ES2603877T3 - Uso de extracto de Vernonia appendiculata para la mejora del estado de la piel - Google Patents
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Abstract
Un extracto foliar de Vernonia appendiculata obtenible por las siguientes etapas: a) extraer las hojas con un disolvente polar, en el que el disolvente polar es una mezcla de agua y alcohol, b) mezclar y extraer la solución obtenida con un disolvente no polar, y c) separar las fases para retener la fase acuosa, o a) extraer las hojas con un disolvente no polar, b) mezclar y extraer la solución obtenida con un disolvente polar, en el que el disolvente polar es una mezcla de alcohol y agua, y c) separar las fases para retener la fase acuosa, en el que el extracto seco contiene ácidos clorogénicos y/o isoclorogénicos en una cantidad total de más del 5 % en peso del extracto total.
Description
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DESCRIPCION
La presente invention se refiere a un extracto foliar de Vernonia appendiculata, a su uso cosmetico y a la composition dermatologica o cosmetica relacionada.
Adicionalmente, se describe en el presente documento el uso de tal extracto de esta planta de Vernonia de Madagascar en productos cosmeticos, productos farmaceuticos y suplementos alimentarios para mejorar el estado de la piel, mas espetificamente fortaleciendo la union dermica-epidermica y/o activando la smtesis fibroblastica de la dermis y los compuestos de la matriz extracelular.
Las Vernoniaceas pertenecen a la familia de las Asteraceas (o Compuestas) que es la familia mas importante de las angiospermas ya que contiene 1600 generos y 22800 especies. El genero Vernonia, dedicado a W. Vernon, contiene 500 a 1000 especies ampliamente extendidas en America, Africa y Asia Sudoriental.
La Vernonia appendiculata puede recogerse en Madagascar, donde se llama Ambiaty. Esta planta es un arbusto que alcanza hasta 4 metros de altura y es verde la mayor parte del ano pero puede volverse plumosa durante la estacion seca. Las hojas son alternas con venas pinnadas y se agrupan en el extremo de la rama: el limbo es dentado, piloso y verde en la parte superior y blanco en la parte inferior. La floracion da flores violetas o blancas abundantes y es en septiembre y octubre. Los frutos son aquenios con doble vilano. En Madagascar, esta planta puede encontrarse en areas secas y soleadas, a lo largo de los rios y alrededor de los pueblos de la region de las Mesetas Altas (800-1500 m de altura, clima tropical). La ambiaty se usa tradicionalmente por ejemplo para curar heridas, antipiretico (malaria), dolor de estomago, y las hojas nuevas pueden cocinarse tambien como comida.
Las especies de Vernonia tambien se usan para la obesidad y la perdida de peso (documento WO 01/15716) y se reivindica un peptido natriuretico de Vernonia cinerea teniendo una propiedad adelgazante (documento WO 01/54659). La Vernonia cinerea se usa por su propiedad antioxidante debida a sus actividades de tipo superoxido dismutasa y de aceptor de radicales libres (documento EP 1 352 640). Las composiciones descritas en el documento EP 1 352 640 pueden mantener la tension y la elasticidad de la piel. La Vernonia anthelmintica se reivindica en uso oral para el tratamiento del vitiligo con la activation de la tirosinasa y la aceleracion de la smtesis de melanina (documentos CN1089861, CN1141183). El documento EP 1 854 452 describe extractos de Vernonia sublutea para uso antiinflamatorio en el campo dermico y cosmetico. Este extracto se obtiene por extraction con heptano, etanol y agua, seguido de liofilizacion. El documento WO 2007/113851 describe composiciones que contienen principios activos de especies de Vernonia para tratar trastornos del cabello. El documento WO 01/15716 describe una mezcla de extractos de plantas que comprenden Vernonia, Cissus y Brillantasia para controlar la ganancia de peso y la obesidad.
