ES2349951T3 - Fermentación de soluciones con contenido en zumo de granada mediante la levadura saccharomyces boulardii y lactobacilos para obtener productos fermentados y la utilización de los mismos. - Google Patents

Abstract

Utilización de un producto de fermentación, obtenible mediante un procedimiento que comprende la fermentación de un componente de fermentación con contenido en zumo de granada, caracterizado por la utilización para la fermentación de la levadura Saccharomyces boulardii y al menos un tipo de lactobacilos, seleccionado a partir del grupo compuesto por los tipos Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus.

Description

Fermentación de soluciones con contenido en zumo de granada mediante la levadura Saccharomyces boulardii y lactobacilos para obtener productos fermentados y la utilización de los mismos

Este hallazgo se corresponde a productos ricos en polifenol procedentes de las plantas, así como a un procedimiento para la elaboración de estos productos. De forma adicional, el hallazgo también se corresponde a la utilización de los productos con contenido en polifenol para la elaboración de alimentos, suplementos nutricionales, alimentos dietéticos y cosméticos; así como también alimentos, suplementos nutricionales, alimentos dietéticos y cosméticos que contienen este producto.

Los polifenoles pertenecen al grupo de sustancias vegetales secundarias. Se encuentran muy presentes en el ámbito de los vegetales con más de 8.000 aplicaciones y pueden disociarse gracias a su estructura base de fenol (hidroxibenzol). La estructura base de los polifenoles está compuesta por un anillo o sistema de anillos aromático con dos o más grupos hidroxilos unidos de forma directa a dicho anillo. Dentro de los polifenoles también se incluyen aquellas asociaciones aromáticas, que cuentan con al menos dos grupos de grupos hidroxilos fenolíticos en una molécula. Aquí se incluyen en particular los tres dihidroxibencenos (pirocatequina, resorcina, hidroquinona) y sus derivados. En la naturaleza, podemos encontrar polifenoles libres y eterificados por ejemplo en las sustancias colorantes de las flores (por ejemplo: antocianinas, antocianidinas, flavonoles, flavonoides), en los taninos (por ejemplo: catequina, taninos), en los líquenes o componentes de los helechos (por ejemplo: ácido úsnico, acilpolifenoles), o en ligninas, como los derivados del ácido gálico, ploroglucinol, ácido pirogálico o hexahidroxibenceno. Por lo general, en los medios ácidos, la solubilidad de los polifenoles al agua es buena. Se oxidan con gran facilidad, y con la polimerización y la oxidación, forman una sedimentación de color marrón. Si atendemos a su estructura química, los polifenoles forman los grupos de los ácidos fenólicos, los flavonoides, las antocianinas, o bien las antocianidinas y los derivados de los estilbenos. Los polifenoles pueden presentarse en forma de asociaciones de elevado peso molecular, como por ejemplo los glicósidos o los ésteres. Con bastante frecuencia, los polifenoles se encuentran en las plantas en forma de glicósidos (asociados a uno o varios azúcares monómeros, iguales o diferentes) o en forma de polímeros.

Los polifenoles pertenecen a los denominados "componentes vegetales secundarios", ya que ni se sintetizan ni se metabolizan en el intercambio de sustancias primarias. Aún no se han descrito completamente las formas precisas de biosíntesis y de metabolización de las sustancias vegetales secundarias. Se ha demostrado que cuentan con propiedades hormonales (estimuladores del crecimiento, esteroides y feromonas) y protectoras; en particular ofrecen protección frente a los rayos UV, frente a insectos y frente infecciones por hongos y bacterias. Algunas de las sustancias vegetales secundarias, como los flavonoides y las antocianinas, también contribuyen de forma decisiva sobre la coloración de las flores y/o los frutos.

Existen numerosas plantas con un elevado contenido en polifenoles. Entre ellas podemos destacar las plantas habituales de Europa como por ejemplo, los manzanos, el té, las hojas y las bayas de las vides de vino rojo, las frambuesas, las fresas, los granos de saúco, las endrinas, las grosellas negras y las cerezas negras, así como también otras plantas y partes de las plantas menos habituales como por ejemplo, la piel y la carne del fruto del mango (Garcinia mangostana), las bayas de acai, el fruto del amalaki, las bayas de la aronia, la granada, el gingko, las semillas de la perilla (Perilla frutescens), la ballota negra, la melisa-limón y el sésamo salvaje. Los polifenoles contenidos en las plantas se encuentran principalmente en forma de glicósidos asociados en una o varias, iguales o diferentes, moléculas de azúcar y/o en forma de polímeros de elevado peso molecular.

El creciente interés en los polifenoles ha resultado en varios estudios in vivo e in vitro, en los cuales se han detectado, entre otras, propiedades anticancerígenas, antimutagénicas, antioxidantes, antivirales, antiproliferativas, antitrombóticas y reductoras de lípidos.

La entrada de polifenoles en el organismo se produce principalmente a través de la reabsorción en la mucosa intestinal. Por consiguiente, las asociaciones de bajo peso molecular pueden atravesar con mayor facilidad la mucosa intestinal que las asociaciones con elevado peso molecular. Puesto que los polifenoles vegetales se presentan principalmente en forma de glicósidos o de polímeros con elevado peso molecular, para una reabsorción de los polifenoles, en primer lugar las asociaciones de azúcar de los glicósidos deberán disociarse y los polifenoles puros, que no se encuentran unidos al azúcar (agliconas) se liberan,

o bien, los polímeros de elevado peso molecular de los ácidos fenólicos se hidrolizan.

Sobre el ser humano, el resultado es un aumento considerable de la flora intestinal con un gran número de diferentes enzimas. En parte, los glicósidos ya se hidrolizan en la mucosa intestinal mediante la enzima lactasa-florizinahidrolasa en el cepillo del epitelio de las células intestinales. La carencia de esta enzima en la flora intestinal es de casi el 5% en los europeos y del 90% en africanos y asiáticos. La beta-glucosidasa de las células intestinales cuenta con una función parecida a la de la enzima lactasa-florizina-hidrolasa, que se puede encontrar sobre todo a nivel intracelular (citosólicos). La mayor parte de los glicósidos se presentan sin disociarse en el intestino grueso. Muchos glicósidos se descomponen en primer lugar mediante los microorganismos del intestino grueso, es decir, mediante glucosidasas específicas situadas en el colon (Scalbert und Williamson, Dietary intake and bioavailability of polyphenols, J. Nutr. 2000 Aug; 130(8S Suppl): 2073S-85S).

