ES2542088B1 - Composición de azufre liposomado - Google Patents

Abstract

Composición de azufre liposomado.#La presente invención se refiere a una composición que comprende una suspensión de liposomas los cuales contienen azufre elemento incorporado a su membrana lipídica, y también al uso de dicha composición en el tratamiento de enfermedades dermatológicas como dermatitis seborreica o acné.

Description

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COMPOSICION DE AZUFRE LIPOSOMADO

DESCRIPCION

La presente invention se refiere a una composition de liposomas que contienen azufre elemento incorporado a su membrana lipidica y al uso de dicha composicion en el tratamiento de enfermedades, principalmente dermatologicas, como la dermatitis seborreica o el acne, ademas de otras. Por tanto, la invencion se podria encuadrar en el campo de la farmacologia y la cosmetica.

ESTADO DE LA TECNICA

El uso de azufre como agente terapeutico para diversos desordenes o enfermedades dermatologicos y no dermatologicos data de tiempos inmemoriales. Durante muchos anos se ha considerado al azufre elemento por via topica en distintas formas o preparaciones galenicas como el remedio espedfico de la seborrea. Debido a su escasa solubilidad o su solubilidad en disolventes no permitidos o no apropiados para su uso humano o animal, la actividad de dichas formulaciones siempre ha sido relativa, escasa o baja y por ello los preparados han tenido que incorporar altas concentraciones de dicho elemento para compensar dicha problematica, entre un 2 % y un 10% o 20% del mismo. Dicha baja actividad o eficacia, siempre ha estado relacionada y determinada o condicionada por su forma de suspension/dilucion y el tamano de particula del azufre elemento incorporado en la formulation, ambas consecuencias directas de su escasa o casi nula solubilidad.

Las aplicaciones por via topica del azufre elemento en diferentes formas o preparaciones galenicas son multiples. Por su efecto queratolrtico, es de utilidad en el tratamiento y prevencion de la dermatitis seborreica, el acne, la rosacea, la pitiriasis versicolor, algunas parasitosis como la escabiosis, foliculitis y otras patologias cutaneas como algunas dermatofitosis superficiales, dermatitis perioral, acne necrotico, y ciertos formas de eccema y psoriasis. Tambien se ha utilizado a bajas concentraciones como queratoplasico, como antipruriginoso, y, ademas, posee actividad oxidorreductora, vasomotora, fotosensibilizante, "despigmentante”, cierta

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actividad germicida y fungicida. A altas dosis puede ser irritante, producir prurito/quemazon, enrojecimiento de la piel, exfoliacion o hiperproliferacion.

Por via general el azufre elemento ha sido utilizado en el tratamiento de algunas parasitosis intestinales, tambien como oligoelemento por su caracter “nutritivo” esencial para la sintesis de muchos aminoacidos, para la caida del pelo, fortalecer unas, etc...

De todas sus posibilidades terapeuticas, son las aplicaciones dermatologicas por via topica mencionadas las mas frecuentes y relevantes hasta el momento.

Las formulaciones o formas de azufre elemento topico mas conocidas historicamente son el azufre precipitado y el azufre sublimado. Ambas formulaciones o formas contienen azufre elemento con un grado de pureza mlnimo del 99,5% en forma anhidra. La experiencia galenica y terapeutica con el azufre elemento, sublimado o precipitado, ha llevado a los expertos a la conclusion de que cuanto menor sea el tamano de partlcula del azufre elemento en la formulacion, mayor y mas homogeneo sera el grado de interaction o contacto con la zona a tratar y, por ello, mayor sera tambien su eficacia terapeutica.

Con el fin de mejorar sus caracterlsticas galenicas y funcionales se han desarrollado otros preparados de azufre como por ejemplo el azufre coloidal, el “bioazufre”, la potasa sulfurada, etc... Otras ejemplos de ello son los acidos politionicos, sus sales alcalinas, los politionatos de amonio cuaternario, y los acidos mercaptocarboxllicos ya sean en forma de acido, esteres o amidas. Se han obtenido resultados funcionales interesantes utilizando algunos de los derivados minerales u organicos del azufre, ya sean naturales o sinteticos, aunque generalmente sus caracterlsticas organolepticas, especialmente el mal olor que desprenden, complican o condicionan su utilization y aceptacion.

Ademas, la problematica galenica del azufre elemento y otras formas del mismo incluye en muchos casos la necesidad de utilizar como solventes o dispersantes determinados componentes, como son grasas o aceites, para su formulacion final, de efecto oclusivo y engrasante, cuya aplicacion puede ser contraproducente en la

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patologla a tratar, un ejemplo de ello sucede con dicho tipo de formulacion y patologlas como la dermatitis seborreica, el acne, etc.

El azufre terapeutico actualmente se aplica sobre la piel y faneras en muy diferentes formas o preparaciones galenicas, como por ejemplo, pomadas, cremas, geles, lociones o leches, jabones o champus, mascaras y unguentos. Su aplicacion a altas dosis y concentraciones puede ser irritante, producir descamacion, quemazon, enrojecimiento de la piel, exfoliation, hiperproliferacion...por lo que existe la necesidad de un sistema de administration de azufre que sea efectivo y que no requiera altas concentraciones de este para minimizar las posibles reacciones adversas, facilitar su aplicacion y mejorar sus caracterlsticas organolepticas.

