ES2811087T3 - Uso de agonistas de PPAR-delta para tratar la atrofia muscular - Google Patents

Abstract

Un agonista de PPARδ para usar en un método para reducir la atrofia muscular asociada al desuso en un sujeto que lo necesite, en donde el agonista de PPARδ es el ácido (E)-[4-[3-(4-Fluorofenil)-3-[4-[3-(morfolin-4-il)propinil]fenil]aliloxi]-2-metil-fenoxi] acético o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

Description

DESCRIPCIÓN

Uso de agonistas de PPAR-6 para tratar la atrofia muscular

Antecedentes de la invención

Campo de la invención

La invención se refiere a los campos de la farmacología y la medicina, y proporciona composiciones terapéuticas para usar en los métodos para tratar la atrofia muscular.

Descripción de la técnica relacionada

La atrofia muscular se refiere a la pérdida progresiva de masa muscular y/o al debilitamiento y la degeneración progresivos de los músculos, que incluyen los músculos esqueléticos o voluntarios, que controlan el movimiento, los músculos cardíacos, que controlan el corazón (cardiomiopatía) y los músculos lisos. La atrofia del músculo esquelético se asocia con el reposo en cama, el uso de corticosteroides, la denervación, la insuficiencia renal crónica, la inmovilización de las extremidades, los trastornos neuromusculares, la sarcopenia del envejecimiento y la artritis. Independientemente de la causa subyacente de la atrofia, la activación muscular reducida/actividad contráctil (hipodinámica) es una característica invariable. Los mecanismos moleculares fundamentales que subyacen a la atrofia muscular y los numerosos procesos celulares incluyen la disminución de la síntesis de proteínas, el aumento de la degradación de proteínas, la supresión de las vías bioenergéticas que se asocian con la función mitocondrial y el aumento del estrés oxidativo (Abadi y otros, PLoS ONE 4 (8):e6518 (2009)).

Los desencadenantes secuencia arriba que inician la atrofia muscular se conocen poco y pueden variar según el contexto patológico; sin embargo, los datos en animales sugieren que los estímulos atróficos dispares convergen en la activación de la degradación de proteínas, particularmente la vía proteosómica ubiquitina (Ub)-26S. Dos nuevas proteínas-Ub ligasas, la atrogin-1 (proteína F-box de la atrofia muscular) y la proteína de dedo anular muscular (MuRF-1), consistentemente se regulan positivamente en los modelos murinos de atrofia muscular, y se cree que ubiquitinan ambas proteínas reguladoras (por ejemplo, la calcineurina y la MyoD) y estructurales (por ejemplo, la miosina y troponina I), lo que dirige así la degradación específica de proteínas durante la atrofia muscular (Abadi y otros, PLoS ONE 4(8):e6518 (2009)).

Si bien se ha avanzado mucho hacia la delineación de las alteraciones funcionales subyacentes y las vías de señalización que median la atrofia muscular en modelos animales, pocos estudios han examinado la atrofia muscular en humanos. Los primeros informes sobre el recambio de proteínas en humanos demostraron que las tasas de síntesis de proteínas musculares mixtas disminuyen durante la atrofia muscular, mientras que las tasas de degradación de proteínas no cambian (de Gray, Curr. Drug Targets 7:1469-1477 (2006); Ferrando y otros, Am. J. Physiol. 270: E627-633 (1996); Gibson y otros, Clin. Sci. (Lond) 72:503-509 (1987); Shangraw y otros, Am. J. Physiol. 255: E548-558 (1988)). Esto se confirmó en un estudio reciente en el que la tasa de síntesis de proteínas miofibrilares disminuyó en un 50 % después de 10 días de suspensión unilateral de extremidades (ULS) en sujetos humanos (de Boer y otros, J. Physiol. 585:241-251 (2007)). Estos estudios enfatizan la supresión de la síntesis de proteínas durante la atrofia en el músculo humano, lo que contrasta con los estudios en modelos murinos que apuntan principalmente hacia una mayor degradación de las proteínas. Sin embargo, un estudio reciente encontró que la degradación de la proteína miofibrilar se incrementó en humanos tan pronto como 72 h después de ULS (Tesch y otros, J. Appl. Physiol 105: 902-906 (2008)). Además, la expresión de la atrogin-1 y la MuRF-1 durante la atrofia muscular en humanos es controvertida, y algunos estudios muestran un aumento en el ARNm de la atrogin-1 y MuRF-1, pero no otros (Abadi y otros, PLoS ONE 4(8):e6518 (2009)).

En un estudio realizado por Abadi y colegas (Abadi y otros, PLoS ONE 4(8):e6518 (2009)), la supresión transcripcional de los genes bioenergéticos y mitocondriales dominó la transcripción que se induce por la inmovilización y fue evidente ya a las 48 horas después de la inmovilización. Estos cambios transcripcionales se acompañaron de disminuciones tanto en el nivel de proteína como en la actividad enzimática de varias proteínas mitocondriales después de 14 días de inmovilización. Además, el ARNm de la atrogina-1 y la MuRF-1 se reguló significativamente de manera temprana durante la progresión de la atrofia muscular, y la ubiquitinación de las proteínas aumentó después de 48 horas de inmovilización, pero no después de 14 días de inmovilización. Por último, la fosforilación de mTOR disminuyó significativamente después de 48 horas de inmovilización, pero no después de 14 días de inmovilización.

Los tratamientos que existen para la atrofia muscular incluyen el ejercicio o la terapia física (cuando sea posible), la estimulación eléctrica funcional de los músculos y la terapia con aminoácidos (por ejemplo, la administración de aminoácidos de cadena ramificada (BAA)) para intentar regenerar el tejido muscular dañado o atrofiado. En casos severos de atrofia muscular, se administran esteroides anabólicos como metandrostenolona a los pacientes. Sin embargo, la eficacia de los tratamientos que existen es limitada, y se sabe que el uso de los BAA y esteroides anabólicos produce efectos secundarios. Por ejemplo, los BAA pueden causar fatiga y pérdida de coordinación, mientras que los esteroides anabólicos pueden causar enfermedades cardiovasculares, insuficiencia hepática y efectos estrogénicos y androgénicos (por ejemplo, acné, crecimiento del vello corporal/facial, calvicie de patrón masculino y ginecomastia). Por consiguiente, existe la necesidad de mejores terapias para el tratamiento de la atrofia muscular.

La presente invención se refiere al uso de un agonista de PPARó para tratar la atrofia muscular en un sujeto que lo necesita.

Breve resumen de la invención

Ciertas variaciones de la presente invención proporcionan un tratamiento mejorado de la atrofia muscular mediante la administración de un agonista de PPARó a un sujeto que lo necesita.

La presente invención se dirige a un agonista de PPARó para su uso en un método de tratamiento de la atrofia muscular asociada al desuso en un sujeto que lo necesite, que comprende administrar al sujeto una cantidad efectiva de un agonista de PPARó. El agonista de PPARó es el ácido (E)-[4-[3-(4-Fluorofenil)-3-[4-[3-(morfolin-4-il) propinil]fenil]aliloxi]-2-metil-fenoxi] acético o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

En una modalidad, la presente invención se dirige a un agonista de PPARó para su uso en un método para reducir la atrofia muscular asociada al desuso en un sujeto que lo necesite, que comprende administrar al sujeto una cantidad efectiva del agonista de PPARó. En una modalidad particular, la atrofia muscular asociada al desuso es causada por la inmovilización de la extremidad en el sujeto. En otra modalidad particular, la atrofia muscular asociada al desuso es causada por el uso de un ventilador mecánico por parte del sujeto.

En una modalidad, reducir la atrofia muscular asociada al desuso comprende reducir la tasa de pérdida de fuerza muscular en un tejido muscular del sujeto en relación con un control, en donde la tasa de pérdida de fuerza muscular comprende una comparación de una o más mediciones de fuerza muscular en el sujeto con una medición basal de la fuerza muscular en el mismo sujeto antes de un período de desuso, en el que la fuerza muscular se mide mediante una prueba de fuerza muscular. En otra modalidad, la reducción de la tasa de pérdida de fuerza muscular en el sujeto comprende un retorno a la medición basal de la fuerza muscular del sujeto más rápido que el control después de un período de desuso. En otra modalidad, la pérdida de fuerza muscular en el sujeto es menor que la pérdida de fuerza muscular en relación con el control durante un período de desuso.

En otra modalidad, reducir la atrofia muscular asociada al desuso comprende reducir la tasa de pérdida de masa muscular en un tejido muscular del sujeto en relación con un control, en donde la tasa de pérdida de masa muscular comprende una comparación de una o más mediciones de volumen muscular en el sujeto con una medición basal del volumen muscular en el mismo sujeto antes de un período de desuso, en donde el volumen muscular se mide por el área de la sección transversal de un músculo. En otra modalidad, la reducción de la tasa de pérdida de masa muscular en el sujeto comprende un retorno a la medición basal de la masa muscular del sujeto más rápido que el control después de un período de desuso. En otra modalidad, la pérdida de masa muscular en el sujeto es menor que la pérdida de masa muscular en relación con el control durante un período de desuso.

En otra modalidad, reducir la atrofia muscular asociada al desuso comprende reducir la tasa de pérdida de fibras musculares de Tipo I en un tejido muscular del sujeto en relación con un control, en donde la tasa de pérdida de fibras musculares de Tipo I comprende una comparación de una o más mediciones de fibras musculares de Tipo I en el sujeto con una medición basal de fibras musculares de Tipo I en el mismo sujeto. En una modalidad, la cantidad de fibras musculares de Tipo I se mide mediante el uso de la tinción con miosina ATPasa de muestras musculares. En otra modalidad, la reducción de la tasa de pérdida de fibras musculares de Tipo I en el sujeto comprende un retorno a la medición de referencia de las fibras musculares de Tipo I del sujeto más rápido que el control después de un período de desuso. En otra modalidad, la pérdida de fibras musculares de Tipo I en el sujeto es menor que la pérdida de fibras musculares de Tipo I en relación con el control durante un período de desuso.

En otra modalidad, reducir la atrofia muscular asociada al desuso comprende reducir la tasa de disminución de la biogénesis mitocondrial en un tejido muscular del sujeto en relación con un control, en donde la tasa de disminución de la biogénesis mitocondrial comprende una comparación de una o más mediciones de biogénesis mitocondrial en el sujeto con una medición basal de la biogénesis mitocondrial en el mismo sujeto. En otra modalidad, la reducción de la tasa de disminución de la biogénesis mitocondrial en el sujeto comprende un retorno a la medición basal del sujeto de la biogénesis mitocondrial más rápido que el control después de un período de desuso. En otra modalidad, la disminución de la biogénesis mitocondrial en el sujeto es menor que la disminución de la biogénesis mitocondrial en relación con el control durante un período de desuso.

En otra modalidad, el agonista de PPARó de la presente invención se usa en los métodos para reducir la atrofia muscular asociada al desuso que comprende la administración de un agonista de PPARó a un sujeto que lo necesite antes, durante o después de un período de desuso, o cualquier combinación de estos.

Este resumen se proporciona simplemente para introducir ciertos conceptos y no pretende identificar ninguna característica clave o esencial de la materia objeto reivindicada.

Breve descripción de los dibujos

La Figura 1 muestra un gráfico de los cambios medios desde el inicio en la fuerza muscular que representa el efecto de la administración de un agonista de PPAR6 sobre el rendimiento de una prueba de fuerza de extensión de rodilla de medidas repetidas durante (día 0 al día 14) y después (día 14 al día 21 y día 21 hasta el día 29) de la inmovilización de las extremidades en sujetos humanos. Los datos reflejan la imputación múltiple de datos faltantes e inválidos.

La Figura 2 muestra un gráfico de los cambios medios desde el inicio en la fuerza muscular que representa el efecto de la administración de un agonista de PPAR6 sobre el rendimiento de una prueba de fuerza de extensión de rodilla de medidas repetidas durante (día 0 al día 14) y después (día 14 al día 21 y día 21 hasta el día 29) de la inmovilización de las extremidades en sujetos humanos. Los datos reflejan todos los datos disponibles para los sujetos con datos válidos, que excluyen los infractores del protocolo (es decir, sin imputación por datos faltantes e inválidos).

Descripción detallada

Como se usa en el presente documento, el compuesto agonista de PPAR6 de la presente invención es útil en el tratamiento de la atrofia muscular en un sujeto que lo necesita.

El PPAR6 es la isoforma PPAR más abundante en el músculo esquelético y tiene una mayor expresión en las fibras musculares oxidativas Tipo I en comparación con las fibras musculares glucolíticas Tipo II (Wang y otros, PLoS Biol.

2:e294 (2004)). Tanto el ejercicio a corto plazo como el entrenamiento de resistencia conducen a una mayor expresión de PPAR6 en el músculo esquelético humano y de roedores (Watt y otros, J. Mol. Endocrinol. 33:533-544 (2004); Mahoney y otros, FASEB J. 19:1498-1500 (2005); Russell y otros, Diabetes 52:2874-2881 (2003); y Fritz y otros, Diabetes Metab. Res. Rev. 2:492-498 (2006)). Los estudios en roedores sugieren que una característica clave de la activación de PPAR6 es la inducción de la oxidación de ácidos grasos en el músculo esquelético (Tanaka y otros, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 100:15924-15929 (2003); Wang y otros, Cell 113:159-170 (2003)). Con la activación de PPAR6 en el músculo esquelético en ratones, la composición de la fibra cambia hacia el tipo oxidativo I con la inducción de la oxidación de ácidos grasos, la respiración mitocondrial, el metabolismo oxidativo y el aparato contráctil de contracción lenta. Además de los efectos metabólicos, este estudio también demostró que PPAR6 estimuló al coactivador gamma del receptor que se activa por el proliferador de peroxisomas-1 alfa (PGC-1a), un efecto que se acompaña de la biogénesis mitocondrial (Tanaka y otros, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 100:15924-15929 (2003)). Curiosamente, este tipo de adaptación es idéntica a la que se observa en respuesta al ejercicio físico, y de hecho, los ratones con sobreexpresión transgénica (Tg) de PPAR6 exhiben una mayor resistencia al correr (Wang y otros, PLoS Biol. 2:e294 (2004)).

