ES2350697T3 - Compuestos de pirrolotriazina. - Google Patents

Abstract

Un compuesto de fórmula I: **(Ver fórmula)**en la que: R1 es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, anillo carbocíclico, anillo carbocíclico sustituido, arilo, arilo sustituido, heterociclilo o heterociclilo sustituido; dichos sustituyentes en el alquilo sustituido, cicloalquilo, arilo o heterociclilo seleccionados del grupo que consiste en uno o más de hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heterociclilo, heterociclilo sustituido, -CN, -N3, -NH2, -NH-alquilo, -NH-alquilo sustituido, -NH-arilo, -NH-arilo sustituido, -NHCO-alquilo, imino, alquilimino, alquilimino sustituido, arilimino, arilimino sustituido, hidroxilo, alcoxi, alcoxi sustituido, ariloxi, ariloxi sustituido, carboxi, -CONH-alquilo, -CONH-alquilo sustituido, R2 es arilo, arilo sustituido, heterociclilo o heterociclilo sustituido; dichos sustituyentes en el grupo arilo sustituido o heterociclilo sustituido se seleccionan del grupo que consiste en uno o más de: hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, -CN, -N3, alcoxi, alcoxi sustituido, arilo, arilo sustituido, ariloxi, ariloxi sustituido, -O-heterociclilo, -O-heterociclilo sustituido, heterociclilo, heterociclilo sustituido, -CF3 y &8211;OCF3; X es un enlace directo o NH-o una sal, éster, solvato, profármaco o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

La patente reivindica el beneficio de la Solicitud de Patente Provisional de EE.UU. Nº 60/584.768, presentada el 1 de julio de 2.004, incorporada en la presente memoria por referencia en su totalidad.

La patente se refiere a compuestos que inhiben la actividad de la tirosina cinasa de receptores del factor de crecimiento tales como HER1, HER2, HER4, VEGFR-2, FGFR-1 y PDGFR haciéndolos de ese modo útiles como agentes anticáncer. Los compuestos también son útiles en el tratamiento de enfermedades, distintas del cáncer, que están asociadas a las rutas de transducción de las señales que operan a través de estos receptores del factor de crecimiento.

Las tirosina cinasas receptoras (RTK) son importantes en la transmisión de señales bioquímicas a través de la membrana plasmática de las células. Estas moléculas transmembrana consisten de manera característica en un dominio de unión con el ligando extracelular conectado a través de un segmento en la membrana plasmática a un dominio de la tirosina cinasa intracelular.

La familia de los receptores del factor de crecimiento epidérmico humano (HER) consiste en cuatro tirosina cinasas receptoras distintas referidas como HER1, HER2, HER3 y HER4. Estas cinasas también se refieren como erbB1, erbB2, etc. HER1 también se refiere comúnmente como el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGF). A excepción de HER3, estos receptores presentan actividad de proteína cinasa intrínseca que es específica de restos de tirosina de proteínas fosfoaceptoras. Las cinasas HER se expresan en la mayoría de las células epiteliales, así como células tumorales de origen epitelial. También se expresan con frecuencia en células tumorales de origen mesenquimatoso tales como sarcomas o rabdomiosarcomas. Las RTK tales como HER1 y HER2 están implicadas en la proliferación celular y están asociadas a enfermedades tales como la soriasis y el cáncer. La ruptura molecular de la transducción de las señales por inhibición de estas cinasas tendría un efecto antiproliferativo y terapéutico.

La actividad enzimática de las tirosina cinasas receptoras se puede estimular o por sobreexpresión o por dimerización mediada por ligandos. La formación de homodímeros así como heterodímeros se ha demostrado para la familia de receptores HER. Un ejemplo de homodimerización es la dimerización de HER1 (receptor de EGF) por uno de la familia EGF de ligandos (que incluye EGF, que transforma el factor alfa de crecimiento, betacelulina, EGF de unión a heparina y epiregulina). La heterodimerización entre las cuatro cinasas receptoras HER se puede activar mediante la unión a miembros de la heregulina (también referida como familia de la neuregulina de ligandos. Dicha heterodimerización ya que implica HER2 y HER3 o una combinación HER3/HER4, da como resultado una estimulación significativa de la actividad de la tirosina cinasa de los dímeros de los receptores incluso aunque uno de los receptores (HER3) sea enzimáticamente inerte. Se ha demostrado que la actividad de la cinasa de HER2 se activa también debido a sobreexpresión del receptor solo en una variedad de tipos de células. La activación de homodímeros y heterodímeros de receptores da como resultado la fosforilación de restos tirosina en los receptores y en otras proteínas intracelulares. Esto va seguido por la activación de rutas de señalización intracelular tales como las que implican la proteína cinasa asociada a microtúbulos (cinasa MAP) y la fosfatidilinositol 3-cinasa (cinasa PI3). Se ha demostrado que la activación de estas rutas conduce a proliferación celular y la inhibición de muerte celular programada. Se ha demostrado que la inhibición de señalización de cinasa HER inhibe la proliferación celular y la supervivencia.

Otras RTK tales como VEGFR-2 están asociadas a la proliferación de células endoteliales así como a células tumorales. La ruptura molecular de esta ruta tendría un efecto antiproliferativo y un efecto terapéutico en trastornos relacionados con la vasculogénesis o la angiogénesis.

La presente invención proporciona compuestos de fórmula I, composiciones farmacéuticas que emplean tales compuestos y procedimientos para usar tales compuestos.

De acuerdo con la presente invención, los compuestos de fórmula I:

imagen1

en los que los símbolos tienen los siguientes significados y, para cada caso, se seleccionan de

manera independiente: R1 es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, anillo carbocíclico, anillo carbocíclico sustituido, arilo, arilo sustituido, heterociclilo o heterociclilo sustituido; dichos sustituyentes en el alquilo sustituido, cicloalquilo, arilo o heterociclilo seleccionado del grupo que consiste en uno o más de hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heterociclilo, heterociclilo sustituido, -CN, -N3, -NH2, -NHalquilo, -NH-alquilo sustituido, -NH-arilo, -NH-arilo sustituido, -NHCO-alquilo, imino, alquilimino, alquilimino sustituido, arilimino, arilimino sustituido, hidroxilo, alcoxi, alcoxi

sustituido, ariloxi, ariloxi sustituido, carboxi, -CONH-alquilo, -CONH-alquilo sustituido,

R2 es arilo, arilo sustituido, heterociclilo o heterociclilo sustituido; dichos sustituyentes en el grupo arilo sustituido o heterociclilo sustituido se seleccionan del grupo que consiste en uno o más de hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, -CN, -N3, alcoxi, alcoxi sustituido, arilo, arilo sustituido, ariloxi, ariloxi sustituido, -O-heterociclilo, -O-heterociclilo sustituido, heterociclilo, heterociclilo sustituido, -CF3 y –OCF3;

X es un enlace directo o NH-

o una sal, éster, solvato, profármaco o estereoisómero farmacéuticamente aceptable de los mismos; inhiben la actividad de la tirosina cinasa de receptores del factor de crecimiento tales como HER2.

Una realización más de la invención se ilustra mediante un compuesto de Fórmula I o una sal, éster, solvato, profármaco o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que:

R1 es cicloalquilo o cicloalquilo sustituido, dichos sustituyentes en el cicloalquilo sustituido, seleccionados del grupo que consiste en uno o más de –OH, -NH2, -NHCN, =O, -NH-alquilSO2-alquilo, -NH-alquilaril-CO2-alquilo, -NHalquilarilCO2H, -NHalquilCO2H, -NHarilalquilCO2H, -NHalquilarilSO2NHCO-alquilo, -NHalquilaril-NH-alquilaril-SO2NHCO-alquilo, -NHalquilarilCONHSO2alquilo y –NHCO-alquilamino; R2 es arilo, arilo sustituido, heterociclilo o heterociclilo sustituido, dichos sustituyentes en el arilo o heterociclilo sustituido seleccionados del grupo que consiste en uno o más de hidrógeno, halógeno, alquilarilo o alquilarilo sustituido y

X es -NH-.

Una realización más de la invención se ilustra mediante un compuesto de Fórmula I o una sal, éster, solvato, profármaco o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que:

R1 es ciclohexilo o ciclohexilo sustituido, dichos sustituyentes en el cicloalquilo sustituido, seleccionados del grupo que consiste en uno o más de –OH, -NH2, -NHCN, =O, -NH-alquilSO2-alquilo, -NH-alquilaril-CO2-alquilo, -NHalquilarilCO2H, -NHalquilCO2H, -NHarilalquilCO2H, -NHalquilarilSO2NHCO-alquilo, -NHalquilaril-NH-alquilaril-SO2NHCO-alquilo, -NHalquilarilCONHSO2alquilo y –NHCO-alquilamino.

Una realización más de la invención se ilustra mediante un compuesto de Fórmula I o una sal, éster, solvato, profármaco o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que:

R1 es heterociclilo o heterociclilo sustituido. En una realización más de la invención, cuando R1 es heterociclilo o heterociclilo sustituido,

el grupo heterociclilo se selecciona del grupo que consiste en tiopirano, oxotetrahidrotiopirano, dioxotetrahidrotiopirano, 1-imino-1-oxotetrahidrotiopirano, 1-metilimino-1-oxotetrahidrotiopirano, azetidin-CO-alquilo y piperidin-CO-alquilamino.

En una realización más de la invención, R1 es -CONH-alquilo o CONH-alquilo. Los compuestos ilustrativos de la invención incluyen lo siguiente: (1,4-cis)-4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)

ciclohexanol; 1-(3-Fluorobencil)-N-(5-((1,4-cis)-4-aminociclohexiloxi)H-pirrolo[1.2-b]piridazin-4-il)-1Hindazol-5-amina; 1-(3-Fluorobencil)-N-(5-((1,4-trans)-4-aminociclohexiloxi)H-pirrolo[1.2-b]piridazin-4-il)-1H

indazol-5-amina; 5-((1,4-cis)-4-Aminociclohexiloxi)-N-(3-cloro-4-fluorofenil)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-4-amina; N-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-il)-5-((1,4-cis)-4-(2-(metilsulfonil)-etilamino)ciclohexiloxi)

pirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin-4-amina; N-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-il)-5-((1,4-trans)-4-(2-(metilsulfonil)-etilamino)ciclohexiloxi) pirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin-4-amina; Ácido 4-(((1,4-trans)-4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5iloxi)ciclohexilamino)metil)benzoico; Ácido 4-(((1,4-cis)-4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5iloxi)ciclohexilamino)metil)benzoico; Ácido 4-(((1,4-trans)-4-(4-(3-cloro-4-(piridin-2-ilmetoxi)fenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5iloxi)ciclohexilamino)metil)benzoico; Ácido 4-(((1,4-cis)-4-(4-(3-cloro-4-(piridin-2-ilmetoxi)fenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5iloxi)ciclohexilamino)metil)benzoico; Ácido 1-(4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi) ciclohexilamino)ciclopropanocarboxílico, isómero A y B; 4-(((1,4-trans)-4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi) ciclohexilamino)metil)-N-(metilsulfonil)benzamida; N-((1,4-cis)-4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi) ciclohexil)-2-aminoacetamida; N-((1,4-trans)-4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi) ciclohexil)-2-aminoacetamida; 1-(4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)piperidin-1il)-2-aminoetanona;

(1R,2R,5S)-y (1S,2S,5R)-5-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2f][1.2.4]triazin-5-iloxi)2-aminociclohexanol;

(1R,2R,5R)-y (1S,2S,5S)-5-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2f][1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-aminociclohexanol;

o una sal, éster, solvato, profármaco o estereoisómero farmacéuticamente aceptable de los mismos. Los compuestos de la presente invención presentan valores IC50 menores que 5 µM en uno o más de los ensayos de HER1, HER2 y HER4.

También se incluyen dentro del ámbito de la invención una composición farmacéutica que comprende al menos un compuesto de fórmula I como se describió anteriormente y un portador farmacéuticamente aceptable.

También se incluye un procedimiento para tratar enfermedades proliferativas, que comprende administrar a un mamífero con necesidad del mismo, una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto de fórmula I.

También se incluye un procedimiento para tratar o prevenir el cáncer, que comprende administrar a un mamífero con necesidad del mismo, una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto de fórmula I.

Lo siguiente son definiciones de términos que se pueden usar en la presente memoria descriptiva. La definición inicial proporcionada para un grupo o término en la presente memoria se aplica a ese grupo o término por toda la presente memoria descriptiva individualmente o como parte de otro grupo, a menos que se indique de otro modo.

El término “alquilo” se refiere a grupos hidrocarbonados no sustituidos de cadena lineal o ramificada de 1 a 20 átomos de carbono, de preferencia 1 a 7 átomos de carbono. La expresión “alquilo inferior” se refiere a grupos alquilo no sustituidos de 1 a 4 átomos de carbono.

El término “alquilo sustituido” se refiere a un grupo alquilo sustituido por ejemplo, por uno a cuatro sustituyentes, tales como, halo, hidroxi, alcoxi, oxo, alcanoílo, ariloxi, alcanoiloxi, amino, alquilamino, alquilamino sustituido, cicloalquilamino, cicloalquilamino sustituido, arilamino, arilamino sustituido, aralquilamino, aralquilamino sustituido, aminas disustituidas en que los 2 sustituyentes amino se seleccionan de alquilo, arilo o aralquilo; alcanoilamino, aroilamino, aralcanoilamino, alcanoilamino sustituido, arilamino sustituido, aralcanoilamino sustituido, tiol, alquiltio, ariltio, aralquiltio, alquiltiono, ariltiono, aralquiltiono, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, aralquilsulfonilo, sulfonamido, por ejemplo, SO2NH2, sulfonamido sustituido, nitro, ciano, carboxi, carbamilo, por ejemplo CONH2, carbamilo sustituido, por ejemplo CONH-alquilo, CONH-arilo, CONH-aralquilo o casos en que hay dos sustituyentes en el nitrógeno seleccionados de alquilo, arilo o aralquilo; alcoxicarbonilo, arilo, arilo sustituido, guanidino, heterociclilo, por ejemplo, indolilo, imidazolilo, furilo, tienilo, tiazolilo, pirrolidilo, piridilo, pirimidilo, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, homopiperazinilo y similares y heterociclilo sustituido. En el caso de que se indicara anteriormente donde está además sustituido el sustituyente será con alquilo, alcoxi, arilo o aralquilo.

El término “halógeno” o “halo” se refiere a flúor, cloro, bromo y yodo.

El término “arilo” se refiere a grupos hidrocarbonados aromáticos monocíclicos o bicíclicos con 6 a 12 átomos de carbono en la porción del anillo, tales como grupos fenilo, naftilo, bifenilo y difenilo, cada uno de los cuales puede estar sustituido.

El término “aralquilo” se refiere a un arilo o un grupo arilo sustituido unido directamente a través de un grupo alquilo, tal como bencilo.

El término “arilo sustituido” se refiere a un grupo arilo sustituido, por ejemplo, por uno a cuatro sustituyentes tales como alquilo, alquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, arilo, arilo sustituido, aralquilo, halo, trifluorometoxi, trifluorometilo, hidroxi, alcoxi, alcanoílo, alcanoiloxi, ariloxi, aralquiloxi, amino, alquilamino, arilamino, aralquilamino, dialquilamino, alcanoilamino, tiol, alquiltio, ureido, nitro, ciano, carboxi, carboxialquilo, carbamilo, alcoxicarbonilo, alquiltiono, ariltiono, arilsulfonilamina, ácido sulfónico, alquilsulfonilo, sulfonamido, ariloxi y similares. El sustituyente puede estar además sustituido por hidroxi, halo, alquilo, alcoxi, alquenilo, alquinilo, arilo o aralquilo.

El término “heteroarilo” se refiere a un grupo aromático opcionalmente sustituido por ejemplo, que es un sistema de anillos monocíclico de 4 a 7 miembros, bicíclico de 7 a 11 miembros o tricíclico de 10 a 15 miembros, que tiene al menos un heteroátomo y al menos un anillo que contiene átomos de carbono, por ejemplo, piridina, tetrazol, indazol.

El término “alquenilo” se refiere a grupos hidrocarbonados de cadena lineal o ramificada de 2 a 20 átomos de carbono, de preferencia 2 a 15 átomos de carbono y lo más de preferencia 2 a 8 átomos de carbono, teniendo de uno a cuatro dobles enlaces.

El término “alquenilo sustituido” se refiere a un grupo alquenilo sustituido, por ejemplo, por uno a dos sustituyentes tales como halo, hidroxi, alcoxi, alcanoílo, alcanoiloxi, amino, alquilamino, dialquilamino, alcanoilamino, tiol, alquiltio, alquiltiono, alquilsulfonilo, sulfonamido, nitro, ciano, carboxi, carbamilo, carbamilo sustituido, guanidino, indolilo, imidazolilo, furilo, tienilo, tiazolilo, pirrolidilo, piridilo, pirimidilo y similares.

El término “alquinilo” se refiere a grupos hidrocarbonados de cadena lineal o ramificada de 2 a 20 átomos de carbono, de preferencia 2 a 15 átomos de carbono y lo más de preferencia 2 a 8 átomos de carbono, teniendo de uno a cuatro triples enlaces.

El término “alquinilo sustituido” se refiere a un grupo alquinilo sustituido, por ejemplo, por un sustituyente tal como halo, hidroxi, alcoxi, alcanoílo, alcanoiloxi, amino, alquilamino, dialquilamino, alcanoilamino, tiol, alquiltio, alquiltiono, alquilsulfonilo, sulfonamido, nitro, ciano, carboxi, carbamilo, carbamilo sustituido, guanidino y heterociclilo, por ejemplo, imidazolilo, furilo, tienilo, tiazolilo, pirrolidilo, piridilo, pirimidilo y similares.