DESCRIPCION DE LA INVENCION

La incorporation del azufre elemento en liposomas con una buena actividad funcional, en una formulacion galenicamente correcta, y, organolepticamente muy aceptable es la innovation desarrollada y objeto de esta patente. Esta encapsulation del azufre elemento en liposomas se ha realizado con el fin de solubilizar, suspender y/o dispersar el mismo sin necesidad de utilizar disolventes no permitidos u otros productos no convenientes, solucionando con ello el principal problema galenico del mismo, asl como a su vez su aspecto funcional que tambien mejora de forma considerable pues, debido a su tamano nanometrico y a las caracterlsticas fisicoqulmicas de dichos liposomas, una vez aplicado, el azufre elemento en forma liposomal sera transportado por dichas nanoestructuras mejorando sus caracterlsticas farmacocineticas y farmacodinamicas. Ademas de los problemas de solubilidad, de formulacion galenica, y funcionales del azufre elemento, el producto resultante, en su forma liposomal, es organolepticamente mucho mejor, mas facil de aplicar y tolerable o agradable para los pacientes, tanto por su olor como por sus posibles texturas y por su facilidad de aplicacion o uso, todo ello en comparacion con las formas clasicas o convencionales del mismo.

Asl como las concentraciones de azufre elemento utilizadas en las formas convencionales son altas, entre 20 y 200 mg/g, en la forma liposomal estas oscilan entre 0,02 y 0,4 mg/ml.

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El producto final, una suspension liposomal de base acuosa, es de muy facil y rapida aplicacion, como por ejemplo la atomizacion, rapida absorcion y no tiene efecto oclusivo ni engrasante de la zona tratada. Puede ser facilmente aplicado a faneras, pelos y unas, con las mismas ventajas. Apenas mancha la piel ni la ropa.

En la forma liposomal propia del invento la eficacia del azufre elemento en el tratamiento o prevention de ciertas patologlas se ve potenciada, no solo por las aportaciones galenicas, farmacocineticas y farmacodinamicas de la estructura liposomal, sino que tambien por la reconocida actividad antiseborreica - anticomedogenica de la fosfatidilcolina en especial, y los fosfollpidos insaturados en general, principales componentes de la membrana liposomal, y que actuan sinergicamente con el azufre en dichas patologlas. La eficacia antiseborreica- anticomedogenica de estos compuestos es principalmente atribuida a su alto contenido en acido linoleico.

Las ventajas de la presente invention se enumeran a continuation:

- El liposoma al solubilizar, suspender o dispersar el azufre elemento en una fase acuosa en forma de unas partlculas de tamano diminuto y muy homogeneo ofrece una muy buena alternativa galenica a dicho activo.

- El liposoma por sus caracterlsticas fisicoqulmicas especiales mejora las propiedades terapeuticas del azufre elemento comparado con las formas galenicas clasicas o convencionales. Esta mejora es debida a las especiales caracterlsticas farmacodinamicas y farmacocineticas del azufre elemento encapsulado en los liposomas.

- Las mejoras o ventajas anteriormente mencionadas permiten utilizar concentraciones y dosis mas bajas del activo manteniendo su actividad terapeutica, disminuyendo el riesgo de reacciones adversas o no deseadas, como son irritation, quemazon,....

- Las formulaciones farmaceuticas que incorporan la forma liposomal de azufre elemento tienen mejores caracterlsticas organolepticas, especialmente el olor, comparadas con las que lo contienen en sus concentraciones y formas galenicas convencionales.

- El producto en forma liposomal, de base acuosa, ademas de aplicarse y absorberse con mucha mayor facilidad que las formulaciones convencionales, especialmente las

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grasas, no engrasa y ocluye la piel, no deja color sobre la misma, y apenas mancha la ropa.

- Las caractensticas especiales y muy versatiles de la formulacion liposomal de azufre elemento permiten incorporarla y presentarla en muchas formas galenicas, tanto en forma fluida tipo locion, suspension, serum, atomizador,.., como tambien en formas semisolidas como son los geles, emulsiones, emulgeles, unguentos, mascaras, etc...

- El "concentrado” liposomal o los liposomas con azufre elemento es/son facilmente incorporable/s o asociable/s a otras formulaciones o productos que ademas del mismo contengan otro u otros activos sinergicos o complementarios destinados al tratamiento de diferentes patologias con el fin de mejorar su eficacia y/o tolerancia.

- Las mejoras galenicas, farmacocineticas y farmacodinamicas aportadas por los liposomas propios del invento en general, pues por su gran biocompatibilidad pueden ser administrados por cualquier via mejorando y potenciando los efectos del azufre elemento, nos permiten pensar en nuevas aplicaciones del mismo por cualquier via de administration y para patologias no contempladas actualmente como susceptibles de ser tratadas con azufre elemento.

- El efecto antiseborreico - anticomedogenico de la fosfatidilcolina, principal componente de la membrana liposomal, que actua sinergicamente con el azufre elemento en determinadas patologias, tambien significa una ventaja importante de la forma liposomal del mismo frente a las convencionales.

- El aumento de la capacidad bactericida de los liposomas conteniendo azufre elemento, comparado con el azufre elemento en su forma convencional, siginifica una mejora en la actividad del mismo y tiene la ventaja de reforzar el efecto antiacneico, anticomedogenico, anti rosacea, etc,... del producto.

- Las caractensticas fisicoquimicas, la facilidad y versatilidad de formulacion de dicha forma de azufre elemento liposomal, tienen la ventaja de no necesitar de productos que interfieran o puedan ser contraproducentes para el tratamiento de determinadas patologias, o para la propia salud del paciente. Por ejemplo, no necesitar grasas, aceites u otros solventes o componentes para su formulacion.

