ES2718557T3 - Nuevos compuestos como inhibidores de nik - Google Patents

Description

DESCRIPCIÓN

Nuevos compuestos como inhibidores de nik

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a agentes farmacéuticos útiles para la terapia y/o profilaxis en un mamífero, y en particular a inhibidores de la cinasa inductora de NF-^k B (NIK - también conocida como MAP3K14) útiles para tratar enfermedades tales como el cáncer, trastornos inflamatorios, trastornos metabólicos, incluidas la obesidad y la diabetes, y trastornos autoinmunitarios. La invención también se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden tales compuestos, a procesos para preparar tales compuestos y composiciones, y a tales compuestos o composiciones farmacéuticas para su uso en la prevención o el tratamiento de enfermedades tales como el cáncer, trastornos inflamatorios, trastornos metabólicos, incluidas la obesidad y la diabetes, y trastornos autoinmunitarios. ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a agentes farmacéuticos útiles para la terapia y/o profilaxis en un mamífero, y en particular a inhibidores de la cinasa inductora de NF-^k B (NIK - también conocida como MAP3K14) útiles para tratar enfermedades tales como el cáncer y trastornos inflamatorios. El factor nuclear kappa B (NK-^k B) es un factor de transcripción que regula la expresión de varios genes implicados en la respuesta inmunitaria, proliferación celular, apoptosis y carcinogénesis. La activación transcripcional dependiente de NF-^k B es una vía de señalización sumamente controlada mediante eventos secuenciales que incluyen la fosforilación y la degradación proteica. La NIK es una serina/treonina-cinasa que regula la activación de la vía de NF-^k B. Existen dos vías de señalización de NF-^k B, la clásica y la alternativa. NIK desempeña una función en ambas pero se ha demostrado que es indispensable para la vía de señalización alternativa en la que fosforila IKKa, lo cual provoca la proteólisis parcial de p100; esto hace que se libere p52 que a continuación se heterodimeriza con RelB, se transloca al núcleo y media la expresión génica. La vía alternativa se activa únicamente por acción de unos pocos ligandos, tales como los ligandos CD40, el factor activador de linfocitos B (BAFF), los ligandos del receptor de la linfotoxina p y el inductor débil de la apoptosis relacionado con TNF (TWEAK), y se ha demostrado que se requiere NIK para que estos ligandos puedan activar la vía. Debido a la función crucial que desempeña, la expresión de NIK está sumamente regulada. En condiciones no estimuladas normales, los niveles de la proteína NIK son muy bajos, esto se debe a su interacción con una serie de factores asociados con el receptor de TNF (TRAF), que son ubiquitina-ligasas y provocan la degradación de NIK. Se cree que cuando los ligandos estimulan la vía alternativa, los receptores activados compiten entonces por los TRAF, lo cual hace que se disocien los complejos TRAF-NIK y de esta manera se incrementan los niveles de NIK. (Thu y Richmond, Cytokine Growth F. R. 2010, 21,213-226)

Los estudios han mostrado que el bloqueo de la vía de señalización de NF-kB en las células cancerosas puede hacer que las células dejen de proliferar, que mueran y que se vuelvan más sensibles a la acción de otras terapias contra el cáncer. Se ha demostrado que NIK interviene en la patogénesis de neoplasias malignas hematológicas y tumores sólidos.

La ruta de NF-^k B está desregulada en mieloma múltiple debido a una gama de diversas anormalidades genéticas que conducen al acoplamiento de las rutas canónicas y no canónicas (Annuziata et al. Cáncer Cell 2007, 12, 115­ 130; Keats et al. ibid 2007, 12, 131-144; Demchenko et al. Blood 2010, 115, 3541-3552). Las muestras de pacientes que padecen un mieloma suelen presentar unos niveles de actividad de NIK mayores. Esto puede deberse a la amplificación cromosómica, translocaciones (que generan proteínas NIK que han perdido los dominios de unión a TRAF), mutaciones (en el domino de unión a TRAF de NIK) o mutaciones amórficas de TRAF. Los investigadores han demostrado que las líneas celulares de mieloma pueden depender de NIK para la proliferación; en estas líneas celulares, si se reduce la actividad de NIK, ya sea por inhibición por acción de un compuesto o ARNhc, esto provoca una falla de la señalización de NF-^k B y la inducción de la muerte celular (Annuziata 2007).

De manera similar, también se han observado mutaciones en TRAF y unos niveles de NIK mayores en muestras procedentes de pacientes que padecen un linfoma de Hodgkin (HL, por sus siglas en inglés). Una vez más, la proliferación de las líneas celulares derivadas de pacientes con HL es susceptible a la inhibición de la función de NIK por ARNhc y compuestos (Ranuncolo et al. Blood First Edition Paper, 2012, DOI 10.1182/blood-2012-01 -405951). Los niveles de NIK también se potencian en células de leucemia de linfocitos T en el adulto (ATL) y abordar NIK con ARNhc reducía el crecimiento de ATL in vivo (Saitoh et al. Blood 2008, 111, 5118-5129). Se ha demostrado que la oncoproteína de fusión API2-MALT1 creada por la translocación recurrente t(11;18)(q21 ;q21) en el linfoma del tejido linfoide asociado a la mucosa (MALT) induce la escisión proteolítica de la cinasa inductora de NF-^k B (NIK) en la arginina 325. La escisión de NIK genera un fragmento de NIK C-terminal que retiene la actividad cinasa y es resistente a la degradación proteosómica (debida a la pérdida de la región de unión a TRAF). La presencia de esta NIK truncada conduce a la señalización de NF-^k B alternativa constitutura, adhesión de linfocitos B mejorada y resistencia a la apoptosis. Por tanto, los inhibidores de NIK podrían representar un nuevo enfoque de tratamiento para linfoma MALT t(11 ;18)-positivo refractario (Rosebeck et al. Science 2011, 331, 468-472).

La NIK se acumula anómalamente en las células de linfoma difuso de linfocitos B grandes (DLBLC, por sus siglas en inglés) debido a la activación constitutiva del factor de activación de linfocitos B (BAFF) por interacción con el ligando estimulador de linfocitos B (BLyS) autóctono. La acumulación de NIK en líneas celulares de DLBCL humanas y en muestras tumorales de pacientes sugirió que es probable que la activación de la cinasa NIK constitutiva sea un mecanismo señalizador clave que interviene en la proliferación anómala de las células tumorales del linfoma. Los ensayos de crecimiento mostraron que usando ARNhc para inhibir la expresión de la proteína cinasa NIK en células DLBCL de tipo GCB y ABC disminuía el crecimiento de las células de linfoma in vitro, lo que implica que la activación de la ruta de NF-^kB inducida por NIK tiene una función significativa en la proliferación de DLBCL (Pham et al. Blood 2011, 117, 200-210).

Como se menciona que la función de NIK en la proliferación de células tumorales no está restringida a células hemáticas, hay informes de que los niveles de proteína NIK se estabilizan en algunas líneas celulares de cáncer pancreático y, como se observa en células sanguíneas, la proliferación de estas líneas celulares de cáncer pancreático son susceptibles a tratamiento con ARNip de NIK (Nishina et al. Biochem. Bioph. Res. Co. 2009, 388, 96-101). La activación constitutiva de NF-kB está implicada preferentemente en la proliferación de líneas celulares de cáncer de mama de subtipo basal, incluyendo niveles elevados de proteína NIK en líneas específicas (Yamamoto et al. Cáncer Sci. 2010. 101, 2391-2397). En los tumores melanómicos, los análisis en micromatrices tisulares de la expresión de NIK revelaron que existía un aumento estadísticamente significativo en la expresión de NIK en comparación con el tejido benigno. Además, las técnicas de ARNhc se usaron para reducir NIK, las líneas celulares de melanoma resultantes reducidas en NIK mostraban proliferación disminuida, apoptosis aumentada, progresión retardada del ciclo celular y crecimiento tumoral reducido en un modelo de xenoinjerto de ratón (Thu et al. Oncogene 2011, 1-13). Una gran cantidad de pruebas mostraron que NF-kB está a menudo activado constitutivamente en las líneas celulares y muestras tisulares de carcinomas broncopulmonares no microcíticos. El agotamiento de NIK por ARNi indujo la apoptosis y afectó a la eficacia del crecimiento celular del NSCLC independiente del anclaje.

Además, los estudios han demostrado que NF-kB controla la expresión de muchos genes que participan en la inflamación y que se ha observado que la señalización de NF-kB es crónicamente activa en muchas enfermedades inflamatorias tales como la artritis reumatoide, la enfermedad inflamatoria intestinal, septicemia y otras. Los agentes farmacéuticos capaces de inhibir NIK y, de esta manera, reducir la vía de señalización de NF-kB pueden tener un beneficio terapéutico para el tratamiento de enfermedades y trastornos en los que se observa una sobreactivación de la señalización de NF-^kB.

La actividad de NF-kB desregulada se asocia con la inflamación del colon y el cáncer, y se ha demostrado que los ratones deficientes en Nlrp12 eran muy propensos a la colitis y al cáncer de colon asociado a la colitis. En este contexto, el trabajo demostró que NLRP12 funciona como un regulador negativo de la vía de NF-kB a través de su interacción y regulación de NIK y TRAF3, y como un punto de control de vías cruciales asociadas con la inflamación y tumorogénesis asociada con la inflamación (Allen et al. Immunity 2012, 36, 742-754).

El factor de necrosis tumoral (TNF)-a se secreta en respuesta a estímulos inflamatorios en enfermedades tales como la artritis reumatoide y las enfermedades inflamatorias intestinales. En una serie de experimentos en células epiteliales de colon y fibroblastos embrionarios de ratón, TNF-a media tanto la apoptosis como la inflamación, lo cual estimula una cascada inflamatoria a través de la vía alternativa de activación de NF-^kB, y provoca a un aumento de p52 y RelB nuclear. TNF-a inducía la ubiquitinación de TRAF, que interactúa con NIK, conduciendo a niveles aumentados de fosfo-NIK (Bhattacharyya et al. J Biol. Chem. 2011,285, 39511 -39522).

Las respuestas inflamatorias son componentes claves de la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), como tal, se ha demostrado que NIK desempeña una función clave en el agravamiento dela enfermedad que sigue a la infección con la bacteria gramnegativa no tipificable Hemophilus influenza (Shuto et al., PNAS 2001, 98, 8774-8779). Asimismo, el humo de los cigarrillos (HC) contiene numerosas especies reactivas de oxígeno/nitrógeno, aldehídos reactivos y quinonas, que se considera que son algunas de las causas más importantes de la patogénesis de las enfermedades pulmonares inflamatorias crónicas, tales como la EPOC y los carcinomas broncopulmonares. Se ha observado un incremento en los niveles de NIK y p-IKKa en las zonas periféricas de los pulmones de fumadores y pacientes con EPOC. Además, se ha demostrado que se recluta NIK endógena a sitios promotores de genes proinflamatorios para inducir la modificación postraduccional de las histonas, modificando de ese modo los perfiles de expresión génica, en respuesta a CS o TNFa (Chung et al. PLoS ONE 2011, 6(8): e23488. doi:10.1371/journal.pone.0023488). Se utilizó un cribado de ARNhc en un modelo in vitro de la muerte celular inducida por estrés oxidativo (como un modelo de la EPOC) para examinar una colección genómica de ARNip farmacoconvertible humana con el fin de identificar genes que modulasen la respuesta celular al estrés. NIK fue uno de los genes identificados en este examen como posible diana terapéutica nueva para modular la apoptosis epitelial en enfermedades pulmonares crónicas (Wixted et al. Toxicol. in vitro 2010, 24, 310-318).

Los individuos diabéticos pueden tener problemas debido a una serie de manifestaciones adicionales asociadas con la inflamación. Una complicación de este tipo es enfermedad cardiovascular y se ha mostrado que existen niveles elevados de p-NIK, p-IKK-a/p y p-kB-a en tejidos aórticos diabéticos (Bitar et al. Life Sci. 2010, 86, 844-853). De manera similar, se ha demostrado que NIK regula las respuestas proinflamatorias de las células epiteliales tubulares proximales renales mediante mecanismos en los que participa TRAF3. Esto sugiere una función para la activación de la ruta no canónica de NF-^kB en la modulación de la inflamación inducida por diabetes en el epitelio tubular renal (Zhao et al. Exp. Diabetes Res. 2011, 1-9). El mismo grupo que ha mostrado que NIK desempeña una función crucial en la activación de la vía alternativa de NF-kB, indujo resistencia in vitro a la insulina del músculo esquelético, lo cual sugiere que NIK podría ser una diana terapéutica importante para el tratamiento de la resistencia a la insulina asociada con la inflamación en la obesidad y la diabetes de tipo 2 (Choudhary et al. Endocrinology 2011, 152, 3622­ 3627).

