ES2713185T3 - Derivados de péptidos similares a GLP-1, y sus usos - Google Patents

Abstract

Un derivado de GLP-1 seleccionado de lo siguiente: N{Épsilon-27}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]-[Aib8,Glu22,Arg26,Lys27,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Gly-Gly-Gly-Ser-N{Épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2- [[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys, Quím. 21: **Fórmula** N{Épsilon-31}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]-[Aib8,Glu22,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Gly-Gly-Gly-Ser-N{Épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2- [[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys, Quím. 22: **Fórmula** Nα([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys, **Fórmula** N{Épsilon-23}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] 20 acetil]-[Aib8,Glu22,Lys23,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Gly-Gly-Gly-Ser-N{Épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2- [[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys, Quím. 24: **Fórmula** N{Épsilon-36}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]-[Aib8,Glu22,Arg26,Arg34,Lys36]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Gly-Gly-Gly-Ser-N{Épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2- [[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoylamino)metil]cyclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etox i]acetil]Lys, Quím. 25: **Fórmula** N{Épsilon-18}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] 20 acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Gly-Gly-Gly-Ser-N{Épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2- [[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys, Quím. 26: **Fórmula** Nα([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Épsilon}[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-[[(4S)-4- carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]hexanoil]amino]hexanoil]Lys-Gly- Gly-Ser-N{Épsilon}[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]hexanoil]amino]hexanoil]Lys, Quím. 27: **Fórmula** N{Épsilon-27}-[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-[[(4S)-4-carboxi-4-(19- carboxinonadecanoilamino)butanoil]amino]hexanoil]amino]hexanoil]-[Aib8,Glu22,Arg26,Lys27,Arg34]-GLP-1- (7-37)-peptidil-Gly-Gly-Gly-Ser-N{Épsilon}[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-[[(4S)-4-carboxi-4-(19- carboxinonadecanoilamino)butanoil]amino]hexanoil]amino]hexanoil]Lys, Quím. 28: **Fórmula** Nα([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(21- carboxihenicosanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]a cetil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{Épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(21- carboxihenicosanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]a cetil]Lys, Quím. 29: **Fórmula** Nα([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Épsilon}3-[2-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]propanoilLys -Gly-Gly-Ser-N{Épsilon}3-[2-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]propanoilLys , Quím. 30: **Fórmula** Nα([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys-Ser-Pro-Glu-N{Épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys, Quím. 31: **Fórmula** Nα([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys-Pro-Glu-Gly-N{Épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys, Quím. 32: **Fórmula** Nα([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys-Ser-Ala-Glu-N{Épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys, Quím. 33: **Fórmula** N{Épsilon-36}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] 20 acetil]-[Aib8,Glu22,Arg26,Arg34,Lys36]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Ala-Glu-Ser-Pro-N{Épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2- [[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19- carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys, Quím. 34: **Fórmula**

Description

DESCRIPCION

Derivados de péptidos similares a GLP-1, y sus usos

Campo tecnico

La presente invencion se refiere a derivados de péptidos similares a GLP-1, que pueden definirse como analogos extendidos en el extremo C-terminal del péptido similar al glucagon 1 (GLP-1). Los derivados son doblemente acilados,

y una de las cadenas laterales acilo se une al aminoacido C-terminal del péptido similar a GLP-1. La invencion se

refiere, ademas, al uso farmaceutico de estos derivados.

Antecedentes de la invencion

Los documentos WO 2009/030771 A1 y WO 2011/080102 describen varios derivados de GLP-1 monoacilados que

incluyen algunos que estan acilados con diacidos grasos C12-C20.

Los documentos WO 2012/140117 A1, WO 2012/062803 A1 y WO 2012/062804 A1 describen varios derivados de

GLP-1 doblemente acilados que incluyen algunos que estan acilados con diacidos grasos C12-C18.

Breve descripcion de la invencion

Liraglutida es un derivado de GLP-1 para una administracion una vez al dfa. Se comercializa con el nombre comercial de VICTOZA® por Novo Nordisk A/S.

Semaglutida es un derivado de GLP-1 para una administracion una vez a la semana. Esta en desarrollo por Novo Nordisk A/S. Este compuesto se describe en el documento WO 2006/097537 Ejemplo 4.

La invencion se refiere a derivados de péptidos similares a GLP-1 que tienen potencial para una administracion una

vez al mes.

Los derivados son doblemente acilados. Uno de los sitios de acilacion es en el extremo C-terminal, mas en particular en la posicion que cuando se compara con GLP-1(7-37) nativo corresponded a la posicion numero 42. El otro sitio

de acilacion es internamente en el péptido similar a GLP-1, mas en particular en una de las posiciones correspondientes a la posicion 18, 23, 27, 31, 36, o 38 en GLP-1(7-37) nativo. Se usa un diacido graso largo para

ambas acilaciones.

En un segundo aspecto la invencion se refiere a composiciones farmaceuticas que comprenden los derivados de la invencion y excipientes farmaceuticamente aceptables, asf como tambien el uso medico de los derivados.

Los analogos de GLP-1 que se incorporan en los derivados de la invencion comprenden los siguientes cambios de aminoacidos cuando se comparan con GLP-1 (7-37) (sec. con num. de ident.:1): i) (8Aib, 22E, 26R, 27K, 34R, 38G,

39G, 40G, 41S, 42K); ii) (8Aib, 22E, 26R, 31K, 34R, 38G, 39G, 40G, 41S, 42K); iii) (8Aib, 22E, 26R, 34R, 38K, 39G,

40G, 41S, 42K); iv (8Aib, 22E, 23K, 26R, 34R, 38G, 39G, 40G, 41S, 42K); v) (8Aib, 22E, 26R, 34R, 36K, 38G, 39G 40G, 41S, 42K); vi) (8Aib, 18K, 22E, 26R, 34R, 38G, 39G, 40G, 41S, 42K); vii) (7Imp, 8Aib, 22E, 26R, 34R, 38K, 39G 40G, 41S, 42K); iix) (8Aib, 22E, 26R, 34R, 36K, 38A, 39E, 40S, 41P, 42K); ix) (8Aib, 22E, 26R, 34R, 36K, 38E, 39G, 40P, 41A, 42K); x) (8Aib, 22E, 26R, 34R, 36K, 38P, 39A, 40S, 41E, 42K); xi) (8Aib, 22E, 26R, 34R, 38K, 39P, 40E, 41G, 42K) (sec. con num. de ident.:: 12); xii) (8Aib, 22E, 26R, 34R, 38K, 39S, 40A, 41E, 42K); o xiii) (8Aib, 22E, 26R,

34R, 38K, 39S, 40P, 41E, 42K).

La secuencia de aminoacidos del GLP-1 (7-37) humano nativo se incluye en el Listado de Secuencias como sec. con

num. de ident.: 1 y las secs. con nums. de ident.: 2-14 son analogos de GLP-1 espedficos de los derivados de GLP-1

de la invencion.

Los derivados de la invencion representan un salto notable en la busqueda de derivados de GLP-1 de tiempos de vida

media muy largos y aun con muy buena potencia.

Descripcion

En lo que sigue, las letras del alfabeto griego pueden representarse por su sfmbolo o el nombre escrito correspondiente, por ejemplo: a = alfa; p = beta; s = epsilon; y = gamma; 8 = delta; o = omega; etc. Ademas, la letra

griega de |i puede representarse por "u", por ejemplo en |i l = ul, o en |i M = uM.

Un asterisco (*) en una formula qrnmica designa i) un punto de union, ii) un radical, y/o iii) un electron no compartido.

El péptido similar a GLP-1 comprende un péptido de formula I:

Xaa⁷-Xaa⁸-Glu-Gly-Thr-Xaaⁱ² -Thr-Ser-Asp-Xaaⁱ⁶ -Ser-Xaaⁱ⁸ -Xaaⁱ⁹ -Xaa²⁰-Glu-Xaa²²-Xaa²³-Ala-Xaa²⁵-Xaa²⁶-Xaa²⁷-Phe-Ile-Xaa³⁰-Xaa^{3 i}-Leu-Xaa³³-Xaa³⁴-Xaa³⁵-Xaa³⁶-Xaa³⁷-Xaa³⁸-Xaa³⁹-Xaa⁴⁰-Xaa^{4 i}-Xaa⁴², en donde

Xaa⁷ es L-histidina, acido (S)-2-hidroxi-3-(iH-imidazol-4-il)-propionico, D-histidina, desamino-histidina, homohistidina, N^a-acetil-histidina, N^a-formil-histidina, N^a-metil-histidina, 3-piridilalanina, 2-piridilalanina, o 4-piridilalanina; Xaa⁸ es Ala, Gly, Ser, Aib, acido (i-aminoci^d opropil)carboxflico, o acido (i-am ino^{d d} obutil)carboxflico; Xaa ⁱ² es Phe o Leu; Xaa ⁱ⁶ es Val o Leu; Xaa ⁱ⁸ es Ser, Arg, Lys, Val, o Leu; Xaaⁱ⁹ es Tyr o Gln; Xaa²⁰ es Leu o Met; Xaa²² es Gly o Glu; Xaa²³ es Gln, Glu, Lys, o Arg; Xaa²⁵ es Ala o Val; Xaa²⁶ es Arg o Lys; Xaa²⁷ es Glu, Lys, o Leu; Xaa³⁰ es Ala, Glu, o Arg; Xaa^{3 i} es Trp, Lys, o His; Xaa³³ es Val, Lys, o Arg; Xaa³⁴ es Lys, Arg, His, Asn, o Gln; Xaa³⁵ es Gly o Ala; Xaa³⁶ es Arg, Lys, o Gly; Xaa³⁷ es Gly o Pro; Xaa³⁸ es Ser, Gly, Ala, Glu, Pro, o Lys; Xaa³⁹ es Ser, Gly, Ala, Glu, o Pro; Xaa⁴⁰ es Ser, Gly, Ala, Glu, o Pro; Xaa^{4 i} es Ser, Gly, Ala, Glu, o Pro; y Xaa⁴² es Lys; con la condicion de que al menos uno de Xaa ^{i 8} , Xaa²³, Xaa²⁷, Xaa^{3 i} , Xaa³⁶, o Xaa³⁸ es Lys; en donde Lys en Xaa⁴² es un primer residuo K, y una Lys en uno de Xaa ^{i 8} , Xaa²³, Xaa²⁷, Xaa^{3 i} , Xaa³⁶, o Xaa³⁸ es un segundo residuo K; y el derivado comprende una primera y una segunda porcion de prolongacion conectadas a dichos primer y segundo residuos K, respectivamente, en donde la primera y la segunda porcion de prolongacion es de formula q^m m. i: HOOC-(CH²)ⁱ⁸ -CO-*, Q^m m. ia: HOOC-(CH²)ⁱ⁷ -CO-*, o Q^m m. ib: HOOC-(CH²)²⁰-CO-*; o una sal farmaceuticamente aceptable, amida, o ester del mismo.

En su segundo aspecto, la invencion se refiere a una composicion farmaceutica que comprende un derivado de la invencion y un excipiente farmaceuticamente aceptable; y el uso del derivado o analogo de la invencion como un medicamento, en particular para usar en (i) prevencion y/o tratamiento de todas las formas de diabetes, tales como hiperglicemia, diabetes tipo 2, alteracion de la tolerancia a la glucosa, diabetes tipo i, diabetes no dependiente de insulina, MODY (diabetes del adulto de inicio juvenil), diabetes gestacional, y/o para la reduccion de HbAiC; (ii) retraso o prevencion de la progresion de la enfermedad diabetica, tal como la progresion a diabetes tipo 2, retraso de la progresion de la alteracion de la tolerancia a la glucosa (IGT) a diabetes tipo 2 dependiente de insulina, retraso o prevencion de la resistencia a la insulina, y/o retraso de la progresion de la diabetes tipo 2 no dependiente de insulina a diabetes tipo 2 dependiente de insulina; (iii) mejoramiento de la funcion de las celulas p, tal como disminuir la apoptosis de las celulas p, aumentar la funcion de las celulas p y/o la masa de las celulas p, y/o para la restauracion de la sensibilidad a la glucosa para las celulas p; (iv) prevencion y/o tratamiento de trastornos cognitivos y/o trastornos neurodegenerativos, tales como la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Parkinson, y/o la esclerosis multiple; (v) prevencion y/o tratamiento de trastornos de la alimentacion, tales como la obesidad, por ejemplo mediante la disminucion de la ingesta de alimentos, reduccion del peso corporal, supresion del apetito, induccion de saciedad; tratamiento o prevencion del trastorno por atracones, bulimia nervosa, y/u obesidad inducida por la administracion de un antisicotico o un esteroide; reduccion de la motilidad gastrica; retraso del vaciado gastrico; aumento de la movilidad ffsica; y/o prevencion y/o tratamiento de comorbilidades de la obesidad, tales como osteoartritis y/o incontinencia urinaria; (vi) prevencion y/o tratamiento de complicaciones diabeticas, tales como angiopatfa; neuropatfa, que incluye neuropatfa periferica; nefropatfa; y/o retinopatfa; (vii) mejoramiento de los parametros lipfdicos, tales como prevencion y/o tratamiento de la dislipidemia, disminucion los lfpidos totales en suero; aumento de HDL; disminucion de la LDL pequena, densa; disminucion de VLDL; disminucion de los trigliceridos; disminucion del colesterol; disminucion de los niveles plasmaticos de lipoprotema A (Lp(a)) en un ser humano; inhibicion de la generacion de apolipoprotema A (apo(A)) in vitro y/o in vivo; (viii) prevencion y/o tratamiento de enfermedades cardiovasculares, tales como smdrome X, ateroesclerosis, infarto del miocardio, enfermedad coronaria, dano por reperfusion, accidente cerebrovascular, isquemia cerebral, una enfermedad cardiaca o cardiovascular temprana, hipertrofia ventricular izquierda, enfermedad de las arterias coronarias, hipertension, hipertension esencial, emergencia hipertensiva aguda, cardiomiopatfa, insuficiencia cardiaca, intolerancia al ejercicio, fallo cardiaco agudo y/o cronico, arritmia, disritmia cardiaca, smcope, angina de pecho, derivacion cardiaca y/o reoclusion del stent, claudicacion intermitente (ateroesclerosis obliterans), disfuncion diastolica, y/o disfuncion sistolica; y/o reduccion de la presion sangumea, tal como reduccion de la presion sangumea sistolica; (ix) prevencion y/o tratamiento de enfermedades gastrointestinales, tales como la enfermedad inflamatoria del intestino, smdrome de intestino corto, o enfermedad de Crohn o colitis; dispepsia, y/o ulceras gastricas; y/o inflamacion, tales como psoriasis, artritis psoriasica, artritis reumatoide y/o lupus eritematoso sistemico; (x) prevencion y/o tratamiento de enfermedades cnticas, tales como tratamiento de un paciente cnticamente enfermo, un paciente con una polinefropatfa (CIPNP) cntica, y/o un paciente con una posible CIPNP; prevencion del desarrollo de enfermedad cntica o CIPNP; prevencion, tratamiento y/o cura del smdrome de respuesta inflamatoria sistemica (SIRS) en un paciente; prevencion o reduccion de la posibilidad de que un paciente padezca de bacteriemia, septicemia, y/o choque septico durante la hospitalizacion; y/o estabilizacion de la glucosa en sangre, equilibrio de la insulina y opcionalmente del metabolismo en pacientes con enfermedades agudas en las unidades de cuidados intensivos; (xi) prevencion y/o tratamiento del smdrome de ovario poliqmstico (PCOS); (xii) prevencion y/o tratamiento de enfermedades cerebrales, tales como isquemia cerebral, hemorragia cerebral, y/o dano traumatico del cerebro; (xiii) prevencion y/o tratamiento de la apnea del sueno; y/o (xiv) prevencion y/o tratamiento del abuso, tal como abuso de alcohol y/o abuso de farmacos.

Un producto intermedio en la forma de un analogo de GLP-i comprende los siguientes cambios de aminoacidos en comparacion con GLP-i(7-37) (sec. con num. de ident.: i):

i) (8Aib, 22E, 26R, 27K, 34R, 38G, 39G, 40G, 4 iS , 42K); ii) (8Aib, 22E, 26R, 3 iK , 34R, 38G, 39G, 40G, 4 iS , 42K); iii) (8Aib, 22E, 26R, 34R, 38K, 39G, 40G, 4 iS , 42K); iv (8Aib, 22E, 23K, 26R, 34R, 38G, 39G, 40G, 4 iS , 42K); v) (8Aib, 22E, 26R, 34R, 36K, 38G, 39G, 40G, 4 iS , 42K); vi) (8Aib, i8K, 22E, 26R, 34R, 38G, 39G, 40G, 4iS , 42K); vii) (7Imp, 8Aib, 22E, 26R, 34R, 38K, 39G, 40G, 41S, 42K); iix) (8Aib, 22E, 26R, 34R, 36K, 38A, 39E, 40S, 41P, 42K); ix) (8Aib, 22E, 26R, 34R, 36K, 38E, 39G, 40P, 41A, 42K); x) (8Aib, 22E, 26R, 34R, 36K, 38P, 39A, 40S, 41E, 42K); xi) (8Aib, 22E, 26R, 34R, 38K, 39P, 40E, 41G, 42K) (sec. con num. de ident.: 12); xii) (8Aib, 22E, 26R, 34R, 38K, 39S, 40A, 41E, 42K); o xiii) (8Aib, 22E, 26R, 34R, 38K, 39S, 40P, 41E, 42K); o se selecciona de estos analogos.

Agonista de receptor de GLP-1

Un agonista de receptor puede definirse como un analogo que se une a un receptor y provoca una respuesta tfpica del ligando natural. Un agonista total puede definirse como uno que provoca una respuesta de la misma magnitud que el ligando natural (vease por ejemplo “Principles of Biochemistry “, AL Lehninger, DL Nelson, MM Cox, Segunda Edicion, Worth Publishers, 1993, pagina 763).

Asf, por ejemplo, un “agonista del receptor de GLP-1” puede definirse como un compuesto que es capaz de unirse al receptor de GLP-1 y es capaz de activarlo. Y un agonista "total" del receptor de GLP-1 puede definirse como un agonista del receptor de GLP-1 que es capaz de provocar una respuesta del receptor GLP-1 de magnitud similar al GLP-1 nativo.

Caractensticas estructurales

Peptidos similares a GLP-1 y analogos de GLP-1

El termino “péptido similar a GLP-1” como se usa en la presente descripcion puede referirse a un analogo (o variante) del péptido 1 similar al glucagon humano, (GLP-1(7-37)), cuya secuencia se incluye en el listado de secuencias como la sec. con num. de ident.: 1. El péptido que tiene la secuencia de sec. con num. de ident.: 1 tambien puede designarse como GLP-1 "nativo".

El péptido similar a GLP-1 puede definirse mediante la siguiente formula I:

Xaa⁷-Xaa⁸-Glu-Gly-Thr-Xaa¹²-Thr-Ser-Asp-Xaa¹⁶-Ser-Xaa¹⁸-Xaa¹⁹-Xaa²⁰-Glu-Xaa²²-Xaa²³-Ala-Xaa²⁵-Xaa²⁶-Xaa²⁷-Phe-Ile-Xaa³⁰-Xaa³¹-Leu-Xaa³³-Xaa³⁴-Xaa³⁵-Xaa³⁶-Xaa³⁷-Xaa³⁸-Xaa³⁹-Xaa⁴⁰-Xaa⁴¹-Xaa⁴²,

en donde Xaa⁷ es L-histidina, acido (S)-2-hidroxi-3-(1H-imidazol-4-il)-propionico, D-histidina, desamino-histidina, homohistidina, N^a-acetil-histidina, N^a-formil-histidina, N^a-metil-histidina, 3-piridilalanina, 2-piridilalanina, o 4-piridilalanina; Xaa⁸ es Ala, Gly, Ser, Aib, acido (1-aminociclopropil)carboxflico, o acido (1-aminociclobutil)carboxflico; Xaa¹² es Phe o Leu; Xaa¹⁶ es Val o Leu; Xaa¹⁸ es Ser, Arg, Lys, Val, o Leu; Xaa¹⁹ es Tyr o Gln; Xaa²⁰ es Leu o Met; Xaa²² es Gly o Glu; Xaa²³ es Gln, Glu, Lys, o Arg; Xaa²⁵ es Ala o Val; Xaa²⁶ es Arg o Lys; Xaa²⁷ es Glu, Lys, o Leu; Xaa³⁰ es Ala, Glu, o Arg; Xaa³¹ es Trp, Lys, o His; Xaa³³ es Val, Lys, o Arg; Xaa³⁴ es Lys, Arg, His, Asn, o Gln; Xaa³⁵ es Gly o Ala; Xaa³⁶ es Arg, Lys, o Gly; Xaa³⁷ es Gly o Pro; Xaa³⁸ es Ser, Gly, Ala, Glu, Pro, o Lys; Xaa³⁹ es Ser, Gly, Ala, Glu, o Pro; Xaa⁴⁰ es Ser, Gly, Ala, Glu, o Pro; Xaa⁴¹ es Ser, Gly, Ala, Glu, o Pro; y Xaa⁴² es Lys; con la condicion de que al menos uno de Xaa¹⁸, Xaa²³, Xaa²⁷, Xaa³¹, Xaa³⁶, o Xaa³⁸ sea Lys.

En esta formula la numeracion de los residuos de aminoacidos sigue la practica establecida en la tecnica para el GLP-1 nativo, espedficamente que el primer residuo de aminoacido (N-terminal) se enumera o se acuerda que sea la posicion num. 7, y los residuos de aminoacidos que le siguen en direccion hacia el C-terminal se enumeran 8, 9, 10, y asf sucesivamente, hasta el ultimo residuo de aminoacido (C-terminal), que en el GLP-1 nativo es Gly con numero 37, sin embargo, el péptido de la formula I tiene una cola o extension C-terminal, como se definio en la formula, hasta la posicion 42 y que la incluye.

La numeracion se realiza de manera diferente en el listado de secuencias, donde al primer residuo de aminoacido de la sec. con num. de ident.: 1 (His) se le asigna el num. 1, y al ultimo (Gly) el num. 31, y viceversa para las otras secuencias de GLP-1 del listado de secuencias. Sin embargo, en la presente descripcion nosotros seguimos la practica de numeracion establecida en la tecnica, como se explico anteriormente.

Cada uno de los analogos de GLP-1 de los derivados de la invencion pueden describirse como referencia i) al numero del residuo aminoaddico en el GLP-1(7-37) nativo correspondiente al residuo aminoaddico que se cambia (es decir, la posicion correspondiente en el GLP-1 nativo) y ii) al cambio real.

En otras palabras, el analogo de GLP-1 de la invencion puede describirse mediante referencia al péptido GLP-1(7-37) nativo, espedficamente como una variante del mismo en la cual se han cambiado varios residuos de aminoacidos, cuando se compara con GLP-1(7-37) nativo (sec. con num. de ident.: 1). Estos cambios pueden representar, independientemente, una o mas sustituciones, adiciones y/o deleciones de aminoacidos.

