ES2624204T3 - Método para recoger material celular y montaje para realizar dicho método - Google Patents

Método para recoger material celular y montaje para realizar dicho método Download PDF

Info

Publication number
ES2624204T3
ES2624204T3 ES12778817.2T ES12778817T ES2624204T3 ES 2624204 T3 ES2624204 T3 ES 2624204T3 ES 12778817 T ES12778817 T ES 12778817T ES 2624204 T3 ES2624204 T3 ES 2624204T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
collection tool
collection
tool
culture plate
electrical capacity
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES12778817.2T
Other languages
English (en)
Inventor
Jetze Botma
Martijn Kleefstra
Martijn Xander BERNTSEN
Tino Walter Van Der Zee
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
BD Kiestra BV
Original Assignee
BD Kiestra BV
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by BD Kiestra BV filed Critical BD Kiestra BV
Application granted granted Critical
Publication of ES2624204T3 publication Critical patent/ES2624204T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M33/00Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus
    • C12M33/02Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus by impregnation, e.g. using swabs or loops
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M33/00Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M47/00Means for after-treatment of the produced biomass or of the fermentation or metabolic products, e.g. storage of biomass
    • C12M47/02Separating microorganisms from the culture medium; Concentration of biomass
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N35/00Automatic analysis not limited to methods or materials provided for in any single one of groups G01N1/00 - G01N33/00; Handling materials therefor
    • G01N35/10Devices for transferring samples or any liquids to, in, or from, the analysis apparatus, e.g. suction devices, injection devices
    • G01N35/1009Characterised by arrangements for controlling the aspiration or dispense of liquids
    • G01N35/1011Control of the position or alignment of the transfer device

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Investigating Or Analyzing Materials By The Use Of Electric Means (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Método para recoger material celular desde la superficie de un medio de cultivo en una placa de cultivo, dicho método posteriormente comprende las etapas de: - desplazar una herramienta de recolección hacia el material celular, - determinar el contacto entre la herramienta de recolección y el material celular, y - retirar la herramienta de recolección del material celular recogiendo de esta manera material celular, en el que la etapa de determinación de contacto entre la herramienta de recolección y el material celular se realiza al llevar a cabo mediciones capacitivas.

