ES2416086T3 - Alimento que contiene arabinoxilano y oligosacáridos - Google Patents

Abstract

Un producto alimentario procesado que comprende, sobre una base de peso seco, entre 2,5% (en p/p) y 15% (en p/p) de arabinoxilanos no extraíbles de agua (WU-AX) y, sobre una base de peso seco, entre 2,5% (en p/p) y 15% (en p/p) de arabinoxilano-oligosacáridos (AXOS), en el que el contenido en WU-AX del producto alimentario procesado se corresponde con la suma de toda la arabinosa y la xilosa unidas retenidas en el residuo obtenido después de extraer dicho producto alimentario procesado con agua caliente a una temperatura entre 95 ºC y 100 ºC durante al menos 30 minutos en presencia de un amilasa termoestable, seguido de enfriar el extracto hasta 70 ºC, y en el que el contenido en AXOS se determina como la suma de toda la arabinosa y la xilosa unidas en la fase soluble obtenida después de extraer dicho producto alimentario procesado con agua caliente a una temperatura entre 95 ºC y 100 ºC durante al menos 30 minutos en presencia de un amilasa termoestable, y al cual, después de enfriar hasta 70 ºC, se le ha añadido etanol hasta una concentración final de etanol/agua 70/30 (en v/v).

Description

Alimento que contiene arabinoxilano y oligosacaridos.

Campo de la invenci6n

La presente invencion se refiere a composiciones nutricionales, mas en concreto a suplementos alimentarios y productos alimentarios procesados, enriquecidos con arabinoxilano-oligosacaridos y que comprenden tambien arabinoxilanos no extraibles de agua o arabinoxilanos hidrosolubles, o ambos. Preferiblemente, dichas composiciones nutricionales comprenden arabinoxilano-oligosacaridos y arabinoxilanos no extraibles de agua.

Antecedentes de la invenci6n

La invencion se refiere al efecto positivo sobre la salud gastrointestinal de alimentos, ingredientes alimentarios o suplementos nutricionales con composiciones concretas de arabinoxilanos. El arabinoxilano (AX), tambien denominado pentosano, es un importante constituye de la pared celular de muchas especies vegetales. Por ejemplo, en los granos de cereales, el AX constituye 5-10% del peso seco de los granos. En general, el AX de los cereales consiste en un esqueleto de restos D-xilopiranosilo beta-(1-4)-enlazados (xilosa), algunos de los cuales estan mono-

o disustituidos con restos alfa-L-arabinofuranosilo (arabinosa) (Izydorczyk y Biliaderis, 1995). La proporcion de arabinosa a xilosa (proporcion AlX o grado medio de sustitucion de arabinosa) en el AX de cereales varia de 0,10 a mas de 1,0, dependiendo del tejido y de la especie vegetal. Ademas, pueden estar unidos mas sustituyentes secundarios a los restos xilosa, tales como cadenas laterales de acetilo, alfa-glucuronilo, alfa-4-0-metilglucuronilo, galacturonilo, xilosilo, ramnosilo, galactosilo, o glucosilo, o cadenas laterales de oligosacaridos cortos (Izydorczyk y Biliaderis, 1995; Andersson y Aman, 2001). Estan presentes acidos hidroxicinamicos, principalmente acido ferulico, y en menor grado, acido deshidrodiferulico, acido p-cumarico, o acido sinapico, tambien como sustituyentes, y en general estaran enlazados en la posicion C-(0)-5 de las unidades de arabinosa terminales (Izydorczyk y Biliaderis, 1995; Andersson y Aman, 2001). El AX en cereales aparece en dos formas, una forma extraible de agua, tambien denominada WE-AX, y una forma no extraible de agua (WU-AX) muy probablemente debido a interacciones covalentes o no covalentes con moleculas de AX vecinas y otros componentes de la pared celular, tales como proteinas, celulosa o lignina (Andersson y Aman, 2001; Courtin y Delcour, 2002). En los granos de trigo, los AX presentes en la aleurona y los tejidos de revestimiento de las semillas principalmente son AX no extraibles de agua (WU-AX) y tienen una proporcion AlX baja (de aproximadamente 0,1 a 0,4), mientras que los AX de los tejidos del pericarpo son WU-AX, con una alta proporcion AlX (de aproximadamente 1,0 a 1,3) (Andersson y Aman, 2001; Barron et al., 2007). Los AX en los tejidos endospermicos del trigo son WU-AX o WE-AX con una proporcion AlX intermedia (de aproximadamente 0,5 a 0,7) (Izydorczyk y Biliaderis, 1995; Andersson y Aman, 2001).

Parte de los WU-AX en los granos de cereales pueden solubilizarse mediante un tratamiento con endoxilanasa a dosis baja. Los AX solubilizados con enzimas (ES-AX) y solubilizados con alcalis (AS-AX) tienen propiedades fisicoquimicas similares a los WE-AX (Courtin y Delcour, 2002). En la presente, el grupo de WE-AX, AS-AX y ES-AX se denominan AX hidrosolubles (WS-AX).

Los prebioticos son compuestos, habitualmente oligosacaridos, que no pueden ser digeridos por enzimas del tracto gastrointestinal superior, sino que son fermentados selectivamente por algunos tipos de bacterias intestinales en el intestino grueso (Gibson y Roberfroid, 1995; Roberfroid, 1988; Van Loo, 2004). La ingestion de prebioticos provoca un desplazamiento en la composicion de la poblacion bacteriana intestinal, generalmente caracterizada por un aumento relativo de especies de Lactobacillus y Bifidobacterium. Este desplazamiento en la microbiota intestinal esta asociado con una mejor salud general, menos infecciones intestinales, mejor absorcion de los minerales, y supresion del inicio del cancer de colon (Van Loo, 2004; Macfarlane et al., 2006).

La fermentacion de prebioticos por las bacterias colonicas produce un aumento en la produccion de acidos grasos de cadena corta (SCFA), tales como acetato, propionato, butirato y lactato, que actuan como sumideros de electrones de la respiracion en el entorno anaerobio del intestino. La presencia de SCFA en el intestino contribuye a disminuir el pH, mejora la biodisponibilidad del calcio y del magnesio, e inhibe las bacterias potencialmente perjudiciales (Teitelbaum y Walker, 2002; Wong et al., 2006). Entre los SCFA, el butirato es el que tiene mayor interes, puesto que el butirato es una fuente de energia preferida para los colonocitos (Roediger, 1982), estimula las celulas epiteliales del colon, y asi aumenta la capacidad absorbente del epitelio (Topping y Clifton, 2001), e inhibe el crecimiento de celulas del carcinoma colonico, in vitro e in vivo (Scheppach et al., 1995). Las propiedades supresoras del cancer de las fibras dieteticas parece correlacionarse con su capacidad para generar butirato tras la fermentacion colonica (Perrin et al., 2001).

La estimulacion selectiva por los prebioticos de ciertas bacterias colonicas, tales como Lactobacillus y Bifidobacterium, que generalmente emplean vias sacaroliticas para alimentar sus necesidades energeticas, en algunos casos es pareja a la supresion de la fermentacion de proteinas en el colon (van Nuenen et al., 2003; De Preter et al., 2004; Geboes et al., 2005). Una menor fermentacion de proteinas en el colon es un resultado deseado, puesto que las vias de degradacion de aminoacidos en bacterias dan como resultado la produccion de catabolitos potencialmente toxicos, tales como amoniaco, aminas, fenoles, indoles y tioles, algunos de los cuales se han implicado en el cancer de intestino (Bone et al., 1976; Johnson, 1977; Visek, 1978) y en la exacerbacion de

enfermedades, tales como la colitis ulcerosa (Ramakrishna et al., 1991).

Las preparaciones de xilo-oligosacaridos (X0S, oligosacaridos que consisten en unidades de D-xilopiranosilo 1-1,4enlazadas) con predominancia de oligosacaridos con un grado de polimerizacion (DP) de 2-3 (xilobiosa y xilotriosa), han demostrado provocar un aumento significativo en el nivel de bifidobacterias y SCFA en las heces y el ciego de ratas (documento EP 0265970B1; Campbell et al., 1997; Hsu et al., 2004), y el colon de seres humanos (0kazaki et al., 1990). Estas preparaciones de X0S ricas en xIlobiosa tambien suprimen los sintomas tempranos de la carcinogenesis de colon inducida por productos quimicos en ratas (Hsu et al., 2004) y potencian la absorcion de calcio en el colon (Toyoda et al., 1993). Los experimentos descritos en el documento W02006l002495 han proporcionado pruebas de que los oligosacaridos derivados de arabinoxilano, tambien denominados arabinoxilanooligosacaridos o AX0S, con un DP medio (avDP) intermedio que varia de 5 a 50, tienen mejores propiedades prebioticas que AX0S con un avDP mayor, y son menos dulces que las preparaciones de AX0S con un avDP menor. La adicion de dichas preparaciones de AX0S a la dieta provoca un aumento significativo en el numero de bifidobacterias presentes en el ciego de pollos, el ciego de ratas, y las heces de seres humanos (documento W02006l002495).

Los prebioticos, incluyendo AX0S, generalmente son oligosacaridos hidrosolubles que pueden incorporarse con facilidad en una amplia gama de productos alimentarios sin afectar de forma perceptible a su sabor o textura. Por tanto, en general los prebioticos se consideran ingredientes particularmente adecuados para la preparacion de alimentos procesados con bajo contenido en fibra dietetica. En efecto, la adicion de prebioticos permite conferir a estos alimentos ciertos beneficidos para la salud asociados con la presencia de fibra dietetica, sin alterar su aspecto atractivo, sabor ni textura. Por otra parte, los alimentos ricos en fibra dietetica, tales como alimentos de cereales integrales o alimentos enriquecidos con salvado, generalmente no estan suplementados con oligosacaridos prebioticos.

En el contexto de la presente invencion, se demostro que los arabinoxilanos no extraibles de agua, tales como los contenidos en el trigo integral y los alimentos enriquecidos con salvado, son un sustrato particularmente adecuado para la formacion de acido butirico en el intestino grueso. Ademas, se descubrio, de forma sorprendente, que un consumo combinado de arabinoxilano no extraible de agua y arabinoxilano-oligosacaridos tiene un efecto sinergico sobre la produccion de acido butirico en el intestino grueso. Este descubrimiento indica que, independientemente de su alto contenido en fibra dietetica, resulta beneficioso suplementar los alimentos existentes que contienen cantidades sustanciales de arabinoxilanos no extraibles de agua, tales como trigo integral y alimentos enriquecidos con salvado, con arabinoxilano-oligosacaridos. Por otra parte, el efecto sinergico de los arabinoxilano-oligosacaridos y los arabinoxilanos no extraibles de agua sobre la produccion de butirato intestinal permite preparar alimentos que contienen arabinoxilanos no extraibles de agua que, en combinacion con los arabinoxilano-oligosacaridos, proporcionan, tras su ingestion, unos niveles deseables de butirato en el intestino grueso, al mismo tiempo que tienen un sabor y una textura agradables. Asi, en un primer aspecto, la presente invenvion se refiere a composiciones nutricionales, que incluyen productos alimentarios, que contienen niveles adecuados de arabinoxilanos no extraibles de agua y arabinoxilano-oligosacaridos que, tras su ingestion, proporcionan una produccion intestinal deseable de butirato. Ademas, se ha observado que el consumo de una composicion nutricional que comprende arabinoxilanos no extraibles de agua y arabinoxilano-oligosacaridos estimula la produccion de butirato, mientras que suprime en gran medida la fermentacion de proteinas en el intestino grueso. Asi, en un segundo aspecto, la presente invencion se refiere a composiciones nutricionales que comprenden arabinoxilanos no extraibles de agua y arabinoxilano-oligosacaridos que, tras su ingestion, proporcionan la produccion de butirato y la inhibicion de la fermentacion de proteinas en el intestino grueso.

El documento W0 2008l098320 se refiere a metodos para aumentar el nivel de arabinoxilo-oligosacaridos solubles en la cerveza para mejorar el sabor ylo la sensacion en la boca de dicha cerveza.

Sumario de la invenci6n

La presente invencion proporciona composiciones nutricionales, mas en concreto suplementos alimentarios y productos alimentarios procesados, enriquecidos con arabinoxilano-oligosacaridos, y que comprenden ademas arabinoxilanos no extraibles de agua o arabinoxilanos hidrosolubles, o ambos. Preferiblemente, dichas composiciones nutricionales comprenden arabinoxilano-oligosacaridos y arabinoxilanos no extraibles de agua.

Descripci6n detallada

Listado de figuras

Figura 1: Efecto de diferentes tipos de arabinoxilanos y sus combinaciones aditivas sobre la concentracion de acetato (A), propionato (B) y butirato (C) en el colon de ratas despues de 14 dias de alimentacion. Las concentraciones se expresan en mmol por kg sobre la base del peso fresco del contenido colonico. Las barras de error indican la desviacion estandar. Las diferentes letras sobre las barras indican las diferencias significativas a p lt; 0,05.