Los siguientes son ejemplos no limitantes de la nomenclatura adecuada de los analogos:

El péptido similar a GLP-1 incorporado en el derivado del Ejemplo 3 en la presente descripcion puede referirse como el siguiente analogo de GLP-1: (8Aib, 22E, 26R, 34R, 38K, 39G, 40G, 41S, 42K) GLP-1(7-37). Esto significa que cuando este analogo se alinea con GLP-1 nativo, tiene i) un Aib en la posicion en el analogo que corresponde, de acuerdo con el alineamiento, a la posicion 8 en GLP-1 nativo, ii) un E en la posicion en el analogo, que corresponde a la posicion 22 en GLP-1 nativo, iii) un R en la posicion en el analogo que corresponde a la posicion 26 en GLP-1 nativo, iv) una R en la posicion en el analogo que corresponde a una posicion 34 en GLP-1 nativo, v) una K en la posicion en el analogo que corresponded a la posicion 38 en GLP-1 nativo (si se extiende en el extremo C-terminal), vi) una G en la posicion en el analogo que corresponded a la posicion 39 en GLP-1 nativo (si se extiende en el extremo C-terminal), vii) una G en la posicion en el analogo que corresponded a la posicion 40 en GLP-1 nativo (si se extiende en el extremo C-terminal), iix) una S en la posicion en el analogo que corresponded a la posicion 41 en GLP-1 nativo (si se extiende en el extremo C-terminal), y ix) una K en la posicion en el analogo que corresponded a la posicion 42 en GLP-1 nativo (si se extiende en el extremo C-terminal). Todos los otros aminoacidos en este analogo son identicos a los aminoacidos correspondientes en GLP-1 nativo. Como se explico anteriormente, el péptido similar a GLP-1 de la invencion puede definirse mediante cambios de aminoacidos cuando se compara con GLP-1 nativo. Los cambios de aminoacidos analizados anteriormente pueden considerarse como sustituciones de aminoacidos y adiciones de aminoacidos, con respecto al GLP-1 nativo. En este ejemplo las adiciones son en el extremo C-terminal, y pueden, por lo tanto, referirse como extensiones C-terminal. Por ejemplo, 38K se refiere al aminoacido K que se encuentra en la posicion C-terminalmente proxima a la que corresponde a la posicion 37 en GLP-1 nativo, cuando el analogo se alinea con GLP-1 nativo. Y despues sigue G en la proxima posicion C-terminalmente en la posicion en el analogo que corresponded a la posicion 39 del GLP-1 nativo; y otro G en la posicion posterior C-terminalmente, en la posicion en el analogo que corresponded a la posicion 40 del GLP-1 nativo; y una S en la posicion posterior C-terminalmente, en la posicion en el analogo que corresponded a la posicion 41 del GLP-1 nativo, y finalmente una K en la posicion que corresponded a la posicion 42 del GLP-1 nativo.

La formula general I debe entenderse de manera similar.

Al menos uno de Xaa¹⁸, Xaa²³, Xaa²⁷, Xaa³¹, Xaa³⁶, o Xaa³⁸ en la formula I es Lys. El péptido similar a GLP-1 comprende al menos un residuo de Lys adicional, espedficamente en la posicion 42 (Xaa⁴²). Este ultimo (pos. 42) puede referirse como el primer residuo K, y el anterior, es decir una Lys en uno de Xaa¹⁸, Xaa²³, Xaa²⁷, Xaa³¹, Xaa³⁶, o Xaa³⁸, puede referirse como el segundo residuo K. El primer y el segundo residuo K constituyen dos sitios de acilacion del derivado de la invencion doblemente acilado. El péptido similar a GLP-1 puede comprender residuos adicionales de Lys, como esta claro a partir de la Formula I. En una modalidad particular el péptido similar a GLP-1 de la invencion tiene solo dos residuos de Lys.

Los analogos “que comprenden” determinados cambios especificados pueden comprender cambios adicionales, cuando se comparan con la sec. con num. de ident.: 1. En una modalidad particular, el analogo "tiene" los cambios especificados.

Como es evidente a partir de los ejemplos anteriores, los residuos de aminoacidos pueden identificarse mediante su nombre completo, su codigo de una letra, y/o su codigo de tres letras. Estas tres maneras son totalmente equivalentes.

Las expresiones “una posicion equivalente a” o "posicion correspondiente" pueden usarse para caracterizar el sitio de cambio en una variante de secuencia de GLP-1(7-37) como referencia a una secuencia de referencia tal como GLP-1(7-37) nativo (sec. con num. de ident.: 1). Las posiciones equivalentes o correspondientes, asf como tambien la cantidad de cambios, se deducen facilmente, por ejemplo mediante simple escritura e inspeccion visual; y/o puede usarse un programa estandar de alineamiento de protemas o péptidos, tal como "align" que se basa en un algoritmo de Needleman-Wunsch. El algoritmo se describe en Needleman, S.B. y Wunsch, C.D., (1970), Journal of Molecular Biology, 48: 443-453, y el programa de alineaciones descrito por Myers y W. Miller en "Optimal Alignments in Linear Space" CABIOS (aplicaciones informaticas en las biociencias) (1988) 4:11-17. Para el alineamiento, puede usarse la matriz de puntuacion predeterminada BLOSUM62 y la matriz de identidad predeterminada, y la penalizacion para el primer residuo en una interrupcion puede fijarse en -12 o preferentemente en -10, y las penalizaciones para los residuos adicionales en una interrupcion en -2 o preferentemente en -0,5.

Un ejemplo de tal alineamiento se inserta a continuacion, en el cual la secuencia num. 1 es la sec. con num. de ident.: 1, y la secuencia num. 2 es el analogo (8Aib, 22E, 26R, 34R, 38K, 39G, 40G, 41S, 42K) de este:

# Secuencias alineadas: 2

# secuencia 1: 1

# secuencia 2: 2

# Matriz: EBLOSUM62

# Penalizacionjnterrupcion: 10,0

# Penalizacion_extendida: 0,5

#

# Longitud: 36

# Identidad: 27/36 (75,0 %)

# Similitud: 29/36 (80,6 %)

# Interrupciones: 5/36 (13,9 %)

# Puntuacion: 143,0

1 1 HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRG---- 31

2 1 HXEGTFTSDVSSYLEEQAAREFIAWLVRGRGKGGSK 36

Cuando 6 se anade a los numeros de posicion que se muestran en este alineamiento (es decir, a "1" y "31" en la secuencia 1, y a "1" y "37" en la secuencia 2) se obtiene la numeracion de posicion como se usa en la presente descripcion. Por ejemplo, en la secuencia 1 (que es identica a la sec. con num. de ident.: 1), el aminoacido N-terminal (H) tiene la posicion numero 7, y el aminoacido C-terminal (G) tiene el numero 37. En cuanto a la secuencia 2, el aminoacido N-terminal (H) tiene el numero 7 y el aminoacido C-terminal (K) tiene el numero 42.

En el caso espedfico de que residuos de aminoacidos o similares que no tienen codon de una letra (tal como Aib) se incluyan en la secuencia, estos pueden, con propositos de alineamiento, reemplazarse, por ejemplo, con X, como se muestra en el alineamiento anterior. Si se desea, X puede corregirse manualmente mas tarde.

Los siguientes son ejemplos no limitantes de lo que puede inferirse a partir del alineamiento anterior:

Como un ejemplo puede inferirse que la secuencia 2 tiene 9 cambios de aminoacidos en comparacion con la secuencia 1 (espedficamente en todas aquellas posiciones donde se muestra en el alineamiento un punto ("."), dos puntos (":"), o un guion horizontal ("-").

Como otro ejemplo puede inferirse que, por ejemplo, la secuencia num. 2 comprende 38K, dado que tiene una K en la posicion que corresponde, de acuerdo con el alineamiento, a la posicion 38 en la secuencia de referencia (secuencia 1, sec. con num. de ident.: 1).

Y de manera similar todos los otros cambios en la secuencia 2 en comparacion con la secuencia 1 pueden deducirse a partir del alineamiento.

El termino “péptido”, como se usa, por ejemplo, en el contexto de los péptidos semejantes a GLP-1 de los derivados de la invencion, se refiere a un compuesto que comprende una serie de aminoacidos interconectados mediante enlaces amida (o peptfdicos).

El péptido comprende al menos 36 aminoacidos. En una modalidad particular, el péptido consiste en 36 aminoacidos. En una modalidad particular adicional, el péptido consiste en 36 aminoacidos.

Aun en otra modalidad particular, el péptido consiste en aminoacidos interconectados mediante enlaces peptfdicos. Los aminoacidos son moleculas que contienen un grupo amino y un grupo acido carboxflico y, opcionalmente, uno o mas grupos adicionales, que frecuentemente se refieren como una cadena lateral.

El termino "aminoacido" incluye aminoacidos proteinogenicos (o naturales) (entre ellos los 20 aminoacidos estandar), asf como tambien aminoacidos no proteinogenicos (o no naturales). Los aminoacidos proteinogenicos son los que se incorporan naturalmente a las protemas. Los aminoacidos estandar son los codificados por el codigo genetico. Los aminoacidos no proteinogenicos no se encuentran en las protemas, o no se producen por la maquinaria celular estandar (por ejemplo, pueden haber sufrido modificaciones postraduccionales). Ejemplos no limitantes de aminoacidos no proteinogenicos son Aib (acido a -aminoisobutmco, o acido 2-aminoisobutmco), des-amino-histidina (nombre alternativo del acido imidazopropionico o acido 3-(imidazol-5-il)propanoico, abreviado Imp), asf como tambien los isomeros D de los aminoacidos proteinogenicos.

En lo que sigue, cada aminoacido de los péptidos de GLP-1 para los cuales no se indica el isomero optico debe entenderse que significa el isomero L (a menos que se especifique de otra manera).

Los derivados de GLP-1 y los analogos de la invencion tienen actividad de GLP-1. Este termino se refiere a la capacidad de unirse al receptor de GLP-1 e iniciar una via de transduccion de senales que da como resultado la accion insulinotropica u otros efectos fisiologicos como se conoce en la tecnica. Por ejemplo, los analogos y derivados de la invencion pueden probarse para determinar la actividad de GLP-1 mediante el uso de los ensayos que se describen en los Ejemplos 29, 30, 32, o 33 en la presente descripcion.

Derivados de péptidos similares a GLP-1

El termino “derivado de GLP-1” generalmente se refiere a un compuesto que puede prepararse a partir del péptido GLP-1 nativo o un analogo de este mediante modificacion qmmica, en particular mediante union covalente de uno o mas sustituyentes. El derivado de un péptido similar a GLP-1 de acuerdo con la invencion comprende dos de tales sustituyentes. Cada uno de ellos puede referirse, tambien o alternativamente, como una cadena lateral.

En una modalidad particular, la cadena lateral es capaz de formar complejos no covalentes con albumina, lo que promueve de esta manera la circulacion del derivado en el torrente sangmneo, y tienen, ademas, el efecto de prolongar el tiempo de accion del derivado, debido al hecho de que el complejo del derivado de GLP-1 y la albumina se desintegra solo lentamente para liberar el ingrediente farmaceutico activo. Asf, el sustituyente, o la cadena lateral como un todo, se refiere preferentemente, como una porcion de union a albumina.

En otra modalidad particular la porcion de union a albumina comprende una porcion que es particularmente relevante para la union a la albumina y de esta manera la prolongacion, cuya porcion, en consecuencia, puede referirse como una porcion de prolongacion. La porcion de prolongacion puede estar cerca, o preferentemente en el extremo terminal (o distal, o libre) de la porcion de union a la albumina, en relacion con su punto de union al péptido. La porcion de union a la albumina se une al péptido mediante acilacion de un residuo de lisina del péptido, en particular mediante acilacion al grupo epsilon amino del residuo de lisina.

Aun en otra modalidad particular la porcion de union a la albumina comprende una porcion entre la porcion de prolongacion y el punto de union al péptido, cuya porcion puede referirse como un enlazador, una porcion de enlazador, un espaciador o similares.

Los derivados comprenden una primera y una segunda porcion de prolongacion de formula Quím. 1, Quím. 1a, o Quím. 1b:

que puede referirse, ademas, como diacido C20, diacido C19, y diacido C22, respectivamente. La primera porcion de prolongacion se conecta al primer residuo K, y la segunda porcion de prolongacion se conecta al segundo residuo K. El termino "conectado" esta destinado a incluir uniones directas asf como tambien indirectas. Un ejemplo de union indirecta es la union por medio de un enlazador situado entre la porcion de prolongacion y el residuo K. Un ejemplo de union directa es cuando no interviene tal enlazador.

Asf, en una modalidad particular la primera porcion de prolongacion se une al primer residuo K, y la segunda porcion de prolongacion se une al segundo residuo K, opcionalmente por medio de un primer y un segundo enlazador, respectivamente.

El primer enlazador y el segundo pueden comprender un elemento_1, que es un dirradical Glu de formula Quím. 2:

Quím. 2:

Este elemento puede referirse como gamma-Glu, o brevemente gGlu, debido al hecho de que es el grupo gamma carboxilo del aminoacido acido glutamico el que se usa aqm para la conexion a otro elemento enlazador, o al grupo epsilon amino de lisina, como puede ser el caso.

Ademas, o alternativamente, el primer y el segundo enlazador pueden comprender un elemento_2 de formula Quím.

3:

Quím. 3:

en donde k es un numero entero en el intervalo de 1-5, y n es un numero entero en el intervalo de 1-5. En una modalidad particular, cuando k = 1 y n = 1, el Quím. 3 elemento_2 puede designarse OEG, o un dirradical de acido 8-amino-3,6-dioxaoctanoico. En una modalidad particular adicional no limitante k=3 y n=2, en tal caso el grupo del elemento_2 del Quím. 3 puede designarse como dPEG4.

Ademas, o alternativamente, el primer y el segundo enlazador pueden comprender un elemento_3 de formula qmm. 4, que puede referirse como Trx (para acido tranexamico):

Quím. 4:

Ademas, o alternativamente, el primer y el segundo enlazador pueden comprender un elemento_4 de formula Quím.

5: *-NH-(CH2)q-CH[(CH2)w-NH2]-CO-*, en donde q es un numero entero en el intervalo de 0-5, y w es un numero entero en el intervalo de 0-5, con las condiciones de que cuando w es 0 q es un numero entero en el intervalo de 1-5, y cuando q es 0 w es un numero entero en el intervalo de 1-5.

Ademas, o alternativamente, el primer y el segundo enlazador pueden comprender un elemento_5 de formula Quím.

6:

Quím. 6:

en donde y es 1 o 2, z es 1 o 2, p es 0 o 1, y X designa un atomo de carbono o un atomo de oxigeno.

Modalidades particulares no limitantes del elemento_5 son Quim, 7, Quim. 8 y Quim. 9:

Quím. 7:

Quím. 8:

Quím. 9:

Además, o alternativamente, el primer y el segundo enlazador pueden comprender un elemento_6 de fórmula Quím.

10:

Quím. 10:

La primera y la segunda porciones de prolongacion se conectan al primer y al segundo enlazadores, respectivamente, y a su vez al primer y al segundo residuo K, respectivamente, del péptido similar a GLP-1 por medio de enlaces amida. El primer y el segundo enlazador pueden comprender uno o mas de diversos elementos como se definio anteriormente (elemento_1 al elemento_6), cada elemento puede ocurrir una o mas veces, y ademas la secuencia de los elementos puede variar.

Siempre que se dice que un enlazador "comprende" un determinado elemento, este puede, adicionalmente, contener otros elementos, mientras que el termino "incorpora" significa lo mismo que "tiene" o "incluye solo". Por lo tanto, un enlazador que "incorpora" dos elementos_2 de formula Quím. 3 tiene solo dos de estos elementos en su estructura. La secuencia en que los elementos se indican aqm es generalmente a partir del extremo N-terminal al extremo C-terminal.

Las dos porciones de union a albumina (es decir las dos cadenas laterales) son similares, preferentemente sustancialmente identicas, o, con la maxima preferencia, identicas.

La primera y la segunda porciones de prolongacion, son similares, preferentemente sustancialmente identicas, o, con la maxima preferencia, identicas.

El primer y el segundo enlazador, son similares, preferentemente sustancialmente identicos, o, con la maxima preferencia, identicos.

El termino "sustancialmente identico" incluye diferencias de identidad que se deben a la formacion de uno o mas esteres y/o amidas; preferentemente a la formacion de uno o mas esteres metilicos, y amidas simples; con mayor preferencia a la formacion de no mas de dos esteres metflicos, y/o amidas simples; o con la maxima preferencia a la formacion de no mas de un ester metflico, y/o amida simple.

En el contexto de los compuestos qmmicos tales como porciones de union a albumina, porciones de prolongacion y enlazadores, la similitud y/o identidad pueden determinarse mediante el uso de cualquier programa informatico adecuado y/o algoritmo conocido en la tecnica.

Por ejemplo, la similitud de dos porciones de prolongacion, dos enlazadores, y/o dos cadenas laterales completas puede determinarse adecuadamente mediante el uso de huellas moleculares. Las huellas constituyen un metodo matematico para representar una estructura qmmica (ver por ejemplo Chemoinformatics: A textbook, Johann Gasteiger y Thomas Engel (Eds), Wiley-VCH Verlag, 2003).

Los ejemplos de huellas adecuadas incluyen, sin limitacion, huellas UNITY, huellas MDL y/o huellas ECFP, tales como huellas ECFP_6 (ECFP significa huellas de conectividad extendida).

En modalidades particulares, las dos porciones de prolongacion, los dos enlazadores, y/o las dos cadenas laterales completas se representan como a) huellas ECFP_6; b) huellas UNITY; y/o c) huellas m Dl .

El coeficiente de Tanimoto se usa preferentemente para calcular la similitud de las dos huellas, se usa ya sea a), b), o c).

En modalidades particulares, se use ya sea a), b) o c), las dos porciones de prolongacion, los dos enlazadores, y/o las dos cadenas laterales completas, respectivamente, tienen una similitud de al menos 0,5 (50 %); preferentemente al menos 0,6 (60 %); con mayor preferencia al menos 0,7 (70 %), o al menos 0,8 (80 %); incluso con mayor preferencia al menos 0,9 (90 %); o con la maxima preferencia al menos 0,99 (99 %), tal como una similitud de 1,0 (100 %).

Las huellas UNITY pueden calcularse mediante el uso del programa SYBYL (comercializado por Tripos, 1699 South Hanley Road, St. Louis, MO 63144-2319 Estados Unidos). Las huellas ECFP_6 y MDL pueden calcularse mediante el uso del programa Pipeline Pilot (comercializado por Accelrys Inc., 10188 Telesis Court, Suite 100, San Diego, CA 92121, Estados Unidos).

Para mas detalles, ver por ejemplo J. Chem. Inf. Model. 2008, 48, 542-549; J. Chem. Inf. Comput. Sci. 2004, 44, 170­ 178; J. Med. Chem. 2004, 47, 2743-2749; J. Chem. Inf. Model. 2010, 50, 742-754; asf como tambien SciT egic Pipeline Pilot Chemistry Collection: Basic Chemistry User Guide, marzo de 2008, SciTegic Pipeline Pilot Data Modeling Collection, 2008 - ambos de Accelrys Software Inc., San Diego, Estados Unidos y las grnas http://www.tripos.com/tripos_resources/fileroot/pdfs/Unity_111408.pdf y http://www.tripos.com/data/SYBYL/SYBYL_072505.pdf.

Un ejemplo de un calculo de similitud se inserta a continuacion, en el cual una cadena lateral completa conocida de un derivado de GLP-1 se comparo con un ester de metilo de este:

Mediante el uso de a) las huellas ECFP_6 la s sim litud es 0,798, b) mediante el uso de las huellas UNITY la similitud es 0,957; y mediante el uso de las huellas MDL la similitud es 0,905.

En el caso de dos cadenas laterales identicas (porciones de union a albumina) el derivado puede designarse como simetrico.

En modalidades particulares el coeficiente de similitud es al menos 0,80, preferentemente al menos 0,85, con mayor preferencia al menos 0,90, incluso con mayor preferencia al menos 0,95, o con la maxima preferencia al menos 0,99.

Los derivados de la invencion pueden existir en diferentes formas estereoisomericas que tienen la misma formula molecular y la secuencia de atomos unidos, pero difieren solo en la orientacion tridimensional de sus atomos en el espacio. El estereoisomerismo de los derivados ejemplificados de la invencion se indica en la seccion experimental, en los nombres asf como tambien las estructuras, mediante el uso de la nomenclatura estandar. A menos que se establezca de otra manera la invencion se refiere a todas las formas estereoisomericas del derivado reivindicado.

La concentracion plasmatica de los derivados de GLP-1 de la invencion puede determinarse mediante el uso de cualquier metodo adecuado. Por ejemplo, puede usarse LC-MS (Espectroscopfa de Masas acoplada a Cromatograffa Lfquida), o inmunoensayos tales como RIA (Radio Inmuno Ensayo), ELISA (Ensayo Inmunoabsorbente ligado a Enzimas) y LOCI (Inmunoensayo de Luminiscencia con Canalizacion de Oxfgeno). Los protocolos generales para ensayos RIA y ELISA adecuados se encuentran, por ejemplo, en el documento WO 2009/030738 en las pags. 116­ 118. Un ensayo preferido es el ensayo LOCI, donde LOCI se refiere a Inmunoensayo de Luminiscencia con Canalizacion de Oxfgeno, que generalmente se describe para la determinacion de insulina por Poulsen y Jensen en Journal de Biomolecular Screening 2007, vol. 12, pags. 240-247. Las perlas donantes se recubrieron con estreptavidina, mientras que las perlas aceptoras se conjugaron con un anticuerpo monoclonal que reconoce un epttopo medio/C-terminal del péptido. Se biotinilo otro anticuerpo monoclonal, espedfico para el N-terminal. Los tres reactivos se combinaron con el analito y formaron un inmunocomplejo de dos sitios. La iluminacion del complejo libero atomos de ox^geno singlete de las perlas donantes, que se canalizaron en las perlas aceptoras y desencadenaron la quimioluminiscencia que se midio en un lector de placas Envision. La cantidad de luz fue proporcional a la concentracion del compuesto.

Sal, amida o ester farmaceuticamente aceptable

Los derivados de la invencion pueden estar en forma de una sal, amida o ester farmaceuticamente aceptable.

Las sales se forman, por ejemplo, mediante una reaccion q^m mica entre una base y un acido, por ejemplo: 2 NH³ + H²SO⁴ ^ (NH⁴)²SO⁴.

La sal puede ser una sal basica, una sal acida, o puede ser otro tipo de sal (es decir una sal neutra). Las sales basicas producen iones hidroxido y las sales acidas iones hidronio en agua.

Las sales de los derivados de la invencion pueden formarse con cationes o aniones anadidos entre los grupos anionicos o cationicos, respectivamente. Estos grupos pueden ubicarse en la porcion peptfdica, y/o en la cadena lateral de los derivados de la invencion.

Ejemplos no limitantes de los grupos anionicos de los derivados de la invencion incluyen grupos carboxflicos libres en la cadena lateral, si los hay, asf como tambien en la porcion peptfdica. La porcion peptfdica frecuentemente incluye un grupo de acido carboxflico libre en el C-terminal y puede incluir, ademas, grupos carboxflicos libres en los residuos aminoaddicos acidos internos tales como Asp y Glu.

Ejemplos no limitantes de grupos cationicos en la porcion peptfdica incluyen el grupo amino libre en el N-terminal, si esta presente, asf como tambien cualquier grupo amino libre de residuos aminoaddicos basicos internos tales como His, Arg y Lys.

