ES2346157T3

ES2346157T3 - Derivados de alquilaminas ciclicas como inhibidores de la interaccion entre mdm2 y p53.

Info

Publication number: ES2346157T3
Application number: ES07727060T
Authority: ES
Inventors: Jean Fernand Armand Lacrampe; Christophe Meyer; Bruno Schoentjes; Alain Philippe Poncelet; Camille Georges Wermuth; Bruno Giethlen; Jean-Marie Contreras; Muriel Joubert; Luc Van Hijfte
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 2006-03-22
Filing date: 2007-03-19
Publication date: 2010-10-11
Anticipated expiration: 2027-03-19
Also published as: CN101405285A; RU2434863C2; RU2008141764A; CN101405285B; BRPI0709077A2

Abstract

Un compuesto de fórmula (I), **(Ver fórmula)** una forma de N-óxido, una sal de adición o una forma estereoquímicamente isómera del mismo en donde m es 0, 1, ó 2, y cuando m es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo; n es 0, 1, 2, ó 3 y cuando n es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo; p es 0 ó 1, y cuando p es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo; t es 0 ó 1, y cuanto t es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo; **(Ver fórmula)** es -CR8=C< y la línea de puntos es entonces un enlace, -C(=O)-CH<, C(=O)-N<, -CHR8-CH< o -CHR8-N<; en donde cada R8 es independientemente hidrógeno o C1-6alquilo; R1 y R2 se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, halo, C1-6alquilo, C1-6alquiloxi, arilC1-6alqui-loxi, heteroarilC1-6alquiloxi, feniltio, hidroxiC1-6alquilcarbonilo, C1-6alquilo sustituido con un sustituyente seleccionado de amino, arilo y heteroarilo; o C3-7cicloalquilo sustituido con un sustituyente seleccionado de amino, arilo y heteroarilo; R3 y R4 se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, halo, C1-6alquilo, polihaloC1-6alquilo, ciano, cianoC1-6alquilo, hidroxi, amino o C1-6alquiloxi; o R4 y R5 pueden formar opcionalmente juntos un radical bivalente seleccionado de metilenodioxi o etilenodioxi; R5 es hidrógeno, C1-6alquiloxicarbonilo o C1-6alquilo; R6 y R7 se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, C1-6alquiloxiC1-6alquilo o C1-6alquilo; o R6 y R7 pueden formar juntos opcionalmente un radical bivalente seleccionado de (b-1),-(CH2)2-O-(CH2)2- (b-2),-(CH2)2-NR9-(CH2)2- en donde R9 es hidrógeno, C1-6alquiloxiC1-6alquilo o C1-6alquilo; Z es un radical seleccionado de **(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)** en donde R10 y R11 se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, halo, hidroxi, amino, C1-6alquilo, nitro, polihaloC1-6alquilo, ciano, cianoC1-6alquilo, tetrazoloC1-6alquilo, arilo, heteroarilo, arilC1-6alquilo, heteroarilC1-6al-quilo, aril(hidroxi)C1-6alquilo, heteroaril(hidroxi)C1-6alquilo, arilcarbonilo, heteroarilcarbonilo, C1-6alquilcarbonilo, arilC1-6alquilcarbonilo, hetero-arilC1-6alquilcarbonilo, C1-6alquiloxi, C3-7cicloalquilcarbonilo, C3-7cicloalquil(hidroxi)C1-6alquilo, arilC1-6alquiloxiC1-6alquilo, C1-6alquiloxiC1-6alquiloxiC1-6alquilo, C1-6alquilcarboniloxiC1-6alquilo, C1-6alquiloxicarbonilC1-6alquiloxiC1-6alquilo, hidroxiC1-6alquiloxiC1-6alquilo, C1-6alquiloxicarbonilC2-6alquenil C1-6alquiloxiC1-6alquilo (sic), C1-6alquiloxicarbonilo, C1-6alquilcarboniloxi, aminocarbonilo, hidroxiC1-6alquilo, aminoC1-6alquilo, hidroxicarbonilo, hidroxicarbonilC1-6alquilo y -(CH2)v-(C(=O)r)-(CHR17)u-NR13R14; en donde v es 0, 1, 2, 3, 4, 5, ó 6 y cuando v es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo; r es 0 ó 1, y cuando r es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo; u es 0, 1, 2, 3, 4, 5, ó 6, y cuando u es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo; R17 es hidrógeno o C1-6alquilo; R12 es hidrógeno, C1-6alquilo, C3-7cicloalquilo, C1-6alquilo sustituido con un sustituyente seleccionado de hidroxi, amino, C1-6alquiloxi y arilo; o C3-7cicloalquilo sustituido con un sustituyente seleccionado de hidroxi, amino, arilo y C1-6alquiloxi; R13 y R14 se seleccionan cada uno independiente de hidrógeno, C1-12alquilo, C1-6alquilcarbonilo, C1-6alquilsulfo-nilo, arilC1-6alquilcarbonilo, C3-7cicloalquilo, C3-7cicloalquilcarbonilo, -(CH2)k-NR15R16, C1-12alquilo sustituido con un sustituyente seleccionado de hidroxi, hidroxicarbonilo, ciano, C1-6alquiloxicarbonilo, C1-6alquiloxi, arilo o heteroarilo; o C3-7cicloalquilo sustituido con un sustituyente seleccionado de hidroxi, C1-6alquiloxi, arilo, amino, arilC1-6alquilo, heteroarilo o heteroarilC1-6alquilo; o R13 y R14 junto con el nitrógeno al cual están unidos pueden formar opcionalmente un morfolinilo, piperidinilo, pirrolidinilo, piperazinilo, o piperazinilo sustituido con un sustituyente seleccionado de C1-6alquilo, arilC1-6alquilo, arilC1-6alquiloxicarbonilo, heteroarilC1-6alquilo, C3-7cicloalquilo y C3-7cicloalquilC1-6alquilo; en donde k es 0, 1, 2, 3, 4, 5 ó 6 y cuando k es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo; R15 y R16 se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, C1-6alquilo, arilC1-6alquiloxicarbonilo, C3-7cicloalquilo, C1-12alquilo sustituido con un sustituyente seleccionado de hidroxi, C1-6alquiloxi, arilo, y heteroarilo; y C3-7cicloalquilo sustituido con un sustituyente seleccionado de hidroxi, C1-6alquiloxi, arilo, arilC1-6alquilo, heteroarilo, y heteroarilC1-6alquilo; o R15 y R16 junto con el nitrógeno al cual están unidos pueden formar opcionalmente un morfolinilo, un piperazinilo, o un piperazinilo sustituido con C1-6alquiloxicarbonilo; arilo es fenilo o naftalenilo; cada fenilo o naftalenilo puede estar sustituido opcionalmente con 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados cada uno independientemente de halo, hidroxi, C1-6alquilo, amino, polihaloC1-6alquilo y C1-6alquiloxi; y cada fenilo o naftalenilo puede estar sustituido opcionalmente con un radical bivalente seleccionado de metilenodioxi y etilenodioxi; heteroarilo es piridinilo, indolilo, quinolinilo, imidazolilo, furanilo, tienilo, oxadiazolilo, tetrazolilo, benzofuranilo o tetrahidrofuranilo; cada piridinilo, indolilo, quinolinilo, imidazolilo, furanilo, tienilo, oxadiazolilo, tetrazolilo, benzofuranilo, o tetrahidrofuranilo puede estar sustituido opcionalmente con 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados cada uno independientemente de halo, hidroxi, C1-6alquilo, amino, polihaloC1-6alquilo, arilo, arilC1-6alquilo o C1-6alquiloxi; y cada piridinilo, indolilo, quinolinilo, imidazolilo, furanilo, tienilo, benzofuranilo, o tetrahidrofuranilo puede estar sustituido opcionalmente con un radical bivalente seleccionado de metilenodioxi o etilenodioxi.

Description

Derivados de alquilaminas cíclicas como inhibidores de la interacción entre MDM2 y p53.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a compuestos y composiciones que contienen dichos compuestos que actúan como inhibidores de la interacción entre MDM2 y p53. Además, la presente invención proporciona procesos para la preparación de los inhibidores descritos, composiciones que comprenden los mismos y métodos de utilización de los mismos, por ejemplo como medicamento.

p53 es una proteína supresora de tumores que juega un papel fundamental en la regulación del equilibrio entre la proliferación celular y la detención/apoptosis del crecimiento celular. En condiciones normales, la semi-vida de p53 es muy corta y por consiguiente el nivel de p53 en las células es bajo. Sin embargo, en respuesta a deterioro del DNA celular o a estrés celular (v.g. activación de oncogenes, erosión de telómeros, hipoxia) los niveles de p53 aumentan. Este aumento en los niveles de p53 conduce a la activación de la transcripción de cierto número de genes que impulsan la célula o bien hacia la detención del crecimiento o a los procesos de apoptosis. Así pues, una función importante de p53 consiste en evitar la proliferación incontrolada de células deterioradas y proteger de este modo el organismo contra el desarrollo del cáncer.

MDM2 es un regulador negativo fundamental de la función de p53. Forma un bucle negativo autorregulador por fijación al dominio de transactivación del terminal amino de p53 y por consiguiente MDM2 inhibe a la vez la capacidad de p53 para activar la transcripción y direcciona p53 hacia la degradación proteolítica. En condiciones normales, este bucle regulador es responsable del mantenimiento de niveles bajos de p53. Sin embargo, en los tumores con p53 de tipo salvaje, la concentración de equilibrio de p53 activa puede aumentarse por antagonizar la interacción entre MDM2 y p53. Esto dará como resultado el restablecimiento de los efectos pro-apoptóticos y anti-proliferativos mediados por p53 en tales células tumorales.

MDM2 es un proto-oncogén celular: La sobreexpresión de MDM2 ha sido observada en una gama de cánceres. MDM2 está sobre-expresado en una diversidad de tumores debido a amplificación génica o transcripción o traducción incrementadas. El mecanismo por el cual la amplificación de MDM2 promueve la tumorigénesis está relacionado al menos en parte con su interacción con p53. En las células que sobreexpresan MDM2, la función protectora de p53 está bloqueada y por consiguiente las células son incapaces de responder al deterioro del DNA o estrés celular por aumento de los niveles de p53, conduciendo a detención del crecimiento celular y/o apoptosis. Así pues, después de deterioro celular y/o estrés celular, las células que sobreexpresan MDM2 se encuentran en libertad para continuar proliferando y asumir un fenotipo tumorígeno. En estas condiciones, la disrupción de la interacción de p53 y MDM2 liberaría la p53 y permitiría por consiguiente que funcionaran las señales normales de detención del crecimiento y/o apoptosis.

MDM2 puede tener también funciones separadas además de la inhibición de p53. Por ejemplo, se ha demostrado que MDM2 interacciona directamente con el factor de transcripción E2F1/DP1 regulado por pRb. Esta interacción podría ser crucial para las actividades oncogénicas de MDM2 independientes de p53. Un dominio de E2F1 exhibe una semejanza notable con el dominio de fijación de MDM2 de p53. Dado que las interacciones de MDM2 tanto con p53 como con E2F1 se localizan en el mismo sitio de fijación en MDM2, puede esperarse que los antagonistas de MDM2/p53 no sólo activen la p53 celular, sino que modulen también las actividades de E2F1, que están comúnmente descontroladas en las células tumorales.

Asimismo, la eficacia terapéutica de los agentes de deterioro del DNA utilizados actualmente (quimioterapia y radioterapia), puede verse limitada por la regulación negativa de p53 por MDM2. Así, si la inhibición de la retroalimentación por MDM2 de p53 se interrumpe, un aumento en los niveles funcionales de p53 aumentará la eficacia terapéutica de dichos agentes por restablecer la función de p53 de tipo salvaje que conduce a la apoptosis y/o inversión de la resistencia a los fármacos asociados con p53. Se demostró que la combinación de los tratamientos de inhibición de MDM2 y deterioro del DNA in vivo conducía a efectos sinérgicos antitumorales (Vousden K.H., Cell, vol. 103, 691-694, 2000).

Así pues, la disrupción de la interacción de MDM2 y p53 ofrece un enfoque para la intervención terapéutica en tumores con p53 de tipo salvaje, y podría incluso exhibir efectos anti-proliferativos en células tumorales que estén desprovistas de p53 funcional y adicionalmente puede sensibilizar las células tumorígenas para la quimioterapia y radioterapia.

Antecedentes de la invención

JP11130750, publicado el 18 de mayo de 1999, describe entre otras cosas derivados sustituidos de fenilaminocarbonilindolilo como antagonistas de los receptores de 5-HT. EP1129074, publicado el 18 de mayo de 2000, describe amidas del ácido antranílico como inhibidores de los receptores del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFR) y útiles en el tratamiento de trastornos angiogénicos. EP1317443, publicado el 21 de marzo de 2002, describe derivados tricíclicos de aminas terciarias, útiles como moduladores de los receptores de quimioquinas CXCR4 o CCR5 para tratamiento del virus de la inmunodeficiencia humana y el virus de la inmunodeficiencia de los felinos.

EP1379279, publicado el 10 de octubre de 2002, describe N-(2-ariletil)bencilaminas como antagonistas del receptor 5-HT_{6}.

WO 00/15357, publicado el 23 de marzo de 2000, proporciona derivados de piperazina-4-fenilo como inhibidores de la interacción entre MDM2 y p53. EP 1137418, publicado el 8 de junio de 2000, proporciona compuestos tricíclicos para establecimiento de la estabilidad estructural de una proteína de la familia p53.

EP 1443937, publicado el 22 de mayo de 2003, describe 1,4-benzodiazepinas sustituidas y los usos de las mismas como inhibidores de las interacciones MDM2-p53.

EP 1458380, publicado el 26 de junio de 2003, proporciona cis-2,4,5-trifenil-imidazolonas que inhiben la interacción de la proteína MDM2 con péptidos análogos a p53 y tienen actividad antiproliferativa.

EP 1519932, publicado el 15 de enero de 2004, describe compuestos de bisarilsulfonamida que se fijan a MDM2 y pueden utilizarse en la terapia del cáncer.

WO 03/040402, publicado el 15 de mayo de 2003, describe compuestos que interrumpen las interacciones proteína-proteína formadas por dos anillos heteroarilo bicíclicos enlazados por cadenas aminoalquilo.

WO 2006/024837, publicado el 9 de marzo de 2006, describe derivados de isoindolin-1-ona enlazados a grupos heteroarilo por cadenas de alquilamina que inhiben la interacción MDM2-p53.