Description

5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
DESCRIPCION
Metodo para recoger material celular y montaje para realizar dicho metodo Antecedentes de la invencion
La invencion se refiere a un metodo para recoger material celular desde la superficie de un medio de cultivo en una placa de cultivo.
Se conoce dicho metodo del documento JP-A-62273429. Este metodo conocido se relaciona con la obtencion de una profundidad de aguja constante utilizando una aguja de trasplante como un electrodo y detectando el contacto entre la aguja de trasplante y un medio de cultivo por una senal electrica. Se coloca un electrodo sobre el medio de cultivo y luego se baja la aguja de trasplante al medio de cultivo. Un suministro de energfa y una resistencia variable se conectan al electrodo y a la aguja de trasplante mediante un cable conductor. Dado que el medio de cultivo tiene un alto contenido de humedad, se puede detectar la presencia o ausencia de conduccion por un detector y se puede cambiar un umbral de deteccion al ajustar la resistencia variable. Un problema que podna surgir cuando se utiliza este metodo conocido es que, aunque se puede obtener una profundidad de aguja constante, a veces parece que la aguja de trasplante ha recogido una mezcla de material celular y de medio de cultivo por debajo del material celular. Adicionalmente, el suministro de energfa conectado al electrodo y a la aguja de transferencia produce una corriente a traves del medio de cultivo que puede ser perjudicial para el material celular en el medio de cultivo. Adicionalmente, al cambiar hacia una placa de cultivo diferente, el electrodo se debe reemplazar o limpiar a profundidad para evitar contaminacion cruzada.
El documento EP1502649 divulga un aparato y metodo de recoleccion de celulas en el que un software de procesamiento de imagenes identifica las ubicaciones de las colonias de celulas animales que se van a recolectar.
Resumen de la invencion
Es un objeto de la invencion proporcionar un metodo para recoger material celular desde la superficie de un medio de cultivo en una placa de cultivo en la que el material celular se puede recoger de forma selectiva.
Es un objeto adicional de la invencion proporcionar un metodo para recoger material celular que no es perjudicial para el material celular.
Es un objeto adicional de la invencion proporcionar un metodo para recoger material celular utilizando menos piezas del dispositivo cuando sea posible.
Por lo menos uno de estos objetos o por lo menos una parte de los mismos se logra mediante la invencion al proporcionar un metodo para recoger material celular desde la superficie de un medio de cultivo en una placa de cultivo, dicho metodo posteriormente comprende las etapas de:
- desplazar una herramienta de recoleccion hacia el material celular,
- determinar el contacto entre la herramienta de recoleccion y el material celular, y
- retirar la herramienta de recoleccion desde el material celular recogiendo de esta manera material celular, en el que la etapa de determinacion de contacto entre la herramienta de recoleccion y el material celular se realiza al llevar a cabo mediciones capacitivas. Dado que el contacto se determina al realizar mediciones capacitivas, no es necesario que ningun electrodo adicional se ponga directamente en contacto con el medio de cultivo para determinar el contacto entre la herramienta de recoleccion y el material celular y/o el medio de cultivo. Adicionalmente, al utilizar mediciones capacitivas, el contacto superficial es suficiente para determinar el contacto de tal manera que la herramienta de recoleccion no necesite penetrar en absoluto en el material celular para establecer contacto, lo que hace posible recoger solo el material celular. Adicionalmente, los niveles de voltaje necesarios para efectuar dicha medicion son suficientemente bajos para no inducir ningun efecto nocivo sobre el crecimiento del material celular.
Se proporciona un metodo muy exacto de acuerdo con la invencion en este caso el metodo comprende las etapas de:
- colocar la placa de cultivo sobre un soporte elaborado de material electricamente conductor;
- utilizar una placa de cultivo elaborada de material electricamente aislante;
- utilizar una herramienta de recoleccion elaborada de material electricamente conductor;
- colocar la herramienta de recoleccion en una posicion inicial muy por encima de la placa de cultivo;
- medir la capacidad electrica inicial del sistema compuesto de herramienta de recoleccion y soporte en la posicion inicial de la herramienta de recoleccion;
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
- bajar la herramienta de recoleccion desde la posicion inicial en una direccion hacia la placa de cultivo;
- medir la capacidad electrica del sistema compuesto de herramienta de recoleccion y soporte durante la bajada de la herramienta de recoleccion.
Preferiblemente el metodo comprende adicionalmente la etapa de detener la bajada de la herramienta de recoleccion en una posicion en contacto cuando la capacidad medida se desvfa de la capacidad electrica inicial. Esto evita que la herramienta de recoleccion se baje demasiado, de tal manera que se pueda evitar recoger el medio de cultivo que esta presente por debajo del material celular. Preferiblemente el metodo comprende adicionalmente la etapa de medir la posicion de contacto de la herramienta de recoleccion cuando la capacidad medida se desvfa de la capacidad electrica inicial.