En una modalidad particular los derivados de la invencion son sales basicas. Las sales pueden, por ejemplo, formarse entre grupos anionicos en la porcion peptfdica y anadir cationes sodio o potasio.

El ester de los derivados de la invencion puede formarse, por ejemplo, mediante la reaccion de un grupo de acido carboxflico libre con un alcohol o un fenol, que conduce al reemplazo de al menos un grupo hidroxilo por un grupo alcoxi o ariloxi.

La formacion de ester puede implicar al grupo carboxflico libre en el C-terminal del péptido, y/o cualquier grupo carboxflico libre en la cadena lateral.

La amida de los derivados de la invencion puede formarse, por ejemplo, mediante la reaccion de un grupo de acido carboxflico libre con una amina o una amina sustituida, o mediante la reaccion de un grupo amino libre o sustituido con un acido carboxflico.

La formacion de amida puede implicar al grupo carboxflico libre en el C-terminal del péptido, cualquier grupo carboxflico libre en la cadena lateral, el grupo amino libre en el N-terminal del péptido, y/o cualquier grupo amino libre o sustituido del péptido en el péptido y/o en la cadena lateral.

En una modalidad particular, el péptido o su derivado tienen forma de una sal farmaceuticamente aceptable. En otra modalidad particular, el derivado tiene forma de una amida farmaceuticamente aceptable, preferentemente con un grupo amida en el C-terminal del péptido. Aun en otra modalidad particular, el péptido o su derivado estan en la forma de un ester farmaceuticamente aceptable.

Propiedades funcionales

En una modalidad particular los derivados de la invencion tienen un tiempo de vida media muy largo y al mismo tiempo una potencia muy buena in vitro e in vivo, que los hace potencialmente adecuados para su administracion una vez al mes.

Asf, en un primer aspecto funcional, los derivados de la invencion tienen una buena potencia. Ademas, o alternativamente, en un segundo aspecto, se unen muy bien al receptor de GLP-1, por ejemplo a una alta concentracion de albumina. Preferentemente son potentes agonistas del receptor de GLP-1, como se refleja por sus capacidades para unirse fuertemente al receptor de GLP-1, combinado con la capacidad para activar el receptor. Ademas, o alternativamente, en un tercer aspecto funcional, tienen propiedades farmacocineticas mejoradas.

Actividad Biologica- potencia in vitro

De acuerdo con el primer aspecto funcional, los derivados de la invencion, as^ como tambien los péptidos similares a GLP-1 constituyentes como tal, son biologicamente activos o potentes.

En una modalidad particular, la potencia y/o la actividad se refieren a la potencia in vitro, es decir, el rendimiento en un ensayo funcional del receptor de GLP-1, mas en particular a la capacidad de activar el receptor de GLP-1 humano.

La potencia in vitro puede, por ejemplo, determinarse en un medio que contiene membranas que expresan el receptor de GLP-1 humano, y/o en un ensayo con celulas enteras que expresan el receptor de GLP-1 humano.

Por ejemplo, la respuesta del receptor de GLP-1 humano puede medirse en un ensayo de gen reportero, por ejemplo en una lmea de celulas BHK transfectadas establemente que expresan el receptor de GLP-1 humano y contienen el ADN para el elemento de respuesta de cAMP (CRE) acoplado a un promotor y el gen para luciferasa de luciernaga (CRE luciferasa). Cuando se produce cAMP como resultado de la activacion del receptor de GLP-1, esto a su vez da como resultado que se exprese la luciferasa. La luciferasa puede determinarse mediante la adicion de luciferina, que se convierte a oxiluciferina mediante la enzima y produce bioluminiscencia, que se mide y es una medida de la potencia in vitro. Un ejemplo no limitante de tal ensayo se describe en el ejemplo 29.

El termino concentracion media eficaz maxima (EC⁵⁰) generalmente se refiere a la concentracion que induce una respuesta intermedia entre la lmea de base y el maximo, referente a la curva de dosis respuesta. EC⁵⁰ se usa como una medida de la potencia de un compuesto y representa la concentracion donde se observa el 50 % de su efecto maximo.

La potencia in vitro de los derivados de la invencion puede determinarse como se describio anteriormente y determinarse la EC⁵⁰ del derivado en cuestion. A menor valor de EC⁵⁰, mejor la potencia.

En una modalidad particular, los derivados de la invencion son muy potentes, a pesar del hecho de que tienen tiempos de vida media muy largos. En una modalidad particular, el derivado de la invencion tiene una potencia in vitro que se determina mediante el uso del metodo del Ejemplo 29 correspondiente a una EC⁵⁰ de 400 pM o por debajo de este valor.

Actividad biologica - farmacologfa in vivo

En otra modalidad particular los derivados de la invencion, asf como tambien los péptidos similares a GLP-1 constituyentes como tales, son potentes in vivo, lo cual puede determinarse, como se conoce en la tecnica, en cualquier modelo animal adecuado, asf como tambien en ensayos clmicos.

El raton db/db diabetico es un ejemplo de un modelo animal adecuado, y el efecto de disminucion de la glucosa en sangre y/o de la disminucion del peso corporal pueden determinarse en tales ratones in vivo, por ejemplo, como se describe en el Ejemplo 32. En una modalidad particular los derivados de la invencion son capaces de disminuir la glucosa en sangre y el peso corporal en ratones db/db hasta 96 horas al menos.

El cerdo LYD es otro ejemplo de un modelo animal adecuado, y la reduccion de la ingesta de alimentos puede determinarse en un estudio PD en dichos cerdos in vivo, por ejemplo, como se describe en el Ejemplo 33.

En una modalidad particular los derivados de la invencion son muy potentes in vivo y durante un tiempo largo, lo cual se evidencia por los resultados obtenidos en la parte experimental y referidos en la seccion titulada "Modalidades particulares".

Actividad biologica - Union al receptor in vitro

De acuerdo con el segundo aspecto funcional, los derivados de la invencion, asf como tambien los péptidos similares a GLP-1 constituyentes, como tales, se unen muy bien al receptor de GLP-1, por ejemplo, a una alta concentracion de albumina. Esto puede determinarse como se describe en el Ejemplo 30.

Generalmente, la union al receptor de GLP-1 a baja concentracion de albumina debe ser tan buena como sea posible, correspondiente a un bajo valor de IC⁵⁰.

El valor de IC⁵⁰ a una alta concentracion de albumina refleja la influencia de la albumina serica en la union del derivado al receptor de GLP-1. Como se conoce, los derivados de GLP-1 pueden unirse a la albumina serica y, si ese es el caso, entonces el valor de IC⁵⁰ con la albumina serica alta sera mayor que el valor de IC⁵⁰ con la albumina baja. Un valor aumentado de IC⁵⁰ con albumina serica alta representa una union reducida al receptor de GLP-1 provocada por la union de la albumina serica que compite con la union al receptor de GLP-1.

En una modalidad particular, los derivados de la invencion se unen muy bien al receptor de GLP-1 con una concentracion baja de albumina, pero tambien se unen muy bien con una concentracion alta de albumina.

Como un ejemplo, en una modalidad particular, la afinidad de union al receptor de GLP-1 (IC⁵⁰) de los derivados de la invencion en presencia de una baja concentracion de HSA (baja albumina) es de 5,0 nM o mas baja.

Perfil farmacocinetico

De acuerdo con el tercer aspecto funcional, los derivados de la invencion tienen propiedades farmacocineticas mejoradas, tales como un aumento del tiempo de vida media terminal, y/o una disminucion de la eliminacion.

El aumento del tiempo de vida media terminal y/o la disminucion de la eliminacion significa que el compuesto en cuestion se elimina del cuerpo mas lentamente. Para los derivados de la invencion esto conlleva una extension de la duracion del efecto farmacologico.

Las propiedades farmacocineticas de los derivados de la invencion pueden determinarse adecuadamente in vivo en estudios farmacocineticos (PK). Dichos estudios se realizan para evaluar como se absorben, se distribuyen y se eliminan los compuestos farmaceuticos en el cuerpo, y como estos procesos afectan la concentracion del compuesto en el cuerpo, en el transcurso del tiempo.

En la fase de descubrimiento y preclmica del desarrollo de un farmaco, pueden usarse modelos animales tales como raton, rata, mono, perro, o cerdo, para realizar esta caracterizacion. Cualquiera de estos modelos puede usarse para probar las propiedades farmacocineticas de los derivados de la invencion.

En tales estudios, tipicamente a los animales se les administra una dosis unica del farmaco, ya sea por via intravenosa (i.v.), por via subcutanea (s.c.), o por via oral (p.o.) en una formulacion relevante. Se extraen las muestras de sangre en puntos de tiempo predefinidos despues de la dosificacion, y las muestras se analizan para determinar la concentracion del farmaco con un ensayo cuantitativo relevante. Sobre la base de estas mediciones, se representan los perfiles de concentracion plasmatica contra tiempo para el compuesto del estudio y se realiza un denominado analisis farmacocinetico no compartimental de los datos.

Para la mayona de los compuestos, la parte terminal de los perfiles de concentracion plasmatica sera lineal cuando se dibuje en una grafica semilogantmica, que refleja que despues de la absorcion y distribucion inicial, el farmaco se elimina del cuerpo a una tasa fraccional constante. La tasa (lambda Z o X^z ) es igual a menos la pendiente de la parte terminal de la grafica. A partir de esta tasa, puede calcularse, ademas, una vida media terminal, como t^ = ln(2) / X^z (ver, por ejemplo, Johan Gabrielsson y Daniel Weiner: Pharmacokinetics and Pharmacodynamic Data Analysis. Concepts & Applications, 3ra Ed., Swedish Pharmaceutical Press, Estocolmo (2000)).

La eliminacion puede determinarse despues de la administracion i.v. y se define como la dosis (D) dividida entre el area bajo la curva (AUC) en el perfil de concentracion plasmatica contra tiempo (Rowland, M y Tozer TN: Clinical Pharmacokinetics: Concepts y Applications, 3ra edicion, 1995 Williams Wilkins).

La estimacion del tiempo de vida media terminal y/o la eliminacion es relevante para la evaluacion de los regfmenes de dosificacion y es un parametro importante en el desarrollo de un farmaco, en la evaluacion de nuevos farmacos. Perfil farmacocinetico - tiempo de vida media in vivo en minicerdos

De acuerdo con el tercer aspecto funcional, los derivados de la invencion tienen propiedades farmacocineticas mejoradas.

En una modalidad particular, las propiedades farmacocineticas pueden determinarse como tiempo de vida media terminal (T^y ) in vivo en minicerdos despues de la administracion i.v., por ejemplo, como se describe en el Ejemplo 31 en la presente descripcion.

En una modalidad particular los derivados de la invencion tienen un excelente tiempo de vida media terminal en minicerdos que los hace adecuados para una administracion una vez al mes. En una modalidad particular, el tiempo de vida media terminal de los derivados de la invencion en minicerdos despues de la administracion i.v. es al menos 90 horas.

Se describen modalidades particulares adicionales de los derivados de la invencion en la seccion titulada "Modalidades particulares", antes de la seccion experimental.

Procesos de produccion

La produccion de péptidos similares a GLP-1 (7-37) y analogos de GLP-1 se conoce bien en la tecnica.

La porcion de péptido similar a GLP-1 de los derivados de la invencion (o sus fragmentos) puede producirse, por ejemplo, mediante síntesis peptfdica clasica, por ejemplo, síntesis peptfdica en fase solida mediante el uso de qmmica t-Boc o Fmoc u otras tecnicas bien establecidas, ver, por ejemplo, Greene y Wuts, “Protective Groups in Organic Synthesis”, John Wiley & Sons, 1999, Florencio Zaragoza Dorwald, “Organic Synthesis on solid Phase”, Wiley-VCH Verlag GmbH, 2000, y “Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis”, editado por W.C. Chan y P.D. White, Oxford University Press, 2000.

Ademas, o alternativamente, ellos pueden producirse mediante metodos recombinantes, a saber, mediante el cultivo de una celula huesped que contiene una secuencia de ADN que codifica el analogo y es capaz de expresar el péptido en un medio de nutrientes adecuado bajo condiciones que permiten la expresion del péptido. Ejemplos no limitantes de celulas huesped adecuadas para la expresion de estos péptidos son: Escherichia coli, Saccharomyces cerevisiae, asf como tambien, lmeas celulares BHK de mairnferos o CHO.

Aquellos derivados de la invencion que incluyen aminoacidos no naturales y/o un monopéptido o dipéptido mimetico N-terminal unido covalentemente pueden, por ejemplo, producirse como se describe en la parte experimental. O ver, por ejemplo, Hodgson y otros: "The synthesis of peptides and proteins containing non-natural amino acids", Chemical Society Reviews, vol. 33, num. 7 (2004), pags. 422-430; y el documento WO 2009/083549 A1 titulado "Preparacion semi-recombinante de analogos de GLP-1".

Los ejemplos espedficos de metodos para preparar varios derivados de la invencion se incluyen en la parte experimental.

Composiciones farmaceuticas

La invencion se refiere ademas a las composiciones farmaceuticas que comprenden un derivado de la invencion o una sal, amida o ester farmaceuticamente aceptables de este y un excipiente farmaceuticamente aceptable. Dichas composiciones pueden prepararse como se conoce en la tecnica.

El termino "excipiente" se refiere, en sentido amplio, a cualquier componente aparte de los ingredientes terapeuticos activos. El excipiente puede ser una sustancia inerte, una sustancia inactiva, y/o una sustancia no activa medicinalmente.

El excipiente puede servir para diversos fines, por ejemplo como portador, vehnculo, diluyente, auxiliar para comprimidos, y/o para mejorar la administracion, y/o la absorcion de la sustancia activa.

En la tecnica se conoce la formulacion de ingredientes activos farmaceuticamente con diversos excipientes, vease, por ejemplo, Remington: The Science and Practice of Pharmacy (por ejemplo, 19na edicion (1995) y cualquiera de las ediciones posteriores).

Ejemplos no limitantes de excipientes son: Los solventes, diluyentes, tampones, conservantes, agentes reguladores de la tonicidad, agentes quelantes y estabilizadores.

Ejemplos de formulaciones incluyen formulaciones lfquidas, es decir, formulaciones acuosas que comprenden agua. Una formulacion lfquida puede ser una solucion, o una suspension. Una formulacion acuosa tfpicamente comprende al menos 50 % p/p de agua, o al menos 60 %, 70 %, 80 %, o incluso al menos 90 % p/p de agua.

Alternativamente una composicion farmaceutica puede ser una formulacion solida, por ejemplo una composicion liofilizada o secada por pulverizacion, que puede usarse tal cual, o a la que el medico o el paciente anaden solventes y/o diluyentes antes de su uso.

El pH en una formulacion acuosa puede ser cualquiera entre pH 3 y pH 10, por ejemplo de aproximadamente 7,0 a aproximadamente 9,5; o de aproximadamente 3,0 a aproximadamente 7,0.

Una composicion farmaceutica puede comprender un tampon. El tampon se selecciona, por ejemplo, de acetato de sodio, carbonato de sodio, citrato, glicilglicina, histidina, glicina, lisina, arginina, dihidrogeno fosfato de sodio, hidrogeno fosfato de disodio, fosfato de sodio y tris(hidroximetil)-aminometano, bicina, tricina, acido malico, succinato, acido maleico, acido fumarico, acido tartarico, acido aspartico y sus mezclas.

Una composicion farmaceutica puede comprender un conservante. El conservante puede seleccionarse, por ejemplo, de fenol, o-cresol, m-cresol, p-cresol, p-hidroxibenzoato de metilo, p-hidroxibenzoato de propilo, 2-fenoxietanol, phidroxibenzoato de butilo, 2-feniletanol, alcohol bendlico, clorobutanol y tiomerosal, bronopol, acido benzoico, imidaurea, clorohexidina, deshidroacetato de sodio, clorocresol, p-hidroxibenzoato de etilo, cloruro de bencetonio, clorfenesina (3p-clorfenoxipropano-1,2-diol) y sus mezclas. El conservante puede estar presente en una concentracion de 0,1 mg/ml a 20 mg/ml. Una composicion farmaceutica puede comprender un agente isotonico. El agente isotonico puede seleccionarse, por ejemplo, de una sal (por ejemplo, cloruro de sodio), un azucar o alcohol de azucar, un aminoacido (por ejemplo, glicina, histidina, arginina, lisina, isoleucina, acido aspartico, triptofano, treonina), un alditol (por ejemplo, glicerol (glicerina), 1,2-propanodiol (propilenglicol), 1,3-propanodiol, 1,3-butanodiol) polietilenglicol (por ejemplo, PEG400) y sus mezclas. Puede usarse cualquier azucar tal como mono-, di-, o polisacaridos, o glucanos solubles en agua, que incluyen, por ejemplo, fructosa, glucosa, manosa, sorbosa, xilosa, maltosa, lactosa, sacarosa, trealosa, dextrano, pululano, dextrina, ciclodextrina, alfa y beta HPCD, almidon soluble, hidroxietil almidon y carboximetilcelulosa de Na. El alcohol de azucar alcoholico se define como un hidrocarburo C4-C8 que tiene al menos un grupo -OH e incluye, por ejemplo, manitol, sorbitol, inositol, galactitol, dulcitol, xilitol y arabitol. En una modalidad, el aditivo alcohol de azucar es manitol.

Una composicion farmaceutica puede comprender un agente quelante. El agente quelante puede seleccionarse, por ejemplo, de sales de acido etilendiaminotetraacetico (EDTA), acido cftrico y acido aspartico y sus mezclas.

Una composicion farmaceutica puede comprender un estabilizante. El estabilizante puede ser, por ejemplo, uno o mas inhibidores de la oxidacion, inhibidores de la agregacion, tensoactivos y/o uno o mas inhibidores de proteasas. Ejemplos no limitantes de estos diversos tipos de estabilizadores se describen en lo siguiente.

El termino "formacion de agregados" se refiere a una interaccion ffsica entre las moleculas polipeptfdicas que resulta en la formacion de oligomeros, que pueden permanecer solubles, o ser grandes agregados visibles que precipitan de la solucion. La formacion de agregados por un polipéptido durante el almacenamiento de una composicion farmaceutica lfquida puede afectar adversamente la actividad biologica de ese polipéptido, lo que resulta en la perdida de la eficacia terapeutica de la composicion farmaceutica. Ademas, la formacion de agregados puede provocar otros problemas tales como el bloqueo de tubos, membranas, o bombas cuando la composicion farmaceutica que contiene polipéptidos se administra mediante el uso de un sistema de infusion.

Una composicion farmaceutica puede comprender una cantidad base de aminoacido suficiente para disminuir la formacion de agregados del polipéptido durante el almacenamiento de la composicion. El termino "base de aminoacidos" se refiere a uno o mas aminoacidos (tales como metionina, histidina, imidazol, arginina, lisina, isoleucina, acido aspartico, triptofano, treonina), o analogos de estos. Cualquier aminoacido puede estar presente ya sea en su forma de base libre o en su forma de sal. Puede estar presente cualquier estereoisomero del aminoacido base (es decir, L, D, o una mezcla de estos).

Puede anadirse metionina (u otros aminoacidos sulfuricos o analogos de aminoacidos) para inhibir la oxidacion de los residuos de metionina a sulfoxido de metionina cuando el polipéptido que actua como agente terapeutico es un polipéptido que comprende al menos un residuo de metionina susceptible a tal oxidacion. Puede usarse cualquier estereoisomero de metionina (L o D) o sus combinaciones.

Una composicion farmaceutica puede comprender un estabilizante que se selecciona de polfmeros de alto peso molecular o compuestos de bajo peso molecular. El estabilizante puede seleccionarse, por ejemplo, de polietilenglicol (por ejemplo, PEG 3350), alcohol polivimlico (PVA), polivinilpirrolidona, carboxi-/hidroxicelulosa o derivados de estos (por ejemplo, HPC, HPC-SL, HPC-L y HPMC), ciclodextrinas, sustancias que contienen azufre como monotioglicerol, acido tioglicolico y 2-metiltioetanol y diferentes sales (por ejemplo, cloruro de sodio). Una composicion farmaceutica puede comprender agentes estabilizantes adicionales tales como, pero no se limitan a, metionina y EDTA, que protegen al polipéptido de la oxidacion de la metionina y un tensoactivo no ionico, que protege al polipéptido de la agregacion asociada a la congelacion-descongelacion o al cizallamiento mecanico.

Una composicion farmaceutica puede comprender uno o mas tensoactivos. El termino "tensoactivo" se refiere a cualesquiera moleculas o iones que constan de una parte soluble en agua (hidrofila) y una parte soluble en grasa (lipofila). El tensoactivo puede seleccionarse, por ejemplo, de tensoactivos anionicos, tensoactivos cationicos, tensoactivos no ionicos y/o tensoactivos zwitterionicos.

Una composicion farmaceutica puede comprender uno o mas inhibidores de proteasas, tales como, por ejemplo, EDTA (acido etilendiaminotetraacetico) y/o benzamidina HCl.

Los ingredientes adicionales, opcionales, de una composicion farmaceutica incluyen, por ejemplo, agentes humectantes, emulsionantes, antioxidantes, agentes de relleno, iones metalicos, vehfculos oleosos, protemas (por ejemplo, albumina serica humana, gelatina) y/o un zwitterion (por ejemplo, un aminoacido tal como betama, taurina, arginina, glicina, lisina e histidina).

Como se menciono anteriormente, la presente invencion se refiere ademas a composiciones farmaceuticas que comprenden un derivado de la invencion o una sal, amida o ester farmaceuticamente aceptables de este, y un excipiente farmaceuticamente aceptable.

En una modalidad particular, el excipiente comprende un tampon de fosfato y un agente isotonico.

En otra modalidad particular, el excipiente comprende un tampon de fosfato y propilenglicol ad isotonico.

Aun en otra modalidad particular la invencion se refiere a una composicion farmaceutica de dosis unica para inyeccion s.c. que comprende (i) un derivado de GLP-1 de la invencion o una sal, amida o ester farmaceuticamente aceptables de este, en una concentracion adecuada, (ii) tampon fosfato 8 mM (tal como 1,42 mg/ml de fosfato de disodio dihidratado), (iii) propilenglicol ad isotonico, y (iv) que tiene un pH de 7,4.

El termino “concentracion adecuada” se refiere a una concentracion farmaceuticamente relevante, que puede determinarse como se conoce en la tecnica.

Los ejemplos no limitantes de concentraciones adecuadas corresponden a las dosis administradas que se mencionan mas adelante, cuando estan contenidas en 1 ml de la composicion (es decir, por ejemplo una concentracion adecuada puede ser de 0,1 mg/ml a 100 mg/ml de la composicion).

En una modalidad particular, la concentracion adecuada es 3 mg/ml.

En otra modalidad particular, la concentracion adecuada es 30 mg/ml.

Aun en otras modalidades particulares el derivado de GLP-1 es (a) el compuesto del Ejemplo 1, (b) el compuesto del Ejemplo 2, (c) el compuesto del Ejemplo 3, (d) el compuesto del Ejemplo 5, o una sal, amida, o ester farmaceuticamente aceptables de cualquiera de (a)-(d).

Ademas, una composicion farmaceutica puede formularse como se conoce en la tecnica de las formulaciones orales de compuestos insulinotropicos, por ejemplo mediante el uso de una o mas de las formulaciones que se describen en el documento WO 2008/145728.