Métodos de tratamiento

La presente invención se dirige generalmente al uso de una cantidad efectiva de un agonista de PPAR6 en métodos para tratar la atrofia muscular en un sujeto que lo necesite, que comprende administrar al sujeto una cantidad efectiva del agonista de PPAR6.

Un músculo es un tejido blando que comprende células musculares que se encuentra en la mayoría de los animales. Las células musculares contienen filamentos de proteínas que pueden deslizarse entre sí y producir una contracción que cambia tanto la longitud como la forma de la célula muscular. Los músculos funcionan para producir fuerza y movimiento. Existen tres tipos de músculos en el cuerpo: a) el músculo esquelético que es el responsable de mover las extremidades y las zonas exteriores de los cuerpos; b) el músculo cardíaco, que es el músculo del corazón, y c) el músculo liso, que es el músculo que se encuentra en las paredes de las arterias y el intestino.

El término "célula muscular" como se usa en el presente documento se refiere a cualquier célula que contribuya al tejido muscular. Los mioblastos, las células satélite, los miotubos y los tejidos de miofibrillas se incluyen en el término "células musculares" y todos pueden tratarse mediante el uso del agonista de PPAR6 de la invención. Los efectos de las células musculares pueden inducirse dentro de los músculos esqueléticos, cardíacos y lisos.

El músculo esquelético, o músculo voluntario, generalmente se ancla por los tendones al hueso y generalmente se usa para efectuar el movimiento esquelético, como la locomoción o para mantener la postura. Aunque cierto control del músculo esquelético generalmente se mantiene como un reflejo inconsciente (por ejemplo, los músculos posturales o el diafragma), los músculos esqueléticos reaccionan al control consciente. El músculo liso, o músculo involuntario, se encuentra dentro de las paredes de los órganos y estructuras como el esófago, el estómago, los intestinos, el útero, la uretra y los vasos sanguíneos. A diferencia del músculo esquelético, el músculo liso no está bajo control consciente. El músculo cardíaco también es un músculo involuntario, pero se parece más al músculo esquelético en su estructura y se encuentra solo en el corazón. Los músculos cardíacos y esqueléticos son estriados porque contienen sarcómeros que se empaquetan en arreglos de haces muy regulares. Por el contrario, las miofibrillas de las células del músculo liso no se disponen en sarcómeros y, por lo tanto, no son estriadas.

El músculo esquelético se divide además en dos grandes tipos: Tipo I (o "contracción lenta") y Tipo II (o "contracción rápida"). Las fibras musculares de Tipo I son densas con capilares y son ricas en mitocondrias y mioglobina, lo que le da al tejido muscular Tipo I un color rojo característico. Las fibras musculares de Tipo I pueden transportar más oxígeno y mantener la actividad aeróbica mediante el uso de grasas o carbohidratos como combustible. Las fibras musculares de Tipo I se contraen durante largos períodos de tiempo, pero con poca fuerza. Las fibras musculares de Tipo II pueden subdividirse en tres subtipos principales (IIa, IIx y IIb) que varían tanto en la velocidad contráctil como en la fuerza que generan. Las fibras musculares de Tipo II se contraen de forma rápida y potente, pero se fatigan muy rápidamente y, por lo tanto, producen solo explosiones anaeróbicas cortas de actividad antes de que la contracción muscular se vuelva dolorosa.

"Atrofia muscular", como se usa en el presente documento, se refiere a una pérdida de masa muscular y/o a un debilitamiento y degeneración progresivos de los músculos. La pérdida de masa muscular y/o el debilitamiento progresivo y degeneración de los músculos pueden ocurrir por una tasa inusualmente alta de degradación de proteínas, una tasa inusualmente baja de la síntesis de proteínas, o una combinación de ambos. Puede ocurrir una tasa inusualmente alta de degradación de la proteína muscular debido al catabolismo de la proteína muscular (es decir, la descomposición de la proteína muscular para usar aminoácidos como sustratos para la gluconeogénesis).

En otra modalidad, la atrofia muscular se refiere a una pérdida significativa en la fuerza muscular. Por pérdida significativa en la fuerza muscular se entiende una reducción de la fuerza en el tejido muscular enfermo, lesionado o que no se usa en un sujeto en relación con el mismo tejido muscular en un sujeto de control. En una modalidad, una pérdida significativa en la fuerza muscular puede ser una reducción en la fuerza de al menos un 10 %, al menos un 15 %, al menos un 20 %, al menos un 25 %, al menos un 30 %, al menos un 35 %, al menos un 40 %, al menos un 45 %, al menos un 50 % o más en relación con el mismo tejido muscular en un sujeto de control. En otra modalidad, por pérdida significativa en la fuerza muscular se entiende una reducción de la fuerza en el tejido muscular que no se usa en relación con la fuerza muscular de este tejido muscular en el mismo sujeto antes de un período de no uso. En una modalidad, una pérdida significativa en la fuerza muscular puede ser una reducción de al menos un 10 %, al menos un 15 %, al menos un 20 %, al menos un 25 %, al menos un 30 %, al menos un 35 %, al menos un 40 %, al menos un 45 %, al menos un 50 % o más en relación con la fuerza muscular de este tejido muscular en el mismo sujeto antes de un período de no uso. La fuerza muscular puede medirse mediante una prueba de fuerza muscular (ver, por ejemplo, los métodos de Prueba de fuerza muscular como se describe en los Ejemplos a continuación).

En otra modalidad, la atrofia muscular se refiere a una pérdida significativa de masa muscular. Por pérdida significativa de masa muscular se entiende una reducción del volumen muscular en el tejido muscular enfermo, lesionado o que no se usa en un sujeto en relación con el mismo tejido muscular en un sujeto de control. En una modalidad, una pérdida significativa de volumen muscular puede ser al menos de un 10 %, al menos un 15 %, al menos un 20 %, al menos un 25 %, al menos un 30 %, al menos un 35 %, al menos un 40 %, al menos un 45 %, al menos un 50 % o más en relación con el mismo tejido muscular en un sujeto de control. En otra modalidad, por pérdida significativa de masa muscular se entiende una reducción del volumen muscular en el tejido muscular que no se usa en relación con el volumen muscular de este tejido muscular en el mismo sujeto antes de un período de no uso. En una modalidad, una pérdida significativa en el tejido muscular puede ser al menos de un 10 %, al menos un 15 %, al menos un 20 %, al menos un 25 %, al menos un 30 %, al menos un 35 %, al menos un 40 %, al menos un 45 %, al menos un 50 % o más en relación con el volumen muscular de este tejido muscular en el mismo sujeto antes de un período de no uso. El volumen muscular puede medirse mediante la evaluación del área de la sección transversal de un músculo, tal como mediante imágenes de resonancia magnética (IRM; ver, por ejemplo, los métodos de IRM del volumen muscular/área de la sección transversal (CSA) como se describe en los ejemplos a continuación).

Entre la población general, la mayor parte de la atrofia muscular resulta del desuso. La atrofia muscular asociada al desuso puede producirse cuando una extremidad se inmoviliza (por ejemplo, debido a una fractura de extremidad o articulación o una cirugía ortopédica como una cirugía de reemplazo de cadera o rodilla). Como se usa en el presente documento, "inmovilización" o "que se inmoviliza" se refiere a la restricción parcial o completa del movimiento de las extremidades, los músculos, huesos, tendones, articulaciones o cualquier otra parte del cuerpo durante un período prolongado de tiempo (por ejemplo, durante 2 días, 3 días, 4 días, 5 días, 6 días, una semana, dos semanas o más). Un período de inmovilización puede incluir períodos cortos o instancias de movimiento sin restricciones, como bañarse, reemplazar un dispositivo externo o ajustar un dispositivo externo. La inmovilización de las extremidades puede llevarse a cabo mediante cualquier variedad de dispositivos externos, que incluye, pero no se limitan a, aparatos ortopédicos, eslingas, yesos, vendas y férulas (cualquiera de los cuales puede componerse de material duro o blando, que incluye, pero no se limitan a, tela, gasa, fibra de vidrio, plástico, yeso o metal), así como cualquier variedad de dispositivos internos, que incluye férulas, placas, aparatos ortopédicos implantados quirúrgicamente y similares. En el contexto de la inmovilización de la extremidad, la restricción del movimiento puede implicar una articulación única o múltiples articulaciones (por ejemplo, articulaciones simples como la articulación del hombro o la cadera, articulaciones compuestas como la articulación radiocarpiana y articulaciones complejas como la articulación de la rodilla, que incluye, pero no se limitan a, uno o más de los siguientes: articulaciones de la mano, articulaciones del hombro, articulaciones del codo, articulaciones de la muñeca, articulaciones auxiliares, articulaciones esternoclaviculares, articulaciones vertebrales, articulaciones temporomandibulares, articulaciones sacroilíacas, articulaciones de cadera, articulaciones de rodilla y articulaciones del pie), un solo tendón o ligamento o múltiples tendones o ligamentos (por ejemplo, que incluyen, pero no se limitan a, uno o más de los siguientes: el ligamento cruzado anterior, el ligamento cruzado posterior, los tendones del manguito rotador, los ligamentos colaterales mediales del codo y rodilla, tendones flexores de la mano, ligamentos laterales del tobillo y tendones y ligamentos de la mandíbula o la articulación temporomandibular), un solo hueso o múltiples huesos (por ejemplo, que incluye, pero no se limitan a uno o más de los siguientes: cráneo, mandíbula, clavícula, costillas, radio, cúbito, húmero, pelvis, sacro, fémur, rótula, falanges, carpas, metacarpianos, tarsos, metatarsianos, peroné, tibia, escápula y vértebras), un solo músculo o múltiples músculos (por ejemplo, que incluyen, pero no se limitan a, uno o más de los siguientes: dorsal ancho, trapecio, deltoides, pectorales, bíceps, tríceps, oblicuos externos, abdominales, glúteo mayor, isquiotibiales, cuádriceps, gastrocnemio y diafragma); una sola extremidad o múltiples extremidades (por ejemplo, uno o más de los brazos y piernas), o todo el sistema del músculo esquelético o partes de este (por ejemplo, en el caso de un yeso de cuerpo completo o un yeso espica).

La atrofia muscular asociada al desuso también puede producirse cuando se reduce el uso de una extremidad (por ejemplo, debido al dolor en las articulaciones que se asocia con la artritis reumatoide o lesión), o debido a un período prolongado de inactividad debido a una enfermedad, reposo en cama o un estado debilitante.

La atrofia muscular asociada al desuso también puede resultar del uso de la ventilación mecánica por parte de un sujeto. A pesar que la ventilación mecánica es una medida que salva vidas en sujetos con insuficiencia respiratoria, las complicaciones que se asocian con la remoción de la ventilación mecánica son comunes, en particular debido a la debilidad del músculo respiratorio del diafragma, un músculo esquelético.

Por consiguiente, en una modalidad, la presente invención se dirige a un agonista de PPAR6 para su uso en un método para reducir la atrofia muscular asociada al desuso en un sujeto que lo necesite, que comprende administrar al sujeto una cantidad efectiva de un agonista de PPAR6. En una modalidad particular, la atrofia muscular asociada al desuso es causada por la inmovilización de la extremidad en el sujeto. En otra modalidad particular, la atrofia muscular asociada al desuso es causada por el uso de un ventilador mecánico por parte del sujeto.

En una modalidad, reducir la atrofia muscular asociada al desuso comprende reducir la tasa de pérdida de fuerza muscular en un tejido muscular del sujeto en relación con un control, en donde la tasa de pérdida de fuerza muscular comprende una comparación de una o más mediciones de fuerza muscular en el sujeto con una medición basal de la fuerza muscular en el mismo sujeto, en el que la fuerza muscular se mide mediante una prueba de fuerza muscular (ver, por ejemplo, los métodos de Prueba de fuerza muscular como se describe en los Ejemplos a continuación). En otra modalidad, la reducción de la tasa de pérdida de fuerza muscular en el sujeto comprende un retorno a la medición basal de la fuerza muscular del sujeto más rápido que el control después de un período de desuso. En una modalidad adicional, la reducción de la tasa de pérdida de fuerza muscular en el sujeto comprende un retorno a la medición basal de la fuerza muscular del sujeto después de un período de desuso en menos del 95 %, o menos del 90 %, o menos del 85 %, o menos del 80 %, o menos del 75 %, o menos del 70 %, o menos del 65 %, o menos del 60 %, o menos del 55 %, o menos del 50 % del tiempo para volver a la línea de inicio para un control. En otra modalidad, la pérdida de fuerza muscular en el sujeto es menor que la pérdida de fuerza muscular en relación con el control. En una modalidad adicional, la pérdida de fuerza muscular en el sujeto comprende menos del 50 %, menos del 45 %, menos del 40 %, menos del 35 %, menos del 30 %, menos del 25 %, menos del 20 %, menos del 15 %, menos del 10 %, menos del 9 %, menos del 8 %, menos del 7 %, menos del 6 %, menos del 5 %, menos del 4 %, menos del 3 %, menos del 2 %, menos del 1 % o 0 % de fuerza muscular en relación con la medición basal de la fuerza muscular del sujeto antes de un período de desuso.

