ES2623509T3 - Dispositivo para la selección de espermatozoides - Google Patents

Abstract

Dispositivo para selección de espermatozoides, que comprende: una primera cámara con figurada para recibir un primer fluido seminal, y una segunda cámara configurada para recibir un segundo fluido, estando la segunda cámara en comunicación de fluido con la primera cámara por medio de al menos un conducto que tiene un primer orificio hacia la primera cámara y un segundo orificio hacia la segunda cámara, estando la longitud del conducto entre 5 y 35 mm, y un medio de desplazamiento para desplazar al menos algo del primer fluido seminal hacia el primer orificio.

Description

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DESCRIPCION

Dispositivo para la seleccion de espermatozoides

La presente invencion se refiere a un dispositivo para seleccion de espermatozoides. Mas espedficamente, la presente invencion se refiere a un dispositivo para seleccion de espermatozoides que tiene una primera camara que esta adaptada para recibir un primer fluido seminal y una segunda camara que esta adaptada para recibir un segundo fluido, estando la primera camara y la segunda camara conectadas en comunicacion de fluido por al menos un conducto, que tiene una longitud entre 5 a 35 mm.. Los dispositivos y metodos de la presente invencion se pueden utilizar para incrementar la calidad de muestras de semen y, en particular, para seleccionar y concentrar espermatozoides para motilidad y/o madurez.

Las muestras de semen de baja calidad estan correlacionadas con fertilizacion fallida, desarrollo de pre-implantacion deficiente y resultado del embarazo. Los factores que contribuyen negativamente a la calidad de la muestra de esperma incluyen alteraciones meioticas, aneuploidfa o dano del ADN del esperma, particularmente fragmentacion del ADN del esperma.

Dispositivos para retirar espermatozoides de fluido seminal que tienen un primer contenedor y un segundo contenedor, en los que un tubo capilar proporciona un puente lfquido entre los contenedores, han sido descritos por el presente inventor en los documentos WO-A1 94/17742 y WO-A2 03/031564, cuyo contenido se incorpora aqu por referencia en su integridad.

El dispositivo de seleccion descrito en el documento WO-A2 03/031564 se ilustra en las figuras 1 y 2. Como se muestra, el dispositivo de seleccion comprende un primer elemento de puente 3 que tiene cuatro canales 6a-6d y un elemento de camara 27 que tiene una primera camara 1 configurada en forma de anillo para recibir fluido seminal 13 y una segunda camara 2 para recibir un medio 12a, estando conectada la segunda camara 12a con la primera camara 1 en forma de anillo sobre una conexion 5 de forma anular. El elemento de puente 3 comprende cuatro paredes lfmite 4a.4e que forman los canales 6a-6d, estando formado un canal adicional 7 por la pared lfmite 4e con la pared lfmite de la conexion 5 de forma anular cuando el elemento de puente esta montado en el elemento de camara 27.

Como se especifica en WO-A2 03/031564, la seleccion se realiza llenado fluido seminal 13 con espermatozoides dentro de una primera camara 1 de forma anular, de tal manea que dicho fluido seminal no llega a los orificios 8a-8d y 9 de los canales sobre el lado de la camara 1 de forma anular y colocando el elemento de puente 3 sobre las camaras 1,2. Posteriormente, el medio 12a es llenado en la camara 2 a traves del orificio central 29, de tal manera que los canales 6a-6d y 7 son llenados con medio 12a. Ademas, el fluido seminal 1 en la primera camara 1 de forma anular puede cubrirse con medio hasta alcanzar los orificios 8a-8d y 9 de los canales en el lado de la camara 1 de forma anular. Los canales 6a-6d y 7, por lo tanto, proporcionan un puente de lfquido, que esta libre de corrientes, permitiendo que los espermatozoides se muevan a traves de los puentes de lfquido formados por canales 6a.6d y 7 en el medio en la camara central 2. El documento US-A-20120052485 describe tambien un dispositivo de seleccion con dos camaras.

Como se describe por el presente inventor, la calidad de los espermatozoides recogidos en la camara central 2 del dispositivo de seleccion descrito anteriormente, incluyendo el rendimiento de espermatozoides, depende altamente del volumen del fluido seminal lleno en la primera camara 1 de forma anular. En particular, el dispositivo de seleccion de la tecnica anterior esta optimizado para cantidades espedficas de fluido seminal y los volumenes mas pequenos deben compensarse utilizando medio adicional. Sin vincularse a ninguna teona, se cree que el incremento del volumen de medio requerido en la primera camara de forma anular conducira a una densidad menor de espermatozoides en la camara central. En este contexto, se ha descubierto que la eficiencia de los dispositivos de seleccion de la tecnica anterior se puede reducir en particular cuando se utilizan volumenes de fluido seminal de 1 ml o menos. Principalmente, muchos pacientes varones que requieren seleccion de espermatozoides, por ejemplo para procedimientos de fertilizacion in-vitro, proporcionan muestras de semen de 2 ml o menos. Ademas, los dispositivos de la tecnica anterior no funcional idealmente si se utiliza demasiado o demasiado poco medio.

Ademas, el dispositivo de la tecnica anterior descrito en el documento WO-A2 03/031564 puede requerir la dispersion del fluido seminal a traves de la superficie de la primera camara de forma anular 1. Sin vincularse por ninguna teona, se cree que los espermatozoides se pueden danar mecanica y/o qmmicamente (por ejemplo, debido a contacto con O2 de la atmosfera) durante este procedimiento, en particular cuando se trata de dispersar volumenes pequenos de fluido seminal incluso a traves de la superficie de dicha primera camara 1 de forma anular. Ademas, se cree que la dilucion mas alta de la muestra de esperma puede incrementar el tiempo requerido para el procedimiento se seleccion, Esto puede afectar a la calidad de los espermatozoides (por ejemplo, debido a dano qmmico) y podna permitir a los espermatozoides de menor calidad llegar a la camara central 2.

El eyaculado humano comprende varios componentes, tales como fluidos de las epididimidas, fluidos de las vesfculas seminales y secreciones de glandulas (en particular de la prostata y de glandulas accesorias). Puesto que estos componentes no se mezclan inmediatamente entre sf despues de la eyaculacion y algunos de ellos son

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altamente viscosos, el eyaculado fresco no puede succionarse normalmente con una aguja o tubo. Por lo tanto, con tecnicas actuales, el eyaculado fresco se deja reposar normalmente durante 20-30 minutos para que se licue suficientemente para procesamiento posterior. De nuevo sin desear vincularse a ninguna teona, se cree que los espermatozoides se pueden danar qmmicamente durante este periodo de reposo (por ejemplo, debido a contacto con O2 circundante)

Como se ha descubierto de manera sorprendente por el presente inventor y se ha descrito en la WO 2012/032165 publicada, asignada comunmente, cuyo contenido se incorpora aqu por referencia en su integridad, la calidad de fluidos seminales se puede mejorar sustancialmente colocando un fluido seminal en la primera camara del dispositivo de seleccion anterior, llenado una segunda camara de un dispositivo de seleccion con un medio para recibir espermatozoides libres de rotura de la cadena de ADN y conectando ambas camaras por un elemento de puente, de tal manera que se forma un puente de fluido entre la primera camara y la segunda camara, que permite a los espermatozoides libres de rotura de la cadena de ADN moverse desde dicha primera camara hasta dicha segunda camara. No obstante, se ha indicado que los espermatozoides con roturas de ADN se pueden extraer desde la primera camara a traves del puente de fluido cuando se recogen los espermatozoides libres de rotura de la cadena de ADN desde la segunda camara. Sin vincularse a ninguna teona, se supone que se puede provocar una corriente macroscopica ligera desde a primera camara a traves del puente de lfquido dentro de la segunda camara cuando se toma una muestra.

A la vista de lo anterior, un objeto de la presente invencion es proporcionar un dispositivo de seleccion mejorado y un metodo correspondiente que soluciona algunos o todos los inconvenientes de la tecnica anterior. En particular, un objeto de la presente invencion es proporcionar un dispositivo y metodo de seleccion que se pueden utilizar con pequenas cantidades de fluido seminal.

Otro objeto de la presente invencion es proporcionar un dispositivo y un metodo de seleccion mejorados que no requieren dilucion del fluido seminal para procedimientos de seleccion o reduce la cantidad de dilucion requerida.

Oro objeto de la presente invencion es proporcionar un dispositivo y metodo de seleccion mejorados, en los que se puede utilizar la misma cantidad de medio independientemente del volumen de fluido seminal disponible.

Otro objeto de la presente invencion es proporcionar un dispositivo y metodo de seleccion mejorados, en los que se reduce la exposicion del fluido seminal a oxfgeno antes, durante y/o despues del procedimiento de seleccion.

Otro objeto de la presente invencion es proporcionar un dispositivo y metodo de seleccion, en los que se mejora la humidificacion de la conexion de fluido.

Ademas, un objeto de la presente invencion es proporcionar un dispositivo y metodo de seleccion mejorados que previenen la contaminacion de la muestra recogida por espermatozoides con roturas de la cadena.

Otro objeto de la presente invencion es reducir el tiempo requerido para el procedimiento de seleccion.

Los objetivos mencionados anteriormente se consiguen por el dispositivo de seleccion mejorado de acuerdo con las reivindicaciones. Otros aspectos, mejoras y variaciones se describen en las figuras y en la descripcion.

En el contexto de la presente descripcion, los terminos “superior” e “inferior” denominan aquellas partes del dispositivo localizadas mas cerca del extremo superior y del extremo inferior del dispositivo, respectivamente, cuando el dispositivo montado se mantiene de una manera vertical, de tal manera que el primero y segundo fluidos pueden ser recibidos en las camaras.

De acuerdo con una forma de realizacion de la invencion, el dispositivo para seleccion de espermatozoides comprende una primera camara configurada para recibir un primer fluido seminal; una segunda camara configurada para recibir un segundo fluido, estando la segunda camara en comunicacion de fluido con la primera camara por medio de al menos un conducto que tiene un primer orificio hacia la primera camara y un segundo orificio hacia la segunda camara; y un medio de desplazamiento adaptado para desplazar al menos al menos algo del primer fluido seminal hacia o hasta el primer orificio. En formas de realizacion preferidas, el medio de desplazamiento esta adaptado para desplazar el primer fluido seminal, de tal manera que la superficie suprior, es decir, el nivel de llenado, del primer fluido seminal esta dispuesto a una distancia predeterminada desde el primer orificio.