Una dosis administrada puede contener de 0,1 mg - 100 mg del derivado, de 1-100 mg del derivado, o de 1-50 mg del derivado.

El derivado puede administrarse en la forma de una composicion farmaceutica. Puede administrarse a un paciente que necesita del mismo en diversos sitios, por ejemplo, en sitios topicos tales como sitios de piel o mucosas; en sitios que evitan la absorcion tales como en una arteria, en una vena, o en el corazon; y en sitios que implican la absorcion, tales como en la piel, bajo la piel, en un musculo o en el abdomen.

La ruta de administracion puede ser, por ejemplo, lingual; sublingual; bucal; en la boca; oral; en el estomago; en el intestino; nasal; pulmonar, tal como a traves de los bronquiolos, los alveolos o una combinacion de estos; parenteral, epidermica; dermica; transdermica; conjuntival; uretral; vaginal; rectal; y/u ocular. Una composicion puede ser una composicion oral, y la via de administracion es oral.

Una composicion puede administrarse en varias formas de dosificacion, por ejemplo como una solucion; una suspension; una emulsion; una microemulsion; emulsiones multiples; una espuma; un unguento; una pasta; un yeso; una pomada; un comprimido; un comprimido recubierto; una goma de mascar; un enjuague; una capsula, tales como capsulas de gelatina duras o suaves; un supositorio; una capsula rectal; gotas; un gel; una pulverizacion; un polvo; un aerosol; un inhalante; gotas oculares; un unguento oftalmico; un enjuague oftalmico; un pesario vaginal; un anillo vaginal; un unguento vaginal; una solucion de inyeccion; una solucion de transformacion in situ, tales como la gelificacion in situ, el fraguado, la precipitacion y la cristalizacion in situ; una solucion de infusion; o como un implante. Una composicion puede ser un comprimido, opcionalmente recubierto, una capsula, o una goma de mascar.

Una composicion puede combinarse adicionalmente en un portador o sistema de suministro de farmacos, por ejemplo con el fin de mejorar la estabilidad, la biodisponibilidad y/o la solubilidad. En una modalidad particular, una composicion puede unirse a tal sistema a traves de interacciones covalentes, hidrofobas y/o electrostaticas. El proposito de tal composicion puede ser, por ejemplo, disminuir los efectos adversos, lograr la cronoterapia y/o aumentar la satisfaccion del paciente.

Una composicion tambien puede usarse en la formulacion de sistemas de suministro de farmacos de liberacion controlada, sostenida, prolongada, retardada y/o lenta.

La administracion parenteral puede realizarse mediante inyeccion subcutanea, intramuscular, intraperitoneal o intravenosa por medio de una jeringa, opcionalmente una jeringa tipo bolfgrafo o por medio de una bomba de infusion. Una composicion puede administrarse por via nasal en la forma de una solucion, una suspension, o un polvo; o puede administrarse por via pulmonar en la forma de un aerosol lfquido o en polvo.

La administracion transdermica es una opcion adicional, por ejemplo, mediante inyeccion sin aguja, desde un parche tal como un parche iontoforetico, o por la via transmucosal, por ejemplo, por via bucal.

Una composicion puede ser una formulacion estabilizada. El termino “formulacion estabilizada” se refiere a una formulacion con estabilidad ffsica y/o qrnmica aumentada, preferentemente ambas. En general, una formulacion tiene que ser estable durante su uso y el almacenamiento (de conformidad con el uso recomendado y las condiciones de almacenamiento) hasta que se alcance la fecha de vencimiento.

El termino “estabilidad ffsica” se refiere a la tendencia del polipéptido a formar agregados biologicamente inactivos y/o insolubles como resultado de la exposicion a estres termo-mecanico y/o a la interaccion con interfaces y superficies desestabilizantes (tales como superficies hidrofobas). La estabilidad ffsica de una formulacion acuosa de polipéptido puede evaluarse mediante inspeccion visual y/o mediante mediciones de la turbidez despues de exposicion a estres mecanico/ffsico (por ejemplo, agitacion) a diferentes temperaturas durante diversos peffodos de tiempo. Alternativamente, la estabilidad ffsica puede evaluarse mediante el uso de un agente espectroscopico o sonda del estado conformacional del polipéptido tal como por ejemplo Tioflavina T o sondas de “parche hidrofobo”.

El termino “estabilidad qmmica” se refiere a cambios qmmicos (en particular covalentes) en la estructura polipepffdica que conducen a la formacion de productos de degradacion qmmica que tienen potencialmente una potencia biologica reducida, y/o efecto inmunogenico aumentado en comparacion con el polipéptido intacto. La estabilidad qmmica puede evaluarse mediante la medicion de la cantidad de productos de degradacion qmmica en diversos puntos de tiempo despues de la exposicion a diferentes condiciones ambientales, por ejemplo mediante SEC-HPLC, y/o RP-HPLC.

El tratamiento con un derivado de acuerdo con la presente invencion puede combinarse, ademas, con una mas sustancias activas farmacologicamente adicionales, por ejemplo, seleccionadas de agentes antidiabeticos, agentes antiobesidad, agentes reguladores del apetito, agentes antihipertensivos, agentes para el tratamiento y/o la prevencion de complicaciones resultantes de o asociadas con la diabetes y agentes para el tratamiento y/o prevencion de complicaciones y trastornos resultantes de o asociados con la obesidad. Ejemplos de estas sustancias activas farmacologicamente son: Insulina, sulfonilureas, biguanidas, meglitinidas, inhibidores de glucosidasa, agonistas de glucagon, antagonistas de glucagon, inhibidores de DPP-IV (dipeptidil peptidasa-IV), inhibidores de enzimas hepaticas implicadas en la estimulacion de la gluconeogenesis y/o glucogenolisis, moduladores de la captacion de glucosa, compuestos que modifican el metabolismo lipfdico tales como agentes antihiperlipidemicos como inhibidores de HMG CoA (estatinas), polipéptidos inhibidores gastricos (analogos GIP), compuestos que reducen la ingesta de alimentos, agonistas RXR y agentes que actuan sobre el canal de potasio dependiente de ATP de las pcelulas; Colestiramina, colestipol, clofibrato, gemfibrozilo, lovastatina, pravastatina, simvastatina, probucol, dextrotiroxina, neteglinida, repaglinida; pbloqueadores tales como alprenolol, atenolol, timolol, pindolol, propranolol y metoprolol, inhibidores de ACE (enzima convertidora de angiotensina) tales como benazepril, captopril, enalapril, fosinopril, lisinopril, alatriopril, quinapril y ramipril, bloqueadores de los canales de calcio tales como nifedipina, felodipina, nicardipina, isradipina, nimodipina, diltiazem y verapamilo y a bloqueadores a tales como doxazosina, urapidilo, prazosina y terazosina; agonistas de CART (transcrito regulado por cocama y anfetamina), antagonistas de NPY (neuropéptido Y), agonistas de PYY, agonistas del receptor de Y2, agonistas del receptor de Y4, agonistas mixtos del receptor de Y2/Y4, agonistas de MC4 (melanocortina 4), antagonistas de orexina, agonistas del TNF (factor de necrosis tumoral), agonistas del CRF (factor de liberacion de corticotropina), antagonistas del CRF BP (protema de union al factor de liberacion de corticotropina), agonistas de urocortina, pagonistas 3, oxintomodulina y analogos, agonistas de MSH (hormona estimulante de melanocitos), antagonistas de MCH (hormona concentradora de melanocitos), agonistas de CCK (colecistoquinina), inhibidores de la recaptacion de serotonina, inhibidores de la recaptacion de serotonina y noradrenalina, compuestos mixtos de serotonina y noradrenergicos, agonistas de 5HT (serotonina), agonistas de bombesina, factor de crecimiento de fibroblastos 2 l (FGF-21), antagonistas de galanina, hormona de crecimiento, compuestos de liberacion de la hormona del crecimiento, agonistas de TRH (hormona liberadora de tireotropina), moduladores de UCP 2 o 3 (protemas desacopladoras 2 o 3), agonistas de leptina, agonistas de DA (bromocriptina, doprexina), inhibidores de lipasa/amilasa, moduladores de RXR (receptor retinoide X), agonistas pTR, antagonistas de histamina H3, agonistas o antagonistas del polipéptido inhibidor gastrico (analogos de GIP), gastrina y analogos de gastrina.

El tratamiento con un derivado de acuerdo con esta invencion puede combinarse, ademas, con una cirugfa que influya en los niveles de glucosa y/o en la homeostasis lipfdica, tal como la banda gastrica o la derivacion gastrica.

Indicaciones farmaceuticas

La presente invencion se refiere, ademas, a un derivado de la invencion para el uso como un medicamento.

En modalidades particulares, el derivado de la invencion puede usarse para los siguientes tratamientos medicos:

(i) prevencion y/o tratamiento de todas las formas de diabetes, tales como hiperglucemia, diabetes tipo 2, tolerancia a la glucosa alterada, diabetes tipo 1, diabetes no dependiente de insulina, MODY (diabetes de aparicion en la madurez de los jovenes), diabetes gestacional y/o reduccion de HbAIC;

(ii) retardar o evitar la progresion de la enfermedad diabetica, tal como la progresion a diabetes tipo 2, retardar la progresion de la tolerancia a la glucosa alterada (IGT) a diabetes tipo 2 que requiere insulina, retardar o evitar la resistencia a la insulina y/o retardar la progresion de la diabetes tipo 2 que no requiere insulina a diabetes tipo 2 que requiere insulina;

(iii) mejorar la funcion de las celulas p, tal como disminuir la apoptosis de las celulas p, aumentar la funcion de las celulas p y/o la masa de celulas p, y/o restablecer la sensibilidad a la glucosa de las celulas p;

(iv) prevencion y/o tratamiento de trastornos cognitivos y/o trastornos neurodegenerativos, tales como enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, y/o esclerosis multiple;

(v) prevencion y/o tratamiento de trastornos alimentarios, tales como obesidad, por ejemplo, disminucion de la ingesta de alimentos, reduccion del peso corporal, supresion del apetito, induccion de saciedad; tratar o evitar el trastorno por atracones, la bulimia nerviosa y/u obesidad inducida por la administracion de un antipsicotico o un esteroide; reduccion de la motilidad gastrica; y/o retardar el vaciamiento gastrico; aumentar la movilidad ffsica; y/o evitar y/o tratar las comorbilidades de la obesidad, tal como osteoartritis y/o incontinencia urinaria;

(vi) prevencion y/o tratamiento de complicaciones diabeticas, tales como angiopatia, neuropatfa, lo que incluye la neuropatfa periferica; nefropatfa; y/o retinopatia;

(vii) mejorar los parametros lip^dicos, tales como la prevencion y/o el tratamiento de la dislipidemia, la disminucion de los lfpidos sericos totales; aumento de HDL; disminucion de LDL densa y pequena; disminucion de VLDL: disminucion de trigliceridos; reducir el colesterol; reducir los niveles plasmaticos de lipoprotema a (Lp(a)) en un humano; inhibir la generacion de apolipoprotema a (apo(a)) in vitro y/o in vivo;

(viii) la prevencion y/o el tratamiento de enfermedades cardiovasculares, tales como el smdrome X, ateroesclerosis, infarto del miocardio, enfermedad coronaria, dano por reperfusion, accidente cerebrovascular, isquemia cerebral, una enfermedad cardfaca temprana o cardiovascular temprana, hipertrofia ventricular izquierda, enfermedad de las arterias coronarias, hipertension, hipertension esencial, emergencia hipertensiva aguda, cardiomiopatfa, insuficiencia ca^aca , intolerancia al ejercicio, fallo cardfaco agudo y/o cronico, arritmia, disritmia ca^aca , smcope, angina de pecho, derivacion cardfaca y/o reoclusion con stent, claudicacion intermitente (ateroesclerosis obliterans), disfuncion diastolica, y/o disfuncion sistolica; y/o reduccion de la presion sangumea, tal como reduccion de la presion sangumea sistolica;

(ix) prevencion y/o tratamiento de enfermedades gastrointestinales, tales como enfermedad inflamatoria intestinal, smdrome del intestino corto, o enfermedad de Crohn o colitis; dispepsia, y/o ulceras gastricas; y/o inflamacion, tal como psoriasis, artritis psoriasica, artritis reumatoide, y/o lupus eritematoso sistemico;

(x) prevencion y/o tratamiento de enfermedades cnticas, tales como el tratamiento de un paciente cntico, un paciente de polinefropatfa cntica (CIPNP), y/o un paciente con CIPNP potencial; prevencion del desarrollo de enfermedades cnticas o de CIPNP; prevencion, tratamiento y/o curacion del smdrome de respuesta inflamatoria sistemica (SIRS) en un paciente; prevencion o reduccion de la posibilidad de que un paciente sufra de bacteriemia, septicemia y/o choque septico durante la hospitalizacion; y/o estabilizacion de la glucosa sangumea, equilibrio de la insulina y opcionalmente del metabolismo en pacientes en unidades de cuidados intensivos con enfermedades agudas;

(xi) prevencion y/o tratamiento del smdrome de ovario poliqmstico (PCOS);

(xii) prevencion y/o tratamiento de enfermedades cerebrales, tales como isquemia cerebral, hemorragia cerebral y/o lesion cerebral traumatica;

(xiii) prevencion y/o tratamiento de la apnea del sueno; y/o

(xiv) prevencion y/o tratamiento del abuso, tal como abuso de alcohol y/o abuso de farmacos.

En una modalidad particular la indicacion se selecciona del grupo que consiste en (i)-(xiv), tal como las indicaciones (i)-(viii), (x)-(xiii), y/o (xiv), y se relaciona de una manera u otra con la diabetes.

En otra modalidad particular, la indicacion se selecciona del grupo que consiste en (i)-(iii) y (v)-(viii), tal como las indicaciones (i), (ii) y/o (iii); o indicacion (v), indicacion (vi), indicacion (vii), y/o indicacion (viii).

Aun en otra modalidad particular, la indicacion es (i). En una modalidad particular adicional, la indicacion es (v). Aun en otra modalidad particular, la indicacion es (viii).

Las siguientes indicaciones se prefieren particularmente: Diabetes tipo 2, y/u obesidad.

Modalidades particulares

Las siguientes son modalidades particulares de la invencion:

292. Un derivado de GLP-1 seleccionado de lo siguiente: Quím. 21, Quím. 22, Quím. 23, Quím. 24, Quím. 25, Quím.

26, Quím. 27, Quím. 28, Quím. 29, Quím. 30, Quím. 31, Quím. 32, Quím. 33, Quím. 34, Quím. 35, Quím. 36, Quím.

37, Quím. 38, Quím. 39, Quím. 40, Quím. 41, Quím. 42, Quím. 43, Quím. 44, Quím. 45, Quím. 46, Quím. 47 y Quím.

48; o una sal, amida, o ester farmaceuticamente aceptables de estos.

293. Un derivado de GLP-1 seleccionado de las estructuras qmmicas que se muestran en cualquiera de los Ejemplos 1-28; o una sal, amida o ester farmaceuticamente aceptables de estos.

294. Un derivado de GLP-1 seleccionado de los nombres de derivados de GLP-1 que se muestran en cualquiera de los Ejemplos 1-28; o una sal, amida o ester farmaceuticamente aceptables de estos.

298. Una composicion farmaceutica que comprende un derivado de acuerdo con cualquiera de las modalidades 292-294, y un excipiente aceptable farmaceuticamente.

299. Un derivado de acuerdo con cualquiera de las modalidades 292-294, para el uso como un medicamento.

300. Un derivado de acuerdo con cualquiera de las modalidades 292-294, para el uso en

(i) prevencion y/o tratamiento de todas las formas de diabetes, tales como hiperglucemia, diabetes tipo 2, tolerancia a la glucosa alterada, diabetes tipo 1, diabetes no dependiente de insulina, MODY (diabetes de aparicion en la madurez de los jovenes), diabetes gestacional y/o reduccion de HbA1C;

(ii) retardar o evitar la progresion de la enfermedad diabetica, tal como la progresion a diabetes tipo 2, retardar la progresion de la tolerancia a la glucosa alterada (IGT) a diabetes tipo 2 que requiere insulina, retardar o evitar la resistencia a la insulina y/o retardar la progresion de la diabetes tipo 2 que no requiere insulina a diabetes tipo 2 que requiere insulina;

(iii) mejorar la funcion de las celulas p, tal como disminuir la apoptosis de las celulas p, aumentar la funcion de las celulas p y/o la masa de celulas p, y/o restablecer la sensibilidad a la glucosa de las celulas p;

(iv) prevencion y/o tratamiento de trastornos cognitivos y/o trastornos neurodegenerativos, tales como enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, y/o esclerosis multiple;

(v) prevencion y/o tratamiento de trastornos alimentarios, tales como obesidad, por ejemplo, disminucion de la ingesta de alimentos, reduccion del peso corporal, supresion del apetito, induccion de saciedad; tratar o evitar el trastorno por atracones, la bulimia nerviosa y/u obesidad inducida por la administracion de un antipsicotico o un esteroide; reduccion de la motilidad gastrica; y/o retardar el vaciamiento gastrico; aumentar la movilidad ffsica; y/o evitar y/o tratar las comorbilidades de la obesidad, tal como osteoartritis y/o incontinencia urinaria;

(vi) prevencion y/o tratamiento de complicaciones diabeticas, tales como angiopatfa, neuropatfa, lo que incluye la neuropatfa periferica; nefropatfa; y/o retinopatfa;

(vii) mejorar los parametros lipfdicos, tales como la prevencion y/o el tratamiento de la dislipidemia, la disminucion de los lfpidos sericos totales; aumento de HDL; disminucion de LDL densa y pequena; disminucion de VLDL: disminucion de trigliceridos; reducir el colesterol; reducir los niveles plasmaticos de lipoprotema a (Lp(a)) en un humano; inhibir la generacion de apolipoprotema a (apo(a)) in vitro y/o in vivo;

(viii) la prevencion y/o el tratamiento de enfermedades cardiovasculares, tales como el smdrome X, ateroesclerosis, infarto del miocardio, enfermedad coronaria, dano por reperfusion, accidente cerebrovascular, isquemia cerebral, una enfermedad cardfaca temprana o cardiovascular temprana, hipertrofia ventricular izquierda, enfermedad de las arterias coronarias, hipertension, hipertension esencial, emergencia hipertensiva aguda, cardiomiopatfa, insuficiencia cardfaca, intolerancia al ejercicio, fallo cardfaco agudo y/o cronico, arritmia, disritmia cardfaca, smcope, angina de pecho, derivacion cardfaca y/o reoclusion con stent, claudicacion intermitente (ateroesclerosis obliterans), disfuncion diastolica, y/o disfuncion sistolica; y/o reduccion de la presion sangumea, tal como reduccion de la presion sangumea sistolica;

(ix) prevencion y/o tratamiento de enfermedades gastrointestinales, tales como enfermedad inflamatoria intestinal, smdrome del intestino corto, o enfermedad de Crohn o colitis; dispepsia, y/o ulceras gastricas; y/o inflamacion, tal como psoriasis, artritis psoriasica, artritis reumatoide, y/o lupus eritematoso sistemico;

(x) prevencion y/o tratamiento de enfermedades cnticas, tales como el tratamiento de un paciente cntico, un paciente de polinefropatfa cntica (CIPNP), y/o un paciente con CIPNP potencial; prevencion del desarrollo de enfermedades cnticas o de CIPNP; prevencion, tratamiento y/o curacion del smdrome de respuesta inflamatoria sistemica (SIRS) en un paciente; prevencion o reduccion de la posibilidad de que un paciente sufra de bacteriemia, septicemia y/o choque septico durante la hospitalizacion; y/o estabilizacion de la glucosa sangumea, equilibrio de la insulina y opcionalmente del metabolismo en pacientes en unidades de cuidados intensivos con enfermedades agudas;

(xi) prevencion y/o tratamiento del smdrome de ovario poliqrnstico (PCOS);

(xii) prevencion y/o tratamiento de enfermedades cerebrales, tales como isquemia cerebral, hemorragia cerebral y/o lesion cerebral traumatica;

(xiii) prevencion y/o tratamiento de la apnea del sueno; y/o

(xiv) prevencion y/o tratamiento del abuso, tal como abuso de alcohol y/o abuso de farmacos.

301. Uso de un derivado de acuerdo con cualquiera de las modalidades 292-294 para la preparacion de un medicamento para

(i) prevencion y/o tratamiento de todas las formas de diabetes, tales como hiperglucemia, diabetes tipo 2, tolerancia a la glucosa alterada, diabetes tipo 1, diabetes no dependiente de insulina, MODY (diabetes de aparicion en la madurez de los jovenes), diabetes gestacional y/o reduccion de HbAIC;

(ii) retardar o evitar la progresion de la enfermedad diabetica, tal como la progresion a diabetes tipo 2, retardar la progresion de la tolerancia a la glucosa alterada (IGT) a diabetes tipo 2 que requiere insulina, retardar o evitar la resistencia a la insulina y/o retardar la progresion de la diabetes tipo 2 que no requiere insulina a diabetes tipo 2 que requiere insulina;

(iii) mejorar la funcion de las celulas p, tal como disminuir la apoptosis de las celulas p, aumentar la funcion de las celulas p y/o la masa de celulas p, y/o restablecer la sensibilidad a la glucosa de las celulas p;

(iv) prevencion y/o tratamiento de trastornos cognitivos y/o trastornos neurodegenerativos, tales como enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, y/o esclerosis multiple;

(v) prevencion y/o tratamiento de trastornos alimentarios, tales como obesidad, por ejemplo, disminucion de la ingesta de alimentos, reduccion del peso corporal, supresion del apetito, induccion de saciedad; tratar o evitar el trastorno por atracones, la bulimia nerviosa y/u obesidad inducida por la administracion de un antipsicotico o un esteroide; reduccion de la motilidad gastrica; y/o retardar el vaciamiento gastrico; aumentar la movilidad ffsica; y/o evitar y/o tratar las comorbilidades de la obesidad, tal como osteoartritis y/o incontinencia urinaria;

(vi) prevencion y/o tratamiento de complicaciones diabeticas, tales como angiopatfa, neuropatfa, lo que incluye la neuropatfa periferica; nefropatfa; y/o retinopatfa;

(vii) mejorar los parametros lipfdicos, tales como la prevencion y/o el tratamiento de la dislipidemia, la disminucion de los lfpidos sericos totales; aumento de HDL; disminucion de LDL densa y pequena; disminucion de VLDL: disminucion de trigliceridos; reducir el colesterol; reducir los niveles plasmaticos de lipoprotema a (Lp(a)) en un humano; inhibir la generacion de apolipoprotema a (apo(a)) in vitro y/o in vivo;

(viii) la prevencion y/o el tratamiento de enfermedades cardiovasculares, tales como el smdrome X, ateroesclerosis, infarto del miocardio, enfermedad coronaria, dano por reperfusion, accidente cerebrovascular, isquemia cerebral, una enfermedad cardfaca temprana o cardiovascular temprana, hipertrofia ventricular izquierda, enfermedad de las arterias coronarias, hipertension, hipertension esencial, emergencia hipertensiva aguda, cardiomiopatfa, insuficiencia cardfaca, intolerancia al ejercicio, fallo cardfaco agudo y/o cronico, arritmia, disritmia cardfaca, smcope, angina de pecho, derivacion cardfaca y/o reoclusion con stent, claudicacion intermitente (ateroesclerosis obliterans), disfuncion diastolica, y/o disfuncion sistolica; y/o reduccion de la presion sangumea, tal como reduccion de la presion sangumea sistolica;

(ix) prevencion y/o tratamiento de enfermedades gastrointestinales, tales como enfermedad inflamatoria intestinal, smdrome del intestino corto, o enfermedad de Crohn o colitis; dispepsia, y/o ulceras gastricas; y/o inflamacion, tal como psoriasis, artritis psoriasica, artritis reumatoide, y/o lupus eritematoso sistemico;

(x) prevencion y/o tratamiento de enfermedades cnticas, tales como el tratamiento de un paciente cntico, un paciente de polinefropatfa cntica (CIPNP), y/o un paciente con CIPNP potencial; prevencion del desarrollo de enfermedades cnticas o de CIPNP; prevencion, tratamiento y/o curacion del smdrome de respuesta inflamatoria sistemica (SIRS) en un paciente; prevencion o reduccion de la posibilidad de que un paciente sufra de bacteriemia, septicemia y/o choque septico durante la hospitalizacion; y/o estabilizacion de la glucosa sangumea, equilibrio de la insulina y opcionalmente del metabolismo en pacientes en unidades de cuidados intensivos con enfermedades agudas;

(xi) prevencion y/o tratamiento del smdrome de ovario poliqrnstico (PCOS);

(xii) prevencion y/o tratamiento de enfermedades cerebrales, tales como isquemia cerebral, hemorragia cerebral y/o lesion cerebral traumatica;

(xiii) prevencion y/o tratamiento de la apnea del sueno; y/o

(xiv) prevencion y/o tratamiento del abuso, tal como abuso de alcohol y/o abuso de farmacos.