El término “cicloalquilo” se refiere a un sistema de anillos hidrocarbonado cíclico saturado, opcionalmente sustituido, que contiene de preferencia 1 a 3 anillos y 3 a 7 carbonos por anillo que se pueden condensar además con un anillo carbocíclico C3-C7 insaturado. Los grupos ejemplares incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, ciclodecilo, ciclododecilo y adamantilo. Los sustituyentes ejemplares incluyen uno o más grupos alquilo como se describió anteriormente o uno o más grupos descritos anteriormente como sustituyentes alquilo.

Los términos “heterociclo”, “heterocíclico” y “heterociclilo” se refieren a un grupo cíclico aromático o no aromático, completamente saturado o insaturado, opcionalmente sustituido, por ejemplo, que es un sistema de anillos monocíclico de 4 a 7 miembros, bicíclico de 7 a 11 miembros o tricíclico de 10 a 15 miembros, que tiene al menos un heteroátomo en al menos un anillo que contiene átomos de carbono. Cada anillo del grupo heterocíclico que contiene un heteroátomo puede tener 1, 2 ó 3 heteroátomos seleccionados de átomos de nitrógeno, átomos de oxígeno y átomos de azufre, donde los heteroátomos de nitrógeno y azufre también se pueden oxidar opcionalmente y los heteroátomos de nitrógeno también se pueden cuaternizar opcionalmente. El grupo heterocíclico puede estar unido a cualquier heteroátomo o átomo de carbono.

Los grupos heterocíclicos monocíclicos ejemplares incluyen pirrolidinilo, pirrolilo, indolilo, pirazolilo, oxetanilo, pirazolinilo, imidazolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, oxazolilo, oxazolidinilo, isoxazolinilo, isoxazolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, tiazolidinilo, isotiazolilo, isotiazolidinilo, furilo, tetrahidrofurilo, tienilo, oxadiazolilo, piperidinilo, piperazinilo, 2oxopiperazinilo, 2-oxopiperidinilo, homopiperazinilo, 2-oxohomopiperazinilo, 2-oxopirrolidinilo, 2-oxazepinilo, azepinilo, 4-piperidonilo, piridilo, N-oxo-piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, tetrahidropiranilo, morfolinilo, tiamorfolinilo, tiamorfolinilsulfóxido, tiamorfolinilsulfona, 1,3dioxolano y tetrahidro-1,1-dioxotienilo, dioxanilo, isotiazolidinilo, tietanilo, tiiranilo, triazinilo y triazolilo y similares.

Los grupos heterocíclicos bicíclicos ejemplares incluyen: 2,3-dihidro-2-oxo-1H-indolilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, benzotienilo, quinuclidinilo, quinolinilo, quinolinil-N-óxido, tetrahidroisoquinolinilo, isoquinolinilo, bencimidazolilo, benzopiranilo, indolizinilo, benzofurilo, cromonilo, cumarinilo, cinolinilo, quinoxalinilo, indazolilo, pirrolopiridilo, furopiridinilo, (tal como furo[2.3-c]piridinilo, furo[3.1-b]piridinil] o furo[2.3-b]piridinilo), dihidroisoindolilo, dihidroquinazolinilo (tal como 3,4-dihidro-4-oxo-quinazolinilo), benzisotiazolilo, benzisoxazolilo, benzodiazinilo, benzofurazanilo, benzotiopiranilo, benzotriazolilo, benzpirazolilo, dihidrobenzofurilo, dihidrobenzotienilo, dihidrobenzotiopiranilo, dihidrobenzotiopiranilsulfona, dihidrobenzopiranilo, indolinilo, indazolilo, isocromanilo, isoindolinilo, naftiridinilo, ftalazinilo, piperonilo, purinilo, piridopiridilo, quinazolinilo, tetrahidroquinolinilo, tienofurilo, tienopiridilo, tienotienilo y similares.

Los sustituyentes ejemplares incluyen uno o más grupos alquilo o aralquilo como se describió anteriormente o uno o más grupos descritos anteriormente como sustituyentes alquilo.

También se incluyen heterociclilos más pequeños tales como epóxidos y aziridinas.

El término “anillo carbocíclico” se refiere a anillos hidrocarbonados monocíclicos saturados o parcialmente insaturados, estables, de 3 a 7 átomos de carbono tales como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y cicloheptilo. El término “opcionalmente sustituido” cuando se refiere a “anillo carbocíclico” en la presente memoria indica que el anillo carbocíclico puede estar sustituido en una o más posiciones del anillo sustituibles por uno o más grupos seleccionados independientemente de alquilo (de preferencia alquilo inferior), alcoxi (de preferencia alcoxi inferior), nitro, monoalquilamino (de preferencia un alquilamino inferior), dialquilamino (de preferencia un dialquilamino inferior), ciano, halo, haloalquilo (de preferencia trifluorometilo), alcanoílo, aminocarbonilo, monoalquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, alquilamido (de preferencia alquilamido inferior), alcoxialquilo (de preferencia un [alcoxi inferior][ alquilo inferior]), alcoxicarbonilo (de preferencia un alcoxicarbonilo inferior), alquilcarboniloxi (de preferencia un alquilcarboniloxi inferior) y arilo (de preferencia fenilo), estando dicho arilo opcionalmente sustituido por grupos halo, alquilo inferior y alcoxi inferior.

El término “heteroátomos” incluirá oxígeno, azufre y nitrógeno.

Los compuestos de fórmula I pueden formar sales que estén también dentro del alcance de esta invención. Se prefieren sales farmacéuticamente aceptables (es decir, fisiológicamente aceptables, no tóxicas), aunque también son útiles otras sales, por ejemplo, en el aislamiento o purificación de los compuestos de esta invención.

Los compuestos de fórmula I pueden formar sales con metales alcalinos tales como sodio, potasio y litio, con metales alcalino-térreos tales como calcio y magnesio, con bases orgánicas tales como diciclohexilamina, tributilamina, piridina y aminoácidos tales como arginina, lisina y similares. Dichas sales se pueden formar como saben los expertos en la materia.

Los compuestos para la fórmula I pueden formar sales con una variedad de ácidos orgánicos e inorgánicos. Dichas sales incluyen las formadas con cloruro de hidrógeno, bromuro de hidrógeno, ácido metanosulfónico, ácido sulfúrico, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido oxálico, ácido maleico, ácido bencenosulfónico, ácido toluenosulfónico y otros varios (por ejemplo, nitratos, fosfatos, boratos, tartratos, citratos, succinatos, benzoatos, ascorbatos,

salicilatos y similares). Dichas sales se pueden formar como saben los expertos en la materia.

Además, se pueden formar zwitteriones (“sales internas”).

Se consideran todos los estereoisómeros de los compuestos de la presente invención o mezclados o en forma pura o sustancialmente pura. La definición de compuestos de acuerdo con la invención incluye todos los posibles estereoisómeros y sus mezclas. Se prefieren en particular las formas racémicas y los isómeros ópticos aislados con la actividad especificada. Las formas racémicas se pueden resolver por procedimientos físicos, tales como, por ejemplo, cristalización fraccionada, separación o cristalización de derivados diastereómeros o separación por cromatografía en columna quiral. Los isómeros ópticos individuales se pueden obtener de los racematos a partir de los procedimientos convencionales tales como, por ejemplo, formación de sales con un ácido óptimamente activo seguido por cristalización.

Los compuestos de la fórmula I pueden tener también formas de profármacos. Todo compuesto que se convierta in vivo para proporcionar el agente bioactivo (es decir, el compuesto para fórmulas I) es un profármaco dentro del alcance y espíritu de la invención.

Diversas formas de profármacos son conocidas en la técnica. Para ejemplos de dichos derivados de profármacos, véanse:

a) Design of Prodrugs, en edición de H. Bundgaard, (Elsevier, 1.985) y Methods in

Enzymology, Vol. 112, pág. 309-396, en edición de K. Widder et al. (Academic Press, 1.985);

b) A Textbook of Drud Design and Development, en edición de Krosgaard-Larsen y H.

Bundgaard, Capítulo 5, “Design and Application of Prodrugs” por H. Bundgaard, pág. 113-191

(1.991);

c) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1.992);

Se debería entender además que los solvatos (por ejemplo, hidratos) de los compuestos de fórmula I están también en el alcance de la presente invención. Los procedimientos de solvatación son generalmente conocidos en la técnica.

La presente invención se basa en el descubrimiento de que ciertas pirrolotriazinas son inhibidores de proteínas cinasas. Más específicamente, las pirrolotriazinas tales como las descritas en esta invención inhiben la actividad de la proteína tirosina cinasa de miembros de la familia HER de receptores. Estos inhibidores serán útiles en el tratamiento de enfermedades proliferativas que son dependientes de la señalización por uno o más de estos receptores. Dichas enfermedades incluyen soriasis, artritis reumatoide y tumores sólidos del pulmón, cabeza y cuello, mama, colon, ovario y próstata. La invención se refiere a una composición farmacéutica de compuesto de fórmula I o sal o hidrato del mismo farmacéuticamente aceptable y un portador farmacéuticamente aceptable en el tratamiento de trastorno hiperproliferativo en mamíferos. En particular, se espera que dicha composición farmacéutica inhiba el crecimiento de esos tumores sólidos primarios y recurrentes que están asociados a HER1 (receptor de EGF) y HER2, especialmente los tumores que dependen significativamente de HER1 o HER2 para su crecimiento y extensión, incluyendo por ejemplo, tumores malignos de la vejiga, de células escamosas, de cabeza, colorectal, de esófago, ginecológicos (tal como ovario), de páncreas, mama, próstata, vulva, piel, cerebro, tracto genitourinario, sistema linfático (tal como tiroides), estómago, laringe y pulmón. En otra realización, los compuestos de la presente invención también son útiles en el tratamiento de trastornos no cancerosos tales como soriasis y artritis reumatoide.

Así, según un aspecto más de la invención se proporciona el uso de un compuesto de la fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la fabricación de un medicamento para uso en la producción de un efecto antiproliferativo en una especie de mamífero tal como un ser humano.

De acuerdo con una característica más de la invención se proporciona un procedimiento para producir un efecto antiproliferativo en una especie de mamífero tal como un ser humano, con necesidad de ese tratamiento que comprende administrar a dicho animal una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como se definió anteriormente en la presente memoria.

Debido a su capacidad para inhibir las cinasas HER1, HER2 y HER4, se pueden usar compuestos de la presente invención para el tratamiento de enfermedades proliferativas incluyendo soriasis y cáncer. Se ha demostrado que la cinasa del receptor HER1 se expresa y se activa en muchos tumores sólidos incluyendo cáncer de cabeza y cuello, de próstata, de pulmón de células no microcíticas, colorectal y de mama. Similarmente, se ha demostrado que la cinasa del receptor HER2 se sobreexpresa en el cáncer de mama, de ovario, de pulmón y gástrico. Los anticuerpos monoclonales que regulan hacia abajo la abundancia del receptor HER2 o inhiben la señalización por el receptor HER1 han mostrado eficacia antitumoral en estudios preclínicos y clínicos. Se espera por lo tanto que los inhibidores de las cinasas HER1 y HER2 tendrán eficacia en el tratamiento de tumores que dependen de la señalización de cualquiera de los dos receptores. Además, estos compuestos tendrán eficacia en la inhibición de tumores que cuenten con la señalización de heterodímero de receptor HER. Se espera que estos compuestos tengan eficacia o como agente solo o en asociación (simultáneamente o secuencialmente) con otros agentes quimioterapéuticos tales como Taxol, adriamicina y cisplatino.

Puesto que se ha demostrado que la señalización de HER1 y HER2 regula la expresión de factores angiogénicos tales como factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) e interleucina 8 (IL8), se espera que estos compuestos presenten eficacia antitumoral resultante de la inhibición de angiogénesis además de la inhibición de proliferación celular tumoral y supervivencia. Se ha demostrado que el receptor HER2 está implicado en la hiperproliferación de células sinoviales en artritis reumatoide y puede contribuir al componente angiogénico de esa condición patológica inflamatoria. Se espera por lo tanto que los inhibidores descritos en esta invención presenten eficacia en el tratamiento de la artritis reumatoide. La capacidad de estos compuestos para inhibir HER1 ayuda además a su uso como agentes antiangiogénicos. Véanse los siguientes documentos y referencias citadas en los mismos: Schlessinger J., “Cell signaling by receptor tyrosine kinases”, Cell 103 (2), pág. 211-225 (2.000); Cobleigh, M. A:, Vogel, C. L., Tripathy, D., Robert, N. J. Scholl, S., Fehrenbacher, L., Wolter, J. M., Paton, V., Shak, S., Lieberman, G., y Slamon, D. J., “Multinational study of the efficacy and safety of humanized anti-HER2 monoclonal antibody in women who have HER2-overexpressing metastatic breast cancer that has progressed after chemotherapy for metastatic disease”, J. de Clin. Oncol. 17 (9), pág. 2.639-2.648 (1.999); Baselga, J., Pfister, D., Cooper, M. R., Cohen, R., Burtness, B., Bos. M., D’Andrea G., Seidman, A., Norton, L., Gunnett, K., Falcey, J., Anderson, V., Waksal, H., y Mendelsohn, J., “Phase I studies of anti-epidermal growth factor receptor chimeric antibody C225 alone and in combination with cisplatin”, J. Clin. Oncol, 18 (4), pág. 904-914 (2.000); Satoh, K, Kikuchi, S., Sekimata, M., Kabuyama Y., Homma, M. K. y Homma Y., “Involvement of ErbB-2 in rheumatoid synovial cell growth”, Arthritis Rheum. 44 (2), pág. 260-265 (2.001).

El tratamiento antiproliferativo definido en la presente memoria anteriormente se puede aplicar como único tratamiento o puede implicar además de un compuesto de la invención, otra u otras sustancias más y/o tratamientos. Dicho tratamiento se puede conseguir por medio de la administración simultánea, secuencial o separada de los componentes individuales del tratamiento. Los compuestos de esta invención también pueden ser útiles en asociación con agentes y tratamientos anticáncer y citotóxicos conocidos, incluyendo radiación. Si se formula como una dosis fija, dichos productos de asociación emplean los compuestos de esta invención dentro del intervalo de administración descrito anteriormente y el otro agente farmacéuticamente activo dentro de su intervalo de administración homologado. Se pueden usar compuestos de la fórmula I secuencialmente con agentes y tratamiento anticáncer o citotóxicos conocidos, incluyendo radiación cuando no es apropiada una formulación de asociación.

En el campo de la oncología médica es práctica normal usar una asociación de diferentes formas de tratamiento para tratar a cada paciente con cáncer. En la oncología médica el otro o los otros componentes de cada tratamiento asociado además del tratamiento antiproliferativo definido en la presente memoria anteriormente pueden ser: cirugía, radioterapia o quimioterapia. Dicha quimioterapia puede cubrir tres categorías principales de agente terapéutico:

(i)

agentes antiangiogénicos que actúan por diferentes mecanismos de los definidos anteriormente (por ejemplo, linomida, inhibidores de la función de integrina αvβ3, angiostatina, razoxano);

(ii)

agentes citostáticos tales como antiestrógenos (por ejemplo, tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno, yodoxifeno), progestógenos (por ejemplo, acetato de megestrol), inhibidores de aromatasa (por ejemplo, anastrozol, letrozol, borazol, exemestano), antihormonas, antiprogestógenos, antiandrógenos (por ejemplo, flutamida, nilutamida, bicalutamida, acetato de ciproterona), agonistas y antagonistas de LHRH (por ejemplo, acetato de goserelina, leuprolida), inhibidores de testosterona 5α-dihidroreductasa (por ejemplo, finasterida), inhibidores de la farnesiltransferasa, agentes antiinvasión (por ejemplo, inhibidores de la metaloproteinasa como marimastat e inhibidores de la función del receptor del activador de plasminógeno urocinasa) e inhibidores de la función del factor de crecimiento (tales factores de crecimiento incluyen por ejemplo, EGF, FGF, factor de crecimiento procedente de las plaquetas y factor de crecimiento de hepatocitos tales inhibidores incluyen anticuerpos de factor de crecimiento, anticuerpos de receptores de factor de crecimiento tales como Avastin® (bevacizumab) y Erbitux® (cetuximab); inhibidores de la tirosina cinasa e inhibidores de serina/treonina cinasa) y

(iii) fármacos antiproliferativos/antineoplásicos y asociaciones de los mismos, cuando se usen en ontología médica, como antimetabolitos (por ejemplo, antifolatos como metotrexato, fluoropirimidinas como análogos de 5-fluorouracilo, purina y adenosina, arabinósido de citosina); antibióticos antitumorales intercaladores (por ejemplo antraciclinas como doxorubicina, daunomicina, epirubicina e idarubicina, mitomicina-C, dactinomicina, mitramicina); derivados de platino (por ejemplo cisplatino, carboplatino); agentes alquilantes (por ejemplo mostaza de nitrógeno, melfalano, clorambucilo, busulfano, ciclofosfamida, ifosfamida nitrosoureas, tiotepa; agentes antimitóticos (por ejemplo alcaloides de la vinca como vincristina y taxoides como Taxol® (paclitaxel), Taxotere® (docetaxel) y agentes microtubulares más nuevos tales como análogos de epotilona, análogos de discodermolida y análogos de eleuterobina); inhibidores de la topoisomerasa (por ejemplo epipodofilotoxinas como etopósido y tenipósido, amsacrina, topotecán); inhibidores del ciclo celular; modificadores de la respuesta biológica e inhibidores del proteasoma tales como Velcade® (bortezomib).

Como se indicó anteriormente, los compuestos de fórmula I de la presente invención son de interés por sus efectos antiproliferativos. Se espera que dichos compuestos de la invención sean útiles en un amplio intervalo de condiciones patológicas incluyendo cáncer, soriasis y artritis reumatoide.