Puesto que el nivel de llenado del primer fluido seminal en la primera camara se puede ajustar con el medio de desplazamiento, el dispositivo de la presente descripcion se puede utilizar son diferentes volumenes de primer lfquido seminal. El medio de desplazamiento permite adaptar el volumen y/o la forma de la primera camara de tal modo que se puede utilizar con volumenes de fluido seminal tan pequenos como 1 ml o menos, con preferencia 0,5 ml o menos. Por lo tanto, las muestras de semen de volumen pequeno requieren menos o ninguna dilucion.

En el contexto de la presente invencion, el termino fluido se puede referir a cualquier fluido que permita movimiento auto-propulsado de celulas moviles, en particular lfquidos o geles. Por lo tanto, cada uno del primero y segundo

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fluidos se pueden denominar como Ifquido o gel.

El primer fluido seminal es con preferencia un fluido seminal que puede ser de mala calidad, tal como un fluido seminal que comprende una cantidad sustancial de espermatozoides con movilidad y/o madurez reducidas, particularmente espermatozoides con alteraciones meioticas, aneuploidfa o dano del ADN del esperma, particularmente fragmentacion del ADN del esperma, por ejemplo rotura de la cadena de ADN. Por ejemplo, el primer fluido puede comprender al menos 15 % de oligoespermia, al menos 32 % de astenoespermia y/o al menos 4 % de teratozooespermia basado en la cantidad total de espermatozoides en el fluido. En formas de realizacion, el primer fluido seminal puede se runa muestra de semen (es decir, eyaculado, en particular eyaculado humano) de un paciente. Este eyaculado puede estar, por ejemplo, sustancialmente no mezcladas y/o eyaculado fresco (por ejemplo, eyaculado que ha permanecido en reposo menos de 20 min., 15 min. o menos, 10 min. o menos, o 5 min o menos y/o eyaculado que no ha sido mezclado por pipetado repetido u otros medios). Por lo tanto, la muestra de esperma utilizada como primer lfquido puede haber sido eyaculada hace menos de 20 min., menos de 15 min. menos de 10 min. o menos de 5 min. antes del uso. Por lo tanto, el eyaculado puede comprender diferentes fases, algunas de las cuales son altamente viscosas. No obstante, el primer fluido puede ser tambien un fluido con otras celulas moviles, que pueden ser seleccionadas por el dispositivo de la presente invencion. Mas preferiblemente, el primer fluido seminal comprende una cantidad sustancial de espermatozoides con roturas de la cadena de ADN.

El segundo fluido es con preferencia un medio para recibir espermatozoides u otras celulas moviles, por ejemplo, un medio tampon- Las celulas seleccionadas son recibidas con preferencia en el segundo fluido contenido en la segunda camara durante el proceso de seleccion. El segundo fluido se puede extraer entonces, por ejemplo, por medio de una pipeta, y se puede utilizar en o procesar adicionalmente para tecnologfas de reproduccion artificial (por ejemplo, inseminacion artificial), crioconservacion o fines de diagnostico. Alternativamente, uno o varios huevos pueden ser localizados en la segunda camara. Tal configuracion se puede utilizar, por ejemplo, para simular lo mas estrechamente posible una seleccion natural y fisiologica de esperma durante la fertilizacion in-vitro.

Cuando el conducto estallenlo con un lfquido, el conducto proporciona con preferencia un puente lfquido entre la primera camara y la segunda camara. Con preferencia, los espermatozoides en la primera camara se pueden mover a lo largo de este puente lfquido hasta la segunda camara cuando los fluidos en la primera y la segunda camaras llegan al primero y segundo orificios del conducto, respectivamente.

De acuerdo la presente invencion, la primera camara puede estar provista por un recipiente con un extremo inferior cerrado, con preferencia un recipiente tubular, de tal manera que el primero fluido seminal se acumula en dicho extremo inferior cerrado bajo el efecto de la gravedad. El extremo inferior cerrado puede ser de cualquier forma adecuada, por ejemplo conica, truncada, redonda (por ejemplo, hemisferica) o lisa.

Ademas, el extremo inferior del recipiente puede estar configurado para que sea auto-estable. Por ejemplo, el extremo inferior puede estar provisto con un soporte, que puede estar formado por una proyeccion cilmdrica que se proyecta sobre el extremo inferior cerrado. El recipiente puede estar formado tambien autonomo sobre un extremo inferior liso.

El recipiente puede estar provisto, ademas, con un extremo superior abierto, a traves del cual se puede introducir el primer fluido seminal en la primera camara, por ejemplo introduciendolo con una pipeta. El recipiente puede estar formado de cualquier material adecuado, por ejemplo plastico o vidrio. Se prefieren materiales traslucidos o transparentes.

De acuerdo con la presente invencion, los medios de desplazamiento pueden comprender un elemento de desplazamiento (que puede ser denominado tambien como un cuerpo de desplazamiento) y/o un mango para manipular los medios de desplazamiento. El elemento de desplazamiento esta localizado con preferencia en el extremo inferior del medio de desplazamiento. El elemento de desplazamiento proporciona con preferencia un cuerpo solido que puede ser introducido en la primera camara y que puede tener un volumen de al menos 0,5 cm3, al 1 cm3, al menos 2 cm3, o al menos 3 cm3. El mango es con preferencia hueco y se abre dentro de la segunda camara. El mango y la segunda camara pueden estar conectadas en comunicacion de fluido, de tal manera que el segundo fluido se puede llenar en la segunda camara a traves del mango y/o de tal manera que el segundo fluido puede ser recogido extendiendo una pipeta a traves de dicho mango dentro de la segunda camara, por ejemplo, una vez que los espermatozoides separados estan contenidos allf.

El elemento de desplazamiento y el mango pueden estar formados o conectados integralmente de una manera fija o desprendible. Se puede utilizar cualquier material adecuado, por ejemplo, plastico o virio para formar el cuerpo de desplazamiento y/o el mango. De nuevo, se prefieren materiales traslucidos o transparentes.

Los medios de desplazamiento son recibidos con preferencia dentro de la primera camara y/o el recipiente de una manera deslizable, asegurando de esta manera cualquier manipulacion segura y facil del dispositivo. Mas preferentemente, los medios de desplazamiento son recibidos concentricamente en el recipiente y deslizables a lo largo del eje longitudinal del recipiente. Se pueden utilizar espaciadores y/o grnas para definir adecuadamente la posicion de los medios de desplazamiento y guiar los medios de desplazamiento dentro del recipiente. Alternativa o

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adicionalmente, el recipiente y los medios de desplazamiento (y/u otros componentes conectados con el) pueden estar provistos con porciones roscadas interactivas con el fin de guiar los medios de desplazamiento dentro del recipiente y/o para mantener los medios de desplazamiento en una cierta posicion con relacion al recipiente durante el procedimiento de seleccion. Por ejemplo, el mango puede estar provisto con una rosca exterior y el recipiente propiamente dicho y/o un elemento fijado al recipiente (por ejemplo, una tapa del recipiente) puede estar provisto con una rosca interior. En este caso, la profundidad de los medios de desplazamiento en el recipiente se pueden definir girando el recipiente y los medios de desplazamiento relativamente entre sf, de manera que los medios de desplazamiento se mueven hacia arriba y hacia abajo en el recipiente a lo largo de la rosca de tornillo (es decir, fuera o mas dentro de un primer fluido seminal contenido en el recipiente, respectivamente).

La segunda camara puede estar localizada en el recipiente cuando el recipiente esta montado. Como tal, la segunda camara forma en uso una camara “central” o “interior”, mientras que la primera camara forma en uso una camara “circundante” o “exterior”. En otras formas de realizacion, un receptaculo exterior puede formar la segunda camara y recibir un recipiente que forma la primera camara allf

La segunda camara puede tener un volumen de 0,5 ml o menos. En formas de realizacion, parte de este volumen puede ser proporcionado por el mango hueco.

Al menos una parte del elemento de desplazamiento puede tener una superficie exterior hemisferica, sustancialmente hemisferica, conica, sustancialmente conica, cilmdrica o sustancialmente cilmdrica. La superficie exterior de los medios de desplazamiento puede coincidir o no con la superficie interior de la primera camara. La porcion inferior de los medios de desplazamiento y/o el elemento de desplazamiento puede tener una forma exterior que corresponde generalmente a la forma interior del extremo inferior cerrado del recipiente. Un intersticio variable puede estar formado entre los medios de desplazamiento y el recipiente. El intersticio puede estar formado de tal manera que se incrementa (por ejemplo, en anchura) desde una parte inferior de la primera camara hacia una parte superior de la primera camara cuando los medios de desplazamiento estan insertados lo mas posible en el recipiente (“posicion totalmente insertada”). Por ejemplo, la superficie exterior del elemento de desplazamiento puede seguir la superficie interior de la primera camara a lo largo de sus secciones inferiores, y separarse de la primera camara a lo largo de secciones superiores, de tal manera que al menos una porcion substancial, con preferencia todo o la mayor parte del primer fluido seminal en la primera camara es recogido en la seccion superior proxima al primer orificio en un espacio de coleccion formado entre la primera camara y los medios de desplazamiento. No obstante los medios de desplazamiento pueden tener tambien una superficie inferior lisa.

En formas de realizacion preferidas de la invencion, la segunda camara puede estar comprendida en los medios de desplazamiento. La segunda camara puede estar formada integralmente con los medios de desplazamiento, en particular el elemento de desplazamiento o conectada con ellos de una manera fija. Por ejemplo, el elemento de desplazamiento puede ser provisto con una abertura o hueco rodeados por un borde que se extiende hacia fuera que forma la segunda camara. Esto permite configurar el dispositivo economizando espacio y de una manera facil de usar. Ademas, el elemento de desplazamiento puede ser proporcionado por la segunda camara propiamente dicha (junto con la pared de lo rodea).