Las siguientes son modalidades particulares adicionales de la invencion:

205. Un derivado de GLP-1 seleccionado de lo siguiente: Quím. 21, Quím. 22, Quím. 23, Quím. 24, Quím. 25, Quím.

26, Quím. 27 y Quím. 28; o una sal, amida, o ester farmaceuticamente aceptables de estos.

206. Un derivado de GLP-1 seleccionado de las estructuras qmmicas que se muestran en cualquiera de los Ejemplos 1-8; o una sal, amida o ester farmaceuticamente aceptables de estos.

207. Un derivado de GLP-1 seleccionado de los nombres de derivados de GLP-1 que se muestran en cualquiera de los Ejemplos 1-8; o una sal, amida o ester farmaceuticamente aceptables de estos.

211. Una composicion farmaceutica que comprende un derivado de acuerdo con cualquiera de las modalidades 205-207, y un excipiente aceptable farmaceuticamente.

212. Un derivado de acuerdo con cualquiera de las modalidades 205-207, para el uso como un medicamento.

213. Un derivado de acuerdo con cualquiera de las modalidades 205-207, para el uso en

(i) prevencion y/o tratamiento de todas las formas de diabetes, tales como hiperglucemia, diabetes tipo 2, tolerancia a la glucosa alterada, diabetes tipo 1, diabetes no dependiente de insulina, MODY (diabetes de aparicion en la madurez de los jovenes), diabetes gestacional y/o reduccion de HbA1C;

(ii) retardar o evitar la progresion de la enfermedad diabetica, tal como la progresion a diabetes tipo 2, retardar la progresion de la tolerancia a la glucosa alterada (IGT) a diabetes tipo 2 que requiere insulina, retardar o evitar la resistencia a la insulina y/o retardar la progresion de la diabetes tipo 2 que no requiere insulina a diabetes tipo 2 que requiere insulina;

(iii) mejorar la funcion de las celulas p, tal como disminuir la apoptosis de las celulas p, aumentar la funcion de las celulas p y/o la masa de celulas p, y/o restablecer la sensibilidad a la glucosa de las celulas p;

(iv) prevencion y/o tratamiento de trastornos cognitivos y/o trastornos neurodegenerativos, tales como enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, y/o esclerosis multiple;

(v) prevencion y/o tratamiento de trastornos alimentarios, tales como obesidad, por ejemplo, disminucion de la ingesta de alimentos, reduccion del peso corporal, supresion del apetito, induccion de saciedad; tratar o evitar el trastorno por atracones, la bulimia nerviosa y/u obesidad inducida por la administracion de un antipsicotico o un esteroide; reduccion de la motilidad gastrica; y/o retardar el vaciamiento gastrico; aumentar la movilidad ffsica; y/o evitar y/o tratar las comorbilidades de la obesidad, tal como osteoartritis y/o incontinencia urinaria;

(vi) prevencion y/o tratamiento de complicaciones diabeticas, tales como angiopatfa, neuropatfa, lo que incluye la neuropatfa periferica; nefropatfa; y/o retinopatfa;

(vii) mejorar los parametros lipfdicos, tales como la prevencion y/o el tratamiento de la dislipidemia, la disminucion de los lfpidos sericos totales; aumento de HDL; disminucion de LDL densa y pequena; disminucion de VLDL: disminucion de trigliceridos; reducir el colesterol; reducir los niveles plasmaticos de lipoprotema a (Lp(a)) en un humano; inhibir la generacion de apolipoprotema a (apo(a)) in vitro y/o in vivo;

(viii) la prevencion y/o el tratamiento de enfermedades cardiovasculares, tales como el smdrome X, ateroesclerosis, infarto del miocardio, enfermedad coronaria, dano por reperfusion, accidente cerebrovascular, isquemia cerebral, una enfermedad cardfaca temprana o cardiovascular temprana, hipertrofia ventricular izquierda, enfermedad de las arterias coronarias, hipertension, hipertension esencial, emergencia hipertensiva aguda, cardiomiopatfa, insuficiencia cardfaca, intolerancia al ejercicio, fallo cardfaco agudo y/o cronico, arritmia, disritmia cardfaca, smcope, angina de pecho, derivacion cardfaca y/o reoclusion con stent, claudicacion intermitente (ateroesclerosis obliterans), disfuncion diastolica, y/o disfuncion sistolica; y/o reduccion de la presion sangmnea, tal como reduccion de la presion sangmnea sistolica;

(ix) prevencion y/o tratamiento de enfermedades gastrointestinales, tales como enfermedad inflamatoria intestinal, smdrome del intestino corto, o enfermedad de Crohn o colitis; dispepsia, y/o ulceras gastricas; y/o inflamacion, tal como psoriasis, artritis psoriasica, artritis reumatoide, y/o lupus eritematoso sistemico;

(x) prevencion y/o tratamiento de enfermedades cnticas, tales como el tratamiento de un paciente cntico, un paciente de polinefropatfa cntica (CIPNP), y/o un paciente con CIPNP potencial; prevencion del desarrollo de enfermedades cnticas o de CIPNP; prevencion, tratamiento y/o curacion del smdrome de respuesta inflamatoria sistemica (SIRS) en un paciente; prevencion o reduccion de la posibilidad de que un paciente sufra de bacteriemia, septicemia y/o choque septico durante la hospitalizacion; y/o estabilizacion de la glucosa sangmnea, equilibrio de la insulina y opcionalmente del metabolismo en pacientes en unidades de cuidados intensivos con enfermedades agudas;

(xi) prevencion y/o tratamiento del smdrome de ovario poliqmstico (PCOS);

(xii) prevencion y/o tratamiento de enfermedades cerebrales, tales como isquemia cerebral, hemorragia cerebral y/o lesion cerebral traumatica;

(xiii) prevencion y/o tratamiento de la apnea del sueno; y/o

(xiv) prevencion y/o tratamiento del abuso, tal como abuso de alcohol y/o abuso de farmacos.

214. Uso de un derivado de acuerdo con cualquiera de las modalidades 205-207 para la preparacion de un medicamento

(i) prevencion y/o tratamiento de todas las formas de diabetes, tales como hiperglucemia, diabetes tipo 2, tolerancia a la glucosa alterada, diabetes tipo 1, diabetes no dependiente de insulina, MODY (diabetes de aparicion en la madurez de los jovenes), diabetes gestacional y/o reduccion de HbAIC;

(ii) retardar o evitar la progresion de la enfermedad diabetica, tal como la progresion a diabetes tipo 2, retardar la progresion de la tolerancia a la glucosa alterada (IGT) a diabetes tipo 2 que requiere insulina, retardar o evitar la resistencia a la insulina y/o retardar la progresion de la diabetes tipo 2 que no requiere insulina a diabetes tipo 2 que requiere insulina;

(iii) mejorar la funcion de las celulas p, tal como disminuir la apoptosis de las celulas p, aumentar la funcion de las celulas p y/o la masa de celulas p, y/o restablecer la sensibilidad a la glucosa de las celulas p;

(iv) prevencion y/o tratamiento de trastornos cognitivos y/o trastornos neurodegenerativos, tales como enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, y/o esclerosis multiple;

(v) prevencion y/o tratamiento de trastornos alimentarios, tales como obesidad, por ejemplo, disminucion de la ingesta de alimentos, reduccion del peso corporal, supresion del apetito, induccion de saciedad; tratar o evitar el trastorno por atracones, la bulimia nerviosa y/u obesidad inducida por la administracion de un antipsicotico o un esteroide; reduccion de la motilidad gastrica; y/o retardar el vaciamiento gastrico; aumentar la movilidad ffsica; y/o evitar y/o tratar las comorbilidades de la obesidad, tal como osteoartritis y/o incontinencia urinaria;

(vi) prevencion y/o tratamiento de complicaciones diabeticas, tales como angiopatfa, neuropatfa, lo que incluye la neuropatfa periferica; nefropatfa; y/o retinopatfa;

(vii) mejorar los parametros lipfdicos, tales como la prevencion y/o el tratamiento de la dislipidemia, la disminucion de los lfpidos sericos totales; aumento de HDL; disminucion de LDL densa y pequena; disminucion de VLDL: disminucion de trigliceridos; reducir el colesterol; reducir los niveles plasmaticos de lipoprotema a (Lp(a)) en un humano; inhibir la generacion de apolipoprotema a (apo(a)) in vitro y/o in vivo;

(viii) la prevencion y/o el tratamiento de enfermedades cardiovasculares, tales como el smdrome X, ateroesclerosis, infarto del miocardio, enfermedad coronaria, dano por reperfusion, accidente cerebrovascular, isquemia cerebral, una enfermedad cardfaca temprana o cardiovascular temprana, hipertrofia ventricular izquierda, enfermedad de las arterias coronarias, hipertension, hipertension esencial, emergencia hipertensiva aguda, cardiomiopatfa, insuficiencia cardfaca, intolerancia al ejercicio, fallo cardfaco agudo y/o cronico, arritmia, disritmia cardfaca, smcope, angina de pecho, derivacion cardfaca y/o reoclusion con stent, claudicacion intermitente (ateroesclerosis obliterans), disfuncion diastolica, y/o disfuncion sistolica; y/o reduccion de la presion sangumea, tal como reduccion de la presion sangumea sistolica;

(ix) prevencion y/o tratamiento de enfermedades gastrointestinales, tales como enfermedad inflamatoria intestinal, smdrome del intestino corto, o enfermedad de Crohn o colitis; dispepsia, y/o ulceras gastricas; y/o inflamacion, tal como psoriasis, artritis psoriasica, artritis reumatoide, y/o lupus eritematoso sistemico;

(x) prevencion y/o tratamiento de enfermedades cnticas, tales como el tratamiento de un paciente cntico, un paciente de polinefropatfa cntica (CIPNP), y/o un paciente con CIPNP potencial; prevencion del desarrollo de enfermedades cnticas o de CIPNP; prevencion, tratamiento y/o curacion del smdrome de respuesta inflamatoria sistemica (SIRS) en un paciente; prevencion o reduccion de la posibilidad de que un paciente sufra de bacteriemia, septicemia y/o choque septico durante la hospitalizacion; y/o estabilizacion de la glucosa sangumea, equilibrio de la insulina y opcionalmente del metabolismo en pacientes en unidades de cuidados intensivos con enfermedades agudas;

(xi) prevencion y/o tratamiento del smdrome de ovario poliqrnstico (PCOS);

(xii) prevencion y/o tratamiento de enfermedades cerebrales, tales como isquemia cerebral, hemorragia cerebral y/o lesion cerebral traumatica;

(xiii) prevencion y/o tratamiento de la apnea del sueno; y/o

(xiv) prevencion y/o tratamiento del abuso, tal como abuso de alcohol y/o abuso de farmacos.

EJEMPLOS

Esta parte experimental comienza con una lista de abreviaturas y le sigue una seccion que incluye los metodos generales para sintetizar y caracterizar los analogos y derivados de la invencion. Despues le siguen varios ejemplos que se relacionan con la preparacion de derivados de GLP-1 espedficos y al final se han incluido varios ejemplos relacionados con la actividad y las propiedades de estos analogos y derivados (seccion titulada metodos farmacologicos). Los ejemplos sirven para ilustrar la invencion.

Materiales y Métodos

Lista de abreviaturas

Aib: a acido aminoisobutmco (acido 2-aminoisobutmco)

AcOH: acido acetico

API: Ingrediente farmaceutico activo

AUC: Area bajo la curva

BG: Glucosa en sangre

BHK Rinon de Hamster Bebe

BW: Peso Corporal

Boc: f-butiloxicarbonilo

Bom: benciloximetilo

BSA: Albumina serica bovina

Bzl: bencilo

CAS: Servicio de Resumenes Químicos

Clt: 2-clorotritilo

colidina: 2,4,6-trimetilpiridina

DCM: diclorometano

Dde: 1-(4,4-dimetil-2,6-dioxociclohexilideno) de etilo

DesH: des-amino histidina (acido imidazopropionico

o acido 3-(imidazol-5-il)propanoico), Imp)

DIC: diisopropilcarbodiimida

DIPEA: diisopropiletilamina

DMAP: 4-dimetilaminopiridina

DMEM: Medio de Eagle Modificado de Dulbecco (DMEM)

DooaSuc: acido 8-amino-3,6-dioxaoctyl succinamico

EDTA: acido etilendiaminotetraacetico

EGTA: acido etilen glicol tetraacetico

FCS: Suero de Ternera Fetal

Fmoc: 9-fluorenilmetiloxicarbonilo

HATU: (O-(7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio hexa

fluorofosfato)

HBTU: (2-(1H-benzotriazol-1-il-)-1,1,3,3 tetrametiluronio

hexafluorofosfato)

HEPES: Acido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazinaetanosulf6nico

HFIP 1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol o hexafluoroisopropanol

HOAt: 1-hidroxi-7-azabenzotriazol

HOBt: 1-hidroxibenzotriazol

HPLC: Cromatograffa Ifquida de alto rendimiento

HSA: Albumina serica humana

IBMX: 3-isobutil-1-metilxantina

Imp: Acido imidazopropionico o acido 3-(imidazol-5-il)propanoico) (referido ademas como des-amino histidina, DesH)

Inp: acido isonipecotico

i.v. por via intravenosa

ivDde: 1-(4,4-dimetil-2,6-dioxociclohexilideno)-3-metilbutilo

IVGTT: Prueba de Tolerancia a Glucosa Intravenosa

LCMS: Espectroscopfa de masas por cromatograffa lfquida

LYD: Landrace Yorkshire Duroc

MALDI-MS: Ver MALDI-TOF MS

MALDI-TOF MS:

Espectroscopfa de masas de tiempo de vuelo de Desorcion/Ionizacion laser asistida por matriz

MeOH: metanol

Mmt: 4-metoxitritilo

Mtt: 4-metiltritilo

NMP: N-metil pirrolidona

OBz: ester de benzoilo

OEG: acido 8-amino-3,6-dioxaoctanoico

OPfp: pentafluorofenoxi

OPnp: para-nitrofenoxi

OSu: Esteres de O-succinimidilo (esteres de hidroxisuccinimida)

OtBu: ester terc butflico

Oxyma Pure®: Ester etilico del acido ciano-hidroxiimino-acetico

Pbf: 2,2,4,6,7-pentametildihidrobenzofuran-5-sulfonilo

PBS: Solucion salina tamponada con fosfato

PD: Farmacodinamica

Pen/Strep:Penicilina/Estreptomicina

PK: Farmacocinetica

RP: Fase inversa

RP-HPLC:Cromatograffa Ifquida de alto rendimiento de fase inversa

RT: Temperatura ambiente

RT: Tiempo de retencion

s.c.: V^a subcutanea

SD: Desviacion estandar

SEC-HPLC: Cromatograffa L^quida de Alta Resolucion de Exclusion de Tamano SEM: Error estandar de la media

SPA: Ensayo de Proximidad por Centelleo

SPPS: Smtesis de péptidos en fase solida

TBME: terc-butil metil eter

tBu: terc butilo

TFA: acido trifluoroacetico

TIS: triisopropilsilano

TLC: Cromatograffa de Capa Delgada

Tos: tosilato (o pare-toluenosulfonilo)

TotaGlyc: acido 13-amino-4,7,10-trioxatridecail diglicolamico

Tris: tris(hidroximetil)aminometano o 2-amino-2-hidroximetilpropano-1,3-diol

Trt: trifenilmetilo (tritilo)

Trx: acido tranexamico

TtdSuc: acido 13-amino-4,7,10-trioxatridecayl succinamico

UPLC: Cromatograffa lfquida de ultra rendimiento

Materiales especiales

Ester mono-terc-bufflico del acido eicosanodioico

Ester mono-terc-bufflico del acido docosanodioico

Ester mono-terc-bufflico del acido nonadecanodioico acido nonadecanodioico Fmoc-acido 8-amino-3,6-dioxaoctanoico

Fmoc-acido 8-amino-3,6-dioxaoctil succinamico

Fmoc-acido 13-amino-4,7,10-trioxatridecail succinamico

Fmoc-acido 13-amino-4,7,10-trioxatridecail diglicolamico

Fmoc-acido tranexamico

Fmoc-Lys(Mtt)-OH

Fmoc-Glu-OtBu

Boc-Lys(Fmoc)-OH

4-dimetilaminopiridina (DMAP)

terc-Butyl metil eter (TBME)

La preparacion del ester mono-terc-butflico del acido eicosanodioico, ester mono-terc-butflico del acido docosanodioico, y ester mono-terc-butilico del acido nonadecanodioico se describe en la seccion 2 mas adelante, y los once ultimos materiales mencionados estan disponibles comercialmente.

Métodos qmmicos

Esta seccion se divide en dos: La seccion A que se relaciona con los metodos generales (de preparacion (A1) y de deteccion y caracterizacion (A2)) y la seccion B, en la que se describe la preparacion y caracterizacion de varios ejemplos de compuestos espedficos.

A. Métodos Generales

A1. Métodos de preparacion

Esta seccion se refiere a metodos para la síntesis de péptidos en fase solida (metodos SPPS, que incluyen metodos para la desproteccion de aminoacidos, metodos para escindir el péptido de la resina y para su purificacion), asf como tambien metodos para detectar y caracterizar el péptido resultante (metodos de LCMS, MALDI y UPLC). La síntesis de los péptidos en fase solida puede mejorarse en algunos casos mediante el uso de dipéptidos protegidos en el enlace amida del dipéptido con un grupo que puede escindirse en condiciones acidas tales como, pero sin limitarse a, 2-Fmoc-oxi-4-metoxibencilo o 2,4,6-trimetoxibencilo. En los casos en que esta presente una serina o una treonina en el péptido, pueden usarse dipéptidos de pseudoprolina (comercializado por, por ejemplo, Novobiochem, ver ademas W.R. Sampson (1999), J. Pep. Sci. 5, 403). Los derivados de aminoacidos protegidos con Fmoc que se usaron fueron el estandar recomendado: Fmoc-Ala-OH, Fmoc-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-Asn(Trt)-OH, Fmoc-Asp(OtBu)-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Glu(OtBu)-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-His(Trt)-OH, Fmoc-Ile-OH, Fmoc-Leu-OH, Fmoc-Lys(Boc)-oH, Fmoc-Met-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Ser(tBu)-OH, Fmoc-Thr(tBu)-OH, Fmoc-Trp(Boc)-OH, Fmoc-Tyr(tBu)-OH, o, Fmoc-Val-OH etc. suministradores, por ejemplo Anaspec, Bachem, Iris Biotech, o Novabiochem. Si no se especifica nada mas, se usa la forma L natural de los aminoacidos. El aminoacido N-terminal se protegio con Boc en el grupo alfa amino (por ejemplo, se uso Boc-His(Boc)-OH, o Boc-His(Trt)-OH para los péptidos con His en el N-terminal). En el caso de la adhesion modular de la porcion de union a la albumina mediante el uso de SPPS, se usaron los siguientes bloques constitutivos protegidos adecuadamente, tales como, pero sin limitarse a: Fmoc-acido 8-amino-3,6-dioxaoctanoico, Fmoc-acido tranexamico, Fmoc-acido isonipecotico, Fmoc-Glu-OtBu, Fmoc-Lys(Fmoc)-OH, suministrados, por ejemplo, por Anaspec, Bachem, Iris Biotech, o Novabiochem. Mas adelante se describe como pueden prepararse los siguientes compuestos: ester mono-terc-butflico del acido eicosanodioico, ester mono-terc-butfiico del acido docosanodioico, y ester mono-terc-butflico del acido nonadecanodioico. Todas las operaciones que se indican a continuacion se realizaron a una escala de síntesis de 250 |jmol.

1. Smtesis de la cadena principal del péptido protegido unido a la resina

Metodo: SPPS_P

SPPS_P se realizo en un sintetizador de péptidos en fase solida Prelude de Protein Technologies (Tucson, AZ 85714 Estados Unidos) a una escala de 250 jm ol mediante el uso de un exceso de seis veces de aminoacidos Fmoc (300 mM en NMP con 300 mM de HOAt u Oxyma Pure®) con respecto a la carga de resina, por ejemplo, baja carga de Fmoc-Gly-Wang (0,35 mmol/g). La desproteccion de Fmoc se realizo mediante el uso de piperidina al 20 % en NMP. El acoplamiento se realizo mediante el uso de 3 : 3 : 3 : 4 aminoacido/(HOAt u Oxyma Pure®)/DIC/colidina en NMP. Se realizaron lavados superiores con NMP y DCM (7 ml, 0,5 min, 2 x 2 cada uno) entre las etapas de desproteccion y acoplamiento. Los tiempos de acoplamiento fueron generalmente de 60 minutos. Algunos aminoacidos que incluyen, pero no se limitan a, Fmoc-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-Aib-OH o Boc-His(Trt)-OH estaban “doblemente acoplados”, lo que significa que despues del primer acoplamiento (por ejemplo, 60 min), la resina se drena y se anaden mas reactivos (aminoacido, HOAt u Oxyma Pure®, DlC y colidina) y la mezcla se deja reaccionar de nuevo (por ejemplo, 60 minutos).

