ES2872389T3 - Sistemas y dispositivos para la manipulación de muestras - Google Patents

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Nicholas Gale
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Abstract

Una cesta (800, 900) para su uso con un sistema para procesar muestras, incluyendo el sistema una bandeja (100) que define un pocillo (102), comprendiendo la cesta (800, 900): una parte de recipiente que define una pared inferior (812, 912) y una pared lateral (810, 910), en donde tanto la pared inferior (812, 912) como la pared lateral (810, 910) definen una pluralidad de aberturas, de tal manera que el interior de la cesta (800, 900) está configurado para estar en comunicación de fluidos con el pocillo (102) de la bandeja (100), estando un labio (804) configurado para retener la cesta (800, 900) dentro del pocillo (102) de la bandeja (100); caracterizado por que al menos algunas de las aberturas tienen esquinas puntiagudas para romper la tensión superficial de un fluido introducido en la cesta (800, 900).

Description

DESCRIPCIÓN
Sistemas y dispositivos para la manipulación de muestras
Introducción
Los procesos robóticos automatizados se utilizan ampliamente en entornos de laboratorio para mejorar la precisión y confianza, así como para mejorar los tiempos de procesamiento y liberar recursos de operario para otras tareas. Los robots de laboratorio se usan a menudo para dispensar múltiples líquidos con pipetas u otros equipos configurados para dispensar y recoger líquidos de prácticamente cualquier volumen. Estos líquidos pueden depositarse y extraerse de una serie de pocillos de muestras que pueden contener células, tejidos, productos químicos, agentes biológicos, portaobjetos que contienen células o tejidos, u otro material que se esté sometiendo a ensayo. Los líquidos pueden ser, o pueden incluir, un medio de cultivo de tejidos, reactivos, fluido de lavado, tintes u otros productos químicos, pudiendo alguno de los mismos o todos reaccionar de una forma u otra con la muestra contenida dentro del pocillo. Las muestras individuales pueden estar contenidas dentro de los pocillos de una placa de microtitulación, que puede transportarse según sea necesario por el equipo robótico. Las placas de microtitulación incluyen habitualmente 6, 12, 24, 96, 384 o más pocillos.
El documento US 5.837.198 A desvela una disposición en la que las muestras se mantienen en recipientes de muestras separados. La base de este recipiente de muestras comprende una malla. En consecuencia, cuando el recipiente de muestras se inserta en un baño de reactivo en el que se ha recogido reactivo, el reactivo fluye desde esta malla al recipiente. El reactivo también puede fluir desde un agujero de flujo. El reactivo que ha desembocado en el recipiente actúa sobre la muestra y tiene lugar el tratamiento del reactivo. El reactivo en una pluralidad de recipientes de muestras colocados en un portarecipientes, se aspira a continuación por una bomba, o por una boquilla insertada junto con el recipiente en el baño de reactivo, a través de la malla del recipiente. Los baños de reactivo adyacentes son independientes entre sí y el reactivo se inyecta solo en el baño de reactivo que va a usarse para la reacción.
El documento US 2004/043398 A1 desvela un dispositivo para realizar ensayos diagnósticos y analíticos que incluye una plataforma y una pluralidad de clavijas que se extienden desde la misma, estando las clavijas adaptadas para insertarse en un depósito de reactivos y teniendo un ligando unido a las mismas, reaccionando el ligando con un reactivo diana para formar un complejo cuando se pone en contacto con el mismo, permaneciendo la parte de ligando del complejo sustancialmente unida a las clavijas durante una medición analítica. Las clavijas pueden incluir además sensores y/o transmisores para la monitorización y control en tiempo real de una reacción.
Sumario
De acuerdo con la presente invención se proporciona una cesta, un sistema para procesar muestras y un método para utilizar un sistema de bandejas y cestas como se especifica en las reivindicaciones.
Breve descripción de los dibujos
En los dibujos se muestran las realizaciones que se prefieren actualmente, entendiéndose, sin embargo, que la tecnología no se limita a las disposiciones e instrumentos precisos mostrados.
Las figuras 1A-3A son vistas en perspectiva desde arriba de las bandejas.
La figura 3B es una vista en sección lateral parcial de un pocillo en la bandeja de la figura 3B.
La figura 4 es una vista en sección en perspectiva de una bandeja.
La figura 5 es una vista en perspectiva desde arriba de otra bandeja.
La figura 6 es una vista en sección en perspectiva de otra bandeja.
