilo que tiene la fórmula CH3(C=O)-.
El término "alquilo", como se usa en el presente documento, significa un grupo hidrocarburo alifático saturado ramificado o de cadena lineal que tiene el número especificado de átomos de carbono, generalmente de 1 a aproximadamente 12 átomos de carbono. La expresión alquilo C1-C6, como se usa en el presente documento, indica un grupo alquilo que tiene 1, 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono. Otras realizaciones incluyen grupos alquilo que tienen de 1 a 8 átomos de carbono, de 1 a 4 átomos de carbono, o 1 o 2 átomos de carbono, por ejemplo alquilo C1-C6, alquilo C1-C4, y alquilo C1-C2. Cuando alquilo Cü-Cn se usa en el presente documento junto con otro grupo, por ejemplo, (cicloalquilo)alquilo C0-C4, el grupo indicado, en este caso cicloalquilo, está unido directamente por un enlace covalente sencillo (Co), o unido por una cadena de alquilo que tiene el número especificado de átomos de carbono, en este caso 1, 2, 3 o 4 átomos de carbono. Algunos ejemplos de alquilo incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, 3-metilbutilo, t-butilo, n-pentilo, y sec-pentilo.
El término "alcoxi" representa un grupo alquilo como se ha definido anteriormente con el número indicado de átomos de carbono unido a través de un puente de oxígeno. Algunos ejemplos de alcoxi incluyen metoxi, etoxi, n- propoxi, i-propoxi, n-butoxi, 2-butoxi, t-butoxi, n-pentoxi, 2-pentoxi, 3-pentoxi, isopentoxi, neopentoxi, n-hexoxi, 2-hexoxi, 3-hexoxi, y 3-metilpentoxi.
El término "arilo", como se usa en el presente documento, significa grupos aromáticos que contienen solo carbono en el anillo o anillos aromáticos. Los grupos arilo habituales contienen de 1 a 3 anillos separados, condensados, o colgantes y de 6 a aproximadamente 18 átomos de anillo, sin heteroátomos como miembros de anillo. Cuando se indique, tales grupos arilo pueden estar además sustituidos con átomos o grupos de carbono o que no sean carbono. Los grupos arilo bicíclicos pueden estar además sustituidos con átomos o grupos de carbono o que no sean carbono. Los grupos arilo bicíclicos pueden contener dos anillos aromáticos condensados (naftilo) o un anillo aromático condensado con un grupo cíclico no aromático de 5 a 7 miembros que contiene opcionalmente 1 o 2 heteroátomos elegidos independientemente entre N, O, y S, por ejemplo un grupo 3,4-metilendioxi-fenilo. Los grupos arilo incluyen, por ejemplo, fenilo, naftilo, incluyendo 1 -naftilo y 2-naftilo, y bifenilo.
El término "cicloalquilo", como se usa en el presente documento, indica un grupo hidrocarburo anular saturado, que tiene solo átomos de carbono en el anillo y que tiene el número especificado de átomos de carbono, habitualmente de 3 a aproximadamente 8 átomos de carbono de anillo, o de 3 a aproximadamente 7 átomos de carbono. Algunos ejemplos de grupos cicloalquilo incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, o ciclohexilo así como grupos anulares saturados en puente o jaula tales como norborano o adamantano.
El término "cicloalquenilo", como se usa en el presente documento, significa un grupo hidrocarburo anular saturado, que comprende uno o más enlaces carbono-carbono insaturados, que pueden aparecer en cualquier punto estable del anillo, y que tiene el número especificado de átomos de carbono. Los grupos cicloalquenilo monocíclicos tienen habitualmente de 3 a aproximadamente 8 átomos de carbono de anillo o de 3 a 7 (3, 4, 5, 6, o 7) átomos de carbono de anillo. Los sustituyentes del cicloalquenilo pueden estar colgando de un átomo de nitrógeno o carbono sustituido, o un átomo de carbono sustituido que puede tener dos sustituyentes puede tener un grupo cicloalquenilo, que está unido como grupo espiránico. Algunos ejemplos de grupos cicloalquenilo incluyen ciclopropenilo, ciclobutenilo, ciclopentenilo, o ciclohexenilo así como grupos anulares saturados en puente o jaula tales como norborneno.
El término "heteroarilo", como se usa en el presente documento, indica un anillo heterocíclico estable monocíclico de 5 a 7 miembros o bicíclico de 7 a 10 miembros que tiene al menos un anillo aromático que contiene de 1 a 4, o específicamente de 1 a 3, heteroátomos elegidos entre N, O, y S, siendo carbono los átomos de anillo restantes. Cuando el número total de átomos de S y O en el grupo heteroarilo excede de 1, estos heteroátomos no son adyacentes entre sí. Específicamente, el número total de átomos de S y O en el grupo heteroarilo es no más de 2, más específicamente el número total de átomos de S y O en el grupo heteroarilo es no más de 1. Un átomo de nitrógeno en un grupo heteroarilo puede estar opcionalmente cuaternarizado. Cuando se indique, tales grupos heteroarilo pueden estar además sustituidos con átomos o grupos de carbono o que no sean carbono. Tal sustitución puede incluir fusión con un grupo cíclico saturado de 5 a 7 miembros que contiene opcionalmente 1 o 2 heteroátomos elegidos independientemente entre N, O, y S, para formar, por ejemplo, un grupo [1,3]dioxolo[4,5-c]piridilo. En ciertas realizaciones, se usan grupos heteroarilo de 5 a 6 miembros. Algunos ejemplos de grupos heteroarilo incluyen, pero no se limitan a, piridilo, indolilo, pirimidinilo, piridizinilo, pirazinilo, imidazolilo, oxazolilo, furanilo, tiofenilo, tiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, quinolinilo, pirrolilo, pirazolilo, benzo[b]tiofenilo, isoquinolinilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, tienilo, isoindolilo, y 5,6,7,8-tetrahidroisoquinolina.
"Haloalquilo" incluye grupos alquilo tanto ramificados como de cadena lineal que tienen el número especificado de átomos de carbono, sustituidos con 1 o más átomos de halógeno, hasta el número máximo permisible de átomos de halógeno. Algunos ejemplos de haloalquilo incluyen, pero no se limitan a, trifluorometilo, difluorometilo, 2-fluoroetilo, y pentafluoroetilo.
"Haloalcoxi" es un grupo haloalquilo como se define en el presente documento unido a través de un puente de oxígeno (oxígeno de un radical alcohol).
"Halo" o "halógeno" es cualquiera de fluoro, cloro, bromo, y yodo.
"Mono y/o dialquilamino" es un grupo alquilamino secundario o terciario, en donde los grupos alquilo son grupos alquilo elegidos independientemente, como se definen en el presente documento, que tienen el número indicado de átomos de carbono. El punto de unión del grupo alquilamino se encuentra en el nitrógeno. Algunos ejemplos de grupos mono y dialquilamino incluyen etilamino, dimetilamino, y metilpropilamino.
El término "sustituido", como se usa en el presente documento, significa que uno o más hidrógenos del átomo o grupo designado están reemplazados con una selección del grupo indicado, con la condición de que no se exceda la valencia normal de los átomos designados. Cuando el sustituyente es oxo (es decir, =O), entonces se reemplazan 2 hidrógenos en el átomo. Cuando un grupo oxo sustituye restos aromáticos, el anillo parcialmente insaturado correspondiente reemplaza el anillo aromático. Por ejemplo, un grupo piridilo sustituido con oxo es una piridona. Un compuesto estable o estructura estable pretende indicar un compuesto que es suficientemente robusto para sobrevivir al aislamiento de una mezcla de reacción, y la posterior formulación en un agente terapéutico eficaz.
A menos que se especifique de otro modo, los sustituyentes se nombran en la estructura central. Por ejemplo, se ha de entender que cuando se enumera (cicloalquilo)alquilo como posible sustituyente, el punto de unión de este sustituyente a la estructura central está en la parte alquilo, o cuando se enumera arilalquilo como posible sustituyente, el punto de unión a la estructura central está en la parte alquilo.
Los grupos adecuados que pueden estar presentes en una posición "sustituida" u "opcionalmente sustituida" incluyen, pero no se limitan a, halógeno; ciano; hidroxilo; nitro; azido; alcanoílo (tal como un grupo alcanoílo C2-C6 tal como acilo 0 similar); carboxamido; grupos alquilo (incluyendo grupos cicloalquilo) que tienen de 1 a aproximadamente 8 átomos de carbono, o de 1 a aproximadamente 6 átomos de carbono; grupos alquenilo y alquinilo incluyendo grupos que tienen una o más uniones insaturadas y de 2 a aproximadamente 8, o de 2 a aproximadamente 6 átomos de carbono; grupos alcoxi que tienen una o más uniones de oxígeno y de 1 a aproximadamente 8, o de 1 a aproximadamente 6 átomos de carbono; ariloxi tal como fenoxi; grupos alquiltio incluyendo los que tienen una o más uniones tioéter y de 1 a aproximadamente 8 átomos de carbono, o de 1 a aproximadamente 6 átomos de carbono; grupos alquilsulfinilo incluyendo los que tienen una o más uniones sulfinilo y de 1 a aproximadamente 8 átomos de carbono, o de 1 a aproximadamente 6 átomos de carbono; grupos alquilsulfonilo incluyendo los que tienen una o más uniones sulfonilo y de 1 a aproximadamente 8 átomos de carbono, o de 1 a aproximadamente 6 átomos de carbono; grupos aminoalquilo incluyendo grupos que tienen uno o más átomos de N y de 1 a aproximadamente 8, o de 1 a aproximadamente 6 átomos de carbono; arilo que tiene 6 o más carbonos y uno o más anillos (por ejemplo, fenilo, bifenilo, naftilo, o similar, cada anillo aromático sustituido o sin sustituir); arilalquilo que tiene de 1 a 3 anillos separados o condensados y de 6 a aproximadamente 18 átomos de carbono de anillo, siendo bencilo un grupo arilalquilo a modo de ejemplo; arilalcoxi que tiene 1 a 3 anillos separados o condensados y de 6 a aproximadamente 18 átomos de carbono de anillo, siendo benciloxi un grupo arilalcoxi a modo de ejemplo; o un grupo heterocíclico saturado, insaturado, o aromático que tiene de 1 a 3 anillos separados o condensados con 3 a aproximadamente 8 miembros por anillo y uno o más átomos de N, O o S, por ejemplo cumarinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, quinazolinilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, furanilo, pirrolilo, tienilo, tiazolilo, triazinilo, oxazolilo, isoxazolilo, imidazolilo, indolilo, benzofuranilo, benzotienilo, benzotiazolilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, y pirrolidinilo. Tales grupos heterocíclicos pueden estar además sustituidos, por ejemplo con hidroxi, alquilo, alcoxi, halógeno y amino.
La expresión "forma de dosificación", como se usa en el presente documento, significa una unidad de administración de un agente activo. Algunos ejemplos de formas de dosificación incluyen comprimidos, cápsulas, inyecciones, suspensiones, líquidos, emulsiones, cremas, pomadas, supositorios, formas inhalables, formas transdérmicas, y similares. Una forma de dosificación a modo de ejemplo es una forma de dosificación oral sólida.
La expresión "composiciones farmacéuticas", como se usa en el presente documento, son composiciones que comprenden al menos un agente activo, tal como un compuesto o sal de Fórmula (I), y al menos otra sustancia, tal como un vehículo. Las composiciones farmacéuticas cumplen con los estándares de GMP (buenas prácticas de fabricación) de la FDA de los Estados Unidos de América para fármacos humanos o no humanos. Las composiciones farmacéuticas pueden formularse en una forma de dosificación.
La expresión "sal farmacéuticamente aceptable", como se usa en el presente documento, incluye derivados de los compuestos desvelados en los que el compuesto precursor se modifica haciendo sales de adición de ácidos o bases, inorgánicos u orgánicos, del mismo. Las sales de los presentes compuestos pueden sintetizarse a partir de un compuesto precursor que contiene un resto básico o ácido mediante métodos químicos convencionales. En general, tales sales pueden prepararse haciendo reaccionar formas de ácido libre de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de una base adecuada (tal como hidróxido, carbonato, bicarbonato de Na, Ca, Mg o K, o similar), o haciendo reaccionar formas de base libre de estos compuestos con una cantidad estequiométrica del ácido apropiado. Tales reacciones se realizan habitualmente en agua o en un disolvente orgánico, o en una mezcla de los dos. En general, se usan medios no acuosos tales como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol, o acetonitrilo, cuando sea factible. Las sales de los presentes compuestos incluyen además solvatos de los compuestos y de las sales de los compuestos.
Algunos ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, sales de ácidos minerales u orgánicos de restos básicos tales como aminas; sales de álcalis o bases orgánicas de restos ácidos tales como ácidos carboxílicos; y similares. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen las sales no tóxicas convencionales y las sales de amonio cuaternario de los compuestos precursores formadas, por ejemplo, a partir de ácidos inorgánicos u orgánicos no tóxicos. Por ejemplo, las sales de ácidos no tóxicos convencionales incluyen las obtenidas a partir de ácidos inorgánicos, tales como clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, sulfámico, fosfórico, nítrico y similares; y las sales preparadas a partir de ácidos orgánicos tales como acético, propiónico, succínico, glicólico, esteárico, láctico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, pamoico, maleico, hidroximaleico, fenilacético, glutámico, benzoico, salicílico, mesílico, esílico, besílico, sulfanílico, 2-acetoxibenzoico, fumárico, toluenosulfónico, metanosulfónico, etanodisulfónico, oxálico, isetiónico, HOOC-(CH2)n-COOH donde n es 0-4, y similares. Pueden encontrarse listas de sales adecuadas adicionales, por ejemplo, en Remington's Pharmaceutical Sciences, 17a ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., pág. 1418 (1985).
El término "vehículo", como se usa en el presente documento, aplicado a composiciones farmacéuticas se refiere a un diluyente, excipiente, o vehículo con el que se proporciona el compuesto activo.
El término "paciente", como se usa en el presente documento, es un ser humano con necesidad de tratamiento médico. El tratamiento médico puede incluir tratamiento de una afección existente, tal como una enfermedad o trastorno, tratamiento profiláctico o preventivo, o tratamiento diagnóstico.
El término "proporcionar", como se usa en el presente documento, significa dar, administrar, vender, distribuir, transferir (con lucro o no), fabricar, componer, o dispensar.
La expresión "proporcionar un compuesto de Fórmula (I) con al menos un agente terapéutico adicional", como se usa en el presente documento, significa que el compuesto de Fórmula (I) y el agente o agentes activos adicionales se proporcionan simultáneamente en una forma de dosificación individual, se proporcionan de forma concomitante en formas de dosificación separadas, o se proporcionan en formas de dosificación separadas para administración separada cierta cantidad de tiempo que está dentro del tiempo en el que tanto el compuesto de Fórmula (I) como el al menos un agente activo adicional están en la corriente sanguínea de un paciente. El compuesto de Fórmula (I) y el agente activo adicional no necesitan ser prescritos a un paciente por el mismo profesional de cuidado médico. El agente o agentes activos adicionales pueden no requerir prescripción. La administración del compuesto de Fórmula (I) o el al menos un agente activo adicional puede producirse mediante cualquier vía apropiada, por ejemplo, comprimidos orales, cápsulas orales, líquidos orales, inhalación, inyección, supositorios o contacto tópico.
El término "tratamiento", como se usa en el presente documento, incluye proporcionar un compuesto de Fórmula (I), ya sea como único agente activo o junto con al menos un agente activo adicional suficiente para: (a) prevenir que se produzca una enfermedad o un síntoma de una enfermedad en un paciente que puede estar predispuesto a la enfermedad pero que aún no se ha diagnosticado que la tiene; (b) inhibir la enfermedad, es decir, detener su desarrollo; y (c) aliviar la enfermedad, es decir, causar la regresión de la enfermedad. "Tratar" y "tratamiento" también significan proporcionar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I), como único agente activo o junto con al menos un agente activo adicional a un paciente que padece trastornos de consumo de sustancias, esquizofrenia y trastornos mentales relacionados, trastornos cognitivos, impulsividad, obesidad, depresión, un trastorno bipolar, o discinesias asociadas a enfermedad de Parkinson (PD) o tratamiento de PD con L-DOPA.
La expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" de una composición farmacéutica, como se usa en el presente documento, significa una cantidad eficaz, cuando se administra a un paciente, para proporcionar un beneficio terapéutico tal como una mejora de síntomas, por ejemplo, para tratar a un paciente que padece de un trastorno de consumo de sustancias, esquizofrenia y trastorno mental relacionado, un trastorno cognitivo, impulsividad, obesidad, depresión, un trastorno bipolar, o una discinesia asociada a enfermedad de Parkinson (PD) o tratamiento de PD con L-DOPA.
Los compuestos pueden administrarse como producto químico puro, o administrarse como una composición farmacéutica. Por consiguiente, una realización proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto o sal farmacéuticamente aceptable de Fórmula (I), junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable. La composición farmacéutica puede contener un compuesto o sal de Fórmula (I) como único agente activo, o puede contener uno o más agentes activos adicionales.
Los compuestos pueden administrarse por vía oral, tópica, parenteral, por inhalación o pulverización, por vía sublingual, transdérmica, administración bucal, rectal, como solución oftálmica, o mediante otros medios, en formulaciones de dosificación unitarias que contienen vehículos farmacéuticamente aceptables convencionales. La composición farmacéutica puede formularse como cualquier forma farmacéuticamente útil, por ejemplo, como un aerosol, una crema, un gel, una píldora, una cápsula, un comprimido, un jarabe, un parche transdérmico, o una solución oftálmica. Algunas formas de dosificación, tales como comprimidos y cápsulas, se subdividen en dosis unitarias de tamaño adecuado que contienen cantidades apropiadas de los componentes activos, por ejemplo, una cantidad eficaz para conseguir el fin deseado.
Los vehículos incluyen excipientes y diluyentes y deben tener una pureza suficientemente alta y una toxicidad suficientemente baja para hacerlos adecuados para administración al paciente que se trata. El vehículo puede ser inerte o puede poseer beneficios farmacéuticos por sí mismo. La cantidad de vehículo empleada junto con el compuesto es suficiente para proporcionar una cantidad práctica de material para administración por dosis unitaria del compuesto.
Las clases de vehículos incluyen, por ejemplo, agentes de tamponamiento, agentes colorantes, diluyentes, disgregantes, emulgentes, aromatizantes, sustancias de deslizamiento, lubricantes, conservantes, estabilizantes, tensioactivos, agentes de formación de comprimidos, y agentes humectantes. Algunos vehículos pueden enumerarse en más de una clase, por ejemplo puede usarse aceite vegetal como lubricante en algunas formulaciones y como diluyente en otras. Algunos vehículos farmacéuticamente aceptables a modo de ejemplo incluyen azúcares, almidones, celulosas, tragacanto en polvo, malta, gelatina, talco, y aceites vegetales. Pueden incluirse agentes activos opcionales en una composición farmacéutica, que no interfieran sustancialmente con la actividad del compuesto de Fórmula (I).
Las composiciones farmacéuticas pueden formularse para administración oral. Estas composiciones contienen entre un 0,1 y un 99 por ciento en peso ("% en peso") de un compuesto de Fórmula (I), y al menos aproximadamente un 5 % en peso. Algunas realizaciones contienen de aproximadamente un 25 % en peso a aproximadamente un 50 % en peso o de aproximadamente un 5 % en peso a aproximadamente un 75 % en peso de un compuesto de Fórmula (I). La composición farmacéutica puede formularse en un envase que comprende la composición farmacéutica que contiene un compuesto de Fórmula (I) o una sal del mismo en un recipiente y que comprende además instrucciones para usar la composición con el fin de obtener un efecto terapéutico en un paciente.
