ES2375510T3

ES2375510T3 - Composiciones de nanopart�?culas magnéticas y sus usos.

Info

Publication number: ES2375510T3
Application number: ES07728223T
Authority: ES
Inventors: Laurent Levy; Matthieu Germain; Corinne Devaux
Original assignee: Nanobiotix SA
Current assignee: Nanobiotix SA
Priority date: 2006-04-19
Filing date: 2007-04-18
Publication date: 2012-03-01
Anticipated expiration: 2027-04-18
Also published as: ATE530168T1; EP2010152B1; WO2007118884A1; US20100040555A1; EP1852107A1; EP2010152A1; JP2009534350A; EA200870447A1; EA016541B1; CA2649207A1; JP5266548B2; CA2649207C

Abstract

Uso de una nanopartícula o agregado de nanopartículas biocompatible, en combinación con un campo magnético no oscilante externo, en donde dicha nanopartícula comprende: a) un núcleo que comprende material ferromagnético, b) una envoltura biocompatible que rodea al núcleo, en donde el diámetro externo de la envoltura es inferior a 100 nm, y c) opcionalmente, un agente marcador unido al material magnético, para preparar una composición farmacéutica para prevenir o tratar un cáncer, en donde la composición está desprovista de todo medio de orientación a dianas celulares.

Description

Composiciones de nanopartículas magnéticas y sus usos.

La presente invención se refiere en general al sector de partículas activables, para la terapia del cáncer y la vigilancia de la evolución de tumores. Más particularmente, la presente descripción proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden nanopartículas magnéticas biocompatibles, métodos para preparar dichas composiciones y emplearlas en el tratamiento de cáncer o en la obtención de imágenes, para la vigilancia de la evolución de tumores, utilizando un campo magnético no oscilante.

Antecedentes de la invención

En los últimos 30 años se han hecho importantes avances en el diagnóstico y el tratamiento de tumores malignos humanos. Paralelamente, las biotecnologías y nanotecnologías han proporcionado vías para el desarrollo de nuevos enfoques para el tratamiento de enfermedades humanas. En la actualidad, la quimioterapia es un método de tratamiento ampliamente utilizado para muchos cánceres, pero presenta algunas limitaciones y desventajas claras. El principal inconveniente de la quimioterapia está relacionado con la toxicidad del fármaco, lo que restringe en gran medida la dosis de fármaco que se puede utilizar para llevar a cabo la erradicación de las células cancerosas.

Desde 1950 se han investigado sondas y partículas magnéticas como un posible tratamiento para el cáncer. Los estudios demuestran que la hipertermia (Grittner et al., 1997, Hybridoma, 16:109; Higler et al., 1997, Invest. Radiol. 32:705) generada por partículas magnéticas acopladas a un campo magnético de corriente alterna (siglas inglesas AC) de hiper-frecuencia (HF) (que requiere una potencia enorme) podría ser utilizado como una alternativa o un coadyuvante de la terapia para el tratamiento del cáncer. Se ha demostrado que la actividad hipertérmica (el calor producido por la energía de relajación magnética del material magnético) destruye eficazmente el tejido tumoral que rodea a las sondas o partículas. El desarrollo de partículas magnéticas ultrapequeñas (ferrofluidos) con elevada cristalinidad proporcionó el siguiente paso en la terapia por hipertermia inducida magnéticamente. Este tratamiento ha originado una reducción del tamaño del tumor cuando se han inyectado directamente las partículas en el tejido y se han expuesto a un campo magnético alterno. Sin embargo, cuando se utiliza este tipo de tratamiento no se pueden excluir efectos secundarios debido a posibles interacciones entre la radiación y los tejidos. Además, el coste y la escasa disponibilidad de aparatos de HF (que no existen actualmente en el sistema sanitario) representan una limitación en cuanto a su uso en la terapia.

Ha constituido otra área de investigación la orientación específica de objetos quimioterapéuticos hacia las células cancerosas como dianas (Schally et al., 1999, J. Endocrinol, 141:1; Nagy et al., 1996, Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 93:7269; Emons et al., 1993, J. Clin. Endocrinol. Metab., 77:1458). Se ha combinado el enfoque de la terapia dirigida específica con la nanotecnología para demostrar el concepto de los agente nanoclínicos como una novedosa estrategia anticancerosa. El documento US 6,514,481 describe el uso de un campo magnético no oscilante para producir la magnetocitólisis selectiva de células cancerosas positivas respecto a receptores de LH-RH que constituían dianas para partículas de óxido de hierro magnéticas que contenían LH-RH como agente de selección de diana. Bergey et al. (Biomedical Microdevices 4:4, 293-299, 2002) y Levy et al. (Chem. Mater. 2002, 14, 3715-3721) no sólo han comprobado la acción selectiva en cuanto a establecimiento de dianas de tales agentes nanoclínicos, sino que han demostrado específicamente que las células testigo que carecían del receptor para LH-RH no mostraron fijación ni acumulación de agentes nanoclínicos, y por tanto no fueron sensibles a una exposición al campo magnético.

Esta estrategia, aunque es eficaz para destruir un tipo específico de célula tumoral, requiere la preparación, costosa y que requiere mucho tiempo, de agentes nanoclínicos diseñados para atacar como diana a dicho tipo celular específico. De hecho, un tipo de partículas determinado sólo se puede utilizar para un tipo de célula cancerosa. Por tanto, se requieren múltiples nanopartículas y desarrollos para hacer frente a diferentes cánceres.

Compendio de la invención

Los autores de la presente invención han descubierto ahora que se pueden utilizar nanopartículas que tengan un núcleo de material terapéutico o para diagnóstico, magnético, preferiblemente ferromagnético, opcionalmente rodeado por una envoltura compuesta de un material biocompatible, en una composición farmacéutica o para diagnóstico, incluso aunque estén desprovistas de todo agente de orientación a diana. Tales nanopartículas son denominadas en la presente memoria nanopartículas "no dirigidas".

La presente invención se refiere en general al uso de nanopartículas magnéticas, preferiblemente ferromagnéticas, biocompatibles, para preparar composiciones destinadas a diversas aplicaciones biológicas y terapéuticas, y a los métodos relacionados con ello.

Los autores de la presente invención proporcionan nuevas composiciones que comprenden partículas de tamaño nanométrico (inferior a aproximadamente 100 nm) denominadas "agentes nanoterapéuticos", "nanobiofármacos", "agentes nanoclínicos", "nanopartículas" o "nanoburbujas" para usos terapéuticos o para vigilar la evolución de tumores.

Más específicamente, los autores de la presente invención proporcionan nuevas composiciones que comprenden nanopartículas magnéticas, preferiblemente ferromagnéticas, que pueden ser utilizadas, en la terapia, para prevenir

o tratar un cáncer, o en el diagnóstico (por ejemplo, en la obtención de imágenes in vivo), para vigilar la evolución (crecimiento o regresión) de tumores.