Metodo: SPPS L

SPPS_L se realizo en un sintetizador de péptidos Liberty basado en microondas de CEM Corp. (Matthews, NC 28106, Estados Unidos) a una escala de 250 pmol o 100 pmol mediante el uso de un exceso de seis veces de aminoacidos Fmoc (300 mM en NMP con HOAt 300 mM u Oxyma Pure®) en relacion con la carga de resina, por ejemplo baja carga Fmoc-Gly-Wang (0,35 mmol/g). La desproteccion de Fmoc se realizo mediante el uso de piperidina al 5 % en NMP a temperatura hasta 75 °C durante 30 segundos donde despues que se dreno la resina y se lavo con NMP se repitio la desproteccion de Fmoc esta vez durante 2 minutos a 75 °C. El acoplamiento se realizo mediante el uso de 1: 1 : 1 aminoacido/(HOAt o Oxyma Pure®)/DIC en NMP. Los tiempos y las temperaturas de acoplamiento fueron generalmente de 5 minutos a temperatura hasta 75 °C. Para reacciones a mayor escala se usaron tiempos de acoplamiento mas largos, por ejemplo, 10 min. Los aminoacidos histidina estaban doblemente acoplados a 50 °C, o acoplados cuatro veces si el aminoacido anterior estaba estericamente impedido (por ejemplo, Aib). Los aminoacidos arginina se acoplaron a RT durante 25 minutos y despues se calentaron a 75 °C durante 5 min. Algunos aminoacidos, tales como, pero sin limitarse a Aib, estaban “doblemente acoplados”, lo que significa que despues del primer acoplamiento (por ejemplo, 5 minutos a 75 °C), la resina se drena y se anaden mas reactivos (aminoacidos, HOAt u Oxyma Pure® y DlC) y la mezcla se calienta de nuevo (por ejemplo, 5 minutos a 75 °C). Se realizaron lavados con NMP (5 x 10 ml) entre las etapas de desproteccion y acoplamiento.

2. Smtesis del grupo de union a albumina

El ester mono-terc-butilico del acido eicosanodioico puede prepararse como se conoce en la tecnica, por ejemplo, como se describe en WO 2010102886 A1.

El ester mono-ferc-butilico del acido docosanodioico puede prepararse como se describe en lo siguiente:

Una solucion 1 M del complejo de borano-tetrahidrofurano en tetrahidrofurano (94,1 ml, 94,1 mmol) se anadio por goteo a una solucion de ester mono-terc-butflico del acido icosanodioico (25,0 g, 62,7 mmol) en tetrahidrofurano seco (140 ml) a 0 °C en argon. La solucion resultante se agito a 0 °C durante 2 horas, despues se elimino el bano de enfriamiento y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante toda la noche. Se anadieron una solucion acuosa saturada de bicarbonato de sodio (300 ml) y agua (100 ml) y la mezcla resultante se extrajo con diclorometano (250 ml, 2 x 100 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se evaporaron hasta la sequedad. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna sobre silicagel (eluyente: diclorometano/metanol 99:1). Las fracciones con el producto puro se evaporaron y el residuo se paso de nuevo por cromatograffa (eluyente: diclorometano/metanol 99:1). Los productos se combinaron y se secaron al vacfo, lo que produjo acido 20-hidroxi-icosanoico ester terc-butilico como un solido blanco.

Rendimiento: 16,50 g (68 %).

¹H NMR espectro (300 MHz, CDCb, delta^H): 3,64 (t, J=6,6 Hz, 2 H), 2,20 (t, J=7,5 Hz, 2 H); 1,65-1,51 (m, 4 H); 1,45 (s, 9 H); 1,36-1,21 (m, 30 H).

El alcohol anteriormente preparado (16,5 g, 42,9 mmol) se disolvio en diclorometano seco (90 ml). Se anadio trietilamina (9,00 ml, 64,4 mmol), se enfrio la mezcla de reaccion a 0 °C y se anadio cloruro de mesilo (4,00 ml, 51,5 mmol) por goteo. Despues de 1 hora la mezcla de reaccion se dejo alcanzar la temperatura ambiente y se agito durante toda la noche. Se anadio agua (1,5 ml) y se agito la mezcla 30 minutos. Los solventes se evaporaron, se anadio acetato de etilo (200 ml) y se extrajo la mezcla con acido clortndrico 1 M (2 x 100 ml), solucion de carbonato de sodio al 5 % (2 x 100 ml) y agua (100 ml). Despues del secado con sulfato de sodio anhidro, filtracion y evaporacion de solventes se obtuvo el ester terc-butflico del acido 20-metanosulfoniloxi-icosanoico como un solido blanco.

Rendimiento: 19,80 g (100 %).

¹H NMR espectro (300 MHz, CDCl^a , delta^H): 4,22 (t, J=6,6 Hz, 2 H); 3,01 (s, 3 H); 2,20 (t, J=7,5 Hz, 2 H); 1,81-1,68 (m, 2 H); 1,63-1,51 (m, 2 H); 1,44 (s, 9 H); 1,34-1,22 (m, 30 H).

El mesilato preparado anteriormente (17,8 g, 38,5 mmol) se disolvio en acetona (250 ml), se anadio bromuro de litio (6,69 g, 77,0 mmol) y la mezcla de reaccion se sometio a reflujo durante toda la noche. Despues de enfriar, se evaporo el solvente, se anadio acetato de etilo (300 ml) y se extrajo la mezcla con solucion de bicarbonato de sodio al 5 % (3 x 170 ml). Los extractos organicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se evaporaron. El producto se seco al vacfo para producir ester terc-butflico del acido 20-bromo-icosanoico como un solido blanco.

Rendimiento: 17,10 g (99 %).

¹H NMR espectro (300 MHz, CDCl^a, delta^H): 3,41 (t, J=6,9 Hz, 2 H); 2,20 (t, J=7,4 Hz, 2 H); 1,90-1,77 (m, 2 H); 1,64­ 1,50 (m, 2 H); 1,43 (s, 9 H); 1,34-1,13 (m, 30 H).

Se disolvio hidruro de sodio (dispersion al 60 % en aceite mineral, 3,96 g, 99,0 mmol) en W,W-dimetilformamida (100 ml) en nitrogeno. Se anadio dimetil malonato (22,6 ml, 198 mmol) y la mezcla de reaccion se calento brevemente a 100 °C, despues se enfrio hasta la temperatura ambiente y se anadio la solucion anteriormente preparada de ester terc-bufflico del acido 20-bromo-icosanoico (14,8 g, 33,0 mmol) en N,N-dimetilformamida (150 ml). La mezcla de reaccion se calento a 100 °C durante 4 horas. Despues de enfriar hasta la temperatura ambiente, se anadio acetato de etilo (150 ml) y se lavo la solucion organica con cloruro de amonio saturado acuoso (3 x 100 ml) y salmuera (100 ml), se seco sobre sulfato de sodio anhidro y se evaporo hasta la sequedad. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna sobre silicagel (eluyente: hexano/acetato de etilo 96:4 a 93:7) que produce ester 22-tercbufflico ester 1-mefflico del acido 2-metoxicarbonil-docosanodioico como un solido blanco.

Rendimiento: 16,10 g (97 %).

1H NMR espectro (300 MHz, CDCb, delta^H): 3,74 (s, 6 H); 3,36 (t, J=7,5 Hz, 1 H); 2,20 (t, J=7,5 Hz, 2 H); 1,95-1,84 (m, 2 H); 1,64-1,51 (m, 2 H); 1,44 (s, 9 H); 1,34-1,21 (m, 32 H).

El ester 22-terc-bufflico 1-ester mefflico del acido 2-metoxicarbonil-docosanodioico (16,1 g, 32,3 mmol) preparado anteriormente se disolvio en tetrahidrofurano (85 ml) y se anadio solucion de hidroxido de litio monohidratado (4,07 g, 96,9 mmol) en agua (75 ml). La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante toda la noche, despues se acidifico con acido clortffdrico 1 M y se extrajo con acetato de etilo (4 x 150 ml). Los extractos organicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se evaporaron. El producto se seco al vacfo para producir ester 22-terc-bufflico del acido 2-carboxi-docosanodioico como un solido blanco.

Rendimiento: 14,50 g (95 %).

1H NMR espectro (300 MHz, CDCl^a , delta^H): 3,44 (t, J=7,4 Hz, 1 H); 2,22 (t, J=7,5 Hz, 2 H); 2,00-1,89 (m, 2 H); 1,63­ 1,52 (m, 2 H); 1,45 (s, 9 H); 1,37-1,20 (m, 32 H).

Se disolvio ester 22-terc-bufflico del acido 2-carboxi-docosanodioico (14,5 g, 30,8 mmol) en tolueno (170 ml) y se sometio a reflujo a 110 °C durante 48 horas. Se evaporo el solvente, se purifico el residuo mediante cromatograffa en columna sobre silicagel (eluyente: diclorometano/metanol 97:3) que produce el compuesto del fftulo como un solido blanco.

Rendimiento: 5,25 g (40 %).

Rendimiento total: 5,25 g (25 %)

1H NMR espectro (300 MHz, CDCl^a, delta^H): 2,35 (t, J=7,5 Hz, 2 H); 2,21 (t, J=7,5 Hz, 2 H); 1,68-1,53 (m, 4 H); 1,45 (s, 9 H); 1,35-1,22 (m, 32 H).

El ester mono-terc-bufflico del acido nonadecanodioico puede prepararse como se describe en lo siguiente:

Una suspension de acido nonadecanodioico (26,1 g, 79,5 mmol) en mezcla de tolueno (140 ml) y f-butanol (32 ml, 334,8 mmol, 4,4 eq.) se calento a temperatura de reflujo (97 °C). La mezcla resulto en una solucion de color amarillo claro. Se anadio d Ma P (1,9 g, 15,2 mmol, 0,2 eq.), seguido por adicion en goteo de Boc²O en tolueno (75 ml) durante 90 minutos. Se observo la evolucion del CO² pesado. La mezcla se agito a temperatura de reflujo durante toda la noche y se concentro a una suspension blanca. Se anadio tolueno fffo (200 ml) y los solidos se retiraron por medio de filtracion, se lavaron con tolueno y se seco al vacfo (45 °C) (6,2 g, material de partida). El filtrado se concentro (45 °C) y se anadio heptano (350 ml) al residuo oleoso. La suspension blanca se agito durante 1 hora a 0 °C y los solidos se aislaron por medio de filtracion. El residuo similar a mantequilla en el filtro se disolvio en TBME y se enjuago a traves del filtro. El filtrado de heptano y el filtrado de TBME se concentraron separadamente. El residuo de heptano (10 g) contema mayormente di-ester (aprox. 80 %) y el residuo de TBME (13,3 g) contema mayormente mono-ester (aprox.

80 %). El residuo de TBME se purifico mediante cromatograffa rapida (Sflice: 500 g, eluyente: CH²C^M PA 98:2 a 97:3). El compuesto del fftulo se obtuvo como un solido blanco (10,3 g, 33 %).

1H NMR espectro (300 MHz, CDCb, delta^H): 2,35 (t, J=7,6 Hz, 2 H); 2,20 (t, J=7,6 Hz, 2 H); 1,68-1,53 (m, 4 H); 1,43 (s, 9 H); 1,39-1,22 (m, 26 H).

3. Adhesion de las cadenas laterales a la cadena principal de péptido protegido unido a la resina

Cuando esta presente una acilacion en una cadena lateral de lisina, el grupo epsilon amino de la lisina a acilar se protegio con Mtt, Mmt, Dde, ivDde o Boc, en dependencia de la ruta de adhesion de la porcion de prolongacion y el enlazador. La desproteccion de Dde o ivDde se realizo con hidrazina al 2 % en NMP (2 x 20 ml, 10 min cada uno) seguido por lavados con NMP (4 x 20 ml). La desproteccion de Mtt o Mmt se realizo con TFA al 2 % y TIS al 2-3 % en DCM (5 x 20 ml, 10 min cada uno) seguido por lavados con DCM (2 x 20 ml), MeOH al 10 % y DIPeA al 5 % en DCM (2 x 20 ml) y NMP (4 x 20 ml), o mediante el tratamiento con hexafluoroisopropanol/DCM (75:25, 5 x 20 ml, 10 min cada uno) seguido por lavados como anteriormente. En algunos casos el grupo Mtt se elimino mediante etapas automatizadas en el sintetizador de péptidos Liberty. La desproteccion de Mtt se realizo con hexafluoroisopropanol o hexafluoroisopropanol/DCM (75:25) a temperatura ambiente durante 30 min seguido por el lavado con d Cm (7 ml x 5), seguido por lavados con NMP (7ml x 5). La porcion de prolongacion y/o el enlazador pueden unirse al péptido ya sea mediante acilacion del péptido unido a resina o mediante acilacion en solucion del péptido no protegido. En el caso de la union de la porcion de prolongacion y/o el enlazador a la resina peptidil protegida la union puede ser modular mediante el uso de SPPS y bloques de construccion adecuadamente protegidos.

Metodo: SC_P

El grupo de proteccion N-e-lisina se elimino como se describio anteriormente y la modificacion qmmica de la lisina se realizo mediante una o mas etapas automatizadas en el sintetizador de péptidos Prelude mediante el uso de bloques de construccion protegidos adecuadamente como se describio anteriormente. Los acoplamientos dobles se realizaron como se describio en SPPS_P con 3 horas por acoplamiento.

Metodo: SC_L

El grupo de proteccion N-e-lisina se elimino como se describio anteriormente y la modificacion qmmica de la lisina se realizo mediante una o mas etapas automatizadas en el sintetizador de péptidos Liberty mediante el uso de bloques de construccion protegidos adecuadamente como se describio anteriormente. Los acoplamientos dobles se realizaron como se describe en SPPS_L.

4. Escision del péptido unido a la resina con o sin cadenas laterales unidas y purificacion

Metodo: CP_M1

Despues de la síntesis la resina se lavo con DCM y el péptido se escindio de la resina mediante un tratamiento de 2­ 3 horas con TFA/TIS/agua (95/2,5/2,5 o 92,5/5/2,5) seguido por precipitacion con dietileter. El péptido se disolvio en un solvente adecuado (tal como, por ejemplo, acido acetico al 30 %) y se purifico mediante RP-Hp Lc estandar en una columna C18, de 5 pm, mediante el uso de acetonitrilo/agua/TFA. Las fracciones se analizaron mediante una combinacion de metodos de UPLC, MALDI y LCMS y las fracciones apropiadas se agruparon y se liofilizaron.

Si se desea, el contraion del péptido puede cambiarse a sodio mediante el uso de metodos conocidos en la tecnica. Como un ejemplo, se disolvieron aproximadamente 2 g de péptido en 250 ml de acetonitrilo/agua (50/50) y se cargaron en una columna C8, 5 pM, 50x250 mm de Waters X-Bridge en un sistema de RP-HPLC preparativa. Despues de la carga, la columna se lavo con agua durante 8 min a una velocidad de flujo de 60 ml/min y con NaOH 0,01 N pH 11 a una velocidad de flujo de 60 ml/min durante 2 x 8 min. La sal de sodio del péptido se eluyo mediante el uso de un flujo de agua isocratico a 60 ml/min durante 10 min seguido por un gradiente lineal de acetonitrilo 5 % a 85 % durante 30 min.

Metodo: CP_M2

Despues de la síntesis la resina se lavo con DCM y el péptido se escindio de la resina mediante un tratamiento de 2­ 3 horas con TFA/TIS/agua (95/2,5/2,5 o 92,5/5/2,5) seguido por precipitacion con dietileter. El péptido se disolvio en un solvente adecuado (tal como, por ejemplo, acido acetico al 30 %) y se purifico mediante RP-Hp Lc estandar en una columna Kinetex C18, 5 pm, y se eluyo con una mezcla binaria de diamoniohidrogenofosfato 0,09 M en agua/acetonitrilo (90:10, pH 3,0) y acetonitrilo/2-propanol/agua (60:20:20). El péptido se purifico adicionalmente mediante RP-HPLC estandar en una columna C18, 5 pm, mediante el uso de acetonitrilo/agua/TFA. Las fracciones se analizaron mediante una combinacion de metodos de UPLC, MALDI y LCMS y las fracciones apropiadas se agruparon y se liofilizaron.

Si se desea, el contraion del péptido se puede cambiar a sodio mediante el uso de los metodos conocidos en la tecnica. Como un ejemplo, se disolvieron aproximadamente 2 g de péptido en 250 ml de acetonitrilo/agua (50/50) y se cargaron en una columna C8, 5 pM, 50x250 mm de Waters X-Bridge en un sistema de RP-HPLC preparativa. Despues de la carga, la columna se lavo con agua durante 8 min a una velocidad de flujo de 60 ml/min y con NaOH 0,01 N pH 11 a una velocidad de flujo de 60 ml/min durante 2 x 8 min. La sal de sodio del péptido se eluyo mediante el uso de un flujo de agua isocratico a 60 ml/min durante 10 min seguido por un gradiente lineal de acetonitrilo 5 % a 85 % durante 30 min.

A2. Métodos Generales para la Deteccion y Caracterizacion

1. Métodos de LCMS

Metodo: LCMS01

LCMS01v1 se realizo en una configuracion que consistio en el sistema Waters Acquity UPLC y el espectrometro de masas LCT Premier XE de Micromass. Eluyentes: A: acido formico 0,1 % en agua; B: acido formico 0,1 % en acetonitrilo. El analisis se realizo a RT mediante la inyeccion de un volumen apropiado de la muestra (preferentemente 2-10 pl) en la columna que se eluyo con un gradiente de A y B. Las condiciones de UPLC, los ajustes del detector y los ajustes del espectrometro de masas fueron: Columna: Waters Acquity UPLC BEH, C-18, 1,7 pm, 2,1 mm x 50 mm. Gradiente: Lineal 5 % - 95 % de acetonitrilo durante 4,0 min (alternativamente 8,0 min) a 0,4 ml/min. Deteccion: 214 nm (salida analogica del TUV (detector de UV ajustable)) Modo de ionizacion MS: API-ES. Escaneo: 100-2000 amu (alternativamente 500-2000 amu), etapa 0,1 amu.

2. Método de UPLC

Metodo: UPLC02

El analisis RP se llevo a cabo mediante el uso de un sistema Waters UPLC ajustado con un detector de doble banda. Las detecciones de UV a 214 nm y 254 nm se recogieron mediante el uso de una columna ACQUITY UPLC BEH130, C18, 130A, 1,7um, 2,1 mm x 150 mm, 40^oC. El sistema HPLC se conecto a dos recipientes de eluyente que conteman: A: 99,95% H²O, 0,05% TFA; B: 99,95% CH³CN, 0,05% TFA. Se uso el siguiente gradiente lineal: 95 % A, 5 % B a 95 % A, 5 % B durante 16 minutos a una velocidad de flujo de 0,40 ml/min.

3. Método MALDI-MS

Metodo: MALDI01v01

Los pesos moleculares se determinaron mediante el uso de espectroscopfa de masas de tiempo de vuelo de ionizacion y desorcion con laser asistida por matriz (MALDI-MS) y se registraron en un Microflex o Autoflex (Bruker). Se uso una matriz de acido alfa-ciano-4-hidroxi cinamico.

B. Preparacion de compuestos de los ejemplos

Ejemplo 1

N{Epsilon-27}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Glu22,Arg26,Lys27,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Gly-Gly-Gly-Ser-N{epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]L ys

Quím. 21:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 2.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 10,6 min

MALDI01v01: calc. m/z = 5649; encontrado m/z = 5648

Ejemplo 2

N{Epsilon-31}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]ethoxi]etoxi]acetil] -[Aib8,Glu22,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Gly-Gly-Gly-Ser-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoylamino)methyl]ciclohexanecarbonyl]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acet il]Lys

Quím. 22:

El péptido tiene la sec. con num. de ident.: 3.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 10,6 min

MALDI01v01: calc. m/z = 5593; encontrado m/z = 5590

Ejemplo 3

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidN)-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]L ys-Gly-Gly-Ser-N{epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]L ys

Quím. 23:

El péptido tiene la sec. con num. de ident.: 4.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt =10,8 min

MALDI01v01: calc. m/z = 5722; encontrado m/z = 5720

Ejemplo 4

N{Epsilon-23H2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoNamino)metN]cidohexanecarbonN]amino]butanoN]aiTiino]etoxi]etoxi]acetN]aiTiino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8,Glu22,Lys23,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Gly-Gly-Gly-Ser-N{epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]L ys

Quím. 24:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 5.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt =10,6 min

MALDI01v01: calc. m/z = 5651; encontrado m/z = 5649

Ejemplo 5

N{Epsilon-36}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Glu22,Arg26,Arg34,Lys36]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Gly-Gly-Gly-Ser-N{epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]L ys

Q m m . 25:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 6.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt =11,3 min

MALDI01v01: calc. m/z = 5623; encontrado m/z = 5621

Ejemplo 6

N{Epsilon-18H2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]cidohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetilj-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidN-Gly-Gly-Gly-Ser-N{epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]L ys

Quím. 26:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 7.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 10,8 min

LCMS01: Rt = 2,6 min, m/3 = 1898; m/4 = 1424; m/3 = 1139

Ejemplo 7

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Epsilon}[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]cidohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]hexanoil]amino]hexanoil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]hexanoil]amino]hexanoil]Lys Quím. 27:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 4.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 9,8 min

LCMS01: Rt = 2,3 min, m/3 = 1885; m/4 = 1415; m/5 = 1131; m/6 = 943

Ejemplo 8

N{Epsilon-27}-[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-[[(4S)-4-carboxi-4-(19-carboxinonadecanoilamino)butanoil]amino]hexanoil]amino]hexanoil]-[Aib8,Glu22,Arg26,Lys27,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Gly-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-[[(4S)-4-carboxi-4-(19-carboxinonadecanoilamino)butanoil]amino]hexanoil]amino]hexanoil]Lys

Quím. 28:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 2.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 8,9 min

MALDI01: calc. m/z = 5303; encontrado m/z = 5302

Ejemplo 9

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34j-GLP-1-(7-37)-peptidN)-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(21-carboxihenicosanoilamino)metil]cidohexanecarbonil]amino]butanoiljamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Ly s-Gly-Gly-Ser-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(21-carboxihenicosanoilamino)metiljcidohexanecarboniljaminojbutanoiljaminojetoxijetoxijacetiljaminojetoxijetoxijacetil]Ly s

Quím. 29:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 4.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 12,3 min

LCMS01: Rt= 2,7; m/3 = 1927; m/4 = 1444; m/5 = 1156

Ejemplo 10

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34j-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Epsilon}3-[2-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metiljciclohexanecarboniljaminojbutanoiljaminojetoxijetoxijetoxijetoxijpropanoilLys-Gly-Gly-Ser-N{EpsNon}3-[2-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metiljciclohexanecarboniljaminojbutanoiljaminojetoxijetoxijetoxijetoxijpropanoilLys Quím. 30:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 4.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M2

UPLC02: Rt = 11,2 min

LCMS01: Rt = 2,7; m/3 = 1880; m/4 = 1410; m/5 = 1128

Ejemplo 11

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidN)-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]cidohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]L ys-Ser-Pro-Glu-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]L ys

Quím. 31:

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 11,7 min

LCMS01: Rt = 2,7 min; m/3 = 1945; m/4 = 1460; m/5 = 1168

Ejemplo 12

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidN)-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]L ys-Pro-Glu-Gly-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]L ys

Quím. 32:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 12.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 11,8 min

LCMS01: Rt = 2,7 min; m/3 = 1935 m/4 = 1452; m/5 = 1162

Ejemplo 13

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]L ys-Ser-Ala-Glu-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]L ys

Quím. 33:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 13.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 11,7 min

LCMS01: Rt = 2,7 min; m/3 = 1937; m/4 = 1453; m/5 = 1162

Ejemplo 14

N{Epsilon-36H2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilammo)metil]cidohexanecarboml]amino]butanoil]ammojetoxi]etoxi]acetil]ammo]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Glu22,Arg26,Arg34,Lys36]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Ala-Glu-Ser-Pro-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]L ys

Quím. 34:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 9.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 12 min

LCMS01: Rt = 2,8 min; m/3 = 1917; m/4 = 1438; m/5 = 1151

E je m p lo 15

N{Epsilon-36H2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]cidohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetilj-[Aib8,Glu22,Arg26,Arg34,Lys36]-GLP-1-(7-37)-peptidN-Pro-Ala-Ser-Glu-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]L ys

Quím. 35:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 11.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 12 min

LCMS01: Rt = 2,8 min; m/3 = 1917; m/4 = 1438; m/5 = 1151

Ejemplo 16

N{Epsilon-36}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Glu22,Arg26,Arg34,Lys36]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Glu-Gly-Pro-Ala-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]L ys

Quím. 36:

El péptido tiene la sec. con num. de ident.: 10.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 12 min

LCMS01: Rt = 2,8 min; m/3 = 1907; m/4 = 1431; m/5 = 1145

Ejemplo 17

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]a mino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]a mino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys

Quím. 37:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 4.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 11,3 min

LCMS01: Rt = 2,7 min; m/4 = 1577; m/5 = 1262

Ejemplo 18

N{alfa}([Imp7,Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19

carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]a mino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]a mino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys

Quím. 38:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 8.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 11,5 min

LCMS01: Rt = 2,7 min; m/4 = 1572; m/5 = 1258

Ejemplo 19

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(19

carboxinonadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetN]Lys-Gly-Gly-Ser-N{EpsNonp-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(19-carboxinonadecanoNammo)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]aiTimo]etoxi]etoxi]acetN]aiTiino]eto xi]etoxi]acetil]Lys

Quím. 39:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 4.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 10,7 min

LCMS01: Rt = 2,6 min; m/4 = 1507; m/5 = 1206

Ejemplo 20

N{alfa}([Imp7,Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidN)-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(19-carboxinonadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(19-carboxinonadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetil]Lys

Quím. 40:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 8.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 10,9 min

LCMS01: Rt = 2,6 min; m/4 = 1503; m/5 = 1203

Ejemplo 21

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Epsilon}[4-[3-[2-[2-[3-[[(4S)-4-carboxi-4-[[1-(19-carboxinonadecanoil)piperidina-4-carbonil]amino]butanoil]amino]propoxi]etoxi]etoxi]propilamino]-4-oxobutanoil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[4-[3-[2-[2-[3-[[(4S)-4-carboxi-4-[[1-(19-carboxinonadecanoil)piperidina-4-carbonil]amino]butanoil]amino]propoxi]etoxi]etoxi]propilamino]-4-oxobutanoil]Lys

Quím. 41:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 4.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 11,1 min

LCMS01: Rt = 2,7 min; m/3 = 1897; m/4 = 1423; m/5 = 1139

Ejemplo 22

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidN)-N{EpsNon}[2-[2-[3-[2-[2-[3-[[(4S)-4-carboxi-4-(19-carboxinonadecanoilamino)butanoil]amino]propoxi]etoxi]etoxi]propilamino]-2-oxoetoxi]acetil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[2-[2-[3-[2-[2-[3-[[(4S)-4-carboxi-4-(19-carboxinonadecanoilamino)butanoil]amino]propoxi]etoxi]etoxi]propilamino]-2-oxoetoxi]acetil]Lys

Quím. 42:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 4.