La composición farmacéutica también puede formularse en un envase que comprende la composición farmacéutica del compuesto de Fórmula (I) o una sal del mismo en un recipiente y que comprende además instrucciones para usar la composición para tratar un paciente que padece, por ejemplo, trastornos de consumo de sustancias, esquizofrenia y trastornos mentales relacionados, trastornos cognitivos, impulsividad, obesidad, depresión, un trastorno bipolar, o discinesias asociadas a enfermedad de Parkinson (PD) o tratamiento de PD con L-DOPA.
En una realización, un método para tratar un trastorno de consumo de sustancias, esquizofrenia o un trastorno mental relacionado, un trastorno cognitivo, impulsividad, obesidad, depresión, un trastorno bipolar o una discinesia asociada a enfermedad de Parkinson (PD) o tratamiento de PD con L-DOPA en un paciente comprende proporcionar una cantidad eficaz de un compuesto o sal de Fórmula (I) a un paciente con necesidad de tal tratamiento. Alternativamente, el compuesto de Fórmula (I) puede proporcionarse en forma de una composición farmacéutica.
En una realización, un método para tratar trastornos de consumo de sustancias (por ejemplo, cocaína, heroína, metanfetamina, opioides (incluyendo hidromorfona, hidrocodona, oxicodona, oximorfona, etilmorfina, buprenorfina, morfina, codeína, etc.), cannabis, alcohol, nicotina, y similares), esquizofrenia y trastornos mentales relacionados, trastornos cognitivos, impulsividad, obesidad, depresión, un trastorno bipolar, o discinesias asociadas a enfermedad de Parkinson (PD) o tratamiento de PD con L-DOPA comprende proporcionar una cantidad eficaz de un compuesto o sal de Fórmula (I) a un paciente con necesidad de tal tratamiento. Alternativamente, el compuesto de Fórmula (I) puede proporcionarse en forma de una composición farmacéutica.
Los compuestos de Fórmula (I) pueden usarse como herramientas de investigación en el estudio de subtipos de receptores de dopamina o usarse como biomarcadores o herramientas de diagnóstico médico, por ejemplo, mediante desarrollo de ligandos de tomografía por emisión de positrones (PET), o formación de imágenes por resonancia magnética (MRI). En una realización, los compuestos de Fórmula (I) comprenden un radioisótopo como se describe en el presente documento (11C, 18F, etc.) para uso para convertir el compuesto en un ligando de PET adecuado. La presente invención se ilustra adicionalmente mediante los siguientes ejemplos que no deberían interpretarse como limitantes.
EJEMPLOS
Ejemplo 1: Síntesis de derivados de piperazina butanodiil/2-butenodiil arilcarboxamida
Se adquirieron disolventes anhidros en Aldrich y se usaron sin purificación adicional excepto el tetrahidrofurano, que se destiló reciente en benzofenona sódica cetilo. Todos los demás productos químicos y reactivos se adquirieron en Sigma-Aldrich Co. LLC, Combi-Blocks, TCI America, Acros Organics, Maybridge, y Alfa Aesar. Todos los productos finales de amina se convirtieron en la sal de oxalato. Los datos espectroscópicos y rendimientos se refieren a la forma de base libre de los compuestos. Se realizo cromatografía Teledyne ISCO CombiFlash Rf o en columna de vidrio ultrarrápida usando gel de sílice (EMD Chemicals, Inc.; 230-400 de malla, 60 A). Los espectros de RMN 1H y 13C se adquirieron usando un espectrómetro Varian Mercury Plus 400 a 400 MHz y 100 MHz, respectivamente. Los desplazamientos químicos se informaron en partes por millón (ppm) y se referenciaron con respecto al disolvente deuterado para los espectros de 1H (CDCh, 7,26, CD3OD, 3,31 o DMSO-cfe, 2,50) y los espectros de 13C (CDCh, 77,2, CD3OD, 49,0 o DMSO-cfe, 39,5). Los datos de cromatografía de gases-espectrometría de masas (GC/MS) se adquirieron (cuando fue posible) usando un aparato Agilent Technologies (Santa Clara, CA) 6890N GC equipado con una columna HP-5MS (PH ME siloxano reticulado al 5 %, 30 m x 0,25 mm d.i. x 0,25 |jm de grosor de película) y un detector iónico selectivo de masa 5973 en modo impacto electrónico. Se usó helio de calidad ultrapura como gas portador a un caudal de 1,2 ml/minuto (min). Las temperaturas del puerto de inyección y la línea de transferencia fueron 250 y 280 °C, respectivamente, y el gradiente de la temperatura del horno usado fue el siguiente: la temperatura inicial (100 °C) se mantuvo durante 3 min y a continuación se aumentó a 295 °C a 15 °C/min durante 13 min, y finalmente se mantuvo a 295 °C durante 10 min. Los análisis de combustión fueron realizados por Atlantic Microlab, Inc. (Norcross, GA) y los resultados coinciden en ±0,4 % con los valores calculados. Los valores de cLogP y área superficial polar (PSA) se calcularon usando ChemDraw Professional Ultra 15.0. La determinación del punto de fusión se realizó usando un aparato de punto de fusión Thomas-Hoover y son sin corregir. Basándose en los datos de RMN y combustión, todos los compuestos finales son > 95 % puros.
Abreviaturas usadas: CDI, 1,1'-carbonildiimidazol; DMF, dimetilformamida; h, hora; min, minuto; TA, temperatura ambiente; THF, tetrahidrofurano.
Las estrategias sintéticas generales usadas para los derivados de piperazina butanodiil/2-butenodiil arilcarboxamida se muestran en los Esquemas 1-5.
Figure imgf000014_0001
Reactivos y condiciones: (a) HNO3 fumante, 0 °C a temperatura ambiente, 2 h; (b) BH3.CS2, 12 h; (c) PCC, CH2CI2, durante una noche; (d) Ph3P CH3Br, ferc-butóxido de litio, THF-78 a 0 a continuación temperatura ambiente, 8 h; (e) Pd al 10 %/C, H2, 50 psi, EtOAc, 45 min; (f) bis(2-cloroetil)amina.HCl, dietilenglicol monoetiléter, 150 °C, 7 h; (g) 1 ) IPA, reflujo, 3 h 2) hidrazina, EtOH, reflujo, durante una noche; (h) ArCOOH, EDC/HoBt, DIPEA, DCM/DMF, 0 °C a ta; (i) complejo (Salen)Co(III)(OAc), H2O, THF, 72 h.
Esquema 2. Síntesis de (±), (R), y (S)-19
Figure imgf000015_0001
HPLC preparativa quiral
Reactivos y condiciones: (a) BH3.CS2, 12 h; (b) PCC, CH2CI2, durante una noche; (c) Ph^P CH3Br, ferc-butóxido de litio, THF-78 a 0 a continuación temperatura ambiente, 8 h; (d) Pd al 10 %/C, H2, 50 psi, EtOAc, 45 min; (e) bis(2-cloroetil)amina.HCl, dietilenglicol monoetiléter, 150 °C, 7 h; (f) 1) IPA, reflujo, 3 h 2) hidrazina, EtOH, reflujo, durante una noche; (g) ArCOOH, EDC/HoBt, DIPEA, DCM/DMF, 0 °C a ta; (h) complejo (Salen)Co(III)(OAc), H2O, THF, 72 h.
Figure imgf000016_0001
Reactivos y condiciones: (a) DAST, DCM seco, -78 °C, durante una noche (b) hidrazina, EtOH, reflujo, durante una noche; (c) ArCOOH, EDC/Hobt, DIPEA, DCM/DMF, 0 °C a temperatura ambiente.
Esquema 4. Síntesis de 35
Figure imgf000016_0002
Reactivos y condiciones: (a) B6 , K2CO3, acetona, reflujo, durante una noche; (b) hidrazina, EtOH, reflujo, durante una noche; (c) ácido 4-metiMH-imidazol-2-carboxílico, CDI, THF, 0 °C a TA, durante una noche.
P
Figure imgf000017_0001
Ácido 3-cloro-4-metoxi-5-nitrobenzoico (A2): se añadió ácido 3-cloro-4-metoxibenzoico (5,0 g, 26,79 mmol) en pequeñas porciones a HNO3 fumante frío (90 %, 25 ml) a 0-5 °C. La mezcla de reacción se dejó calentar a 20 °C y se agitó durante 2 h adicionales. Se añadió agua fría (50 ml), y el producto precipitado se extrajo en CHCh y se lavó con solución salina saturada y se concentró. El producto se purificó por cromatografía ultrarrápida usando MeOH/CHCh al 8 % como eluyente para proporcionar 5,28 g (85 %) de producto. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 8,27 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 4,02 (s, 3H); RMN 13C (100 MHz, CD3OD) 8165,9, 153,9, 146,4, 136,3, 131,56, 125,9, 63,2; GC-MS (EI) m/z 231 (M+).
(3-Cloro-4-metoxi-5-nitrofenil)metanol (A3): se añadió gota a gota complejo de borano y sulfuro de dimetilo (10 M, 3,072 g, 40,44 mmol) a una solución de a 2 (5,28 g, 22,85 mmol) en Th F (60 ml) a 0-5 °C. La mezcla se dejó llegar a TA y se agitó durante una noche. La mezcla de reacción se enfrió a 0-5 °C y se inactivó cuidadosamente por adición gota a gota de MeOH. La mezcla de reacción se evaporó para dar 4,7 g de producto crudo y se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 8,49-8,38 (m, 2H), 5,50 (s, 2H), 4,82 (m, 3H), 3,70 (s a, 1H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8148,9, 145,2, 137,9, 132,5, 130,6, 121,3, 63,1,62,5; GC-MS (EI) m/z 217 (M+).
3-Cloro-4-metoxi-5-nitrobenzaldehído (A4) (Mizuhara et al. Structure-activity relationship study of phenylpyrazole derivatives as a novel class of anti-HIV agents. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2013, 23, 4557-61): se añadió clorocromato de piridinio (PCC, 9,31 g, 43,20 mmol) a una solución de A3 (4,7 g, 21,60 mmol) en CH2Ch (100 ml). La mezcla de reacción se agitó durante una noche y se filtró a través de una capa de Celite. El producto se purificó por cromatografía ultrarrápida usando EtOAc/hexanos al 20 % como eluyente para proporcionar 4,0 g (85 %) del producto en forma de un sólido amarillo. RMN 1H (400 MHz, CDCla) 9,94 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 8,13 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,10 (s, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCls) 8187,8, 154,4, 145,7, 134,5, 132,2, 131,9, 124,8, 63,0; GC-MS (EI) m/z 215 (M+).
1-Cloro-2-metoxi-3-nitro-5-vinilbenceno (A5): se añadió gota a gota terc-butóxido de litio (4,46 g, 55,81 mmol) a una suspensión de bromuro de metiltrifenilfosfonio (7,90 g, 22,32 mmol) en THF seco (100 ml) a -78 °C en atmósfera de argón. La mezcla de reacción se dejó calentar a 0-20 °C y se agitó durante 3 h y se advirtió la formación de un precipitado amarillo. La solución de A4 (4,0 g, 18,60 mmol) en THF (50 ml) se añadió gota a gota durante 30 min. La mezcla de reacción se mantuvo a 20 °C y se agitó durante 8 h. La mezcla de reacción se inactivó con solución saturada de NH4Cl (50 ml) y el THF se retiró al vacío. El producto crudo se extrajo con EtOAc (3 x 25 ml). La fase orgánica se combinó, se secó, se concentró y se purificó usando cromatografía ultrarrápida con dietil éter/hexanos al 5 % como eluyente para proporcionar 3,17 g (85 %) del producto en forma de un sólido amarillo. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 7,59 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 6,55-6,47 (m, 1H), 5,69 (d, J = 16 Hz, 1H), 5,32 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,92 (s, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCla) 8148,7, 145,2, 134,5, 133,1, 131,6, 130,5, 120,8, 117,2, 62,3. GC-MS (EI) m/z 213 (M+).
3- Cloro-5-etil-2-metoxianilina (A6): una mezcla de A5 (3,17 g, 14,8 mmol) y Pd al 10 %/C (0,350 g) en acetato de etilo (30 ml) se agitó en atmósfera de hidrógeno (45 psi) a temperatura ambiente durante 45 minutos. La mezcla de reacción se filtró a través de una capa de Celite y se evaporó al vacío. La mezcla de reacción fue suficientemente pura para usarse en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6,60 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,44 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,96 (s a, 2H), 3,83 (s, 3H), 2,48 (c, J = 7,6 Hz, 2H), 1,19 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8 141,3, 141,0, 140,9, 127,0, 118,3, 113,7, 59,4, 28,1, 15,2. GC-MS (EI) m/z 185 (M+).
1- (3-Cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazina (A7): la mezcla de reacción de A6 (2,8 g, 15,13 mmol) y clorhidrato de bis(2-cloroetil)amina (2,69 g, 15,13 mmol) en dietilenglicol monometil éter (4,0 ml) se calentó a 150 °C durante 7 h en atmósfera inerte. La mezcla de reacción se dejó llegar a TA, se añadió hielo picado y la mezcla se neutralizó con NaOH 2 M a pH 8-9, seguido de extracción con acetato de etilo (250 ml). La fase orgánica se recogió, se lavó dos veces con agua enfriada con hielo, se concentró y se purificó por cromatografía en columna usando MeOH/CHCh al 5 % como eluyente para proporcionar 2,7 g (70 %) de productos sólido. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 86,84 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,08-3,01 (m, 8H), 2,55 (c, J = 8 Hz, 2H), 1,20 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCls) 8146,8, 146,6, 140,9, 128,4, 122,4, 116,9, 59,2, 51,9, 46,8, 28,6, 15,6. GC-MS (EI) m/z 254,2 (M+). La sal de oxalato se precipitó en acetona; p.f. 190-191 °C. Anal. C13H-igClN2O^C2H2O4^ 0 ,5 H2O) C, H, N.
4- Amino-1-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)butan-2-ol (A9): se añadió 2- (2-(oxiran-2-il)etil)isoindolina-1,3-diona a 8 (0,768 g, 3,54 mmol) a la mezcla de reacción de A7 (0,90 g, 3,54 mmol) en 2-propanol (15 ml) y se agitó a reflujo durante 3 h. La formación de 2-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)isoindolina-1,3-diona se confirmó por cromatografía en capa fina (Kumar et al. J. Med. Chem., 2016, 59 (16), pág. 7634-7650). La mezcla de reacción se enfrió a 20 °C y se añadió hidrazina y la mezcla de reacción se calentó nuevamente a reflujo a 90° durante 7 h. La reacción se controló por TLC y cuando la reacción se completó, el disolvente se evaporó y se basificó con solución al 20 % de K2CO3 (20 ml), seguido de la extracción con cloroformo (250 ml). La fase orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 anhidro y el disolvente se evaporó para proporcionar el producto en forma de un aceite. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 86,77 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 3,85-3,81 (m, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,06 (s a, 4H), 2,86 (m, 2H), 2,72-2,70 (m, 2H), 2,53-2,44 (m, 4H), 2,37-2,28 (m, 3H), 1,53-1,44 (m,2H), 1,13 (t, J = 8,0 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8 146,3, 146,0, 140,7, 128,1, 122,2, 116,6, 66,2, 64,6, 58,9, 53,8, 50,3, 39,6, 37,7, 28,4, 15,4.
(S)-4-amino-1-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)butan-2-ol (A9S) se preparó mediante el método descrito para A9 usando (S)-2-(2-(oxiran-2-il)etil)isoindolina-1,3-diona (A8S); RMN 1H (400 MHz, CDCh) 86,99 (s, 1H), 6,88 (dd, J = 19,1, 8,2 Hz, 2H), 6,61 (s, 1H), 3,97 - 3,76 (m, 4H), 3,14 (s, 4H), 2,91 (d, J = 3,4 Hz, 6H), 2,79 (s, 3H), 2,55 (dt, J = 14,5, 7,3 Hz, 6H), 2,47 - 2,32 (m, 4H), 1,67 - 1,46 (m, 4H), 1,20 (t, J = 7,6 Hz, 4H).
(R) -4-amino-1-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)butan-2-ol (A9R) se preparó mediante el método descrito para A9 usando (R)-2-(2-(oxiran-2-il)etil)isoindolina-1,3-diona (A8R). El producto obtenido se tomó como tal en la siguiente etapa.
Procedimiento de amidación general A. El ácido carboxílico (1,0 mmol) se disolvió en una solución de cloroformo y dimetilformamida (8:2) y se enfrió a 0 °C. A esta solución se añadió 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (EDCI) (1,3 mmol) e hidroxibenzotriazol (Hobt) (1,2 mmol) (Org Biomol Chem. 2015;13(40):10162-78). Después de 30 min, se añadió 1 eq de la arilamina a 0 °C. A esta mezcla de reacción se añadió diisopropiletilamina (DIPEA) (1,5 mmol) y la mezcla de reacción continuo agitándose a temperatura ambiente durante 8 h. El progreso de la reacción se controló por TLC. Después de la compleción, se añadió solución saturada de bicarbonato sódico (NaHCOs) y los compuestos finales se extrajeron en cloroformo (50 ml x 4). La fase orgánica obtenida se evaporó para proporcionar la amida cruda, que se purificó usando cromatografía en columna ultrarrápida para proporcionar el producto puro deseado. Todos los enantiómeros y compuestos racémicos se caracterizaron por HPLC quiral.
W-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)-1H-indol-2-carboxamida (±)-29 se preparó a partir de ácido indol-2-carboxílico y A9 de acuerdo con el procedimiento de amidación general A. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando acetona/CHCh al 30 % como eluyente para dar el producto deseado con un 60,0 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 89,21 (s, 1H), 7,64 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,42 (t, J = 10,3 Hz, 2H), 7,37 (s, 1H), 7,27 (dd, J = 11,1,4,0 Hz, 1H), 7,13 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 6,62 (s, 1H), 4,10 - 3,87 (m, 2H), 3,84 (s, 3H), 3,57 - 3,39 (m, 1H), 3,16 (s, 3H), 2,84 (s, 2H), 2,55 (dd, J = 15,1, 7,6 Hz, 3H), 2,48 - 2,37 (m, 2H), 1,94 - 1,74 (m, 1H), 1,72 - 1,52 (m, 3H), 1,21 (t, J = 7,5 Hz, 3H). RMN 13C (101 MHz, CDCls) 8 162,89, 162,02, 161,43, 146,41, 145,72, 140,79, 136,06, 131,10, 128,25, 127,76, 124,27, 122,44, 121,72, 120,54, 116,59, 111,86, 101,69, 66,42, 63,67, 58,99, 53,61, 50,30, 38,06, 33,24, 28,40, 15,31; la sal de clorhidrato se precipitó en acetona; anal. (C26H33ClN4Os^HCl^2H2O) C, H, N.