La figura 7 es una vista en sección en perspectiva de otra bandeja.
Las figuras 8A y 8B son una vista en perspectiva y una vista en sección en perspectiva, respectivamente, de una cesta de muestras.
Las figuras 9A y 9B son vistas en perspectiva de cestas de muestras.
La figura 10 representa un método para usar un sistema de bandejas y cestas para el procesamiento robótico de muestras.
La figura 11 representa una vista en perspectiva desde arriba de una bandeja para su uso en el procesamiento de portaobjetos.
Descripción detallada
Las figuras 1A y 1B representan, cada una de las mismas, bandejas de seis pocillos para su uso en el procesamiento de muestras biológicas. En la figura 1A, la bandeja 100 define seis pocillos 102, teniendo cada uno de los mismos una pared exterior 104 y una superficie inferior 106. La pared exterior 104 también puede definir un reborde 108 en un borde superior del pocillo 102. El reborde 108 puede ser liso, cónico o roscado según se requiera o se desee para adaptarse a una cesta de acoplamiento específica (a continuación, se describen diversos tipos de la misma). La superficie inferior 106 define un drenaje 110, localizado en el centro y definido por la superficie inferior 106. Un canal 112 conecta el drenaje 110 a un puerto de acceso 114. El puerto de acceso 114 está dimensionado y configurado con el fin de recibir una pipeta. En general, una superficie inferior del puerto de acceso 114 se localiza debajo de una superficie inferior del drenaje 110, permitiendo de este modo que cualquier fluido en el canal 112 se drene pasivamente hacia el puerto de acceso 114. La superficie inferior 106 se interseca con la pared exterior 104 en una esquina 116. La superficie inferior 106 se inclina hacia abajo desde la esquina 116 hasta el drenaje 110. En consecuencia, el fluido localizado en el pocillo 102 se drena desde el punto alto de la superficie inferior 106 (en este caso, la esquina 116) hasta el punto bajo de la superficie inferior 106 (en este caso, el drenaje 110), bajando a continuación la pendiente del canal 112 hasta el puerto de acceso 114. En esta bandeja 100, el pocillo 102 y el puerto de acceso 114 están conectados a través de una ranura 118 que penetra en la pared exterior 104 del pocillo 102. Las ventajas de esta ranura 118 incluyen un aumento del caudal entre el pocillo 102 y el puerto de acceso 114 (por ejemplo; cuando la pipeta se inserta en el puerto de acceso 14 para suministrar fluido a o extraer fluido del pocillo 102).
La figura 1B representa otra realización de una bandeja 100. En esta figura, los elementos que tienen números de referencia similares a los elementos identificados en la figura 1A son, en general, los mismos que los elementos previamente identificados, a menos que se indique lo contrario. 25 En particular, en la realización de la figura 1B, el canal 112 se encamina a lo largo de una orientación inicial sustancialmente ortogonal a la pared exterior 104. Una vez cerca de la pared exterior 104, el canal 112 gira aproximadamente 90 grados, continuando a continuación hasta el puerto de acceso 114. Como con la realización anterior, la superficie inferior 106 es convexa, mientras que el canal 112 se inclina hacia abajo desde el drenaje 110 hasta el puerto de acceso 114. Como puede verse comparando las realizaciones de las figuras 1A y 1B, el encaminamiento del canal 112 puede ser en cualquier orientación desde el drenaje 110 hasta el puerto de acceso 114.
Las figuras 2A y 2B representan dos realizaciones de bandejas de doce pocillos 200 para su uso en el procesamiento de líquidos biológicos. Los elementos identificados con números de referencia similares a los de las realizaciones de la figura 1A son, en general, los mismos que los elementos previamente identificados. La alineación de los puertos de acceso 214 es apreciable en esta realización. Los puertos de acceso 114 están alineados en dos columnas C1 y C2, así como a lo largo de seis filas R1-R6. La configuración de la bandeja 200, de tal manera que los puertos de acceso 214 están así alineados, permite que un instrumento multipipeta se use de manera eficiente para introducir fluido y extraer fluido de los pocillos 202. Además, la bandeja 200 de la figura 2A incluye unas marcas 220, que pueden usarse para identificar un pocillo específico identificando su fila y su columna asociadas.