En otra modalidad, reducir la atrofia muscular asociada al desuso comprende reducir la tasa de pérdida de masa muscular en un tejido muscular del sujeto en relación con un control, en donde la tasa de pérdida de masa muscular comprende una comparación de una o más mediciones de volumen muscular en el sujeto a una medición basal del volumen muscular en el mismo sujeto, en el que el volumen muscular se mide por el área de la sección transversal de un músculo (tal como por imágenes de resonancia magnética [IRM]; ver, por ejemplo, los métodos de IRM de volumen/sección transversal del músculo [CSA] como se describe en los ejemplos a continuación). En otra modalidad, la reducción de la tasa de pérdida de masa muscular en el sujeto comprende un retorno a la medición basal de la masa muscular del sujeto más rápido que el control. En una modalidad adicional, la reducción de la tasa de pérdida de masa muscular en el sujeto comprende un retorno a la medición basal de la masa muscular del sujeto después de un período de desuso en menos del 95 %, o menos del 90 %, o menos del 85 %, o menos del 80 %, o menos del 75 %, o menos del 70 %, o menos del 65 %, o menos del 60 %, o menos del 55 %, o menos del 50 % del tiempo para volver a la línea de inicio para un control. En otra modalidad, la pérdida de masa muscular en el sujeto es menor que la pérdida de masa muscular en relación con el control. En una modalidad adicional, la pérdida de masa muscular en el sujeto comprende menos del 50 %, menos del 45 %, menos del 40 %, menos del 35 %, menos del 30 %, menos del 25 %, menos del 20 %, menos del 15 %, menos del 10 %, menos del 9 %, menos del 8 %, menos del 7 %, menos del 6 %, menos del 5 %, menos del 4 %, menos del 3 %, menos del 2 %, menos del 1 % o 0 % de masa muscular en relación con la medición basal de masa muscular del sujeto antes de un período de desuso.

En otra modalidad, reducir la atrofia muscular asociada al desuso comprende reducir la tasa de pérdida de fibras musculares de Tipo I en un tejido muscular del sujeto en relación con un control, en donde la tasa de pérdida de fibras musculares de Tipo I comprende una comparación de una o más mediciones de fibras musculares de Tipo I en el sujeto con una medición basal de fibras musculares de Tipo I en el mismo sujeto, en el que las fibras musculares de Tipo I se miden mediante el uso de la tinción de miosina ATPasa. En otra modalidad, la reducción de la tasa de pérdida de fibras musculares de Tipo I en el sujeto comprende un retorno a la medición basal de las fibras musculares de Tipo I del sujeto más rápido que el control. En una modalidad adicional, la reducción de la tasa de pérdida de fibras musculares de Tipo I en el sujeto comprende un retorno a la medición basal de las fibras musculares de Tipo I del sujeto después de un período de desuso en menos del 95 %, o menos del 90 %, o menos del 85 %, o menos del 80 %, o menos del 75 %, o menos del 70 %, o menos del 65 %, o menos del 60 %, o menos del 55 %, o menos del 50 % del tiempo de retorno a la línea de inicio para un control. En otra modalidad, la pérdida de fibras musculares de Tipo I en el sujeto es menor que la pérdida de fibras musculares de Tipo I en relación con el control. En una modalidad adicional, la pérdida de fibras musculares de Tipo I en el sujeto comprende menos de un 50 %, menos de un 45 %, menos de un 40 %, menos de un 35 %, menos de un 30 %, menos de un 25 %, menos del 20 %, menos del 15 %, menos del 10 %, menos del 9 %, menos del 8 %, menos del 7 %, menos del 6 %, menos del 5 %, menos de un 4 %, menos de un 3 %, menos de un 2 %, menos de un 1 % o menos del 0 % de las fibras musculares de Tipo I en relación con la medición basal de las fibras musculares de Tipo I del sujeto antes de un período de desuso.

Los procedimientos para medir las fibras musculares de Tipo I se describen en N. Yasuda y otros J Appl Physiol 99: 1085­ 1092 (2005). Por ejemplo, las muestras musculares pueden diseccionarse de grasa visible y tejido conectivo y colocarse en un medio de incrustación de temperatura de corte óptima (OCT Tissue-Tek) con la orientación de las fibras perpendiculares al plano horizontal. Las muestras pueden congelarse rápidamente en isopentano, enfriarse con nitrógeno líquido y almacenarse a -80 °C hasta su posterior análisis histoquímico. En el análisis histoquímico, las muestras de músculo que se montan en OCT pueden seccionarse en serie a un grosor de 10 pm, y pueden determinarse las fibras musculares de Tipo I, IIa y IIx mediante la tinción de miosina ATPasa.

En otra modalidad, reducir la atrofia muscular asociada al desuso comprende reducir la tasa de disminución de la biogénesis mitocondrial en un tejido muscular del sujeto en relación con un control, en donde la tasa de disminución de la biogénesis mitocondrial comprende una comparación de una o más mediciones de biogénesis mitocondrial en el sujeto con una medición basal de la biogénesis mitocondrial en el mismo sujeto. En otra modalidad, la reducción de la tasa de disminución de la biogénesis mitocondrial en el sujeto comprende un retorno a la medición basal de la biogénesis mitocondrial del sujeto más rápido que el control. En una modalidad adicional, la reducción de la tasa de disminución de la biogénesis mitocondrial en el sujeto comprende un retorno a la medición basal de la biogénesis mitocondrial del sujeto después de un período de desuso en menos del 95 %, o menos del 90 %, o menos del 85 %, o menos del 80 %, o menos del 75 %, o menos del 70 %, o menos del 65 %, o menos del 60 %, o menos del 55 %, o menos del 50 % del tiempo para volver a la línea de inicio para un control. En otra modalidad, la disminución de la biogénesis mitocondrial en el sujeto es menor que la disminución de la biogénesis mitocondrial en relación con el control. En una modalidad adicional, la disminución de la biogénesis mitocondrial en el sujeto comprende menos del 50 %, menos del 45 %, menos del 40 %, menos del 35 %, menos del 30 %, menos del 25 %, menos del 20 %, menos del 15 %, menos del 10 %, menos del 9 %, menos del 8 %, menos del 7 %, menos del 6 %, menos del 5 %, menos del 4 %, menos del 3 %, menos del 2 %, menos del 1 % o 0 % de la biogénesis mitocondrial en relación con la medición basal de la biogénesis mitocondrial del sujeto antes de un período de desuso.

La biogénesis mitocondrial se mide por la masa y el volumen mitocondriales mediante tinción de la sección histológica mediante el uso de un anticuerpo marcado fluorescentemente específico para los complejos de oxidación-fosforilación, como el anticuerpo de la subunidad Vd del Complejo Anti-OxPhox de Life Technologies o mediante el uso de colorantes mitocondriales específicos en la tinción de células vivas, como las sondas Mito-tracker de Life Technologies. La biogénesis mitocondrial también puede medirse mediante el control de la expresión génica de uno o más factores de transcripción que se relacionan con la biogénesis mitocondrial, como PGC1a, NRF1 o NRF2, mediante el uso de una técnica como la QPCR.

En otra modalidad, la invención comprende una cantidad efectiva de un agonista de PPAR6 para usar en un método para tratar la atrofia muscular causada por el tiempo que se pasa en un ambiente de gravedad cero, gravedad reducida o gravedad cero percibida en un sujeto que lo necesita.

La atrofia muscular también puede asociarse con la enfermedad. La atrofia muscular que se asocia a la enfermedad es menos común que la atrofia muscular asociada al desuso y puede resultar de enfermedades que afectan los nervios que irrigan los músculos individuales (es decir, la atrofia neurogénica) o de enfermedades intrínsecas al tejido muscular (es decir, la enfermedad muscular). En la atrofia neurogénica, el suministro nervioso al músculo puede interrumpirse o comprometerse por compresión, lesión o enfermedad dentro de las células nerviosas, lo que resulta en un déficit nervioso temporal o permanente. Las enfermedades dentro de las células nerviosas que pueden interrumpir o comprometer el suministro nervioso a los músculos incluyen, por ejemplo, la esclerosis múltiple, la esclerosis lateral amiotrófica (ELA o enfermedad de Lou Gehrig), el síndrome de Guillain-Barré, el accidente cerebrovascular y la infección viral de las células nerviosas (por ejemplo, la poliomielitis). Las enfermedades musculares pueden ser intrínsecas al tejido muscular (por ejemplo, la distrofia muscular, polimiositis o miotonía) o pueden presentarse como respuesta a una enfermedad sistémica (por ejemplo, el hipo o hipertiroidismo, el agotamiento de las glándulas suprarrenales, la diabetes mellitus o las enfermedades autoinmunes). La sarcopenia es una enfermedad debilitante que afecta a los ancianos y se caracteriza por la pérdida de masa muscular y su función con la edad avanzada. El desgaste muscular generalizado (caquexia) también puede ocurrir como una consecuencia secundaria de enfermedades como el cáncer avanzado, el síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA), la enfermedad pulmonar obstructiva crónica, la insuficiencia cardíaca congestiva, la miocardiopatía, la enfermedad hepática crónica, la enfermedad renal, el enfisema, la tuberculosis, la osteomalacia, la deficiencia hormonal, la anorexia nerviosa, la desnutrición generalizada y el abuso de drogas (por ejemplo, el abuso de alcohol, opiáceos o esteroides).

En otra modalidad, la presente invención proporciona un compuesto agonista de PPAR6 para usar en métodos para inhibir la atrofia muscular y/o aumentar la masa muscular al proporcionar a un sujeto que lo necesite una cantidad efectiva del compuesto agonista de PPAR6, y composiciones farmacéuticas que comprenden el compuesto que se usa en los métodos. En otra modalidad, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas para usar en métodos para modular el crecimiento muscular, o para aumentar la fuerza muscular, o para mantener la fuerza muscular, o para reducir la pérdida de fuerza muscular, o para inducir hipertrofia del músculo esquelético, o para mejorar el crecimiento in vitro o in vivo del tejido, o para mejorar la formación muscular. En cada una de estas composiciones farmacéuticas, se administra o se usa un compuesto agonista de PPAR6.

En otra modalidad, la presente invención proporciona un kit que comprende al menos un compuesto agonista de PPAR6 y uno o más de: (a) un suplemento proteico; (b) un agente anabólico; (c) un agente catabólico; (d) un suplemento dietético; (e) al menos un agente que se conoce para tratar un trastorno que se asocia con el desgaste muscular; (f) instrucciones para tratar un trastorno que se asocia con la actividad colinérgica; o (g) instrucciones para usar el compuesto para aumentar la masa muscular y/o la fuerza muscular. Los kits también pueden comprender compuestos y/o productos que se empaquetan, formulan y/o se entregan conjuntamente con otros componentes. Por ejemplo, un fabricante de medicamentos, un revendedor de medicamentos, un médico, una tienda de compuestos o un farmacéutico pueden proporcionar un kit que comprende un compuesto y/o producto agonista de PPAR6 y otro componente para la entrega a un paciente. Se contempla que los kits que se divulgan pueden usarse en conexión con los métodos que se divulgan de fabricación, los métodos que se divulgan de uso y/o las composiciones que se divulgan.

En otra modalidad, puede usarse un compuesto agonista de PPAR6 en el tratamiento de trastornos musculares. El trastorno muscular puede ser la atrofia del músculo esquelético secundaria a la desnutrición, el desuso muscular (secundario al reposo en cama voluntario o involuntario), la enfermedad neurológica (que incluye la esclerosis múltiple, la esclerosis lateral amiotrófica, la atrofia muscular espinal, la neuropatía por enfermedad crítica, la lesión de la médula espinal o la lesión del nervio periférico), las lesiones ortopédicas, yeso y otras formas postoperatorias de inmovilización de extremidades, las enfermedades crónicas (que incluyen al cáncer, la insuficiencia cardíaca congestiva, la enfermedad pulmonar crónica, la insuficiencia renal crónica, la enfermedad hepática crónica, la diabetes mellitus, el síndrome de Cushing y las infecciones crónicas como el VIH/SIDA o la tuberculosis), las quemaduras, sepsis, otras enfermedades que requieren ventilación mecánica, la enfermedad muscular que se induce por fármacos (como la miopatía inducida por glucorticoides y la miopatía inducida por estatinas), las enfermedades genéticas que afectan principalmente al músculo esquelético (como la distrofia muscular y la distrofia miotónica), las enfermedades autoinmunes que afectan el músculo esquelético (como la polimiositis y la dermatomiositis), vuelos espaciales, períodos de exposición a gravedad cero o baja, o la sarcopenia que se relaciona con la edad. Por lo tanto, se proporciona un compuesto agonista de PPAR6 para usar en un método para tratar o prevenir la atrofia muscular en un sujeto que padece uno de estos trastornos o sujeto a una de estas afecciones, que comprende administrar a un sujeto el compuesto agonista de PPAR6 en una cantidad efectiva.

En otra modalidad, la presente invención proporciona un compuesto agonista de PPAR6 para usar en un método para tratar el síndrome de dificultad respiratoria aguda (SDRA) en un sujeto que comprende administrar a un sujeto un compuesto agonista de PPAR6 en una cantidad efectiva. En una modalidad adicional, el sujeto está en un ventilador mecánico. En una modalidad adicional, el método comprende la reducción de la atrofia muscular en el diafragma.

En otra modalidad, la presente invención proporciona un compuesto agonista de PPAR6 para usar en un método para reducir el período hasta la remoción de un ventilador mecánico que comprende administrar a un sujeto el compuesto agonista de PPAR6 en una cantidad efectiva. En una modalidad, el período de remoción se reduce en al menos 1 hora, al menos 2 horas, al menos 3 horas, al menos 4 horas, al menos 8 horas, al menos 16 horas, al menos 24 horas, al menos 32 horas, al menos 40 horas, al menos 48 horas, al menos 56 horas, al menos 64 horas o al menos 72 horas.