(S) -W-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)-1H-indol-2-carboxamida ((S)-29) se preparó a partir de ácido indol-2-carboxílico y A9S de acuerdo con el procedimiento de amidación general A. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando acetona/CHCh al 30 % como eluyente para dar el producto deseado con un 55 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 89,42 (s, 1H), 7,64 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,43 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 7,40 (s, 1H), 7,31 - 7,22 (m, 1H), 7,13 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,89 - 6,81 (m, 1H), 6,62 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 4,02 - 3,86 (m, 2H), 3,85 (d, J = 10,7 Hz, 3H), 3,50 (ddd, J = 13,1, 8,3, 3,9 Hz, 1H), 3,15 (s, 3H), 2,84 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 2,55 (dd, J = 15,1, 7,6 Hz, 3H), 2,48 - 2,34 (m, 2H), 1,91 - 1,77 (m, 1H), 1,64 (dtd, J = 13,8, 8,9, 4,6 Hz, 3H), 1,21 (t, J = 7,6 Hz, 3H). RMN 13C (101 MHz, CDCI3) 8 161,47, 146,41, 145,76, 140,76, 136,16, 131,14, 128,16, 127,61, 124,18, 122,44, 121,84, 120,38, 116,67, 111,77, 101,69, 66,48, 63,74, 58,98, 53,68, 50,39, 37,96, 33,10, 28,46, 28,21, 15,42. La sal de clorhidrato se precipitó en acetona; anal. (C26H33ClN4O3^HCl) C, H, N. [a]23D 34,54 (CHCI3, c 0,16) ee > 98 %. (R)-A/-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)-1H-indol-2-carboxamida ((R)-29) se preparó a partir de ácido índol-2-carboxílíco y A9R de acuerdo con el procedimiento de amídacíón general A. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando acetona/CHCh al 30 % como eluyente para dar el producto deseado con un 51 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 89,33 (s, 1H), 7,64 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,43 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,32 - 7,22 (m, 1H), 7,13 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,62 (s, 1H), 3,91 (dd, J = 13,1, 6,2 Hz, 2H), 3,84 (s, 3H), 3,58 - 3,41 (m, 1H), 3,16 (s, 3H), 2,85 (s, 2H), 2,56 (dd, J = 15,1, 7,6 Hz, 3H), 2,45 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 1,82 (s, 1H), 1,64 (d, J = 9,2 Hz, 3H), 1,21 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (101 MHz, CDCh) 8161,52, 146,26, 145,95, 140,77, 136,06, 131,15, 128,30, 127,72, 124,25, 122,33, 121,73, 120,52, 116,67, 111,87, 101,88, 66,43, 63,75, 59.09, 53,69, 50,39, 38,05, 33,26, 28,47; la sal de clorhidrato se precipitó en acetona; anal. (C26H33ClN4O3^HChH2O) C, H, N. [a]23D -27,89 (CHCh, c 0,23) ee > 98 %.
2-Cloro-1-nitro-3-vinilbenceno (B4): se usó el mismo procedimiento que se ha descrito para A5, partiendo de B3 (Kumar et al. J. Med. Chem., 2016, 59 (16), pág. 7634-7650) para dar el producto deseado con un 70 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 7,74 (dd, J = 8,0, 1,6 Hz, 1H), 7,64 (dd, J = 8,0, 1,6 Hz, 1H), 7,37 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,12 (dd, J = 17,2, 11,0 Hz, 1H), 5,81 (dd, J = 17,2, 0,8 Hz, 1H), 5,54 (dd, J = 10,8, 0,8 Hz, 1H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8 149,6, 138,9, 132,1, 129,9, 127,2, 124,8, 123,9, 119,6.
2-Cloro-3-etilanilina (B5): se usó el mismo procedimiento que se ha descrito para A6 usando B4 en EtOAc como disolvente. El producto fue suficientemente puro para usarse en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 6,99 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,66-6,62 (m, 2H), 4,04 (s a, 2H), 2,72 (c, J = 7,6 Hz, 2H), 1,22 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8143,1, 142,4, 126,9, 119,2, 118,9, 113,4, 27,1, 13,9.
1-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazina (B6): se usó el mismo procedimiento que se ha descrito para A7 partiendo de B5. El producto se purificó por cromatografía ultrarrápida usando MeOH/CHCh al 2 % como eluyente para dar el producto deseado con un 46 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 87,16-7,12 (m, 1H), 6,94-6,89 (m, 2H), 3,05-2,95 (m, 8H), 2,76 (c, J = 7,6 Hz, 2H), 1,21 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8 150,0, 143,2, 128,7, 126,9, 123.9, 118,0, 53,0, 46,3, 27,5, 14,1. La sal de oxalato se precipitó en acetona; p.f. 166-167 °C. Anal. (C12H-i7ClN2^1,5C2H2O4^H2O) C, H, N.
4-Amino-1-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butan-2-ol (B8): se usó el mismo procedimiento que se ha descrito para A9, empleando B7 para proporcionar B8 con un 90 % de rendimiento y fue suficientemente puro para usarse en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 7,03-7,0 (m, 1H), 6,82-6,77 (m, 2H), 3,80-3,71 (m, 1H), 2,92-2,61 (m, 10H), 2,49-2,24 (m, 7H), 1,46-1,40 (m, 2H), 1,10 (t, J = 7,6, 0,8 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8149,2, 142,8, 128,3, 126,6, 123,6, 117,7, 65,8, 64,4, 51,3, 39,3, 37,5, 27,1, 13,8.
(S)-4-amino-1-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butan-2-ol (B8S) se preparó mediante el método descrito para B8 usando (S)-2-(2-(oxiran-2-il)etil)isoindolina-1,3-diona B7S.
(R)-4-amino-1-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butan-2-ol (B8R) se preparó mediante el método descrito para A9 usando (R)-2-(2-(oxiran-2-il)etil)isoindolina-1,3-diona B7R.
W-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)-1H-indol-2-carboxamida (±)-19 se preparó a partir de ácido indol-2-carboxílico y B8 de acuerdo con el procedimiento de amidación general A. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando acetona/CHCh al 30 % como eluyente para dar el producto deseado con un 60 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 89,20 (s, 1H), 7,64 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,43 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,31 - 7,23 (m, 1H), 7,20 - 7,09 (m, 1H), 7,00 - 6,88 (m, 2H), 6,84 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 3,91 (ddd, J = 13,5, 10,7, 5,2 Hz, 3H), 3,57 - 3,41 (m, 1H), 3,07 (s, 3H), 2,88 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 2,78 (c, J = 7,5 Hz, 2H), 2,61 (s, 2H), 2,51 - 2,39 (m, 2H), 1,89 - 1,76 (m, 1H), 1,64 (ddd, J = 18,9, 9,1, 4,4 Hz, 1H), 1,22 (c, J = 7,5 Hz, 3H). RMN 13C (101 MHz, CDCh) 8 161,36, 149,36, 143,15, 136,05, 131,04, 128,50, 127,81, 126,90, 124,19, 124,14, 121,76, 120,53, 117,96, 111,76, 101,73, 66,52, 63,62, 51,65, 51,34, 38,00, 33,11, 27,46, 27,32, 14,07. La sal de clorhidrato se precipitó en acetona; anal. (C25H3-iClN4O2^HChH2O) C, H, N.
(R)-A/-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)-1H-indol-2-carboxamida (R)-19 se preparó a partir de ácido indol-2-carboxílico y 8R de acuerdo con el procedimiento de amidación general A. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando acetona/CHCh al 30 % como eluyente para dar el producto deseado con un 50 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 89,44 (s, 1H), 7,64 (d, J = 7,7 Hz, 2H), 7,44 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,33 - 7,21 (m, 1H), 7,15 (dt, J = 14,9, 7,5 Hz, 1H), 6,95 (dd, J = 17,8, 7,6 Hz, 2H), 6,85 (s, 2H), 4,01 - 3,82 (m, 3H), 3,51 (s, 1H), 3,07 (s, 3H), 2,89 (s, 2H), 2,78 (dd, J = 14,8, 7,3 Hz, 2H), 2,63 (s, 2H), 2,52 - 2,40 (m, 2H), 1,83 (s, 1H), 1,64 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 1,23 (t, J = 7,4 Hz, 3H). RMN 13C (101 MHz, CDCh) 8 161,54, 149,26, 143,23, 136,18, 131,14, 128,72, 127,64, 126,78, 124,22, 121,70, 120,49, 117,97, 111,85, 101,83, 66,45, 63,70, 51,63, 38,09, 33,26, 27,46, 14,02. La sal de clorhidrato se precipitó en acetona; anal. (C25H3-iClN4O2^HChH2O) C, H, N. [a]23D -45,29 (CHCI3, c 0,23), ee > 98 %.
(S)-W-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)-1H-indol-2-carboxamida (S)-19 se preparó a partir de ácido indol-2-carboxílico y B8S de acuerdo con el procedimiento de amidación general A. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando acetona/CHCh al 30 % como eluyente para dar el producto deseado con un 55 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 89,52 (s, 1H), 7,64 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,45 (dd, J = 8,3, 0,7 Hz, 2H), 7,33 - 7,21 (m, 1H), 7,14 (dt, J = 7,9, 4,3 Hz, 1H), 6,95 (ddd, J = 18,5, 7,8, 1,4 Hz, 2H), 6,86 (d, J = 1,3 Hz, 2H), 4,07 - 3,82 (m, 3H), 3,51 (ddd, J = 13,2, 8,4, 4,1 Hz, 1H), 3,07 (s, 3H), 2,89 (dd, J = 10,6, 5,0 Hz, 2H), 2,78 (c, J = 7.5 Hz, 2H), 2,62 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 2,51 - 2,38 (m, 2H), 1,84 (ddd, J = 13,5, 5,6, 3,3 Hz, 1H), 1,73 - 1,55 (m, 1H), 1,24 (dd, J = 12,8, 5,3 Hz, 3H). RMN 13C (101 MHz, CDCh) 8161,56, 149,36, 143,16, 136,20, 131,02, 128,66, 127,76, 126,90, 124,20, 121,92, 120,48, 117,97, 111,92, 101,82, 66,40, 63,70, 51,64, 38,11, 33,17, 27,47, 14,08. La sal de clorhidrato se precipitó en acetona; anal. (C25H3-iClN4O2^HChH2O) C, H, N. [a]23L 48,13 (CHCh, c 0,25) ee > 98 %
2-(4-(4-(3-Cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)butil)isoindolina-1,3-diona (14a): se añadió A/-(4-bromobut¡l)ftal¡m¡da (0,378 g, 1,34 mmol) a una mezcla de reacción de A7 (0,310 g, 1,22 mmol) y K2CO3 (0,505 g, 3,65 mmol) en acetona (15 ml) y se agitó a reflujo durante una noche. El producto crudo se filtró, se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida usando EtOAc/hexanos al 12 % como eluyente para proporcionar 0,465 g (83,6 %) del producto en forma de un aceite. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 87,68 (dd, J = 5,6, 2,8 Hz, 2H), 7,57 (dd, J = 5,6, 3,2 Hz, 2H), 6,68 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 6,49 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,60 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 3,01 (s a, 4H), 2,48 (s a, 4H), 2,40 (c, J = 7.6 Hz, 2H), 2,32 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,62 (quintuplete, J = 7,6 Hz, 2H), 1,48-1,45 (m, 2H), 1,06 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8 168,2, 146,3, 146,0, 140,6, 133,8, 132,0, 128,0, 123,0, 122,0, 116,6, 58,8, 57,9, 53,6, 50,0, 37.7, 28,3, 26,5, 23,9, 15,3.
2-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1 -il)butil)isoindolina-1,3-diona (14b): se usó el mismo procedimiento que se ha descrito para 14a, empleando B6. El producto se purificó por cromatografía ultrarrápida usando EtOAc/hexanos al 20 % como eluyente para proporcionar 14b con un 64,2 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 7,85-7,82 (m, 2H), 7,71-7,69 (m, 2H), 7,15 (dt, J = 7,6, 2,4 Hz, 1H), 6,95-6,91 (m, 2H), 3,75 (dt, J = 6,4, 0,8 Hz, 2H), 3,06 (s a, 4H), 2.77 (dc, J = 7,6, 2,0 Hz, 2H), 2,64 (s a, 4H), 2,47 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 1,80-1,75 (m, 2H), 1,63-1,59 (m, 2H), 1,27-1,21 (m, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8167,9, 149,4, 142,8, 133,6, 131,9, 128,4, 126,6, 123,6, 122,8, 117,7, 57,8, 53,2, 51,3, 37,6, 27,2, 26,4, 24,0, 13,9.
4-(4-(3-Cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)butan-1-amina (16a): se añadió hidrazina (0,097 g, 3,02 mmol) a una solución del compuesto 14a (0,460 g, 1,00 mmol) en EtOH (15 ml) y se agitó a reflujo durante 7 h. El disolvente se evaporó y la mezcla de reacción se diluyó con solución acuosa al 20 % de K2CO3 (15 ml) y se extrajo en CHCh (2 x 15 ml). La fase orgánica se combinó, se secó y se concentró para proporcionar un producto aceitoso amarillo, que fue suficientemente puro para usarse en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 86,70 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,49 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,01 (s a, 4H), 2,59 (s, 2H), 2,47-2,38 (m, 6H), 2,27 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,46-1,33 (m, 4H), 1,07 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8146,3, 146,1, 140,6, 128,0, 122,0, 116,5, 58.8, 58,5, 53,7, 50,2, 28,3, 24,2, 15,3.
4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butan-1-amina (16b): se usó el mismo procedimiento que se ha descrito para 16a, empleando 14b para proporcionar 16b con un 85,1 % de rendimiento y fue suficientemente puro para usarse en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 6,99-6,95 (m, 1H), 6,77-6,74 (m, 2H), 2,89 (s a, 4H), 2,63-2,54 (m, 4H), 2,47 (s a, 4H), 2,27-2,23 (m, 2H), 1,43-1,28 (m, 4H), 1,08-1,04 (m, 5H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8149,3, 142,7, 128,3, 126,5, 123,5, 117,6, 58,2, 53,1, 51,2, 41,8, 31,5, 27,1, 24,0, 13,8.
Procedimiento de amidación general B. Se añadió CDI (1 eq) a una solución del ácido carboxílico (1 eq) en THF seco (10 ml/mmol) y se agitó durante 3 h a TA. La mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y se añadió gota a gota la amina particular (1 eq) después de diluir con THF seco (10 ml/mmol). La mezcla de reacción se dejó llegar a TA y se agitó durante una noche, se concentró, se diluyó con H2O (20 ml) y se extrajo en CHCh (3 x 10 ml). La fase orgánica se concentró y el producto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida para proporcionar la amida respectiva.
W-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butil)-1H-indol-2-carboxamida (18): 18 se preparó a partir de ácido indol-2-carboxílico y 16b de acuerdo con el procedimiento de amidación general B. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando acetona/CHCh al 30 % como eluyente para dar el producto deseado con un 51,0 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCla) 10,35 (s, 1H), 7,63 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,27 (dt, J = 8,0, 1,2 Hz, 1H), 7,13 (sextuplete, J = 4,0 Hz, 2H), 6,96-6,87 (m, 4H), 3,56 (dd, J = 12,8, 6,4 Hz, 2H), 3,06 (s a, 4H), 2.78 (c, J = 7,6 Hz, 2H), 2,65 (s a, 4H), 2,47 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,72-1,64 (m, 4H), 1,23 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8162,1, 149,6, 143,3, 136,7, 131,1, 128,7, 127,6, 127,0, 124,3, 124,1, 121,9, 120,6, 118,1, 112,2, 102,2, 58,1 53,5, 51,5, 39,8, 27,7, 27,6, 24,5, 14,2. La sal de oxalato se precipitó en acetona; p.f. 228-229 °C. Anal. (C25H31ClN4O-C2H2O4-0,75H2O) C, H, N.
W-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butil)benzofuran-2-carboxamida (20): 20 se preparó a partir de ácido benzofuran-2-carboxílico y 16b de acuerdo con el procedimiento de amidación general B. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando EtOAc/hexanos al 25 % como eluyente para dar el producto deseado con un 76,5 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 7,65-7,63 (m, 1H), 7,46 (s a, 1H), 7,44 (d, J = 0,8 Hz, 1H), 7,38 (dt, J = 7,2, 1,2 Hz, 1H), 7,29-7,25 (m, 1H), 7,15-7,11 (m, 2H), 6,91 (dc, J = 7,2, 1,6 Hz, 2H), 3,53 (dd, J = 12,4, 6,4 Hz, 2H), 3,08 (s a, 4H), 2,77 (c, J = 7,6 Hz, 2H), 2,67 (s a, 4H), 2,48 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,74-1,65 (m, 4H), 1,22 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8158,9, 154,7, 149,6, 149,0, 143,2, 128,7, 127,7, 126,9, 126,8, 124,0, 123,7, 122,7, 118,0, 111,7, 110,2, 58,0, 53,5, 51,5, 39,2, 27,6, 27,5, 24,4, 14,1. La sal de oxalato se precipitó en acetona; p.f.
119-120 °C. Anal. (C25H30ClN3O2^C2H2O4^0,5H2O) C, H, N.
W-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)benzofuran-2-carboxamida (21): 21 se preparó a partir de ácido benzofuran-2-carboxílico y B8 de acuerdo con el procedimiento de amidación general B. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando acetona/CHCh al 25 % como eluyente para dar el producto deseado con un 52,1 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 7,64 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,58 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 7,50-7,45 (m, 2H), 7,38 (dt, J = 7,2, 1,2 Hz, 1H), 7,28-7,24 (m, 1H), 7,15 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,92 (dc, J = 8,0, 1,2 Hz, 2H), 3,94-3,84 (m, 3H), 3,55-3,50 (m, 1H), 3,06 (s a, 4H), 2,87-2,85 (m, 2H), 2,76 (c, J = 7,6 Hz, 2H), 2,62-2,61 (m, 2H), 2,48-02,43 (m, 2H), 1,85-1,80 (m, 1H), 1,66-1,63 (m, 1H), 1,22 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8159,0, 154,8, 149,4, 149.1, 143,3, 128,7, 127,7, 127,0, 126,7, 124,2, 123,6, 122,7, 118,0, 111,9, 110,1, 66,0, 63,9, 51,7, 37,5, 33,7, 27,5, 14.2. La sal de oxalato se precipitó en éter; p.f. 147-148 °C. Anal. (C25H30ClN3O3. C2^ O 4^ O ) C, H, N.
W-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butil)imidazo[1,2-a]piridin-2-carboxamida (22): 22 se preparó a partir de ácido imidazo[1,2-a]piridin-2-carboxílico y 16b de acuerdo con el procedimiento de amidación general B. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando MeOH/CHCh al 3 % como eluyente para dar el producto deseado con un 78,4 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 88,11-8,09 (m, 2H), 7,53-7,49 (m, 2H), 7,21-7,17 (m, 1H), 7,10 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,89 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 6,81-6,77 (m, 1H), 3,48 (c, J = 6,0 Hz, 2H), 3,03 (s a, 4H), 7,72 (c, J = 7,6 Hz, 2H), 2,62 (m, 4H), 2,45-2,42 (m, 2H), 1,65 (m, 4H), 1,18 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8162,7, 149,6, 144,4, 143,1, 140,0, 128,6, 126,9, 126,5, 126,0, 123,9, 118,0, 114,1, 113,3, 58,1, 53,4, 51,4, 39,0, 27,7, 27,4, 24.3, 14,1. La sal de oxalato se precipitó en acetona; p.f. 144-145 °C. Anal. (C24H3t)ClN5O^2C2H2O4^1,5H2O) C, H, N.
W-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)imidazo[1,2-a]piridin-2-carboxamida (23): 23 se preparó a partir de ácido imidazo[1,2-a]piridin-2-carboxílico y B8 de acuerdo con el procedimiento de amidación general B. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando MeOH/CHCh al 2 % como eluyente para dar el producto deseado con un 46,3 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 88,13-8,11 (m, 2H), 7,90 (t a, J = 6,0 Hz, 1H), 7,56 (dd, J = 7,2, 0,8 Hz, 1H), 7,23-7,19 (m, 1H), 7,14 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,93 (dc, J = 7,6, 1,6 Hz, 2H), 6,82 (dt, J = 6.4, 1,2 Hz, 1H), 3,91-3,78 (m, 2H), 3,56-3,48 (m, 1H), 3,04 (s a, 4H), 2,86-2,83 (m, 2H), 2,75 (c, J = 7,6 Hz, 2H), 2,62-2,60 (m, 2H), 2,45-2,40 (m, 2H), 1,84-1,76 (m, 1H), 1,70-1,61 (m, 1H), 1,21 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8162,9, 149,5, 144,6, 143,2, 140,2, 128,7, 126,9, 126,4, 125,8, 124,0, 118,2, 118,0, 114,1, 113,3, 65,3, 63,9, 53,5, 51,6, 36,6, 34,4, 27,4, 14,1. La sal de oxalato se precipitó en acetona; p.f. 137-138 °C. Anal. (C24H30ClN5O2.
