ES2845298T3 - Uso de derivados de maleimida para prevenir y tratar la leucemia - Google Patents

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Abstract

Un compuesto de fórmula (V) **(Ver fórmula)** una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, un hidrato del mismo, un solvato del mismo o un profármaco del mismo; para su uso en un método para el tratamiento y/o la prevención de la leucemia, en donde, R1 se selecciona del grupo que consiste en alquilo, cicloalquilo, arilo, arilalquilo e hidrógeno; R4 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, arilo, heteroarilo, alquilo, cicloalquilo, polifluoroalquilo, arilalquilo y heteroarilalquilo;R5 se selecciona del grupo que consiste en alquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, hidroxialquilo, arilo y heteroarilo; R6 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo y arilo; y R7 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, acilo, formilo, cicloalquilo, arilo, haloalquilo, polifluoroalquilo, alquiltio, ariltio, monoalquilamino, dialquilamino, monoarilamino, diarilamino, alquilarilamino, alquilimido, hidroxi, alcoxi, ariloxi, carboxilo, alcoxicarbonilo, ariloxicarbonilo, ciano, amino, amido, acilamino, nitro, alquilsulfinilo, arilsulfinilo, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, alquilsulfinamido, arilsulfinamido, alquilsulfonamido y arilsulfonamido.

Description

DESCRIPCIÓN
Uso de derivados de maleimida para prevenir y tratar la leucemia
La presente invención está relacionada con un derivado de pirrolidona para su uso en el tratamiento y/o la prevención de la leucemia.
La leucemia es un cáncer maligno de la médula ósea y la sangre y se caracteriza por el crecimiento descontrolado de las células de la sangre. Los tipos comunes de leucemia se dividen en cuatro categorías: mielógena aguda o crónica, que involucra a los elementos mieloides de la médula ósea, y linfocítica aguda o crónica, que involucra a las células del linaje linfoide. En general, la leucemia aguda, a diferencia de la forma crónica, es potencialmente curable. El tratamiento estándar para la leucemia incluye habitualmente quimioterapia y/o trasplante de células madre y/o radioterapia.
La quimioterapia en la leucemia implica habitualmente una combinación de dos o más agentes quimioterapéuticos. Algunas combinaciones comunes incluyen citarabina con doxorrubicina o daunorrubicina o mitoxantrona o tioguanina, mercaptopurina con metotrexato, mitroxantrona con etopósido, asparaginasa con vincristina, daunorrubicina y prednisona, ciclofosfamida con vincristina, citarabina y prednisona, ciclofosfamida con vinicristina y prednisona, daunorrubicina con citarabina y tioguanina y daunorrubicina con vincristina y prednisona.
El tratamiento de la leucemia es muy complejo y depende de su tipo. A pesar de las mejoras en los resultados con los programas de tratamiento actuales, continúa la necesidad de descubrir nuevos agentes para el tratamiento de todos los tipos de leucemia.
La investigación de las vías de transducción de señales y el desarrollo de agentes específicos son factores importantes para mejorar aún más la terapia de la leucemia. Diferentes estudios de leucemia aguda mostraron que la señalización aberrante de la fosfatidilinositol 3-quinasa (PI3K)/AKT fomenta la transformación celular y la progresión maligna (Martelli et al. Biochim Biophys Acta 2010, 1803, 991-1002; Park et al., Haematologica 2010, 95, 819-28; Gutiérrez et al. Blood 2009, 114, 647-50). La glucógeno sintasa quinasa 3 p (GSK3p) es un sustrato de la proteína quinasa Akt y es importante para la función metabólica. GSK3p es una serina/treonina quinasa que está altamente activada en las células en reposo (Kockeritz et al., Current drug targets, 2009, 7, 1377-88). Aparte de su influencia en la síntesis de glucógeno, GSK3p está involucrada en la vía Wnt/p-catenina. En la vía Wnt/p-catenina, GSK3p es parte del complejo de destrucción de p-catenina y previene su translocación hacia el núcleo. Por tanto, se inhibe la transcripción de genes que están involucrados en la proliferación, diferenciación y desarrollo embrionario (Logan et al., Annual review of cell and developmental biology 2004, 20, 781-810). En la vía de señalización de PI3K/Akt, la GSK3p es fosforilada por Akt y, por tanto, inactivada. Por lo tanto, se inhibe la fosforilación de los objetivos de GSK3p (Vivanco, I. y Sawyers, C.L., Nature reviews. Cancer, 2, 489-501).
Por tanto, en ambas vías, GSK3p antagoniza el crecimiento celular y la progresión del ciclo celular. De acuerdo con esto, la inhibición de GSK3p condujo a una disminución del crecimiento celular y a un aumento de la apoptosis en diferentes tipos de células tumorales, a saber, células de glioblastoma (Korur et al., PloS one, 4, e7443), células de cáncer gastrointestinal (Mai et al., Clinical cancer research 2009, 5, 6810-9; Ghosh Clinical cancer research 2009, 11, 4580-8), células de cáncer de ovario (Cao et al. Cell research 2009, 16, 671-7), células cancerosas de tiroides medular (Kunnimalaiyaan, M et al., Molecular cancer therapeutics 2007, 6, 1151), células de cáncer de páncreas (Ougolkov et al., Cancer research 2005, 65, 2076-81) y células de leucemia (Hu et al., Journal of experimental clinical cancer research 2010, 29, 154).
El documento WO 2009/071620 A1 está relacionado con el uso de derivados de 3-(indolil)- o 3-(azaindolil)-4-arilmaleimida en el tratamiento de la leucemia.
Song AY et al. (Experimental Hematology 2010; 38:908-921) informan sobre el inhibidor de la glucógeno sintasa quinasa-3p que suprime el crecimiento de células de leucemia.
El documento WO 2010/120614 A1 está relacionado con derivados de benzodiazepinas para el tratamiento de neoplasias hematopoyéticas y leucemias.
El documento WO 03/103663 A2 está relacionado con pirrolinas sustituidas como inhibidores de quinasas.
El problema subyacente a la presente invención es la provisión de medios adecuados para el tratamiento de la leucemia. Un problema adicional subyacente a la presente invención es la provisión de una composición farmacéutica adecuada para el tratamiento de la leucemia. Un problema aún adicional subyacente a la presente invención es la provisión de un método para el tratamiento de la leucemia.
El problema subyacente a la presente invención se resuelve mediante la materia objeto de las reivindicaciones independientes adjuntas; realizaciones preferidas pueden tomarse de las reivindicaciones dependientes adjuntas. Más específicamente, el problema subyacente a la presente invención se resuelve en un primer aspecto mediante un compuesto de fórmula (V)
Figure imgf000003_0001
una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, un hidrato del mismo, un solvato del mismo o un profármaco del mismo; para su uso en un método para el tratamiento y/o la prevención de la leucemia,
en donde,
R1 se selecciona del grupo que consiste en alquilo, cicloalquilo, arilo, arilalquilo e hidrógeno;
R4 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, arilo, heteroarilo, alquilo, cicloalquilo, polifluoroalquilo, arilalquilo y heteroarilalquilo;
R5 se selecciona del grupo que consiste en alquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, hidroxialquilo, arilo y heteroarilo;
R6 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo y arilo; y
R7 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, acilo, formilo, cicloalquilo, arilo, haloalquilo, polifluoroalquilo, alquiltio, ariltio, monoalquilamino, dialquilamino, monoarilamino, diarilamino, alquilarilamino, alquilimido, hidroxi, alcoxi, ariloxi, carboxilo, alcoxicarbonilo, ariloxicarbonilo, ciano, amino, amido, acilamino, nitro, alquilsulfinilo, arilsulfinilo, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, alquilsulfinamido, arilsulfinamido, alquilsulfonamido y arilsulfonamido.
En una realización del primer aspecto, R5 es metilo.
En una realización del primer aspecto, R1 se selecciona del grupo que consiste en alquilo, hidrógeno, fenilo y bencilo,
preferiblemente R1 se selecciona del grupo que consiste en metilo, butilo e hidrógeno,
más preferiblemente R1 se selecciona del grupo que consiste en metilo e hidrógeno.
En una realización del primer aspecto, R7 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, metilo y metoxi.
En una realización preferida del primer aspecto, R7 es 5-metoxi o 5-halógeno.
En una realización alternativa preferida del primer aspecto, R7 es hidrógeno.
En una realización del primer aspecto, R4 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo y bencilo, preferiblemente R4 es hidrógeno o metilo, más preferiblemente R4 es hidrógeno.
En una realización del primer aspecto, R6 es hidrógeno o alquilo, preferiblemente hidrógeno o metilo, más preferiblemente metilo.
En una realización del primer aspecto, el compuesto se selecciona del grupo que consiste en 3-(4-acetilfenil)-1 -metil-4-(2-metil-1 H-indol-3-il)-1 H-pirrol-2,5-diona (también denominada en el presente documento PDA-66); y 3-(4-acetilfenil)-4-(2-metil-1 H-indol-3-il)-1 H-pirrol-2,5-diona.
En una realización del primer aspecto, el compuesto es 3-(4-acetilfenil)-1-metil-4-(2-metil-1H-indol-3-il)-1H-pirrol-2,5-diona
En una realización del primer aspecto, el compuesto es 3-(4-acetilfenil)-4-(2-metil-1 H-indol-3-il)-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000004_0001
En una realización del primer aspecto, la leucemia se selecciona del grupo que consiste en leucemia linfoblástica aguda (ALL), leucemia mieloide aguda (AML), leucemia refractaria, leucemia resistente, leucemia FLT3-ITD-positiva, cualquier leucemia crónica, mielodisplasia y linfoma.
En una realización del primer aspecto, el método comprende la administración de un segundo agente terapéutico, en el que el segundo agente terapéutico es un agente quimioterapéutico,
preferiblemente el agente quimioterapéutico se selecciona del grupo que comprende citarabina, etopósido, mitoxantrón, ciclofosfamida, ácido retinoico, daunorrubicina, doxorrubicina, idarrubicina, azacitidina, decitabina, un inhibidor de tirosina-quinasa, un anticuerpo antineoplásico, alcaloides de la vinca y esteroides,
más preferiblemente, el agente quimioterapéutico es un inhibidor de tirosina-quinasa, en donde el inhibidor de tirosina-quinasa se selecciona del grupo que comprende sorafenib, dasatinib, nilotinib, nelarabina y fludarabina, o el agente quimioterapéutico es Alemtuzumab (Campath®).
Se describe el uso de un compuesto como se define en las reivindicaciones para la fabricación de un medicamento contra la leucemia.
Se describe una composición farmacéutica que comprende un compuesto como se define en las reivindicaciones y un soporte o excipiente farmacéuticamente aceptable.
En un ejemplo de la composición farmacéutica, la composición farmacéutica comprende un segundo agente terapéutico, en el que el segundo agente terapéutico es un agente quimioterapéutico.
Se describe un método de tratamiento y/o prevención de la leucemia, en el que el método comprende administrar a un sujeto que lo necesite una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto como se define en las reivindicaciones o de una composición farmacéutica como se describe en este documento.
La presente invención se basa en el sorprendente hallazgo de que el compuesto de la invención es capaz de inhibir GSK3p. Más específicamente, la presente invención se basa en el sorprendente hallazgo de que el compuesto de la invención es adecuado para el tratamiento de la leucemia.
Un compuesto de la invención como se define en las reivindicaciones puede existir en forma libre o en forma de sal y/o en forma de solvato o de la sal del mismo. Una "sal farmacéuticamente aceptable" de un compuesto se refiere a una sal que es farmacéuticamente aceptable y que posee la actividad farmacológica deseada del compuesto original. "Sales fisiológica o farmacéuticamente aceptables" de un compuesto de la invención incluyen, pero no se limitan a sales por adición de ácidos con a) ácidos inorgánicos, tales como, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico o ácido fosfórico y similares, o formadas con b) ácidos orgánicos, que incluyen, pero no se limitan a ácidos carboxílicos, tales como, p. ej., ácido acético, ácido tartárico, ácido láctico, ácido cítrico, ácido maleico, ácido malónico, ácido succínico, ácido ascórbico, ácido fumárico, ácido cinámico, ácido mandélico, ácido benzoico, ácido glucónico y similares, o c) ácidos sulfónicos, tales como, p. ej., ácido metanosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido toluenosulfónico, ácido canforsulfónico y similares.
Solvatos fisiológicamente aceptables son preferiblemente hidratos.
A menos que se indique lo contrario, los siguientes términos y expresiones utilizados en la memoria descriptiva y las reivindicaciones tienen, en una realización preferida, los significados que se dan a continuación:
Los términos "alquilo" y "alquiloxi" como se usan preferiblemente en este documento o en combinación con otros términos significan estructuras de hidrocarburos lineales o ramificados y combinaciones de los mismos con uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis átomos de carbono, que incluyen pero no se limitan a, p. ej., metilo, etilo, propilo (iso-, n-), butilo (iso-, n-, terc.-), pentilo, hexilo, metoxi, etoxi, propoxi (iso-, n-), butoxi (iso-, n-, terc.-), pentoxi, hexoxi y similares.