La figura 2B representa una bandeja 200 que tiene un pocillo 202 con un drenaje 210 y un canal 212. Las realizaciones anteriores de las figuras 1A-2A representaban los drenajes 110 que tenían un diámetro más pequeño que los puertos de acceso 114. En la realización de la figura 2B, sin embargo, el drenaje 210 tiene un diámetro de drenaje Dd que es más grande que el diámetro de puerto de acceso Da . Este diámetro de drenaje más grande Dd permite mayores flujos de fluido a través del drenaje 214. Este drenaje más grande ayuda a reducir la turbulencia de fluido durante los procedimientos, así como el tiempo de llenado y el tiempo de drenaje. También reduce la flotación de la cesta a medida que se introduce fluido.
Las figuras 3A y 3B representan una bandeja 300 para su uso en el procesamiento de líquidos biológicos. Los elementos identificados con números de referencia similares a los de las realizaciones de la figura 1A son, en general, los mismos que los elementos previamente identificados. Una diferencia notable entre la bandeja 300 y las bandejas descritas anteriormente es que el puerto de acceso 314 está separado del pocillo 302. En este caso, la pared exterior 304 del pocillo 302 no está rota. Por lo tanto, independientemente de la velocidad de introducción o extracción del fluido del puerto de acceso 314, todo el fluido entrará en el pocillo 302 a través del canal 312 (en las realizaciones representadas anteriormente, los caudales muy altos pueden hacer que el fluido fluya a través de las ranuras representadas anteriormente). Como se ha representado en la figura 3B, el canal 312 está inclinado hacia abajo desde el drenaje 310 hasta el puerto de acceso 314. En determinadas realizaciones, la inclinación puede estar entre aproximadamente 2 grados y aproximadamente 5 grados. Esto ayuda a facilitar el drenaje del pocillo 302, al igual que lo hace la superficie inferior convexa 306 del pocillo 302. Además, una parte inferior 322 del puerto de acceso 314 es más baja que el canal 312, lo que ayuda a garantizar que todo el fluido pueda extraerse del pocillo (sin que queden cantidades significativas en, por ejemplo, el canal 312). Uno o más de los pocillos 302 pueden estar asociados con una o más abrazaderas, enganches u otros elementos de bloqueo 324 que pueden usarse para sujetar una cesta dentro del pocillo 302.
La figura 4 representa una vista en sección en perspectiva de otra realización de una bandeja 400. En esta realización, la superficie inferior 406 de cada pocillo 402 es una configuración convexa, que ayuda a reducir la flotación de la cesta y mejora el drenaje del pocillo 402. En consecuencia, el fluido dentro del pocillo 402 se drena desde el centro del pocillo 402 hacia la pared exterior 404. La esquina 416 puede inclinarse desde un punto alto a un punto bajo en el perímetro exterior de la superficie inferior 406. Un drenaje (no mostrado) está localizado en el punto bajo. En determinadas realizaciones, el drenaje no necesita ser un elemento separado, sino que puede ser la ranura 418 que conecta el puerto de acceso 414 al pocillo 402.
La figura 5 representa otra realización de una bandeja 500. En esta realización, un puerto de acceso 514 está localizado muy cerca de, y completamente en comunicación de fluidos con, un pocillo 502, a través de una ranura 518. Un drenaje 510 en este caso es un punto bajo del puerto de acceso 514, y la superficie inferior 506 está inclinada hacia el puerto de acceso 514 y el drenaje 510. En consecuencia, en esta realización, se inserta una pipeta en el puerto de acceso 514 y extrae fluido del drenaje 510, que recibe el contenido de fluido del pocillo 502 debido a la pendiente de la superficie inferior 506. La ranura 518 puede definir además uno o más canales o receptores 524 para recibir una compuerta 526. La compuerta 526 puede recibirse completa o parcialmente dentro de los receptores 524 con el fin de aislar parcial o completamente el pocillo 502 del puerto de acceso 514, según se requiera o se desee para una aplicación específica. Pueden utilizarse juntas u otros dispositivos de prevención de fugas en la interfaz de la compuerta 526 y uno o ambos receptores 524 y la superficie inferior 506 para evitar fugas no deseadas entre el puerto de acceso 514 y el pocillo 502. En consecuencia, un borde inferior de la compuerta 526 puede colocarse por encima de la superficie inferior 506 con el fin de que actúe como un elemento de control de flujo entre el puerto de acceso 514 y el pocillo 502.
