ES2604709T3

ES2604709T3 - Composición para prevenir o atenuar las arrugas de la piel que contiene extracto de honeybush fermentado como principio activo

Info

Publication number: ES2604709T3
Application number: ES12815040.6T
Authority: ES
Inventors: Sungwook CHAE; Hwa-Jung CHOI; Jae-Hyoung SONG; Goya Choi; Mi Young Lee
Original assignee: Korea Institute of Oriental Medicine KIOM
Current assignee: Korea Institute of Oriental Medicine KIOM
Priority date: 2011-07-18
Filing date: 2012-07-11
Publication date: 2017-03-08
Anticipated expiration: 2032-07-11
Also published as: EP2735304A4; KR101295368B1; US20140127189A1; WO2013012197A2; US9439849B2; EP2735304A2; WO2013012197A3; EP2735304B1; KR20130010250A

Abstract

Uso de una composición cosmética que comprende honeybush fermentado como principio activo para prevenir o atenuar las arrugas de la piel, en el que el honeybush fermentado se prepara mediante el método que comprende las siguientes etapas: 1) inocular leche animal con bacteria de ácido láctico: 2) mezclar la leche inoculada de la etapa 1) con una fuente de carbono y el extracto de honeybush; y 3) fermentar la mezcla de la etapa 2).

Description

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

DESCRIPCION

Composicion para prevenir o atenuar las arrugas de la piel que contiene extracto de honeybush fermentado como principio activo

Antecedentes de la invencion

1. Campo de la invencion

La presente invencion se refiere a una composicion para prevenir o atenuar las arrugas de la piel que contiene honeybush fermentado como principio activo.

2. Descripcion de la tecnica anterior

A medida que se envejece, la piel humana tambien envejece y el sfntoma mas representative del envejecimiento de la piel son las arrugas. Las arrugas son un fenomeno que muestra el envejecimiento. El mecanismo principal implicado en la formacion de las arrugas de la piel se explica de la siguiente manera: Cuando la piel se expone de manera continua al estres oxidativo que proviene del ambiente toxico tal como la contaminacion del aire, exposicion a UV, estres o enfermedad, aumentan los radicales del cuerpo para destruir colageno, elastina y acido hialuronico, que son tejidos conectivos dermicos y, por tanto, se produce un asentamiento de una determinada parte de la piel (arruga). Tal mecanismo puede oxidar lfpidos adicionalmente en la membrana celular, dando como resultado la destruccion celular, provocando enfermedades tales como dermatitis, acne y cancer de piel.

La causa de las arrugas, segun la estructura de la piel, se explica en mas detalle a continuacion en el presente documento. La estructura de la piel esta compuesta en gran parte por la epidermis y la dermis. La epidermis es una capa fina protectora compuesta por queratinocitos, melanocitos y celulas de Langerhans. La dermis es una capa mas gruesa y mas complicada compuesta por tejidos conectivos y tejidos fibrosos que comprenden colageno y fibras elasticas. El colageno es una protefna estructural principal de la piel, que es responsable de la resistencia a la traccion y la tenacidad, mientras que la fibra elastica desempena un papel importante en la resiliencia de la piel y la elasticidad de la piel.

Cuando la renovacion de queratinocitos disminuye en la epidermis, se acumula capa cornea y, por tanto, la capa cornea se hace mas gruesa y pierde la capacidad de retencion de humedad. Por tanto, la queratina se endurece y como resultado se generan arrugas. La zona de la union dermoepidermica tiene una implicacion importante en el soporte de celulas epidermicas, la union, la transferencia de nutrientes y la regulacion de diferenciacion epidermica. El colageno IV y VII puede reducirse por motivos de envejecimiento, y particularmente por UV. En este momento, el papel de soporte de la epidermis y la dermis de colageno se debilita, y tambien lo hace la funcion de transmision selectiva. Entonces, los componentes toxicos pueden afectar a la dermis facilmente para provocar arrugas (Keene DR et al., The Journal of Cell Biology 1987 1 04(3):611-621).

La dermis es el tejido que comprende tejidos conectivos debajo de la epidermis, que no es tan compacta como los queratinocitos, las celulas epidermicas, y tiene espacio abierto extracelular. Es decir, la dermis esta compuesta por una estructura de red de macromoleculas denominada matriz extracelular. Dicha matriz extracelular se genera por fibroblastos en la dermis y se compone de protefnas fibrosas tales como colageno y elastina y polisacaridos denominados mucopolisacaridos acidos tales como acido hialuronico. Los tejidos conectivos implicados en la formacion de arrugas de la piel son los componentes fibrosos tales como fibra de colageno, fibra reticular y fibra elastica. El colageno y la elastina cooperan de manera elaborada en la dermis para mantener la flexibilidad y elasticidad de la piel.

El colageno es el tejido fibroso responsable de la flexibilidad de la piel, que ocupa aproximadamente el 70% del tejido dermico total. Como elemento principal que compone la piel, el colageno esta implicado en la rigidez mecanica, coherencia de tejido, union celular y diferenciacion celular en la capa dermica.

El papel basico de la piel es evitar que la humedad se evapore del cuerpo humano y evitar la invasion de materiales toxicos extranos. Como la piel siempre esta expuesta a estfmulos externos, tiene necesariamente muchos mecanismos de defensa. La piel es un tipo de expresion de la belleza. Es decir, la piel sana y luminosa se acepta como un signo de belleza. Recientemente, no son solo las mujeres sino tambien los hombres los que estan interesados en problemas de la piel incluyendo el envejecimiento de la piel y, por tanto, se desarrollan rapidamente productos para el cuidado de la piel.

Para reducir las arrugas de la piel, se incluyen en cosmeticos o medicamentos acido ascorbico, a-tocoferol, retinol y sus derivados, y superoxido dismutasa (SOD) como antioxidante o eliminador de arrugas de la piel, para prevenir arrugas y otras enfermedades de la piel. Sin embargo, estos materiales tienen desventajas de alto precio e inestabilidad qufmica, que los hace no practicos. Por tanto, el desarrollo de un material que es mas seguro y mas eficaz para atenuar las arrugas de la piel ha sido un objetivo importante de estudio no solo en la industria de la medicina y de la alimentacion sino tambien en la industria cosmetica.

Los retinoides usados para composiciones cosmeticas para atenuar las arrugas de la piel se ejemplifican por retinol,

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

retinal, acido retinoico, acetato de retinilo, linoleato de retinilo, y palmitato de retinilo, etc. Entre ellos, el retinol es un compuesto endogeno que es esencial para la diferenciacion y el crecimiento de tejido epitelial. En comparacion con retinoides tales como acido retinoico, etc, el retinol es altamente estable, lo que lo hace una materia prima excelente, apropiada en cosmeticos para atenuar las arrugas de la piel.

Se ha demostrado mediante pruebas clfnicas para la piel que dicho retinoide es eficaz para atenuar las arrugas de la piel. Sin embargo, cuando se anade en un producto para el cuidado de la piel, podrfa provocar cambios en el color y el aroma del producto. Ademas, incluso con una pequena dosis, puede provocar efectos secundarios tales como irritacion en la piel. La reduccion de tftulo provocado por cambios en las propiedades y la consiguiente disminucion de eficacia son otros problemas.

Para solucionar dichos problemas del retinoide, se requiere desarrollar una composicion cosmetica para atenuar las arrugas usando materiales bioactivos generados a partir de sustancias naturales. Tales materiales bioactivos son ventajosos en termino de menos efectos secundarios en la piel y menos cambios qufmicos de las propiedades, indicando que son excelentes en estabilidad y seguridad. Por tanto, los estudios se han concentrado en usar plantas medicinales para el desarrollo de una composicion cosmetica para prevenir o atenuar las arrugas de la piel.