Los polifenoles se liberan mediante las enzimas de la flora del intestino grueso de sus polímeros glicósidos, es decir de su forma de polímero. Numerosos polifenoles están sujetos además a un ciclo enterohepático como los glucurónidos, metilatos o sulfatos, que en parte se disocian mediante los microorganismos del intestino grueso. Los aglico-polifenoles liberados mediante la metabolización en el intestino grueso no sólo muestran un peso molecular bajo, sino que cuentan con el mismo efecto lipófilo que las glicósidas. Por este motivo, las agliconas traspasan la membrana celular hidrófóbica de los colocitos en una cantidad considerable y son introducidas en el torrente sanguíneo.

La biodisponibilidad de los aglico-polifenoles también depende de forma decisiva de la actividad de intercambio de sustancias de la flora intestinal. Se consigue una biodisponibilidad suficiente de polifenoles cuando existe una adecuada flora intestinal, que disocia la asociación de azúcar de los glicósidopolifenoles y libera aglico-polifenoles para metabolizar el resto de polímeros de polifenol de elevado peso molecular y convertirlos en componentes con bajo peso molecular. También se puede elevar la biodisponibilidad de los polifenoles mediante una biotransformación de las moléculas que aún no han sido lipofilizadas. Sólo si de da una biodisponibilidad lo suficientemente elevada, los polifenoles penetrarán en tal cantidad en el torrente sanguíneo como para alcanzar una concentración lo suficientemente efectiva. Por consiguiente, el efecto biológico de los polifenoles, se ve influido de forma directa por la capacidad de intercambio de sustancias y por la composición de la flora intestinal.

La composición y la actividad metabólica de los microorganismos intestinales demuestran una fuerte diferencia ínter-individual y también específica de cada especie. Por ejemplo, los microorganismos del intestino de los ratones no son capaces de fermentar ciertos polifenoles de granadas. También en el caso del ser humano existen diferencias ínter-individuales relacionadas con la actividad metabólica de la flora intestinal. La biodisponibilidad, y por consiguiente, el efecto biológico de las sustancias vegetales, y en particular el de los polifenoles, puede influir de forma muy diferente sobre varias personas.

Existen diferentes procesos, mediante los cuales las sustancias vegetales pueden transformarse de forma metabólica en el exterior del cuerpo humano. Por ejemplo, la transformación de las frutas caedizas mediante microorganismos que provocan una biotransformación sobre las sustancias de esta fruta. También la elaboración de vino o cerveza, con la utilización de levadura de vino o de cerveza reflejan este proceso.

El detalle de patente US 5,639,496 A describe un producto alimenticio que se ha obtenido mediante la fermentación con Saccharomyces boulardii, en particular, a partir de cereales como el maíz y el trigo, la soja y diferentes verduras como por ejemplo los guisantes.

El detalle de patente US 5,891,440 describe, entre otros, la elaboración de una crema para la piel elaborada a partir de diferentes componentes vegetales, entre ellos, aceite obtenido de las semillas de granada, leche de coco, espárrago chino y bayas de schizandra. Una parte del aceite de las semillas de la granada puede sustituirse de forma alternativa por una mezcla a partir de vino tinto seco, preferiblemente Carmel Hilonim 1995, de la bodega Carmel en Israel.

El detalle de patente US 6,953,574 B2 describe la fermentación de diferentes componentes de diferentes plantas, y también de diferentes verduras o tipos de frutas, bayas, hierbas, hongos, frutos secos además de productos animales como por ejemplo los órganos ricos en proteínas o los productos procedentes de la apicultura, mediante diferentes microorganismos como por ejemplo bífido bacterias, ácidos acéticos o propionibacterias, levaduras, lactobacilos o también hongos. Es posible obtener diferentes medios hidrolizados y fermentados que contienen en diferentes cantidades materiales de intercambio con diferentes microorganismos. El ámbito de aplicación de los medios generales descritos será muy extenso y comprenderá el tratamiento de casi todas las enfermedades.

Serán de interés especial para la terapia alimenticia adjunta, para la prevención de problemas de alimentación fisiológicos y el tratamiento y/o profilaxis de enfermedades aquellos productos que se pueden obtener mediante un proceso de elaboración con las materias de partida descritas y seleccionadas de forma concreta conforme a un objetivo, que cuentan con un espectro adecuado de sustancias utilizadas para el mantenimiento general de la salud, o que además son adecuadas para determinadas enfermedades, para la terapia de alimentación adjunta y para la prevención de problemas de alimentación fisiológicos.

El objetivo del presente hallazgo era el de elaborar un producto con un elevado contenido en polifenoles biodisponibles, que en una dosis alimenticia fisiológica para la elaboración de alimentos, suplementos dietéticos y alimentos dietéticos sea adecuado para un mantenimiento general de la salud, en particular del corazón, los vasos sanguíneos y la próstata y que dentro de la dosificación farmacológica en forma de fármacos, en particular en lo que respecta a la terapia adjunta, sean adecuados para la prevención de cáncer (en especial de próstata, mama, colon y/o carcinoma pulmonar; y que también sean también de ayuda y sinergéticos para la cromoterapia y/o radioterapia), hiperplasia prostática benigna, arteriosclerosis por la modificación de los vasos sanguíneos, enfermedades coronarias, esclerosis celebrar, hipercolesterolemia, enfermedades crónicas inflamatorias como por ejemplo artritis reumatoide; Alzheimer mórbido, Párkinson mórbido, esclerosis múltiple y/o micro y macroangiopatías causadas por Diabetes mellitus.

Este problema se ha resuelto de forma asombrosa mediante un componente de fermentación, obtenido mediante un procedimiento de fermentación de un componente de fermentación con contenido en zumo de granada, en el que se utilizan la fermentación la levadura Saccharomyces boulardii y al menos un tipo de lactobacilos, seleccionados del grupo compuesto por el tipo de lactobacilos Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus.