Figura 2: Efecto de diferentes tipos de arabinoxilanos y sus combinaciones aditivas sobre las concentraciones sumadas de isovalerato e isobutirato en el colon de ratas despues de 14 dias de alimentacion. Las concentraciones se expresan en mmol por kg sobre la base del peso fresco del contenido colonico. Las barras de error indican la desviacion estandar. Las diferentes letras sobre las barras indican las diferencias significativas a p lt; 0,05.

Figura 3: Efecto de diferentes tipos de arabinoxilanos y sus combinaciones a dosis totales iguales sobre la concentracion de acetato (A), propionato (B) y butirato (C) en el ciego de ratas despues de 14 dias de alimentacion. La denominacion quot;Triplequot; indica la combinacion de AX0S, WU-AX y WS-AX. Las concentraciones se expresan en !mol por ciego. El recuadro representa los cuartiles 0,25 y 0,75; la mediana es el cuadrado negro dentro del recuadro; las lineas se trazan en los valores minimo y maximo.

Figura 4: Efecto de diferentes tipos de arabinoxilanos y sus combinaciones aditivas a dosis totales iguales sobre las concentraciones sumadas de isovalerato e isobutirato en el colon de ratas despues de 14 dias de alimentacion. La denominacion quot;Triplequot; indica la combinacion de AX0S, WU-AX y WS-AX. Las concentraciones se expresan en !mol por ciego. El recuadro representa los cuartiles 0,25 y 0,75; la mediana es el cuadrado negro dentro del recuadro; las lineas se trazan en los valores minimo y maximo.

Descripcion

Tal como se emplea en la presente, quot;arabinoxilano-oligosacaridosquot; o quot;AX0Squot; se refiere a oligosacaridos de arabinoxilanos que comprenden una cadena principal de unidades de D-xilopiranosilo 1-1,4-enlazadas, a las cuales pueden unirse unidades de 0-2 ylo 0-3 a-L-arabinofuranosilo. Las preparaciones de AX0S derivadas de arabinoxilanos generalmente contienen oligosacaridos de D-xilopiranosido 1-1,4-enlazados no sustituidos (xilooligosacaridos o X0S), asi como oligosacaridos de D-xilopiranosido 1-1,4-enlazados sustituidos con Larabinofuranosilo, y las mezclas que contienen ambas entidades moleculares tambien se denominan AX0S. Para los fines de la presente invencion, se prefiere que el grado medio de sustitucion de arabinosa de los arabinoxilanooligosacaridos varie entre 0,15 y 1,0, mas preferiblemente entre 0,15 y 0,50. Preferiblemente, el grado medio de polimerizacion de los arabinoxilano-oligosacaridos varia entre 3 y 50, mas preferiblemente entre 3 y 20, por ejemplo entre 3 y 10 o entre 3 y 8. Generalmente, los arabinoxilano-oligosacaridos o AX0S pueden solubilizarse en una cantidad suficiente de agua a una temperatura entre 70 DC y 100 DC, y permanecen solubles despues de enfriar hasta 70 DC y la adicion de etanol hasta una concentracion final del 70% (en vlv) a 70 DC. Los arabinoxilanooligosacaridos adecuados para su uso en el metodo segun la presente invencion pueden obtenerse mediante la hidrolisis parcial de arabinoxilanos extraidos de cereales o de materiales derivados de cereales. Mas preferiblemente, los arabinoxilano-oligosacaridos se obtienen mediante la hidrolisis de arabinoxilanos procedentes de salvado, por ejemplo salvado de trigo o centeno.

Tal como se emplea en la presente, los quot;arabinoxilanos hidrosolublesquot; o quot;WS-AXquot; se refieren a moleculas de arabinoxilanos, que pueden solubilizarse en una cantidad suficiente de agua a una temperatura de entre 70 DC y 100 DC, pero que se hacen insolubles despues de enfriar hasta 70 DC y la adicion de etanol hasta una concentracion final del 70% (en vlv) a 70 DC. Estos arabinoxilanos hidrosolubles preferiblemente tienen un grado medio de sustitucion de arabinosa entre 0,15 y 1,0, mas preferiblemente entre 0,15 y 0,70. El grado de polimerizacion de estos arabinoxilanos hidrosolubles generalmente es mayor que 50 y puede aumentar hasta 15000, correspondiente a un peso molecular de aproximadamente 2 millones. Dada la viscosidad extremadamente alta de WS-AX de alto peso molecular, se prefiere que el WS-AX que se vaya a utilizar en la presente invencion tenga un grado medio de polimerizacion de entre 50 y 1000, mas preferiblemente entre 50 y 500, por ejemplo entre 100 y 400. Los WS-AX estan presentes en la naturaleza en muchos cereales y harinas de cereales. Se encuentran cantidades particularmente altas de WS-AX en la mayoria de las variedades de centeno, y en casos mas raros, en algunas variedades de trigo, tales como por ejemplo la variedad Yumai-34, asi como en harina, harina fina, salvado u otras fracciones de molienda derivadas de estos. Ademas, el contenido en WS-AX de la harina, la harina fina, el salvado u otras fracciones de molienda de un cereal puede aumentar mezclando una cantidad apropiada de una preparacion enzimatica que comprende actividad endoxilanasa en dicha harina, harina fina o salvado, y despues incubando dicha mezcla humedecida durante un periodo de tiempo apropiado. Durante el periodo de incubacion, una fraccion de los arabinoxilanos no extraibles de agua comprendidos en dicha harina, harina fina o salvado se solubilizan. Preferiblemente, dicha preparacion enzimatica comprende tambien al menos una endoxilanasa que es muy selectiva para WU-AX. Preferiblemente, la preparacion enzimatica se anade en una cantidad suficiente para aumentar el contenido en WS-AX en la harina, harina fina, salvado u otras fracciones de molienda de un cereal en al menos 25%, preferiblemente al menos 50%, mas preferiblemente al menos 100%, y hasta 500%, mientras que el contenido en WU-AX se reduce en la cantidad correspondiente. El WS-AX tambien puede obtenerse de harina, harina fina, salvado u otra fraccion de molienda de un cereal que contenga arabinoxilanos no extraibles de agua, tratando dicho material de cereal con una disolucion acuosa alcalina a un pH en exceso de 11. La disolucion alcalina provoca la solubilizacion de parte del arabinoxilano no extraible de agua, y los arabinoxilanos solubilizados se comportan como WS-AX y se denominan arabinoxilanos solubilizados con alcalis (AS-AX).

Tal como se emplea en la presente, quot;arabinoxilanos no extraibles de aguaquot; o quot;WU-AXquot; se refiere a moleculas de arabinoxilano que no pueden solubilizarse en agua a una temperatura entre 70 DC y 100 DC. Estos arabinoxilanos no extraibles de agua preferiblemente pueden tener un grado medio de sustitucion de arabinosa entre 0,1 y 1,3, mas preferiblemente entre 0,35 y 1,0. El grado medio de polimerizacion de estos arabinoxilanos no extraibles de agua generalmente es mayor que 200. Los WU-AX estan presentes en cantidades relativamente altas en la mayoria de los cereales y en la harina, harina fina ylo salvado derivado de estos. En particular, el salvado es una buena fuente de WU-AX.

Tal como se utiliza en la presente, quot;amilasa termoestablequot; se refiere a una enzima amilasa (EC 3.2.1.1) cuya temperatura optima para la actividad es al menos 70 DC, tal como entre 70 DC y 80 DC, o tal como entre 80 DC y 90 DC, o tal como entre 90 DC y 100 DC.

El termino quot;cerealquot;, en el contexto de la presente invencion, se refiere a plantas de la familia botanica de las Poaceas que incluye, pero no se limita a especies tales como el trigo, la cebada, la avena, el centeno, el sorgo, el maiz y el arroz.

El termino quot;salvadoquot; en el contexto de la presente invencion, significa una fraccion molida derivada del grano del cereal enriquecida en cualquiera o todos los tejidos que se seleccionan de aleurona, pericarpo, revestimiento de la semilla, sepalos y petalos, comparado con el correspondiente grano de cereal intacto.

Tal como se emplea en la presente, quot;tamano de racionquot; se refiere a la porcion recomendada de un producto alimentario que se va a consumir en una sola comida. Generalmente, la informacion sobre el tamano de racion se proporciona en el envase de la mayoria de los productos alimentarios como un elemento de la etiqueta nutricional. Para ciertos productos alimentarios, una practica consiste en envasar los productos alimentarios en unidades individuales que comprenden una cantidad de producto alimentario que se corresponde al tamano de racion.

Tal como se utiliza en la presente, un quot;producto alimentario procesadoquot; se refiere a cualquier tipo de producto alimentario que resulte de la transformacion de ingredientes brutos en alimentos para ser consumidos por seres humanos. Los alimentos procesados en general son producidos por la industria alimentaria de forma que son adecuados para el consumo con o sin un procesamiento minimo posterior. Las etapas de procesamiento posteriores se limitan, por ejemplo, a anadir un liquido, tal como agua o leche ylo calentar el producto. Estos alimentos procesados generalmente se comercializan en un envase especializado, que comprende un unico o multiples tamanos de racion del producto alimentario. Ademas, el envase de los alimentos procesados porta una etiqueta alimentaria que proporciona informacion sobre los ingredientes del producto y su composicion nutricional, asi como el tamano de racion recomendado del producto. Los ejemplos de alimentos procesados incluyen productos horneados, productos lacteos, productos de pasta, cereales listos para consumir, preparaciones de frutas, zumos de fruta, nectares, batidos, productos carnicos procesados y pasteles, incluyendo productos de chocolate. En una realizacion particular, los alimentos procesados incluyen alimentos procesados para gatos y perros, tales como preparaciones enlatadas o pienso extrusionado embolsado.

Tal como se emplea en la presente, quot;productos horneadosquot; se refiere a cualquier tipo de producto horneado preparado a partir de masa, masa de pastel o rebozado, de caracter blando o crujiente, de tipo blanco, ligero o negro. La masa o el rebozado generalmente es una masa o un rebozado de harina fina que comprende harina de trigo o harina fina de trigo ylu otros tipos de harinas, harinas finas o almidones, tales como harina fina de maiz, almidon de maiz, harina de centeno, harina fina de centeno, harina fina de avena, harina de avena, harina fina de soja, harina de sorgo, harina fina de sorgo, almidon de arroz, harina fina de arroz, harina de patata, harina fina de patata o almidon de patata. La masa o el rebozado generalmente se leuda mediante la adicion de un cultivo microbiano adecuado, preferiblemente un cultivo de levaduras, tal como un cultivo de Saccharomyces cerevisiae (levadura de panadero) o mediante la adicion de un agente leudante quimico, tal como bicarbonato de sodio. La masa puede ser fresca, congelada o semihorneada. Los productos horneados basados en masa comestible preferidos incluyen pan (en particular pan blanco, de trigo, de harina integral, bajo en carbohidratos, moreno, de multiples granos, negro y de centeno), generalmente en forma de rebanadas, bollos o panecillos, y mas preferiblemente pan de molde, bollos de hamburguesas, pan frances de tipo baguette, pan de pita, tortillas, pasteles, tortitas, galletas, galletas saladas, masa para pasteles, pan crujiente, pan al vapor, masa para pizzas y similares. La masa o el rebozado tambien pueden comprender otros ingredientes para masas convencionales, por ejemplo, proteinas, tales como leche o leche en polvo, gluten y soja; huevos (huevos enteros, yema de huevo o clara de huevo); manteca, tal como aceite o grasa granulada; un oxidante, tal como acido ascorbico, bromato de potasio, yodato de potasio, azodicarbonamida (ADA) o persulfato de amonio; un agente reductor, tal como L-cisteina; un azucar; una sal, tal como cloruro de sodio, acetato de calcio, sulfato de sodio o sulfato de calcio. La masa puede comprender tambien un emulgente, tal como mono- o digliceridos, esteres del acido diacetiltartarico de mono- o digliceridos, esteres de azucares de acidos grasos, esteres de poliglicerol de acidos grasos, esteres de acido lactico de monogliceridos, esteres de acido acetico de monogliceridos, estearatos de polioxietileno, fosfolipidos, lecitina y lisolecitina.

