ES2711274T3 - Composiciones y métodos para el crecimiento del cabello - Google Patents

Abstract

Una composición para hacer crecer el cabello en un paciente en donde la composición comprende 0,03 % p/v de bimatoprost y 0,05 % p/v de ciclosporina A.

Description

DESCRIPCION

Composiciones y metodos para el crecimiento del cabello

Campo de la invencion

La presente invencion esta dirigida a una composicion para hacer crecer el cabello en una patente, en donde la composicion comprende bimatoprost y ciclosporina, usados al mismo tiempo y en combinacion. La presente invencion tambien esta dirigida a composiciones que contienen bimatoprost y ciclosporina para hacer crecer el cabello del cuero cabelludo para el tratamiento de todas las formas de perdida del cabello, no solamente alopecia areata, vease la lista mas adelante en texto de color verde de alopecia areata, y diversos metodos no terapeuticos de administracion de las composiciones de bimatoprost y ciclosporina.

Antecedentes de la invencion:

La hipotricosis o la escasez de cabello del cuero cabelludo es un problema medico comun que, frecuentemente, puede ser socialmente debilitante. El mecanismo de la perdida de cabello no esta bien definido y se ha teorizado que esta producido por una variedad de factores incluidos, aunque no de forma limitativa, desequilibrio hormonal, medicamentos, infecciones y patologfas. Las opciones de tratamiento actuales para la perdida del cabello pueden ser prolongadas, con elevadas tasas de efectos adversos o ningun efecto en absoluto, e incluyen la inyeccion de esteroides, el minoxidilo y la fotoquimioterapia. Se ha demostrado que la ciclosporina A (CsA) mejora el crecimiento del cabello en pacientes con alopecia moderada a severa, pero se produce un alto mdice de suspensiones del tratamiento debido a los efectos secundarios sistemicos. Algunos estudios han examinado la eficacia y seguridad de la ciclosporina A por via topica de modelos animales con perdida de cabello. Los estudios in vivo demuestran que los ratones tratados con 0,1 % y 1 % pasan a la fase anagena 21 semanas antes que los ratones de control, con crecimiento de cabello significativo observado despues de 2 semanas de tratamiento (Ezure, 2007). La ciclosporina A al 0,5 % aplicada por via topica dos veces al dfa a ratas calvas experimentales mostro crecimiento del cabello una semana despues de la aplicacion durante 6 semanas con una reduccion en la inflamacion folicular (Verma, 2004). La ciclosporina A por via topica ha mostrado reducir la inflamacion dermica asociada con la dermatitis atopica (Saeki y col., 2009). La aplicacion de ciclosporina A como composicion topica para suprimir la funcion de los linfocitos T y mejorar la fase anagena del ciclo de crecimiento del cabello es prometedora para pacientes con escasez de cabello.

En el parrafo anterior, el artfculo de Ezure puede encontrarse en el Journal of Dermatological Science 2007, vol.

47(2), pags.168-70; el artfculo de Verma en el European Journal Dermatology, 2004, vol 14(5), pags. 332-8; y el artfculo de Saeki en The Journal of Dermatology, 2009, vol. 36, pags. 563-577. Se pueden encontrar referencias posteriores a Ochoa y Uno en el Journal of the American Academy of Dermatology, 2009, vol. 61(3), pags. 530-2 y el libro “ Hair and its disorders: biology, pathology and management” , 2000, Londres: Martin Dunitz, pags. 137-151, respectivamente.

La patente US 2004/052760 A1 describe una composicion cosmetica que contiene al menos un inhibidor de 15-hidroxiprostaglandina deshidrogenasa y excipientes cosmeticamente aceptables para promover el crecimiento y/o para evitar o retardar la perdida de cabello, asf como el uso de un inhibidor de 15-hidroxiprostaglandina deshidrogenasa para la preparacion de una composicion prevista para controlar la perdida del cabello y/o para promover el recrecimiento del cabello.

La patente US 2007/078175 A1 describe compuestos de fenilfurilmetiltiazolidin-2,4-diona y de feniltienilmetiltiazolidin-2,4-diona de los que se ha informado que son utiles para estimular o inducir el crecimiento de las fibras queratinosas y/o ralentizar su perdida y/o aumentar su densidad y/o mejorar su aspecto y tambien para cuidar o formar fibras queratinosas, p. ej., para cuidar o formar el cabello o las pestanas.

Prostaglandinas

Las prostaglandinas son una clase de sustancias analogas a hormonas farmacologicamente activas que median en una amplia gama de funciones fisiologicas incluidas la presion sangumea, la contraccion del musculo liso, la inflamacion y la permeabilidad vascular. Una prostaglandina es cualquier miembro de un grupo de compuestos lipfdicos que se han derivado enzimaticamente de acidos grasos y tienen funciones importantes en el organismo animal. Cada prostaglandina contiene 20 atomos de carbono, incluido un anillo de 5 atomos de carbono. Las prostaglandinas son mediadores lipfdicos autocrinos y paracrinos que actuan sobre las plaquetas, el endotelio, el utero y los mastocitos. Se sintetizan en la celula a partir de los acidos grasos esenciales (AGE). Un ejemplo de AGE es el acido linoleico (linoleic acid - LA). Se sabe que un derivado del LA, el acido gamma-linolenico (gammalinolenic acid - GLA) reduce la inflamacion y se sabe que las prostaglandinas regulan la mediacion inflamatoria. La presente invencion reconoce que el LA, el GLA y las prostaglandinas pueden tener, todos ellos, un papel en la salud del cabello. En al menos una realizacion de la presente invencion, la aplicacion topica de prostaglandinas se utiliza para mejorar la salud del cabello y mejorar el crecimiento del cabello.

Existen nueve tipos de prostaglandinas, designadas por las letras A a I, donde el grado de saturacion de la cadena lateral de cada una de ellas se designa mediante los subrndices 1 ,2 y 3. Los ejemplos de prostaglandinas incluyen la prostaglandina E1 (alprostadilo), prostaglandina E2 (dinoprostona), latanoprost y travoprost. Latanoprost y travoprost son realmente profarmacos de prostaglandina (es decir, 1 -isopropil esteres de una prostaglandina); sin embargo, reciben el nombre de prostaglandinas porque actuan sobre el receptor de prostaglandina F, despues de hidrolizarse al acido 1-carbox^lico.

Una prostamida (tambien denominada una prostaglandina-etanolamida) es un analogo de prostaglandina, que es farmacologicamente unica respecto a una prostaglandina (es decir, porque las prostamidas actuan sobre un receptor celular diferente [el receptor de prostamida] al de las prostaglandinas), y es un lfpido neutro formado como un producto de oxigenacion por la enzima ciclooxigenasa-2 (“ COX 2” ) de un endocannabinoide (tal como anandamida). Ademas, las prostamidas no se hidrolizan in situ al acido 1-carboxflico. Los ejemplos de prostamidas son bimatoprost (la etilamida preparada sinteticamente de 17-fenil prostaglandina F2a) y prostamida F2a.

Se ha mostrado que bimatoprost, un analogo de prostaglandina, induce el crecimiento de pestanas, dando como resultado una mayor longitud, espesor y oscuridad en pacientes sanos (Latisse® PI, 2009). Sin embargo, se ha descubierto que LATISSE® era menos eficaz para fomentar el crecimiento de pestanas en pacientes con alopecia areata (Ochoa y col., 2009). Esto puede deberse al tejido inflamado que produce una inhibicion o reduccion de la capacidad del farmaco para penetrar en el tallo del folfculo, limitando su eficacia. Uno y col. en 2001 notificaron un crecimiento del cabello significativo del cuero cabelludo calvo de macacos despues del tratamiento con latanoprost al 0,05 %. La densidad y el grosor del cabello aumentaron significativamente despues de 3 meses de tratamiento. Se citan las patentes US 6.403.649; US 5.688,819; US 5.474.979 y US 4.839.342.

Inmunomoduladores

Un inmunomodulador, tambien conocido como inmunoterapia, es una sustancia (p. ej. un farmaco) que tiene un efecto sobre el sistema inmunitario. Los inmunomoduladores pueden usarse en las composiciones de la presente invencion, e incluyen inmunosupresores, inmunoestimulantes y tolerogenos. Los inmunosupresores inhiben la respuesta inmunitaria, por ejemplo, en enfermedades autoinmunitarias. Los inmunoestimulantes aumentan la respuesta inmunitaria y pueden ser utiles, por ejemplo, en infecciones, inmunodeficiencia y canceres. Los tolerogenos inducen tolerancia y hacen que el tejido no sea sensible al antfgeno.

Los inmunomoduladores que pueden utilizarse en las composiciones de la presente invencion incluyen y no se limitan a: ciclosporina, tacrolimus, azatioprina, ciclofosfamida, metotrexato, clorambucilo, micofenolato de mofetilo, prednisolona, muromonab CD3, inmunoglobulina antitimodtica (ATG), inmunoglobulina Rho (D), efalizumab, levamisol, talidomida y mezclas de los mismos. En al menos una realizacion, el inmunomodulador utilizado en la composicion es ciclosporina.

Ciclosporina

Como se ha mencionado anteriormente, las composiciones de la presente invencion pueden contener ciclosporina u otros compuestos activos. Las ciclosporinas son un grupo de oligopeptidos dclicos no polares con actividad inmunosupresora conocida. Se ha identificado la ciclosporina A, junto con otros metabolitos secundarios, asf como ciclosporina B, C, D, E, F, G, H, I, J, K, L, M, N, O, P, Q, R, S, T, U, V, W, X, Y y Z. Ademas, se han preparado derivados, sales y analogos de dichas ciclosporinas y varios analogos sinteticos, y pueden ser utiles en la presente invencion. El uso de ciclosporina A y derivados de ciclosporina A para tratar las enfermedades oftalmicas ha sido objeto de diversas patentes, por ejemplo, Ding y col., patente US 5.474.979; Garst patente US 6.254.860; US 6.350.442, y US 7.368.436.