Más específicamente, los compuestos de fórmula I son útiles en el tratamiento de una variedad de tumores malignos, incluyendo (pero no limitándose a) lo siguiente:

-carcinoma, incluyendo el de vejiga, mama, colon, riñón, hígado, pulmón, incluyendo cáncer

de pulmón microcítico, esófago, vesícula biliar, ovario, páncreas, estómago, cérvix, tiroides,

próstata y piel, incluyendo carcinoma de células escamosas;

-tumores de origen mesenquimatoso, incluyendo fibrosarcoma y rabdomiosarcoma;

-tumores del sistema nervioso central y periférico, incluyendo astrocitoma, neuroblastoma,

glioma y schwannomas y

-otros tumores, incluyendo melanoma, seminoma, teratocarcinoma y osteosarcoma.

Debido al papel clave de las cinasas en la regulación de la proliferación celular en general, los inhibidores podían actuar como agentes citostáticos reversibles que pueden ser útiles en el tratamiento de cualquier proceso de enfermedad que caracterice proliferación celular anormal por ejemplo, hiperplasia de próstata benigna, poliposis de adenomatosis familiar, neurofibromatosis, fibrosis pulmonar, artritis, soriasis, glomerulonefritis, reestenosis después de angioplastia o cirugía vascular, formación de cicatriz hipertrófica y enfermedad del intestino inflamado.

Los compuestos de fórmula I son útiles en especial en el tratamiento de tumores con una alta incidencia de actividad de la tirosina cinasa, tales como los tumores de colon, pulmón y pancreáticos. Mediante la administración de una composición (o una asociación) de los compuestos de esta invención, se reduce el desarrollo de tumores en un huésped mamífero.

Los compuestos de fórmula I también pueden ser útiles en el tratamiento de enfermedades distintas del cáncer que pueden estar asociadas a las rutas de transducción de señales que operen a través de los receptores de factor de crecimiento tales como HER1 (receptor EGF), HER2 o HER4.

Los compuestos de esta invención se pueden formular con un vehículo o diluyente farmacéutico para administración oral, intravenosa o subcutánea. La composición farmacéutica se puede formular de una manera clásica usando vehículos sólidos o líquidos, diluyentes y aditivos apropiados para el modo de administración deseado. Oralmente, los compuestos se pueden administrar en la forma de comprimidos, cápsulas, gránulos, polvos, suspensiones y similares. Los compuestos se pueden administrar en un intervalo de administración de aproximadamente 0,05 a 300 mg/kg/día, de preferencia menor que 200 mg/kg/día, en una sola dosis o en 2 a 4 dosis divididas.

Las composiciones farmacéuticas de la presente invención que contienen el ingrediente activo pueden estar en una forma adecuada para uso oral, por ejemplo, como comprimidos, comprimidos medicinales, pastillas, suspensiones acuosas u oleosas, polvos o gránulos dispersables, emulsiones, cápsulas blandas o duras o jarabes o elixires. Las composiciones destinadas a uso oral se pueden preparar de acuerdo con cualquier procedimiento conocido en la técnica para la fabricación de composiciones farmacéuticas y dichas composiciones pueden contener uno o más agentes seleccionados del grupo que consiste en agentes edulcorantes, agentes saborizantes, colorantes y conservantes para proporcionar preparaciones farmacéuticamente elegantes y apetitosas. Los comprimidos contienen el ingrediente activo mezclado con excipientes farmacéuticamente aceptables no tóxicos que son adecuados para la fabricación de comprimidos. Estos excipientes pueden ser, por ejemplo, diluyentes inertes, tales como carbonato de calcio, carbonato sódico, lactosa, fosfato de calcio o fosfato de sodio; agentes de granulación y disgregantes, por ejemplo, celulosa microcristalina, croscarmelosa de sodio, almidón de maíz o ácido algínico; agentes aglutinantes, por ejemplo almidón, gelatina, polivinilpirrolidona o goma arábiga y agentes lubricantes, por ejemplo, estearato de magnesio, ácido esteárico o talco. Los comprimidos pueden no estar revestidos o pueden estar revestidos mediante técnicas conocidas para enmascarar el sabor desagradable del fármaco o retrasar la disgregación y absorción en el tubo digestivo y proporcionar de ese modo una acción prolongada durante un periodo más prolongado. Por ejemplo, se puede emplear un material enmascarante del sabor soluble en agua tal como hidroxipropilmetilcelulosa o hidroxipropilcelulosa o un material de retardo del tiempo tal como etilcelulosa, acetato butirato de celulosa.

Las formulaciones para uso oral también se pueden presentar como cápsulas de gelatina dura en las que el ingrediente activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolín o como cápsulas de gelatina blandas en las que el ingrediente activo se mezcla con un portador soluble en agua tal como polietilenglicol o un medio oleoso, por ejemplo aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de oliva.

Las suspensiones acuosas contienen el material activo mezclado con excipientes adecuados para la fabricación de suspensiones acuosas. Dichos excipientes son agentes de suspensión, por ejemplo carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato de sodio, polivinilpirrolidona, goma tragacanto y goma arábiga; agentes dispersantes o humectantes pueden ser una fosfatida que se encuentre en la naturaleza, por ejemplo lecitina o productos de condensación de un óxido de alquileno con ácidos grasos, por ejemplo estearato de polioxietileno o productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alifáticos de cadena larga, por ejemplo, heptadecaetileno-oxicetanol o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales procedentes de ácidos grasos y un hexitol tal como monooleato de polioxietileno sorbitol o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales procedentes de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, por ejemplo monooleato de polietileno sorbitán. Las suspensiones acuosas también pueden contener uno o más conservantes, por ejemplo p-hidroxibenzoato de etilo o n-propilo, uno o más colorantes, uno o más saborizantes y uno o más edulcorantes, tales como sacarosa, sacarina o aspartamo.

Las suspensiones oleosas se pueden formular mediante la suspensión del ingrediente activo en un aceite vegetal, por ejemplo aceite de maní, aceite de oliva, aceite de sésamo o aceite de cacahuete o en aceite de parafina tal como parafina líquida. Las suspensiones oleosas pueden contener un agente espesante, por ejemplo, cera de abeja, parafina dura o alcohol cetílico. Se pueden añadir edulcorantes tales como los indicados anteriormente y saborizantes para proporcionar una preparación oral apetitosa. Estas composiciones se pueden conservar mediante la adición de un antioxidante tal como hidroxianisol butilado o alfatocoferol.

Polvos y gránulos dispersables adecuados para la preparación de una suspensión acuosa por adición de agua proporciona el ingrediente activo mezclado con un agente dispersante o humectante, agente de suspensión y uno o más conservantes. Los agentes dispersantes o humectantes adecuados y los agentes de suspensión se ejemplifican por los ya mencionados anteriormente. También pueden estar presentes excipientes adicionales, por ejemplo edulcorantes, saborizantes y colorantes. Estas composiciones se pueden conservar mediante la adición de un antioxidante tal como ácido ascórbico.

Las composiciones farmacéuticas de la invención también pueden estar en forma de emulsiones de aceite en agua. La fase oleosa puede ser un aceite vegetal, por ejemplo aceite de oliva o aceite de maní o un aceite de parafina, por ejemplo parafina líquida o mezclas de éstos. Agentes emulsionantes adecuados pueden ser fosfatidas que se encuentren en la naturaleza, por ejemplo lecitina de soja y ésteres o ésteres parciales procedentes de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, por ejemplo monooleato de sorbitán y productos de condensación de dichos ésteres parciales con óxido de etileno, por ejemplo monooleato de polioxietileno sorbitán. Las emulsiones pueden contener también edulcorantes, saborizantes, conservantes y antioxidantes.

Se pueden formular jarabes y elixires con agentes edulcorantes, por ejemplo glicerol, propilenglicol, sorbitol o sacarosa. Dichas formulaciones también pueden contener un demulcente, un conservante, agentes saborizantes y colorantes y antioxidante.

Las composiciones farmacéuticas pueden estar en forma sólida de disoluciones acuosas inyectables estériles. Entre los vehículos y disolventes aceptables que se pueden emplear están agua, disolución de Ringer y disolución isotónica de cloruro de sodio.

La preparación inyectable estéril también puede ser una microemulsión de aceite en agua inyectable estéril en el caso de que el ingrediente activo se disuelva en la fase oleosa. Por ejemplo, el ingrediente activo se puede disolver primero en una mezcla de aceite de soja y lecitina. La disolución oleosa se introduce después en una mezcla de agua y glicerol y se trata para formar una microemulación.

Las disoluciones inyectables o microemulsiones se pueden introducir en el torrente circulatorio de un paciente por inyección intravenosa rápida local. Alternativamente, se puede administrar ventajosamente la disolución o microemulsión de tal manera que se mantenga una concentración de circulación constante del compuesto inmediato. Para mantener dicha concentración constante, se puede utilizar un dispositivo de suministro intravenoso continuo. Un ejemplo de dicho dispositivo es la bomba intravenosa modelo 5400 de Deltec CADDPLUS.TM.

Las composiciones farmacéuticas pueden estar en la forma de una suspensión acuosa u oleaginosa inyectable estéril para administración intramuscular y subcutánea. Esta suspensión se puede formular de acuerdo con la técnica conocida usando los agentes dispersantes o humectantes y los agentes de suspensión adecuados que se han mencionado anteriormente. La preparación inyectable estéril también puede ser una disolución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o disolvente parenteralmente aceptable no tóxico, por ejemplo como disolución en 1,3-butanodiol. Además, se emplean convencionalmente aceites fijados estériles como disolvente o medio de suspensión. Para este fin se puede emplear cualquier aceite fijado suave incluyendo mono o diglicéridos sintéticos. Además, los ácidos grasos tales como ácido oleico encuentran uso en la preparación de inyectables.

También se pueden administrar compuestos de Fórmula I en la forma de supositorios para administración rectal del fármaco. Estas composiciones se pueden preparar mezclando el fármaco con un excipiente no irritante adecuado que sea sólido a temperaturas ordinarias pero líquido a la temperatura rectal y se fundirá por lo tanto en el recto para liberar el fármaco. Dichos materiales incluyen manteca de cacao, gelatina glicerinada, aceites vegetales hidrogenados, mezclas de polietilenglicoles de diversos pesos moleculares y ésteres de ácidos grasos de polietilenglicol.

Para uso tópico, se emplean cremas, pomadas, gelatinas, disoluciones o suspensiones, etc., que contienen el compuesto de Fórmula I. (Para los fines de esta solicitud, la aplicación tópica incluirá lavados bucales y gárgaras).

Los compuestos para la presente invención se pueden administrar en forma intranasal mediante uso tópico de vehículos y dispositivos de distribución intranasales adecuados o mediante rutas transdérmicas, usando las formas de parches cutáneos transdérmicos conocidos por los expertos en la materia. Para administrar en forma de sistema de distribución transdérmico, la administración de la dosis será, por supuesto, continua más bien que intermitente por toda la pauta posológica. Los compuestos de la presente invención también se pueden suministrar como supositorios que emplean bases tales como manteca de cacao, gelatina glicerinada, aceites vegetales hidrogenados, mezclas de polietilenglicoles de diversos pesos moleculares y ésteres de ácidos grasos de polietilenglicol.

Cuando se administra un compuesto de acuerdo con esta invención a un individuo humano, la dosis diaria la determinará normalmente el médico que la prescribe variando la dosis generalmente de acuerdo con la edad, el peso, el sexo y la respuesta del paciente individual, así como la importancia de los síntomas del paciente.

Si se formula como dosis fija, dichos productos de asociación emplean los compuestos de esta invención dentro del intervalo de administración descrito anteriormente y el otro agente farmacéuticamente activo o tratamiento dentro de su intervalo de administración homologado. También se pueden administrar los compuestos de fórmula I de manera secuencial con agentes anticáncer o citotóxicos conocidos cuando sea inapropiada una formulación de asociación. La invención no está limitada en la secuencia de administración; se pueden administrar compuestos de fórmula I o previamente a o después de administración del agente o de los agentes anticáncer o citotóxicos conocidos.

Los compuestos se pueden administrar en un intervalo de administración de aproximadamente 0,05 a 200 mg/kg/día, de preferencia menos de 100 mg/kg/día, en una sola dosis o en 2 a 4 dosis divididas. Ensayos de Cinasa HER1, HER2 o HER4:

Se ensayaron compuestos de interés en un tampón de cinasa que contenía Tris 20 mM, HCl pH 7,5, MnCl2 10 mM, ditiotreitol 0,5 mM, albúmina de suero bovino a 0,1 mg/ml, poli(glu/tyr, 4:1) a 0,1 mg/ml, ATP 1 µM y ATP [γ-33P] 4 µCi/ml. Poli(glu/tyr, 4:1) es un polímero sintético que sirve como aceptor de fosforilo y se adquiere en Sigma Chemicals. La reacción de la cinasa se inicia mediante la adición de enzima y se incubaron las mezclas de reacción a 26ºC durante 1

h. La reacción se termina mediante la adición de AEDT a 50 mM y se precipitan proteínas mediante la adición de ácido tricloroacético al 5%. Las proteínas precipitadas se recuperan por filtración sobre placas Packard Unifilter y se mide la cantidad de radiactividad incorporada en un contador de centelleo Topcount.

Para la preparación de HER1 y HER4 recombinantes, las secuencias citoplasmáticas de los receptores se expresaron en células de insectos como proteínas de fusión GST, que se purificaron por cromatografía de afinidad. La secuencia citoplásmica de HER2 se subclonó en el vector de expresión de baculovirus pBlueBac4 (Invitrogen) y se expresó como una proteína no etiquetada en células de insectos. La proteína recombinante se purificó parcialmente por cromatografía de intercambio iónico.

Los compuestos inmediatos presentan cinasas HER1, HER2 y HER4 con valores de IC50

5 entre 0,001-5,0 µM. Los compuestos preferidos presentan valores de IC50 entre 0,001-5,0 µM. Compuestos más preferidos presentan valores de IC50 entre 0,001-0,1 µM. Los compuestos más preferidos presentan valores de IC50 entre 0,001-0,1 µM.

Se puede usar un ensayo de canales de potasio HERG para investigar en los compuestos la actividad de HERG (véase Caballero R, et al., Direct Effects of Candesartan and Eprosartan on

10 Human Cloned Potassium Channels Involved in Cardiac Repolarization, Molecular Pharmacology, Vol. 59, Nº 4, págs. 825-36; 2.001). De acuerdo con esto, los compuestos preferidos presentan actividad de ensayo de HERG inferior.

Ciertos compuestos de fórmula I se pueden preparar en general de acuerdo con los siguientes esquemas y el conocimiento de un experto en la materia. También se puede 15 encontrar información de la preparación adicional en la solicitud de patente de EE.UU. en tramitación con la presente, número de serie 09/573.829, presentada el 18 de mayo de 2.000 y las solicitudes internacionales publicadas bajo el Tratado de Cooperación en materia de Patentes (PCT), Publicación de Patente Internacional Número WO 00/71129 y Patente Internacional WO 03/042172, todas las cuales se incorporan por referencia en la presente

20 memoria.

Esquema I

imagen1

Etapa 1: La primera etapa del Esquema 1 implica la oxidación de la 5hidroximetilpirrolotriazina i (Ref. de patente internacional WO 03/042172 A2) al aldehído ii. Esto 25 se puede realizar con una variedad de agentes oxidantes, por ejemplo, dióxido de manganeso.

Etapa 2: El aldehído ii experimenta un reordenamiento de Bayer-Villiger (revisar: G. R. Krow, Organic Reactions, 1.993, 43, 251) con la hidrólisis concomitante del compuesto intermedio éster de formiato en el tratamiento con el oxidante apropiado para dar iii.

Etapa 3: El tratamiento de iii con una base tal como NaH en un disolvente anhidro tal como

5 DMF con el agente alquilante apropiado (por ejemplo, haluros de alquilo, sulfatos de dialquilo, triflatos de alquilo) da, después de la eliminación de los grupos protectores que estuvieran en el agente alquilante y/o después de la modificación o la elaboración adicional de grupos funcionales que estuvieran en este residuo, el producto final, iv. Alternativamente, la reacción de Mitsunobu (revisar: D. L. Hughes, Organic Reactions, 1.992, 42, 335) de iii con el alcohol

10 apropiado proporciona, después de la eliminación de los grupos protectores que hubiera en el agente alquilante y/o después de la modificación o elaboración adicional de grupos funcionales que hubiera en este residuo, el producto final, iv. Otras variantes de la reacción de Mitsunobu también se pueden usar para esto, por ejemplo, T. Tsunoda et al., Tetrahedron Lett. 1.995, 36,

2.529.

15 Esquema 2

imagen1

en el que E es un grupo éster y PO es un grupo hidroxi protegido e Y es un halógeno. Etapa 1: La primera etapa del Esquema 1, implica la protección del grupo 3-hidroxi de un éster del ácido 3-hidroxi-1H-pirrol-2-carboxílico v (T. Momose et al., Chem. Pharm. Bull., 1.978,

20 26, 2.224) para dar vi. Se pueden usar para esto diversos grupos alcohol protegidos, por ejemplo, arilsulfonatos o bencil éteres sustituidos. Estos grupos protectores están unidos por tratamiento de v con una base tal como diisopropiletilamina en un disolvente anhidro tal como DCM seguido por un haluro de arilsulfonilo o un anhídrido arilsulfónico o por tratamiento de v con una base tal como NaH en un disolvente anhidro tal como THF o DMF seguido por un

25 haluro de bencilo o un haluro de bencilo sustituido. Etapa 2: Esto implica tratar el pirrol vi con una base tal como t-butóxido de potasio o hidruro de sodio en un disolvente anhidro tal como THF o DMF seguido por un reactivo de aminación,

tal como O-(2,4-dinitro-fenil)-hidroxilamina (T. Sheradsky, J. Heterocyclic Chem., 1.967, 4, 413)

o cloraminas (I. P. Sword, J. Chem. Soc. C. 1.971, 820) para dar el 1-aminopirrol vii. Etapa 3: El 1-aminopirrol vii se calienta con formamida en exceso para dar la pirrolotriazinona viii.