NF-^k B es un componente importante tanto en la autoinmunidad como en la destrucción ósea en la artritis reumatoide (AR). Los ratones que carecen de una NIK funcional no tienen nódulos linfáticos periféricos, tienen linfocitos B y T defectuosos, y una osteoclastogénesis estimulada por el ligando del receptor activador de NF-^k B deficiente. Aya et al. (J. Clin. Invest. 2005, 115, 1848-1854) investigaron la función de NIK en modelos murinos de artritis inflamatoria utilizando ratones Nik-/-. El modelo de artritis debida a la transferencia de suero se inició con anticuerpos preformados y requirió únicamente sistemas del complemento y neutrófilos intactos en los receptores. Aunque los ratones Nik-/- presentaron una inflamación equivalente a la de los controles Nik+/+, mostraron una osteoclastogénesis periarticular menos significativa y menos erosión ósea. Por el contrario, los ratones Nik-/- fueron totalmente resistentes a la artritis inducida por antígeno (AIA) que requiere una función linfocítica y de presentación del antígeno intactas pero no nódulos linfáticos. Además, la transferencia de linfocitos T o esplenocitos Nik+/+ a ratones Rag2-/- confirió propensión a la AIA, mientras que la transferencia de células Nik-/- no lo hizo. Los ratones N ik-/- también fueron resistentes a una forma de artritis espontánea y genética generada en ratones que expresaban el receptor de linfocitos T KRN y H-2g7. El mismo grupo usó ratones transgénicos con expresión de linaje OC de NIK que carece de su dominio de unión a TRAF3 (NT3) para demostrar que la activación constitutiva de NIK dirige la osteoclastogénesis y la resorción ósea potenciadas, ambas en condiciones basales y en respuesta a estímulos inflamatorios (Yang et al. PLoS One 2010, 5, 1-9, e15383). Por consiguiente, este grupo concluyó que NIK es importante en los componentes destructores del hueso e inmunitarios de la artritis inflamatoria y representa una posible diana terapéutica para estas enfermedades.

También se ha planteado la hipótesis de que la manipulación de los niveles de NIK en los linfocitos T puede tener valor terapéutico. La disminución de la actividad NIK en linfocitos T puede mejorar significativamente las alorespuestas y respuestas inmunitarias, como la GVHD (siglas en inglés de enfermedad del receptor contra el injerto) y el rechazo de trasplante, sin que ello afecte de forma negativa al sistema inmunitario tan drásticamente como lo hacen los inhibidores de la activación de NF-^k B clásica.

El documento WO2010/042337 describe derivados de 6-azaindolaminopirimidina novedosos que tienen actividad inhibidora de NIK, los documentos WO 2009/092431 y WO 2010/051781 describen derivados de azaindolo como inhibidores de cinasas.

El documento WO2009/158011 describe alcoholes alquinílicos como inhibidores de cinasas.

El documento WO2012/123522 describe compuestos de tipo alcohol propargílico 6,5-heterocíclico y usos para estos. DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a compuestos novedosos del grupo A:

y tautómeros y formas estereoisoméricas de los mismos,

y los solvatos y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

El término "sujeto", tal como se emplea en la presente, se refiere a un animal, preferentemente un mamífero (p. ej., gato, perro, primate o ser humano), más preferiblemente un ser humano, que es o que ha sido objeto de tratamiento, observación o experimentación.

El término “cantidad terapéuticamente eficaz”, tal como se emplea en la presente, se refiere a la cantidad de compuesto o agente farmacéutico activos que desencadena la respuesta biológica o medicinal en un sistema tisular, animal o ser humano, la cual un investigador, veterinario, médico u otro profesional sanitario desea obtener y que incluye el alivio o anulación de los síntomas de la enfermedad o trastorno que se esté tratando.

Se pretende que el término "composición" abarque un producto que comprende los componentes especificados en las cantidades especificadas, así como también cualquier producto que sea el resultado, directa o indirectamente, de combinaciones de los componentes especificados en las cantidades especificadas.

Se pretende que el término "tratamiento", como se utiliza en la presente, se refiera a todos los procesos en los que pueda haber una ralentización, interrupción, detención o parada de la progresión de una enfermedad, pero no indica necesariamente una eliminación total de todos los síntomas.

Tal como se utiliza en la presente, cualquier fórmula química con enlaces mostrados sólo como líneas continuas y no como enlaces en cuña o en cuña con trazo discontinuo, o indicado de otra manera como que tienen una configuración particular (por ejemplo R, S) alrededor de uno o más átomos, contempla cada estereoisómeros posible, o mezcla de dos o más estereoisómeros.

Anteriormente y a continuación en este documento, se entiende que la expresión "compuesto(s) del grupo A" incluye los tautómeros de los mismos y las formas estereoisoméricas de los mismos, y las sales farmacéuticamente aceptables y los solvatos de los mismos.

Con la expresión "compuesto(s) de la (presente) invención" o "compuesto(s) de acuerdo con la (presente) invención", se pretende los "compuesto(s) del grupo A".

Las expresiones “estereoisómeros”, “formas estereoisoméricas” o “formas estereoquímicamente isoméricas” anteriormente o en lo sucesivo en la presente se utilizan indistintamente.

La invención incluye todos los estereoisómeros de los compuestos de la invención, ya sea como un estereoisómero puro o como una mezcla de dos o más estereoisómeros.

Los enantiómeros son estereoisómeros que son imágenes especulares entre sí que no se pueden superponer. Una mezcla 1 :1 de un par de enantiómeros es un racemato o mezcla racémica.

Los atropisómeros (o atropoisómeros) son estereoisómeros que tienen una configuración espacial particular, que es el resultado de una rotación restringida alrededor de un enlace sencillo, debido a un gran impedimento estérico. Se pretende que todas las formas atropoisoméricas de los compuestos del grupo A estén incluidas dentro del alcance de la presente invención.

Los diastereómeros (o diastereoisómeros) son estereoisómeros que no son enantiómeros, es decir, que no están relacionados como imágenes especulares. Si un compuesto contiene un doble enlace, los sustituyentes pueden estar en la configuración E o Z.

Los sustituyentes en radicales (parcialmente) saturados cíclicos bivalentes pueden tener tanto la configuración cis como la trans, por ejemplo, si un compuesto contiene un grupo cicloalquilo disustituido, los sustituyentes pueden estar tanto en la configuración cis como en la trans.

Por lo tanto, la invención incluye enantiómeros, atropisómeros, diastereómeros, racematos, isómeros E, isómeros Z, isómeros cis, isómeros trans y mezclas de estos, siempre que sea químicamente posible.

Los expertos en la técnica estarán familiarizados con el significado de todos estos términos, es decir, enantiómeros, atropisómeros, diastereómeros, racematos, isómeros E, isómeros Z, isómeros cis, isómeros trans y mezclas de estos.

La configuración absoluta se especifica de acuerdo con el sistema de Cahn-Ingold-Prelog. La configuración en un átomo asimétrico se especifica con R o S. Los estereoisómeros resueltos cuya configuración absoluta se desconozca se pueden designar como (+) o (-) dependiendo de la dirección en la que hagan rotar el plano de la luz polarizada. Por ejemplo, los enantiómeros resueltos cuya configuración absoluta se desconozca se pueden designar como (+) o (-) dependiendo de la dirección en la que hagan rotar el plano de la luz polarizada.

Cuando se identifica un estereoisómero específico, esto quiere decir que dicho estereoisómero está sustancialmente exento, es decir, asociado con menos de un 50%, preferentemente menos de un 20%, más preferentemente menos de un 10%, aún más preferentemente menos de un 5%, en particular menos de un 2% y aún más preferentemente menos de un 1%, de los otros estereoisómeros. Por tanto, cuando un compuesto del grupo A se especifica, por ejemplo, como (R), esto significa que el compuesto está sustancialmente libre del isómero (S).

Algunos de los compuestos de acuerdo con el grupo A también pueden existir en su forma tautomérica. Se pretende que dichas formas, en la medida en que puedan existir, aunque no se indican de forma explícita, estén incluidas dentro del alcance de la presente invención. Se concluye que un único compuesto puede existir tanto en forma estereoisomérica como tautomérica.

Para el uso en medicina, las sales de los compuestos de esta invención se refieren a "sales farmacéuticamente aceptables" atóxicas. Sin embargo, otras sales pueden ser útiles en la preparación de compuestos de acuerdo con esta invención o de sus sales farmacéuticamente aceptables. Las sales farmacéuticamente aceptables adecuadas de los compuestos incluyen las sales de adición de ácido que se pueden formar, por ejemplo, mezclando una solución del compuesto con una solución de un ácido farmacéuticamente aceptable tal como el ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido succínico, ácido acético, ácido benzoico, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido carbónico o ácido fosfórico.

A la inversa, dichas formas salinas se pueden convertir en la forma de base libre por tratamiento con una base adecuada.

Además, cuando los compuestos de la invención contienen un resto ácido, las sales farmacéuticamente aceptables adecuadas de estos pueden incluir sales de metales alcalinos, p. ej., sales de sodio o potasio; sales de metales alcalinotérreos, p. ej., sales de calcio o magnesio; y sales formadas con ligandos orgánicos adecuados, p. ej., sales de amonio cuaternario.

Los ácidos representativos que se pueden utilizar en la preparación de sales farmacéuticamente aceptables incluyen, sin carácter limitante, los siguientes: ácido acético, ácido 2,2-dicloroacético, aminoácidos acetilados, ácido adípico, ácido algínico, ácido ascórbico, ácido L-aspártico, ácido bencenosulfónico, ácido benzoico, ácido 4-acetamidobenzoico, ácido (+)-canfórico, ácido canforsulfónico, ácido cáprico, ácido caproico, ácido caprílico, ácido cinámico, ácido cítrico, ácido ciclámico, ácido etano-1 ,2-disulfónico, ácido etanosulfónico, ácido 2-hidroxietanosulfónico, ácido fórmico, ácido fumárico, ácido galactárico, ácido gentísico, ácido glucoheptónico, ácido D-glucónico, ácido D-glucurónico, ácido L-glutámico, ácido beta-oxoglutárico, ácido glicólico, ácido hipúrico, ácido bromhídrico, ácido clorhídrico, ácido (+)-L-láctico, ácido (±)-DL-láctico, ácido lactobiónico, ácido maleico, ácido (-)-L-málico, ácido malónico, ácido (±)-DL-mandélico, ácido metanosulfónico, ácido naftaleno-2-sulfónico, ácido naftaleno 1,5-disulfónico, ácido 1-hidroxi-2-naftoico, ácido nicotínico, ácido nítrico, ácido oleico, ácido orótico, ácido oxálico, ácido palmítico, ácido pamoico, ácido fosfórico, ácido L-piroglutámico, ácido salícilico, ácido 4-aminosalícilico, ácido sebácico, ácido esteárico, ácido succínico, ácido sulfúrico, ácido tánico, ácido (+)-L-tartárico, ácido tiociánico, ácido p-toluenosulfónico, ácido trifluorometilsulfónico y ácido undecilénico.

Las bases representativas que se pueden utilizar en la preparación de sales farmacéuticamente aceptables incluyen, sin carácter limitante, las siguientes: amoníaco, L-arginina, benetamina, benzatina, hidróxido de calcio, colina, dimetiletanolamina, dietanolamina, dietilamina, 2-(dietilamino)etanol, etanolamina, etilendiamina, N-metilglucamina, hidrabamina, 1H-imidazol, L-lisina, hidróxido de magnesio, 4-(2-hidroxietil)morfolina, piperazina, hidróxido de potasio, 1 -(2-hidroxietil)pirrolidina, amina secundaria, hidróxido de sodio, trietanolamina, trometamina e hidróxido de zinc. A la inversa, dichas formas salinas se pueden convertir en las formas de ácido libre por tratamiento con un ácido adecuado.

El término solvato comprende las formas de adición de disolvente, así como las sales de las mismas, que los compuestos del grupo A son capaces de formar. Algunos ejemplos de dichas formas de adición de disolventes son, p. ej., hidratos, alcoholatos y similares.

En el ámbito de esta solicitud, un elemento, en particular cuando se menciona en relación con un compuesto del grupo A, comprende todos los isótopos y mezclas isotópicas de este elemento, de origen natural o producidos de forma sintética, con abundancia natural o en una forma isotópicamente enriquecida. Los compuestos radiomarcados del grupo A pueden comprender un isótopo radiactivo seleccionado del grupo de 2H (D), 3H, 11C, 18F, 122I, 123I, 125I, 131I, 75Br, 76Br, 77Br y 82Br. Preferentemente, el isótopo radioactivo se selecciona a partir del grupo constituido por 2H, 3H, 11C y 18F. Más preferentemente, el isótopo radioactivo es 2H. En particular, se pretende que los compuestos deuterados queden incluidos dentro del alcance de la presente invención.

En una realización, la presente invención se refiere a los compuestos 1 a 33,

sus tautómeros y formas estereoisoméricas,

y las sales de adición farmacéuticamente aceptables y los solvatos de los mismos.

En una realización, la presente invención se refiere a los compuestos 1 a 33.

Farmacología

Se ha observado que los compuestos de la presente invención inhiben la cinasa inductora de NF-^k B (NIK - también conocida como MAP3K14). Los compuestos de acuerdo con la invención y las composiciones farmacéuticas que comprenden tales compuestos pueden ser útiles para tratar o prevenir enfermedades tales como el cáncer, trastornos inflamatorios, trastornos metabólicos incluidas la obesidad y la diabetes y trastornos autoinmunitarios. En particular, los compuestos de acuerdo con la presente invención y las composiciones farmacéuticas de estos pueden ser útiles en el tratamiento de una neoplasia maligna hematológica o un tumor sólido. En una realización específica, dicha neoplasia hemática se selecciona del grupo que consiste en mieloma múltiple, mieloma múltiple, linfoma de Hodgkin, leucemia de linfocitos T, linfoma del tejido linfoide asociado a la mucosa, linfoma de linfocitos B grandes difuso y linfoma de células del manto, en una realización particular, linfoma de células del manto. En otra realización específica de la presente invención, el tumor sólido se selecciona a partir del grupo constituido por cáncer pancreático, cáncer de mama, melanoma y carcinomas broncopulmonares no microcíticos.