2C2H2O4^H2O^0,75CHCl3) C, H, N.
W-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butil)-6-metilimidazo[2,1-8]tiazol-5-carboxamida (24): 24 se preparó a partir de ácido 6-metilimidazo[2,1-8]tiazol-5-carboxílico y 16b de acuerdo con el procedimiento de amidación general B. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando MeOH/CHCh al 3 % como eluyente para dar el producto deseado con un 48,9 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 88,19 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,13-7,09 (m, 1H), 6,92-6,82 (m, 3H), 5,98 (m, 1H), 3,50-3,45 (m, 2H), 3,03 (s a, 4H), 2,73 (c, J = 7,6 Hz, 2H), 2,64 (s a, 4H), 2,58 (s, 3H), 2,48-2,45 (m, 2H), 1,66 (m, 4H), 1,19 (t, J = 8,0 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8 160,7, 150,9, 149,4, 145.1, 143,2, 128,7, 126,9, 124,0, 121,4, 118,7, 117,9, 112,4, 58,1, 53,4, 51,3, 39,4, 27,9, 27,4, 24,2, 16,5, 14,1. La sal de oxalato se precipitó en acetona; p.f. 113-114 °C. Anal. (C23H3üClN5OS^2C2H2O4^2,5H2O) C, H, N.
W-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butil)-4-etil-1H-imidazol-2-carboxamida (25): una solución de trimetilaluminio (2 M en hexano) (0,18 ml, 3,54 mmol) se añadió gota a gota a una solución de 16b (0,105 g, 3,54 mmol) en CH2Ch (10 ml) en atmósfera de argón a TA. La mezcla de reacción se agitó a TA durante 15 min y se añadió gota a gota solución de 4-etil-1H-imidazol-2-carboxilato de etilo en CH2O 2 (10 ml) y se agitó durante 6 h. La mezcla de reacción se inactivó con solución diluida de HCl (15 ml). La fase orgánica se extrajo, se secó sobre Na2SO4, se concentró y se purificó usando cromatografía ultrarrápida con MeOH/CHCh al 4 % como eluyente para proporcionar 0,148 g (14,9 %) de producto. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 87,56 (s a, 1H), 7,13 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,92 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 6,82 (s, 1H), 3,46-3,43 (m, 2H), 3,06 (s, 4H), 2,75 (c, J = 7,6 Hz, 2H), 2,66 (m, 5H), 2,48-2,46 (m, 2H), 2,18-2,15 (m, 1H), 1,65 (s, 5H), 1,29-1,18 (m, 6H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8 159,1, 149,5, 143,2, 140,0, 128,7, 126,9, 124,0, 118,0, 58,0, 53.4, 51,2, 39,1, 27,5, 27,4, 24,1, 14,1, 13,5. La sal de oxalato se precipitó en acetona; p.f. 167-168 °C. Anal. (C22H32ClN5O-2,5C2H2O4-H2O) C, H, N.
W-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butil)-4-metil-1H-imidazol-2-carboxamida (26): 26 se preparó a partir de ácido 4-metil-1H-imidazol-2-carboxílico y 16b de acuerdo con el procedimiento de amidación general B. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando MeOH/CHCh al 3 % como eluyente para dar el producto deseado con un 65,2 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 87,76 (s a, 1H), 7,13 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,94-6,89 (m, 2H), 6,82 (s, 1H), 3,46 (c, J = 6,4 Hz, 2H), 3,06 (s a, 4H), 2,75 (c, J = 8,0 Hz, 2H), 2,64 (s a, 4H), 2,45 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,28 (s, 3H), 1,68-1,61 (m, 4H), 1,20 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8 159,3, 149,5, 143,2, 140,1, 128,6, 126,9, 124,0, 118,0, 58,1, 53,4, 51,4, 39,2, 27,5, 24,2, 14,1. La sal de oxalato se precipitó en acetona; p.f.
175-176 °C. Anal. ^ iH a o C I N s O ^ ^ O ^ O ) C, H, N.
W-(4-(4-(2-CIoro-3-et¡Ifen¡I)p¡peraz¡n-1-¡I)-3-h¡droxibut¡I)-4-met¡I-1H-¡m¡dazoI-2-carboxam¡da (27): 27 se preparó a partir de ácido 4-met¡I-1H-im¡dazoI-2-carboxíI¡co y B8 de acuerdo con el procedimiento de amidación general B. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando MeOH/CHCh al 3 % como eluyente para dar el producto deseado con un 39,8 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 812,40 (s a, 1H), 8,11 (s a, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,14 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,95-6,88 (m, 2H), 6,83 (s a, 1H), 3,90-3,84 (m, 1H), 3,79-3,70 (m, 1H), 3,57-3,49 (m, 1H), 3,03 (s a, 4H), 2,83-2,81 (m, 2H), 2,75 (c, J = 8,0 Hz, 2H), 2,58 (s a, 2H), 2,42 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 2,29 (s a, 3H), 1,81-1,73 (m, 1H), 1,68-1,59 (m, 1H), 1,20 (t, J = 8,0 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCI3) 8 162,6, 159,3, 149,4, 143,2, 140,0, 128,6, 126,9, 124,1, 118,0, 65,0, 63,9, 53,5, 51,6, 36,8, 34,1,27,5, 14,1. La sal de oxalato se precipitó en acetona; p.f.
130-131 °C. Anal. (C21H30CIN5O2^C2H2O4<3H2O) C, H, N.
W-(4-(4-(3-CIoro-5-et¡I-2-metox¡fen¡I)piperaz¡n-1-¡I)but¡I)-1H-¡ndoI-2-carboxam¡da (28): 28 se preparó a partir de ácido indoI-2-carboxíIico y 16a de acuerdo con el procedimiento de amidación general B. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando acetona/CHCh al 25 % como eluyente para dar el producto deseado con un 57,6 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 8 10,25 (s, 1H), 7,62 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,45 (dd, J = 8,0, 0,8 Hz, 1H), 7,28-7,24 (m, 1H), 7,14-7,10 (m, 1H), 6,93 (m, 1H), 6,90 (s, 1H), 6,84 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 6,58 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,54 (c, J = 6,0 Hz, 2H), 3,14 (s a, 4H), 2,60 (s a, 4H), 2,53 (c, J = 7,6 Hz, 2H), 2,45 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 1,73-1,64 (m, 4H), 1,19 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCI3) 8 162,0, 146,4, 146,0, 140,9, 136,6, 131,0, 128,2, 127,6, 124,3, 122,3, 121,8, 120,5, 116,7, 112,1, 102,3, 59,0, 58,0, 53,7, 50,1, 39,6, 28,4, 27,5, 24,2, 15,4. La sal de oxalato se precipitó en acetona y se cristalizó en MeOH/éter; p.f. 220-221 °C. Anal. (C26HaaCIN4O2^C2H2O4^0,5H2O) C, H, N.
W-(4-(4-(3-CIoro-5-et¡I-2-metoxifen¡I)p¡peraz¡n-1-¡I)but¡I)benzofuran-2-carboxam¡da (30): 30 se preparó a partir de ácido benzofuran-2-carboxíIico y 16a de acuerdo con el procedimiento de amidación general. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando acetona/CHCh al 20 % como eluyente para dar el producto deseado con un 76,5 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 87,63 (dd, J = 7,2, 1,2 Hz, 1H), 7,44-7,42 (m, 2H), 7,36 (dt, J = 7,0, 1,2 Hz, 1H), 7,28-7,24 (m, 1H), 7,13 (m, 1H), 6,82 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,59 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,51 (c, J = 6,4 Hz, 2H), 3,15 (s a, 4H), 2,61 (s a, 4H), 2,51 (c, J = 7,6 Hz, 2H), 2,45 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,73-1,63 (m, 4H), 1,17 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCI3) 8158,9, 154,7, 149,0, 146,4, 146,1, 140,8, 128,2, 127,7, 126,7, 123,7, 122.7, 122,2, 116,7, 111,6, 110,2, 59,0, 58,0, 53,8, 50,2, 39,2, 28,4, 27,5, 24,3, 15,4. La sal de oxalato se precipitó en acetona y se cristalizó en MeOH/éter; p.f. 126-127 °C. Anal. (C26H32CIN3O3^2C2H2O4.H2O) C, H, N.
W-(4-(4-(3-CIoro-5-et¡I-2-metox¡fen¡I)piperaz¡n-1-¡I)-3-h¡drox¡but¡I)benzofuran-2-carboxam¡da (31): 31 se preparó a partir de ácido benzofuran-2-carboxíIico y A9 de acuerdo con el procedimiento de amidación general. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando acetona/CHCh al 20 % como eluyente para dar el producto deseado con un 50,5 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 87,64 (dd, J = 7,6, 0,8 Hz, 1H), 7,53 (m, 1H), 7,49 (dd, J = 8.4. 0,8 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 0,8 Hz, 1H), 7,40-7,36 (m, 1H), 7,29-7,25 (m, 1H), 6,85 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,95-3,81 (m, 5H), 3,56-3,48 (m, 1H), 3,14 (s a, 4H), 2,84-2,81 (m, 2H), 2,62-2,51 (m, 4H), 2,46-2,42 (m, 2H), 1,87-1,80 (m, 1H), 1,68-1,61 (m, 1H), 1,20 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCI3) 8159,0, 154,8, 149,0, 146.4, 146,0, 140,8, 128,3, 127,7, 126,7, 123,6, 122,6, 122,4, 116,7, 111,8, 110,1, 65,9, 63,8, 59,1, 53,7, 50,4, 37,3, 33.7, 28,5, 15,4. La sal de oxalato se precipitó en acetona y se cristalizó en 2-PrOH/éter; p.f. 154-155 °C. Anal. (C26H32CIN3O4-1,5C2H2O4-H2O) C, H, N.
(£)-2-(4-(4-(2-CIoro-3-et¡Ifen¡I)piperaz¡n-1-¡I)but-2-en-1-¡I)¡so¡ndoI¡na-1,3-d¡ona (33): se añadió 32 (0,592 g, 2,11 mmol) a la mezcla de reacción de B6 (0,475 g, 2,11 mmol) y K2CO3 (0,1.458 g, 10,56 mmol) en acetona (25 ml) y se agitó a reflujo durante una noche. La mezcla de reacción se filtró, se concentró y se purificó usando cromatografía ultrarrápida con acetona/CHCl3 al 15 % como eluyente para proporcionar 0,880 g (98,2 %) de producto en forma de un aceite. RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 87,67 (dd, J = 5,2, 3,2 Hz, 2H), 7,53 (dd, J = 5,2, 3,2 Hz, 2H), 6,98 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,76 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 5,63 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 5,61 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 4,16 (d, J = 4,0 Hz, 2H), 2,90 (m, 6H), 2,59 (c, J = 8,0 Hz, 2H), 2,47 (s a, 4H), 1,06 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCI3) 8 167,6, 149,5, 142,9, 133,8, 132,0, 130,1, 128,5, 126,9, 126,8, 123,8, 123,1, 117,9, 60,1, 53,3, 51,4, 38,9, 27,4, 14,1.
(£)-4-(4-(2-CIoro-3-etiIfen¡I)p¡perazin-1-¡I)but-2-en-1-am¡na (34): se usó el mismo procedimiento que se ha descrito para 16a. El producto se aisló con un 91,2 % de rendimiento y fue suficientemente puro para usarse en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 86,96 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,75 (dd, J = 8,0, 1,6 Hz, 2H), 5,63-5,57 (m, 1H), 5,53-5,46 (m, 1H), 3,13 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 2,88-2,87 (m, 6H), 2,59 (c, J = 7,6 Hz, 2H), 2,47 (s a, 4H), 1,16 (s a, 2H), 1,05 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCI3) 8 149,5, 142,9, 135,3, 128,5, 126,8, 126,0, 123,8, 117,9, 60,4, 53,2, 51,4, 43,7, 27,4, 14,1. GC-MS (EI) m/z 293,1 (M+).
(E)-W-(4-(4-(2-CIoro-3-et¡Ifen¡I)p¡peraz¡n-1-¡I)but-2-en-1-¡I)-4-met¡I-1H-im¡dazoI-2-carboxam¡da (35): 35 se preparó a partir de ácido 4-met¡I-1H-im¡dazoI-2-carboxíI¡co y 34 de acuerdo con el procedimiento de amidación general. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando MeOH/CHCh al 3 % como eluyente para dar el producto deseado con un 54,7 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 8 12,70-12,63 (m, 1H), 7,90 (s a, 1H), 7,13 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,94-6,89 (m, 2H), 6,80 (s, 1H), 5,76 (d, J = 5,0, 1H), 5,73 (d, J = 5,0, 1H), 4,06 (t, J = 5,0, 2H), 3,05-3,04 (m, 6H), 2,75 (c, J = 7,6, 2H), 2,62 (s a, 4H), 2,31 (s, 2H), 2,24 (s, 1H), 1,20 (t, J = 8,0, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCla) 8 159,1, 149,5, 143,2, 139,9, 129,3, 129,2, 128,7, 126,9, 124,0, 118,0, 60,3, 53,4, 51,4, 40,8, 27,5, 14,1. La sal de oxalato se precipitó en acetona y se cristalizó en MeOH/éter; p.f. 166-167 °C. Anal. (C21H28ClN5O^2C2H2O4^1,25H2O) C, H, N.
1-(2-Cloro-3-etilfenil)-4-(2-(oxiran-2-il)etil)piperazina (37): se añadió 2-(2-bromoetil)oxirano (0,269 g, 1,78 mmol) a una mezcla de reacción de B6 (0,266 g, 1,18 mmol) y K2CO3 (0,491 g, 3,56 mmol) en acetona (20 ml) y se agitó a reflujo durante una noche. El producto crudo se filtró, se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida usando acetona/CHCl3 al 12 % como eluyente para proporcionar 0,145 g (41,4 %) del producto en forma de un aceite. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 87,15 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,95-6,91 (m, 2H), 3,06 (s a, 4H), 3,02-2,95 (m, 1H), 2,80-2,73 (m, 3H), 2,66 (s a, 4H), 2,62-2,55 (m, 2H), 2,53-2,51 (m, 1H), 1,87-1,79 (m, 1H), 1,76-1,67 (m, 1H), 1,22 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8 149,6, 143,2, 128,7, 126,9, 124,0, 118,0, 55,0, 53,5, 51,6, 50,9, 47,1, 30,2, 27,5, 14,2. GC-MS (EI) m/z 294,1 (M+).
1-Azido-4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butan-2-ol (38): una mezcla de reacción de 37 (0,170 g, 0,57 mmol), NaN3 (0,056 g, 0,86 mmol) y N ^ C l (0,062 g, 1,15 mmol) en DMF (5 ml) se calentó a 100 °C durante 6 h. El disolvente se evaporó y la mezcla de reacción se diluyó con agua (15 ml) y se extrajo en EtOAc (3 x 15 ml). La fase orgánica se combinó, se secó, se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida usando acetona/CHCh al 7 % como eluyente para proporcionar 0,103 g (52,9 %) del producto en forma de un aceite. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 87,17 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,97 (dd, J = 7,6, 1,2 Hz, 1H), 6,91 (dd, J = 7,6, 1,2 Hz, 1H), 4,07-4,02 ((m, 1H), 3,28 (m, 2H), 3,07 (s a, 4H), 2,85-2,71 (m, 6 H), 2,64-2,61 (m, 2H), 1,87-1,77 (m, 1H), 1,60-1,54 (m, 1H), 1,26-1,22 (m, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8 149,2, 143,3, 128,7, 127,0, 124,3, 118,1, 73,0, 57,3, 56,6, 53,4, 51,5, 28,5, 27,5, 14,1.
1- Amino-4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butan-2-ol (39): una mezcla de 38 (0,123 g, 0,36 mmol) y Pd al 10 %/C (0,050 g) en EtOAc (10 ml) se agitó en atmósfera de hidrógeno (50 psi) a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reacción se filtró a través de una capa de Celite y se evaporó al vacío. La mezcla de reacción fue suficientemente pura para usarse en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, CD3OD CDCh) 8 7,07 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6,89 (dd, J = 13,6, 8,4 Hz, 2H), 4,89 (s a, 2H), 4,11 (s a, 1H), 3,33-3,17 (m, 10H), 3,04-2,99 (m, 1H), 2,64 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 2,06-1,97 (m, 2H), 1,12 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8147,5, 143,3, 128,5, 127,1, 125.1, 118,3, 65,5, 54,2, 52,7, 48,7, 44,8, 28,8, 27,2, 13,8.
W-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-2-hidroxibutil)-1H-indol-2-carboxamida (40): 40 se preparó a partir de ácido indol-2-carboxílico y 39 de acuerdo con el procedimiento de amidación general B usando DMF como disolvente. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando MeOH/CHCh al 2 % como eluyente para dar el producto deseado con un 16,4 % de rendimiento.
RMN 1H (400 MHz, CDCh) 89,73 (s, 1H), 7,63 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,43 (dd, J = 8,4, 0,8 Hz, 1H), 7,28-7,23 (m, 1H), 7,16-7,09 (m, 2H), 6,95 (dd, J = 7,6, 1,2 Hz, 2H), 6,91 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 6,86 (dd, J = 7,6, 1,6 Hz, 1H), 4,10-4,06 (m, 1H), 3,76-3,71 (m, 1H), 3,43-3,37 (m, 1H), 3,04 (s a, 4H), 2,93-2,81 (m, 2H), 2,79-2,69 (m, 4H), 2,62 (m, 2H), 1,82-1,78 (m, 1H), 1,62-1,57 (m, 1H), 1,21 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8 161,9, 149,1, 143,3, 136,3, 130,8, 128,7, 127,7, 126,9, 124,3, 124,3, 121,9, 120,5, 118,0, 112,0102,3, 72,6, 57,3, 53,4, 51,4, 45,3, 30,9, 28,6, 27,4, 14,0. La sal de oxalato se precipitó en acetona; p.f. 225-226 °C. Anal. (C25H3-iClN4O2^1,5C2H2O4^1,75H2O) C, H, N.
2- (4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)isoindolina-1,3-diona (C1a). Una mezcla de los compuestos A7 (1 mmol) y 2-(2-(oxiran-2-il)etil)isoindolina-1,3-diona (A8, 1 mmol) se agitó a la temperatura de reflujo en 2-PrOH (20 ml) durante 3 h. La mezcla de reacción se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida usando EtOAc/hexanos al 20 % como eluyente para proporcionar 0,523 g (91 %) de producto. RMN 1H (400 m Hz , CDCh) 8 7,85 (dd, J = 5,2, 3,2 Hz, 2H), 7,71 (dd, J = 5,6, 2,8 Hz, 2H), 6,84 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,93-3,79 (m, 6 H), 3,13 (s a, 4H), 2,81-2,79 (m, 2H), 2,60-2,58 (m, 2H), 2,55 (c, J = 8,0 Hz, 2H), 2,45-2,41 (m, 2H), 1,79 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 1,19 (t, J = 8,0 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8 168,5, 146,4, 145,9, 140,8, 133,9, 132,2, 128,2, 123.2, 122,4, 116,7, 64,5, 63,9, 59,1, 53,8, 50,3, 35,1, 33,6, 28,4, 15,4.