5 Etapa 4: El compuesto viii se convierte en una 4-halo-pirrolotriazina ix por calentamiento con el oxihaluro de fósforo apropiado, por ejemplo, la 4-cloro-pirrolotriazina ix se obtiene por calentamiento de viii con oxicloruro de fósforo.

Etapa 5: El tratamiento de viii con la amina, alcohol o tiol apropiado en presencia de una base tal como NaHCO3 o trietilamina en un disolvente tal como acetonitrilo proporciona x. 10 Alternativamente, calentar una mezcla de viii y la amina apropiada en un disolvente alcohólico

o una mezcla de disolventes tal como la de un alcohol y 1,2-dicloroetano proporciona la sal de ácido (HX) de x. Etapa 6: La eliminación clásica del grupo protector de vi da la 5-hidroxipirroltriazina iii que se puede convertir en el producto final iv como se indicó en líneas generales en el Esquema 1.

15 Además, se pueden preparar otros compuestos de fórmula I usando procedimientos conocidos en general por los expertos en la materia. En particular, los siguientes ejemplos proporcionan procedimientos adicionales para la preparación de los compuestos de esta invención. A menos que se indique de otro modo, “Tiempo de Ret. de HPLC” es el tiempo de retención

20 de HPLC que se obtuvo en las siguientes condiciones: tipo de columna y longitud, tiempo en gradiente (a menos que se indique de otro modo, todos los gradientes empezaron con 100% de disolvente A y terminaron con 100% de disolvente B; para columnas Phenomenex Primeshpere, el disolvente A fue una mezcla de CH3CN : agua : NH4OAc 5,0 M = 1 : 9 : 0,005 y el disolvente B fue CH3CN : agua : NH4OAc 5,0 M = 9 : 1 : 0,005 para columnas YMC xterra, el

25 disolvente A fue una mezcla de MeOH : agua : TFA = 1 : 9 : 0,01 y el disolvente B fue MeOH : agua : TFA = 9 : 1 : 0,01), caudal (ml/min). La detección UV se realizó siempre a 220 nM. Ejemplo 1 4-(1-(3-(Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-F][1.2.4]triazin-5-ol

30

35

imagen1

Procedimiento A 1A. Preparación de 4-(1-(3-(Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin5-carbaldehído

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Una mezcla de MnO2 (2,78 g, 32,2 mmoles), (4-(1-(3-(fluorobencil)-1H-indazol-5ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-il)metanol (Ref patente internacional WO 2003043172 A2) (499 mg, 1,28 mmoles) en DCM seco (24 ml) en N2 se calentó a 30ºC durante 1,5 h. Se filtró la reacción por una almohadilla de celite pequeña para dar el producto (482 mg, 97%): RMN de 1H (CDCl3): 5,59 (s, 2H); 6,86 (m, 1H); 6,96 (m, 2H); 7,16 (m, 1H); 6,28 (m, 1H); 7,33 (m, 1H); 7,53 (m, 1H); 7,67 (m, 1H); 8,07 (s, 1H); 8,17 (s, 1H); 8,47 (m, 1H); 9,75 (s, 1H); MS: 387 (M+H)+; Tiempo de Ref. de HPLC: 2,57 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 3 min, 5 ml/min). 1B. 4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-ol

Se añadió ácido m-cloroperbenzoico sólido (64 mg, 70%, 0,26 mmoles) a una disolución enfriada con hielo de 1A (39 mg, 0,10 mmoles) en DCM (1,5 ml). Se añadió gota a gota una disolución de TFA (0,023 ml, 0,20 mmoles) en DCM (1 ml) y se dejó con agitación la reacción durante 5 h. Se diluyó con DCM y se lavó con una disolución ac. al 10% de NaHSO3, NaHCO3 ac. saturada, se secó (Na2SO4) y se retiraron los disolventes. La cromatografía radial sobre gel de sílice (elución con gradiente por etapas con 0 a 3% de una disolución metanólica de NH3 en DCM) proporcionó el producto (14 mg, 37%): RMN de 1H (DMSO-D6): 5,69 (s, 2H); 6,14 (m, 1H); 7,02 (m, 1H); 7,08 (m, 1H); 7,35 (m, 1H); 7,42 (m, 1H); 7,59 (m, 1H); 7,71 (m, 2H); 8,13 (s, 1H); 8,30 (m, 1H); 8,45 (s, 1H); MS: 375 (M+H)+; Tiempo de Ref. de HPLC: 1,13 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 2 min, 5 ml/min). Procedimiento B 1C. Preparación de 3-(tosiloxi)-1H-pirrol-2-carboxilato de Metilo Se añadió diisopropiletilamina (7,1 ml, 40,7 mmoles) y después una disolución de TsCl (6,46 g, 33,9 mmoles) en DCM seco (20 ml) a una disolución enfriada con hielo de 3-hidroxi-1Hpirrol-2-carboxilato de metilo (4,78 g, 33,9 mmoles) en DCM seco (80 ml) en una atmósfera de N2 seco. Después de 2 h, se retiró la reacción del baño y se dejó que se calentara a TA. Después de 2 h, esto se lavó con agua, se secó (Na2SO4) y se retiraron los disolventes para dejar 3-(tosiloxi)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (10 g) como un sólido. RMN de 1H (CDCl3): 2,39 (s, 3H); 3,64 (s, 3H); 6,06 (m, 1H); 6,75 (m, 1H); 7,26 (m, 2H); 7,71 (m, 2H); MS: 311 (M+H)+; Tiempo de Ref. de HPLC: 1,28 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 2 min, 5 ml/min). 1D. Preparación de 1-amino-3-(tosiloxi)-1H-pirrol-2-carboxilato de Metilo

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Se añadió 3-(tosiloxi)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo sólido (1,33 g, 4,50 mmoles) en porciones a una suspensión enfriada con hielo de NaH (60% en aceite de parafina, 234 mg, 5,85 mmoles) en DMF seco (15 ml) bajo una atmósfera de N2 seco. Cuando terminó la adición, se retiró la reacción del baño y se dejó con agitación a TA. Después de 1 h, se añadió una disolución de NH2Cl (59 ml; 0,1 M en Et2O preparado según J. Chem. Soc. C., 1.971, 824; 5,85 mmoles) y se dejó con agitación la reacción durante 1,3 h. Después se enfrió a –5ºC y se añadió lentamente una disolución acuosa de Na2S2O4 (20 ml; 1,0 M) durante 5 min. Se añadió agua (60 ml) y se retiró el baño. Después de 10 min., esto se extrajo con EtOAc (2 x 200 ml) y se lavaron los extractos orgánicos con salmuera y se secaron (Na2SO4). La eliminación de los disolventes seguida por cromatografía súbita sobre gel de sílice usando elución con gradiente por etapas (hexano : EtOAc de 100 : 0 a 70 : 30) proporcionó el compuesto del titulo (1,22 g, rendimiento del 88%) como un sólido. RMN de 1H (CDCl3): 2,39 (s, 2H); 3,62 (s, 3H); 5,44 (s, 2H); 5,76 (m, 1H); 6,73 (m, 1H); 7,26 (m, 2H); 7,66 (m, 2H); MS: 311 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,28 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 2 min, 5 ml/min).

1E. Preparación de 4-metilbencenosulfonato de 4-oxo-3,4-dihidropirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin-5-ilo.

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Una mezcla de 1-amino-3-(tosiloxi)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (13,65 g; 44,0 mmoles) y ácido fosfórico (862 mg; 8,8 mmoles) en formamida (44 ml) se calentó a 120ºC bajo una atmósfera de N2 seco durante 15 h. Se añadió DCM (600 ml) y se extrajo la reacción con disolución de NaHCO3 acuosa saturada (200 ml) y después agua (200 ml). Se volvieron a extraer los extractos acuosos con DCM y se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera y se secaron (Na2SO4). Esto se concentró a aproximadamente 150 ml y se separó el producto puro como un precipitado que se recogió por filtración (6,19 g). La retirada del disolvente de las aguas madres seguido por cristalización de EtOAc/ hexano proporcionó unos 2,44 adicionales de producto puro. Unos 1,49 g adicionales de producto puro (rendimiento total: 10,12 g, 75%) se obtuvieron por cromatografía súbita de las aguas madres finales sobre gel de sílice usando elución con gradiente por etapas con mezclas de DCM : MeOH = 99,8; 0,2 a 99,3 : 0,7. RMN de 1H (CDCl3): 2,41 (s, 3H); 6,28 (m, 1H); 7,23 (m, 1H); 7,29 (m, 1H); 7,57 (s, 1H); 7,80 (m, 2H); MS: 306 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,19 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 2 min, 5 ml/min). 1F. Preparación de 4-metilbencenosulfonato de 4-cloropirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-ilo

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Se añadió POCl3 (2,32 ml; 15 mmoles) a una mezcla de 4-metilbencenosulfonato de 4-oxo3,4-dihidropirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-ilo (3,05 g; 10 mmoles) y diisopropiletilamina (1,74 ml; 10 mmoles) en tolueno seco (40 ml) en una atmósfera de N2 seco. Esto se calentó para hacerlo hervir a reflujo durante 15 h y después se permitió que se enfriara a TA. Se añadió una disolución acuosa saturada de NaHCO3 y se dejó con agitación esta reacción durante 10 min. Esto se diluyó después con DCM y se separó la fase orgánica, se lavó con salmuera y se secó (Na2SO4). La cromatografía súbita sobre gel de sílice con DCM como eluyente proporcionó el producto como un sólido amarillo (2,78 g; 86%). RMN de 1H (CDCl3): 2,46 (s, 3H); 6,77 (m, 1H); 7,34 (m, 1H); 7,69 (m, 1H); 7,77 (s, 1H); 8,13 (m, 2H); MS: 324 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,53 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 2 min, 5 ml/min).

1G. Preparación de 4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5ol

Se calentó a 90ºC durante 50 min una mezcla de 4-metilbencenosulfonato de 4-cloro-1Hpirrolo[1.2-b]piridazin-5-ilo (7,01 g; 21,67 mmoles) y 1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-amina (5,48 g; 22,8 mmoles) en 1,2-dicloroetano seco (44 ml) y n-butanol seco (22 ml). Después de la retirada de los disolventes, se suspendió el sólido residual en THF seco (225 ml) y se enfrió la reacción en un baño de hielo. Se añadió NaOMe (18,7 ml; 25% en peso en MeOH, aproximadamente 87 mmoles). Después de 30 min, se añadió una disolución acuosa saturada de NH4Cl (400 ml) y se dejó con agitación la reacción durante 5 min antes de que se extrajera con EtOAc. Se lavaron los extractos con salmuera, se secó (Na2SO4) y se concentró. El producto precipitó del concentrado y se recogió por filtración (5,31 g; 92%). Ejemplo 2 N-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-il)-5-metoxipirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-4-amina

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Se trató una disolución de 4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)H-pirrolo[1.2-b]piridazin 5-ol (39,1 mg; 0,104 mmoles) en THF seco (3 ml) con NaH (2,76 mg; 0,115 mmoles) y se agitó a 23ºC durante 0,25 h antes de añadir MeI (7,1 µl; 0,115 µmoles). Después de 16 h, se diluyó la mezcla con EtOAc y se lavó con salmuera. Se secó la fase orgánica (MgSO4) y se concentró a vacío. Se purificó el material bruto por cromatografía súbita sobre gel de sílice con mezclas de 10 a 20% de EtOAc en DCM para dar el producto (5 mg; 12%); RMN de 1H (CD3OD): 3,9 (s, 3H); 5,57 (s, 2H); 6,31 (d, J=3,05 Hz, 1H); 6,88 (m, 1H); 6,91 (m, 2H); 7,22 (m, 1H); 7,29 (d, J=2,03 Hz, 1H); 7,45 (m, 2H); 7,53 (s, 1H); 7,99 (s, 1H); 8,05 (m, 1H); MS: 389 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,86 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5 µ C4, gradiente de 2 min, 4 ml/min).

Ejemplo 3 (1,4-cis)-4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi) ciclohexanol

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Se añadió azodicarboxilato de dietilo (70 mg; 0,4 mmoles) a una disolución de 1 (50 mg; 0,134 mmoles), trans-ciclohexano-1,4-diol (47 mg; 0,4 mmoles) y trifenilfosfina (105 mg; 0,4 mmoles) en THF seco. Después de agitar a TA durante 20 h, se evaporó el disolvente y el residuo se sometió a cromatografía súbita sobre una columna de gel de sílice que se eluyó con una mezcla de acetato de etilo : hexano = 1 : 1 para dar el producto (31 mg; 49%); MS: 473 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,92 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5 µ C4, gradiente de 2 min, 4 ml/min). Se disolvió una muestra en THF y se trató con un equivalente de una disolución 0,8 N de HCl en dioxano. La retirada del disolvente dejó la sal de hidrocloruro: RMN de 1H (DMSO-D6): 1,76-1,45 (m, 6H); 2,06-1,94 (m, 2H); 3,63 (m, 1H); 4,49 (m, 1H); 5,70 (s, 2H); 6,52 (d, 1H); 7,07-6,98 (m, 2H); 7,09 (td, 1H); 7,4-7,3 (m, 1H); 7,53 (dd, 1H); 7,59 (d, 1H); 7,76 (d, 1H); 7,84 (s, 1H); 8,16 (s, 1H), 8,39 (s, 1H). MS: 473 (M+H)+. Ejemplo 4 4-(4-1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi) ciclohexanona

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Se trató una disolución de 1 (500 mg; 1,34 mmoles), 1-hidroxi-4-ciclohexanona etileno cetal; (635 mg; 4,0 mmoles) y trifenilfosfina (1,05 g; 4,0 mmoles) en THF, gota a gota, con azodicarboxilato de dietilo (695 mg; 4,0 mmoles). Después de agitar a TA durante 20 h, se evaporó el disolvente. Se aplicó el residuo sobre una almohadilla de gel de sílice SCX (6,0 g; Silicycle) y se eluyó con MeOH seguido por una disolución 2 N de NH3 en MeOH. Las fracciones que contenían el material deseado se combinaron y se retiró el disolvente. Una disolución de este residuo y ácido p-toluenosulfónico (100 mg) en acetona acuosa al 90% (25 ml) se calentó para hacerla hervir a reflujo durante 20 h. Después de enfriar a TA, esto se hizo ligeramente básico con NaHCO3 y se retiró el disolvente. Se absorbió el residuo en EtOAc, se lavó con agua, se secó (MgSO4) y se retiró el disolvente. La cromatografía súbita sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc en hexano (1:1) dio el producto (422 mg; 67,0%): MS: 471 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,81 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5 µ C4, gradiente de 2 min, 4 ml/min). El tratamiento de una muestra con un equivalente de una disolución 0,8 N de HCl en dioxano seguido por la eliminación del disolvente proporcionó la sal de hidrocloruro: RMN de 1H (DMSO-D6): 2,59-2,10 (m, 8H); 4,86 (t, 1H); 5,72 (s, 2H); 6,7 (d, 1H); 7,15-6,90 (m, 3H); 7,4-7,3 (m, 1H); 7,55-7,46 (m, 1H); 7,8-7,7 (m, 3H); 8,27-8,14 (m, 2H); 9,0 (s ancho, 1H).

Ejemplo 5 1-(3-Fluorobencil)-N-(5-((1,4-cis)-4-aminociclohexiloxi)H-pirrolo[1.2-b]piridazin-4-il)-1Hindazol-5-amina

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5A. Preparación de (1,4-cis)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin-5-iloxi)ciclohexilcarbamato de terc-butilo

Se añadió bis(dimetilamida) del ácido azodicarboxílico (184 mg; 1,07 mmoles) a una mezcla de 1 (200 mg; 0,53 mmoles), (1,4-trans)-4-(hidroxiciclohexil-carbamato de terc-butilo (173 mg; 0,805 mmoles) y tri-n-butilfosfina (0,264 ml; 1,07 mmoles) en tolueno seco (4 ml) a TA en una atmósfera de N2 seco. Después de 1 h, esto se calentó a 60ºC durante 1,7 h. En el enfriamiento a TA, se diluyó la reacción con DCM, se filtró y se aplicó el líquido filtrado sobre la placa de gel de sílice de 2 mm de un cromatotrón radial. La elución con una mezcla de EtOAc:hexano = 2:3 proporcionó (1,4-trans)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)Hpirrolo[1.2-b]piridazin-5-iloxi)ciclohexilcarbamato de terc-butilo como un aceite (167 mg; 55%).

MS: 572 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 2,64 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min).

5B. Preparación de 1-(3-Fluorobencil)-N-(5-((1,4-cis)-4-aminociclohexiloxi)H-pirrolo][1.2b]piridazin-4-il)-1H-indazol-5-amina

5 Se trató 5A (167 mg) con una mezcla de DCM seco (2 ml) y TFA (2 ml) a TA durante 0,5 h. Después de la eliminación de los disolventes, se absorbió el residuo en DCM, se lavó con una mezcla 1:1 de una disolución acuosa saturada de Na2CO3 y agua y después se secó (Na2SO4). La eliminación de los disolventes dejó el producto como un vidrio (128 mg; 93%): RMN de 1H (CDCl3): 1,70 (m, 8H); 2,17 (m, 2H); 2,88 (m, 1H); 4,47 (m, 1H); 5,56 (s, 1H); 6,19 (s, 1H); 6,83

10 (m, 1H); 6,94 (m, 2H); 7,25 (m, 1H); 7,32 (m, 2H); 7,52 (m, 1H); 7,82 (s, 1H); 7,04 (s, 1H); 7,15 (s, 1H); 8,30 (s, 1H). MS: 472 (M+H)+. Tiempo de Ret. de HPLC: 1,82 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min). Ejemplo 6 1-(3-Fluorobencil)-N-(5-((1,4-trans)-4-aminociclohexiloxi)H-pirrolo[1.2-b]piridazin-4-il)-1H

15 indazol-5-amina

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Se preparó compuesto 6 a partir de 1 y (1,4-cis)-4-hidroxiciclohexil-carbamato de terc-butilo 25 de la misma manera que el Ejemplo 5 y presentó: MS: 472 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,76 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min).