Método de síntesis _ SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 10,7 min

LCMS01: Rt = 2,6 min; m/3 = 1834; m/4 = 1376; m/5 = 1101

Ejemplo 23

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidN)-N{EpsNon}[4-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]etilamino]-4-oxobutanoil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[4-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]etilamino]-4-oxobutanoil]Lys Quím. 43:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 4.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 11,1 min

LCMS01: Rt = 2,7 min; m/4 = 1401,3; m/5 = 1121

Ejemplo 24

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidN)-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]a mino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]a mino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys

Quím. 44:

El péptido tiene la sec. con num. de ident.: 4.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 10,7 min

LCMS01: Rt = 2,6 min; m/4 = 1721; m/5 = 1377

Ejemplo 25

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-(19-carboxinonadecanoilamino)hexanoil]amino]hexanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-(19

carboxinonadecanoilamino)hexanoil]amino]hexanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys

Quím. 45:

El péptido tiene la sec. con num. de ident.: 4.

Método de síntesis: SPPS_L; SC_L; CP_M1

UPLC02: Rt = 9,0 min

LCMS01: Rt = 2,2 min, m/4 = 1570; m/5 = 1257

Ejemplo 26

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidN)-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(18-carboxioctadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Ly s-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(18-carboxioctadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Ly s

Quím. 46:

El péptido tiene la sec. con num. de ident.: 4.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_P; CP_M1

UPLC02: Rt = 10,5 min

LCMS01: Rt = 2,7 min; m/4 = 1425; m/5 = 1140

Ejemplo 27

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidN)-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-(19-carboxinonadecanoilamino)hexanoil]amino]hexanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]ammo]etoxi]etoxi]acetN]Lys-Gly-Gly-Ser-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-(19-carboxinonadecanoilamino)hexanoil]amino]hexanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys

Quím. 47:

El péptido tiene la sec. con núm. de ident.: 4.

Método de síntesis: SPPS_P; SC_L; CP_M2

UPLC02: Rt = 8,8 min

LCMS01: Rt = 2,2 min; m/4 = 1643; m/5 = 1315

Ejemplo 28

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidN)-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-(19-carboxinonadecanoilamino)hexanoil]amino]hexanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-(19-carboxinonadecanoilamino)hexanoil]amino]hexanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys

Quím. 48:

_ _ _ UPLC02: Rt = 8,6 min

LCMS01: Rt = 2,2 min; m/4 = 1716; m/5 = 1373

Métodos farmacologicos

Ejemplo 29: Potencia in vitro

El proposito de este ejemplo es probar la actividad, o potencia, de los derivados de GLP-1 in vitro. La potencia in vitro es la medida de la activacion del receptor de GLP-1 humano en un ensayo de celulas completas.

Las potencias de los derivados de GLP-1 de los Ejemplos 1-28 se determinaron como se describe mas adelante. Se incluyo la semaglutida para la comparacion.

Principio

La potencia in vitro se determino mediante la medicion de la respuesta del receptor de GLP-1 humano en un ensayo de gen reportero. El ensayo se realizo en la lmea celular BHK transfectada establemente, que expresa el receptor de GLP-1 humano y contiene el ADN para el elemento de respuesta de cAMP (CRE) acoplado a un promotor y el gen para la luciferasa de luciernaga (c Re luciferasa). Cuando se activa el receptor de GLP-1 humano da como resultado la produccion de cAMP, que a su vez da como resultado que se expresa la protema de la luciferasa. Cuando se completa la incubacion del ensayo, se anade el sustrato de la luciferasa (luciferina) y la enzima convierte la luciferina en oxiluciferina para producir bioluminiscencia. La luminiscencia se mide como la lectura del ensayo.

Cultivo celular y preparacion

Las celulas que se usan en este ensayo (clon FCW467-12A/KZ10-1) eran celulas BHK con BHKTS13 como lmea celular parental. Las celulas se derivaron de un clon (FCW467-12A) que expresa el receptor de GLP-1 humano y se establecieron mediante transfeccion adicional con luciferasa CRE para obtener el clon actual.

Las celulas se cultivaron en CO2 al 5 % en medio de cultivo celular. Se alicuotaron y se almacenaron en nitrogeno lfquido. Antes de cada ensayo se tomo una almuota y se lavo dos veces en p Bs antes de suspenderla a la concentracion deseada en el tampon espedfico del ensayo. Para las placas de 96 pocillos se produjo la suspension con una concentracion final de 5x103 celulas/pocillo.

Materiales

Se usaron los siguientes compuestos qrnmicos en el ensayo: Pluronic F-68 (10 %) (Gibco 2404), albumina serica humana (HSA) (Sigma A9511), ovalbumina (Sigma A5503), DMEM w/o fenol rojo (Gibco 11880-028), Hepes 1 M (Gibco 15630), Glutamax 100x (Gibco 35050) y steadylite plus (PerkinElmer 6016757).

Tampones

El medio de cultivo celular consistio en medio DMEM con FBS al 10 % (suero fetal bovino; Invitrogen 16140-071), G418 1 mg/ml (Invitrogen 15140-122), MTX 240 nM (metotrexato; Sigma M9929) y pen/strep al 1 % (penicilina/estreptomicina; Invitrogen 15140-122).

El medio del ensayo consistio en DMEM w/o fenol rojo, Hepes 10 mM y Glutamax 1x. El tampon del ensayo consistio en ovalbumina al 2 % y Pluronic F-68 al 0,2 % en el medio del ensayo.

Procedimiento

1) Las reservas de celulas se descongelaron en un bano de agua a 37 °C.

2) Las celulas se lavaron tres veces en PBS.

3) Las celulas se contaron y se ajustaron a 5x103 celulas/50 pl (1x105 celulas/ml) en el medio del ensayo. A cada pocillo en la placa de ensayo se transfirio una alfcuota de 50 pl de celulas.

4) Las reservas de los compuestos de prueba y los compuestos de referencia se diluyeron hasta una concentracion de 0,2 pM en el tampon del ensayo. Los compuestos se diluyeron 10-veces para producir las siguientes concentraciones: 2x10-7 M, 2x10-8 M; 2x10-9 M, 2x10'10 M, 2X10-11 M, 2x10-12 M, 2x10'13 M, and 2x10'14 M.

5) Se transfirio una alfcuota de 50 pl del compuesto o del blanco desde la placa de dilucion hacia la placa del ensayo. Los compuestos se analizaron a las siguientes concentraciones finales: 1x10-7 M, 1x10-8 M; 1x10-9 M, 1x10'10 M, 1x10-11 M, 1x10-12 M, 1x10-13 M, and 1x10-14 M.

6) La placa de ensayo se incubo durante 3 horas en CO2 al 5 % en una incubadora a 37 °C.

7) La placa de ensayo se saco de la incubadora y se dejo reposar a temperatura ambiente durante 15 min.

8) A cada pocillo de la placa de ensayo se anadio una alfcuota de 100 pl del reactivo steadylite plus (el reactivo es sensible a la luz).

9) Cada placa de ensayo se cubrio con papel de aluminio para protegerla de la luz y se agito durante 30 min a temperatura ambiente.

10) Cada placa de ensayo se leyo en un instrumento TopCount NXT de Packard.

Calculos y Resultados

Los datos del instrumento TopCount se transfirieron al programa informatico GraphPad Prism. El programa informatico realiza una regresion no lineal (log(agonista) vs respuesta). Los valores de EC50 que se calcularon mediante el programa informatico y se informaron en pM se muestran en la Tabla 1 mas adelante.

Para cada muestra se midio un mmimo de dos replicas. Los valores que se informan son promedios de las replicas.

Tabla 1: Potencia in vitro

Todos los compuestos tienen datos de potencia que confirman que son agonistas del receptor de GLP-1.

Ejemplo 30: Union al receptor de GLP-1

El proposito de este ejemplo es probar la union a los receptores de los derivados de GLP-1 in vitro. La union al receptor es una medida de la afinidad de un derivado por el receptor de GLP-1 humano.

Principio

La union al receptor de los derivados de GLP-1 de los Ejemplos 1-28 al receptor de GLP-1 humano se midio en un ensayo de union competitiva. En este tipo de ensayo, un ligando marcado (en este caso 125I-GLP-1) se une al receptor. Cada derivado se anade en una serie de concentraciones a las membranas aisladas que contienen el receptor de GLP-1 humano y se monitorea el desplazamiento del ligando marcado. La union al receptor se informa como la concentracion a la cual la mitad del ligando marcado se desplaza del receptor, el valor de IC50. Se incluyo semaglutida como compuesto comparativo. Para probar la union de los derivados a la albumina, el ensayo se realiza con una baja concentracion de albumina serica (max. 0,001 % como concentracion final del ensayo asf como tambien en presencia de una concentracion considerablemente mayor de albumina serica (2,0 % como concentracion final del ensayo). Un aumento del valor del IC50 en presencia de albumina serica indica una afinidad a la albumina serica y representa un metodo para predecir un perfil farmacocinetico prolongado de la sustancia de prueba en modelos animales.

Materiales

Se usaron los siguientes compuestos qmmicos en el ensayo: Albumina serica humana (HSA) (Sigma A1653), DMEM w/o fenol rojo (Gibco 11880-028), Pen/strep (Invitrogen 15140-122), G418 (Invitrogen 10131-027), Hepes 1 M (Gibco 15630), Ed Ta (Invitrogen 15575-038), Pb S (Invitrogen 14190-094), suero fetal bovino (Invitrogen 16140-071), Eg TA, MgCl2 (Merck 1.05832.1000), Tween 20 (Amresco 0850C335), partfculas de SPA (aglutinina de germen de trigo (WGA) perlas de SPA, Perkin Elmer RPNQ0001), [125I]-GLP-1]-(7-36)NH2 (obtenido en el laboratorio), OptiPlateTM-96 (Packard 6005290).

El tampon 1 consistio en Na-HEPES 20 mM mas EDTA 10 mM y el pH se ajusto a 7,4. El tampon 2 consistio en Na-HEPES 20 mM mas EDTA 0,1 mM y el pH se ajusto a 7,4. El tampon del ensayo consistio en HEPES 50 mM suplementado con EGTA 5 mM, MgCb 5 mM, Tween 20 al 0,005 % y el pH se ajusto a 7,4. La reserva de albumina al 8 % consistio en HSA disuelto al 8 % (p/v) en el tampon del ensayo. La reserva de albumina al 0,02 % consistio en HSA disuelto al 0,02 % (p/v) en el tampon del ensayo.

Cultivo celular y preparacion de membranas

Las celulas que se usaron en este ensayo (clon FCW467-12A) eran celulas BHK con BHKTS13 como lmea celular parental. Las celulas expresan el receptor de GLP-1 humano.

Las celulas se cultivaron en CO2 al 5 % en DMEM, FCS al 10 %, Pen/Strep al 1 % (penicilina/estreptomicina) y 1,0 mg/ml del marcador de seleccion G418.

Para obtener una preparacion de membranas las celulas se cultivaron hasta aproximadamente 80 % de confluencia. Las celulas se lavaron dos veces en solucion salina de tampon fosfato y se cosecharon. Las celulas se sedimentaron mediante el uso de una centrifugacion breve y el sedimento se mantuvo en hielo. El sedimento de celulas se homogenizo con el instrumento de dispersion ULTRA-THURRAX™ durante 20-30 segundos en una cantidad adecuada del tampon 1 (por ejemplo, 10 ml). El homogenato se centrifugo durante 15 minutos. El sedimento se resuspendio (homogenizado) en 10 ml del tampon 2 y se centrifugo. Esta etapa se repitio una vez mas. El sedimento resultante se resuspendio en el tampon 2 y se determino la concentracion de protemas. Las membranas se alicuotaron y se almacenaron a menos 80°°C.

Procedimiento

1. Para el ensayo de union al receptor en presencia de baja HSA (0,005 %) se anadieron 50 pl del tampon del ensayo a cada pocillo de una placa de ensayo. El ensayo continuo con la etapa 3.

2. Para el ensayo de union al receptor en presencia de alta HSA (2 %) se anadieron 50 pl de la reserva de albumina al 8 % a cada pocillo de una placa de ensayo. El ensayo continuo con la etapa 3.

3. Los compuestos de prueba se diluyeron en serie para producir las siguientes concentraciones: 8x10'678M, 8x10' 8 M, 8x10'9 M, 8x10'10 *M, 8x10_11 M, 8x10'12 M y 8x10'13 M. Se anadieron veinticinco pl a los pocillos adecuados en la placa de ensayo.

4. Las alfcuotas de membranas celulares se descongelaron y se diluyeron hasta sus concentraciones de trabajo. Se anadieron cincuenta pl a cada pocillo en la placa de ensayo.

5. Las perlas de WGA SPA se suspendieron en el tampon del ensayo a 20 mg/ml. La suspension se diluyo hasta 10 mg/ml en el tampon del ensayo justo antes de anadirla a la placa de ensayo. Se anadieron cincuenta pl a cada pocillo en la placa de ensayo.

6. La incubacion se inicio mediante la adicion de 25 pl de solucion de [125I]-GLP-1]-(7-36)NH2 480 pM a cada pocillo de la placa de ensayo. Se reservo una alfcuota de 25 pl para medir los conteos totales/pocillo.

7. La placa de ensayo se incubo durante 2 horas a 30 °C.

8. La placa de ensayo se centrifugo durante 10 min.

9. La placa de ensayo se leyo en un instrumento TopCount NXT de Packard.

Calculos

Los datos del instrumento TopCount se transfirieron al programa informatico GraphPad Prism. El programa informatico promedio los valores de las replicas y realizo una regresion no lineal. Los valores de IC50 se calcularon mediante el programa informatico y se informaron en nM.

Resultados

Se obtuvieron los siguientes resultados:

Tabla 2: Union al receptor de GLP-1

Todos los compuestos mostraron muy buena union al receptor de GLP-1 en ausencia de albumina, y la mayona de los compuestos tambien mostraron muy buena union en presencia de albumina. Los dos compuestos que tuvieron valores >1000 de IC50 excedieron el lfmite de deteccion del ensayo.

Ejemplo 31: Estudio farmacocinetico en minicerdos

El proposito de este estudio fue determinar la prolongacion in vivo de los derivados de GLP-1 despues de la administracion i.v. a minicerdos, es decir la prolongacion de su tiempo en el cuerpo y de esta manera su tiempo de accion. Esto se hizo en un estudio farmacocinetico (PK), donde se determino la vida media terminal del derivado en cuestion. Por tiempo de vida media terminal se entiende el tiempo que se tarda en reducir a la mitad una determinada concentracion plasmatica en la fase de eliminacion terminal.

Los derivados de los Ejemplos 1-5 se dosificaron con 2 nmol/kg, el derivado del Ejemplo 6 se dosifico con 5 nmol/kg, y los derivados de los Ejemplos 7-9 se dosificaron con 15 nmol/kg. Se incluyo semaglutida para la comparacion (1,5 nmol/kg).

En los estudios se usaron minicerdos Gottingen machos de Ellegaard Gottingen Minipigs (Dalmose, Dinamarca), de aproximadamente 7-14 meses de edad y con un peso aproximado de 16-35 kg. Los minicerdos se alojaron individualmente (cerdos con cateteres permanentes) o en un grupo y se alimentaron de forma restringida una o dos veces al dfa con dieta SDS para minicerdos (Special Diets Services, Essex, Reino Unido).

Despues de al menos 2 semanas de aclimatacion, se implantaron dos cateteres venosos centrales permanentes en la vena cava caudal o craneal en cada animal. A los animales se les permitio una recuperacion de 1 semana despues de la cirugfa y despues se usaron para estudios farmacocineticos repetidos con un penodo de reposo adecuado entre las dosificaciones sucesivas de los derivados de GLP-1.

Los derivados de GLP-1 se disolvieron en fosfato de sodio 50 mM, cloruro de sodio 70-145 mM, Tween 80 al 0,05 %, pH 7,4 hasta una concentracion generalmente de 20-60 nmol/ml.

Se administraron inyecciones intravenosas (el volumen correspondiente a, por ejemplo, 0,050-0,125 ml/kg) de los compuestos a traves de un cateter o a traves del venflon, y se tomaron muestras de sangre en puntos de tiempo predefinidos hasta 25 d^as despues de la dosificacion (preferentemente a traves del otro cateter o por venipuntura). Las muestras de sangre (por ejemplo, 0,8 ml) se colectaron en tampon de EDTA (8 mM) y luego se centrifugaron a 4 °C y 1942 G durante 10 minutos.

El plasma se pipeteo en tubos Micronic sobre hielo seco, y se mantuvo a -20 °C hasta que se realizara el analisis de la concentracion plasmatica de los respectivos compuestos de GLP-1 mediante el uso de LOCI. Los perfiles individuales de concentracion plasmatica contra tiempo se analizaron mediante un metodo farmacocinetico nocompartimental en Phoenix v. 6.2 (Pharsight Inc., Mountain View, CA, Estados Unidos), u otro programa informatico relevante para el analisis PK, y se determinaron los tiempos de vida media terminales resultantes (media armonica).

Resultados

Tabla 3: Estudio farmacocinetico en minicerdos (i.v.)

Los derivados de la invencion que se analizaron tienen tiempos de vida media terminales muy largos (al menos dos veces el de semaglutida).

Ejemplo 32: Estudio farmacodinamico en ratones db/db

El proposito del estudio es verificar el efecto agudo de los derivados de GLP-1 sobre la glucosa en sangre (BG) y el peso corporal (BW) en un ambiente diabetico.

Los derivados de GLP-1 de los Ejemplos 1-8 y 10 se probaron en un estudio de dosis unica en un modelo de raton obeso y diabetico (ratones db/db) como se describe a continuacion. Los derivados se probaron a una dosis de 10 nmol/kg (Ejemplo 10), o 30 nmol/kg (Ejemplos 1-8).

Seis ratones db/db (de Taconic, Dinamarca) de aproximadamente 10 semanas de edad se enrolaron en el estudio por cada compuesto a probar, se alimentaron desde el nacimiento con la dieta NIH31 (NIH 31M Rodent Diet, comercializada por Taconic Farms, Inc., Estados Unidos, ver www.taconic.com). Los ratones tuvieron libre acceso al alimento estandar (por ejemplo Altromin 1324, Brogaarden, Gentofte, Dinamarca) y al agua corriente y se mantuvieron a 24 °C. Despues de 1-2 semanas de adaptacion, se evaluo el nivel basal de glucosa en sangre dos veces en dos dfas consecutivos (es decir a las 9 am). Los ratones se asignaron a los grupos de tratamiento sobre la base de la correspondencia entre los niveles de glucosa en sangre y los pesos corporales. Los ratones se usaron en experimentos con una duracion de 120 horas, y se reutilizaron hasta 2 veces. Despues del ultimo experimento, los ratones se sacrificaron.

Los animales se agruparon para recibir tratamiento de la siguiente manera: Vehfculo, s.c., o derivado de GLP-1, s.c., donde el vehnculo fue fosfato de sodio 50 mM, cloruro de sodio 70 mM, polisorbato 80 al 0,05 %, pH 7,4 (Ejemplos 1, 2, 7 y 10); o fosfato de sodio 50 mM, cloruro de sodio 145 mM, Tween 80 al 0,05 % (p/v), pH 7,4 (Ejemplos 3-6 y 8).

El derivado de GLP-1 se disolvio en el vehfculo, hasta una concentracion de dosificacion de 1,7-17 nmol/ml en dependencia de las respectivas dosis. Los animales se dosificaron una vez, al comenzar el experimento, por via s.c. con una dosis-volumen de 6 ml/kg (es decir 300 pl por raton de 50 g).

El dfa de la dosificacion, la glucosa en sangre se evaluo 1^h antes (8.30 am), y despues se pesaron los ratones. El derivado de GLP-1 se dosifico aproximadamente a las 9 am (tiempo 0). El dfa de la dosificacion, la glucosa en sangre se evaluo en los tiempos 1, 2, 4 y 8 horas (10 am, 11 am, 1 pm y 5 pm).

En los dfas siguientes, la glucosa en sangre se evaluo a las 24 horas, 48 horas, 72 horas, y 96 horas. Los ratones se pesaron todos los dfas despues del muestreo de glucosa en sangre.

Los ratones se pesaron individualmente en una balanza digital.