2-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)isoindolina-1,3-diona (C1b): se usó el mismo procedimiento que se ha descrito para C1a, empleando B6 (1 mmol) y 2-(2-(oxiran-2-il)etil)isoindolina-1,3-diona (B7, 1 mmol). El producto se purificó por cromatografía ultrarrápida usando EtOAc/hexanos al 30 % como eluyente para proporcionar C1b con un 57 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 7,85 (dd, J = 7,2, 5,6 Hz, 2H), 7,71 (dd, J = 5,6, 3,2 Hz, 2H), 7,15 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,92 (dc, J = 7,6, 1,6 Hz, 2H), 3,94-3,77 (m, 4H), 3,03 (s a, 4H), 2,84-2,81 (m, 2H), 2,76 (c, J = 7.6 Hz, 2H), 2,59 (m, 2H), 2,46-2,38 (m 2H), 1,79 (c, J = 7,0, 2H), 1,22 (t, J = 7,6 Hz, 3H); RMN 13C (100 MHz, CDCh) 8 168,7, 151,7, 149,6, 143,4, 134,0, 132,4, 128,8, 127,0, 124,2, 123,4, 118,1, 64,6, 64,0, 51,8, 35,3, 33,8, 27,6, 14,2.
2-(4-(4-(3-Cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)isoindolina-1,3-diona (C2a): al compuesto C1a (1 mmol) se añadió diclorometano seco y la mezcla de reacción se enfrió a -78 °C. Manteniendo la misma temperatura, se añadió gota a gota trifluoruro de (dietilamino)azufre (DAST, 1,5 mmol) disuelto en diclorometano seco y la agitación continuó a 20 °C durante 8 h. Se usó cromatografía en capa fina para monitorizar el progreso de la reacción. Una vez se completó la reacción, se añadió agua enfriada en hielo a la mezcla de reacción y el producto se extrajo en acetato de etilo y se purificó por columna ultrarrápida usando acetato de etilo y hexano al 20 % como eluyente. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 8 7,95 - 7,80 (m, 2H), 7,79 - 7,62 (m, 2H), 6,82 (t, J = 10,6 Hz, 1H), 6,57 (t, J = 16,3 Hz, 1H), 4,92 - 4,66 (m, 1H), 3,97 - 3,83 (m, 2H), 3,83 - 3,74 (m, 3H), 3,64 - 3,41 (m, 2H), 3,11 (d, J = 3,0 Hz, 4H), 2,80 - 2,59 (m, 4H), 2,54 (td, J = 7,5, 4,4 Hz, 2H), 2,18 - 1,78 (m, 2H), 1,20 (dt, J = 12,1, 5,0 Hz, 3H).
2-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)isoindolina-1,3-diona (C2b) se preparó con C2b de acuerdo con el procedimiento descrito para C2a. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 87,90 - 7,80 (m, 2H), 7,77 - 7,66 (m, 2H), 7,14 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 6,92 (ddd, J = 14,9, 7,8, 1,5 Hz, 1H), 4,94 - 4,65 (m, 1H), 4,12 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 3,95 - 3,76 (m, 2H), 3.04 (s, 2H), 2,74 (ddd, J = 13,8, 12,9, 7,4 Hz, 2H), 2,64 - 2,44 (m, 2H), 2,20 - 1,92 (m, 4H), 1,58 (s, 2H), 1,24 (dt, J = 16,2, 7,3 Hz, 3H).
4-(4-(3-Cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutan-1-amina (C3a): se añadió hidrazina (3 mmol) a una solución del compuesto C2a (1 mmol) en EtOH (15 ml) y se agitó a reflujo durante 7 h. El disolvente se evaporó y la mezcla de reacción se diluyó con solución acuosa al 20 % de K2CO3 (15 ml) y se extrajo en CHCl3 (2 x 15 ml). La fase orgánica se combinó, se secó y se concentró para proporcionar un producto aceitoso amarillo, que fue suficientemente puro para usarse en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 86,85 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,86 (d, J = 49,8 Hz, 1H), 3,83 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 3,15 (s, 2H), 2,89 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 2,72 (dt, J = 19,2, 10,6 Hz, 2H), 2,59 - 2,48 (m, 2H), 1,56 (s, 10H), 1,20 (t, J = 7,6 Hz, 3H).
4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutan-1-amina (C3b) se preparó con C2b usando el procedimiento descrito para C3a. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 87,15 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,95 (dd, J = 19,8, 11,6 Hz, 2H), 4,92 (d, J = 49.8 Hz, 1H), 3,07 (s, 2H), 2,89 (dd, J = 13,0, 6,2 Hz, 2H), 2,81 - 2,67 (m, 2H), 2,17 (s, 4H), 1,54 (s, 8H), 1,22 (t, J = 7.5 Hz, 3H).
W-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-carboxamida (C4a) se preparó a partir de ácido indol-2-carboxílico y C3a de acuerdo con el procedimiento de amidación general A. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando acetona/CHCl3 al 30 % como eluyente para dar el producto deseado con un 50 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 8 9,16 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,66 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,34 -7,22 (m, 1H), 7,15 (dd, J = 13,2, 6,1 Hz, 1H), 6,84 (dd, J = 7,6, 1,7 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,55 (s, 1H), 4,90 (d, J = 49,1 Hz, 1H), 3,83 (s, 2H), 3,79 - 3,58 (m, 1H), 3,15 (s, 2H), 2,95 (s, 1H), 2,92 - 2,84 (m, 2H), 2,75 - 2,64 (m, 3H), 2,56 (dt, J = 15,2, 5,6 Hz, 2H), 2,02 (dd, J = 17,8, 14,3 Hz, 2H), 1,59 (s, 2H), 1,20 (t, J = 7,6 Hz, 3H). La sal de oxalato se precipitó en acetona; anal. (C26H32ClFN4O2^1,2C2H2O4^H2O) C, H, N.
W-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)benzofuran-2-carboxamida (C4b) se preparó a partir de ácido benzofuran-2-carboxílico y C3a de acuerdo con el procedimiento de amidación general A. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando acetona/CHCl3 al 30 % como eluyente para dar el producto deseado con un 55 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 8 8,02 (s, 1H), 7,72 - 7,64 (m, 1H), 7,51 - 7,44 (m, 1H), 7,44 - 7,36 (m, 1H), 7,33 - 7,26 (m, 1H), 7,01 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,89 (d, J = 49,9 Hz, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,74 - 3,61 (m, 2H), 3,16 (s, 4H), 2,95 (s, 1H), 2,88 (d, J = 0,5 Hz, 1H), 2,79 - 2,64 (m, 5H), 2,59 - 2,48 (m, 2H), 2,24 - 1,97 (m, 2H), 1,59 (s, 4H), 1,19 (t, J = 7,6 Hz, 3H). RMN 13C (101 MHz, CDCl3) 8 159,00, 154,65, 148,55, 146,26, 146,01, 140,71, 128,23, 127,61, 126,79, 123,60, 122,72, 122,33, 116,60, 111,69, 110,41, 106,50, 92,03, 90,30, 61,99, 59,24, 54,36, 50,18, 35,88, 33,14, 28,53, 15,39. La sal de oxalato se precipitó en acetona. Anal. (C26H31ClFN3O3^ 1,1C2H2O4^H2O) C, H, N.
W-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-carboxamida (ABS01-113 (C5a) se preparó a partir de ácido indol-2-carboxílico y C3b de acuerdo con el procedimiento de amidación general A. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando acetona/CHCl3 al 30 % como eluyente para dar el producto deseado con un 60 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 8 9,11 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,19 - 7,06 (m, 1H), 7,06 - 6,93 (m, 1H), 6,85 - 6,73 (m, 2H), 6,68 (s, 1H), 6,48 (s, 1H), 4,76 (d, J = 48,0 Hz, 1H), 3,53 (d, J = 25,1 Hz, 2H), 2,92 (s, 1H), 2,80 (ddd, J = 6,7, 3,6, 1,8 Hz, 3H), 2,73 (ddd, J = 5,1, 3,6, 1,8 Hz, 3H), 2,67 - 2,54 (m, 3H), 1,85 (s, 2H), 1,51 (s, 3H), 1,16 - 0,98 (m, 3H). RMN 13C (101 MHz, CDCl3) 8 162,50, 161,68, 149,42, 143,22, 136,16, 130,50, 128,69, 127,62, 126,88, 124,31, 124,10, 121,84, 120,67, 117,97, 111,80, 101,97, 92,45, 90,77, 62,04, 54,00, 51,27, 36,39, 32,99, 31,46, 27,45, 14,08. La sal de oxalato se precipitó en acetona; p.f. 228-229 °C. Anal. (C25H29ClFN3O2-C2H2O4-0,5H2O) C, H, N.
W-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)benzofuran-2-carboxamida (C5b) se preparó a partir de ácido benzofuron-2-carboxílico y C3b de acuerdo con el procedimiento de amidación general A. El producto crudo se purificó por cromatografía ultrarrápida usando acetona/CHCl3 al 30 % como eluyente para dar el producto deseado con un 60 % de rendimiento. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 88,02 (s, 1H), 7,67 (ddd, J = 7,8, 1,2, 0,7 Hz, 1H), 7,48 (ddd, J = 5,4, 4,5, 3,0 Hz, 1H), 7,41 (ddd, J = 8,3, 7,2, 1,3 Hz, 1H), 7,32 - 7,26 (m, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,15 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,01 (s, 1H), 6,93 (ddd, J = 15,4, 7,8, 1,5 Hz, 1H), 5,03 - 4,75 (m, 1H), 3,75 - 3,61 (m, 3H), 3,08 (s, 2H), 2,95 (s, 1H), 2,88 (d, J = 0,5 Hz, 3H), 2,83 - 2,71 (m, 3H), 2,18 - 1,88 (m, 2H), 1,61 (s, 3H), 1,27 - 1,13 (m, 3H). RMN 13C (101 MHz, CDCl3) 8 158,92, 154,70, 149,48, 148,62, 143,22, 128,59, 127,50, 126,81, 124,02, 123,68, 122,71, 117,81, 111,69, 110,39, 92,14, 90,36, 62,21, 61,96, 54,09, 51,40, 35,88, 33,17, 32,92, 27,34, 14,08. La sal de oxalato se precipitó en acetona; anal. (C23H29ClFN3O2^1,3C2H2O4^H2O) C, H, N.
Abreviaturas adicionales usadas en los siguientes ejemplos: DA, dopamina; TM, transmembrana; D2R, receptor D2 de dopamina; D3R, receptor D3 de dopamina; D4R, receptor D4 de dopamina; 5-HT, 5-hidroxitriptamina (serotonina); i.p., intraperitoneal; PPB, tampón fosfato potásico; s.c. subcutáneo; y THC, (6aR,10aR)-delta-9-tetrahidrocannabinol.
Ejemplo 2. Ensayos de unión de radioligando
La unión de receptores de tipo D2 de dopamina se determinó usando métodos descritos previamente (Chen et al. "Tranylcypromine substituted c/'s-hydroxycyclobutylnaphthamides as potent and selective dopamine D(3) receptor antagonists." J. Med. Chem. 2014, 57, 4962-4968). Se prepararon membranas a partir de células HEK293 que expresan D2R, D3R o D4R humano, se cultivaron en una mezcla 50:50 de medios de cultivo DMEM y Ham's F12, complementada con HEPES 20 mM, L-glutamina 2 mM, aminoácidos no esenciales 0,1 mM, antibiótico/antimicótico 1x, suero bovino fetal inactivado térmicamente al 10 %, y 200 pg/ml de higromicina (Life Technologies, Grand Island, NY) y se mantuvieron en un incubadora a 37 °C y CO2 al 5 %. Tras alcanzar un 80-90 % de confluencia, las células se recogieron usando solución salina equilibrada de Earle (EBSS) premezclada con EDTA 5 pM (Life Technologies) y se centrifugaron a 3000 rpm durante 10 min a 21 °C. El sobrenadante se retiró y el sedimento se resuspendió en 10 ml de tampón de lisis hipotónico (MgCh 5 m M6 H2O, Tris 5 mM, pH 7,4 a 4 °C) y se centrifugó a 20.000 rpm durante 30 min a 4 °C. A continuación, el sedimento se resuspendió en tampón EBSS reciente preparado a partir de 8,7 g/l de solución salina equilibrada de Earle sin rojo fenol (US Biological, Salem, MA), 2,2 g/l de bicarbonato sódico, pH a 7,4. Se usó un ensayo de proteína de Bradford (Bio-Rad, Hercules, CA) para determinar la concentración de proteínas y las membranas se diluyeron hasta 500 pg/ml y se almacenaron en un congelador a -80 °C para uso posterior.
Los experimentos de unión competitiva de radioligandos se realizaron usando membranas congeladas. Los compuestos de ensayo se disolvieron de forma reciente en 30 % de DMSO y 70 % de H2O hasta una concentración de trabajo de 100 pM. Para ayudar a la solubilización de compuestos de base libre, se añadieron 10 pl de ácido acético glacial junto con el DMSO. A continuación, cada compuesto de ensayo se diluyó en 13 diluciones seriadas semilogarítmicas usando vehículo de DMSO al 30 %; las concentraciones de ensayo finales variaron de 10 pM a 10 pM. Las membranas congeladas previamente se diluyeron en EBSS reciente a 100 pg/ml (para hD2R o hD3R) o 200 pg/ml (hD4R) de trabajo para unión. Los experimentos competitivos de radioligando se realizaron en tubos de vidrio que contenían 300 pl de tampón EBSS reciente con metabisulfito sódico 0,2 mM, 50 pl de compuesto de ensayo diluido, 100 pl de membranas (10 pl de proteína total para hD2R o hD3R, 20 pl de proteína total para hD4R) y 50 pl de [3H]W-metilespiperona (concentración final 0,4 nM; Perkin Elmer). La unión no específica se determinó usando butaclamol 10 pM (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) y la unión total se determinó con vehículo de DMSO al 30 %. Todas las diluciones de compuestos se sometieron a ensayo por triplicado y la reacción se incubó durante una hora a temperatura ambiente. La reacción se terminó por filtración a través de filtros Whatman GF/B, empapados previamente durante una hora en polietilenimina al 0,5 %, usando un colector de filtración Brandel R48 (Brandel Instruments, Gaithersburg, MD). Los filtros se lavaron 3 veces con 3 ml de tampón EBSS enfriado en hielo y se transfirieron a viales de centelleo. Se añadieron 3 ml de cóctel de centelleo líquido CytoScint (MP Biomedicals, Solon, OH) y se realizó el recuento de los viales usando un contador de centelleo líquido Perkin Elmer Tri-Carb 2910 TR (Waltham, MA). Los valores de CI50 para cada compuesto se determinaron a partir de curvas dosis-respuesta y los valores de Ki se calcularon usando la ecuación de Cheng-Prusoff; estos análisis se realizaron usando GraphPad Prism versión 5.00 para Windows (GraphPad Software, San Diego, CA). Los valores de K informados se determinaron a partir de al menos tres experimentos independientes.
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T l 1B.
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RESULTADOS FARMACOLOGICOS Y DISCUSION
Las afinidades de unión de los compuestos se evaluaron realizando estudios de unión competitiva con [3H]-W-metilespiperona usando membranas preparadas a partir de células HEK293 que expresan D2R o D3R humano. Los datos de unión para los ligandos sustituidos de longitud completa se muestran en las Tablas 1A y 1B. Además, se calcularon los valores de cLogP y área superficial polar (PSA) para proporcionar medidas de lipofilicidad y penetración cerebral predicha, respectivamente, para los compuestos de longitud completa. La mayoría de los análogos demostraron afinidades de unión en el intervalo inferior al subnanomolar para D3R. En la serie basada en 1- (2-cloro-3-etilfenil)piperazina (18-27), tanto 18 como 19 mostraron altas afinidades de unión para D3R (K¡ = 0,14 y 0,36 nM, respectivamente). Además, 19 mostró una selectividad D2R/D3R > 400 veces. Cuando el resto de indol de 18 y 19 se reemplazó con benzofurano, se mantuvieron las afinidades de unión subnanomolares tanto para 20 como para 21, pero la selectividad para D3R se redujo debido a una mejora en las afinidades para D2R. Cuando el anillo de indol también se reemplazó con otros sistemas anulares heteroarilo, tales como 2-(imidazo[1,2-a]piridina) (22 y 23), 5-(6-metilimidazo[2,1-6]tiazol) (24), 2-(4-etil-1H-imidazol) (25), 2-(4-metil-1H-imidazol) (26 y 27). En la mayoría de los casos, aunque se mantuvieron las altas afinidades de unión a D3R, las mejoras relativas en las afinidades de unión a D2R redujeron la selectividad para D3R. No se observó ningún cambio importante en la afinidad y selectividad de 26 cuando se introdujo un conector frans-butenilo entre la arilamida y el resto de piperazina para proporcionar 35.
En la serie basada en 1-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazina más altamente sustituida (28-31), el indol 28 mostró un perfil de unión similar a su análogo 18. El compuesto 29 exhibió alta afinidad (K¡ = 6,29 nM) y la mayor selectividad de unión a D3R frente a D2R, (~2700 veces) de todas las 4-fenilpiperazinas. Los derivados de benzofurano 30 y 31 mostraron afinidades de unión a D3R reducidas y selectividades similares o inferiores para D3R, en comparación con 20 y 21, respectivamente. La introducción de un grupo 3-OH en la cadena conectora de butilo dio como resultado valores de cLogP inferiores, prediciendo un descenso de lipofilicidad, en comparación con los compuestos alifáticos precursores correspondientes. En comparación con todos los análogos de 3-OH-butilo, el derivado de 2-OH-butilo 40 mostró mayor afinidad para D3R (K¡ = 0,20 nM) pero exhibió menor selectividad para D3R, similar a los compuestos que no tienen sustitución con OH en la cadena conectora. Ninguno de los compuestos demostró alta afinidad de unión para D4R.
Las moléculas de longitud completa basadas tanto en 3-cloro-5-etil-2-metoxifenilpiperazina como en 2- cloro-3-etilfenilpiperazina mostraron altas afinidades de unión a D3R y selectividades sobre D2R.
El reemplazo del indol con otros sistemas anulares heteroarilo no mostraron ninguna mejora en la selectividad de D3R. Ejemplo 3. Estudios de metabolismo microsomal: microsomas de hígado de rata, mono Rhesus, y humano
El compuesto (±)-29 se analizó en un ensayo de estabilidad microsomal de hígado de mono frente un control. También se realizaron estudios adicionales conjuntos de estabilidad entre el compuesto (±)-29 y PG648 (Compuesto 1) en ensayos de estabilidad microsomal de hígado de mono y de hígado de rata. El compuesto 29 demostró una estabilidad metabólica mejorada en comparación con el compuesto 1 en ambas especies.
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Métodos: se realizó un ensayo de estabilidad metabólica de fase I en microsomas de hígado de rata y mono Rhesus. Para el metabolismo de fase I, la reacción se realizó con tampón fosfato potásico 100 mM, pH 7,4, en presencia de sistema regenerador de NADPH (NADPH 1,3 mM, glucosa 6-fosfato 3,3 mM, MgCh 3,3 mM, 0,4 U/ml de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa, citrato sódico 50 jM ). Las reacciones por triplicado se iniciaron por adición de los microsomas hepáticos a la mezcla de incubación (la concentración final de compuesto fue 10 |jM; 0,5 mg/ml de microsomas). Se realizaron controles negativos en ausencia de cofactores para determinar la degradación específica sin cofactores. La desaparición del compuesto se monitorizó mediante LC/MS/MS. El análisis cromatográfico se realizó usando un sistema de ultraalto rendimiento Accela™ que consistió en una bomba analítica, y un automuestrador acoplado a un espectrómetro de masas TSQ Vantage (Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham MA). La separación del analito del material potencialmente interferente se consiguió a temperatura ambiente usando una columna Agilent Eclipse Plus (100 x 2,1 mm d.i.) empaquetada con una fase estacionaria C18 de 1,8 jm . La fase móvil usada estuvo compuesta por ácido fórmico al 0,1 % en acetonitrilo y ácido fórmico al 0,1 % en H2O con elución en gradiente, comenzando en un 10 % (orgánico) aumentando linealmente a un 99 % hasta 2 min, manteniendo a un 99 % (2-2,5 min) y reequilibrando a un 10 % en 2,7 min. El tiempo total de proceso para cada analito fue de 5,0 min.