En una realizacion ventajosa de un metodo de acuerdo con la invencion el metodo comprende adicionalmente las etapas de retirar la herramienta de recoleccion una distancia predeterminada lejos de la posicion de contacto hacia una posicion de verificacion y mantener dicha herramienta de recoleccion en dicha posicion de verificacion y de medicion de la capacidad electrica del sistema compuesto de herramienta de recoleccion y soporte en la posicion de verificacion. En algunos casos el material celular que se va a recoger es muy pegajoso o viscoso. Cuando se retira la herramienta de recoleccion despues de hacer contacto con dicho material celular lejos del material celular algunas veces una hebra delgada permanece en contacto entre la herramienta de recoleccion y el material celular en la placa de cultivo. Esta delgada hebra se puede romper y posiblemente contaminar el dispositivo de herramienta de recoleccion. AL medir la capacidad electrica en la posicion de verificacion, que por ejemplo puede ser de unos pocos milfmetros es posible que la placa de cultivo, detecte la presencia de dicha hebra de tal manera que se puedan tomar las acciones apropiadas. Especialmente cuando en una realizacion de un metodo de acuerdo con la invencion en el que se proporciona un soporte de herramienta de recoleccion para mantener de forma desmontable una herramienta de recoleccion, es posible que dicho soporte de herramienta de recoleccion adaptado para agarrar y liberar una herramienta de recoleccion automatice dicha accion en caso de deteccion de una hebra restante. Preferiblemente el metodo entonces comprende la etapa de liberar la herramienta de recoleccion desde el soporte de herramienta de recoleccion en el caso de que la capacidad electrica medida en la posicion de verificacion difiera de la capacidad electrica inicial de tal manera que la herramienta de recoleccion cae en la placa de cultivo, y opcionalmente la etapa de desechar la placa de cultivo. Estas etapas se pueden realizar facilmente en una forma automatica de tal manera que no se necesita una intervencion humana que consuma mucho tiempo para desechar la placa de cultivo.
En una realizacion de un metodo de acuerdo con la invencion en el que el metodo comprende la etapa de proporcionar como un soporte elaborado de material electricamente conductor un elemento anular de material electricamente conductor y la etapa de interponer un elemento o capa de material electricamente aislante transparente entre el soporte y la placa de cultivo, es posible proporcionar iluminacion desde la parte inferior de la placa de cultivo para ayudar en la determinacion de la ubicacion del material celular en la placa de cultivo.
Preferiblemente el metodo comprende la etapa de utilizar una herramienta de recoleccion elaborada de un material plastico electricamente conductor, de tal manera que la herramienta de recoleccion se puede desechar. Aunque es posible limpiar profundamente una herramienta de recoleccion despues de que se ha recogido material celular y antes de que se utilice para recoger adicionalmente material celular, de acuerdo con una realizacion de un metodo de acuerdo con la invencion es preferible utilizar una nueva herramienta de recoleccion cada vez que se va a recolectar material celular desde la superficie de un medio de cultivo en una placa de cultivo. De esta forma se puede realizar una forma de recoleccion confiable, economica y rapida del material celular desde una placa de cultivo.
La invencion tambien se refiere a un montaje para realizar el metodo para recoger material celular desde la superficie de un medio de cultivo en una placa de cultivo como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, dicho montaje comprende:
- un dispositivo de herramienta de recoleccion comprende un soporte de herramienta de recoleccion de material electricamente conductor, dicho soporte de herramienta de recoleccion se monta al dispositivo de herramienta de recoleccion en una forma electricamente aislada, dicho soporte de herramienta de recoleccion mantiene una herramienta de recoleccion elaborada de material electricamente conductor, dicha herramienta de recoleccion es sujetada por el soporte de herramienta de recoleccion en una forma electricamente conductora;
- una placa de cultivo elaborada de material electricamente aislante;
- un soporte elaborado de material electricamente conductor para soportar la placa de cultivo;
- un dispositivo de posicionamiento para posicionar la herramienta de recoleccion en una posicion inicial por encima de la placa de cultivo y para bajar y elevar la herramienta de recoleccion hacia y lejos de la placa de cultivo, respectivamente;
- un controlador para controlar el movimiento del dispositivo de posicionamiento;
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
- un dispositivo de medicion para llevar a cabo mediciones capacitivas para determinar la capacidad electrica del sistema compuesto de herramienta de recoleccion y soporte, dicho dispositivo de medicion adaptado para determinar la capacidad electrica inicial del sistema compuesto de herramienta de recoleccion y soporte en la posicion inicial de la herramienta de recoleccion y para proporcionar una senal que representa la capacidad electrica inicial en el controlador, dicho dispositivo de medicion se adapta para determinar la capacidad electrica del sistema compuesto de herramienta de recoleccion y soporte al bajar la herramienta de recoleccion hacia la placa de cultivo y proporcionar una senal que representa la capacidad electrica medida al controlador;
- dicho controlador comprende un comparador para realizar una comparacion de la capacidad electrica durante la bajada de la herramienta de recoleccion con la capacidad electrica inicial y para proporcionar una senal de comparacion indicadora de dicha comparacion, dicho controlador que controla el movimiento del dispositivo de posicionamiento por lo menos se basa en la senal de comparacion.
Se describen las realizaciones preferidas del montaje de acuerdo con la invencion en las reivindicaciones de montaje dependientes.
Otros objetos, aspectos, efectos y detalles de la invencion se describen en la siguiente descripcion detallada de una variedad de realizaciones de ejemplo, con referencia a los dibujos.
Breve descripcion de los dibujos
La Figura 1 es una representacion esquematica de un montaje para realizar un metodo para recoger material celular desde la superficie de un medio de cultivo en una placa de cultivo de acuerdo con la invencion.
Descripcion detallada
La Figura 1 es una representacion esquematica de un montaje para realizar un metodo para recoger material celular desde la superficie de un medio de cultivo en una placa de cultivo de acuerdo con la invencion.
El montaje comprende un dispositivo 1 de herramienta de recoleccion que comprende un soporte 2 de herramienta de recoleccion de material electricamente conductor. El soporte 2 de herramienta de recoleccion se monta al dispositivo 1 de herramienta de recoleccion en una forma electricamente aislada. El soporte 2 de herramienta de recoleccion se adapta para mantener una herramienta 3 de recoleccion elaborada de material electricamente conductor en una forma electricamente conductora. La herramienta 3 de recoleccion se puede elaborar de un metal pero tambien se puede elaborar de un material plastico electricamente conductor, por ejemplo un plastico que comprende carbono.