La granada (fruto del granado, Punica granatum) es uno de los frutos más antiguos utilizado por la humanidad con fines culturales y curativos. Durante los últimos años, la granada ha estado en el punto de mira de la investigación. Hasta el momento, alrededor de 250 publicaciones en revistas científicas se han dedicado al granado. Se han demostrado los efectos antioxidantes, antiinflamatorios, antiarterioscleróticos y anticancerígenos en estudios in vitro, in vivo y en estudios clínicos del zumo de granada. En un estudio realizado con 48 pacientes con cáncer de próstata, se demostró con la ingesta regular de zumo de granada, el tiempo de doblaje del reflejo sanguíneo del marcador para cáncer de próstata PSA (antígeno prostático específico) se veía cuadruplicado, lo que se traduce en un retardo sobre el avance del cáncer de próstata (Pantuck et al., Phase II Study of Pomegranate Juice for Men with Rising Prostate-Specific Antigen following Surgery or Radiation for Prostate Cancer, Clin. Cancer Res. 2006; 12, 13: 4018-4026). Otros estudios demuestran que el zumo de granada sobre modelos animales e in vitro cuenta con un marcado efecto inhibidor del crecimiento del cáncer de pulmón, intestino, piel y pecho. En los estudios clínicos realizados, a ingesta de zumo de granada mejoró considerablemente el riego sanguíneo del miocardio (músculo del corazón) en pacientes con enfermedades coronarias y redujo los depósitos arterioscleróticos en la arteria carótida (Arteria carotis). Los procesos inflamatorios NF-kappaB-y TNF-alfa y el desarrollo de la demencia del Alzheimer se vieron también retardados. Parece que no se trata de coincidencias aisladas específicas, sino que es un efecto sinergético específico de los diferentes componentes naturales de la granada. Dichos componentes se encargan de modular la ruta de transducción intracelular además de la regulación de la expresión genética.

La granada cuenta con un elevado contenido en determinadas sustancias vegetales secundarias y en polifenoles. Aquí se incluyen especialmente los ácidos fenólicos (ácidos gálicos, ácidos elágicos), cuyos derivados polimerizados (sobre todo, elagitanina, como por ejemplo punicalagina), flavonoides (como por ejemplo catequina, quercetina, rutina) además de antocianinas (como por ejemplo: delfinidina-3,5-diglucósido, delfinidina-3diglucósido, cianidina-3,5-diglucósido, cianidina-3-glucósido, pelargonidina-3glucósido).

Se conoce que determinados productos de la granada tienen contenido en polifenoles, especialmente en forma de ácidos fenólicos y sus polímeros, además de flavonoides. Los polifenoles de la granada se presentan fundamentalmente como glicósidos o como polímeros de elevado peso molecular. Los productos derivados de la granada se han ofrecido hasta el momento o bien en forma de zumo o bien en forma de extractos secos procedentes de la piel y de las membranas de la granada. Para la elaboración, se han empleado medios de extracción mecánicos, acuosos y/o alcohólicos. En todos estos procesos quedan polifenoles asociados a su enlace de azúcar, es decir, glicósidos, dicho de otro modo, quedan polímeros de elevado peso molecular al igual que en el producto a base de granada. Su biodisponibilidad directa es por consiguiente baja y requiere, en primer lugar, someterse a una biotransformación mediante los microorganismos intestinales. Al mismo tiempo, la biodisponibilidad de las agliconas, o bien de los productos de disociación de bajo peso molecular depende en gran medida de la flora intestinal individual de cada paciente.

De esta forma, en los estudios individuales que se han realizado hasta el momento, se ha observado que la ingesta por vía oral de zumo de granada en pacientes con cáncer de próstata ha demostrado que casi más del 80% de los participantes en el estudio han respondido tras tratamiento con zumo de granada. Esto se tradujo en un aumento del tiempo de doblaje para el reflejo sanguíneo del marcador de cáncer de próstata PSA durante una media entre 15 y 54 meses, aspecto que se corresponde a un retardo considerable sobre el avance de la enfermedad. Sin embargo, entre los Respondedores se produjo una diferencia patente en la forma de este efecto. Esto se reflejó en el gran margen de fluctuación del tiempo de doblaje PSA obtenido al cabo de 54 ± 102 meses. En una parte de los pacientes sólo se apreció un ligero retardo en el aumento del reflejo sanguíneo PSA, mientras que en el 35% de los pacientes se observó un descenso absoluto del reflejo sanguíneo PSA. En el 9% de los pacientes se observó un descenso del reflejo PSA de un 50% (Pantuck et al., 2006). Este elevado rango de descenso como efecto del zumo de granada no puede ser aclarado únicamente por las posibles diferencias en los carcinomas prostáticos, sino que se debe también a las diferencias ínter-individuales en la biodisponibilidad de los polifenoles de la granada. Esto se ha demostrado de forma contundente en un estudio de biodisponibilidad con polifenoles de granada. Tras la ingesta por vía oral, se ha demostrado que las concentraciones de suero de las sustancias entre diferentes personas descendieron de forma considerable y que los metabolitos estudiados sobre un tercio de las personas sometidas a las pruebas no ascendían en la sangre. Este fenómeno está relacionado en primera instancia con la constitución individual de la flora intestinal (Cerdá et al., J. Agric. Food Chem. 2005 Jul 13; 53(14): 5571-6).

Algo seguro es que el efecto biológico del zumo de granada se atribuye principalmente a las agliconas metabolitos de la flora intestinal contenidas en los glicósidos y en los polifenoles polímeros, no a un efecto directo de los glicósidos y polímeros polifenoles contenidos en el zumo. Esto también se ha visto respaldado por los hallazgos en los estudios de biodisponibilidad.

Además, en el efecto del zumo de granada no sólo participan una o varias sustancias individuales, sino que se trata del efecto sinergético de un espectro de sustancias (L.M. Jacob, Granatapfel: Prävention und adjuvante Ernährungstherapie bei Krebserkrankungen, EHK 2007 (56): 464-473). Globalmente no se trata de un mecanismo de efecto farmacológico individual y concreto, sino que se trata de un efecto nutricional fisiológico del zumo de granada.

En particular, también parecen intervenir diferentes polifenoles agliconas sobre este efecto, que se obtuvieron en primer lugar mediante una biotransformación

o bien se crearon o se liberaron y por consiguiente se convirtieron en biodisponibles debido a la deglicosilación de los componentes de la granada.

Para elaborar un producto con un elevado contenido en polifenoles biodisponibles de conformidad con el hallazgo, en primer lugar no deberá emplearse el zumo de granada como producto de partida rico en polifenoles, sino que los materiales contenidos deberán someterse a un proceso adicional de fermentación fuera del cuerpo humano, con los microorganismos biotransformados y biodisponibles adecuados. Esto facilita que también las personas con una flora individual escasa puedan beneficiarse de los eficaces efectos de los metabolitos de los polifenoles.

De conformidad con el hallazgo, para la fermentación se ha seleccionado la levadura Saccharomyces boulardii y al menos un tipo de lactobacilos pertenecientes al grupo compuesto por los tipos Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus.