La figura 6 representa una vista en sección en perspectiva de otra realización de una bandeja 600. En esta realización, la superficie inferior 606 de cada pocillo 602 es una configuración convexa, que ayuda a reducir la flotación de la cesta y mejora el drenaje del pocillo 602. En consecuencia, el fluido dentro del pocillo 602 se drena desde el centro del pocillo 602 hacia la pared exterior 604. La esquina 616 puede inclinarse desde un punto alto a un punto bajo en el perímetro exterior de la superficie inferior 606. Un drenaje, en este caso, una ranura 618, conecta el puerto de acceso 614 al pocillo 602. La parte inferior del puerto de acceso 614 es cóncava y, por lo tanto, más baja que la superficie inferior 606 de su pocillo asociado 602, lo que ayuda a mejorar el drenaje.
La figura 7 representa una vista en sección en perspectiva de otra realización de una bandeja 700. En esta realización, un solo puerto de acceso 714 atiende a múltiples pocillos 702. Al igual que con la realización de la figura 6, la superficie inferior 706 de cada pocillo 702 es una configuración convexa, que ayuda a reducir la flotación de la cesta y mejora el drenaje del pocillo 702. En consecuencia, el fluido dentro del pocillo 702 se drena desde el centro del pocillo 702 hacia la pared exterior 704. La esquina 716 puede inclinarse desde un punto alto a un punto bajo en el perímetro exterior de la superficie inferior 706. Los drenajes, en este caso, las ranuras 718, conectan el puerto de acceso 714 a cada uno de los pocillos 702. La parte inferior del puerto de acceso 714 es cóncava y, por lo tanto, más baja que la superficie inferior 706 de sus pocillos asociados 702, lo que ayuda a mejorar el drenaje. Aunque se representan cuatro pocillos 702 en comunicación con un solo puerto de acceso 714, más o menos de cuatro pocillos pueden estar en comunicación de fluidos con un solo puerto de acceso, según se requiera o se desee para una aplicación específica. En general, pueden drenarse y llenarse múltiples pocillos a través de un solo puerto de acceso cuando la contaminación cruzada del contenido de los múltiples pocillos no es una preocupación.
Las figuras 8A y 8B representan una realización de una pieza insertada o cesta de muestras 800 que incluye una parte de recipiente 802 y un labio 804. El labio 804 puede incluir una ranura 806 para recibir una junta que puede usarse para sujetar la cesta 800 cuando se inserta en un pocillo de una bandeja (tal como los pocillos y bandejas descritos anteriormente). La interferencia entre el reborde del pocillo y la junta forma un ajuste de interferencia que evita que la cesta 800 se desprenda del pocillo durante el procesamiento. Como alternativa, el labio 804 en sí mismo puede fabricarse de un material elástico para formar un ajuste de interferencia con el reborde del pocillo, en lugar de una junta o junta tórica específica. Como alternativa, elementos de sujeción mecánicos, tales como abrazaderas, palancas, cerrojos, etc., pueden utilizarse para retener la cesta 800 en el pocillo. En determinadas realizaciones, el labio puede enroscarse para que coincida con una rosca correspondiente en el reborde del pocillo. Además, una máscara o sello puede sujetarse a la superficie superior de la bandeja para sujetar la cesta, así como evitar que los líquidos se derramen involuntariamente fuera del pocillo durante el transporte. En la superficie interior 804a del labio 804 ayuda a evitar salpicaduras y ayuda a retirar la cesta 800 de su pocillo asociado.
La parte de recipiente 802 de la cesta 800 define una serie de agujeros, aberturas o penetraciones 808 tanto en una pared lateral 810 como en la pared inferior 812 de la misma. Las penetraciones 808 pueden definir cualquier forma o tamaño, según se requiera o se desee para una aplicación específica. Las penetraciones 808 deben ser lo suficientemente grandes para permitir un alto caudal a través de las mismas, pero lo suficientemente pequeñas para evitar que se escape la muestra localizada dentro de la cesta 800. Se ha determinado que las cestas que incluyen aberturas sobre una parte significativa de la pared lateral y la pared inferior permiten caudales mejorados sobre los sistemas que utilizan otras estructuras para permitir la introducción de fluido en un pocillo (por ejemplo, sistemas que tienen pocillos que utilizan una superficie inferior de malla). Las cestas que tienen caudales altos permiten que el pocillo se llene rápidamente sin que se desprenda la cesta, ya que las cestas que no permiten un flujo adecuado a través de las mismas pueden desprenderse del pocillo asociado. De acuerdo con la invención, las cestas definen unos agujeros que tienen esquinas puntiagudas (por ejemplo, tales como los agujeros rectangulares de las figuras 8A y 8B) que ayudan a romper la tensión superficial de líquidos de mayor viscosidad. Esto permite un mayor flujo de fluido y ayuda a reducir o eliminar la flotación de la cesta. Algunos o todos los agujeros también pueden definir un ángulo con respecto a la pared lateral o la pared inferior de la cesta con el fin de provocar una corriente o un remolino en el fluido para evitar que las muestras se peguen en el mismo.