- El preparado tiene unas caractensticas, tamano de particula, que le permiten ser esterilfiltrado tanto en su fase de concentrado como tambien en su forma diluida, como producto acabado. Esta posibilidad supone la ventaja de permitir envasar y administrar los productos sin necesidad de anadir conservantes a la formulacion.

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Por tanto, un primer aspecto de la presente invention se refiere a una composition que comprende una suspension de liposomas en fase acuosa caracterizada porque comprende:

• Fosfollpidos con una proportion de fosfatidilcolina de entre el 75 y el 99,5% en peso,

■ al menos una sal biliar,

■ al menos un alcohol y

■ agua,

y porque los liposomas contienen azufre elemento incorporado a la bicapa fosfolipldica.

Los fosfollpidos de la composicion pueden proceder de lecitinas naturales extraldas o ser de origen sintetico.

Por el termino “liposoma” se entiende una veslcula esferica con al menos una membrana compuesta de una doble capa de fosfollpidos, tambien llamada bicapa fosfolipldica, que constan de partes hidrofllicas y lipofllicas.

Los liposomas pueden ser uni-, oligo- o multilamelares, es decir que pueden comprender una o varias dobles capas de fosfollpidos. Si bien los propios de la invencion, los mas adecuados y preferidos para su aplicacion topica son los unilamelares.

Por “composicion que comprende liposomas” se entiende composiciones que den lugar a la formacion de liposomas, ya sean uni-, oligo- o multilamelares y soluciones micelares convertibles por dilution en liposomas, si bien preferentemente interesan los liposomas unilamelares.

El termino “azufre elemento incorporado a la bicapa” quiere decir que el azufre forma parte o esta incluido en la estructura de bicapa lipldica del liposoma. La combination de los componentes del liposoma y el azufre elemento como principio activo tiene lugar durante la preparation de los mismos y previa a la fabrication de la suspension liposomal.

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Por el termino "azufre elemento” se entiende cualquier forma de azufre mineral con un mlnimo del 99,5% de pureza, si bien preferentemente se utiliza la sustancia conocida como "azufre flor” que, por poseer un tamano de grano adecuado y unas caracterlsticas y propiedades terapeuticas y farmaceuticamente reconocidas, se transforma en el activo de dicha formulacion o preparation liposomal.

El encapsulado de azufre elemento en liposomas conduce a una buena alternativa o solution de las dificultades de su formulacion galenica, a una mejora de los aspectos o caracterlsticas funcionales del mismo, y, consecuentemente, a una reduction significativa de la dosis necesaria del mismo con la misma o superior eficacia terapeutica, comparado con la formas clasicas o no liposomales convencionales. Los inconvenientes de su formulacion y presentation, as! como gran parte de sus posibles efectos secundarios se reducen drasticamente o incluso desaparecen. Algunos ejemplos de esta mejora general son unas mejores caracterlsticas galenicas del producto, especialmente, una mejora de sus caracterlsticas organolepticas, una mayor facilidad de formulacion, una mayor facilidad y comodidad de aplicacion, una mayor seguridad y margen de seguridad del producto, una menor posibilidad de sobredosificacion y de aparicion de reacciones adversas.

En una realization preferida los liposomas de azufre elemento son primero producidos o fabricados en una forma concentrada que puede ser almacenada durante largos periodos de tiempo, y/o, en segundo lugar, ser diluida o incorporada en otra formulacion a una determinada concentration para su aplicacion en pacientes. En determinados casos el producto puede aplicarse en la forma concentrada del mismo, si bien debera realizarse con mucho cuidado.

En una realizacion preferida de un producto final para su aplicacion en pacientes, la composicion se presenta o prepara en forma de suspension acuosa a una concentracion de azufre elemento en forma liposomal apropiada o adecuada para su aplicacion topica directa en forma de locion, atomizada o con cuentagotas, asociada o no a otros componentes u activos.

En otra realizacion preferida, la composition se presenta en una forma apropiada para la administration topica, oral, intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, subcutanea,

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topica cutanea, ungueal, capilar o inhalatoria. Preferiblemente por via topica cutanea, ungueal y capilar, (piel y faneras).

En otra realization preferida, los liposomas tienen un diametro medio entre 40 nm y 500 nm, preferiblemente entre 60 nm y 180 nm, y mas preferiblemente entre 75 nm y 145 nm.

En otra realizacion preferida de invento, el azufre elemento incorporado en los liposomas es azufre flor de calidad farmaceutica. Preferiblemente en el producto final para el paciente la concentration de este elemento esta entre los 0,004 gr por litro hasta los 0,4 gr por litro, mas preferiblemente entre 0,012 gr por litro y los 0,25 gr por litro, y aun mas preferiblemente entre 0,02 gr por litro y 0,12 gr por litro. En el concentrado resultante de la fabrication de los liposomas de azufre flor propios del invento, el azufre esta preferiblemente a una concentracion del 0,4% y en el producto final para el paciente la concentracion preferida es de 0,04%.

En otra realizacion preferida del invento, la concentracion de fosfollpidos es de 10 g a 200 g por litro de composition, mas preferiblemente entre 50 g y 150 g por litro de composition y aun mas preferiblemente entre 90 g y 110 g por litro de composicion. En el concentrado resultante de la fabricacion de los liposomas de azufre flor propios de la invention, la concentracion de fosfollpidos es preferiblemente de 100 g/litro y en el producto final es de 10 g/litro.

En otra realizacion preferida, los fosfollpidos tienen la formula (I):

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II

R1-C-0-CH2

O-CH O

ch2-o-p-o-ch2-ch2-n+ (CH3) 3

o

(I)

R9-C-

II

0

donde R1 y R2 pueden ser igual o diferentes entre si, son cadenas hidrocarbonadas de C12-C22, que comprenden entre 0 y 8 enlaces dobles cis, preferiblemente entre 0 y 6 enlaces dobles cis.