El honeybush (Cyclopia intermedia) es un arbusto de hoja perenne que pertenece a Melianthaceae, que solo se distribuye en una zona estrecha de cadena montanosa en la costa este-oeste de la region del Cabo de Sudafrica y tiene una gran similitud con el rooibos. Cyclopia intermedia recibe el nombre de “honeybush” (arbusto de miel) porque su flor huele a miel. La manera de consumir esta hierba o su efecto es similar al del rooibos, pero el sabor es mucho mas dulce que el rooibos. El honeybush se procesa principalmente como te. Contiene una pequena cantidad de tanina pero no tiene nada de cafefna. En su lugar, el honeybush contiene diversos minerales (por ejemplo, hierro, potasio, calcio, cobre, cinc, magnesio, etc). Se ha usado para tratar resfriados, insomnio y dolores de estomago desde hace mucho y se conoce que tiene un efecto de reduccion de la glucosa en sangre. En la descripcion del documento PCT/EP2008/052863, se describe el efecto antidiabetico del extracto de honeybush. Segun un informe anterior, el extracto de honeybush puede controlar la diferenciacion del papiloma esofagico (Sissing L et al., Nutrition and cancer 2011 63(4):600-6l0). Sin embargo, todavfa no se conoce si el extracto de honeybush tiene el efecto de atenuar las arrugas de la piel.

Los presentes inventores estudiaron el desarrollar extractos de plantas naturales para atenuar las arrugas de la piel. Como resultado, los presentes inventores confirmaron que el extracto de honeybush o honeybush fermentado podrfa reducir la longitud y profundidad de las arrugas de la piel provocadas por la irradiacion UV y reducir el espesor de la capa epidermica, ademas de suprimir la reaccion de degradacion del tejido de colageno, sugiriendo un efecto de atenuacion de las arrugas de la piel. Por consiguiente, los presentes inventores completaron esta invencion confirmando que el extracto de honeybush o honeybush fermentado podrfa usarse de manera eficaz como un principio activo de una composicion para prevenir o atenuar las arrugas de la piel.

Sumario de la invencion

Es un objeto de la presente invencion proporcionar una composicion para prevenir o atenuar las arrugas de la piel que contiene extracto de honeybush (Cyclopia intermedia), la fraccion del mismo, o honeybush fermentado como principio activo.

Es otro objeto de la presente invencion proporcionar un metodo para la prevencion de arrugas de en piel que contiene la etapa de administrar el extracto de honeybush, la fraccion del mismo, o honeybush fermentado a un sujeto.

Es tambien un objeto de la presente invencion proporcionar un metodo de atenuacion para las arrugas de la piel que contiene la etapa de administrar el extracto de honeybush, la fraccion del mismo, o honeybush fermentado a un sujeto que tiene arrugas de la piel.

Ademas, es un objeto de la presente invencion proporcionar un uso del extracto de honeybush, la fraccion del mismo, o honeybush fermentado para la preparacion de una composicion para prevenir o atenuar las arrugas de la piel.

Para lograr el objeto anterior, la presente invencion proporciona una composicion cosmetica para prevenir o atenuar las arrugas de la piel que contiene honeybush fermentado como principio activo.

La presente invencion tambien proporciona una preparacion externa para la piel para prevenir o atenuar las arrugas de la piel que contiene honeybush fermentado como principio activo.

La presente invencion proporciona ademas una composicion farmaceutica para prevenir o atenuar las arrugas de la piel que contiene honeybush fermentado como principio activo.

La presente invencion tambien proporciona un alimento saludable para prevenir o atenuar las arrugas de la piel que contiene honeybush fermentado como principio activo.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

La presente invencion tambien proporciona un metodo de prevencion de las arrugas de la piel que contiene la etapa de administrar honeybush fermentado a un sujeto.

La presente invencion tambien proporciona un metodo de atenuacion para las arrugas de la piel que contiene la etapa de administrar honeybush fermentado a un sujeto que tiene arrugas de la piel.

La presente invencion tambien proporcion un uso de honeybush fermentado para la preparacion de una composicion cosmetica para prevenir o atenuar las arrugas de la piel.

La presente invencion tambien proporciona un uso del honeybush fermentado para la preparacion de una preparacion externa para la piel para prevenir o atenuar las arrugas de la piel.

La presente invencion tambien proporciona un uso de honeybush fermentado para la preparacion de una composicion farmaceutica para prevenir o atenuar las arrugas de la piel.

Ademas, la presente invencion proporciona un uso de honeybush fermentado para la preparacion de un alimento saludable para prevenir o atenuar las arrugas de la piel.

Efecto ventajoso

Tal como se explico anteriormente en el presente documento, el honeybush fermentado de la presente invencion puede reducir la longitud y profundidad de las arrugas de la piel provocadas por la irradiacion UV y reducir el espesor de la capa epidermica, ademas de suprimir reacciones de degradacion de tejido de colageno, indicando que es excelente para atenuar las arrugas de la piel, de modo que puede usarse de manera eficaz como principio activo de una composicion para prevenir o atenuar las arrugas de la piel.

Breve descripcion de los dibujos

La aplicacion de las realizaciones preferidas de la presente invencion se entiende mejor con referencia a los dibujos adjuntos, en los que:

La figura 1 ilustra el efecto de atenuacion de honeybush fermentado en las arrugas de la piel, confirmado por analisis de replica.

La figura 2 ilustra el efecto de atenuacion del extracto de honeybush o honeybush fermentado en las arrugas de la piel, confirmado por el analisis de la longitud media de las arrugas.

La figura 3 ilustra el efecto de atenuacion del extracto de honeybush o honeybush fermentado en las arrugas de la piel, confirmado por el analisis de la profundidad media de las arrugas.

La figura 4 ilustra el efecto de atenuacion del extracto de honeybush o honeybush fermentado en las arrugas de la piel, confirmado por tincion con hematoxilina y eosina (H&E).

La figura 5 ilustra el efecto de atenuacion del extracto de honeybush o honeybush fermentado en las arrugas de la piel, confirmado por tincion tricromica de Masson.

La figura 6 ilustra el efecto de atenuacion del extracto de honeybush o honeybush fermentado en las arrugas de la piel, confirmado por la medicion de los cambios de espesor epidermico.

Descripcion de las realizaciones preferidas

A continuacion en el presente documento, la presente invencion se describe en detalle.

La presente invencion proporciona una composicion cosmetica para prevenir o atenuar las arrugas de la piel que contiene honeybush fermentado como principio activo.

El extracto de honeybush de la presente invencion se prepara preferiblemente mediante el metodo que comprende, pero no siempre se limita a las siguientes etapas:

1) extraer honeybush anadiendo un disolvente de extraccion;

2) enfriar y filtrar el extracto obtenido en la etapa 1);

3) concentrar el extracto filtrado en la etapa 2) a presion reducida; y

4) preparar polvo secado con el extracto concentrado en la etapa 3).

En el metodo anterior, el honeybush de la etapa 1) se obtiene o bien mediante cultivo o bien comprado. Puede usarse cualquier parte de honeybush pero las hojas, semillas, frutos, rafces y partes aereas del mismo se usan preferiblemente, pero no siempre se limita a los mismos.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

Dicho disolvente de extraccion se selecciona preferiblemente del grupo que consiste en agua, alcohol inferior Ci ~ C2, metanol, hexano, acetona, acetato de etilo, butano normal saturado, cloroformo, cloruro de metileno, y un disolvente mezclado de los mismos, pero no siempre se limita a los mismos. El alcohol en el presente documento es preferiblemente alcohol inferior Ci ~ C2, y el alcohol inferior es preferiblemente etanol o metanol. Se prefiere mas el agua como disolvente de extraccion, pero no siempre se limita al mismo.

El metodo de extraccion es preferiblemente extraccion por agitacion, o extraccion por reflujo, y es mas preferida la extraccion por reflujo frfo, pero no siempre se limita a la misma. El disolvente de extraccion se anade preferiblemente a honeybush 2 ~ 10 veces el volumen de honeybush, y mas preferiblemente 5 ~ 10 veces, y lo mas preferiblemente 10 veces el volumen de honeybush, pero no siempre se limita al mismo. La temperatura de extraccion es preferiblemente la temperatura ambiente ~ 100°C, pero no siempre se limita a la misma. El tiempo de extraccion es de 1 ~ 3 horas, y mas preferiblemente de 1 hora, pero no siempre se limita al mismo. La extraccion se repite preferiblemente 1 ~ 3 veces, y mas preferiblemente se repite 2 veces, pero no siempre se limita al mismo.