Como se usa preferiblemente en el presente documento, el término "cicloalquilo" significa grupos alquilo carbocíclicos mono- o poli-cíclicos, saturados o insaturados, de tres, cuatro, cinco, seis o siete anillos, que incluyen, pero no se limitan a ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclobutenilo, ciclopentenilo, ciclopentadienilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, ciclohexadienilo, cicloheptenilo, cicloheptadienilo y cicloheptatrienilo y similares.
El término "arilo", como se usa preferiblemente en el presente documento, significa grupos aromáticos mono- y policíclicos que tienen 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 o 14 átomos de carbono en la cadena principal, opcionalmente condensados a un grupo carbocíclico, que incluyen pero no se limitan a fenilo, naftilo, indenilo, indanilo, azulenilo, fluorenilo, 1,2,3,4-tetrahidronaftilo, fenantrenilo y similares.
El término "monoalquilamino" o "monoarilamino" como se usa preferiblemente en el presente documento significa un radical -NHR, en el que R es un alquilo, cicloalquilo o arilo como se define en el presente documento, que incluye, pero no se limita a p. ej., metilamino, ciclohexilamino, fenilamino y similares.
El término "dialquilamino" o "diarilamino" como se usa preferiblemente en el presente documento significa un radical -NRR', en donde cada uno de R y R' representa individual e independientemente un alquilo, cicloalquilo o arilo como se define en el presente documento, que incluye, pero no se limita a p. ej., dimetilamino, diciclohexilamino, metiletilamino, difenilamino y similares.
El término "alquiltio" o "ariltio" como se usa preferiblemente en el presente documento significa un radical -SR, en el que R es un alquilo o arilo como se define en el presente documento, que incluye, pero no se limita a, p. ej., metiltio, etiltio, propiltio, butiltio, feniltio y similares.
El término "acilamino" como se usa preferiblemente en este documento significa un radical -NR'C(O)R, en donde R' es hidrógeno o alquilo, y R es hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, fenilo o fenilalquilo, en donde alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo y fenilalquilo son como se definen en el presente documento. Ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a formilamino, acetilamino, ciclohexilcarbonilamino, benzoilamino y similares.
El término "haloalquilo", como se usa preferiblemente en el presente documento, significa alquilo sustituido como se define en el presente documento, en donde alquilo está sustituido con uno o más átomos de halógeno iguales o diferentes, que incluyen, pero no se limitan a, p. ej., -CH2CI, -CF3 , -CH2CF3 , -CH2CCh y similares.
Los términos "alquilsufinilo" y "arilsulfinilo", como se usan preferiblemente en el presente documento, significan un grupo -S(O)R, en que R es alquilo (en el caso de alquilsulfinilo) y arilo (en el caso de arilsulfinilo) como se define en el presente documento, que incluye, pero no se limita a, p. ej., metilsulfinilo, etilsulfinilo, propilsulfinilo, butilsulfinilo, cada uno de los cuales incluye todas sus formas isoméricas, y similares.
Los términos "alquilsulfonilo" y "arilsulfonilo", como se usan preferiblemente en el presente documento, significan un grupo -S(O)2R, en que R es alquilo (en el caso de alquilsulfonilo) y arilo (en el caso de arilsulfonilo) como se define en el presente documento, que incluye pero no se limita a, p. ej., metilsulfonilo, etilsulfonilo, propilsulfonilo, butilsulfonilo, cada uno incluyendo todas sus formas isoméricas, y similares.
Los términos "alquilsulfinamido" y “arilsulfinamido", como se usan preferiblemente en el presente documento significan un grupo -S(O)NRR', en que R y R' son hidrógeno y/o alquilo (en el caso de alquilsulfinamido) y arilo (en el caso de arilsulfinamido) como se define en el presente documento, que incluyen, pero no se limitan a, p. ej., terc.-butanosulfinamida, p-toluenosulfinamida y similares.
Los términos "alquilsulfonamido" y “arilsulfonamido", como se usan preferiblemente en el presente documento, significan un grupo -S(O)2 NRR', en que R y R' son hidrógeno y/o alquilo (en el caso de arilsulfonamido) y arilo (en el caso de arilsulfonamido) como se define en el presente documento, que incluye, pero no se limita a, p. ej., metansulfonamida y similares.
El término "heteroarilo", como se usa preferiblemente en el presente documento, significa grupos aromáticos monoo bi-carbocíclicos con 1, 2, 3 o 4 heteroátomos en el anillo seleccionados entre N, S y O. Preferiblemente, el número total de átomos en el anillo es 5, 6, 7, 8, 9 o 10. Ejemplos sin limitación de grupos heteroarilo son benzofuranilo, furilo, tienilo, benzotienilo, tiazolilo, imidazolilo, oxazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, benzotiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, pirrolilo, piranilo, tetrahidropiranilo, pirazolilo, piridilo, pirimidinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, purinilo, carbazolilo, benzoxazolilo, benzamidazolilo, indolilo, isoindolilo, diazinilo, pirazinilo, triazinilo, tetrazinilo, tetrazolilo, benzotiofenilo, benzopiridilo, bencimidazolilo y derivados de los mismos. El anillo heteroarilo está opcionalmente sustituido de forma independiente con uno o más sustituyentes, en donde cada uno de los sustituyentes se selecciona individual e independientemente de grupos alquilo, haloalquilo, heteroalquilo, alcoxi, hidroxi, halógeno, nitro, ciano y similares, preferiblemente como se define aquí.
El término "heterociclilo" como se usa preferiblemente en el presente documento significa grupos heterociclilo no aromáticos, saturados o insaturados, mono- o poli-cíclicos de 5, 6, 7 u 8 átomos en el anillo, en los que uno o dos átomos del anillo son heteroátomos seleccionados de NR (en que R es independientemente hidrógeno o alquilo, preferiblemente como se define en el presente documento), O o S(O)n (en que n es un número entero de 0, 1 y 2), siendo los átomos restantes del anillo átomos de carbono, en que uno o dos átomos de carbono pueden opcionalmente ser reemplazados por un grupo carbonilo. El anillo heterociclilo puede estar opcionalmente sustituido independientemente con uno, dos o tres sustituyentes, en donde cada uno de los sustituyentes se selecciona, individual e independientemente, de alquilo, haloalquilo, heteroalquilo, halógeno, nitro, ciano, hidroxi, alcoxi, amino, mono- o di-alquilamino, acilo, preferiblemente como se define en el presente documento. Ejemplos de grupos heterociclilo incluyen, pero no se limitan a tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, N-metilpiperidin-3-ilo, N-metilpirrolidin-3-ilo, pirrolinilo y derivados de cada uno de los mismos.
El término "halógeno", como se usa preferiblemente en este documento, significa un átomo de halógeno seleccionado entre flúor, cloro, bromo y yodo, preferiblemente el átomo de halógeno es flúor o cloro, más preferiblemente el átomo de halógeno es flúor.
El término "protegido", como se usa preferiblemente en el presente documento, significa aquellos grupos orgánicos destinados a proteger átomos de nitrógeno contra reacciones indeseables durante los procesos de síntesis. Grupos protectores de nitrógeno adecuados son bien conocidos en la técnica e incluyen, pero no se limitan a, p. ej., trimetilsililo, terc.-butildimetilsililo (TBDMS), bencilo, benciloxicarbonilo (Cbz), 9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc), terc.-butoxicrbonilo (Boc), trifluoroacetilo, 2-trimetilsililetanosulfonilo (SES) y similares. Otros grupos protectores de nitrógeno adecuados, que son adecuados para la práctica de la invención, se pueden encontrar en la publicación de T. W. Greene y G. M. Wuts, "Protecting Groups in Organic Synthesis", Segunda edición, Wiley, Nueva York, 1991, y referencias citadas en el mismo.
Numerosos aspectos y ventajas adicionales de la invención resultarán evidentes para los expertos en la técnica al considerar la siguiente descripción detallada de la invención que describe realizaciones actualmente preferidas de la misma.
La divulgación también se refiere a los metabolitos y profármacos del compuesto según se define en las reivindicaciones. Preferiblemente, un profármaco de un compuesto como se define en las reivindicaciones se prepara modificando grupos funcionales presentes en el compuesto de la invención de tal manera que las modificaciones se pueden escindir in vivo para liberar uno o el compuesto activo. Preferiblemente, un compuesto activo de este tipo es un compuesto de la invención o un compuesto derivado del mismo que tiene al menos una característica de un compuesto de la invención. Preferiblemente, una característica de este tipo es la capacidad de inhibir GSK3p y/o es la idoneidad para el tratamiento de la leucemia.
De acuerdo con el mismo, el término "profármaco" se refiere a (a) una forma inactiva de un fármaco que ejerce sus efectos después de procesos metabólicos in vivo, cuando dicho profármaco se administra a un sujeto mamífero, para liberar un fármaco precursor activo y preferiblemente un compuesto de la invención, o (b) una sustancia que da lugar a un metabolito farmacológicamente activo, aunque no es activo en sí mismo (es decir, un precursor inactivo). Ejemplos de profármacos incluyen, pero no se limitan a ésteres, carbamatos y similares.
Como se usa preferiblemente en el presente documento, el término "metabolito" se refiere a a) un producto del metabolismo, incluidos un compuesto intermedio y un producto final, b) cualquier sustancia en el metabolismo (ya sea como producto del metabolismo o según sea necesario para el metabolismo), o c) cualquier sustancia producida o utilizada durante el metabolismo. Más preferiblemente, el término "metabolito" se refiere a un producto final que permanece después del metabolismo.
Como se usa preferiblemente en este documento, la expresión "excipiente farmacéuticamente aceptable" es un excipiente que es útil para preparar una composición farmacéutica que es generalmente segura, no tóxica y ni biológica ni de otra manera indeseable, o que afecta adversamente al beneficio terapéutico del compuesto de la invención. Un "excipiente farmacéuticamente aceptable" como se usa preferiblemente en la memoria descriptiva y las reivindicaciones incluye tanto uno como más de uno de dichos excipientes. Un excipiente de este tipo puede ser cualquier sólido, líquido, semi-sólido. Excipientes farmacéuticos sólidos incluyen almidón, celulosa, talco, glucosa, lactosa, sacarosa, gelatina, malta, arroz, harina, greda, gel de sílice, estearato de magnesio, estearato de sodio, monoestearato de glicerol, cloruro de sodio, leche desnatada en polvo y similares. Excipientes líquidos y semisólidos pueden seleccionarse de glicerol, propilenglicol, agua, etanol y diversos aceites, incluidos los de origen del petróleo, animal, vegetal o sintético, p. ej., aceite de cacahuete, aceite de soja, aceite mineral, aceite de sésamo y similares. Como se usa preferiblemente en el presente documento, la expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" significa la cantidad de un compuesto de la fórmula (I) de la invención que, cuando se administra a un mamífero para tratar una enfermedad, es suficiente para efectuar dicho tratamiento para la enfermedad. La "cantidad terapéuticamente eficaz" variará dependiendo del compuesto, la enfermedad y su gravedad y la edad, peso, etc., del mamífero a tratar.
Como se usa preferiblemente en el presente documento, "tratar" o "tratamiento" de una enfermedad incluye: (1) prevenir la enfermedad, es decir, hacer que los síntomas clínicos de la enfermedad no se desarrollen en un mamífero que puede estar expuesto o predispuesto a la enfermedad, pero que aún no experimenta ni muestra síntomas de la enfermedad, (2) inhibir la enfermedad, es decir, detener o reducir el desarrollo de la enfermedad o sus síntomas clínicos, o (3) aliviar la enfermedad, es decir, provocar la regresión de la enfermedad o sus síntomas clínicos.
Como se usa preferiblemente en este documento, el término "leucemia" significa una enfermedad caracterizada por una proliferación anormal (producción por multiplicación) de células de la sangre, habitualmente glóbulos blancos (leucocitos). La leucemia, como se usa preferiblemente en el presente documento, incluye formas aguda y crónica. La leucemia aguda se caracteriza por la rápida proliferación de células de la sangre inmaduras. Este apiñamiento hace que la médula ósea no pueda producir células de la sangre sanas.
Como se usa preferiblemente en el presente documento, la expresión "tratamiento de la leucemia" incluye la inhibición parcial o total de la leucemia en un sujeto, así como la destrucción parcial o total de las células leucémicas.
Como se usa preferiblemente en este documento, la expresión "prevención de la leucemia" incluye prevenir la aparición de leucemia clínicamente evidente, así como prevenir la aparición de una fase preclínica evidente de leucemia en sujetos en riesgo.
En una realización preferida de la invención como se define en las reivindicaciones, la leucemia es leucemia resistente y, en particular, leucemia resistente a múltiples fármacos, es decir, las células leucémicas exhiben resistencia a quimioterapias convencionales, preferiblemente el fenotipo MDR (resistencia a múltiples fármacos).
En una realización de la invención según se define en las reivindicaciones, el compuesto de la invención es un compuesto, una sal fisiológicamente aceptable del mismo o un solvato fisiológicamente aceptable del mismo, que es capaz de estimular la apoptosis en células leucémicas.