Los resultados comparativos del ensayo estabilidad microsomal de hígado de mono muestran que el compuesto 29 exhibe sorprendentemente alta estabilidad metabólica, especialmente en comparación con PG648 (Figura 1). Los resultados muestran además que el compuesto 29 exhibe un excelente metabolismo de fase I en microsomas de hígado de rata (Figura 2) y es significativamente más estable que PG648.
Ensayo de estabilidad microsomal de ratón. El ensayo de estabilidad metabólica de fase I para el compuesto 29 también se realizó en microsomas de hígado de ratón. La reacción se realizó con tampón fosfato potásico 100 mM, pH 7,4, en presencia de sistema regenerador de NADPH (la concentración final de compuesto fue 10 j M; 0,5 mg/ml de microsomas). También se evaluaron controles positivos para el metabolismo de fase I (testosterona). La desaparición del compuesto se monitorizó a lo largo del tiempo usando un método en tándem de cromatografía líquida y espectrometría de masas (LC/MS/MS). Todas las reacciones se realizaron por triplicado. El análisis cromatográfico se realizó usando un sistema de ultraalto rendimiento Accela que consistió en una bomba analítica y un automuestrador acoplado a un espectrómetro de masas TSQ Vantage (Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham MA). La separación del analito del material potencialmente interferente se consiguió a temperatura ambiente usando una columna Agilent Eclipse Plus (100 mm x 2,1 mm d.i.) empaquetada con una fase estacionaria C18 de 1,8 jm . La fase móvil usada estuvo compuesta por ácido fórmico al 0,1 % en acetonitrilo y ácido fórmico al 0,1 % en H2O con elución en gradiente, comenzando en un 10 % (orgánico) aumentando linealmente a un 99 % hasta 2 min, manteniendo a un 99 % (2-2,5 min) y reequilibrando a un 10 % en 2,7 min. El tiempo total de proceso para cada analito fue de 4,5 min. Los resultados revelaron que el compuesto 29 muestra una excelente estabilidad metabólica con > 80 % de permanencia durante 1 h.
Se realizaron ensayos de estabilidad metabólica de fase I adicionales para el compuesto racémico (±)-29 y cada enantiómero (R)-29 y (S)-29. Los resultados, proporcionados en la siguiente tabla, ilustran la estabilidad metabólica de fase I en microsomas de hígado humano donde permanece un 70-76 % de fármaco intacto después de 1 hora para todos los compuestos.
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Ejemplo 4. Estudios de autoadministración de oxicodona en ratas con el compuesto 29 y el compuesto 19
Se usaron métodos de autoadministración de oxicodona intravenosa convencionales para evaluar los efectos de los antagonistas de receptores DA D3, el compuesto 29 y el compuesto 19, en autoadministración de oxicodona en ratas.
MATERIALES Y MÉTODOS: se usaron ratas macho Long-Evans (Charles-River, Raleigh, N.C.). Se alojaron individualmente con un ciclo de luz-oscuridad de 12 h inverso (encendido a las 7:00 PM) tras la recepción, con acceso libre a alimento y agua, y se permitió que se aclimataran al nuevo entorno al menos durante 7 días antes de iniciar el experimento. Todos los procedimientos experimentales fueron consistentes con "Principles of Laboratory Animal Care" publicado por los Institutos nacionales de salud (publicación NIH 86-23, 1996) y se aprobaron por el Comité de cuidado y uso de animales de NIDA.
Cirugía: en primer lugar, se implantó a las ratas (300-350 g) usadas para autoadministración de oxicodona un catéter intravenoso. Se anestesiaron con pentobarbital (30 mg/kg i.p.) suplementado con hidrato de cloral (140 mg/kg, i.p.). A continuación, se hizo una pequeña incisión a la derecha de la línea media del cuello y se sacó la vena yugular externa y se insertó un catéter i.v., hecho de microrenatano (Braintree Scientific Inc., Braintree, MA, EE. UU.), con la punta llegando a la aurícula derecha. El catéter se fijó a la vena con sutura de seda y el otro extremo se alimentó por vía subcutánea alrededor de la parte posterior del cuello para salir cerca de la parte posterior del cráneo. El extremo se deslizó sobre una cánula de acero inoxidable de calibre 24 doblada (Plastic One Inc., Roanoke, VA, EE. UU.) con una cabeza roscada usada para asegurar una cánula ficticia y, durante la experimentación, una línea de infusión. A continuación, el catéter y la cánula guía se fijaron al cráneo con cuatro tornillos de acero inoxidable enroscados en el cráneo y cemento dental y se suturó la herida.
Después de la cirugía, los catéteres se enjuagaron diariamente con una solución de gentamicina-heparina-salina (30 UI/ml de heparina; ICN Biochemicals, Cleveland, OH, EE. UU.) como precaución contra la obstrucción e infección del catéter. Se permitió que los animales se recuperaran durante al menos 5 días antes de comenzar el entrenamiento conductual.
Aparato de autoadministración y entrenamiento de autoadministración de oxicodona: en primer lugar, en 3 ensayos experimentales, las ratas se entrenaron para autoadministrarse oxicodona. El aparato y los procedimientos de autoadministración se han descrito anteriormente (Xi et al., 2004, 2005). Después de recuperarse de la cirugía, cada rata se conectó mediante un tubo de polietileno (protegido con un resorte helicoidal de acero) y una pieza giratoria de líquido de un canal a una bomba de jeringa (Razel Sci., Stamford, Conn) controlada por un microprocesador y situada en una cámara operativa (Med Associates, Georgia, VT) equipada con luz de alojamiento de 15 W y dos palancas de respuesta (una activa y una inactiva) 6,5 cm por encima del suelo de la cámara. Se equiparon una luz de señal y un altavoz 12 cm por encima de la palanca activa. Cada sesión comenzó con la inserción de la palanca activa en la cámara y la iluminación de la luz de alojamiento que se mantuvo hasta el final de la sesión. Cada rata se entrenó en sesiones diarias de 3 horas para presionar la palanca activa en un programa de refuerzo de relación fija-1 (FR-1) para infusión de oxicodona i.v. En primer lugar, se entrenaron con una dosis unitaria de 0,1 mg/kg/infusión durante 2 semanas seguida de 0,5 mg/kg/infusión durante otra semana. Cada pulsación de la palanca activa dio como resultado la activación de una señal compuesta de luz-tono y el suministro de 0,08 ml de oxicodona durante 4,6 s. Este tiempo de infusión también sirvió como período de espera durante el que la señal de luz-tono se mantuvo activada y las respuestas de los animales a la palanca activa se registraron pero no tuvieron ninguna consecuencia programada. Las respuestas de los animales a la palanca inactiva también se registraron, pero no se recompensaron.
Experimento 1. Efectos del bloqueo de receptores D3 por el compuesto 29 en autoadministración de oxicodona. Los efectos del compuesto 29 en la autoadministración de oxicodona se sometieron a ensayo al día siguiente de la finalización del entrenamiento de autoadministración. En primer lugar, las ratas se asignaron a 4 grupos experimentales y se inyectaron con una dosis del fármaco (5, 15 o 25 mg/kg) o vehículo (2-hidroxipropil-p-ciclodextrina al 25 %) usado para disolver el fármaco. Quince minutos después de la inyección, las ratas se pusieron en las cámaras de autoadministración y se dejaron para otra sesión de autoadministración en la última dosis de oxicodona entrenada. Se registraron las respuestas de los animales a las palancas activa e inactiva y las infusiones de oxicodona durante la sesión de 3 h. Se realizó el experimento correspondiente con el compuesto 19.
Experimento 2. Efectos del bloqueo de receptores D3 por el compuesto 29 en animales que responden durante ensayo de sustitución salina. Después de la finalización del ensayo de autoadministración, se dejó que las ratas se autoadministraran oxicodona durante otras 4 sesiones diarias. A la mañana del quinto día, la solución de oxicodona de las jeringas infusión se reemplazó con solución salina y los animales se inyectaron con el compuesto 29 (5 o 15 mg/kg) o vehículo. Quince minutos después de la inyección, se pusieron en las cámaras y se dejó que presionaran la palanca para infusión salina durante 3 h. Se registraron las respuestas de los animales en las palancas activa e inactiva y el número de infusiones salinas durante la sesión de ensayo de 3 h.
Experimento 3. Efectos del bloqueo de receptores D3 por el compuesto 29 en el restablecimiento de búsqueda de fármaco inducido por cebado de oxicodona. Después de la finalización del entrenamiento de autoadministración, tres grupos de animales adicionales se expusieron a las condiciones de extinción, en las que se reemplazó cocaína por solución salina, y se desconectaron la señal luminosa y el tono asociados a la cocaína. La pulsación de la palanca activa condujo únicamente a la infusión de solución salina. Las sesiones de extinción de 3 h diarias para cada rata continuaron hasta pulsaciones de palanca < 10 veces por sesión de 3 h durante al menos 3 días consecutivos. En el día del ensayo, los grupos de ratas recibieron el vehículo o una de 2 dosis de compuesto 29 (5 o 15 mg/kg). Quince minutos después de la inyección, se administró una inyección de cebado de oxicodona (1 mg/kg i.p.) e inmediatamente se pusieron en las cámaras de autoadministración. Se dejó que los animales presionaran las palancas durante otra sesión de extinción y se registraron sus respuestas en las palancas.
Aparato de condicionamiento de lugar y efectos del compuesto 29 en aversión al lugar condicionada (CPA) provocada pornaloxona. El aparato condicionante de lugar (Med Associates, St Albans, VT) consistió en dos compartimentos (21 x 28 cm2) unidos por un área de conexión gris (21 x 12,5 cm2); una puerta deslizante separaba cada compartimento del área de conexión. Los dos compartimentos extremos diferían en el color de las paredes (blanco y negro), el tipo de suelo (rejilla y red), y la iluminación; la preferencia por los compartimentos extremos se equilibró usando iluminación débil en el compartimento blanco reflector (y normalmente menos preferente) y mayor iluminación en el compartimento negro no reflector. El paradigma se "equilibró" adicionalmente asociando las inyecciones de entrenamiento al lugar blanco en la mitad de los animales y al lugar negro en los animales restantes.
Los procedimientos de CPA en este estudio fueron similares a los descritos por otros (Azar et al., 2003; Olmstead y Burns 2005; 2012). En resumen, un día antes de comenzar los tratamientos farmacológicos, las ratas (200-250 g) se dividieron en 6 grupos y se permitió que exploraran su aparato de condicionamiento asignado durante 15 min (precondicionamiento). Los tratamientos comenzaron a la mañana del día siguiente; 3 grupos se inyectaron con oxicodona (3 mg/kg, i.p.) y otros 3 con solución salina (1 ml/kg) dos veces al día durante 7 días. Las dos inyecciones en un día se administraban a las 8 a.m. y 6 p.m., respectivamente. Se administraron solución salina (1 ml/kg, s.c.) y naloxona (0,3 mg/kg, s.c.) 4 h después de la inyección matinal de oxicodona en los días 4°, 6° y 5°, 7°, respectivamente. Las ratas tratadas con oxicodona se pusieron en un compartimento durante 30 min inmediatamente después de cada una de las 2 inyecciones de naloxona, y en el otro compartimento después de cada una de las inyecciones de solución salina. Se administró vehículo o una dosis de compuesto 29 (5 o 15 mg/kg, i.p.) 1 h después de cada sesión de condicionamiento con naloxona. Los 3 grupos de ratas tratadas con solución salina se condicionaron con naloxona, vehículo y compuesto 29 (15 mg/kg), respectivamente, en los días de emparejamiento de fármaco. Se sometió a ensayo CPA 24 h después de la última sesión de condicionamiento y se dejó que los animales exploraran el aparato durante 15 min. La puntuación de CPA se calculó como el tiempo que los animales pasaron en los compartimentos emparejados al fármaco menos los emparejados a solución salina. Se adquirieron oxicodona HCl y naloxona HCl en Sigma Chemical Co. (Saint Louis, MO, EE. UU.) y se disolvieron en solución salina fisiológica.
Todos los datos se presentaron como valores medios (± SEM), y se analizaron usando un análisis de varianza (ANOVA) unidireccional o bidireccional con o sin medida repetida cuando fuera apropiado. Las comparaciones post-hoc entre grupos se realizaron mediante el ensayo de Newman-Keuls.
REFERENCIAS:
Azar MR, Jones BC, Schulteis G (2003) Conditioned place aversion is a highly sensitive index of acute opioid dependence and withdrawal. Psychopharmacology (Berl) 170:42-50.
Olmstead MC, Burns LH (2005) Ultra-low-dose naltrexone suppresses rewarding effects of opiates and aversive effects of opiate withdrawal in rats. Psychopharmacology (Berl) 181:576-581.
Yu H, Wen D, Ma C, Meng Y, Li S, Ni Z, Cong B (2012) Effects of exogenous cholecystokinin octapeptide on acquisition of naloxone precipitated withdrawal induced conditioned place aversion in rats. PLoS One 7:e41860. Xi Zx , Gilbert J, Campos a C, Kline N, Ashby CR Jr, Hagan JJ, Heidbreder CA, Gardner EL (2004) Blockade of mesolimbic dopamine D3 receptors inhibits stress-induced reinstatement of cocaine-seeking in rats. Psychopharmacol (Berl) 176:57- 65
Xi ZX, Gilbert JG, Pak AC, Ashby CR Jr, Heidbreder CA, Gardner EL (2005) Selective dopamine D3 receptor antagonism by SB-277011A attenuates cocaine reinforcement as assessed by progressive-ratio and variable-cost/variable-payoff fixed-ratio cocaine self-administration in rats. Eur J Neurosci 21:3427-3438.
La Figura 3A muestra los efectos de la inyección sistémica del compuesto 29 (5-25 mg/kg, i.p.) tras ingesta de oxicodona (autoadministración) en ratas. ANOVA bidireccional con medición repetida durante la sesión (análisis de datos en bruto) reveló un efecto significativo de grupo (F(3,30) = 5,54, P < 0,01) pero no de sesión (F(1,10) = 0,77, P = 0,39) e interacción sesión x grupo (F(3,30) = 1,76, P = 0,18). El análisis de los cambios porcentuales con ANOVA unidireccional también reveló un efecto significativo (F(3,30) = 5,54, P < 0,01). N = 6 en cada grupo. #, P,0,05 frente a niveles basales de ingesta de droga; * y **, P < 0,05 y 0,01, respectivamente, frente al grupo de vehículo. La Figura 3B muestra los efectos de la inyección sistémica del compuesto 19 (1-5 mg/kg, i.p.) tras ingesta de oxicodona (autoadministración) en ratas. N = 6-7 en cada grupo. #, P < 0,05 frente a niveles basales de ingesta de droga; * y **, P < 0,05 y 0,01, respectivamente, frente al grupo de vehículo.
La Figura 4 muestra los efectos de la inyección sistémica del compuesto 29 (5-15 mg/kg, i.p.) en el restablecimiento de búsqueda de oxicodona inducido por inyección de cebado de oxicodona (1 mg/kg, i.p.) en ratas entrenadas previamente para autoadministración de oxicodona y finalmente extinguidas conductualmente. N = 7-8 en cada grupo. **, P < 0,01 frente al grupo de vehículo.
La Figura 5 describe el procedimiento para la aversión al lugar condicionada provocada por naloxona en ratas tratadas con oxicodona crónicas.
La Figura 6 ilustra los resultados donde el compuesto 29 (5, 15 mg/kg, 1 hora antes de la naloxona) inhibe la aversión al lugar condicionada provocada por naloxona en ratas tratadas con oxicodona crónicas. # y ##, P < 0,05 y 0,01, frente a grupos tratados con solución salina; * y **, P < 0,05 y 0,01, frente al grupo de naloxona vehículo, respectivamente. N = 8 en cada grupo.
El compuesto 29 se evaluó para su eficacia in vivo en la autoadministración en ratas de la prescripción del analgésico opioide oxicodona. Con una programación FR1, el compuesto 29 atenuó la autoadministración a 15 y 25 mg/kg (Figura 3A), inhibió la búsqueda de oxicodona durante ensayo de extinción (Figura 4), y bloqueó el restablecimiento de búsqueda de droga inducido por oxicodona. El compuesto 29 también atenuó significativamente la aversión al lugar condicionada provocada por naloxona en ratas tratadas con oxicodona crónicas (Figura 6 ). Los resultados muestran que el compuesto 29, un antagonista altamente selectivo de D3R, es eficaz en estos modelos de abuso de opiáceos.
Estos datos sugieren que los antagonistas de D3R de Fórmula (I) pueden ser alternativas o complementos adecuados a medicaciones mediadas para receptores de opioides (por ejemplo, buprenorfina, metadona o naloxona) usadas clínicamente en la actualidad para el tratamiento de adicción a opiáceos.
El compuesto 29 no se une a receptores de opioides (mu, delta, kappa).
El pretratamiento con el compuesto (±)-29 (15 mg/kg y 25 mg/kg) o el compuesto (±)-19 (1 mg/kg y 5 mg/kg) no mostró ningún efecto significativo en la autoadministración de sacarosa.
Los pretratamientos del compuesto (±)-29 (5-15 mg/kg i.p.) en la adquisición de autoadministración de oxicodona (0,05 mg/kg/infusión; N = 8 en cada grupo) demostraron que los animales se autoadministraron un número significativamente inferior de infusiones de oxicodona cuando se pretrataron con 15 mg/kg del compuesto (±)-29 y este efecto persistió durante varios días después del pretratamiento.
Ejemplo 5. Estudios de autoadministración de THC en monos ardilla con el compuesto 29
El compuesto 29 se sometió a ensayo en un modelo de autoadministración de THC en monos ardilla que se autoadministran THC con una programación FR10.
Objetos: siete monos ardilla (Saimirí sciureus) adultos macho que pesaban de 0,8 a 1,1 kg se alojaron en jaulas individuales en una habitación de temperatura y humedad controlada con acceso sin restricción a agua. Cada animal tuvo un número o identificador alfanumérico único (grupo de autoadministración de THC: 434, 25B, 37B; grupo de autoadministración de alimento: 1549, 570, 27B, 535). Estos monos se entrenaron para autoadministrarse THC o gránulos de alimento antes del estudio. Los monos se alimentaron (aproximadamente dos horas después de la sesión) con una ración de alimento diario que consistió en galletas de dieta de mono alta en proteínas (Lab Diet 5045, PMI Nutrition International, Richmond, Indiana). Se determinó individualmente para cada mono el número de galletas (8-14) para mantener su peso corporal a nivel constante a lo largo del estudio. Los monos que se autoadministraron gránulos de alimento tomaron un número de galletas ajustado para mantener la motivación de realizar una tarea de refuerzo de alimento. Se proporcionaron diariamente frutas frescas, verduras y enriquecimiento ambiental. Todos los animales usados en este estudio se mantuvieron en instalaciones completamente acreditadas por la Asociación para la evaluación y acreditación del cuidado de animales de laboratorio, y los experimentos se realizaron de acuerdo con las directrices del Comité institucional de cuidado y uso de animales del Programa de investigación intramural, Institutos nacional de abuso de drogas, Institutos nacionales de salud, y las directrices para el Cuidado y uso de mamíferos en investigación neurocientífica y conductual (National Research Council 2003).
Los monos se prepararon quirúrgicamente con catéteres venosos permanentes crónicos (poli(cloruro de vinilo); diámetro interior, 0,38 mm; diámetro exterior 0,76 mm) (Goldberg 1973) que se pasaron por vía subcutánea a la espalda del mono por donde salían de la piel. Los monos llevaban chaquetas de malla de nailon (Lomir Biomedical, Canadá) para proteger sus catéteres.