En este metodo, la concentracion a presion reducida en la etapa 3) se realiza preferiblemente usando un concentrador de vacfo o un rotavapor a vacfo, pero no siempre se limita a los mismos. El secado en la etapa 4) se realiza preferiblemente por secado a presion reducida, secado a vacfo, secado por ebullidon, secado por atomizacion o liofilizacion, pero no siempre se limita a los mismos.

La fraccion del extracto de honeybush se obtiene por fraccionamiento del extracto obtenido anteriormente y en este momento el disolvente utilizado para el fracdonamiento se selecciona del grupo que consiste en agua, alcohol inferior C1 ~ C2, metanol, hexano, acetona, acetato de etilo, butanol normal saturado, cloroformo, cloruro de metileno, y un disolvente mezclado de los mismos, pero no siempre se limita a los mismos.

El honeybush fermentado se prepara mediante el metodo que comprende las siguientes etapas:

1) inocular leche animal con bacteria de acido lactico;

2) mezclar la leche inoculada de la etapa 1) con una fuente de carbono y el extracto de honeybush o la fraccion del mismo; y

3) fermentar la mezcla de la etapa 2).

La bacteria de acido lactico de la etapa 1) es preferiblemente Streptococcus thenmophilus, pero no siempre se limita a la misma y, de hecho, cualquier bacteria de acido lactico usada posiblemente para fermentacion puede usarse en el presente documento.

La bacteria de acido lactico de la etapa 1) se cultiva preferiblemente en MRS (de Man, Rogosa & Sharpe), pero no siempre se limita al mismo y, de hecho, cualquier medio utilizable para el cultivo de bacteria de acido lactico puede usarse en el presente documento.

La bacteria de acido lactico de la etapa 1) se inocula preferiblemente a la densidad de 3 x 104 ~ 3 x 106 UFC/ml, y mas preferiblemente a la densidad de 3 x 105 UFC/ml, pero no siempre se limita a la misma.

La fuente de carbono de la etapa 2) es preferiblemente glucosa o azucar, pero no siempre se limita a las mismas.

El extracto de honeybush o la fraccion del mismo de la etapa 2) se anade preferiblemente en la proporcion del 3 ~ 10% (v/v), y mas preferiblemente en la proporcion del 5 ~ 6% (v/v), y lo mas preferiblemente en la proporcion del 5% (v/v), pero no siempre se limita al mismo.

La fermentacion en la etapa 3) se realiza preferiblemente en un incubador a 35 - 38°C durante 1 -3 dfas, y mas preferiblemente en un incubador a 37 - 38°C durante 1 dfa, pero no siempre se limita a los mismos.

En una realizacion preferida de la presente invencion, el honeybush fermentado redujo la longitud y profundidad de las arrugas de la piel provocadas por irradiacon UV, redujo el espesor de la capa epidermica, e inhibio reacciones de degradacon de colageno, indicando efecto de atenuacion de las arrugas de la piel, de modo que puede usarse de manera eficaz para una composicion cosmetica para prevenir o atenuar las arrugas de la piel (vease la figura 1 ~ figura 6).

La composicion cosmetica puede proporcionarse en forma de disolucion, gel, anhfdrido solido o de pasta, emulsion preparada dispersando fase oleosa en fase acuosa, suspension, microemulsion, microcapsula, microgranulo, vesfcula ionica (liposoma) o no ionica, crema, piel, loaon en polvo, pulverizador y barra correctora. Ademas, la composidon cosmetica puede formularse como una composicion de aerosol que contiene una espuma o propelente comprimido.

La composicion cosmetica puede incluir, ademas del extracto de honeybush, la fraccion del mismo, o honeybush fermentado de la presente invencion, un complemento generalmente usado en el campo de cosmeticos tales como sustancia grasa, disolvente organico, resolvente, concentrado, agente gelificante, suavizante, antioxidante, agente de suspension, estabilizante, agente espumante, odorizante, tensioactivo, agua, agente emulsionante ionico o no

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

ionico, carga, agente secuestrante, agente quelante, agente conservante, vitamina, bloqueante, agente humectante, aceite esencial, colorante, pigmento, activador hidrofilo o hidrofobo, vesfcula lipfdica u otros componentes generalmente usados en cosmeticos.

En una realizacion preferida de la presente invencion, el contenido del extracto de la presente invencion en la composicion cosmetica que contiene honeybush fermentado de la presente invencion es del 1 - 15 % en peso del peso total de la composicion, y preferiblemente del 2 ~ 10 % en peso.

La preparacion externa para la piel que contiene honeybush fermentado de la presente invencion puede adicionalmente incluir un complemento generalmente usado en el campo de la ciencia de la piel tal como sustancia grasa, disolvente organico, resolvente, concentrado, agente gelificante, suavizante, antioxidante, agente de suspension, estabilizante, agente espumante, odorizante, tensioactivo, agua, agente emulsionante ionico o no ionico, carga, agente secuestrante, agente quelante, agente conservante, vitamina, bloqueante, agente humectante, aceite esencial, colorante, pigmento, activador hidrofilo o hidrofobo, vesfcula lipfdica u otros componentes generalmente usados en una preparacion externa para la piel. La cantidad del complemento anterior puede determinarse como se acepta generalmente en el campo de la ciencia de la piel.

La composicion cosmetica para prevenir o atenuar las arrugas de la piel de la presente invencion puede incluir agentes generales ademas de dicho honeybush fermentado. Cuando se anade un ingrediente adicional que es de ayuda para el cuidado de la salud de la piel, se espera que aumente mas el efecto de prevencion o atenuacion de la composicion de la invencion en las arrugas de la piel pero tambien tienen que considerarse la seguridad en la piel, la facilidad de formulacion y la estabilidad de principios activos. El agente antiarrugas adicional que puede anadirse a la composicion de la presente invencion es aquellos materiales funcionales notificados por el Ministerio de Seguridad de Alimentos y Medicamentos que se ejemplifican mediante retinol, palmitato de retinilo, adenosina, retinamida polietoxilada, colageno, TGF y protemas de origen placentario animal, etc, pero no siempre se limita a los mismos. El agente antiarrugas adicional puede incluirse en la proporcion del 0.0001 ~ 10% en peso. En este momento, el % en peso se regula considerando la actividad de smtesis de colageno o inhibicion de colagenasa, y temas de seguridad para la piel, etc.

La presente invencion tambien proporciona una preparacion externa para la piel para prevenir o atenuar las arrugas de la piel que comprende honeybush fermentado como principio activo.

El honeybush fermentado puede mezclarse con una preparacion externa para la piel como tal o si es necesario en forma de un aditivo preparado mezclando uno o dos o mas ingredientes farmaceuticamente aceptables. El ingrediente farmaceuticamente aceptable que puede usarse para una preparacion externa para la piel en esta invencion se ejemplifica por azucar reductor, azucar no reductor, alcohol de azucar, polisacarido soluble, polnriero sintetico, antioxidante, y emulsionante, pero no siempre se limita a los mismos. Mas particularmente, los derivados de azucares de a,a-trehalosa, a-glucosil a,a-trehalosa, a-maltosil a,a-trehalosa, y a-maltotriosil a,a-trehalosa e hidratos de carbono que comprenden los derivados de azucares (denominados derivados de azucares de de a,a- trehalosa a continuacion en el presente documento) descritos en la patente japonesa n° H07-143876 y 3182679 tienen una fuerte actividad para inhibir la degradacion de glicosido de vitaminas, para prevenir la consolidacion, y para inhibir la absorcion de humedad, haciendolos candidatos mas preferibles. Estos ingredientes para una preparacion externa para la piel son ventajosos cuando se anaden en el honeybush fermentado de la presente invencion porque pueden evitar el malfuncionamiento o consolidacion de la misma durante la conservacion y el transporte.