De acuerdo con "Plantes utiles des hautes terres de Madagascar” (Jean-Marie Samyn, 1999), la pulpa de la planta Vernonia appiculata puede usarse para la curacion de heridas. Se sabe que las hojas de la misma planta tienen un efecto antifebril y muchas veces se usan en los alimentos.
En "wound healing activity and systemic effects of Vernonia scorpioides extract in guinea pig” (Leite y col., Filoterapia 73 (2002), 496-500) se extraen hojas frescas de Vernonia scorpioides con etanol. Este extracto se usa para el tratamiento de ulceras de piel cronicas. Un extracto acuoso de la misma planta puede ser usable para tratar afecciones dermicas, como alergias, parasitos de la piel, irritaciones, lesiones dermicas o picor.
"Evaluation of wound-healing potency of Vernoizia arborea Hk.” (Manjunatha y col., Indian J. Pharmacol., 2005, Vol. 37, artmulo 4, 223-226) menciona extractos de las hojas de Vernonia arborea obtenidos a traves de la extraccion con metanol o bien con agua. Para ambos extractos, se describe una promotion de curacion de heridas.
El acido clorogenico (acido 3-cafeoilqumico) y el acido isoclorogenico (acido 3,5-dicafeoilqumico) son compuestos dihidroxicinamicos que son compuestos fenolicos.
Acido clorogenico:
Acido isoclorogenico:
La presente invention se refiere a un extracto foliar de Vernonia appendiculata obtenible por las siguientes etapas:
5 a) extraer las hojas con un disolvente polar, en el que el disolvente polar es una mezcla de agua y alcohol,
b) mezclar y extraer la solution obtenida con un disolvente no polar, y
c) separar las fases para retener la fase acuosa, o
a) extraer las hojas con un disolvente no polar,
10 b) mezclar y extraer la solucion obtenida con un disolvente polar, en el que el disolvente polar es una mezcla de
alcohol y agua, y
c) separar las fases para retener la fase acuosa,
en el que el extracto seco contiene acidos clorogenicos y/o isoclorogenicos en una cantidad total de mas del 5 % en peso del extracto total.
15 La union dermica-epidermica (UDJ) consiste en dos capas (lamina lucida y densa) y conexiones multiples: esta organization original da lugar a las funciones tipicas de la UDJ. La UDJ es un primer soporte para la epidermis: los queratinocitos basales se unen a la Lamina lucida (parte superior de la UDJ) gracias a sus hemidesmosomas y la protema Citoqueratina 14 anclando el citoesqueleto de actina de los queratinocitos en la capa de la Lamina lucida.
La UDJ tambien estructura la piel ya que el alto contenido de Colageno IV de la Lamina densa participa en la 20 resistencia mecanica con el tipico patron de surcos en red aumentando la superficie de intercambio entre la epidermis y la dermis.
La UDJ participa en la comunicacion de la piel, por ejemplo con el suministro de soluto y la filtration en la Lamina reticularia (que tambien se llama dermis reticular y de hecho es la parte superior de la dermis papilar y se caracteriza por contenidos altos de celulas y vasos). La UDJ es esencial para la cohesion entre la epidermis y la dermis, 25 notablemente con la glucoprotema Laminina V (filamento de cohesion distribuido a traves de toda la L. lucida y la L. densa).
Los extractos de la presente invencion pueden usarse para la mejora del estado de la piel por ejemplo fortaleciendo la union dermica-epidermica y/o activando smtesis fibroblastica de la dermis y de compuestos de la matriz extracelular. Eso se puede lograr por ejemplo mediante activation de la smtesis de laminina V, activation de smtesis 30 del colageno IV, activacion de smtesis de citoqueratina 14 o activacion de smtesis de glucosaminoglucanos. Por lo tanto compuestos, mezclas y extractos de la presente invencion pueden usarse tambien para antienvejecimiento de la piel, densificacion y afirmacion de la piel, resplandor de la piel, mejora de la cohesion de la union dermica- epidermis, mejora de la estructuracion de la piel, una interfaz funcional conservada entre epidermis y dermis (comunicacion, nutrition...), la circulation de los elementos vitales, el contenido en humedad de la piel, la movilidad 35 de los fibroblastos y/o la distribution de las fibras en la red de la dermis.