Ejemplo 7 5-((1,4-cis)-4-Aminociclohexiloxi)-N-(3-cloro-4-fluorofenil)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-4amina

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7A. Preparación de 4-(3-Cloro-4-fluorofenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-ol

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Se preparó compuesto 7A a partir de 1F y 3-cloro-4-fluoroanilina de la misma manera que 1G 10 y presentó: MS: 279 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,72 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5 µ C4, gradiente de 2 min, 4 ml/min).

7B. Preparación de 5-((1,4-cis)-4-Aminociclohexiloxi)-N-(3-cloro-4-fluorofenil)pirrolo[1.2f][1.2.4]triazin-4-amina

Se preparó compuesto 7 a partir de 7A y (1,4-trans)-4-hidroxiciclohexilcarmabato de terc15 butilo de la misma manera que en el Ejemplo 5 y presentó: MS: 376 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,36 min (columna de 4,6 x 30 mm YMC Combiscreen S5, CH3CN : agua : TFA = 1:

9 : 0,005 a CH3CN : agua : TFA = 9 : 1 : 0,005, gradiente de 2 min, 4 ml/min).

Ejemplo 8 5-((1,4-cis)-4-aminociclohexiloxi)-N-(3-cloro-4-(piridin-2-ilmetoxi)fenil)pirrolo[1.220 f][1.2.4]triazin-4-amina

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8A. Preparación de 4-(3-Cloro-4-(piridin-2-ilmetoxi)fenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5ol

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Se preparó compuesto 8A a partir de 1F y 3-cloro-4-(piridin-2-ilmetoxi)bencenamina de la misma manera que 1G y presentó MS: 368 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,59 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5 µ C4, gradiente de 2 min, 4 ml/min). 8B. Preparación de 5-((1,4-cis)-4-aminociclohexiloxi)-N-(3-cloro-4-(piridin-2-ilmetoxi)fenil) pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-4-amina

Se preparó compuesto 8 a partir de 8A y (1,4-trans)-4-hidroxiciclohexil-carbamato de tercbutilo de la misma manera que en el Ejemplo 4 y presentó: MS: 465 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,19 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5 µ C4, gradiente de 2 min, 4 ml/min). Ejemplo 9 5-((1,4-trans)-4-aminociclohexiloxi)-H-(3-cloro-4-(piridin-2-ilmetoxi)fenil)pirrolo[1.2f]]1.2.4]triazin-4-amina

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Se preparó compuesto 9 a partir de 8A y (1,4-cis)-4-hidroxiciclohexil-carbamato de terc-butilo de la misma manera que en el ejemplo 6 y presentó: MS: 465 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 0,99 min (columna de 3 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 2 min, 5 ml/min).

Ejemplo 10 N-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-il)-(5-((1,4-cis)-4-(2-(metilsulfonil)-etilamino)ciclohexil oxi)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-4-amina

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Se dejó con agitación una disolución de 5 (50 mg; 0,106 mmoles) y metil vinil sulfona (21 mg; 0,2 mmoles) en MeOH a TA durante 18 h. Se recogió el precipitado y se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice con acetonitrilo como eluyente para dar el producto (36 mg; 59%): MS: 578 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,81 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5 µ C4). El tratamiento de una muestra con un equivalente de una disolución 0,8 N de HCl en dioxano seguido por la eliminación del disolvente proporcionó la sal de hidrocloruro: RMN de 1H (DMSO-D6): 1,83-1,65 (m, 4H); 2,03-1,90 (m, 2H); 2,35-2,19 (m, 2H); 3,13 (s, 3H); 3,27 (m, 1H); 3,64-3,49 (m, 3H); 4,60 (s, 1H); 5,72 (s, 2H); 6,50 (d, 1H); 7,066,97 (m, 2H); 7,11 (td, 1H); 7,41-7,32 (m, 1H); 7,62-7,56 (m, 2H); 7,73 (d, 1H); 7,86 (s, 1H); 8,17 (s, 1H); 8,23 (s, 1H); 8,45 (d, 1H); 8,94 (s ancho, 1H). Ejemplo 11 N-(1-(3-Fluorobencil)-1çH-indazol-5-il)-(5-((1,4-trans)-4-(2-(metilsulfonil)etilamino) ciclohexiloxi)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-4-amina

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Se preparó compuesto 11 a partir de 6 y metil vinil sulfona de la misma manera que en el Ejemplo 10 y presentó: MS: 578 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,96 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5 µ C4, gradiente de 2 min, 4 ml/min).

Ejemplo 12 N-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-il)-5-((1,4-cis)-4-(isocianoamino)-ciclohexiloxi)pirrolo [1.2-f][1.2.4]triazin-4-amina

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Se agitó una mezcla de 5 (54 mg; 0,115 mmoles), bromuro de cianógeno (13 mg; 0,12 mmoles) y acetato de sodio (26 mg; 0,232 mmoles) en MeOH, a TA, durante 4 h. La eliminación del disolvente seguido de cromatografía sobre gel de sílice con EtOAc como

15 eluyente proporcionó el producto (47 mg; 83,2%): MS: 497 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,92 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5 µ C4, gradiente de 2 min, 4 ml/min). El tratamiento de una muestra con un equivalente de una disolución 0,8 N de HCl en dioxano seguido por la eliminación del disolvente proporcionó la sal de hidrocloruro: RMN de 1H

20 (DMSO-D6 + D2O): 1,81-1,50 (m, 6H); 2,06-1,90 (m, 2H); 3,19 (m, 1H); 4,52 (m, 1H); 5,66 (s, 3H); 6,51 (d, 1H); 7,13-6,92 (m, 3H); 7,39-7,29 (m, 1H); 7,53 (dd, 1H); 7,59 (d, 1H); 7,71 (d, 1H); 7,76 (s, 1H); 8,15 (s, 1H); 8,23 (s, 1H). Ejemplo 13 4-(((1,4-trans)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5

25 iloxi)ciclohexilamino)metil)benzoato de metilo Ejemplo 14 4-(((1,4-cis)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5iloxi)ciclohexilamino)metil)benzoato de metilo

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Procedimiento A. Se agitó una disolución de 4 (780 mg; 1,66 mmoles), hidrocloruro de 4(aminometil)benzoato de metilo (402 mg; 1,99 mmoles) y ortoformiato de trimetilo (3 ml) en DMF (15 ml), a TA, durante 15 min y después NaBH(OAc)3 (880 mg, 4,15 mmoles) en pequeñas porciones. Después de 18 h, se destruyó el hidruro en exceso mediante la adición de una mezcla de AcOH y MeOH (1:1; 1 ml). Se hizo pasar la mezcla resultante por una almohadilla pequeña de gel de sílice SCX (marca Silicycle, 10 g), eluyendo primero con MeOH y después con una 2,0 M de NH3 en MeOH para obtener una mezcla de 13 y 14. Estas se separaron por HPLC preparativa (30 x 100 mm; YMC ODS-A S-5 µm, CH3CN : H2O : NH4OAc 5,0 M = 1 : 9 : 0,01 a 9 : 1 : 0,01; caudal = 20 ml/min; tiempo de gradiente 7 min). Esto dio 13 (260 mg; 25%): MS: 620 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,49 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5 µ C18, CH3CN : H2O : TFA = 1 : 9 : 0,005 a 9 : 1 : 0,005; gradiente de 2 min, 4 ml/min). RMN de 1H (DMSO, d-6): 1,24 (m, 2H); 1,56 (m, 2H); 1,96 (m, 2H); 2,13 (m, 2H); 3,34 (s, 3H); 3,81 (s, 2H); 4,31 (m, 1H); 5,70 (s, 2H); 6,53 (d, J=3,07 Hz, 1H); 7,02 (d, J=7,7 Hz, 2H); 7,10 (m, 1H); 7,36 (m, 1H); 7,49 (m, 3H); 7,56 (d, J=3,08 Hz, 1H); 7,71 (d, J=9,20 Hz, 1H); 7,81 (s, 1H); 7,90 (d, J=7,95 Hz, 2H); 8,15 (s, 1H); 8,31 (m, 1H); 8,33 (s, 1H) y 13 (187 mg; 18%): MS: 620 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,47 min (4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5 µ, C18, CH3CN : H2O : TFA = 1 : 9 : 0,005 a 9 : 1 : 0,005; gradiente de 2 min, 4 ml/min); RMN de 1H (CDCl3): 1,57-1,44 (m, 2H); 2,03-1,83 (m, 4H); 2,232,13 (m, 2H); 2,87-2,74 (m, 1H); 3,85 (s, 3H); 3,90 (s, 2H); 4,35 (s ancho, 1H); 5,48 (s, 2H); 6,08 (d, J=3,03 Hz, 1H); 6,8 (td, J=2,02; 9,09 Hz, 1H); 6,95-6,88 (m, 2H); 7,24-7,19 (m, 1H); 7,29-7,24 (m, 1H); 7,31 (d, J=3,03 Hz); 7,51 (d, J=8,08 Hz, 2H); 7,68 (dd, J=2,02; 9,10 Hz, 1H); 7,80 (s, 1H); 7,91 (d, J=8,59 Hz, 2H); 7,98 (s, 1H), 8,02 (s, 1H); 8,35 (d, J=1,52 Hz, 1H).

Procedimiento B. Se añadió poco a poco NaBH(OAc)3 (1,25 g; 7,61 mmoles) a una disolución agitada de 6 (2,39 g; 5,07 mmoles) y 4-formilbenzoato de metilo (1,25 g; 7,61 mmoles) en DMF seco (15 ml) a TA durante 3 h. Después de 18 h, se añadió más 4formilbenzoato de metilo (0,333 g; 2,03 mmoles) y se dejó agitando la reacción durante unas 4 h más. Se neutralizó la reacción con NaHCO3 sólido, se diluyó con EtOAc (400 ml) y se lavó con agua (3 x 40 ml). La fase orgánica se secó (MgSO4) y se concentró a vacío dejando un jarabe espeso naranja que se cromatografió sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc seguido por una mezcla al 4% de una disolución 2 N de NH3 en MeOH y EtOAc para dar 13 (1,85 g; 59%).

Ejemplo 15 Ácido 4-(((1,4-trans)-4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4] triazin-5-iloxi)ciclohexilamino)metil)benzoico

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Se añadió una disolución acuosa de NaOH (6,86 ml, 4 N, 27,4 mmoles) a una disolución de 13 (0,425 g; 0,686 mmoles) en una mezcla de THF : MeOH : agua (2:2:1, 30 ml). Se añadió algo de agua después de 1 h para preparar la disolución homogénea y después de una hora adicional, se neutralizó la mezcla con AcOH y se retiraron los disolventes. Se trituró el residuo en agua y se recogió el producto bruto como un sólido blanco. La purificación por HPLC preparativa (20 x 100 mm, YMC ODS-A S-5 µm,eluyente: CH3CN : H2O : NH4OAc 5 M= 1 : 9 : 0,01 a 9 : 1 : 0,01; caudal = 20 ml/min; tiempo gradiente = 7 min), proporcionó el producto (0,353 mg; 85%): MS: 606 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,42 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5 µ, C4, gradiente de 2 min, 4 ml/min); RMN de 1H (DMSO, d6): 1,26 (m, 2H); 1,57 (m, 2H); 1,97 (m, 2H); 2,15 (m, 2H); 3,81 (s, 2H); 4,31 (m, 1H); 5,70 (s, 2H); 6,53 (d, J=2,94 Hz, 1H); 7,02 (d, J=7,09 Hz, 2H); 7,10 (m, 1H); 7,36 (m, 1H); 7,46 (d, J=8,12 Hz, 2H); 7,51 (d, J=1,93 Hz, 1H); 7,53 (d, J=1,9 Hz, 1H); 7,56 (d, J=3,07 Hz, 1H); 7,72 (d, J=8,15 Hz, 1H); 7,81 (s, 1H); 7,90 (d, J=8,03 Hz, 3H); 8,15 (s, 1H); 8,31 (m, 1H); 8,33 (s, 1H).

Ejemplo 16 Ácido 4-(((1,4-cis)-4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin5-iloxi)ciclohexilamino)metil)benzoico

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Se preparó compuesto 16 a partir de 14 de la misma manera que en el Ejemplo 15 y presentó: MS: 606 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,42 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5 µ, C4, gradiente de 2 min, 4 ml/min);

Ejemplo 17 Isómero A e Isómero B Ácido 4-((4-(4-(3-cloro-4-fluorofenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)ciclohexil amino)metil)benzoico

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17A. Preparación de 4-(4-(3-cloro-4-fluorofenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi) ciclohexanona

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Se preparó compuesto 17A a partir de 7A y 1-hidroxi-4-ciclohexanona etileno cetal de la misma menara que en el Ejemplo 4 y presentó: MS: 375 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: --min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5µ, C4, gradiente de 2 min, 4 ml/min).

17B. Preparación de 4-((4-(4-(3-Cloro-4-fluorofenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5iloxi)ciclohexilamino)metil)benzoico, isómero A y B

Se preparó compuesto 17, isómeros A y B, a partir de 17A e hidrocloruro de 4(aminometil)benzoato de metilo de la misma manera que en el Procedimiento A para los Ejemplos 13 y 14 seguido por saponificación como para el Ejemplo 15. El isómero A presentó : MS: 510 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,48 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5µ, C4, gradiente de 2 min, 4 ml/min) y el isómero B presentó: MS: 510 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,43 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5µ, C4, gradiente de 2 min, 4 ml/min). Ejemplo 18 Ácido 4-(((1,4-trans)-4-(4-(3-cloro-4-(piridin-2-ilmetoxi)fenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4] triazin-5-iloxi)ciclohexilamino)metil)benzoico

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Se preparó compuesto 19 a partir de 8A y 1-hidroxi-4-ciclohexanona etileno cetal de la misma manera que para el Ejemplo 17. El Ejemplo 18 presentó: MS: 600 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,42 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5µ, C4, gradiente de 2 min, 4 ml/min). El Ejemplo 18 también se preparó a partir de 9 y 4-formilbenzoato de metilo usando el procedimiento descrito para el Ejemplo 14, Procedimiento B, seguido por saponificación como para el Ejemplo 15. Ejemplo 20 Isómero A e Isómero B Ácido 2-(4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi) ciclohexilamino)acético

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Se obtuvo compuesto 20, isómeros A y B a partir de la cetona 4 e hidrocloruro del éster etílico de glicina como se describió para los Ejemplos 11 y 13. El Procedimiento A y después se saponificó como se describió para el Ejemplo 15. El Isómero A presentó: MS: 530 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,43 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5µ, C4, gradiente de 2 min, 4 ml/min) y el Isómero B presentó: MS: 530 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,41 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5µ, C4, gradiente de 2 min, 4 ml/min). Ejemplo 21 Isómero A e Isómero B Ácido 1-(4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi) ciclohexilamino)ciclopropanocarboxílico Se obtuvo compuesto 21, isómeros A y B, a partir de la cetona 4 e hidrocloruro del éster etílico del ácido 1-aminociclopropanocarboxilico como se describió para el Ejemplo 20. El Isómero A presentó: MS: 556 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,40 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5µ, C4, gradiente de 2 min, 4 ml/min) y el Isómero B presentó: MS: 556 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,40 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5µ, C4, gradiente de 2 min, 4 ml/min). Ejemplo 22 Ácido 3-((1,4-trans)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4] triazin-5-iloxi)ciclohexilamino)-2,2-dimetilpropanoico

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Se añadió NaBH(OAc)3 (32 mg, 0,15 mmoles) a una suspensión agitada de 5 (50 mg; 0,11 mmoles), 2,2-dimetil-3-oxopropanoato de etilo (15 mg; 0,11 mmoles) y HOAc (9 µl; 0,13 mmoles) en 1,2-dicloroetano seco (1 ml) a TA. Después de 20 min, se enfrió rápidamente la reacción con NaOH acuoso (2 ml; 1,0 N) y se extrajo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con salmuera, se secó (Na2SO4) y se retiraron los disolventes. Se cromatografió el residuo (cromatografía radial con un gradiente por etapas de DCM que contenía 0,1,2,3,4% de MeOH) para dar 3-((1,4-trans)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5iloxi)ciclohexilamino)-2,2-dimetilpropanoato de etilo (60 mg; rendimiento cuantitativo): MS: 600 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 2,05 min (columna de 4,6 x 50 mm, YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min). Se calentó una mezcla de este éster (63 mg; 0,11 mmoles) y una disolución acuosa de LiOH (0,55 ml; 1,0 M; 0,55 mmoles) en MeOH (5 ml) en N2 a 40ºC durante 39 h. Se vertió la reacción sobre un cartucho SCX (Varian Mega Bond Elut SCX, 1 g) que se había acondicionado con MeOH. Esto se lavó con 1 volumen de columna de MeOH seguido por diversos volúmenes de columna de una disolución 2,0 N de NH3 en MeOH. La eliminación del disolvente de las fracciones apropiadas dejó el producto como un vidrio (48 mg; 76%): MS: 572 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,88 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min).

Ejemplo 23 Ácido 3-((1,4-cis)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5iloxi)ciclohexilamino)-2,2-dimetilpropanoico

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Se obtuvo compuesto 23 a partir de la amina 4 y 2,2-dimetil-3-oxopropanoato de etilo como se describió para los Ejemplos 22 y presentó: MS: 572 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,33 20 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 2 min, 4 ml/min).