La proporcion de mezcla de tal aditivo para una preparacion externa para la piel con respecto al honeybush fermentado de la presente invencion o la preparacion externa para la piel que contiene el mismo no esta limitada siempre que no detenga la funcion o efecto del mismo. Sin embargo, considerando la funcion esperada y la conveniencia en el uso, la concentracion del aditivo es preferiblemente del 0,01 ~ 20%, mas preferiblemente el 0,1 ~ 10%, y lo mas preferiblemente el 0,5 ~ 10% del peso total de la preparacion externa para la piel.

El aditivo para una preparacion externa para la piel puede anadirse al honeybush fermentado de la presente invencion o la preparacion externa para la piel que contiene el mismo en cualquier momento durante el procedimiento de la preparacion externa para la piel de la invencion desde la etapa de materia prima a la etapa de producto final. En este momento, cualquier metodo seleccionado del grupo que consiste en mezclado, disolucion, fusion, dispersion, suspension, emulsificacion, micelacion inversa, infiltracion, formacion de cristales, pulverizacion, propagacion, nebulizacion, inyeccion, remojo, y consolidacion puede usarse correctamente. Estos metodos pueden usarse solos o como una combinacion de al menos dos metodos.

La preparacion externa para la piel en esta invencion incluye cosmeticos, productos parafarmaceuticos, y medicamentos para la piel, y tambien incluye productos qmmicos, productos industriales, y productos miscelaneos posiblemente puestos en contacto con la piel. La formulacion de la preparacion externa para la piel no esta limitada y un sistema de disolucion, sistema de microemulsion, sistema de emulsion, sistema de dispersion de polvo, sistema bifasico de agua-aceite, sistema bifasico de agua-polvo, y sistema trifasico agua-aceite-polvo estan todos aceptados. El uso de honeybush fermentado de la presente invencion tampoco esta limitado. Por ejemplo, el honeybush fermentado de la presente invencion puede usarse para la preparacion de cosmeticos basicos, cosmeticos de

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

acabado, cosmeticos para la piel, cosmeticos limpiadores, limpiadores faciales, lociones para la piel, cremas, lociones lechosas, mascarillas, bases, polvos blancos, polvos, barras de labios, sombras de ojos, perfumes, cosmeticos de bano, cosmeticos orales, lociones bronceadoras/protectoras solares, cosmeticos de maquillaje, cosmeticos de unas, cosmeticos de delineadores de ojos, cosmeticos labiales, cosmeticos orales, cosmeticos faciales, aceites cosmeticos, cosmeticos aromaticos, cosmeticos corporales, cosmeticos capilares, cosmeticos de lavado capilar, jabones cosmeticos, jabones medicinales, pastas dentffricas, colutorios, desodorantes, productos nutritivos capilares, cosmeticos de afeitado, protectores solares, antipruriginosos, agentes de limpieza, higienizantes, desinfectantes, agentes de decoloracion, y depilatorios en las formas de agua, locion, locion lechosa, crema, unguento, suspension, emulsion, pasta, mousse, cosmetico, solido, semi-solido, polvo, polvo solido, jalea, gel, aerosol, pulverizador, pastilla, mascarilla, y mascarilla facial para la piel. El honeybush fermentado de la presente invencion tambien puede usarse para la preparacion de agentes preventivos o terapeuticos para varias enfermedades tales como pie de atleta, hemorroides, acne, heridas, quemaduras, congelacion, dermatitis inducida por laca, llagas, inflamacion, infeccion, alergia, atopfa, ulceras, y tumores.

Parti cularmente, el honeybush fermentado de la presente invencion puede usarse para la preparacion de jabon cosmetico, crema limpiadora, espuma limpiadora, leche limpiadora, locion limpiadora, aceite limpiador, crema de masaje, crema cold cream, crema hidratante, crema vanishing, crema de manos, locion hidratante, aceite cosmetico, base lfquida, base en polvo, base en pasta, base en barra, base compacta oleosa, base en crema, brocha para las mejillas, base en emulsion, cosmeticos basicos, polvo corporal, polvo en crema, polvo blanco, polvo lfquido, polvo solido, polvo amasado, polvo de talco, polvo de colorete, polvo para bebes, colorete de mejillas, pintura para cejas, mascara, barra de labios, crema labial, mascarilla, crema de afeitar, crema para despues del afeitado, locion, locion para las manos, locion de afeitar, locion para despues del afeitado, crema bronceadora, aceite bronceador, locion protectora solar, locion bronceadora, agua de tocador emoliente, astringente, agua de tocador limpiadora, locion de agitacion, champu facial, champu corporal, champu capilar, polvo limpiador, jabon de manos, enjuague facial, enjuague corporal, enjuague capilar, tratamiento capilar, tonico capilar, cosmetico de crecimiento capilar, pomada, crema capilar, lfquido capilar, tonico capilar, tonico de fijacion, aceite de peinado facil, aceite capilar, laca capilar, mousse capilar, tinte capilar, decolorante capilar, bano de color, pulverizador de color, disolucion de ondas permanentes, polvo compacto, polvo suelto, crema para los ojos, sombra de ojos, sombra de ojos en crema, sombra de ojos en polvo, delineador de ojos, lapiz de cejas, mascara, crema depilatoria, perfume general, perfume en polvo, agua de colonia, desodorante, agente de bano, aceite de bano, sal de bano, aceite cosmetico, aceite para bebes, laca de unas, esmalte, quitaesmalte, tratamiento de unas, colutorio, pasta dentffrica, pasta dentffrica en polvo, repelente de insectos (eliminador de insectos), unguento para curar heridas externas, crema antimicrobiana, unguento esteroideo, almohadilla de tipo hoja o pelfcula aplicada sobre la zona afectada de la piel o cavidad oral, detergente o jabon para la ropa, detergente para el suelo, limpiador de cocina, y limpiador, etc.

La presente invencion proporciona ademas una composicion farmaceutica para prevenir o atenuar las arrugas de la piel que contiene el honeybush fermentado como principio activo.

La presente invencion tambien proporciona un metodo de prevencion de arrugas de la piel que contiene la etapa de administrar el honeybush fermentado a un sujeto.

La presente invencion tambien proporciona un metodo de atenuacion para las arrugas de la piel que contiene la etapa de administrar el honeybush fermentado a un sujeto que tiene arrugas de la piel.

El honeybush fermentado de la presente invencion redujo la longitud y profundidad de las arrugas de la piel provocadas por irradiacion UV, redujo el espesor de la capa epidermica, e inhibio reacciones de degradacion de colageno, sugiriendo un excelente efecto de atenuacion de las arrugas de la piel, de modo que puede usarse de manera eficaz como una composicion farmaceutica para prevenir o atenuar las arrugas de la piel.

La composicion farmaceutica de la presente invencion puede adicionalmente incluir excipientes, agentes desintegrantes, agentes edulcorantes, lubricantes, y aromas, etc. usados generalmente. La composicion de la presente invencion puede formularse como comprimidos, capsulas, polvos, granulos, suspensiones, emulsiones, jarabes, y otras formulaciones lfquidas.

Particularmente, las formulaciones de la composicion farmaceutica de la presente invencion para administracion oral se ejemplifican mediante comprimidos, pastillas, grageas, suspensiones solubles o basadas en aceites, polvos o granulos, emulsiones capsulas duras o blandas, jarabes, y elixires, etc. Cuando la composicion farmaceutica de la presente invencion se formula como comprimidos o capsulas, se incluyen agentes aglutinantes tales como lactosa, sacarosa, sorbitol, manitol, almidon, amilopectina, celulosa o gelatina, excipientes como fosfato dicalcico, agentes desintegrantes tales como almidon de mafz o almidon de boniato, y lubricantes tales como estearato de magnesio, estearato de calcio, estearil fumarato de sodio o cera de polietilenglicol. En el caso de capsulas, se incluyen adicionalmente vehfculos lfquidos como aceite graso.