Por tanto, la presente invención también se refiere al uso de un compuesto de la invención como se define en las reivindicaciones, una sal o solvato fisiológicamente aceptable del mismo, preferiblemente como se define en el presente documento, en combinación con uno o más de un agente quimioterapéutico adicional.
En una realización de la invención como se define en las reivindicaciones, el tratamiento del sujeto comprende, además, la estimulación de la muerte de las células mediante un método convencional o una combinación de métodos convencionales. Los métodos convencionales se seleccionan preferiblemente del grupo que consiste en irradiación, p. ej., irradiación externa o administración de compuestos radiactivos, trasplante de médula ósea y tratamiento con un agente quimioterapéutico que incluye agentes antineoplásicos, agentes de reversión de la resistencia a múltiples fármacos y modificadores de la respuesta biológica, y combinaciones de los mismos.
Por tanto, la presente invención también se refiere al uso de un compuesto de la invención como se define en las reivindicaciones, a una sal fisiológicamente aceptable o a un solvato del mismo, preferiblemente como se define en el presente documento, en combinación con uno o más de un agente quimioterapéutico adicional. Agentes antineoplásicos adecuados pueden seleccionarse del grupo que comprende asparaginasa, bleomicina, busulfán, carmustina, clorambucilo, cladribina, ciclofosfamida, citarabina, dacarbazina, daunorrubicina, doxorrubicina, etopósido, fludarabina, gemcitabina, hidroxiurea, idarrubicina, ifosfamida, lomustina, mecloretamina, melfalan, mercaptopurina, metotrexato, mitomicina, mitoxantrona, pentostatina, procarbazina, 6-tioguanina, topotecán, vinblastina, vincristina, dexametasona, ácido retinoico y prednisona. Ejemplos preferidos de agentes antineoplásicos a utilizar en el tratamiento de la leucemia de acuerdo con la presente invención, especialmente en el tratamiento de AML, que es leucemia mieloide aguda, o ALL, que es leucemia linfoblástica aguda, comprenden citarabina, etopósido, mitoxantrón, ciclofosfamida, ácido retinoico, daunorrubicina, doxorrubicina e idarubicina.
Cuando un compuesto de la invención, una sal fisiológicamente aceptable o un solvato del mismo se usa como un ingrediente activo de acuerdo con la invención como se define en las reivindicaciones, dicho compuesto puede incorporarse en formas de dosificación farmacéuticas estándar, con las que el experto en la técnica está familiarizado. Básicamente, en la invención se puede utilizar cualquier forma de dosificación farmacéutica.
La presente divulgación también se refiere a una composición farmacéutica que comprende un agente auxiliar farmacéuticamente aceptable, además de un compuesto de la invención, una sal o solvato fisiológicamente aceptable del mismo como se definió anteriormente. Agentes auxiliares de este tipo son conocidos en la técnica. p. ej., los excipientes, diluyentes y adyuvantes farmacéuticos habituales, p. ej., materiales de soporte inertes orgánicos e inorgánicos, tales como agua, gelatina, lactosa, almidón, estearato de magnesio, talco, aceites vegetales, gomas, polialquilenglicoles, etc. Estas preparaciones farmacéuticas pueden ser empleadas en forma sólida, p. ej., como comprimidos, cápsulas, o pueden administrarse en forma líquida, p. ej., como soluciones, suspensiones o emulsiones.
Excipientes y adyuvantes farmacéuticos adicionales que se pueden añadir a una composición farmacéutica de la invención incluyen conservantes, antioxidantes, agentes antimicrobianos y otros estabilizadores; agentes humectantes, emulsionantes y de suspensión y compuestos anti-aglomerantes; aditivos de fragancia y colorantes; composiciones para mejorar la compresibilidad o agentes para crear una liberación retardada, sostenida o controlada del ingrediente activo; y diversas sales para cambiar la presión osmótica de la preparación farmacéutica o para actuar como tampones. Excipientes y adyuvantes de este tipo son conocidos por el experto en la materia.
Figure imgf000008_0001
En cuanto a la síntesis del compuesto de la invención tal como se define en las reivindicaciones, un experto en la técnica reconocerá lo siguiente. La maleimida disustituida y, en particular, la subunidad bisindolilmaleimida está presente en un cierto número de compuestos biológicamente activos. Entre estos, arciriarubinas (Esquema 1; a) representan los miembros más simples de las 3,4-bisindolilmaleimidas que se producen de forma natural. Están estructuralmente relacionadas con las arciriaflavinas (b) y con el aglicón de la bien conocida estaurosporina (c), rebecamicina (d) y otros metabolitos biológicamente activos.
Esquema 1. Arciriarubinas (a), arciriaflavinas (b), estaurosporina (c) y rebecamicina (d).
Curiosamente, análogos sintéticos poseen amplios espectros de actividades antibacterianas, antivirales, antimicrobianas y antigénicas. Además, los derivados de esta clase de compuestos son agentes prometedores para enfermedades autoinmunes, tales como la diabetes y el cáncer, así como valiosos inhibidores de diferentes proteína quinasas, especialmente PKC, que desempeña un papel importante en muchas vías de transducción de señales, o GSK3p, por lo tanto, puede utilizarse para el tratamiento de enfermedades mediadas por GSK3p. En particular, algunos derivados se evalúan actualmente en ensayos clínicos en seres humanos como fármacos contra el cáncer. Por ejemplo, enzastaurina, que es desarrollada por Eli Lilly and Company, es un derivado sintético de bisindolilmaleimida con actividad antineoplásica potencial y puede usarse para el tratamiento de tumores sólidos (documentos WO02/02094, WO02/02116 e IL165747). En enero de 2009, enzastaurina estaba en la fase III de los ensayos clínicos. Este agente puede disminuir el suministro de sangre al tumor, previniendo su crecimiento. La ruboxistaurina, otra bisindolilmaleimida, es un fármaco en investigación para la retinopatía periférica diabética, también fue desarrollado por Eli Lilly y actualmente se encuentra en un estudio de fase III. La ruboxistaurina es un inhibidor de PKC-beta. Otros ejemplos de agentes de indolilmaleimida se han descrito en los documentos WO2009/071620 y WO 2006/061212. A saber, ciertos derivados de 3-(indolil)- o 3-(azaindolil)-4arilmaleimida actúan como inhibidores de la angiogénesis, por lo que se propuso su uso para controlar la angiogénesis y/o disfunción vascular así como para el tratamiento de la leucemia.
Obviamente, es muy importante desarrollar nuevas estrategias para los nuevos derivados de esta clase de compuestos bioactivos que muestren propiedades más mejoradas, tales como una biodisponibilidad potenciada, una estabilidad metabólica incrementada y selectividades mejoradas hacia los objetivos de acción que pueden usarse como fármacos fijados como objetivo.
Como resultado de la importancia farmacéutica de las 3,4-bisindolilmaleimidas, se ha informado en la bibliografía de una diversidad de enfoques para su síntesis. Los métodos más utilizados fueron desarrollados por grupos de W. Steglich (Tetrahedron, 1988, 44, 2887) y M. Faul (JOC, 1998, 63, 6053). Ambos métodos permiten la síntesis de maleimidas disustituidas simétrica y asimétricamente. De acuerdo con el procedimiento de Steglich, el bromuro de indolil magnesio reacciona con 3,4-dibromomaleimida para dar productos mono- o di-sustituidos. El resultado de esta reacción depende en gran medida del disolvente. El procedimiento de Faul et al. implica una condensación en una etapa de (aril o indolil) acetamidas sustituidas con ésteres de (aril o indolil) glioxilo sustituidos en presencia de una base fuerte.
También se pueden preparar varios compuestos de indolilmaleimida de acuerdo con los métodos conocidos, que se describen, por ejemplo, en los documentos WO02/38561, EP328026, WO03/095452 y WO2006/061212.
Los compuestos seleccionados de esta invención se prepararon de acuerdo con la referencia "Org. Biomol. Chem.
2008, 6, 992”. Típicamente, en una secuencia de dos etapas primero se sintetizó el derivado de 3-halo-4-indolil- o azaindolilmaleimida, partiendo de un derivado de indol o azaindol disponible comercialmente y 3,4-dihalomaleimida. En un caso particular, 2-metilindol (1) reaccionó con 3,4-dibromomaleimida (2) para formar 3-brom-6-1-metil-4-(2-metil-3-indolil)-maleimida (3) (Esquema 2).
Figure imgf000009_0001
El uso de reactivo de Grignard de acuerdo con el protocolo de Steglich condujo al producto monosustituido deseado con un rendimiento aislado del 68%. Además, se aisló una pequeña cantidad del correspondiente producto disustituido (5%). Sin embargo, aplicando la modificación de Ohkubo (Tetrahedron, 1996, 52, 8099), que significa metalación de indol con hexametildisilazano de litio (LiHMDS) y reacción adicional con un equivalente de compuesto dibromo 2, condujo a 3-bromo-1-metil-4-(2-metil-3-indolil)-maleimida (3) con excelente selectividad y rendimiento casi cuantitativo (98%).
Se introdujeron sustituyentes arilo, heteroarilo o heterociclilo en la posición 4 del resto maleimida usando la reacción de acoplamiento de Suzuki del compuesto 3 con diversos ácidos aril, heteroaril o heterociclil borónicos, sustituidos o no sustituidos. Las reacciones de acoplamiento se realizaron preferiblemente en presencia de 0,05 a 4% en moles de Pd(OAc)2 y ligando de fosfina adecuado. Dependiendo de factores estéricos y electrónicos, se obtuvo un rendimiento de bueno a excelente del producto correspondiente de fórmula (I). Por ejemplo, la reacción de acoplamiento de Suzuki de 3-bromo-1-metil-4-(2-metil-3-indolil)-maleimida (3) con ácido fenilborónico (4) condujo a 1 -metil-3-(2-metil-1 H-indol-3-il)-4-fenil-1 H-pirrol-2,5-diona (5) en rendimiento cuantitativo (Esquema 3).
Figure imgf000009_0002
Todos los productos de acoplamiento son compuestos cristalinos estables y de colores brillantes. Las 3-indolil-4-aril(heteroaril o heterociclil)maleimidas resultantes constituyen nuevos compuestos biológicamente activos. No son necesarias las etapas de protección y desprotección del nitrógeno del indol.
Como resultará evidente para un experto en la técnica, el compuesto de fórmula (I), en donde X es N-R1, se puede convertir en otro compuesto de fórmula (III) (Esquema 4).
Figure imgf000009_0003
Por ejemplo, el tratamiento de un compuesto de fórmula (I) protegido con un resto de maleimida con una base fuerte, tal como hidróxido de sodio o potasio, condujo a la formación de los correspondientes anhídridos cíclicos de fórmula (II), que se convierten fácilmente en compuestos de fórmula (III) no protegidos por calentamiento con acetato de amonio.
Ambas conversiones proceden de altos a excelentes rendimientos. Además, estos productos son compuestos cristalinos estables y de colores brillantes.
Ciertos compuestos de la presente invención, durante los ensayos biológicos como inhibidores de GSK3p, inesperadamente han mostrado propiedades citotóxicas y son capaces de inducir apoptosis en células leucémicas. La presente invención se ilustra ahora adicionalmente con referencia a las siguientes figuras y ejemplos de los cuales pueden tomarse ventajas, características y realizaciones adicionales, en las que
la Fig. 1 es un diagrama que muestra la inhibición de GSK3p por el compuesto PDA-66 a diferentes concentraciones;
la Fig. 2 es un conjunto de diagramas de barras que muestran el impacto del compuesto PDA-66 sobre la proliferación celular y la actividad metabólica de las células SEM, células RS4;11, células Jurkat y células Molt-4;
la Fig. 3 es un conjunto de imágenes por microscopía óptica que indican el efecto del compuesto PDA-66 y DSMO en células SEM y células Jurkat;
la Fig. 4 es un conjunto de diagramas de barras que muestran el impacto del compuesto PDA-66 en la distribución del ciclo celular de células SEM, células RS4;11, células Jurkat y células Molt-4;
la Fig. 5A es un conjunto de diagramas de barras que muestran el impacto del compuesto PDA-66 sobre la apoptosis y necrosis de células SEM, células RS4; 11, células Jurkat y células Molt-4;
la Fig. 5B muestra el resultado de un análisis de transferencia Western del efecto del compuesto PDA-66 sobre la escisión de Caspasa 3, 7 y PRAP;
la Fig. 6A muestra el resultado de un análisis de transferencia Western del efecto del compuesto PDA-66 sobre la expresión de pAktSer473, pAktThr308, Akt, pGSK3pSer9, p-Catenina y GAPDH;
la Fig. 6B muestra el resultado de un análisis de transferencia Western del efecto del compuesto PDA-66 sobre la expresión de p4EBP-1 Ser65, 4EBP1 y GAPDH en células SEM, células RS4;11 y células Molt-4; y la Fig. 6C muestra la Tabla 1 que indica las concentraciones de CI50 del compuesto PDA-66 en células SEM, células RS4; 11, células Jurkat y células Molt-4.