La levadura Saccharomyces boulardii pertenece a la categoría de las levaduras de azúcar (Saccharomyces) y se demostró por primera vez en 1923 en Indochina por Henri Boulard sobre las pieles de los frutos del lichi. La existencia de la levadura Saccharomyces boulardii en el tracto intestinal no supone ningún peligro para el ser humano. Entre otras aplicaciones, en forma de cápsulas liofilizadas se utiliza para el tratamiento de la diarrea y para la restauración de la flora intestinal tras el tratamiento con antibióticos por vía oral, presumiblemente su efecto en el intestino impide, al menos de forma temporal, una fuerte proliferación de los patógenos que podrían haber provocado la diarrea, posiblemente debido a su elevada capacidad de reproducción. Por contraposición con las levaduras típicas del vino, la Saccharomyces boulardii cuenta con una óptima y elevada temperatura de crecimiento de 37°C (Mansour-Ghanaei et al., World J Gastroenterol 2003 Aug; 9(8):1832-1833; McFarland et al., Microbial Ecology in Health and Disease 1993 July 6(4):157171).

Los lactobacilos pertenecen al grupo de bacterias Gram positivas. Pueden obtenerse a partir de la fermentación de los ácidos lácticos y por lo general no son patógenos para el ser humano. Algunos tipos de lactobacilos se utilizan en la elaboración de alimentos, por ejemplo para la elaboración de productos lácteos. No obstante, los lactobacilos pueden resultar dañinos en la industria alimenticia y provocar reacciones no deseadas, como por ejemplo en las fábricas de cerveza. Algunos lactobacilos son una parte de la flora natural intestinal de las personas, en particular del tracto digestivo. De esta manera podemos encontrar por ejemplo Lactobacillus plantarum en el tracto digestivo de una persona. Los lactobacilos toleran por lo general los valores de pH bajos mejor que las especies utilizadas como por ejemplo los Pedioccocus, y crecen también con valores pH de por ejemplo 4-5.

Como contrapartida a las fermentaciones de levaduras habituales de frutos con levaduras de vino para la producción de alcohol, que se corresponden a la temperatura óptima de las levaduras del vino para la producción de alcohol a temperaturas moderadas entre 10 -25°C, se ha demos trado de forma asombrosa y ha resultado particularmente provechoso el hecho de que con la elaboración de conformidad con el hallazgo de los productos de fermentación con contenido en polifenoles, se alcanza una temperatura de cultivo entre 30 38°C durante la fermentación. Se ha evidenciado que las reacciones enzimáticas necesarias como por ejemplo para la depolimerización y la deglicosización se producen de la forma más efectiva posible a estas temperaturas. La utilización de Saccharomyces boulardii se ha demostrado de forma asombrosa de conformidad con el hallazgo y ha resultado particularmente provechoso, el hecho de que esta bacteria prefiere temperaturas superiores a 30°C para un crecimiento óptimo. Además, se ha demostrado de forma sorprendente que la bacteria Lactobacillus plantarum, así como las bacterias Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus, son ideales para la fermentación del zumo de granada por su contenido en polifenoles de bajo peso molecular. Estos lactobacilos disponen de una cantidad adecuada de enzimas. Especialmente, durante el inicio de la fermentación, se utiliza una suficiente concentración de microorganismos de lactobacilos y para unas condiciones de crecimiento favorables (temperatura, valor pH, contenido en azúcar) la solución se elabora de forma que el zumo de granada contenga polifenoles antibacterianos, que retarden el crecimiento bacteriano. La concentración de enzimas de estos lactobacilos completa, además de la concentración de enzimas de la levadura Saccharomyces boulardii, de forma particularmente adecuada, la elaboración del producto de fermentación de conformidad con el hallazgo en el marco de una cofermentación.

Mediante la fermentación con Saccharomyces boulardii y Lactobacillus plantarum / paraplantarum / pentosus / acidophilus se reproduce en cierto modo el proceso de la digestión fuera del cuerpo humano, de forma que también se puede obtener una mejor biodisponibilidad en personas con flora intestinal reducida. Dichos productos integrales de la granada con metabolitos polifenoles con peso molecular bajo, que se fermentan en un medio similar al del intestino, en la actualidad aún se desconocen.

Un producto fermentado de la granada es muy adecuado para una protección celular general y para el mantenimiento de la salud celular; en dosis farmacológicas y también como fármaco es adecuado para la terapia adjunta y la prevención del cáncer (especialmente de próstata, mama, colon y/o carcinoma pulmonar; y que es en particular favorable y sinergético para la cromoterapia y/o radioterapia), hiperplasia prostática benigna, modificaciones arterioscleróticas de los vasos sanguíneos, enfermedades coronarias, esclerosis cerebral, hipercolesterolemia, enfermedades crónicas inflamatorias como por ejemplo artritis reumatoide, Alzheimer mórbido, Párkinson mórbido, esclerosis múltiple y/o micro y macroangiopatías causadas por Diabetes mellitus.

Los productos de fermentación de conformidad con el hallazgo pueden ofrecerse con un contenido en azúcar considerablemente reducido frente al contenido en azúcar natural del zumo de granada. Esto permite que los diabéticos, por ejemplo, puedan beneficiarse de los polifenoles de granada fermentada. Para los diabéticos es particularmente interesante, ya que este grupo de población cuenta con un riesgo más elevado a sufrir micro y macroangiopatías, que podrán reducirse por ejemplo de forma nutricional y fisiológica mediante los polifenoles de la granada. El espectro evidente necesario de sustancias se encuentra en su mayor parte en la pulpa de la granada, lo que por otra parte resulta en un elevado contenido en azúcar sin las reducciones previas del contenido en azúcar en beneficio de los diabéticos. Mediante el producto de fermentación de conformidad con el hallazgo será posible reducir considerablemente el elevado contenido natural en azúcar del zumo de granada, y al mismo tiempo se podrá obtener una amplia gama de componentes naturales de la pulpa de la granada y sus derivados.

Los productos de fermentación preferidos de conformidad con el hallazgo cuentan con un contenido en azúcar, medido como una parte de glucosa y fructosa, de un total máximo del 2% del peso, correspondiente al peso total del componente de fermentación una vez finalizado el proceso de fermentación y antes de un procesamiento eventual. Los productos de fermentación preferidos de conformidad con el hallazgo muestran un contenido en azúcar de un total máximo de 1% del peso, y preferiblemente un 0,25% del peso, medido como parte de glucosa y fructosa y correspondiente al peso total del componente de fermentación al final del proceso de fermentación y antes de un procesamiento eventual.