La presente invencion se basa en los descubrimientos de un estudio comparativo de los efectos de diferentes tipos de moleculas de arabinoxilano y sus combinaciones sobre los parametros relacionados con la salud gastrointestinal. En un modelo animal, que resulta predictivo para los seres humanos y otros vertebrados monogastricos, los efectos relacionados con la salud intestinal y prebioticos de la administracion de polisacaridos de xilano o arabinoxilano varian segun las propiedades fisicoquimicas y el peso molecular de estas moleculas. Se descubrio, de forma sorprendente, que la administracion combinada de AX0S y WU-AX a traves de la dieta produjo un aumento sinergico en la produccion de butirato en el intestino grueso. Este descubrimiento fue de particular interes dada la importancia del butirato como principal fuente de energia para las celulas epiteliales del colon y considerando las pruebas cada vez mayores de que la capacidad de formar butirato en el intestino grueso se correlaciona con las propiedades supresoras de cancer de colon de carbohidratos no digeribles (Perrin et al., 2001; Mclntosh et al., 2001; Wong et al., 2006).

Asi, un primer objeto de lapresente invencion es proporcionar una nueva composicion nutricional que comprende cantidades apropiadas de AX0S y WU-AX, en la que la administracion gastrointestinal de dicha composicion nutricional proporciona un aumento deseado en la produccion de butirato en el intestino grueso. La composicion nutricional de la invencion puede estar en cualquier forma adecuada para la administracion humana, y en particular es adecuada para la administracion al tracto gastrointestinal. Normal y preferiblemente, esto implica composiciones adecuadas para la administracion oral, aunque una composicion para la administracion directa en el intestino, tal como un cateter o tubo de via, tambien forma parte de la invencion. La composicion nutricional de la invencion tambien puede estar en una forma adecuada para la administracion oral a gatos o perros, que en el mundo occidental cada vez se alimentan mas con pienso para mascotas muy procesado.

Preferiblemente, dicha composicion nutricional comprende, sobre una base de peso seco, entre 1% (en plp) y 80% (en plp) de AX0S, y entre 1% (en plp) y 35% (en plp) de WU-AX. Mas preferiblemente, el contenido en AX0S de dicha composicion nutricional es mayor que 1,5% (en plp), lo mas preferiblemente mayor que 2,5% (en plp), tal como por ejemplo, mayor que 3%, 4%, 5%, 7,5% o 10% (en plp) sobre una base de peso seco. Tambien se prefiere mas que el contenido en WU-AX de dicha composicion nutricional sea mayor que 1,5% (en plp), lo mas preferiblemente mayor que 2,5% (en plp), tal como por ejemplo, mayor que 3%, 4%, 5%, 7,5% o 10% (en plp) sobre una base de peso seco. 0pcionalmente, una composicion nutricional segun la presente invencion comprende ademas entre 0,75% (en plp) y 80% (en plp) de WS-AX. Mas preferiblemente, dicha composicion nutricional comprende mas del 1% (en plp), mas preferiblemente mas del 1,25% (en plp), tal como por ejemplo, mas del 1,5%, 2% o 3% (en plp) de WS-AX sobre una base de peso seco.

En una realizacion preferida, la composicion nutricional de la presente invencion es un suplemento alimentario. Preferiblemente, dicho suplemento alimentario comprende entre 5% (en plp) y 80% (en plp) de AX0S, y entre 2,5% (en plp) y 35% (en plp) de WU-AX sobre una base de peso seco. Mas preferiblemente, el contenido en AX0S de dicho suplemento alimentario es mayor que 5% (en plp), mas preferiblemente mayor que 10% (en plp), por ejemplo, mayor que 20%, 30% o 40% (en plp), y preferiblemente no mayor que 80% (en plp), por ejemplo, menor que 70% (en plp) o 60% (en plp) en peso seco. Tambien se prefiere mas que el contenido en WU-AX de dicho suplemento alimentario sea mayor que 2,5% (en plp), mas preferiblemente mayor que 5% (en plp), por ejemplo, mayor que 10%, 15% o 20% (en plp), y preferiblemente no mayor que 35% (en plp), por ejemplo, menor que 30% (en plp) o 25% (en plp) en peso seco.

0pcionalmente, dicho suplemento alimentario puede comprender tambien entre 1% (en plp) y 80% (en plp) de WS-AX. Mas preferiblemente, el contenido en WS-AX de dicho suplemento alimentario es mayor que 5% (en plp), mas preferiblemente mayor que 10% (en plp), por ejemplo, mayor que 20%, 30% o 40% (en plp), y preferiblemente no mayor que 80% (en plp), por ejemplo, menor que 70% (en plp), 60% o 50% (en plp) en peso seco.

En total, el suplemento alimentario segun la presente invencion comprende preferiblemente entre 20% (en plp) y 90% (en plp), mas preferiblemente entre 30% (en plp) y 80% (en plp), por ejemplo, entre 40% (en plp) y 70% (en plp) de arabinoxilanos y AX0S en peso seco. El resto pueden ser otros carbohidratos no digeribles, almidon, azucares, proteinas, minerales, grasas, colorantes, conservantes y similares.

El suplemento alimentario de la presente invencion puede estar en una forma para la administracion separada, tal como una capsula, un comprimido, un polvo, un sobre, una composicion liquida o una forma similar. Este suplemento puede comprender tambien uno o mas adyuvantes, vehiculos o excipientes adecuados para su uso en suplementos alimentarios, asi como uno o mas componentes adicionales ylo aditivos descritos anteriormente.

El suplemento alimentario tambien puede estar en forma de un polvo, una composicion liquida o una forma similar, que se anade o se mezcla con un alimento adecuado o un vehiculo liquido o solido adecuado, para la preparacion de un alimento o bebida que este listo para consumir. Por ejemplo, el suplemento alimentario puede estar en forma de un polvo que puede mezclarse o suspenderse, por ejemplo, en agua, leche y zumo de fruta, entre otros. Tambien puede estar en forma de un polvo o liquido que puede mezclarse con alimentos solidos o con alimentos con un alto contenido en agua, tales como queso blando o alimentos fermentados, por ejemplo, yogur.

En otra realizacion preferida, la composicion nutricional de la presente invencion es un producto alimentario procesado, que incluye productos bebibles. Preferiblemente, este producto alimentario procesado comprende entre 1% (en plp) y 25% (en plp) de AX0S, y entre 1% (en plp) y 25% (en plp) de WU-AX sobre una base de peso seco. Mas preferiblemente, el contenido en AX0S de dicho producto alimentario procesado es mayor que 1,5% (en plp), lo mas preferiblemente mayor 2,5% (en plp), tal como por ejemplo, mayor que 3%, 4%, 5%, 7,% o 10% (en plp), y preferiblemente no mayor que 25% (en plp), por ejemplo, menor que 20% (en plp) o 15% (en plp) en peso seco. Tambien se prefiere mas que el contenido en WU-AX de dicho suplemento alimentario sea mayor que 1,5% (en plp), lo mas preferiblemente mayor que 2,5% (en plp), tal como por ejemplo, mayor que 3%, 4%, 5%, 7,% o 10% (en plp), y preferiblemente no mayor que 25% (en plp), por ejemplo, menor que 20% (en plp) o 15% (en plp) en peso seco.

0pcionalmente, dicho producto alimentario procesado puede comprender tambien entre 0,75% (en plp) y 15% (en plp) de WS-AX. Mas preferiblemente, el contenido en WS-AX de dicho producto alimentario procesado es mayor que 1% (en plp), mas preferiblemente mayor que 1,25% (en plp), por ejemplo, mayor que 1,5%, 2% o 3% (en plp), y preferiblemente no mayor que 15% (en plp), por ejemplo, menor que 12% (en plp) o 10% (en plp) en peso seco.

En una realizacion mas preferida, dicho producto alimentario procesado comprende entre 1 y 15 g de WU-AX, y entre 1 y 10 g de AX0S por tamano de racion de dicho producto alimentario procesado. Mas preferiblemente, dicho producto alimentario procesado comprende mas de 1, mas preferiblemente mas de 2 g, por ejemplo, mas de 2,5, 3 o 4 g de AX0S por tamano de racion, y preferiblemente no mas de 10 g, por ejemplo, menos de 8 g o 5 g de AX0S por tamano de racion. Tambien se prefiere mas que dicho producto alimentario procesado comprenda mas de 1, mas preferiblemente mas de 2 g, por ejemplo, mas de 2,5, 3, 4, 5 o 6 g de WU-AX por tamano de racion, y preferiblemente no mas de 15 g, por ejemplo, menos de 12 o 10 g de WU-AX por tamano de racion. 0pcionalmente, dicho producto alimentario procesado comprende ademas entre 0,3 y 10 g de WS-AX por racion. Preferiblemente, dicho producto alimentario procesado comprende mas de 0,3, mas preferiblemente mas de 0,75 g, por ejemplo, mas de 1, 1,5, 2, 2,5, 3 o 4 g de WS-AX por racion, y preferiblemente no mas de 10 g, por ejemplo, menos de 8 o 5 g de WS-AX por racion.

En una realizacion concreta, los productos alimentarios procesados segun la presente invencion son productos horneados, tales como pan, galletas, galletas para el desayuno, galletas saladas, pasteles, pizzas, tartas, magdalenas, pastelitos, incluyendo pastelitos para tostadora, entre otros. El tamano de racion de estos productos varia segun el producto. El tamano de racion del pan varia generalmente entre 80 y 100 g, mientras que el tamano de racion de las galletas, galletas para el desayuno, tartas y pastelitos generalmente es entre 30 y 50 g. El tamano de racion de las galletas generalmente es entre 15 y 30 g. Estos productos horneados pueden comprender rellenos, revestimientos ylo coberturas; sin embargo, cuando se determina el contenido en AX0S, WS-AX o WU-AX sobre una base de peso seco para estos productos, el peso seco de estos rellenos, revestimientos ylo coberturas debe restarse del peso total del producto alimentario procesado. En otra realizacion concreta, un producto alimentario procesado segun la presente invencion es un cereal listo para consumir, que incluye barritas de cereales, muesli y granola. Los tamanos de racion tipicos de los cereales listos para consumir varian entre 30 y 50 g; este tamano de racion no incluye la leche u otros productos lacteos o sustitutos de lacteos que puedan anadirse a los cereales. En otra realizacion concreta, un producto alimentario procesado segun la presente invencion es un producto de pasta. Los tamanos de racion tipicos para los productos de pasta varian entre 80 y 125 g de pasta seca, excluyendo cualquier salsa, queso, carne u otros ingredientes anadidos. En otra realizacion concreta, un producto alimentario procesado segun la presente invencion es un producto lacteo, tal como leche, bebida a base de leche, yogur, yogur para beber y queso blando, entre otros. El tamano de racion del yogur varia entre 100 y 200 g, mientras que una racion tipica de leche, bebidas a base de leche y yogur para beber es de aproximadamente 200 g. En general, los tamanos de racion de los productos de queso blando varian entre 100 y 150 g. En otra realizacion concreta, un producto alimentario procesado segun la presente invencion es una bebida a base de frutas, tal como un batido. El tamano de racion de la bebida a base de frutas generalmente es entre 150 y 300 g.

Un segundo objeto de la presente invencion es proporcionar el uso de cualquiera de las composiciones nutricionales descritas anteriormente para estimular la produccion de butirato en el intestino tras la administracion gastrointestinal de dichas composiciones nutricionales. Sin querer estar limitados por ninguna teoria, se supone que esta mayor produccion de butirato es el resultado de una accion moduladora sobre la microflora intestinal de la presencia combinada en el intestino de WU-AX y AX0S.

Ademas, de forma interesante se ha descubierto que la administracion combinada de AX0S y WS-AX a traves de la dieta tiene un sorprendente potente efecto inhibidor sobre la fermentacion de las proteinas intestinales, combinado con un efecto positivo sobre la produccion de acido butirico. Asi, en un tercer objeto, la presente invencion proorciona una composicion nutricional enriquecida con AX0S y WS-AX. Preferiblemente, dicha composicion nutricional comprende, sobre una base de peso seco, entre 1% (en plp) y 80% (en plp) de AX0S, y entre 1% (en plp) y 80% (en plp) de WS-AX. Mas preferiblemente, el contenido en AX0S de dicha composicion nutricional es mayor que 1,5% (en plp), lo mas preferiblemente mayor que 2,5% (en plp), tal como por ejemplo, mayor que 3%, 4%, 5%, 7,5% o 10% (en plp) sobre una base de peso seco. Tambien se prefiere mas que el contenido en WS-AX de dicha composicion nutricional sea mayor que 1,5% (en plp), lo mas preferiblemente mayor que 2,5% (en plp), tal como por ejemplo, mayor que 3%, 4%, 5%, 7,5% o 10% (en plp) sobre una base de peso seco. 0pcionalmente, una composicion nutricional segun la presente invencion comprende ademas entre 1% (en plp) y 35% (en plp) de WU-AX en peso seco. Mas preferiblemente, dicha composicion nutricional comprende mas del 1% (en plp), mas preferiblemente mas del 1,25% (en plp), tal como por ejemplo, mas del 1,5%, 2% o 3% (en plp) de WU-AX sobre una base de peso seco.