Ademas los extractos de la presente invencion pueden usarse para tratar EBDR (epidermolisis bullosa distrofica recesiva), dermatosis bullosa sub-epidermica, penfigoides (bullosa, etc.), lupus eritematoso asi como para curacion de heridas, renovation de ECM, tratamiento de fibrolisis y tratamiento de reticulation fibrosa (glicacion, etc.).
El uso de extracto de Vernonia es un procedimiento apropiado y seguro para el tratamiento de la piel.
40 Los extractos de Vernonia de acuerdo con la invencion son extractos de la planta Vernonia appendiculata.
Otras plantas conocidas de la familia de Vernonia de Madagascar incluyen Vernonia chapelieri, Vernonia diversifolia, Vernonia sublutea, Vernonia trinervis, Vernonia trichoderma, Vernonia pectoralis, Vernonia moquinoides y Vernonia eryophylla.
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La extraccion se lleva a cabo de acuerdo con la reivindicacion 1. La extraccion se lleva a cabo con un disolvente polar aplicable para extraccion. De acuerdo con la primera alternativa de la reivindicacion 1, las hojas se extraen primero con un disolvente polar opcionalmente en varias veces. La solucion obtenida se mezcla y se extrae despues con un disolvente no polar por ejemplo heptano para retirar las ceras, los aceites esenciales, los pigmentos y la mayona de las moleculas no polares. Despues de separacion de fases, se anade la glicerina a la solucion acuosa con el fin de ajustar el contenido de extracto vegetal a un mmimo del 10 % en peso del extracto seco en una mezcla de glicerina-agua 1:1.
Un extracto de acuerdo con la invencion es normalmente un extracto en solucion. No obstante el extracto puede usarse tambien como un extracto secado (por ejemplo despues de secar por congelacion) o puede usarse adicionalmente en el proceso de encapsulacion. El disolvente polar usado para la extraccion es preferentemente alcohol o una mezcla de agua y alcohol en la que el alcohol es preferentemente etanol. La relacion del volumen entre agua y alcohol puede ser de 50:50 a 90:10, preferentemente 70:30.
El extracto vegetal seco puede contener acidos clorogenico y/o isoclorogenico en una cantidad total de mas del 5 % en peso del extracto total, o una solucion del mismo. Mas preferentemente el extracto vegetal es un extracto de Vernonia appendiculata.
Los extractos de la presente invencion pueden administrarse en cualquier forma mediante cualquier via eficaz, que incluye, por ejemplo, oral, parenteral, enteral, intravenosa, intraperitoneal, topica, transdermica (por ejemplo, usando cualquier parche convencional), oftalmica, nasalmente, local, no oral, tal como por aerosol, inhalacion, subcutanea, intramuscular, bucal, sublingual, rectal, vaginal, intra-arterial e intratecal, etc. Esto puede administrarse solo, o en combinacion con cualquier ingrediente o ingredientes, activos o inactivos. Se da preferencia a una administracion topica.
Los extractos de la presente invencion pueden convertirse de una manera conocida en las formulaciones usuales tales como composiciones cosmeticas o farmaceuticas o composiciones usadas como suplemento alimentario. Estas pueden ser formulaciones lfquidas o solidas por ejemplo sin limitacion comprimidos normales y con recubrimiento enterico, capsulas, pfldoras, polvos, granulos, elixires, tinturas, solucion, suspensiones, supositorios, jarabes, aerosoles solidos y lfquidos, emulsiones, pastas, cremas, pomadas, leches, geles, unguentos, sueros, espumas, champus, barras o lociones.