Como se ha indicado más arriba, las nanopartículas tienen un núcleo de material magnético terapéutico o para diagnóstico opcionalmente rodeado por una envoltura compuesta de un material biocompatible. Las nanopartículas contienen opcionalmente un agente marcador.

Una característica particular de estas nanopartículas es que están desprovistas de todo agente de orientación a dianas celulares, es decir, de todo agente capaz de facilitar la interacción con (o la absorción por) una célula diana, por ejemplo una célula cancerosa o una célula de la que se sospecha sea una célula tumoral. Tal agente de orientación a diana es generalmente un agente que se fija específicamente a una célula diana.

En la terapia, las nanopartículas se utilizan preferentemente, en la presente invención, en combinación con un campo magnético externo, para preparar una composición farmacéutica para prevenir o tratar un cáncer.

Así, las composiciones farmacéuticas descritas en la presente memoria están desprovistas de todo agente de orientación a dianas celulares y comprenden una nanopartícula que comprende a) un núcleo que comprende material magnético, preferiblemente material ferromagnético, y opcionalmente b) una capa biocompatible que rodea al núcleo, en donde el diámetro externo de la envoltura es inferior a aproximadamente 100 nm, preferiblemente inferior a aproximadamente 50 nm, en asociación con un vehículo biocompatible.

En la presente memoria se describe en particular un método para destruir selectivamente células seleccionadas como diana, por ejemplo células cancerosas. Al exponer las células a agentes nanoclínicos que tienen un núcleo magnético, el tumor se adhiere y/o internaliza los agentes nanoclínicos. La posterior aplicación de un campo magnético no oscilante o estable puede destruir específicamente las células establecidas como diana.

Para la obtención de imágenes, se utilizan preferentemente las nanopartículas descritas en la presente memoria en combinación con un campo magnético externo tal como se ha descrito más arriba, para preparar una composición de vigilancia destinada a la detección o la visualización de una célula, tejido u órgano canceroso, en ausencia de cualquier agente de orientación a dianas.

Por tanto, la presente descripción proporciona además composiciones para diagnóstico útiles para vigilar el crecimiento o regresión tumorales. Estas composiciones, también desprovistas de todo agente de orientación a dianas celulares, comprenden una nanopartícula que comprende a) un núcleo que comprende material magnético, preferentemente material ferromagnético; opcionalmente b) una envoltura biocompatible que rodea al núcleo, y c) un agente marcador, en donde el diámetro externo de la envoltura es inferior a aproximadamente 100 nm, preferiblemente inferior a aproximadamente 50 nm, en asociación con un vehículo biocompatible.

Descripción detallada de la invención

Los términos o expresiones "agente nanoterapéutico", "nanobiofármaco", "nanoburbuja", "nanopartícula", "agente nanoclínico" o sus plurales, se utilizan indistintamente y, a los efectos de esta memoria descriptiva, significan una partícula, o agregado de partículas, biocompatible, con un diámetro inferior a aproximadamente 100 nm, desprovista de todo agente de orientación a dianas, que tiene un núcleo central de material terapéutico o para diagnóstico, opcionalmente una envoltura que rodea al núcleo central; y, opcionalmente, un agente marcador.

Los términos o expresiones "nanopartícula magnética", "nanoMAG", "agente magnético" o "material magnético", se utilizan indistintamente y, tal como se emplean en la presente memoria, se refieren a una partícula, o agregado de partículas, magnética, en particular ferromagnética, no dirigido a dianas, sensible a la energía, que opcionalmente comprende un revestimiento biocompatible y que, cuando es expuesto a una fuente externa de campo magnético, adquiere una orientación preferencial que implica una rotación física que conduce al efecto terapéutico.

La expresión "composición de nanopartículas magnéticas", tal como se emplea en la presente memoria, se refiere a una composición, desprovista de todo agente de orientación a dianas celulares, que comprende una nanopartícula magnética, preferiblemente ferromagnética, y un medio adecuado.

El término "tratamiento", indica en la presente memoria cualquier mejoría en los signos patológicos, por ejemplo, en particular, una disminución del tamaño o el desarrollo de un tumor, la eliminación o la destrucción de células o tejidos patológicos, una desaceleración o estabilización de la progresión del cáncer, una disminución de la formación de metástasis, una regresión o una remisión completa, etc.

Las partículas descritas en la presente memoria pueden ser implementadas para marcar, deteriorar o destruir células, tejidos u órganos en combinación con un campo magnético externo in vitro, in vivo o ex vivo. Se pueden utilizar partículas y composiciones que comprenden dichas partículas en cualquier tipo de tejido, ya sea superficial o profundo, en cualquier organismo mamífero, con preferencia en un ser humano.

Un objeto descrito en la presente memoria se refiere al uso de una nanopartícula, o agregado de nanopartículas, biocompatible, en combinación con un campo magnético externo, en donde dicha nanopartícula comprende:

a) un núcleo que comprende material magnético, preferiblemente ferromagnético; opcionalmente

b) una envoltura biocompatible que rodea al núcleo, en donde el diámetro externo de la envoltura es inferior a aproximadamente 100 nm, preferiblemente inferior a aproximadamente 50 nm; y opcionalmente

c) un agente marcador, que puede estar unido al material magnético o a la capa biocompatible,

para preparar una composición farmacéutica destinada a prevenir o tratar un cáncer, en donde la composición está desprovista de todo agente de orientación a dianas celulares.

También se describe en la presente memoria el uso de una nanopartícula, o agregados de nanopartículas, biocompatible, en combinación con un campo magnético externo, en donde dicha nanopartícula comprende:

b) una envoltura biocompatible que rodea al núcleo, en donde el diámetro externo de la envoltura es inferior a aproximadamente 100 nm, preferiblemente inferior a aproximadamente 50 nm, y

c) un agente marcador, que puede estar unido al material magnético o a la capa biocompatible

para preparar una composición de vigilancia destinada a la detección o la visualización de una célula, tejido u órgano cancerosos, en donde la composición está desprovista de todo agente de orientación a dianas celulares

Las partículas magnéticas biocompatibles útiles para la presente invención deben tener un tamaño lo suficientemente pequeño para ser capaces de difundirse en el tejido con el fin de penetrar en las células (a través de procesos de endocitosis) sin ser capturadas por macrófagos (mediante fagocitosis) y ser lo suficientemente grandes como para responder al campo magnético aplicado, a 37ºC. Por lo tanto, las partículas de menos de aproximadamente 200 nm de diámetro, preferiblemente menos de aproximadamente 100 nm de diámetro, o situadas en el intervalo de aproximadamente 10 nm a menos de aproximadamente 100 nm de diámetro, incluso más preferiblemente partículas de menos de 50 nm de diámetro, son adecuadas para la presente invención. Las partículas preferidas útiles para la presente invención tienen un diámetro comprendido entre aproximadamente 10 y aproximadamente 50 nm. El núcleo magnético debe ser lo suficientemente grande como para presentar propiedades magnéticas, en particular propiedades ferromagnéticas, con el fin de proporcionar un efecto terapéutico o de diagnóstico.