Los medios de desplazamiento pueden comprender, ademas, una tapa de forma anular. La tapa de forma anular se puede extender a lo largo o alrededor de la periferia del borde a una distancia definida, formando de esta manera el conducto entre el borde y la tapa de forma anular. La tapa de forma anular esta localizada con preferencia al menos a 0,1 mm, con preferencia al menos 0,2 mm, y mas preferentemente entre 0,3 mm y 0,4 mm desde el borde para esta finalidad. De acuerdo con ello, el conducto tiene con preferencia una anchura de al menos 0,1 mm, mas preferentemente al menos 0,2 mm y mas preferentemente entre 0,3 mm y 0,4 mm. Las distancias y/o anchuras establecidas permiten el llenado y humidificacion optimos del conducto por accion capilar ejercida sobre el primer fluido seminal y/o el segundo fluido. Esto asegura que el conducto forme el puente lfquido entre la primera camara y la segunda camara. La tapa de forma anular puede estar formada integralmente o conectada al mango de una manera fija o desprendible. La tapa de forma anular puede estar formada de cualquier material adecuado, por ejemplo plastico o vidrio. Ademas, la tapa de forma anular (ademas o en lugar de los espaciadores / grna mencionados anteriormente) pueden ayudar a definid la posicion del medio de desplazamiento en el recipiente, por ejemplo manteniendo los medios de desplazamiento en una posicion concentrica.

De acuerdo con otras formas de realizacion, el conducto puede tener una anchura maxima de 1 mm, con preferencia 0,5 mm a lo largo de toda su longitud o al menos un segmento.

La longitud del conducto esta entre 5 y 35 mm, mas preferentemente entre 5 y 15 mm medida desde el primer orificio hasta el segundo orificio, por ejemplo cuando se considera una seccion transversal del dispositivo a lo largo de su eje longitudinal. Esto asegura el llenado del canal por accion capilar y en enriquecimiento optimo de espermatozoides libres de rotura de la cadena de ADN en la segunda camara, mientras que conductos mas largos pueden conducir a una seleccion no deseable de espermatozoides de acuerdo con seis caractensticas.

El conducto principal comprende al menos un primer segmento que se extiende en una direccion que tiene una

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componente direccional hacia el extremo superior el dispositivo y al menos un segundo segmento que se extiende en una direccion que tiene una componente direccional hacia el extremo inferior del dispositivo. Cuando se sigue el conducto desde su primera abertura hacia su segunda abertura, el primer segmento que se extiende hacia arriba esta con preferencia antes que el segundo segmento que se extiende hacia abajo. Con preferencia, el curso del conducto descrito anteriormente se puede apreciar cuando se considera una seccion transversal a lo largo del eje longitudinal del dispositivo.

De acuerdo con la presente invencion, el conducto puede tener una seccion transversal en forma de U, V o W, por ejemplo cuando se considera una seccion transversal a lo largo de un eje longitudinal del dispositivo y/o un eje longitudinal de los medios de desplazamiento. Esto significa que el conducto puede tener la forma de una U, una V o una W cuando se considera una seccion transversal del dispositivo y/o los medios de desplazamiento a lo largo del eje longitudinal respectivo. En formas de realizacion, el conducto puede estar sustancialmente en forma de U, V o W.

El conducto se extiende con preferencia a lo largo de una parte, la mayor parte o todo el penmetro de la segunda camara. El dispositivo de seleccion puede comprender varios de tales conductos que se extienden a lo largo del penmetro de la segunda camara de acuerdo con formas de realizacion de la invencion.

La seccion transversal tiene con preferencia la forma de una U invertida, extendiendose una primera pata de la U dentro de la primera camara y extendiendose una segunda pata de la U en la segunda camara. El conducto puede proporcionar, por lo tanto una comunicacion de fluido entre dicha primera camara y dicha segunda camara que requiere celulas moviles (por ejemplo, espermatozoides) localizados en la primera camara para “nadar” o moverse contra la gravedad a lo largo de al menos un segmento del conducto con el fin de llegar a la segunda camara. Con preferencia, la segunda para de la U es mas larga que la primera pata, es decir, que la segunda pata se extiende mas en la segunda camara que la primera para se extiende dentro de la primera camara. En otras formas de realizacion, la primera para puede ser mas larga que la segunda.

De acuerdo con la presente invencion, el dispositivo puede estar provisto con una escala para evaluar un volumen del primer fluido seminal en la primera camara (primera escala). Dicha primera escala puede estar prevista, por ejemplo, sobre el recipiente que forma la primera camara, por ejemplo, sobre una superficie interior o una superficie exterior de la misma. Adicional o alternativamente, el volumen introducido en la primera camara puede ser evaluado tambien por otros medios, por ejemplo una pipeta.

Tambien puede estar prevista una escala para evaluar el recorrido de los medios de desplazamiento (aunque se utiliza a continuacion el termino "segunda escala", esta claro 'para el tecnico tambien que esta escala puede estar prevista independientemente de la "primera escala" mencionada anteriormente). La segunda escala se puede utilizar para evaluar hasta que punto los medios de desplazamiento y/o el elemento de desplazamiento han sido introducidos en la primera camara. La escala puede estar prevista, por ejemplo, sobre los medios de desplazamiento o el recipiente que forma la primera camara, mientras que el otro de los medios de desplazamiento y el recipiente pueden estar provistos con una lmea o indentacion de referencia para medir el recorrido sobre la segunda escala. Marcas, lmeas, indentaciones y/o medios similares pueden formar las gradaciones de la primera y/o segunda escalas. Las gradaciones pueden estar espaciadas de una manera regular o irregular.

De acuerdo con forma de realizacion de la invencion, la segunda escala puede indicar el recorrido requerido para los medios de desplazamiento dependiendo del volumen del primer fluido seminal previsto en la primera camara. Esto significa que la segunda escala puede indicar la posicion optima de los medios de desplazamiento y/o el elemento de desplazamiento dependiendo de dicho volumen del primer fluido seminal. La gradacion de la segunda escala puede indicar hasta que punto debenan introducirse los medios de desplazamiento en la primera camara o recipiente con el fin de desplazar un volumen predeterminado del primer fluido seminal hacia el primer orificio. Con preferencia, la segunda escala indica hasta que punto debenan introducirse los medios de desplazamiento dentro de la primera camara o recipiente con el fin de desplazar el primer fluido seminal, de tal manera que permanece un intersticio fijo entre el primer fluido seminal y el primer orificio, independientemente del volumen del primer fluido seminal previsto en la primera camara.

En formas de realizacion de la invencion, las graduaciones de la segunda escala pueden ser proporcionadas por codigos de color correspondientes sobre los medios de desplazamiento y el recipiente. Estos codigos de color pueden comprender campos o graduaciones de diferentes colores, con tal que la profundidad de los medios de desplazamiento en el recipiente sea adecuada para el volumen contenido en la primera camara cuando un cierto color de un codigo se solapa con el mismo o con un color correspondiente del otro codigo. Ademas, la primera escala puede estar formada como un codigo de color, en cuyo caso la primera escala puede formar el codigo de color sobre el recipiente requerido para la segunda escala.

La extension hasta la que el nivel de fluido alcanza en la primera camara cuando los medios de desplazamiento se insertan depende de varios factores, que incluyen la forma de la primera camara y la forma de los medios de desplazamiento. Puede no estar relacionada linealmente con el recorrido de los medios de desplazamiento. Aunque

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se puede requerir un recorrido grande para volumenes pequenos, la diferencia de recorrido pueden ser mmimas para volumenes mayores. La segunda escala puede tener en cuenta estos efectos. Por ejemplo, la segunda escala puede ser no-lineal y la distancia entre gradaciones adyacentes puede disminuir a medida que se incrementa el volumen. La segunda escala puede utilizarse para insertar los medios de desplazamiento hasta el recorrido requerido despues de determinar el volumen del primer fluido seminal en la primera camara con la primera escala y/u otros medios (por ejemplo, una pipeta).

En implementaciones mecanicas o electromecanica de la invencion, el recorrido de los medios de desplazamiento se puede medir con sensores y/o controlar por actuadores.

En formas de realizacion, la presente invencion puede incluir tambien un medio de cierre para sellar la primera camara con relacion al entorno, por ejemplo cubriendo y/o llenando el extremo superior abierto del recipiente. El medio de cierre puede estar configurado para sellar la primera camara (que puede ser una camara exterior circundante como se ha descrito anteriormente) de una manera estanca al aire.

El medio de cierre puede ser un tapon, por ejemplo un tapon con un taladro pasante que se puede conectar al mango. El medio de cierre puede estar formado de cualquier material adecuado para sellar la primera camara de una manera hermetica al aire o sustancialmente hermetica al aire (por ejemplo, caucho u otros materiales polimericos, tales como materiales termoplasticos). Cuando la primera camara esta sellada con relacion al medio ambiente, el fluido en la primera camara no penetrara en la segunda camara incluso cuando se recoja el fluido contenido allf, por ejemplo, con una pipeta. Por lo tanto, el tapon evita que espermatozoides con roturas de la cadena sean introducidos en la segunda camara cuando se recogen allf espermatozoides libres de roturas de la cadena de ADN.

En formas de realizacion, una tapa (por ejemplo, una tapa roscada que se puede enroscar en el recipiente o una tapa con un ajuste de bayoneta) se puede utilizar para cubrir y/o cerrar el recipiente. La tapa puede tener una estructura de fijacion (por ejemplo, una porcion roscada con una rosca interna o externa, un ajuste de bayoneta o un ajuste elastico) que se acopla o es acoplada por un medio de fijacion (por ejemplo, una rosca externa o interna, un medio de fijacion para un ajuste de bayoneta o un ajuste elastico) previsto sobre el recipiente. Como se ha mencionado anteriormente, tal tapa puede funcionar tambien como un elemento de centrado para el medio de desplazamiento y puede comprender un taladro pasante central para el mango en este contexto. Ademas, este taladro pasante central u otra porcion de la tapa puede estar provisto con una rosca interior (o hembra) que interactua con una rosca exterior (o macho) del mango para definir el recorrido del medio de desplazamiento en el recipiente. El ajuste de bayoneta o rosca de tornillo utilizados para fijar la tapa al recipiente se puede configurar cerca de la direccion en la que el medio de desplazamiento es girado cuando se enrosca dentro (es decir, debajo) del recipiente para evitar la apertura accidental de la tapa. Como tal, el mango puede estar provisto con una rosca a la izquierda cuando el ajusta de bayoneta se cierra en el sentido horario y vice-versa.