Se da preferencia a una composicion cosmetica en una forma de solucion acuosa, una crema blanca o coloreada, pomada, leche, gel, unguento, suero, espuma, champu, barra, crema, pasta, o locion.
Se da preferencia a una composicion que comprende el extracto secado de la presente invencion en una cantidad del 0,01 % al 5 %, preferentemente del 0,1 al 1 % en peso de la composicion total.
Se da preferencia tambien a una composicion que contiene una solucion, preferentemente una solucion basada en agua, del extracto de acuerdo con la presente invencion en una cantidad del 0,1 % al 10 %, preferentemente del 1 % al 5 % en peso de la composicion total.
La composicion de acuerdo con la invencion se administra una o mas, preferentemente hasta tres, mas preferentemente hasta dos veces al dfa. Se da preferencia a una administracion topica.
No obstante, puede ser ventajoso en algunos casos desviarse de las cantidades especificadas, dependiendo del peso corporal, el comportamiento individual hacia el ingrediente activo, el tipo de preparacion y el tiempo o intervalo durante el que se lleva a cabo la administracion. Por ejemplo, menos de las cantidades mmimas mencionadas puede ser suficientes en algunos casos, mientras que el lfmite superior especificado tiene que excederse en otros casos. En el caso de administracion de cantidades relativamente grandes, puede ser aconsejable dividir estas en varias dosis individuales durante el dfa.
Los extractos de la presente invencion tambien pueden combinarse con al menos una sustancia activa adicional o extracto vegetal adicional por ejemplo sustancias o extractos de plantas empleados usualmente para uso dermatologico o cosmetico.
Las sustancias activas adicionales incluyen pero no se limitan a agentes desescamadores y/o humectantes, agentes de filtracion o bloqueantes de ultravioleta, agentes despigmentantes o propigmentantes, agentes antiglicacion, agentes antiinflamatorios, agentes antimicrobianos, agentes que estimulan la smtesis de macromoleculas dermicas, epidermicas, del cabello o de las unas y/o evitan la degradacion de las mismas, agentes que estimulan la diferenciacion de queratinocitos, relajantes musculares, agentes antipolucion y/o agentes antirradicales libres, agentes adelgazantes, agentes que actuan en la microcirculacion, agentes que actuan en el metabolismo energetico de las celulas, agentes tensores, agentes que evitan la perdida o estimulan el crecimiento del cabello, agentes que evitan el cabello blanco o gris o una mezcla de los mismos. Preferentemente esa combinacion esta contenida en una composicion dermatologica o cosmetica por via topica.
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Ejemplos
Se extraen primero hojas secadas de Vernonia appendiculata con heptano antes de la percolacion con etanol. La retirada de grasas se obtiene despues gracias a una extraccion Kquido-Kquido con heptano. Despues de concentracion en la fase acuosa, se anade glicerina ajustando la solucion al l0 % en peso/volumen de extracto vegetal en una mezcla de agua-glicerina. El producto final es entonces una forma lfquida.
La composicion puede probarse mediante HPLC y una composicion tipica del extracto vegetal (secado) contiene mas del 5 % de acidos clorogenico e isoclorogenico en peso del extracto total.
Ejemplo 2: crema anti edad
- Nombre INCI
- Cantidad
- Estearato de glicerilo (y) estearato de PEG-100
- 2,00
- Alcohol ceteanlico (y) glucosido de cetearilo
- 3,00
- Miristato de octildodecilo
- 4,00
- Escualano vegetal
- 3,00
- Eter de dicaprililo
- 3,00
- Trigliceridos C8/C10
- 2,00
- Ciclometicona
- 3,00
- Fenoxietanol (y) metilparabeno (y) etilparabeno (y) propilparabeno (e) isobutilparabeno
- 0,80
- Glicerina
- 1,50
- Etoxidiglicol
- 0,75
- Agua (y) glicerina (y) extracto de hoja de Vernonia Appendiculata (Extracto de Vernonia de acuerdo con el ejemplo 1)
- 1,00
- Agua
- C.s. 100%
Ejemplo 3: Evaluacion ex vivo de activacion de Glucosaminoglicanos, Citoqueratina 14 y Laminina V
Las biopsias de cirugfa plastica abdominal se usan en este experimento ex vivo. Se cultivan en un medio de explantes de supervivencia espedfica: MEB (Medio de Explantes de BIO-EC). Se aplican 2 mg de una formulacion que contiene el 7 % del extracto de acuerdo con el ejemplo 1 en las franjas de piel en los siguientes tiempos: dfa D0, D1, D2, D4, D6 y D8. Los resultados se comparan con las franjas de piel no tratadas.