Las nanopartículas pueden tener formas diferentes. Pueden ser, por ejemplo, redondas, achatadas, alargadas, esféricas, ovaladas, etc. La forma se puede determinar o controlar por el proceso de fabricación, y puede ser adaptada por un experto en la técnica en función del campo magnético que se va a aplicar, y de las aplicaciones requeridas. La forma de las partículas puede influir en sus propiedades (especialmente en las propiedades magnéticas). La forma puede influir en la "biocompatibilidad" y biodistribución de las partículas. Así, por razones de farmacocinética y para evitar posibles interacciones indeseadas, se prefieren nanopartículas, o agregados de nanopartículas, de forma esencialmente esférica o redonda. Además, se prefieren nanopartículas, o agregados de nanopartículas, con forma esencialmente homogénea.

Las nanopartículas que pueden utilizarse en la presente invención deben ser biocompatibles, es decir, cuando son administradas a un organismo, típicamente un animal mamífero, preferentemente un ser humano, no deben inducir ningún efecto adverso. Este carácter biocompatible puede asegurarse, por ejemplo, por la naturaleza de los compuestos constitutivos de la partícula y/o por la naturaleza del revestimiento cuando esté presente.

El material que forma el núcleo puede ser uno o más materiales magnéticos terapéuticos o para diagnóstico, que incluyan al menos un material magnético, preferiblemente ferromagnético. Tales materiales incluyen hierro, níquel, cobalto, gadolinio, samario, neodimio, boro, aluminio, preferiblemente en forma de un óxido, un hidróxido o un metal de los mismos, y cualquiera de sus mezclas. En una realización preferida, el material del núcleo magnético es un material metálico, preferiblemente un material ferromagnético, incluso más preferiblemente, un material ferromagnético monodominio. En ejemplos específicos, el material que forma el núcleo está seleccionado del grupo consistente en óxido ferroso y óxido férrico. Se puede utilizar material mixto con el fin de optimizar las interacciones entre un campo magnético y las nanopartículas. Como material mixto se pueden utilizar formas en disolución sólida (bien conocidas por el experto en la técnica como mezclas aleatorias de varios materiales) tales como CoFe2O4, por ejemplo. También se puede utilizar una forma en disolución sólida en fases separadas, por ejemplo Fe2O3 / Co.

Como se ha indicado con anterioridad, las nanopartículas o agregados de nanopartículas descritos en la presente memoria comprenden opcionalmente una envoltura. Tal revestimiento hace posible ventajosamente preservar la integridad de las partículas in vivo y asegurar o mejorar su biocompatibilidad y biodistribución específica.

La envoltura biocompatible puede estar hecha de cualquier material amorfo o cristalino. De una manera general, el revestimiento puede ser no biodegradable o bien ser biodegradable. Los revestimientos no biodegradables pueden estar seleccionados de sílice (SiO2), oro (Au), agarosa, alúmina (AI2O3), un polímero de carbono saturado y un polímero inorgánico, lineal o ramificado, modificado o no (poliestireno, por ejemplo). Los revestimientos biodegradables, por ejemplo, pueden estar seleccionados de moléculas biológicas naturales o artificiales, que pueden estar modificadas o no. Puede ser un polímero hecho de una molécula biológica, modificada o no, de forma natural o no, o bien un polímero biológico, tal como sacáridos, un oligosacárido, un polisacárido, polisulfatado o no, por ejemplo el dextrano. Los materiales o compuestos así mencionados pueden ser utilizados solos, en mezclas o conjuntos, compuestos o no, de tipo covalente o no, posiblemente en combinación con otros compuestos. Además, también se puede utilizar cualquier material mencionado en lo que antecede, hidrosoluble o liposoluble, de forma natural o artificial. El material bio-compatible está seleccionado preferentemente de sílice (SiO2), alúmina (AI2O3), polietilenglicol (PEG) y dextrano.

Opcionalmente se puede utilizar un agente marcador (también denominado en la presente memoria "colorante marcador") para permitir el seguimiento de las nanopartículas. Este agente marcador puede estar unido al material magnético que forma el núcleo de la nanopartícula o bien a la capa biocompatible cuando está presente. El agente marcador puede encontrarse dentro de la capa biocompatible o bien estar unido a la superficie de la nanopartícula. El agente marcador puede estar seleccionado del grupo consistente en derivados de marcadores fluorescentes, colorantes químicos, agentes de contraste para ultrasonido, agentes de contraste para rayos X y agentes para la obtención de imágenes por resonancia magnética.

El colorante marcador puede ser cualquier colorante fluorescente. Constituye un ejemplo un colorante que tenga una longitud de onda de excitación en el intervalo infrarrojo. En la patente de EE.UU. número 5,912,247 se encuentra una descripción de dos colorantes de fotones que son adecuados.

En la presente invención, las nanopartículas pueden comprender otras moléculas, compuestos, o materiales superficiales o estructurales, destinados a mejorar su estabilidad, propiedades, función, especificidad, etc. Puede ser una molécula que garantice o mejore la biocompatibilidad de la nanopartícula o bien una molécula que permita a las nanopartículas escapar del sistema inmunitario (y en particular evitar las interacciones con los macrófagos y el sistema retículo-endotelial). Sin embargo, dichas nanopartículas están desprovistas de todo agente de orientación a dianas celulares específico.

En una realización, las nanopartículas utilizadas en la presente invención son estructuras que comprenden un núcleo hecho de Fe2O3 o Fe3O4, opcionalmente una sonda óptica como agente marcador y, preferiblemente una envoltura de sílice como envoltura biocompatible. Un tamaño preferible para el núcleo magnético es aproximadamente 20 nm. Se considera que la envoltura de sílice estabiliza el núcleo magnético.

Un método típico para preparar nanopartículas utilizables en la presente invención comprende los pasos de:

a) formar un núcleo magnético, preferiblemente ferromagnético, con un material seleccionado del grupo descrito con anterioridad, por ejemplo con óxido ferroso u óxido férrico; y preferiblemente

b) formar una envoltura biocompatible, por ejemplo una envoltura de sílice, alrededor del núcleo;

en donde el diámetro externo de la envoltura de sílice es inferior a aproximadamente 100 nm, preferiblemente inferior a 50 nm.