5 En una realizacion mas preferida, R1 y R2 se seleccionan de la lista que comprende acido oleico, acido linoleico, acido linolenico, acido palmltico, acido estearico, acido araquidonico acido eicosapentaenoico y acido docosahexaenoico, preferiblemente acido oleico, acido linoleico, acido linolenico, acido palmltico, acido estearico.

10 Entre los fosfollpidos que comprenden estos acidos grasos estan la lecitina de soja, lecitina de huevo, lecitina de otras semillas como por ejemplo de la calabaza, etc... y lecitina con fosfollpidos omega 3 de diferente origen, fosfollpidos de krill, fosfollpidos de crustaceos, de foca, etc...

15 En una realizacion particular de la presente invencion, el fosfollpido tiene la siguiente composition de acidos grasos:

Acido graso en R1 y/o R2

% en fosfollpido

acido oleico

6-13

acido linoleico

61-71

acido linolenico

4-7

acido palmltico

10-15

acido estearico

1,5-3,5

acido araquidonico

0-2

20 En otra realizacion particular de la presente invencion, el fosfollpido tiene la siguiente composicion de acidos grasos:

Acido graso en R1 y/o R2

% en fosfollpido

acido mirlstico

1,8%

acido palmltico

23,7%

acido palmitoleico

1,4%

acido oleico

8,5%

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acido eicosapentaenoico (EPA)

1,9%

acido docosahexaenoico (DHA)

31,9%

Otros saturados cis

10,1%

Esta ultima realization particular es especialmente util cuando se desean liposomas de muy alta capacidad de difusion e intercambio, permeabilidad y flexibilidad.

Preferiblemente el fosfollpido se selecciona del grupo que comprende lecitina de soja, lecitina de huevo, lecitina de semillas de calabaza, lecitina de krill y cualquiera de sus mezclas, mas preferiblemente lecitina de soja, aunque tambien puede ser de huevo u otra fuente con alto contenido en fosfatidilcolina. Preferiblemente el contenido mlnimo en fosfatidilcolina de las lecitinas o los fosfollpidos necesarios para la fabrication o production de los liposomas de la invention esta entre un 75% y 99,5% del total lipldico, mas preferiblemente entre un 96,5 y 98,5 % del total llpido. Ademas de por fosfatidilcolina, la bicapa fosfolipldica del liposoma puede estar compuesta, en una proportion menor o igual a un 25% por fosfatidiletanolamina, fosfatidilinositol, fosfatidilserina, o cualquiera de sus mezclas y/o productos de degradation como es la lisofosfatidilcolina.

En otra realization preferida, la sal biliar se selecciona del grupo que comprende colato sodico, desoxicolato sodico, glicocolato sodico, taurocolato sodico, taurodesoxicolato sodico, ursocolato sodico y quenoxicolato sodico, mas preferentemente colato sodico.

En otra realization preferida, la proportion molar de fosfollpidos/sal biliar esta entre 1,5 y 10, preferiblemente entre 2,5 y 5, y mas preferiblemente entre 3 y 4.

En otra realization preferida, la composition ademas comprende un alcohol seleccionado de la lista que comprende etanol, propanol, isopropanol y cualquiera de sus mezclas, preferiblemente etanol 96% de calidad farmaceutica.

En otra realizacion del primer aspecto de la presente invencion, la proporcion de alcohol/fosfollpido o lecitina en volumen/peso esta entre 0,25 y 3, preferiblemente entre 0,75 y 2,5, y mas preferiblemente entre 1 y 2.

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En otra realization preferida, la fase acuosa comprende agua pura o agua con una sal seleccionada de la lista que comprende cloruro sodico, cloruro potasico, cloruro de magnesio, yoduro sodico y cualquiera de sus mezclas, preferiblemente cloruro sodico. Preferiblemente, la concentration de la sal es inferior a 9 gramos por litro, mas preferiblemente entre 0 y 0,9 gramos por litro. Sin embargo tambien serla posible su production con concentraciones superiores al 0,9% de NaCl, o incluyendo distintas sales, especialmente sales en la concentration del agua de mar, con 35 a 38 g de sales por litro de agua. Preferiblemente la fase acuosa comprende agua pura calidad farmaceutica.

En otra realization preferida, la composition ademas comprende suero glucosado, u otros azucares como manitol.

La composition de liposomas ademas puede contener o comprender excipientes. El termino "excipiente” hace referencia a una sustancia que ayuda a la administration (absorcion) de cualquiera de los componentes del producto de la invention, estabiliza dichos componentes o ayuda a la preparation de la composition farmaceutica en el sentido de darle consistencia y asl estabilizar la suspension, o aportar olores que lo hagan mas agradable. Asl pues, los excipientes podrlan tener la funcion de mantener los componentes unidos como por ejemplo almidones, azucares o celulosas, funcion de olorizar o desodorizar, funcion de colorante, funcion de protection del medicamento. Por tanto, el termino "excipiente” se define como aquella materia que, incluida en las formas galenicas, se anade a los principios activos o a sus asociaciones para ayudar a su administration, penetration en la piel o faneras, posibilitar su preparation o formulation y estabilizarla, modificar sus propiedades organolepticas o determinar las propiedades flsico-qulmicas de la composition farmaceutica y su biodisponibilidad. El excipiente "farmaceuticamente aceptable” debe permitir la actividad de los compuestos de la composicion farmaceutica, es decir, que sea compatible con dichos componentes. Ejemplos de excipientes son aglutinantes, rellenos, desintegradores, lubricantes, saborizantes o aromas y colorantes. Ejemplos mas concretos no limitantes de excipientes aceptables son almidones, azucares, acido hialuronico, xantanas, glicerol, xilitol, sorbitol, o glicerina entre otros.