Las figuras 9A (no de acuerdo con la invención) y 9B (de acuerdo con la invención) representan otras configuraciones de cestas 900. Al igual que con la realización representada en las figuras 8A y 8B, las aberturas 908 penetran en la pared lateral 910 y la pared inferior 912 de la parte de recipiente 902. Como se desprende de las figuras, las aberturas 908 pueden ser de cualquier tamaño o forma. Se contemplan otras formas de cesta. Por ejemplo, las cestas pueden tener una forma complementaria a la forma del pocillo (es decir, cestas y pocillos redondos, cestas y pocillos cuadrados, etc.). De hecho, la forma tanto de la cesta como del pocilio puede configurarse según se requiera o se desee para una aplicación específica.
La figura 10 representa un método 1000 para utilizar un sistema de bandejas y cestas para el procesamiento de muestras biológicas, específicamente, el procesamiento robótico automático de embriones, incluida la tinción de los embriones. En la operación 1002, la bandeja se carga con una o más cestas insertando, en primer lugar, una cesta en cada pocillo de la bandeja. Esto puede hacerse manualmente por un técnico, o puede realizarse por una pieza de equipo robótico configurada adecuadamente. También puede ser ventajoso insertar las cestas en los pocillos durante la fabricación y el montaje. A continuación, el sistema de bandejas y cestas puede sellarse adecuadamente con el fin de evitar la contaminación y enviarse a un usuario final. Después de cargar las cestas, o después de que se haya retirado el sello de contaminantes, puede cargarse, a continuación, un embrión en una o más cestas, como en la operación 1004. Debido a la delicada naturaleza de los embriones, esto a menudo lo realiza un operario humano, aunque puede usarse un equipo robótico. Una vez que los embriones se han insertado en las cestas adecuadas, cada bandeja cargada se inserta, a continuación, en el equipo de procesamiento robótico, en la operación 1006. Las operaciones específicas se programan en el equipo de procesamiento o el software de gestión de laboratorio y se realizan según se requiera o se desee para una aplicación específica. Durante el procesamiento, independientemente del tipo de líquido introducido, la construcción del sistema de bandejas y cestas descrito en el presente documento permite que la pipeta introduzca o extraiga líquido sin dañar ni retirar el embrión, o sin que la cesta llegue a desprenderse de la bandeja. Al insertar la pipeta en el puerto de acceso, como en la operación 1008, se elimina el daño al embrión o la retirada del embrión de la cesta. En la operación 1010, el fluido se introduce y se extrae del pocillo a través del puerto de acceso. Este procedimiento puede repetirse según se requiera para un proceso específico. El programa usado para controlar el equipo robótico continuará realizando el procedimiento adecuado, operación 1012, hasta que concluya. Después, como se indica en la operación 1014, la bandeja se retira del equipo de procesamiento robótico. A continuación, un operario humano o un equipo robótico especializado puede retirar el embrión como se indica en la operación 1016.
Volviendo a la operación 1010, se proporciona, a continuación, un protocolo de procesamiento de embriones completo a modo de ejemplo. Como se ha indicado anteriormente, los fluidos se introducen y se extraen a través del puerto de acceso para reducir la probabilidad de daño o retirada del embrión. Los procesos pueden adaptarse para cualquier muestra de ensayo que pueda retenerse en pocillos, tal como portaobjetos de tejido obtenido por vibrátomos o micrótomos deslizantes, preparaciones totales o parciales de órganos o tejidos embrionarios o adultos, etc.