WO 2006/032631, publicado del 30 de marzo de 2006, describe derivados bicíclicos unidos por una cadena que contiene amina a un fenilo como inhibidores de la interacción entre las proteínas p53 y MDM2.

Continúa habiendo necesidad de moléculas pequeñas eficaces y potentes que inhiban las interacciones entre MDM2 y p53.

Los compuestos de la presente invención difieren de la técnica anterior en estructura, en su actividad farmacológica y/o en potencia farmacológica.

Descripción de la invención

La presente invención proporciona compuestos, composiciones para inhibir, y métodos de inhibición de las interacciones entre MDM2 y p53 para el tratamiento del cáncer. Adicionalmente, los compuestos y composiciones de la presente invención son útiles para mejorar la eficacia de la quimioterapia y la radioterapia. Esta invención se refiere a compuestos de fórmula (I)

1

una forma de N-óxido, una sal de adición o una forma estereoquímicamente isómera del mismo en donde

m es 0, 1, ó 2, y cuando m es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo;

n es 0, 1, 2, ó 3 y cuando n es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo;

p es 0 ó 1, y cuando p es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo;

t es 0 ó 1, y cuanto t es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo;

2

es -CR^{8}=C< y la línea de puntos es entonces un enlace, -C(=O)-CH<, C(=O)-N<, -CHR^{8}-CH< o -CHR^{8}-N<; en donde cada R^{8} es independientemente hidrógeno o C_{1-6}alquilo;

R^{1} y R^{2} se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, halo, C_{1-6}alquilo, C_{1-6}alquiloxi, arilC_{1-6}alqui-
loxi, heteroarilC_{1-6}alquiloxi, feniltio, hidroxiC_{1-6}alquilcarbonilo, C_{1-6}alquilo sustituido con un sustituyente seleccionado de amino, arilo y heteroarilo; o C_{3-7}cicloalquilo sustituido con un sustituyente seleccionado de amino, arilo y heteroarilo;

R^{3} y R^{4} se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, halo, C_{1-6}alquilo, polihaloC_{1-6}alquilo, ciano, cianoC_{1-6}alquilo, hidroxi, amino o C_{1-6}alquiloxi; o

R^{4} y R^{5} pueden formar opcionalmente juntos un radical bivalente seleccionado de metilenodioxi o etilenodioxi;

R^{5} es hidrógeno, C_{1-6}alquiloxicarbonilo o C_{1-6}alquilo;

R^{6} y R^{7} se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, C_{1-6}alquiloxiC_{1-6}alquilo o C_{1-6}alquilo; o

R^{6} y R^{7} pueden formar juntos opcionalmente un radical bivalente seleccionado de

(b-1),-(CH_{2})_{2}-O-(CH_{2})_{2}-

(b-2),-(CH_{2})_{2}-NR^{9}-(CH_{2})_{2}-

en donde R^{9} es hidrógeno, C_{1-6}alquiloxiC_{1-6}alquilo o C_{1-6}alquilo;

Z es un radical seleccionado de

3

en donde

R^{10} y R^{11} se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, halo, hidroxi, amino, C_{1-6}alquilo, nitro, polihaloC_{1-6}alquilo, ciano, cianoC_{1-6}alquilo, tetrazoloC_{1-6}alquilo, arilo, heteroarilo, arilC_{1-6}alquilo, heteroarilC_{1-6}al-
quilo, aril(hidroxi)C_{1-6}alquilo, heteroaril(hidroxi)C_{1-6}alquilo, arilcarbonilo, heteroarilcarbonilo, C_{1-6}alquilcarbonilo, arilC_{1-6}alquilcarbonilo, heteroarilC_{1-6}alquilcarbonilo, C_{1-6}alquiloxi, C_{3-7}ciclo-alquilcarbonilo, C_{3-7}cicloalquil(hidroxi)C_{1-6}alquilo, arilC_{1-6}alquiloxiC_{1-6}alquilo, C_{1-6}alquiloxiC_{1-6}alquiloxi-C_{1-6}alquilo, C_{1-6}alquilcarboniloxiC_{1-6}alquilo, C_{1-6}alquiloxicarbonilC_{1-6}alquiloxiC_{1-6}alquilo, hidroxiC_{1-6}alquiloxi-C_{1-6}alquilo, C_{1-6}alquiloxicarbonilC_{2-6}alquenil
C_{1-6}alquiloxiC_{1-6}alquilo, C_{1-6}alquiloxicarbonilo, C_{1-6}alquilcarboniloxi, aminocarbonilo, hidroxiC_{1-6}alquilo, amino
C_{1-6}alquilo, hidroxicarbonilo, hidroxicarbonilC_{1-6}alquilo y -(CH_{2})_{v}-(C(=O)_{r})-(CHR^{17})_{u}-NR^{13}R^{14}; en donde

v es 0, 1, 2, 3, 4, 5, ó 6 y cuando v es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo;

r es 0 ó 1, y cuando r es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo;

u es 0, 1, 2, 3, 4, 5, ó 6, y cuando u es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo;

R^{17} es hidrógeno o C_{1-6}alquilo;

R^{12} es hidrógeno, C_{1-6}alquilo, C_{3-7}cicloalquilo, C_{1-6}alquilo sustituido con un sustituyente seleccionado de hidroxi, amino, C_{1-6}alquiloxi y arilo; o C_{3-7}cicloalquilo sustituido con un sustituyente seleccionado de hidroxi, amino, arilo y C_{1-6}alquiloxi;

R^{13} y R^{14} se seleccionan cada uno independiente de hidrógeno, C_{1-12}alquilo, C_{1-6}alquilcarbonilo, C_{1-6}alquilsulfo-
nilo, arilC_{1-6}alquilcarbonilo, C_{3-7}cicloalquilo, C_{3-7}cicloalquilcarbonilo, -(CH_{2})_{k}-NR^{15}R^{16}, C_{1-12}alquilo sustituido con un sustituyente seleccionado de hidroxi, hidroxicarbonilo, ciano, C_{1-6}alquiloxicarbonilo, C_{1-6}alquiloxi, arilo o heteroarilo; o C_{3-7}cicloalquilo sustituido con un sustituyente seleccionado de hidroxi, C_{1-6}alquiloxi, arilo, amino, arilC_{1-6}
alquilo, heteroarilo o heteroarilC_{1-6}alquilo; o

R^{13} y R^{14} junto con el nitrógeno al cual están unidos pueden formar opcionalmente un morfolinilo, piperidinilo, pirrolidinilo, piperazinilo, o piperazinilo sustituido con un sustituyente seleccionado de C_{1-6}alquilo, arilC_{1-6}alquilo, arilC_{1-6}alquiloxicarbonilo, heteroarilC_{1-6}alquilo, C_{3-7}cicloalquilo y C_{3-7}cicloalquilC_{1-6}alquilo; en donde

k es 0, 1, 2, 3, 4, 5 ó 6 y cuando k es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo;

R^{15} y R^{16} se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, C_{1-6}alquilo, arilC_{1-6}alquiloxicarbonilo, C_{3-7}
cicloalquilo, C_{1-12}alquilo sustituido con un sustituyente seleccionado de hidroxi, C_{1-6}alquiloxi, arilo, y heteroarilo; y C_{3-7}cicloalquilo sustituido con un sustituyente seleccionado de hidroxi, C_{1-6}alquiloxi, arilo, arilC_{1-6}alquilo, heteroarilo, y heteroarilC_{1-6}alquilo; o

R^{15} y R^{16} junto con el nitrógeno al cual están unidos pueden formar opcionalmente un morfolinilo, un piperazinilo, o un piperazinilo sustituido con C_{1-6}alquiloxicarbonilo;

arilo es fenilo o naftalenilo;

cada fenilo o naftalenilo puede estar sustituido opcionalmente con 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados cada uno independientemente de halo, hidroxi, C_{1-6}alquilo, amino, polihaloC_{1-6}alquilo y C_{1-6}alquiloxi; y

cada fenilo o naftalenilo puede estar sustituido opcionalmente con un radical bivalente seleccionado de metilenodioxi y etilenodioxi;

heteroarilo es piridinilo, indolilo, quinolinilo, imidazolilo, furanilo, tienilo, oxadiazolilo, tetrazolilo, benzofuranilo o tetrahidrofuranilo;

cada piridinilo, indolilo, quinolinilo, imidazolilo, furanilo, tienilo, oxadiazolilo, tetrazolilo, benzofuranilo, o tetrahidrofuranilo puede estar sustituido opcionalmente con 1, 2 ó 3 sustituyentes seleccionados cada uno independientemente de halo, hidroxi, C_{1-6}alquilo, amino, polihaloC_{1-6}alquilo, arilo, arilC_{1-6}alquilo o C_{1-6}alquiloxi; y

cada piridinilo, indolilo, quinolinilo, imidazolilo, furanilo, tienilo, benzofuranilo, o tetrahidrofuranilo puede estar sustituido opcionalmente con un radical bivalente seleccionado de metilenodioxi o etilenodioxi.

\vskip1.000000\baselineskip

Los compuestos de fórmula (I) pueden existir también en sus formas tautómeras. Dichas formas, aunque no se indica explícitamente en la fórmula anterior, deben entenderse incluidas dentro del alcance de la presente invención.

Varios términos utilizados en las definiciones anteriores y las que figuran más adelante se explican a continuación. Estos términos se utilizan a veces como tales o en términos de composiciones.

Como se utiliza en las definiciones que anteceden y en lo sucesivo, halo es genérico para fluoro, cloro, bromo y yodo; C_{1-6}alquilo define radicales hidrocarbonados saturados lineales y de cadena ramificada que tienen de 1 a 6 átomos de carbono tales como, v.g., metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo, hexilo, 1-metiletilo, 2-metilpropilo, 2-metil-butilo, 2-metilpentilo y análogos; hidroxiC_{1-6}alquilo define un sustituyente hidroxi en radicales hidrocarbonados saturados lineales y de cadena ramificada que tienen de 1 a 6 átomos de carbono; trihalometilo define metilo que contiene tres sustituyentes halo idénticos o diferentes, por ejemplo trifluorometilo; C_{3-7}cicloalquilo incluye grupos hidrocarbonados cíclicos que tienen de 3 a 10 carbonos, tales como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, cicloheptilo, y análogos.

El término "sal de adición" comprende las sales que pueden formar los compuestos de fórmula (I) con bases orgánicas o inorgánicas tales como aminas, bases de metal alcalino y bases de metal alcalinotérreo, o bases de amonio cuaternario, o con ácidos orgánicos o inorgánicos, tales como ácidos minerales, ácidos sulfónicos, ácidos carboxílicos o ácidos que contienen fósforo.

El término "sal de adición" comprende adicionalmente sales farmacéuticamente aceptables, complejos metálicos y solvatos y las sales de los mismos, que pueden formar los compuestos de fórmula (I).

El término "sales farmacéuticamente aceptables" significa sales de adición de ácido o base farmacéuticamente aceptables. Debe entenderse que las sales de adición de ácido o base farmacéuticamente aceptables como se mencionan anteriormente en esta memoria comprenden las formas de sal no tóxicas de adición de ácido y sales no tóxicas de adición de base terapéuticamente activas que pueden formar los compuestos de fórmula (I). Los compuestos de fórmula (I) que tienen propiedades básicas pueden convertirse en sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables por tratamiento de dicha forma de base con un ácido apropiado. Ácidos apropiados comprenden, por ejemplo, ácidos inorgánicos tales como hidrácidos halogenados, v.g. ácido clorhídrico o bromhídrico; ácido sulfúrico; ácido nítrico; ácido fosfórico y los ácidos afines; o ácidos orgánicos tales como, por ejemplo, los ácidos acético, propanoico, hidroxiacético, láctico, pirúvico, oxálico, malónico, succínico (es decir ácido butanodioico), maleico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, metanosulfónico, etanosulfónico, bencenosulfónico, p-toluenosulfónico, ciclámico, salicílico, p-aminosalicílico, pamoico y los ácidos análogos.

Los compuestos de fórmula (I) que tienen propiedades ácidas pueden convertirse en sus sales de adición de base farmacéuticamente aceptables por tratamiento de dicha forma ácida con una base orgánica o inorgánica adecuada. Formas apropiadas de sales con bases comprenden, por ejemplo, las sales de amonio, las sales de metal alcalino y alcalinotérreo, v.g. las sales de litio, sodio, potasio, magnesio, calcio y análogas, sales con bases orgánicas, v.g. las sales de benzatina, N-metil-D-glucamina, sales de hidrabamina, y sales con aminoácidos tales como, por ejemplo, arginina, lisina y análogos.

Los términos sal de adición de ácido o base comprenden los hidratos y las formas de sal de adición de disolvente que pueden formar los compuestos de fórmula (I). Ejemplos de tales formas son v.g. hidratos, alcoholatos y análogas.

El término "complejos metálicos" significa un complejo formado entre un compuesto de fórmula (I) y una o más sales orgánicas o inorgánicas con metales. Ejemplos de dichas sales orgánicas o inorgánicas comprenden los halogenuros, nitratos, sulfatos, fosfatos, acetatos, trifluoroacetatos, tricloroacetatos, propionatos, tartratos, sulfonatos, v.g. metilsulfonatos, 4-metilfenilsulfonatos, salicilatos, benzoatos y análogas de los metales del segundo grupo principal del sistema periódico, v.g. las sales de magnesio o calcio, del tercer o cuarto grupo principal, v.g. aluminio, estaño, plomo así como los grupos de transición primero a octavo del sistema periódico, tales como, por ejemplo, cromo, manganeso, hierro, cobalto, níquel, cobre, cinc y análogos.

La expresión "formas estereoquímicamente isómeras de compuestos de fórmula (I)", como se utiliza anteriormente en esta memoria, define todos los compuestos posibles constituidos por los mismos átomos unidos por la misma secuencia de enlaces pero que tienen estructuras tridimensionales diferentes que no son intercambiables, que pueden poseer los compuestos de fórmula (I). A no ser que se mencione o indique otra cosa, la designación química de un compuesto abarca la mezcla de todas las formas estereoquímicamente isómeras posibles que puede poseer dicho compuesto. Dicha mezcla puede contener todos los diastereómeros y/o enantiómeros de la estructura molecular básica de dicho compuesto. Todas las formas estereoquímicamente isómeras de los compuestos de fórmula (I) tanto en forma pura como en mezcla de unos con otros, deben entenderse abarcadas dentro del alcance de la presente invención.

Son especialmente interesantes aquellos compuestos de fórmula (I) que son estereoquímicamente puros.