En una realizacion preferida, la composicion nutricional segun el tercer objeto de la presente invencion es un suplemento alimentario. Preferiblemente, dicho suplemento alimentario comprende entre 10% (en plp) y 80% (en plp) de AX0S, y entre 10% (en plp) y 80% (en plp) de WS-AX sobre una base de peso seco. Mas preferiblemente, el contenido en AX0S de dicho suplemento alimentario es mayor que 10% (en plp), por ejemplo, mayor que 20%, 30% o 40% (en plp), y preferiblemente no mayor que 80% (en plp), por ejemplo, menor que 70%, 60% o 50% (en plp) de peso seco. Tambien se prefiere mas que el contenido en WS-AX de dicho suplemento alimentario sea mayor que 2,5% (en plp), mas preferiblemente mayor que 10% (en plp), por ejemplo, mayor que 20%, 30% o 40% (en plp), y preferiblemente no mayor que 80% (en plp), por ejemplo, menor que 70%, 60% o 50% (en plp) en peso seco.

0pcionalmente, dicho suplemento alimentario puede comprender tambien entre 1% (en plp) y 35% (en plp) de WU-AX. Mas preferiblemente, el contenido en WU-AX de dicho suplemento alimentario es mayor que 1,5% (en plp), lo mas preferiblemente mayor que 2,5% (en plp), tal como por ejemplo, mayor que 3%, 4%, 5%, 7,5% o 10% (en plp), y preferiblemente no mayor que 25% (en plp), por ejemplo, menor que 20% (en plp) o 15% (en plp) de peso seco.

En total, el suplemento alimentario segun la presente invencion comprende preferiblemente entre 20% (en plp) y 90% (en plp), mas preferiblemente entre 30% (en plp) y 80% (en plp), por ejemplo, entre 40% (en plp) y 70% (en plp) de arabinoxilanos y AX0S en peso seco. El resto pueden ser otros carbohidratos no digeribles, almidon, azucares, proteinas, minerales, grasas, colorantes, conservantes y similares.

El suplemento alimentario de la presente invencion puede estar en una forma para la administracion separada, tal como una capsula, un comprimido, un polvo, un sobre, una composicion liquida o una forma similar. Este suplemento puede comprender tambien uno o mas adyuvantes, vehiculos o excipientes adecuados para su uso en suplementos alimentarios, asi como uno o mas componentes adicionales ylo aditivos descritos anteriormente.

El suplemento alimentario tambien puede estar en forma de un polvo, una composicion liquida o una forma similar, que se anade o se mezcla con un alimento adecuado o un vehiculo liquido o solido adecuado, para la preparacion de un alimento o bebida que este listo para consumir. Por ejemplo, el suplemento alimentario puede estar en forma de un polvo que puede mezclarse o suspenderse, por ejemplo, en agua, leche y zumo de fruta, entre otros. Tambien puede estar en forma de un polvo o liquido que puede mezclarse con alimentos solidos o con alimentos con un alto contenido en agua, tales como queso blando o alimentos fermentados, por ejemplo, yogur.

En otra realizacion preferida, la composicion nutricional segun el tercer objeto de la presente invencion es un producto alimentario procesado. Preferiblemente, este producto alimentario procesado comprende entre 0,75 y 15% (en plp) de WS-AX, y entre 1,0 y 15% de AX0S sobre una base de peso seco. Mas preferiblemente, el contenido en AX0S de dicho producto alimentario procesado es mayor que 1,5% (en plp), lo mas preferiblemente mayor que 2,5% (en plp), tal como por ejemplo, mayor que 3%, 4%, 5%, 7,5% o 10% (en plp), y preferiblemente no mayor que 25% (en plp), por ejemplo, menor que 20% (en plp) o 15% (en plp) de peso seco. Tambien se prefiere mas que el contenido en WS-AX de dicho suplemento alimentario sea mayor que 0,75% (en plp), lo mas preferiblemente mayor que 2,5% (en plp), tal como por ejemplo, mayor que 3%, 4%, 5%, 7,5% o 10% (en plp), y preferiblemente no mayor que 15% (en plp), por ejemplo, menor que 12% (en plp) en peso seco.

0pcionalmente, dicho producto alimentario procesado puede comprender tambien entre 0,75% (en plp) y 15% (en plp) de WU-AX. Mas preferiblemente, el contenido en WU-AX de dicho producto alimentario procesado es mayor que 1% (en plp), mas preferiblemente mayor que 1,25% (en plp), por ejemplo, mayor que 1,5%, 2% o 3% (en plp), y preferiblemente no mayor que 15% (en plp), por ejemplo, menor que 12% (en plp) o 10% (en plp) en peso seco.

En una realizacion preferida, dicho producto alimentario procesado segun el tercer objeto de la presente invencion es un producto alimentario procesado que comprende entre 0,3 y 15 g de WS-AX, y entre 1 y 10 g de AX0S por tamano de racion de dicho producto alimentario procesado. Preferiblemente, dicho producto alimentario procesado comprende mas de 1 g, mas preferiblemente mas de 2 g, por ejemplo, mas de 3 g o 4 g de AX0S por tamano de racion, y preferiblemente no mas de 10 g, por ejemplo, menos de 8 g o 5 g de AX0S por racion. Preferiblemente, dicho producto alimentario procesado comprende mas de 0,3, mas preferiblemente mas de 0,75 g, por ejemplo, mas de 1, 2, 3 o 4 g de WS-AX por tamano de racion, y preferiblemente no mas de 10 g, por ejemplo, menos de 8 g de WS-AX por racion. 0pcionalmente, dicho producto alimentario procesado comprende ademas entre 0,3 y 20 g de WU-AX por racion. Preferiblemente, dicho producto alimentario procesado comprende mas de 0,5, mas preferiblemente mas de 0,75 g, por ejemplo, mas de 1, 2, 3 o 5 g de WU-AX por racion, y preferiblemente no mas de 15 g, por ejemplo, menos de 10 g deWU-AX por racion.

En una realizacion concreta, los productos alimentarios procesados segun el tercer objeto de la presente invencion son productos horneados, tales como pan, galletas, galletas para el desayuno, galletas saladas, pasteles, pizzas, magdalenas, pastelitos, incluyendo pastelitos para tostadora, entre otros. Estos productos horneados pueden comprender rellenos, revestimientos ylo coberturas; sin embargo, cuando se determina el contenido en AX0S, WS-AX o WU-AX sobre una base de peso seco para estos productos, el peso seco de estos rellenos, revestimientos ylo coberturas debe restarse del peso total del producto alimentario procesado. En otra realizacion concreta, un producto alimentario procesado segun el tercer objeto de la presente invencion es un cereal listo para consumir, que incluye barritas de cereales, muesli y granola. En otra realizacion concreta, un producto alimentario procesado segun el tercer objeto de la presente invencion es un producto de pasta. En otra realizacion concreta, un producto alimentario procesado segun el tercer objeto de la presente invencion es un producto lacteo, tal como leche, bebida a base de leche, yogur, yogur para beber y queso blando, entre otros. En otra realizacion concreta, un producto alimentario procesado segun el tercer objeto de la presente invencion es una bebida a base de frutas, tal como un batido.

La presente invencion proporciona ademas el uso de preparaciones enriquecidas en AX0S para la produccion de cualquiera de las composiciones nutricionales segun se especifico anteriormente. Preferiblemente, dicha preparacion enriquecida en AX0S comprende mas del 15% (en plp), mas preferiblemente mas del 30% (en plp), lo mas preferiblemente mas del 40% (en plp), por ejemplo, mas del 50%, 60% o 70% (en plp) y hasta 99% (en plp), tal como hasta 90 u 85% (en plp) de AX0S sobre una base de peso seco. Se prefiere que el grado medio de sustitucion de arabinosa del AX0S en esta preparacion varie entre 0,15 y 1,0, mas preferiblemente entre 0,15 y 0,50, lo mas preferiblemente entre 0,15 y 0,30. Preferiblemente, el grado medio de polimerizacion del AX0S comprendido en dicha preparacion varia entre 3 y 50, mas preferiblemente entre 3 y 20, por ejemplo entre 3 y 10 o entre 3 y 8.

La presente invencion tambien proporciona el uso de una preparacion rica en WU-AX para la produccion de cualquiera de las composiciones nutricionales que contienen WU-AX segun se especifico anteriormente. Preferiblemente, dichas preparaciones enriquecidas en WU-AX comprenden mas del 10% (en plp), mas preferiblemente mas del 15% (en plp), lo mas preferiblemente mas del 20% (en plp), por ejemplo, mas del 30% o 40% (en plp) y hasta 60% (en plp), tal como hasta 50% o 45% (en plp) de WU-AX sobre una base de peso seco. En una realizacion preferida, dicho material rico en WU-AX es salvado de un cereal, tal como salvado de trigo, centeno, maiz o arroz. En una realizacion mas preferida, los componentes hidrosolubles se extraen de dicho salvado para aumenter la concentracion relativa de WU-AX en dicho salvado. En una realizacion aun mas preferida, una fraccion sustancial del material de proteina o de salvado, o de ambos, se extrae de dicho salvado, por ejemplo, utilizando una proteasa y una amilasa, respectivamente.

La presente invencion proporciona ademas el uso de materiales ricos en WS-AX para la produccion de composiciones nutricionales que contienen WS-AX segun se especifico anteriormente. Este material rico en WS-AX puede ser una harina, una harina fina u otra fraccion de molienda de una variedad de trigo, tal como Yumai-34, o centeno naturalmente rico en WS-AX. Generalmente, dicha harina, harina fina u otra fraccion de molienda del trigo o centeno comprende entre 1,5% y 8% (en plp) de WS-AX sobre una base de peso seco. Como alternativa, puede utilizarse un material derivado de cereales procesado para estar enriquecido en WS-AX. Preferiblemente, dichas preparaciones enriquecidas en WS-AX comprenden mas del 15% (en plp), mas preferiblemente mas del 30% (en plp), lo mas preferiblemente mas del 40% (en plp), por ejemplo, mas del 50%, 60% o 70% (en plp) y hasta 99% (en plp), tal como hasta 90 o 85% (en plp) de WS-AX sobre una base de peso seco. Ademas, los materiales de cereales, tales como harina, harina fina u otra fraccion de molienda de un cereal, pueden procesarse de modo que al menos parte del WU-AX comprendido en dicho material de cereal se transforma en WS-AX. Preferiblemente, dicho material de cereal se trata utilizando una preparacion de endoxilanasa exogena a una dosis que permite aumentar al menos en 50%, tal como en 100% y hasta 500%, el contenido en WS-AX naturalmente presente en dicha fraccion de cereal. Es posible que el tratamiento con endoxilanasa de dicho material de cereal pueda realizarse durante la produccion del producto alimentario procesado.

El contenido en AX0S de una composicion nutricional de la presente invencion se determina preferiblemente como la suma de toda la xilosa y arabinosa unida en la fase soluble obtenida despues de extraer dicha composicion nutricional con agua caliente a una temperatura entre 95 DC y 100 DC durante al menos 30 minutos en presencia de una amilasa termoestable, y a la cual, despues de enfriar hasta 70 DC, se ha anadido etanol hasta una concentracion final de etanollagua 70l30 (en vlv). El contenido en WU-AX de una composicion nutricional segun la presente invencion se mide preferiblemente como la suma de toda la arabinosa y la xilosa unidas retenidas en el residuo obtenido despues de extraer dicha composicion nutricional con agua caliente a una temperatura entre 95 DC y 100 DC durante al menos 30 minutos en presencia de una amilasa termoestable, seguido de un enfriamiento del extracto hasta 70 DC. El contenido en WS-AX de una composicion nutricional de la presente invencion se determina preferiblemente como la suma de toda la arabinosa y la xilosa unidas en la fase soluble obtenida despues de extraer dicha composicion nutricional con agua caliente a una temperatura entre 95 DC y 100 DC durante al menos 30 minutos en presencia de una amilasa termoestable y despues enfriar dicho extracto hasta 70 DC, menos el contenido en AX0S comprendido en dicha composicion nutricional. Los metodos para medir WU-AX y AX0S en las composiciones nutricionales se describen mas a fondo en el ejemplo 1.

La invencion se ilustra mas a fondo mediante las realizaciones ilustrativas descritas a continuacion.

Realizaciones ilustrativas

Ejemplos

Ejemplo 1: Efecto sobrelos parametros intestinales de preparacionesde WU-AX, WS-AX Y AXOS Ysus combinaciones aditivas

Materiales y metodos

Preparacion de AX0S

El AX0S fue preparado por FUGEIA NV (Leuven, Belgica) a partir de salvado de trigo mediante un tratamiento con endoxilanasa (vease Swennen et al., 2006). Despues de un aclarado utilizando una centrifuga de disco y despues de la inactivacion con calor de la enzima, el sobrenadante se filtro y se purifico haciendolo pasar sobre resinas de

intercambio anionico y de intercambio cationico. Por ultimo, la disolucion se concentro y se seco por pulverizacion. Las etapas de aclarado y de purificacion con resinas de intercambio ionico no son fundamentales para las propiedades del AX0S descrito en la presente invencion. La composicion y la caracterizacion de la preparacion de AX0S se muestra en la tabla 1.