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Ademas la composition de la invention tambien puede comprender diversos antioxidantes, como vitamina E, vitamina A y vitamina C, que principalmente proporcionarlan un efecto estabilizante qulmico de la composition, y tambien puede contener perfumes o substancias desodorizantes.

La composition puede contener tambien uno o mas aditivos como tampones, tensoactivos, agentes espesantes, conservantes, o cualquiera de sus mezclas.

La composition tambien puede contener uno o mas activos sinergicos o complementarios de la action del azufre elemento como por ejemplo, antibacterianos, antisepticos, crecepelos, astringentes, queratollticos, exfoliantes, activos oxidoreductores, etc.

Otro aspecto de la presente invention se refiere al uso de la composition de la invention para la fabrication de un medicamento o un cosmetico o un dietetico o un nutraceutico.

Otro aspecto de la invention se refiere al uso de la composition de la invention para la fabrication de un medicamento para el tratamiento y/o prevention por via topica de una enfermedad que se selecciona de entre dermatitis seborreica, acne, rosacea, pitiriasis versicolor, dermatofitosis superficiales, escabiosis, dermatitis perioral,

verrugas, foliculitis, psoriasis, eccema, prurito, problemas de pigmentation o manchas en la piel, y queratosis.

Otro aspecto de la invention se refiere a un metodo de tratamiento y/o prevention de una enfermedad que se selecciona de entre dermatitis seborreica, acne, rosacea, pitiriasis versicolor, dermatofitosis superficiales, escabiosis, dermatitis perioral,

verrugas, foliculitis, psoriasis, eccema, prurito, problemas de pigmentation o manchas en la piel, o queratosis, que comprende la administration de la composition de la invention, preferiblemente por via topica, a un paciente que lo necesite.

Otro aspecto de la invention se refiere a un procedimiento de obtencion de la composition de la invention que comprende las siguientes etapas:

a) preparar una disolucion acuosa que comprende la sal biliar,

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b) preparar una disolucion alcoholica que comprende el fosfollpido,

c) diluir por agitacion simple el azufre flor, azufre elemento, en dicha mezcla llpido- alcohol de la etapa (b),

d) homogeneizar conjuntamente las disoluciones obtenidas en las etapas (a) y (c); dicha homogeneizacion puede realizarse por diferentes medios mecanicos, agitacion, cizallamiento, extrusion, etc. o una mezcla de ellos.

e) opcionalmente realizar una etapa de filtrado del producto obtenido en la etapa (d), preferiblemente esterilfiltrado, es decir, un filtrado con esterilizacion simultanea,

f) diluir el concentrado liposomal con azufre elemento, obtenido siguiendo los pasos a) hasta e), en agua sin o con conservante, como por ejemplo el fenoxietanol al 0,5%, hasta que el preparado o formulacion tenga la concentration deseada de azufre elemento en forma liposomal.

g) opcionalmente el producto puede ser utilizado en forma concentrada.

El producto en su forma concentrada obtenida en las etapas (d) o (g) puede envasarse y almacenarse para su posterior utilization mezclado con otros componentes.

A lo largo de la description y las reivindicaciones la palabra "comprende" y sus variantes no pretenden excluir otras caracterlsticas tecnicas, aditivos, componentes o pasos. Para los expertos en la materia, otros objetos, ventajas y caracterlsticas de la invention se desprenderan en parte de la descripcion y en parte de la practica de la invention. Los siguientes ejemplos y figuras se proporcionan a modo de ilustracion, y no se pretende que sean limitativos de la presente invencion.

EJEMPLOS

A continuation se ilustrara la invencion mediante unos ensayos realizados por los inventores, que pone de manifiesto el uso de las composiciones de la invencion como principio activo en el tratamiento de diferentes desordenes dermatologicos tanto humanos como veterinarios.

Los siguientes ejemplos y figuras se proporcionan a modo de ilustracion, y no se pretende que sean limitativos de la presente invencion.

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Ejemplo 1.

Obtencion de una composicion de liposomas de azufre elemento.

Se disolvieron por agitacion simple 80 g de lecitina de soja en 80 ml de etanol del 96%. Se disolvieron por agitacion simple 320 mg de Azufre Flor en la mezcla anterior, lecitina de soja/etanol. Se disolvieron por agitacion simple 11,20 g de colato sodico en 640 ml de agua. Las disoluciones obtenidas se mezclaron y homegenizaron con un homogenizador y posteriormente se sometieron a esterilfiltrado o filtrado por 0,45 y/o 0,2 micras con esterilizacion simultanea, obteniendose una dispersion y suspension muy fina y homogenea de partlculas liposomales. Estas partlculas se pueden diluir o no hasta la concentration deseada de administration, por ejemplo en una proportion 1/10 hasta una concentracion de azufre del 0,04 mg/ml. El preparado puede ser esterilfiltrado por 0,45 o 0,2 micras tambien en su forma diluida. Esta posibilidad permite administrar los productos sin necesidad de anadir conservantes. A dicha preparation final se le puede anadir o no conservante, substancias odorizantes...Esta preparation se realiza preferiblemente en vaclo o atmosfera inerte para evitar la degradation de los diferentes componentes.

Ejemplo 2.

Pruebas de actividad dermatologica realizadas con el azufre liposomado topico.