EJEMPLOS
Las abreviaturas utilizadas en los procedimientos generales y los ejemplos se definen como sigue: "HCl" para ácido clorhídrico, "KOH" para hidróxido de potasio, "NaHCOa" para hidrocarbonato de sodio, “K2CO3" para carbonato de potasio, “Na2SO4" para sulfato de sodio, “CH2Cl2" para cloruro de metileno, "THF" para tetrahidrofurano, "EA" para acetato de etilo, "DMSO" para dimetilsulfóxido, ''CDCta'' para cloroformo deuterado, "TLC" para cromatografía en capa fina, “LiHMDS" para hexametildisilazano de litio, "Pd(OAc)2" para acetato de paladio.
Todas las reacciones se llevaron a cabo bajo una atmósfera de argón. Las reacciones se controlaron mediante análisis de TLC (placas de gel de sílice prerrevestidas con indicador fluorescente UV254, 0,2 mm) y se visualizaron con luz UV de 254 nm o yodo. Los productos químicos se adquirieron de Aldrich, Fluka, Acros, AlfaAsar, Strem y, a menos que se indique lo contrario, se utilizaron sin purificación adicional. Todos los compuestos se caracterizaron por espectroscopía de 1H RMN, 13C RMN, GC-MS, HRMS e IR. Los espectros de 1H se registraron en espectrómetros Bruker AV 300 y AV 400. Los espectros de 13C RMN y de 19F rMn se registraron a 75,5 MHz y 282 MHz, respectivamente. Los desplazamientos químicos se expresan en ppm con respecto al centro de resonancia del disolvente. Los puntos de fusión se determinaron en un SMP3 digital (Stuart). Los espectros de IR se registraron en FT-IR ALPHA (Bruker) con Platinum-ATR (Bruker). Los espectros de masas EI (70 eV) se registraron en MAT 95XP (Thermo ELECTRON CORPORATION). La GC se realizó en un cromatógrafo Agilent 6890 con una columna HP5 de 30 m. La HRMS se realizó en MAT 95Xp (EI) y LC/MS Agilent 6210 Tiempo de Vuelo (ESI). La GC-MS se realizó en un detector selectivo de masas cromatógrafo Agilent 5973. Todos los rendimientos reseñados se refieren a rendimientos aislados.
Ejemplo 1: Preparación 1 - Procedimiento general para la condensación de derivado de indol o azaindoles con compuesto de 3,4-dihalomaleimida y compuestos específicos
El derivado de (aza)indol (10 mmol) se disolvió en THF seco (20 ml) y se enfrió bajo argón a -20 °C, antes de que se añadieran lentamente 21 ml de LiHMDS (1 M en THF). Después de agitar durante 2 h a -20 °C, se añadió una solución de derivado de 3,4-dihalomaleimida (10 mmol) en THF (20 ml) a la solución de (aza)indol litiado de una vez mediante una jeringa. Después de agitar 1 h más a -20 °C (control por TLC), la mezcla de reacción se neutralizó cuidadosamente con HCl ac. 2 N y se extrajo con acetato de etilo (3 x). Los componentes orgánicos combinados se lavaron con NaHCO3 sat. ac., salmuera y agua. Después de secar sobre Na2SO4 y concentración, el material bruto se cristalizó en éter.
Ejemplo 1.1
3-Bromo-1 -metil-4-(2-metil-1 H-indol-3-il)-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000011_0001
Cristales naranjas; 1H-RMN (CDCis) 52,48 (s, 3H), 3,19 (s, 3H), 7,18 (ddd, 1H), 7,20 (ddd, 1H), 7,31 (ddd, 1H), 7,48 (m, 1 H), 8,48 (s ancho, 1H); 13C RMN (CDCI3) 514,3, 24,9, 102,0, 110,8, 120,5, 120,7, 120,8, 122,4, 126,4, 135,5, 137,6, 139,3, 166,4, 169,1; GC-MS (EI, 70 eV): m/z (%) 318 (100) [M+], 320 (96) [M+]; HRMS (EI): Calc. para C14H11Ü2N2Br: 317,99984. encontrado: 317,99979; IR (ATR, cm-1): 3361, 3066, 1771, 1703, 1623, 1422, 1379, 990, 806, 749, 733, 656.
Ejemplo 1.2
3-Bromo-1 -metil-4-( 1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000011_0002
La preparación se realizó utilizando reactivo de Grignard. Cristales naranjas; 1H RMN (DMSO-d6) 52,99 (s, 3H), 7,21 (ddd, 1H, J - 3,83, 5,31, 7,36 Hz), 8,20 (s, 1 H), 8,31 (dd, 1H, J = 1,53, 3,52 Hz), 8,33 (s, 1H), 12,68 (s ancho, 1 H); 13C RMN (DMSÜ-de) 524,6, 102,7, 114,8, 116,9, 117,0, 130,8, 131,2, 136,8, 144,0, 148,7, 166,4, 168,9; GC-MS (EI, 70 eV): m/z (%) 305 (58) [M+], 307 (57) [M+]; HRMS pos. (ESI): Calc. para [M+H]+, C12HsBrN3Ü2: 305.98727 y 307.98532; encontrado: 305,98737 y 307,98544; IR (ATR, cm-1): 3079, 2742, 1764, 1707, 1584, 1488, 1440, 1419, 1384, 1287, 1167, 1141, 1101,801,778, 733, 628.
Ejemplo 1.3
1 -Metil-3,4-bis-(2-metil-1 H-indol-3-il)-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000011_0003
Cristales rojos; 1H RMN (DMSO-d6) 51,97 (s, 3H), 1,98 (s, 3H), 3,05 (s, 3H), 6,75 (t ancho, 2H, J = 7,41 Hz), 6,95 (ddd, 2H, J - 3,83, 5,31, 7,36 Hz), 7,03 (d ancho, 2H, J = 7,90 Hz), 7,23 (d ancho, 2H, J = 8,09 Hz), 11,29 (s ancho, 2H); 13C RMN (DMSÜ-de) 5 13,0, 23,9, 103,3, 110,7, 119,2, 119,4, 120,8, 126,6, 131,2, 135,5 (2C), 137,3, 170,4, 171,3; GC-MS (EI, 70 eV): m/z (%) 369 (100) [M+]; HRMS (EI): Calc. para C23H19O2N3 : 369,14718; encontrado 369,14705; IR (ATR, cm-1): 3383, 3307, 1755, 1692, 1456, 1435, 1377, 1239, 1049, 1022, 1003, 747, 737, 693.
Ejemplo 2: Preparación 2 - Procedimiento general para el acoplamiento de Suzuki y compuestos específicos
En un tubo de presión Ace en una solución de derivado de (aza)indolilmaleimida (1 mmol) y el ácido borónico correspondiente (1,5 mmol) en dimetoxietano (3 ml) se añadieron K2CO3 (1M en agua, 3 ml), Pd(OAc)2 (2 % en moles) y ligando (2,5% en moles) bajo atmósfera de argón. El tubo de presión se equipó con una tapa de teflón y se calentó a 100 °C (control por TLC). La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con solución ac. sat. de cloruro de amonio (2 x 30 mL) y agua. Después de secar sobre Na2SO4 y eliminación del disolvente al vacío, el producto de acoplamiento se aisló mediante cromatografía en columna en heptano/acetato de etilo.
Ejemplo 2.4
1 -Metil-3-(2-metil-1 H-indol-3-il)-4-(4-vinilfenil)-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000012_0001
Cristales rojo anaranjado; 1H RMN (CDCI3) 52,14 (s, 3H), 3,17 (s, 3H), 5,25 (dd, 1 H, J = 0,66, 10,89 Hz), 5,72 (dd, 1H, J = 0,70, 17,61 Hz), 6,63 (dd, 1H, J = 10,88, 17,62 Hz), 6,96 (m, 1H), 7,09 (m, 2H), 7,23 (m, 1H), 7,27 (m, 2H), 7,53 (m, 2H), 8,32 (s ancho, 1H); 13C RMN (CDCh) 5 13,7, 24,2, 103,0, 110,5, 115,0, 120,3, 120,5, 122,0, 126,1 (2C), 126,5, 129,5 (2C), 129,6, 132,7, 133,7, 135,7, 136,2, 136,8, 138,1, 171,2, 171,6; GC-MS (EI, 70 eV): m/z (%) 342 (100) [M+]; HRMS (EI): Calc. para C22H18O2N2 : 342,13628; encontrado: 342,13618; IR (ATR, cm-1): 3380, 3053, 2920, 1745, 1689, 1456, 1428, 1383, 1235, 990, 903., 847, 814, 741,656.
Ejemplo 2.5
1 -Metil-3-(2-metil-1 H-indol-3-il)-4-fenil-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000012_0002
Cristales rojos; 1H RMN (CDCh) 52,14 (s, 3H), 3,20 (s, 3H), 6,97 (ddd, 1H), 7,11 (m, 2H), 7,22 (ddd, 1H), 7,27 (m, 3H), 7,55 (m, 2H), 8,33 (s ancho, 1H); 13C RMN (CDCh) 513,6, 24,2, 102,8, 110,5, 120,3, 120,5, 122,0, 126,5, 128,4 (2C), 129,1, 129,3 (2C), 130,2, 133,2, 134,1, 135,7, 136,8, 171,2, 171,5; GC-MS (EI, 70 eV): m/z (%) 316 (100) [M+]; HRMS (EI): Calc. para C20H16O2N2 : 316,12063; encontrado: 316,12091; IR (ATR, cm-1): 3426, 3381, 3052, 1759, 1690, 1618, 1435, 1422, 1382, 1234, 1002, 989, 938, 786, 752, 736, 693.
Ejemplo 2.6
3-(4-Acetilfenil)-1 -metil-4-(2-metil-1 H-indol-3-il)-1 H-pirrol-2,5-diona (PDA-66)
Figure imgf000012_0003
Cristales rojos; 1H RMN (CDCh) 52,18 (s, 3H), 2,57 (s, 3H), 3,21 (s, 3H), 6,94 (ddd, 1 H, J ~ 0,99, 7,05, 8,00 Hz), 7,03 (ddd, 1H), 7,11 (ddd, 1H, J ~ 1,15, 7,05, 8,11 Hz), 7,25 (dd, 1H, J ~ 0,41, 8,11 Hz), 7,67 (ddd, 2H, J ~ 1,72, 3,63, 8,61 Hz), 7,84 (ddd, 2H, J ~ 1,85, 3,70, 8,61 Hz), 8,57 (s ancho, 1H); 13C RMN (CDCh) 5 13,8, 24,3, 26,6, 102,5, 110,7, 120,1, 120,6, 122,2, 126,2, 128,2 (2C), 129,5 (2C), 131,9, 134,9, 135,0, 135,8, 136,6, 137,6, 170,8, 171,1, 197,8; GC-MS (EI, 70 eV): m/z (%) 358 (100) [M+]; HRMS (EI): Calc. para C22H18O3N2 : 358,13119; encontrado: 358,131088; IR (ATR, cm-1): 3339, 3058, 2923, 1762, 1692, 1678, 1427, 1407, 1383, 1358, 1265, 1234, 990, 846, 817, 742.
Ejemplo 2.7
3-(2,6-Dimetilfenil -1 -metil-4-(2-metil-1 H-indol-3-il)-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000012_0004
Cristales naranjas; 1H RMN (CDCh) 51,97 (d, 3H, J = 0,88), 2,08 (s, 6H), 3,22 (s, 3H), 7,00 (ddd, 1H), 7,01 (d, 2H), 7,10 (ddd, 1H), 7,12 (ddd, 1H), 7,19 (ddd, 1H), 7,25 (ddd, 1H), 8,21 (s ancho, 1H); 13C RMN (CDCh) 5 13,2, 20,7 (2C), 24,4, 103,6, 110,3, 119,9, 120,6, 122,1, 126,8, 128,0 (2C), 128,8, 129,5, 135,4, 136,1, 136,9, 137,0 (2C), 137,1, 171,0, 171,2; GC-MS (EI, 70 eV): miz (%) 344 (100) [M+]; HRMS (EI): Calc. para C22H20O2N2 : 344.15193; encontrado: 344,15175; IR (ATR, cm-1): 3342, 2951, 1763, 1689, 1433, 1381, 1229, 987, 739, 665.
Ejemplo 2.8
3-(3-Clorofenil)-1-metil-4-(2-metil-1H-indol-3-il)-1H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000013_0001
Cristales rojos; 1H RMN (CDCI3) 52,20 (s, 3H), 3,20 (s, 3H), 6,98 (ddd, 1H, J - 1,03, 7,0, 8,03 Hz), 7,05 (d ancho, 1H, J - 7,52 Hz), 7,13 (ddd, 1H, J - 1,23, 7,0, 8,14 Hz), 7,18 (d ancho, 1H, J = 7,91 Hz), 7,25 (m, 2 H), 7,40 (ddd, 1H, J - 1,26, 2,72, 7,84 Hz), 7,62 (t ancho, 1H, J = 1,80 Hz), 8,36 (ancho, 1H); 13C RMN (CDCI3) 513,8, 24,3, 102,6, 110,6, 120,3, 120,7, 122,2, 126,2, 127,5, 129,1, 129,2, 129,6, 131,9, 132,1, 134,2, 134,3, 135,85, 137,2, 170,8, 171,1; GC-MS (IE, 70 eV): miz (%) 350 (100) [M+]; HRMS (EI): Calc. para C20H15O2N2CI: 350,08166; encontrado: 350,08115; IR (ATR, cm-1): 3350, 3068, 2909, 1764, 1689, 1433, 1383, 1235, 991,743, 735, 715, 683.