Preparacion de WS-AX

El WS-AX se preparo a partir de salvado de trigo comercial tratando el salvado de trigo suspendido en agua desmineralizada (8 litros de agua por kg de materia seca) con una amilasa comercial (BAN 480 L, Novozymes, Bagsvaerd, Dinamarca; 1 ml de preparacion de enzima por kg de materia seca) a 70D C con agitacion constante durante 90 minutos, seguido por una filtracion y un enjuagado a fondo del residuo con agua desmineralizada. El salvado sin almidon entonces se suspendio en agua desmineralizada (10 litros de agua por kg de materia seca) y se trato con xilanasa comercial (Multifect CX 12 L, Danisco, Copenhague, Dinamarca; 0,25 ml de preparacion de enzima por kg de materia seca) a 50 DC con agitacion constante durante 8 h. La fase liquida se recupero despues de una filtracion. Despues de la inactivacion de la enzima mediante el tratamiento del filtrado durante 10 minutos a 90 DC, la disolucion se concentro en un evaporador de pelicula descendente, y por ultimo se seco en un secador de pulverizacion. La composicion y la caracterizacion de la preparacion de WS-AX se muestra en la tabla 1.

Preparacion de WU-AX

El WU-AX se preparo a partir de salvado de trigo comercial tratando el salvado de trigo suspendido en agua desmineralizada (10 litros de agua por kg de materia seca) con una amilasa comercial (Termamyl 120 L, Novozymes, Bagsvaerd, Dinamarca; 1 ml de preparacion de enzima por kg de materia seca) a 90D C durante 90 minutos. Despues de enfriar la pasta hasta 50 DC, el pH de la pasta se adapto a pH 6,0 mediante la adicion de HCl y se trato con una proteasa comercial (Neutrase 0.8 L, Novozymes, Bagsvaerd, Dinamarca; 40 ml de preparacion de enzima por kg de materia seca) a 50D C con agitacion constante durante 4 h. La pasta se calento hasta 100 DC y se mantuvo a esta temperatura durante 10 minutos. Despues de enfriar hasta 60 DC, la pasta se filtro, el residuo se lavo a fondo con agua desmineralizada, y por ultimo se seco en un liofilizador. La composicion y la caracterizacion de la preparacion de WU-AX se muestra en la tabla 1.

Caracterizacion de los sacaridos

Se determino el contenido en sacaridos totales, sacaridos de extremo reductor, y monosacaridos libres mediante un analisis cromatografico de gases-liquidos, segun se describe en Courtin et al., (2000). Para la determinacion del contenido en sacaridos totales, se hidrolizaron 40 mg de muestras secas suspendidas en 2,5 ml de agua destilada, o 2,5 ml de extractos acuosos que contienen sacaridos de las mezclas, mezclando con 2,5 ml de acido trilfuoroacetico 4,0 M e incubando a 110 DC durante 60 minutos. Despues de la hidrolisis, la mezcla se filtro y despues 3,0 ml del filtrado se trataron anadiendo 1,0 ml de una disolucion de patron interno (100 mg de beta-D-alosa en 100 ml de una disolucion de acido benzoico saturada al 50%), 1,0 ml de disolucion de amoniaco (al 25% en vlv) y 3 gotas de 2octanol. Los monosacaridos fueron reducidos a alditoles mediante la adicion de 200 !l de una disolucion de borohidruro de sodio (200 mg de borohidruro de sodio en 1,0 ml de amoniaco 2 M), y la muestra se incubo durante 30 minutos a 40 DC. La reaccion se detuvo mediante la adicion de 400 !l de acido acetico glacial. Para la reaccion de acetilacion, se anadieron 500 !l de la muestra que contiene los alditoles a 5,0 ml de anhidrido acetico y 500 !l de 1metilimidazol. Despues de 10 minutos se retiro el exceso de anhidrido acetico mediante la adicion de 900 !l de etanol a la muestra. Despues los acetatos de alditol se concentraron en la fase organica mediante la adicion de agua (10 ml) y una disolucion de hidroxido de potasio (2 veces 5,0 ml de una disolucion 7,5 M, con un descanso intermedio de unos pocos minutos). Se anadio una disolucion de azul de bromofenol (500 !l, al 0,04% en plv) como indicador para la fase acuosa. Se separaron partes alicuotas de 1 !l de la fase organica que contenia los acetatos de alditol formados mediante una cromatografia de gases en una columna polar Supelco SP-2380 (30 m x 0,32 mm D.I.; 0,2 !m de espesor de pelicula) (Supelco, Bellefonte, PA, EEUU) en un cromatografo Agilent (serie Agilent 6890, Wilmington, DE, EEUU) equipado con un automuestreador, un puerto de inyeccion de reparto (proporcion de reparto 1:10) y un detector de ionizacion de llama. Los monosacaridos purificados D-glucosa, D-manosa, D-galactosa, Dxilosa y L-arabinosa se trataron en paralelo con cada conjunto de muestras con objetivos de calibracion, y la calibracion tomo en cuenta la degradacion parcial de los patrones de monosacaridos durante la etapa de hidrolisis (6% para la D-glucosa, 8% para la D-manosa, 6% para la D-galactosa, 11% para la D-xilosa, y 5% para la Larabinosa).

Para la determinacion del contenido en sacaridos de extremo reductor, se mezclaron 40 mg de muestras secas suspendidas en agua, o 2,5 ml de extractos acuosos que contienen sacaridos de las muestras, con 500 !l de un patron interno (100 mg de beta-D-alosa en 100 ml de una disolucion de acido benzoico saturada al 50%), 50 !l de disolucion de amoniaco (al 25% en vlv) y 9 gotas de 2-octanol. Los sacaridos fueron reducidos a alditoles mediante la adicion de 200 !l de una disolucion de borohidruro de sodio (200 mg de borohidruro de sodio en 1,0 ml de amoniaco 2 M), y la muestra se incubo durante 30 minutos a 40 DC. La reaccion se detuvo mediante la adicion de 400 !l de acido acetico glacial. Una parte alicuota de 2,5 ml de la muestra que contiene los sacaridos reducidos se hidrolizo mediante la adicion de 500 !l de acido trifluoroacetico (al 99%), y la muestra se incubo a 110 DC durante 60 minutos. Despues de la hidrolisis, se realizo un analisis de acetilacion y de cromatografia de gases como se describio anteriormente. Los monosacaridos purificados D-glucosa, D-manosa, D-galactosa, D-xilosa y L-arabinosa se trataron en paralelo con cada conjunto de muestras con objetivos de calibracion.

Para la determinacion del contenido en monosacaridos libres, se mezclaron 40 mg de muestras secas suspendidas en agua, o 2,5 ml de extractos acuosos que contienen sacaridos de las muestras, con 500 !l de un patron interno (100 mg de beta-D-alosa en 100 ml de una disolucion de acido benzoico saturada al 50%), 50 !l de disolucion de amoniaco (al 25% en vlv) y 9 gotas de 2-octanol. Los sacaridos fueron reducidos a alditoles mediante la adicion de 200 !l de una disolucion de borohidruro de sodio (200 mg de borohidruro de sodio en 1,0 ml de amoniaco 2 M), y la muestra se incubo durante 30 minutos a 40 DC. La reaccion se detuvo mediante la adicion de 400 !l de acido acetico glacial. Una parte alicuota de 2,5 ml de la muestra que contiene los sacaridos reducidos se acetilo y se analizo mediante una cromatografia de gasas como se describio anteriormente. Los monosacaridos purificados D-glucosa, D-manosa, D-galactosa, D-xilosa y L-arabinosa se trataron en paralelo con cada conjunto de muestras con objetivos de calibracion.

Para los analisis descritos anteriormente se obtuvieron los siguientes valores:

· %totxil, %totara, %totgal, %totman, %totglu son las concentracion de xilosa, arabinosa, galactosa, manosa y glucosa total (polimerica y libre), respectivamente, segun se determina mediante el procedimiento de analisis de sacaridos totales.

· %redxil, %redara, %redgal, %redman, %redglu son las concentraciones de xilosa, arabinosa, galactosa, manosa y glucosa de extremo reductor, respectivamente, segun se determina mediante el procedimiento de analisis de sacaridos de extremo reductor.

· %xillibre, %aralibre, %gallibre, %manlibre %glulibre son las concentraciones de xilosa, arabinosa, galactosa, manosa y glucosa libres, respectivamente, segun se determina mediante el procedimiento de analisis de monosacaridos libres.

El contenido en glucosa unida no celulosica, galactosa unida, manosa unida, xilosa unida y arabinosa unida se calculo mediante las formulas (1), (2), (3), (4) y (5), respectivamente:

(1)

(%totglu - %glulibre)*162l180

(2)

(%totgal - %gallibre)*162l180

(3)

(%totman - %manlibre)*162l180

(4)

(%totxil - %xillibre)*132l150

(5)

(%totara -%aralibre)*132l150 El contenido en arabinoxilano o AX0S (%AXlAX0S) en la muestra se calculo mediante la formula (6):

(6)

(%totxil - %redxil)*132l150 + (%totara -%aralibre)*132l150 + (%redxil - %xillibre) El grado medio de polimerizacion (avDP) del arabinoxilano o AX0S se calculo utilizando la formula (7):

(7)

(%totxil - %xillibre + %totara - %aralibre)l(%redxil - %xillibre) La proporcion de arabinosa a xilosa (proporcion AlX) del arabinoxilano o AX0S se calculo utilizando la formula (8):

(8)

(%totara - %aralibre)l(%totxil - %xillibre)

Determinacion del contenido en WU-AXX WS-AX y AX0S

Se determino el contenido en WU-AX, WS-AX y AX0S en una muestra, por ejemplo, una muestra alimentaria, mediante el siguiente conjunto de analisis paralelos.

La cantidad total de AX o AX0S (T0T-AXlAX0S) en una muestra se determino como sigue:

· Se pesan de forma precisa tres partes alicuotas de 40 mg de la muestra seca con un contenido en materia seca conocido.

· Se determina el contenido en sacaridos totales, sacaridos de extremo reductor y monosacaridos libres para cada una de las muestras de 40 mg, respectivamente.

· Se calcula el %T0T-AXlAX0S como el %AXlAX0S utilizando la anterior formula (6) sobre la base de 40 mg (multiplicado por el porcentaje de materia seca) de la muestra original.

La cantidad total de AX hidrosoluble (� WS-AX + AX0S) en una muestra se determina mediante el siguiente

procedimiento: · Se pesan de forma precisa aproximadamente 500 mg de la muestra seca con un contenido en materia seca conocido, se trasladan a un tubo de centrifuga con tapon y se anaden 10,8 ml de tampon MESlTRIS 50 mM (pH 8,2).

· Se colocan los tubos en un bano de agua hirviendo, se anaden 15 !l de una a-amilasa termoestable (Termamyl 120 LS, Novozymes, Bagsvaerd, Dinamarca) en cuanto la temperatura del liquido de los tubos es de al menos 80 DC, y se incuba durante 30 minutos a 95-100 DC.

· Se enfria hasta 60-70 DC.

· Se anaden 29,2 ml de agua (precalentada a 60 DC) y se incuban los tubos en un bano de agua a 70 DC durante 20 minutos con agitacion y otros 20 minutos sin agitacion. · Se centrifugan los tubos a 4.000 x g durante 15 minutos. · Se recogen 35 ml del sobrenadante y se trasladan a un tubo de centrifuga limpio. · Se centrifugan los tubos a 10.000 x g durante 15 minutos. · Se recogen 30 ml del sobrenadante. · Se determina el contenido en sacaridos totales, sacaridos de extremo reductor y monosacaridos libres sobre las

partes alicuotas de 2,5 ml de las muestras de sobrenadante aclaradas.

· Se calcula el %WS-AXlAX0S como el %AXlAX0S utilizando la anterior formula (6), suponiendo un peso seco de la muestra de 1000*2,5l40 mg (multiplicado por el porcentaje de materia seca) de la muestra original. Se determino la cantidad total de AX o AX0S soluble en etanol (ETS-AXlAX0S) en una muestra mediante el

siguiente procedimiento: · Se pesan de forma precisa aproximadamente 500 mg de la muestra seca con un contenido en materia seca

conocido, se trasladan a un tubo de centrifuga con tapon y se anaden 10,8 ml de tampon MESlTRIS 50 mM (pH 8,2). · Se colocan los tubos en un bano de agua hirviendo, se anaden 15 !l de una a-amilasa termoestable (Termamyl

120 LS, Novozymes, Bagsvaerd, Dinamarca) en cuanto la temperatura del liquido de los tubos es de al menos 80 DC, y se incuba durante 30 minutos a 95-100 DC.