En general, las ciclosporinas comerciales pueden contener una mezcla de varias ciclosporinas individuales que comparten una estructura de peptido ciclico que consiste en once residuos de aminoacidos con un peso molecular total de aproximadamente 1200, pero con sustituyentes o configuraciones diferentes de algunos de los aminoacidos.

El termino “ componente de ciclosporina” , como se utiliza en la presente memoria, incluye cualquier miembro individual del grupo de ciclosporinas, sales de las mismas, derivados de las mismas, analogos de las mismas y mezclas de las mismas, asf como mezclas de dos o mas sales de ciclosporina individuales de las mismas y mezclas de las mismas.

En determinadas realizaciones, los componentes de ciclosporina incluyen, aunque de forma no limitativa, ciclosporina A, derivados de ciclosporina A, sales de ciclosporina A y similares y mezclas de los mismos. La ciclosporina A es un componente de ciclosporina especialmente util.

Breve descripcion de los dibujos:

La Figura 1 muestra imagenes del recrecimiento del pelo despues de 13 dfas de tratamiento con vehfculo, ciclosporina (CsA) (0,05%, 0,1 %, 1 %) en solitario y en combinacion con Bimatoprost (0,03%, 0,3%, 3% ) y Bimatoprost en solitario (0,03 % y 0,3 %); y,

la Figura 2 muestra que la ciclosporina (CsA) en solitario (0,05 %, 0,1 %) y en combinacion con Bimatoprost (Bpst) (0,03%) estimula el recrecimiento del pelo en ratones macho C57BL/6 afeitados en el dfa 13. Los datos para composiciones que comprenden algo que no sea bimatoprost al 0,03 % p/v y CsA al 0,05 % no forman parte de la invencion y se proporcionan con fines informativos solamente.

Sumario de la invencion:

Un aspecto de la presente invencion esta dirigido a la aplicacion simultanea de bimatoprost y ciclosporina A en las cantidades especificadas en las reivindicaciones al cuero cabelludo y otras areas del cuerpo para estimular el crecimiento del cabello en pacientes normales (con o sin perdida del cabello). La invencion tambien se refiere a composiciones para hacer crecer cabello en pacientes que padecen alopecia y otros trastornos resultantes en la perdida de cabello incluidos, aunque no de forma limitativa, hormonas androgenas incluidas testosterona, dihidrotestosterona, telogeno, efluvio, malnutricion, perdida de cabello tras cirugfa, perdida de cabello despues del embarazo, algunas medicaciones, tratamientos con aceite caliente (permanentes, etc.), cepillado excesivo, estres, alopecia por traccion, alopecia androgenica, alopecia triangular, alopecia sin cicatrizacion, alopecia areata, todas las demas formas de alopecia.

La presente invencion tambien se refiere a composiciones y/o formulaciones que contienen bimatoprost y ciclosporina A juntos en las cantidades especificadas en las reivindicaciones, para el cuero cabelludo y otras areas del cuerpo para estimular el crecimiento del cabello en pacientes normales (con o sin perdida de cabello) y en pacientes que padecen alopecia y otros trastornos resultantes en la perdida de cabello incluidos, aunque no de forma limitativa, las hormonas androgenas incluidas testosterona, dihidrotestosterona, telogeno, efluvio, malnutricion, perdida de cabello tras cirugfa, perdida de cabello despues del embarazo, algunas medicaciones, tratamientos con aceite caliente (permanentes, etc.), cepillado excesivo, estres, alopecia por traccion, alopecia androgenica, alopecia triangular, alopecia sin cicatrizacion, alopecia areata, todas las demas formas de alopecia. La presente invencion tambien se refiere a metodos no terapeuticos novedosos de aplicacion de composiciones que contienen ciclosporina A y bimatoprost en las cantidades reivindicadas sobre el cuero cabelludo para hacer crecer el cabello o para el tratamiento de la perdida del cabello. Algunas realizaciones de la invencion estan incluidas en los siguientes puntos:

1) Una composicion para hacer crecer cabello en un paciente, en donde la composicion comprende 0,03% p/v de bimatoprost y 0,05 % p/v de ciclosporina A.

2) La composicion del punto 1, en donde la composicion incluye ademas etanol, propilenglicol, D-limoneno y agua.

3) La composicion del punto 2, en donde la composicion incluye ademas al menos un excipiente seleccionado del grupo que consiste en Transcutol®, Labrasol®, cineol, Cremophor RH-40, DMSO, acido oleico, miristato de isopropilo, propilenglicol, oxibutinina y monolaurato.

4) Las composiciones del punto 3, en donde la composicion esta en una forma seleccionada del grupo que consiste en un lfquido, suspension, emulsion, emulsion inversa, microemulsion, espuma, semisolido, solucion, dispersion, capsula, gel, locion, crema, pasta y cera.

5) La composicion del punto 2, en donde la composicion se selecciona del grupo que consiste en una solucion, espuma, emulsion y gel.

6) La composicion del punto 5, en donde la composicion se aplica con un aplicador.

7) La composicion del punto 3, en donde la composicion consiste practicamente en 0,03 % de bimatoprost, 0,05 % de ciclosporina A, etanol, propilenglicol, D-limoneno y agua.

8) La composicion del punto 7, en donde la composicion incluye ademas transcutol.

9) Una composicion que comprende 0,03 % p/v de bimatoprost y 0,05 % p/v de ciclosporina A, para usar en un metodo para tratar la perdida del cabello en un paciente.

10) La composicion del punto 9, en donde el metodo incluye aplicar una espuma de 0,03 % p/v de bimatoprost y 0,05 % p/v de ciclosporina A al menos una vez al dfa al cuero cabelludo.

11) La composicion del punto 10, en donde antes de la aplicacion de la espuma, el cuero cabelludo se trata previamente mediante la aplicacion al cuero cabelludo de al menos uno de los siguientes seleccionado del grupo que consiste en calor, estimulacion mecanica, sonoforesis, vibracion y masaje.

12) La composicion del punto 11, en donde la composicion se aplica sobre el cuero cabelludo mediante la aplicacion de un aplicador provisto de roll-on.

13) Un metodo no terapeutico para hacer crecer cabello en un cuero cabelludo humano que comprende la aplicacion de una composicion que comprende 0,03 % p/v de bimatoprost y 0,05 % p/v de ciclosporina A.

14) El metodo no terapeutico del punto 13, en donde la composicion se aplica al menos una vez al dfa.

15) El metodo no terapeutico del punto 13, en donde la composicion se aplica como uno seleccionado del grupo que consiste en un champu y acondicionador.

16) El metodo no terapeutico del punto 13, en donde la composicion esta en forma de lfquido, suspension, emulsion, emulsion inversa, microemulsion, espuma, semisolido, solucion, dispersion, capsula, gel, locion, crema, pasta y cera. Descripcion detallada de la invencion:

1) Aplicacion de Latisse® y Restasis® en solitario en comparacion con las formulaciones combinadas de bimatoprost y ciclosporina A :

Un aspecto de la presente invencion son composiciones o formulaciones combinadas de ciclosporina (“ CsA” ) y bimatoprost (“ Bpst” ) en el crecimiento del cabello. Dichas formulaciones se compararan respecto de su capacidad para estimular el crecimiento del cabello con la aplicacion de Latisse® y Restasis® aplicados individualmente a pacientes con escasez de cabello y dolencias que dan por resultado hipertricosis y otros trastornos del crecimiento del cabello.

1. Composiciones que contienen tanto ciclosporina como bimatoprost

La presente invencion se refiere, en parte, a composiciones o formulaciones que contienen tanto ciclosporina A como bimatoprost en una sola composicion para usar en el crecimiento del cabello y sus metodos no terapeuticos de aplicacion. Se cree que la combinacion de ciclosporina A y bimatoprost es un tratamiento seguro y eficaz para suprimir el componente inflamatorio de la alopecia y otros trastornos del crecimiento del cabello y para mejorar la cantidad de cabello crecido sobre el cuero cabelludo de pacientes normales (pacientes que no padecen un trastorno de perdida del cabello).

De acuerdo con la presente invencion, se aplica ciclosporina A en la concentracion eficaz de 0,05 % p/v junto con bimatoprost en una cantidad de 0,03 % p/v en un vehfculo farmaceuticamente aceptable.

a. Componente de ciclosporina

Las composiciones de la presente invencion comprenden ciclosporina A.

Las ciclosporinas son un grupo de oligopeptidos dclicos no polares con actividad inmunosupresora conocida. Se ha identificado la ciclosporina A, junto con otros metabolitos secundarios, asf como ciclosporina B, C, D, E, F, G, H, I, J, K, L, M, N, O, P, Q, R, S, T, U, V, W, X, Y y Z. Ademas, se han preparado derivados, sales y analogos de dichas ciclosporinas y varios analogos sinteticos, y pueden ser utiles en la presente invencion, junto con ciclosporina A. El uso de ciclosporina A y derivados de ciclosporina A para tratar diversas dolencias oftalmicas ha sido el objeto de diversas patentes, por ejemplo, las patentes US 5.474.979; US 6.254.860; US 6.350.442; y US 7.368.436.