Aparato: las cámaras experimentales y otros aparatos usados en este estudio fueron los mismos que los descritos anteriormente (Justinova et al. 2003). Las sesiones de ensayo se realizaron en cámaras de aislamiento con atenuación del sonido equipadas con una silla de plexiglás, una luz de alojamiento blanca y ruido blanco para enmascarar el sonido externo. La silla contenía una palanca de respuesta (Med Associates., EE. UU.) montada en una pared frontal transparente; cada pulsación en la palanca con una fuerza superior a 0,2 N producía un clic audible y se registraba como respuesta. Un par de luces de estímulo de color ámbar, montadas detrás de la pared transparente de la silla, podían iluminarse y usarse como estímulos visuales.
Procedimiento de autoadministración: habitualmente, se realizaron sesiones experimentales diarias de una hora de lunes a viernes con cada mono. En cada sesión, se colocó a los monos en sillas de plexiglás y se sujetaron en posición sentada mediante cierres de cintura. Antes del inicio de la sesión, los catéteres se enjuagaron con 1 ml de solución salina y se administró una inyección (calculada para llenar el espacio muerto del catéter que era de aproximadamente 0,2 ml). Los catéteres de los monos se conectaron a tubos de polietileno, que salían de las cámaras de aislamiento donde estaban conectados a bombas de jeringa accionadas por motor. Las bombas de jeringa se calibraron de modo que la duración de cada inyección fuera 0,2 s y el volumen de inyección fuera 0,2 ml. Al comienzo de la sesión, se apagó la luz blanca de alojamiento y se encendió una luz verde de estímulo. En presencia de la luz verde, se requirió que los monos dieran 10 respuestas en la palanca (programación de refuerzo de proporción fija de 10 respuestas; FR10) para producir una inyección de THC. La compleción de 10 respuestas en la palanca apagaba la luz verde y producía una inyección intravenosa (i.v.) de 4 pg/kg de THC. Cada inyección se emparejó con una iluminación de 2 s de una luz ámbar de estímulo. Cada inyección fue seguida por un período de espera de 60 s, durante el que la cámara se oscurecía y las pulsaciones de palanca no tenían las consecuencias programadas.
Estudio de autoadministración: cuando se respondió a la dosis de entrenamiento de THC (4 pg/kg/inyección), se mantuvo estable durante al menos cinco sesiones consecutivas (menos de un 15 % de variabilidad), sometiendo a ensayo el compuesto 29 antagonista selectivo de D3. Después de 3 sesiones con pretratamiento con vehículo, se sometió a ensayo el pretratamiento con cada dosis de Compuesto 29 (1, 3 y 10 mg/kg, i.m.) durante tres sesiones consecutivas, seguido de recuperación de la respuesta basal de THC. También se usaron una programación de refuerzo y un protocolo experimental iguales en un grupo de monos que se autoadministraban gránulos de alimento.
Estudios de restablecimiento: para determinar por separado los efectos de restablecimiento de una inyección de cebado y las señales asociadas a drogas, se utilizaron dos protocolos de extinción diferentes (descritos posteriormente) que permitieron aislar los efectos de estas variables independientes.
Restablecimiento inducido por cebado: antes de comenzar los ensayos de restablecimiento inducido por cebado, se dejó que los monos se autoadministraran la dosis de entrenamiento de THC hasta que alcanzaron una línea basal estable (5-10 sesiones). En sesiones de extinción posteriores, las pulsaciones de palanca condujeron a infusiones de solución salina i.v. más las señales visuales que se habían asociado previamente al THC. Después de al menos dos sesiones de extinción, cuando la respuesta había alcanzado un nivel estable bajo, se administró una inyección de cebado de THC (0,04 mg/kg i.v.) inmediatamente antes de la siguiente sesión, durante la cual la respuesta (FR10) continuó para producir solo inyecciones de solución salina i.v. y las señales visuales discretas. Se estudiaron los efectos de Compuesto 29 (1, 3 y 10 mg/kg, i.m.) o vehículo como pretratamientos administrados antes de las sesiones de cebado de THC. También se administró inyección de vehículo i.v. no contingente antes de cada sesión de extinción como control para el tratamiento de cebado de droga. La dosis de 10,0 mg/kg del compuesto 29 también se administró i.m. antes del cebado de vehículo para determinar si el Compuesto 29 solo afectaría a la búsqueda de droga extinguida. El restablecimiento inducido por cebado de THC con pretratamiento con vehículo se repitió después de la conclusión del ensayo del Compuesto 29 para determinar la fiabilidad del efecto de restablecimiento en ensayos repetidos.
Restablecimiento inducido por señal: después de completar los ensayos de restablecimiento inducido por cebado, los monos volvieron a la autoadministración de THC basal durante 5-10 sesiones. En las sesiones de extinción posteriores, se retiraron las inyecciones de droga y todas las señales asociadas a las inyecciones de droga. Esto significa que los catéteres no estaban conectados a ninguna bomba y los monos no recibían infusiones o presentaciones de señales visuales. Después de dos o tres días de extinción, se sometió a ensayo el restablecimiento inducido por señal de la conducta de búsqueda de droga extinguida después de pretratamiento con vehículo (i.m.) permitiendo la administración de una inyección de solución salina emparejada con las señales asociadas a droga. A continuación, se estudió el efecto del pretratamiento con Compuesto 29 (0,3, 1 y 3 mg/kg) en el restablecimiento inducido por señal. Cada ensayo de restablecimiento fue una sesión individual, que fue precedida y seguida por sesiones de extinción con pretratamiento con vehículo (i.m.) 30 minutos antes de las sesiones. El compuesto 29 (3 mg/kg) también se administró i.m. antes de una sesión de extinción para estudiar los efectos del Compuesto 29 en la búsqueda de droga extinguida. El restablecimiento inducido por señal con pretratamiento con vehículo se repitió después de la conclusión del ensayo del Compuesto 29 para determinar la fiabilidad del efecto de restablecimiento en ensayos repetidos.
Se disolvió A9-tetrahidrocannabinol (THC, NIDA Drug Supply Program, Bethesda, MD, EE. UU.) en un vehículo que contenía Tween 80 al 1 %, etanol al 1 %, y solución salina para obtener una solución de trabajo (0,4 mg/ml) y se diluyó adicionalmente con solución salina. En los ensayos de restablecimiento, se inyectó THC i.v. (1 ml/kg) inmediatamente antes de la sesión. El compuesto 29 se disolvió en un vehículo que contenía DMSO al 15 %, ciclodextrina al 10 % en solución salina y se inyectó i.m. (0,33 ml/kg) 30 min antes de la sesión.
Análisis de datos: el número de refuerzos (inyecciones o gránulos) por sesión representa el número total de inyecciones administradas durante cada sesión de 1 hora. Las tasas de respuesta se expresan como respuestas por segundo promediadas durante la sesión de 1 h, no incluyéndose el tiempo y la respuesta durante los tiempos de espera en los cálculos. Los datos se expresan como tasas medias de respuesta y número de refuerzos por sesión ± SEM. Para la evaluación estadística de los efectos durante sesiones consecutivas, se usó el valor medio de las últimas tres sesiones antes de la manipulación experimental como valor de control para permitir comparaciones con sesiones posteriores. El análisis estadístico se realizó utilizando ANOVA de medidas repetidas unidireccional o bidireccional (los datos cumplieron con los supuestos del ensayo). El análisis post hoc se realizó mediante comparaciones múltiples por pares de Tukey o ensayo t de Bonferroni (comparaciones múltiples frente al grupo de control). La significación estadística se aceptó a nivel de p < 0,05. Se usó el software SigmaStat (Systat Software Inc.) para todos los análisis estadísticos.
Referencias (métodos): Goldberg SR (1973) Comparable behavior maintained under fixed-ratio and second-order schedules of food presentation, cocaine injection or d-amphetamine injection in the squirrel monkey. J Pharmacol Exp Ther 186:18-30.
Justinova Z, Tanda G, Redhi GH, Goldberg SR (2003) Self-administration of delta9-tetrahydrocannabinol (THC) by drug naive squirrel monkeys. Psychopharmacology (Berl) 169:135-140.
La Figura 7, gráficos A y B, exhibe resultados que establecen que el compuesto 29 atenúa la autoadministración de THC en monos ardilla cuando se administra por vía intramuscular a 1, 3, y 10 mg/kg.
La Figura 8, gráficos A y B, exhibe resultados que establecen que el compuesto 29 no tiene ningún efecto en la autoadministración de alimento en monos ardilla cuando se administra por vía intramuscular a 1, 3, y 10 mg/kg.
La Figura 9, gráficos A y B, exhibe resultados que establecen que el compuesto 29 atenúa el restablecimiento de búsqueda de droga inducido por THC en monos ardilla cuando se administra por vía intramuscular a 1, 3, y 10 mg/kg. El compuesto 29 no se une a receptores cannabinoides CB1 o CB2.
Los resultados muestran que el compuesto 29, un agonista de D3R altamente selectivo, es eficaz en un modelo de abuso de THC. El compuesto 29 bloquea de forma dependiente a la dosis la autoadministración de THC (4 |jg/kg/¡nfus¡ón) en el intervalo de 1-10 mg/kg sin afectar a la autoadministración de alimento. Además, el compuesto 29, en el mismo intervalo de dosis, bloqueó el restablecimiento de búsqueda de droga inducido por THC en estos animales, lo que sugiere que los antagonistas de D3R de Fórmula (I) pueden ser útiles en el tratamiento de abuso de marihuana.
El compuesto (±)-29 atenuó el restablecimiento de comportamiento de búsqueda de droga inducido por señal en monos ardilla.
Las Tablas 2 y 3 proporcionan datos funcionales adicionales para compuestos seleccionados de Fórmula (I).
Tabla 2. Datos funcionales para compuestos seleccionados de Fórmula (I) usando estimulación o inhibición de mi n i im l r in ir l n l l H n D R min h m n
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Tabla 3. Datos funcionales y de unión in vitro adicionales para compuestos seleccionados de Fórmula (I) en i
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Ejemplo 6. Estudio de preferencia de lugar condicionada (CPP) inducida por oxicodona en ratas
Se adquirieron cincuenta ratas macho Long-Evans (275-300 g) en Charles River Laboratories (Raleigh, NC) y se alojaron en la instalación de animales de NIDA IRP con un ciclo de luz-oscuridad de 12 h inverso (encendido a las 7:00 PM) con acceso libre a alimento y agua. Todos los procedimientos se realizaron de acuerdo con "Principles of Laboratory Animal Care" indicado por el Instituto Nacional de Salud (publicación NIH 86-23, 1996).
Se sometió a ensayo la CPP en el aparato de condicionamiento de lugar (Med Associates, St Albans, VT) que consistió de dos compartimentos laterales (21 x 28 cm2) y un área de conexión gris central (21 x 12,5 cm2); una puerta deslizante separaba cada compartimento del área de conexión. Los dos compartimentos extremos diferían en el color de las paredes (blanco y negro), el tipo de suelo (rejilla y red), y la iluminación. A continuación, los animales se dividieron aleatoriamente en cinco grupos de tratamiento como se muestra en la leyenda de la Figura 10. En primer lugar, cada rata se expuso al aparato de CPP durante 15 minutos (precondicionamiento) y a continuación siguió el condicionamiento CPP con oxicodona. Los animales que presentaron un sesgo significativo en un compartimento (definido por diferencia de tiempo entre dos compartimentos > 200 s) durante el precondicionamiento fueron excluidos del estudio. Los procedimientos de CPP con oxicodona consistieron en 2 días de condicionamiento de oxicodona (3 mg/kg, i.p.) en un compartimento y 2 días de condicionamiento con solución salina en otro compartimento, alternativamente (por ejemplo, oxicodona-solución salina-oxicodona-solución salina). Los compartimentos emparejados a oxicodona o solución salina se compensaron. En los días de condicionamiento, cada animal recibió un pretratamiento con solución salina o compuesto 29 (5, 15 mg/kg, i.p.) 15 minutos antes de la inyección de oxicodona. Después de la inyección de oxicodona, los animales se confinaron inmediatamente en los compartimentos asignados durante 40 minutos. Para potenciar la formación de CPP por oxicodona, los animales recibieron 4 días de tratamiento con oxicodona (3 mg/kg, i.p., dos veces al día a las 8:00 y 18:00) en jaulas de alojamiento. En el grupo (29 vehículo), se emparejó solución salina a un compartimento y se emparejó compuesto 29 (15 mg/kg) a otro compartimento. En el grupo (vehículo vehículo), se emparejó solución salina a cada compartimento. A continuación, 24 horas después de la última inyección de condicionamiento de solución salina u oxicodona, los animales se pusieron en el mismo aparato de CPP de tres cámaras durante 15 minutos y se registró el tiempo pasado en cada compartimento. La puntuación de CPP se calculó por diferencia del tiempo (segundos) que el animal pasó en el compartimento emparejado a la droga frente al compartimento emparejado a la solución salina.
La Figura 10 muestra los efectos del compuesto 29 en CPP inducida por oxicodona. Cuatro días de condicionamiento de oxicodona (por ejemplo, grupo de vehículo oxicodona) (3 mg/kg, i.p.) frente a solución salina produjeron una CPP significativa en comparación con el grupo de control (vehículo solución salina) de ratas. El pretratamiento con compuesto 29 (5, 15 mg/kg, i.p., 15 min antes de cada inyección de oxicodona) atenuó de forma dependiente a la dosis la CPP inducida por oxicodona (Figura 10). ANOVA unidireccional reveló un efecto principal de tratamiento estadísticamente significativo (F4,45 = 4,29, p < 0,01). Las comparaciones de grupos individuales post hoc indicaron una reducción significativa en CPP inducida por oxicodona después de 15 mg/kg de compuesto 29 (p < 0,05) en comparación con el grupo (vehículo oxicodona). El compuesto 29 solo, a 15 mg/kg, no produjo CPP, lo que sugiere una falta de recompensa por sí mismo. En la Figura 10, ** p < 0,01, comparado con el grupo (vehículo vehículo); ## p < 0,01, comparado con el grupo (vehículo oxicodona); el número sobre cada barra vuestra el número del animal en cada grupo experimental.
Ejemplo 7. Estudios de actividad locomotora en ratones
Al igual que otros agonistas de opioides tales como morfina y heroína, la administración aguda (o dosis individual) de oxicodona produce un aumento significativo en la actividad locomotora en ratones. Además, la administración repetida de estos agonistas de opioides produce un aumento progresivo en la locomoción, es decir, sensibilización locomotora. Este estudio se dirigió a (1) determinar si el compuesto 29 solo tenía algún efecto en la actividad locomotora basal, (2) si atenuaría la actividad y sensibilización locomotoras estimuladas por oxicodona, y (3) si este efecto era de larga duración. Se adquirieron veinticuatro ratones macho (22-25 g) con antecedentes genéticos C57BL/6J en Charles River Laboratories (Raleigh, NC). Después de su llegada, se alojaron agrupados en las instalaciones de animales con un ciclo de luz-oscuridad de 12 h inverso (encendido a las 7:00 PM) con acceso libre a alimento y agua y se dejó que se aclimataran al nuevo entorno durante 7 días antes del inicio del experimento. Todos los procedimientos estuvieron de acuerdo con "Principles of Laboratory Animal Care" indicados por el Estatuto nacional de salud (publicación NIH 86-23, 1996).
Los ensayos de actividad locomotora se realizaron en cámaras de campo abierto (43 x 43 x 30 cm3) (Accuscan Instruments, Inc., Columbus, OH, EE. UU.). Antes del ensayo, los ratones se habituaron a la cámara locomotora (2 h/día durante 3 días consecutivos) y a continuación se dividieron aleatoriamente en tres grupos de dosis (vehículo, 5, 15 mg/kg de compuesto 29). En los días de habituación, los animales se trasladaron a la sala de ensayo, se aclimataron allí durante 10 minutos y a continuación se pusieron en sus cámaras locomotoras asignadas. El día 1 de ensayo, cada grupo de ratones se pretrató con vehículo (25 % de 2-hidroxipropil-p-ciclodextrina) o una dosis del compuesto 29 (5, 15 mg/kg, i.p.) sin inyección de oxicodona. A continuación, 15 minutos después, los animales se pusieron en las cámaras de ensayo. Sus actividades locomotoras se registraron cada 20 min durante 2 h utilizando el software VersaMax versión 3.0 (Accuscan Instruments, Inc.). En los días 2-6 de ensayo, los tres grupos de ratones recibieron en primer lugar vehículo o una dosis del compuesto 29, seguido de una inyección de oxicodona 15 minutos después del pretratamiento con compuesto 29. Después de 72 h de abstinencia en las jaulas de alojamiento en la instalación de animales, cada animal se estimuló nuevamente con una inyección de oxicodona de 4 mg/kg (día 9) pero sin pretratamiento con compuesto 29. Las actividades locomotoras se registraron durante 2 h/día después de cada inyección de oxicodona. Los datos de comportamiento locomotor se expresan como valores medios (± SEM). La distancia recorrida (cm) en 2 h (Figura 11, gráfico A) o cada 20 min (Figuras 11B-D) se usó para evaluar los efectos locomotores de 29 y/u oxicodona en ratones. Se usó ANOVA bidireccional con medidas repetidas a lo largo del tiempo para evaluar la significación estadística de los cambios en la actividad locomotora después de la administración de compuesto 29 y/u oxicodona. Se usó mínima diferencia significativa de Fisher post hoc para comparaciones múltiples. p < 0,05 se consideró estadísticamente significativo.
Los gráficos A-D de la Figura 11 ilustran los efectos del compuesto 29 (0, 5, 15 mg/kg, i.p.) en los aumentos basales e inducidos por oxicodona en actividad locomotora en ratones. El gráfico A de la Figura 11 muestra los efectos de la oxicodona en la locomoción a lo largo del tiempo (del día 2 al día 9) en presencia o ausencia de tratamiento con compuesto 29. En el día 1, se administró compuesto 29 solo (5, 15 mg/kg, 15 min antes de solución salina) y no tuvo ningún efecto en la locomoción. Del día 2 al día 6, cada animal recibió una dosis diaria de 29 (vehículo, 5, 15 mg/kg, 15 min antes de oxicodona) y administración de oxicodona (4 mg/kg). En el grupo de tratamiento con vehículo, la administración diaria repetida de oxicodona produjo un aumento progresivo en la locomoción (es decir, sensibilización locomotora) (# p < 0,05, ## p < 0,01, comparado con el nivel de actividad locomotora del día 2). Está sensibilización locomotora fue bloqueada de forma dependiente a la dosis por 29 (* p < 0,05, ** p < 0,01, comparado con el grupo de control de vehículo en cada punto temporal etiquetado). Después de 5 días de la administración conjunta (vehículo/29 oxicodona), los animales experimentaron 2 días de abstinencia, seguido de inyección de estimulación de oxicodona de 4 mg/kg (sin pretratamiento con 29) en el día 9, indicando que la sensibilización locomotora inducida por oxicodona que aún estaba presente en el grupo de control de vehículo, fue bloqueada en los grupos de pretratamiento con 29. El gráfico B de la Figura 11 muestra el curso temporal de los cambios en la locomoción inducidos por 29 (día 1), indicando que no tiene ningún efecto en la actividad locomotora por sí mismo. El gráfico C de la Figura 11 muestra el curso temporal de los cambios en la locomoción inducidos por oxicodona después de la primera inyección de oxicodona (efecto agudo en el día 2), indicando que el pretratamiento con 29 inhibió de forma dependiente a la dosis la hiperactividad inducida por oxicodona (efecto agudo). El gráfico D de la Figura 11 muestra el curso temporal de los cambios en la locomoción inducidos por cebado de oxicodona en ratones después de 2 días de abstinencia desde la última administración conjunta (vehículo/29 oxicodona) (día 9), indicando que el pretratamiento con 29 repetido desde el día 2 al día 6 produjo una inhibición de larga duración en el aumento en la locomoción inducido por oxicodona. N = 8 ratones en cada grupo.