· Se enfria hasta 60-70 DC. · Se anaden 29,2 ml de etanol al 96% (en vlv)lagua (precalentado a 60 DC) de forma que la concentracion final de etanol es del 70% (en vlv), y se incuban los tubos en un bano de agua a 70 DC durante 20 minutos con agitacion y otros 20 minutos sin agitacion.

· Se centrifugan los tubos a 4.000 x g durante 15 minutos. · Se recogen 35 ml del sobrenadante y se trasladan a un tubo de centrifuga limpio. · Se centrifugan los tubos a 10.000 x g durante 15 minutos. · Se recogen 30 ml del sobrenadante. · Se evapora el disolvente en un instrumento Rotavap hasta que quedan aproximadamente 3 ml en el matraz. Se

anaden 10 ml de agua destilada a 70 DC, se agita bien y se trasladan a un cilindro medidor. Se anaden 10 ml mas de agua destilada al matraz del rotavapor, se agita bien y se trasladan al mismo cilindro medidor. Se ajusta el liquido en el cilindro medidor a 30 ml mediante la adicion de agua destilada.

· Se determina el contenido en sacaridos totales, sacaridos de extremo reductor y monosacaridos libres sobre las

partes alicuotas de 2,5 ml del liquido recogido en el cilindro medidor. · Se calcula el %ETS-AXlAX0S como el %AXlAX0S utilizando la anterior formula (6), suponiendo un peso seco de la muestra de 1000*2,5l40 mg (multiplicado por el porcentaje de materia seca) de la muestra original.

Se calcula el %WU-AX utilizando la formula (9):

(9)

%WU-AX � %T0T-AXlAX0S - %WS-AXlAX0S

Se calcula el %WS-AX utilizando la formula (10):

(10)

%WS-AX � %WS-AXlAX0S - %ETS-AXlAX0S

Se calcula el %AX0S utilizando la formula (11):

(11)

%AX0S � %ETS-AXlAX0S

Determinacion del contenido en humedad y cenizas

Se analizo el contenido en humedad y cenizas segun los metodos AACC 44-19 y 08-01, respectivamente (metodos aprobados de the American Association of Cereal Chemist, 10� edicion, 2000, The Association, St. Paul, MN, EEUU).

Determinacion del contenido en prote�nas

Se determino el contenido en nitrogeno y el contenido en proteinas deducido segun el metodo de combustion de Dumas, utilizando un sistema de analisis de proteinas Dumas automatico (EAS varioMax NlCN, EIt, Gouda, Paises Bajos) que sigue una adaptacion de metodo oficial de A0AC para la determinacion de proteinas (Association of 0fficial Analytical Chemists. 0fficial Methods of Analysis, 16� edicion, 1995, metodo 990.03, A0AC Washington DC, EEUU). El contenido en proteinas fue deducido multiplicando el contenido en nitrogeno por el factor 6,25.

Condiciones de ensayo de los animales

Se obtuvieron ratas macho de 6 semanas (Wistar) en Elevage Janvier (Le Genest-St-Isle, Francia) y se asignaron aleatoriamente a 6 grupos de 10 ratas cada uno. Las ratas se alojaron en jaulas con fondo de alambre de acero inoxidable (2 ratas por jaula) en una sala con el ambiente controlado (22 DC) con un ciclo de luz-oscuridad de 14-10

h. Las ratas accedieron libremente al agua y a pienso (10 mm) de la dieta quot;controlquot; (tabla 2) durante 6 dias. Despues de 6 dias de adaptacion con la dieta control, las ratas se asignaron aleatoriamente a uno de los 6 grupos de tratamiento diferentes (10 rataslgrupo), y los grupos pudieron acceder libremente al pienso (10 mm) durante 14 dias de una de las 6 dietas descritas en la tabla 2.

Los animales se pesaron y se midio la ingesta de alimento 3 veces semanales. Despues de 14 dias de tratamiento, todos los animales se pesaron y se eutanizaron mediante asfixia con dioxido de carbono. Despues los animales se diseccionaron para recoger el contenido del colon y ciego.

Analisis de los acidos �rasos de cadena corta. A viales que contenian muestras intestinales (2 g) se les anadio lo siguiente: 0,5 ml de acido sulfurico 9,2 M, 0,4 ml de acido 2-metilhexanoico al 0,75% (en vlv) (patron interno), 0,4 g de NaCl y 2 ml de eter dietilico. Despues de agitar los viales durante 2 minutos, los viales se centrifugaron (3 min a 3000 x g), y la fase de eter dietilico se traslado a viales de vidrio. La fase de eter dietilico que contenia los acidos organicos se analizo en un cromatografo de gases-liquidos equipado con una columna EC-1000 Econo-Cap (Alltech, Laame, Belgica; dimensiones: 25 m x 0,53 mm, espesor de la pelicula 1,2 !m; polietilenglicol modificado con acido como fase liquida) y un detector de ionizacion de llama. Se empleo nitrogeno como gas vehiculo a un caudal de 20 ml por minuto, y la temperatura de la columna y la temperatura del inyector se ajustaron a 130 DC y 195 DC, respectivamente. Se calcularon las concentraciones de SCFA basandose en patrones con concentraciones conocidas de los diferentes acidos. Se empleo el acido 2-metilhexanoico como patron interno (Van de Wiele et al., 2007).

Analisis estad�stico. Se analizo el efecto de las dietas sobre diferentes parametros mediante el ensayo de �ruskal-Wallis no parametrico con un nivel de confianza del 95% utilizando el programa informatico Analyse-it, version 2.07. En caso de observar un efecto estadisticamente significativo para el factor dieta, se analizan las diferencias entre las dietas con una proteccion de error de Bonferroni con un nivel de confianza del 95%.

Resultados

Las ratas se utilizaron como modelo in vivo para estudiar el efecto de la inclusion en la dieta de diferentes tipos de arabinoxilanos en mamiferos. Para este fin, se formaron y caracterizaron preparaciones de arabinoxilanooligosacaridos de bajo peso molecular (AX0S), arabinoxilano hidrosoluble de alto peso molecular (WS-AX) y arabinoxilano no extraible de agua de alto peso molecular (WU-AX) (tabla 1). Las diferentes preparaciones se anadieron solas o en combinaciones aditivas a las diferentes dietas (tabla 2), y se evaluo una gama de parametros relacionados con la salud intestinal despues de un periodo de alimentacion de 14 dias.

No se observaron diferencias significativas en el peso corporal ni en la ingesta de alimento diaria entre los diferentes tratamientos.

Puesto que el aumento en los niveles de SCFA intestinales es una caracteristica de la existencia de desplazamientos en la microflora intestinal inducidos por la ingesta de compuestos prebioticos (Macfarlane et al., 2006), se midio la concentracion de los principales SCFA, acetato, propionato y butirato, en el ciego y el colon de ratas de los diferentes grupos de tratamiento. Ademas, puesto que se forman los SCFA ramificados isobutirato e isovalerato durante el catabolismo de los aminoacidos de cadena ramificada valina, leucina, y isoleucina y, asi, se consideran un indicador de la fermentacion de proteinas en el intestino (Mortensen et al., 1992; Macfarlane y Macfarlane, 1995), se evaluaron los niveles de SCFA ramificados en el ciego y el colon de ratas. Los datos para los niveles de SCFA en el ciego y el colon se muestran en las tablas 3 y 4, respectivamente, y en las figuras 1 y 2 para los niveles de SCFA del colon. En las tablas 3 y 4, los datos se expresan sobre una base de peso fresco y seco del contenido del ciego o del colon. Ademas, puesto que algunas de las dietas provocaron un aumento significativo en la cantidad de contenido del ciego y, aunque en un grado menor, del contenido del colon, los datos tambien se expresaron como !mol de SCFA por ciego o por colon. Esta ultima presentacion de los datos se considera que es biologicamente mas pertinente, puesto que refleja la fermentacion intestinal total y no se ve influida por las variaciones relacionadas con la dieta en la cantidad de digerido intestinal presente en los animales. Los cambios mas marcados se observaron para la produccion de butirato en el ciego (tabla 3) y el colon (tabla 4, figura 1C). El WS-AX por si mismo provoco un aumento en el butirato producido por ciego y por colon con relacion a la dieta control, y esto aumento significativamente en la combinacion de WS-AX con AX0S en el ciego y el colon con relacion a la dieta con WS-AX solo. La combinacion de WU-AX con AX0S tambien condujo a un aumento significativo en la cantidad de butirato producido por ciego con relacion al WU-AX solo, excediendo la produccion de butirato observada en la combinacion WS-AX + AX0S. Los mayores niveles de butirato se encontraron en el ciego y el colon de las ratas que consumieron la dieta suplementada con la combinacion de WU-AX, WS-AX y AX0S.

Se observaron unas reducciones significativas en los niveles de SCFA ramificados colonicos en todos los grupos que consumieron dietas que contenian WS-AX, solo o en combinacion con AX0S o con AX0S y WU-AX. Los niveles de SCFA ramificados aumentaron en las ratas que consumieron la dieta que contenia WU-AX, pero estos niveles mayores se redujeron en las ratas que consumieron la combinacion de WU-AX y AX0S, en especial en el colon.

Ejemplo 2: Efecto sobre los parametros intestinales de preparaciones de WU-AX, WS-AX Y AXOS Y sus combinaciones a dosis totales iguales

Materiales y metodos

Preparacion de AX0S

El AX0S fue preparado por FUGEIA NV (Leuven, Belgica) a partir de salvado de trigo mediante un tratamiento con endoxilanasa fundamentalmente como se describe en Swennen et al. (2006). Despues de un aclarado utilizando una centrifuga de disco y despues de la inactivacion con calor de la enzima, el sobrenadante se filtro y se purifico haciendolo pasar sobre resinas de intercambio anionico y de intercambio cationico. Por ultimo, la disolucion se concentro y se seco por pulverizacion. Las etapas de aclarado y de purificacion con resinas de intercambio ionico no son fundamentales para las propiedades del AX0S descrito en la presente invencion. La composicion y la caracterizacion de la preparacion de AX0S se muestra en la tabla 5.

Preparacion de WU-AX

El WU-AX se preparo a partir de salvado de trigo comercial tratando el salvado de trigo suspendido en agua desmineralizada (1:10, en plv) con una amilasa comercial (Termamyl 120 L, Novozymes, Bagsvaerd, Dinamarca; 1 ml por kg de salvado de trigo) a 90D C durante 90 minutos. Despues de hervir (20 min) y de una centrifugacion, el residuo sin almidon (DR) se lavo con agua y se resuspendio en agua desmineralizada (1:12, en plv). El pH de la pasta se adapto a pH 5,0 mediante la adicion de HCl y la pasta se trato con una proteasa comercial (Neutrase 0.8 L, Novozymes, Bagsvaerd, Dinamarca; 80 ml kg de DR) a 55D C con agitacion constante durante 4 h. La pasta se calento hasta 100 DC y se mantuvo a esta temperatura durante 30 minutos. Despues de enfriar hasta 60 DC, la pasta se filtro, el residuo se lavo a fondo con agua desmineralizada, y por ultimo se seco en un liofilizador. La composicion y la caracterizacion de la preparacion de WU-AX se muestra en la tabla 1.

Preparacion de WS-AX

Se suspendio en agua harina de endospermo de trigo comercial (1:5, en plv) y se trato con Termamyl 120L (Novozymes, 60 ml por kg de harina de trigo) a 90D C durante 60 minutos. Despues de hervir (20 min) y de una centrifugacion de la suspension, el residuo sin almidon (DR) se lavo con agua y se resuspendio en agua desionizada (1:5, en plv). La suspension se incubo a 50 DC y a un pH constante de 5,0 con agitacion continua con Neutrase 0.8 L (Novozymes) a 20 ml por kg de DR durante 20 h. La enzima se inactivo mediante un hervido durante 30 min. Despues de enfriar hasta 25 DC, la pasta se centrifugo y se rechazo el sobrenadante. El residuo sin almidon ni proteinas se lavo con agua y se resuspendio en agua desionizada. El pH de la suspension se llevo a 12 mediante la adicion de Na0H (8 M). La suspension despues se agito durante 18 h a temperatura ambiente. Despues del ajuste del pH a 7,0 mediante la adicion de HCl (10 M), seguido de una centrifugacion, los arabinoxilanos solubilizados con alcalis (AS-AX) se recuperaron del sobrenadante. Los AS-AX del sobrenadante se precipitaron mediante la adicion de etanol (3:1, en vlv), y los AS-AX precipitados se recogieron mediante filtracion al vacio sobre un papel de filtro. El residuo se lavo despues con acetona y eter dietilico. El eter residual se evaporo bajo una corriente de aire calentada a 50 DC. La composicion y la caracterizacion de la preparacion de WS-AX se muestra en la tabla 5.