Los estudios histologicos se llevan a cabo en D6 y D10. Para analisis morfologicos, los explantes se fijan despues de la deshidratacion y la impregnacion de parafina, con solucion de Bouin. Se cortan y tinen despues con tincion de tricoma de Masson. La tincion espedfica y el inmunomarcaje se llevan a cabo en tejidos de cortes de criostato congelados.
a- Evaluacion de Glucosaminoglucanos (GAG):
La inmunotincion espedfica de GAG se lleva a cabo mediante el procedimiento de tincion de Mowry (tincion de azul de Alcian) y permite visualizar los de GAG presentes en la dermis papilar y a lo largo de la union dermica-epidermica (UDE) debida a la tincion rosa-violeta.
Observaciones de los GAG en D6: Para todas las biopsias, no hay activacion de los GAG acidos presentes en la dermis papilar. En lo referente a las bandas de piel no tratadas, los GAG neutros estan presentes a lo largo de la UDE con tincion moderada en una banda irregular y fina. Para los explantes tratados con extracto de Vernonia appendiculata, los GAG neutros estan claramente marcados a lo largo de la UDE y forman una banda regular y fina (Figura 1).
El marcado amplificado indica que el tratamiento con extracto de Vernonia appendiculata aumenta el contenido de GAG en la dermis.
b-Evaluacion de Citoqueratina 14:
El inmunomarcaje espedfico de citoqueratina 14 se lleva a cabo gracias a anticuerpos monoclonales antiqueratina 14 (Progen referencia RCK107) y se revela mediante FITC. Los nucleos celulares se tinen despues con yoduro de propidio. La queratina 14 puede observarse despues en el area de union dermica-epidermica debido al marcaje fluorescente.
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Observaciones de la Citoqueratina 14 en D10:
En lo referente a las tiras de piel no tratadas, el marcaje es claro y mas y menos regular en la capa de los queratinocitos basales. Es suave en la segunda capa de celulas. Para los explantes tratados con extracto de Vernonia appendiculata, el marcaje es muy claro y regular sobre la capa de queratinocitos basal y moderado en la segunda capa de celulas (Figura 2).
El tratamiento con extracto de Vernonia appendiculata ayuda a regular al alza la liberacion de citoqueratina 14 en la epidermis.
c- Evaluacion de Laminina V:
El inmunomarcaje espedfico de la Laminina V se lleva a cabo gracias a anticuerpos monoclonales antilaminina V (memoria descriptiva de ref. 13587 de Santa Cruz) y se revelo mediante FITC. Los nucleos celulares se tinen despues con yoduro de propidio. La laminina V se puede observar despues en el area de union dermica-epidermica debido al marcaje fluorescente.
Observaciones de la smtesis de la Laminina V:
Mientras que el marcado es bastante claro y mas y menos regular en la membrana de las celulas para las biopsias no tratadas, es muy claro y muy regular despues de tratamiento con extracto de Vernonia appendiculata (Fig.3).
El tratamiento con extracto de Vernonia appendiculata ayuda regulando positivamente el contenido en Laminina V.