Las formas estereoisómeras puras de los compuestos y compuestos intermedios que se mencionan en esta memoria se definen como isómeros sustancialmente exentos de otras formas enantiómeras o diastereoisómeras de la misma estructura molecular básica de dichos compuestos o compuestos intermedios. En particular, el término "estereoisómeramente puro" se refiere a compuestos o compuestos intermedios que tienen un exceso estereomérico de al menos 80% (es decir como mínimo 90% de un isómero y como máximo 10% de los otros isómeros posibles) hasta un exceso estereomérico de 100% (es decir 100% de un isómero y nada del otro u otros), de modo más particular, compuestos o compuestos intermedios que tienen un exceso estereomérico de 90% hasta 100%, de modo aún más particular que tienen un exceso estereomérico de 94% hasta 100% y de modo muy particular que tienen un exceso estereomérico de 97% hasta 100%. Los términos "enantioméricamente puro" y "diastereoisómeramente puro" deben entenderse de manera similar, pero haciendo relación entonces al exceso enantiomérico, o respectivamente al exceso diastereomérico de la mezcla en cuestión.

Debe entenderse que las formas tautómeras de los compuestos de fórmula (I) comprenden aquellos compuestos de fórmula (I) en los cuales v.g. un grupo enol se convierte en un grupo ceto (tautomería ceto-enólica).

Debe entenderse que las formas de N-óxido de los compuestos de fórmula (I) comprenden aquellos compuestos de fórmula (I) en los cuales uno o más átomos de nitrógeno están oxidados para formar el denominado N-óxido, particularmente aquellos N-óxidos en los cuales uno o más de los nitrógenos de piperidina, piperazina o piridazinilo están oxidados en N.

Los compuestos de fórmula (I) pueden convertirse en las formas correspondientes de N-óxido siguiendo procedimientos conocidos en la técnica para convertir un nitrógeno trivalente en su forma de N-óxido. Dicha reacción de oxidación en N puede llevarse a cabo generalmente por reacción del material de partida de fórmula (I) con un peróxido orgánico o inorgánico apropiado.

Peróxidos inorgánicos apropiados comprenden, por ejemplo, peróxido de hidrógeno, peróxidos de metal alcalino o metal alcalinotérreo, v.g. peróxido de sodio, peróxido de potasio; peróxidos orgánicos apropiados pueden comprender peroxiácidos tales como, por ejemplo, ácido bencenocarboperoxoico o ácido bencenocarboperoxoico sustituido con halógeno, v.g. ácido 3-clorobencenocarboperoxoico, ácidos peroxoalcanoicos, v.g. ácido peroxoacético, hidroperóxidos de alquilo, v.g. hidroperóxido de terc-butilo. Disolventes adecuados son, por ejemplo, agua, alcoholes inferiores, v.g. etanol y análogos, hidrocarburos, v.g. tolueno, cetonas, v.g. 2-butanona, hidrocarburos halogenados, v.g. diclorometano, y mezclas de tales disolventes.

La presente invención tiene por objeto incluir también cualesquiera isótopos de los átomos presentes en los compuestos de la invención. Por ejemplo, los isótopos de hidrógeno incluyen tritio y deuterio, y los isótopos de carbono incluyen C-13 y C-14.

Siempre que se utilice en lo sucesivo en esta memoria, debe entenderse que el término "compuestos de fórmula (I)" incluye asimismo las formas de N-óxido, las sales de adición de ácido o base farmacéuticamente aceptables y todas las formas estereoisómeras.

Un primer grupo de compuestos interesantes está constituido por aquellos compuestos de fórmula (I) en los cuales se aplican una o más las restricciones siguientes:

a) m es 0;

b) n es 2;

c) p es 1;

d) t es 0;

e)

4

es -CH=C<;

f) R^{1} y R^{2} son cada uno independientemente hidrógeno;

g) R^{3} y R^{4} son cada uno independientemente hidrógeno;

h) R^{5} es hidrógeno;

i) R^{6} y R^{7} son cada uno independientemente hidrógeno o C_{1-6}alquilo;

j) Z es un radical seleccionado de (a-1), (a-2) o (a-4); o

k) R^{10} y R^{11} se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, hidroxi, C_{1-6}alquiloxicarbonilo o hidroxi
C_{1-6}alquilo.

\vskip1.000000\baselineskip

Un segundo grupo de compuestos interesantes está constituido por aquellos compuestos de fórmula (I) y aquellos compuestos del primer grupo de compuestos interesantes en donde se aplican una o más de las restricciones siguientes:

a) m es 0;

b) m es 2;

c) p es 1;

d) t es 0;

e)

5

es -CH=C<;

\newpage

f) R^{1} y R^{2} son cada uno independientemente hidrógeno;

g) R^{3} y R^{4} son cada uno independientemente hidrógeno;

h) R^{5} es hidrógeno;

i) R^{6} y R^{7} son cada uno independientemente hidrógeno;

j) Z es un radical seleccionado de (a-2) o (a-4); o

k) R^{10} y R^{11} se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, hidroxi, o hidroxiC_{1-6}alquilo.

\vskip1.000000\baselineskip

Un grupo de compuestos preferidos está constituido por aquellos compuestos de fórmula (I) o cualquier subgrupo de los mismos, en donde m es 0; n es 0; p es 1; t es 0; R^{1} y R^{2} son cada uno independientemente hidrógeno; R^{3} y R^{4} son cada uno independientemente hidrógeno; R^{5} es hidrógeno; R^{6} y R^{7} son cada uno independientemente hidrógeno o C_{1-6}alquilo; Z es un radical seleccionado de (a-1), (a-2) o (a-4); o R^{10} y R^{11} se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, hidroxi, C_{1-6}alquiloxicarbonilo o hidroxiC_{1-6}alquilo.

Un grupo de compuestos más preferidos está constituido por aquellos compuestos de fórmula (I) o cualquier subgrupo de los mismos en donde m es 0; n es 0; p es 1; t es 0; R^{1} y R^{2} son cada uno independientemente hidrógeno; R^{3} y R^{4} son cada uno independientemente hidrógeno; R^{5} es hidrógeno; R^{6} y R^{7} son cada uno independientemente hidrógeno; Z es un radical seleccionado de (a-2) o (a-4); o R^{10} y R^{11} se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, hidroxi, o hidroxiC_{1-6}alquilo.

Los compuestos más preferidos son el compuesto No. 1, el compuesto No. 4 y el compuesto No. 5.

\vskip1.000000\baselineskip

6

\vskip1.000000\baselineskip

Los compuestos de fórmula (I), sus sales farmacéuticamente aceptables y N-óxidos y formas estereoquímicamente isómeras de los mismos pueden prepararse de manera convencional. Los materiales de partida y algunos de los compuestos intermedios son compuestos conocidos y están disponibles comercialmente o se pueden preparar de acuerdo con procedimientos convencionales de reacción conocidos generalmente en la técnica.

Algunos de tales métodos de preparación se describirán más adelante con mayor detalle.

Otros métodos de obtención de los compuestos finales de fórmula (I) se describen en los ejemplos.

Los compuestos de fórmula (I) se pueden preparar por reacción de un compuesto intermedio de fórmula (II) con un compuesto intermedio de fórmula (III) en donde W es un grupo lábil apropiado tal como, por ejemplo, halo, v.g. fluoro, cloro, bromo o yodo, o un radical sulfoniloxi tal como metilsulfoniloxi, 4-metilfenilsulfoniloxi y análogos. La reacción puede llevarse a cabo en un disolvente inerte en la reacción tal como, por ejemplo, un alcohol, v.g. metanol, etanol, 2-metoxi-etanol, propanol, butanol y análogos; un éter, v.g. 4,4-dioxano, 1,1'-oxibispropano y análogos; una cetona, v.g. 4-metil-2-pentanona; o N,N-dimetilformamida, nitrobenceno, acetonitrilo, ácido acético y análogos. La adición de una base apropiada tal como, por ejemplo, un carbonato o hidrogenocarbonato de metal alcalino o alcalinotérreo, v.g. trietilamina o carbonato de sodio, puede utilizarse para capturar el ácido que se libera durante el curso de la reacción. Una pequeña cantidad de un yoduro metálico apropiado, v.g. yoduro de sodio o potasio puede añadirse para favorecer la reacción. La agitación puede aumentar la velocidad de la reacción. La reacción puede llevarse a cabo convenientemente a una temperatura comprendida entre la temperatura ambiente y la temperatura de reflujo de la mezcla de reacción y, en caso deseado, la reacción puede llevarse a cabo a una presión incrementada.

\vskip1.000000\baselineskip

7

\vskip1.000000\baselineskip

Los compuestos de fórmula (I), en donde p es 1, a los que se hace referencia en esta memoria como compuestos de fórmula (I-a) se pueden preparar por conversión de compuestos intermedios de fórmula (IV) con hidruro de litio y aluminio en un disolvente adecuado tal como tetrahidrofurano.

\vskip1.000000\baselineskip

8

\vskip1.000000\baselineskip

Los compuestos de fórmula (I-a) se pueden preparar también por reacción de un carboxaldehído de fórmula (VI) apropiado, con un compuesto intermedio de fórmula (V), en presencia de un reactivo apropiado, tal como un borohidruro de sodio, v.g. tetrahidroborato de sodio o cianotrihidroborato soportado por polímero, en un disolvente adecuado, tal como un alcohol, v.g. metanol.

\vskip1.000000\baselineskip

9

\vskip1.000000\baselineskip

De manera idéntica, los compuestos de fórmula (I), en donde t es 1, a los que se hace referencia en esta memoria como compuestos de fórmula (I-b), se pueden preparar por reacción de un compuesto intermedio de fórmula (II) con un carboxaldehído apropiado de fórmula (VII).

\vskip1.000000\baselineskip

10

\vskip1.000000\baselineskip

Los compuestos de fórmula (I) se pueden convertir también unos en otros por reacciones conocidas en la técnica o transformaciones de grupos funcionales. Algunas de tales transformaciones han sido ya descritas anteriormente en esta memoria. Otros ejemplos son hidrólisis de ésteres carboxílicos para dar el ácido carboxílico o el alcohol correspondientes; hidrólisis de amidas para dar los ácidos carboxílicos o aminas correspondientes; hidrólisis de nitrilos a las amidas correspondientes; los grupos amino en imidazol o fenilo pueden reemplazarse por un hidrógeno por reacciones de diazotación conocidas en la técnica y reemplazamiento subsiguiente del grupo diazo por hidrógeno; los alcoholes pueden convertirse en ésteres y éteres; las aminas primarias pueden convertirse en aminas secundarias o terciarias; los enlaces dobles pueden hidrogenarse para dar enlaces simples correspondientes; un radical yodo en un grupo fenilo puede convertirse en un grupo éster por inserción de monóxido de carbono en presencia de un catalizador de paladio adecuado.

Los compuestos intermedios de fórmula (V) en donde m es 0, a los que se hace referencia en esta memoria como compuestos intermedios de fórmula (V-a), se pueden preparar por conversión de un compuesto intermedio de fórmula (VIII) con un hidrato de hidracina en un disolvente adecuado tal como metanol.

11

Los compuestos intermedios de fórmula (V-a) se pueden preparar también por una reacción de reducción de nitro a amino partiendo de un compuesto intermedio de fórmula (XVI), en presencia de un catalizador metálico tal como níquel Raney y un reductor apropiado tal como hidrógeno, en un disolvente adecuado tal como metanol o etanol.

12

Los compuestos intermedios de fórmula (X) se pueden preparar por reacción de un compuesto intermedio de fórmula (XI) con un compuesto intermedio de fórmula (XII) en presencia de reactivos apropiados tales como monohidrocloruro de N'-(etilcarbonimidoil)-N,N-dimetil-1,3-propanodiamina (EDC) y 1-hidroxi-1H-benzotriazol (HOBT). La reacción puede llevarse a cabo en presencia de una base tal como trietilamina, en un disolvente adecuado, tal como una mezcla de diclorometano y tetrahidrofurano.

13

\vskip1.000000\baselineskip

Los compuestos intermedios de fórmula (VI) se pueden preparar por reacción de compuestos intermedios de fórmula (XIII) con hidruro de litio y aluminio en un disolvente adecuado tal como tetrahidrofurano.

14

Los compuestos intermedios de fórmula (VIII) (lo mismo es válido para los compuestos intermedios de fórmula (XVI)), en donde t es 0, a los que se hace referencia en esta memoria como compuestos intermedios de fórmula (VIII-a), se pueden preparar por reacción de un compuesto intermedio de fórmula (IX) con un compuesto intermedio de fórmula (XIV), en donde L es un grupo lábil apropiado tal como, por ejemplo, halo, v.g. fluoro, cloro, bromo o yodo, o C_{1-6}alquiloxi, v.g. metiloxi, en presencia de una solución de hidrocloruro en 2-propanol, en un disolvente inerte en la reacción tal como N,N-dimetilformamida.

15

Los compuestos intermedios de fórmula (IX), en donde R^{6} y R^{7} son ambos hidrógeno, a los que se hace referencia en esta memoria como compuestos intermedios de fórmula (LX-a) (sic), se pueden preparar por conversión de un compuesto intermedio de fórmula (XV) en presencia de cianoborohidruro de sodio. La reacción puede llevarse a cabo en un disolvente inerte en la reacción tal como, por ejemplo, ácido acético.

16

\vskip1.000000\baselineskip

Los compuestos de fórmula (I) y algunos de los compuestos intermedios pueden tener al menos un centro estereogénico en su estructura. Dicho centro estereogénico puede estar presente en una configuración R o S.

Algunos de los compuestos de fórmula (I) y algunos de los compuestos intermedios en la presente invención pueden contener un átomo de carbono asimétrico. Las formas estereoquímicamente isómeras puras de dichos compuestos y dichos compuestos intermedios pueden obtenerse por aplicación de procedimientos conocidos en la técnica. Por ejemplo, los diastereoisómeros se pueden separar por métodos físicos tales como cristalización selectiva o técnicas cromatográficas, v.g. distribución en contracorriente, cromatografía líquida y métodos análogos. Los enantiómeros pueden obtenerse a partir de mezclas racémicas por conversión primeramente de dichas mezclas racémicas con agentes de resolución adecuados tales como, por ejemplo, ácidos quirales, en mezclas de sales o compuestos diastereoisómeros; seguido por separación física de dichas mezclas de sales o compuestos diastereoisómeros mediante, por ejemplo, cristalización selectiva, cromatografía con fluidos supercríticos o técnicas cromatográficas, v.g., cromatografía líquida y métodos análogos; y finalmente conversión de dichas sales o compuestos diastereoisómeros separados en los enantiómeros correspondientes. Las formas estereoquímicamente isómeras puras pueden obtenerse también a partir de las formas estereoquímicamente isómeras puras de los compuestos intermedios y materiales de partida apropiados, con tal que las reacciones que intervienen ocurran estereoespecíficamente.