Durante un periodo de seis meses se realizaron pruebas de actividad funcional del producto de investigation, el invento, por via topica cutanea en voluntarios afectos de dermatitis seborreica, seborrea y acne. El producto final utilizado, como producto de investigacion tenia la siguiente composicion, presentation y posologla.

Composicion del producto final:

- Lecitina de Soja 10,00 mg/ml

- Etanol 7,89 mg/ml

- Colato Sodico 1,4 mg/ml

- Azufre Flor 0,04 mg/ml

- Agua, cantidad suficiente hasta 1 ml

- pH de la suspension 7,25

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Presentacion:

Suspension acuosa de azufre elemento liposomado esterilfiltrada a una concentration de 0,04 mg/ml de azufre, sin conservante, envasado:

1- en un vial de cristal topacio de 20 ml/u con cabezal atomizador grafado.

2- en una botella de cristal topacio de 125 ml de volumen con cuentagotas

Posologia:

Se aplico con el atomizador la cantidad de producto suficiente para humedecer la zona a tratar y realizar un ligero masaje para distribuirla y hacerla penetrar mejor. En la mayorla de casos, se realizo una aplicacion diaria, preferiblemente por la noche. En algunos casos, la aplicacion se repitio, espaciandolas en el tiempo unas 12 h aproximadamente, por ejemplo, aplicar por la manana y por la noche.

Resultados:

a. 1) Dermatitis seborreica:

El producto final de investigation, con la composition y posologia nombrada anteriormente, se ensayo en ocho voluntarios adultos, entre los 48 y 76 anos de edad, afectos de dermatitis seborreica con un importante componente inflamatorio y descamativo, principalmente en la zona del surco nasogeniano y frente. La prueba cllnica del producto final de investigacion se realizo en tratamientos de 30 dlas de duration a cada paciente. El tratamiento se realizo en regimen ambulatorio y hubo dos visitas control por paciente, una al comienzo del tratamiento, con la entrega del producto objeto de estudio, y, otra al final del tratamiento, con la recogida de datos y opiniones.

A los pocos dlas, (2 o 3), del comienzo del tratamiento todos los enfermos notaron el buen funcionamiento del producto y refirieron una rapida disminucion de la secretion o cantidad de grasa de su piel, acompanada de una importante disminucion del componente inflamatorio y por tanto del enrojecimiento o eritema de la misma, propio de la dermatitis seborreica. En los pacientes con un componente descamativo importante de la piel (siete de los ocho) tambien se produjo una rapida reduction de la intensidad y numero de escamas llegando, en un relativamente corto periodo de

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tiempo, 2 a 7 dlas, a su total desaparicion en todos los casos. El producto final de investigation y su presentation tuvo un importante grado de aceptacion por parte de los pacientes. Todos ellos reportaron y loaron las buenas caracterlsticas organolepticas del producto, as! como su facilidad de manejo y aplicacion. El producto final de investigacion tuvo una muy buena tolerancia cutanea y en ninguno de los casos se produjo reaction adversa alguna.

a. 2) Alopecia + Dermatitis seborreica:

El mismo producto final de investigacion con la misma posologla pero con una presentacion en envases de cristal topacio de 125 ml de volumen con cuentagotas, se utilizo en otros cinco pacientes voluntarios, entre los 38 y 57 anos de edad, afectados de alopecia androgenica con un importante componente seborreico. En estos casos el producto se asocio a otros preparados o productos anticalda/crecepelo como es la locion de minoxidilo topico al 2%, en todos los caso con un importante exito. La facilidad de su aplicacion, textura y caracterlsticas organolepticas fueron del agrado de todos los voluntarios. El producto tuvo una muy buena tolerancia y en ningun caso se produjeron reacciones adversas.

b) Acne:

El producto final de investigacion, azufre elemento liposomado, se ensayo o probo en doce pacientes voluntarios de ambos sexos, entre los 16 y 24 anos, afectados de acne de distinta gravedad. El producto final de investigacion tiene la misma posologla y la presentacion descrita en el apartado de "presentacion”.

La prueba cllnica del producto final de investigacion se extendio durante un periodo de seis meses y se realizaron tratamientos de 21 dlas de duration a cada paciente. El tratamiento se realizo en regimen ambulatorio y hubo dos visitas control por paciente, una al comienzo del tratamiento, con la entrega del producto, y, otra al final del tratamiento, con la recogida de datos y opiniones.

Entre el segundo o tercer dla del comienzo del tratamiento todos los pacientes pudieron apreciar una mejora de su cuadro general. En mayor o menor grado, todos los enfermos notaron y refirieron una disminucion de la cantidad de grasa y brillo de la

5

10

15

20

25

30

piel, acompanada de una disminucion del componente inflamatorio o eritematoso de los comedones.

En los siguientes dlas los comedones fueron disminuyendo de tamano y, con el tiempo, aproximadamente entre los cinco y nueve dlas del inicio del tratamiento, tambien comenzo la disminucion de su numero. En algunos casos, ocho, la disminucion del numero de comedones fue muy importante hasta llegar casi a desaparecer en su totalidad durante el periodo que duro el tratamiento.

El producto fue muy bien tolerado por todos los pacientes, y, salvo algo de sequedad de la piel que se produjo en tres de los casos, no se produjeron reacciones alergicas o adversas de otro tipo.

Todos los pacientes apreciaron y agradecieron la facilidad de uso del producto final, asl como la textura y las caracterlsticas organolepticas del mismo, especialmente su poco olor.

El producto final y los liposomas en el contenidos, asl como en el concentrado, se mantuvieron flsicamente estables durante todo el periodo que duraron las pruebas y siguen estables un ano y medio despues.