Ejemplo 4: Evaluacion Ex vivo de activacion de Colageno IV
Las biopsias de cirugfa plastica abdominal se usan en este experimento ex vivo. Se cultivan en un medio de explantes de supervivencia espedfica: MEB (Medio de Explantes de BIO-EC).
Se aplican 2 mg de una formulacion que contiene un 1 % del extracto de acuerdo con el ejemplo 1 en los discos de piel en los siguientes tiempos: dfa D0, D1, D2, D4, D6 y D8. Los resultados se comparan con una formulacion control (excipiente sin compuestos activos) y con una formulacion de referencia (formulacion comercial que contiene retinol).
Los estudios histologicos se llevan a cabo en D6 y D10.
Para analisis morfologicos, los explantes se fijan despues de la deshidratacion y la impregnacion de parafina, con solucion de Bouin. Se cortan y tinen despues mediante tricoma de Masson.
El inmunomarcaje espedfico de colageno IV se lleva a cabo en tejidos de corte de criostato congelado gracias a anticuerpos monoclonales anti-colageno IV (SBA) y se revela mediante FITC. Los nucleos celulares se tinen despues con yoduro de propidio. El colageno IV se puede observar despues en el area de union dermica-epidermica y en la dermis papilar superior debido al marcado fluorescente.
Evaluacion con Colageno IV mediante analisis de imagen
El analisis de imagen se lleva a cabo despues de digitalizacion de imagen y evalua la superficie ocupada por la tincion. El porcentaje de la superficie ocupada por colageno IV es mayor para las biopsias tratadas con extracto de Vernonia appendiculata que para la piel escindida no tratada o aquella tratada con el excipiente: +23,4 % frente al excipiente, +24,8 % frente a la no tratada. Estos valores son comparables a los resultados obtenidos con una formulacion de retinol.
Claims (8)
- 510152025REIVINDICACIONES1. Un extracto foliar de Vernonia appendiculata obtenible por las siguientes etapas:a) extraer las hojas con un disolvente polar, en el que el disolvente polar es una mezcla de agua y alcohol,b) mezclar y extraer la solucion obtenida con un disolvente no polar, yc) separar las fases para retener la fase acuosa,oa) extraer las hojas con un disolvente no polar,b) mezclar y extraer la solucion obtenida con un disolvente polar, en el que el disolvente polar es una mezcla de alcohol y agua, yc) separar las fases para retener la fase acuosa,en el que el extracto seco contiene acidos clorogenicos y/o isoclorogenicos en una cantidad total de mas del 5 % en peso del extracto total.
- 2. El extracto foliar de la reivindicacion 1, en el que la preparacion comprende ademas la etapad) anadir glicerina a la solucion acuosa.
- 3. El extracto foliar de la reivindicacion 1 o 2, en el que el disolvente no polar es heptano.
- 4. Uso cosmetico del extracto foliar de Vernonia appendiculata de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para mejorar el estado de la piel teniendo un efecto antienvejecimiento de la piel, densificando y afirmando la piel y/o fortaleciendo la union dermica-epidermica.
- 5. Uso cosmetico de la reivindicacion 4 para mejorar el estado de la piel mediante regulacion positiva del contenido de laminina V, activacion de la smtesis de colageno IV, regulacion positiva de la citoqueratina 14 en la epidermis, aumento de la smtesis de glucosaminoglucanos en la dermis y/o reduccion/limitacion de la glicacion de la dermis.
- 6. Uso cosmetico de la reivindicacion 4 para la mejora del resplandor de la piel, la mejora de la cohesion de la union dermica-epidermis, la mejora de la estructuracion de la piel, una interfaz funcional conservada entre la epidermis y la dermis, la circulacion de los elementos vitales y/o el contenido en humedad de la piel.
- 7. Una composicion dermatologica o cosmetica que contiene el extracto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.
- 8. La composicion de la reivindicacion 7, en la que la composicion contiene una solucion del extracto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 en una cantidad del 0,1 % al 10 % en peso de la composicion total.
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