En otra modalidad, la decisión de remover un ventilador mecánico se evalúa mediante el uso de una puntuación de prueba muscular manual (MMT). Una subpuntuación proximal MMT (5 grupos musculares) puede evaluarse inicialmente (como antes de la administración del agonista de PPAR6) y cada 3 (± 1) días después de la evaluación inicial hasta el alta hospitalaria, incluido el día del alta o el día anterior. Durante los períodos de ventilación mecánica, puede programarse un MMT durante las vacaciones de sedación. La puntuación total de MMT (12 grupos musculares) puede realizarse un día después que se escribe una orden para el alta de la UCI y cada 7 (± 1) días a partir de entonces hasta el alta hospitalaria. Los grupos musculares que pueden evaluarse son la abducción bilateral del hombro, la flexión del codo, la extensión de la muñeca, la flexión de la cadera, la extensión de la rodilla y la dorsiflexión del pie. En otra modalidad, los grupos musculares que pueden evaluarse incluyen cualquier agrupación de lo siguiente: Trapecio (elevadores de hombro); Deltoides medio (abductores de hombro); Bíceps braquial (flexores del codo); Extensores de muñeca; Flexores de muñeca; Iliopsoas (flexores de la cadera); Cuádriceps femoral (extensores de rodilla); Dorsiflexores de tobillo; Flexores del cuello; Glúteo medio (abductores de cadera); Extensores de cuello; Glúteo mayor (extensores de la cadera); Isquiotibiales (flexores de rodilla); y flexores plantares de tobillo; que incluyen cualquier grupo de 12.

El sujeto puede colocarse en posición sentada o supina, en dependencia de la situación clínica del paciente. La fuerza en cada grupo muscular se puntuará de acuerdo con el sistema MRC de seis puntos, en el que una puntuación de 0 no es contracción; 1 es un parpadeo de contracción; 2 es movimiento activo con gravedad eliminada; 3 es movimiento activo contra la gravedad; 4 es movimiento activo contra la gravedad y la resistencia; y 5 es potencia normal. La fuerza muscular proximal, una medida de resultado, puede calificarse como la media de las puntuaciones para la abducción bilateral del hombro y la flexión bilateral de la cadera, y puede denominarse la subpuntuación proximal MMT.

En otra modalidad, la presente invención proporciona un compuesto agonista de PPAR6 para usar en un método para disminuir la tasa de disminución de la puntuación MMT (o subpuntuación) de un paciente en la que el sujeto se somete a ventilación mecánica, para mantener la puntuación MMT (o subpuntuación) de un sujeto, o aumentar la puntuación MMT de un sujeto (o subpuntuación), donde el paciente se somete a ventilación mecánica, que comprende administrar a un sujeto el compuesto agonista de PPARó en una cantidad efectiva. En una modalidad, la puntuación MMT del sujeto para la abducción bilateral del hombro y la flexión bilateral de la cadera es 6 o mayor antes de la remoción de la ventilación mecánica.

En otra modalidad, la presente invención proporciona un método para aumentar los días libres de ventilación mecánica para un sujeto con ventilación mecánica. En una modalidad, el número de días libres es de 28 días. En otra modalidad, la presente invención proporciona un método para aumentar el número de días sin hospitalización de un sujeto con ventilación mecánica. En una modalidad, el número de días libres en el hospital es de 28 días.

También se proporciona un compuesto agonista de PPARó para usar en un método para aumentar la masa muscular, que comprende administrar a un sujeto el compuesto agonista de PPARó en una cantidad efectiva para aumentar la masa muscular del sujeto. En una modalidad, el sujeto es un mamífero. En una modalidad adicional, el mamífero es un primate. En otra modalidad adicional, el mamífero es un humano. En otra modalidad, el sujeto es un animal domesticado. En una modalidad adicional, el animal domesticado son aves de corral. En una modalidad aún más adicional, las aves de corral se seleccionan a partir de pollo, pavo, pato y ganso. En otra modalidad adicional, el animal domesticado es el ganado. En una modalidad adicional, el animal de ganado se selecciona a partir de cerdo, vaca, caballo, cabra, bisonte y oveja.

En otra modalidad, la presente invención proporciona un compuesto agonista de PPARó para usar en un método para mejorar el crecimiento in vitro del tejido o las células, al comprender el método la administración del compuesto agonista de PPARó al tejido o las células en una cantidad efectiva para mejorar el crecimiento del tejido o las células. En una modalidad adicional, el tejido comprende células animales. En otra modalidad adicional, las células animales son células musculares. En una modalidad adicional, las células musculares son células de miosatélites. En una modalidad aún más adicional, cualquiera de los tejidos o células anteriores puede crecer en una plataforma, perla u otra matriz de soporte. En una modalidad adicional, la presente invención proporciona un tejido o células que se cultivan en presencia de un compuesto agonista de PPARó. En otra modalidad, el tejido o las células que se cultivan pueden implantarse en un sujeto del que se extrajeron originalmente el tejido o las células. En otra modalidad, el tejido o las células que se cultivan pueden implantarse en un sujeto diferente del sujeto del que se recolectaron originalmente el tejido o las células.

En otra modalidad, la presente invención proporciona un compuesto agonista de PPARó para usar en un método para mejorar el crecimiento in vivo de tejido, al comprender el método la administración del compuesto agonista de PPARó en una cantidad efectiva para mejorar el crecimiento de un tejido o células después de la implantación del tejido o células en el sujeto. En una modalidad adicional, el tejido comprende células animales. En otra modalidad adicional, las células animales son células musculares. En una modalidad adicional, las células musculares son células de miosatélites. En una modalidad aún más adicional, cualquiera de las células anteriores puede crecer en una plataforma, perla u otra matriz de soporte antes de la implantación. En una modalidad adicional, el tejido o las células se cultivan en presencia de un compuesto agonista de PPARó. En otra modalidad, el tejido que creció puede implantarse en un sujeto del que se extrajeron originalmente el tejido o las células. En otra modalidad, el tejido que creció puede implantarse en un sujeto diferente del sujeto del que se extrajeron originalmente el tejido o las células.

En otra modalidad, la presente invención proporciona usos de un compuesto agonista de PPARó como herramientas farmacológicas en el desarrollo y la estandarización de sistemas de prueba in vitro e in vivo para la evaluación de los efectos de moduladores de la hipertrofia muscular o inhibidores de la actividad que se relaciona con la atrofia muscular en animales de laboratorio como gatos, perros, conejos, monos, ratas y ratones, como parte de la búsqueda de nuevos agentes terapéuticos para aumentar la masa muscular y/o inhibir la hipertrofia muscular.

En cualquiera de las modalidades del presente documento donde se administra un compuesto agonista de PPARó a un sujeto, el compuesto puede administrarse sistémicamente, tal como por inyección parenteral o por consumo oral, y puede usarse para promover el crecimiento muscular y reducir la atrofia muscular en todos los músculos, que incluyen los de las extremidades y el diafragma. Un compuesto agonista de PPARó también puede administrarse localmente, tal como por vía tópica o inyección localizada, y puede usarse para promover el crecimiento muscular local, como puede requerirse después de una lesión o cirugía localizada.

En cualquiera de las modalidades del presente documento donde se administra un compuesto agonista de PPARó a un sujeto, la administración puede combinarse con un régimen de terapia física para inhibir la atrofia muscular, o para aumentar la masa muscular, o para inhibir la pérdida de la fuerza muscular, o para aumentar la fuerza muscular, o para mejorar la formación muscular.

Por consiguiente, en una modalidad, la invención comprende un compuesto agonista de PPARó para usar en un método para tratar una enfermedad que se asocia con la atrofia muscular en un sujeto que lo necesita, que comprende administrar al sujeto una cantidad efectiva del agonista de PPARó.

La atrofia muscular también puede asociarse con lesiones. La atrofia muscular que se asocia a la lesión puede ocurrir, por ejemplo, con quemaduras graves y traumatismos, que incluyen, pero no se limitan a, daños al sistema nervioso central (SNC) o al sistema nervioso periférico (SNP), o exposición a productos químicos tóxicos.

Por consiguiente, en una modalidad, la invención comprende un compuesto agonista de PPARó para usar en un método para tratar la atrofia muscular que se asocia a lesiones en un sujeto que lo necesite, que comprende administrar al sujeto una cantidad efectiva del agonista de PPARó.

Como se usa en el presente documento, "administrar" o "administración" significa introducir, tal como introducir a un sujeto un compuesto o compuestos o composición. El término no se limita a ningún modo específico de entrega, y puede incluir, pero no se limita a, entrega transdérmica y oral.

Como se usa en el presente documento, "tratar" o "tratando" o "tratamiento" puede referirse a uno o más de: retrasar el progreso de un trastorno; controlar un trastorno; retrasar la aparición de un trastorno; mejorar uno o más síntomas característicos de un trastorno; o retrasar la recurrencia de un trastorno, o síntomas característicos de este, en dependencia de la naturaleza del trastorno y sus síntomas característicos.

En algunos aspectos de la invención, la atrofia muscular puede predecirse en un sujeto, por ejemplo, en el contexto de la atrofia muscular causada por la inmovilización de la extremidad o causada por el uso de un ventilador mecánico por parte de un sujeto. En tales casos, el tratamiento puede iniciarse antes de la afección que se predice que causa la atrofia muscular. Por ejemplo, el tratamiento de un sujeto con una cantidad efectiva de un agonista de PPARó puede iniciarse inmediatamente antes de que se prediga que la afección causará la atrofia muscular (por ejemplo, inmediatamente antes de la inmovilización de la extremidad o el uso de un ventilador mecánico). En otra modalidad, el tratamiento de un sujeto con una cantidad efectiva de un agonista de PPARó puede iniciarse al menos 1 hora, al menos 2 horas, al menos 3 horas, al menos 4 horas, al menos 8 horas, al menos 16 horas, a al menos 24 horas, al menos 32 horas, al menos 40 horas, al menos 48 horas, al menos 56 horas, al menos 64 horas o al menos 72 horas antes de la afección que se predice que causa la atrofia muscular (por ejemplo, inmediatamente antes de la inmovilización de la extremidad o uso de un ventilador mecánico).

Por consiguiente, en una modalidad, la presente invención proporciona un compuesto agonista de PPARó para usar en un método para reducir la atrofia muscular asociada al desuso que comprende la administración del agonista de PPARó a un sujeto que lo necesite durante un período de desuso. En otra modalidad, la presente invención proporciona un compuesto agonista de PPARó para usar en un método para reducir la atrofia muscular asociada al desuso que comprende la administración del agonista de PPARó a un sujeto que lo necesite antes de un período de desuso. En otra modalidad, la presente invención proporciona un compuesto agonista de PPARó para usar en un método para reducir la atrofia muscular asociada al desuso que comprende la administración del agonista de PPARó a un sujeto que lo necesite después de un período de desuso. En otra modalidad, la presente invención proporciona un compuesto agonista de PPARó para usar en un método para reducir la atrofia muscular asociada al desuso que comprende la administración de un agonista de PPARó a un sujeto que lo necesite antes, durante o después de un período de desuso, o cualquier combinación de estos.

En el tratamiento de la atrofia muscular, el diagnóstico y la evaluación de la gravedad de la afección y/o la eficacia de la prevención o el tratamiento se deja en última instancia al sujeto y/o al médico tratante. Sin embargo, hay varias herramientas disponibles para evaluar la gravedad de la afección y/o la eficacia de la prevención o el tratamiento, como se describe en otra parte del presente documento.

Como se usa en el presente documento, "sujeto" generalmente se refiere a un ser humano, pero también puede incluir otros mamíferos tales como caballos, vacas, ovejas, cerdos, ratones, ratas, perros, gatos y primates. En una modalidad, el sujeto es un humano. En otra modalidad, el sujeto es un mamífero que exhibe uno o más síntomas característicos de un trastorno. En otra modalidad, el sujeto es un humano que exhibe uno o más síntomas característicos de un trastorno. El término sujeto no requiere que uno tenga un estado o relación particular con respecto a un hospital, clínica, centro de investigación o médico (por ejemplo, como paciente admitido, participante del estudio o similar).