Las partículas con un núcleo magnético pueden ser sintetizadas utilizando un procedimiento en dos pasos, tal como se describe en el Ejemplo 1.

Se describen métodos alternativos de producción de materiales utilizables para la producción de las nanopartículas utilizables en la presente invención en, por ejemplo, el documento US 6,514,481 B1, en Nelson et al., Chem. Mater. 2003, 15, 688-693 "Nanocrystalline Y203:Eu Phosphors Prepared by Alkalide Reduction" o en Liu et al., Journal of Magnetism and Magnetic Materials 270 (2004) 1-6 "Preparation and characterization of amino-silane modified superparamagnetic silica nanospheres".

De las enseñanzas de la presente invención, los expertos en la técnica reconocerán que las nanopartículas magnéticas no dirigidas pueden ser modificadas sin apartarse del espíritu de la invención.

Otro objeto descrito en la presente memoria consiste en cualquier composición que comprenda las nanopartículas, o agregado de nanopartículas, magnéticas no dirigidas biocompatibles tal como se ha definido con anterioridad y/o posible de obtener por cualquiera de los procedimientos descritos con anterioridad.

Aunque no es obligatorio, las nanopartículas de las composiciones de la invención ventajosamente tienen una forma y tamaño esencialmente homogéneos. Las composiciones pueden estar en forma sólida o en forma líquida (nanopartículas en suspensión), en forma de una pasta, aerosol, etc.

Una composición farmacéutica desprovista de todo agente de orientación a dianas celulares, descrita en la presente memoria comprende una nanopartícula tal como se ha definido más arriba, preferiblemente en una cantidad terapéuticamente eficaz, que comprende a) un núcleo que comprende material magnético, preferiblemente un núcleo hecho de material ferromagnético, por ejemplo de óxido ferroso u óxido férrico, y preferiblemente b) una envoltura biocompatible que rodea al núcleo, en donde el diámetro externo de la envoltura es inferior a aproximadamente 100 nm, preferiblemente entre aproximadamente 10 nm y aproximadamente 50 nm, en asociación con un vehículo biocompatible.

La cantidad terapéuticamente eficaz puede situarse entre aproximadamente 0,01 mg y aproximadamente 100 mg/g de tumor, con preferencia entre aproximadamente 0,05 mg y aproximadamente 30 mg/g de tumor, aún con mayor preferencia entre aproximadamente 0,05 mg y aproximadamente 10 mg/g de tumor. El tamaño y el peso del tumor pueden estimarse y calcularse utilizando imágenes de MRI o de escáner.

Una composición para diagnóstico o vigilancia, desprovista de todo agente de orientación a dianas, descrita en la presente memoria comprende una nanopartícula tal como se ha definido más arriba, preferiblemente en una cantidad eficaz para el diagnóstico, que comprende a) un núcleo que comprende material magnético, preferiblemente un núcleo hecho de material ferromagnético, por ejemplo de óxido ferroso u óxido férrico, preferiblemente b) una envoltura biocompatible que rodea al núcleo, y c) un agente marcador, en donde el diámetro externo de la envoltura es inferior a aproximadamente 100 nm, con preferencia entre aproximadamente 10 nm y aproximadamente 50 nm, en asociación con un vehículo biocompatible.

Esta composición para diagnóstico o vigilancia puede estar combinada con la composición farmacéutica o bien asimilada a la composición farmacéutica, en particular cuando la vigilancia y el tratamiento se realizan simultáneamente. En este último caso, las mismas nanopartículas son utilizadas en general como agente terapéutico y como herramienta de diagnóstico.

La cantidad de nanopartículas utilizadas para preparar la composición para diagnóstico o vigilancia dependerá de la cantidad de nanopartículas utilizadas para proporcionar un efecto terapéutico.

El excipiente o vehículo puede ser cualquier soporte muy habitual para este tipo de aplicaciones, tal como, por ejemplo, soluciones salinas, isotónicas, estériles o tamponadas, etc. Puede comprender además agentes estabilizantes, edulcorantes y/o agentes tensioactivos, etc. Puede ser formulado en forma de ampollas, viales, comprimidos o cápsulas, mediante el uso de técnicas galénicas en sí conocidas.

Las composiciones, nanopartículas y agregado de la invención se puede utilizar en muchos campos, particularmente en medicina humana o veterinaria.

Cuando son expuestas a un campo magnético, y dependiendo de la duración de la exposición, las nanopartículas magnéticas permiten la destrucción de la célula o tejido (una duración de varios minutos, por ejemplo, de 2 ó 5 minutos a 120 minutos) o, simplemente, una vigilancia o visualización de los mismos (obtención de imágenes, diagnóstico) (duración de varios segundos o minutos, en particular de 1 segundo a 120 minutos, con preferencia de 1 minuto a 60 minutos, por ejemplo de 10 segundos a 10 minutos). En particular, la vigilancia puede ser grabada durante el tiempo de tratamiento.

Se pueden utilizar otras modalidades de obtención de imágenes tales como el escáner, mamografía, PET, ultrasonidos ópticos, para visualizar las nanopartículas y proporcionar imágenes para el diagnóstico y/o con fines de seguimiento del tumor.

Si se usan campos magnéticos, las partículas de la invención son aplicables para una exploración por barrido de cualquier tejido del cuerpo.

Las nanopartículas o agregados de nanoparticulas y composiciones de la presente invención pueden utilizarse ventajosamente para la lisis de células cancerosas o células sospechosas de serlo, cuando son sometidas a un campo magnético. Un objeto particular descrito en la presente memoria se refiere por tanto al uso de una nanopartícula, o agregado de nanopartículas, biocompatible, en combinación con un campo magnético externo, en donde dicha nanopartícula comprende:

a) un núcleo que comprende material magnético, preferiblemente ferromagnético; y opcionalmente

b) una envoltura biocompatible que rodea al núcleo, en donde el diámetro externo de la envoltura es inferior a aproximadamente 100 nm, con preferencia en torno a o inferior a aproximadamente 50 nm;

para preparar una composición farmacéutica, destinada a destruir una célula tal como una célula cancerosa, en particular para prevenir o tratar un cáncer, en donde la composición está desprovista de todo medio de orientación a dianas celulares.

La descripción se refiere además a un método para inducir o provocar la apoptosis, necrosis o lisis de una célula tumoral in vitro, ex vivo o in vivo, que comprende los pasos de:

(a): poner en contacto la composición farmacéutica de acuerdo con la invención y descrita en lo que antecede, con células tumorales durante un tiempo suficiente para que dichas células tumorales fijen y/o internalicen las nanopartículas o agregado de nanopartículas contenidos en dicha composición farmacéutica; y

(b): exponer las células a un campo magnético no oscilante u estable,

en donde dicha exposición provoca apoptosis, necrosis o lisis de las células tumorales que han fijado y/o internalizado las nanopartículas.