Protocolo de procesamiento de embriones de ratón completo
A. Módulo W1, día 1
i. Montar los embriones de ratón en el robot, comenzar a ejecutar
ii. Sumergir los embriones en glutaraldehído/paraformaldehído al 2 % (60 minutos).
iii. Sumergir los embriones en PBS (5 minutos).
iv. Sumergir los embriones 4 veces en PBS, (15 minutos). Por ejemplo, 3 x 10 minutos con agitación v. Sumergir los embriones en una solución de tinción LacZ
vi. Retirar los embriones del robot
(1) Incubar los portaobjetos a 4 °C 12-48 horas
(2) El tiempo y la temperatura de incubación varían
B. Módulo W2, día 3
i. Devolver los embriones al robot
ii. Sumergir los embriones 3 veces en PBS (5 minutos cada vez).
iii. Sumergir los embriones en paraformaldehído al 2 %
iv. Retirar los embriones del robot
(1) Incubar 12 horas
C. Módulo W3, día 4
i. Devolver los embriones al robot
ii. Sumergir los embriones 3 veces en PBS (15 minutos).
iii. Sumergir los embriones en glicerol al 50 %
iv. Retirar los embriones del robot
(1) Incubar 12 horas
D. Módulo W4, día 5
i. Devolver los embriones al robot
ii. Sumergir los embriones en glicerol al 70 % (12 horas)
iii. Retirar los embriones del robot
iv. Transferir los embriones al almacenamiento
El sistema de bandejas representado en el presente documento es útil en muchos otros procesos biológicos donde deben añadirse o extraerse fluidos de un pocillo, sin dañar ni retirar involuntariamente la muestra con la aspiración creada por la pipeta. Esto puede incluir otros tipos de histoquímica, hibridación in situ o inmunohistoquímica. Por ejemplo, las muestras dentro del pocillo pueden incluir cualquier colonia de cultivo de tejidos o células en suspensión, incluyendo células o tejidos vegetales o animales. En algunas realizaciones, las muestras se cultivan sobre portaobjetos y el sistema de bandejas está configurado para sujetar el portaobjetos. En algunas realizaciones, las muestras se colocan en el portaobjetos usando una técnica centrífuga u otra técnica conocida, y el sistema de bandejas configurado para sujetar el portaobjetos se usa en un proceso de tinción. Independientemente del proceso biológico en el que se usen los sistemas de bandejas y cestas, las bandejas se configuran habitualmente para ser similares o idénticas en el tamaño dimensional exterior (longitud, anchura, espesor) a una placa de microtitulación convencional. Esto permite que el sistema de cestas y bandejas se use fácilmente con los sistemas de procesamiento robótico de laboratorio existentes.
La figura 11 representa una bandeja 1100 para procesar una pluralidad de portaobjetos. La bandeja incluye una serie de pocillos 1102, teniendo, cada uno de los mismos, una pluralidad de paredes laterales 1104 y una superficie inferior (no mostrada). Los puertos de acceso 1114 (en este caso, dos asociados con cada pocillo 1102) penetran en una superficie superior de la bandeja 1100. Los puertos de acceso 1114 pueden estar en comunicación fluídica con los pocillos 1102 de la misma manera que se ha representado en las figuras anteriores. Es decir, los puertos de acceso 1114 pueden estar completamente separados de los pocillos, como se muestra en este caso y como se representa en la figura 3A. En otras realizaciones, los puertos de acceso pueden estar en comunicación fluídica con los pocillos a través de un drenaje y/o canal en la superficie inferior, y/o una ranura en la pared lateral 1104. Una o más paredes 1104 (habitualmente paredes enfrentadas opuestas) de cada pocillo 1102 definen al menos parcialmente una serie de salientes 1120. Los salientes adyacentes 1120 están espaciados con el fin de recibir un portaobjetos entre los mismos. Se puede contener cualquier número de portaobjetos en un pocillo específico 1102, y los portaobjetos pueden orientarse de tal manera que el eje longitudinal del portaobjetos sea sustancialmente vertical (como se representa) u horizontal. En la realización representada, no es necesario usar cestas, pero en otras realizaciones, los portaobjetos pueden montarse en cestas configuradas adecuadamente, pudiendo las cestas, a continuación, insertarse en los pocillos.
A continuación, se representa un sistema de procesamiento de portaobjetos a modo de ejemplo. Protocolo de procesamiento de portaobjetos