En general, las ciclosporinas comerciales pueden contener una mezcla de varias ciclosporinas individuales que comparten una estructura de peptido dclico que consiste en once residuos de aminoacidos con un peso molecular total de aproximadamente 1200 Dalton, pero con sustituyentes o configuraciones diferentes de algunos de los aminoacidos. Por lo tanto, la presente invencion contempla tambien mezclas de diferentes tipos de ciclosporina o componentes de ciclosporina junto con la ciclosporina A. El termino “ componente de ciclosporina” , como se utiliza en la presente memoria, incluye cualquier miembro individual del grupo de la ciclosporina, sales de los mismos y mezclas de los mismos, asf como mezclas de dos o mas sales de ciclosporina individuales de los mismos y mezclas de los mismos. En las composiciones de la invencion se usa ciclosporina A.

Otros componentes de ciclosporina preferidos incluyen derivados de ciclosporina A, sales de ciclosporina A y similares y mezclas de los mismos.

La estructura qmmica de la ciclosporina A se representa mediante la Formula I:

Como se utiliza en la presente memoria, el termino “ derivados” de una ciclosporina se refiere a compuestos que tienen estructuras suficientemente similares a la ciclosporina como para que funcionen de una forma practicamente similar, o practicamente identica a la ciclosporina, por ejemplo, la ciclosporina A, en las presentes composiciones y metodos no terapeuticos. Incluidos dentro de los derivados de ciclosporina A utiles estan los seleccionados de los derivados ((R)-metiltio-Sar)3-(4'-hidroxi-MeLeu)-ciclosporina A, ((R)-(ciclo)alquiltio-Sar)3-(4'-hidroxi-MeLeu)4-ciclosporina A, y ((R)-(ciclo)alquiltio-Sar)3-ciclosporina A descritos a continuacion.

Estos derivados de ciclosporina se representan por las siguientes formulas generales (II) y (III), respectivamente:

en donde Me es metilo; Alk es alquileno C2-6 o cicloalquileno C3-6; R es OH, COOH, alcoxicarbonilo, -NR1R2 o N(R3)-(CH2)-NRi R2; en donde R1, R2 es H, alquilo, cicloalquilo C3-6, fenilo (opcionalmente sustituido con halo, alcoxi, alcoxicarbonilo, amino, alquilamino o dialquilamino), bencilo o heterociclilo saturado o insaturado que tiene 5 o 6 miembros y 1-3 heteroatomos; o NR1R2 es un heterociclo de 5 o 6 miembros que puede contener un heteroatomo adicional de N, O, o S y puede estar alquilado; R3 es H o alquilo y n es 2-4; y los residuos alquilo contienen C1-4.

Las presentes composiciones y metodos no terapeuticos pueden llevarse a la practica empleando cualquier composicion o combinacion de composiciones adecuadas que incluyen cantidades terapeuticamente eficaces de un componente de ciclosporina junto con bimatoprost utiles para promover el crecimiento del cabello. El componente de ciclosporina esta presente en una cantidad y/o concentracion eficaz suficiente para proporcionar el efecto terapeutico deseado cuando la composicion que contiene ciclosporina se administra a un ser humano o animal segun la presente invencion. Se contemplan mezclas de componentes de ciclosporina. En la invencion, la ciclosporina A esta presente en las composiciones en una cantidad de 0,05 % p/v de la composicion.

b. Bimatoprost

La presente invencion tambien implica el uso de ciclosporina A junto con bimatoprost, que puede representarse de una forma general mediante la formula I:

en donde los enlaces discontinuos representen un enlace simple o doble que puede estar en la configuracion cis o trans, A es un radical alquileno o alquenileno que tiene de dos a seis atomos de carbono, dicho radical puede estar interrumpido por uno o mas radicales oxido y sustituido por uno o mas grupos hidroxi, oxo, alquiloxi o alquilcarboxilo en donde dicho radical alquilo comprende de uno a seis atomos de carbono; B es un radical cicloalquilo que tiene de tres a siete atomos de carbono, o un radical arilo, seleccionado del grupo que consiste en radicales hidrocarbilarilo y heteroarilo que tienen de cuatro a diez atomos de carbono en donde el heteroatomo se selecciona del grupo que consiste en atomos de nitrogeno, oxfgeno y azufre; X es un radical seleccionado del grupo que consiste en -OR4 y -N(R4)2 en donde R4 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrogeno, un radical alquilo inferior que tiene de uno a seis atomos de carbono, R5-C- o R5-O-C- en donde R5 es un radical alquilo inferior que tiene de uno a seis atomos de carbono; Z es =O o representa 2 radicales hidrogeno; uno de R1 y R2 es =O, -OH o un grupo -O(CO)R6, y el otro es -OH u -O(CO)R6, o R1 es =O y R2 es H, en donde R6 es un grupo hidrocarburo adclico saturado o insaturado que tiene de 1 a aproximadamente 20 atomos de carbono, o -(CH2)mR7 en donde m es 0 o un numero entero de 1 a 10 y R7 es un radical cicloalquilo que tiene de tres a siete atomos de carbono, o un radical hidrocarbilarilo o heteroarilo, como se ha definido anteriormente, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, con la condicion de que, cuando B no esta sustituido con un radical colgante que contiene heteroatomos y Z es =O, entonces X no es -OR4. (Es decir, el radical cicloalquilo o hidrocarbilarilo o heteroarilo no esta sustituido con un radical colgante que tiene un atomo distinto del carbono o hidrogeno).

El bimatoprost tambien se puede representar mediante la siguiente formula general II:

en donde y es 0 o 1, x es 0 o 1 y x e y no son ambos 1, Y es un radical seleccionado del grupo que consiste en alquilo, halo, p. ej. flooro, cloro, etc., nitro, amino, tiol, hidroxi, alquiloxi, alquilcarboxi, alquilo sustituido con halo en donde dicho radical alquilo comprende de uno a seis atomos de carbono, etc. y n es 0 o un numero entero de 1 a aproximadamente 3 y R3 es =O, -OH o -O(CO)R6 en donde R6 es como se ha definido anteriormente. Preferiblemente, n es 1 o 2.

El bimatoprost tambien se puede representar mediante la Formula general III.

en donde las lmeas rayadas indican una configuracion, los triangulos rellenos se usan para indicar la configuracion.

El bimatoprost tambien se puede representar mediante la Formula general IV:

O se representa mediante la Formula general V:

En todas las formulas anteriores, asf como en las que se proporcionan a continuacion, las lmeas discontinuas en los enlaces entre los carbonos 5 y 6 (C-5), entre los carbonos 13 y 14 (C-13), entre los carbonos 8 y 12 (C-8), y entre los carbonos 10 y 11 (C-10), indican un enlace sencillo o doble que puede estar en configuracion cis o trans. Si se usan dos lmeas continuas, esto indica una configuracion espedfica para dicho doble enlace. Las lmeas rayadas en las posiciones C-9, C-11 y C-15 indican la configuracion a. Si se tuviera que dibujar la configuracion p, se usana una lmea triangular continua.

En los compuestos usados segun la presente invencion se contemplan compuestos que tienen los sustituyentes en C-9 o C-11 o C-15 en la configuracion a o p. Como se ha mencionado anteriormente, en todas las formulas proporcionadas en la presente memoria, las conexiones al anillo de ciclopentano mediante una lmea discontinua indican sustituyentes en la configuracion a. Las conexiones al anillo de ciclopentano mediante una lmea continua engrosada indican sustituyentes en la configuracion a. Ademas, la conexion mediante lmea discontinua del grupo hidroxilo u otro sustituyente a los atomos de carbono C-11 y C-15 significa configuracion a.

Para los fines de la presente invencion, salvo que se limite de forma adicional, el termino “ alquilo” se refiere a grupos alquilo que tienen de uno a diez atomos de carbono, el termino “ cicloalquilo” se refiere a grupos cicloalquilo que tienen de tres a siete atomos de carbono, el termino “ arilo” se refiere a grupos arilo que tienen de cuatro a diez atomos de carbono. El termino “ grupo hidrocarburo adclico saturado o insaturado” se usa para referirse a grupos de hidrocarburos de cadena lineal o ramificada, saturados o insaturados, que tienen de uno a aproximadamente 6, preferiblemente de uno a aproximadamente 4 atomos de carbono. Dichos grupos incluyen grupos alquilo, alquenilo y alquinilo de longitudes apropiadas, y preferiblemente son grupos alquilo, p. ej., metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo o hexilo, o una forma isomerica de los mismos.

La definicion de R6 puede incluir un componente dclico, -(CH2)mR7, en donde n es 0 o un numero entero de 1 a 10, R7 es un anillo alifatico de aproximadamente 3 a aproximadamente 7 atomos de carbono, o un anillo aromatico o heteroaromatico. El “ anillo alifatico” puede estar saturado o insaturado, y preferiblemente es un anillo saturado que tiene 3-7 atomos de carbono, inclusive. Como anillo aromatico, R7 es preferiblemente fenilo, y los anillos heteroaromaticos tienen oxfgeno, nitrogeno o azufre como heteroatomo, es decir, R7 puede ser tienilo, furanilo, piridilo, etc. Preferiblemente, m es 0 o un numero entero de 1 a 4.

Z es =O o representa dos atomos de hidrogeno.

X se puede seleccionar del grupo que consiste en -OR4 y -N(R4)2 en donde R4 se selecciona del grupo que consiste en hidrogeno, un radical alquilo inferior que tiene de uno a seis atomos de carbono, R5-C(O)- o R5-O-C(O)-en donde R5 es un radical alquilo inferior que tiene de uno a seis atomos de carbono.