De acuerdo con otras formas de realizacion de la invencion, la tapa puede estar provista con uno o varios orificios de ventilacion. En este contexto, el tapon puede utilizarse para cerrar selectivamente estos orificios de ventilacion. Por ejemplo, el tapon puede fijarse a la tapa de una manera giratoria, de tal manera que se puede girar desde una primera posicion, en la que los orificios de ventilacion estan abiertos, hasta una segunda posicion, en la que los orificios de ventilacion estan cerrados y con preferencia sellados de una manera hermetica al aire. El tapon puede estar previsto por encima de la tapa para esta finalidad. De acuerdo con otras formas de realizacion de la invencion, la tapa puede utilizarse para presionar el 6tapon contra el recipiente para proporcionar un sellado hermetico al aire.

El tapon puede estar separado de la tapa, fijado a ella o formado integralmente con ella.

El medio de cierre (por ejemplo, el tapon) puede ser insertado en la primera camara despues de sellarla con el. Mas espedficamente, el medio de cierre puede ser insertado en el recipientes de que de sellarlo, por ejemplo, en su extremo superior. Aunque se puede emplear cualquiera tipo adecuado de medio de cierre para esta finalidad, el medio de cierre puede configurarse de tal forma que se puede insertar hasta una profundidad predeterminada y/o fija en el recipiente. Por ejemplo, el tapon puede comprenden una superficie de tope que inhibe la insercion del tapon cuando ha alcanzado una profundidad predeterminada. Opcionalmente, la tapa se puede utilizar para insertar el tapon (con o sin una superficie de tope) hasta una profundidad predeterminada. La insercion del medio de cierre en el recipiente puede conducir a una presion positiva en la primera camara, que puede causar que algo del fluido en el conducto (por ejemplo, fluido en la parte interior del conducto proxima al segundo orificio) fluya dentro de la segunda camara. Esto puede incrementar el rendimiento de espermatozoides obtenido por el procedimiento de seleccion.

De acuerdo con la presente invencion, el dispositivo puede comprender, ademas, una pipeta que contiene un volumen predeterminado del segundo fluido. Esto asegura que se utilice el volumen correcto del segundo fluido y que el conducto sea humedecido de una manera optima. Puesto que el nivel del primer fluido seminal en la primera camara puede ser adaptado a los medios de desplazamiento, el volumen del segundo fluido en la pipeta puede estar fijado y puede ser independiente del volumen a proporcionar en la primera camara. Esto puede asegurar que se proporcione un volumen correcto del segundo fluido en la segunda camara y se obtienen resultados reproducibles.

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La pipeta puede estar configurada y adaptada para inyectar el segundo fluido en la segunda camara del dispositivo y/o para extraer fluidos desde la segunda camara. Opcionalmente, la pipeta puede estar configurada de tal manera que el fluido no sea inyectado en la segunda camara demasiado rapidamente. Esto puede ser util para prevenir la formacion de burbuja de aire en el segundo fluido, que podnan ocluir parte del conducto. Ademas, la pipeta puede estar configurada de tal manera que el fluido no sea inyectado en la segunda camara demasiado lentamente. Esto puede ser util para asegurar que el conducto se llene adecuadamente. En formas de realizacion, el volumen del segundo fluido previsto en la pipeta puede ser 0,5 ml o menos, que corresponde a la cantidad que se inyecta idealmente en el utero.

El dispositivo de seleccion de la presente invencion puede reutilizarse o ser desechable, es decir, destinado para un solo uso. Se prefiere el uso desechable de acuerdo con las especificaciones reguladoras.

La presente invencion se puede referir tambien a un equipo que comprende un dispositivo para seleccionar espermatozoides y una pipeta que contiene un volumen predeterminado del segundo fluido y una estructura de canal.

Ademas, la presente invencion se puede referir a un metodo para seleccion de celula moviles (por ejemplo, espermatozoides) utilizando el dispositivo descrito aqrn. El metodo puede incluir las etapas de (a) proporcionar un primer fluido que comprende celulas moviles en la primera camara del dispositivo; (b) proporcionar un medio tampon en la segunda camara del dispositivo; (c) conectar la primera camara y la segunda camara por medio de una conexion lfquida; y (d) desplazar al menos algo del primer fluido hacia, cerca o hasta el primer orificio del conducto con los medios de desplazamiento.

Como se ha descrito por el inventor, el metodo puede utilizarse para seleccionar espermatozoides para movilidad y/o madures, y en particular para obtener un fluido en la segunda camara enriquecido con espermatozoides libres de roturas de la cadena de ADN.

Como se describe, ademas, por el inventor, el metodo anterior conduce a rendimientos sustancialmente mas altos de celulas moviles (en particular espermatozoides) en la segunda camara, cuando el primer fluido es fresco y/o eyaculado no tratado, es decir, eyaculado que no ha sido licuado por un periodo de reposo y/o pipetado. Por lo tanto, el eyaculado fresco y/o sustancialmente no tratado se utiliza con preferencia como el primer fluido. El eyaculado puede utilizarse directamente despues de la eyaculacion. El paciente puede eyacular directamente en el recipiente del dispositivo de seleccion de acuerdo con la invencion o en una estructura de canal fijada allf (por ejemplo, la estructura de canal de la presente invencion). Directamente despues (es decir, por ejemplo, sin periodo de espera o un periodo de espera inferior a 20 min., 15 min,. o menos, 10 min. o menos, o 5 min. o menos), se puede iniciar la separacion, por ejemplo introduciendo el medio de desplazamiento en la primera camara proporcionada por el recipiente.

De acuerdo con otra forma de realizacion de la invencion, el plasma seminal que permanece despues de la seccion de los espermatozoides se puede utilizar en otros procedimientos, por ejemplo infusion de plasma seminal.

Se describe una estructura de canal para llenar un lfquido en un recipiente. La estructura de canal tiene con preferencia un orificio de entrada que tiene una primera area de la seccion transversal que es mayor que la segunda area de la seccion transversal. El orificio de entrada esta posicionado con preferencia de tal manera que esta por encima del orificio de salida cuando el canal esta en una posicion vertical. Ademas, la estructura del canal comprende con preferencia un orificio intermedio. Cuando la estructura de canal esta en una posicion vertical, dicho orificio intermedio esta dispuesto con preferencia entre el orificio de entrada y el orificio de salida.

La estructura de canal esta configurada con preferencia para ser fijada a un recipiente y puede comprender una estructura de fijacion. Las estructuras de fijacion adecuadas pueden incluir, entre otros, una porcion de la estructura de canal que proporciona un ajuste de forma y/o un ajuste de friccion con el recipiente. Por ejemplo, la estructura de canal puede estar provista con una porcion que tiene una rosca interior, una rosca exterior, un ajuste de bayoneta y/o un ajuste elastico y/o un tornillo sobre collar. La estructura de fijacion esta configurada con preferencia para proporcionar una fijacion a prueba de fugas con el recipiente, de tal manera que un lfquido contenido en el recipiente no se puede escapar en la zona de fijacion, por ejemplo, cuando el recipiente y la estructura de canal se extienden horizontalmente o se invierten. Con preferencia, la estructura de canal esta provista con una porcion cilmdrica (por ejemplo, una porcion cilmdrica con una rosca interior) que rodea una abertura del recipiente y, por lo tanto, previene que las paredes interiores del recipiente entren en contacto con elementos extranos. Por lo tanto, se reduce al mmimo la probabilidad de contaminacion.

La estructura de canal tiene con preferencia un compartimiento o camara de recuperacion que estan configurados para recoger y retener al menos parte del lfquido contenido en el recipiente cuando el recipiente y/o el canal de extienden horizontalmente o se invierten, por ejemplo cuando se voltea inadvertidamente. El compartimiento de recuperacion esta configurado con preferencia, ademas, de tal manera que el lfquido recogido y retenido allf fluye de retorno al recipiente cuando el recipiente es posicionado despues den una posicion vertical. El compartimiento de recuperacion puede tener un extremo superior centrado y que se abre en direccion hacia abajo. La abertura del

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compartimiento de recuperacion puede estar prevista alrededor del orificio intermedio.

La estructura de canal comprende con preferencia una primera pared circunferencial que se estrecha hacia dentro cuando sigue el eje longitudinal de la estructura de canal en una direccion desde el orificio de entrada hasta el orificio de salida. La primera pared circunferencial tiene con preferencia una forma generalmente conica a lo largo de al menos un segmento de la misma. La primera pare circunferencial puede formar un primer canal, que puede ser un canal exterior de acuerdo con aspectos de la invencion. La primera pared circunferencial se puede extender hasta y/o desde el orificio exterior. Ademas, la primera pared circunferencial puede extenderse proxima al orificio de entrada.

La estructura de canal comprende tambien con preferencia una segunda pared circunferencial. La segunda pared circunferencial se puede estrecha hacia dentro cuando sigue el eje longitudinal de la estructura de canal en una direccion desde el orificio de entrada hasta el orificio de salida y puede tener una forma generalmente conica a lo largo de al menos un segmento de la misma. La segunda pared circunferencial se puede extender generalmente paralela a la primera pared circunferencial a lo largo de al menos un segmento. Ademas, la segunda pared circunferencial puede formar un segundo canal, que puede ser un canal interior que esta dispuesto dentro del canal exterior totalmente o a lo largo de un segmento. La primera pared circunferencial se puede extender hasta y/o formar el orificio de entrada. Ademas, la primera pared circunferencial se puede extender hasta y/o formar el orificio intermedio.

El compartimiento de recuperacion puede estar previsto entre la primera y segunda paredes circunferenciales. La primera y segunda paredes circunferenciales estan conectada con preferencia por una pared superior, que puede formar el extremo superior cerrado de la camara de recuperacion de acuerdo con aspectos de la descripcion. Aunque se utiliza el termino “circunferencial”, debena indicarse que ni la estructura de canal ni la primera y segunda paredes circunferenciales tienen que ser simetricas en rotacion. En formas de realizacion, una o ambas de estas paredes pueden no rodear totalmente la estructura de canal.

La primera y segunda paredes circunferenciales del canal pueden estar formadas integralmente, por ejemplo, de un solo material (por ejemplo, un material polimerico o vidrio).

La estructura de canal puede comprender un orificio de ventilacion. El orificio de ventilacion proporciona una conexion de fluido adicional entre el interior del recipiente al que esta fijada la estructura de canal y el medio ambiente. Por lo tanto, se puede prevenir la formacion de burbujas de aire cuando la estructura de canal esta llena. El orificio de ventilacion proporciona con preferencia una conexion de fluido entre el interior del recipiente y el compartimiento de recuperacion. En este caso, cualquier lfquido que fluye fuera del recipiente a traves del orificio de ventilacion puede ser recogido en dicho compartimiento de recuperacion. El orificio de ventilacion puede ser proporcionado por un taladro que atraviesa la primera pared circunferencial.