Ejemplo 2.9
3-(2,4-Diclorofenil)-1 -metil-4-(2-metil-1 H-indol-3-il)-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000013_0002
Cristales naranjas; 1H RMN (CDCI3) 52,11 (s, 3H), 3,21 (s, 3H), 6,99 (ddd, 1H, J - 1,03, 7,0, 8,03 Hz), 7,10 (ddd, 1H, J - 0,93, 7,09, 8,23 Hz), 7,18 (m, 2H), 7,19 (d, 2H, J - 1,20 Hz), 7,40 (ancho, 1H, J = 1,15 Hz), 8,41 (s ancho, 1H); 13C RMN (CDCh) 5 13,5, 24,4, 103,1, 110,6, 119,7, 120,8, 122,2, 126,7, 127,3, 128,5, 130,1, 132,1, 132,4, 134,7, 135,5, 137,5, 137,6, 170,1, 170,6; GC-MS (EI, 70 eV): miz (%) 384 (100) [M+]; HRMS (EI): Calc. para C20H14O2N2Cl2: 384,04268; encontrado: 384,04261; IR (ATR, cm-1): 3358, 3064, 2949, 1756, 1687, 1436, 1386, 1228, 992, 857, 810, 778, 741,673, 666.
Ejemplo 2.10
1 -Metil-3-(2-metil-1 H-indol-3-il)-4-(tiofen-3-il)-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000013_0003
Cristales rojos; 1H RMN (CDCh) 52,27 (s, 3H), 3,18 (s, 3H), 7,01 (ddd, 1H, J - 1,07, 7,07, 8,05 Hz), 7,12 (ddd, 1H), 7,137 (dd, 1 H, J - 3,02, 5,15 Hz), 7,14 (ddd, 1H), 7,19 (dd, 1H, J = 1,22, 5,17 Hz), 7,25 (dt, 1H, J = 0,91, 8,06 Hz), 8,11 (dd, 1 H, J = 1,24, 2,95 Hz), 8,42 (s ancho, 1H); 13C RMN (CDCh) 5 13,5, 24,2, 102,9, 110,6, 120,1, 120,5, 122,0, 125,1, 126,7, 127,5, 129,2, 130,0, 130,2. 130,5, 135,7, 136,7, 171,5, 171,6; GC-MS (EI, 70 eV): miz (%) 322 (100) [M+]; HRMS (EI): Calc. para C18H14O2N2S: 322,07705; encontrado: 322,07631; IR (ATR, cm-1): 3391, 3102, 1756, 1689, 1624, 1438, 1410, 1382, 1334, 1228, 1071,1003, 989, 820, 804, 790, 752, 737, 653.
Ejemplo 2.11
1 -Metil-3-(2-metil-1 H-indol-3-il)-4-(piridin-4-il)-1 H-pirrol-2,5-diona
Cristales rojos; 1H RMN (CDCI3) 52,28 (s, 3H), 3,21 (s, 3H), 6,97 (m, 2H), 7,14 (ddd, 1H, J - 3,58, 4,69, 8,23 Hz), 7,30 (dt, 1 H, J -0,7, 8,15 Hz), 7,46 (2dd, 2H, J - 1,59, 4,57 Hz), 8,53 (2dd, 2H, J - 1,57, 4,62 Hz), 8,71 (s ancho, 1H); 13C RMN (CDCh) 514,1,24,4, 102,5, 110,8, 120,3, 120,9, 122,5, 123,3 (2C), 125,9, 139,9, 135,9, 136,5, 137,9, 138,1, 149,8 (2C), 170,3, 170,6; GC-MS (EI, 70 eV): m/z (%) 317 (100) [M+]; HRMS (EI): Calc. para C19H15O2Ne3: 317,11588; encontrado: 317,11635; IR (ATR, cm-1): 3342, 2923, 1765, 1694, 1456, 1428, 1383, 1237, 990, 813, 742, 656.
Ejemplo 2.12
1 -Metil-3-(2-metil-1 H-indol-3-il)-4-(naftalen-2-il)-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000014_0001
Cristales rojos; 1H RMN (CDCh) 52,09 (s, 3H), 3,24 (s, 3H), 6,95 (ddd, 1H, J - 1,04, 7,14, 8,12 Hz), 7,11 (ddd, 1H, J - 1,11,7,13, 8,18 Hz), 7,20 (dd, 1H, J - 0,5, 8,12 Hz), 7,25 (dd, 1H, J - <0,5, 8,07 Hz), 7,44 (dd, 1H, J - 1,68, 8,58 Hz), 7,48 (m, 2H), 7,59 (d ancho, 1H, J - 8,71 Hz), 7,74 (m, 1 H), 7,83 (m, 1H), 8,33 (s ancho, 2H); 13C RMN (CDCh) 5 13,7, 24,3, 103,1, 110,5, 120,4, 120,6, 122,1, 125,8, 126,3, 126,8, 127,1, 127,6, 127,7, 127,8, 128,9, 130,0, 133,0, 133,18, 133,22, 133,8, 135,7, 136,9, 171,2, 171,6; GC-MS (EI, 70 eV): m/z (%) 366 (100) [M+]; HRMS (EI): Calc. para C24H18O2N2 : 366,13628; encontrado: 366,13581; IR (ATR, cm-1): 3345, 3055, 2946, 1759, 1689, 1425, 1381, 1226, 989, 816, 737, 660.
Ejemplo 2.13
3-(2,5-Dimetoxifenil)-1 -metil-4-(2-metil-1 H-indol-3-il)-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000014_0002
Cristales de color naranja intenso; 1H RMN (CDCh) 52,05 (s, 3H), 3,19 (s, 3H), 3,36 (s, 3H), 3,66 (s, 3H), 6,75 (ancho d, 1H, J - 8,79 Hz), 6,81 (ancho, 1H, J - 2,57 Hz), 6,84 (dd, 1H, J - 3,05, 8,80 Hz), 6,94 (ddd, 1H, J - 1,13, 7,08, 8,02 Hz), 7,05 (ddd, 1H, J - 1,07, 7,15, 8,02 Hz), 7,14 (d ancho, 1H, J - 8,11 Hz), 7,18 (d ancho, 1H, J = 7,94 Hz), 8,38 (s ancho, 1H); 13C RMN (CDCh) 5 13,3, 24,2, 55,78, 55,84, 104,0, 110,2, 112,7, 115,9, 116,2, 119,9, 120,3, 120,6, 121,8, 127,0, 133,3, 135,5, 135,6, 136,6, 151,9 (2C), 153,4 (2C), 171,0, 171,3; GC-MS (EI, 70 eV): m/z (%) 376 (100) [M+]; HRMS (EI): Calc. para C22H20O4N2 : 376,14176; encontrado: 376,14113; IR (ATR, cm-1): 3338, 2924, 1750, 1689, 1427, 1383, 1273, 1237, 1212, 1049, 1018, 997, 823, 760, 746, 724, 667.
Ejemplo 2.14
1 -Metil-3-(2-metil-1 H-indol-3-il)-4-(2-(trifluorometil)fenil)-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000014_0003
Cristales naranjas; 1H RMN (acetona-d6) 52,20 (s, 3H), 3,11 (s, 3H), 6,86 (ddd, 1H, J - 1,06, 7,13, 8,07 Hz), 7,00 (ddd, 1 H, J - 1,16, 7,16, 8,13 Hz), 7,19 (ancho, 1H, J - 7,95 Hz), 7,27 (ddd, 1H), 7,37 (m, 1H), 7,55 (m, 2H), 7,76 (m, 1H), 10,55 (s anchos, 1H); 13C RMN (acetona-de) 5 13,1, 24,1, 102,3 (d, J = 4,55 Hz), 111,2 (d, J = 5,13 Hz), 120,0, 120,2, 121,9, 124,9 (q, J = 272,93 Hz), 127,7 (q, J = 4,42 Hz), 127,9 (d, J = 3,68 Hz), 129,6 (q, J = 30,37 Hz), 129,9 (d, J = 1,79 Hz), 130,0, 132,5 (2C), 135,4, 136,5 (d, J= 15,20 Hz), 137,5, 138,4 (d, J = 14,52 Hz), 170,87, 170,93; 19F RMN (CDCh) 5 -57,57 (s); GC-MS (EI, 70 eV): m/z (%) 384 (100) [M+]; HRMS (EI): Calc. para C21H15O2N2F3 : 384.10801; encontrado: 384,10765; IR (ATR, cm-1): 3365, 3080, 1768, 1694, 1445, 1385, 1315, 1163, 1118, 1036, 991,764, 742, 657.
Ejemplo 2.15
3-(4-Fiuorofenii)-1 -metil-4-(2-metil-1 H-indol-3-il)-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000015_0001
Cristales naranjas; 1H RMN (CDCis) 52,21 (s, 3H), 3,20 (3, 3H), 6,96 (m, 3H), 7,03 (dd, 1 H, J - 0,35, 7,75 Hz), 7,12 (ddd, 1H, J - 1,24, 6,93, 8,13 Hz), 7,25 (ddd, 1H), 7,59 (ddt, 2H, J - 2.90, 5.50, 8.48 Hz), 8,35 (s ancho, 1H); 13C RMN (CDCl3) 513,7, 24,2, 102,6, 110,6, 115,4, 115,7, 120,2, 120,6, 122,1, 126,22 (d, J - 3,60 Hz), 126,3, 131,4, 131,5, 132,87 (d, J - 1,07 Hz), 132,0, 135,8, 136,9, 162,89 (d, J = 251,81 Hz), 171,1, 171,5; 19F RMN (CDCb) 5 -109,8 (s); HRMS (EI): Calc. para C20H15O2N2F: 334,11121; encontrado: 334,11137; IR (ATR, cm-1): 3380, 3042, 1755, 1700, 1600, 1508, 1458, 1427, 1379, 1232, 1159, 996, 841,813, 750, 731,657.
Ejemplo 2.16
3-(5-Acetil-2-fluorofenil)-1 -metil-4-(2-metil-1 H-indol-3-il)-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000015_0002
Cristales de color rojo oscuro; 1H RMN (acetona-d6) 52,29 (s, 3H), 2,49 (s, 3H), 3,12 (s, 3H), 6,80 (ddd, 1 H, J -1,06, 7,15, 8,37 Hz), 7,00 (m, 2H), 7,16 (dd, 1H, J = 8,69, 9,51 Hz), 7,30 (dd, 1H, J = 0,82, 8,69 Hz), 8,01 (ddd, 1H, J = 2,34, 4,90, 8,57 Hz), 8,17 (dd, 1H, J = 2,23, 6,79 Hz), 10,65 (s ancho, 1H); 13C RMN (acetona-de) 5 13,4, 24,1, 26,3, 103,5, 111,4, 116,6 (d, J = 22,4 Hz), 119,9, 120,1 (d, J = 16,2 Hz), 120,4, 122,0, 127,4, 128,7 (d, J = 2,5 Hz), 131,8 (d, J = 9,6 Hz), 133,0 (d, J = 4,6 Hz), 134,2 (d, J = 3,4 Hz), 136,7, 138,4, 138,9, 163,4 (d, J = 259,4 Hz), 170,6, 170,8, 195,9; 19F RMN (acetona-de) 5 -102,9 (m); GC-MS (EI, 70 eV): m/z (%) 376 (100) [M+]; HRMS pos. (ESI): Calc. para [m +H]+, C22H18FN2O3 : 377.1296; encontrado: 377,1302; HRMS pos. (ESI): Calc. para [M+Na]+, C22H17FN2NaO3: 399,11154; encontrado: 399,11152; IR (ATR, cm-1): 3351, 1689, 1645, 1602, 1439, 1386, 1353, 1250, 1223, 828, 778, 742, 630, 568, 436, 408.
Ejemplo 2.17
N-(4-(1-Metii-4-(2-metii-1H-indoi-3-ii)-2!5-dioxo-2!5-dihidro-1H-pirroi-3-ii)fenii)acetamida
Figure imgf000015_0003
Cristales naranjas; 1H RMN (acetona-d6) 52,05 (s, 3 H), 2,27 (s, 3 H), 3,07 (s, 3 H), 6,83 (ddd, 1 H, J - 0,98, 6,93, 8,06 Hz), 7,00 (d, 1 H, J = 7,60 Hz), 7,02 (ddd, 1H), 7,32 (ddd, 1H, J - 1,00, 2,09, 7,76 Hz), 7,53 (m, 4H), 9,27 (s ancho, 1H), 10,59 (s ancho, 1H); 13C RMN (acetona-d6) 513,3, 23,8, 24,0, 103,0, 111,3, 118,8 (2C), 120,1, 120,5, 121,8, 125,9, 127,2, 130,6 (2C), 132,6, 133,8, 136,9, 137,9, 140,7, 168,8, 171,4, 171,9; GC-MS (EI, 70 eV): m/z (%) 373 (100) [m+]; HRMS pos. (ESI): Calc. para [M+H]+, C22H20N3O3 : 374,14992; encontrado: 374,15012; HRMS pos.