Los representantes preferidos de los compuestos comprendidos en el alcance de la presente invencion son los compuestos de formula V en donde X es -OH, es decir, acido ciclopentano heptenoico 5-cis-2-(3a-hidroxi-4-mclorofenoxi-1-trans-butenil)-3,5-dihidroxi, [1a,2p,3a,5a] y ciclopentano metilheptenoato-5-cis-2(3a-hidroxi-4-mclorofenoxi-1-trans-butenil)-3,5-dihidroxi, [1a,2p,3a,5a] y los esteres en 9, 11 y/o 15 de este compuesto. (Las designaciones numeradas entre parentesis se refieren a las posiciones en el anillo ciclopentano).

Los siguientes compuestos novedosos pueden usarse en las composiciones farmaceuticas y los metodos no terapeuticos de la presente invencion.

(I) ciclopentano heptenol-5-cis-2-(3a-hidroxi-5-fenil-1-trans-pentenil)-3,5-dihidroxi, [1a,2p,3a,5a]

(2 ) ciclopentano heptenamida-5-cis-2-(3a-hidroxi-5-fenil-1-trans-pentenil)-3,5-dihidroxi, [1a,2p,3a,5a]

(3) ciclopentano N,N-dimetilheptenamida-5-cis-2-(3a-hidroxi-5-fenil-1-trans-pentenil)-3,5-dihidroxi, [1a,2p,3a,5a] (4) ciclopentano heptenil metoxido-5-cis-2-(3a-hidroxi-5-fenil-1-trans-pentenil)-3,5-dihidroxi, [1a,2p,3a,5a]

(5) ciclopentano heptenil etoxido-5-cis-2-(3a-hidroxi-4-meta-clorofenoxi-1-trans-pentenil)-3,5-dihidroxi, [1a,2p,3a,5a] (6) ciclopentano heptenilamida-5-cis-2-(3a-hidroxi-4-meta-clorofenoxi-1-trans-pentenil)-3,5-dihidroxi, [1a,2p,3a,5a] (7) ciclopentano heptenilamida-5-cis-2-(3a-hidroxi-4-trifluorometilfenoxi-1-trans-pentenil)-3,5-dihidroxi, [1a,2p,3a,5a] (8) ciclopentano N-isopropil heptenamida-5-cis-2-(3a-hidroxi-5-fenil-1-trans-pentenil)-3,5-dihidroxi, [1a,2p,3a,5a] (9) ciclopentano N-etil heptenamida-5-cis-2-(3a-hidroxi-5-fenil-1-trans-pentenil)-3,5-dihidroxi, [1a,2p,3a,5a]

(10) ciclopentano N-metil heptenamida-5-cis-2-(3a-hidroxi-5-fenil-1-trans-pentenil)-3,5-dihidroxi, [1a,2p,3a,5a] ( I I ) ciclopentano heptenol-5-cis-2-(3a-hidroxi-4-meta-clorofenoxi-1-trans-butenil)-3,5-dihidroxi, [1a,2p,3a,5a] (12) ciclopentano heptenamida-5-cis-2-(3a-hidroxi-4-meta-clorofenoxi-1-trans-butenil)-3,5-dihidroxi, [1a,2p,3a,5a] (13) ciclopentano heptenol-5-cis-2-(3a-hidroxi-5-fenil-1-trans-pentenil)-3,5-dihidroxi, [1a,2p, 3a,5a]

Una sal farmaceuticamente aceptable es cualquier sal que retenga la actividad del compuesto precursor y no transmita ningun efecto negativo o indeseable al sujeto al que se administra y en el contexto en el que se administra. Dichas sales son las formadas con cationes farmaceuticamente aceptables, p. ej., metales alcalinos, metales alcalinoterreos, etc.

En una realizacion, el componente de bimatoprost esta presente en una cantidad de 0,03 % p/v.

La concentracion enumerada de ciclosporina A se combina con las concentraciones enumeradas de bimatoprost en una composicion que tiene 0,05 % p/v de ciclosporina y 0,03 % p/v de bimatoprost combinado con los excipientes y veldculos enumerados en la presente memoria, tales como, aunque no de forma limitativa, el veldculo del Ejemplo 1.

Las composiciones o formulaciones utiles para llevar a la practica la invencion pueden estar en forma de lfquidos, suspensiones, emulsiones, emulsiones inversas, microemulsiones, semisolidos, soluciones, dispersiones, capsulas, geles, lociones, cremas, parches, espumas, pulverizaciones, pastas, ceras y similares. Los expertos en la tecnica de la formulacion farmaceutica pueden formular composiciones adecuadas que incluyen componentes de ciclosporina y bimatoprost en una forma adecuada, tales como las formas senaladas en la presente memoria que incluyen, por ejemplo, uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables, tales como los usados convencionalmente en composiciones similares.

C. Excipientes

Los ejemplos espedficos de excipientes farmaceuticamente aceptables incluidos en las composiciones de la presente invencion pueden ser aceite de oliva, aceite de cacahuete, aceite de ricino, aceite mineral, vaselina, dimetilsulfoxido, Cremophor, Miglyol 182 (comercializado por Dynamit Nobel Kay-Fries Chemical Company, Mont Vale, N.J.), un alcohol (p. ej. etanol, alcohol n-propflico o alcohol isopropflico), liposomas o productos analogos a liposomas o un fluido de silicona. Los excipientes preferidos son dimetilsulfoxido y aceite de oliva. Se contemplan mezclas de cualesquiera excipientes adecuados.

Las combinaciones de excipientes que pueden incluirse en las composiciones de la presente invencion incluyen, aunque no de forma limitativa, etanol:propilenglicol:agua (60:20:20). Otras posibles combinaciones de excipientes pueden incluir una combinacion EtOH:Upido:agua. Pueden usarse diversos penetrantes / potenciadores de la penetracion que incluyen, aunque no de forma limitativa, D-limoneno, Transcutol®, Labrasol®, cineol, Cremophor RH 40, DMSO, acido oleico, miristato de isopropilo, propilenglicol, oxibutinina y monolaurato. Plantas, incluidas, aunque no de forma limitativa, Aloe Vera (esto tambien se puede usar como producto de pretratamiento) (vease http://www.scribd.com/doc/19139862/Aloe-VeraMiracle-Plant - Free Extract “Aloe Vera - The Magical Plant Amongst Us” del Dr. Reuben Titus).

Las composiciones pueden estar en forma de microemulsiones (agua, aceite y tensioactivos) con diversos tensioactivos que incluyen, aunque no de forma limitativa, labrasol, transcutol, lecitina de soja y cineol. Tambien pueden utilizarse determinadas plantas incluidas, aunque no de forma limitativa, Aloe Vera, que se puede usar como producto de pretratamiento. Varios aceites de acidos grasos no fosforilados tambien pueden incluir, aunque no de forma limitativa, aceite de emu y otros enumerados en el sitio web de internet “ www.hairloss-research.org” y varios polifenoles que incluyen, aunque no de forma limitativa, epigalocatequina-3-galato (EGCG), un constituyente principal de los polifenoles (encontrados en el te verde). Los acelerantes se pueden incluir en las composiciones, incluyendo 8M-urea y dimetilsulfoxido (DMSO).

Varios excipientes incluyen, aunque no de forma limitativa, etanol:propilenglicol:agua (60:20:20). Otros posibles excipientes pueden incluir, aunque no de forma limitativa, una combinacion EtoH:lfpido:agua. Grice y col. Relative Uptake of Minoxidil into Appendages and Stratum Corneum and Permeation through Human Skin In Vitro. J Pharm Sci 2010; Vol 99.

Diversos penetrantes / potenciadores de la penetracion incluyen, aunque no de forma limitativa, D-limoneno. Fang y col. In Vitro and in vivo evaluations of the efficacy and safety of skin permeation enhancers using flurbiprofen as a model drug. Int J Pharmaceutics 2003; 255:153-166.

Varios tipos de microemulsiones (agua, aceite y tensioactivos) incluyen, aunque no de forma limitativa, Labrasol, Transcutol y cineol. Mura y col. Penetration enhancer-containing vesicles (PEVs) as carriers for cutaneous delivery of minoxidil. Int J Pharmaceutics 2009; 380:72-79. Kreilgaard M y col. Influence of microemulsions of cutaneous drug delivery. Adv Drug Delivery Rev 2002; 1: S77-S98. Verma Dd y col. Treatment of alopecia areata in the DEBR model using Cyclosporin A lipid vesicles. EJD 2004; 14:332-8.

Diversos aceites de acidos grasos no fosforilados incluyen, aunque no de forma limitativa, aceite de emu (vease el sitio web de internet www.hairloss-research.org, Emu oil Hairloss and Frontal Regrowth, 11 octubre de 2010. Topical Emu Oil and Coconut Oil for Hair Loss - A Potent Combination. 15 de julio de 2010).

Diversos polifenoles incluyen, aunque no de forma limitativa, epigalocatequina-3-galato (EGCG), un constituyente principal de los polifenoles (encontrados en el te verde), que tambien se pueden usar en una solucion de pretratamiento (vease el sitio web de internet www.hairloss-research.org. Green Tea Consumption Grows Hair, Protects Against UV Radiation in Animal Models, 24 de junio de 2010).

Diversos vehfculos lipfdicos nanoestructurados incluyen, aunque no de forma limitativa, lecitina de soja. (vease http://www.cosmeticsdesign.com/Formulation-Science/Nano-carriers-enhance-skin-penetration-and-antioxidant-effectof-CoQ10, Nano carriers enhance skin penetration and antioxidant effect of CoQ10, Katie Bird, 08 de abril de 2010).