Los compuestos de fórmula (I), las sales de adición farmacéuticamente aceptables y las formas estereoisómeras de los mismos tienen propiedades farmacológicas valiosas en el sentido de que inhiben la interacción entre p53 y
MDM2.

El término "MDM2" se utiliza en esta memoria para referirse a una proteína obtenida como resultado de la expresión del gen mdm2. Dentro del significado de este término, MDM2 abarca todas las proteínas codificadas por mdm2, mutantes de las mismas, proteínas rodaja alternativas de las mismas, y proteínas fosforiladas de las mismas. Adicionalmente, como se utiliza en esta memoria, el término "MDM2" incluye análogos de MDM2 v.g. MDMX, conocido también como MDM4, y homólogos y análogos de MDM2 de otros animales, v.g. la HDM2 humana homóloga, o la HDMX humana análoga.

El término "inhibición de la interacción" o "inhibidor de la interacción" se utiliza en esta memoria para significar la prevención o reducción de la asociación directa o indirecta de una o más moléculas, péptidos, proteínas, enzimas o receptores; o prevención o reducción de la actividad normal de una o más moléculas, péptidos, proteínas, enzimas o receptores.

La expresión "inhibidor de la interacción de p53 con MDM2" o "inhibidor de p53-MDM2" se utiliza en esta memoria para describir un agente que aumenta la expresión de p53 en el ensayo descrito en C.1. Este aumento puede estar causado por, pero sin carácter limitante, uno o más de los mecanismos de acción siguientes:

-: inhibición de la interacción entre p53 y MDM2,

-: asociación directa con la proteína MDM2 o la proteína p53,

-: interacciones con dianas situadas aguas arriba o aguas abajo; v.g. quinasas; o actividades enzimáticas implicadas en la ubiquitinación o modificación SUMO,

-: secuestración o transporte de MDM2 y p53 a compartimientos celulares diferentes,

-: modulación de proteínas que se asocian con MDM2, por ejemplo (pero sin carácter limitante), p73, E2F-1, Rb, p21waf1 o cip1,

-: regulación descendente o interferencia con la expresión de MDM2 y/o la actividad de MDM2, por ejemplo (pero sin carácter limitante), impacto en su localización celular, modificación posterior a la traducción, exportación nuclear o actividad de ligasa de ubiquitina,

-: estabilización directa o indirecta de la proteína p53, v.g. por mantenimiento de la misma en su forma funcional estructural, o por prevención del plegamiento erróneo,

-: aumento de la expresión de p53 o la expresión de miembros de la familia p53, v.g. p63 y p73,

-: aumento de la actividad de p53, por ejemplo (pero sin carácter limitante), aumento de su actividad de transcripción y/o

-: aumento de la expresión de genes y proteínas del camino de señalización de p53, por ejemplo (pero sin carácter limitante) p21waf1, cip1, MIC-1 (GDF-15), PIG-3 y ATF-3.

\vskip1.000000\baselineskip

Por consiguiente, la presente invención describe los compuestos de fórmula (I) para uso como medicamento.

Adicionalmente, la invención se refiere también al uso de un compuesto para fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno mediado por una interacción p53-MDM2, en donde dicho compuesto es un compuesto de fórmula (I).

El término "terapia" o "tratamiento" como se utiliza en esta memoria, abarca cualquier tratamiento de una enfermedad y/o afección en un animal, particularmente un humano, e incluye: (i) evitación de que ocurra una enfermedad y/o afección en un individuo que puede estar predispuesto a la enfermedad y/o afección pero no ha sido diagnosticado todavía de padecer la misma; (ii) inhibición de la enfermedad y/o afección, es decir, detención de su desarrollo; (iii) alivio de la enfermedad y/o afección, es decir, causa de la regresión de la enfermedad y/o afección.

Con la expresión "un trastorno mediado por una interacción p53-MDM2" se entiende cualquier condición indeseable o perjudicial que da como resultado o resulta de la inhibición de la interacción entre la proteína MDM2 y p53 u otras proteínas celulares que inducen apoptosis, inducen muerte celular, o regulan el ciclo celular.

Esta solicitud describe también un método para tratamiento de un trastorno mediado por una interacción p53-MDM2 por administración de una cantidad eficaz de un compuesto de la presente invención a un individuo, v.g. un mamífero (y más particularmente un humano) que precisa dicho tratamiento.

Los compuestos de la invención pueden tener efectos antiproliferativos en células tumorales, aun cuando dichas células estén desprovistas de p53 funcional. De modo más particular, los compuestos de la invención pueden tener efectos antiproliferativos en tumores con p53 de tipo salvaje y/o en tumores que sobreexpresan MDM2.

Así pues, se describe también un método para inhibición del crecimiento tumoral por administración de una cantidad eficaz de un compuesto de la presente invención a un individuo, v.g. un mamífero (y más particularmente un humano) que precisa dicho tratamiento.

Ejemplos de tumores que pueden ser inhibidos, pero sin carácter limitante, son cáncer de pulmón (v.g. adenocarcinoma y con inclusión de cáncer de pulmón de células no pequeñas), cánceres pancreáticos (v.g. carcinoma pancreático tal como, por ejemplo, carcinoma pancreático exocrino), cáncer de colon (v.g. carcinomas colorrectales, tales como, por ejemplo, adenocarcinoma de colon y adenoma de colon), cáncer esofágico, carcinoma oral escamoso, carcinoma de lengua, carcinoma gástrico, cáncer nasofaríngeo, tumores hematopoyéticos de linaje linfoide (v.g. leucemia linfocítica aguda, linfoma de células B, linfoma de Burkitt), linfoma distinto al Hodgkin, enfermedad de Hodgkin, leucemias mieloides (por ejemplo, leucemia mielógena aguda (AML)), cáncer folicular de tiroides, síndrome mielodisplástico (MDS), tumores de origen mesenquimático (v.g. fibrosarcomas y rabdomiosarcomas), melanomas, teratocarcinomas, neuroblastomas, tumores cerebrales, gliomas, tumor benigno de la piel (queratoacantomas), carcinoma de mama (v.g. cáncer de mama avanzado), carcinoma de riñón, carcinoma de ovario, carcinoma cervical, carcinoma endometrial, carcinoma de vejiga, cáncer de próstata con inclusión de la enfermedad avanzada, cánceres testiculares, osteosarcoma, cáncer de cabeza y cuello y carcinoma epidérmico.

Los compuestos de la presente invención pueden utilizarse también para el tratamiento y la prevención de afecciones inflamatorias.

Así, se describe también un método para el tratamiento y la prevención de afecciones inflamatorias por administración de una cantidad eficaz de un compuesto de la presente invención a un individuo, v.g. un mamífero (y más particularmente un humano) que precisa dicho tratamiento.

Los compuestos de la presente invención se pueden utilizar también para el tratamiento de enfermedades y afecciones autoinmunes. Con el término "enfermedades autoinmunes" debe entenderse cualquier enfermedad en la cual el sistema inmunitario de un animal reacciona negativamente a un autoantígeno. Con el término "autoantígeno" se entiende cualquier antígeno que se encuentra normalmente en el cuerpo del animal. Enfermedades autoinmunes representativas incluyen, pero sin carácter limitante: tiroiditis de Hashimoto, enfermedad de Grave, esclerosis múltiple, anemia perniciosa, enfermedad de Addison, diabetes mellitus dependiente de insulina, artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico (SLE o lupus), dermatomiositis, enfermedad de Crohn, granulomatosis de Wegener, Enfermedad Anti-Membrana Basal Glomerular, Síndrome Antifosfolipídico, Dermatitis Herpetiforme 25, Encefalomielitis alérgica, glomerulonefritis, glomerulonefritis membranosa, síndrome de Goodpasture, Lambert-Eaton, síndrome miasténico, miastenia grave, penfigoide bulloso, poliendocrinopatías, enfermedad de Reiter, y síndrome de Stiff-Man.

Así pues, se describe también un método para el tratamiento de enfermedades y afecciones autoinmunes y el tratamiento de enfermedades asociadas con proteínas estructurales inestables o defectuosamente plegadas por administración de una cantidad eficaz de un compuesto de la presente invención a un individuo, v.g. un mamífero (y más particularmente un humano) que precisa dicho tratamiento.

Los compuestos de la presente invención pueden ser útiles también para el tratamiento de enfermedades asociadas con proteínas estructurales inestables o defectuosamente plegadas.

Ejemplos de las enfermedades asociadas con proteínas estructurales inestables o defectuosamente plegadas incluyen, pero sin carácter limitante: fibrosis quística (CFTR), síndrome de Marfan (fibrilina), esclerosis amiotrófica lateral (superóxido-dismutasa), escorbuto (colágeno), enfermedad de la orina jarabe de arce (complejo de \alpha-cetoácido-deshidrogenasa), osteogénesis imperfecta (procolágeno pro-alfa tipo I), enfermedad de Creutzfeldt-Jakob (prión), enfermedad de Alzheimer (\beta-amiloide), amiloidosis familiar (lisozima), cataratas (cristalinas), hipercolesterolemia familiar (receptor de LDL), deficiencia en antitripsina \alphaI, enfermedad de Tay-Sachs (beta-hexosaminidasa), retinitis pigmentosa (rodopsina), y leprechaunismo (receptor de insulina).

Así pues, se describe también un método para el tratamiento de enfermedades asociadas con proteínas estructurales inestables o defectuosamente plegadas por administración de una cantidad eficaz de un compuesto de la presente invención a un individuo, v.g. un mamífero (y más particularmente un humano) que precisa dicho tratamiento.

Teniendo en cuenta sus útiles propiedades farmacológicas, los presentes compuestos pueden formularse en diversas formas farmacéuticas para propósitos de administración.

Para preparar las composiciones farmacéuticas de esta invención, una cantidad eficaz de un compuesto particular, en forma de sal de adición de base o ácido como el ingrediente activo se combina en mezcla íntima con un vehículo farmacéuticamente aceptable, vehículo que puede tomar una gran diversidad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para administración. Estas composiciones farmacéuticas se encuentran deseablemente en forma de dosificación unitaria adecuada, preferiblemente, para administración oral, rectal, percutánea o por inyección parenteral. Por ejemplo, en la preparación de las composiciones en forma de dosificación oral, puede emplearse cualquiera de los medios farmacéuticos usuales, tales como, por ejemplo, agua, glicoles, aceites, alcoholes y análogos en el caso de preparaciones orales líquidas tales como suspensiones, jarabes, elixires y soluciones; o vehículos sólidos tales como almidones, azúcares, caolín, lubricantes, aglomerantes, agentes desintegrantes y análogos en el caso de polvos, píldoras, cápsulas y tabletas.

Debido a su facilidad de administración, tabletas y cápsulas representan la forma de dosificación oral más ventajosa, en cuyo caso se emplean obviamente vehículos farmacéuticos sólidos. Para las composiciones parenterales, el vehículo comprenderá usualmente agua estéril, al menos en gran parte, aunque pueden incluirse otros ingredientes, por ejemplo para favorecer la solubilidad. Pueden prepararse por ejemplo soluciones inyectables, en las cuales el vehículo comprende solución salina, solución de glucosa o una mezcla de solución salina y de glucosa. Pueden prepararse también suspensiones inyectables, en cuyo caso se pueden emplear vehículos líquidos apropiados, agentes de suspensión y análogos. En las composiciones adecuadas para administración percutánea, el vehículo comprende opcionalmente un agente mejorador de la penetración y/o un agente humectante adecuado, combinado opcionalmente con aditivos adecuados de cualquier naturaleza en menores proporciones, aditivos que no causan un efecto deletéreo significativo a la piel. Dichos aditivos pueden facilitar la administración a la piel y/o pueden ser útiles para preparar las composiciones deseadas. Estas composiciones se pueden administrar de diversas maneras, v.g. como un parche transdérmico, como un toque, o como un ungüento. Es especialmente ventajoso formular las composiciones farmacéuticas arriba mencionadas en forma de dosis unitaria para facilidad de administración y uniformidad de dosificación.

Forma unitaria de dosificación, como se utiliza en la memoria descriptiva y las reivindicaciones adjuntas, hace referencia a unidades físicamente discretas adecuadas como dosis unitarias, conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada de ingrediente activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado en asociación con el vehículo farmacéutico requerido. Ejemplos de tales formas unitarias de dosificación son tabletas (con inclusión de tabletas ranuradas o recubiertas), cápsulas, píldoras, paquetes de polvos, pastillas, soluciones o suspensiones inyectables, cucharaditas de té, cucharadas de mesa y análogas, y múltiplos segregados de las mismas.

Es especialmente ventajoso formular las composiciones farmacéuticas mencionadas anteriormente en forma unitaria de dosificación para facilidad de administración y uniformidad de dosificación.

La forma unitaria de dosificación como se utiliza en la memoria descriptiva y las reivindicaciones adjuntas hacen referencia a unidades físicamente discretas adecuadas como dosis unitarias, conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada de ingrediente activo, calculada para producir el efecto terapéutico deseado, en asociación con los vehículos farmacéuticos requeridos. Ejemplos de tales formas de dosis unitaria son tabletas (con inclusión de tabletas ranuradas o recubiertas), cápsulas, píldoras, paquetes de polvos, pastillas, soluciones o suspensiones inyectables, cucharaditas de té, cucharadas de mesa y análogas, y múltiplos segregados de las mismas.

El compuesto de la invención se administra en una cantidad suficiente para inhibir la interacción entre MDM2 y p53 u otras proteínas celulares que inducen apoptosis, inducen muerte celular, o regulan el ciclo celular.

El potencial oncogénico de MDM2 no viene determinado exclusivamente por su capacidad para suprimir p53, sino también por su capacidad para regular otras proteínas supresoras de tumores, v.g. la proteína pRb del retinoblastoma y el factor de transcripción E2F1 estrechamente asociado.

Por ello, el compuesto de la invención se administra en una forma suficiente para modular la interacción entre MDM2 y los factores de transcripción E2F.

Los expertos en la técnica podrían determinar fácilmente la cantidad eficaz a partir de los resultados de tests presentados más adelante en esta memoria. En general, se contempla que una cantidad terapéuticamente eficaz podría ser de 0,005 mg/kg a 100 mg/kg de peso corporal, y en particular de 0,005 mg/kg a 10 mg/kg de peso corporal. Puede ser apropiado administrar la dosis requerida como una, dos, tres, cuatro o más subdosis a intervalos apropiados a lo largo del día. Dichas subdosis pueden formularse como formas de dosificación unitaria, por ejemplo, que contienen 0,5 a 500 mg, y en particular 10 mg a 500 mg de ingrediente activo por forma de dosis unitaria.