Las dosis del compuesto que se usa en la presente invención deben fijarse en última instancia por un médico tratante. Los esquemas generales de las dosis se proporcionan a continuación en el presente documento. Generalmente, una dosis adecuada de un agonista de PPARó, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para la administración a un humano está en el intervalo de aproximadamente 0,1 mg/kg por día a aproximadamente 25 mg/kg por día (por ejemplo, aproximadamente, 2 mg/kg por día, aproximadamente, 3 mg/kg por día, aproximadamente, 4 mg/kg por día, aproximadamente, 5 mg/g por día, aproximadamente, 6 mg/kg por día, aproximadamente, 7 mg/kg por día aproximadamente, 8 mg/kg por día, aproximadamente, 9 mg/kg por día, aproximadamente 1 mg/kg por día, aproximadamente 2 mg/kg por día, aproximadamente 3 mg/kg por día, aproximadamente 4 mg/kg por día, aproximadamente 5 mg/kg por día, aproximadamente 6 mg/kg por día, aproximadamente 7 mg/kg por día, aproximadamente 8 mg/kg por día, aproximadamente 9 mg/kg por día, aproximadamente 10 mg/kg por día, aproximadamente 15 mg/kg por día, aproximadamente 20 mg/kg por día, o aproximadamente 25 mg/kg por día). Alternativamente, una dosis adecuada de un agonista de PPARó, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para la administración a un humano está en el intervalo de aproximadamente 0,1 mg/día a aproximadamente 1000 mg/día; de aproximadamente 1 mg/día a aproximadamente 400 mg/día; o de aproximadamente 1 mg/día a aproximadamente 300 mg/día. En otras modalidades, una dosis adecuada de un agonista de PPARó, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para la administración a un humano será de aproximadamente 1 mg/día, aproximadamente 2 mg/día, aproximadamente 3 mg/día, aproximadamente 4 mg/día, aproximadamente 5 mg/día, aproximadamente 6 mg/día, aproximadamente 7 mg/día, aproximadamente 8 mg/día, aproximadamente 9 mg/día, aproximadamente 10 mg/día, aproximadamente 15 mg/día, aproximadamente 20 mg/día, aproximadamente 25 mg/día, aproximadamente 30 mg/día, aproximadamente 35 mg/día, aproximadamente 40 mg/día, aproximadamente 45 mg/día, aproximadamente 50 mg/día, aproximadamente 55 mg/día, aproximadamente 60 mg/día, aproximadamente 65 mg/día, aproximadamente 70 mg/día, aproximadamente 75 mg/día, aproximadamente 80 mg/día, aproximadamente 85 mg/día, aproximadamente 90 mg/día, aproximadamente 95 mg/día, aproximadamente 100 mg/día, aproximadamente 125 mg/día, aproximadamente 150 mg/día, aproximadamente 175 mg/día, aproximadamente 200 mg/día, aproximadamente 225 mg/día, aproximadamente 250 mg/día, aproximadamente 275 mg/día, aproximadamente 300 mg/día, aproximadamente 325 mg/día, aproximadamente 350 mg/día, aproximadamente 375 mg/día, aproximadamente 400 mg/día, aproximadamente 425 mg/día, aproximadamente 450 mg/día, aproximadamente 475 mg/día, o aproximadamente 500 mg/día. Las dosis pueden administrarse más de una vez al día (por ejemplo, dos, tres, cuatro o más veces al día). En una modalidad, una dosis adecuada de un agonista de PPAR6, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para la administración a un humano es de aproximadamente 100 mg dos veces/día (es decir, un total de aproximadamente 200 mg/día). En otra modalidad, una dosis adecuada de un agonista de PPAR6, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para la administración a un humano es de aproximadamente 50 mg dos veces/día (es decir, un total de aproximadamente 100 mg/día).

En algunos aspectos de la invención, el agonista de PPAR6 se administra en una cantidad terapéuticamente efectiva a un sujeto (por ejemplo, un humano). Como se usa en el presente documento, el término "cantidad efectiva" o "cantidad terapéuticamente efectiva" se refiere a una cantidad de un ingrediente activo que provoca la respuesta biológica o medicinal que se desea, por ejemplo, la reducción o alivio de los síntomas de la afección que se está tratando. En algunas modalidades de la invención, la cantidad de agonista de PPAR6 que se administra puede variar en dependencia de varios factores, que incluyen, pero no se limitan a, el peso del sujeto, la naturaleza y/o extensión de la condición del sujeto, etc.

Compuestos

Un agonista del receptor activado del proliferador de peroxisomas - delta (PPAP6) es un ácido graso, lípido, proteína, péptido, molécula pequeña u otra entidad química que se une al PPAR6 celular y provoca una respuesta posterior, es decir, la transcripción génica, ya sea la transcripción de genes nativos o la transcripción génica de una construcción de gen reportero, comparable a los ligandos endógenos como el ácido retinoico o comparable a un agonista de PPAR6 de referencia estándar como la carbaciclina.

En una modalidad, un agonista de PPAR6 es un agonista selectivo. Como se usa en el presente documento, un agonista selectivo de PPAR6 se considera una entidad química que se une y activa el PPAR6 celular y no activa sustancialmente los receptores activados por el proliferador de peroxisoma celular - alfa (PPARa) y - gamma (PPARy). Como se usa en el presente documento, un agonista selectivo de PPAR6 es una entidad química que tiene al menos una activación máxima de 10 veces (en comparación con el ligando del receptor endógeno) con una potencia mayor de 100 veces para la activación de PPAR6 en relación con uno o ambos de PPARa y PPARy. En una modalidad adicional, un agonista selectivo de PPAR6 es una entidad química que se une y activa el PPAR6 humano celular y no activa sustancialmente ninguno de los PPARa y PPARy humanos. En una modalidad adicional, un agonista selectivo de PPAR6 es una entidad química que tiene una potencia de al menos 10 veces, o 20 veces, o 30 veces, o 40 veces, o 50 veces, o 100 veces para la activación de PPAR6 respecto a uno o ambos de PPARa y PPARy.

La "activación" aquí se define como la respuesta secuencia abajo que se menciona anteriormente, que en el caso de los PPAR es la transcripción génica. La transcripción génica puede medirse indirectamente como la producción de proteínas secuencia abajo que reflejan la activación del subtipo PPAR particular en estudio. Alternativamente, puede emplearse una construcción de reportero artificial para estudiar la activación de los PPAR individuales que se expresan en las células. El dominio de unión al ligando del receptor particular a estudiar puede fusionarse con el dominio de unión al ADN de un factor de transcripción, que produce lecturas de laboratorio convenientes, tales como el dominio de unión al ADN del factor de transcripción GAL4 de levadura. La proteína de fusión puede transfectarse en una línea celular de laboratorio junto con un potenciador de Gal4, que afecta la expresión de la proteína luciferasa. Cuando tal sistema se transfecta en una línea celular de laboratorio, la unión de un agonista del receptor a la proteína de fusión resulta en la emisión de luz.

Un agonista selectivo de PPAR6 puede ilustrar el perfil de transcripción génica anterior en células que expresan selectivamente PPAR6, y no en células que expresan selectivamente PPAPy o PPARa. En una modalidad, las células pueden expresar el PPAR6, PPARy y PPARa humanos, respectivamente.

En una modalidad adicional, un agonista de PPAR6 puede tener un valor EC50 de menos de 5 pm tal como se determina mediante el ensayo de transactivación transitoria de PPAR que se describe a continuación. En una modalidad, el valor de EC50 es inferior a 1 pm. En otra modalidad, el valor de EC50 es inferior a 500 nM. En otra modalidad, el valor de EC50 es inferior a 100 nM. En otra modalidad, el valor de EC50 es inferior a 50 nM.

El ensayo de transactivación transitoria PPAR puede basarse en la transfección transitoria en células HEK293 humanas de dos plásmidos que codifican una proteína de prueba quimérica y una proteína indicadora, respectivamente. La proteína de prueba quimérica puede ser una fusión del dominio de unión al ADN (DBD) del factor de transcripción GAL4 de levadura al dominio de unión al ligando (LBD) de las proteínas PPAR humanas. El resto PPAR-LBD alojado además del bolsillo de unión al ligando también tiene el dominio de activación nativo, lo que permite que la proteína de fusión funcione como un factor de transcripción dependiente del ligando PPAR. El DBD de GAL4 dirige la proteína quimérica para que se una solo a los potenciadores Gal4 (de los cuales ninguno existía en las células HEK293). El plásmido reportero contenía un potenciador Gal4 que impulsaba la expresión de la proteína luciferasa de luciérnaga. Después de la transfección, las células HEK293 expresaron la proteína de fusión GAL4-DBD-PPAR-LBD. La proteína de fusión a su vez se unirá al potenciador Gal4 que controla la expresión de luciferasa y no hará nada en ausencia de ligando. Tras la adición a las células de un ligando PPAR, la proteína luciferasa se produce en cantidades correspondientes a la activación de la proteína PPAR. La cantidad de proteína luciferasa se mide por la emisión de luz después de la adición del sustrato apropiado.

Cultivo de células y transfección: Las células HEK293 pueden crecer en DMEM 10 % de FCS. Las células pueden sembrarse en placas de 96 pocillos el día antes de la transfección para obtener una confluencia del 50-80 % en la transfección. Un total de 0,8 mg de ADN que contiene 0,64 mg de pM1a/gLBD, 0,1 mg de pCMVbGal, 0,08 mg de pGL2 (Gal4)⁵ , y 0,02 mg de pADVANTAGE pueden transfectarse por pocillo mediante el uso del reactivo de transfección FuGene de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Puede permitirse que las células expresen las proteínas durante 48 h seguido de la adición del compuesto.

Plásmidos: El PPARó humano puede obtenerse mediante amplificación por la PCR mediante el uso del ADNc que se sintetiza por transcripción inversa del ARNm de hígado humano, tejido adiposo y plancenta, respectivamente. Los ADNc amplificados pueden clonarse en pCR2.1 y secuenciarse. El dominio de unión al ligando (LBD) de cada isoforma PPAR puede generarse por la PCR (PPAró: aa 128 - C-terminal) y fusionarse con el dominio de unión al ADN (DBD) del factor de transcripción GAL4 de levadura al subclonar fragmentos en marco en el vector pM1 (Sadowski y otros (1992), Gene 118, 137), lo que genera los plásmidos pMIaLBD, pMlYLBD y pM1ó. Las fusiones subsiguientes pueden verificarse mediante secuenciación. El reportero puede construirse al insertar un oligonucleótido que codifique cinco repeticiones de la secuencia de reconocimiento de g AL4 (Webster y otros (1988), Nucleic Acids Res. 16, 8192) en el promotor del vector pGL2 (Promega), y generar el plásmido pGL2 (GAL4)⁵. El pCMVbGal puede comprarse en Clontech y pADVANTAGE puede comprarse en Promega.

Compuestos: Los compuestos pueden disolverse en DMSO y diluirse 1:1000 tras la adición a las células. Los compuestos pueden analizarse por cuadruplicado en concentraciones que varían de 0,001 a 300 pM. Las células pueden tratarse con el compuesto durante 24 h seguido de un ensayo de luciferasa. Cada compuesto puede probarse en al menos dos experimentos separados.

Ensayo de la luciferasa: Puede aspirarse el medio que incluye el compuesto de prueba y pueden agregarse a cada pocillo 100 pl de PBS que incluye 1 mM de Mg⁺⁺ y Ca⁺⁺ . El ensayo de la luciferasa puede realizarse mediante el uso del kit LucLite de acuerdo con las instrucciones del fabricante (Packard Instruments). La emisión de luz puede cuantificarse mediante el conteo con un Packard LumiCounter. Para medir la actividad de la p-galactosidasa, pueden transferirse 25 ml de sobrenadante de cada lisado de transfección a una nueva microplaca. Los ensayos de p-galactosidasa pueden realizarse en las placas de micropocillos mediante el uso de un kit de Promega y leerse en un lector Labsystems Ascent Multiscan. Los datos de p-galactosidasa pueden usarse para normalizar (eficiencia de transfección, crecimiento celular, etc.) los datos de luciferasa.

Métodos estadísticos: La actividad de un compuesto puede calcularse como la inducción doble en comparación con una muestra no tratada. Para cada compuesto, la eficacia (actividad máxima) puede darse como una actividad relativa en comparación con el Wy14,643 para el PPARa, la rosiglitazona para el PPARy y la carbaciclina para el PPARÓ. La EC50 es la concentración que proporciona el 50 % de la actividad máxima observada. Los valores de EC50 pueden calcularse mediante regresión no lineal mediante el uso de GraphPad PRISM 3.02 (GraphPad Software, San Diego, CA).

En una modalidad adicional, un agonista de PPARÓ tiene un peso molecular de menos de 1000 g/mol, o un peso molecular de menos de 950 g/mol, o un peso molecular de menos de 900 g/mol, o un peso molecular de menos de 850 g/mol, o un peso molecular de menos de 800 g/mol, o un peso molecular de menos de 750 g/mol, o un peso molecular de menos de 700 g/mol, o un peso molecular de menos de 650 g/mol, o un peso molecular de menos de 600 g/mol, o un peso molecular de menos de 550 g/mol, o un peso molecular de menos de 500 g/mol, o un peso molecular de menos de 450 g/mol, o un peso molecular de menos de 400 g/mol, o un peso molecular de menos de 350 g/mol, o un peso molecular de menos de 300 g/mol, o un peso molecular de menos de 250 g/mol. En otra modalidad, un agonista de PPARÓ tiene un peso molecular mayor que 200 g/mol, o un peso molecular mayor que 250 g/mol, o un peso molecular mayor que 250 g/mol, o un peso molecular mayor que 300 g/mol, o un peso molecular de más de 350 g/mol, o un peso molecular de más de 400 g/mol, o un peso molecular de más de 450 g/mol, o un peso molecular de más de 500 g/mol, o un peso molecular superior a 550 g/mol, o un peso molecular superior a 600 g/mol, o un peso molecular superior a 650 g/mol, o un peso molecular superior a 700 g/mol , o un peso molecular de más de 750 g/mol, o un peso molecular de más de 800 g/mol, o un peso molecular de más de 850 g/mol, o un peso molecular de más de 900 g/mol, o un peso molecular superior a 950 g/mol, o un peso molecular superior a 1000 g/mol. Cualquiera de los límites superior e inferior que se describen anteriormente en este párrafo puede combinarse.

En una modalidad, un agonista de PPARÓ puede ser un compuesto agonista de PPARÓ como se describe en cualquiera de las siguientes solicitudes de patente publicadas: WO 97/027847, WO 97/027857, WO 97/028115, WO 97/028137, WO 97/028149, WO 98/027974, WO 99/004815, WO 2001/000603, WO 2001/025181, WO 2001/025226, WO 2001/034200, WO 2001/060807, WO 2001/079197, WO 2002/014291, WO 2002/028434, WO 2002/046154, WO 2002/050048, WO 2002/059098, WO 2002/062774, WO 2002/070011, WO 2002/076957, WO 2003/016291, WO 2003/024395, WO 2003/033493, WO 2003/035603, WO 2003/072100, WO 2003/074050, WO 2003/074051, WO 2003/074052, WO 2003/074495, WO 2003/084916, WO 2003/097607, WO 2004/000315, WO 2004/000762, WO 2004/005253, WO 2004/037776, WO 2004/060871, WO 2004/063165, WO 2004/063166, WO 2004/073606, WO 2004/080943, WO 2004/080947, WO 2004/092117, WO 2004/092130, WO 2004/093879, WO 2005/060958, WO 2005/097098, WO 2005/097762, WO 2005/097763, WO 2005/115383, WO 2006/055187, WO 2007/003581, and WO 2007/071766.