Aunque no se pretende quedar ligado por ninguna teoría en particular, los datos, que se describen con detalle en la parte experimental de la presente solicitud, sugieren que un probable mecanismo de la citólisis podría ser una orientación física de nanopartículas magnéticas en el campo, lo que induciría un estrés físico o desgarro local que llevaría a la destrucción de las células. La presente invención demuestra la capacidad magnetocitolítica (lisis celular) de estos agentes nanoclínicos.

La evidencia aquí presentada sugiere que estos agentes nanoclínicos interactúan con células cancerosas y se concentran en los tumores al escapar de la vasculatura permeable que rodea a los tumores sólidos a través de un fenómeno conocido como efecto de penetración y retención incrementadas (siglas inglesas EPR). De hecho, se sabe que los tejidos tumorales tienen vasculatura permable y menos vasos linfáticos si se comparan con la situación histológica normal. Este fenómeno da lugar a una acumulación pasiva de partículas de escala nanométrica en los tumores. Como se ha explicado con anterioridad, las células que hay que destruir pueden ser cualesquiera células cancerosas de cualquier mamífero, en particular, de un ser humano. Las células cancerosas están seleccionadas preferiblemente del grupo consistente en células de cáncer de colon, células de cáncer de mama, células de cáncer de ovario, células de cáncer de páncreas, células de cáncer de riñón, células de cáncer de vejiga, células de cáncer de esófago, células de cáncer del cerebro, células de cáncer de hígado, células de cáncer de endometrio, células de cáncer de próstata y células de cáncer de páncreas.

Otro objeto descrito en la presente memoria se refiere a un método para estabilizar o tratar un cáncer, que comprende (a) la administración, a un paciente que sufra de un cáncer, de una composición de la invención tal como se ha definido con anterioridad, en condiciones que permiten que las nanopartículas o agregado de nanopartículas incluidos en dicha composición entren en contacto o penetren en las células cancerosas, y (b) la exposición del paciente a un campo magnético, tal como se ha explicado más arriba, lo que conduce a un deterioro, una perturbación o una destrucción funcional de sus células cancerosas, tratando así su cáncer.

El método descrito más arriba se puede utilizar para tratar cualquier tipo de cáncer, en particular los tumores sólidos, metastatizados o no. Las neoplasias malignas humanas que pueden ser estabilizadas o tratadas mediante el empleo de nanopartículas magnéticas de acuerdo con la invención incluyen, pero sin quedar limitadas a éstas, las de colon, hígado, pulmón, riñón, vejiga, cabeza y cuello, cerebro, piel, intestino, mama, ovario, endometrio, próstata, el cáncer de páncreas, etc.

Las nanopartículas o composiciones de acuerdo con la invención tal como se ha descrito más arriba pueden ser administradas por diversas vías, preferiblemente por inyección. La inyección puede ser local [intra-tumoral (IT) o peri-tumoral, por ejemplo], con el fin de asegurar una concentración local en el tumor y maximizar el efecto terapéutico, o bien sistémica [por ejemplo, por vía intravenosa (IV)], para permitir la acumulación pasiva de nanopartículas en el tumor a través del efecto EPR. La administración se puede realizar también por vía oral. Se pueden considerar, si fuera necesario, inyecciones o administraciones repetidas.

El campo magnético, que preferiblemente es no oscilante o estable, se puede aplicar de manera constante después de una primera administración de las nanopartículas, en una o más veces, utilizando cualquier fuente de campo magnético. Cada activación por un campo magnético puede ser seguida de una o varias administraciones de nanopartículas o composiciones de acuerdo con la invención.

La fuente del campo magnético es preferiblemente una fuente de campo magnético uniforme y unidireccional, y puede estar seleccionado de cualquier imán permanente, electroimán, y equipo de obtención de imágenes por Resonancia Magnética (siglas inglesas MRI). Se encuentra disponible un campo magnético no oscilante o estable, adecuado, en equipos estándar de MRI que tengan típicamente un campo magnético en el intervalo de 0,5 a 5 teslas (T).

Para llevar a cabo el tratamiento o el diagnóstico, se exponen células tumorales, tal como se ha descrito con anterioridad, a las nanopartículas o agregados de nanopartículas de acuerdo con la invención. Se pueden administrar nanopartículas o agregados de nanopartículas en una o más veces, preferiblemente en una vez. Cuando se administran en varias veces, por ejemplo, 2, 3, 4 o 5 veces, las nanopartículas o agregados de nanopartículas puede ser administrados regularmente durante al menos una semana, con preferencia dos semanas. Después de la fijación y/o internalización de las nanopartículas o agregados de nanopartículas por las células tumorales, se expone al paciente a un campo magnético, con preferencia a un campo magnético no oscilante o estable.

Con fines de diagnóstico, y tal como se ha explicado con anterioridad, las composiciones de la invención también pueden ser utilizadas como agentes de contraste o de diagnóstico (composiciones para vigilancia), con el fin de detectar y/o visualizar cualquier tipo de tejido canceroso.

Por lo tanto, un objeto descrito en la presente memoria se refiere al uso de nanopartículas, o agregado de nanopartículas, tal como se han descrito con anterioridad, en combinación con un campo magnético, para preparar una composición destinada a la detección o la visualización de células, tejidos u órganos, o para la vigilancia de la evolución de la patología.

La expresión "en combinación" indica que el efecto requerido se obtiene cuando las células, tejidos u órganos de interés, que tienen parcialmente incorporadas nanopartículas de la invención, son excitadas por el campo magnético. Sin embargo, tal como se ha explicado con anterioridad, en el contexto de la terapia, no es necesario que las partículas y el campo magnético sean gestionados de forma simultánea, ni según el mismo protocolo.

Tal composición se puede utilizar durante la etapa de tratamiento.

El campo magnético aplicado en la terapia o el diagnóstico se sitúa en el rango de 0,5 a 7 teslas, preferiblemente en el intervalo de 0,5 a 5 teslas. Se puede utilizar típicamente un dispositivo de MRI para proporcionar la excitación de las nanopartículas con un campo magnético de 1,5 teslas. En un momento adecuado (cuando la biodistribución sea adecuada para una buena actividad terapéutica y minimice los posibles daños colaterales), después de una administración única o repetida de las nanopartículas o composiciones de la invención, se puede aplicar un campo magnético en una o más veces en una o varias semanas (preferiblemente 1, 2, 3 o 4 semanas) y se aplica preferiblemente cada 1 o 2 días. El número de activaciones es preferiblemente inferior o igual a 5 [por ejemplo 1, 2, 3, 4 o 5 activaciones] y típicamente dura de 30 minutos a 90 minutos en la terapia, y de 10 segundos a 60 minutos en el diagnóstico.