La estructura de canal puede reutilizarse, pero, con preferencia, es un artfculo desechable configurado para un solo uso. La estructura de canal puede ser particularmente ventajosa para aplicaciones de laboratorio.

La estructura de canal proporciona un tipo mejorado de canal que previene que lfquidos, por ejemplo lfquidos valiosos, sean derramados cuando se vuelca o se da la vuelta al recipiente, en el que los lfquidos estan llenos. Ventajosamente, el lfquido es recibido en el compartimiento de recuperacion y posteriormente puede ser llenado de nuevo en el recipiente sin tener contacto con el medio ambiente. Por lo tanto, se puede prevenir la contaminacion del lfquido y/o del medio ambiente. Ademas de lfquidos, la estructura de canal se puede utilizar tambien con otra sustancias que son llenadas dentro de algun tipo de estructura de recepcion por medio de un canal. Otras sustancias puede incluir polvos y/o granos.

La estructura de canal y el dispositivo de seleccion de la presente invencion se pueden adaptar para uso combinado. Por ejemplo, cualquiera de los dispositivos descritos anteriormente puede comprender un medio de fijacion configurado para fijar el dispositivo, por ejemplo su recipiente, a la estructura de canal (por ejemplo, por medio de la estructura de fijacion). El medio de fijacion puede comprender, entre otras cosas, una porcion que tiene una rosca interna, una rosca externa, un ajuste elastico, un ajuste de bayoneta y/o un tornillo sobre collar. El medio de fijacion puede estar previsto proximo al extremo superior abierto del recipiente. Un equipo que comprende la estructura de canal y un dispositivo de seleccion pueden estar previstos de acuerdo con aspectos de la presente invencion. No obstante, debena indicarse que la estructura de canal puede estar prevista tambien separadamente.

De acuerdo con otro aspecto, se proporciona un soporte para un recipiente. El soporte se puede utilizar para retener el dispositivo de la presente invencion en una posicion vertical, por ejemplo cuando la estructura de canal esta ijada al dispositivo y/o cuando se realiza el procedimiento de seleccion. Un equipo que comprende un soporte, una estructura de canal y/o un dispositivo de seleccion pueden estar previstos de acuerdo con aspectos de la presente invencion.

La estructura de canal descrita anteriormente es particularmente ventajosa para recoger muestras de esperma. Los pacientes varones que deben proporcionar tales muestras estan a menudo nerviosos y a veces vuelcan el recipiente

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en el que se recibe la muestra. La estructura de canal previene la perdida de toda o la mayor parte de la muestra en este caso. Tambien es particularmente util en este contexto que la estructura de canal pueda prevenir la contaminacion del interior del recipiente. Por ejemplo, la estructura de canal puede prevenir que el paciente entre en contacto con las superficies interiores del recipiente con las manos o el pene, reduciendo de esta manera la probabilidad de contaminacion.

Ademas, cuando se utiliza la estructura de canal con el recipiente del dispositivo de seleccion, la muestra de esperma puede ser recibida en el recipiente utilizado directamente para seleccion de espermatozoides. De esta manera se evitan las transferencias de un recipiente a otro, que podna conducir a dano mecanico y/o qmmico de las celulas de esperma y perdida de las celulas de esperma que permanecen en los recipientes usados.

Las figuras descritas a continuacion describen formas de realizacion de la invencion para fines ilustrativos. En particular, la descripcion proporcionada por las figuras no limitan el alcance de la proteccion conferida por la invencion. Las figuras son solo dibujos esquematicos y las formas de realizacion mostrada se pueden modificar de muchas maneras dentro del alcance de la reivindicaciones,

La figura 1 es una vista en seccion de un dispositivo de seleccion de la tecnica anterior descrito en WO 03/031594.

La figura 2 es una vista despiezada ordenada del dispositivo de seleccion de la tecnica anterior mostrado en la figura 1.

La figura 3A es una vista en planta de un dispositivo para seleccion de espermatozoides de acuerdo con una forma de realizacion de la presente invencion.

La figura 3B es una vista despiezada ordenada del dispositivo mostrado en la figura 3A.

La figura 4 es una vista en planta de los medios de desplazamiento del dispositivo mostrado en las figuras 3A y 3B.

La figura 5 es una vista ampliada de la seccion que ilustra la porcion inferior de los medios de desplazamiento mostrados en la figura 4.

La figura 6 es un dibujo ampliado de la seccion de la porcion inferior del dispositivo mostrado en las figuras 3A y 3B.

Las figuras 7A-7C son una secuencia de dibujos esquematicos de la seccion que muestran el uso de un dispositivo de acuerdo con la presente invencion.

La figura 7D es un dibujo esquematico que ilustra la seleccion de espermatozoides.

Las figuras 8A-8D son dibujos en seccion que muestran la porcion inferior de un dispositivo de seleccion de acuerdo con varias formas de realizacion de la invencion.

La figura 9 es una vista en planta que muestra un recipiente para dispositivos de seleccion de acuerdo con formas de realizacion de la presente invencion, estando provisto el recipiente con primera y segunda escalas.

La figura 10 es una vista en planta que muestra un medio de desplazamiento para dispositivos de seleccion de acuerdo con forma de realizacion de la presente invencion, estando provistos los medios de desplazamiento con una escala.

La figura 11A es una vista en planta que muestra un equipo de acuerdo con formas de realizacion de la presente invencion.

La figura 11B es una vista despiezada ordenada del equipo mostrado en la figura 11A.

La figura 12A es un dibujo en seccion del dispositivo de seleccion de acuerdo con otra forma de realizacion de la invencion.

La figura 12B es un dibujo en seccion que muestra una vista ampliada de la porcion inferior del dispositivo de seleccion de la figura 12A.

La figura 13A es una vista en planta de un dispositivo para la seleccion de espermatozoides de acuerdo con otra forma de realizacion de la presente invencion con los medios de desplazamiento totalmente introducidos en el recipiente.

La figura 13B es la seccion I-I de la figura 13A.

La figura 13C es una vista en perspectiva del dispositivo para seleccion de espermatozoides de acuerdo con las figuras 13A y 13B.

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La figura 13D es una vista en planta de un dispositivo para seleccion de espermatozoides de acuerdo con la figura 13A con el medio de desplazamiento en un extremo superior del recipiente.

La figura 13E muestra la seccion II-II de la figura 13D.

La figura 14A muestra un dibujo en seccion que muestra una estructura de canal.

La figura 14B muestra un dibujo en seccion que muestra el principio funcional de la estructura de canal ilustrada en la figura 13A.

La figura 15A muestra una vista en planta que muestra una estructura de canal.

La figura 15B muestra la seccion MI-MI de la figura 15A.

La figura 16 muestra una Tabla que compara concentraciones de espermatozoides conseguidas cuando se utilizan eyaculado fresco, no tratado y eyaculado que ha permanecido en reposo durante 15 a 30 minutos.

La figura 3A muestra una vista en plante de un dispositivo 101 para seleccion de espermatozoides de acuerdo con formas de realizacion de la presente invencion. Como se muestra, el dispositivo puede ser rotatorio simetrico con respecto a su eje longitudinal A.

Como se muestra en la vista despiezada ordenada ilustrada en la figura 3B, el dispositivo 101 comprende una primera camara 103 y un medio de desplazamiento 105. La primera camara 103 puede estar formada por una porcion interior de un extremo inferior de un recipiente 104, que rodea con preferencia los medios de desplazamiento 105 cuando el dispositivo 101 esta en el estado montado (ver la figura 3A). Aunque el recipiente 104 se muestra con un extremo inferior hemisferico, hay que indicar que el extremo inferior del recipiente puede tener cualquier forma adecuada. Como tal, el recipiente puede tener un extremo inferior conico, generalmente conico, truncado, redondo o plano. Ademas, el extremo inferior del recipiente puede estar formado de tal manera que el recipiente es auto- estable.

La figura 4 muestra una vista en planta de los medios de desplazamiento 105 ilustrados en las figuras 3A y 3B. Como se muestra, los medios de desplazamiento 105 pueden comprender un elemento de desplazamiento 109 localizado en una porcion inferior 107 del mismo. La porcion inferior 107 puede estar provista tambien con una segunda camara 115, que esta prevista por encima del elemento de desplazamiento 109 en la forma de realizacion ilustrada y formada integralmente con el.

Los medios de desplazamiento 105 pueden comprender, ademas, un mango 123 para la manipular y retener los medios de desplazamiento. Como tal, el mando 123 puede utilizarse por un usuario para deslizar los medios de desplazamiento dentro del recipiente 104 y la primera camara 103 (ver la figura 3A). Cuando se utiliza un mango hueco 123 como se muestra en las figuras, se puede conectar la atmosfera en conexion de fluido con la segunda camara 115, de tal manera que el segundo fluido se puede llenar entro y/o extraerse fuera de la segunda camara a traves del mango 123. El mango puede estar provisto con uno o varios espaciadores 125 para centrar los medios de desplazamiento 105 en el recipiente 104. Los espaciadores aseguran que los medios de desplazamiento 105 sean recibidos en el recipiente 104 de una manera coaxial. Debena indicarse, no obstante, que se pueden utilizar para esta finalidad tambien otros elementos conectados al recipiente y/o a los medios de desplazamiento, por ejemplo la tapa 119 de forma anular.

Como se muestra tambien, por ejemplo, en la figura 3A, se puede utilizar un tapon 127 para cerrar el recipiente 104. El tapon 127 puede ser parte de los medios de desplazamiento y se pueden fijar allf de una manera fija o deslizable. Alternativamente, el tapon 127 puede estar formado integralmente con los medios de desplazamiento 105, por ejemplo, como parte del mango 123. El tapon puede cerrar el recipiente 104 de una manera sellada, por ejemplo hermetica al aire.