(ESI): Calc. para [M+Na]+, C22H1sN3NaO3: 396,13186; encontrado: 396,13226; IR (ATR, cm-1): 3379, 1675, 1582, 1505, 1424, 1403, 1386, 1365, 1310, 1237, 1179, 851,815, 750, 653, 585, 567, 556, 532, 434, 379.
Ejemplo 3: Preparación 3 - Procedimiento general para la preparación de compuestos de fórmula (II) y (III) y compuestos específicos
Etapa 1. La mezcla de compuesto de fórmula (I) (1 mmol), en donde X es N-R1 y 100 ml de KOH ac. al 10% se calentaron a 140 °C hasta que la mezcla se volvió homogénea (10 a 30 min, control por TLC). Luego, la solución se enfrió y se acidificó con HCl ac. 2 N, hasta que se formó un precipitado, el cual se recogió, se secó y se recristalizó para dar anhídrido casi cuantitativamente cíclico de fórmula (II).
Etapa 2. Se calentó el compuesto de fórmula (II) (1 mmol) con acetato de amonio (100 mmol) a 140 °C hasta que la mezcla se volvió homogénea (control por TLC). La mezcla se enfrió, se añadió agua y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los componentes orgánicos combinados se lavaron con agua, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El material bruto se cristalizó en éter. El producto de fórmula (III) se aisló mediante cromatografía en columna en heptano/acetato de etilo.
Ejemplo 3.18
3-(2-Metil-1 H-indoi-3-ii)-4-feniifuran-2,5-cíiona
Figure imgf000016_0001
Cristales rojos; 1H RMN (acetona-d6) ó 2,31 (s, 3H), 6,86 (ddd, 1H, J - 1,03, 7,06, 8,08 Hz), 7,02 (ddd, 1H), 7,07 (ddd, 1H, J - 1,14, 7,17, 8,21 Hz), 7,36 (m, 4H), 7,60 (m, 2H), 10,83 (s ancho, 1H); 13C RMN (acetona-d6) 513,4, 102,2, 111,6, 120,6 (2C), 122,4, 126,7, 128,9 (2C), 129,9 (2C), 130,2, 130,4, 134,9, 136,1, 136,9, 139,7, 166,1, 166,3; GC-MS (EI, 70 eV): m/z (%) 303 (52) [M+]; HRMS (EI): Calc. para C19H13O3N: 303,08899; encontrado: 303.08861; IR (ATR, cm-1): 3350, 2921, 2852, 1825, 1749, 1618, 1456, 1423, 1252, 902, 741, 726, 693, 671, 635, 622, 564, 531.
Ejemplo 3.19
3-(2-Metil-1 H-indol-3-il)-4-fenil-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000016_0002
Cristales rojos; 1H RMN (acetona-de) 52,24 (s, 3H), 6,83 (ddd, 1H, J - 1,01, 7,08, 8,01 Hz), 7,02 (ddd, 1H), 7,03 (d, 1H, J = 7,58 Hz), 7,27 (m, 3H), 7,31 (ddd, 1H), 7,54 (m, 2H), 9,83 (s ancho, 1H), 10,56 (s ancho, 1H); 13C RMN (acetona-de) 5 13,2, 102,8, 111,2, 120,1, 120,5, 121,8, 127,3, 128,6 (2C), 129,3, 130,0 (2C), 131,3, 134,8, 134,9, 136,8, 138,0, 171,7, 172,2; GC-MS (EI, 70 eV): m/z (%) 302 (100) [M+]; HRMS (EI): Calc. para C19H14O2N2 : 302.10498; encontrado: 302,105426; IR (ATR, cm-1): 3379, 3205, 3065, 2917, 2764, 1764, 1704, 1598, 1451, 1423, 1335, 1289, 1278, 1227, 1013, 993, 770, 754, 729, 719, 690.
Ejemplo 3.20
3-(2-Metil-1H-indol-3-il)-4-(naftalen-2-il)furan-2,5-diona
Figure imgf000016_0003
Cristales naranjas; 1H RMN (CDCh) 52,30 (s, 3H), 6,81 (ddd, 1H), 7,05 (ddd, 2H), 7,37 (ddd, 1H), 7,53 (m, 3H), 7,75 (d, 1H, J - 8,62 Hz), 7,87 (m, 2H), 8,36 (s, 1H), 10,86 (s, 1H); 13C RMN (CDCh) 513,3, 102,5, 111,6, 120,6, 120,7, 122,4, 126,0, 126,9, 127,2, 127,7, 128,16, 128,24, 128,4, 129,3, 130,7, 133,5, 134,1, 134,7, 136,1, 136,9, 139,9, 166,1, 166,4; EM (EI): m/z (%) 353 (650) [M+]; HRMS pos. (ESI): Calc. para [M H]+, C23H16NO3 : 354,11247; encontrado: 354,11221; HRMS pos. (ESI): Calc. para [M+Na]+, C23H15NNaO3: 376.09441; encontrado: 376,09419; IR (ATR, cm-1): 3366, 2926, 1757, 1460, 1428, 1259, 1242, 1222, 1158, 910, 784, 766, 737, 590, 554, 475.
Ejemplo 3.21
3- (2-Metil-1H-indol-3-il) -4- (naftalen-2-il) -1H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000016_0004
Cristales naranjas; 1H RMN (acetona-d6) 52,24 (s, 3H), 6,77 (ddd, 1H, J - 1,04, 7,12, 8,07 Hz), 7,00 (ddd, 1H, J -1,15, 7,10, 8,07 Hz), 7,08 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,33 (ddd, 1H, J - 0,85, 8,08), 7,48 (m, 3H), 7,66 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,80 (m, 1H), 7,84 (m, 1H), 8,30 (d, 1H, J = 0,72 Hz), 9,90 (s ancho, 1H), 10,60 (s ancho, 1H); 13C RMN (acetona-d6) 5 13,3, 103,1, 111,3, 120,2, 120,5, 121,9, 126,6, 126,9, 127,5 (2C), 128,0, 128,1, 128,9, 129,1, 130,4, 133,6, 133,7, 134,5, 135,0, 136,8, 138,3, 171. 7, 172,3 ; EM (EI): m/z (%) 352 (100) [M+]; HRMS (EI): Calc. para C23H16O2N2 : 352,12063; encontrado: 352,120553; IR (ATR, cm-1): 3379, 3209, 3062, 2959, 2925, 2738, 1762, 1702, 1621, 1457, 1426, 1329, 1290, 1222, 1034, 993, 858, 826, 786, 754, 742, 715, 670, 662.
Ejemplo 3.22
3-(4-Acetilfenil)-4-(2-metil-1H-indol-3-il)furan-2,5-diona
Figure imgf000017_0001
Cristales rojo anaranjado; 1H RMN (CDCh) 52,33 (s, 3H), 2,56 (s, 3H), 6,86 (ddd, 1H, J - 1,0, 7,04, 8,08 Hz), 6,99 (d ancho, 1H, J - 8,0 Hz), 7,07 (ddd, 1H, J - 1,22, 7,02, 8,12 Hz), 7,34 (ddd, 1H, J - 0,80, 0,84, 8,10), 7,72 (ddd, 2H), 7,94 (ddd, 2H), 10,98 (s ancho, 1H); 13C RMN (CDCh) 513,5, 26,4, 102,3, 111,7, 120,6, 120,8, 122,5, 126,5, 128,6 (2C), 130,1 (2C), 133,3, 134,5, 136,9, 137,5, 138,0, 140,4, 165,9, 166,0, 197,2; GC-MS (EI, 70 eV): m/z (%) 345 (87) [M+]; HRMS (EI): Calc. para C21H15O4 N: 345,09956; encontrado: 345,09942; IR (ATR, cm-1): 3233, 2921, 2852, 1759, 1671, 1460, 1252, 1186, 1112, 924, 831,747, 731,628, 591,578, 516, 456, 434, 416.
Ejemplo 3.23
3-(4-Acetilfenil)-4-(2-metil-1 H-indol-3-il)-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000017_0002
Cristales naranjas; 1H RMN (acetona-d6) 52,28 (s, 3H), 2,53 (s, 3H), 6,82 (ddd, 1H, J - 1,03, 7,07, 8,03 Hz), 6,99 (d ancho, 1H, J - 7,40 Hz), 7,02 (ddd, 1H, J - 1,12, 7,07, 8,11 Hz), 7,33 (ddd, 1H, J - 0,81,0,95, 8,08), 7,66 (ddd, 2H), 7,87 (ddd, 2H), 9,93 (s ancho, 1H), 10,67 (s ancho, 1H); 13C RMN (acetona-de) 513,4, 26,4, 102,8, 111,4, 120,3, 120,5, 122,0, 127,1, 128,4 (2C), 130,2 (2C), 133,3, 135,9, 136,3, 136,9, 137,2, 138,7, 171,4, 171,8, 197,2; GC-MS (EI, 70 eV): m/z (%) 344 (100) [M+]; HRMS (EI): Calc. para C21H16O3N2 : 344,11554; encontrado: 344,11495; IR (ATR, cm-1): 3343, 3296, 3057, 1757, 1699, 1676, 1428, 1343, 1262, 1230, 740, 666, 638, 595, 460, 409.
Ejemplo 3.24
3-(4-Acetilfenil)-4-( 1,2-dimetil-1 H-indol-3-il)-1 -metil-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000017_0003
Cristales de color rojo oscuro; 1H RMN (DMSO-d6) 52,18 (s, 3H), 2,52 (s, 3H), 3,03 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 6,84 (ddd, 1H), 6,93 (d ancho, 1H, J - 7,54 Hz), 7,08 (ddd, 1H, J - 1,06, 7,08, 8,14 Hz), 7,45 (ancho, 1H, J - 8,25 Hz), 7,56 (ancho, 2H, J - 8,50 Hz), 7,86 (ancho, 2H, J - 8,50 Hz); 13C RMN (DMSO-de) 512,3, 24,2, 26,8, 29,9, 101,3, 109,9, 119,7, 119,9, 121,3, 125,1, 128,1 (2C), 129,3 (2C), 131,6, 134,6, 135,1, 136,2, 137,1, 139,6, 170,4, 170,7, 197,5; GC-MS (EI, 70 eV): m/z (%) 372 (100) [M+]; HRMS pos. (ESI): Calc. para [M+H]+, C23H21N2O3 : 373,15467; encontrado: 373,15473; IR (ATR, cm-1): 3433, 2915, 1759, 1680, 1599, 1433, 1404, 1382, 1359, 1265, 1240, 957, 849, 829, 749, 738, 726, 595, 546, 439.
Ejemplo 3.25
3-(4-Acetilfenil)-1 -metil-4-( 1 H-pirrolo [2,3-b] piridin-3-il)-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000018_0001
Cristales amarillos; 1H RMN (DMSO-de) 52,57 (s, 3H), 3,04 (s, 3H), 6,66 (dd, 1H, J - 0,89, 8,00 Hz), 6,80 (dd, 1H, J - 4,74, 7,96 Hz), 7,55 (ancho, 2H, J - 8,27 Hz), 7,93 (ancho, 2H, J - 8,20 Hz), 8,11 (s, 1H), 8,18 (ancho, 2H, J -3,70 Hz), 12,55 (ancho s, 1H); 13C RMN (DMSO-d6) 524,1,26,8, 102,8, 116,28, 116,34, 128,0 (2C), 128,4, 129,1, 129,9 (2C), 131,8, 132,5, 134,8, 136,5, 143,7, 149,0, 170,6, 170,8, 197,5; GC-MS (EI, 70 eV): m/z (%) 345 (100) [M+]; HRMS pos. (ESI): Calc. para [M+H]+, C20H16N3O3 : 346,11862; encontrado: 346,11828; IR (ATR, cm-1): 3025, 2873, 2817, 1756, 1695, 1677, 1440, 1421,1385, 1289, 1269, 1229, 1090, 814, 776, 750, 645, 596, 514.