El agonista de PPAR5 es el ácido f£J-[4-[3-(4-Fluorofenil)-3-[4-[3-(morfolin-4-il) propinil]fenil]aliloxi]—2—metil—fenoxi] acético:

Un ejemplo de la síntesis química del ácido f£j-[4-[3-(4-Fluorofenil)-3-[4-[3-(morfolin-4-il)propinil]fenil]aliloxi]-2-metilfenoxi] acético puede encontrarse en el Ejemplo 10 de la Pub. de Solicitud PCT. Núm. WO 2007/071766.

El agonista de PPAR5 es el ácido f£j-[4-[3-(4-Fluorofenil)-3-[4-[3-(morfolin-4-il)propinil]fenil]aliloxi]-2-metil-fenoxi] acético o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

Como se usa a lo largo de esta especificación, el término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a las sales de un ácido libre o una base libre que no son biológicamente indeseables y generalmente se preparan al hacer reaccionar la base libre con un ácido orgánico o inorgánico adecuado o al hacer reaccionar el ácido con una base orgánica o inorgánica adecuada. El término puede usarse en referencia a cualquier compuesto de la presente invención. Las sales representativas incluyen las siguientes sales: Acetato, Bencenosulfonato, Benzoato, Bicarbonato, Bisulfato, Bitartrato, Borato, Bromuro, Edetato de Calcio, Cansilato, Carbonato, Cloruro, Clavulanato, Citrato, Diclorhidrato, Edetato, Edisilato, Estolato, Esilato, Fumarato, Gluceptato, Gluconato, Glutamato, Glicolilarsanilato, Hexilresorcinato, Hidrabamina, Hidrobromuro, Clorhidrato, Hidroxinaftoato, Yoduro, Isetionato, Lactato, Lactobionato, Laurato, Malato, Maleato, Mandelato, Mesilato, Bromuro de Metilo, Nitrato de metilo, Sulfato de Metilo, Maleato de Monopotasio, Mucato, Napsilato, Nitrato, N-metilglucamina, Oxalato, Pamoato (Embonato), Palmitato, Pantotenato, Fosfato/Difosfato, Poligalacturonato, Potasio, Salicilato, Sodio, Estearato, Subacetato, Succinato, Tanato, Tartrato, Teoclato, Tosilato, Trietilyoduro, Trimetilamonio, y Valerato. Cuando está presente un sustituyente ácido, como -COOH, puede formarse la sal de amonio, morfolinio, sodio, potasio, bario, calcio y sus similares para usar como forma de dosificación. Cuando está presente un grupo básico, como amino, o un radical heteroarilo básico, como piridilo, puede formarse una sal ácida, como clorhidrato, bromhidrato, fosfato, sulfato, trifluoroacetato, tricloroacetato, acetato, oxalato, maleato, piruvato, malonato, succinato, citrato, tartarato, fumarato, mandelato, benzoato, cinamato, metanosulfonato, etanosulfonato, picrato y sus similares, e incluyen ácidos relacionados con las sales farmacéuticamente aceptables que se enumeran en Stephen M. Berge, y otros, Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol. 66(1), pp. 1-19 (1977).

Composiciones farmacéuticas

En algunas modalidades de la invención, puede incluirse un agonista de PPAR5 dentro de una composición farmacéutica. Como se usa en el presente documento, el término "composición farmacéutica" se refiere a una composición líquida o sólida, preferentemente sólida (por ejemplo, un polvo granulado), que contiene un ingrediente farmacéuticamente activo (por ejemplo, un agonista de PpAR5) y al menos un vehículo, donde ninguno de los ingredientes es de manera general biológicamente indeseable en las cantidades que se administran.

Las composiciones farmacéuticas que incorporan un agonista de PPAR5 pueden tomar cualquier forma física que sea farmacéuticamente aceptable. Las composiciones farmacéuticas para administración oral son particularmente preferidas. En una modalidad de tales composiciones farmacéuticas, se incorpora una cantidad efectiva de un agonista de PPAR5.

Los ingredientes inertes y la forma de formulación de las composiciones farmacéuticas de la invención son convencionales. Pueden seguirse los métodos que se conocen de formulación que se usan en la ciencia farmacéutica. Se contemplan todos los tipos habituales de composiciones, que incluyen, pero no se limitan a, tabletas, tabletas masticables, cápsulas y soluciones. Sin embargo, la cantidad de agonista de PPAR5 se define mejor como la cantidad efectiva, es decir, la cantidad de agonista de PPAR5 que proporciona la dosis deseada al sujeto que necesita de tal tratamiento. La actividad de los agonistas de PPAR5 no depende de la naturaleza de la composición, por lo que las composiciones pueden elegirse y formularse únicamente por conveniencia y economía. Cualquiera de los agonistas de PPAR6 como se describe en el presente documento puede formularse en cualquier forma de composición deseada.

Las cápsulas pueden prepararse al mezclar el agonista de PPAR6 con un diluyente adecuado y al llenar la cantidad apropiada de la mezcla en cápsulas. Los diluyentes habituales incluyen sustancias en polvo inertes, como almidón de muchos tipos diferentes, celulosa en polvo, especialmente celulosa cristalina y microcristalina, azúcares como fructosa, manitol y sacarosa, harinas de grano y polvos comestibles similares.

Los comprimidos pueden prepararse por compresión directa, por granulación húmeda o por granulación en seco. Sus formulaciones suelen incorporar diluyentes, aglutinantes, lubricantes y desintegradores, así como el agonista de PPAR6. Los diluyentes típicos incluyen, por ejemplo, varios tipos de almidón, lactosa, manitol, caolín, fosfato o sulfato de calcio, sales inorgánicas tales como cloruro de sodio y azúcar en polvo. Los derivados de celulosa en polvo también son útiles. Los aglutinantes de tabletas típicos son sustancias como almidón, gelatina y azúcares como lactosa, fructosa, glucosa y similares. Las gomas naturales y sintéticas también son convenientes, que incluyen acacia, alginatos, metilcelulosa, polivinilpirrolidina y similares. El polietilenglicol, la etilcelulosa y las ceras también pueden servir como aglutinantes.

Un lubricante en una formulación de tableta puede ayudar a evitar que la tableta y los punzones se peguen en la matriz. Puede elegirse un lubricante entre sólidos como talco, estearato de magnesio y calcio, ácido esteárico y aceites vegetales hidrogenados.

Los desintegradores de tabletas son sustancias que se hinchan cuando se humedecen para romper la tableta y liberar el compuesto. Incluyen almidones, arcillas, celulosas, alineaciones y gomas. Más particularmente, pueden usarse almidones de maíz y papa, metilcelulosa, agar, bentonita, celulosa de madera, esponja natural en polvo, resinas de intercambio catiónico, ácido algínico, goma guar, pulpa de cítricos y carboximetilcelulosa, por ejemplo, así como lauril sódico sulfato.

Las formulaciones entéricas a menudo se usan para proteger un ingrediente activo del contenido fuertemente ácido del estómago. Tales formulaciones se crean al recubrir una forma de dosificación sólida con una película de un polímero que es insoluble en entornos ácidos y soluble en entornos básicos. Películas ilustrativas son acetato ftalato de celulosa, ftalato de acetato de polivinilo, ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa y succinato de acetato de hidroxipropilmetilcelulosa.

Las tabletas a menudo se recubren con azúcar como sabor y sellador. Los agonistas de PPAR6 también pueden formularse como tabletas masticables mediante el uso de grandes cantidades de sustancias de sabor agradable como el manitol en la formulación, como es una práctica bien establecida.

Los parches transdérmicos pueden usarse. Típicamente, un parche comprende una composición resinosa en la cual los compuestos activos se disolverán, o se disolverán parcialmente, y se mantiene en contacto con la piel mediante una película que protege la composición. También se usan otras composiciones de parches más complicadas, particularmente aquellas que tienen una membrana perforada con innumerables poros a través de los cuales los fármacos son bombeados por acción osmótica.

En una modalidad donde el agonista de PPAR6 se incluye en una composición farmacéutica, tales composiciones farmacéuticas pueden estar en una forma adecuada para el uso oral, por ejemplo, como tabletas, trociscos, pastillas para chupar, suspensiones acuosas o aceitosas, polvos dispersables o gránulos, emulsiones, cápsulas duras o blandas, o jarabes o elixires. Las composiciones que se destinan para usar por vía oral pueden prepararse de acuerdo con cualquier método conocido, y tales composiciones pueden contener uno o más agentes que se seleccionan del grupo que consiste en agentes edulcorantes, agentes saborizantes, agentes colorantes y agentes conservantes para proporcionar preparaciones farmacéuticamente elegantes y agradables al paladar. Las tabletas pueden contener el ingrediente activo en mezcla con excipientes no tóxicos farmacéuticamente aceptables que son adecuados para la fabricación de tabletas. Estos excipientes pueden ser, por ejemplo, diluyentes inertes, tales como carbonato cálcico, carbonato sódico, lactosa, fosfato cálcico o fosfato sódico; agentes granulantes y desintegrantes, por ejemplo, almidón de maíz o ácido algínico; agentes aglutinantes, por ejemplo, almidón, gelatina o acacia; y agentes lubricantes, por ejemplo, estearato magnésico, ácido esteárico o talco. Las tabletas pueden recubrirse o no recubrirse por técnicas conocidas para retrasar la desintegración y absorción en el tracto gastrointestinal y por lo tanto proporcionan una acción sostenida durante un período más largo. Por ejemplo, puede emplearse un material de retraso en el tiempo tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo.

Protocolo

A continuación, se proporciona un protocolo para la evaluación experimental del impacto de un agonista de PPAR6 en la atrofia muscular durante y después del final de la inmovilización de la extremidad. En el protocolo, la referencia al Compuesto 1 se refiere a la sal sódica de ácido (E)-[4-[3-(4-Clorofenil)-3-[4-[3-(morfolin-4-il)propinil]fenil]aliloxi]-2-metil-fenoxi] acético (compuesto de referencia).

Se describe un estudio aleatorizado, ciego al investigador y al sujeto, de patrocinador abierto, controlado con placebo que evalúa el posible impacto del Compuesto 1 en la recuperación de la atrofia muscular de la inmovilización de la extremidad. A los sujetos se les inmovilizará la pierna mediante el uso de una rodillera (flexión de 30 grados en la pierna izquierda para permitir la conducción) y se les proporcionarán muletas para caminar de modo que no se soporten pesos en la pierna inmovilizada. Los sujetos se inscribirán y se aleatorizarán para recibir el Compuesto 1 o el placebo (ambos se referencian como Fármaco de Estudio en este protocolo). El estudio consta de cinco períodos denominados SCR (período de detección, Día -35 a -3), BL (período de inicio: Día -1 al Día 1 [am]), IMM (inmovilización de las extremidades y tratamiento con el fármaco del estudio, Día 1[pm] al Día 14), TRE (tratamiento con fármaco de estudio sin inmovilización de extremidades, Día 15 al Día 29) y REC (sin período de recuperación del tratamiento, Día 29 al Día 42). Habrá seis días de prueba durante el estudio: Día 1 (inicio), Día 14 (día sin refuerzo), Día 16 (48 horas después de quitarse el refuerzo), Día 21, Día 29 (última dosis) y Día 42 (visita de estudio final). En cada día de prueba, los sujetos se someterán a la combinación de varios procedimientos de prueba en orden secuencial como se detalla a continuación: 1) Actividad matutina más una caminata de aproximadamente 500 pasos (cuando esté domiciliado en la Unidad de Investigación Clínica [CRU]); 2) muestreo de sangre; 3) Desayuno estandarizado (la administración del Fármaco de Estudio se realizará inmediatamente antes del desayuno, excepto el día 42); 4) biopsia muscular; 5) Pruebas de fuerza muscular de las piernas (MST) y prueba de rendimiento físico modificado (PPT); y 6) Imagen de resonancia magnética (IRM) del muslo para evaluar el volumen del músculo del muslo/área de sección transversal (CSA).

Las pruebas de inicio (Día 1 [am]) y las pruebas los días 14 y 16 se realizarán después de que los sujetos se admitan en la Unidad de Investigación Clínica (CRU). En el Día -1 (antes de la prueba de inicio), los sujetos se admitirán en la CRU por la noche después de recibir instrucciones de abstenerse de hacer ejercicio, ingerir una dieta estándar para mantener el peso y evitar la cafeína y el alcohol durante tres días antes de admitirse a la CRU. A las 1900 h del Día -1, consumirán una comida estandarizada y luego ayunarán (excepto el agua) y descansarán en la cama hasta la mañana siguiente. A las 0730 h del Día 1, se les pedirá que usen el baño, se duchen, se cepillen los dientes y caminen (aproximadamente 500 pasos). A las 0800 h, los sujetos se someterán a los procedimientos de prueba (que incluye el desayuno) que se describen anteriormente. Después de completar todos los procedimientos de prueba, los sujetos recibirán el almuerzo y luego se les colocará el refuerzo de rodilla. Los sujetos permanecerán en la CRU hasta el tiempo de dosificación de la noche del Fármaco de Estudio. La primera dosis del Fármaco de Estudio se administrará por el personal del sitio en el lugar alrededor de las 1900 h y la cena se proporcionará inmediatamente después de la dosificación. Los sujetos se darán de alta de la CRU con el suministro del Fármaco de Estudio y las instrucciones para la autoadministración en el hogar. Se alentará a los sujetos a caminar entre 4000 y 6000 pasos por día durante la duración del estudio (Día 1 - Día 42) a menos que se especifique de otra forma.