Los productos de fermentación de conformidad con el hallazgo contienen preferiblemente entre el 0,25 hasta 4% del peso, correspondiente al peso total del componente de fermentación una vez finalizado el proceso de fermentación y antes de un procesamiento eventual, de uno o varios polímeros. Además, de forma preferible, los productos de fermentación de conformidad con el hallazgo contienen entre el 0,5 hasta el 3% del peso, y de forma más preferible entre el 0,7 y el 2,5% del peso, correspondiente al peso total del componente de fermentación una vez finalizado el proceso de fermentación y antes de un procesamiento individual, de uno o varios polifenoles. Un contenido escaso en polifenoles podría reducir la calidad nutricional y fisiológica del producto de fermentación. Un contenido demasiado elevado en polifenoles podría crear un efecto demasiado fuerte antimicrobiano sobre los componentes de fermentación, lo que haría que ésta no pudiese producirse. El contenido en polifenoles viene determinado por el reactivo de Folin-Ciocalteu utilizado en la industria del vino y las bebidas alcohólicas con la utilización de ácidos gálicos a modo de sustancia de referencia.

Se prefiere que en el producto de fermentación de conformidad con el hallazgo haya una elevada parte de polifenoles con peso molecular bajo que en el componente de fermentación al principio de la fermentación. El peso molecular de los polifenoles puede determinarse por ejemplo mediante un espectrómetro de masas de conformidad con el anterior proceso de separación HPLC (Cromatografía líquida de alta eficacia).

Preferiblemente, el producto de fermentación de conformidad con el hallazgo contiene polifenoles seleccionados del grupo compuesto por los ácidos gálicos y/o derivados de los ácidos gálicos y/o metabolitos de los ácidos elágicos y de los elagitaninos; los flavonoides como por ejemplo la quercetina y/o los metabolitos y/o los derivados de los flavonoides, antocianinas, antocianidinas. De forma preferible, el producto de fermentación de conformidad con el hallazgo contiene ácidos elágicos, derivados de los ácidos elágicos, metabolitos de los ácidos elágicos y/o elagitaninos.

De forma preferible, los polifenoles contenidos en el producto de fermentación de conformidad con el hallazgo muestran una parte considerablemente reducida de enlaces glicosilados.

Los diferentes polifenoles pueden separarse e identificarse por ejemplo mediante procedimientos cromatográficos, como por ejemplo la HPLC o también mediante una combinación de HPLC y espectrómetro de masas.

Otro de los aspectos de este hallazgo es un procedimiento para la elaboración de un producto de fermentación, incluida la fermentación de un componente de fermentación con contenido en zumo de granada, en el que para la fermentación de se ha utilizado la levadura Saccharomyces boulardii y al menos un tipo de lactobacilos, seleccionado del grupo compuesto por los tipos Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus.

Para la fermentación se ha utilizado la levadura Saccharomyces boulardii y al menos un tipo de lactobacilos, seleccionado del grupo compuesto por los tipos Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus. Particularmente, uno de los procedimientos del hallazgo consiste en una cofermentación utilizando la levadura Saccharomyces boulardii y al menos un tipo de lactobacilos, seleccionados del grupo compuesto por los tipos Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus.

La fermentación puede realizarse por lo general en primer lugar en presencia de la levadura Saccharomyces boulardii y a continuación en presencia del al menos de un tipo de lactobacilos, seleccionados del grupo compuesto por los tipos Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus; o en primer lugar en presencia de un tipo de lactobacilos, seleccionado del grupo compuesto por los tipos Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus, y a continuación en presencia de la levadura Saccharomyces boulardii; o como cofermentación al mismo tiempo en presencia de la levadura Saccharomyces boulardii y al menos un tipo de lactobacilos, seleccionados del grupo compuesto por los tipos Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus.

De forma preferible, la fermentación tiene lugar como cofermentación al mismo tiempo en presencia de la levadura Saccharomyces boulardii y al menos un tipo de lactobacilos, seleccionados del grupo compuesto por los tipos Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus.

Otra de las formas de procedimiento preferidas tiene lugar tras una fermentación al principio de aprox. 1-3 partes activas con Saccharomyces boulardii u otro tipo de microorganismo adecuado y a continuación un tipo de lactobacilos seleccionado del grupo compuesto por los tipos Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus, para continuar con la fermentación.

De forma preferible, se ha seleccionado el tipo de lactobacilos Lactobacillus paraplantarum.

Igualmente, también se ha seleccionado el tipo de lactobacilos Lactobacillus plantarum.

De forma preferible, la fermentación tiene lugar como cofermentación al mismo tiempo en presencia de la levadura Saccharomyces boulardii y del lactobacilo Lactobacillus plantarum. De forma preferible, la fermentación tiene lugar como cofermentación al mismo tiempo en presencia de la levadura Saccharomyces boulardii y del lactobacilo Lactobacillus paraplantarum.

Para la fermentación pueden utilizarse por ejemplo concentraciones de microorganismos de 2 x 109 -2 x 1011 de Saccharomyces boulardii por 10 l de componentes de fermentación y/o 2 x 1010 -2 x 1013 de lactobacilos por 10 l de componentes de fermentación. Si se diera el caso, podría utilizarse en primer lugar un inóculo preparado con una cantidad elevada de microorganismos, que se añadirá a continuación al resto de componentes de fermentación.

Para la fermentación pueden utilizarse además uno o varios tipos de las bacterias mencionadas anteriormente (Saccharomyces boulardii, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus) y de forma adicional diferentes tipos de microorganismos. Por ejemplo, de forma adicional pueden añadirse a los componentes de fermentación Saccharomyces boulardii y Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus, o bien, Lactobacillus acidophilus y también uno o más tipos de levaduras del vino (por ejemplo: Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces ellipsoides, Saccharomyces uvarum, Saccharomyces bayanus, Zygosaccharomyces) como levadura de champán, levadura de Oporto, levadura de Bordeaux, levadura de Borgoña ó levadura de jerez, y/o hongos nutricionales y fisiológicos e inofensivos como por ejemplo Aspergillus oryzae.

El zumo de granada puede obtenerse mediante el prensado de los frutos desmenuzados. Por ejemplo, los frutos sin la cáscara pueden exprimirse con un exprimidor de la marca Champion de la empresa Plastaket Manufacturing Co. (Lodi 95240, California, EE.UU.; del importador alemán: Keimling Naturkost GmbH, 21614 Buxtehude). El zumo de granada puede también puede obtenerse mediante otros medios. Lo ideal para obtener el zumo es a partir del fruto sin la piel.