Diversos acelerantes incluyen, aunque no de forma limitativa, 8M-urea y dimetilsulfoxido (DMSO) (vease MECHANISM OF ACTION OF ACCELERANTS ON SKIN PENETRATION, C. ALLENBY, N.H. CREASEN, J.A.G. EDGINTON, J.A. FLETCHER y C. SCHOCK. Artfculo publicado por primera vez en lmea: 29 JUL 2006 DOI: 10.1111/j.1365-2133.1969.tb16061.x Issue British Journal of Dermatology Volumen 81, paginas 47-55, agosto de 1969).

Diversas formas de sales de adicion de acido y base libre (vease Skin penetration enhancement using free base and acid addition salt combination of active agents. Patente US-4888354).

D. Modalidades de pretratamiento

Se pueden utilizar diversas modalidades de pretratamiento para mejorar la eficacia de la presente invencion o aumentar la penetracion de los compuestos activos en el cuero cabelludo. Esto incluye variar las temperaturas de la piel / cuero cabelludo incluido, aunque no de forma limitativa, aumentar la temperatura de pretratamiento del area a tratar. Tambien se pueden utilizar diversas formas de estimulacion de la piel / cuero cabelludo incluidas, aunque no de forma limitativa, estimulacion mecanica, vibracion y masaje. Tambien se pueden utilizar ondas sonoras incluido, aunque no de forma limitativa, sonoforesis a baja frecuencia (ultrasonidos). Esto podna incorporarse al dispositivo de administracion, por ejemplo, un aplicador de tipo “ roll-on” que podna llevar integrado un dispositivo de ultrasonidos. Diversas formas de estimulacion electrica incluidas, aunque no de forma limitativa, sonoforesis/ultrasonidos e iontoforesis (por ejemplo, Power Paper, que es un tipo de producto de iontoforesis).

E. Aplicadores

Las composiciones de la presente invencion pueden aplicarse a las zonas de tratamiento con diversos tipos de aplicadores incluidos, aunque no de forma limitativa, frascos provistos de bomba pulverizadora, frascos de aerosol y dispositivos con roll-on similares a aplicadores de antitranspirantes de tipo roll-on. Las composiciones tambien pueden aplicarse mediante champus o acondicionadores, asf como otros productos de pretratamiento que permitan que las sustancias activas que siguen el proceso de lavado con champu/acondicionado/pretratamiento penetren en el cuero cabelludo en el mayor grado posible. Tambien se incluyen los champus medicinales que contienen agentes farmacologicos activos incluidos, aunque no de forma limitativa, champus que contienen ketoconazol. El champu conocido como Nizoral (ketoconazol) bloquea los efectos del DHT en el cuero cabelludo, lo que puede evitar la perdida del cabello. El DHT es un metabolito de testosterona que se cree provoca la perdida del cabello.

Ejemplo I

Induccion rapida del crecimiento del pelo por la penetracion de bimatoprost (“ Bpst” ) y ciclosporina A (“ CsA” ) en lomos afeitados de roedores.

Objetivo

El objetivo de este estudio no GLP es evaluar el recrecimiento del pelo en ratones macho C57BL6 despues del tratamiento individual y combinado de ciclosporina A y bimatoprost diariamente durante los 20 primeros dfas y durante diez dfas alternos hasta el dfa 40 usando un sistema de fotograffa. Tambien se evaluara la documentacion de la pigmentacion de la piel observada (correlacion con el ciclo del folfculo piloso) y la irritacion de la piel para detectar la tolerabilidad dermica (dermatitis) diariamente durante 40 dfas. El peso de los ratones se registrara semanalmente para monitorizar el estado de salud y el aspecto. El plasma sangmneo se recogera para la determinacion farmacocinetica de los compuestos mediante HPLC-MS y para determinar los niveles sericos de interleucina-2 (IL-2) mediante ELISA. El tejido se recogera para determinar el ciclo de folfculo piloso (anageno, telogeno, catageno) mediante evaluacion histologica el dfa 40.

Preparacion de dosis

Los artfculos experimentales se prepararan una vez al principio del estudio y se prepararan en un vehfculo de EtOH a 10 % p/v, propilenglicol a 2 % p/v, carboximetilcelulosa al 0,75 % p/v, PBS (o ddw con ajuste del pH). La ciclosporina A se preparara al 0,05% (p/v), 0,1 % (p/v) y 1 % (p/v) para los grupos 2, 4, 5, 7 y 8, respectivamente. El bimatoprost se preparara al 0,03 % (p/v), 0,3 % (p/v) y 3 % (p/v) para los grupos de dosis 3, 4, 6, 7 y 8, respectivamente.

Segun la informacion sobre la estabilidad proporcionada por el Patrocinador, las soluciones de las dosis se prepararan una vez al comienzo del estudio y se almacenaran a 2-8 °C antes de la administracion. Los frascos se envolveran con papel de aluminio para evitar la exposicion del artfculo experimental a la luz.

Sistema de ensayo y cria

Generalidades

Especie: Raton

Cepa: C57BL/6NCrlBR

Sexo: Macho

Fuente: Charles River

Peso inicial: 20-30 g

Edad: 7 semanas

Numero: 120

Identificacion: Tarjeta de la jaula y/o marca en la oreja

Aclimatacion: > 7 dfas

Justificacion del uso del sistema de ensayo

La justificacion del uso de ratones en este estudio se basa en la premisa de que el ensayo con animales es un requisito previo basico y etico para probar nuevos farmacos en seres humanos, y en que los datos obtenidos de modelos animales no clmicos tendran relevancia para el comportamiento del material experimental en seres humanos. Debido a las interacciones complejas que se producen in vivo, un sistema in vitro no proporciona suficiente informacion para la evaluacion de actividades in vivo de un compuesto (NIH, 1993). Los ratones se han usado ampliamente para evaluar el comportamiento no clmico (p. ej., farmacologfa, toxicidad y farmacocinetica) de una amplia variedad de agentes farmacologicos y toxicologicos (incluidos los ambientales). Se espera que el numero de animales utilizados en este estudio proporcione una muestra lo suficientemente grande para obtener resultados cientificamente significativos.

Cria

Alojamiento y enriquecimiento. Los animales se mantendran y monitorizaran para comprobar su buena salud segun las SOP (procedimientos normalizados de trabajo) para la cna de Pacific BioLabs. Durante la aclimatacion, los animales se agruparan y alojaran en cajas de policarbonato para roedores que contienen virutas absorbentes para lechos de animales. Durante el estudio, los animales se alojaran individualmente en cajas para roedores que contienen virutas absorbentes para lechos de animales.

Penodo de aclimatacion. Los animales integrados en el estudio se aclimataran a la instalacion de prueba durante al menos siete dfas antes de comenzar el estudio. Se realizaran observaciones acerca del estado de salud periodicamente durante la aclimatacion para asegurar la aceptabilidad para el estudio; los animales se integraran en el estudio a criterio del director del estudio.

Entorno. Los animales se mantendran en un entorno controlado con una temperatura de 20 a 26 °C, humedad relativa de 50 ± 20 % y un ciclo de luz/oscuridad de 12 horas. El ciclo de iluminacion de 12 h puede interrumpirse para adaptarse a los procedimientos del estudio. Los animales se mantendran en habitaciones con al menos diez cambios de aire ambiental por hora. Los registros de la instalacion del animalario se conservaran en el archivo de Pacific BioLabs.

Dietay alimentacion. Los animales recibiran alimento a voluntad certificado (dieta de laboratorio para roedores, etc.), salvo que se especifique otra cosa para la administracion de la dosis. El fabricante del alimento proporciona el analisis del mismo, e informes representativos de los analisis estan archivados en Pacific BioLabs. No hay contaminantes conocidos en los materiales alimentarios a niveles que puedan interferir con la realizacion de este estudio.

Agua potable. Se ofrecera agua potable fresca a todos los animales, a voluntad, mediante frascos de agua y tubos de succion. El agua se suministra por la empresa local de abastecimiento y Pacific BioLabs la analiza dos veces al ano para determinar posibles contaminantes; los resultados de los analisis de agua estan archivados en Pacific BioLabs. No hay contaminantes conocidos en el agua a niveles que puedan interferir con la realizacion de este estudio.

Identificacion. Los animales se identificaran mediante tarjetas de jaula y/o marcas en la oreja.

Bienestar de los animales

Declaracion general sobre garantia. Este estudio cumplira todas las secciones relevantes del reglamento “Final Rules of the Animal Welfare Act (9 CFR)”, la polftica “Public Health Service Policy on Humane Care and Use of Laboratory Animals” y la gma “Guide for the Care and Use of Laboratory Animals”. Las condiciones de vida de los animales, incluidas el alojamiento, alimentacion y atencion no medica, seran adecuadas para la especie, contribuiran a su salud y comodidad, y no se desviaran de los estandares establecidos en la reglamento “USDA Animal Welfare Act” y en la actual gma “Guide for the Care and Use of Laboratory Animals” preparada por el Institute of Laboratory Animal Resources, National Academy of Sciences. Los procedimientos usados en este estudio han sido revisados y aprobados por el Pacific BioLabs Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC), segun lo estipulado en el reglamento Animal Welfare Act [PBL ACUP 17-C09].

Ningun animal se utilizara en mas de un procedimiento operativo mayor del cual se tenga que recuperar, salvo que cientificamente este justificado o sea necesario como procedimiento veterinario. No se usara paralisis sin la adecuada anestesia.