Adicionalmente el montaje de acuerdo con la invencion comprende una placa 4 de cultivo elaborada de material electricamente aislante, tal como vidrio o un plastico electricamente aislante. La placa 4 de cultivo contiene un medio 11 de cultivo sobre el cual esta presente el material 12 celular tal como una colonia 12 de bacterias. La placa 4 de cultivo esta apoyada sobre un soporte 5 elaborado de material electricamente conductor. La placa 4 de cultivo se puede apoyar directamente en el soporte 5 electricamente conductor o indirectamente al interponer un elemento o capa de material electricamente aislante entre la placa 4 de cultivo y el soporte 5. En la realizacion mostrada en la Figura 1 el soporte 5 es un elemento anular de material electricamente conductor, que rodea una capa 6 de material electricamente aislante transparente en el que se puede soportar la placa 4 de cultivo. De esta manera es posible proporcionar iluminacion desde la parte inferior de la placa 4 de cultivo para ayudar a determinar la ubicacion de material celular en la placa 4 de cultivo. Tenga en cuenta que la capa 6, en una realizacion alternativa tambien se puede colocar en la parte superior del soporte 5 anular.
Se dispone un dispositivo 7 de posicionamiento para posicionar la herramienta 3 de recoleccion (y el soporte 2 de herramienta de recoleccion) en una posicion inicial por encima de la placa 4 de cultivo. Este dispositivo 7 de posicionamiento puede bajar o elevar la herramienta 3 de recoleccion hacia y lejos de la placa de cultivo, respectivamente, bajo el control de un controlador, tal como un microprocesador 8 o cualesquier otros medios adecuados para controlar la operacion del dispositivo de posicionamiento. Adicionalmente el dispositivo 7 de posicionamiento puede desplazar la herramienta 3 de recoleccion en un plano paralelo al plano de la placa 4 de cultivo. Los desplazamientos se indican de forma esquematica en la Figura 1 por medio de flechas de doble cabeza XY y Z. El microprocesador 8 se conecta al dispositivo 7 de posicionamiento por medio de una lmea 9 de senal con el fin de controlar apropiadamente el dispositivo 7 de posicionamiento.
El montaje mostrado en la Figura 1 comprende adicionalmente un dispositivo 10 de medicion para detectar o medir cuando la herramienta 3 de recoleccion hace contacto con el material 12 celular o el medio 11 de cultivo. El dispositivo 10 de medicion puede llevar a cabo mediciones capacitivas para determinar la capacidad electrica del sistema compuesto de herramienta 3 de recoleccion y soporte 5. En la realizacion mostrada en la Figura 1 el dispositivo 10 de medicion se compone de un circuito 18 oscilador, que tambien funciona como una fuente de voltaje alternante, que se conecta con un conductor 14 electrico al soporte 2 de herramienta de recoleccion y con otro conductor 15 electrico al soporte 5 anular. En la realizacion el circuito 18 oscilador proporciona un voltaje que tiene un valor entre
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
aproximadamente 1.25 y aproximadamente 3.5 V, que tiene una frecuencia fija que se puede escoger en el rango entre 100 y 150 kHz. El voltaje alternante V proporcionado es un voltaje en diente de sierra como se muestra esquematicamente en la grafica en la Figura 1.
El circuito 18 oscilador por ejemplo puede comprender un oscilador multivibrador de amplificador operacional. La frecuencia de oscilacion del circuito de oscilacion depende del valor de la capacidad electrica del circuito de medicion compuesto de conductor 14 electrico, soporte 2 de herramienta de recoleccion, herramienta 3 de recoleccion, material celular y/o medio 11 de cultivo, placa 4 de cultivo, elemento 6 o capa de aislamiento, soporte anular y conductor 15 electrico. En este caso la herramienta 3 de recoleccion se separa del material 12 celular (mostrado en lmeas solidas en la Figura 1) la capacidad electrica se determina adicionalmente por la columna de aire presente entre la herramienta 3 de recoleccion y el material 12 celular y/o medio 11 de cultivo. Esta columna de aire no esta presente cuando la herramienta 3' de recoleccion esta en contacto con el material 12 celular y/o medio 11 de cultivo, como se muestra con lmeas discontinuas en la Figura 1. El circuito 18 oscilador se conecta al microprocesador 8 a traves de una lmea 19 de medicion. El microprocesador comprende en la realizacion mostrada una pantalla 20 para visualizar los resultados de medicion.
De esta manera el dispositivo 10 de medicion puede determinar la capacidad electrica inicial del sistema compuesto de entre otras cosas la herramienta 3 de recoleccion y soporte 5 en la posicion inicial de la herramienta 3 de recoleccion, cuya posicion inicial esta muy por encima de la placa 4 de cultivo como se muestra en las lmeas solidas en la Figura 1. En esta posicion inicial el dispositivo 10 de medicion proporciona una senal que representa la capacidad electrica inicial al microprocesador 8. En la presente realizacion esta senal que representa la capacidad electrica inicial es la frecuencia de oscilacion del circuito 18 oscilador, cuya frecuencia se puede mostrar sobre la pantalla.
Al bajar la herramienta 3 de recoleccion hacia la placa 4 de cultivo el dispositivo 10 de medicion continua determinando la capacidad electrica (es decir la frecuencia de oscilacion) y proporciona de forma continua una senal que representa la frecuencia de oscilacion al microprocesador 8. El microprocesador comprende un comparador 21 para realizar una comparacion de la capacidad electrica (es decir la frecuencia de oscilacion) durante la bajada de la herramienta 3 de recoleccion con la capacidad electrica inicial (es decir la frecuencia de oscilacion inicial). En el momento en el que la herramienta 3' de recoleccion hace contacto con el material 12 celular cambia la capacidad del sistema, que tiene el resultado inmediato de que cambia la frecuencia de oscilacion del circuito de oscilacion. El comparador 21 del microprocesador 8 detecta este cambio y proporciona una senal de comparacion indicadora de este cambio (o comparacion), cuya senal de comparacion se utiliza por el microprocesador para controlar el movimiento del dispositivo 7 de posicionamiento. En este caso la frecuencia de oscilacion (es decir la capacidad) medida durante la bajada de la herramienta 3 de recoleccion se desvfa de la frecuencia de oscilacion inicial, por ejemplo cuando la herramienta 3 de recoleccion hace contacto con el material celular, el controlador inmediatamente detiene la bajada de la herramienta 3 de recoleccion basada en la senal de comparacion proporcionada por el comparador 21. De esta forma se garantiza que la herramienta de recoleccion no penetre el material celular y solo el material celular este en contacto con la herramienta de recoleccion.