El protocolo descrito en lo que antecede se puede repetir durante el tiempo si fuera necesario (cada mes o cada dos, tres, cuatro, cinco o seis meses, por ejemplo).

La invención se apreciará mejor a partir de los ejemplos siguientes, que están destinados a ser ilustrativos y no limitantes.

Breve descripción de los dibujos

La Figura 1 es una imagen TEM de nanopartículas de óxido de hierro revestidas con sílice.

La Figura 2 es una representación de la evolución del peso de ratones C57BL6 después de la inyección de dosis crecientes de nanopartículas que iban desde 0,006 a 0,06 mg de composición nanoMag no dirigida/ratón. La Figura 2 muestra demuestra que no existe efecto por parte de la composición nanoMag no dirigida sobre el peso de los ratones durante el mes siguiente a la administración de la misma.

La Figura 3 es una representación de la evolución del peso de ratones C57BL6 después de una inyección única de 0,9 y 1,8 mg de composición NanoMag no dirigida/ratón. La Figura 3 demuestra que no existe efecto por parte de la composición nanoMag no dirigida sobre el peso de los ratones.

La Figura 4 es una representación del peso de ratones portadores de tumores C38, antes y después de 5 inyecciones intravenosas de composición nanoMag no dirigida (0,12 mg/ratón). No hay diferencia entre el peso de los ratones testigo y el peso de los ratones sometidos a MRI.

La Figura 5 es una representación de la disminución del crecimiento de tumor C38 en ratones C57BL6 inyectados con nanoMag no dirigida, sometidos a un campo magnético durante 1 hora, 20 horas después de la inyección, en comparación con animales a los que se ha inyectado NanoMag no dirigida, pero no activados.

La Figura 6 es una representación de la evolución del peso de ratones C57BL6 después de la inyección de NaCl o de la inyección y la activación después de 5, 20 o 48 horas de nanoMag no dirigida, que no revela que exista diferencia entre los animales testigo y los tratados.

La Figura 7 es una representación de los volúmenes tumorales de ratones tratados con NanoMag no dirigida, activada, en relación con ratones no tratados. El crecimiento de los tumores se redujo en los ratones tratados con nanoMag no dirigida, activada 48 horas después de la inyección.

La Figura 8 son imágenes obtenidas por MRI de ratones portadores de tumores C38 (a) después de una única inyección IT de solución de NaCl al 0,9% y (b) 48 horas después de una única inyección IT de nanoMag.

Ejemplo 1

Se sintetizan partículas con un núcleo magnético mediante un proceso en dos pasos. Se realiza una etapa de precipitación mediante la inyección simultánea de soluciones acuosas de cloruro ferroso (60 mmol) e hidróxido de sodio (120 mmol) en un reactor bajo atmósfera de nitrógeno y agitación mecánica. Después, la solución de hidróxido de hierro obtenida se oxida directamente mediante la inyección de peróxido de hidrógeno en el reactor. Durante la etapa de oxidación, se mantiene a pH 8 el grueso de la reacción por medio de una bureta automática llena de una solución de hidróxido de sodio. Durante todo este proceso, el pH, la temperatura y el volumen de hidróxido de sodio

5 agregado son registrados por un ordenador conectado al pH-metro. Se incuba la disolución durante 2 horas después del final de la inyección de peróxido de hidrógeno. Después, los 5 g de partículas obtenidas (30 nm de diámetro) se lavan por centrifugación con agua destilada y se estabilizan mediante la adición de hidróxido de tetrametilamonio 1,2 mM.

Se puede revestir adicionalmente el núcleo magnético con una envoltura, por ejemplo una envoltura de sílice. Para

10 ello, se lleva a cabo una primera impregnación con sílice mediante la adición de disolución de silicato de sodio en partículas (780 µL para 1 g de partículas en 240 ml de agua destilada). El silicato de sodio remanente es eliminado mediante centrifugación en agua. Se dispersan 125 mg de partículas en disolución agua/etanol (1/4) que contiene 0,6 mmol de ortosilicato de tetraetilo. La hidrólisis y condensación del precursor de sílice son promovidas mediante la inyección de disolución de amonio en la masa. Se incuba la disolución durante una noche antes de lavar las

15 partículas por centrifugación en agua destilada. Las partículas revestidas se mantienen en agua (el pH se ha ajustado a aproximadamente 7,4). La Figura 1 representa una imagen obtenida mediante microscopía electrónica de transmisión de nanoMag no dirigida.

Ejemplo 2

Esta realización verifica la dosis máxima tolerada (siglas inglesas MTD) de nanopartículas magnéticas no dirigidas

20 (NanoMag no dirigida) en ratones C57BL/6 machos y hembras sanos y ratones Swiss Nude (inmunodeficientes) machos y hembras sanos.

Se llevó a cabo un experimento de dosis máxima tolerada (MTD) en 12 ratones C57BL/6 machos sanos y 12 ratones C57BL/6 hembras sanos, y también en 3 ratones Swiss Nude machos sanos y 3 ratones Swiss Nude hembras sanos. Los animales recibieron una única inyección IV en bolo del vehículo de NanoMag y la composición NanoMAG

25 no dirigida, a distintas dosis elegidas por los autores de la presente invención. El estudio de tolerancia se llevó a cabo de la manera que se describe en la Tabla 1 siguiente:

Grupo: Cepa Sexo Número de ratones Tratamiento Dosis (mg/ratón) Número de tratamientos

1: C57BL/6 machos 3 vehículo
1

2: C57BL/6 machos 3 NanoMAG no dirigida 0,006 1

3: C57BL/6 machos 3 NanoMAG no dirigida 0,03 1

4: C57BL/6 machos 3 NanoMAG no dirigida 0,06 1

5: C57BL/6 hembras 3 vehículo 1

6: C57BL/6 hembras 3 NanoMAG no dirigida 0,006 1

7: C57BL/6 hembras 3 NanoMAG no dirigida 0,03 1

8: C57BL/6 hembras 3 NanoMAG no dirigida 0,06 1

9: Swiss Nude machos 3 NanoMAG no dirigida 0,06 1

10: Swiss Nude hembras 3 NanoMAG no dirigida 0,06 1

Se registraron dos veces por semana el peso corporal, signos clínicos de toxicidad y la supervivencia. Se consideró omo criterio de toxicidad una pérdida del 25% del peso corporal y/o la muerte del animal.

30 La Figura 2 no muestra ningún efecto de la composición nanoMag no dirigida, sobre el peso de los ratones durante el mes siguiente a la administración de dosis crecientes de la misma (que iban de 0,006 a 0,06 mg/ratón). No se encontró relación con la cepa o el sexo del ratón. El sacrificio y la autopsia macroscópica de los ratones no revelaron ningún signo de toxicidad.