Atencion veterinaria. El objetivo del estudio es establecer el comportamiento farmacologico y toxicologico del artfculo experimental, que incluye efectos adversos que pueden incluir dolor o estres del animal. El Director del estudio ha revisado la bibliograffa y no estan actualmente disponibles pruebas alternativas que evitanan dolor o sufrimiento. Por lo tanto, la denegacion de cuidados paliativos, salvo que el dolor sea severo (o cronico) o el animal este moribundo, esta justificada.

Durante todo el estudio estara disponible la asistencia veterinaria, y los animales que muestren sufrimiento grave se pueden tratar para aliviar el dolor y el sufrimiento a discrecion del veterinario. Estos tratamientos se indicaran en los archivos del estudio y el Informe final, y se notificara al Patrocinador la asistencia veterinaria adicional. Los animales con sufrimiento grave o moribundos se pueden sacrificar a discrecion del veterinario y del Director del estudio. Si es posible, se consultara al Patrocinador antes de realizar el sacrificio. Los procedimientos terminales destinados al sacrificio de los animales se llevaran a cabo con la anestesia adecuada, como se describe en las SOP de Pacific BioLabs.

Los animales retirados del estudio pueden ser sustituidos a discrecion del Director del estudio, si la sustitucion no afecta negativamente a la realizacion del estudio.

Procedimientos de ensayo

Diseno experimental

Los animales recibiran diariamente la aplicacion topica del artfculo experimental, tal como se resume en la Tabla 1. Las dosis se administraran a ratones C57BL/6 macho, con 12 ratones/grupo, y un total de 8 grupos de tratamiento durante 40 dfas.

Tabla 1. Designaciones de grupos y niveles de dosis

(*) Estos ejemplos no forman parte de la invencion y se proporcionan con fines informativos solamente.

Asignacion de grupos

El Director del estudio asignara los animales a los grupos de tratamiento sin desviacion aparente, pero sin aleatorizacion.

Administracion de la dosis

Todos los animales se afeitaran desde la base de las orejas hasta la base de la cola; se debera tener cuidado para evitar la abrasion de la piel. La pigmentacion de la piel se evaluara el dfa antes de empezar el tratamiento. Todos los animales se pesaran semanalmente. Las dosis se administraran diariamente como aplicacion topica. Observaciones en vivo

Medicion del peso corporal

Los pesos corporales se mediran semanalmente (Dfa 1, 7, 14, 21, 28, 36, 40) y se registraran.

Moribundez/Mortalidad

Las comprobaciones generales de morbilidad y mortalidad (p. ej., las observaciones junto a la jaula) se realizaran una vez al dfa.

Observaciones clinicas

Las observaciones clinicas se realizaran diariamente despues de la dosificacion. Las caractensticas que deben observarse incluyen el aspecto general de salud y el comportamiento del animal.

Otras medidas

Se tomaran fotos desde la punta de la nariz del raton hasta la base de la cola diariamente durante los primeros 20 dfas del estudio y despues en dfas alternos hasta concluir el estudio. De forma adicional, cada raton se marcara (en la tarjeta de la jaula y en la cola) y cada grupo estara codificado con un color. Los ratones se anestesiaran con isofluorano y la piel del lomo de cada raton se pinzara y se afeitara con cuidado con pinzas electricas, para no danar la piel el dfa 1 del estudio. La eliminacion de pelo se extendera desde la base de las orejas hasta la base de la cola. El color de la piel se evaluara en una escala de cuatro puntos (P-1: rosa palido (telogeno), P-2: rosado oscuro, P-3: gris claro, P-4: gris oscuro / negro (anageno)) y se tomara una foto despues del afeitado. La piel debera aparecer de color rosa palido debido a fase telogena del ciclo (nota: los animales no se utilizaran si la piel es mas oscura que rosa palido). Las fotos se descargaran y almacenaran en un ordenador y/o lapiz de memoria. Se sacrificaran tres roedores para los estudios histologicos en el punto temporal del Dfa 1, antes de la aplicacion del tratamiento.

El dfa 39 se recogeran 700 pl de sangre de 6 animales de cada grupo de tratamiento por puncion cardfaca terminal para analisis farmacocinetico. Se dispensaran 700 pl de sangre al interior de un tubo con tapon verde que contiene heparina sodica y se centrifugara a 2500 g durante 15 minutos para recoger el plasma. El plasma se transferira a un tubo de microcentnfuga y se almacenara a -70 °C. Otros 700 pl de sangre adicionales de tres animales de cada grupo de tratamiento se obtendran mediante puncion cardiaca y se transferiran a tubos separadores de suero y se centrifugaran a 2500 g durante 15 minutos para recoger suero para el analisis de IL-2. El suero se transferira a tubos nuevos y se almacenara a -70 °C hasta su analisis.

El dfa 40, tres ratones/grupo de tratamiento se sacrificaran por asfixia con CO2, y se extirpara la piel de la zona de tratamiento y la piel se fijara en formalina tamponada neutra a 10 %.

Tabla 2. Actividades del estudio y calendario

Observaciones finales

Autopsias

Muertes prematuras. Los animales encontrados muertos no se someteran a necropsia masiva; los organos y tejidos de los animales encontrados muertos no se recogeran para histopatologfa.

Muertes programadas. Los animales no se someteran a necropsia masiva en el sacrificio programado; la piel de la zona de tratamiento de estos animales se recogera para histopatologfa.

Sacrificio. Los animales se sacrificaran con CO2.

Histopatologia

La piel de la zona de tratamiento de tres animales/grupo se recogera para la evaluacion histologica posterior el dfa 40 y se fijara en formalina tamponada neutra a 10 %.

Puntos temporales de recogida

Las muestras de farmacocinetica se obtendran de los animales del estudio (6/grupo) el d^a 39. La sangre (700 j l ) se recogera de los animales por puncion cardfaca terminal y se transferira a tubos con EDTA de potasio, se centrifugaran durante 15 segundos a 2500 g, y el plasma se transferira a tubos nuevos. Las muestras de plasma se almacenaran a -70 °C y los posibles analisis seran responsabilidad del patrocinador.

Las muestras de farmacologfa para el analisis de IL-2 se obtendran de los animales del estudio (3/grupo) el dfa 39. La sangre (700 j l ) se recogera de los animales por puncion cardfaca terminal y se transferira a tubos separadores de suero, se centrifugara a 2500 g, y el suero se transferira a tubos nuevos y se almacenara de -60 a -80 °C. El analisis de las muestras de suero sera responsabilidad del patrocinador.

Recogida y procesamiento

Las muestras de sangre se recogeran de los animales anestesiados por medio de puncion cardfaca terminal en un tubo de tamano adecuado que contiene EDTA de potasio como anticoagulante para analisis farmacocinetico o en tubos separadores de suero para el analisis de IL-2. Las muestras se mantendran en hielo hasta centrifugacion a aproximadamente 2800 rpm a temperatura ambiente durante aproximadamente 15 min. El plasma se separara y se almacenara de -60 a -80 °C.

Bioanalisis

Los bioanalisis de las concentraciones plasmaticas del artfculo experimental seran responsabilidad del Patrocinador y los resultados bioanaltticos no se incluiran en el Informe final. Los bioanalisis de las concentraciones sericas de IL-2 seran responsabilidad del Patrocinador y no se incluiran en el Informe final. Adquisicion y analisis de datos

Los sistemas informaticos principales utilizados en este estudio pueden incluir, aunque no de forma limitativa, Microsoft Excel®, Microsoft Word®, y el Environmental Monitoring System® de Rees Scientific para el control ambiental de la sala del estudio.

Estadistica descriptiva

La estadistica descriptiva (media, desviaciones estandar y numero de repeticiones) se presentara para todos los datos de medicion y se mostrara en tablas resumen. La estadistica descriptiva se calculara con Microsoft Excel®. Resultados

El dfa 13, que no es el punto final del estudio (dfa 40), se evaluo el crecimiento del pelo de los grupos de la Tabla 1 como se muestra en la Figura 1. Como se ha mencionado anteriormente, se afeito la superficie dorsal de ratones C57BL/6 macho de 8 semanas de edad para eliminar el pelo y se puntuo la pigmentacion de la piel como indicador de telogeno (rosa) o anageno (gris oscuro). Solamente los ratones con piel rosada (fase telogena) el dfa despues del afeitado se incluyeron en el estudio. Los ratones recibieron una aplicacion topica diaria de 200 j l de vehfculo, CsA (0,05 %, 0,1 % y 1 %) solo y en combinacion con Bpst (0,03 %, 0,3 % y 3 %), o bimatoprost solo (0,03 %, 0,3 %), en un vehfculo de etanol a 10 %, propilenglicol a 2 %, carboximetilcelulosa al 0,75 % y agua desionizada destilada con el pH ajustado a 7,4. El dfa 13, los ratones se anestesiaron con isoflurano y se tomaron diariamente fotos de la zona de dosificacion de cada raton con una camara digital Nikon D90 montada sobre un pie. Desde la parte superior izquierda hacia la derecha y hacia abajo, las fotos corresponden a: (grupo 1 animal 5, control), (grupo 2 animal 15, CsA al 0,05 %), (grupo 3 animal 35, Bpst al 0,03 %), (grupo 4 animal 38, CsA al 0,05 %/Bpst al 0,03 %), (grupo 5 animal 52, CsA al 0,1 %), (grupo 6 animal 65, Bpst al 0,3 %), (grupo 7 animal 84, CsA al 0,1 %/Bpst al 0,3 %), (grupo 8, animal 92, CsA al 1 %/Bpst a 3 %). Los grupos 1-3 y 5-8 no forman parte de la invencion y se proporcionan con fines informativos solamente. Estas fotos se muestran en la Figura 1.