Condiciones de ensayo de los animales

Se obtuvieron ratas macho de 6 semanas (Wistar) en Elevage Janvier (Le Genest-St-Isle, Francia). Las ratas se alojaron en jaulas de plastico con el fondo cubierto de serrin (2 ratas por jaula) en una sala con el ambiente controlado (22 DC) con un ciclo de luz-oscuridad de 14-10 h. Despues de 6 dias de adaptacion con la dieta control (tabla 6), las ratas se asignaron aleatoriamente a uno de los 7 grupos de tratamiento diferente (10 rataslgrupo), y los grupos pudieron acceder libremente al pienso (10 mm) durante 14 dias de una de las 7 dietas descritas en la tabla 6. Las ratas pudieron acceder libremente al agua y al pienso de la dieta apropiada.

Los animales se pesaron y se midio la ingesta de alimento 2 veces semanales. Despues de 21 dias de tratamiento, todos los animales se pesaron y se eutanizaron mediante asfixia con dioxido de carbono. Despues los animales se diseccionaron para recoger el contenido del ciego.

Analisis

Para la determinacion de los SCFA, se anadio lo siguiente a viales que contenian 300 mg de muestras intestinales: 200 !l de acido sulfurico 9,38 molll, 100 !l de acido 2-metilhexanoico al 0,75% (en vlv) (patron interno), 0,1 g de NaCl y 800 !l de eter dietilico. Despues de agitar los viales durante 2 minutos, los viales se centrifugaron (2500 x g durante 5 minutos), y 1,0 !l de la fase de eter dietilico que contiene los acidos organicos se traslado a un vial de vidrio y se analizo mediante una cromatografia de gases segun se describe en Van de Wiele et al. (2007).

Todos los demas analisis se realizaron como en el ejemplo 1.

Resultados

Las ratas se utilizaron como modelo in vivo para estudiar el efecto de la inclusion en la dieta de diferentes tipos de arabinoxilanos en mamiferos. Para este fin, se formaron y caracterizaron preparaciones de arabinoxilanooligosacaridos de bajo peso molecular (AX0S), arabinoxilano hidrosoluble de alto peso molecular (WS-AX) y arabinoxilano no extraible de agua de alto peso molecular (WU-AX) (tabla 5). Las diferentes preparaciones se anadieron solas o en combinaciones a las diferentes dietas, de modo que la suma de la concentracion de AX0S ylo AX representa una dosis total igual del 5% en cada una de las dietas, excepto en la dieta control (tabla 6). Se evaluaron los parametros relacionados con la salud intestinal despues de un periodo de alimentacion de 14 dias.

Puesto que el aumento en los niveles de SCFA intestinales es una caracteristica de la existencia de desplazamientos en la microflora intestinal inducidos por la ingesta de compuestos prebioticos (Macfarlane et al., 2006), se midio la concentracion de los principales SCFA, acetato, propionato y butirato, en el ciego para los diferentes grupos de tratamiento. Se observo una mayor produccion de acetato en las dietas con solo AX0S anadido, solo WS-AX, AX0S combinado con WS-AX, y la triple combinacion de AX0S, WS-AX y WU-AX (figura 3A). La cantidad de propionato producida por ciego no se vio muy afectada, pero se observo un aumento moderado para la dieta con AX0S en combinacion con WS-AX (figura 3B). Como en el ejemplo 1, los cambios mas marcados se observaron para la cantidad de butirato producido por ciego (figura 3C). AX0S y WS-AX por si solos no afectaron a la produccion de butirato del ciego cuando se compara con el control, mientras que la combinacion de AX0S y WS-AX provoco un significativo aumento sinergico de la produccion de butirato del ciego. El WU-AX por si solo provoco un aumento en la produccion de butirato del ciego, pero WU-AX en combinacion con AX0S y la triple combinacion de AX0S, WS-AX y WU-AX produjo un fuerte aumento sinergico de la produccion de butirato.

Los SCFA ramificados isobutirato e isovalerato se forman durante el catabolismo de los aminoacidos de cadena ramificada valina, leucina, y isoleucina (Mortensen et al., 1992; Macfarlane y Macfarlane, 1995) y se consideran un indicador de la fermentacion de proteinas en el intestino. Por tanto, se evaluaron los contenidos del ciego de las ratas para los niveles de SCFA ramificados isobutirato e isovalerato. Se observaron reducciones en los niveles de SCFA ramificados en el ciego en los grupos que consumieron dietas que contenian solo AX0S, solo WS-AX, la combinacion de AX0S y WS-AX, y la triple combinacion de AX0S, WS-AX y WU-AX (figura 4).

Los efectos mas deseado sobre los parametros relacionados con la salud intestinal se observaron con las dietas que contenian una combinacion de WS-AX y AX0S, una combinacion de WU-AX y AX0S, o una combinacion de WS-AX, AX0S y WU-AX. Con estas combinaciones, en particular con la combinacion de WU-AX y AX0S y la combinacion de WS-AX, AX0S y WU-AX, se observo un fuerte aumento sinergico en la produccion de butirato, el SCFA mas beneficioso desde el punto de vista de la salud intestinal, en el intestino grueso. Con las dietas que contenian una combinacion de AX0S y WS-AX y las dietas que contenian una combinacion de WS-AX, AX0S y WU-AX, el aumento en los niveles de butirato vino acompanado de una reduccion del nivel de SCFA ramificados, un marcador de la fermentacion de proteinas intestinales no deseada.

Ejemplo 3: Producci6n de productos alimentarios procesados que contienen una combinaci6n de WU-AX Y AXOS

Se preparo un producto de cereal listo para consumir mezclando los siguientes ingredientes en un mezclador industrial:

Harina de endospermo de trigo

23%

Harina de maiz

30%

Salvado de trigo

25%

Preparacion de AX0S

7%

Sacarosa

13%

Sal (NaCl)

1%

Aceite vegetal

1%

En la anterior formulacion, la preparacion de AX0S es la misma que la utilizada en el ejemplo 2. La mezcla se extrusiona a traves de un extrusor de doble tornillo convencional (Brabender) con un troquel de 1,2 mm y un cortador rotatorio para cortar el producto extrusionado. Durante la extrusion se introduce una dosificacion de agua mediante un medidor de flujo hasta que se alcanza la consistencia deseada. En el momento en que se produce un producto de masa aceptable, se mantiene el flujo de agua en ese nivel minimo aceptable. El producto extrusionado resultante despues se seca.

Se prepara un producto alimentario de yogur mezclando los siguientes ingredientes:

Yogur bajo en grasas

84,2%

Salvado de trigo

8,4%

Preparacion de AX0S

3,2%

Sacarosa

4,2%

10 En la anterior formulacion, la preparacion de AX0S es la misma que la utilizada en el ejemplo 2. Despues de mezclar los ingredientes, el yogur se envasa en porciones individuales de 125 g.

Ejemplo 4: Producci6n de productos alimentarios que contienen una combinaci6n de WU-AX, WS-AX Y AXOS

Se preparo un producto alimentario de cereal listo para consumir mezclando los siguientes ingredientes en un 15 mezclador industrial:

Harina de endospermo de trigo

22%

Harina integral de centeno

31%

Salvado de trigo

25%

Preparacion de AX0S

7%

Sacarosa

13%

Sal (NaCl)

1%

Aceite vegetal

1%

En la anterior formulacion, la preparacion de AX0S es la misma que la utilizada en el ejemplo 2. Por cada kg de la mezcla anterior se anaden 200 ml de una suspension de agua que contiene 12 g de una preparacion de endoxilanasa (Grindamyl H640, Danisco, Copenhague, Dinamarca), se mezcla y se deja en reposo a temperatura

20 ambiente durante 40 minutos. La mezcla se extrusiona a traves de un extrusor de doble tornillo convencional (Brabender) con un troquel de 1,2 mm y un cortador rotatorio para cortar el producto extrusionado. El producto extrusionado resultante despues se seca.

�ablas

Tabla 1: Composicion y caracterizacion de las preparaciones de AX0S, WS-AX y WU-AX utilizadas en el ejemplo 1. Los parametros de la composicion se expresan como porcentaje (en plp) sobre una base de peso seco. Proporcion AlX: proporcion de arabinosa a xilosa o grado medio de sustitucion de arabinosa del arabinoxilano; avDP: grado medio de polimerizacion del arabinoxilano.

Preparacion de AX0S

Preparacion de WS-AX Preparacion de WU-AX

ARABIN0XILAN0

- xilosa unida

68,2 45,8 28,2

- arabinosa unida

14,6 21,5 15,5

- arabinoxilano total

85,2 67,3 43,7

- proporcion AlX

0,21 0,47 0,55

- avDP

5 146 �200

0TR0S CARB0HIDRAT0S

- glucosa unida no celulosica

12,5 16,8 1,2

- galactosa unida

0,6 0,9 0,2

-manosa unida

0,2 0,7 1,5

M0N0SAC�RID0S

- xilosa

1,2 0,2 lt;0,1

- arabinosa

0,2 0,5 lt;0,1

- glucosa

0,2 5,2 lt;0,1

0TR0S C0MP0NENTES

- proteinas

0,4 3,5 10,4

- cenizas

0,5 0,2 4,4

Tabla 2: Composicion de las diferentes dietas de las ratas (en g por 100 g) utilizadas en el ejemplo 1. Las concentraciones de las preparaciones de AX0S, WU-AX y WS-AX indicadas entre parentesis fueron corregidas para su pureza segun se calcula mediante su contenido total en AXlAX0S. Tabla 3: Efecto de AX0S, WS-AX y WU-AX y sus combinaciones aditivas sobre las concentraciones de acetato, propionato, butirato y sobre las concentraciones sumadas de isovalerato e isobutirato (SCFA ramificados) en el ciego de ratas despues de 14 dias de alimentacion. Las concentraciones se expresan en mmol por kg sobre una base de peso fresco (PF) del contenido del ciego, en mmol por kg sobre una base de peso seco (PS) del contenido del ciego, o en !mol por ciego. Las diferentes letras detras de los datos dentro de la misma columna indican una diferencia estadisticamente significativa a p lt; 0,05. Tabla 4: Efecto de AX0S, WS-AX y WU-AX y sus combinaciones aditivas sobre las concentraciones de acetato, propionato, butirato y sobre las concentraciones sumadas de isovalerato e isobutirato (SCFA ramificados) en el colon de ratas despues de 14 dias de alimentacion. Las concentraciones se expresan en mmol por kg sobre una base de peso fresco (PF) del contenido del colon, en mmol por kg sobre una base de peso seco (PS) del contenido del colon, o en !mol por colon. Las diferentes letras detras de los datos dentro de la misma columna indican una diferencia estadisticamente significativa a p lt; 0,05.

Control

WU-AX WU-AX + AX0S WS-AX WS-AX + AX0S WU-AX + WU-AX + AX0S

Almidon de maiz (pregelatinizado)

73,50 66,30 63,28 68,16 65,94 58,74

Preparacion de AX0S

- - 2,22 (1,80) - 2,22 (1,80) 2,22 (1,80)

Preparacion de WU-AX

- 9,14 (3,60) 9,14 (3,60) - - 9,14 (3,60)

Preparacion de WS-AX

- - - 5,34 (3,60) 5,34 (3,60) 5,34 (3,60)

Aislado de proteina de soja

10,80 9,30 9,30 10,80 10,80 9,30

Gluten de trigo

5,00 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00

Aceite de soja

3,50 3,20 3,20 3,50 3,50 3,20

L-lisina

0,45 0,50 0,50 0,45 0,45 0,50

D,L-metionina

0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15

Control

WU-AX WU-AX + AX0S WS-AX WS-AX + AX0S WU-AX + WU-AX + AX0S

L-cisteina

0,08 0,07 0,07 0,08 0,08 0,07

L-treonina

0,13 0,15 0,15 0,13 0,13 0,15

L-triptofano

0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07

Premezcla de vitaminas

1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00

Premezcla de mineralesloligoelementos

4,20 4,20 4,20 4,20 4,20 4,20

Carbonato de calcio

0,70 0,50 0,50 0,70 0,70 0,50

Cr203

0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20

Cloruro de colina

0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20

Butilhidroxitoluol

0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02

Ciego

Acetato (mmol por kg de PF)

Propionato (mmol por kg de PF) Butirato (mmol por kg de PF) SCFA ramificados (mmol por kg de PF)

Control

104,7 (b) 24,1 (a) 33,5 (c) 3,1 (ab)

WU-AX

112,2 (ab) 23,5 (a) 78,6 (ab) 3,8 (a)

WU-AX + AX0S

123,8 (ab) 23,4 (a) 108,8 (a) 2,9 (ab)