Como otro aspecto de la presente invención, se contempla una combinación de un inhibidor de p53-MDM2 con otro agente anticáncer, especialmente para uso como medicamento, más especialmente en el tratamiento del cáncer o enfermedades afines.

Para el tratamiento de las afecciones anteriores, los compuestos de la invención pueden emplearse ventajosamente en combinación con uno o más agentes medicinales distintos, de modo más particular, con otros agentes anticáncer. Ejemplos de agentes anticáncer incluyen pero sin carácter limitante:

-: compuestos de coordinación de platino, por ejemplo cisplatino, carboplatino u oxaliplatino;

-: compuestos de taxano, por ejemplo paclitaxel o docetaxel;

-: inhibidores de la topoisomerasa I tales como compuestos de camptotecina, por ejemplo irinotecán o topotecán;

-: inhibidores de la topoisomerasa II tales como epipodofilotoxinas antitumorales o derivados de podofilotoxinas, por ejemplo etoposido o teniposido;

-: alcaloides antitumorales de la vinca, por ejemplo vinblastina, vincristina o vinorrelbina;

-: derivados antitumorales nucleosídicos, por ejemplo 5-fluorouracilo, leucovorina, gemcitabina, o capecitabina;

-: agentes alquilantes tales como mostazas nitrogenadas o nitrosourea, por ejemplo ciclofosfamida, clorambucil, carmustina, tiotepa, mefalán o lomustina;

-: derivados antitumorales de antraciclina, por ejemplo daunorrubicina, doxorrubicina, doxil, idarrubicina o mitoxantrona;

-: moléculas que direccionan el receptor IGF-1, por ejemplo picropodofilina;

-: derivados de tetracarcina, por ejemplo tetrocarcina A;

-: glucocorticoides, por ejemplo prednisona;

-: anticuerpos, por ejemplo trastuzumab (anticuerpo HER2), rituximab (anticuerpo CD20), gemtuzamab, cetuximab, pertuzumab o bevacizumab;

-: antagonistas de los receptores de estrógenos o moduladores selectivos de los receptores de estrógenos, por ejemplo tamoxifeno, fulvestrant, toremifeno, droloxifeno, faslodex o raloxifeno;

-: inhibidores de las aromatasas, tales como exemestano, anastrozol, letrazol o vorozol;

-: agentes de diferenciación tales como retinoides, vitamina D o ácido retinoico y agentes bloqueantes del metabolismo del ácido retinoico (RAMBA), por ejemplo accutano;

-: inhibidores de la metil-transferasa de DNA, por ejemplo azacitidina o decitabina;

-: antifolatos, por ejemplo pemetrexed disódico;

-: antibióticos, por ejemplo antinomicina D, bleomicina, mitomicina C, dactinomicina, carminomicina o daunomicina;

-: antimetabolitos, por ejemplo clofarabina, aminopterina, citosina-arabinosido o metotrexato;

-: agentes inductores de apoptosis y agentes antiangiogénicos, tales como inhibidores de Bcl-2, por ejemplo YC 137, BH 312, ABT 737, gossipol, HA 14-1, TW 37 o ácido decanoico;

-: agentes de fijación de tubulina, por ejemplo combrestatina, colchicinas o nocodazol;

-: inhibidores de quinasas, como por ejemplo flavoperidol, imatinib-mesilato, erlotinib o gefitinib;

-: inhibidores de la farnesil-transferasa, por ejemplo tipifamib;

-: inhibidores de la histona-desacetilasa (HDAC), por ejemplo butirato de sodio, ácido suberoilanilida-hidroxámico (SAHA), depsipéptido (FR901228), NVP-LAQ824, R306465, JNJ-26481585 o tricostatina A;

-: inhibidores del camino ubiquitina-proteasoma, por ejemplo PS-341, MLN.41 o bortezomib;

-: Yondelis;

-: inhibidores de las telomerasas, por ejemplo telomestatina;

-: inhibidores de las metaloproteinasas de la matriz, por ejemplo batimastat, marimastat, prinostat o metastat.

\vskip1.000000\baselineskip

Como se ha expuesto anteriormente, los compuestos de la presente invención tienen también aplicaciones terapéuticas en la sensibilización de células tumorales para quimioterapia y radioterapia.

Por consiguiente, los compuestos de la presente invención pueden utilizarse como "radiosensibilizador" y/o "quimiosensibilizador" o pueden administrarse en combinación con otro "radiosensibilizador" y/o "quimiosensibilizador".

El término "radiosensibilizador", como se utiliza en esta memoria, se define como una molécula, preferiblemente una molécula de peso molecular bajo, administrada a animales en cantidades terapéuticamente eficaces para aumentar la sensibilidad de las células a la radiación ionizante y/o para promover el tratamiento de enfermedades que son tratables con radiación ionizante.

El término "quimiosensibilizador", como se utiliza en esta memoria, se define como una molécula, preferiblemente una molécula de peso molecular bajo, administrada a animales en cantidades terapéuticamente eficaces para aumentar la sensibilidad de las células a la quimioterapia y/o promover el tratamiento de enfermedades que son tratables con agentes quimioterapéuticos.

Varios mecanismos para el modo de acción de los radiosensibilizadores han sido propuestos en la bibliografía, con inclusión de: radiosensibilizadores de células hipóxicas (v.g., compuestos de 2-nitroimidazol, y compuestos de benzotriazina-dióxido) que mimetizan el oxígeno o se comportan alternativamente como agentes biorreductores en condiciones de hipoxia; radiosensibilizadores de células no hipóxicas (v.g. pirimidinas halogenadas) pueden ser análogos de las bases de DNA y se incorporan preferentemente en el DNA de las células del cáncer y promueven con ello la rotura inducida por radiación de las moléculas de DNA y/o previenen los mecanismos normales de reparación del DNA; y diversos otros mecanismos potenciales de acción han sido propuestos para los radiosensibilizadores en el tratamiento de enfermedades. Muchos protocolos de tratamiento del cáncer emplean actualmente radiosensibilizadores en asociación con radiación de rayos X. Ejemplos de radiosensibilizadores activados por rayos X incluyen, pero sin carácter limitante, los siguientes: metronidazol, misonidazol, desmetilmisonidazol, pimonidazol, etanidazol, nimorazol, mitomicina C, RSU-1069, SR 4233, EO9, RB 6145, nicotinamida, 5-bromodesoxiuridina (BUdR), 5-yododesoxiuridina (IUdR), bromodesoxicitidina, fluorodesoxiuridina (FudR), hidroxiurea, cisplatino, y análogos terapéuticamente eficaces y derivados de los mismos.

La terapia fotodinámica (PDT) de los cánceres emplea luz visible como el activador de radiación del agente sensibilizador. Ejemplos de radiosensibilizadores fotodinámicos incluyen los siguientes, pero sin carácter limitante: derivados de hematoporfirina, Photofrin, derivados de benzoporfirina, etioporfirina de estaño, feoborbida-a, bacterioclorofila-a, naftalocianinas, ftalocianinas, ftalocianina de cinc, y análogos y derivados de los mismos terapéuticamente eficaces.

Los radiosensibilizadores pueden administrarse en conjunción con una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más compuestos adicionales que incluyen, pero sin carácter limitante: compuestos que promueven la incorporación de radiosensibilizadores a las células diana; compuestos que controlan el flujo de agentes terapéuticos, nutrientes y/u oxígeno a las células diana; agentes quimioterapéuticos que actúan sobre el tumor con o sin radiación adicional; u otros compuestos terapéuticamente eficaces para el tratamiento del cáncer u otra enfermedad.

Los quimiosensibilizadores pueden administrarse en asociación con una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más compuestos adicionales que incluyen, pero sin carácter limitante: compuestos que promueven la incorporación de quimiosensibilizadores a las células diana; compuestos que controlan el flujo de agentes terapéuticos, nutrientes y/u oxígeno a las células diana; agentes quimioterapéuticos que actúan sobre el tumor u otros compuestos terapéuticamente eficaces para el tratamiento del cáncer u otra enfermedad. Los antagonistas del calcio, por ejemplo verapamil, se han encontrado útiles en combinación con agentes antineoplásticos para establecer la quimiosensibilidad en las células tumorales resistentes a los agentes quimioterapéuticos aceptados y potenciar la eficacia de tales compuestos en enfermedades malignas sensibles a los fármacos.

Teniendo en cuenta sus útiles propiedades farmacológicas, los componentes de las combinaciones de acuerdo con la invención, es decir, el otro agente medicinal y el inhibidor de p53-MDM puede formularse en diversas formas farmacéuticas para propósitos de administración. Los componentes pueden formularse por separado en composiciones farmacéuticas individuales o en una composición farmacéutica unitaria que contiene ambos compuestos.

La presente invención se refiere también por tanto a una composición farmacéutica que comprende el otro agente medicinal y el inhibidor de p53-MDM junto con uno o más vehículos farmacéuticos.

La presente invención se refiere adicionalmente al uso de una combinación de acuerdo con la invención en la fabricación de una composición farmacéutica para inhibir el crecimiento de las células tumorales.

La presente invención se refiere adicionalmente a un producto que contiene como primer ingrediente activo un inhibidor de p53-MDM2 de acuerdo con la invención y como segundo ingrediente activo un agente anticáncer, como una preparación combinada para uso simultáneo, separado o secuencial en el tratamiento de pacientes que sufren de cáncer.

El otro agente medicinal y el inhibidor de p53-MDM2 pueden administrarse simultáneamente (v.g. en composiciones separadas o unitarias) o secuencialmente en cualquier orden. En el último caso, los dos compuestos se administraran dentro de un periodo y en una cantidad y manera que es suficiente para asegurar que se consigue un efecto ventajoso o sinérgico. Se apreciará que el método y el orden de administración preferidos así como las cantidades de dosificación respectivas y los regímenes para cada componente de la combinación dependerán del otro agente medicinal particular y del inhibidor de p53-MDM2 que se administre, su ruta de administración, el tumor particular que se esté tratando y el hospedador particular de que se trate. El método y orden de administración óptimos así como las cantidades y régimen de dosificación pueden ser determinados fácilmente por los expertos en la técnica utilizando métodos convencionales y teniendo en cuenta la información expuesta en esta memoria.

El compuesto de coordinación de platino se administra ventajosamente en una dosis de 1 a 500 mg por metro cuadrado (mg/m^{2}) de superficie corporal, por ejemplo 50 a 400 mg/m^{2}, particularmente para cisplatino en una dosis de aproximadamente 75 mg/m^{2} y para carboplatino aproximadamente 300 mg/m^{2} por curso de tratamiento.

El compuesto de taxano se administra ventajosamente en una dosis de 50 a 400 mg por metro cuadrado (mg/m^{2}) de superficie corporal, por ejemplo 75 a 250 mg/m^{2}, particularmente para paclitaxel en una dosis de aproximadamente 175 a 250 mg/m^{2} y para docetaxel en aproximadamente 75 a 150 mg/m^{2} por curso de tratamiento.

El compuesto de camptotecina se administra ventajosamente en una dosis de 0,1 a 400 mg por metro cuadrado (mg/m^{2}) de superficie corporal, por ejemplo 1 a 300 mg/m^{2}, particularmente para irinotecán en una dosis de aproximadamente 100 a 350 mg/m^{2} y para topotecán en aproximadamente 1 a 2 mg/m^{2} por curso de tratamiento.

\newpage

El derivado antitumoral de podofilotoxina se administra ventajosamente en una dosis de 30 a 300 mg por metro cuadrado (mg/m^{2}) de superficie corporal, por ejemplo 50 a 250 mg/m^{2}, particularmente para etoposido en una dosis de aproximadamente 35 a 100 mg/m^{2}, y para teniposido en un aproximadamente 50 a 250 mg/m^{2} por curso de tratamiento.

El alcaloide anti-tumoral de la vinca se administra ventajosamente en una dosis de 2 a 30 mg por metro cuadrado (mg/m^{2}) de superficie corporal, particularmente para vinblastina en una dosis de aproximadamente 3 a 12 mg/m^{2}, para vincristina en una dosis de aproximadamente 1 a 2 mg/m^{2} y para vinorrelbina en una dosis de aproximadamente 10 a 30 mg/m^{2} por curso de tratamiento.

El derivado antitumoral nucleosídico se administra ventajosamente en una dosis de 200 a 2500 mg por metro cuadrado (mg/m^{2}) de superficie corporal, por ejemplo 700 a 1500 mg/m^{2}, particularmente para 5-FU en una dosis de 200 a 500 mg/m^{2}, para gemcitabina en una dosis de aproximadamente 800 a 1200 mg/m^{2} y para capcitabina en aproximadamente 1000 a 2500 mg/m^{2} por curso de tratamiento.

Los agentes alquilantes tales como mostaza nitrogenada o nitrosourea se administran ventajosamente en una dosis de 100 a 500 mg por metro cuadrado (mg/m^{2}) se superficie corporal, por ejemplo 120 a 200 mg/m^{2}, particularmente para ciclofosfamida en una dosis de aproximadamente 100 a 500 mg/m^{2}, para clorambucil en una dosis de aproximadamente 0,1 a 0,2 mg/kg, para carmustina en una dosis de aproximadamente 150 a 200 mg/m^{2}, y para lomustina en una dosis de aproximadamente 100 a 150 mg/m^{2} por curso de tratamiento.

El derivado antitumoral de antraciclina se administra ventajosamente en una dosis de 10 a 75 mg por metro cuadrado (mg/m^{2}) de superficie corporal, por ejemplo 15 a 60 mg/m^{2}; particularmente para doxorrubicina en una dosis de aproximadamente 40 a 75 mg/m^{2}, para daunorrubicina en una dosis de aproximadamente 25 a 45 mg/m^{2}, y para idarrubicina en una dosis de aproximadamente 10 a 15 mg/m^{2} por curso de tratamiento.