Ejemplo 4: Ensayo de actividad quinasa GSK3p
El ensayo de actividad quinasa se realizó como se describió previamente por Schmole et. al., 2010 (Schmole et al., 2010, Novel indolylmaleimide acts as GSK-3beta inhibitor in human neural progenitor cells. Bioorganic medicinal chemistry, 18, 6785-95). Brevemente, se incubó GSK3P humana recombinante (Biomol, Hamburgo, Alemania) con su sustrato fosfo glucógeno sintasa péptido 2 (pGS2) (Millipore, Billerica, EE.UU.), ATP (Cell Signalling, Frankfurt am Main, Alemania) y diferentes concentraciones de PDA-66 durante 30 min a 30 °C. Después de la adición de Kinase-Glo (Promega, Mannheim, Alemania) y 10 min de incubación a temperatura ambiente, se midió la señal de luminiscencia con un lector de microplacas Glomax 96 (Promega). Más específicamente, se incubó GSK3P humana recombinante con pGS2, ATP y diferentes concentraciones de PDA-66. La actividad quinasa se inhibió significativamente a concentraciones entre 0,25 ^ y 1 ^ de PDA-66. Los resultados se muestran como la media ± DE de dos experimentos independientes. En cada uno de los experimentos, las concentraciones de PDA-66 y el control se testaron con 8 repeticiones. * Efecto significativo del tratamiento frente al control con DMSO, a = 0,05.
PDA-66 inhibe la actividad quinasa de GSK3fi recombinante
El efecto de PDA-66 sobre la actividad enzimática de GSK3P se determinó mediante la incubación de la enzima con un sustrato específico, PDA-66 y ATP. Con un efecto inhibidor creciente, hay más ATP presente después de la incubación. En una segunda etapa, el ATP restante se convierte en una señal de luminiscencia, que es inversamente proporcional a la actividad enzimática. El análisis de la actividad quinasa de GSK3P en el estudio de los autores de la invención muestra una relación dosis-respuesta en forma de campana (Fig 1). La incubación con 0,25 - 1 ^ de PDA-66 condujo a un aumento significativo de la señal de luminiscencia y, por tanto, a una inhibición de la enzima, mientras que 10 ^ parece potenciar la actividad enzimática.
Ejemplo 5: Tratamiento de líneas celulares de ALL con PDA-66
Las líneas celulares de B-ALL humana SEM, RS4; 11 y las líneas celulares T-ALL humana Jurkat y Molt-4 se adquirieron en DSMZ (Alemania) y se cultivaron según el protocolo del fabricante. El medio correspondiente se complementó con suero bovino fetal inactivado por calor al 10% (PAA, Pasching, Austria) y penicilina y estreptomicina al 1% (Biochrom AG, Berlín, Alemania). Las células Molt-4 se cultivaron con medio complementado con suero bovino fetal inactivado por calor al 20%. Todas las células se mantuvieron a 37 °C en 5% de CO2. Células (5x105/pocillo) se sembraron en placas de 24 pocillos (Nunc, Langenselbold, Alemania) y se incubaron durante 72 h con PDA-66. Las células tratadas se recolectaron después de 4, 24, 48 y 72 h y se usaron para análisis adicionales.
Los recuentos de células se determinaron usando la tinción con azul tripán. La actividad metabólica se analizó utilizando el compuesto de tetrazolio WST-1 (Roche, Mannheim, Alemania). En resumen, triplicados de células (5x104/pocillo) se sembraron en placas de 96 pocillos, se trataron con PDA-66 y se incubaron con 15 ^ de WST-1 durante hasta 4 h. Las deshidrogenasas mitocondriales reducen el WST-1 a formazán soluble y provocan un cambio de color, que se correlaciona con la cantidad de células metabólicamente activas. La absorbancia a 450 nm y una longitud de onda de referencia a 620 nm se determinaron mediante un lector ELISA (Anthos, Krefeld, Alemania). La absorbancia del medio de cultivo con WST-1 complementado en ausencia de células se utilizó como control de fondo.
PDA-66 inhibe la proliferación y la actividad metabólica de células de ALL
La influencia de PDA-66 sobre la proliferación en líneas celulares de ALL SEM, RS4; 11, Jurkat y Molt-4 se analizó mediante incubación con diferentes concentraciones del fármaco (0,001 ^ a 10 ^ ) . La actividad metabólica se determinó usando el ensayo WST-1. La proliferación y la actividad metabólica de todas las líneas celulares se suprimieron significativamente a concentraciones más altas. Los resultados se muestran como la media ± DE de tres experimentos independientes. *Efecto significativo del tratamiento frente al control con DMSO, a = 0,05. Los resultados se resumen en la Fig.2, en la que las nueve barras individuales para cada uno de los conjuntos de experimentos representan, de izquierda a derecha, DMSO, 0,001 pM, 0,01 pM, 0,1 pM, 0,25 pM, 0,5 pM, 1,0 pM, 5 pM y 10 pM. Después de 48 h de incubación se pudo observar una inhibición de la proliferación, pero fue más clara después de 72 h. Hubo una inhibición significativa después de 72 h en todas las líneas celulares a una concentración de PDA-660,5 pM.
Se pudieron detectar resultados similares en el ensayo WST-1. Después de 72 h de incubación, la actividad metabólica disminuyó significativamente en todas las líneas celulares a una concentración de PDA-660,5 pM. A esta concentración, la actividad metabólica disminuyó a 35,7 ± 8,3 % en células SEM, 33,3 ± 4,4% en células RS4;11, 66.7 ± 8% en células Jurkat y 35,5 ± 17% en células Molt-4 en comparación con las células de control tratadas con DMSO. En el ensayo WST-1, se determinaron las concentraciones de CI50 para PDA-66 en las cuatro líneas celulares (Tabla 1). Los valores de CI50 oscilan entre 0,41 pM en células SEM y 1,28 pM en células Jurkat después de 72 h de incubación.
La incubación de las líneas celulares de ALL con dosis más altas de PDA-66 (0,5 pM o más) condujo a una disminución en el número de células, es decir, por debajo de la cantidad de células sembradas (5x105). Este resultado indica no solo una influencia sobre la proliferación, sino también una inducción de la muerte celular.
Ejemplo 6: Tinción de May Grunwald-Giemsa
Citospins de células SEM y Jurkat se tiñeron con tinción de May Grunwald-Giemsa después de 48 h de incubación con 1 pM de PDA-66 y DMSO, respectivamente.
Después del tratamiento con PDA-66 1 pM, 3x104 células se colocaron en portaobjetos con una centrífuga Cytospin 3 (Shandon, Frankfurt/Main, Alemania). Posteriormente, las células se tiñeron usando tinción de May-Grunwald-Giemsa. Brevemente, los portaobjetos se incubaron en solución de May-Grunwald (Merck, Darmstadt, Alemania) durante 6 min, luego se lavaron con agua del grifo, se incubaron en solución de Giemsa (Merck, Darmstadt, Alemania) durante 20 min y se lavaron nuevamente con agua del grifo. Después de dejar secar los portaobjetos, las células se analizaron con el microscopio óptico Nikon Eclipse E 600 y se tomaron fotografías con el software NIS Elements (Nikon, Düsseldorf, Alemania).
PDA-66 influye en la morfología de las células de ALL
El análisis mediante microscopía óptica mostró una influencia en la morfología de las cuatro líneas celulares. Después del tratamiento, se pudo observar una mayor cantidad de células con condensación de cromatina (flecha negra a en la Fig. 3) y cariorrexis (flecha negra b en la Fig. 3) junto con más detritos celulares. En contraste con las células de control tratadas con DMSO, la incubación de PDA-66 condujo a la condensación de cromatina en el núcleo, cariorrexis y una cantidad creciente de vacuolas y detritos celulares después de 48 h de tratamiento (Fig. 3). La cromatina condensada podría indicar la inducción de apoptosis por un lado o la detención del ciclo celular por otro.
Ejemplo 7: Análisis del ciclo celular
Después del tratamiento, las células se recogieron y se lavaron dos veces en PBS. Las células se fijaron con etanol al 70% y se incubaron con 1 mg/ml de ribonucleasa A (Sigma-Aldrich, St. Louis, EE.UU.) durante 30 min a 37 °C. Después de lavar las células dos veces en PBS, se tiñeron con PI (50 pg/ml) y se determinó el contenido de ADN mediante citometría de flujo. Todas las líneas celulares se incubaron con PDA-66 y se determinó la distribución del ciclo celular usando tinción con yoduro de propidio.
El tratamiento con PDA-66 influyó de forma diferente en las cuatro líneas celulares. Los resultados se muestran en la Fig. 4, en la que las cuatro barras individuales para cada uno de los conjuntos de experimentos representan, de izquierda a derecha, DMSO, 0,25 pM, 0,5 pM y 1,0 pM. La detención de G2 se pudo detectar en células RS4;11 y Molt-4 después de 48 h de tratamiento. El tratamiento de las células Jurkat indujo una disminución de las células en la fase G0/G1 a favor de las células en la fase S. Los resultados se muestran como la media ± DE de tres experimentos independientes. * Efecto significativo del tratamiento frente al control con DMSO, a = 0,05.
Células SEM mostraron un aumento significativo en la cantidad de células en G0/G1 después de 48 h de incubación con 0,5 pM (control DMSO: 62,8 ± 2,8%; 0,5 pM PDA-66: 69,3 ± 2,7%), mientras que 1 pM no afectó significativamente al ciclo celular. Las células RS4;11 y Molt-4 se caracterizaron por una detención de G2 significativa 48 h después del tratamiento con PDA-66 1 pM. La cantidad de células RS4;11 y Molt-4 en la fase G2 aumentó de 20,1 ± 3,9% y 21,9 ± 4,9% después de la incubación con DMSO a 42,1 ± 4,4% y 41,0 ± 5,8% después del tratamiento con PDA-66. Esto se asoció con una disminución significativa en la fase G0/G1 (RS4;11 y Molt-4: 65.7 ± 2,1% y 63,7 ± 6,6% en el control; 47,3 ± 2,7% y 45,0 ± 7,3% después del tratamiento con 1 pM de PDA-66). Por otro lado, dosis más pequeñas condujeron a un aumento significativo de células en la fase G0/G1. Las células Jurkat mostraron una disminución significativa en la fase G0/G1 (de 60,0 ± 3,7% en control a 47,3 ± 4,3% con PDA-66) y un aumento en la fase S (de 14,6 ± 1,5% en control a 20,0 ± 1,1% con PDA-66) después de la incubación con PDA-661 pM.
Ejemplo 8: Análisis de apoptosis y necrosis
La apoptosis y la necrosis se analizaron tiñendo las células con Anexina V FITC (BD Biosciences, Heidelberg, Alemania) y yoduro de propidio (PI) (Sigma Aldrich, St. Louis, EE.UU.). Los resultados se evaluaron mediante citometría de flujo.
(A) Las células se trataron con PDA-66 durante un máximo de 72 h y se tiñeron con Anexina V FITC y yoduro de propidio (PI). Tasas de apoptosis temprana (FITC+, PI-) y células apoptóticas tardías y necróticas (FITC+, PI+) se midieron mediante citometría de flujo. Se pudo observar una inducción significativa de apoptosis en todas las líneas celulares después de 48 h de incubación, así como una inducción tendencial de necrosis en ambos puntos de tiempo. Los resultados se muestran como la media ± DE de tres experimentos independientes. * Efecto significativo del tratamiento frente al control con DMSO, a = 0,05.
(B) La inducción de apoptosis fue confirmada por transferencia Western. Las células se trataron con diferentes concentraciones de PDA-66 y los lisados celulares totales (25 pg) se analizaron mediante transferencia Western para detectar la escisión de Caspasa 3, 7 y PARP. Se utilizó GAPDH como control de carga. Se muestran resultados ejemplares de células SEM.
Más específicamente, 5x105 células se recolectaron y lavaron dos veces (180 g, 10 min, 4 °C) con PBS. Después de resuspender las células en 100 pl de tampón de unión (1x), se añadieron 4 pl de Anexina V FITC y se incubaron durante 15 min a temperatura ambiente. Después de la adición de 400 pl de tampón de unión para un volumen final de 500 pl, las células se tiñeron con PI (0,6 pg/ml) inmediatamente antes de la medición. Como controles, se incluyeron en cada experimento células sin teñir y teñidas individuales. Las mediciones se realizaron utilizando FACSCalibur (Becton and Dickinson, Heidelberg, Alemania) y los análisis de datos se llevaron a cabo con el software CellQuest (Becton and Dickinson, Heidelberg, Alemania).
PDA-66 induce apoptosis
Además, el efecto de PDA-66 sobre la apoptosis se determinó mediante transferencia Western. Para la extracción de proteínas, las células se lavaron dos veces en PBS y se lisaron con tampón RIPA (Tris HCl 50 mM, pH 7,4; NaCl 150 mM; SDS al 0,1% y NP40 al 1%), incluidos inhibidores de proteasa y fosfatasa (Roche Applied Science, Mannheim, Alemania). Las muestras se incubaron durante 20 min a 4 °C y se congelaron a -20 °C. Los extractos celulares se descongelaron y centrifugaron a 12000 g durante 10 min a 4 °C. La concentración de proteína total de los sobrenadantes se determinó usando el Ensayo de Proteínas de Bio-Rad (Bio-Rad, München, Alemania).