Se programará una visita ambulatoria en el Día 6 (± 1 día) para los laboratorios de seguridad y el nivel mínimo de PK. El sujeto debe estar en ayunas durante la noche antes de la visita y el Fármaco de Estudio se administrará en el sitio del estudio inmediatamente antes de que se sirva el desayuno.

En el Día 13 (ventana de -1 día), (un día antes del final de la inmovilización de la extremidad), los sujetos se admitirán en la CRU por la noche después de recibir instrucciones de ingerir una dieta estándar para mantener el peso y evitar la cafeína y el alcohol por tres días antes de admitirse en la CRU. A las 1900 h, consumirán una comida estandarizada y luego ayunarán (excepto el agua) y descansarán en la cama hasta la mañana siguiente (Día 14). A las 0700 h del Día 14, se quitará el refuerzo de la rodilla y se pedirá a los sujetos que usen el baño, se duchen, se laven los dientes y caminen (aproximadamente 500 pasos). A las 0800 h, los sujetos tomarán el Fármaco de Estudio bajo la supervisión del personal del sitio y se someterán a los procedimientos de prueba (que incluye el desayuno) que se describen anteriormente. Después de completar todos los procedimientos de prueba, los sujetos regresarán a la CRU, donde recibirán el almuerzo, un refrigerio más tarde en la tarde y una cena estandarizada como se describió anteriormente a las 1900 h. También se los alentará a realizar caminatas cortas hasta un total de 2000 pasos (± 250 pasos) el día 14. En el día 15, recibirán comidas estandarizadas igual que en el día 14 y descansarán en una silla en la CRU, excepto por 4 breves períodos de caminar aproximadamente 500 pasos cada uno (2000 pasos en total ± 250 pasos para todo el día). El día 16 (día de la prueba), se les pedirá a los sujetos que usen el baño, se duchen, se cepillen los dientes y caminen (aproximadamente 500 pasos) a las 0730 h. A las 0800 h, se someterán a los procedimientos de prueba (que incluye el desayuno) que se describen anteriormente. Después de completar todos los procedimientos de prueba, los sujetos recibirán el almuerzo y se darán de alta de la CRU.

En los días 21, 29 y 42 (± 1 día), los sujetos se evaluarán como pacientes ambulatorios en la CRU después de recibir instrucciones de consumir una dieta para mantener el peso y sin cafeína durante al menos 3 días antes de la visita de estudio. Llegarán a la CRU antes de las 0800 h después de un ayuno nocturno, debe recolectarse una muestra de sangre alrededor de las 0800 h, y el Fármaco de Estudio debe administrarse inmediatamente después. El desayuno estandarizado se proporcionará inmediatamente después de la dosificación (excepto el día 42) y luego se realizará la prueba como se describió anteriormente.

Dos grupos de tratamiento en este estudio:

a) Grupo de tratamiento A: Tratado con 100 mg de Compuesto 1 dos veces al día desde el Día 1 hasta el Día 29. b) Grupo de tratamiento B: Tratado con placebo dos veces al día desde el Día 1 hasta el Día 29.

Si hay un aumento de peso al final del estudio (Día 42), se proporcionará un programa de pérdida de peso como una opción para todos los sujetos.

Diagnóstico y criterios principales para la inclusión: Criterios de inclusión claves: 1) Hombres sanos de 30 a 55 años, inclusivos, en el momento del examen; 2) Los sujetos deben gozar de buena salud, según lo que se determina por el historial médico, el examen físico, los signos vitales, el electrocardiograma (ECG) y los resultados de las pruebas clínicas; 3) No se limita a una silla de ruedas o se limita a una cama; 4) Peso > 50,0 kg; y 5) IMC entre 18 y 30,0 kg/m2, inclusivo, en el momento del examen. Criterios de exclusión claves: 1) Glucosa en ayunas > 110 mg/dL (solo Visita de Pesquisa); 2) Creatinina sérica > 1,5 mg/dL (Visita de Pesquisa e Inicio; si la creatinina sérica es > 1,5 mg/dL y el aclaramiento de creatinina es > 60 ml/min, el sujeto no necesita excluirse); 3) Nivel de troponina I por encima del límite superior de lo normal (ULN; Visita de Pesquisa e Inicio); 4) Pruebas de función hepática (LFT) > 1,5x ULN (Visita de Pesquisa e Inicio); 5) Evidencia de disfunción significativa del sistema orgánico (por ejemplo, Diabetes, enfermedad cardiovascular, cirrosis, hipogonadismo, hipo o hipertiroidismo; hipertensión); 6) Cualquier fluctuación en el peso (no más de ± 2 % del peso corporal) por autoinforme del sujeto en los 3 meses previos a la Visita de Pesquisa; 7) Recibió el Compuesto 1 en un ensayo clínico previo; 8) Fumar dentro de los 6 meses anteriores al Día -1; y 9) Puntuación en la Prueba de Pesquisa de Alcohol de Michigan superior a 2.

Criterios de Seguridad: Eventos adversos (EA), pruebas de laboratorio clínico, signos vitales, electrocardiograma de 12 derivaciones (ECG) y exámenes físicos.

Todos los análisis de seguridad se basarán en la población de seguridad, que comprende todos los sujetos que se asignan al azar a un grupo de tratamiento y que posteriormente reciben la medicación del estudio. Las variables de seguridad se resumirán mediante el uso de estadísticas descriptivas (media, desviación estándar, mediana, intervalo y número de observaciones).

Farmacocinética (PK): A través de la PK del Compuesto 1 a 100 mg BID (dos veces al día) durante 28 días de tratamiento. Se recolectarán muestras de sangre para la evaluación de las concentraciones mínimas del Compuesto 1 en el plasma a lo largo del estudio. Las extracciones de sangre antes de la dosis (t = 0) para las muestras de PK se tomaron dentro de los 10 minutos previos a la dosificación en los días 6, 14, 16, 21 y 29. Las muestras de plasma recogidas de sujetos que recibieron el Compuesto 1 se analizaron para determinar las concentraciones del Compuesto 1 mediante el uso de un método bioanalítico previamente desarrollado y validado.

Todos los análisis PK se basarán en la población PK, que comprende todos los sujetos que recibieron el Compuesto 1. Todos los parámetros PK que se derivan y las concentraciones plasmáticas del Compuesto 1 en cada punto de tiempo de evaluación programado se resumirán con estadísticas descriptivas (media aritmética y geométrica, desviación estándar, coeficiente de variación, mediana, intervalo y número de observaciones). También se generarán visualizaciones gráficas de las concentraciones individuales del sujeto y de la media en plasma del Compuesto 1 través del tiempo.

Farmacodinámica (PD): Los parámetros de PD se evaluarán al inicio (Día 1 [am]), Día 14, Día 16, Día 21, Día 29 y Día 42 para medir los cambios desde el inicio hasta el Día 14, desde el Día 14 hasta el Día 16, desde el Día 14 hasta el Día 21, desde el Día 14 hasta el Día 29, y desde el Día 14 hasta el Día 42. Los parámetros PD serán: 1) Prueba de fuerza muscular (MST); 2) Prueba de rendimiento físico (PPT); 3) medición del área de la sección transversal del músculo (CSA) (mediante imágenes de resonancia magnética [IRM]); y 4) medición de biomarcadores de tejido muscular (biopsia muscular). Los biomarcadores que se evaluaron del tejido muscular fueron: 1) Análisis de expresión génica (matriz genética global); 2) perfil genético PCG-1a secuencia abajo; 3) micro ARN; 4) Contenido de proteínas (fosfo-mTOR, mTOR, Ub, CS, COX subunidad II, COX subunidad IV); 5) Análisis de enzimas (citrato sintasa, COX); y 6) tamaño de la fibra muscular. No se realizará una IRM CSA el Día 16, y los biomarcadores del tejido muscular no se evaluarán el día 42.

El tiempo de recolección de muestras PD estará sujeto al cronograma disponible de cada procedimiento en cada uno de los días de prueba. Se recolectarán muestras de sangre dentro de 1 hora de la dosificación (t=0). El desayuno se proporcionará a las 0800 h (± 1 hora) inmediatamente después de la dosificación. La biopsia muscular (que no se realizó en el Día 42) se realizará a las 1000 h (2 horas ± 15 minutos en referencia a la hora del desayuno). Las pruebas de fuerza muscular y rendimiento físico se realizarán después de la biopsia muscular. La resonancia magnética (IRM) del muslo se realizará en último lugar (no se realizó el Día 16).

Después de un ayuno nocturno, se recolectarán aproximadamente 30 ml de sangre venosa (antecubital) dentro de 1 hora del tiempo de dosificación (0800 h), para medir los laboratorios de seguridad y los siguientes parámetros de PD: glucosa, insulina, hsCRP, panel de lípidos (HDL-c, LDL-c, colesterol total y triglicéridos). Las muestras de sangre para la determinación de la concentración de glucosa se recolectarán en tubos refrigerados que contienen heparina y se analizarán inmediatamente después de la recolección.

Una biopsia por punción del cuádriceps femoral (~100 mg) se obtendrán a través de una pequeña incisión cutánea durante la anestesia local (lidocaína, 2 %). Una alícuota del tejido muscular se incrustará en TissueTek® para histología; el tejido muscular restante se enjuagará inmediatamente en tampón de homogeneización helado (Tris-HCl 50 mM pH 7,5, e DtA 1 mM, EGTA 1 mM, glicerofosfato 10 mM, NaF 50 mM, Tritón-X al 0,1 %, 2-mercaptoetanol al 0,1 % , 1 tableta inhibidora de proteasa/fosfatasa completa [Roche Diagnostics Ltd, Burgess Hill, Reino Unido]) o solución salina tamponada, se limpiará de tejido conectivo y sangre, se dividirá en dos alícuotas (una alícuota debe ser de alrededor de 40 mg) y se sumergirá en nitrógeno líquido y luego se almacenará a -80 °C hasta su posterior procesamiento.

La Prueba de Fuerza Muscular (MST): La cantidad máxima de peso que el participante puede levantar para una repetición (1-RM) se medirá en una máquina de pesas de múltiples estaciones Hoist para los siguientes ejercicios: prensa de piernas, extensión de rodilla, flexión de rodilla y prensa de banca. Se realizarán pruebas isocinéticas (Cybex) de extensión/flexión de rodilla para evaluar las deficiencias en el reclutamiento rápido de fuerza. Los sujetos se sentarán en el dispositivo de prueba y se amarrarán para evitar que la pelvis se deslice hacia adelante. El brazo de movimiento se ajustará a la longitud de la pierna del sujeto y se determinará el peso de la pierna. Las pruebas isocinéticas de los extensores y flexores de la rodilla se realizarán a 0°/s, 60°/s y 180°/s. Se realizarán de cuatro a cinco repeticiones en cada modo con los dos valores más altos que se usan para el análisis de datos. Los sujetos estarán familiarizados con estos procedimientos durante la visita de selección.

La Prueba de Rendimiento Físico (PPT): Para evaluar objetivamente el rendimiento físico, administraremos la prueba de rendimiento físico modificada (PPT). El PPT modificado es una medida global del rendimiento físico que se basa en el rendimiento que evalúa la capacidad de realizar las actividades diarias habituales, que incluyen las actividades básicas de la vida diaria y las actividades instrumentales de la vida diaria. Incluye 6 tareas cronometradas: 1) subir un tramo de 10 escaleras, 2) ponerse de pie 5 veces desde una silla alta de 16", 3) caminar 50 pies, 4) ponerse y quitarse el abrigo, 5) recoger un centavo colocado a 12" delante del pie en el lado dominante, y 6) levantar un libro de 7 lb a un estante ~12 pulgadas por encima de la altura del hombro. Las otras 3 tareas incluyen una evaluación de 1) la capacidad de subir y bajar 4 tramos de 10 escaleras, 2) el rendimiento de un giro de 360° y 3) el equilibrio de pie con los pies uno al lado del otro, semi-tándem, y tándem completo.

Imagen de resonancia magnética: La IRM se usará para cuantificar el volumen muscular del muslo. Las imágenes se adquirirán en un escáner de resonancia magnética de Siemens superconductor de 1,5 T (Siemens, Iselin, NJ) en las instalaciones de la Unidad de Imágenes Humanas de la Facultad de Medicina de la Universidad de Washington. Las imágenes axiales bilaterales ponderadas en T1 con y sin saturación de grasa se obtendrán mediante el uso de secuencias de Siemens disponibles comercialmente, y se comenzará 10 cm proximales al borde distal del fémur y se cubrirá una extensión aproximada de 10 cm. Después de corregir/restar la grasa intramuscular, los volúmenes musculares en cada una de las imágenes se determinarán al segmentar las áreas musculares de sección transversal para cada corte mediante el uso del software Matlab (Mathworks, Natick, MA) y al sumar el área por espesor de corte para todas las rebanadas. El método de análisis incluirá una serie de etapas semiautomatizados, como el filtrado de imágenes/corrección de homogeneidad, la identificación de tejidos mediante análisis de umbral, revisión/corrección manual de clasificaciones resultantes e informes de volúmenes musculares.