Los ejemplos de cánceres que pueden tratarse (o inhibirse) incluyen, aunque sin limitación, un carcinoma, por ejemplo, un carcinoma de la vejiga, de mama, de colon (por ejemplo, carcinomas colorrectales tales como adenocarcinoma de colon y adenoma de colon), de riñón, urotelial, de útero, de la epidermis, de hígado, de pulmón (por ejemplo, adenocarcinoma, carcinomas broncopulmonares no microcíticos y carcinomas broncopulmonares microcíticos, carcinomas broncopulmonares escamosos), de esófago, de la cabeza y el cuello, de la vesícula biliar, de ovario, de páncreas (por ejemplo, carcinoma pancreático exocrino), de estómago, cáncer gastrointestinal (también conocido como gástrico) (por ejemplo, tumores estromáticos gastrointestinales), de cuello del útero, de endometrio, de tiroides, de próstata o de la piel (por ejemplo, carcinoma escamocelular o dermatofibrosarcoma protuberante); cáncer de la pituitaria, un tumor hematopoyético de linaje linfático, por ejemplo, leucemia, leucemia linfocítica aguda, leucemia linfocítica crónica, linfoma de linfocitos B (por ejemplo, linfoma de linfocitos B grandes difuso, linfoma de células del manto), linfoma/leucemia de linfocitos T, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, linfoma de células pilosas o linfoma de Burkett; un tumor hematopoyético de linaje mieloide, por ejemplo, leucemias, leucemias mielógenas agudas y crónicas, leucemia mielomonocítica crónica (CMML), un trastorno mieloproliferativo, un síndrome mieloproliferativo, un síndrome mielodisplásico o leucemia promielocítica; mieloma múltiple; cáncer folicular de tiroides; cáncer hepatocelular, un tumor de origen mesenquimático (por ejemplo, sarcoma de Ewing), por ejemplo, fibrosarcoma o rabdomiosarcoma; un tumor del sistema nervioso central o periférico, por ejemplo, astrocitoma, neuroblastoma, glioma (tal como glioblastoma multiforme) o schwannoma; melanoma; seminoma; teratocarcinoma; osteosarcoma; xerodermia pigmentosa; queratoactantoma; cáncer folicular de tiroides; o sarcoma de Kaposi.

Por tanto, la invención se refiere a compuestos del grupo A para su uso como medicamento.

La invención también se refiere al uso de un compuesto del grupo A o una composición farmacéutica de acuerdo con la invención para la fabricación de un medicamento.

La presente invención también se refiere a un compuesto del grupo A o una composición farmacéutica de acuerdo con la invención para su uso en el tratamiento, la prevención, la mejora, el control o la reducción del riesgo de trastornos asociados con la disfunción de la cinasa inductora de NF-^k B en un mamífero, incluyendo un ser humano, cuyo tratamiento o prevención se ve afectado o facilitado por la inhibición de la cinasa inductora de NF-^k B.

Además, la presente invención también se refiere al uso de un compuesto del grupo A o una composición farmacéutica de acuerdo con la invención para la fabricación de un medicamento para tratar, prevenir, mejorar, controlar o reducir el riesgo de trastornos asociados con la disfunción de la cinasa inductora de NF-^k B en un mamífero, incluyendo un ser humano, cuyo tratamiento o prevención se ve afectado o facilitado por la inhibición de la cinasa inductora de NF-^k B.

La invención también se refiere a un compuesto del grupo A para su uso en el tratamiento o la prevención de una cualquiera de las enfermedades mencionadas anteriormente en este documento.

La invención también se refiere a un compuesto del grupo A para su uso en el tratamiento o la prevención de una cualquiera de las enfermedades mencionadas anteriormente en este documento.

La invención también se refiere al uso de un compuesto del grupo A para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de una cualquiera de las afecciones patológicas mencionadas anteriormente en este documento.

Los compuestos de la presente invención se pueden administrar a mamíferos, preferentemente seres humanos, para tratar o prevenir cualquiera de las enfermedades mencionadas anteriormente en la presente.

En vista de la utilidad de los compuestos del grupo A, se proporcionan los compuestos del Grupo A para utilizar en un método de tratamiento de animales de sangre caliente, incluyendo seres humanos, que padece una cualquiera de las enfermedades mencionadas anteriormente en este documento.

Dicho método comprende la administración, es decir, la administración sistémica o tópica, preferentemente la administración oral, de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto del grupo A, a animales de sangre caliente, incluyendo seres humanos.

Por lo tanto, la invención también se refiere a los compuestos del Grupo A para su uso en un método para el tratamiento de cualquiera de las enfermedades mencionadas anteriormente en la presente que comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con la invención a un paciente que lo necesite.

Un experto en la técnica comprenderá que una cantidad terapéuticamente eficaz de los compuestos de la presente invención es la cantidad suficiente para ejercer una actividad terapéutica y que esta actividad varía, entre otras cosas, dependiendo del tipo de enfermedad, la concentración del compuesto de la formulación terapéutica y el estado del paciente. En general, la cantidad de un compuesto de la presente invención que se vaya a administrar como agente terapéutico para tratar los trastornos a los que se hace referencia en la presente estará determinada en cada caso por el médico responsable.

Los expertos en el tratamiento de tales enfermedades podrán determinar la cantidad diaria terapéutica eficaz a partir de los resultados de las pruebas que se presentan más adelante en la presente. Una cantidad diaria terapéuticamente eficaz estará comprendida entre aproximadamente 0.005 mg/kg y 50 mg/kg, en particular entre 0.01 mg/kg y 50 mg/kg de peso corporal, más en particular entre 0.01 mg/kg y 25 mg/kg de peso corporal, preferentemente entre aproximadamente 0.01 mg/kg y aproximadamente 15 mg/kg, más preferentemente entre aproximadamente 0.01 mg/kg y aproximadamente 10 mg/kg, aún más preferentemente entre aproximadamente 0.01 mg/kg y aproximadamente 1 mg/kg, más preferentemente entre aproximadamente 0.05 mg/kg y aproximadamente 1 mg/kg de peso corporal. La cantidad de un compuesto de acuerdo con la presente invención, a la que también se hace referencia en la presente como principio activo, que es necesaria para lograr un efecto terapéutico variará, en cada caso, por ejemplo, según el compuesto particular, la vía de administración, la edad y el estado del receptor, y la enfermedad o trastorno particular que se esté tratando. Un método de tratamiento también puede incluir administrar el principio activo en un régimen que comprenda entre una y cuatro tomas al día. En estos métodos de tratamiento, los compuestos de acuerdo con la invención se formulan preferentemente antes de la administración. Tal como se describe a continuación en la presente, las formulaciones farmacéuticas adecuadas se preparan mediante procedimientos conocidos utilizando ingredientes conocidos y de los que se puede disponer fácilmente.

La presente invención también proporciona composiciones para prevenir o tratar los trastornos a los que se hace referencia en la presente. Dichas composiciones comprenden una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto del grupo A y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

Aunque es posible administrar el principio activo solo, es preferible presentarlo como una composición farmacéutica. Por consiguiente, la presente invención proporciona además una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la presente invención, junto con un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable. El portador o diluyente debe ser "aceptable" en el sentido de ser compatible con los otros ingredientes de la composición y no nocivos para los receptores de los mismos.

Las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden prepararse por cualquier método bien conocido en la técnica de farmacia, por ejemplo, usando métodos tales como los descritos en Gennaro et al. Remington's Pharmaceutical Sciences (18.a ed., Mack Publishing Company, 1990, véase especialmente la Parte 8: Preparados farmacéuticos y su elaboración). Una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto particular, en forma de base o en forma de sal de adición, como principio activo se combina en mezcla íntima con un portador farmacéuticamente aceptable, que puede tomar una gran variedad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para su administración. Estas composiciones farmacéuticas se encuentran convenientemente en formas farmacéuticas unitarias adecuadas, preferentemente, para la administración sistémica tal como la administración oral, percutánea o parenteral; o la administración tópica tal como por inhalación, une spray nasal, colirio o mediante una crema, gel, champú o similar. Por ejemplo, en la preparación de composiciones en una forma farmacéutica oral, se puede emplear cualquiera de los medios farmacéuticos habituales tales como, por ejemplo, agua, glicoles, aceites, alcoholes y similares en el caso de preparados líquidos orales tales como suspensiones, jarabes, elixires y soluciones; o portadores sólidos tales como almidones, azúcares, caolín, lubricantes, aglutinantes, agentes desintegrantes y similares en el caso de polvos, pastillas, cápsulas y comprimidos. Debido a su fácil administración, los comprimidos y las cápsulas representan la forma farmacéutica unitaria oral más conveniente, en cuyo caso se emplean obviamente portadores farmacéuticos sólidos. Para las composiciones parenterales, el portador normalmente comprenderá agua esterilizada, al menos en gran parte, aunque puede incluir otros ingredientes, por ejemplo, para incrementar la solubilidad. Se pueden preparar soluciones inyectables, por ejemplo, en las que el portador comprenda solución salina, solución de glucosa o una mezcla de solución salina y de glucosa. También se pueden preparar suspensiones inyectables, en cuyo caso se pueden emplear portadores líquidos, agentes de suspensión y similares que sean adecuados. En las composiciones adecuadas para la administración percutánea, el portador comprende opcionalmente un agente potenciador de la penetración y/o un agente humectante adecuados, opcionalmente combinados con aditivos adecuados de cualquier naturaleza en proporciones minoritarias, sin que los aditivos provoquen ningún efecto perjudicial significativo en la piel. Dichos aditivos pueden facilitar la administración a la piel y/o pueden ser útiles para preparar las composiciones deseadas. Estas composiciones se pueden administrar de varias formas, p. ej., como un parche transdérmico, como una unción dorsal puntual o como una pomada.

Es especialmente conveniente formular las composiciones farmacéuticas mencionadas anteriormente en formas farmacéuticas unitarias debido a su fácil administración y a la uniformidad de la dosis. La expresión "forma farmacéutica unitaria", tal como se utiliza en la memoria descriptiva y en las reivindicaciones en la presente, se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosis unitarias, donde cada unidad contiene una cantidad predeterminada de principio activo, calculada para producir el efecto terapéutico deseado, asociada con el portador farmacéutico requerido. Los ejemplos de tales formas farmacéuticas unitarias son comprimidos (incluidos los comprimidos recubiertos o ranurados), cápsulas, pastillas, sobres de polvos, obleas, soluciones o suspensiones inyectables, cucharaditas, cucharadas y similares, y múltiples segregados de estos.

Los presentes compuestos se pueden utilizar para la administración sistémica tal como la administración oral, percutánea o parenteral; o la administración tópica tal como por inhalación, une spray nasal, colirio o mediante una crema, gel, champú o similar. Los compuestos se administran preferentemente por vía oral. La dosificación exacta y la frecuencia de administración dependen del compuesto particular del grupo A usado, la afección particular que se esté tratando, la gravedad de la afección que se esté tratando, la edad, el peso, el género, el grado del trastorno y el estado físico general del paciente particular, así como otras medicaciones que pueda estar tomando el individuo, como saben bien los expertos en la materia. Además, es obvio que dicha cantidad diaria eficaz se puede reducir o incrementar dependiendo de la respuesta del sujeto tratado y/o dependiendo de la evaluación del médico que prescriba los compuestos de la presente invención.

Los compuestos de la presente invención se pueden administrar solos o combinados con uno o más agentes terapéuticos adicionales. La terapia combinada incluye la administración de una única formulación farmacéutica que contenga un compuesto de acuerdo con la presente invención y uno o más agentes terapéuticos adicionales, así como también la administración del compuesto de acuerdo con la presente invención y cada agente terapéutico adicional en su propia formulación farmacéutica independiente. Por ejemplo, un compuesto de acuerdo con la presente invención y un agente terapéutico se pueden administrar al paciente juntos en una única composición posológica oral, tal como un comprimido o una cápsula, o cada agente se puede administrar en formulaciones farmacéuticas orales independientes.