La Figura 2 muestra un rectangulo (852x436 unidades arbitrarias) creado usando el programa informatico Image J para abarcar el area afeitada en el dorso de cada raton. El valor de gris medio del area rectangular se midio mediante el programa informatico Image J como indicador del oscurecimiento de la piel y del recrecimiento del pelo. * indica p<0,05 vs. control mediante el analisis de la prueba de la t con el programa informatico Microsoft Excel. # indica p<0,05 vs. bimatoprost al 0,03 % en solitario mediante el analisis de la prueba de la t con el programa informatico Microsoft Excel. N=12/grupo ± S.E.M. La combinacion de CsA al 0,05 % y Bpst al 0,03 % demostro superioridad frente al control y a los grupos de tratamiento con CsA al 0,05 % por estimulacion del oscurecimiento de la piel y recrecimiento de pelo en un 46 % respecto de los ratones tratados con el control y en un 3 % respecto de los tratados con CsA al 0,05 % en solitario. El CsA al 0,05% y 0,1 % en solitario no forma parte de la invention y se proporciona unicamente para information. Estos ejemplos aumentaron el oscurecimiento de la piel y el recrecimiento de pelo en un 42 % y 45 % respecto a los controles, respectivamente. El tratamiento combinado de CsA al 0,05 % y bimatoprost al 0,03 % aumento el oscurecimiento de la piel y el recrecimiento del pelo en un 0,4 % respecto al grupo tratado con CsA al 0,1 % en solitario. El grupo con CsA al 0,05 %/Bpst al 0,03 % demostro superioridad respecto a bimatoprost al 0,03 % en solitario al estimular el oscurecimiento de la piel y el recrecimiento del pelo en un 73 % respecto de bimatoprost al 0,03 % en solitario el dfa 13 del estudio.

Ejemplo II

Fin/hipotesis: Demostrar que la combinacion de ciclosporina A (“ CsA” ) y bimatoprost (“ Bpst” ) es un tratamiento seguro y eficaz para potenciar del crecimiento del cabello en longitud en el cuero cabelludo de pacientes con escasez de cabello y dolencias que dan como resultado hipotricosis.

Criterio de valoracion principal:

Determinar la penetration de una terapia individual y combinada de ciclosporina A y bimatoprost para el tratamiento de la hipotricosis del cuero cabelludo en pacientes con escasez de cabello y dolencias que dan como resultado hipotricosis.

Criterios de valoracion secundarios:

Comparacion de longitud, grosor y cantidad de recrecimiento del cabello entre los grupos de tratamiento:

1) Determinar el cambio en el crecimiento del cabello en longitud al principio y despues de aplicar una terapia individual y combinada de ciclosporina A y bimatoprost;

2) Determinar la seguridad de la ciclosporina A mediante analisis de suero sangurneo, espedficamente, niveles de creatinina, niveles de hormonas tiroideas y celulas inmunitarias, tales como recuentos de linfocitos T e interleucinas, medidos mediante pruebas anatiticas;

3) Determinar la seguridad de la ciclosporina A mediante el seguimiento de la presion sangumea medida con esfigmomanometro; y,

4) Determinar la seguridad de bimatoprost por observation de los cambios en la pigmentation de la piel o dermatitis de la piel sometida al farmaco, medida con el programa informatico AOI mediante fotogratia Canfield.

La perdida del cabello se determinara mediante una evaluation con cuestionario y la observacion del cuero cabelludo, donde > 6,45 centimetres cuadrados (> 1 pulgada cuadrada) del cuero cabelludo debe mostrar escasez de cabello o no mostrar cabello. Se debe determinar que el folfculo piloso esta activo. En la evaluacion inicial, cada paciente rellenara un cuestionario, firmara el consentimiento informado y se sometera a extraction de sangre. De los pacientes seleccionados se tomaran fotogratias de la zona afectada del cuero cabelludo antes del tratamiento el Dfa 0.

Se evaluaran cuatro grupos de 10 pacientes (n total = 40). Los cuatro grupos de pacientes se aplicaran formulaciones (el velticulo tendra aproximadamente 10 % p/v de etanol, aproximadamente 2 % p/v de propilenglicol, 0,75 % p/v de carboximetilcelulosa en agua desionizada destilada con el pH ajustado a 7,4 y ademas puede incluir opcionalmente un potenciador de penetracion y/o conservante) de: 1) CsA al 0,05 % (Restasis®) en solitario (C0); 2) Bpst al 0,03 % (Latisse®) en solitario (B0); 3) una formulation con CsA al 0,05 % y Bpst al 0,03 % (CB1); y 4) una formulation con CsA al 0,1 % y Bpst al 0,3% (CB2). C0, B0 y CB2 no forman parte de la invencion y se proporcionan con fines informativos solamente. “Aproximadamente” se refiere a variaciones en la concentration de sustancias activas o excipientes que una agencia reguladora tal como la FDA o la EMA consideranan bioequivalentes.

Todos los pacientes limpiaran y secaran sus cueros cabelludos por la manana o por la noche, seguido de un solo tratamiento con producto en el area de tratamiento del cuero cabelludo 1 vez por la noche (al acostarse). El tratamiento debera permanecer en el cuero cabelludo durante al menos 8 horas. Los pacientes mantendran un diario con entradas semanales relacionadas con el crecimiento del cabello y cualquier acontecimiento adverso. Las visitas a la consulta se realizaran el primer dfa del ensayo, el Dfa 0, a las 2 semanas, seguido de visitas mensuales durante una duration de 6 meses. Se requerira un total de 8 visitas y en cada visita se tomaran fotograffas de la zona de tratamiento con el programa informatico AOl. Esto se calculara segun el porcentaje de zona afectada por cm2 que demuestre crecimiento, medido con el programa informatico AOI mediante fotograffa Canfield. El D^ a 0 y el Mes 6 se realizara una evaluation de la presion arterial mediante esfigmomanometro y extraction de sangre seguido de analisis, con atencion a los niveles de creatinina y hormonas tiroideas, y recuento de celulas inmunitarias de linfocitos T e interleucinas.

Caracteristicas de los sujetos (criterios de inclusion):

1) Los sujetos deben otorgar su consentimiento informado por escrito, y deben autorizar la diseminacion y el uso de information relativa a su salud;

2) Los pacientes tanto masculinos como femeninos deben tener un diagnostico de perdida de cabello o escasez de cabello con parches o sobre todo el cuero cabelludo segun determine el investigador del estudio; 3) Pacientes tanto masculinos como femeninos > 18 anos a 65 anos de edad; y,

4) Los sujetos deben tener recuentos de linfocitos T CD4+ en el lfmite inferior de la normalidad, segun determine el laboratorio local.

Caracteristicas de los sujetos (criterios de exclusion):

1) Trastornos autoinmunitarios, supresion inmunitaria o evidencia de inmunodeficiencia;

2) Resultados anomalos en el recuento de linfocitos T y/o pruebas de funcion hepatica o hemoglobina serica; 3) Mujeres embarazadas o en periodo de lactancia;

4) Hipertension, toma de medication hipertensiva, o patologfa cardiovascular inestable;

5) Medicamentos que disminuyen la presion intraocular;

6) Toma en la actualidad de medicamentos con esteroides o derivados de esteroides, o suplementos de hormonas;

7) Antecedentes de calvicie de patron masculino;

8) Antecedentes de tricotilomania o pacientes con foffculos pilosos danados; y,

9) Otras razones no especificadas que contraindiquen la inscription en el estudio, segun determine el investigador

Plan de analisis estadistico:

Los criterios de valoracion primarios y secundarios se determinaran primero usando ANOVA trifactorial, por paciente, pretratamiento (bimatoprost o placebo) y tratamiento (ciclosporina o placebo) como factores intersujetos. El posterior analisis de varianza usando ANOVA bifactorial se utilizara para determinar los efectos del pretratamiento y el tratamiento dentro del grupo de pacientes. Si hay efectos principales del pretratamiento o tratamiento, o un efecto de interaction, se usaran analisis post hoc con la correction de Bonferroni para determinar la fuente de estos efectos. Un valor p de 0,05 es significativo.

Los resultados demostraran que las formulaciones combinadas de ciclosporina y bimatoprost en solitario son superiores para potenciar el crecimiento del cabello en pacientes con escasez de cabello y en pacientes que padecen hipertricosis u otros trastornos de perdida del cabello.

Ejemplo III

Un varon caucasico de 47 anos de edad que padece alopecia areata se aplica una solution de 0,03 %/0,05 % p/v de bimatoprost/ciclosporina A a su cuero cabelludo aplicando la solucion dos veces al dfa con un aplicador, una vez por la manana y una vez por la noche durante un periodo de 60 dfas. Se mide el crecimiento del cabello una vez a la semana calculando el porcentaje de zona afectada por cm2 que demuestra crecimiento, medido con el programa informatico AOI mediante fotograffa Canfield. Despues de 60 dfas de aplicacion dos veces al dfa de la solucion de 0,03 %/0,05 % p/v de bimatoprost/ciclosporina A, se mide un aumento del 27 % en el crecimiento del cabello.

Los siguientes ejemplos no forman parte de la invention y se proporcionan con fines informativos solamente.