Los componentes de fermentación también pueden estar contenidos en al menos otras partes de la granada, como por ejemplo las hojas, el concentrado de zumo, el puré, las pieles, proteína transmembranal blanca, las flores y/o los extractos. Como hojas se entienden las hojas verdes del granado. Por proteínas transmembranales blancas se entienden, las semillas sin envoltura de la carne de los frutos rojos. Por flores, se entienden las flores rojas del granado.

El componente de fermentación puede obtenerse además del zumo de granada también del zumo del fruto y/o de los componentes o de varias plantas, como por ejemplo las seleccionadas del grupo compuesto por uvas rojas, bayas de acai, bayas de amalaki, bayas de aronia, frambuesas, fresas, granos de saúco, endrino, grosellas y cerezas negras.

El componente de fermentación muestra desde el principio de la fermentación preferiblemente un contenido en azúcar, medido como una parte de glucosa y fructosa, de un total entre el 8 -17% del peso, especialmente preferible entre el 13 -15% del peso, siempre referido al peso total del componente de fermentación al principio de la fermentación. En el caso de un contenido en azúcar escaso, el componente de fermentación no contará con suficientes nutrientes para los microorganismos utilizados. En el caso de un contenido demasiado elevado en azúcar podría generarse una elevada cantidad de alcohol que podría influir limitando el crecimiento de levaduras y lactobacilos y probablemente el de otros microorganismos utilizados.

El componente de fermentación muestra de forma preferible un valor pH de 3 hasta 6, especialmente preferible de 4 hasta 5. El valor pH del componente de fermentación puede ajustarse añadiendo bicarbonato de sodio, carbonato de calcio y/o carbonato de potasio y si fuera necesario corregirse durante el proceso de fermentación. Por lo general no es necesario realizar una acidificación del componente de fermentación, no obstante, si fuera necesario, podría realizarse mediante la adición de citrato de sodio. En el caso de obtenerse un valor demasiado elevado o demasiado bajo del valor pH del componente de fermentación, el crecimiento y el intercambio de sustancias de los microorganismos utilizados no serán óptimos para la elaboración del producto de fermentación de conformidad con el hallazgo.

Se entiende por componente de fermentación la mezcla acuosa que se encuentra disponible al principio de la fermentación y el zumo de granada, que contiene la levadura Saccharomyces boulardii y/o al menos un tipo de lactobacilos, seleccionados del grupo compuesto por los tipos Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus, además de otros componentes, así como también la mezcla acuosa que se produce durante y después de la fermentación mediante el proceso de fermentación.

De forma preferible, la fermentación se produce a una temperatura de 30 38°C, especialmente preferible de 35 -37°C del com ponente de fermentación. En caso de temperaturas demasiado elevadas o demasiado bajas, el crecimiento y el intercambio de sustancias de los microorganismos empleados no serán óptimos para la elaboración del producto de fermentación de conformidad con el hallazgo.

Preferiblemente, la fermentación tiene lugar durante un periodo de tiempo entre 3 y 8 días, aunque lo preferible es un periodo entre 4 y 6 días. El producto final de la fermentación se alcanza normalmente cuando, como resultado del contenido en azúcar reducido debido a la actividad de intercambio de sustancias de los microorganismos del componente de fermentación, la producción de dióxido de carbono por parte de los microorganismos utilizados ha desaparecido de forma considerable o apenas puede continuar siendo observada.

Tras la fermentación pueden realizarse uno o varios procedimientos del proceso, preferiblemente una pasteurización, una liofilización o una micelización de liposomas.

En el caso de que el producto de fermentación contase con microorganismos destruidos, se realizará una pasteurización y si fuera necesario también otros procedimientos. En el caso de que el producto de fermentación aún contase con microorganismos vivos, se suprimirá la pasteurización. La pasteurización puede realizarse siguiendo los métodos adecuados para este proceso. Por ejemplo, la pasteurización puede realizarse mediante el calentamiento durante poco tiempo del producto de fermentación a 60 -90°C. Otra variante posible es someter el producto de pasteurización durante algunos segundos a aproximadamente 85°C. De conformidad con el hallazg o, el producto de fermentación contiene microorganismos destruidos.

En una de las formas de procedimiento preferidas, la fermentación se cierra tras una pasteurización, una liofilización del producto de fermentación. Tras la liofilización, los productos de fermentación de conformidad con el hallazgo poseen entre un 10 y 30% del peso, o entre un 15 y 25% del peso, correspondientes a la liofilización de uno o varios polifenoles. El contenido en polifenoles viene determinado por el reactivo de Folin-Ciocalteu, utilizado en la industria del vino y las bebidas alcohólicos, mediante la utilización de ácidos gálicos como sustancia de referencia y tras la reconstitución del liofilizado en agua destilada. La liofilización puede realizarse siguiendo los métodos conocidos y adecuados para este proceso. Pueden utilizarse liofilizadores de uso industrial. De conformidad con el hallazgo, para la liofilización no se deberán utilizar productos químicos crioprotectores o sustancias portadoras.

Una micelización de los liposomas eleva la lipofilia del producto final. Lo ideal sería que antes de una micelización de los liposomas se realizase una liofilización del producto de fermentación. La micelización de los liposomas puede realizarse siguiendo los métodos adecuados para dicho proceso. A modo de enlaces que formen liposomas, enlaces anfifílicos, pueden utilizarse por ejemplo fosfolípidos adecuados.

Al componente de fermentación o al producto de fermentación se le podrán añadir otras sustancias tras una pasteurización, liofilización y/o micelización de liposomas. Por ejemplo, podrán utilizarse una o varias sustancias seleccionadas del grupo compuesto por tributirina, butirato, curcumina y aceite de semillas de granada. Estas sustancias pueden utilizarse de la misma forma que los polifenoles de la granada para inducir una rediferenciación de las células cancerígenas y se añaden en cantidades que ofrezcan una concentración suficiente de esta sustancia en el producto final para producir este efecto.

La ejecución técnica de la fermentación no muestra particularidades especiales, sino que puede ser realizada por especialistas aplicando los métodos adecuados para dicho proceso. Por ejemplo, la fermentación puede realizarse en un recipiente adecuado con una válvula de salida para CO2 con privación de oxígeno. Si apareciese una sedimentación al final de la fermentación, podrá realizarse una agitación esporádica del componente de fermentación.

Al mismo tiempo, también serán objeto de este estudio los productos de fermentación obtenidos mediante uno o varios procedimientos de los descritos anteriormente.

Otro aspecto de este hallazgo es la utilización del producto de fermentación de conformidad con el hallazgo para la elaboración de un alimento, un suplemento dietético, un alimento dietético o un cosmético. Se recomienda la utilización del producto de fermentación de conformidad con el hallazgo para la elaboración de un alimento, un suplemento dietético o un alimento dietético. En particular, se recomienda la utilización del producto de fermentación de conformidad con el hallazgo para la elaboración de un suplemento nutricional.