La composicion farmaceutica de la presente invencion puede administrate por via oral o parenteral y la administracion parenteral incluye inyeccion subcutanea, inyeccion intravenosa, inyeccion intramuscular e inyeccion intratoracica. Para preparar la composicion farmaceutica de la presente invencion como una formulacion para administracion parenteral, el extracto de honeybush, la fraccion del mismo, o el honeybush fermentado de la

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

presente invencion se mezcla con un estabilizante o un agente amortiguador en agua para producir una suspension, que entonces se formula como ampollas o viales.

La composicion farmaceutica de la presente invencion se trata preferiblemente mediante administracion transdermica, y mas preferiblemente se trata mediante aplicacion topica, pero no siempre se limita a las mismas.

La dosis eficaz de la composicion de la presente invencion puede determinarse segun la absortividad del principio activo, velocidad de inactivacion, velocidad de excrecion, edad, sexo, estado de salud y gravedad de una enfermedad por los expertos en la tecnica. En el caso de la administracion oral, la composicion farmaceutica de la presente invencion puede administrarse en 0,01 ~ 500 mg/kg por dfa para un adulto, y mas preferiblemente en 1 ~ 100 mg/kg por dfa. La frecuencia de administracion es una vez al dfa o algunas veces al dfa. La dosis no puede limitar el alcance de la presente invencion en absoluto. La preparacion externa para la piel de la presente invencion se aplica preferiblemente en la dosis de 0,5 ml ~ 5,0 ml/dfa/adulto, 1 ~ 5 veces al dfa, durante al menos 1 mes.

La presente invencion tambien proporciona un alimento saludable para prevenir o atenuar las arrugas de la piel que contiene el honeybush fermentado como principio activo.

El honeybush fermentado de la presente invencion redujo la longitud y profundidad de las arrugas de la piel provocadas por irradiacion UV, redujo el espesor de la capa dermica, e inhibio reacciones de degradacion de colageno, sugiriendo un excelente efecto de atenuacion de las arrugas de la piel, de modo que puede usarse de manera eficaz para un alimento saludable para prevenir o atenuar las arrugas de la piel.

El honeybush fermentado de la presente invencion puede usarse como aditivo alimentario. En ese caso, el extracto de honeybush puede anadirse como tal o mezclado con otros componentes alimentarios segun el metodo convencional.

El alimento en el presente documento no esta limitado. Por ejemplo, el honeybush fermentado de la presente invencion puede anadirse a caramelos, carnes, salchichas, panes, chocolates, golosinas, aperitivos, galletas, pizza, fideos instantaneos, tallarines, gomas, productos lacteos incluyendo helados, sopas, te, bebidas, bebidas alcoholicas y complejo vitamfnico, etc, y en amplio sentido, puede incluirse casi cualquier alimento aplicable en la produccion de alimento saludable.

La composicion para bebidas saludables de la presente invencion puede incluir adicionalmente varios aromas o hidratos de carbono naturales, etc, como otras bebidas. Los hidratos de carbono naturales anteriores pueden ser uno de monosacaridos tales como glucosa y fructosa, disacaridos tales como maltosa y sacarosa, polisacaridos tales como dextrina y ciclodextrina, y alcoholes de glucosa tales como xilitol, sorbitol y eritritol. Ademas, puede incluirse como agente edulcorante agentes edulcorantes naturales tales como taumatina y extracto de estevia, y agentes edulcorantes sinteticos tales como sacarina y aspartamo. El contenido del hidrato de carbono natural es preferiblemente de 0,01 ~ 0,04 g y mas preferiblemente de 0,02 ~ 0,03 g en 100 ml de la composicion.

Ademas de los ingredientes mencionados anteriormente, el honeybush de la presente invencion puede incluir una variedad de nutrientes, vitaminas, minerales, aromas, agentes colorantes, acido pectico y sus sales, acido algfnico y sus sales, acido organico, agentes espesantes protectores, reguladores de pH, estabilizantes, antisepticos, glicerina, alcoholes, carbonatadores que solfan anadirse a gaseosa, etc. El extracto de honeybush, la fraccion del mismo o honeybush fermentado de la presente invencion tambien puede incluir pulpa de fruta que puede anadirse a zumo de fruta natural, bebidas de fruta y bebidas de verduras. Todos los ingredientes mencionados pueden anadirse solos o juntos. La proporcion de mezclado de esos ingredientes no importa de hecho, pero en general, cada uno puede anadirse en el 0,01 ~ 0,1 en partes en peso por 100 partes en peso de honeybush fermentado de la presente invencion.

El alimento saludable para prevenir o atenuar las arrugas de la piel de la presente invencion puede incluir agentes antiarrugas generales ademas de dicho honeybush fermentado. Cuando se anade un ingrediente adicional que es de ayuda para el cuidado de la salud de la piel, se espera que aumente mas el efecto de prevencion o atenuacion del alimento saludable de la invencion en las arrugas de la piel pero tambien tienen que considerarse la seguridad en la piel, facilidad de formulacion, y estabilidad de principios activos. El agente antiarrugas adicional que puede anadirse al alimento saludable de la presente invencion es aquellos materiales funcionales notificados por el Ministerio de Seguridad de Alimentos y Medicamentos que se ejemplifican mediante clorela, espirulina, N- acetilglucosamina y gel de aloe, etc, pero no siempre se limita a los mismos. El agente antiarrugas adicional puede incluirse en la proporcion del 0,0001 - 10% en peso. En este momento, el % en peso se regular considerado la actividad de sfntesis de colageno o inhibicion de colagenasa, y temas de seguridad para la piel, etc.

La presente invencion tambien proporciona un uso del honeybush fermentado para la preparacion de una composicion cosmetica para prevenir o atenuar las arrugas de la piel.

La presente invencion tambien proporciona un uso del honeybush fermentado para la preparacion de una

5

10

15

20

25

30

35

40

composicion farmaceutica para prevenir o atenuar las arrugas de la piel.

Ademas, la presente invencion tambien proporciona un uso del honeybush fermentado para la preparacion de un alimento saludable para prevenir o atenuar las arrugas de la piel.

El honeybush fermentado de la presente invencion redujo la longitud y profundidad de las arrugas de la piel provocadas por la irradiacion UV, redujo el espesor de la capa epidermica, e inhibio reacciones de degradacion de colageno, sugiriendo un excelente efecto de atenuacion de las arrugas de la piel, de modo que puede usarse de manera eficaz para un metodo para prevenir o atenuar las arrugas de la piel y para una composicion que previene o atenua las arrugas de la piel.

Realizaciones practicas y preferidas en la actualidad de la presente invencion son ilustrativas tal como se muestra en los siguiente ejemplos, ejemplos experimentales y ejemplos de fabricacion.

Sin embargo, se apreciara que los expertos en la tecnica, en consideracion de esta divulgacion, pueden hacer modificaciones y mejoras dentro del alcance de la presente invencion.

Ejemplo 1: Preparacion de extracto de honeybush

Honeybush se compro de Renewallife (
http://www.renewallife.com). La muestra comprada se almaceno en un frigorffico para medicinal oriental en el que la temperatura se mantuvo a 5,5 ± 0,3°C y la humedad se mantuvo a 50+5%. Se anadieron 220 ml a 25 g de honeybush (peso total), seguido de reflujo dos veces, durante una hora cada uno. Como resultado, se obtuvo extracto de honeybush. El extracto preparado se filtro con un papel de filtro y el filtrado obtenido se cargo en un concentrador a vacfo para eliminar el disolvente. Como resultado, se obtuvieron 4,3 g del extracto de honeybush de la presente invencion.

Ejemplo 2: Preparacion de honeybush fermentado

Para preparar el honeybush fermentado de la presente invencion, se inoculo 1 ml de bacteria de acido lactico (Streptococcus thenmophilus, 3*105 UFC/lml) cultivada en medio MRS (de Man, Rogosa, & Sharpe) en 100 ml de leche animal (leche blanca). Se anadieron 3 g de azucar y el extracto de honeybush preparado en el ejemplo 1 a la leche inoculada (5%, p/v). Entonces, la mezcla se fermento en un incubador a 37°C durante 1 dfa. Como resultado, se obtuvieron 100 g del honeybush fermentado de la presente invencion.