El agente antiestrogénico se administra ventajosamente en una dosis de aproximadamente 1 a 100 mg diariamente, dependiendo del agente particular y la afección de que se trate. El tamoxifeno se administra ventajosamente por vía oral en una dosis de 5 a 50 mg, preferiblemente 10 a 20 mg dos veces al día, continuando la terapia durante tiempo suficiente para alcanzar y mantener un efecto terapéutico. El toremifeno se administra ventajosamente por vía oral en una dosis de aproximadamente 60 mg una vez al día, continuando la terapia durante un tiempo suficiente para alcanzar y mantener un efecto terapéutico. El anastrozol se administra ventajosamente por vía oral en una dosis de aproximadamente 1 mg una vez al día. El droloxifeno se administra ventajosamente por vía oral en una dosis de aproximadamente 20-100 mg una vez al día. El raloxifeno se administra ventajosamente por vía oral en una dosis de aproximadamente 60 mg una vez al día. El exemestano se administra ventajosamente por vía oral en una dosis de aproximadamente 25 mg una vez al día.

Los anticuerpos se administran ventajosamente en una dosis de aproximadamente 1 a 5 mg por metro cuadrado (mg/m^{2}) de superficie corporal, o como se conoce en la técnica, en caso de ser diferente. El trastuzumab se administra ventajosamente en una dosis de 1 a 5 mg por metro cuadrado (mg/m^{2}) de superficie corporal, particularmente 2 a 4 mg/m^{2} por curso de tratamiento.

Estas dosificaciones pueden administrarse por ejemplo una sola vez, dos veces o más por curso de tratamiento, que puede repetirse por ejemplo cada 7, 14, 21 ó 28 días.

Los compuestos de fórmula (I), las sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables y las formas estereoisómeras de los mismos pueden tener propiedades diagnósticas valiosas en el sentido de que pueden utilizarse para detectar o identificar una interacción p53-MDM2 en una muestra biológica que comprende detectar o medir la formación de un complejo entre un compuesto marcado y/o p53 y/o MDM2 y/u otras moléculas, péptidos, proteínas, enzimas o receptores.

Los métodos de detección o identificación pueden utilizar compuestos que están marcados con agentes de marcación tales como radioisótopos, enzimas, sustancias fluorescentes, sustancias luminosas, etc. Ejemplos de los radioisótopos incluyen ^{125}I, ^{131}I, ^{3}H y ^{14}C. Las enzimas se hacen detectables usualmente por conjugación de un sustrato apropiado que cataliza a su vez una reacción detectable. Ejemplos de las mismas incluyen, por ejemplo, beta-galactosidasa, beta-glucosidasa, fosfatasa alcalina, peroxidasa y malato-deshidrogenasa, preferiblemente peroxidasa de rábano picante. Las sustancias luminosas incluyen, por ejemplo, luminol, derivados de luminol, luciferina, equorina y luciferasa.

Las muestras biológicas pueden definirse como tejido corporal o fluidos corporales. Ejemplos de fluidos corporales son fluido cerebroespinal, sangre, plasma, suero, orina, esputo, saliva y análogos.

Los ejemplos siguientes ilustran la presente invención.

Parte experimental

En lo sucesivo, "DMF" se define como N,N-dimetilformamida, "DCM" se define como diclorometano, "EtOAc" se define como acetato de etilo, "EtOH" se define como etanol, "MeOH" se define como metanol y "THF" se define como tetrahidrofurano.

\vskip1.000000\baselineskip

Puntos de fusión

Para algunos compuestos, se obtuvieron los puntos de fusión con un banco caliente Kofler, constituido por una placa calentada con un gradiente lineal de temperatura, un índice deslizante y una escala de temperatura en grados Celsius.

\vskip1.000000\baselineskip

LCMS

Método A

El gradiente de HPLC fue suministrado por un sistema Alliance HT 2795 (Waters) que comprendía una bomba cuaternaria con desgasificador, un tomamuestras automático y un detector de red de diodos (DAD). El flujo procedente de la columna se dividió a un detector MS. El detector MS estaba configurado con una fuente de ionización por pulverización electrónica. El voltaje de la aguja capilar era 3 kV y la temperatura de la fuente se mantuvo a 100ºC en el LCT (espectrómetro de masas de tiempo de vuelo con diseño Z-Spray de Waters). Se utilizó como gas nebulizador nitrógeno. La adquisición de los datos se realizó con un sistema de datos Waters-Micromass MassLynx-Openlynx.

La HPLC en fase inversa se llevó a cabo en una columna Xterra-RP C18 (5 \mum, 3,9 x 150 mm) con un caudal de 1,0 ml/min a una temperatura de 30ºC. Se emplearon dos fases móviles (fase móvil A: 100% acetato de amonio 7 mM; fase móvil B: 100% acetonitrilo, para ejecutar una condición de gradiente desde 85%A, 15% B (mantenimiento durante 3 minutos) hasta 20% A, 80% B en 5 minutos, mantenimiento a 20% A y 80% B durante 6 minutos y reequilibración con las condiciones iniciales durante 3 minutos. Se utilizó un volumen de inyección de 20 \mul. El voltaje del cono era 20V para modo de ionización positivo. Los espectros de masas se adquirieron por escaneo desde 100 a 900 en 0,8 segundos utilizando un retardo interescaneo de 0,08 segundos.

\vskip1.000000\baselineskip

Método B

El gradiente LC fue suministrado por un sistema Acquity UPLC (Waters) que comprendía una bomba binaria, un organizador de muestras, un calentador de columna (ajustado a 55ºC) y un detector de red de diodos (DAD). El flujo de la columna se dividió a un detector MS. El detector MS estaba configurado con una fuente de ionización por pulverización electrónica. Los espectros de masas se adquirieron por escaneo desde 100 a 1000 en 0,18 segundos utilizando un tiempo de residencia de 0,02 segundos. El voltaje de la aguja capilar era 3,5 kV y la temperatura de la fuente se mantuvo a 140ºC. Se utilizó nitrógeno como gas nebulizador. La adquisición de los datos se realizó con un sistema de datos Waters-Micromass MassLynx-Openlynx.

La UPLC de fase inversa se realizó en una columna puenteada etilsiloxano/sílice (BEH) C18 (1,7 \muM, 2,1 x 50 mm) con un caudal de 0,8 ml/min. Se utilizaron dos fases móviles (fase móvil A: 0,1% ácido fórmico en H_{2}O/metanol 95/5; fase móvil B: metanol) para ejecutar una condición de gradiente desde 95% A a 5% A, 95% B en 1,3 minutos y mantenimiento durante 0,2 minutos. Se utilizó un volumen de inyección de 0,5 \mul.

El voltaje del cono era 10V para modo de ionización positivo y 20V para modo de ionización negativo.

\vskip1.000000\baselineskip

A. Preparación de los compuestos intermedios Ejemplo A1 a) Preparación del compuesto intermedio 1

17

A una solución de 5-nitroindolina (10,0 g, 0,061 moles) e hidrocloruro de 4-cloropiridina (11,0 g, 0,073 moles) en DMF (70 ml), bajo argón, a 0ºC, se añadió poco a poco terc-butóxido de potasio (17,0 g, 0,15 moles). La mezcla se calentó hasta 100ºC durante 16 horas. La mezcla se vertió en hielo y se extrajo dos veces con EtOAc. Se separó la capa orgánica, se secó (MgSO_{4}), se filtró y se evaporó el disolvente. El residuo se purificó dos veces por cromatografía en columna sobre gel de sílice (40-63 \mum) (eluyente: ciclohexano/EtOAc/MeOH 50/50/0 hasta 0/80/20). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, obteniéndose 2,49 g (17%) de compuesto intermedio 1 como sólido pardo anaranjado.

^{1}H NMR (300 MHz, DMSO-d_{6}) \delta 8,47 (dd, 2H, J=6,4, J=1,6), 8,06 (m, 2H), 7,41 (d, 1H, J=9,6), 7,28 (dd, 2H, J=6,4, J=1,6), 4,16 (t, 2H, J=8,6), 3,22 (t, 2H, J=8,6), MS (ES+) m/z 242 (M+1).

\vskip1.000000\baselineskip

b) Preparación del compuesto intermedio 2

18

Una mezcla de compuesto intermedio 1 (2,4 g, 0,010 moles) y níquel Raney (5 ml, suspensión espesa al 50% en agua) en EtOH (45 ml) y THF (45 ml) se agitó a la temperatura ambiente bajo 30 psi (2,11 kg/cm^{2}) de hidrógeno durante 3 horas. Después de filtración a través de un taco de Celita, se evaporó el disolvente para dar 2,01 g (96%) de compuesto intermedio 2 como un sólido pardo.

^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,32 (dd, 2H, J=6,4, J=1,5), 7,15 (d, 1H, J=8,5), 6,92 (dd, 2H, J=6,4, J=1,5), 6,63 (d, 1H, J=2,2), 6,50 (dd, 1H, J=8,3, J=2,4), 3,92 (t, 2H, J=8,3), 3,44 (brs, 2H), 3,08 (t, 2H, J=8,3).

\vskip1.000000\baselineskip

c) Preparación del compuesto intermedio 3

19

A una solución de compuesto intermedio 2 (1,9 g, 0,0089 moles) en DCM (20 ml) y THF (20 ml), bajo argón, se añadieron sucesivamente ácido indol-3-acético (2,0 g, 0,012 moles), hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (1,6 g, 0,012 moles) e hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3 etilcarbodiimida (2,2 g, 0,012 moles). La mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 40 horas. Para completar la reacción, se añadieron ácido indol-3-acético (1,6 g, 0,0089 moles) e hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (1,7 g, 0,0089 moles) y la mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 16 horas más. Se evaporaron los disolventes y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (40-63 \mum) (eluyente: DCM/MeOH/NH_{4}OH 95/5/0,1 a 80/20/0,1). Se evaporaron las fracciones recogidas, y el sólido resultante se lavó con MeOH y se secó, obteniéndose 1,95 g (60%) del compuesto intermedio 3.

^{1}H NMR (300 MHz, DMSO-d_{6}) \delta 10,93 (brs, 1H), 10,08 (brs, 1H), 8,31 (d, 2H, J=6,3), 7,88 (d, 1H, J=8,1), 7,58 (m, 2H), 7,34 (m, 2H), 7,26 (d, 1H, J=2,1), 7,17 (d, 2H, J=6,6), 7,07 (t, 1H, J=6,9), 6,98 (t, 1H, J=7,4), 3,99 (t, 2H, J=8,3), 3,71 (s, 2H), 3,12 (t, 2H, J=8,2), MS (ES+) m/z 369 (M+1).

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo A2 a) Preparación del compuesto intermedio 4

20

A una solución de 5-nitroindolina (5,0 g, 0,030 moles) y 4-cloroquinolina (6,0 g, 0,037 moles) en DMF (30 ml), bajo argón, se añadió poco a poco terc-butóxido de potasio (8,4 g, 0,075 moles). La mezcla se agitó a 100ºC durante 16 horas y luego a la temperatura ambiente durante 70 horas. La mezcla se vertió en hielo y se extrajo tres veces con EtOAc. Se separó la capa orgánica, se lavó con salmuera, se secó MgSO_{4}, se filtró y se evaporó el disolvente. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (40-63 \mum) (eluyente: EtOAc/ciclohexano 50/50 a 100/0). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, obteniéndose 2,26 g (26%) de compuesto intermedio 4 como un sólido anaranjado.

^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,93 (d, 1H, J=4,9), 8,11 (m, 2H), 7,92 (dd, 1H, J=8,9, J=2,5), 7,85 (d, 1H, J=7,7), 7,82 (dt, 1H, J=7,0, J=1,4), 7,60 (dt, 1H, J=6,8, J=1,2), 7,54 (d, 1H, J=4,9), 6,26 (d, 1H, J=8,9), 4,30 (t, 2H, J=8,4), 3,35 (t, 2H, J=8,2).

MS (ES+) m/z 292 (M+1).

\vskip1.000000\baselineskip

b) Preparación de compuesto intermedio 5

21

Una mezcla de compuesto intermedio 4 (2,0 g, 0,0069 moles) y níquel Raney (3 ml, suspensión espesa al 50% en agua) en EtOH (30 ml) y THF (30 ml) se agitó a la temperatura ambiente bajo 30 psi (2,11 kg/cm^{2}) de hidrógeno durante 4,5 horas. Después de filtración a través de un taco de Celita, se evaporó el disolvente, obteniéndose 1,81 g (100%) de compuesto intermedio 5 como un sólido anaranjado.

^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,71 (d, 1H, J=5,1), 8,07 (d, 1H, J=8,5), 8,01 (d, 1H, J=8,5), 7,67 (t, 1H, J=7,0), 7,41 (t, 1H, J=7,1), 7,09 (d, 1H, J=5,1), 6,67 (s, 1H), 6,49 (d, 1H, J=8,3), 6,38 (dd, 1H, J=8,3, J=1,9), 4,04 (t, 2H, J=7,9), 3,39 (brs, 2H), 3,12 (t, 2H, J=7,8).

MS (ES+) m/z 262 (M+1).

\vskip1.000000\baselineskip

c) Preparación del compuesto intermedio 6

22

A una solución de compuesto intermedio 5 (1,7 g, 0,0064 moles) en DCM (15 ml) y THF (15 ml), bajo argón, se añadieron sucesivamente ácido indol-3-acético (1,5 g, 0,0084 moles), hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (1,1 g, 0,0084 moles) e hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (1,6 g, 0,0084 moles). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 16 horas. Se evaporaron los disolventes y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (40-63 \mum) (eluyente: DCM/MeOH/NH_{4}OH 90/10/0,1). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, obteniéndose 1,15 g (43%) de compuesto intermedio 6 como una espuma parda.

^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,74 (d, 1H, J=5,1), 8,61 (brs, 1H), 8,09 (d, 1H, J=8,1), 7,91 (d, 1H, J=8,4), 7,70-7,62 (m, 2H), 7,41 (m, 4H), 7,22 (m, 3H), 7,09 (d, 1H, J=5,1), 6,74 (dd, 1H, J=8,4, J=1,8), 6,38 (d, 1H, J=8,4), 4,04 (t, 2H, J=8,0), 3,89 (s, 2H), 3,15 (t, 2H, J=7,9).

MS (ES+) m/z 419 (M+1).

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo A3 a) Preparación del compuesto intermedio 7

23

Una mezcla de ácido indol-3-acético (2,0 g, 0,013 moles) y 1,1-carbonildiimidazol (2,1 g, 0,013 moles, añadido poco a poco) en DCM (28 ml) se agitó bajo argón a la temperatura ambiente durante 2 horas. Se añadió hidrocloruro de N,O-dimetilhidroxilamina (1,3 g, 0,013 moles), se agitó la mezcla a la temperatura ambiente durante 16 horas, y se vertió luego en hielo y agua. Se ajustó el pH a 10 con una solución 4N de hidróxido de sodio, y la capa acuosa se extrajo dos veces con EtOAc. Se separó la capa orgánica, se lavó con una solución de ácido clorhídrico 3N, se secó (MgSO_{4}), se filtró, y se evaporó el disolvente, obteniéndose 2,37 g (89%) de compuesto intermedio 7 como un sólido de color rosado.