A. Montar los portaobjetos en el robot, comenzar la ejecución (módulo S1 día 1)
B. Sumergir los portaobjetos en paraformaldehído al 2 % (durante 5 minutos)
C. Sumergir los portaobjetos en PBS (5 minutos)
D. Sumergir los portaobjetos 4 veces en PBS, (10 minutos)
E. Sumergir los portaobjetos en la solución de tinción Lac Z.
F. Retirar los portaobjetos del robot
i. Incubar los portaobjetos a 37 °C durante la noche
ii. Permitir que los portaobjetos vuelvan a RT
G. Devolver los portaobjetos al robot (módulo S2 día 2)
H. Sumergir los portaobjetos 3 veces en PBS (5 minutos cada vez)
I. Sumergir en paraformaldehído al 2 % (60 minutos)
J. Sumergir los portaobjetos 3 veces en PBS (10 minutos)
i. Sumergir los portaobjetos en rojo neutro (3 minutos)
K. Sumergir los portaobjetos en D H2O (10 segundos)
L. Sumergir los portaobjetos en etanol al 70 % (5 minutos)
M. Sumergir los portaobjetos en etanol al 85 % (5 minutos)
N. Sumergir los portaobjetos en etanol al 95 % (5 minutos)
O. Sumergir los portaobjetos 2 veces en etanol al 100 % (5 minutos cada vez)
P. Sumergir los portaobjetos en etanol/histoclear (5 minutos)
Q. Sumergir los portaobjetos 2 veces en histoclear (durante 5 minutos cada vez)
R. Finalizar la ejecución del robot, sujetar portaobjetos
En algunos aspectos, la muestra es un embrión de ratón. En otros aspectos, la muestra es un tejido. En otros aspectos más, la muestra es una colonia de cultivo de células en suspensión. Las muestras descritas en este caso son de naturaleza biológica; sin embargo, en el presente documento se contempla cualquier muestra, cuando el tamaño de la muestra es suficiente para evitar el movimiento a través de los agujeros, aberturas o penetraciones en la cesta. Los materiales utilizados en la fabricación de las bandejas y cestas descritas en el presente documento pueden ser similares a los usados en los sistemas de procesamiento biológico robótico existentes. Por ejemplo, pueden usarse materiales plásticos como TEFLON, DELRYN, diversos grados de polipropileno, ABS o PVC. También pueden utilizarse metales como el aluminio, el acero inoxidable y el titanio. Además, la bandeja y las cestas descritas en el presente documento pueden fabricarse a partir de materiales convencionales utilizados para la impresión tridimensional. Posteriormente a la fabricación, la bandeja o cesta puede tratarse con una solución química que derrita la superficie exterior de la bandeja o cesta, haciéndola, de este modo, no porosa. Este proceso puede ser especialmente útil para configuraciones de bandejas o cestas muy complejas.
En el presente documento se contempla que las cestas puedan tratarse o no tratarse. Por ejemplo, una cesta tratada puede ser capaz de liberar factores de crecimiento o citocinas para facilitar el crecimiento de los tejidos o células dentro de la cesta.

Claims (16)

REIVINDICACIONES
1. Una cesta (800, 900) para su uso con un sistema para procesar muestras, incluyendo el sistema una bandeja (100) que define un pocillo (102), comprendiendo la cesta (800, 900):
una parte de recipiente que define una pared inferior (812, 912) y una pared lateral (810, 910), en donde tanto la pared inferior (812, 912) como la pared lateral (810, 910) definen una pluralidad de aberturas, de tal manera que el interior de la cesta (800, 900) está configurado para estar en comunicación de fluidos con el pocillo (102) de la bandeja (100),
estando un labio (804) configurado para retener la cesta (800, 900) dentro del pocillo (102) de la bandeja (100); caracterizado por que al menos algunas de las aberturas tienen esquinas puntiagudas para romper la tensión superficial de un fluido introducido en la cesta (800, 900).
2. La cesta (800, 900) de la reivindicación 1, en donde al menos una de (a) las aberturas en la pared inferior (812, 912) y (b) las aberturas en la pared lateral (810, 910) definen una forma curva, preferentemente
en donde al menos una de (a) las aberturas en la pared inferior (812, 912) y (b) las aberturas en la pared lateral (810, 910) definen una forma circular.
3. La cesta (800, 900) de la reivindicación 1, en donde la cesta (800, 900) se trata con un tratamiento químico que hace que la superficie exterior de la cesta (800, 900) sea no porosa, o
en donde la cesta (800, 900) se trata con el fin de hacer que la cesta (800, 900) sea capaz de liberar factores de crecimiento o citocinas.
4. Un sistema para procesar muestras, comprendiendo el sistema:
una bandeja (100) que define:
un pocillo (102) que define un drenaje (110), en donde el pocillo (102) comprende una superficie inferior (106); y
un puerto de acceso (114) en comunicación de fluidos con el drenaje (110); y
la cesta (800, 900) de cualquier reivindicación anterior adaptada para recibirse en el pocillo (102).