Ejemplo 3.

Estudio microbiologico: actividad bactericida del azufre liposomado frente a azufre en polvo.

Objetivo:

Comparar en el laboratorio la actividad bactericida del azufre liposomado (S-LIP) frente a la del azufre en polvo (S-POL) con el objetivo de demostrar que la forma liposomada presenta una actividad bactericida superior al azufre en polvo.

Metodo:

A partir de cultivos de concentraciones conocidas de cepas bacterianas representativas de la flora de epidermis humana o causantes de infecciones cutaneas

5

10

15

20

25

o relacionadas con el acne (S.aureus, P.aeruginosa, coliformes como E.coli) se comparo el efecto bactericida de las dos formas de azufre (S-LIP y S-POL).

Materiales y medios:

- Cepas bacterianas de trabajo: S. aureus, P. aeruginosa, E.coli

- Tubos de 5ml. esteriles

- Agua esteril (H2O)

- Suero fisiologico (SF)

- Agua de peptona (PEP)

- Agar nutritivo (AN)

Instruccion:

1- Se preparo un banco de diluciones en SF de cada una de las cepas bacterianas citadas de manera que se obtengan concentraciones conocidas de cada una de ellas. Las concentraciones bacterianas para cada cepa que se enfrentaran a ambas sustancias son: 106 - 105- 104- 103 UFC* /0,1ml.

*UFC: Unidades Formadoras de Colonia.

2- Se partio de S-LIP 0,4 g/100ml.

3- Se preparo la siguiente dilucion con agua esterilizada a partir de S-POL: 0,4 g/100ml

4- En tubos esteriles se dispensaron las preparaciones A y B junto las cepas bacterianas segun la siguiente tabla:

S.aureus

A (S-LIP 0,4) B (S-POL 0,4)

10

(0,1ml. 106 + 2ml. A) x 2 (0,1ml. 106 + 2ml. C) x 2

105

(0,1ml. 105 + 2ml. A) x 2 (0,1ml. 105 + 2ml. C) x 2

104

(0,1ml. 104 + 2ml. A) x 2 (0,1ml. 104 + 2ml. C) x 2

103

(0,1ml. 103 + 2ml. A) x 2 (0,1ml. 103 + 2ml. C) x 2

E.coli

A (S-LIP 0,4) B (S-POL 0,4)

10

(0,1ml. 106 + 2ml. A) x 2 (0,1ml. 106 + 2ml. C) x 2

10

(0,1ml. 105 + 2ml. A) x 2 (0,1ml. 105 + 2ml. C) x 2

104

(0,1ml. 104 + 2ml. A) x 2 (0,1ml. 104 + 2ml. C) x 2

103

(0,1ml. 103 + 2ml. A) x 2 (0,1ml. 103 + 2ml. C) x 2

P.aeruginosa

A (S-LIP 0,4) B (S-POL 0,4)

(0,1ml. 106 7 + 2ml. A) x 2 (0,1ml. 106 + 2ml. C) x 2

10

(0,1ml. 105 + 2ml. A) x 2 (0,1ml. 105 + 2ml. C) x 2

10

(0,1ml. 104 + 2ml. A) x 2 (0,1ml. 104 + 2ml. C) x 2

10

(0,1ml. 103 + 2ml. A) x 2 (0,1ml. 103 + 2ml. C) x 2

Tabla 1

5- Control positivo: se dispensaron 2ml. de suero fisiologico con cada una de las 5 cepas bacterias a las distintas concentraciones, segun la siguiente tabla:

S.aureus

SUERO FISIOLOGICO

106

(0,1ml. 106 + 2ml. SF) x 2

105

(0,1ml. 105 + 2ml. SF) x 2

104

(0,1ml. 104 + 2ml. SF) x 2

103

(0,1ml. 103 + 2ml. SF) x 2

E.coli

SUERO FISIOLOGICO

106

(0,1ml. 106 + 2ml. SF) x 2

10

(0,1ml. 105 + 2ml. SF) x 2

10

(0,1ml. 104 + 2ml. SF) x 2

10

(0,1ml. 103 + 2ml. SF) x 2

P.aeruginosa

SUERO FISIOLOGICO

106

(0,1ml. 106 + 2ml. SF) x 2

105

(0,1ml. 105 + 2ml. SF) x 2

104

(0,1ml. 104 + 2ml. SF) x 2

103

(0,1ml. 103 + 2ml. SF) x 2

Tabla 2

6- Se mezclaron en vortex todos los tubos e incubar a 37°C durante 48 horas.

7- Se inocularon 0,1ml. de cada tubo en una placa de AN.

8- Se incubaron todas las placas a 37°C durante 24horas.

9- Se anotaron los resultados obtenidos: (Crecimiento - C / No crecimiento - NC):

5

S.aureus

A (S-LIP 0,4) B (S-POL 0,4)

106

NC C

105

NC C

T04

NC NC

T03

NC NC

E.coli

A (S-LIP 0,4) B (S-POL 0,4)

106

NC C

105

NC C

104

NC NC

103

NC NC

P.aeruginosa

A (S-LIP 0,4) B (S-POL 0,4)

106

NC C

"I05

NC C

I04

NC NC

T03

NC NC

Tabla 3

S.aureus

SUERO FISIOLOGICO

106

C

105

C

104

C

103

C

E.coli

SUERO FISIOLOGICO

I06

C

"I05

C

I04

C

103

C

P.aeruginosa

SUERO FISIOLOGICO

106

C

105

C

104

C

T03

C

5

Tabla 4

10 Conclusiones:

Segun los resultados obtenidos, el azufre liposomado presenta una actividad bactericida superior a la del azufre en polvo para todas las cepas que se han ensayado (S. aureus, P.aeruginosa y E.coli), ya que en el ensayo con la forma liposomada no se obtuvo crecimiento a concentraciones de inoculo de hasta 106 UFC 15 en todos los casos.