Se separaron cantidades iguales de muestras de proteína mediante electroforesis en gel de poliacrilamida-SDS (8% o 15%) y se transfirieron a una membrana de PVDF (Amersham Biosciences, Buckinghamshire, Reino Unido). Las membranas se bloquearon en leche al 5% o BSA al 5% y se incubaron a 4 °C durante la noche con los siguientes anticuerpos policlonales: caspasa 3 anti-escindida de conejo, anti-caspasa 3 de conejo, PARP anti-escindida de conejo, caspasa 7 anti-escindida de conejo, anti-caspasa 7 de conejo (todas de Cell Signaling Frankfurt/Main, Alemania). Los borrones se incubaron con anti-GAPDH de ratón (Invitrogen, Carlsbad, EE.UU.) como control de carga. Se utilizaron anticuerpos secundarios específicos conjugados con peroxidasa de rábano picante (anti-ratón o anti-conejo) Las señales se detectaron con el reactivo ECL Plus (Amersham Biosciences; Buckinghamshire, Reino Unido) y una cámara CCD (Kodak Digital Sience Image Station 440CF, Rochester, EE. UU.).
Después de 48 h de incubar las células con 1 pM de PDA-66, todas las líneas celulares mostraron un aumento significativo en la apoptosis en comparación con las células de control (SEM: 2,1 ± 0,9% a 10,5 ± 1,3%; RS4; 11: 2,5 ± 0,7% a 7,4 ± 1,1%; Jurkat: 3,8 ± 0,6% a 8,3 ± 1,9%; Molt-4: 3,7 ± 1,2% a 16,3 ± 5,1%). Después de 72 h se pudo observar una tendencia similar, pero solo las desviaciones en las células SEM y Molt-4 fueron significativas (SEM: 1,3 ± 0,4% a 5,6 ± 1,6%; RS4; 11: 2,1 ± 0,9% a 6,4 ± 3,6%; Jurkat: 4,7 ± 1,9% a 6,1 ± 0,7%; Molt-4: 4,9 ± 1,9% a 20,1 ± 6,6%). Todas las células mostraron un aumento tendencial de la necrosis después de 48 y 72 h de incubación con PDA-66 1 pM. Después de 72 h de incubación, la tasa de necrosis aumentó en células SEM de 3,1 ± 1,6% a 27,8 ± 5,81%, en células RS4;11 de 6,1 ± 0,8% a 26,5 ± 10,2%, en células Jurkat de 5,7 ± 3,5% a 28,0 ± 13,4 % y en células Molt-4 de 11,7 ± 3,6% a 46,7 ± 15,6% (Fig. 5A, en donde las cuatro barras individuales para cada uno de los conjuntos de experimentos representan, de izquierda a derecha, DMSO, 0,25 pM, 0,5 pM y 1,0 pM) .
El análisis mediante transferencia Western mostró una inducción de la apoptosis en todas las líneas celulares. El tratamiento con PDA-66 indujo la escisión de las caspasas 3 y 7 y PARP 48 h después de la adición de PD066. En la Figura 5B, se muestran a modo de ejemplo los resultados de las células SEM.
Ejemplo 9: Influencia en la vía de PI3K/Akt y Wnt
Después del tratamiento con PDA-66 y DMSO, respectivamente, se lisaron las células y se analizó la expresión de proteínas con transferencia Western.
La extracción de proteínas y la transferencia Western se realizaron como se describió anteriormente. Se utilizaron los siguientes anticuerpos policlonales: anti-caspasa 3 escindida de conejo, anti-caspasa 3 de conejo, anti-PARP escindida de conejo, anti-PARP de conejo, caspasa 7 anti-escindida de conejo, anti-caspasa 7 de conejo, anti pAktThr308 de conejo, anti-pAktSer473 de conejo, anti-Akt de conejo, anti-p-catenina de conejo, anti-pGSK3pSer9 de conejo, anti-GSK3p de conejo, anti-p4EBP-1Ser65 de conejo y anti-4EBP-1 de conejo (todas de Cell Signaling Frankfurt/Main, Alemania). Los borrones se incubaron con anticuerpo anti-GAPDH de ratón (Invitrogen, Carlsbad, EE.UU.) como control de carga.
PDA-66 influye en la expresión de proteínas de 4EBP-1, pero no en la p-catenina o GSK3p
Para caracterizar los efectos de PDA-66 sobre la vía de PI3K/Akt y Wnt/p-catenina, los autores de la invención realizaron un análisis de transferencia Western. Como puede observarse de la Fig. 6A, no se pudo notar influencia alguna sobre la expresión de GSK3p total y la forma total de Akt. Se observó una pequeña disminución de pGSK3pSer9, pero ninguna influencia sobre la cantidad de p-catenina. Un ligero aumento de pAktThr308 no fue confirmado por un aumento de pAktSer473. Se muestran resultados ilustrativos de células SEM. Como puede observarse de la Fig. 6B, en células SEM y RS4;11 se detectó una disminución de 4 EBP-1 y p4EBP-1 Ser65, por el contrario las células Molt-4 mostraron una expresión incrementada de p4EBP-1Ser65 después del tratamiento con PDA-66.
Más específicamente, la incubación con PDA-66 no mostró influencia sobre la expresión de p-catenina, GSK3p total y Akt total (Fig. 6). Sin embargo, se pudo detectar un aumento de pAktThr308 en células s Em y Jurkat después de una incubación de 24 h, lo que no fue confirmado por un aumento de pAktSer473. Además, en las células SEM se observó una ligera disminución de pGSK3pSer9 después de 4 h. Sin embargo, no se detectó influencia alguna sobre la forma total de p-catenina. Esto no explicaría un aumento de la activación de GSK3p. Sin embargo, hubo una influencia de PDA-66 en la expresión de 4EBP-1 y p4EBP-1Ser65. Las células SEM, RS4;11 y Jurkat mostraron una disminución de la forma fosforilada y total de 4EBP-1 después de una incubación de 4 y 24 h. Por el contrario, las células Molt-4 mostraron un aumento de la forma fosforilada en estos puntos de tiempo.

Claims (13)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto de fórmula (V)
Figure imgf000022_0001
una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, un hidrato del mismo, un solvato del mismo o un profármaco del mismo; para su uso en un método para el tratamiento y/o la prevención de la leucemia, en donde,
R1 se selecciona del grupo que consiste en alquilo, cicloalquilo, arilo, arilalquilo e hidrógeno;
R4 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, arilo, heteroarilo, alquilo, cicloalquilo, polifluoroalquilo, arilalquilo y heteroarilalquilo;R5 se selecciona del grupo que consiste en alquilo, aminoalquilo, alcoxialquilo, hidroxialquilo, arilo y heteroarilo;
R6 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo y arilo; y
R7 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, acilo, formilo, cicloalquilo, arilo, haloalquilo, polifluoroalquilo, alquiltio, ariltio, monoalquilamino, dialquilamino, monoarilamino, diarilamino, alquilarilamino, alquilimido, hidroxi, alcoxi, ariloxi, carboxilo, alcoxicarbonilo, ariloxicarbonilo, ciano, amino, amido, acilamino, nitro, alquilsulfinilo, arilsulfinilo, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, alquilsulfinamido, arilsulfinamido, alquilsulfonamido y arilsulfonamido.
2. El compuesto para su uso de la reivindicación 1, en donde R5 es metilo.
3. El compuesto para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, en donde
R1 se selecciona del grupo que consiste en alquilo, hidrógeno, fenilo y bencilo,
preferiblemente R1 se selecciona del grupo que consiste en metilo, butilo e hidrógeno,
más preferiblemente R1 se selecciona del grupo que consiste en metilo e hidrógeno.
4. El compuesto para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde R7 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, metilo y metoxi.
5. El compuesto para su uso de la reivindicación 4, en donde R7 es 5-metoxi o 5-halógeno,
6. El compuesto para su uso de la reivindicación 4, en donde R7 es hidrógeno.
7. El compuesto para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en donde R4 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo y bencilo, preferiblemente R4 es hidrógeno o metilo, más preferiblemente R4 es hidrógeno.
8. El compuesto para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en donde R6 es hidrógeno o alquilo, preferiblemente hidrógeno o metilo, más preferiblemente metilo.
9. El compuesto para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en donde el compuesto se selecciona del grupo que consiste en 3-(4-acetilfenil)-1-metil-4-(2-metil-1 H-indol-3-il)-1H-pirrol-2,5-diona (también denominada en el presente documento PDA-66); y
3-(4-acetilfenil)-4-(2-metil-1 H-indol-3-il)-1 H-pirrol-2,5-diona.
10. El compuesto para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde el compuesto es 3-(4-acetilfenil)-1 -metil-4-(2-metil-1 H-indol-3-il)-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000023_0001
11. El compuesto para su uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde el compuesto es 3-(4-acetilfenil)-4-(2-metil-1 H-indol-3-il)-1 H-pirrol-2,5-diona
Figure imgf000023_0002
12. El compuesto para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en donde la leucemia se selecciona del grupo que consiste en leucemia linfoblástica aguda (ALL), leucemia mieloide aguda (AML), leucemia refractaria, leucemia resistente, leucemia FLT3-ITD-positiva, cualquier leucemia crónica, mielodisplasia y linfoma.
13. El compuesto para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, en donde el método comprende la administración de un segundo agente terapéutico, en donde el segundo agente terapéutico es un agente quimioterapéutico,
preferiblemente, el agente quimioterapéutico se selecciona del grupo que comprende citarabina, etopósido, mitoxantrón, ciclofosfamida, ácido retinoico, daunorrubicina, doxorrubicina, idarrubicina, azacitidina, decitabina, un inhibidor de tirosina-quinasa, un anticuerpo antineoplásico, alcaloides de la vinca y esteroides,
más preferiblemente, el agente quimioterapéutico es un inhibidor de tirosina-quinasa, en donde el inhibidor de tirosina-quinasa se selecciona del grupo que comprende sorafenib, dasatinib, nilotinib, nelarabina y fludarabina, o el agente quimioterapéutico es Alemtuzumab (Campath®).
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Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2928465B1 (en) 2012-12-10 2020-11-18 Centogene GmbH Use of maleimide derivatives for preventing and treating cancer
US9809539B2 (en) * 2015-03-03 2017-11-07 Shuttle Pharmaceuticals, Llc Dual function molecules for histone deacetylase inhibition and ataxia telangiectasia mutated activation and methods of use thereof
JP6793401B2 (ja) * 2015-03-11 2020-12-02 国立研究開発法人理化学研究所 難治性白血病治療薬
US11584733B2 (en) 2017-01-09 2023-02-21 Shuttle Pharmaceuticals, Inc. Selective histone deacetylase inhibitors for the treatment of human disease
CA3049435A1 (en) 2017-01-09 2018-07-12 Scott Grindrod Selective histone deacetylase inhibitors for the treatment of human disease
CA3087565A1 (en) 2018-01-09 2019-07-18 Shuttle Pharmaceuticals, Inc. Selective histone deacetylase inhibitors for the treatment of human disease

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL89167A (en) * 1988-02-10 1994-02-27 Hoffmann La Roche Substituted pyrroles, their manufacture and pharmaceutical compositions containing them
JP2844704B2 (ja) 1989-08-17 1999-01-06 正浩 入江 光学記録媒体
AU2548699A (en) * 1998-02-23 1999-09-06 Rei Asakai Cell death inhibitors
KR100916613B1 (ko) * 2000-11-07 2009-09-14 노파르티스 아게 단백질 키나제 ｃ 억제제로서의 인돌릴말레이미드 유도체
EP1362047B1 (en) 2000-12-08 2006-05-17 Ortho-McNeil Pharmaceutical, Inc. Indazolyl-substituted pyrroline compounds as kinase inhibitors
DE60315270T2 (de) * 2002-03-08 2008-04-17 Eli Lilly And Co., Indianapolis Pyrrol-2,5-dion derivate und deren verwendung als gsk-3 inhibitoren
WO2003103663A2 (en) 2002-06-05 2003-12-18 Janssen Pharmaceutica N.V. Substituted pyrrolines as kinase inhibitors
GB0303319D0 (en) 2003-02-13 2003-03-19 Novartis Ag Organic compounds
CN1274303C (zh) * 2004-07-09 2006-09-13 吕志民 一种化合物及其衍生物在制备防治癌症药物中的应用
JP5289769B2 (ja) * 2004-12-08 2013-09-11 ヨハネス、グーテンベルク−ウニフェルジテート、マインツ ３−（インドリル）−４−アリールマレイミド誘導体および脈管形成阻害剤としてのそれらの使用
WO2007008514A2 (en) 2005-07-07 2007-01-18 Georgetown University Inhibitors of glycogen synthase kinase 3
CA2707554C (en) * 2007-12-05 2015-06-30 Gerd Dannhardt Use of 3-(indolyl)-or 3-(azaindolyl)-4-arylmaleimide derivatives in leukemia management
KR101290509B1 (ko) 2009-04-14 2013-07-26 일라이 릴리 앤드 캄파니 조혈성 신생물 및 백혈병의 치료를 위한 벤조디아제핀 유도체
EP2343291A1 (en) * 2009-12-18 2011-07-13 Johannes Gutenberg-Universität Mainz 3-(Indolyl)- or 3-(Azaindolyl)-4-arylmaleimide compounds and their use in tumor treatment
EP2928465B1 (en) * 2012-12-10 2020-11-18 Centogene GmbH Use of maleimide derivatives for preventing and treating cancer

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