Para el tratamiento de las afecciones anteriores, los compuestos de la invención se pueden emplear convenientemente combinados con uno o más agentes medicinales, más concretamente, con otros agentes contra el cáncer o adyuvantes en la terapia contra el cáncer. Los ejemplos de agentes contra el cáncer o adyuvantes (agentes de apoyo en la terapia) incluyen, sin carácter limitante:

- compuestos de coordinación de platino, por ejemplo, cisplatino combinado opcionalmente con amifostina, carboplatino u oxaliplatino;

- compuestos taxánicos, por ejemplo, paclitaxel, partículas con paclitaxel unido a proteínas (AbraxaneTM) o docetaxel;

- inhibidores de la topoisomerasa I tales como compuestos de camptotecina, por ejemplo, irinotecán, SN-38, topotecán, topotecánHCl;

- inhibidores de la topoisomerasa II tales como epipodofilotoxinas o derivados de podofilotoxinas antitumorales, por ejemplo, etopósido, etopósido fosfato o tenipósido;

- alcaloides de la vinca antitumorales, por ejemplo, vinblastina, vincristina o vinorelbina;

- derivados de nucleósidos antitumorales, por ejemplo, 5-fluorouracilo, leucovorina, gemcitabina, gemcitabinaHCl, capecitabina, cladribina, fludarabina, nelarabina;

- agentes alquilantes tales como mostaza nitrogenada o nitrosourea, por ejemplo, ciclofosfamida, clorambucil, carmustina, tiotepa, mefalán (melfalán), lomustina, altretamina, busulfán, dacarbazina, estramustina, ifosfamida opcionalmente en combinación con mesna, pipobromán, procarbazina, estreptozocina, temozolomida, uracilo;

- derivados de antraciclina antitumorales, por ejemplo, daunorrubicina, doxorrubicina opcionalmente en combinación con dexrazoxano, doxil, idarrubicina, mitoxantrona, epirrubicina, epirrubicinaHCl, valrrubicina;

- moléculas que actúan sobre el receptor IGF-1, por ejemplo, picropodofilina;

- derivados de tetracarcina, por ejemplo, tetrocarcina A;

- glucocorticoides, por ejemplo, prednisona;

- anticuerpos, por ejemplo, trastuzumab (anticuerpo HER2), rituximab (anticuerpo CD20), gemtuzumab, gemtuzumab ozogamicin, cetuximab, pertuzumab, bevacizumab, alemtuzumab, eculizumab, ibritumomab tiuxetan, nofetumomab, panitumumab, tositumomab, CNTO 328;

- antagonistas del receptor de estrógeno o moduladores selectivos del receptor de estrógeno o inhibidores de la síntesis de estrógeno, por ejemplo, tamoxifeno, fulvestrant, toremifeno, droloxifeno, faslodex, raloxifeno o letrozol; - inhibidores de la aromatasa tales como exemestano, anastrozol, letrazol, testolactona y vorozol;

- agentes de diferenciación tales como retinoides, vitamina D o ácido retinoico y agentes bloqueantes del metabolismo del ácido retinoico (RAMBA, por sus siglas en inglés), por ejemplo, accutane;

- inhibidores de la ADN-metiltransferasa, por ejemplo, azacitidina o decitabina;

- antifolatos, por ejemplo, premetrexed disódico;

- antibióticos, por ejemplo, antinomicina D, bleomicina, mitomicina C, dactinomicina, carminomicina, daunomicina, levamisol, plicamicina, mitramicina;

- antimetabolitos, por ejemplo, clofarabina, aminopterina, arabinósido de citosina o metotrexato, azacitidina, citarabina, floxuridina, pentostatina, tioguanina;

- agentes inductores de la apoptosis y agentes antiangiogénicos tales como inhibidores de Bcl-2, por ejemplo, YC 137, BH 312, ABT 737, gosipol, HA 14-1, TW 37 o ácido decanoico;

- agentes de unión a la tubulina, por ejemplo, combrestatina, colchicinas o nocodazol;

- inhibidores de cinasas (p. ej., inhibidores de EGFR (receptor del factor de crecimiento epitelial), MTKI (inhibidores multicinasa), inhibidores mTOR), por ejemplo, flavoperidol, mesilato de imatinib, erlotinib, gefitinib, dasatinib, lapatinib, lapatinib ditosilato, sorafenib, sunitinib, maleato de sunitinib, temsirolimus;

- inhibidores de la farnesiltransferasa, por ejemplo, tipifarnib;

- inhibidores de la histona-desacetilasa (HDAC, por sus siglas en inglés), por ejemplo, butirato de sodio, ácido hidroxámico suberoilanilida (SAHA), depsipéptido (FR 901228), NVP-LAQ824, R306465, quisinostato, tricostatina A, vorinostat;

- inhibidores de la ruta de la ubiquitina-proteosoma, por ejemplo, PS-341, MLN .41 o bortezomib;

- yondelis;

- inhibidores de la telomerasa, por ejemplo, telomestatina;

- inhibidores de metaloproteinasa de la matriz, por ejemplo batimastat, marimastat, prinostat o metastat; - interleucinas recombinantes por ejemplo aldesleucina, denileucina diftitox, interferón alfa 2a, interferón alfa 2b, peginterferón alfa 2b;

- inhibidores de MAPK;

- retinoides, por ejemplo alitretinoína, bexaroteno, tretinoína;

- trióxido de arsénico;

- asparaginasa;

- esteroides, por ejemplo propionato de dromostanolona, acetato de megestrol, nandrolona (decanoato, fenpropionato), dexametasona;

- agonistas o antagonistas de la hormona liberadora de gonadotropina, por ejemplo abarelix, acetato de goserelina, acetato de histrelina, acetato de leuprolida;

- talidomida, lenalidomida;

- mercaptopurina, mitotano, pamidronato, pegademasa, pegaspargasa, rasburicasa;

- miméticos de BH3, por ejemplo, ABT-737;

- inhibidores de MEK, por ejemplo PD98059, AZD6244, CI-1040;

- análogos de factor estimulante de colonias, por ejemplo filgrastim, pegfilgrastim, sargramostim; eritropoyetina o análogos de la misma (por ejemplo darbepoyetina alfa); interleucina 11 ; oprelvecina; zoledronato, ácido zoledrónico; fentanilo; bisfosfonato; palifermin;

- un inhibidor del citocromo P450 17alfa-hidroxilasa-17,20-liasa esteroide (CYP17), p. ej., abiraterona, acetato de abiraterona.

Por lo tanto, una realización de la presente invención se refiere a un producto que contiene como primer principio activo un compuesto de acuerdo con la invención y como principio activo adicional uno o más agentes anticancerosos, como un preparado combinado para el uso simultáneo, por separado o secuencial en el tratamiento de pacientes que padecen cáncer.

El otro o los otros agentes medicinales y el compuesto de acuerdo con la presente invención se pueden administrar simultáneamente (p. ej., en composiciones unitarias o por separado) o secuencialmente en cualquier orden. En el último caso, los dos o más compuestos se administrarán dentro de un período, y en una cantidad y modo que sean suficientes para garantizar que se logre un efecto conveniente o sinérgico. Se comprenderá que el método y orden de administración preferidos, y las pautas y cantidades posológicas respectivas de cada componente de la combinación dependerán del otro agente medicinal particular y del compuesto de la presente invención que se estén administrando, su vía de administración, el tumor particular que se esté tratando y el receptor particular que se esté tratando. Los expertos en la técnica podrán determinar fácilmente el método y orden de administración óptimos, y las pautas y cantidades posológicas utilizando métodos convencionales y teniendo en cuenta la información expuesta en la presente. El experto en la técnica puede determinar la relación ponderal del compuesto de acuerdo con la presente invención respecto al otro o a los otros agentes anticancerosos cuando se administran como una combinación. Dicha relación, y la dosis exacta y la frecuencia de administración dependen del compuesto particular de acuerdo con la invención y del otro o los otros agentes anticancerosos utilizados, la afección particular que se esté tratando, la gravedad de la afección que se esté tratando, la edad, el peso, el sexo, la dieta, el momento de administración y el estado físico general del paciente particular, el modo de administración así como también de otra medicación que el individuo pueda estar tomando, como bien sabrán los expertos en la técnica. Además, es obvio que la cantidad diaria eficaz se puede reducir o incrementar dependiendo de la respuesta del sujeto tratado y/o dependiendo de la evaluación del médico que prescriba los compuestos de la presente invención. Una relación ponderal particular para el presente compuesto del grupo A y otro agente antineoplásico puede variar de 1/10 a 10/1, más en particular de 1/5 a 5/1, incluso más en particular de 1/3 a 3/1.

El compuesto de coordinación de platino se administra convenientemente en una dosis de 1 a 500 mg por metro cuadrado (mg/m2) de área superficial corporal, por ejemplo, de 50 a 400 mg/m2, concretamente para el cisplatino en una dosis de aproximadamente 75 mg/m2 y para el carboplatino de aproximadamente 300 mg/m2 por período de tratamiento.

El compuesto taxánico se administra convenientemente en una dosis de 50 a 400 mg por metro cuadrado (mg/m2) de área superficial corporal, por ejemplo, de 75 a 250 mg/m2, concretamente para el paclitaxel en una dosis de aproximadamente 175 a 250 mg/m2 y para el docetaxel de aproximadamente 75 a 150 mg/m2 por período de tratamiento.

El compuesto camptotecina se administra convenientemente en una dosis de 0.1 a 400 mg por metro cuadrado (mg/m2) de área superficial corporal, por ejemplo, de 1 a 300 mg/m2, concretamente para el irinotecán en una dosis de aproximadamente 100 a 350 mg/m2 y para el topotecán de aproximadamente 1 a 2 mg/m2 por período de tratamiento.

El derivado antitumoral podofilotoxina se administra convenientemente en una dosis de 30 a 300 mg por metro cuadrado (mg/m2) de área superficial corporal, por ejemplo, de 50 a 250 mg/m2, concretamente para el etopósido en una dosis de aproximadamente 35 a 100 mg/m2 y para el tenipósido de aproximadamente 50 a 250 mg/m2 por período de tratamiento.

El alcaloide la vinca antitumoral se administra convenientemente en una dosis de 2 a 30 mg por metro cuadrado (mg/m2) de área superficial corporal, concretamente para la vinblastina en una dosis de aproximadamente 3 a 12 mg/m2, para la vincristina en una dosis de aproximadamente 1 a 2 mg/m2 y para la vinorelbina en una dosis de aproximadamente 10 a 30 mg/m2 por período de tratamiento.

El derivado de nucleósidos antitumoral se administra convenientemente en una dosis de 200 a 2500 mg por metro cuadrado (mg/m2) de área superficial corporal, por ejemplo de 700 a 1500 mg/m2, concretamente, para 5-FU en una dosis de 200 a 500 mg/m2, para la gemcitabina en una dosis de aproximadamente 800 a 1200 mg/m2 y para la capecitabina de aproximadamente 1000 a 2500 mg/m2 por período de tratamiento.

Los agentes alquilantes tales como la mostaza nitrogenada o nitrosourea se administran convenientemente en una dosis de 100 a 500 mg por metro cuadrado (mg/m2) de área superficial corporal, por ejemplo, de 120 a 200 mg/m2, concretamente para la ciclofosfamida en una dosis de aproximadamente 100 a 500 mg/m2, para el clorambucil en una dosis de aproximadamente 0.1 a 0.2 mg/kg, para la carmustina en una dosis de aproximadamente 150 a 200 mg/m2, y para la lomustina en una dosis de aproximadamente 100 a 150 mg/m2 por período de tratamiento.

El derivado de antraciclina antitumoral se administra convenientemente en una dosis de 10 a 75 mg por metro cuadrado (mg/m2) de área superficial corporal, por ejemplo, de 15 a 60 mg/m2, concretamente para la doxorrubicina en una dosis de aproximadamente 40 a 75 mg/m2, para la daunorrubicina en una dosis de aproximadamente 25 a 45 mg/m2 y para la idarrubicina en una dosis de aproximadamente 10 a 15 mg/m2 por período de tratamiento. El agente antiestrogénico se administra convenientemente en una dosis de aproximadamente 1 a 100 mg diariamente dependiendo del agente particular y de la afección que se esté tratando. El tamoxifeno se administra convenientemente por vía oral en una dosis de 5 a 50 mg, preferentemente de 10 a 20 mg dos veces al día, y se continúa la terapia durante un tiempo suficiente para lograr y mantener un efecto terapéutico. El toremifeno se administra convenientemente por vía oral en una dosis de aproximadamente 60 mg una vez al día, y se continúa la terapia durante un tiempo suficiente para lograr y mantener un efecto terapéutico. El anastrozol se administra convenientemente por vía oral en una dosis de aproximadamente 1 mg una vez al día. El droloxifeno se administra convenientemente por vía oral en una dosis de aproximadamente 20-100 mg una vez al día. El raloxifeno se administra convenientemente por vía oral en una dosis de aproximadamente 60 mg una vez al día. El exemestano se administra convenientemente por vía oral en una dosis de aproximadamente 25 mg una vez al día.

Los anticuerpos se administran convenientemente en una dosis de aproximadamente 1 a 5 mg por metro cuadrado (mg/m2) de área superficial corporal, o según conste en la técnica en caso de que sea diferente. El trastuzumab se administra convenientemente en una dosis de 1 a 5 mg por metro cuadrado (mg/m2) de área superficial corporal, concretamente de 2 a 4 mg/m2 por período de tratamiento.

Estas dosis se pueden administrar, por ejemplo, una vez, dos veces o más durante el período de tratamiento, el cual se puede repetir, por ejemplo, cada 7, 14, 21 o 28 días.

Los siguientes ejemplos ilustran adicionalmente la presente invención.

Ejemplos

En los siguientes ejemplos se ilustran varios métodos para preparar los compuestos de la invención. A menos que se indique lo contrario, todos los materiales de partida se adquirieron de proveedores comerciales y se utilizaron sin purificación adicional.