Ejemplo 24 Isómero A e Isómero B N-(4-((4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi) ciclohexilamino)metil)fenilsulfonil)acetamida

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24A. Preparación de N-(4-(aminometil)fenilsulfonil)acetamida

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Se añadió dicarbonato de di-terc-butilo (4,80 g; 22 mmoles) a una disolución de hidrogenocloruro de 4-(aminometil)bencenosulfonamida (4,45 g; 20 mmoles) y TEA (6,14 ml; 44 mmoles) en una mezcla de DCM (50 ml) y EtOH (7 ml). Después de que se hubiera completado la reacción, se diluyó con DCM, se lavó con agua y se secó (Na2SO4). Se retiró el disolvente para dejar el éster [[4-(aminosulfonil)fenil]metil]-terc-butílico del ácido carbámico bruto. Una porción de éste (1,29 g, 4,49 mmoles) se añadió a una suspensión agitada de K2CO3 (1,24 g; 8,99 mmoles) en acetona (18 ml) seguido por cloruro de acetilo (0,42 ml; 5,84 mmoles) y se calentó la mezcla para hacerla hervir a reflujo durante 16 h. Se añadió más cloruro de acetilo (0,42 ml; 5,84 moles) y se continuó agitando durante unas 1,5 h más. Después de enfriar a TA, se añadió agua para dar una disolución clara que se extrajo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con salmuera, se secó (Na2SO4) y se retiró el disolvente. La cromatografía de columna de gel de sílice (elución con una mezcla de DCM y MeOH) proporcionó el éster [[4-(N-acetil-aminosulfonil)fenil]metil]-terc-butílico del ácido carbámico, (1,14 g; 77%) como un sólido: RMN de 1H (CDCl3): 1,46 (s, 9H); 2,05 (s, 3H); 4,39 (s a, 2H); 5,0 (s a, 1H); 7,44 (d, 2H); 7,99 (d, 2H); 8,5 (s a, 1H). Esto (1,29 g; 3,93 mmoles) se disolvió en una mezcla de DCM seco (40 ml) y TFA (30 ml) en un baño de hielo. Después de 1 h, se retiró el disolvente para dejar la sal de TFA del producto final. Se convirtió material en la base libre por aplicación sobre columna SCX (Varian Mega Bond Elut SCX) que se había acondicionado con MeOH. Esto fue lavándose con 1 volumen de columna de MeOH seguido por varios volúmenes de columna de una disolución 2,0 N de NH3 en MeOH. La eliminación del disolvente de las fracciones apropiadas dejó el producto como un vidrio: MS: 229 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 0,12 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 3 min, 4 ml/min). 24B. Preparación de N-(4-((4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2f][1.2.4]triazin-5-iloxi)ciclohexilamino)metil)fenilsulfonil)acetamida

Se añadió NaBH(OAc)3 (60 mg; 0,15 mmoles) a una mezcla agitada de 3 (94 mg; 0,20 mmoles), N-(4-(aminometil)fenilsulfonil)acetamida (46 mg; 0,20 mmoles) y HOAc (16 µl; 0,26 mmoles) en una mezcla de DCM seco (0,4 ml) y DMF seco (0,4 ml) a TA. Después de 20 min, se enfrió rápidamente la reacción con NaOH acuoso (2 ml; 1,0 N) y después se neutralizó con HCl 1,0 N acuoso. Esto se extrajo con EtOAc y los extractos se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4) y se retiraron los disolventes. Se cromatografió el residuo (cromatografía radial con un gradiente en etapas de DCM que contenía 0, 1, 2, 3, 4, 5% de una disolución metanólica 2,0 N de NH3) para dar Isómero A (19 mg; 11%): MS: 683 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,18 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 2 min, 5 ml/min) y el Isómero B: MS: 683 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,18 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 2 min, 5 ml/min).

Ejemplo 25 4-(((1,4-trans)-4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazols-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5iloxi)ciclohexilamino)metil)-N-(metilsulfonil)benzamida

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Una suspensión de 15 (240 mg; 0,396 mmoles) en DMF seco (8 ml) se trató con dicarbonato de di-terc-butilo (104 mg; 0,477 mmoles) y se agitó a 50ºC durante 16 h. Esto se concentró a vacío a sequedad para dejar el 4-((N-terc-butiloxicarbonil-(1,4-trans)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1Hindazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)ciclohexilamino)metil)-N-(metilsulfonil) benzamida bruta que se usó sin más purificación. Tiempo de Ret. de HPLC: 1,92 min (columna C18-HC 5 µ de 4,6 x 30 mm, Phenomenex Primesphere; CH3CN : H2O : TFA = 1 : 9 : 0,005 a 9 : 1 : 0,005; gradiente de 2 min, 4 ml/min). Una mezcla de este ácido bruto (36,7 mg; 0,052 mmoles), CH3SO2NH2 (6,4 mg, 0,0674 mmoles), DMAP (10,76 mg; 0,088 mmoles) e hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (16,9 mg; 0,088 mmoles) en DCM seco (1 ml) se agitó a TA durante 3 h. Se diluyó la mezcla con CHCl3 y se lavó con agua. Se secó la fase orgánica (MgSO4) y se concentró a vacío. La cromatografía súbita sobre gel de sílice (elución con EtOAc: DCM (9:1) seguido por un gradiente en etapas varió desde 0 a 10% de MeOH en AcOEt) proporcionó 4-((N-terc-butiloxicarbonil-(1,4-trans)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)ciclohexilamino)metil)-N(metilsulfonil)benzamida (23 mg; 56%): MS: 783 (M+H)+; RMN de 1H (DMSO, d-6): 1,0-1,8 (m, 15H); 2,21 (m, 2H); 2,88 (s, 3H); 4,20 (m, 1H); 4,36 (m, 2H); 5,73 (s, 2H); 6,49 (d, J=3,08 Hz, 1H); 7,02 (d, J=7,02 Hz, 2H); 7,15 (m, 1H); 7,19 (d, J=8,17 Hz, 3H); 7,36 (m, 1H); 7,53 (m, 3H); 7,73 (d, J=8,61 Hz, 1H); 7,79 (s, 1H); 7,87 (d, J=8,08 Hz, 3H); 8,15 (s, 1H); 8,30 (s, 1H); 8,34 (s, 1H). Este material (23 mg; 0,029 mmoles) se disolvió en DCM seco (12 ml) y se trató con TFA (1 ml) a TA. Después de 2 h, esto se diluyó con tolueno y se concentró a sequedad. La HPLC preparativa (columna de 20 x 100 mm, YMC ODS-A S-5 µm; gradiente de CH3CN : H2O : NH4OAc 5,0 M = 20% (1 : 9 : 0,01) a 100% (9 : 1 : 0,01); caudal = 20 ml/min; gradiente de 7 min con un mantenimiento inicial de 4 min) proporcionó el producto (14 mg; 71%): MS: 683 (M+H)+; Tiempo de Ret. de LCMS: 1,48 min (columna de 4,6 x 30 mm C18-HC Phenomenex Primesphere 5µ, gradiente de 2 min, 4 ml/min); RMN de 1H (DMSO, d-6): 1,5 (m, 2H); 1,63 (m, 2H); 2,20 (m, 2H); 2,25 (m, 2H); 2,84 (s, 3H); 4,21 (m, 1H); 4,28 (m, 2H); 5,69 (s, 2H); 6,58 (d, J=2,44 Hz, 1H); 7,00 (m, 2H); 7,09 (td, J=2,8 y 8,9 Hz, 2H); 7,35 (m, 1H); 7,43 (d, J=7,3 Hz, 2H); 7,53 (dd, J=9,3 y 3,0 Hz, 1H); 7,57 (d, J=3,04 Hz, 1H); 7,71 (d, J=9,05 Hz, 1H); 7,80 (s, 1H); 7,98 (d, J=7,36 Hz, 2H); 8,14 (s, 1H); 8,28 (s, 1H); 8,32 (s, 1H); 8,75 (m, 1H).

Ejemplo 26 Metilcarbonato de 4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2.-f][1.2.4]triazin-5ilo

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Se añadió cloroformiato de metilo (10 mg; 0,1 mmoles) a una disolución agitada de 1 (25 mg; 0,067 mmoles) y trietilamina (5 gotas) en THF a TA. Después de 10 min, se retiró el disolvente y se cromatografió el producto de reacción sobre gel de sílice (EtOAc : hexano = 1:1). Se disolvió el producto en THF y se trató con un equivalente de disolución 0,8 N de HCl en dioxano. La eliminación del disolvente seguido por trituración con éter dio la sal de HCl (18 mg; 57%): MS: 433 (M+H)+; Tiempo de Ret. de LCMS: 1,81 min (columna de 4,6 x 30 mm C18-HC Phenomenex Primesphere 5µ, gradiente de 2 min, 4 ml/min); RMN de 1H (DMSO-D6): 3,88 (s, 3H); 5,71 (s, 2H); 6,71 (d, 1H); 7,07-6,98 (m, 2H); 7,11 (td, 1H); 7,41-7,32 (m, 1H); 7,55 (d, 1H); 7,71 (d, 1H); 7,74 (d, 1H); 7,90 (s, 1H); 8,11 (s, 1H); 8,17 (s, 1H); 8,99 (s, 1H).

Ejemplo 27 Metilcarbamato 4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2.-f][1.2.4]triazin-5-ilo

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Una disolución de 1 (25 mg; 0,067 mmoles), isocianato de metilo (4 mg, 0,07 mmoles) y DMAP (8 mg; 0,07 mmoles) en DCM se agitó a TA durante 6 h. La eliminación del disolvente seguido por cromatografía sobre gel de sílice (elución con 25 a 50% de EtOAc en hexano) proporcionó el producto (20 mg; 69%). Se trató con un equivalente de una disolución 0,8 N de HCl en dioxano para dar la sal de HCl: MS: 432 (M+H)+; Tiempo de Ret. de LCMS: 1,66 min (columna de 4,6 x 30 mm C18-HC Phenomenex Primesphere 5µ, gradiente de 2 min, 4 ml/min); RMN de 1H (DMSO-D6 + D2O): 2,71 (s, 3H); 5,69 (s, 2H); 6,80 (d, 1H); 7,13-6,96 (m, 3H); 7,397,31 (m, 1H); 7,52 (dd, 1H); 7,69 (d, 1H); 7,77 (d, 1H); 7,80 (s, 1H); 8,04 (d, 1H); 8,2 (s, 1H). Ejemplo 28 N-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-il)-5-(tetrahidro-2H-tiopiran-4-iloxi)pirrolo[1.2.f][1.2.4]triazin-4-amina

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Se obtuvo compuesto 28 a partir de 1 y glicina-tetrahidro-2H-tiopiran-4-ol como se describió para el Ejemplo 3 y presentó: MS: 475 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,54 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 2 min, 5 ml/min).

Ejemplo 29 N-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-il)-5-(1-oxotetrahidro-2H-tiopiran-4-iloxi)pirrolo[1.2.f][1.2.4]triazin-4-amina

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Se añadió ácido m-cloroperbenzoico sólido (68 mg; 77%, 0,3 mmoles) a una disolución de 28 (143 mg; 0,3 mmoles) en CHCl3 (3 ml) a -30ºC. Después de 50 min, se añadió una disolución ac., de NaHSO3 (6%, 0,5 ml) y se dejó que se calentara la reacción a TA. Esto se diluyó con CHCl3 y se extrajo con una disolución ac., saturada de NaHCO3 (x 2) y se secó (Na2SO4). La eliminación del disolvente seguido por cromatografía radial (elución con gradiente por etapas con DCM que contenía 0 a 3% de MeOH dio el 29 (138 mg; 93%): MS: 491 (M+H)+; Tiempo de Ret. de LCMS: 1,66 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5µ C4; gradiente de 2 min, 4 ml/min y 30 (6 mg; 4%): MS: 507 (M+H)+; Tiempo de Ret. de LCMS: 2,53 min (columna de 4,6 x 30 mm Phenomenex Primesphere 5µ C4; gradiente de 4 min, 4 ml/min).

Ejemplo 31 Isómero A y B N-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-il)-5-(1-imino-1-oxotetrahidro-2H-tiopiran-4iloxi)pirrolo[1.2.-f][1.2.4]triazin-4-amina

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Se calentó una mezcla de 29 (95 mg; 0,19 mmoles) y NaN3 (100 mg; 0,80 mmoles) en poli(ácido fosfórico) (5 g) a 56ºC durante 12 h y después 60ºC durante 2 h. Después de enfriamiento a TA, se añadió agua y se ajustó el pH a 11 usando NaOH ac., al 50%. Se extrajo la reacción con DCM y se secaron los extractos orgánicos (Na2SO4). La eliminación de los disolventes seguido por cromatografía radial (elución con gradiente por etapas con DCM que contenía 0 a 3% de MeOH) proporcionó Isómero A (13 mg; 13%): MS: 506 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,03 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 2 min, 5 ml/min) e Isómero B (30 mg; 30%): MS: 506 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,05 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 2 min, 5 ml/min). Ejemplo 32 N-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-il)-5-(1-metilimino-1-oxotetrahidro-2H-tiopiran-4iloxi)pirrolo [1.2.-f][1.2.4]triazin-4-amina

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Se añadió TFA (15 µl; 0,13 mmoles) a una mezcla agitada de isómero B del Ejemplo 31 (21 mg; 0,042 mmoles), paraformaldehído (10 mg), trietilsilano (20 µl, 0,125 mmoles) en acetonitrilo (0,5 ml) a TA en N2. Después de 18 h, esto se diluyó con agua y se ajustó el pH a 11 con una disolución ac., saturada de Na2CO3. Esto se extrajo con una disolución al 10% de MeOH en DCM (x 4) y se secaron los extractos (Na2SO4). La eliminación de los disolventes seguido por cromatografía radial (elución con gradiente por etapas con DCM que contenía 0 a 3% de MeOH proporcionó el producto (12 mg; 57%): MS: 520 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,01 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 2 min, 5 ml/min).

Ejemplo 33 N-((1,4-cis)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2.-f][1.2.4]triazin-5iloxi)ciclohexil)-2-aminoacetamida

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Se añadió DIPEA (0,087 ml; 0,381 mmoles) a una suspensión agitada de 5 (60 mg; 0,127 mmoles), Fmoc-Gly-OH (38 mg, 0,127 mmoles) y hexafluorofosfato de benzotriazol-1iloxitripirrolidinofosfonio (73 mg; 140 mmoles) en DCM seco (2 ml) a TA. Después de 0,5 h, esto se diluyó con EtOAc, se lavó con agua, NaHCO3 saturado y se secó (Na2SO4). La cromatografía radial (elución con gradiente por etapas con 75 a 85% de EtOAc en hexano) proporcionó 2-((1,4-cis)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin5-iloxi)ciclohexilamino)-2-oxoetilcarbamato de (9H-fluoren-9-il)metilo (93 mg; 0,12 mmoles). Esto se suspendió en acetonitrilo seco (2 ml) a TA y se trató con piperidina (0,4 ml). Después de 0,5 h, esto se concentró a vacío. La cromatografía radial (elución con gradiente por etapas con 0 a 6% de una disolución metanólica 2,0 N de NH3 en DCM) proporcionó el producto (60 mg; 95%): MS: 529 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,95 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min).

Ejemplo 34 N-((1,4-trans)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2.-f][1.2.4]triazin-5iloxi)ciclohexil)-2-aminoacetamida

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Se obtuvo compuesto 34 a partir de 6 como se describió para el Ejemplo 33 y presentó: MS: 529 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,85 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min).

15 Ejemplo 35 1-(3-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2.-f][1.2.4]triazin-5iloxi)azetidin1-il)-2-aminoetanona

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35A. Preparación de N-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-il)-5-(1-benzhidrilazetidin-3-iloxi) pirrolo[1.2.-f][1.2.4]triazin-4-amina

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Se obtuvo compuesto 35A a partir de 1 y benzhidrilazetidin-3-ol como se describió para el

Ejemplo 5A salvo que se calentó la reacción a 60ºC durante 3 h previamente al tratamiento final. Presentó: MS: 596 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 2,17 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min).

35B. Preparación de N-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-il)-5-(azetidin-3-iloxi)pirrolo[1.2f][1.2.4]triazin-4-amina

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Se hidrogenó una mezcla de 35A (148 mg; 0,25 mmoles), hidróxido de paladio (150 mg; 20% en peso en C, húmedo) y HCl 1,0 M (0,25 ml) en EtOH (20 ml) (55 psi, aparato Parr) durante 24

15 h. Después de eliminar el catalizador y el disolvente, se suspendió el residuo en DCM, se lavó con una disolución ac., saturada de Na2CO3, se secó (Na2SO4) y se retiró el disolvente. La cromatografía radial (elución con gradiente por etapas con 0 a 15% de MeOH en DCM) proporcionó el producto (62 mg; 58%): MS: 430 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,50 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min).

20 35C. Preparación de 1-(3-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2.f][1.2.4]triazin-5-iloxi)azetidin-1-il)-2-aminoetanona Se obtuvo compuesto 35 a partir de 35B y Fmoc-Gly-OH como se describió para el Ejemplo 33 y presentó: MS: 487 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,57 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min).