Por medicamentos, se entienden todos aquellos medios que cuentan con la capacidad de curar, mitigar, prevenir enfermedades, dolores o daños corporales, o influir sobre el estado o las funciones corporales o anímicas, y que cuentan, sobre todo, con un efecto farmacológico. Los alimentos no son fármacos.

En cambio, los suplementos y los alimentos dietéticos pertenecen al grupo de los alimentos. Los alimentos son sustancias que tienen la función de ser absorbidos por las personas, y que principalmente tienen un propósito alimenticio o para el disfrute. Los alimentos cuentan principalmente con un efecto nutricional y fisiológico. Los alimentos dietéticos cuentan con un propósito nutritivo y se corresponden a las necesidades alimenticias de los usuarios, cuya función intestinal o proceso de reabsorción o el intercambio de sustancias no es adecuado o bien se encuentran en un estado fisiológico especial como los lactantes sanos o los niños pequeños. De los alimentos dietéticos se distinguen los suplementos nutricionales, que no son medios nutricionales con un propósito nutritivo en concreto, sino que son un suplemento para la alimentación general, como por ejemplo un concentrado de sustancias nutritivas u otras sustancias con efectos nutritivos específicos o fisiológicos.

Los cosméticos son sustancias o preparados a partir de sustancias que se utilizan exclusiva o principalmente en el exterior del cuerpo humano o en la cavidad oral para la limpieza de la misma (por ejemplo jabones, champús, pasta de dientes), para la protección, para el mantenimiento de un buen estado (por ejemplo cremas para la piel, lociones), para el perfume, para la modificación del aspecto externo (por ejemplo auto bronceadores, tintes para el pelo) y/o todos aquellos que se utilizan para eliminar los olores corporales (por ejemplo desodorantes). También se incluyen los productos de aplicación externa como por ejemplo las pomadas, las cremas o las soluciones en spray.

Con la utilización del producto de fermentación de conformidad con el hallazgo, se fabricará un fármaco para su aplicación interna o externa. De forma preferible, en este caso se tratará de un medio para aplicación interna, y de forma especialmente preferible, para la administración oral o rectal.

La aplicación del producto de fermentación de conformidad con el hallazgo engloba la elaboración de alimentos, nutrientes y suplementos dietéticos para uso interno. La utilización del producto de fermentación de conformidad con el hallazgo engloba la elaboración de suplementos alimenticios y alimentos dietéticos para uso por vía oral.

Los alimentos, suplementos alimenticios, alimentos dietéticos, medicamentos o cosméticos elaborados a partir del producto de fermentación de conformidad con el hallazgo, pueden adoptar diferentes formas de presentación. Se recomienda especialmente la presentación de los productos de fermentación de conformidad con el hallazgo utilizados en alimentos, suplementos dietéticos, fármacos o cosméticos en forma de gotas, zumos, concentrados, soluciones, elixires, cápsulas, pastillas, grageas, píldoras, globulinas, granulados, ampollas, supositorios, blisteres, polvos o comprimidos efervescentes o mediante un medio de aplicación externa como por ejemplo pomadas, cremas

o sprays. Se recomienda especialmente la utilización de medios en forma de polvos o cápsulas.

Se prefiere una dosificación nutricional y fisiológica del producto de fermentación en forma de medio nutritivo o suplemento dietético para el mantenimiento general de la salud, en especial del corazón, de los vasos sanguíneos y de la próstata; o con una dosificación farmacológica para la elaboración de un fármaco para terapias adicionales y la prevención del cáncer (especialmente de próstata, mama, colon, o carcinoma pulmonar; especialmente para el apoyo y la sinergia en una cromoterapia y/o radioterapia), hiperplasia benigna prostática, modificaciones de los vasos sanguíneos arterioscleróticas, dolencias cardiacas coronarias, esclerosis cerebral, hipercolesterolemia, enfermedades crónicas inflamatorias como por ejemplo artritis reumatoide, Alzheimer mórbido, Párkinson mórbido, esclerosis múltiple y/o micro y macroangiopatías causadas por Diabetes mellitus.

Otro de los aspectos del hallazgo son los alimentos, medios nutricionales, suplementos dietéticos o cosméticos que contienen un producto de fermentación de conformidad con el hallazgo y/o un producto de fermentación obtenido mediante el proceso de conformidad con el hallazgo.

En lo sucesivo, se describirá con mayor precisión el hallazgo mediante ejemplos de procedimiento.

Ejemplo de procedimiento 1

En primer lugar se prepararán dos inóculos:

Inóculo 1: Saccharomyces boulardii 1 g de Saccharomyces boulardii (2 x 1010 microorganismos liofilizados; disponibles a nivel comercial, por ejemplo en las farmacias) inoculado en 1 litro de zumo de granada a 36°C durante 24 h.

Inóculo 2: Lactobacillus plantarum 0,5 g de Lactobacillus plantarum (2 x 1011 microorganismos liofilizados; disponibles a nivel comercial, por ejemplo a través de la empresa Danisco) inoculado en 1 litro de una mezcla realizada con 300 ml de agua y 700 ml de zumo de granada con un valor pH de aprox. 5 durante 24 h a 36°C.

A continuación se preparará el componente de fermentación y se producirá la fermentación. Para tal efecto, se mezclarán ambos inóculos en un recipiente adecuado para la fermentación con una válvula de salida para CO2 con 10 l de zumo de granada, que puede obtenerse exprimiendo los frutos sin la piel mediante un exprimidor de la marca Champion de la empresa Plastaket Manufacturing Co. (Lodi 95240, California, EE.UU.; importador alemán: Keimling Naturkost GmbH, 21614 Buxtehude). El zumo de granada deberá tener un contenido en azúcar de aprox. 14 g/l (contenido total de glucosa y fructosa). El valor pH del componente de fermentación se preparará con bicarbonato de sodio o carbonato de potasio con un valor pH de 4,5. El componente de fermentación se dejará fermentando durante unos 4-5 días a una temperatura de 36°C con privación de oxígeno, h asta que el contenido en azúcar haya descendido por debajo de 0,5% (5 g/l) y la producción de CO2 se haya interrumpido.

El producto de fermentación obtenido se pasteurizará o liofilizará preferiblemente o sin haberse sometido a pasteurización (modo menos preferido) se someterá a una liofilización con los microorganismos vivos.