Los detalles de la porcion inferior 107 de los medios de desplazamiento se ilustran esquematicamente en la vista ampliada de la figura 5. Como se muestra, la segunda camara 115 puede estar rodeada por un borde 117 que tiene una superficie extrema superior, una superficie de la pared exterior y una superficie interior de la pared. Una tapa 19 de forma anular se puede extender alrededor de al menos parte de la superficie exterior de la pared, la superficie extrema superior y la superficie interior de la pared el borde 117 a una distancia predeterminada formando un conducto 111. El elemento de desplazamiento 109 y la segunda camara 115 estan formados integralmente en la forma de realizacion mostrada. Se puede utilizar cualquier material adecuado, por ejemplo plastico o vidrio.

La pieza espaciadora 121 permite mantener el miembro 119 de forma anular a una distancia predeterminada con el fin de proporcionar al conducto 111 una anchura predeterminada. La tapa de forma anular puede estar formada integralmente con o conectada con el mango y puede estar formada de cualquier material adecuado, por ejemplo plastico o vidrio. El mango con la tapa de forma anular puede conectarse al elemento de desplazamiento de una manera fija.

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La figura 6 ilustra esquematicamente una seccion transversal del dispositivo a lo largo de su eje longitudinal A. Como se muestra aqm, el conducto 111 tiene sustancialmente la forma de una U invertida, extendiendose una primera pata hasta la primera camara y extendiendose una segunda pata hasta la segunda camara. El conducto 111 tiene un primer orificio 112 hacia la primera camara 103 y un segundo orificio 113 hacia la segunda camara 115. Los orificios 112, 113 estan configurados con preferencia de forma anular. Como se ilustra, el conducto 111 en forma de U se puede extender mas dentro de la segunda camara 115 que dentro de la primera camara 103. Las flechas mostrada en la figura 6 indican la trayectoria a lo largo de la cual pueden circular los espermatozoides desde la primera camara 103 hasta la segunda camara 115.

El uso del dispositivo para seleccion de espermatozoides de acuerdo con forma de realizacion de la presente invencion se ilustra, ademas, por los dibujos esquematicos de las figuras 7A-7C. Como se muestra en la figura 7A, el primer fluido seminal 135 puede ser recibido en la primera camara 103 formada en el extremo inferior del recipiente 104. Puesto que el primer fluido seminal puede ser, por ejemplo, semen de un paciente, el volumen proporcionado puede variar considerablemente.

Una vez que el primer fluido seminal 135 es recibido en la primera camara 103, los medios de desplazamiento 105, en particular el elemento de desplazamiento 109, pueden introducirse en dicha primera camara 103 hasta que el primer fluido seminal 135 esta localizado proximo al primer orificio 112. En el ejemplo ilustrado, los medios de desplazamiento se insertan una distancia L en el primer fluido seminal. La superficie superior del primer fluido seminal se desplaza, como consecuencia, una distancia D hacia el primer orificio 112 (ver la figura 7B). En la forma de realizacion ilustrada, el primer fluido seminal 135 no alcanza el primer orificio 112 totalmente. Mas bien, permanece un espacio S entre el primer fluido seminal 135 y el primer orificio 112, que es cubierto posteriormente por el segundo fluido 136 que fluye a traves del conducto 111 cuando la segunda camara 115 esta llena. Esto previene que el primer fluido seminal penetre en el conducto 111 por accion capilar y, por lo tanto, evita que los espermatozoides lleguen a la segunda camara 115 sin para el proceso de seleccion. No obstante, el desplazamiento del primer fluido seminal 135 hacia el primer orificio 112 puede ser considerado para alguna aplicaciones. Con el dispositivo de seleccion de la presente invencion, el espacio S entre el primer fluido seminal 135 y el primer orificio 112 puede ser igualado para un amplio rango de volumenes de primer fluido seminal previsto en la primera camara 135 insertando el elemento de desplazamiento 109 hasta la profundidad L adecuada. De esta manera, el volumen del segundo fluido 136 se puede mantener constante y se pueden obtener resultados reproducibles.

Como se muestra en la figura 7C, el segundo fluido, por ejemplo un medio tampon, es proporcionado posteriormente en la segunda camara 115. Como se ha mencionado anteriormente, el segundo fluido es introducido con preferencia en el conducto 111 por accion capilar y/o debido a la presion ejercida cuando se llena en la segunda camara, por ejemplo a lo largo del mango 123 por medio de una pipeta. De acuerdo con ello, el conducto 111 establece un puente de lfquido entre la primera camara 103 y la segunda camara 115, que permite a los espermatozoides moverse a lo largo de la trayectoria indicada por las flechas mostradas en las figuras 6 y 7C. Como se ilustra esquematicamente en la figura 7D, lo espermatozoides u otras celulas moviles en el primer luido 135 nadaran o fluiran desde la primera camara a traves del conducto 110 dentro del segundo fluido 136 contenido en la segunda camara.

Una vez que los espermatozoides estan separados (por ejemplo, despues de esperar durante 15-120 min.), se puede extraer el segundo fluido desde la segunda camara, por ejemplo por medio de una pipeta introducida a traves del mango 123. La primera camara 103 puede estar sellada con relacion al medio ambiente (es decir, cerrado en extremo superior abierto del recipiente 104 con el tapon 127, como se muestra en la figura 3A) con el fin de prevenir que el primer fluido seminal 135 sea introducido en la segunda camara 115 cuando se recoge el fluido contenido allr

Como se apreciara por los tecnicos en la materia, la secuencia de las etapas descritas anteriormente se puede cambiar en formas de realizacion. Por ejemplo, el segundo fluido 136 puede ser recibido en la segunda camara 115 antes de que los medios de desplazamiento sean introducidos en la primera camara 103. Ademas, los medios de desplazamiento pueden ser introducidos en la primera camara antes de que el primer fluido seminal 135 sea recibido en ella.

La tapa 119 de forma anular esta localizada con preferencia al menos 0,1 mm, con preferencia al menos 0,2 mm y mas preferentemente entre 0,3 mm y 0,4 mm desde el borde. De acuerdo con ello, el conducto 111 tiene con preferencia una anchura de al menos 0,1 mm, mas preferentemente al menos 0,2 mm y mas preferentemente entre 0,3 y 0,4 mm. Como se comprendera por el tecnico, las anchuras optimas dependeran de los materiales y de los fluidos empleados, ya que ambos pueden influir en la accion capilar. La longitud del conducto 111 esta con preferencia entre 15 y 40 mm, mas preferentemente entre 20 y 38 mm, mas preferentemente entre 25 y 35 mm, medido desde el primer orificio hasta el segundo orificio cuando se considera una seccion transversal del elemento de desplazamiento a lo largo del eje longitudinal B.

La superficie exterior de la porcion inferior de los medios de desplazamiento que se introduce en la primera camara, en particular la superficie exterior del elemento de desplazamiento 109, puede estar configurada de diferentes maneras, por ejemplo de una manera sustancialmente esferica, hemisferica, conica, truncada o cilmdrica. Tambien

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la superficie interior de la primera camara 103, en particular la superficie interior del extremo inferior cerrado del recipiente 104 puede tener varias formas. Como tal, la superficie interior puede ser, entre otras, sustancialmente hemisferica, conica, truncada o cilmdrica. Dependiendo de los requerimientos particulares, las formas mencionadas anteriormente se pueden combinar como se desee. Por ejemplo, se pueden utilizar medios de desplazamiento redondeados con recipientes conicos y viceversa.

Las figuras 8A-8E ilustran diferentes formas de realizacion de medios de desplazamiento para dispositivos de acuerdo con la presente invencion, cuyas formas tambien se pueden combinar. Como se muestra en estas figuras, se puede formar un intersticio G entre la porcion inferior de los medios de desplazamiento 105 y la pared interior del recipiente 104. Mas espedficamente, el intersticio G esta formado con preferencia entre el elemento de desplazamiento 109 y el recipiente 104.

Como se muestra en las figuras 8A-8C, el intersticio G puede ser variable. En este caso, el intersticio G se forma con preferencia de tal manera que una fraccion relativamente grande del primer fluido seminal recibido en la primera camara es desplazada desde la parte inferior de la primera camara proxima al primer orificio del conducto. El intersticio G puede proporcionar un espacio de coleccion ampliado proximo al primer orificio. Para esta finalidad, la anchura del intersticio G se incrementa con preferencia desde una parte inferior hacia una parte superior de la primera camara 103 cuando los medios de desplazamiento 105 estan totalmente insertados. Por ejemplo, el elemento de desplazamiento 109 puede seguir la superficie interior de la primera camara en el fondo del recipiente 104 (es decir, en el extremo inferior cerrado) y separado de la primera camara proxima al primer orificio 112 para formar el espacio de coleccion (ver, por ejemplo, la figura 8A).

No obstante, como se muestra en las figuras 8D y 8E, la forma del elemento de desplazamiento 109 puede coincidir tambien con la forma del extremo inferior del recipiente 104. Por ejemplo ambos elementos pueden tener una forma generalmente hemisferica (figura 8D), o generalmente conica (figura 8e) a lo largo de al menos sus segmentos de conexion. Como es evidente, ademas, a partir de las figuras 8A-8E, los medios de desplazamiento 109 pueden tener diferentes tamanos y volumenes de desplazamiento, siendo los medios de desplazamiento 109 de las figuras 8D y 8E alto “mas cortos” a lo largo del eje longitudinal B. Debena indicarse que cualquiera de los medios de desplazamiento descritos anteriormente (por ejemplo, los medios de desplazamiento ilustrados en las figuras 8A-8B) pueden ser “mas cortos” o “mas largos” para proveer el elemento de desplazamiento 109 con un volumen de desplazamiento y/o forma deseados.

Como se muestra, ademas, en las figuras 9 y 10, el dispositivo puede estar provisto con primera y segunda escalas 129, 131 para evaluar el volumen del primer fluido seminal previsto en la primera camara y el recorrido de los medios de desplazamiento con relacion al recipiente 104, respectivamente. En la forma de realizacion ejemplar mostrada en la figura 9 y 10, la primera escala 129 esta prevista sobre el recipiente 104 y la segunda escala 131 esta prevista sobre los medios de desplazamiento 105 (por ejemplo, en una porcion superior). No obstante, la segunda escala puede estar localiza tambien en el recipiente 104, por ejemplo en una porcion superior del mismo. Aunque se ha descrito anteriormente que la segunda escala 131 esta localizada en la porcion superior del recipiente 104 y los medios de desplazamiento 105, debena indicarse que la segunda escala puede estar localizada a cualquier altura adecuada a lo largo del eje longitudinal del dispositivo.