25 Ejemplo 36 1-(4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2.-f][1.2.4]triazin-5-iloxi) piperidin-1-il)-2-aminoetanona 36A. Preparación de 4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2.-f][1.2.4] triazin-5iloxi)piperidin-1-carboxilato de N-terc-butilo

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Se obtuvo compuesto 36A a partir de 1 y 4-hidroxi-1-piperidinocarboxilato de terc-butilo como se describió para el Ejemplo 5A y presentó: MS: 558 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 2,60 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min). 36B. Preparación de N-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-il)-5-(piperidin-4-iloxi)pirrolo[1.2.f][1.2.4]triazin-4-amina

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Se obtuvo compuesto 36B a partir de 36A como se describió para el Ejemplo 5B y presentó: MS: 458 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,73 min (columna de 4,6 x 30 mm C18HC Phenomenex Primesphere 5µ; gradiente de 3 min, 4 ml/min). 36C. Preparación de 1-(4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2.f][1.2.4]triazin-5-iloxi) piperidin-1-il)-2-aminoetanona

Se obtuvo compuesto 36 a partir de 36B y Fmoc-Gly-OH como se describió para el Ejemplo 33 y presentó: MS: 515 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 2,06 min (columna de 4,6 x 30 mm C18-HC Phenomenex Primesphere 5µ; gradiente de 3 min, 4 ml/min). Ejemplo 37 Enantiómero A y B (1R,2R,5S)-y (1S,2S,5R)-5-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2.-f][1.2.4] triazin-5-iloxi)-2-aminociclohexanol

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Racémico C (1S,2S,4S)-y (1R,2R,4R)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2.-f] [1.2.4] triazin-5-iloxi)-2-aminociclohexanol

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37A. Preparación de N-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-il)-5-((1S,3S,6R) y (1R,3R,6S)-7oxa-biciclo[4.1.0]heptan-3.iloxi)pirrolo[1.2.-f][1.2.4]triazin-4-amina

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Se obtuvo compuesto 37A a partir de 1 y cis-3,4-epoxi-ciclohexanol (K. B. Sharpless et al., J. Amer. Chem. Soc., 1.979, 95, 6.136) como se describió para el Ejemplo 5A y presentó: MS: 471 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,42 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 2 min, 5 ml/min). 37B. Preparación de Regioisómero A, (1R,2R,5S)-y (1S,2R,5S)-5-(4-(1-(3-fluorobencil)-1Hindazol-5-ilamino)pirrolo[1.2.-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-azidociclohexanol

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y

Regioisómero B, (1S,2S,4S)-y (1R,2R,4R)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5ilamino)pirrolo[1.2.-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-azidociclohexanol

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Se calentó una mezcla de LiClO4 anhidro (165 mg; 1,55 mmoles) 37B (73 mg; 0,155 mmoles) y NaN3 (50 mg; 0,776 mmoles) en CH3CN seco (1,5 ml) a 80ºC durante la noche. Después de enfriar a TA, esto se diluyó con EtOAc, se lavó con agua, se secó (Na2SO4) y se eliminaron los disolventes. La HPLC preparativa (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, MeOH : H2O : TFA = 1 : 9 : 0,1 a 9 : 1 : 0,1, gradiente de 30 min, 25 ml/min) seguido por eliminación de disolventes y liberación de la base libre (reparto entre EtOAc y Na2CO3 ac., saturado) proporcionó regioisómero A (25 mg; 31%): MS: 514 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1, 53 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 2 min, 5 ml/min) y regioisómero B (21 mg; 26%): MS: 514 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,40 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 2 min, 5 ml/min). 37C. Preparación de (1R,2R,5S) y (1S,2S,5R)-5-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5ilamino)pirrolo[1.2.-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-aminociclohexanol, Enantiómero A y Enantiómero B

Se calentó una mezcla de regioisómero A 37B (24 mg; 0,046 mmoles), trifenilfosfina (24 mg; 0,92 mmoles) en THF (1 ml) que contenía agua (0,050 ml) para hacerla hervir a reflujo durante 2 h. Esto se diluyó con EtOAc, se secó (Na2SO4) y se eliminaron los disolventes. La cromatografía radial (gel de sílice, elución con gradiente por etapas con mezclas de DCM que contenían 4 a 5% de disolución metanólica 2,0 N de NH3) proporcionó el producto racémico (15 mg; 77%): MS: 488 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1, 11 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 2 min, 5 ml/min). Se separó una muestra de este racemato por HPLC quiral (columna Chiralpak AD, 4,6 x 250 mm, 10 µm, que eluye con TEA al 0,05% en EtOH, caudal 0,7 ml/min) para dar Enantiómero A: Tiempo de Ret.: 22,97 min y Enantiómero B: Tiempo de Ret.: 29,13 min.

37D. (1S,2S,4S) y (1R,2R,4R)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-aminociclohexanol.

Esto se obtuvo a partir de regioisómero B y trifenilfosfina como se describió para el Ejemplo 37A y el producto racémico presentó: MS: 488 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1, 09 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 3 min, 5 ml/min). Ejemplo 38 Enantiómero A y B (1R,2R,5R) y (1S,2S,5S)-5-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-aminociclohexanol

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Regioisómero Racémico C (1S,2S,4R) y (1R,2R,4S)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-aminociclohexanol

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38A. Preparación de trans-(3,4-Epoxi)-ciclohexanol

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Se añadió azodicarboxilato de dietilo (1,24 g; 7,14 mmoles) a una disolución enfriada con hielo de cis-3,4-epoxi-ciclohexanol (407 mg; 3,57 mmoles), trifenilfosfina (1,87 g; 7,14 mmoles) y ácido p-nitrobenzoico (1,21 g; 7,21 mmoles) en tolueno seco en N2. Después de 2 h, se diluyó la reacción con EtOAc, se extrajo con una disolución ac., saturada de NaHCO3, se secó (Na2SO4) y se eliminó el disolvente. La cromatografía radial (gel de sílice, elución con gradiente en etapas con hexano que contenía 10 a 40% de EtOAc) proporcionó trans-(3,4-epoxi)ciclohexan-(4-nitrobenzoato) (467 mg, 50%) como un sólido: MS: 264 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1, 96 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 3 min, 5 ml/min). Se saturó una disolución enfriada con hielo, agitada, del benzoato (467 mg; 1,77 mmoles) en una mezcla de MeOH seco (40 ml) y DCM (5 ml), con gas NH3. Se retiró el baño y se dejó con agitación la reacción a TA durante la noche. La eliminación del disolvente seguida por cromatografía radial (gel de sílice, gradiente con etapas con mezclas de hexano que contenían de 10 a 50% para proporcionar el producto trans como un aceite (70 mg, 35%): RMN de 1H (CDCl3): 1,32 (m, 1H); 1,58 (m, 1H); 1,74 (m, 1H); 1,87 (m, 1H), 2,05 (m, 1H); 2,18 (dd, 1H); 2,24 (s a, 1H); 3,11 (m, 2H); 3,77 (s, 1H). 38B. Preparación de N-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-il)-5-((1S,3S,6R) y (1R,3R,6S)-7oxa-biciclo[4.1.0]heptan-3-iloxi)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-4-amina

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Se obtuvo compuesto 38B a partir de 1 y racémico 38A como se describió para el Ejemplo 5A y presentó: MS: 471 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,45 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 2 min, 5 ml/min). 38C. Preparación de Regioisómero A, (1S,2S,5S)-y (1R,2R,5S)-5-(4-(1-(3-fluorobencil)-1Hindazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-azidociclohexanol

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Regioisómero B, (1R,2R,4S)-y (1S,2S,4R)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-azidociclohexanol

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Se obtuvieron los compuestos 38C, isómeros A y B a partir de racémico 38B (80 mg; 0,170 mmoles) y como se describió para el Ejemplo 37B y Regioisómero A (25 mg; 30%) presento: MS: 514 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 3,78 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S5, eluyente: MeOH : H2O : TFA = 1,5 : 8,5 : 0,1 a 6,5 : 3,5 : 0,1, gradiente de 6 min, 5 ml/min) y regioisómero B (14 mg; 16%): MS: 514 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 4,02 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S5, eluyente: MeOH : H2O : TFA = 1,5 : 8,5 : 0,1 a 6,5 : 3,5 : 0,1, gradiente de 6 min, 5 ml/min). 38D. Preparación de (1R,2R,5R) y (1S,2S,5S)-5-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5ilamino)pirrolo[1.2.-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-aminociclohexanol Enantiómero A y Enantiómero B

Se obtuvo Compuesto 38D, enantiómeros A y B, a partir de racémico 38C, Regioisómero A como se describió para el Ejemplo 37D y presentó: MS: 488 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,06 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 2 min, 5 ml/min). Se separó una muestra por HPLC quiral (columna Chiralpak AD, 4,6 x 250 mm, 10 µm, eluyendo con mezclas de dietilamina al 0,05% en acetonitrilo (disolvente A) y dietilamina al 0,05% en acetonitrilo: EtOH = 5 : 95 (disolvente B), empezando con disolvente B al 5% durante 3 min seguido por una gradiente variado desde 5 a 75% de disolvente B durante 27 min a un caudal de 0,9 ml/min para dar Enantiómero A: Tiempo Ret.: 9,60 min y Enantiómero B: Tiempo de Ret.: 22,2 min. 38E. Preparación de (1S,2S,4R) y (1R,2R,4S)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-aminociclohexanol

Se obtuvo compuesto 38 a partir de regioisómero B como se describió para el Ejemplo 38D y el producto racémico presentó: MS: 488 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,16 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 3 min, 5 ml/min). Ejemplo 39 Síntesis de Enantioespecífica de (1R,2R,5S)-5-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-aminociclohexanol

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39A. Preparación de (1R,2R,5R)-5-(Benciloxi)-2-((S)-1-feniletilamino)ciclohexanol

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Se añadió LiClO4 (33,0 g; 0,31 moles) a una disolución agitada, enfriada con hielo, de cis-4benciloxi-1,2-epoxiciclohexano (12,65 g; 62,0 mmoles), M. Chini et al., J. Org. Chem., 1.990,

55, 4.265) en acetonitrilo seco (137 ml). Se retiró el baño y se añadió (S)-(-)-α-metilbencilamina (40,0 ml, 0,31 moles, Aldrich, 98% de ee) después de 20 min. Se dejó la reacción con agitación a TA durante la noche, se diluyó con agua y se extrajo tres veces con EtOAc. Se lavaron los extractos orgánicos combinados con agua, salmuera y se secó (Na2SO4). Se retiró el disolvente en el evaporador rotatorio y se retiró la (S)-(-)-α-metilbencilamina en exceso por destilación kugelrohr. La cromatografía en columna [gel de sílice, elución con gradiente por etapas que empezó con hexano/EtOAc/TEA = 98/0/2 y que terminó con 49/49/2] del residuo proporcionó, en orden de elución, (1S,2S,5S)-5-(benciloxi)-2-((S)-1-feniletilamino)ciclohexanol) (7,7 g; 39%) como un sólido: [a]25 589 0,4 (c 8,0, MeOH), RMN de 1H (CDCl3): 0,84 (m, 1H); 1,31 (m, 1H); 1,35 (d, 3H); 1,42 (dd, 1H); 1,91 (m, 1H); 2,02 (m, 1H); 2,39 (m, 1H), 2,47 (m, 1H); 3,13 (m, 1H); 3,40 (m, 1H); 3,90 (dd, 1H); 4,54 (dd, 2H); 7,23-7,35 (m, 10H); MS: 326 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,86 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min) y (1R,2R,5R)-5-(benciloxi)-2-((S)-1-feniletilamino)ciclohexanol) (9,7 g; 49%) como un sólido: [a]25 589 -69,4 (c 4,4, MeOH), RMN de 1H (CDCl3): 0,90 (m, 1H); 1,22 (m, 2H); 1,34 (d, 3H); 2,04 (m, 2H); 2,15 (m, 1H); 2,38 (m, 1H); 3,16 (m, 1H); 3,37 (m, 1H); 3,96 (dd, 1H); 4,51 (dd, 2H); 7,22-7,29 (m, 10H); MS: 326 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,86 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min).

39B. Preparación de (1R,2R,4R)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-4-hidroxiciclohexilcarbamato de terc-butilo

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Se añadió trifluorometanosulfonato de terc-butildimetilsililo (8,8 ml; 38,5 mmoles) a una disolución agitada, enfriada con hielo, de (1R,2R,5R)-5-(benciloxi)-2-((S)-1-feniletilamino)ciclohexanol) (4,8 g; 14,8 mmoles) y TEA (8,2 ml; 59,1 mmoles) en DCM seco (250 ml). Después de 15 min, esto se lavó con una disolución ac., saturada de NaHCO3 y se secó (Na2SO4). La eliminación del disolvente seguido por cromatografía en columna (gel de sílice, elución con gradiente por etapas con hexano que contenía de 0 a 30% de EtOAc) proporcionó (1R,2R,4R)-4-(benciloxi)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-N-((S)-1-feniletil)ciclohexanamina (6,2 g; 95%): MS: 440 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 2,73 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min). Se hidrogenó una mezcla de este material (6,2 g; 14 mmoles), dicarbonato de di-terc-butilo (12,2 g; 56 mmoles) e hidróxido de paladio (6,5 g; 20% en peso en carbono, húmedo) en EtOH (250 ml) (aparato Paar, 50 psi H2, 16 h, TA). La eliminación del catalizador y el disolvente seguido por cromatografía sobre columna (gel de sílice, elución con gradiente por etapas con hexano que contenía 0 a 30% de EtOAc) proporcionó el producto (3,3 g; 68%): [a]25 589 – 19,1 (c 5,9, MeOH); RMN de 1H (CDCl3): 0,11 (s, 3H); 0,13 (s, 3H); 0,78 (s, 9H); 1,20 (m, 1H); 1,33 (s, 9H); 1,46 (m, 1H); 1,53 (m, 1H); 1,64 (m, 1H); 1,89 (m, 1H); 2,06 (m, 1H); 2,7 (s a, 1H); 3,36 (m, 1H); 3,36 (m, 1H); 3,67 (m, 1H); 4,38 (m, 1H); MS: 346 (M+H).+

39C. Preparación de (1R,2R,5S)-5-(4-1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-aminociclohexanol

Se añadió 1,1’-azobis(N,N-dimetilformamida) en polvo (2,87 g; 16,7 mmoles) a una suspensión agitada de 4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-ol (2,5 g; 6,68 mmoles), (1R,2R,4R)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-4-hidroxiciclohexilcarbamato de terc-butilo (2,54 g; 7,35 mmoles) y tri-n-butilfosfina (4,11 ml; 16,7 mmoles) en tolueno seco (45 ml) en N2 a TA. Después de 0,5 h, esto se puso en un baño de aceite a 60ºC durante 5 h. Después se diluyó la reacción con EtOAc, se lavó con agua, salmuera y se secó (Na2SO4). La eliminación de los disolventes seguido por cromatografía de columna (elución con gradiente por etapas con hexano que contenía 0 a 20% de EtOAc) proporcionó (1R,2R,4S)-4-(4-(1-(3fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-(terc-butildimetilsililoxi) ciclohexilcarbamato de terc-butilo (2,71 g; 58%), MS: 702 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,99 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 2 min, 5 ml/min). Se añadió TFA (29 ml) a una disolución agitada de este material (2,06 g; 2,93 mmoles) en MeOH (29 ml) a TA. Después de 1,5 h, se eliminaron los disolventes en el evaporador rotatorio. Se disolvió el residuo en DCM y se eliminó el disolvente en el evaporador rotatorio. Esto se repitió tres veces. Finalmente, se disolvió el residuo en DCM, se lavó con una disolución ac., saturada de Na2CO3, salmuera y se secó (Na2SO4). La eliminación del disolvente seguido por cromatografía de columna (elución con gradiente por etapas con DCM que contenía 0 a 4% de una disolución 2,0 N de NH3 en MeOH) proporcionó el producto (1,14 g; 80%) que era idéntico al Ejemplo 37, Enantiómero A.

Ejemplo 40 Síntesis Enantioespecífica de (1R,2R,5R)-5-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino) pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-aminociclohexanol

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40A. Preparación de (1R,2R,4S)-5-(terc-butildimetilsililoxi)-4-hidroxiciclohexilcarbamato de terc-butilo

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Se añadió perrutenato de tetrapropilamonio (21 mg; 0,06 mmoles), a una suspensión agitada de N-óxido de N-metilmorfolina (107 mg; 0,92 mmoles), (1R,2R,4R)-2-(terc-butildimetilsililoxi)4-hidroxiciclohexilcarbamato de terc-butilo (39B) (210 mg; 0,61 mmoles) y tamices moleculares de 4 Å triturados (500 mg) en CH3CN seco (5 ml). Después de 5 min, se retiró el disolvente y se suspendió el residuo en una mezcla 1:1 de EtAc y hexano. Esto se aplicó en una pequeña columna de gel de sílice y se eluyó con cinco volúmenes de columna de la mezcla EtAc/hexano. La eliminación de los disolventes proporcionó (1R, 2R)-2-(terc-butildimetilsililoxi)4-oxociclohexilcarbamato de terc-butilo (189 mg; 90%). Esto se disolvió en THF seco y se enfrió la reacción a –78ºC. Se añadió tri-sec-butilborohidruro de litio (1,1 ml; 1,1 mmoles; 1,0 M en THF) gota a gota y se dejó la reacción con agitación durante 1 h, que permitió que se calentara a 0ºC. Se añadió cuidadosamente una disolución ac., saturada de NH4Cl y se extrajo la reacción con una mezcla de EtOAc/hexano = 1/1. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera y se secaron (Na2SO4). La eliminación de los disolventes seguido por cromatografía radial (gel de sílice, elución con gradiente por etapas que empezó con mezcla de hexano que contenía 0 a 30% de EtOAc) proporcionó, en orden de elución, el producto (127 mg; 67%) como un aceite: RMN de 1H (CDCl3): 0,05 (s, 3H); 0,07 (s, 3H); 0,86 (m, 9H); 1,42 (s, 9H); 1,47 (m, 1H); 1,57 (m, 2H); 1,70 (m, 3H), 1,91 (m, 1H); 3,43 (s, 1H); 3,83 (m, 1H); 4,05 (d, 1H); 4,48 (d, 1H) y (1R,2R,4R)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-4-hidroxiciclohexilcarbamato de terc-butilo (9 mg; 5%).