En el caso de que la herramienta 3' de recoleccion contacte el material 12 celular, la corriente que fluye a traves del circuito de medicion, y por lo tanto tambien a traves del material celular, es inferior a 0.1 mA, lo cual no es perjudicial para el crecimiento del material celular. La corriente que fluye a traves del circuito de medicion esta indicada esquematicamente en la Figura 1 por la letra A.
Despues que la herramienta 3 de recoleccion ha hecho contacto con el material 12 celular y el microprocesador ha controlado el dispositivo 7 de posicionamiento para detener el movimiento de la herramienta de recoleccion en la direccion de la placa de cultivo, el microprocesador 8 controla el dispositivo de posicionamiento para invertir el movimiento de la herramienta 3 de recoleccion, es decir para retirar la herramienta 3 de recoleccion del material 12 celular.
Aunque la herramienta 3 de recoleccion con el material celular llevado en esta, se puede transferir directamente para procesamiento adicional, como se conoce en la tecnica, en la realizacion actualmente mas preferida de la invencion, el microprocesador 8 controla el movimiento inverso del dispositivo 7 de posicionamiento de tal manera que la herramienta 3 de recoleccion se retira primero a una distancia predeterminada lejos de la posicion de contacto hacia una posicion de verificacion (intermedia a la posicion de inicio y la posicion de contacto) y la mantiene en dicha posicion de verificacion. En esta posicion de verificacion se mide la frecuencia de oscilacion (es decir la capacidad electrica) del circuito de medicion, que contiene la herramienta 3 de recoleccion y el soporte 5 anular. En el caso de que en esta posicion de verificacion la frecuencia de oscilacion determinada se desvfe de la frecuencia de oscilacion inicial (segun se determina por el comparador 21) el microprocesador 8 proporciona una senal de advertencia que indica que podna haber una hebra de material celular todavfa conectando la herramienta 3 de recoleccion y el material 12 celular sobre el medio de cultivo. Esta senal de advertencia se puede proporcionar a un operador que puede tomar las acciones apropiadas.
Sin embargo, puesto que se desea automatizar la recoleccion y transferencia de material celular tanto como sea posible en la realizacion actualmente mas preferida se utiliza un soporte 2 de herramienta de recoleccion que se adapta para mantener de forma desmontable la herramienta 3 de recoleccion. De esta manera el soporte 2 de herramienta de recoleccion se adapta para agarrar y liberar la herramienta 3 de recoleccion, por ejemplo Por medio de dedos
5
10
15
20
25
30
desplazables o cualquier otro medio adecuado. De esta manera, la senal de advertencia se puede utilizar para liberar la herramienta 3 de recoleccion del soporte 2 de herramienta de recoleccion en caso de que la frecuencia de oscilacion (es decir la capacidad electrica) medida en la posicion de verificacion difiera de la frecuencia de oscilacion inicial (es decir la capacidad electrica inicial) de tal manera que la herramienta 3 de recoleccion cae en la placa 4 de cultivo. La placa 4 de cultivo con la herramienta 3 de recoleccion que ha cafdo dentro de la misma se puede desechar por cualquier medio automatizado adecuado, que sea conocido per se. Adicionalmente cuando el soporte de herramienta de recoleccion se adapta para mantener de forma desmontable la herramienta de recoleccion se puede utilizar una nueva herramienta de recoleccion cada vez que se va a recolectar material celular desde la superficie de un medio de cultivo en una placa de cultivo.
El dispositivo de medicion descrito anteriormente es uno de los muchos dispositivos de medicion que se pueden utilizar para medir el cambio en la capacidad cuando durante el movimiento desde la posicion inicial hacia la placa de cultivo la herramienta de recoleccion hace contacto con el material celular. La presente invencion no esta restringida a un dispositivo espedfico, sino que se puede utilizar cualquier dispositivo de medicion conocido por el experto en la tecnica dentro de la invencion. Adicionalmente el dispositivo de posicionamiento no se describe en detalle debido a que tambien para este dispositivo de posicionamiento se puede utilizar cualquier dispositivo conocido adecuado para desplazar la herramienta de recoleccion en por lo menos la dimension vertical dentro de la invencion.
En consecuencia el montaje que se describio anteriormente en general realiza un metodo para recoger material celular desde la superficie de un medio de cultivo en una placa de cultivo, cuyo metodo posteriormente comprende las etapas de desplazar una herramienta de recoleccion hacia el material celular, determinar el contacto entre la herramienta de recoleccion y el material celular, y retirar la herramienta de recoleccion desde el material celular recogiendo de esta manera material celular, en el que la etapa de determinacion de contacto entre la herramienta de recoleccion y el material celular se realiza al llevar a cabo mediciones capacitivas. La bajada de la herramienta de recoleccion se detiene en una posicion en contacto cuando la capacidad medida se desvfa de la capacidad electrica inicial. En este caso se mide la posicion de contacto de la herramienta de recoleccion, esta posicion determinada tambien se puede utilizar mediante el microprocesador para controlar la operacion del dispositivo de posicionamiento para mover la herramienta de recoleccion. Por ejemplo la herramienta de recoleccion se puede desplazar a diferentes velocidades, por ejemplo una mayor velocidad que parte desde la posicion inicial y una velocidad reducida cuando la herramienta de recoleccion alcanza la posicion de contacto de un ciclo previo. Esto es posible ya que se puede asumir que en general esta nivelada la superficie del medio de cultivo.