^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8.09 (brs, 1H), 7,66 (d, 1H, J=7,5), 7,36 (d, 1H, J=7,5), 7,22-7,10 (m, 3H), 3,92 (s, 2H), 3,66 (s, 3H), 3,23 (s, 3H).

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo A4 a) Preparación del compuesto intermedio 8

24

Una mezcla de 5-nitroindolina (8,0 g, 0,024 moles) y éster metílico del ácido 4-cloro-2-piridinacarboxílico (5,0 g, 0,029 moles) en ácido acético (24 ml), se calentó a 120ºC durante 25 minutos en un aparato de microondas Biotage Initiator. La reacción se extinguió con hielo, y se ajustó el pH a pH 9 por adición de una solución saturada de carbonato de potasio. La mezcla se extrajo tres veces con DCM. Se separó la capa orgánica, se secó (MgSO_{4}), se filtró y se evaporó el disolvente. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (40-63 \mum) (eluyente: DCM/MeOH 100/0 a 90/10). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, obteniéndose 1,37 g (19%) de compuesto intermedio 8 como un sólido amarillo.

^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,65 (d, 1H, J=5,6), 8,16 (dd, 1H, J=8,9, J=2,1), 8,11 (s, 1H), 7,98 (d, 1H, J=2,5), 7,35 (d, 1H, J=8,9), 7,30 (dd, 1H, J=5,7, J=2,5), 4,23 (t, 2H, J=8,5), 4,05 (s, 3H), 3,32 (t, 2H, J=8,4),

MS (ES+) m/z 300 (M+1).

\vskip1.000000\baselineskip

b) Preparación del compuesto intermedio 9

25

Una mezcla de compuesto intermedio 8 (1,2 g, 0,0045 moles) y níquel Raney (4 ml, suspensión espesa al 50% en agua) en MeOH (20 ml) y THF (20 ml) se agitó a la temperatura ambiente bajo 1 atmósfera de hidrógeno durante 20 horas. Después de filtración a través de un taco de Celita, se evaporó el disolvente, obteniéndose 1,06 g (88%) de compuesto intermedio 9 como un sólido anaranjado.

^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,40 (d, 1H, J=5,8), 7,77 (d, 1H, J=2,5), 7,18 (d, 1H, J=8,4), 7,05 (dd, 1H, J=5,8, J=2,6), 6,62 (d, 1H, J=2,2), 6,52 (dd, 1H, J=8,4, J=2,4), 4,00 (m, 5H), 3,09 (t, 2H, J=8,3).

MS (ES+) m/z 270 (M+1).

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo A5 a) Preparación del compuesto intermedio 10

26

Una mezcla de 5-aminoindol (1,1 g, 0,0086 moles) y anhídrido ftálico (2,6 g, 0,017 moles) en DMF (20 ml) se agitó a 100ºC durante 5 horas, y luego a la temperatura ambiente durante 64 horas. La mezcla de reacción se diluyó en EtOAc, se lavó dos veces con una solución saturada de cloruro de amonio, se secó (MgSO_{4}), se filtró, y se evaporó el disolvente. El aceite resultante se recogió en ácido acético (15 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 20 minutos, después de lo cual se calentó a 80ºC durante 1,5 horas. Se añadió hielo y el pH se ajustó a pH 4 con una solución saturada de carbonato de sodio. La mezcla se extrajo dos veces con EtOAc. Se separó la capa orgánica, se secó (MgSO_{4}), se filtró, y se evaporó el disolvente. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (40-63 \mum) (eluyente: EtOAc/ciclohexano 40/60). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, obteniéndose 2,06 g (91%) de compuesto intermedio 10.

^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,32 (brs, 1H), 7,97 (m, 2H), 7,79 (m, 2H), 7,66 (d, 1H, J=2,0), 7,49 (d, 1H, J=8,6), 7,27 (dd, 1H, J=5,7, J=2,8), 7,17 (dd, 1H, J=8,6, J=2,0), 6,61 (t, 1H, J=1,1).

MS (ES+) m/z 263 (M+1).

\vskip1.000000\baselineskip

b) Preparación del compuesto intermedio 11

27

Una mezcla de compuesto intermedio 10 (2,1 g, 0,0079 moles) y cianoborohidruro de sodio (987 mg, 0,016 moles) en ácido acético (30 ml) se agitó a la temperatura ambiente durante 18 horas. Se añadió hielo y el pH se ajustó a 6 con una solución saturada de carbonato de sodio. La mezcla se extrajo dos veces con EtOAc. Se separó la capa orgánica, se lavó con salmuera, se secó (MgSO_{4}), se filtró, y se evaporó el disolvente. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (40-63 \mum) (eluyente: EtOAc/ciclohexano 30/70 a 70/30). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, obteniéndose 726 mg (35%) de compuesto intermedio 11 como un sólido amarillo.

^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,93 (m, 2H), 7,77 (m, 2H), 7,09 (s, 1H), 7,00 (d, 1H, J=8,2), 6,70 (d, 1H, J=8,2), 3,62 (t, 2H, J=8,4), 3,09 (t, 2H, J=8,4).

MS (ES+) m/z 265 (M+1).

\vskip1.000000\baselineskip

c) Preparación del compuesto intermedio 12

28

Una mezcla de compuesto intermedio 11 (570 mg, 0,0022 moles), 4-bromo-6,7-dihidro-5H-[1]piridin-7-ol (554 mg, 0,0026 moles) y una solución de ácido clorhídrico 5N en 2-propanol (0,57 ml, 0,0029 moles) en DMF (11 ml) se calentó a 120ºC durante 1 hora en un aparato de microondas Biotage Initiator. La reacción se extinguió con una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio y se extrajo 3 veces con DCM. Se evaporaron los disolventes. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (40-63 \mum) (eluyente: EtOAc/MeOH 100/0 a 80/20 y luego DCM/MeOH 95/5 a 90/10). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, obteniéndose 651 mg (76%) de compuesto intermedio 12 como un sólido amarillo.

^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,30 (d, 1H, J=5,6), 7,95 (m, 2H), 7,79 (m, 2H), 7,23-7,12 (m, 3H), 6,94 (d, 1H, J=8,4), 5,24 (t, 1H, J=7,0), 4,18 (m, 1H), 4,08 (m, 1H); 3,25 (m, 2H), 3,00 (m, 1H), 2,85 (m, 1H), 2,57 (m, 1H), 2,06 (m, 1H).

MS (ES+) m/z 398 (M+1).

\vskip1.000000\baselineskip

d) Preparación del compuesto intermedio 13

29

A la temperatura ambiente, se añadió hidrato de hidracina (137 \mul, 0,0028 moles) a una suspensión de compuesto intermedio 12 (557 mg, 0,0014 moles) en MeOH (5,5 ml) y la mezcla resultante se calentó a 7,0ºC durante 40 minutos. Se extinguió la reacción con agua y se extrajo 4 veces con EtOAc. Se separó la capa orgánica, se secó (MgSO_{4}), se filtró, y se evaporó el disolvente, obteniéndose 392 mg (100%) de compuesto intermedio 13 como un sólido pardo anaranjado.

^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,18 (d, 1H, J=5,8), 7,07 (d, 1H, J=5,8), 6,49 (d, 1H, J=8,3), 6,63 (d, 1H, J=2,1), 6,48 (dd, 1H, J=8,3, J=2,4), 5,21 (m, 1H), 4,19 (brs, 2H), 4,03 (m, 3H), 3,05 (m, 3H), 2,84 (m, 1H), 2,50 (m, 1H), 2,03 (m, 1H).

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo A6 a) Preparación del compuesto intermedio 14

\vskip1.000000\baselineskip

30

Una mezcla de 2,3-dihidro-3,3-dimetil-5-nitro-1H-indol (0,003 moles) y 4-bromopiridina (0,003 moles) en 1-butanol (5 ml) se calentó en un tubo herméticamente cerrado en un horno microondas a 140ºC durante 30 minutos, se recogió luego en una solución de carbonato de potasio al 10% y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con agua, a continuación con NaCl y salmuera, se secó (MgSO_{4}), se filtró, y se evaporó el disolvente. El residuo (0,8 g) se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (20-45 \mum) (eluyente: DCM/MeOH 100/0 a 98/2). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente. El residuo (0,45 g, 64%) se cristalizó en acetonitrilo. El precipitado se separó por filtración y se secó, obteniéndose 0,216 g (31%) del compuesto intermedio 14, punto de fusión 217ºC (Kofler).

^{1}H NMR (DMSO-d_{6}) \delta 1,4 (6H, s), 3,92 (2H, s), 7,3 (2H, m), 7,45 (1H, m), 8,10 (2H,m), 8,47 (2H,m).

LCMS (ES+) m/z 270 (M+1), R_{t} = 0,77, método B

\vskip1.000000\baselineskip

b) Preparación del compuesto intermedio 15

\vskip1.000000\baselineskip

31

Una mezcla de compuesto intermedio 14 (0,003 moles) y níquel Raney (0,9 g) en MeOH (20 ml) se hidrogenó a la temperatura ambiente durante 1 hora a una presión de 3 bares, y se filtró luego sobre Celita. La Celita se lavó con MeOH. El filtrado se evaporó, obteniéndose 0,8 g (100%) de compuesto intermedio 15.

\vskip1.000000\baselineskip

c) Preparación del compuesto intermedio 16

32

Se añadió poco a poco hexafluorofosfato de bromotris(pirrolidino)fosfonio (0,004 moles) a la temperatura ambiente a una solución de compuesto intermedio 15 (0,003 moles), ácido 1H-indol-3-acético (0,004 moles), 1-hidroxibenzotriazol (0,04 moles) y diisopropil-éter (0,005 moles) en DCM (15 ml). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante una noche. Se lavó la capa orgánica con una solución de carbonato de potasio al 10%, se secó (MgSO_{4}), se filtró y se evaporó el disolvente. El residuo (3,2 g) se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (10-40 \mum) (eluyente: DCM/MeOH/NH_{4}OH 25/5/0,2). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente. El residuo (0,7 g, 52%) se cristalizó en acetonitrilo. El precipitado se separó por filtración y se secó, obteniéndose 0,55 g (41%) de compuesto intermedio 16, punto de fusión 158ºC (Kofler).

^{1}H NMR (DMSO-d6) \delta 1,28 (6H, s), 3,7 (2H, s), 3,73 (2H, s), 6,99 (1H, t, J=7,7Hz), 7,07-7,11 (3H,m), 2,25 (1H, d, J=3,6Hz), 7,30-7,39 (3H, m), 7,55 (1H, br, d, J=3,6Hz), 7,62 (1H, d, J=7,7 Hz), 8,3 (2H, d, J=7,7Hz), 10,03 (1H, br, s), 10,92 (1H, br, s) LCMS (ES+) m/z 397 (M+1), R_{t} = 8,43, método A.

\vskip1.000000\baselineskip

B. Preparación de los compuestos finales Ejemplo B1 Preparación del Compuesto 1

33

Se añadió poco a poco hidruro de litio y aluminio (423 mg, 0,0011 moles) a una suspensión de compuesto intermedio 3 (1,0 g, 0,0027 moles) en THF (60 ml) bajo argón. La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 24 horas, se extinguió con hielo y una solución diluida de sal de Rochelle, y se extrajo 3 veces con DCM. Se separó la capa orgánica, se secó (MgSO_{4}), se filtró, y se evaporó el disolvente. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (40-63 \mum) (eluyente: DCM/MeOH/NH_{4}OH 95/5/0,1). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, obteniéndose 170 mg (18%) de compuesto 1 como una espuma amarilla.

^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,36 (brs, 1H), 8,32 (d, 2H, J=6,6), 7,63 (d, 1H, J=7,8), 7,39 (d, 1H, J=7,5), 7,24-7,11 (m, 3H), 7,07 (d, 1H, J=1,8), 6,93 (d, 2H, J=6,6), 6,58 (s, 1H), 6,45 (dd, 1H, J=8,4, J=2,1), 3,93 (t, 2H, J=8,2), 3,62 (brs, 1H), 3,46 (t, 2H, J=7,5), 3,09 (m, 4H). LCMS (ES+) m/z 355 (M+1), R_{t} = 8,30, método A.

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo B2 Preparación del compuesto 2

34

Se añadió poco a poco bajo argón, a la temperatura ambiente, hidruro de litio y aluminio (391 mg, 0,010 moles) a una solución de compuesto intermedio 6 (1,1 g, 0,0026 moles) en THF (55 ml). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 18 horas. La reacción se extinguió a 0ºC con MeOH. Se añadieron hielo y solución diluida de sal de Rochelle, y la mezcla se extrajo 3 veces con DCM. Se separó la capa orgánica, se lavó con salmuera, se secó (MgSO_{4}), se filtró, y se evaporó el disolvente. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (40-63 \mum) (eluyente: DCM/MeOH/NH_{4}OH 97/3/0,5). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, obteniéndose 121 mg (12%) de compuesto 2 como una espuma anaranjada.

^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,70 (d, 1H, J=5,1), 8,18 (brs, 1H), 8,07 (d, 1H, J=8,7), 8,03 (d, 1H, J=8,7), 7,66 (m, 2H), 7,41 (m, 2H), 7,22 (t, 1H, J=7,7), 7,12 (m, 3H), 6,63 (s, 1H), 6,56 (d, 1H, J=8,4), 6,34 (dd, 1H, J=8,4, J=2,1), 4,06 (t, 2H, J=7,8), 3,46 (t, 2H, J=6,8), 3,12 (m, 4H).

MS (ES+) m/z 405 (M+1).

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo B3 Preparación del compuesto 3

35

A 0ºC bajo argón, se añadió hidruro de litio y aluminio (14 mg, 0,00036 moles) a una solución de compuesto intermedio 7 (74 mg, 0,00036 moles) en THF (1 ml). La mezcla se agitó a 0ºC durante 1 hora, se extinguió con una solución al 5% de hidrogenosulfato de potasio, y se extrajo dos veces con EtOAc. Se separó la capa orgánica, se lavó con salmuera, se secó (MgSO_{4}), se filtró, y se evaporó el disolvente, para dar el indol-3-il-acetaldehído como un aceite anaranjado.