En este documento, el término "DCM" significa diclorometano, "BEH" significa híbrido de etilsiloxano/sílice unido por puente, "DIPEA" significa diisopropiletilamina, "DMF" significa W,W-dimetilformamida, "DMSO" significa dimetilsulfóxido, "UPLC" significa cromatografía líquida de ultra rendimiento, "LC" significa cromatografía líquida, "EtOAc" significa acetato de etilo, "HPLC" significa cromatografía líquida de alto rendimiento, "LCMS" significa cromatografía líquida/espectrometría de masas, "MeCN" significa acetonitrilo, "MeOH" significa metanol, "Et2O" significa éter dietílico, "Rt" significa tiempo de retención, "ISOLUTE® SCX-2 SPE" significa columna de intercambio catiónico de ácido propilsulfónico de sílice ISOLUTE®, "TBAF" significa fluoruro de tetrabutilamonio, "TFA" significa ácido trifluoroacético, "SFC" significa cromatografía de fluidos supercríticos y "THF" significa tetrahidrofurano.

En las estructuras de los intermedios y los compuestos de la presente invención, el deuterio (2H) se representa mediante el símbolo químico D.

Los compuestos del grupo A pueden sintetizarse en forma de mezclas racémicas de enantiómeros que pueden separarse entre sí siguiendo procedimientos de resolución conocidos en la técnica. Los compuestos racémicos del grupo A pueden convertirse en las correspondientes formas salinas diastereoméricas por reacción con un ácido quiral adecuado. Dichas formas salinas diastereoméricas se separan posteriormente, por ejemplo, mediante una cristalización fraccionada o selectiva, y los enantiómeros se liberan de estas con álcali. Una manera alternativa de separar las formas enantioméricas de los compuestos del grupo A implica cromatografía líquida usando una fase estacionaria quiral. Dichas formas estereoquímicamente isoméricas puras también pueden obtenerse a partir de las formas estereoquímicamente isoméricas puras correspondientes de los materiales de partida adecuados, siempre que la reacción tenga lugar de manera estereoespecífica.

Preparación de los intermedios

Ejemplo A1

a) Preparación del intermedio 1

Una solución agitada de 5-bromo-1H-pirrolo[2,3-c]piridina (2.0 g, 10.2 mmol) en DMF anhidra (80 ml) en una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente se trató por partes con hidruro de sodio (0.49 g, 12.2 mmol, 60% en aceite mineral). Después de agitar durante 20 minutos, se añadió gota a gota 2-yodopropano (1.1 ml, 11.2 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante 18 horas. La mezcla se concentró al vacío, y el residuo se repartió entre agua y EtOAc. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4 y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con una mezcla de EtOAc y pentano (1:9 a 1:1 en volumen), para producir el producto deseado como un aceite marrón (1.87 g, 77%).

LCMS (Método C): TR = 3.19 min, m/z [M+H]+ = 239/241.

b) Preparación del intermedio 2

Una mezcla agitada de intermedio 1 (1.87 g, 7.81 mmol), cloruro de aluminio (2.08 g, 15.6 mmol) y DCM anhidro (40 ml) a temperatura ambiente se trató por partes con cloruro de acetilo (1.1 ml, 15.6 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante 4 horas. La mezcla se trató secuencialmente con MeOH (2.0 ml), solución acuosa 15 M de hidróxido de amonio (10 ml) y agua. La fase acuosa separada se extrajo con DCM y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con una mezcla de EtOAc y pentano (1:9 a 1:0 en volumen), para producir el producto deseado como un sólido amarillo pálido (1.67 g, 76%).

LCMS (Método B): TR = 2.88 min, m/z [M+H]+ = 281/283.

c) Preparación del intermedio 3

Una mezcla de intermedio 2 (1.66 g, 5.92 mmol) y ferc-butoxi bis(dimetilamino)metano (2.44 ml, 11.8 mmol) se agitó a 100 °C durante 30 minutos. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío para producir el producto deseado como un sólido amarillo pálido (1.99 g, 100%).

LCMS (Método C): TR = 2.80 min, m/z [M+H]+ = 336/338.

d) Preparación del intermedio 4

Una mezcla agitada de clorhidrato de guanidina (5.65 g, 59.2 mmol) y 1-butanol (40 ml) en una atmósfera de nitrógeno a 0 °C se trató por partes con metóxido de sodio (3.20 g, 59.2 mmol). Después de agitar durante 30 minutes, se añadió intermedio 3 (1.99 g, 5.92 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 100 °C durante 18 horas. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se repartió entre agua y EtOAc. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4 y se concentró al vacío. El residuo se trituró con Et2O para producir el producto deseado como un sólido blanco (1.77 g, 90%).

LCMS (Método C): TR = 2.04 min, m/z [M+H]+ = 332/334.

e) Preparación del intermedio 5

Una mezcla de intermedio 4 (1.62 g, 4.88 mmol), W-yodosuccinimida (1.65 g, 7.32 mmol) y DMF (35 ml) se agitó a 55 °C durante 2.5 horas. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, y se repartió entre agua y EtOAc. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4 y se concentró al vacío. El residuo se trituró con DCM para producir el producto deseado como un sólido amarillo (1.18 g, 53%). El filtrado se concentró al vacío y se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con una mezcla de EtOAc en pentano (0:1 a 1:0 en volumen), para producir un segundo lote de producto deseado (0.36 g, 16%).

LCMS (Método C): TR = 3.24 min, m/z [M+H]+ = 458/460.

Ejemplo A2

a) Preparación del intermedio 6

Una suspensión agitada de 5,7-dibromo-1H-pirrolo[2,3-c]piridina (2.24 g, 8.12 mmol) en DCM (34 ml) a 0 °C se trató secuencialmente con 4-dimetilaminopiridina (0.06 g, 0.49 mmol), trietilamina (2.26 ml, 12.2 mmol) y di-fercbutildicarbonato (2.13 g, 9.74 mmol). La mezcla resultante se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante 1 hora. La mezcla se repartió entre DCM y agua. La fase orgánica se secó con Na2SO4 y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con una mezcla de DCM y pentano (0:1 a 4:2 en volumen), para producir el producto deseado como un sólido blanco (2.66 g, 87%).

LCMS (Método C): TR = 4.05 min, m/z [M-(fBu)+H]+ = 319/321/323.

b) Preparación del intermedio 7

Una suspensión agitada de intermedio 6 (5.29 g, 14.07 mmol) y tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0.81 g, 0.703 mmol) en THF anhidro (54 ml) en una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente se trató con solución 0.5 M de bromuro de ciclopropil zinc en THF (42.2 ml, 21.10 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante 4 horas. La mezcla se repartió entre EtOAc y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La fase orgánica se secó con Na2SO4 y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con una mezcla de DCM y pentano (0:1 a 7:3 en volumen), para producir el producto deseado como un sólido blanco (4.0 g, 84%).

LCMS (Método C): TR = 4.61 min, m/z [M+H]+ = 337/339.

c) Preparación del intermedio 8

Una mezcla desgasada del intermedio 7 (4.0 g, 11.9 mmol), 4,4,-di-ferí-butil-2,2-dipiridilo (0.32 g, 1.19 mmol) y ciclohexano (53 mL) en una atmósfera de argón a temperatura ambiente se trató secuencialmente con di-pmetoxobis(1,5-ciclooctadieno)diiridio (0.39 g, 0.59 mmol) y 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (8.6 mL, 59.3 mmol). La mezcla resultante se agitó a 60 °C durante 45 minutos. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró y el filtrado resultante se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con una mezcla de DCM y pentano (0:1 a 7:3 en volumen), para producir el producto deseado como un sólido blanco (4.74 g, 86%).

LCMS (Método D): TR = 4.62 min, m/z [M-(ferc-butilo)+H]+ = 407/409.

d) Preparación del intermedio 9

Una mezcla de intermedio 8 (4.74 g, 10.2 mmol), 4-cloro-5-fluoropirimidin-2-amina (3.78 g, 25.6 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paladio (1.18 g, 1.02 mmol), solución acuosa 2.0 M de carbonato de sodio (20.5 ml, 40.9 mmol), tolueno (126 ml) y MeOH (17 ml) se agitó en una atmósfera de argón a 85 °C durante 3 horas. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, y se repartió entre agua y EtOAc. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4 y se concentró al vacío. El residuo se purificó por trituración con DCM, seguida de cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con una mezcla de EtOAc y pentano (0:1 a 1:1 en volumen), para producir el producto deseado como un sólido blanco (2.30 g, 50%).

LCMS (Método D): TR = 3.81 min, m/z [M-(ferc-butilo)+H]+ = 392/394.

e) Preparación del intermedio 10

Una solución agitada de intermedio 9 (0.98 g, 2.19 mmol) en DCM (25 ml) en una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente se trató con TFA (12 ml, 157 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante 6 horas. La mezcla se concentró al vacío (2 x usando tolueno para formar azeótropos del TFA) y el residuo se trituró con MeOH para producir el producto deseado como un sólido amarillo pálido (0.62 g, 80%).

LCMS (Método B): TR = 2.91 min, m/z [M+H]+ = 348/350.

Los intermedios 11 y 12 se prepararon por un protocolo de reacción análogo al intermedio 6 usando los materiales de partida apropiados (tabla 1 ).

Tabla 1:

Los intermedios 13 y 14 se prepararon por un protocolo de reacción análogo al intermedio 8 usando los materiales de partida apropiados (tabla 2).

Tabla 2:

Los intermedios 15 y 16 se prepararon por un protocolo de reacción análogo al intermedio 9 usando los materiales de partida apropiados (tabla 3).

Tabla 3:

Los intermedios 17 a 23 se prepararon por un protocolo de reacción análogo al intermedio 10 usando el material de partida apropiado (tabla 4).

Tabla 4:

Ejemplo A3

a) Preparación del intermedio 24

Una mezcla de intermedio 12 (0.50 g, 0.76 mmol), 4-(2-hidroxietil)morfolina (10 ml, 82.6 mmol), 1,10-fenantrolina (0.11 g, 0.61 mmol), yoduro de cobre(I) (0.058 g, 0.30 mmol) y Cs2CÜ3 (0.50 mmol, 1.52 mmol) se calentó por radiación microondas a 110 °C durante 0.5 horas. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, y se repartió entre agua y EtOAc. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó con Na2SÜ4 y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con una mezcla de EtOAc y pentano (0:1 a 1:0 en volumen), seguida de una mezcla de solución 2.0 M de amoniaco en MeOH y DCM (0:1 a 1:9 en volumen), para producir el producto deseado como un aceite amarillo (0.50 g, 100%).

LCMS (Método C): TR = 2.51 min, m/z [M+H]+ = 561/563.

Ejemplo A4

a) Preparación del intermedio 25

Una mezcla agitada de intermedio 17 (3.00 g, 9.74 mmol), CS2CO3 (9.5 g, 29.2 mmol) y DMF (45 ml) a temperatura ambiente se trató con éster ferc-butílico del ácido 3-metanosulfoniloxi-pirrolidin-1-carboxílico (3.87 g, 14.6 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 80 °C durante 20 horas. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se repartió entre agua y 2-metiltetrahidrofurano. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4 y se concentró al vacío. El residuo se trituró con Et2O para producir el producto deseado como un sólido marrón (3.60 g, 77%).

Los intermedios 26 a 28 se prepararon por un protocolo de reacción análogo al intermedio 25 usando los materiales de partida apropiados (tabla 5).

Tabla 5:

Ejemplo A5

a) Preparación del intermedio 29

Una solución agitada de intermedio 18 (0.20 g, 0.53 mmol) en una mezcla de MeOH (11 ml) y 1,2-dicloroetano (6.2 ml) en una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente se trató secuencialmente con acetato de sodio (0.06 g, 0.69 mmol), acetona (0.077 ml, 1.06 mmol) y triacetoxiborohidruro de sodio (0.225 g, 1.06 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante 2 horas. La mezcla se purificó por columna ISOLUTE® SCX-2 SPE, eluyendo con una mezcla de MeOH y solución 2.0 M de amoniaco en MeOH (1:0 a 0:1 en volumen), para producir el producto deseado como un sólido amarillo (0.22 g, 99%).

LCMS (Método A): TR = 2.03 min, m/z [M+H]+ = 419/421.

Los intermedios 30 a 33 se prepararon por un protocolo de reacción análogo al intermedio 29 usando los materiales de partida apropiados (tabla 6).

Tabla 6:

a) Preparación del intermedio 34

Una mezcla agitada de intermedio 18 (0.30 g, 0.79 mmol), DIPEA (0.70 ml, 1.59 mmol), THF (8.0 ml) y DMF (4 ml) a temperatura ambiente se trató con 1-bromo-3-metoxi-propano (0.18 ml, 1.59 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 70 °C durante 18 horas. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se repartió entre agua y DCM. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó con Na2SÜ4 y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con una mezcla de MeOH y DCM (de 0:1 a 2:23 en volumen), para obtener el producto deseado como un sólido blanco (0.15 g, 51%).

LCMS (Método C): TR = 0.34/1.65/1.82 min, m/z [M+H]+ = 449/451.

El intermedio 35 se preparó por un protocolo de reacción análogo al intermedio 34 usando los materiales de partida apropiados (tabla 7).