Claims (15)

  1. 5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    50
    55
    60
    65
    Reivindicaciones
    1. Metodo para recoger material celular desde la superficie de un medio de cultivo en una placa de cultivo, dicho metodo posteriormente comprende las etapas de:
    - desplazar una herramienta de recoleccion hacia el material celular,
    - determinar el contacto entre la herramienta de recoleccion y el material celular,
    y
    - retirar la herramienta de recoleccion del material celular recogiendo de esta manera material celular, en el que la etapa de determinacion de contacto entre la herramienta de recoleccion y el material celular se realiza al llevar a cabo mediciones capacitivas.
  2. 2. Metodo como se reivindica en la reivindicacion 1, en el que el metodo comprende adicionalmente las etapas de:
    - colocar la placa de cultivo sobre un soporte elaborado de material electricamente conductor;
    - utilizar una placa de cultivo elaborada de material electricamente aislante;
    - utilizar una herramienta de recoleccion elaborada de material electricamente conductor;
    - colocar la herramienta de recoleccion en una posicion inicial muy por encima de la placa de cultivo;
    - medir la capacidad electrica inicial del sistema compuesto de herramienta de recoleccion y soporte en la posicion inicial de la herramienta de recoleccion;
    - bajar la herramienta de recoleccion desde la posicion inicial en una direccion hacia la placa de cultivo;
    - medir la capacidad electrica del sistema compuesto de herramienta de recoleccion y soporte durante el descenso de la herramienta de recoleccion.
  3. 3. Metodo como se reivindica en la reivindicacion 2, en el que el metodo comprende adicionalmente la etapa de detener la bajada de la herramienta de recoleccion en una posicion en contacto cuando la capacidad medida se desvfa de la capacidad electrica inicial.
  4. 4. Metodo como se reivindica en la reivindicacion 3, en el que el metodo comprende adicionalmente la etapa de medir la posicion de contacto de la herramienta de recoleccion cuando la capacidad medida se desvfa de la capacidad electrica inicial.
  5. 5. Metodo como se reivindica en la reivindicacion 4, en el que el metodo comprende adicionalmente las etapas de retirar la herramienta de recoleccion una distancia predeterminada lejos de la posicion de contacto hacia una posicion de verificacion y mantener dicha herramienta de recoleccion en dicha posicion de verificacion y medir la capacidad electrica del sistema compuesto de herramienta de recoleccion y soporte en la posicion de verificacion.
  6. 6. Metodo como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el metodo comprende adicionalmente proporcionar un soporte de herramienta de recoleccion para mantener de forma desmontable una herramienta de recoleccion, dicho soporte de herramienta de recoleccion se adapta para agarrar y liberar una herramienta de recoleccion.
  7. 7. Metodo como se reivindica en la reivindicacion 5 y 6, en el que el metodo comprende la etapa de liberar la herramienta de recoleccion desde el soporte de herramienta de recoleccion en este caso la capacidad electrica medida en la posicion de verificacion difiere de la capacidad electrica inicial de tal manera que la herramienta de recoleccion cae en la placa de cultivo, y opcionalmente la etapa de desechar la placa de cultivo.
  8. 8. Metodo como se reivindica en la reivindicacion 2 o una cualquiera de las reivindicaciones 3 a 7 cuando dependen de la reivindicacion 2, en el que el metodo comprende la etapa de proporcionar como un soporte elaborado de material electricamente conductor un elemento anular de material electricamente conductor y la etapa de interponer un elemento o capa de material electricamente aislante transparente entre el soporte y la placa de cultivo.
  9. 9. Metodo como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el metodo comprende la etapa de utilizar una herramienta de recoleccion elaborada de un material plastico electricamente conductor.
  10. 10. Metodo como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el metodo comprende la etapa de utilizar una nueva herramienta de recoleccion cada vez que se va a recolectar material celular desde la superficie de un medio de cultivo en una placa de cultivo.
    5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
  11. 11. Montaje para realizar el metodo para recoger material celular desde la superficie de un medio de cultivo en una placa de cultivo como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, dicho montaje comprende:
    - un dispositivo de herramienta de recoleccion que comprende un soporte de herramienta de recoleccion de material electricamente conductor, dicho soporte de herramienta de recoleccion se monta al dispositivo de herramienta de recoleccion en una forma electricamente aislada, dicho soporte de herramienta de recoleccion mantiene una herramienta de recoleccion elaborada de material electricamente conductor, dicha herramienta de recoleccion es sostenida por el soporte de herramienta de recoleccion en una forma electricamente conductora;
    - una placa de cultivo elaborada de material electricamente aislante;
    - un soporte elaborado de material electricamente conductor para soportar la placa de cultivo;
    - un dispositivo de posicionamiento para posicionar la herramienta de recoleccion en una posicion inicial por encima de la placa de cultivo y para bajar y elevar la herramienta de recoleccion hacia y lejos de la placa de cultivo, respectivamente;
    - un controlador para controlar el movimiento del dispositivo de posicionamiento;
    - un dispositivo de medicion para llevar a cabo mediciones capacitivas para determinar la capacidad electrica del sistema compuesto de herramienta de recoleccion y soporte, dicho dispositivo de medicion adaptado para determinar la capacidad electrica inicial del sistema compuesto de herramienta de recoleccion y soporte en la posicion inicial de la herramienta de recoleccion y proporcionar una senal que representa la capacidad electrica inicial para el controlador, dicho dispositivo de medicion se adapta para determinar la capacidad electrica del sistema compuesto de herramienta de recoleccion y soporte al bajar la herramienta de recoleccion hacia la placa de cultivo y proporcionar una senal que representa la capacidad electrica medida para el controlador;
    - dicho controlador comprende un comparador para realizar una comparacion de la capacidad electrica durante la bajada de la herramienta de recoleccion con la capacidad electrica inicial y para proporcionar una senal de comparacion indicadora de dicha comparacion, dicho controlador que controla el movimiento del dispositivo de posicionamiento por lo menos se basa en la senal de comparacion.
  12. 12. Montaje como se reivindica en la reivindicacion 11, en el que el controlador se adapta para detener la bajada de la herramienta de recoleccion cuando la capacidad medida durante la bajada de la herramienta de recoleccion se desvfa de la capacidad electrica inicial.
  13. 13. Montaje como se reivindica en la reivindicacion 11 o 12, en el que el soporte de herramienta de recoleccion se adapta para mantener de forma desmontable una herramienta de recoleccion.
  14. 14. Montaje como se reivindica en la reivindicacion 11, 12 o 13, en el que el soporte es un elemento anular de material electricamente conductor, y en el que un elemento o capa de material electricamente aislante transparente se interpone entre el soporte y la placa de cultivo.
  15. 15. Montaje como se reivindica en la reivindicacion 11, 12, 13 o 14, en el que la herramienta de recoleccion se elabora de un material plastico electricamente conductor.
ES12778817.2T 2011-09-29 2012-09-28 Método para recoger material celular y montaje para realizar dicho método Active ES2624204T3 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP11183251 2011-09-29
EP11183251.5A EP2574660B1 (en) 2011-09-29 2011-09-29 Method for picking up cell material and assembly for performing said method
PCT/NL2012/050681 WO2013048249A1 (en) 2011-09-29 2012-09-28 Method for picking up cell material and assembly for performing said method