El análisis de PD se basará en la población evaluable. Las variables PD se resumirán con estadísticas descriptivas (media, desviación estándar, mediana, intervalo y número de observaciones). Pueden realizarse análisis inferenciales apropiados para evaluar las tendencias del tratamiento en el cambio desde el inicio o las diferencias entre grupos. En particular, habrá un análisis de pares emparejados de cada sujeto en el estudio. El análisis comparará los niveles variables de PD antes de la exposición al fármaco con pruebas al plasma del sujeto durante cada día de dosificación y visita de estudio final. El cambio dentro del grupo desde el inicio hasta el Día 14, del Día 14 al 16, del Día 14 al 21, del Día 14 al 29 y del Día 14 al 42 y las diferencias entre los grupos desde el inicio hasta el Día 14, del Día 14 al 16, del Día 14 al 21, se evaluarán los Días 14 a 29 y los Días 14 a 42. Las variables con distribuciones sesgadas se transformarán logarítmicamente antes del análisis. Si los datos no se distribuyen normalmente después de la transformación logarítmica, se usarán pruebas no paramétricas apropiadas.

El siguiente ejemplo y los resultados que se asocian se proporcionan como ilustraciones de algunas modalidades de la invención y no pretenden limitar el alcance del objeto que se reivindica de ninguna manera.

EJEMPLOS

En el siguiente ejemplo, la referencia al Compuesto 1 se refiere a la sal sódica del ácido (E)-[4-[3-(4-C lorofenil)-3-[4-[3-(morfolin-4-il)propinil]fenil]aliloxi]-2-metil-fenoxi] acético.

Ejemplo 1 (Ejemplo de Referencia):

Se realizó un estudio experimental para evaluar el impacto del Compuesto 1, un agonista de PPARó, en la atrofia muscular durante y después del final de la inmovilización de la extremidad en humanos. Excepto donde se indique específicamente de otra forma a continuación, todos los métodos se realizaron como se describe en el protocolo anterior.

Métodos:

Los métodos se realizaron generalmente como se describe en el protocolo. El estudio se diseñó como un estudio paralelo doble ciego, aleatorizado, controlado con placebo en sujetos varones sanos. Un total de N=24 sujetos se asignaron al azar. El número de sujetos que se asignaron al azar es más bajo de lo que se planeó originalmente. Un total de N=21 sujetos tenían datos disponibles para el análisis estadístico. A pesar del poder estadístico inferior al que se usa típicamente, se observó una superioridad estadísticamente significativa sobre el placebo para la variable de análisis de fuerza muscular primaria.

El estudio asignó al azar a 24 sujetos, 12 de los cuales se asignaron al azar para recibir el Compuesto 1 (edad media = 42; 50 % negros o afroamericanos) y 12 de los cuales se asignaron al azar para recibir el placebo (edad media = 39; 58 % negros o afroamericanos) . Un sujeto no tenía datos posteriores al inicio y, por lo tanto, no proporcionó datos que se pudieran usar. Otros dos sujetos tampoco proporcionaron datos que se pudieran usar.

El análisis estadístico comparó el grupo experimental tratado con el Compuesto 1 (n = 10) con el grupo placebo (n = 11). Las tasas de abandono en el estudio fueron del 17 % en cada grupo de tratamiento.

Durante un análisis intermedio sin cegamiento, se reveló que tres de los sujetos tratados con placebo aumentaron la fuerza muscular y también el volumen muscular durante el período de inmovilización. Posteriormente, una revisión de datos a ciegas incluyó la identificación de cualquier sujeto (independientemente del grupo de tratamiento) que tuvo un aumento significativo durante la inmovilización en el volumen muscular medido por IRM, donde un aumento significativo se definió como un aumento de más de 1 desviación estándar. Un total de 4 sujetos cumplieron este criterio, uno de los cuales se trató con el Compuesto 1. Las conclusiones del análisis, por lo tanto, se consideran conservadoras.

Se usaron métodos estadísticos de imputación múltiple para preservar el principio de intención de tratar (ITT) mientras se manejaban los datos no válidos y faltantes.

El análisis primario se ejecutó según lo que se definió en el protocolo de estudio y el plan de análisis estadístico (ver protocolo que se describe anteriormente). El análisis de apoyo incluyó hacer frente a los datos faltantes de diferentes maneras para garantizar la solidez de las conclusiones del análisis con respecto a la metodología que se usó. Métodos incluidos: (1) primario (imputación múltiple en base a la regresión recursiva), (2) casos observados (sin supresión de datos, sin imputación de datos), (3) finalizadores (grupo estable para análisis longitudinal, (4) ITT, última-observación-llevadahacia adelante (grupo estable, todos los pacientes), (5) por protocolo establecido por ICH E9 (excluye infractores de protocolo), (6) uso de mediana de placebo imputado por datos faltantes y (7) uso de placebo promedio imputado por datos faltantes. Los resultados del análisis indicaron una firme solidez frente a la metodología.

El análisis estadístico usó el análisis de covarianza (ANCOVA) con la medida de inicio usada como covariable. El cambio medio de mínimos cuadrados (LSMEAN) es un cambio medio del valor basal estimado a partir del modelo ANCOVA que refleja el ajuste de los valores al valor basal.

Resultados

La Figura 1 muestra un gráfico de los cambios medios desde el inicio en la fuerza muscular que representa el análisis primario (que refleja la imputación múltiple de los datos faltantes e inválidos) del efecto de la administración del Compuesto 1 en el rendimiento de una prueba de fuerza de extensión de rodilla de medidas repetidas durante (día 0 a día 14) y después (día siguiente 14) de la inmovilización de las extremidades en humanos.

Los datos que soportan el gráfico que se muestra en la Figura 1 también se proporciona en la Tabla 1 a continuación.

Tabla 1.

La Figura 2 muestra un gráfico de los cambios medios desde el inicio en la fuerza muscular que representa el análisis de apoyo (mediante el uso de todos los datos disponibles para sujetos con datos válidos, que excluye a los infractores del protocolo, es decir, sin imputación) del efecto de la administración del Compuesto 1 en la ejecución de la prueba de medidas repetidas de fuerza de extensión de una rodilla durante (día 0 al día 14) y después (día 14 al día 21 y día 21 al día 29) de la inmovilización de las extremidades en sujetos humanos.

Los datos que soportan el gráfico que se muestra en la Figura 2 también se proporciona en la Tabla 2 a continuación.

Tabla 2.

El conjunto de datos que se proporciona en la Tabla 2 y se representa en la Figura 2 se creó a partir del conjunto de datos que se proporciona en la Tabla 3. La Tabla 3 incluye los valores primarios de la fuerza muscular máxima en la extensión de la rodilla (KE) medida en libras (lb) en la prueba de fuerza de extensión de la rodilla de medidas repetidas. Los valores en este conjunto de datos no reflejan ningún cálculo, imputación o derivación de ningún tipo. D1 es el día 1 (de inicio, predosis), D14 es el día 14 (día en que se quita el refuerzo), D21 es el día 21 (punto final primario para el estudio) y D29 es el día 29, que es la evaluación final durante el tratamiento período. D42 es el día 42, que es una evaluación de seguridad y seguimiento, que no estaba destinada a análisis estadísticos.

Tabla 3.

El compuesto 1 fue efectivo para reducir la atrofia muscular durante la inmovilización (es decir, reducir la tasa de pérdida de fuerza muscular durante la inmovilización en relación con los sujetos de control que recibieron el placebo) y para reducir la atrofia después de la inmovilización (es decir, aumentar la tasa de retorno de la fuerza muscular al inicio después de la inmovilización en relación con los sujetos de control que recibieron el placebo).

Fue inesperado que un agonista de PPARó se asociara con la prevención de la atrofia muscular (es decir, al reducir la tasa de pérdida de fuerza muscular durante la inmovilización en relación con los sujetos de control que recibieron el placebo). El análisis mostró que en sujetos que se trataron con el Compuesto 1, las medidas de atrofia muscular que se esperarían no ocurrieron o no pudieron medirse. En otras palabras, hubo una reducción significativa en la tasa de pérdida de fuerza muscular durante la inmovilización en sujetos que recibieron el Compuesto 1 en relación con los sujetos de control que recibieron el placebo. Además, la tasa de pérdida de fuerza muscular durante la inmovilización en los sujetos que recibieron el Compuesto 1 se redujo a casi cero, ya que los sujetos que recibieron el Compuesto 1 no mostraron una pérdida significativa de fuerza muscular en comparación con sus mediciones de inicio. El análisis también mostró que el cambio medio desde el inicio hasta el día 21 en la fuerza muscular para el grupo que se trató con el Compuesto 1 mostró superioridad en relación con los sujetos de control que recibieron el placebo. A los 14 días después del final de la inmovilización (es decir, el día 28), el cambio en la fuerza muscular en comparación con el valor inicial ya no era significativamente diferente entre el grupo que se trató con el Compuesto 1 en relación con los sujetos de control que recibieron el placebo.

Claims (15)

1. REIVINDICACIONES

   i. Un agonista de PPARó para usar en un método para reducir la atrofia muscular asociada al desuso en un sujeto que lo necesite, en donde el agonista de PPARó es el ácido (E)-[4-[3-(4-Fluorofenil)-3-[4-[3-(m orfolin-4-il)propinil]fenil]aliloxi]-2—metil-fenoxi] acético o una sal farmacéuticamente aceptable de este.
2. 2. El agonista de PPARó para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la atrofia muscular asociada al desuso está causada por la inmovilización de la extremidad en el sujeto, o en donde la atrofia muscular asociada al desuso está causada por el uso de un ventilador mecánico por el sujeto.
3. 3. El agonista de PPARó para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde reducir la atrofia muscular asociada al desuso comprende reducir la tasa de pérdida de fuerza muscular en un tejido muscular del sujeto en relación con un control, en donde la tasa de pérdida de fuerza muscular comprende una comparación de una o más mediciones de la fuerza muscular en el sujeto con una medición basal de la fuerza muscular en el mismo sujeto antes de un período de desuso, en donde la fuerza muscular se mide mediante una prueba de fuerza muscular.
4. 4. El agonista de PPARó para usar de acuerdo con la reivindicación 3, en donde reducir la tasa de pérdida de fuerza muscular en el sujeto comprende un retorno a la medición basal del sujeto de la fuerza muscular más rápido que el control después de un período de desuso, o en donde reducir la tasa de pérdida de la fuerza muscular en el sujeto comprende un retorno a la medición basal del sujeto de la fuerza muscular después de un período de desuso en menos del 90 % del tiempo para retornar al valor basal para un control, o en donde la pérdida de fuerza muscular en el sujeto es menor que la pérdida de fuerza muscular en relación con el control durante un período de desuso, o en donde la pérdida de fuerza muscular en el sujeto comprende menos de un 10 % de pérdida de fuerza muscular en relación con la medición basal del sujeto de la fuerza muscular antes de un período de desuso.
5. 5. El agonista de PPARó para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde reducir la atrofia muscular asociada al desuso comprende reducir la tasa de pérdida de masa muscular en un tejido muscular del sujeto en relación con un control, en donde la tasa de pérdida de masa muscular comprende una comparación de una o más mediciones de volumen muscular en el sujeto con una medición basal del volumen muscular en el mismo sujeto, en donde el volumen muscular se mide por el área de la sección transversal de un músculo.
6. 6. El agonista de PPARó para usar de acuerdo con la reivindicación 5, en donde reducir la tasa de pérdida de masa muscular en el sujeto comprende un retorno a la medición basal de masa muscular del sujeto más rápido que el control, o en donde reducir la tasa de pérdida de masa muscular en el sujeto comprende un retorno a la medición basal del sujeto de la masa muscular después de un período de desuso en menos del 90 % del tiempo para retornar al valor basal para un control, o en donde la pérdida de masa muscular en el sujeto es menor que la pérdida de masa muscular en relación al control, o en donde la pérdida de masa muscular en el sujeto comprende menos de un 10 % de pérdida de masa muscular en relación con la medición basal de masa muscular del sujeto antes de un período de desuso.
7. 7. El agonista de PPARó para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la reducción de la atrofia muscular asociada al desuso comprende reducir la tasa de pérdida de fibras musculares de Tipo I en un tejido muscular del sujeto en relación con un control, en donde la tasa de pérdida de fibras musculares de Tipo I comprende una comparación de una o más mediciones de fibras musculares de Tipo I en el sujeto con una medición basal de fibras musculares de Tipo I en el mismo sujeto.
8. 8. El agonista de PPARó para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la reducción de la atrofia muscular asociada al desuso comprende reducir la tasa de disminución de la biogénesis mitocondrial en un tejido muscular del sujeto en relación con un control, en donde la tasa de disminución de la biogénesis mitocondrial comprende una comparación de una o más mediciones de biogénesis mitocondrial en el sujeto con una medición basal de biogénesis mitocondrial en el mismo sujeto.
9. 9. El agonista de PPARó para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en donde el agonista de PPARó se administra al sujeto que lo necesita durante un período de desuso.
10. 10. El agonista de PPARó para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en donde el agonista de PPARó se administra al sujeto que lo necesita antes de un período de desuso.
11. 11. El agonista de PPARó para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en donde el agonista de PPARó se administra al sujeto que lo necesita después de un período de desuso.
12. 12. El agonista de PPARó para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en donde el agonista de PPARó se administra al sujeto que lo necesita antes, durante o después de un período de desuso, o cualquier combinación de estos.
13. 13. El agonista de PPAR6 para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, en donde el agonista de PPAR6 es el ácido (^£^ -[4—[3—(4—Fluorofenil)—3—[4—[3—(morfolin—4—il)propinil]fenil]aliloxi]—2—metil—fenoxi] acético.
14. 14. El agonista de PPAR6 para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, en donde el agonista de PPAR6 es una sal farmacéuticamente aceptable del ácido (E)-[4-[3-(4-Fluorofenil)-3-[4-[3-(m orfolin-4-il)propinil]fenil]aliloxi]-2—metil-fenoxi] acético.
15. 15. El agonista de PPAR6 para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, en donde la cantidad efectiva del agonista de PPAR6 es de 0,1 mg/día a 500 mg/día.