Ejemplo experimental 1: Evaluacion de efecto de atenuacion de las arrugas de honeybush fermentado mediante analisis de replica

Se realizo analisis de replica para evaluar el efecto de atenuacion de las arrugas del extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion.

<1-1> Animal de ensayo y tratamiento de la muestra

Se utilizaron ratones macho sin pelo HR-1 (Japan SLC, Inc.) de 7 semanas como animales de ensayo. Los ratones se compraron de Central Lab. Animal Inc., y se adaptaron al entorno durante 1 semana antes de usarse. Durante el periodo de adaptacion, se observaron las condiciones generales de los ratones para seleccionar los ratones sanos para el experimento. Las condiciones ambientales fueron las siguientes; temperatura: 23 ± 3°C, humedad relativa: 50 + 5%, ciclo luz/oscuridad: 12/12 horas (encendido a 7:00 y apagado a 19:00). Los animales de ensayo se distribuyeron en jaulas de policarbonato (200x320x450 mm, Tres-shine Co., Daejeon, Corea), 5 ratones/jaula. Se proporcionaron libremente piensos exclusivos para ratones (5L79, Charles river, EEUU) y agua esterilizada por UV.

Tal como se muestra en la tabla 1, el experimento se realizo con 4 grupos, el grupo de control (control), el grupo irradiado con UV (UV), el grupo tratado con extracto de honeybush (HB) y el grupo tratado con honeybush fermentado (STC HB). La muestra de ensayo se administro por via oral a los ratones usando un zonde de raton durante 8 semanas, 5 dfas a semana.

[Tabla 1]

Irradiacion UV y dos is

Grupo experimental: UV Dos is

Grupo de control: X -

Grupo irradiado con UV: o Agua esterilizada con UV: 5 ml/kg

Grupo tratado con extracto de honeybush (HB): o 100 mg/kg

Grupo tratado con honeybush fermentado (STC HB): o 5ml/kg

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

Los grupos experimentales se irradiaron con UV durante 8 semanas, tres veces a la semana, excepto el grupo de control. Se realizo la irradiacion UV usando una lampara de UVB (Mineralight UV Display lamp, UVP, EEUU). La dosis de UV fue de 60 mJ/cm2 durante la semana 1 ~ semana 2, 90 mJ/cm2 durante la semana 3 ~ semana 5, y 120 mJ/cm2 durante la semana 6 ~ semana 8. La dosis de UV se controlo regulando las horas de irradiacion despues de medir la intensidad de radiacion usando un instrumento de medicion optica (Delta OHM, Italia).

<1-3> Evaluacion de efecto de atenuacion de las arrugas mediante analisis de replica

Para medir el efecto de atenuacion de las arrugas de honeybush fermentado de la presente invencion, se hizo una replica en la piel de la espalda de cada raton sin pelo del ejemplo experimental <1-1> usando caucho de silicona, seguido de observacion de la formacion de arrugas.

Particularmente, se prepare la replica usando Repliflo Cartridge Kit (CuDerm Corporation, EEUU), que se aplico entonces de manera fina sobre la espalda del raton. Tras el secado completo, el disco se separo de manera cuidadosa para preparar la replica. La preparacion de la replica se realizo a 20 - 22°C con una humedad del 40 - 50%.

Como resultado, tal como se muestra en la figura 1, se formaron arrugas gruesas y profundas junto con arrugas finas en el grupo irradiado con UV, en comparacion con el grupo de control normal. En el grupo tratado con extracto honeybush o el grupo tratado con honeybush fermentado, el grosor o profundidad de las arrugas provocadas por irradiacion UV se atenuaron (figura 1).

Ademas, la atenuacion de arrugas gruesas fue mas peculiar en el grupo tratado con honeybush fermentado que en el grupo irradiado con UV. Este efecto de atenuacion en el grupo tratado con honeybush fermentado tambien fue superior que el del grupo tratado con extracto de honeybush. Asf, las arrugas gruesas se hicieron mas finas, casi cercanas a las del grupo de control normal.

Por tanto, se confirmo que el honeybush fermentado de la presente invencion tuvo un excelente efecto de atenuacion en las arrugas de la piel provocadas por irradiacion UV.

<1-4> Evaluacion del efecto de atenuacion de las arrugas investigando la longitud y profundidad de las arrugas

Para analizar cuantitativamente el efecto de atenuacion de las arrugas del extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion, se investigaron la longitud y profundidad de las arrugas.

Particularmente, la replica preparada en el ejemplo experimental <1-3> se uso para medir la longitud y profundidad de las arrugas usando Visioline VL650. La replica se inserto en el cartucho estandar disenado para dejar pasar una fuente luminosa especffica. Entonces, la fuente luminosa se paso a un angulo de incidencia de 35°. Se archivaron imagenes de intensidad de sombra generadas segun el grosor de la replica usando una camara CCD. Entonces, se midieron la longitud y profundidad de las arrugas usando software Skin Visiometer VL650. Los resultados obtenidos se analizaron por ANOVA de un factor y la prueba t de Student para evaluar la significancia estadfstica entre los grupos de control y experimental (p<0,05).

Como resultado, tal como se muestra en la figura 2, la longitud de las arrugas aumento en el grupo irradiado con UV, en comparacion con la del grupo de control. Mientras tanto, la longitud de arrugas en el grupo tratado con extracto de honeybush disminuyo en el 0,89% con respecto al grupo irradiado con UV. La longitud de las arrugas en el grupo tratado con honeybush fermentado disminuyo en el 28% con respecto al grupo irradiado con UV. Estos resultados fueron estadfsticamente significativos (p<0,05) (figura 2).

Tal como se muestra en la figura 3, la profundidad de arrugas aumento en el grupo irradiado con UV, en comparacion con la del grupo de control. Mientras tanto, la profundidad de las arrugas en el grupo tratado con honeybush fermentado disminuyo en el 17% con respecto al grupo irradiado con UV, que tambien fue estadfsticamente significative (p<0,05) (figura 3).

De los resultados anteriores, se confirmo que el extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion tuvieron un efecto supresor en las arrugas de la piel provocadas por la irradiacion UV, y el efecto supresor del honeybush fermentado fue superior al del extracto de honeybush.

Ejemplo experimental 2: Evaluacion del efecto de atenuacion de las arrugas por tincion histologica

Para confirmar el efecto de atenuacion de las arrugas del extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion a traves de la observacion histologica de la piel, se tomaron tejidos de piel de los ratones sin pelo, seguido de tincion histologica.

Particularmente, se tomaron tejidos de piel de cada raton sin pelo del ejemplo experimental <1-1>, que se fijaron en disolucion de formalina neutra al 10%. Lo tejidos fijados se lavaron, deshidrataron, limpiaron, infiltraron, y se incluyeron en parafina segun el metodo convencional. El bloque de parafina se corto en secciones con un espesor

5

10

15

20

25

30

35

40

de 4 um, seguido de tincion con Hematoxilina & Eosina (H&E) y tincion tricromica de Masson.

Como resultado, tal como se muestra en la figura 4, se confirmo por tincion con H&E que la capa cornea aumento en el grupo irradiado con UV, que fue mas peculiar que en el grupo de control, y el espesor epidermico tambien aumento. Mientras tanto, la capa cornea se atenuo en el grupo tratado con extracto de honeybush y en el grupo tratado con honeybush fermentado y se redujo el espesor epidermico (figura 4).

Tal como se muestra en la figura 5, se confirmo por la tincion tricromica de Masson que la capa cornea apenas se observo y la capa epidermica no era espesa en el grupo de control. La mayorfa de tejido era la capa dermica, en la que colageno estaba distribuida de manera regular. Por otro lado, la capa cornea era espesa y no observo colageno en el grupo irradiado con UV. En el grupo tratado con extracto de honeybush (comparative) y en el grupo tratado con honeybush fermentado, aumentaron las fibras de colageno, en comparacion con el grupo irradiado con UV (figura 5).

Ademas, se confirmo por ambos ensayos de tincion que los efectos de reducir la capa cornea y el espesor epidermico y aumentar la fibra de colageno fueron superiores en el grupo tratado con honeybush fermentado que en el grupo tratado con extracto de honeybush.

