ES2605652T3 - Método para producir plantas fértiles a través de inducción de BBM durante la transformación - Google Patents

Método para producir plantas fértiles a través de inducción de BBM durante la transformación Download PDF

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Abstract

Un método para producir una planta de pimiento dulce Capsicum annuum transgénica fértil, dicho método comprende: (a) transformar una célula vegetal de pimiento dulce Capsicum annuum con un vector de expresión que codifica una proteína babyboom (BBM), en donde dicho vector de expresión produce una actividad de transcripción nuclear inducible de dicha proteína babyboom (BBM); (b) regenerar dicha célula vegetal de pimiento dulce Capsicum annuum transformada en estructuras tipo brote (SLS) en condiciones inductoras que dan como resultado una actividad de transcripción nuclear de dicha proteína babyboom (BBM), dichas condiciones inductoras comprenden poner en contacto dicha célula vegetal de pimiento dulce Capsicum annuum transformada con un medio que comprende un agente que produce dicha actividad de transcripción; (c) cultivar dichas estructuras tipo brote (SLS) en una planta de pimiento dulce Capsicum annuum transgénico fértil en condiciones no inductoras que dan como resultado la ausencia substancial de actividad de transcripción nuclear de dicha proteína babyboom (BBM); en donde dicha proteína babyboom (BMM) tiene al menos 70%, preferiblemente al menos 80%, más preferiblemente al menos 90%, incluso más preferiblemente al menos 95%, y lo más preferiblemente al menos 99% de identidad de secuencia a nivel de aminoácido con la SEQ ID NO: 1 en condiciones en que dicha proteína babyboom (BBM) tiene actividad de transcripción.