Los resultados de esta evaluación se muestran en la Figura 11, gráficos A-D. El gráfico A de la Figura 11 muestra los efectos locomotores globales de la administración diaria repetida de oxicodona (4 mg/kg, i.p.) en presencia de vehículo (p-ciclodextrina al 25 %) o una dosis de compuesto 29 (5, 15 mg/kg, i.p., administrada 15 min antes de la inyección de oxicodona). El compuesto 29 solo no tiene ningún efecto en la actividad locomotora basal en ratones cuando se somete a ensayo en el día 1 (Figura 11, gráficos A, B). Por el contrario, la oxicodona causó un aumento significativo en la actividad locomotora (Figura 11, gráficos A, C). La administración repetida de oxicodona produjo un aumento progresivo en la locomoción (sensibilización) a lo largo del tiempo (del día 2 al día 6 en el grupo de pretratamiento con vehículo). Sorprendentemente, el pretratamiento con compuesto 29 no solo atenuó la hiperactividad aguda inducida por oxicodona (Figura 11, gráfico A, día 2, sino que también bloqueó la adquisición de sensibilización locomotora repetida inducida por oxicodona (Figura 11, gráfico A, día 2-día 6) y la expresión de sensibilización locomotora inducida por cebado de oxicodona después de 2 días de abstinencia (Figura 11, gráfico A, día 9). ANOVA bidireccional para mediciones repetidas a lo largo del tiempo (Figura 11, gráfico A) reveló un efecto principal de tratamiento farmacológico estadísticamente significativo (F2,21 = 12,24, p < 0,001), efecto principal temporal (F6,49 = 9,14, p < 0,001), e interacción tratamiento x tiempo (F-i2,98 = 31,51, p < 0,001). Los gráficos B-D de la Figura 11 muestran los cursos temporales del cambio en la actividad locomotora inducido por oxicodona cuando se somete a ensayo el día 1 (Figura 11, gráfico B: F2,21 = 0,12, p = 0,88), el día 2 (Figura 11, gráfico C: F2,21 = 5,22, p < 0,05) y el día 9 (Figura 11, gráfico D: F2,21 = 5,95, p < 0,01), que indica que el pretratamiento con compuesto 29 atenuó significativamente el aumento en la locomoción inducido por oxicodona en cada día de ensayo.
Ejemplo 8. Métodos para estudio de la farmacocinética de nuevos antagonistas de receptores D3 de dopamina en ratas
En este estudio se usaron ratas Long-Evans macho con pesos corporales de ~250 gramos (Charles River Laboratories, Raleigh, NC, EE. UU.). Todas las ratas se alojaron individualmente en una habitación de clima controlado con un ciclo de luz/oscuridad de 12 h. Estuvieron disponibles alimentos y agua ad libitum durante los experimentos. Todos los procedimientos experimentales se realizaron de acuerdo con la Guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio y fueron aprobados por el Comité de cuidado y uso de animales del Instituto nacional de abuso de drogas de los Institutos Nacionales de Salud de EE. UU.
Procedimientos experimentales (sonda oral): los animales se contuvieron suavemente (agarrando al animal por la piel suelta del cuello y la espalda) para inmovilizar la cabeza, pero no de manera que los animales vocalizaran o mostraran otros signos de angustia. Se mantuvo el animal en posición erguida (vertical) y pasó la aguja de la sonda (calibre 19) a lo largo del lateral de la boca. Siguiendo el paladar, se hizo avanzar la aguja hacia el esófago y hacia el estómago. Después de pasar la aguja a la longitud correcta, se inyectó el compuesto. A continuación, los animales se anestesiaron profundamente con 100 mg/kg de pentobarbital (i.p.), y a continuación se obtuvo sangre (~1 ml) mediante punción cardíaca y se diseccionó el cerebro en diferentes puntos temporales (15 min, 30 min, 60 min, 2 h, 4 h, y 8 h, n = 3 ratas por punto temporal) después de la administración oral del fármaco. Tres ratas adicionales recibieron el vehículo (beta-hidroxiciclodextrina al 25 %) como controles de punto temporal "0 min" (es decir, línea basal antes de la inyección del fármaco, en la que los niveles de fármaco en las muestras deberían ser cero).
Método de análisis de muestras; preparación de solución de trabajo de estándares y estándar interno (IS): los compuestos de ensayo (R- y S-29 y R- y S-19) se disolvieron en una cantidad apropiada de DMSO para producir una solución de trabajo 10 mM. Estas soluciones se almacenaron a -20 °C. Se disolvió losartán (IS) en DMSO a una concentración 10 mM que además se diluyó en acetonitrilo para obtener una concentración final 500 nM y las soluciones se almacenaron a -20 °C.
Preparación de curva de estándares y muestra de control de calidad (QC): se prepararon muestras de plasma de curva de estándares usando plasma de rata sin tratamiento previo, mediante dilución seriada de la solución de trabajo, con 8 estándares y 4 QC, que variaron de 10-50.000 pmol/ml.
Se prepararon muestras cerebrales de curva de estándares usando cerebro de ratón sin tratamiento previo. El tejido se homogeneizó en acetonitrilo (factor de dilución; DF = 3), se trituró, y se centrifugó a 10.000 rpm durante 10 minutos. El sobrenadante resultante se usó como matriz de la curva de estándares. La curva de estándares se preparó posteriormente por dilución seriada de la solución de trabajo, con 7 estándares y 4 QC, que variaron de 30-50.000 pmol/ml.
Procedimiento de extracción: los compuestos de ensayo se extrajeron de muestras de plasma mediante precipitación de proteínas usando acetonitrilo. Los compuestos se extrajeron de muestras cerebrales poniendo tejido pesado en 2 veces p/v de acetonitrilo (DF = 3), se trituró, se centrifugó a 10.000 rpm durante 10 minutos, y el sobrenadante resultante se usó como solución de muestra. En resumen, los estándares, QC, y muestras (25 |jl) se mezclaron con 100 j l de acetonitrilo que contenía losartán 0,5 jM (estándar interno; IS) en tubos de microcentrífuga de baja retención. La mezcla se agitó vorticialmente durante 1 min y se centrifugó a 10.000 rpm durante 10 min a 5 °C. Se transfirieron 50 j l de sobrenadante a viales de automuestrador de polipropileno de 250 j l y se mezclaron con 50 j l de agua, y se sellaron con un tapón de teflón. Se inyectó un volumen de 3 j l en el instrumento de cromatografía líquida de ultraalto rendimiento (UPLC) para análisis cuantitativo usando un automuestrador controlado por temperatura que operaba a 10 °C.
Condiciones cromatográficas y de espectrometría de masas:
Condiciones de LC
Sistema UHPLC: bomba Accela 1250 y automuestrador de brazo abierto Accela AS
Columna: Eclipse Plus C18 RRHD 1,8 um, 2,1 x 100 mm
Caudal: 0,4 ml/min
Fase móvil A: FA al 0,1 % en ACN, Fase B: FA al 0,1 % en agua.
Condiciones de gradiente de LC
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Condiciones de MS
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(continuación)
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El espectrómetro de masas se operó con una interfase ESI en modo de ionización positiva para todos los compuestos sometidos a ensayo y se controló mediante el software Xcalibur 2.3 (Thermo Scientific). Las muestras se introdujeron en la interfase a través de Turbo Ion Spray con la temperatura de capilar ajustada a 350 °C. Se usó nitrógeno como cubierta y gas auxiliar, y argón como gas de colisión con los ajustes a 40, 5 y 1,4, respectivamente. La cuantificación se realizó en modo de monitorización de reacción múltiple (m Rm ).
En análisis cromatográfico se realizó usando un sistema de ultraalto rendimiento Accela™ que consistió en una bomba analítica, y un automuestrador acoplado a un espectrómetro de masas TSQ Vantage (Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham Ma ). La separación del analito del material potencialmente interferente se consiguió a temperatura ambiente usando una columna Agilent Eclipse Plus (100 x 2,1 mm d.i.) empaquetada con una fase estacionaria C18 de 1,8 |jm. La fase móvil usada estaba compuesta por ácido fórmico (FA) al 0,1 % en acetonitrilo (ACN) y ácido fórmico a 0,1 % en H2O con elución en gradiente, comenzando con un 10 % orgánico aumentando linealmente hasta un 99 % en 2 min, manteniendo a un 99 % (2-2,5 min), reequilibrando a un 10 % en 2,7 min y manteniendo un 10 % orgánico hasta el final del proceso. El tiempo total de proceso para cada analito fue 5,00 min.
Las curvas de calibración para todos los compuestos de ensayo se calcularon usando la proporción del área de pico del analito con respecto al estándar interno usando regresión cuadrática con ponderación 1/x. Los parámetros de cada curva de calibración se usaron para calcular las concentraciones y para obtener los valores para las muestras de QC y las muestras desconocidas por interpolación.
La Figura 12A desvela los resultados de farmacocinética en rata para cada enantiómero del compuesto 29 administrado por vía oral a 10 mg/kg. Ambos enantiómeros son disponibles por vía oral y penetran en el cerebro. Para la misma dosis, R-29 mostró exposiciones dos veces mayores tanto en cerebro como en plasma, pero la proporción en cerebro frente a plasma fue similar para ambos enantiómeros.
La Figura 12B muestra que cada enantiómero del compuesto 19 administrado por vía oral a 10 mg/kg es disponible por vía oral y penetra altamente en el cerebro, mostrando R-19 mejor proporción cerebro/plasma (11 frente a 6) en comparación con el enantiómero S.
Ejemplo 9. Estudio del efecto del Compuesto (±)-29 en la respuesta térmica en ratas
Métodos: el compuesto (±)-29 se administró 15 minutos antes de la estimulación con solución salina u oxicodona. Se realizaron ensayos después de que la rata se situara en una jaula circular transparente sobre una placa caliente (52 ± 0,2 °C). Lamer la pata trasera o saltar se consideró como señal de nocicepción térmica. Continuación, la rata se retiró inmediatamente de la placa caliente y se registró la latencia temporal. La Figura 13 ilustra que el pretratamiento con compuesto (±)-29 no mostró efectos significativos en la respuesta térmica del animal sometida a ensayo 30 minutos después de estimulación con solución salina (1 ml/kg, i.p.) u oxicodona (2 mg/kg, i.p.). De ese modo, se descubrió que el compuesto bloquea los efectos de refuerzo de la oxicodona que pueden conducir a adicción, y no previene la analgesia producida por la droga.
Los términos "un", "una" y "uno" no indican una limitación de cantidad, sino que en su lugar indican la presencia de al menos uno del artículo referenciado. El término "o" significa "y/o". La referencia en la memoria descriptiva a "una realización", "otra realización", etc., significa que un elemento particular (por ejemplo, rasgo, estructura y/o característica) descrito junto con la realización está incluido en al menos una realización descrita en el presente documento, y puede estar o no estar presente en otras realizaciones. Además, se ha de entender que los elementos descritos pueden combinarse de cualquier modo adecuado en las diversas realizaciones. El modificador "aproximadamente" usado junto con una cantidad incluye el valor indicado y tiene el significado dictado por el contexto (por ejemplo, incluye el grado de error asociado a la medición de la cantidad particular).
Los puntos extremos de todos los intervalos referidos al mismo componente o propiedad incluyen los puntos extremos, son combinables independientemente, e incluyen todos los puntos e intervalos intermedios (por ejemplo, los intervalos "hasta aproximadamente un 25 % en peso o, más específicamente, de aproximadamente un 5 % en peso a aproximadamente un 20 % en peso" incluye los puntos extremos y todos los valores intermedios de los intervalos "de aproximadamente un 5 % a aproximadamente un 25 %", tal como de aproximadamente un 10 % a aproximadamente un 23 %, etc.).
Todos los métodos descritos en el presente documento pueden realizarse en un orden adecuado a menos que se indique de otro modo en el presente documento o que quede claramente contradicho de otro modo por el contexto. El uso de todos y cada uno de los ejemplos, o lenguaje a modo de ejemplo (por ejemplo, "tal como") simplemente pretende ilustrar mejor la invención y no representa una limitación del alcance de la invención a menos que se reivindique de otro modo. Ningún lenguaje de la memoria descriptiva deberían interpretarse como indicativo de que cualquier elemento no reivindicado es esencial para la práctica de la invención como se usa en el presente documento. A menos que se definan de otro modo, todos los términos técnicos y científicos usados en el presente documento tienen el mismo significado que entiende habitualmente el experto en la materia a la que pertenece la presente invención.
Aunque la invención se ha descrito por referencia a una realización a modo de ejemplo, los expertos en la materia han de entender que pueden realizarse diversos cambios y pueden sustituirse equivalentes por elementos de los mismos sin apartarse del alcance de la invención. Además, pueden realizarse numerosas modificaciones para adaptar una situación o material particular a las enseñanzas de la invención sin apartarse del alcance de la misma. Por tanto, se pretende que la invención no quede limitada a la realización particular desvelada como el mejor modo contemplado de llevar a cabo la presente invención, sino que la invención incluirá todas las realizaciones que estén dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas.

Claims (15)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto de Fórmula (I), un estereoisómero del mismo, un radioisótopo del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo
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en donde
Ar es un heteroarilo que puede estar opcionalmente sustituido con 1, 2, o 3 sustituyentes donde cada sustituyente es independientemente alquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, haloalcoxi C1-C6, -OH, -COOH, amino, nitro, grupo alcanoílo C2-C3, mono o dialquilamino C1-C3, o halógeno;
n es 1 o 2;
m es 1 o 2;
R1 es H o halógeno;
R2 es H, alcoxi C1-C3, o halógeno;
R3 es H, halógeno o alcoxi C1-C3;
R4 es H, -OH, o halógeno;
R5 es H, -OH, o halógeno; y
— es un enlace sencillo o un enlace doble,
con las condiciones a) y b)
a) cuando R1 es H entonces al menos uno de R2 y R3 no es H; y
b) cuando uno o ambos de R2 y R3 es H entonces R1 no es H.
2. El compuesto de la reivindicación 1, en donde: (a) R1 es H; R2 es -OMe; y R3 es Cl o (b) R1 es Cl; R2 es H; y R3 es H.
3. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R1 es H; R2 es -OMe; R3 es Cl; y Ar es benzofuranilo, benzotienilo, imidazolilo, imidazo[1,2-a]piridinilo, imidazo[2,1-b]tiazolilo, o indolilo, donde Ar está además opcionalmente sustituido con 1, 2, o 3 sustituyentes donde cada sustituyente es independientemente alquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, haloalcoxi C1-C6, -OH, -COOH, amino, nitro, grupo alcanoílo C2-C3, o halógeno.
4. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R1 es Cl; R2 es H; R3 es H; y Ar es benzofuranilo, benzotienilo, imidazolilo, imidazo[1,2-a]piridinilo, imidazo[2,1-b]tiazolilo, o indolilo, donde Ar está además opcionalmente sustituido con 1, 2, o 3 sustituyentes donde cada sustituyente es independientemente alquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, haloalcoxi C1-C6, -OH, -COOH, amino, nitro, grupo alcanoílo C2-C3, o halógeno.
5. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R1 es H; R2 es -OMe; R3 es Cl; Ar es benzofuranilo, 4-etil-1H-imidazolilo, 4-metil-1H-imidazolilo, imidazo[1,2-a]piridinilo, 6-metilimidazo[2,1-b]tiazolilo, o indolilo; m es 1; y n es 1.
6. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R1 es Cl; R2 es H; R3 es H; Ar es benzofuranilo, 4-etil-1 H-imidazolilo, 4-metil-1 H-imidazolilo, imidazo[1,2-a]piridinilo, 6-metilimidazo[2,1-b]tiazolilo, o indolilo; m es 1; y n es 1.
7. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R1 es H; R2 es -OMe; R3 es Cl; Ar es benzofuranilo, 4-etil-1 H-imidazolilo, 4-metil-1 H-imidazolilo, imidazo[1,2-a]piridinilo, 6-metilimidazo[2,1-b]tiazolilo, o indolilo; y uno de R4 y R5 es H y el otro es -OH o -F.
8. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R1 es Cl; R2 es H; R3 es H; Ar es benzofuranilo, 4-etil-1 H-imidazolilo, 4-metil-1 H-imidazolilo, imidazo[1,2-a]piridinilo, 6-metilimidazo[2,1-b]tiazolilo, o indolilo; y uno de R4 y R5 es H y el otro es -OH o -F.
9. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R1 es H; R2 es -OMe; R3 es Cl; Ar es benzofuranilo o indolilo; n es 1 o 2; m es 1 o 2; R4 es H, -OH, o halógeno; R5 es H, -OH, o halógeno; y ~ es un enlace sencillo o un enlace doble.
10. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R1 es Cl; R2 es H; R3 es H; Ar es benzofuranilo o indolilo; n es 1 o 2; m es 1 o 2; R4 es H, -OH, o halógeno; R5 es H, -OH, o halógeno; y ~ es un enlace sencillo o un enlace doble.
11. Un compuesto de la reivindicación 1, en donde el compuesto es
W-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butil)-1H-indol-2-carboxamida (18);
W-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)-1H-indol-2-carboxamida (19);
W-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butil)benzofuran-2-carboxamida (20);
W-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)benzofuran-2-carboxamida (21);
W-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butil)imidazo[1,2-a]piridin-2-carboxamida (22);
W-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)imidazo[1,2-a]piridin-2-carboxamida (23);
W-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butil)-6-metilimidazo[2,1-ó]tiazol-5-carboxamida (24);
W-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butil)-4-etil-1H-imidazol-2-carboxamida (25);
W-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butil)-4-metil-1H-imidazol-2-carboxamida (26);
W-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)-4-metil-1H-imidazol-2-carboxamida (27);
W-(4-(4-(3-Cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)butil)-1H-indol-2-carboxamida (28);
W-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)-1H-indol-2-carboxamida (29);
W-(4-(4-(3-Cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)butil)benzofuran-2-carboxamida (30);
W-(4-(4-(3-Cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)benzofuran-2-carboxamida (31);
(E)-W-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)but-2-en-1-il)-4-metil-1H-imidazol-2-carboxamida (35);
W-(4-(4-(2-Cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-2-hidroxibutil)-1H-indol-2-carboxamida (40);
W-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-carboxamida (C4a);
W-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)benzofuran-2-carboxamida (C4b);
W-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-carboxamida (C5a);
W-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)benzofuran-2-carboxamida (C5b);
un estereoisómero del mismo;
un radioisótopo del mismo; o
una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
12. Un compuesto de la reivindicación 1, en donde el compuesto es
W-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)-1H-indol-2-carboxamida;
(R) -A/-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)-1H-indol-2-carboxamida;
(S) -W-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)-1H-indol-2-carboxamida;
W-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)-1H-indol-2-carboxamida;
(R)-A/-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)-1H-indol-2-carboxamida;
(s)-W-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-hidroxibutil)-1H-indol-2-carboxamida;
W-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-carboxamida;
(R)-A/-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-carboxamida;
(s)-W-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-carboxamida;
W-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)benzofuran-2-carboxamida;
(R) -A/-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)benzofuran-2-carboxamida;
(S) -W-(4-(4-(3-cloro-5-etil-2-metoxifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)benzofuran-2-carboxamida;
W-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-carboxamida;
(R)-A/-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-carboxamida;
(s)-W-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-carboxamida;
W-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)benzofuran-2-carboxamida;
(R) -A/-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)benzofuran-2-carboxamida;
(S) -W-(4-(4-(2-cloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)benzofuran-2-carboxamida;
un radioisótopo del mismo; o
una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
13. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende tritio, deuterio, 11C, 13C, 14C, 18F, o una combinación de los mismos.
14. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende además al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable.
15. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-13, o una composición farmacéutica de la reivindicación 14, para uso en un método para tratar un trastorno de consumo de sustancias, esquizofrenia y trastorno mental relacionado, un trastorno cognitivo, impulsividad, obesidad, depresión, un trastorno bipolar, o una discinesia asociada a enfermedad de Parkinson (PD) o tratamiento de PD con L-DOPA.
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