Tabla 7:

Ejemplo A7

a) Preparación del intermedio 36

Una solución agitada de intermedio 19 (3.2 g, 6.71 mmol) en una mezcla de MeOH (63 ml) y ácido acético (32 ml) en una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente se trató con (1-etoxiciclopropoxi)trimetilsilano (6.74 ml, 33.5 mmol). Después de agitar durante 10 minutes, la mezcla se trató con cianoborohidruro de sodio (2.53 g, 40.2 mmol) y la mezcla resultante se agitó a 55 °C durante 2 horas. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se repartió entre DCM y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La fase orgánica se secó con Na2SO4 y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con una mezcla de DCM y MeOH (1:0 a 19:1 en volumen). La purificación adicional por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con una mezcla de solución 2.0 M de amoniaco en MeOH y DCM (0:1 a 1:9 en volumen) produjo el producto deseado como un sólido blanco (0.85 g, 31%).

LCMS (Método C): TR = 1.86 min, m/z [M+H]+ = 403/405.

Ejemplo A8

a) Preparación del intermedio 37

Una mezcla agitada de intermedio 17 (1.00 g, 3.25 mmol), hidróxido de potasio en polvo (0.55 g, 9.74 mmol), tolueno (20 ml) y DMF (2.0 ml) en una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente se trató con éster ferc-butílico del ácido 3-metanosulfoniloxi-piperidin-1-carboxílico (1.37 g, 4.90 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 90 °C durante 18 horas. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se repartió entre EtOAc y agua. La fase orgánica se secó con Na2SO4 y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con una mezcla de solución de amoníaco 2.0 M en MeOH y DCM (de 0:1 a 1:19 en volumen). La purificación adicional por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con una mezcla de EtOAc y pentano (0:1 a 1:0 en volumen) produjo el producto deseado como un sólido amarillo pálido (0.17 g, 10%).

LCMS (Método C): TR = 3.53 min, m/z [M+H]+ = 491/493.

Ejemplo A9

a) Preparación del intermedio 38

Una solución agitada de metildifenilsililacetileno (80.0 g, 359.8 mmol) en THF anhidro (1200 mL) en una atmósfera de argón a -78 °C se trató con n-butillitio (23.5 g, 367.0 mmol) manteniendo la temperatura por debajo de -70 °C. Después de agitar durante 1 hora, la mezcla se trató con 1-ciclopropiletanona (36.3 g, 432.0 mmol) y la mezcla resultante se agitó a 0 °C durante 1.5 horas. La mezcla se desactivó añadiendo agua y se repartió entre EtOAc y agua. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4 y se concentró al vacío. El residuo se purificó por SFC preparativa quiral con las siguientes condiciones: columna, ChiralPak IC, 300 x 50 mm, 10 mm; fase móvil, CO2 (90%) y una mezcla de heptano e isopropanol (1:1 en volumen) (10%); caudal 200 ml/min, contrapresión 100 bar; detector, UV 220 nm; temperatura de columna 38 °C. El primer enantiómero eluyente se aisló como un sólido blanquecino (20.2 g, 47.5%). El enantiómero que se eluyó en segundo lugar (intermedio 38; enantiómero R o S) se aisló como un sólido blanquecino (20.2 g, 47.5%).

Ejemplo A10

a) Preparación del intermedio 39

Una solución agitada de (metildifenilsilil)acetileno (4.95 ml, 22.5 mmol) en THF anhidro (80 ml) en una atmósfera de argón a -78 °C se trató con una solución 1.6 M de n-butil-litio en hexanos (15.5 ml, 24.8 mmol) manteniendo la temperatura por debajo de -70 °C. Después de 1 hora, la mezcla se trató con acetona-de (1.95 ml, 27.0 mmol) y la mezcla resultante se agitó a 0 °C durante 1.5 horas. La mezcla se desactivó añadiendo agua y se repartió entre EtOAc y agua. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4 y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con una mezcla de EtOAc y ciclohexano (de 0:1 a 2:3 en volumen), para obtener el producto deseado como un aceite incoloro (6.31 g, 98%).

Preparación de los compuestos

Los valores de la acidez (p. ej., el contenido de ácido fórmico o ácido acético) en los compuestos que se proporcionan en la presente son aquellos obtenidos experimentalmente y pueden variar si se utilizan métodos analíticos diferentes. El contenido de ácido fórmico o ácido acético se muestra en la presente según se determinó integrando el espectro de 1H RMN y se presenta junto con los resultados de 1H RMN. Los compuestos con una acidez inferior a 0.5 equivalentes se pueden considerar bases libres.

Ejemplo B1

a) Preparación del compuesto 1

Una mezcla de intermedio 10 (0.20 g, 0.57 mmol), 2-ciclopropil-but-3-in-2-ol (0.13 g, 1.15 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0.13 g, 0.11 mmol), yoduro de cobre(I) (0.01 g, 0.05 mmol), trietilamina (0.53 ml, 3.78 mmol) y MeCN (12 ml) se calentó por radiación microondas a 100 °C durante 1 hora. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con una mezcla de solución de amoníaco 2.0 M en MeOH y DCM (de 0:1 a 3:97 en volumen). La purificación adicional por HPLC preparativa en fase inversa, eluyendo con una mezcla de MeCN y agua que contenía hidróxido de amonio al 0.1% (1:19 a 3:2 en volumen durante 20 minutos), produjo el producto deseado como un sólido amarillo pálido (0.072 g, 33%).

1H RMN (400 MHz, DMSO-ak) 5 ppm: 12.64 (s a, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.25-8.24 (m, 2H), 6.58 (s, 2H), 5.30 (s, 1H), 2.68-2.58 (m, 1H), 1.53 (s, 3H), 1.21-1.12 (m, 1H), 1.12-1.07 (m, 2H), 1.06-1.01 (m, 2H), 0.59-0.48 (m, 2H), 0.46-0.35 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.73 min, m/z [M+H]+ = 378.

Ejemplo B2

a) Preparación del compuesto 2

Una mezcla desgasificada de intermedio 20 (0.20 g, 0.62 mmol), intermedio 38 (0.29 g, 0.93 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0.14 g, 0.12 mmol), yoduro de cobre(I) (0.012 g, 0.06 mmol), trietilamina (0.61 ml, 4.35 mmol) y MeCN (7.5 ml) se trató con solución 1.0 M de TBAF en t Hf (0.31 ml, 0.31 mmol). La mezcla resultante se calentó a 100 °C durante 30 minutos. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con una mezcla de solución de amoníaco 2.0 M en MeOH y DCM (de 0:1 a 1:9 en volumen). El residuo se purificó en una columna ISOLUTE® SCX-2 SPE, eluyendo con una mezcla de MeOH y una solución 2.0 M de amoníaco en MeOH (de 1:0 a 0:1 en volumen). La purificación adicional por HPLC preparativa en fase inversa, eluyendo con una mezcla de MeCN y agua que contenía hidróxido de amonio al 0.1% (1:9 a 7:3 en volumen durante 20 minutos), produjo el producto deseado como un sólido blanco (0.11 g, 49%).

1H RMN (400 MHz, DMSO-ak) 5 ppm: 12.43 (s a, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.24 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 6.59 (s, 2H), 5.30 (s, 1H), 2.68 (s, 3H), 1.54 (s, 3H), 1.21-1.13 (m, 1H), 0.59-0.50 (m, 2H), 0.45-0.38 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.44 min, m/z [M+H]+ = 352.

Los compuestos 3 a 23 se prepararon por un protocolo de reacción análogo al ejemplo B1 o B2 usando los materiales de partida apropiados (tabla 8).

Tabla 8:

Ejemplo C1

a) Preparación de los compuestos 24 y 25

El compuesto 12 (0.12 g, 0.27 mmol) se purificó por SFC quiral con las siguientes condiciones: columna, YMC Celulosa-C; fase móvil, CO2 (75%), IPA con un 1% de dietilamina (25%); detector, UV 240 nm. Esto produjo el compuesto 24 (primer enantiómero eluyente) como un sólido blanco (0.050 g, 40%) y el compuesto 25 (segundo enantiómero eluyente) como un sólido blanco (0.023 g, 19%).

Ejemplo C2

a) Preparación de los compuestos 26 y 27

El compuesto 11 (0.06 g, 0.13 mmol) se purificó por SFC quiral con las siguientes condiciones: columna, YMC Celulosa-C; fase móvil, CO2 (70%), IPA con un 1% de dietilamina (30%); detector, UV 240 nm. Esto produjo el compuesto 26 (primer diastereoisómero eluyente) como un sólido blanco (0.018 g, 29%) y el compuesto 27 (segundo diastereoisómero eluyente) como un sólido blanco (0.016 g, 26%).

Ejemplo C3

a) Preparación de los compuestos 28 y 29

El compuesto 14 (0.04 g, 0.09 mmol) se purificó por SFC quiral con las siguientes condiciones: columna, YMC Celulosa-C; fase móvil, CO2 (70%), IPA con un 1% de dietilamina (30%); detector, UV 240 nm. Esto produjo el compuesto 28 (primer enantiómero eluyente) como un sólido amarillo pálido (0.018 g, 45%) y el compuesto 29 (segundo enantiómero eluyente) como un sólido amarillo pálido (0.016 g, 39%).

Ejemplo C4

Preparación de los compuestos 30 y 31

El compuesto 19 (0.06 g, 0.17 mmol) se purificó por SFC quiral con las siguientes condiciones: columna, YMC Amilosa-C; fase móvil, CO2 (75%), IP^a con un 1% de dietilamina (25%); detector, UV 240 nm. Esto produjo el compuesto 30 (primer enantiómero eluyente) como un sólido amarillo (0.022 g, 35%) y el compuesto 31 (segundo enantiómero eluyente) como un sólido amarillo (0.017 g, 27%).

Ejemplo C5

Preparación de los compuestos 32 y 33

El compuesto 18 (0.06 g, 0.16 mmol) se purificó por SFC quiral con las siguientes condiciones: columna, LUX Celulosa-4; fase móvil, CO2 (50%), I PA con un 1% de dietilamina (50%); detector, UV 240 nm. Esto produjo el compuesto 32 (primer enantiómero eluyente) como un sólido blanquecino (0.017 g, 28%) y el compuesto 33 (segundo enantiómero eluyente) como un sólido blanquecino (0.014 g, 23%).

Parte analítica

LCMS

Los experimentos de espectrometría de masas (LCMS) para determinar los tiempos de retención y las masas iónicas asociadas se realizaron utilizando los siguientes métodos:

Método A: Los experimentos se realizaron con un espectrómetro de masas de cuadrupolo ZMD de Waters acoplado a un sistema de LC 1525 de Waters con un detector de haz de diodos. El espectrómetro tenía una fuente de electronebulización que operaba en modo de ionización positivo y negativo. Se logró una detección adicional utilizando un detector evaporativo de dispersión de la luz Sedex 85. La LC se llevó a cabo utilizando una columna C18 30 x 4.6mm de 3 micrones Luna y un caudal de 2 mL/min. El sistema disolvente inicial era agua al 95% que contenía ácido fórmico al 0.1% (disolvente A) y MeCN al 5% que contenía ácido fórmico al 0.1% (disolvente B) durante los primeros 0.5 minutos seguido de un gradiente de hasta el 5% de disolvente A y el 95% de disolvente B durante los siguientes 4 min. El sistema disolvente final se mantuvo constante durante 1 minuto adicional.

Método B: Los experimentos se realizaron con un espectrómetro de cuadrupolo VG Platform II de Waters acoplado a un sistema de LC 1050 de Hewlett Packard con un detector de haz de diodos. El espectrómetro tenía una fuente de electronebulización que operaba en modo de ionización positivo y negativo. Se logró una detección adicional utilizando un detector evaporativo de dispersión de la luz Sedex 85. La LC se llevó a cabo utilizando una columna C18 30 x 4.6mm de 3 micrones Luna y un caudal de 2 mL/min. El sistema disolvente inicial era agua al 95% que contenía ácido fórmico al 0.1% (disolvente A) y MeCN al 5% que contenía ácido fórmico al 0.1% (disolvente B) durante los primeros 0.3 minutos seguido de un gradiente de hasta el 5% de disolvente A y el 95% de disolvente B durante los siguientes 4 min. El sistema disolvente final se mantuvo constante durante 1 minuto adicional.

Método C: Los experimentos se realizaron con un espectrómetro de masas de cuadrupolo LC Platform de Waters acoplado a un sistema de LC HP1100 de Hewlett Packard con un detector de haz de diodos. El espectrómetro tenía una fuente de electronebulización que operaba en modo de ionización positivo y negativo. Se logró una detección adicional utilizando un detector evaporativo de dispersión de la luz Sedex 85. La LC se llevó a cabo utilizando una columna C1830 x 4.6mm de 3 micrones Luna de Phenomenex y un caudal de 2 mL/min. El sistema disolvente inicial era agua al 95% que contenía ácido fórmico al 0.1% (disolvente A) y MeCN al 5% que contenía ácido fórmico al 0.1% (disolvente B) durante los primeros 0.5 minutos seguido de un gradiente de hasta el 5% de disolvente A y el 95% de disolvente B durante los siguientes 4 min. El sistema disolvente final se mantuvo constante durante 1 minuto adicional.