5. El sistema de la reivindicación 4, en donde el puerto de acceso (114) está separado del pocillo (102).
6. El sistema de la reivindicación 4, en donde el pocillo (102) define un canal (112) que conecta el drenaje (110) y el puerto de acceso (114), en donde el canal (112) está inclinado hacia abajo desde el drenaje (110) hasta el puerto de acceso (114), preferentemente:
en donde (i) la superficie inferior define una superficie superior del canal, o
(ii) la superficie inferior define al menos parcialmente un borde del canal.
7. El sistema de la reivindicación 4, en donde la superficie inferior (106) comprende un punto alto y un punto bajo, y en donde el drenaje (110) está localizado cerca del punto bajo, preferentemente:
en donde (i) el punto bajo está localizado cerca del centro de la superficie inferior (106), o
(ii) el punto bajo está localizado cerca de un borde exterior de la superficie inferior (506), o
(iii) el pocillo comprende una pared exterior, y en donde la pared exterior define al menos parcialmente el drenaje.
8. El sistema de la reivindicación 4, en donde la bandeja (100) define una ranura (118), en donde la ranura proporciona una comunicación de fluidos entre el pocillo y el puerto de acceso (114), en donde, preferentemente, la ranura (518) está configurada para recibir una compuerta (526).
9. El sistema de la reivindicación 4, en donde la bandeja (100) comprende además al menos uno de una abrazadera o un enganche para sujetar la cesta (800, 900) dentro del pocillo (102).
10. El sistema de la reivindicación 4, en donde el pocillo (102) comprende una pared exterior (104), en donde la pared exterior (104) define al menos una de entre una forma circular, una forma de cuadrilátero, una forma ovalada y una forma triangular, en donde, preferentemente, la pared lateral (810, 910) de la cesta (800, 900) define una forma complementaria a la forma de la pared exterior (104) en donde, cuando se inserta en el pocillo (102), la cesta (800, 900) forma un ajuste de interferencia con la pared exterior (104) y en donde al menos una de la pared exterior (104) y la cesta (800, 900) comprende una junta, en donde la junta forma el ajuste de interferencia.
11. El sistema de la reivindicación 4, en donde la bandeja (100) comprende una pluralidad de pocillos (102) y el puerto de acceso (104) está en comunicación de fluidos con al menos dos de la pluralidad de pocillos (102).
12. Un método para utilizar un sistema de bandejas y cestas para procesar muestras, comprendiendo el método: insertar una cesta (800, 900) de acuerdo con la reivindicación 1 en una bandeja (100), teniendo la bandeja (100) un pocillo (102) que define un drenaje (110) que incluye una superficie inferior (106), y un puerto de acceso (114) en comunicación de fluidos con el drenaje (110);
insertar un embrión en la cesta (800, 900); insertar la bandeja cargada (100) en un equipo de procesamiento robótico;
insertar una pipeta en el puerto de acceso (114); introducir y/o extraer fluido en la cesta (800, 900) a través de la pipeta;
retirar la bandeja (100) del equipo de procesamiento robótico; y
retirar el embrión de la cesta (800, 900).
13. El método de la reivindicación 12, en donde al menos una de las etapas, incluyendo la etapa de insertar la cesta (800, 900) en la bandeja (100), se realiza manualmente, o
en donde al menos una de las etapas, incluyendo la etapa de insertar la cesta (800, 900) en la bandeja (100), se realiza mediante un equipo robótico.
14. El método de la reivindicación 12, en donde al menos una de las etapas, incluyendo la etapa de retirar el embrión de la cesta (800, 900), se realiza manualmente, o en donde al menos una de las etapas, incluyendo la etapa de retirar el embrión de la cesta (800, 900), se realiza mediante un equipo robótico.
15. El método de la reivindicación 12, que comprende además tratar la cesta (800, 900) con una solución química configurada para hacer que la superficie exterior de la cesta (800, 900) sea no porosa, antes de la etapa de insertar la cesta (800, 900) en la bandeja (100), o
que comprende además tratar la cesta (800, 900) con el fin de hacer que la cesta (800, 900) sea capaz de liberar factores de crecimiento o citocinas, antes de la etapa de insertar la cesta (800, 900) en la bandeja (100).
16. El método de la reivindicación 12, que comprende además sellar el conjunto de cesta y bandeja, después de la etapa de insertar la cesta (800, 900) en la bandeja (100), comprendiendo preferentemente, además, retirar el sello del conjunto de cesta y bandeja,
antes de la etapa de insertar un embrión en la cesta (800, 900).
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