Description

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imagen3
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imagen5
Tabla 1.
número gi
especie de planta
gi: 21069055
Brassica napus
gi: 21069053
Brassica napus
gi: 58761187
Medicago trunculata
gi: 21069057
Arabidopsis thaliana Col 0
gi: 151936654
Arabidopsis thaliana C 24
gi: 46451393
Arabidopsis thaliana
gi: 9755766
Arabidopsis thaliana
gi: 195615496
Zea mays
gi: 195612040
Zea mays
gi: 21304227
Oryza sativa
gi: 189170271
Pennisetum squamulatum
gi: 189170265
Pennisetum squamulatum
gi: 189170267
Cenchrus ciliaris
gi: 189170269
Cenchrus ciliaris
Tabla 1: Números GI (Identificador GenInfo) de proteínas de varias especies de plantas que se parecen a BBM de SEQ ID NO: 1.
Se describe la secuencia de nucleótidos que codifica una proteína BBM que está operativamente ligada a un elemento genético seleccionado del grupo que consiste en un activador de transcripción, un activador de 5 transcripción o un sistema de localización nuclear.
Tales elementos genéticos permiten el control de la actividad de la proteína BBM para permitir una actividad espacial y/o temporal de la proteína BB6M. En esta memoria la actividad espacial quiere decir que se puede lograr actividad de BBM específica de un órgano o tejido. Una ventaja de usar tales elementos genéticos es que se puede prevenir la aparición de problemas relacionados con la expresión o actividad inapropiadas de la proteína
10 BBM.
En una realización preferida la proteína BBM está operativamente ligada a un sistema de localización nuclear. En esta realización es posible controlar la actividad de BBM originando la proteína BBM::GR fusionada translacionalmente para migrar o translocarse al núcleo.
Cuando el elemento genético según la invención es un activador de transcripción, es posible regular la actividad de
15 BBM a un nivel transcripcional. Tal sistema de inducción de la transcripción puede ser un sistema que comprende un promotor inducible por etanol o un promotor inducible por choque térmico. Se puede usar un activador de traducción, que se puede localizar en la secuencia 5’UTR o 3’UTR, para regular la actividad BBM mediante control de la traducción. Quedará claro para el experto qué sistemas se pueden usar para inducir actividad BBM según los elementos genéticos mencionados anteriormente. Otros sistemas apropiados incluyen un sistema inducible por
20 estrógeno, un sistema inducible por PRP, un sistema inducible por UAS, cualquier sistema que comprenda VP16.
En una realización preferida de la presente invención la secuencia de nucleótidos que codifica una proteína BBM está operativamente ligada a una secuencia de nucleótidos caracterizada por la SEQ ID NO: 2. El péptido codificado por esta secuencia de nucleótidos permite que se induzca la actividad de la proteína BBM cuando el material vegetal se pone en contacto con un medio que comprende dexametasona (DEX).
25 Según la presente invención, la célula vegetal o material vegetal transformado regenerador se pone en contacto con un medio que comprende un agente adecuado para la inducción de actividad de la proteína BBM.
Se describe el etanol como el agente que es adecuado para la inducción de la actividad de la proteína BBM. El etanol se puede usar para inducir la transcripción del gen exógeno BBM. También son adecuados otros sistemas
7
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Tabla 3
Nº de explantes
Nº de brotes %
Ferrari
886 15 1,7
Fiesta
1.304 626 48
Spirit
1.781 61 3,4
La Tabla 3 muestra los porcentajes de formación de brotes de diferentes variedades después de la transformación con 35S::BBM:GR.
Tabla 4
ID de la planta
Origen nº sembrado Km R Km S ratio nº locus
1702
Fiesta 42 31 11 3:1 1
2559
Fiesta 100 74 24 3:1 1
2639
Fiesta 113 0 113 0:1 0
2647
Fiesta 78 0 78 0:1 0
2649
Fiesta 70 51 19 3:1 1
2650
Fiesta 50 32 14 3:1 1
2655
Fiesta 50 37 11 3:1 1
2656
Fiesta 63 48 15 3:1 1
2676
Fiesta 24 20 4 5:1 >1
2691
Fiesta 14 13 1 13:1 >1
2692
Fiesta 49 42 7 6:1 >1
2693
Fiesta 100 98 2 49:1 >1
2696
Fiesta 77 65 12 5:1 >1
2697
Fiesta 100 75 25 3:1 1
2700
Fiesta 100 82 18 5:1 >1
2831
Ferrari 79 69 10 7:1 >1
2832
Ferrari 65 54 11 5:1 >1
3041
Ferrari 100 75 25 3:1 1
La Tabla 4 presenta el análisis de segregación de la descendencia de plantas transgénicas maduras autofertilizadas crecidas en medio selectivo.
5 Discusión
El resultado muestra que usando un gen BBM sobre-expresado inducible, se pueden generar brotes de buena calidad de plantas de pimiento dulce transgénicas directamente o a través de embriogénesis somática y que el transgén se hereda a la siguiente generación.
Se ha estudiado intensivamente la inducción de la formación de embrión somático en especies y variedades de
10 pimiento picante que conduce a la regeneración en plantas normales. En el pimiento dulce, sin embargo, fue posible la inducción de embriones somáticos pero los embriones carecen del meristemo apical y no se desarrollan
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10
15
20
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35
40
en plantas normales. Mediante activación del gen BBM durante el proceso de regeneración fue posible regenerar plantas de pimiento dulce fértiles.
Ejemplo 2
Transformación genética de Petunia recalcitrante W138 con BBM
La línea de Petunia W138 ha demostrado ser recalcitrante a la regeneración y la posterior producción de plantas transgénicas.
En un intento de obtener plantas de Petunia transgénicas maduras, se transformaron explantes de W138 usando un protocolo estándar para la transformación de petunia.
Se transformaron dos líneas de origen W138 (NC2676-10, NC2676-11) y una de origen W5 (293) con el constructo BBM inducible (35S::BBM:GR), o un constructo T-DNA control, en este caso que contiene el gen reportero GUS. Se obtuvieron callos resistentes a Kanamicina de todas las tres líneas con ambos constructos, con la mayor eficiencia para NC2676-11, seguido de 293. Los callos del constructo control presentaron una fuerte expresión GUS.
Aparecieron primero estructuras tipo brote (SLS) y primordios en la línea NC2676-11 seguido de las otras en el mismo orden, aunque se observó desarrollo y crecimiento solamente en callos transformados con 35S::BBM:GR (Fig. 14 y 15).
Al igual que en el pimiento dulce, la sobre-expresión de BBM lleva a la formación de brotes transgénicos en una planta recalcitrante.
Ejemplo 3
Análisis de la progenie de líneas 35S::BBM:GR
Se creció la progenie homocigota T1 de múltiples líneas 35S::BBM:GR in vitro en medio de co-cultivo que comprende además TDZ, DEX y/o TDZ y DEX o sin TDZ/DEX como un control.
El cultivo de explantes de cotiledón de líneas 35S::BBM:GR homocigotas reveló diferencias de desarrollo causadas por la proteína BBM inducida nuclear y no nuclear. En el borde del cotiledón donde ha sido transversalmente cortado se forman embriones somáticos (Fig. 19). Estos efectos no se observan en explantes de cotiledón crecidos en medio sin DEX.
Los resultados en esta memoria muestran que se puede usar la expresión de BBM exógena y controlada para producir brotes morfológicamente normales y de alta calidad de pimiento dulce transgénico. Tales embriones somáticos de hecho tenían una semejanza sorprendente con embriones cigóticos. De hecho, se pueden inducir un alto número (>100) de embriones somáticos en cotiledones de pimiento. La alta cantidad de tales embriones que se pueden identificar en explantes de pimiento es suficiente para permitir un factor de multiplicación de al menos 100 veces a alcanzar en la generación de plantas de pimiento dulce maduras en cultivo de tejidos. Este hallazgo también permite multiplicar plantas de pimiento dulce estériles masculinas sin la necesidad de usar una línea de mantenimiento.
Referencias
Bent AF. (2000) Arabidopsis in planta transformation. Uses, mechanisms, and prospects for transformation of other species. Plant Physiol. 124:1540-7.
Broothaerts W, Mitchell HJ, Weir B, Kaines S, Smith LM, Yang W, Mayer JE, Roa-Rodríguez C, Jefferson RA (2005) Gene transfer to plants by diverse species of bacteria. Nature 433:629-33.
De Witt and Bosland (1997) Pepper of the world: an identification guide. Ten Speed Press, Berkley.
Gamborg O.L. MRA, Ojima K. (1968) Nutrient Requirement of suspensión cultures of soybean root cells. Experimental Cell Research 50
Murashige T, Skoog F (1962) A Revised Medium for Rapid Growth and Bio Assays with Tobacco Tissue Cultures. Physiologia Plantarum 15: 473-497.
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Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102165920B (zh) * 2011-02-21 2012-11-14 浙江省萧山棉麻研究所 一种水生鸢尾体细胞再生的组培方法
US10492394B2 (en) 2013-11-01 2019-12-03 Enza Zaden Beheer B.V. Red-yellow striped peppers
BR112018008705B1 (pt) 2015-10-30 2023-12-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc Método para produzir uma planta transgênica
CN107022616B (zh) * 2017-04-26 2020-09-29 江苏省农业科学院 藜麦二态性InDel分子标记及其开发方法与应用
US20230079816A1 (en) * 2020-02-12 2023-03-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Cas-mediated homology directed repair in somatic plant tissue
EP4019638A1 (en) * 2020-12-22 2022-06-29 KWS SAAT SE & Co. KGaA Promoting regeneration and transformation in beta vulgaris
EP4019639A1 (en) * 2020-12-22 2022-06-29 KWS SAAT SE & Co. KGaA Promoting regeneration and transformation in beta vulgaris