En formas de realizacion de la invencion, la segunda escala 131 puede indicar el recorrido requerido para los medios de desplazamiento dependiendo del volumen del primer fluido seminal previsto en la primera camara. Los usuarios del dispositivo podran evaluar entonces el volumen del primer fluido seminal en la primera camara por medio de la primera escala y posteriormente el recorrido requerido para los medios de desplazamiento en la segunda escala, sin tener que realizar etapas o calculos intermedios.

En algunos casos, la distancia hasta la que los medios de desplazamiento deben insertarse no sera inversamente proporcional al volumen recibido en la primera camara sino que estara correlacionada, por ejemplo, de alguna manera redproca. Por lo tanto, la distancia entre gradaciones adyacentes de la segunda escala 131 puede variar y puede ser, por ejemplo, menor para volumenes mayores.

Con el dispositivo de la presente invencion, se puede requerir el mismo volumen del segundo fluido, independientemente del volumen del primer fluido seminal recibido en la primera camara. Cono se muestra en las figuras 11A y 11B, el dispositivo 101 puede comprender tambien una pipeta 140. La pipeta 140 puede estar adaptada para ser insertada en el mando 123 y puede contener un volumen definido y/o fijo de segundo fluido 136, determinado de tal manera que se asegura la humidificacion optima del conducto. Puesto que el nivel del fluido en la primera camara se puede ajustar con los medios de desplazamiento, este volumen puede ser fijo, independientemente del volumen del primer fluido seminal previsto en la primera camara. Ademas, la pipeta 140 puede estar configurada para inyectar el segundo fluido 136 a una velocidad predeterminada y/o con una presion predeterminada con el fin de prevenir la formacion de burbujas de aire en el segundo fluido 136. El dispositivo 101 y la pipeta 140 pueden estar previstos como un equipo.

De acuerdo con formas de realizacion de la invencion, los medios de cierre (por ejemplo, tapon 127) pueden

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insertarse en la primera camara 103 despues de sellarla con ello. Mas espedficamente, los medios de cierre pueden insertarse en el recipiente 104 despues de sellarlo, por ejemplo, en su extremo superior abierto.

Como se ilustra en la figura 12A, los medios de cierre pueden estar configurados de tal manera que se pueden insertar hasta una profundidad maxima predeterminada en el recipiente. A modo de ejemplo, el tapon 227 tiene una porcion inferior con un primer diametro y una porcion superior con un segundo diametro que es mayor que el primer diametro. Por lo tanto, se forma una superficie de tope que se apoya a tope contra el extremo superior de la pared lateral del recipiente 104 y previene la insercion adicional del tapon cuando se ha alcanzado la profundidad maxima. La forma de realizacion ilustrada comprende, ademas, una tapa roscada opcional 228 que esta provista con una rosca interior 229 para acoplamiento con un medio de fijacion 106 del recipiente 104. Como se muestra, los medios de fijacion 106 pueden estar formados por una rosca exterior formada sobre la superficie exterior de la pared del recipiente. Debena indicarse que tambien se pueden emplear otros tapones (por ejemplo, un tapon generalmente cilmdrico que tiene un diametro que corresponde al diametro interior del extremo superior el recipiente 104). Tales tapones pueden estar fijados a la tapa 228 o pueden estar formados como componentes separados.

Cuando la segunda camara esta llena de la manera mostrada en la figura 12B, con el nivel del segundo fluido 136 mas alto que el primer orificio el conducto, la presion positiva causada por la insercion del tapon 127, 227 en el recipiente 104 puede empujar un volumen fijo del segundo fluido 136 localizado a lo largo de la parte interior del conducto proxima al segundo orificio en la segunda camara. Como se ha descrito anteriormente, el recipiente 104 se puede sellar posteriormente, de manera que no se introduce fluido adicional en la segunda camara cuando se extrae el fluido contenido allf.

Las figuras 13A-13E ilustran un dispositivo para seleccion de espermatozoides 101 de acuerdo con otra forma de realizacion de la presente invencion. En las figuras 13A, 13B y 13c, se muestra el dispositivo de seleccion 102 con el medio de desplazamiento 105 totalmente introducido en el recipiente 103 en vistas en planta, en seccion y en perspectiva, respectivamente.

Como se muestra en la figura 13B, se puede conseguir un espacio ideal S entre el primer fluido 135 contenido en la primera camara 13 y el orificio del conducto que conduce a la segunda camara 115 incluso si solo se proporcionan volumenes pequenos de fluido seminal 135 en la primera camara 103. Por el contrario, las figuras 13D y 13E ilustran el dispositivo de seleccion 101 con el medio de desplazamiento 105 localizado en la parte superior de la primera camara 103. Como se muestra mejor en la figura 13E, esta configuracion permite proporcionar un volumen relativamente grande del primer fluido en la primera camara 103. Por lo tanto, el dispositivo de las figuras 13A-13E puede proporcionar la misma funcionalidad que los dispositivos 3A-12B descritos anteriormente.

Como se muestra tambien en las figuras 13A-13E, el recipiente 104 se puede cerrar con una tapa 328, que pude estar provista, por ejemplo, con un ajuste de bayoneta 329 con el fin de fijarla a una estructura de fijacion 306 correspondiente del recipiente 104. No obstante, se indica que tambien se pueden utilizar otros medios en este contexto como, por ejemplo, una tapa roscada, una tapa con un collar roscado o una tapa con un ajuste elastico.

La tapa 328 puede comprender orificios de ventilacion 330. Con preferencia, los orificios de ventilacion 330 pueden cerrarse por medio de un tapon 327, que esta montado sobre la tapa 328 en la forma de realizacion ejemplar ilustrada en estas figuras. El tapon 327 se puede girar con relacion a la tapa 328 con el fin de cerrar los agujeros de ventilacion 330 de una manea hermetica al aire. Como tal, la primera camara 103 se puede sellar.

Como se muestra en las figuras 13B y 13E, el medio de desplazamiento 105 puede comprender un mango 123 con una rosca exterior 124. De manera correspondiente, un taladro pasante con una rosca interior 324 puede estar formado en la tapa, cuyo taladro pasante puede utilizarse para centrar el medio de desplazamiento 105 en el recipiente 104. Por medio de la interaccion de la rosca exterior y la rosca interior, el medio de desplazamiento 105 con la segunda camara 115 que forma el elemento de desplazamiento puede bajarse o elevarse en el recipiente, permitiendo de esta manera a un usuario ajustar la altura correcta de los medios de desplazamiento 105 de acuerdo con el volumen del primer fluido 135 proporcionado en la primera camara 103.

El recipiente 104 del dispositivo 101 de las figuras 13A-13E se muestra con un extremo inferior liso y puede ser autonomo si la necesidad de un soporte. No obstante, el fondo del recipiente 104 puede estar provisto con otras formas, como se describe en detalle anteriormente.

La figura 14A ilustra la estructura de canal 170 en una posicion vertical, de tal manera que el canal se puede utilizar para llenar lfquidos en un receptaculo o recipiente. La estructura de canal 170 tiene una primera pared circunferencial 171 y una segunda pared circunferencial 172, que se estrechan ambas hacia el interior de la estructura de canal 170 (es decir, hacia su eje central) en una direccion descendente. Como se muestra, la primera pared circunferencial 171 puede formar un canal exterior y la segunda pared circunferencial puede formar un canal interior con respecto a dicho canal exterior. Los canales interior y exterior pueden tener formas generalmente conicas a lo largo de al menos un segmento.

La primera y segunda paredes circunferenciales pueden estar conectadas por una pared superior 173. Con

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preferencia, un compartimiento de recuperacion 179 esta formado entre la primera y segunda paredes circunferenciales. El extremo superior del compartimiento de recuperacion puede estar cerrado por la pared superior 173 y puede estar abierto en una direccion descendente cuando la estructura del canal 170 esta posicionada de una manera vertical. Una, varias o todas las paredes de la estructura de canal pueden estar formadas de materiales polimericos o vidrio. Las paredes pueden estar formadas integralmente.

Ademas, la estructura de canal 170 comprende un orificio de entrada 175 y un orificio de salida 177. El orificio de salida 177 tiene con preferencia un area de la seccion transversal mas pequena que el orificio de entrada 175 y con preferencia esta dispuesta debajo del orificio de entrada 175 cuando la estructura de canal 170 esta en la posicion vertical, como se muestra en la figura 14A. Un orificio intermedio 176 puede estar dispuesto entre el orificio de entrada 175 y el orificio de salida 177.

Con preferencia, el orificio de entrada 175 esta formado en el extremo superior de la segunda pared circunferencial 172 y el orificio intermedio 176 esta formado en el extremo inferior de la segunda pared circunferencial 172. El orificio de salida 177 esta formado con preferencia en el extremo inferior de la primera pared circunferencial 171.

La estructura de canal 170 puede estar provista con una estructura de fijacion 174 para fijar el canal a un recipiente. En el ejemplo ilustrado, la estructura de fijacion 174 esta prevista sobre una proyeccion cilmdrica con una rosca interior. El recipiente 104 puede estar insertado en la proyeccion cilmdrica para prevenir la contaminacion de las paredes interiores del recipiente. No obstante, tambien se pueden prever otros tipos de conectores y/o estructuras de fijacion, como sea apropiado.

Como se muestra en la figura 14A, la estructura de canal puede comprender tambien un orificio de ventilacion 178 opcional, que conecta en fluido el interior del recipiente 104 y el medio ambiente. En la forma de realizacion mostrada, el orificio de ventilacion 178 proporciona una conexion de fluido entre el interior del recipiente 104 y el compartimiento de recuperacion 179. El orificio de ventilacion 178 puede ser proporcionado por un taladro que atraviesa la primera pared circunferencial 171.

Como se muestra, ademas, en la figura 14A, la estructura de tunel puede estar fijada al recipiente 104 del dispositivo de seleccion y se puede utilizar en combinacion con el. El recipiente 104 puede estar provisto con medios de fijacion 106 para esta finalidad. Los medios de fijacion 106 pueden estar configurados para acoplarse con la estructura de fijacion 174 de la estructura de canal 170. Como se ilustra, los medios de fijacion 106 pueden estar previstos proximos al orificio superior del recipiente 104 de acuerdo con las formas de realizacion de la invencion.

El recipiente 104 puede estar insertado en un soporte 180 para mantenerlo en una posicion vertical o puede ser auto-estable.