40B. Preparación de (1R,2R,5R)-5-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-aminociclohexanol

Se obtuvo (1R,2R,4R)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin5-iloxi)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-ciclohexilcarbamato de terc-butilo a partir de 1 y 40A como se describió en 39C. Después se desprotegió como se describió en 39C para dar el producto que fue idéntico al del Ejemplo 38, Enantiómero A. Ejemplo 41 Síntesis Enantioespecífica de (1S,2S,5R)-5-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5ilamino)pirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-aminociclohexanol

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41A. Preparación de (1S,2S,4S)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-4-hidroxiciclohexilcarbamato de terc-butilo

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Se obtuvo (1S,2S,4S)-4-(Benciloxi)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-N-((S)-1-feniletil) ciclohexanamina MS: 440 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 2,83 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min) a partir de (1S,2S,5S)-5-(benciloxi)-2-((S)-1feniletilamino)ciclohexanol) 39A como se describió en 39B. Después se convirtió en el producto como se describió en 39B y presentó un [a]25 589 19,2 (c 5,7, MeOH). 41B. Preparación de (1S,2S,5R)-5-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-aminociclohexanol

Se obtuvo (1S,2S,4R)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin

5-iloxi)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-ciclohexilcarbamato de terc-butilo a partir de 1 y 41A como se describió en 39C. Después se desprotegió como se describió en 39C para dar el producto que fue idéntico al del Ejemplo 37, Enantiómero B. Ejemplo 42 Síntesis Enantioespecífica de (1S,2S,5S)-5-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5ilamino)pirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-aminociclohexanol

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42A. Preparación de (1S,2S,4R)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-4-hidroxiciclohexilcarbamato de terc-butilo

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Se preparó (1S,2S)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-4-oxociclohexilcarbamato de terc-butilo a partir de (1S,2S,4S)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-4-hidroxiciclohexilcarbamato de terc-butilo (41A) como se describió en 40A. Se convirtió en el producto como se describió en 40A. 42B. Preparación de (1S,2S,5S)-5-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2f] [1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-aminociclohexanol

Se obtuvo (1S,2S,4S)-4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin5-iloxi)-2-(terc-butildimetilsililoxi)ciclohexilcarbamato de terc-butilo a partir de 1 y 42A como se describió en 39C. Después se desprotegió como se describió en 39C para dar el producto que fue idéntico al del Ejemplo 38, Enantiómero B.

Ejemplo 43 (1R,2R,5S)-2-amino-5-(4-(3-metoxifenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi) ciclohexanol

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43A. Preparación de 4-(3-Metoxifenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-ol

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Se preparó compuesto 43A a partir de 1F y 3-metoxianilina de la misma manera que 1G y presentó: MS: 257 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,22 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC 20 Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min).

43B. Preparación de (1R,2R,5S)-2-Amino-5-(4-(3-metoxifenilamino)-pirrolo[1.2f][1.2.4]triazin-5-iloxi)ciclohexanol

Se preparó compuesto 43 a partir de 43A y (1R,2R,4R)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-4hidroxiciclohexilcarbamato de terc-butilo (39B) de la misma manera que se describió para 39C 25 y presentó: MS: 370 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,44 min (columna de 4,6 x 50 mm

Phenomenex-Luna S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min).

Ejemplo 44 (1S,2S,5S)-2-Amino-5-(4-(3-metoxifenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5iloxi)ciclohexanol

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Se preparó compuesto 44 a partir de 4-(3-metoxifenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-ol (43A) y (1S,2S,4R)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-4-hidroxiciclohexilcarbamato de terc-butilo (42A) de la misma manera que se describió para 39C y presentó: MS: 370 (M+H)+;Tiempo de Ret. de HPLC: 0,79 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 2 min, 5 ml/min). Ejemplo 45 (1R,2R,5S)-2-Amino-5-(4-(3-etinilfenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)ciclohexanol

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45A. Preparación de 4-(3-Etinilfenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-ol

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Se preparó compuesto 45A a partir de 1F y 3-etinilbencenamina de la misma manera que 1G y presentó: MS: 251 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,39 min (columna de4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min). 45B. Preparación de (1R,2R,5S)-2-Amino-5-(4-(3-etinilfenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4] triazin-5-iloxi)ciclohexanol

Se preparó compuesto 45 a partir de 45A y (1R,2R,4R)-2-(terc-butildimetilsililoxi)hidroxiciclohexilcarbamato de terc-butilo (39B) de la misma manera que se describió para 39C y presentó: MS: 364 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,63 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min).

Ejemplo 46 (1S,2S,5S)-2-Amino-5-(4-(3-etinilfenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)ciclohexanol

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Se preparó compuesto 46 a partir de 45A y (1S,2S,4R)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-4hidroxiciclohexilcarbamato de terc-butilo (42A) de la misma manera que se describió para 39C y presentó: MS: 364 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 0,97 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 2 min, 5 ml/min). Ejemplo 47 (1S,2S,5R)-2-Amino-5-(4-(3-etinilfenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)ciclohexanol

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Se preparó compuesto 47 a partir de 45A y (1S,2S,4S)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-4hidroxiciclohexilcarbamato de terc-butilo (41A) de la misma manera que se describió para 39C y presentó: MS: 364 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 0,98 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 2 min, 5 ml/min). Ejemplo 48 (1R,2R,5R)-2-Amino-5-(4-(3-etinilfenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)ciclohexanol

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Se preparó compuesto 48 a partir de 45A y (1R,2R,4S)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-4hidroxiciclohexilcarbamato de terc-butilo (40A) de la misma manera que se describió para 39C y presentó: MS: 364 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 0,98 min (columna de 3,0 x 50 mm YMC Xterra S7, gradiente de 2 min, 5 ml/min). Ejemplo 49 (1R,2R,5S)-2-Amino-5-(4-(3-bromofenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi) ciclohexanol

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49A. Preparación de 4-(3-Bromofenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-ol

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Se preparó compuesto 49A a partir de 1F y 3-bromoanilina de la misma manera que 1G y presentó: MS: 306 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,64 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min). 49B. Preparación de (1R,2R,5S)-2-Amino-5-(4-(3-bromofenilamino)pirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin-5-iloxi)ciclohexanol

Se preparó compuesto 49 a partir de 49A y (1R,2R,4R)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-4hidroxiciclohexilcarbamato de terc-butilo (39B) de la misma manera que se describió para 39C y presentó: MS: 418 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,89 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min).

Ejemplo 50 (1R,2R,5S)-2-Amino-5-(4-(3-clorofenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi)ciclohexanol

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50A. Preparación de 4-(3-Clorofenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-ol

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20 Se preparó compuesto 50A a partir de 1F y 3-cloroanilina de la misma manera que 1G y presentó: MS: 261 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,28 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min). 50B. Preparación de (1R,2R,5S)-2-Amino-5-(4-(3-clorofenilamino)pirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin-5-iloxi)ciclohexanol

25 Se preparó compuesto 50 a partir de 50A y (1R,2R,4R)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-4hidroxiciclohexilcarbamato de terc-butilo (39B) de la misma manera que se describió para 39C y presentó: MS: 374 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,90 min (columna de 4,6 x 50 mm YMC Xterra S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min). Ejemplo 51

30 (1R,2R,5S)-2-Amino-5-(4-(3-cloro-4-fluorofenilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5-iloxi) ciclohexanol

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Se preparó compuesto 51 a partir de 7A y (1R,2R,4R)-2-(terc-butildimetilsililoxi)-4hidroxiciclohexilcarbamato de terc-butilo (39B) de la misma manera que se describió para 39C y presentó: MS: 392 (M+H)+; Tiempo de Ret. de HPLC: 1,72 min (columna de 3,0 x 50 mm Phenomenex-Luna S5, gradiente de 3 min, 4 ml/min).

Claims (15)

1. Reivindicaciones

   1. Un compuesto de fórmula I:

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   en la que: R1 es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, anillo carbocíclico, anillo carbocíclico sustituido, arilo, arilo sustituido, heterociclilo o heterociclilo sustituido; dichos sustituyentes en el alquilo sustituido, cicloalquilo, arilo

   o heterociclilo seleccionados del grupo que consiste en uno o más de hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heterociclilo, heterociclilo sustituido, -CN, -N3, -NH2, -NH-alquilo, -NH-alquilo sustituido, -NH-arilo, -NH-arilo sustituido, -NHCO-alquilo, imino, alquilimino, alquilimino sustituido, arilimino, arilimino sustituido, hidroxilo, alcoxi, alcoxi sustituido, ariloxi, ariloxi sustituido, carboxi, -CONH-alquilo, -CONH-alquilo sustituido, R2 es arilo, arilo sustituido, heterociclilo o heterociclilo sustituido; dichos sustituyentes en el grupo arilo sustituido o heterociclilo sustituido se seleccionan del grupo que consiste en uno o más de: hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, -CN, -N3, alcoxi, alcoxi sustituido, arilo, arilo sustituido, ariloxi, ariloxi sustituido, -O-heterociclilo, -O-heterociclilo sustituido, heterociclilo, heterociclilo sustituido, -CF3 y –OCF3; X es un enlace directo o NH-

   o una sal, éster, solvato, profármaco o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo.

2. 2.

   El compuesto como se define en la reivindicación 1 en el que: R1 es cicloalquilo o cicloalquilo sustituido, dichos sustituyentes en el cicloalquilo sustituido, seleccionados del grupo que consiste en uno o más de: –OH, -NH2, NHCN, =O, -NH-alquil-SO2-alquilo, -NH-alquilaril-CO2-alquilo, -NHalquilarilCO2H, NHalquilCO2H, -NHarilalquilCO2H, -NHalquilarilSO2NHCO-alquilo, -NHalquilaril-NH-alquilaril-SO2NHCO-alquilo, -NHalquilarilCONHSO2alquilo y –NHCO-alquilamino; R2 es arilo, arilo sustituido, heterociclilo o heterociclilo sustituido; dichos

   sustituyentes en el grupo arilo o heterociclilo sustituido se seleccionan del grupo que consiste en uno o más de: hidrógeno, halógeno, alquilarilo o alquilarilo sustituido y X es -NH

3. 3.

   El compuesto según la reivindicación 1,

   en el que: R1 es ciclohexilo o ciclohexilo sustituido, dichos sustituyentes en el cicloalquilo sustituido, seleccionados del grupo que consiste en uno o más de: –OH, -NH2, NHCN, =O, -NH-alquil-SO2-alquilo, -NH-alquilaril-CO2-alquilo, -NHalquilarilCO2H, NHalquilCO2H, -NHarilalquilCO2H, -NHalquilarilSO2NHCO-alquilo, -NHalquilaril-NH-alquilaril-SO2NHCO-alquilo, -NHalquilarilCONHSO2alquilo y –NHCO-alquilamino.

4. 4.

   El compuesto que es: (1,4-cis)-4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5iloxi) ciclohexanol; 1-(3-Fluorobencil)-N-(5-((1,4-cis)-4-aminociclohexiloxi)H-pirrolo[1.2-b]piridazin-4-il)1H-indazol-5-amina; 1-(3-Fluorobencil)-N-(5-((1,4-trans)-4-aminociclohexiloxi)H-pirrolo[1.2-b]piridazin-4il)-1H-indazol-5-amina; 5-((1,4-cis)-4-Aminociclohexiloxi)-N-(3-cloro-4-fluorofenil)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-4amina; N-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-il)-5-((1,4-cis)-4-(2-(metilsulfonil)etilamino)ciclohexiloxi) pirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin-4-amina; N-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-il)-5-((1,4-trans)-4-(2(metilsulfonil)etilamino)ciclohexiloxi) pirrolo[1.2-f] [1.2.4]triazin-4-amina; Ácido 4-(((1,4-trans)-4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2f][1.2.4]triazin-5-iloxi)ciclohexilamino)metil)benzoico; Ácido 4-(((1,4-cis)-4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2f][1.2.4]triazin-5-iloxi)ciclohexilamino)metil)benzoico; Ácido 4-(((1,4-trans)-4-(4-(3-cloro-4-(piridin-2-ilmetoxi)fenilamino)pirrolo[1.2f][1.2.4]triazin-5-iloxi)ciclohexilamino)metil)benzoico; Ácido 4-(((1,4-cis)-4-(4-(3-cloro-4-(piridin-2-ilmetoxi)fenilamino)pirrolo[1.2f][1.2.4]triazin-5-iloxi)ciclohexilamino)metil)benzoico; Ácido 1-(4-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5iloxi) ciclohexilamino)ciclopropanocarboxílico, isómero A y B; 4-(((1,4-trans)-4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2f][1.2.4]triazin-5-iloxi) ciclohexilamino)metil)-N-(metilsulfonil)benzamida;

   N-((1,4-cis)-4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5iloxi) ciclohexil)-2-aminoacetamida; N-((1,4-trans)-4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2f][1.2.4]triazin-5-iloxi) ciclohexil)-2-aminoacetamida; 1-(4-(4-(1-(3-Fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2-f][1.2.4]triazin-5iloxi)piperidin-1-il)-2-aminoetanona; (1R,2R,5S)-y (1S,2S,5R)-5-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2f][1.2.4]triazin-5-iloxi)2-aminociclohexanol; (1R,2R,5R)-y (1S,2S,5S)-5-(4-(1-(3-fluorobencil)-1H-indazol-5-ilamino)pirrolo[1.2f][1.2.4]triazin-5-iloxi)-2-aminociclohexanol

   o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

5. 5.

   Una composición farmacéutica que comprende al menos un compuesto según la reivindicación 1 y un portador farmacéuticamente aceptable.

6. 6.

   Una composición farmacéutica que comprende al menos un compuesto según la reivindicación 1 en asociación con un portador farmacéuticamente aceptable y al menos otro agente anticáncer o citotóxico formulado como una dosis fija.

7. 7.

   La composición farmacéutica según la reivindicación 6, en la que dicho agente anticáncer

   o citotóxico se selecciona del grupo que consiste en: tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno, yodoxifeno, acetato de megestrol, anastrozol, letrozol, borazol, exemestano, flutamida, nilutamida, bicalutamida, acetato de ciproterona, acetato de goserelina, leuprolida, finasterida, inhibidores de la metaloproteinasa, inhibidores de la función del receptor del activador de plasminógeno urocinasa, anticuerpos del factor de crecimiento, anticuerpos de receptores de factor de crecimiento, bevacizumab, cetuximab, inhibidores de la tirosina cinasa, inhibidores de serina/treonina cinasa, metotrexato, 5-fluorouracilo, purina, análogos de adenosina, arabinósido de citosina, doxorubicina, daunomicina, epirubicina, idarubicina, mitomicina-C, dactinomicina, mitramicina, cisplatino, carboplatino, mostaza de nitrógeno, melfalano, clorambucilo, busulfano, ciclofosfamida, ifosfamida, nitrosoureas, tiotepa, vincristina, paclitaxel, docetaxel, análogos de epotilona, análogos de discodermolida, análogos de eleuterobina, etopósido, tenipósido, amsacrina, topotecán, flavopiridoles, inhibidores del proteasoma incluyendo bortezomib y modificadores de la respuesta biológica.
8. 8. Uso de un compuesto según la reivindicación 1, para la preparación de una composición farmacéutica para el tratamiento de una enfermedad proliferativa, tratamiento que comprende administrar a una especie de mamífero con necesidad del mismo, una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto según la reivindicación 1.
9. 9. El uso según la reivindicación 8, en el que la enfermedad proliferativa se selecciona del grupo que consiste en cáncer, soriasis y artritis reumatoide.
10. 10.El uso según la reivindicación 9, en el que la enfermedad proliferativa es cáncer.
11. 11.El uso según la reivindicación 10, en el que el tratamiento comprende además administrar a una especie de mamífero con necesidad del mismo, una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos otro agente anticáncer o citotóxico en asociación con un compuesto según la reivindicación 1.
12. 12.El uso según la reivindicación 11, en el que dicho agente anticáncer o citotóxico se selecciona del grupo que consiste en: tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno, yodoxifeno, acetato de megestrol, anastrozol, letrozol, borazol, exemestano, flutamida, nilutamida, bicalutamida, acetato de ciproterona, acetato de goserelina, leuprolida, finasterida, inhibidores de la metaloproteinasa, inhibidores de la función del receptor del activador de plasminógeno urocinasa, anticuerpos del factor de crecimiento, anticuerpos de receptores de factor de crecimiento, bevacizumab, cetuximab, inhibidores de la tirosina cinasa, inhibidores de serina/treonina cinasa, metotrexato, 5-fluorouracilo, purina, análogos de adenosina, arabinósido de citosina, doxorubicina, daunomicina, epirubicina, idarubicina, mitomicina-C, dactinomicina, mitramicina, cisplatino, carboplatino, mostaza de nitrógeno, melfalano, clorambucilo, busulfano, ciclofosfamida, ifosfamida, nitrosoureas, tiotepa, vincristina, paclitaxel, docetaxel, análogos de epotilona, análogos de discodermolida, análogos de eleuterobina, etopósido, tenipósido, amsacrina, topotecán, flavopiridoles, inhibidores del proteasoma incluyendo bortezomib y modificadores de la respuesta biológica.
13. 13.Uso de un compuesto según la reivindicación 1, para la preparación de una composición farmacéutica para modular la actividad de la tirosina cinasa receptora, modulación que comprende administrar a una especie de mamífero con necesidad del mismo, una cantidad eficaz de al menos un compuesto según la reivindicación 1.
14. 14.El uso según la reivindicación 13, en el que dicha tirosina cinasa receptora se selecciona del grupo que consiste en HER1, HER2, HER4, VEGFR-2, FGFR-1 y PDGFR.
15. 15.Uso de un compuesto según la reivindicación 1, para la preparación de una composición farmacéutica para el tratamiento de enfermedades asociadas a rutas de transducción de señales que operan mediante receptores del factor de crecimiento, tratamiento que comprende administrar a una especie de mamífero con necesidad del mismo, una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto según la reivindicación 1.