Método D; Los experimentos se realizaron con un espectrómetro de masas de cuadrupolo ZQ de Waters acoplado a un sistema de LC HP1100 de Hewlett Packard con una bomba cuaternaria y un detector PDA. El espectrómetro tenía una fuente de electronebulización que operaba en modo de ionización positivo y negativo. Se logró una detección adicional utilizando un detector evaporativo de dispersión de la luz Sedex 65. La LC se llevó a cabo utilizando una columna C1830 x 4.6mm de 3 micrones Luna de Phenomenex y un caudal de 2 mL/min. El sistema disolvente inicial era agua al 95% que contenía ácido fórmico al 0.1% (disolvente A) y MeCN al 5% que contenía ácido fórmico al 0.1% (disolvente B) durante los primeros 0.3 minutos seguido de un gradiente de hasta el 5% de disolvente A y el 95% de disolvente B durante los siguientes 4 min. El sistema disolvente final se mantuvo constante durante 1 minuto adicional.

Método E: Los experimentos se realizaron con un espectrómetro de masas de cuadrupolo Micromass ZQ2000 de Waters acoplado a un sistema de UPLC Acquity de Waters con un detector UV PDA. El espectrómetro tenía una fuente de electronebulización que operaba en modo de ionización positivo y negativo. La LC se llevó a cabo utilizando una columna C18 de 1.7 micrones BEH de Acquity, una columna RP18 de 1.7 micrones BEH Shield de Acquity o una columna de 1.8 micrones HST de Acquity. Las dimensiones de cada columna eran de 100 x 2.1 mm y se mantuvieron a 40 °C con un caudal de 0.4 mL/minuto. El sistema disolvente inicial era agua al 95% que contenía ácido fórmico al 0.1% (disolvente A) y MeCN al 5% que contenía ácido fórmico al 0.1% (disolvente B) durante los primeros 0.4 minutos seguido de un gradiente de hasta el 5% de disolvente A y el 95% de disolvente B durante los siguientes 5.2 min. El sistema disolvente final se mantuvo constante durante 0.8 min adicionales.

Datos de RMN

En la presente, los experimentos de RMN se llevaron a cabo utilizando un espectrómetro Unity Inova de Varian con secuencias de pulso estándar, que operaba a 400 MHz y a temperatura ambiente. Los desplazamientos químicos (5) se presentan en partes por millón (ppm) a un campo más bajo respecto al tetrametilsilano (TMS), que se utilizó como patrón interno. Se usó CDCl3 (cloroformo deuterado) o DMSO-afe (DMSO deuterado, sulfóxido de dimetilo-d6) como disolvente.

Los valores de la acidez (p. ej., el contenido de ácido fórmico o ácido acético) en los compuestos que se proporcionan en la presente son aquellos obtenidos experimentalmente y pueden variar si se utilizan métodos analíticos diferentes. El contenido de ácido fórmico o ácido acético se muestra en la presente según se determinó integrando el espectro de 1H RMN. Los compuestos con una acidez inferior a 0.5 equivalentes se pueden considerar bases libres.

Compuesto 3

1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm: 9.14 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.58 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 6.63 (s, 2H), 5.38-5.30 (m, 2H), 3.19-3.12 (m, 2H), 2.75 (dd, J = 7.1, 10.6 Hz, 1H), 2.56-2.45 (m,

2H), 2.42-2.34 (m, 1H), 2.00-1.89 (m, 1H), 1.55 (s, 3H), 1.22-1.14 (m, 1H), 1.12 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.09 (d, J = 6.3

Hz, 3H), 0.62-0.49 (m, 2H), 0.48-0.39 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.26 min, m/z [M+H]+ = 449.

Compuesto 4

1H RMN (400 MHz, DMSO-afe) 8 ppm 8.96 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.69 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.11 (s, 1H),

6.16 (s, 2H), 5.32 (s, 1H), 5.05-4.96 (m, 1H), 4.19 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.59 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 2.79 (t, J = 5.4 Hz, 2H),

2.49-2.44 (m, 4H), 1.59-1.54 (m, 9H), 1.22-1.14 (m, 1H), 0.62-0.49 (m, 2H), 0.48-0.36 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.05 min, m/z [M+H]+ = 491.

Compuesto 5

iH RMN (400 MHz, DMSO-afe) 8 ppm: 9.05 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.58 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.29 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 6.66 (s, 2H), 5.41-5.32 (m, 2H), 3.82 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 3.56-3.51 (m, 2H), 2.79 (t, J = 7.2 Hz 2H), 2.45-2.31 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.22-1.14 (m, 1H), 0.60-0.50 (m, 2H), 0.45-0.38 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.61 min, m/z [M+H]+ = 489.

Compuesto 6

1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 8 ppm: 9.13 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 8.59 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 8.48 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 6.63 (s, 2H), 5.41-5.35 (m, 1H), 5.34 (s, 1H), 3.20-3.10 (m, 2H), 2.64-2.52 (m, 2H), 2.48-2.39 (m, 2H), 2.25 (q, J = 8.7 Hz, 1H), 2.00-1.89 (m, 1H), 1.55 (s, 3H), 1.54-1.48 (m, 2H), 1.25-1.14 (m, 1H), 0.95 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.60-0.50 (m, 2H), 0.46-0.38 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.30 min, m/z [M+H]+ = 449.

Compuesto 7

iH RMN (400 MHz, DMSO-ds) 8 ppm: 9.11 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.58 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.45 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 6.63 (s, 2H), 5.40-5.32 (m, 2H), 3.51 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.28 (s, 3H), 3.22-3.14 (m, 2H), 2.79-2.60 (m, 3H), 2.56-2.52 (m, 1H), 2.37 (q, J = 8.5 Hz, 1H), 1.99-1.88 (m, 1H), 1.55 (s, 3H), 1.22-1.14 (m, 1H), 0.60-0.50 (m, 2H), 0.46-0.39 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.26 min, m/z [M+H]+ = 465.

Compuesto 8

iH RMN (400 MHz, DMSO-dg) 8 ppm: 9.11 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 8.59 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.45 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 6.64 (s, 2H), 5.42-5.36 (m, 1H), 5.34 (s, 1H), 3.45-3.40 (m, 2H), 3.24 (s, 3H), 3.20-3.10 (m, 2H), 2.65- 2.53 (m, 4H), 2.26 (q, J = 8.7 Hz, 1H), 2.01-1.89 (m, 1H), 1.79-1.67 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.22-1.14 (m, 1H), 0.60-0.50 (m, 2H), 0.46-0.39 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.32 min, m/z [M+H]+ = 479.

Compuesto 9

1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm: 9.02 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.64 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.46 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 6.68 (s, 2H), 5.50 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 5.37-5.29 (m, 1H), 4.68-4.60 (m, 1H), 3.87 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 3.63-3.57 (m, 2H), 2.13-2.07 (m, 1H), 1.44 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.44-0.38 (m, 2H), 0.34-0.29 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 1.87 min, m/z [M+H]+ = 393.

Compuesto 10

iH RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm: 8.57 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.24 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.61 (s, 2H), 5.52-5.48 (m, 1H), 5.31 (s, 1H), 3.25 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 3.15 (dt, J = 2.8, 8.8 Hz, 1H), 2.89 (s, 3H), 2.65-2.53 (m, 3H), 2.48-2.44 (m, 1H), 2.25 (q, J = 8.7 Hz, 1H), 1.93-1.83 (m, 1H), 1.54 (s, 3H), 1.21-1.11 (m, 4H), 0.60-0.49 (m, 2H), 0.45-0.38 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.06 min, m/z [M+H]+ = 449.

Compuesto 11 (0.8 equivalentes de ácido fórmico)

iH RMN (400 MHz, DMSO-dg) 8 ppm: 9.12 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.59 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.46 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 8.16 (s, 0.8H), 6.63 (s, 2H), 5.40-5.32 (m, 2H), 3.19-3.10 (m, 2H), 2.65-2.52 (m, 3H), 2.48-2.41 (m, 1H), 2.25 (q, J = 8.7 Hz, 1H), 1.99-1.89 (m, 1H), 1.55 (s, 3H), 1.53-1.35 (m, 4H), 1.22-1.14 (m, 1H), 0.92 (t, J = 7.3 Hz, 3H), 0.60-0.50 (m, 2H), 0.46-0.38 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.48 min, m/z [M+H]+ = 463.

Compuesto 12

iH RMN (400 MHz, CDCI3) 8 ppm: 8.81 (s, 1H), 8.69 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.15 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 5.02 (s, 2H), 4.71-4.62 (m, 1H), 3.12-3.07 (m, 1H), 2.78-2.71 (m, 1H), 2.56 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 2.42-2.33 (m, 4H), 2.19­ 2.12 (m, 1H), 1.97-1.76 (m, 3H), 1.59-1.52 (m, 2H), 0.93 (t, J = 7.4 Hz, 3H).

LCMS (Método E): TR = 2.14 min, m/z [M+H]+ = 443.

Compuesto 13

iH RMN (400 MHz, DMSO-dg) 8 ppm: 12.62 (s a, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.26-8.24 (m, 2H), 6.59 (s, 2H), 5.31 (s, 1H), 2.66- 2.58 (m, 1H), 1.53 (s, 3H), 1.21-1.13 (m, 1H), 1.13-1.00 (m, 4H), 0.60- 0.50 (m, 2H), 0.48-0.37 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.71 min, m/z [M+H]+ = 378.

Compuesto 14

1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 8 ppm: 9.03 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.62 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.47 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.29 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 7.07 (s a, 1H), 6.67 (s, 2H), 5.38-5.30 (m, 1H), 3.87 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 3.62-3.57 (m, 2H), 2.13-2.07 (m, 1H), 1.94 (s, 3H), 0.44-0.38 (m, 2H), 0.34-0.28 (m, 2H). LCMS (Método E): TR = 2.20 min, m/z [M+H]+ = 476.

Compuesto 15

iH RMN (400 MHz, DMSO-ds) 8 ppm: 9.04 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.64 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.47 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.29 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.67 (s, 2H), 5.39-5.31 (m, 1H), 3.88 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 3.63-3.58 (m, 2H), 2.63 (s, 3H), 2.13-2.07 (m, 1H), 1.89 (s, 3H), 0.45-0.38 (m, 2H), 0.34-0.29 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.13 min, m/z [M+H]+ = 475.

Compuesto 16

iH RMN (400 MHz, DMSO-ds) 8 ppm: 9.03 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.63 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.47 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.29 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 6.68 (s, 2H), 6.54 (s a, 1H), 6.39 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 5.38-5.30 (m, 1H), 3.90-3.85 (m, 2H), 3.63­ 3.57 (m, 2H), 2.42 (d, J = 0.8 Hz, 3H), 2.13-2.07 (m, 1H), 1.85 (s, 3H), 0.44-0.38 (m, 2H), 0.34-0.30 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.28 min, m/z [M+H]+ = 474.

Compuesto 17

iH RMN (400 MHz, DMSO-dg) 8 ppm: 9.00 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 8.90 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 8.59 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.45 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 7.51 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 6.66 (s, 2H), 6.17 (s, 1H), 5.37-5.29 (m, 1H), 3.87 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 3.62-3.57 (m, 2H), 2.13-2.06 (m, 1H), 1.92 (s, 3H), 0.44-0.37 (m, 2H), 0.34-0.28 (m, 2H). LCMS (Método E): TR = 1.96 min, m/z [M+H]+ = 471.

Compuesto 18

iH RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm: 12.48 (s a, 1H), 8.80 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.63 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 6.63 (s, 2H), 6.52 (s, 1H), 6.39 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 2.42 (d, J = 0.8 Hz, 3H), 1.85 (s, 3H).

LCMS (Método E): TR = 2.42 min, m/z [M+H]+ = 379.

Compuesto 19

iH RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm: 12.45 (s a, 1H), 8.79 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.62 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.62 (s, 2H), 1.94 (s, 3H).

LCMS (Método E): TR = 2.32 min, m/z [M+H]+ = 381.

Compuesto 20

iH RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm: 12.41 (s a, 1H), 8.78 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.59 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.30 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.24 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 6.62 (s, 2H), 5.32 (s, 1H), 1.99-1.92 (m, 4H), 1.81 -1.68 (m, 4H).

LCMS (Método E): TR = 2.40 min, m/z [M+H]+ = 338.

Compuesto 21

iH RMN (400 MHz, DMSO-dg) 8 ppm: 9.01 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 8.60 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 8.45 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 6.67 (s, 2H), 5.36-5.30 (m, 2H), 3.87 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 3.63-3.57 (m, 2H), 2.14-2.06 (m, 1H), 1.99-1.94 (m, 4H), 1.79-1.68 (m, 4H), 0.45-0.38 (m, 2H), 0.34-0.30 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.26 min, m/z [M+H]+ = 433.

Compuesto 22

iH RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm: 12.63 (s a, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.24 (d, J = 2.7 Hz, 2H), 6.60 (s, 2H), 5.30 (s, 1H), 2.66-2.59 (m, 1H), 1.97-1.91 (m, 4H), 1.79-1.67 (m, 4H), 1.13-1.08 (m, 2H), 1.07-1.00 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.72 min, m/z [M+H]+ = 378.

Compuesto 23

1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm: 12.67 (s a, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.27-8.23 (m, 2H), 6.59 (s, 2H), 6.49 (s, 1H), 6.38 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 2.67-2.59 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 1.84 (s, 3H), 1.13-1.07 (m, 2H), 1.07-1.00 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.75 min, m/z [M+H]+ = 419.