En el caso del ensayo con azufre en polvo se obtuvo crecimiento bacteriano para las tres cepas ensayadas a concentraciones de inoculo de 105 UFC y 106 UFC.

20

Claims (27)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   REIVINDICACIONES

   1. - Una composition que comprende una suspension de liposomas en fase acuosa caracterizada porque comprende:

   ■ fosfollpidos con una proportion de fosfatidilcolina de entre el 75 y el 99,5 % en peso,

   ■ al menos una sal biliar,

   ■ al menos un alcohol y

   ■ agua,

   y porque los liposomas contienen azufre elemento incorporado a la bicapa fosfolipldica.
2. 2. - La composition segun la revindication 1, donde los fosfollpidos tienen la formula

   (I):

   0

   Ri-C-0-CH2 R2-C-0-CH 0

   0 ch2-o-p-o-ch2-ch2-n+ (CH3) 3 0

   (I)

   donde R1 y R2 pueden ser igual o diferentes entre si, son grupos alquilo o alquenilo de C12-C22, que comprenden entre 0 y 8 enlaces dobles cis, preferiblemente entre 0 y 6 enlaces dobles cis.
3. 3. - La composition segun la revindication 2, donde R1 y R2 se seleccionan independientemente de la lista que comprende acido oleico, acido linoleico, acido linolenico, acido palmltico, acido estearico, acido araquidonico, acido eicosapentaenoico y acido docosahexaenoico.

   5

   10

   15

   20

   25

   30
4. 4. - La composition segun la revindication 3, donde R1 y R2 se seleccionan independientemente de la lista que comprende acido oleico, acido linoleico, acido linolenico, acido palmltico, acido estearico.
5. 5. - La composition segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores donde los fosfollpidos comprenden una proportion menor o igual al 25% en peso de fosfatidiletanolamina, fosfatidilinositol, fosfatidilserina o cualquiera de sus mezclas.
6. 6. - La composition segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde los fosfollpidos se seleccionan de la lista que comprende lecitina de soja, lecitina de huevo, lecitina de semillas de calabaza, lecitina de krill y cualquiera de sus mezclas.
7. 7. - La composition segun la revindication anterior, donde el fosfollpido es lecitina de soja.
8. 8. - La composition segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la sal biliar se selecciona de la lista que comprende colato sodico, desoxicolato sodico, glicocolato sodico, taurocolato sodico, taurodesoxicolato sodico, ursocolato sodico y quenoxicolato sodico.
9. 9. - La composition segun la revindication anterior donde la sal biliar es colato sodico.
10. 10. - La composition segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la proportion molar de fosfollpidos/sal biliar esta entre 1,5 y 10.
11. 11. - La composition segun la revindication anterior, donde la proportion molar de fosfollpidos/sal biliar esta entre 2,5 y 5.
12. 12. - La composition segun la revindication anterior, donde la proportion molar de fosfollpidos/sal biliar esta entre 3 y 4.
13. 13. - La composition segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el alcohol se selecciona de la lista que comprende etanol, propanol, isopropanol y cualquiera de sus mezclas.

    5

    10

    15

    20

    25

    30
14. 14. - La composition segun la revindication anterior, donde el alcohol es etanol.
15. 15. - La composition segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la proportion de alcohol/fosfollpido en volumen/peso esta entre 0,25 y 3.
16. 16. - La composition segun la revindication anterior, donde la proportion de alcohol/fosfollpido en volumen/peso esta entre 0,75 y 2,5.
17. 17. - La composition segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la composition se presenta en una forma apropiada para la administration topica, oral, intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, subcutanea, topica, ungueal, capilar o inhalatoria.
18. 18. - La composition segun la revindication anterior donde la composition se presenta en una forma apropiada para la administration topica, ungueal o capilar.
19. 19. - La composition segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde los liposomas tienen un diametro medio entre 40 nm y 500 nm.
20. 20. - La composition segun la revindication anterior, donde los liposomas tienen un diametro medio entre 60 nm y 180 nm.
21. 21. - La composition segun la revindication anterior, donde los liposomas tienen un diametro medio de entre 75 nm y 145 nm.
22. 22. - La composition segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores donde la concentration de fosfollpidos es de 10-200 g por litro de composition.
23. 23. - La composition segun la revindication anterior donde la concentration de fosfollpidos es de 50-150 g por litro de composition.
24. 24. - La composition segun la revindication anterior donde la concentration de fosfollpidos es de 90-110 g por litro de composition.
25. 25.- La composition segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores donde la fase acuosa es agua pura, calidad farmaceutica o cosmetica.

    5 26.- La composition segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores donde la fase

    acuosa comprende una sal seleccionada de la lista que comprende cloruro sodico, cloruro potasico, cloruro de magnesio, yoduro sodico y cualquiera de sus mezclas.
26. 27. - Uso de la composition segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 26 para la

    10 fabrication de un medicamento.
27. 28. - Uso de la composition segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 26 para la fabrication de un medicamento para el tratamiento y/o prevention por via topica de dermatitis seborreica, acne, rosacea, pitiriasis versicolor, dermatofitosis superficiales,

    15 escabiosis, dermatitis perioral, verrugas, foliculitis, psoriasis, eccema, prurito, exceso de pigmentation y queratosis.