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6002069A (en) * 1996-06-05 1999-12-14 The Regents Of The University Of California Seed plants exhibiting inducible early reproductive development and methods of making same
EP1057891A1 (en) * 1999-06-02 2000-12-06 Centrum Voor Plantenveredelings- En Reproduktieonderzoek Use of the BNM3 transcriptional activator to control plant embryogenesis and regeneration processes
EP1711614B1 (en) * 2004-02-02 2009-01-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Ap2 domain transcription factor odp2 (ovule development protein 2) and methods of use
US7148402B2 (en) * 2004-05-21 2006-12-12 Rockefeller University Promotion of somatic embryogenesis in plants by PGA37 gene expression
US8878002B2 (en) * 2005-12-09 2014-11-04 Council Of Scientific And Industrial Research Nucleic acids and methods for producing seeds with a full diploid complement of the maternal genome in the embryo
NZ570698A (en) * 2006-02-06 2012-02-24 Simplot Co J R Generation of marker-free and backbone-free transgenic plants using Agrobacterium containing a plasmid comprising a transfer DNA gene and a plant hormone biosynthesis gene
ATE500337T1 (de) * 2006-05-18 2011-03-15 Biogemma Fr Verfahren zur durchführung homologer rekombinationen in pflanzen
US20080301836A1 (en) * 2007-05-17 2008-12-04 Mendel Biotechnology, Inc. Selection of transcription factor variants

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US9212369B2 (en) 2015-12-15
JP5616441B2 (ja) 2014-10-29
HUE031906T2 (en) 2017-08-28
KR101497774B1 (ko) 2015-03-02
CN102725414A (zh) 2012-10-10
HK1176967A1 (zh) 2013-08-09
AR077181A1 (es) 2011-08-10

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