La figura 14B ilustra el principio funcional de la estructura de canal 170. Cuando el recipiente 104 y la estructura de canal 170 estan dispuestos en una posicion horizontal, volcada o volteada, la mayor parte o todo el lfquido (por ejemplo, el lfquido seminal 135) que esta contenido en el recipiente 104 y fluye hacia fuera a traves del orificio exterior 177 de la estructura de canal 170 es capturado en el compartimiento de recuperacion 179. Por lo tanto, se previene la contaminacion del lfquido que fluye fuera del recipiente y el lfquido puede retornar al recipiente 104, por ejemplo manteniendo la estructura de canal 170 y el recipiente 104 en la posicion vertical mostrada en la figura 14A.

Ademas, la estructura de fijacion 174 esta configurada con preferencia para proporcionar una fijacion a prueba de fugas con el recipiente 104, de tal manera que cuando el recipiente 104 esta dispuesto en una posicion horizontal, volcada y/o invertida, el lfquido 135 que permanece en el recipiente 104 no fuga a traves del orificio superior del recipiente 104. No obstante, el recipiente 104, la estructura de canal 170 y/o el soporte 180 pueden estar configurados tambien de tal manera que el fondo del recipiente esta por debajo de su orificio cuando se vuelca el recipiente y/o se coloca horizontalmente. En este caso, puede no ser necesaria una junta de estanqueidad entre la estructura de fijacion 174 de la estructura de canal 170 y los medios de fijacion 106 del recipiente 104.

Las figuras 15A y 15B muestran otra forma de realizacion de una estructura de canal de acuerdo con la presente invencion en vistas en planta y en seccion, respectivamente. La estructura de canal 470 es similar a la estructura de canal 170 de las figuras 14A y 14B y se utilizan los mismos numeros de referencia para algunos de los elementos que son iguales o similares. En este contexto, se hace referencia a la descripcion de la estructura de canal 170 proporcionada anteriormente para evitar repeticiones.

Como se puede ver a partir de las figuras 15A y 15B, la estructura de canal 470 esta configurada con medios de fijacion en forma de un ajuste de bayoneta 474 que coopera con la seccion de fijacion 306 correspondiente proporcionada en el recipiente. De acuerdo con ello, la estructura de canal 470 esta configurada para uso con el dispositivo de seleccion 101 de las figuras 13A-13E y la estructura de canal se puede fijar al recipiente por el mismo mecanismo que la tapa 327.

Finalmente, la figura 16 muestra una tabla, en la que la concentracion de espermatozoides conseguir es informada para selecciones realizadas despues de dejar que el eyaculado repose durante 15 a 30 min. y sin tal periodo de

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reposo. Para los fines de este estudio, el eyaculado de cuatro pacientes diferentes (pacientes A-D) ha sido procesado dentro del dispositivo de la presente invencion. La "concentracion final" indicada en la Tabla en millones es espermatozoides por ml informa de la concentracion alcanzada en el segundo fluido despues de la seleccion, que es el fluido a partir del cual se recuperan entonces los espermatozoides para fertilizacion in-vitro. No se requieren otras etapas de separacion. Aunque se ha utilizado una muestra de esperma diferente para cada medicion, se ha mostrado que todos los pacientes implicados - en varios estudios previos - proporcionan muestras de esperma de volumen y calidad muy similar despues de un periodo de abstinencia de 3 dfas.

Como se puede observar, se han conseguido mejoras sustanciales en todos los casos, en los que la muestra de semen se utiliza directamente despues de la eyaculacion, incluyendo una concentracion diez veces mas alta de espermatozoides. A la inversa, se obtuvo una concentracion considerablemente mas baja (hasta diez veces menor) cuando se espero de 15 a 3 minutos, dejando reposar el eyaculado para licuarlo. Por lo tanto, se prefiere introducir muestras de semen en el dispositivo de seleccion de la presente invencion inmediatamente despues de la eyaculacion, sin periodos de reposo y/o el uso de recipientes adicionales.

Como se reconocera por el tecnico, a la vista de la descripcion proporcionada anteriormente, la presente invencion proporciona dispositivos y metodos de seleccion mejorados que se pueden utilizar con volumenes variables de fluido seminal. En particular, el dispositivo se puede utilizar para volumenes de fluido seminal inferiores a 1 ml o inferiores a 0,5 ml, sin requerir dilucion. El tiempo requerido para separar tales muestras de esperma se pueden reducir significativamente, reduciendo de esta manera la tension qmmica debida al contacto con O2 atmosferico. Ademas, se requieren menos etapas de manipulacion y se reduce tambien la tension mecanica.

Puesto que la primera camara puede estar sellada con relacion al medio ambiente, se previene la contaminacion de a muestra recogida por espermatozoides con roturas de la cadena y/o baja movilidad. Ademas, se reduce adicionalmente la exposicion de espermatozoides a oxfgeno antes, durante y/o despues del procedimiento de seleccion.

Adicionalmente, se puede utilizar la misma cantidad de medio independientemente del volumen de fluido seminal recibido en la primera camara. Por lo tanto, se simplifica la manipulacion del dispositivo y se obtienen mas facilmente resultados repetibles. La humidificacion de la conexion de fluido se mejora, por ejemplo, cuando se utiliza la pipeta descrita anteriormente para inyectar el medio, lo que puede conducir tambien a mejores resultados cuando se realiza el procedimiento de seleccion.

Aunque la invencion se ha ilustrado y descrito en detalle en los dibujos y en la descripcion anterior, tal ilustracion y descripcion deben considerarse ilustrativas o ejemplares y no restrictivas, Se comprendera que se pueden realizar cambios y modificaciones por los tecnicos en la materia dentro del alcance de las siguientes reivindicaciones. En particular, la presente invencion cubre otras formas de realizacion con cualquier combinacion de caractensticas de diferentes formas de realizacion descritas anteriormente.

Claims (15)

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   REIVINDICACIONES

   1.- Dispositivo para seleccion de espermatozoides, que comprende:

   una primera camara con figurada para recibir un primer fluido seminal, y

   una segunda camara configurada para recibir un segundo fluido, estando la segunda camara en comunicacion de fluido con la primera camara por medio de al menos un conducto que tiene un primer orificio hacia la primera camara y un segundo orificio hacia la segunda camara, estando la longitud del conducto entre 5 y 35 mm, y

   un medio de desplazamiento para desplazar al menos algo del primer fluido seminal hacia el primer orificio.
2. 2. - Dispositivo de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que el medio de desplazamiento es recibido de forma desplazable en la primera camara.
3. 3. - Dispositivo de acuerdo con las reivindicaciones 1 o 2, en el que el medio de desplazamiento esta adaptado para desplazar el primer fluido seminal de tal manera que la superficie superior del primer fluido seminal esta dispuesta a una distancia predeterminada desde el primer orificio.
4. 4. - Dispositivo de acuerdo con la reivindicacion 1, 2 o 3, en el que una primera camara es proporcionada por un recipiente con un extremo inferior cerrado y una porcion inferior del medio de desplazamiento tiene una forma exterior que corresponde generalmente a la forma interior del extremo inferior cerrado del recipiente.
5. 5. - Dispositivo de acuerdo con la reivindicacion 1, 2 o 3, en el que la primera camara es proporcionada por un recipiente con un extremo inferior cerrado y se forma un intersticio variable entre el medio de desplazamiento y el recipiente, con preferencia en el que en una posicion totalmente insertada del medio de desplazamiento, el tamano del intersticio se incrementa desde una parte inferior de la primera camara hacia una parte superior de la primera camara.
6. 6. - Dispositivo de acuerdo con un revision precedente, en el que el medio de desplazamiento comprende un elemento de desplazamiento y un mango para manipular el medio de desplazamiento.
7. 7. - Dispositivo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que la segunda camara esta formada en el medio de desplazamiento.
8. 8. - Dispositivo de acuerdo con la reivindicacion 6 o 7, en el que el mango esta hueco y se abre en la segunda camara.
9. 9. - Dispositivo de acuerdo con cualquier reivindicacion precedente, en el que el conducto tiene la seccion transversal de una U invertida, una primera pata de dicha U se extiende hasta la primera camara y una segunda pata de dicha U se extiende hasta la segunda camara.
10. 10. - Dispositivo de acuerdo con cualquier reivindicacion precedente, en el que el cuerpo de desplazamiento comprende un borde que se extiende hacia arriba y en el que el mango esta conectado con una tapa de forma anular, en el que el conducto esta formado entre el borde y la tapa.
11. 11. - Dispositivo de acuerdo con cualquier reivindicacion precedente, en el que el recipiente esta provisto con una primera escala para evaluar un volumen de un primer fluido seminal en la primera camara, comprendiendo, ademas, el dispositivo una segunda escala para evaluar el recorrido del medio de desplazamiento, en el que la segunda escala indica con preferencia el recorrido requerido del medio de desplazamiento en funcion del volumen indicado por la primera escala.
12. 12. - Dispositivo de acuerdo con cualquier reivindicacion precedente, que comprende, ademas, un medio de cierre para sellar la primera camara con relacion al medio ambiente.
13. 13. - Metodo para seleccionar celulas moviles utilizando el dispositivo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, que incluye las etapas:

    (a) proporcionar un primer fluido que comprende celulas moviles en la primera camara,

    (b) proporcionar un medio tampon en la segunda camara; y

    (c) conectar la primera camara y la segunda camara por medio de una conexion lfquida; y

    (d) desplazar al menos algo del primer fluido hacia, cerca o hasta el primer orificio del conducto con el cuerpo de desplazamiento.

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14. 14. - El metodo de la reivindicacion 13, en el que el primer fluido es sustancialmente eyaculado humano no mezclado.
15. 15. - Kit que comprende

    un dispositivo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 y

    una estructura de canal para llenar un lfquido en un recipiente, teniendo la estructura de canal un orificio de entrada con una primera area de la seccion transversal, un orificio de salida con una segunda area de la seccion transversal y un orificio intermedio dispuesto entre el orificio de entrada y el orificio de salida, siendo la primera area de la seccion transversal mayor que la segunda area de la seccion transversal, en la que la estructura de canal tiene un compartimiento de recuperacion que esta configurado para recoger y retener al menos parte del lfquido contenido en el recipiente cuando el recipiente y/o canal estan tendidos horizontalmente o invertidos.