Compuesto 24

iH RMN (400 MHz, CDCI3) 8 ppm: 8.82 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 8.69 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.15 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.04 (s, 2H), 4.71-4.62 (m, 1H), 3.14-3.07 (m, 1H), 2.77-2.71 (m, 1H), 2.58-2.53 (m, 1H), 2.47 (s, 1H), 2.42-2.33 (m, 3H), 2.19-2.10 (m, 1H), 1.97-1.74 (m, 3H), 1.59-1.51 (m, 2H), 0.94 (t, J = 7.4 Hz, 3H).

LCMS (Método E): TR = 2.14 min, m/z [M+H]+ = 443.

Compuesto 25

iH RMN (400 MHz, CDCI3) 8 ppm: 8.81 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 8.69 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.15 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 5.02 (s, 2H), 4.71-4.62 (m, 1H), 3.12-3.09 (m, 1H), 2.77-2.71 (m, 1H), 2.60-2.54 (m, 1H), 2.42-2.33 (m, 4H), 2.19-2.10 (m, 1H), 1.97-1.76 (m, 3H), 1.56-1.50 (m, 2H), 0.94 (t, J = 7.4 Hz, 3H).

LCMS (Método E): TR = 2.15 min, m/z [M+H]+ = 443.

Compuesto 26

iH RMN (400 MHz, DMSO-dg) 8 ppm: 9.13 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.59 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.46 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 6.63 (s, 2H), 5.41-5.36 (m, 1H), 5.35 (s, 1H), 3.19-3.10 (m, 2H), 2.64-2.53 (m, 2H), 2.48-2.41 (m, 2H), 2.25 (q, J = 8.7 Hz, 1H), 1.99-1.89 (m, 1H), 1.55 (s, 3H), 1.53-1.36 (m, 4H), 1.22-1.14 (m, 1H), 0.92 (t, J = 7.3 Hz, 3H), 0.60-0.50 (m, 2H), 0.46-0.38 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.46 min, m/z [M+H]+ = 463.

Compuesto 27

iH RMN (400 MHz, DMSO-dg) 8 ppm: 9.12 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 8.59 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 8.46 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 6.63 (s, 2H), 5.39-5.36 (m, 1H), 5.34 (s, 1H), 3.20-3.10 (m, 2H), 2.64-2.53 (m, 2H), 2.48-2.41 (m, 2H), 2.25 (q, J = 8.8 Hz, 1H), 2.00-1.89 (m, 1H), 1.55 (s, 3H), 1.53-1.36 (m, 4H), 1.22-1.14 (m, 1H), 0.92 (t, J = 7.3 Hz, 3H), 0.60-0.50 (m, 2H), 0.46-0.38 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.46 min, m/z [M+H]+ = 463.

Compuesto 28

iH RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm: 9.03 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.62 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.47 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.29 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.67 (s, 2H), 5.38-5.30 (m, 1H), 3.90-3.84 (m, 2H), 3.62-3.57 (m, 2H), 2.13-2.06 (m, 1H), 1.94 (s, 3H), 0.44-0.38 (m, 2H), 0.33-0.30 (m, 2H).

LCMS (Método E): TR = 2.19 min, m/z [M+H]+ = 476.

Compuesto 29

iH RMN (400 MHz, DMSO-dg) 8 ppm: 9.03 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.62 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.47 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.67 (s, 2H), 5.38-5.30 (m, 1H), 3.87 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 3.62-3.57 (m, 2H), 2.13-2.07 (m, 1H), 1.94 (s, 3H), 0.44-0.38 (m, 2H), 0.33-0.29 (m, 2H). LCMS (Método E): TR = 2.19 min, m/z [M+H]+ = 476.

Compuesto 30

iH RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm: 12.42 (s a, 1H), 8.79 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.61 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.24 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 7.04 (s, 1 H), 6.61 (s, 2H), 1.94 (s, 3H).

LCMS (Método E): TR = 2.32 min, m/z [M+H]+ = 381.

Compuesto 31

iH RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm: 12.45 (s a, 1H), 8.78 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.61 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.04 (s, 1 H), 6.59 (s, 2H), 1.94 (s, 3H).

LCMS (Método E): TR = 2.32 min, m/z [M+H]+ = 381.

Compuesto 32

1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 8 ppm: 12.43 (s a, 1H), 8.79 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.63 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 6.62 (s, 2H), 6.51 (s, 1H), 6.39 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 2.42 (d, J = 0.8 Hz, 3H), 1.85 (s, 3H).

LCMS (Método E): TR = 2.42 min, m/z [M+H]+ = 379.

Compuesto 33

iH RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm: 12.33 (s a, 1H), 8.80 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.63 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 6.62 (s, 2H), 6.51 (s, 1H), 6.39 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 2.42 (d, J = 0.7 Hz, 3H), 1.85 (s, 3H).

LCMS (Método E): TR = 2.41 min, m/z [M+H]+ = 379.

Parte farmacológica

Ensayo biológico A

Inhibición de la actividad de autofosforilación de la cinasa inductora de NF-kappaB humana recombinante (NIK/MAP3K14) (AlphaScreen®)

Se midió la actividad de autofosforilación de NIK/MAP3K14 utilizando el formato AlphaScreen® (ascreen) (Perkin Elmer). Todos los compuestos estudiados se disolvieron en sulfóxido de dimetilo (DMSO) y el resto de las diluciones se realizaron en el tampón de ensayo. La concentración final de DMSO en los ensayos fue de un 1% (v/v). El tampón de ensayo fue Tris 50 mM pH 7.5 que contenía EGTA (ácido etilenglicol tetraacético) 1 mM, DTT (ditiotreitol) 1 mM, Na3VO40.1 mM, MgCl25 mM, Tween® 20 al 0.01%. Los ensayos se llevaron a cabo en Alfaplacas de 384 pocillos (Perkin Elmer). Las incubaciones consistieron en el compuesto, adenosina-5'-trifosfato (ATP) 25 microM y NIK/MAP3K140.2 nM. Las incubaciones se iniciaron por adición de la enzima NIK/MAP3K14 marcada con GST, se llevaron a cabo durante 1 h a 25 °C y finalizaron con la adición del tampón de parada que contenía el anticuerpo anti-fosfo-IKK Ser176/180. Se añadieron microesferas aceptoras recubiertas de proteína A y donantes recubiertas de glutatión antes de realizar una lectura utilizando un lector de placas de múltiples marcas de EnVision® (Perkin Elmer). La señal obtenida en los pocillos que servían de blanco se sustrajo de todos los demás pocillos y se determinaron las CI50 ajustando una curva sigmoidea al % de inhibición del control frente al Log10 de la concentración del compuesto.

Ensayo biológico B

Efecto de los compuestos sobre los niveles de P-IKKa en células L363

Todos los compuestos estudiados se disolvieron en DMSO y se realizaron diluciones adicionales en medio de cultivo. La concentración final de DMSO en los ensayos celulares fue de un 1% (v/v). Las células L363 humanas (ATCC) se cultivaron en medio RPMI 1640 suplementado con GlutaMax y un 10% de suero bovino fetal (PAA). Las células se mantuvieron de manera rutinaria con densidades de 0.2x106 células por mL - 1x106 células por mL a 37 °C en una atmósfera con un 5% de CO2 humidificada. Se realizaron pases con las células dos veces por semana dividiéndolas para obtener la densidad menor. Las células se sembraron en placas de 96 pocillos (Nunc 167008) con una densidad de 2x106 por mL de medio en un volumen de 75 mL por pocillo más 25 mL del factor activador de linfocitos B humanos recombinante de 1 mg/mL (BAFF/BLyS/TNFSF13B). Las células sembradas se incubaron a 37 °C en una atmósfera con un 5% de CO2 humidificada durante 24 horas. Se añadieron los fármacos y/o disolventes (20 pL) hasta un volumen final de 120 pL. Después de 2 h de tratamiento se retiraron las placas de la incubadora y se logró la lisis celular por adición de 30 mL de tampón de lisis 5x seguida por agitación en un agitador de placas a 4 °C durante 10 min. Al final de esta incubación, se centrifugaron las células lisadas a 800 x g durante 20 min a 4 °C y se evaluó el lisado para determinar los niveles de P-IKKa por inmunoensayo de sándwich que se llevó a cabo en placas Mesoscale recubiertas con anticuerpos anti-Ig de conejo. Dentro de un experimento, los resultados para cada tratamiento fueron la media de 2 pocillos replicados. A efectos de un cribado inicial, los compuestos se estudiaron utilizando una curva de dilución de 8 puntos (diluciones en serie 1:3). Para cada experimento, se realizaron en paralelo controles (que contenían MG132 y BAFF pero no el fármaco estudiado) y una incubación que servía de blanco (que contenía MG132 y BAFF y ADS125117 10 mM, una concentración de ensayo que se sabe que proporciona una inhibición completa). El valor de la incubación que servía de blanco se sustrajo de todas los valores del control y las muestras. Para determinar las CI50 se ajustó una curva sigmoidea a la representación del % de inhibición de los niveles de P-IKKa de control frente al Log10 de la concentración del compuesto.

Ensayo biológico C

Determinación de la actividad antiproliferativa sobre células LP-1, L-363 y JJN-3

Todos los compuestos estudiados se disolvieron en DMSO y el resto de las diluciones se realizaron en el medio de cultivo. La concentración final de DMSO en los ensayos de proliferación celulares fue de un 0.3% (v/v). Se evaluó la viabilidad utilizando el kit para el ensayo de la viabilidad celular CellTiter-Glo (Promega). Las células LP-1, L-363 y JJN-3 humanas (DSMZ) se cultivaron en medio RPMI 1640 suplementado con L-glutamina 2 mM y un 10% de suero bovino fetal (PAA). Las células se mantuvieron rutinariamente como células en suspensión a 37 °C en una atmósfera con un 5% de CO2 humidificada. Se realizaron pases con las células con una densidad de siembra de 0.2x106 /mL dos veces por semana. Las células se sembraron en placas de 96 pocillos negras para el cultivo tisular tratadas (Perkin Elmer). Las densidades utilizadas para la colocación en placas estuvieron comprendidas entre 2000 y 6000 células por pocillo en un volumen total de 75 pL de medio. Después de veinticuatro horas, se añadieron los fármacos y/o disolventes (25 pL) hasta un volumen final de 100 pL. Después de 72 horas de tratamiento, se retiraron las placas de la incubadora y se permitió que se equilibraran a temperatura ambiente durante aproximadamente 10 min. Se añadieron 100 pL del reactivo CellTiter-Glo a cada pocillo que se cubrió a continuación (Perkin Elmer Topseal) y se agitó en un agitador de placas durante 10 min. Se midió la luminiscencia en un HTS Topcount (Perkin Elmer). Dentro de un experimento, los resultados para cada tratamiento fueron la media de 2 pocillos replicados. A efectos de un cribado inicial, los compuestos se estudiaron utilizando una curva de dilución de 9 puntos (diluciones en serie 1:3). Para cada experimento, se realizaron en paralelo controles (que no contenían fármaco) y una incubación que servía de blanco (que contenía células que se habían leído en el momento de la adición del compuesto). El valor del blanco se sustrajo de todos los valores de las muestras y de control. Para cada muestra, el valor medio del crecimiento celular (en unidades relativas de luz) se expresó como un porcentaje del valor medio del crecimiento celular del control.

Los datos de los compuestos de la invención en los ensayos anteriores se proporcionan en la Tabla 9 (los valores de la Tabla 9 son valores promediados de todas las medidas en todos los lotes de un compuesto).

Tabla 9:

Ejemplos de composición teórica

"Ingrediente activo" (a.i.) como se usa en todos estos ejemplos se refiere a un compuesto del grupo A, incluyendo cualquier tautómero o forma estereoisomérica del mismo, o una sal de adición farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo; en particular a uno cualquiera de los compuestos ejemplificados.

A continuación se describen ejemplos típicos de recetas para la formulación de la invención:

1. Comprimidos

Principio activo 5-50 mg

Fosfato de dicalcio 20 mg

Lactosa 30 mg

Talco 10 mg

Estearato de magnesio 5 mg

Almidón de papa hasta 200 mg

2. Suspensión

Se prepara una suspensión acuosa para su administración oral de modo que cada mililitro contenga 1-5 mg del principio activo, 50 mg de carboximetilcelulosa de sodio,

1 mg de benzoato de sodio, 500 mg de sorbitol y agua hasta 1 mL.

3. Inyectable

Se prepara una composición parenteral mediante la agitación de 1.5% (peso/volumen) de principio activo en 0.9% de solución de NaCl o en 10% por volumen de polietilenglicol en agua.

4. Pomada

Principio activo 5-1000 mg

Alcohol estearílico 3 g

Lanolina 5 g

Petrolato blanco 15 g

Agua hasta 100 g

En este Ejemplo, el principio activo se puede reemplazar por la misma cantidad de cualquiera de los compuestos de acuerdo con la presente invención, en particular por la misma cantidad de cualquiera de los compuestos empleados como ejemplo.

Claims (5)

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto seleccionado de:

sus tautómeros y formas estereoisoméricas,

y las sales de adición farmacéuticamente aceptables y los solvatos de los mismos.

2. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 para su uso como medicamento.

4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 para su uso en la prevención o tratamiento del cáncer.

5. Una composición farmacéutica como la que se reivindica en la reivindicación 2 para su uso en la prevención o el tratamiento del cáncer.