De los resultados anteriores, se confirmo que el extracto de honeybush o honeybush fermentado de la presente invencion tuvieron un efecto de atenuacion en las arrugas de la piel provocadas por irradiacion UV, y el efecto de atenuacion del honeybush fermentado fue superior al del extracto de honeybush.

Ejemplo experimental 3: Evaluacion del efecto de atenuacion de las arrugas observando los cambios de espesor epidermico

El efecto de atenuacion de las arrugas del extracto de honeybush (comparativo) y honeybush fermentado de la presente invencion se investigo midiendo los cambios de espesor epidermico.

Particularmente, para medir el espesor epidermico, la distancia de la capa de queratina a la membrana basal epidermica en el tejido tenido con H&E en el ejemplo experimental se midio usando la regla especial equipada en un microscopio. La significancia de los resultados obtenidos para el control y los grupos experimentales se evaluo por ANOVA de un factor y la prueba t de Student (p<0,05). Los resultados obtenidos se analizaron por ANOVA de un factor y la prueba t de Student para evaluar la significancia estadfstica los grupos de control y experimental (p<0,05).

Como resultado, tal como se muestra en la figura 6, el espesor epidermico aumento en el grupo irradiado con UV, en comparacion con el del grupo de control. Mientras tanto, el espesor epidermico en el grupo tratado con extracto de honeybush se redujo en el 40% con respecto al grupo irradiado con UV, y el espesor epidermico en el grupo tratado con honeybush fermentado se redujo significativamente en el 56% con respecto al grupo irradiado con UV (figura 6).

Este efecto de atenuacion en el grupo tratado con honeybush fermentado fue superior al del tratado con extracto de honeybush (p < 0,05).

Por tanto, se confirma que el honeybush fermentado de la presente invencion redujo significativamente el espesor epidermico, sugiriendo que es eficaz en atenuar las arrugas de la piel. En este momento, el honeybush fermentado fue mas eficaz que el extracto de honeybush.

Ejemplo de fabricacion 1: Preparacion de cosmeticos que contienen honeybush fermentado como principio activo

<1-1> Preparacion de agua de tocador emoliente

Se preparo agua de tocador emoliente que contiene el extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion como principio activo segun la composicion mostrada en la [Tabla 2].

[Tabla 2]

Constituyente: Contenido (parte en peso)

Extracto de honeybush o honeybush fermentado: 10,00

1,3-butilenglicol

EDTA-2Na: 0,05

Alantofna: 0,10

Glicirrizato dipotasico: 0,05

Acido cftrico: 0,01

Citrato sodico: 0,02

Glicereth-26: 1,00

Arbutina: TOO

Aceite de ricino hidrogenado: 1,00

Etanol: 30,00

Conservante: Cantidad pequena

Colorante: Cantidad pequena

Aroma: Cantidad pequena

Agua purificada: Cantidad correcta

<1-2> Preparacion de crema nutritiva

Se preparo crema nutritiva que contiene el extracto de honeybush (comparative^ o honeybush fermentado de la presente invencion como principio activo segun la composicion mostrada en la [Tabla 3].

5 [Tabla 3]

Constituyente: Contenido (parte en peso)

Extracto de honeybush o honeybush fermentado: 10,0

1,3- butilenglicol: 7,0

Glicerina: 1,0

D-pantenol: 0,1

Extracto de planta: 3,2

Silicato de magnesio y aluminio: 0,3

Estearato de PEG-40: 1,2

Acido estearico: 2,0

Polisorbato 60: 1,5

Estearato de glicerilo, lipofilo: 2,0

Sesquioleato de sorbitan: 1,5

Alcohol cetearilo: 3,0

Aceite mineral: 4,0

Escualeno: 3,8

Triglicerido caprico/caprflico: 2,8

Aceite vegetal: 1,8

Dimeticona: 0,4

Glicirrizato dipotasico: Cantidad pequena

Alantofna: Cantidad pequena

Hialuronato de sodio: Cantidad pequena

Acetato de tocoferilo: Cantidad apropiada

Trietanolamina: Cantidad apropiada

Conservante: Cantidad apropiada

Aroma: Cantidad apropiada

Agua purificada: Cantidad apropiada

<1-3> Preparacion de esencia [Tabla 4]

: Constituyente Contenido (parte en peso)

Fase acuosa: 1 Agua purificada 70,58

2: Extracto de honeybush o honeybush fermentado 8,00

3: Metilparabeno 0,15

4: Extracto de acido hialuronico 2,50

5: Glicerina 8,00

Fase oleosa: 6 Proprilparabeno

7: Lecitina 0,60

8: Aceite de nuez de macadamia 10,0

Aditivo: 9 Aroma 0,07

5 Segun la proporcion de composicion mostrada en la [Tabla 4], se midieron y mezclaron agua purificada, extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado (invencion), metilparabeno, extracto de acido hialuronico, y glicerina a 80 ± 2°C para preparar la fase acuosa. Tambien se midieron y mezclaron propilparabeno, lecitina y aceite de nuez de macadamia a 80 ± 2°C para preparar fase oleosa.

La fase oleosa se anadio a la fase acuosa, seguido de mezclado para hacer una mezcla en forma de emulsion. Se 10 anadio aroma a la mezcla, seguido de enfriamiento a 35°C. Como resultado, se preparo esencia que contiene el extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion como principio activo.

Ejemplo de fabricacion 2: Preparacion de formulaciones farmaceuticas que contienen el extracto de honeybush o honeybush fermentado como principio activo

<2-1> Preparacion de jarabes

15 Se prepararon jarabes que contienen el extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion como principio activo segun la composicion mostrada en la [Tabla 5].

[Tabla 5]

Constituyente: Contenido (parte en peso)

Extracto de honeybush o honeybush fermentado: 2

Sacarina: 0,8

Sacarosa: 25,4

Glicerina: 8

Aroma de alimento: 0,04

Etanol: 4

Acido sorbico: 0,4

Agua destilada: 60

5

10

15

20

25

30

35

Se prepararon comprimidos contienen el extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion como principio activo segun la composicion mostrada en la [Tabla 6].

[Tabla 6]

Constituyente: Contenido (parte en peso)

Extracto de honeybush o honeybush fermentado: 250

Lactosa: 175,9

Almidon de patata: 180

Acido silflico coloidal: 32

Disolucion de gelatina al 10%: 5

Almidon de patata: 160

Talco: 50

Estearato de magnesio: 5

Particularmente, se mezclaron todos juntos 250 partes en peso del extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion, 175.9 partes en peso de lactosa, 180 artes en peso de almidon de patata y 32 partes en peso de acido silflico coloidal. Se anadio disolucion de gelatina al 10% a la mezcla, que entonces se trituro y filtro con un tamiz de tamano de malla 14. La mezcla triturada se seco, a la que se anadieron 160 partes en peso de almidon de patata, 50 partes en peso de talco y 5 partes en peso de estearato de magnesio para preparar comprimidos.

Ejemplo de fabricacion 3: Preparacion de alimentos saludables que contienen el extracto de honeybush o honeybush fermentado como principio activo

Se prepararon alimentos que contienen el extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion como principio activo de la siguiente manera.

<3-1> Preparacion de alimentos de harina

Se anadieron a la harina 0,5 - 5,0 partes en peso del extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion. Se prepararon con la mezcla de harina alimentos potenciadores de la salud tales como pan, bizcocho, galletas, galletas saladas y tallarines segun el metodo convencional.

<3-2> Preparacion de sopas y salsas

Se anadieron a sopas y salsas 0,1 ~ 5,0 partes en peso del extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion a sopas y salsas. Se prepararon con esta mezcla productos carnicos, sopas y salsas potenciadores de la salud por el metodo convencional.

<3-3> Preparacion de carne de vacuno picada

Se preparo carne de vacuno picada potenciadora de la salud mezclando 10 partes en peso del extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion con carne vacuno picada segun el metodo convencional.