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2624204T3 true ES2624204T3 (es) 2017-07-13

Family

ID=47080769

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES11183251T Active ES2785222T3 (es) 2011-09-29 2011-09-29 Método para recolectar material celular y conjunto para llevar a cabo dicho método
ES12778817.2T Active ES2624204T3 (es) 2011-09-29 2012-09-28 Método para recoger material celular y montaje para realizar dicho método

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES11183251T Active ES2785222T3 (es) 2011-09-29 2011-09-29 Método para recolectar material celular y conjunto para llevar a cabo dicho método

Country Status (9)

Country Link
US (1) US9677044B2 (es)
EP (2) EP2574660B1 (es)
JP (1) JP6101697B2 (es)
CN (1) CN103958661B (es)
AU (1) AU2012316865B2 (es)
BR (1) BR112014007672B1 (es)
CA (1) CA2849870C (es)
ES (2) ES2785222T3 (es)
WO (1) WO2013048249A1 (es)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10197335B2 (en) 2012-10-15 2019-02-05 Apple Inc. Inline melt control via RF power
US10072927B2 (en) 2016-01-07 2018-09-11 Rarecyte, Inc. Detecting a substrate
US11054346B2 (en) * 2013-04-11 2021-07-06 Rarecyte, Inc. Detecting a substrate
CN205907259U (zh) * 2015-03-30 2017-01-25 Bd科斯特公司 用于从培养介质收集样本的设备
CA2981741C (en) * 2015-04-08 2023-03-14 Becton, Dickinson And Company Device and apparatus for collecting microbial growth from a semi-solid surface
KR20230169444A (ko) * 2015-05-28 2023-12-15 비디 키에스트라 비.브이. 식별 및 항생제 감수성 시험용 미생물 샘플을 수득 및 준비하기 위한 자동화된 방법 및 시스템
US11291986B2 (en) * 2017-02-24 2022-04-05 Becton, Dickinson And Company Unique sample transfer device for an automated pipettor for processing a variety of clinical microbiological specimens
EP3986121A4 (en) * 2019-06-20 2023-07-05 The Trustees of the University of Pennsylvania SYSTEMS AND METHODS FOR AUTOMATED IMAGING AND MANIPULATION OF SMALL ANIMALS
US20220325225A1 (en) 2019-06-27 2022-10-13 Bd Kiestra B.V. Method and system for locating a bacterial colony on a culture plate
IT202000008416A1 (it) * 2020-04-20 2021-10-20 Copan Italia Spa Utensile per la distribuzione di un campione di materiale biologico o microbiologico e processo di distribuzione associato
IT202000008410A1 (it) * 2020-04-20 2021-10-20 Copan Italia Spa Utensile per la distribuzione di un campione di materiale biologico o microbiologico e processo di distribuzione associato