Las muestras para la medicion de la glucosa en sangre se obtuvieron del capilar de la punta de la cola de ratones conscientes. La sangre, 10 jl, se colecto en capilares heparinizados y se transfirio a 500 j l del tampon de glucosa (solucion del sistema EKF, Eppendorf, Alemania). La concentracion de glucosa se midio mediante el uso del metodo de glucosa oxidasa (analizador de glucosa Biosen 5040, EKF Diagnostic, GmbH, Barleben, Alemania). Las muestras se mantuvieron a temperatura ambiente durante hasta 1 h hasta el analisis. Si fue necesario posponer el analisis, las muestras se mantuvieron a 4 °C durante un maximo de 24 h.

Los datos se presentan como por ciento del cambio de glucosa en sangre o del peso corporal medido en los puntos de tiempo a 48 horas y a 96 horas. Por ejemplo, el por ciento de cambio del nivel de glucosa en sangre a 48 horas para cada individuo se calculo como sigue: [[(nivel de glucosa en sangre a 48 horas) - (nivel de glucosa en sangre basal)]/(nivel de glucosa en sangre basal)]xl00 %], donde el nivel de glucosa en sangre basal se refiere al nivel antes de la administracion de cualquier tratamiento - y viceversa para el cambio del peso corporal. Un valor negativo se refiere a un % de reduccion.

Se obtuvieron los resultados siguientes (promedios de todas las determinaciones individuales correspondientes a los tratamientos respectivos):

Tabla 4: Efecto sobre la glucosa en sangre y el peso corporal en ratones db/db

Todos los derivados analizados mostraron efecto in vivo de disminucion de BG asf como tambien de BW despues de 48 horas asf como tambien despues de 96 horas.

Ejemplo 33: Estudio farmacodinamico en cerdos LYD

El proposito de este experimento es investigar el efecto de los derivados de GLP-1 sobre la ingesta de alimentos en cerdos. Esto se hace en un estudio farmacodinamico (PD) como se describe a continuacion, en el cual la ingesta de alimentos se mide de 1 a 4 dfas despues de la administracion de una dosis unica del derivado de GLP-1, en comparacion con un grupo control tratado con vehfculo.

Se usaron cerdos hembras Landrace Yorkshire Duroc (LYD), de aproximadamente 3 meses de edad, con peso de aproximadamente 30-35 kg (n=3-4 por grupo). Los animales se alojaron en un grupo durante aproximadamente 1 semana para la adaptacion a las instalaciones de los animales. Durante el periodo experimental los animales se colocaron en corrales individuales al menos 2 dfas antes de la dosificacion y durante todo el experimento para la medicion de la ingesta individual de alimentos. Los animales se alimentaron ad libitum con alimento para cerdos (Svinefoder Danish Top o HRC Sow and Weaner Diet) en todos los momentos durante la adaptacion y durante el penodo experimental. La ingesta de alimentos se controlo en lmea mediante el registro del peso del alimento cada 15 minutos, o manualmente. El peso del alimento se registro diariamente para cada animal (periodos de 24 horas) a partir del dfa 2 hasta el dfa 6 (120 horas) despues de la dosis, administracion incluida.

Los derivados de GLP-1 primero se disolvieron en un tampon fosfato (fosfato 50 mM, tween 80 al 0,05 %, pH 8; o fosfato 50 mM, cloruro de sodio 145 mM, Tween 80 al 0,05 %, pH 7,4) a la concentracion deseada (tal como 12, 40, 120, 400 o 1200 nmol/ml correspondiente a las dosis de 10, 15, o 30 nmol/kg). El tampon fosfato sirve como vehfculo. Los animales se dosificaron con una dosis unica subcutanea del derivado de GLP-1 o vehfculo (volumen usual de dosis de 0,025 ml/kg) en la manana del dfa 1 y la ingesta de alimentos se midio durante 1-4 dfas despues de la dosificacion. El ultimo dfa de cada estudio, 1-4 dfas despues de la dosificacion, se tomo una muestra de sangre de la vena cava yugular/anterior para medir la exposicion en plasma del derivado de GLP-1. Los animales se reutilizaron durante tres experimentos. El contenido de los derivados de GLP-1 en plasma se analizo mediante el uso de LOCI.

La ingesta de alimentos se calculo como la ingesta de alimentos media en 24 horas en intervalos de 24 horas (0-24 horas, 24-48 horas, 48-72 horas y 72-96 horas) y puede, por ejemplo, indicarse como porcentaje de la ingesta de alimento del grupo vehmulo en el mismo intervalo de tiempo.

Las comparaciones estad^sticas de la ingesta de alimentos en los intervalos de 24 horas en el grupo vehmulo frente al del derivado de GLP-1 se realizaron mediante el uso de ANOVA de mediciones repetidas de dos vfas, seguido por la prueba posterior de Bonferroni.

<110> Novo Nordisk A/S

<120> Derivados de péptidos similares a GLP-1, y sus usos

<130> 8706WO01

<160> 14

<170> Novo Nordisk A/S PatSeq 1.0.5.5

<210> 1

<211> 31

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<400> 1

<210> 2

<211> 36

<212> PRT

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> Analogo de GLP-1

<220>

<221> Mod_Res

<222> (2)..(2)

<223> /mod_res= "Aib (Acido 2-aminoisobutmco)"

<400> 2

<210> 3

<211> 36

<212> PRT

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> Analogo de GLP-1

<220>

<221> Mod_Res

<222> (2)..(2)

<223> /mod_res= "Aib (Acido 2-aminoisobutmco)"

<400> 3

<210> 4

<211> 36

<212> PRT

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> Analogo de GLP-1

<220>

<221> Mod_Res

<222> (2)..(2)

<223> /mod_res= "Aib (Acido 2-aminoisobutmco)"

<400> 4

<210> 5

<211> 36

<212> PRT

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> Analogo de GLP-1

<220>

<221> Mod_Res

<222> (2)..(2)

<223> /mod_res= "Aib (Acido 2-aminoisobutmco)"

<400> 5

<210> 6

<211> 36

<212> PRT

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> Analogo de GLP-1

<220>

<221> Mod_Res

<222> (2)..(2)

<223> /mod_res= "Aib (Acido 2-aminoisobutmco)"

<400> 6

<210> 7

<211> 36

<212> PRT

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> Analogo de GLP-1

<220>

<221> Mod_Res

<222> (2)..(2)

<223> /mod_res= "Aib (Acido 2-aminoisobutmco)"

<400> 7

<210> 8

<211> 36

<212> PRT

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> Analogo de GLP-1

<220>

<221> Mod_Res

<222> (1)..(1)

<223> /mod_res= "Imp (Acido 3-(imidazol-5-il)propanoico)"

<220>

<221> Mod_Res

<222> (2)..(2)

<223> /mod_res= "Aib (Acido 2-aminoisobutmco)"

<400> 8

<210> 9

<211> 36

<212> PRT

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> Analogo de GLP-1

<220>

<221> Mod_Res

<222> (2)..(2)

<223> /mod_res= "Aib (Acido 2-aminoisobutmco)"

<400> 9

<210> 10

<211> 36

<212> PRT

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> Analogo de GLP-1

<220>

<221> Mod_Res

<222> (2)..(2)

<223> /mod_res= "Aib (Acido 2-ammoisobutmco)"

<400> 10

<210> 11

<211> 36

<212> PRT

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> Analogo de GLP-1

<220>

<221> Mod_Res

<222> (2)..(2)

<223> /mod_res= "Aib (Acido 2-aminoisobutmco)"

<400> 11

<210> 12

<211> 36

<212> PRT

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> Analogo de GLP-1

<220>

<221> Mod_Res

<222> (2)..(2)

<223> /mod_res= "Aib (Acido 2-aminoisobutmco)"

<400> 12

<210> 13

<211> 36

<212> PRT

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> Analogo de GLP-1

<220>

<221> Mod_Res

<222> (2)..(2)

<223> /mod_res= "Aib (Acido 2-aminoisobutmco)"

<400> 13

<210> 14

<211> 36

<212> PRT

<213> Secuencia artificial

<220>

<223> Analogo de GLP-1

<220>

<221> Mod_Res

<222> (2)..(2)

<223> /mod_res= "Aib (Acido 2-aminoisobutmco)"

<400> 14

Claims (4)

REIVINDICACIONES

1. Un derivado de GLP-1 seleccionado de lo siguiente:

N{Epsilon-27}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]cidohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]-[Aib8,Glu22,Arg26,Lys27,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Gly-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys,

Quím. 21:

carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]-[Aib8,Glu22,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Gly-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys,

Quím. 22:

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidN)-N{epsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys,

Quím. 23:

carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetNHAib8,Glu22,Lys23,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Gly-Gly-Gly-Ser-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys,

Quím. 24:

carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]-[Aib8,Glu22,Arg26,Arg34,Lys36]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Gly-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoylamino)metil]cyclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etox i]acetil]Lys,

Quím. 25:

N{Epsilon-18}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Gly-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys,

Quím. 26:

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Epsilon}[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]hexanoil]amino]hexanoil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]hexanoil]amino]hexanoil]Lys,

Quím. 27:

carboxinonadecanoilamino)butanoil]amino]hexanoil]amino]hexanoil]-[Aib8,Glu22,Arg26,Lys27,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Gly-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-[[(4S)-4-carboxi-4-(19-carboxinonadecanoilamino)butanoil]amino]hexanoil]amino]hexanoil]Lys,

Quím. 28:

carboxihenicosanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]a cetil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(21-carboxihenicosanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]a cetil]Lys,

Quím. 29:

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Epsilon}3-[2-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]propanoilLys -Gly-Gly-Ser-N{EpsNon}3-[2-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]etoxi]etoxi]propanoilLys

Quím. 30:

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidN)-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys-Ser-Pro-Glu-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys,

Q m m . 31:

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]cidohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys-Pro-Glu-Gly-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]cidohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys,

Quím. 32:

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidN)-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]cidohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys-Ser-Ala-Glu-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys,

Q m m . 33:

carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetN]-[Aib8,Glu22,Arg26,Arg34,Lys36]-GLP-1-(7-37)-peptidN-Ala-Glu-Ser-Pro-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys,

Quím. 34:

N{Epsilon-36}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]-[Aib8,Glu22,Arg26,Arg34,Lys36]-GLP-1-(7-37)-peptidil-Pro-Ala-Ser-Glu-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys,

Quím. 35;

carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetNHAib8,Glu22,Arg26,Arg34,Lys36]-GLP-1-(7-37)-peptidN-Glu-Gly-Pro-Ala-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys,

Quím. 36:

carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]Lys-Gly-Gly-Ser-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys,

Q m m . 37:

N{alfa}([Imp7,Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]airiino]etoxi]etoxi]acetN]Lys-Gly-Gly-Ser-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys,

Q m m . 38:

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(19-carboxinonadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]ami no]etoxi]etoxi]acetil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(19-carboxinonadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]ami no]etoxi]etoxi]acetil]Lys,

Quím. 39:

N{alfa}([Imp7,Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(19-carboxinonadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]ami no]etoxi]etoxi]acetN]Lys-Gly-Gly-Ser-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(19-carboxinonadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]ami no]etoxi]etoxi]acetil]Lys,

Q u m 40:

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Èpsilon}[4-[3-[2-[2-[3-[[(4S)-4-carboxi-4-[[1-(19-carboxinonadecanoil)piperidina-4-carbonil]amino]butanoil]amino]propoxi]etoxi]etoxi]etoxi]propilamino]-4-oxobutanoil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[4-[3-[2-[2-[3-[[(4S)-4-carboxi-4-[[1-(19-carboxinonadecanoil)piperidine-4-carbonil]amino]butanoil]amino]propoxi]etoxi]etoxi]propilamino]-4-oxobutanoil]Lys,

Quím. 41:

carboxinonadecanoilamino)butanoil]amino]propoxi]etoxi]etoxi]propilamino]-2-oxoetoxi]acetil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[2-[2-[3-[2-[2-[3-[[(4S)-4-carboxi-4-(19-carboxinonadecanoilamino)butanoil]amino]propoxi]etoxi]etoxi]propilamino]-2-oxoetoxi]acetil]Lys,

Q u m 42:

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Epsilon}[4-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]etilamino]-4-oxobutanoil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[4-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]etilamino]-4-oxobutanoil]Lys,

Quím. 43:

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(19-carboxinonadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys,

Quím. 44:

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidN)-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-(19-carboxinonadecanoilamino)hexanoil]amino]hexanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetil]ammo]etoxi]etoxi]acetN]Lys-Gly-Gly-Ser-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-(19-carboxinonadecanoilamino)hexanoil]amino]hexanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys,

Quím. 45:

carboxioctadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetN]Lys-Gly-Gly-Ser-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[4-[(18-carboxioctadecanoilamino)metil]ciclohexanecarbonil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi] acetil]Lys,

Quím. 46:

M{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Épsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[ 2-[2-[2-[[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-(19-carboxinonadecanoilamino)hexanoil]amino]hexanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]Lys-Gly-Gly-Ser-N{EpsNon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-(19-carboxinonadecanoilamino)hexanoil]amino]hexanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys,

Quím. 47:

N{alfa}([Aib8,Glu22,Arg26,Arg34]-GLP-1-(7-37)-peptidil)-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-(19-carboxinonadecanoilamino)hexanoil]amino]hexanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys-Gly-Gly-Ser-N{Epsilon}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2S)-2-amino-6-[[(2S)-2-amino-6-(19-carboxinonadecanoilamino)hexanoil]amino]hexanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]Lys,

Quím. 48:

o una sal farmaceuticamente aceptable, amida, o ester de este.

2. Una composicion farmaceutica que comprende un derivado de conformidad con la reivindicacion 1, y un excipiente farmaceuticamente aceptable.

3. Un derivado de conformidad con la reivindicacion 1, para el uso como un medicamento.

4. Un derivado de conformidad con la reivindicacion 1 para usar en

(i) prevencion y/o tratamiento de todas las formas de diabetes, tales como hiperglucemia, diabetes tipo 2, tolerancia a la glucosa alterada, diabetes tipo 1, diabetes no dependiente de insulina, MODY (diabetes de aparicion en la madurez de los jovenes), diabetes gestacional y/o reduccion de HbAIC;

(ii) retardar o evitar la progresion de la enfermedad diabetica, tal como la progresion a diabetes tipo 2, retardar la progresion de la tolerancia a la glucosa alterada (IGT) a diabetes tipo 2 que requiere insulina, retardar o evitar la resistencia a la insulina y/o retardar la progresion de la diabetes tipo 2 que no requiere insulina a diabetes tipo 2 que requiere insulina;

(iii) mejorar la funcion de las celulas p, tal como disminuir la apoptosis de las celulas p, aumentar la funcion de las celulas p y/o la masa de celulas p, y/o restablecer la sensibilidad a la glucosa de las celulas p;

(iv) prevencion y/o tratamiento de trastornos cognitivos y/o trastornos neurodegenerativos, tales como enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, y/o esclerosis multiple;

(v) prevencion y/o tratamiento de trastornos alimentarios, tales como obesidad, por ejemplo, disminucion de la ingesta de alimentos, reduccion del peso corporal, supresion del apetito, induccion de saciedad; tratar o evitar el trastorno por atracones, la bulimia nerviosa y/u obesidad inducida por la administracion de un antipsicotico o un esteroide; reduccion de la motilidad gastrica; y/o retardar el vaciamiento gastrico; aumentar la movilidad ffsica; y/o evitar y/o tratar las comorbilidades de la obesidad, tal como osteoartritis y/o incontinencia urinaria;

(vi) prevencion y/o tratamiento de complicaciones diabeticas, tales como angiopatfa, neuropatfa, lo que incluye la neuropatfa periferica; nefropatfa; y/o retinopatfa;

(vii) mejorar los parametros lipfdicos, tales como la prevencion y/o el tratamiento de la dislipidemia, la disminucion de los lfpidos sericos totales; aumento de HDL; disminucion de LDL densa y pequena; disminucion de VLDL: disminucion de trigliceridos; reducir el colesterol; reducir los niveles plasmaticos de lipoprotema a (Lp(a)) en un humano; inhibir la generacion de apolipoprotema a (apo(a)) in vitro y/o in vivo;

(viii) la prevencion y/o el tratamiento de enfermedades cardiovasculares, tales como el smdrome X, ateroesclerosis, infarto del miocardio, enfermedad coronaria, dano por reperfusion, accidente cerebrovascular, isquemia cerebral, una enfermedad cardfaca temprana o cardiovascular temprana, hipertrofia ventricular izquierda, enfermedad de las arterias coronarias, hipertension, hipertension esencial, emergencia hipertensiva aguda, cardiomiopatfa, insuficiencia cardfaca, intolerancia al ejercicio, fallo cardfaco agudo y/o cronico, arritmia, disritmia cardfaca, smcope, angina de pecho, derivacion cardfaca y/o reoclusion con stent, claudicacion intermitente (ateroesclerosis obliterans), disfuncion diastolica, y/o disfuncion sistolica; y/o reduccion de la presion sangumea, tal como reduccion de la presion sangumea sistolica;

(ix) prevencion y/o tratamiento de enfermedades gastrointestinales, tales como enfermedad inflamatoria intestinal, smdrome del intestino corto, o enfermedad de Crohn o colitis; dispepsia, y/o ulceras gastricas; y/o inflamacion, tal como psoriasis, artritis psoriasica, artritis reumatoide, y/o lupus eritematoso sistemico;

(x) prevencion y/o tratamiento de enfermedades cnticas, tales como el tratamiento de un paciente cntico, un paciente de polinefropatfa cntica (CIPNP), y/o un paciente con CIPNP potencial; prevencion del desarrollo de enfermedades cnticas o de CIPNP; prevencion, tratamiento y/o curacion del smdrome de respuesta inflamatoria sistemica (SIRS) en un paciente; prevencion o reduccion de la posibilidad de que un paciente sufra de bacteriemia, septicemia y/o choque septico durante la hospitalizacion; y/o estabilizacion de la glucosa sangumea, equilibrio de la insulina y opcionalmente del metabolismo en pacientes en unidades de cuidados intensivos con enfermedades agudas;

(xi) prevencion y/o tratamiento del smdrome de ovario poliqrnstico (PCOS);

(xii) prevencion y/o tratamiento de enfermedades cerebrales, tales como isquemia cerebral, hemorragia cerebral y/o lesion cerebral traumatica;

(xiii) prevencion y/o tratamiento de la apnea del sueno; y/o

(xiv) prevencion y/o tratamiento del abuso, tal como abuso de alcohol y/o abuso de farmacos.

Uso de un derivado de conformidad con la reivindicacion 1 en la fabricacion de un medicamento para

(i) prevencion y/o tratamiento de todas las formas de diabetes, tales como hiperglucemia, diabetes tipo 2, tolerancia a la glucosa alterada, diabetes tipo 1, diabetes no dependiente de insulina, MODY (diabetes de aparicion en la madurez de los jovenes), diabetes gestacional y/o reduccion de HbAIC;

(ii) retardar o evitar la progresion de la enfermedad diabetica, tal como la progresion a diabetes tipo 2, retardar la progresion de la tolerancia a la glucosa alterada (IGT) a diabetes tipo 2 que requiere insulina, retardar o evitar la resistencia a la insulina y/o retardar la progresion de la diabetes tipo 2 que no requiere insulina a diabetes tipo 2 que requiere insulina;

(iii) mejorar la funcion de las celulas p, tal como disminuir la apoptosis de las celulas p, aumentar la funcion de las celulas p y/o la masa de celulas p, y/o restablecer la sensibilidad a la glucosa de las celulas p;

(iv) prevencion y/o tratamiento de trastornos cognitivos y/o trastornos neurodegenerativos, tales como enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, y/o esclerosis multiple;

(v) prevencion y/o tratamiento de trastornos alimentarios, tales como obesidad, por ejemplo, disminucion de la ingesta de alimentos, reduccion del peso corporal, supresion del apetito, induccion de saciedad; tratar o evitar el trastorno por atracones, la bulimia nerviosa y/u obesidad inducida por la administracion de un antipsicotico o un esteroide; reduccion de la motilidad gastrica; y/o retardar el vaciamiento gastrico; aumentar la movilidad ffsica; y/o evitar y/o tratar las comorbilidades de la obesidad, tal como osteoartritis y/o incontinencia urinaria;

(vi) prevencion y/o tratamiento de complicaciones diabeticas, tales como angiopatia, neuropatfa, lo que incluye la neuropatfa periferica; nefropatfa; y/o retinopatfa;

(vii) mejorar los parametros lipfdicos, tales como la prevencion y/o el tratamiento de la dislipidemia, la disminucion de los lfpidos sericos totales; aumento de HDL; disminucion de LDL densa y pequena; disminucion de VLDL: disminucion de trigliceridos; reducir el colesterol; reducir los niveles plasmaticos de lipoprotema a (Lp(a)) en un humano; inhibir la generacion de apolipoprotema a (apo(a)) in vitro y/o in vivo;

(viii) la prevencion y/o el tratamiento de enfermedades cardiovasculares, tales como el smdrome X, ateroesclerosis, infarto del miocardio, enfermedad coronaria, dano por reperfusion, accidente cerebrovascular, isquemia cerebral, una enfermedad cardfaca temprana o cardiovascular temprana, hipertrofia ventricular izquierda, enfermedad de las arterias coronarias, hipertension, hipertension esencial, emergencia hipertensiva aguda, cardiomiopatfa, insuficiencia ca^aca , intolerancia al ejercicio, fallo cardfaco agudo y/o cronico, arritmia, disritmia cardfaca, smcope, angina de pecho, derivacion ca ^a ca y/o reoclusion con stent, claudicacion intermitente (ateroesclerosis obliterans), disfuncion diastolica, y/o disfuncion sistolica; y/o reduccion de la presion sangumea, tal como reduccion de la presion sangu^nea sistolica;

(ix) prevencion y/o tratamiento de enfermedades gastrointestinales, tales como enfermedad inflamatoria intestinal, smdrome del intestino corto, o enfermedad de Crohn o colitis; dispepsia, y/o ulceras gastricas; y/o inflamacion, tal como psoriasis, artritis psoriasica, artritis reumatoide, y/o lupus eritematoso sistemico;

(x) prevencion y/o tratamiento de enfermedades cnticas, tales como el tratamiento de un paciente cntico, un paciente de polinefropatfa cntica (CIPNP), y/o un paciente con CIPNP potencial; prevencion del desarrollo de enfermedades cnticas o de CIPNP; prevencion, tratamiento y/o curacion del smdrome de respuesta inflamatoria sistemica (SIRS) en un paciente; prevencion o reduccion de la posibilidad de que un paciente sufra de bacteriemia, septicemia y/o choque septico durante la hospitalizacion; y/o estabilizacion de la glucosa sangumea, equilibrio de la insulina y opcionalmente del metabolismo en pacientes en unidades de cuidados intensivos con enfermedades agudas;

(xi) prevencion y/o tratamiento del smdrome de ovario poliqrnstico (PCOS);

(xii) prevencion y/o tratamiento de enfermedades cerebrales, tales como isquemia cerebral, hemorragia cerebral y/o lesion cerebral traumatica;

(xiii) prevencion y/o tratamiento de la apnea del sueno; y/o

(xiv) prevencion y/o tratamiento del abuso, tal como abuso de alcohol y/o abuso de farmacos.