Ejemplo de procedimiento 2

El inóculo 2 (Lactobacillus plantarum) del ejemplo de ejecución 1 se mezclará en un recipiente adecuado para la fermentación con una válvula de salida para CO2 con 10 l de zumo de granada, que puede obtenerse exprimiendo los frutos sin la piel mediante un exprimidor de la marca Champion de la empresa 5 Plastaket Manufacturing Co. (Lodi 95240, California, EE.UU.; importador alemán: Keimling Naturkost GmbH, 21614 Buxtehude). El zumo de granada deberá tener un contenido en azúcar de aprox. 14 g/l (contenido total de glucosa y fructosa). El valor pH del componente de fermentación se preparará con bicarbonato de sodio o carbonato de potasio con un valor pH de 4,5. El 10 componente de fermentación se dejará fermentar durante unas 24h a una temperatura de 36°C con privación de oxígeno. A con tinuación se le añadirá el inóculo 1 (Saccharomyces boulardii) procedente del ejemplo de procedimiento

1. El componente de fermentación se dejará fermentando durante unos 4-5 días a una temperatura de 36°C con privación de oxí geno, hasta que el

15 contenido en azúcar haya descendido por debajo de 0,5% (5 g/l) y la producción de CO2 se haya interrumpido.

El producto de fermentación obtenido se pasteurizará o liofilizará preferiblemente o sin haberse sometido a pasteurización (modo menos 20 preferido) se someterá a una liofilización con los microorganismos vivos.

Claims (16)

1. REIVINDICACIONES:

   1.

   Utilización de un producto de fermentación, obtenible mediante un procedimiento que comprende la fermentación de un componente de fermentación con contenido en zumo de granada, caracterizado por la utilización para la fermentación de la levadura Saccharomyces boulardii y al menos un tipo de lactobacilos, seleccionado a partir del grupo compuesto por los tipos Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus.

2. 2.

   Producto de fermentación de conformidad con el requisito 1, caracterizado porque el producto de fermentación, de uno o varios polifenoles, cuenta entre el 0,25 y el 4% del peso total del componente de fermentación una vez finalizado el proceso de fermentación y antes de un procesamiento eventual.

3. 3.

   Producto de fermentación de conformidad con el requisito 1 o 2, caracterizado porque el contenido en azúcar del producto de fermentación, medido como parte de glucosa y fructosa, supone total del 2% del peso, correspondiente al peso total del componente de fermentación una vez finalizado el proceso de fermentación y antes de un procesamiento eventual.

4. 4.

   Procedimiento para la elaboración de un producto de fermentación de conformidad con el requisito 1, que comprende la fermentación de un componente de fermentación que contiene zumo de granada, caracterizado porque para la fermentación se ha utilizado la levadura Saccharomyces boulardii y al menos un tipo de lactobacilos, seleccionado a partir del grupo compuesto por los tipos Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus.

5. 5.

   Procedimiento de conformidad con el requisito 4, caracterizado porque la fermentación se produce en primer lugar en presencia de la levadura Saccharomyces boulardii y a continuación en presencia de al menos un tipo de lactobacilos, seleccionado del grupo compuesto por los tipos Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus

   acidophilus; o caracterizado porque la fermentación se produce en primer lugar en presencia de un tipo de lactobacilos, seleccionado del grupo compuesto por los tipos Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus, y a continuación en presencia de la levadura Saccharomyces boulardii; o porque la fermentación tiene lugar a modo de cofermentación al mismo tiempo en presencia de la levadura Saccharomyces boulardii y al menos un tipo de lactobacilos, seleccionado del grupo compuesto por los tipos Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus.

6. 6.

   Procedimiento según uno o varios de los requisitos precedentes 4 hasta 5, caracterizado por la utilización de un lactobacilo del tipo Lactobacillus paraplantarum.

7. 7.

   Procedimiento según uno o varios de los requisitos precedentes 4 hasta 6, caracterizado porque el componente de fermentación contiene al menos un componente de la granada, como por ejemplo las hojas, el concentrado de zumo, el puré, las pieles, las proteínas transmembranales blancas y las flores y/o los extractos de las mismas.

8. 8.

   Procedimiento según uno o varios de los requisitos precedentes 4 hasta 7, caracterizado porque el componente de fermentación contiene zumo de frutas y/o componentes de las frutas de una o varias plantas, seleccionadas preferiblemente del grupo compuesto por uvas rojas, bayas de acai, bayas de amalaki, bayas de aronia, frambuesas, fresas, granos de saúco, endrino, grosellas y cerezas negras.

9. 9.

   Procedimiento según uno o varios de los requisitos precedentes 4 hasta 8, caracterizado porque el componente de fermentación cuenta con un valor pH de 3 hasta 6, y preferiblemente, de 4 hasta 5.

10. 10.

    Procedimiento según uno o varios de los requisitos precedentes 4 hasta 9, caracterizado porque la fermentación se produce a una temperatura de 30 38°C, y preferiblemente de 35 -37°C del componente de fermentación.

11. 11.

    Procedimiento según uno o varios de los requisitos precedentes 4 hasta 10, caracterizado porque el componente de fermentación al comienzo de la fermentación tiene un contenido en azúcar medido como parte de glucosa y fructosa, de un total del 8 – 17% del peso, preferiblemente del 13 – 15% del peso, con respecto al peso total del componente de fermentación al principio de la fermentación.

12. 12.

    Procedimiento según uno o varios de los requisitos precedentes 4 hasta 11, caracterizado porque uno o varios procesos del procedimiento, preferiblemente una pasteurización, una liofilización y/o una micelización de los liposomas finalizan el proceso de la fermentación.

13. 13.

    Procedimiento según uno o varios de los requisitos precedentes 4 hasta 12, caracterizado porque para la fermentación de uno o varios de los tipos mencionados de Saccharomyces boulardii, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus y Lactobacillus acidophilus se utilizan de forma adicional diferentes tipos de microorganismos.

14. 14.

    Utilización de un producto de fermentación de conformidad con uno o varios de los requisitos 1 hasta 3 y/o de conformidad con uno o varios de los requisitos 4 hasta 13 del procedimiento descrito para la elaboración de un alimento, un suplemento nutricional, un alimento dietético o un cosmético.

15. 15.

    Aplicación de conformidad con el requisito 14 que se caracteriza por un alimento que se trata de un suplemento nutricional o de un alimento dietético.

16. 16.

    Alimento, suplemento nutricional, alimento dietético o cosmético, que contiene un producto de fermentación de conformidad con uno o varios de los requisitos 1 -3 y/o un procedimiento de conformidad con uno o varios de los requisitos 4 -13.