Ejemplo 3

35 Esta realización demuestra adicionalmente la tolerancia de ratones sanos a nanopartículas magnéticas no dirigidas 9

(NanoMAG no dirigida) después de una única inyección intravenosa (IV).

3.1 Material -composiciones NanoMAG no dirigidas: 3 g de composición NanoMAG no dirigida/L y 6 g de composición

NanoMAG no dirigida/L 5 -6 ratones C57BL/6 machos sanos

3.2 Tratamiento -Vía de administración: IV, en bolo -Volumen de inyección: 300 µl/ratón/inyección -Dosis de tratamiento: 0,90 y 1,80 mg de composición NnanoMAG no dirigida/ratón/inyección

10 -Pauta de tratamiento: Q1Dx1 Se llevaron a cabo, de la manera que se describe en la Tabla 2 siguiente, experimentos de tolerancia que incluían inyecciones únicas de 0,9 y 1,8 mg de composición NanoMAG no dirigida / ratón:

Número del grupo: Cepa Sexo Número de ratones Sustancia de prueba Dosis de tratamiento (mg de NanoMAG no dirigida) Pauta de tratamiento Vía de administración Volumen de administración/ratón (µl/ratón)

1: C57B L/6 machos 3 composición NanoMAG no dirigida 3 g/L 0,90 Q1Dx1 IV 300

2: C57B L/6 machos 3 composición NanoMAG no dirigida 6 g/L 1,80 Q1Dx1 IV 300

Se inyectó al Grupo 2 sólo cuando el Grupo 1 toleró la dosis de 0,90 mg de composición NanoMAG no 15 dirigida/ratón/inyección

3.3 Seguimiento de los ratones -registro del peso corporal dos veces por semana durante 10 días -se anotaron diariamente viabilidad y comportamiento -se sacrificaron los ratones y se realizó su autopsia 10 días después de la última inyección

20 Los experimentos de tolerancia demostraron la ausencia de efecto de la composición nanoMAG no dirigida sobre el peso de los ratones (véase la Figura 3)

Ejemplo 4

Esta realización demuestra la tolerancia de ratones C57BL6 y Swiss sanos a nanopartículas magnéticas no dirigidas (NanoMAG no dirigida) tras inyecciones repetidas.

25 Se han realizado experimentos similares a los descritos en los Ejemplos 2-3 después de inyecciones repetidas de NanoMAG no dirigida. Se determinó (véase la Figura 4) el peso de los ratones, antes y después de 5 inyecciones intravenosas de composición NanoMAG no dirigida (0,12 mg/ratón). Para verificar la seguridad de las nanopartículas después de la activación, se sometieron algunos ratones a un campo magnético (MRI) con el fin de activar las nanopartículas. No hubo diferencia entre el peso de los ratones testigos y el peso de los ratones sometidos a MRI.

30 Además, el sacrificio y las autopsias de los animales no revelaron signos de toxicidad.

Ejemplo 5

Esta realización demuestra la eficacia de composiciones NanoMAG no dirigidas en ratones C57BL6 hembras portadores de tumores de colon C38.

Se inyectó una composición NanoMAG no dirigida (1,5 g/l) directamente en tumores C38 presentes en ratones C57BL6. 20 horas después de la inyección se sometió a los animales a un campo magnético (MRI) durante 1 hora, y después se les comparó con animales inyectados con nanoMAG no dirigida, pero no activados. La Figura 5 muestra una disminución del crecimiento tumoral en los animales activados.

Ejemplo 6

5 Esta realización evalúa la actividad antitumoral de NanoMAG no dirigida activada por un campo magnético, en un modelo de ratones C57BL6 machos portadores de tumor C38, después de una única inyección intratumoral (IT), y en distintas condiciones de retraso entre la inyección IT y la exposición a campo magnético.

El día del tratamiento (D0), se distribuyeron al azar 26 de los 50 ratones C57BL/6 machos portadores de tumores, en 5 grupos (un grupo de 6 ratones y cuatro grupos de 5 ratones). No había diferencia en los volúmenes medios de

10 tumor entre los grupos (mediante análisis de varianza). Los autores de la presente invención eligieron la pauta de tratamiento de la siguiente manera:

-: Grupo 1: cinco ratones recibieron una única inyección IT de disolución de NaCl al 0,9% (pauta de tratamiento Q1Dx1).

-: Grupo 2: Seis ratones recibieron una única inyección IT de NanoMAG no dirigida, a razón de 0,75 mg de 15 NanoMAG no dirigida/ml de tumor (pauta de tratamiento Q1Dx1).

-: Grupo 3: cinco ratones recibieron una única inyección IT de NanoMAG no dirigida, a razón de 0,75 mg de NanoMAG no dirigida/ml de tumor (pauta de tratamiento Q1Dx1). Luego se sometió a los ratones durante una hora a un campo magnético de 4,7 teslas, 5 horas después de la inyección IT de nanoMAG no dirigida.

-: Grupo 4: cinco ratones recibieron una única inyección IT de NanoMAG no dirigida, a razón de 0,75 mg de

20 NanoMAG no dirigida/ml de tumor (pauta de tratamiento Q1Dx1). Luego se sometió a los ratones durante una hora a un campo magnético de 4,7 teslas, 20 horas después de la inyección IT de NanoMAG no dirigida.

-: Grupo 5: cinco ratones recibieron una única inyección IT de NanoMAG no dirigida, a razón de 0,75 mg de NanoMAG no dirigida/ml de tumor (pauta de tratamiento Q1Dx1). Luego se sometió a los ratones durante 25 una hora a un campo magnético de 4,7 teslas, 48 horas después de la inyección de NanoMAG no dirigida.

El plan de tratamiento se encuentra resumido en la Tabla 3 siguiente:

Número del grupo: Cepa Sexo Número de ratones Sustancia de prueba Pauta de tratamiento Vía de administración Dosis inyectada (mg de NanoMAG no dirigida/ml de tumor)

1: C57BL/6 machos 5 NaCl al 0,9% Q1Dx1 IT -

2: C57BL/6 machos 6 NanoMAG no dirigida Q1Dx1 IT 0,75

3: C57BL/6 machos 5 NanoMAG no dirigida Q1Dx1 IT 0,75

4: C57BL/6 machos 5 NanoMAG no dirigida Q1Dx1 IT 0,75

5: C57BL/6 machos 5 NanoMAG no dirigida Q1Dx1 IT 0,75

La exposición de los ratones al campo magnético y la activación se realizaron como se describe en la Tabla 4 siguiente:

Grupos: Número de ratones Sustancia de prueba Duración de la activación Tiempo desde la inyección a la activación Obtención de imágenes

1: 5 NaCl al 0,9% no no sí

2: 6 NanoMAG no dirigida no no no

3: 5 NanoMAG no dirigida 1 hora 5 horas sí

4: 5 NanoMAG no dirigida 1 hora 20 horas sí

5
5: NanoMAG no dirigida 1 hora 48 horas sí

Se registraron dos veces por semana el peso corporal, signos clínicos de toxicidad y la supervivencia. Se consideró como criterio de toxicidad una pérdida del 15-20% del peso corporal y/o la muerte del animal.