WS-AX

174,7 (a) 30,1 (a) 34,8 (c) 0,2 (c)

WS-AX + AX0S

133,3 (ab) 20,4 (a) 57 (bc) 0,4 (c)

WU-AX + WS-AX + AX0S

144,1 (ab) 27,6 (a) 102,7 (ab) 1,5 (bc)

Acetato (mmol por kg de PS)

Propionato (mmol por kg de PS) Butirato (mmol por kg de PS) SCFA ramificados (mmol por kg de PS)

Control

556,8 (b) 129 (a) 184,5 (c) 17,0 (bc)

WU-AX

524,6 (b) 110,4 (a) 347,2 (b) 17,9 (ab)

WU-AX + AX0S

574,5 (b) 110 (a) 507,1 (a) 13,6 (ab)

WS-AX

987,5 (a) 175,4 (a) 204,8 (bc) 1,1 (d)

WS-AX + AX0S

717,8 (ab) 112,8 (a) 293,4 (ab) 0,5 (cd)

WU-AX + WS-AX + AX0S

731,2 (ab) 140,9 (a) 483,9 (a) 6,4 (ab)

Acetato (!mol por ciego)

Propionato (!mol por ciego) Butirato (!mol por ciego) SCFA ramificados (!mol por ciego)

Control

194,4 (b) 45,2 (b) 63,4 (e) 5,9 (a)

WU-AX

255,9 (ab) 55,3 (ab) 181 (cd) 8,7 (a)

WU-AX + AX0S

381,4 (a) 77,3 (ab) 366,5 (a) 8,7 (a)

WS-AX

754,5 (a) 110,9 (a) 140,1 (d) 0,7 (b)

WS-AX + AX0S

618 (ab) 68,1 (ab) 196 (c) 0,4 (b)

WU-AX + WS-AX + AX0S

699,1 (a) 141,2 (a) 459 (a) 6 (ab)

Acetato (mmol por kg de PF)

Propionato (mmol por kg de PF) Butirato (mmol por kg de PF) SCFA ramificados (mmol por kg de PF)

Control

68,4 (a) 12,5 (c) 13,9 (d) 2,5 (a)

WU-AX

94,7 (a) 17,9 (abc) 46,1 (ab) 2,4 (a)

WU-AX + AX0S

104,6 (a) 15,5 (abc) 36,7 (bc) 1,9 (a)

WS-AX

93,3 (a) 26 (a) 22,1 (cd) 0,6 (cd)

WS-AX + AX0S

106,3 (a) 14,1 (bc) 37,3 (b) 0,2 (d)

WU-AX + WS-AX + AX0S

101,6 (a) 19,8 (abc) 58,2 (ab) 1,5 (bc)

Acetato (mmol por kg de PS)

Propionato (mmol por kg de PS) Butirato (mmol por kg de PS) SCFA ramificados (mmol por kg de PS)

Control

213,7 (b) 39,1 (b) 47,6 (c) 9,4 (a)

WU-AX

285,7 (ab) 53,9 (ab) 141,9 (ab) 7,8 (ab)

WU-AX + AX0S

312,6 (ab) 46,5 (b) 102,4 (b) 5,1 (bc)

WS-AX

341 (ab) 95,1 (a) 69,8 (c) 2,2 (de)

WS-AX + AX0S

409,3 (a) 54,2 (ab) 136,9 (ab) 0,7 (e)

WU-AX + WS-AX + AX0S

368,4 (a) 71,7 (a) 193,2 (a) 3,5 (cd)

Acetato (!mol por colon)

Propionato (!mol por colon) Butirato (!mol por colon) SCFA ramificados (!mol por colon)

Control

86,6 (b) 14,3 (b) 15 (d) 2,7 (b)

WU-AX

211,8 (ab) 48,1 (a) 116,4 (a) 5,9 (a)

WU-AX + AX0S

270,9 (a) 40,5 (ab) 86 (ab) 4,3 (ab)

WS-AX

141,3 (a) 37,8 (ab) 32,1 (c) 1,2 (c)

WS-AX + AX0S

209,5 (ab) 25 (ab) 77,4 (b) 0,4 (c)

WU-AX + WS-AX + AX0S

256,2 (a) 52,3 (a) 141 (a) 2,8 (bc)

Tabla 5: Composicion y caracterizacion de las preparaciones de AX0S, WS-AX y WU-AX utilizadas en el ejemplo 2. 10 Los parametros de la composicion se expresan como porcentaje (en plp) sobre una base de peso seco. Proporcion AlX: proporcion de arabinosa a xilosa o grado medio de sustitucion de arabinosa del arabinoxilano; avDP: grado medio de polimerizacion del arabinoxilano.

Preparacion de AX0S

Preparacion de WS-AX Preparacion de WU-AX

ARABIN0XILAN0

- xilosa unida

68,8 63,6 29,7

- arabinosa unida

14,6 29,4 17,8

- arabinoxilano total

83,4 81,3 41,3

- proporcion AlX

0,21 0,45 0,57

- avDP

5 �200 �200

0TR0S CARB0HIDRAT0S

- glucosa unida no celulosica

12,4 14,5 0,9

- galactosa unida

0,6 0,7 0,2

-manosa unida

0,2 0,8 1,5

M0N0SAC�RID0S

- xilosa

1,2 lt;0,1 lt;0,1

- arabinosa

0,2 lt;0,1 lt;0,1

- glucosa

0,2 lt;0,1 lt;0,1

0TR0S C0MP0NENTES

- proteinas

0,4 1,8 10,4

- cenizas

0,5 0,4 5,7

Tabla 6: Composicion de las diferentes dietas de las ratas (en g por 100 g) utilizadas en el ejemplo 2. Las concentraciones de las preparaciones de AX0S, WS-AX y WU-AX indicadas entre parentesis se corrigieron para su pureza segun se calcula mediante su contenido total en AXlAX0S.

21

Control

AX0S WU-AX AX0S + WU-AX WS-AX AX0S + WS-AX AX0S + WU-AX + WS-AX

Preparacion de AX0S

0,00 6,12 (5,00) 0,00 3,80 (2,50) 0,00 3,80 (2,50) 2,06 (1,67)

Preparacion de WU-AX

0,00 0,00 12,58 (5,00) 6,29 (2,50) 0,00 0,00 4,17 (1,67)

Preparacion de WS-AX

0,00 0,00 0,00 0,00 7,14 (5,00) 3,57 (2,50) 2,38 (1,67)

Almidon de maiz pregelatinizado

74,54 68,42 62,88 65,65 67,40 67,88 66,22

Aislado de proteina de soja

14,00 14,00 14,00 14,00 14,00 14,00 14,00

Gluten de trigo

0,92 0,92 0,00 0,46 0,92 0,92 0,61

L-lisina HCl

0,36 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36

D,L-metionina

0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15

L-cisteina

0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12

L-treonina

0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20

L-triptofano

0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07

Premezcla de vitaminas

1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00

Premezcla de mineralesloligoelementos

4,20 4,20 4,20 4,20 4,20 4,20 4,20

Fosfato de dicalcio

0,70 0,70 0,70 0,70 0,70 0,70 0,70

Cloruro de colina

0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20

Butilhidroxitoluol

0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02

Aceite de soja

3,50 3,50 3,50 3,50 3,50 3,50 3,50

Cr2 03

0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02

Referencias bibliograficas

Claims (16)

1. REIVINDICACIONES

   1.- Un producto alimentario procesado que comprende, sobre una base de peso seco, entre 2,5% (en plp) y 15% (en plp) de arabinoxilanos no extraibles de agua (WU-AX) y, sobre una base de peso seco, entre 2,5% (en plp) y 15% (en plp) de arabinoxilano-oligosacaridos (AX0S), en el que el contenido en WU-AX del producto alimentario procesado se corresponde con la suma de toda la arabinosa y la xilosa unidas retenidas en el residuo obtenido despues de extraer dicho producto alimentario procesado con agua caliente a una temperatura entre 95 DC y 100 DC durante al menos 30 minutos en presencia de un amilasa termoestable, seguido de enfriar el extracto hasta 70 DC, y en el que el contenido en AX0S se determina como la suma de toda la arabinosa y la xilosa unidas en la fase soluble obtenida despues de extraer dicho producto alimentario procesado con agua caliente a una temperatura entre 95 DC y 100 DC durante al menos 30 minutos en presencia de un amilasa termoestable, y al cual, despues de enfriar hasta 70 DC, se le ha anadido etanol hasta una concentracion final de etanollagua 70l30 (en vlv).
2. 2.- El producto alimentario procesado segun la reivindicacion 1, que comprende entre 1 y 15 g de WU-AX, y entre 1 y 5 g de AX0S por tamano de racion de dicho producto alimentario procesado.
3. 3.- El producto alimentario procesado segun las reivindicaciones 1 o 2, que comprende entre 1% (en plp) y 15% (en plp) de arabinoxilanos hidrosolubles (WS-AX), en el que el contenido en WS-AX de dicho producto alimentario procesado se determina como la suma de toda la arabinosa y la xilosa unidas en la fase soluble obtenida despues de extraer dicho producto alimentario procesado con agua caliente a una temperatura entre 95 DC y 100 DC durante al menos 30 minutos en presencia de un amilasa termoestable y despues enfriar dicho extracto hasta 70 DC, menos el contenido en AX0S comprendido en dicho producto alimentario procesado.
4. 4.- El producto alimentario procesado segun la reivindicacion 3, en el que dicho producto alimentario procesado es un producto alimentario que comprende entre 0,3 y 5 g de WS-AX por tamano de racion de dicho producto alimentario procesado.
5. 5.- El producto alimentario procesado segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que dicho producto alimentario procesado es un producto horneado.
6. 6.- El producto alimentario procesado segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que dicho producto alimentario procesado es un cereal listo para consumir.
7. 7.- El producto alimentario procesado segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que dicho producto alimentario procesado es un producto de pasta.
8. 8.- El producto alimentario procesado segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que dicho producto alimentario procesado es un producto lacteo.
9. 9.- El producto alimentario procesado segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que dicho producto alimentario procesado es una bebida a base de fruta.
10. 10.- Un suplemento alimentario que comprende, sobre una base de peso seco, entre 10% (en plp) y 35% (en plp) de WU-AX, y mas del 5% (en plp) y hasta 70% (en plp) de AX0S, en el que el contenido en WU-AX del suplemento alimentario se corresponde con la suma de toda la arabinosa y la xilosa unidas retenidas en el residuo obtenido despues de extraer dicho producto alimentario procesado con agua caliente a una temperatura entre 95 DC y 100 DC durante al menos 30 minutos en presencia de un amilasa termoestable, seguido de enfriar el extracto hasta 70 DC, y en el que el contenido en AX0S se determina como la suma de toda la arabinosa y la xilosa unidas en la fase soluble obtenida despues de extraer dicho producto alimentario procesado con agua caliente a una temperatura entre 95 DC y 100 DC durante al menos 30 minutos en presencia de un amilasa termoestable, y al cual, despues de enfriar hasta 70 DC, se le ha anadido etanol hasta una concentracion final de etanollagua 70l30 (en vlv).
11. 11.- El suplemento alimentario segun la reivindicacion 10, que comprende ademas, sobre una base de peso seco, entre 5% (en plp) y 70% (en plp) de WS-AX, en el que el contenido en WS-AX de dicho suplemento alimentario se determina como la suma de toda la arabinosa y la xilosa unidas en la fase soluble obtenida despues de extraer dicho producto alimentario procesado con agua caliente a una temperatura entre 95 DC y 100 DC durante al menos 30 minutos en presencia de un amilasa termoestable y despues enfriar dicho extracto hasta 70 DC, menos el contenido en AX0S comprendido en dicho producto alimentario procesado.
12. 12.- El uso de una preparacion que comprende al menos 30% de AX0S con un grado de polimerizacion de entre 3 y 50, para la produccion de un producto alimentario procesado segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, o un suplemento alimentario segun cualquiera de las reivindicaciones 10 y 11.
13. 13.- El uso de una preparacion que comprende al menos 15% de WU-AX, para la produccion de un producto alimentario procesado segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, o un suplemento alimentario segun cualquiera de las reivindicaciones 10 y 11.
14. 14.- El uso de una preparacion que contiene WU-AX segun la reivindicacion 13, en el que dicha preparacion es un salvado de cereal.
15. 15.- El uso de una preparacion derivada de un cereal que contiene arabinoxilano que comprende, sobre una base de peso seco, entre 1,5 y 8% de WS-AX, para la produccion de un producto alimentario procesado segun cualquiera de las reivindicaciones 3 a 8.
16. 16.- El uso de un producto alimentario procesado segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, o un suplemento alimentario segun cualquiera de las reivindicaciones 10 y 11, para estimular la produccion de butirato en el intestino grueso.

    �I�URAS