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4613573A (en) 1982-05-20 1986-09-23 Hitachi, Ltd. Automatic bacterial colony transfer apparatus
JPS62273429A (ja) 1986-05-22 1987-11-27 Hitachi Electronics Eng Co Ltd 移殖針の制御方式
JPH069519B2 (ja) 1987-09-09 1994-02-09 株式会社神戸製鋼所 動物および植物細胞量の計測方法
EP0277789B1 (en) * 1987-02-04 1992-05-20 Kabushiki Kaisha Kobe Seiko Sho Method for measuring biomass
US5648727A (en) 1995-10-24 1997-07-15 Dpc Cirrus Inc. Capacitive level sensing pipette probe
GB9624927D0 (en) 1996-11-29 1997-01-15 Oxford Glycosciences Uk Ltd Gels and their use
WO2003067904A2 (en) 2002-02-06 2003-08-14 University Of North Carolina At Chapel Hill High-throughput cell identification and isolation method and apparatus
US7776584B2 (en) * 2003-08-01 2010-08-17 Genetix Limited Animal cell colony picking apparatus and method
FR2867279B1 (fr) * 2004-03-05 2006-05-19 Nanotec Solution Procede et dispositif pour mesurer et caracteriser une biomasse, application a une mesure en ligne de donnees de biomasse dans un processus de fermentation, et procede de pilotage associe
US6989679B2 (en) * 2004-06-03 2006-01-24 General Electric Company Non-contact capacitive sensor and cable with dual layer active shield
DE102006034245C5 (de) 2006-07-21 2014-05-28 Stratec Biomedical Systems Ag Positioniereinrichtung zur Positionierung von Pipetten
FR2917498B1 (fr) 2007-06-15 2009-10-02 Nanotec Solution Soc Civ Ile Procede et systeme pour compter en ligne et in situ des cellules dans un milieu de culture biologique
JP5411662B2 (ja) 2009-11-13 2014-02-12 株式会社日立ハイテクノロジーズ 微生物菌液調整装置
JP5313218B2 (ja) 2010-09-30 2013-10-09 株式会社日立ハイテクノロジーズ 細菌検査システム

Also Published As

Publication number Publication date
EP2760990B1 (en) 2017-04-05
AU2012316865B2 (en) 2017-03-02
ES2785222T3 (es) 2020-10-06
EP2574660B1 (en) 2020-04-08
CN103958661A (zh) 2014-07-30
CA2849870C (en) 2020-04-21
BR112014007672A2 (pt) 2017-04-18
EP2760990A1 (en) 2014-08-06
EP2574660A1 (en) 2013-04-03
AU2012316865A1 (en) 2014-05-22
JP6101697B2 (ja) 2017-03-22
CA2849870A1 (en) 2013-04-04
WO2013048249A1 (en) 2013-04-04
CN103958661B (zh) 2016-10-12
JP2014528723A (ja) 2014-10-30
US9677044B2 (en) 2017-06-13
US20140242570A1 (en) 2014-08-28
BR112014007672B1 (pt) 2020-11-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2624204T3 (es) Método para recoger material celular y montaje para realizar dicho método
AU2016200340A1 (en) Unitized reagent strip
RU2014142041A (ru) Устройство для обнаружения критического состояния поверхности
CN108387399A (zh) 便携式野外水样采集检测装置
RU2010137741A (ru) Устройство и способ для определения, по меньшей мере, одной величины, характеризующей электромагнитное излучение исследуемого объекта
CN207592242U (zh) 一种中药材筛选装置
CN206523370U (zh) 一种拉力试验机
CN104360108A (zh) 一种用于led灯板检测的测试台
CN106383274A (zh) 一种输电线路绝缘子带电检测方法
CN204214895U (zh) 一种用于led灯板检测的测试台
CN205228334U (zh) 用于大跨距龙门机床两立柱前导轨共面的检测装置
CN204548919U (zh) 一种病理诊疗采样板
CN202614894U (zh) 测试设备
CN106643534A (zh) Ccd光圈检测装置
CN203881512U (zh) 一种应用于积分球上的发光体固定夹具
CN207081568U (zh) 土壤检测装置
CN103409316B (zh) 用于血液细菌培养仪的恒温控制系统
US3682305A (en) Decanting and filling apparatus
CN206330690U (zh) 一种电子体温计自动检定装置
CN112985240A (zh) 一种蒙砂玻璃平整度自动检测设备
CN207768369U (zh) 一种静脉穿刺仪
CN209486274U (zh) 一种多功能光电参数测试机
CN217670298U (zh) 一种用于石材切割的智能控制系统
CN214473590U (zh) 一种架空线路用无人机验电装置
CN213665196U (zh) 一种含有脚踏拍摄开关的毛发检测仪