Ejemplo IV

Una mujer caucasica de 35 anos de edad con escasez de cabello aplica una emulsion de 0,3 %/0,5 % p/v de bimatoprost/ciclosporina A a su cabello una vez al dfa con un aplicador de roll-on durante un penodo de 90 dfas. Se mide el crecimiento del cabello semanalmente calculando el porcentaje de zona afectada por cm2 que demuestra crecimiento, medido con el programa informatico AOI mediante fotograffa Canfield. Despues de 90 dfas de aplicacion diaria de la solucion de 0,3 %/0,5 % p/v de bimatoprost/ciclosporina A, se mide un aumento del 31 % en el crecimiento y volumen del cabello.

Ejemplo V

Una mujer afroamericana de 57 anos de edad con alopecia areata y escaso pelo en las cejas se aplica una espuma de 0,1 %/0,3 % p/v de bimatoprost/ciclosporina A a su cuero cabelludo y cejas dos veces al dfa, una vez por la manana y una vez por la noche, durante un penodo de 90 dfas. La espuma se aplica y se deja sobre la piel durante 15 minutos tras el pretratamiento de la piel con una toallita humeda caliente para aumentar la temperatura de la zona de tratamiento. Despues de 90 dfas de aplicacion de la espuma de 0,1 %/0,3 % p/v de bimatoprost/ciclosporina A, se observa un 26 % de aumento en el crecimiento del cabello del cuero cabelludo y un aumento del 21 % en el crecimiento de las cejas usando el programa informatico AOI y la fotograffa Canfield.

Ejemplo VI

Un hombre hispano de 27 anos de edad que padece calvicie de patron masculino y alopecia areata se aplica un gel de 0,2 %/0,4 % p/v de bimatoprost/ciclosporina A al cabello una vez al dfa durante un penodo de 120 dfas. El gel se aplica sobre el cuero cabelludo y se deja secar. Se mide el crecimiento del cabello semanalmente calculando el porcentaje de zona afectada por cm2 que demuestra crecimiento, medido con el programa informatico AOI mediante fotograffa Canfield. Despues de 120 dfas de aplicacion diaria del gel de 0,2 %/0,4 % p/v de bimatoprost/ciclosporina A, se mide un aumento del 24 % en el crecimiento del cabello.

Ejemplo VII

Una mujer de Oriente Medio de 18 anos de edad que se queja de escasez de cabello y de cejas posterior a quimioterapia utiliza un champu de pretratamiento espedfico sobre su cuero cabelludo y cejas (este champu permite que los compuestos que siguen al tratamiento con champu penetren en los folfculos pilosos en mayor grado). La paciente pulveriza una solucion de 0,3 %/0,01 % bimatoprost/ciclosporina sobre su cabello y cejas a la hora de acostarse durante 90 dfas. Se mide el crecimiento del cabello semanalmente calculando el porcentaje de zona afectada por cm2 que demuestra crecimiento, medido con el programa informatico AOI mediante fotograffa Canfield. Despues de 120 dfas de aplicacion diaria de la solucion de 0,2 % / 0,4 % p/v de bimatoprost/ciclosporina A, se mide un aumento del 31 % en el crecimiento del cabello del cuero cabelludo y crecimiento de las cejas.

Ejemplo VIII

Una mujer posmenopausica de 58 anos de edad que padece escasez de cabello difusa en su cuero cabelludo se aplica parches de iontoforesis por la noche sobre las zonas de escasez de cabello difusa (durante un penodo de tiempo especificado) impregnados con una combinacion de solucion de 0,3 %/0,5 % p/v de bimatoprost/ciclosporina. Se mide el crecimiento del cabello semanalmente calculando el porcentaje de zona afectada por cm2 que demuestra crecimiento, medido con el programa informatico AOI mediante fotograffa Canfield. Despues de 60 dfas de aplicacion nocturna de los parches de iontoforesis impregnados con la solucion de 0,3 %/0,5 % p/v de bimatoprost/ciclosporina A, se mide un aumento del 41 % en el crecimiento del cabello del cuero cabelludo.

Ejemplo IX

Un paciente masculino asiatico de 25 anos de edad que padece perdida difusa del cabello utiliza un acondicionador especialmente formulado, disenado para permitir una mejor penetracion folicular de la formulacion de bimatoprost/ciclosporina seguido por aplicacion de una emulsion de 0,3 %/0,5 % p/v de bimatoprost/ciclosporina A a su cabello una vez al dfa con un aplicador de roll-on durante un penodo de 90 dfas. Se mide el crecimiento del cabello semanalmente calculando el porcentaje de zona afectada por cm2 que demuestra crecimiento, medido con el programa informatico AOI mediante fotograffa Canfield. Despues de 90 dfas de aplicacion diaria de la emulsion de 0,3 %/0,5 % p/v de bimatoprost/ciclosporina A, se mide un aumento del 38 % en el crecimiento y volumen del cabello.

Ejemplo X

Una mujer latina de 34 anos de edad, 6 semanas posparto, padece perdida de cabello en parches despues de su parto gemelar. La paciente se aplica champus y acondicionadores a su cabello cada noche (el champu y el acondicionador que se utiliza permiten que el producto/compuesto que sigue a la combinacion de champu/acondicionador se absorba en un mayor grado). Luego aplica un gel que contiene una variedad de penetrantes, asf como 0,2 %/0,4 % p/v de bimatoprost/ciclosporina A a su cabello una vez por la noche durante un penodo de 120 dfas. El gel se aplica sobre el cuero cabelludo y se deja secar. Se mide el crecimiento del cabello semanalmente calculando el porcentaje de zona afectada por cm2 que demuestra crecimiento, medido con el programa informatico AOI mediante fotograffa Canfield. Despues de 120 dfas de aplicacion diaria del gel de 0,2 %/0,4 % p/v de bimatoprost/ciclosporina A, se mide un aumento del 36 % en el crecimiento del cabello.

Ejemplo XI

Un varon caucasico de 32 anos de edad que padece alopecia total se aplica una espuma de 0,1 %/0,3 % p/v de bimatoprost/ciclosporina A a su cuero cabelludo una vez por la manana y una vez por la noche durante un penodo de 120 dfas. La espuma se aplica y se deja sobre la totalidad del cuero cabelludo durante 15 minutos despues del pretratamiento de la piel con un dispositivo vibratorio calentado para aumentar la capacidad del cuero cabelludo para absorber compuestos que siguen a este tipo de regimen de pretratamiento. Despues de 90 dfas de aplicacion de la espuma de 0,1 %/0,3 % p/v de bimatoprost/ciclosporina A, se observa un crecimiento sostenido del cabello del cuero cabelludo. Esto se documenta usando el programa informatico AOI y fotograffa Canfield. De forma adicional, se documenta que el crecimiento del cabello se produce al doble de velocidad que en individuos normales que no estan usando el regimiento anteriormente indicado.

Claims (16)

REIVINDICACIONES

1. Una composicion para hacer crecer el cabello en un paciente en donde la composicion comprende 0,03 % p/v de bimatoprost y 0,05 % p/v de ciclosporina A.

2. La composicion de la reivindicacion 1 en donde la composicion incluye ademas etanol, propilenglicol, D-limoneno y agua.

3. La composicion de la reivindicacion 2 en donde la composicion incluye ademas al menos un excipiente seleccionado del grupo que consiste en Transcutol®, Labrasol®, cineol, Cremophor RH-40, DMSO, acido oleico, miristato de isopropilo, propilenglicol, oxibutinina y monolaurato.

4. Las composiciones de la reivindicacion 3 en donde la composicion esta en forma de uno seleccionado del grupo que consiste en un lfquido, suspension, emulsion, emulsion inversa, microemulsion, espuma, semisolido, solucion, dispersion, capsula, gel, locion, crema, pasta y cera.

5. La composicion de la reivindicacion 2 en donde la composicion se selecciona del grupo que consiste en una solucion, espuma, emulsion y gel.

6. La composicion de la reivindicacion 5 en donde la composicion se aplica mediante un aplicador.

7. La composicion de la reivindicacion 3 en donde la composicion consiste practicamente en 0,03 % de bimatoprost, 0,05 % de ciclosporina A, etanol, propilenglicol, D-limoneno y agua.

8. La composicion de la reivindicacion 7 en donde la composicion incluye ademas transcutol.

9. Una composicion que comprende 0,03 % p/v de bimatoprost y 0,05 % p/v de ciclosporina A, para usar en un metodo para tratar la perdida del cabello en un paciente.

10. La composicion de la reivindicacion 9 en donde el metodo incluye aplicar una espuma de 0,03 % p/v bimatoprost y 0,05 % p/v ciclosporina A al menos una vez al dfa al cuero cabelludo.

11. La composicion de la reivindicacion 10 en donde, antes de la aplicacion de la espuma, el cuero cabelludo se trata previamente mediante la aplicacion al cuero cabelludo de al menos uno de los siguientes seleccionado del grupo que consiste en calor, estimulacion mecanica, sonoforesis, vibracion y masaje.

12. La composicion de la reivindicacion 11 en donde la composicion se aplica sobre el cuero cabelludo mediante la aplicacion de un aplicador provisto de roll-on.

13. Un metodo no terapeutico para hacer crecer cabello en un cuero cabelludo humano que comprende la aplicacion de una composicion que comprende 0,03 % p/v de bimatoprost y 0,05 % p/v de ciclosporina A.

14. El metodo no terapeutico de la reivindicacion 13 en donde la composicion se aplica al menos una vez al dfa.

15. El metodo no terapeutico de la reivindicacion 13 en donde la composicion se aplica como una seleccionada del grupo que consiste en un champu y acondicionador.

16. El metodo no terapeutico de la reivindicacion 13 en donde la composicion esta en forma de lfquido, suspension, emulsion, emulsion inversa, microemulsion, espuma, semisolido, solucion, dispersion, capsula, gel, locion, crema, pasta, y cera.