Este experimento no reveló ninguna diferencia de peso entre los animales testigo y tratados (véase la Figura 6).

5 Se midieron con un calibre el largo y el ancho del tumor y se estimó el volumen del tumor mediante la fórmula (ancho2 x largo)/2. La eficacia del tratamiento se evaluó en términos de los efectos de NanoMAG no dirigida, activado, sobre los volúmenes de tumor de los ratones tratados en comparación con los ratones no tratados. Se vigiló el crecimiento tumoral, que está representado en la Figura 7. El crecimiento de los tumores disminuye cuando se trata a los ratones con NanoMAG no dirigida, activada 48 horas después de la inyección.

10 La Figura 8 muestra imágenes MRI de ratones portadores de tumores C38 que han sido inyectados intratumoralmente con NaCl al 0,9% (a) o con nanoMAG (b), 48 horas después de la inyección. Se puede detectar nanoMAG in vivo, y proporciona especificidad e intensificación del contraste.

Claims

REIVINDICACIONES

1.

Uso de una nanopartícula o agregado de nanopartículas biocompatible, en combinación con un campo magnético no oscilante externo, en donde dicha nanopartícula comprende: a) un núcleo que comprende material ferromagnético, b) una envoltura biocompatible que rodea al núcleo, en donde el diámetro externo de la envoltura es inferior a 100 nm, y

c) opcionalmente, un agente marcador unido al material magnético, para preparar una composición farmacéutica para prevenir o tratar un cáncer, en donde la composición está desprovista de todo medio de orientación a dianas celulares.
2.

Nanopartícula o agregado de nanopartículas biocompatible, en donde dicha nanopartícula está desprovista de todo medio de orientación a dianas celulares y comprende: a) un núcleo que comprende material ferromagnético, b) una envoltura biocompatible que rodea al núcleo, en donde el diámetro externo de la envoltura es inferior a 100 nm, y

c) opcionalmente, un agente marcador unido al material magnético, para uso, en combinación con un campo magnético no oscilante externo, en la prevención o el tratamiento de cáncer.
3.

Uso según la reivindicación 1 o nanopartícula o agregado de nanopartículas biocompatible según la reivindicación 2, en donde el material ferromagnético está en la forma de un óxido, un hidróxido o un metal, y está seleccionado del grupo formado por hierro, níquel, cobalto, gadolinio, samario, neodimio, boro, aluminio, y cualquiera de sus mezclas, y la envoltura biocompatible está hecha de un material seleccionado del grupo consistente en sílice, oro, alúmina, azúcar, PEG y dextrano.
4.

Uso según la reivindicación 1 o nanopartícula o agregado de nanopartículas biocompatible según la reivindicación 2, en donde el material ferromagnético es un material ferromagnético monodominio.
5.

Uso según la reivindicación 1 o nanopartícula o agregado de nanopartículas biocompatible según la reivindicación 2, en donde el material del núcleo magnético está seleccionado del grupo consistente en óxido ferroso y óxido férrico.
6.

Uso según la reivindicación 1 o nanopartícula o agregado de nanopartículas biocompatible según la reivindicación 2, en donde la nanopartícula o agregado de nanopartículas tiene una forma esencialmente esférica o redonda.
7.

Uso de una nanopartícula o agregado de nanopartículas biocompatible, en combinación con un campo magnético externo, en donde dicha nanopartícula comprende: a) un núcleo que comprende material ferromagnético; b) una envoltura biocompatible que rodea al núcleo, en donde el diámetro externo de la envoltura es inferior a 100 nm; y

c) un agente marcador; para preparar una composición destinada al tratamiento y detección de una célula, tejido u órgano cancerosos, en donde la composición está desprovista de todo medio de orientación a dianas celulares.
8.

Nanopartícula o agregado de nanopartículas biocompatible, en donde dicha nanopartícula está desprovista de todo medio de orientación a dianas celulares y comprende: a) un núcleo que comprende material ferromagnético; b) una envoltura biocompatible que rodea al núcleo, en donde el diámetro externo de la envoltura es inferior a 100 nm; y

c) un agente marcador; para uso, en combinación con un campo magnético externo, en el tratamiento y detección de una célula, tejido u

órgano cancerosos.
9. Una composición farmacéutica para prevenir o tratar un cáncer en un paciente expuesto a un campo magnético no oscilante externo, en donde la composición farmacéutica está desprovista de todo medio de orientación a dianas celulares, y comprende una nanopartícula o agregado de nanopartículas biocompatible que comprende a) un núcleo

5 que comprende material ferromagnético, y b) una envoltura biocompatible que rodea al núcleo, en donde el diámetro externo de la envoltura es inferior a 100 nm, preferiblemente entre 10 nm y 50 nm, en asociación con un vehículo biocompatible.
10. Composición según la reivindicación 9, donde el material del núcleo ferromagnético está seleccionado del grupo consistente en óxido ferroso y óxido férrico.

10 11. Composición según la reivindicación 9 ó 10, en donde la nanopartícula o agregado de nanopartículas tiene una forma esencialmente esférica o redonda.
12. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 9 a 11, en donde la nanopartícula o agregado de nanopartículas biocompatible comprende además c) un agente marcador.

Imagen TEM de nanoMAG

Figura 1

Evolución del peso de ratones después de la inyección IV de nanoMAG

Figura 2

Evolución del peso de ratones C57BL6 después de la inyección IV de nanoMAG

Figura 3

Peso de ratones C57BL6 antes y después de 5 inyecciones IV de nanoMAG

Figura 4

Crecimiento tumoral después de solo inyección de nanoMAG o después de inyección de nanoMAG y activación MR

Días después de la inyección

nanoMAG sin activar (3 ratones)

nanoMAG activado por MRI (3 ratones)

Figura 5

Evolución del peso de ratones después de inyección IV de nanoMAG

NaCl al 0,9%

nanoMAG +MRI 5 horas tras la inyección nanoMAG

nanoMAG +MRI 20 horas tras la inyección nanoMAG +MRI 48 horas tras la inyección

Figura 6

Crecimiento tumoral después de solo inyección de nanoMAG

o después de inyección de nanoMAG y activación MR

Días después de la inyección

inyectado NaCl n=5

inyectado nanoMAG y activado 48 horas después de la inyección

Figura 7

NaCl nanoMAG

Figura 8