<3-4 > Preparacion de productos lacteos

Se anadieron a leche 5 ~ 10 partes en peso del extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion. Se prepararon con la mezcla de leche productos lacteos potenciadores de la salud tales como mantequilla y helados segun el metodo convencional.

<3-5> Preparacion de Sun-Sik

Se gelatinizaron arroz pardo, cebada, arroz glutinoso y Yulmu (lagrimas de Job) segun el metodo convencional, se secaron y se trituraron para obtener polvos de tamano de malla 60.

Se cocieron al vapor y se secaron soja negra, sesamo negro y sesamo silvestre segun el metodo convencional y se

5

10

15

20

25

30

35

trituraron para obtener polvos de tamano de malla 60.

El extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion se concentro a presion reducida, se seco por pulverizacion y se trituro para obtener polvos secos de tamano de malla 60.

Se preparo Sun-Sik mezclando los polvos secos de los granos, semillas y el extracto de honeybush o honeybush fermentado de la presente invencion segun la proporcion a continuacion.

Granos (arroz pardo: 30 partes en peso, Yulmu: 15 partes en peso, cebada: 20 partes en peso),

Semillas (sesamo silvestre: 7 partes en peso, soja negra: 8 partes en peso, sesamo negro: 7 partes en peso),

Polvos secos de extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion (3 partes en peso),

Ganodenva lucidum (0,5 partes en peso),

Rehmannia glutinosa (0,5 partes en peso)

<3-6> Preparacion de chocolate Manteca de cacao 30,0 partes en peso Leche entera en polvo 30,0 partes en peso Azucar en polvo 41,85 partes en peso Lecitina 0,45 partes en peso Aroma 0,1 partes en peso

Extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado (invencion) 0,6 partes en peso

Se preparo chocolate que contiene el extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion basandose en las composiciones y los contenidos anteriores siguiendo el metodo convencional.

<3-7> Preparacion de caramelo

Sirope de almidon 37,43 partes en peso

Azucar blanco 5,33 partes en peso

Aceite vegetal 9,35 partes en peso

Emulsionante 0,018 partes en peso

Sal 0,056 partes en peso

Leche desnatada en polvo 28,07 partes en peso

Leche condensada endulzada 3,74 partes en peso

Crema fresca 5,61 partes en peso

Aroma 0,07 partes en peso

Extracto de honeybush o honeybush fermentado 10,326 partes en peso

Se preparo caramelo que contiene extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion basandose en las composiciones y los contenidos anteriores siguiendo el metodo convencional.

<3-8> Preparacion de golosinas

Azucar 50,0 partes en peso

Sirope de almidon 33,0 partes en peso

Acido cftrico 1,0 partes en peso

Aroma 0,2 partes en peso

Extracto de honeybush o honeybush fermentado 0,4 partes en peso

5

10

15

20

25

30

35

Agua 15,4 partes en peso

Se prepararon golosinas que contienen el extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion basandose en las composiciones y los contenidos anteriores siguiendo el metodo convencional.

<3-9> Preparacion de pan

Huevos 2 cada uno

Azucar 50 partes en peso

Harina blanda 33,5 partes en peso

Almidon de mafz 6,6 partes en peso

Levadura qufmica 3,3 partes en peso

Extracto de honeybush o honeybush fermentado 6,6 partes en peso

Se preparo pan que contiene el extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion basandose en las composiciones y los contenidos anteriores siguiendo el metodo convencional.

Ejemplo de fabricacion 4: Preparacion de bebidas que contienen el extracto de honeybush o honeybush fermentado como principio activo

<4-1> Preparacion de bebidas saludables

El extracto de honeybush (comparativo) o honeybush fermentado de la presente invencion (0,5%) se mezclo con fructosa lfquida (0,5%), oligosacarido (2%), azucar (2%), sal (0,5%), y agua (75%). Tras mezclar completamente, la mezcla se esterilizo instantaneamente y se relleno en recipientes pequenos tales como botellas de vidrio, botellas de pet, etc, para preparar bebidas saludables.

<4-2> Preparacion de zumo vegetal

Se preparo zumo vegetal potenciador de la salud anadiendo 5 g del extracto de honeybush fermentado de la presente invencion a 1.000 ml de zumo de tomate o zanahoria segun el metodo convencional.

<4-3> Preparacion de zumo de frutas

Se preparo zumo de frutas potenciador de la salud anadiendo 1 g del extracto de honeybush o honeybush fermentado de la presente invencion a 1.000 ml de zumo de manzana o uva segun el metodo convencional.

Aplicabilidad industrial

Tal como se explico anteriormente en el presente documento, el honeybush fermentado de la presente invencion tiene el efecto supresor en la formacion de arrugas de la piel provocadas por UV, de modo que puede usarse de manera eficaz para el desarrollo y la produccion de cosmeticos, preparaciones externas para la piel, medicamentos, o alimentos saludables para prevenir o atenuar las arrugas de la piel.

Los expertos en la tecnica apreciaran que las concepciones y las realizaciones especfficas dadas a conocer en la descripcion anterior pueden utilizarse facilmente como base para modificar o disenar otras realizaciones para llevar a cabo los mismos fines de la presente invencion. Los expertos en la tecnica tambien apreciaran que tales realizaciones equivalentes no se apartan del alcance de la invencion tal como se expone en las reivindicaciones adjuntas.

Claims

REIVINDICACI ONES

1.

Uso de una composicion cosmetica que comprende honeybush fermentado como principio activo para prevenir o atenuar las arrugas de la piel, en el que el honeybush fermentado se prepara mediante el metodo que comprende las siguientes etapas:

5

1) inocular leche animal con bacteria de acido lactico: 2) mezclar la leche inoculada de la etapa 1) con una fuente de carbono y el extracto de honeybush; y 3) fermentar la mezcla de la etapa 2).
2. 10

Uso de la reivindicacion 1, en el que el extracto de honeybush se prepara extrayendo honeybush con un disolvente seleccionado del grupo que consiste en agua, alcohol inferior C1 ~ C2, metanol, hexano, acetona, acetato de etilo, butano normal saturado, cloroformo, cloruro de metileno, y un disolvente mezclado de los mismos.
3.

Uso de la reivindicacion 2, en el que el alcohol inferior es etanol o metanol.
4. 15

Uso de la reivindicacion 1, en el que la bacteria de acido lactico de la etapa 1) es Streptococcus thermophilus.
5.

Uso de la reivindicacion 1, en el que la bacteria de acido lactico de la etapa 1) se inocula a la concentracion de 3x104~ 3x106 UFC/ml.
6.

Uso de la reivindicacion 1, en el que el extracto de honeybush de la etapa 2) se anade al inoculo en la proporcion del 3 ~ 10% (v/v) del volumen total del inoculo.

20 7.

Uso de la reivindicacion 1, en el que la fermentacion de la etapa 3) se realiza en un incubador a 35 ~ 38°C durante 1 ~ 3 dfas.
8.

Uso de la reivindicacion 1, en el que el honeybush fermentado incluye adicionalmente otros agentes antiarrugas.
9. 25

Uso de la reivindicacion 8, en el que el agente antiarrugas se selecciona del grupo que consiste en retinol, palmitato de retinilo, adenosina, retinamida polietoxilada, colageno y protefnas de origen placentario animal.
10.

Uso de una aplicacion externa para la piel que comprende honeybush fermentado como principio activo para prevenir o atenuar las arrugas de la piel.
11.

Composicion farmaceutica que comprende honeybush fermentado como principio activo para su uso para prevenir o atenuar las arrugas de la piel.

30 12.

Composicion de alimento saludable que comprende honeybush fermentado como principio activo para su uso para prevenir o atenuar las arrugas de la piel.
13.

Composicion de alimento saludable para el uso de la reivindicacion 12, en la que el honeybush fermentado adicionalmente incluye otros agentes antiarrugas.
14. 35

Composicion de alimento saludable para el uso de la reivindicacion 13, en la que el agente antiarrugas se selecciona del grupo que consiste en clorela, espirulina, N-acetilglucosamina y gel de aloe.