Una mezcla de compuesto intermedio 9 (200 mg, 0,00074 moles) y cianoborohidruro de sodio (64 mg, 0,0010 moles) en MeOH (2,3 ml) y ácido acético (2 gotas) se añadió gota a gota a una solución del aldehído anterior (236 mg, 0,0015 moles) en MeOH (2 ml). La mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 16 horas. La reacción se extinguió con agua, se alcalinizó con una solución saturada de hidrofluorocarbonato de sodio y se extrajo tres veces con EtOAc. Se separó la capa orgánica, se lavó con salmuera, se secó (MgSO_{4}), se filtró, y se evaporó el disolvente. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (40-63 \mum) (eluyente: EtOAc/MeOH 100/0 a 90/10). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, obteniéndose 190 mg (44%) de compuesto 3 como una espuma anaranjada.

^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,42 (d, 1H, J=5,7), 8,08 (brs, 1H), 7,79 (d, 1H, J=2,4), 7,63 (d, 1H, J=7,8), 7,40 (d, 1H, J=8,1), 7,25-7,07 (m, 5H), 6,59 (s, 1H), 6,48 (dd, 1H, J=8,7, J=2,1), 4,00 (m, 5H), 3,48 (t, 2H, J=6,8), 3,12 (m, 4H).

MS (ES+) m/z 413 (M+1).

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo B4 Preparación del compuesto 4

36

Se añadió lentamente borohidruro de sodio (92 mg, 0,0024 moles) a una solución de compuesto 3 (100 mg, 0,00024 moles) en MeOH (3 ml). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 1 hora y luego a 80ºC durante 4 horas, y de nuevo a la temperatura ambiente durante 85 horas. La reacción se extinguió con agua y la mezcla se extrajo con EtOAc. Se separó la capa orgánica, se lavó con salmuera, se secó (MgSO_{4}), se filtró, y se evaporó el disolvente. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (40-63 \mum) (eluyente: DCM/MeOH 90/10 a 85/15). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, obteniéndose 50 mg (54%) del compuesto 4 como una espuma amarilla.

^{1}H NMR (300 MHz, DMSO-d_{6}) \delta 10,83 (brs, 1H), 8,14 (d, 1H, J=5,7), 7,54 (d, 1H, J=7,8), 7,35 (d, 1H, J=7,8), 7,22 (m, 2H), 7,14 (d, 1H, J=2,1), 7,70 (dt, 1H, J=7,6, J=1,2), 6,98 (dt, 1H, J=7,5, J=0,9), 6,86 (dd, 1H, J=6,0, J=2,4), 6,62 (d, 1H, J=2,1), 6,45 (dd, 1H, J=8,7, J=2,2), 5,39 (brs, 2H), 4,49 (d, 2H, J=4,0), 3,92 (t, 2H, J=8,2), 3,30 (m, 2H), 3,06 (t, 2H, J=8,1), 2,96 (t, 2H, J=7,5).

MS (ES+) m/z 385 (M+1).

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo B5 Preparación del compuesto 5

37

A una mezcla de compuesto intermedio 13 (100 mg, 0,00037 moles) y cianoborohidruro de sodio (33 mg, 0,00052 moles) en MeOH (1,5 ml) y ácido acético (2 gotas), se añadió gota a gota una solución del aldehído anterior (57 mg, 0,00036 moles) en MeOH (0,5 ml). La mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 18 horas. La reacción se extinguió con una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio y se extrajo dos veces con EtOAc. Se separó la capa orgánica, se lavó con salmuera, se secó (MgSO_{4}), se filtró, y se evaporó el disolvente. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (40-63 \mum) (eluyente: DCM/MeOH 100/0 a 90/10). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, obteniéndose 79 mg (52%) de compuesto 5 como una espuma amarilla.

^{1}H NMR (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,37 (brs, 1H), 8,15 (d, 1H, J=5,8), 7,63 (d, 1H, J=7,8), 7,37 (d, 1H, J=7,1), 7,21 (dt, 1H, J=7,6, J=1,2), 7,12 (dt, 1H, J=7,6, J=1,1), 7,07 (m, 2H), 6,83 (d, 1H, J=8,5), 6,56 (d, 1H, J=2,0), 6,40 (dd, 1H, J=8,5, J=2,3), 5,22 (t, 1H, J=6,7), 4,19 (brs, 1H), 4,04 (m, 3H), 3,44 (t, 2H, J=6,7), 3,06 (m, 5H), 2,83 (m, 1H), 2,54 (m, 1H), 2,08 (m, 1H).

MS (ES+) m/z 411 (M+1).

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo B6 Preparación del compuesto 6

38

El compuesto intermedio 16 (0,001 mol) se añadió poco a poco a una solución de tetrahidruro de litio y aluminio (0,002 moles) en THF (10 ml) en corriente de N_{2}. La mezcla se agitó y se calentó a reflujo durante 24 horas, se vertió en agua con hielo y se filtró sobre Celita. La Celita se lavó con EtOAc. El filtrado se extrajo con EtOAc. Se separó la capa orgánica, se secó (MgSO_{4}), se filtró y se evaporó el disolvente. El residuo (0,45 g) se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (10 \mum) (eluyente: DCM/MeOH/NH_{4}OH 95/5/0,5). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, obteniéndose 0,042 g de compuesto 6.

^{1}H NMR (DMSO-d6) \delta 1,28 (6H, s), 2,95 (2H, t, J=7,7Hz), 3,27-3,34 (2H, m), 3,65 (2H, s), 5,3 8(1H, br, t, J=6,4Hz), 6,45 (1H, dd, J=4Hz,7,7Hz), 6,57 (1H, d, J=4Hz), 6,96-7,02 (3H, m), 7,07 (1H, t, J=7,7Hz), 7,15-7,5 (3H, m),7,35 (1H, d, J=7,7Hz), 7,55 (1H, d, J=7,7Hz), 8,22 (1H, d, J=7,7Hz), 10,83(1H,br,s).

MS (ES+) m/z 383 (M+1), R_{t} = 9,17, método A.

La Tabla F-1 enumera los compuestos que se prepararon en uno de los ejemplos anteriores.

TABLA F-1

39

C. Ejemplo farmacológico

La capacidad de los compuestos para preservar p-53 en células A2780 se midió con el ensayo de inmunosorbente unido a enzima de p53. El ensayo de p53 es un inmunoensayo enzimático "sándwich" que emplea dos anticuerpos policlonales. Un anticuerpo policlonal, específico para la proteína p53, se ha inmovilizado en la superficie de los pocillos de plástico. Cualquier p53 presente en la muestra a ensayar se fijará al anticuerpo de captura. El anticuerpo policlonal biotinilado detector reconoce también la proteína p53, y se fijará a cualquier p53, que haya sido retenida por el anticuerpo de captura. El anticuerpo detector, a su vez, se liga a estreptavidina conjugada con peroxidasa de rábano picante. La peroxidasa de rábano picante cataliza la conversión del sustrato cromógeno o-fenileno-diamina, cuya intensidad es proporcional a la cantidad de proteína p53 ligada a la placa. El producto de la reacción coloreada se cuantifica utilizando un espectrofotómetro. La cuantificación se realiza por la construcción de una curva estándar utilizando concentraciones conocidas de proteína p53 purificada recombinante marcada con HIS (véase el Ejemplo C.1.).

La actividad celular de los compuestos de fórmula (I) se determinó en células tumorales U87MG utilizando un ensayo colorimétrico para toxicidad o supervivencia de las células (véase el Ejemplo C.2).

Las células U87MG son células de glioblastoma humano con p53 de tipo salvaje. En esta línea de células MDM2 controla estrictamente la expresión de p53.

\vskip1.000000\baselineskip

C.1. ELISA de p53

Se cultivaron células A2780 (ATCC) en RPMI 1640 complementado con 10% de suero de ternero fetal (FCS), L-glutamina 2 mM y gentamicina a 37ºC en una incubadora humidificada con 5% CO_{2}.

Las células A2780 se sembraron a razón de 20.000 células por pocillo en una placa de 96 pocillos, se cultivaron durante 24 horas y se trataron con compuesto durante 16 horas a 37ºC en una incubadora humidificada. Después de la incubación, las células se lavaron una sola vez con solución salina tamponada con fosfato y se añadieron 30 \mul, por pocillo, de tampón RIPA con baja concentración de sal (Tris 20 mM, pH 7,0, EDTA 0,5 mM, 1% Nonidet P40, 0,5% DOC, 0,05% SDS, PMSF 1 mM, 1 \mug/ml de aprotinina y 0,5 \mu/ml de leupeptina). Se pusieron las placas en hielo durante 30 minutos para completar la lisis. La proteína p53 se detectó en los lisados utilizando el ELISA sándwich, descrito más adelante.

Se recubrieron placas de 96 pocillos EIA/RIA de poliestireno de alta fijación (Costar 9018) con el anticuerpo de captura pAb1801 (Abcam ab28-100) a una concentración de 1 \mug/ml en tampón de revestimiento (NaHCO_{3} 0,1M de pH 8,2), 50 \mul por pocillo. Se dejó que el anticuerpo se adhiriera durante una noche a 4ºC. Las placas revestidas se lavaron una sola vez con solución salina tamponada con fosfato (PBS)/0,05% Tween 20 y se añadieron 300 \mul de tampón de bloqueo (PBS, 1% de seroalbúmina bovina (BSA)), durante un periodo de incubación de 2 horas a la temperatura ambiente. Se hicieron diluciones de la proteína p53 purificada recombinante marcada con HIS, comprendidas entre 3 y 200 ng/ml en tampón de bloqueo y se utilizaron como estándares.

Se lavaron dos veces las placas con PBS/0,05% Tween 20 y se añadieron tampón de bloqueo o estándares a 80 \mul/pocillo. Se añadieron a los estándares 20 \mul de tampón de lisis. Se añadieron las muestras a los otros pocillos a razón de 20 \mul lisado/pocillo. Después una incubación durante una noche a 4ºC, se lavaron dos veces las placas con PBS/0,05% Tween 20. Se añadieron a cada pocillo partes alícuotas de 100 \mul de anticuerpo policlonal secundario p53 (FL-393) (Tebubio, sc-6243) a una concentración de 1 \mug/ml en tampón de bloqueo, y se dejó que se adhirieran durante 2 horas a la temperatura ambiente. Se lavaron tres veces las placas con PBS/0,05% Tween 20. Se añadió el anticuerpo de detección HRP anticonejo (sc-2004 Tebubio) a 0,04 \mug/ml en PBS/1% BSA y se incubó durante 1 hora a la temperatura ambiente. Se lavaron tres veces las placas con PBS/0,05% Tween 20 y se añadieron 100 \mul de tampón sustrato (el tampón sustrato se preparó poco antes de su utilización por adición de 1 tableta de 10 mg de o-fenileno-diamina (OPD) de Sigma y 125 \mul de H_{2}O_{2} al 3% a 25 \mul de tampón OPD: ácido cítrico 35 mM, Na_{2}HPO_{4} 66 mM, pH 5,6). Después de 5 a 10 minutos, se paró la reacción coloreada por adición de 50 \mul de tampón de parada (H_{2}SO_{4} 1M) por pocillo. Se midió la absorbancia a longitudes de onda duales de 490/655 nm utilizando un lector de microplacas BioRad y se analizaron luego los resultados.

Para cada experimento, se ejecutaron en paralelo controles (que no contenían fármaco alguno) y una incubación en blanco (que no contenía células o fármacos). El valor en blanco se sustrajo de todos los valores de control y de muestra. Para cada muestra, el valor de p53 (en unidades de absorbancia) se expresó como porcentaje del valor para p53 presente en el control. La preservación de un porcentaje mayor que 140% se definió como significativa. En este caso, los efectos de los compuestos de test se expresan como la dosis mínima que proporciona al menos 140% del valor para p53 presente en el control (LAD) (véase tabla F-2).

\vskip1.000000\baselineskip

C.2. Ensayo de proliferación

Todos los compuestos testados se disolvieron en DMSO y se hicieron diluciones adicionales en medio de cultivo. Las concentraciones finales en DMSO no excedían de 0,1% (v/v) en los ensayos de proliferación celular. Los controles contenían células U87MG y DMSO sin compuesto, y los blancos contenían DMSO pero no contenían células.

Las células U87MG se sembraron en placas de cultivo de células de 96 pocillos a razón de 3000 células/pocillo/100 \mul. 24 horas más tarde, se cambió el medio y se añadieron compuesto y/o disolvente hasta un volumen final de 200 \mul. Después de 4 días de incubación, se reemplazó el medio por 200 \mul de medio fresco y se evaluó el crecimiento celular utilizando un ensayo basado en MTT. Para ello, se añadieron a cada pocillo 25 \mul de la solución de MTT (0,5% de MTT grado investigación, de Serva, en solución salina tamponada con fosfato), y las células se incubaron ulteriormente durante 2 horas a 37ºC. Se aspiró luego cuidadosamente el medio y el producto azul MTT-formazano se disolvió por adición a cada pocillo de 25 \mul de glicina 0,1M y 100 \mul de DMSO. Las placas se agitaron mediante sacudidas durante 10 minutos más en un agitador de sacudidas de microplacas antes de leer la absorbancia a 540 nm por un lector de microplacas BioRad.

Dentro de un experimento, los resultados para cada condición experimental son el valor medio de 3 pocillos replicados. Para propósitos de cribado iniciales, los compuestos se testaron a una sola concentración fijada de 10^{-5} M. Para los compuestos activos, se repitieron los experimentos para construir curvas completas concentración-respuesta. Para cada experimento, se ejecutaron en paralelo controles (que no contenían fármaco alguno) y una incubación en blanco (que no contenía células ni fármaco). El valor en blanco se sustrajo de todos los valores de control y de muestra. Para cada muestra, el valor medio para crecimiento celular (en unidades de absorbancia) se expresó como un porcentaje del valor medio para el crecimiento celular del control. En caso apropiado, se computaron los valores CI_{50} (concentración del fármaco, necesaria para reducir el crecimiento celular al 50% del control) utilizando análisis Probit para datos clasificados (Finney, D.J., Probit Analyses, 2nd Ed. Chapter 10, Graded Responses, Cambridge University Press, Cambridge 1962). En este caso, los efectos de los compuestos de test se expresan como pCI_{50} (el valor del logaritmo negativo del valor CI_{50}) (véase tabla F-2).

En algunos de los experimentos, el ensayo de proliferación se adaptó para y se utilizó en placas de cultivo de 384 pocillos (véase tabla F-2).

TABLA F-2 La Tabla F-2 enumera los resultados de los compuestos que se testaron de acuerdo con el Ejemplo C.1 y C.2.

41

\vskip1.000000\baselineskip

D. Ejemplo de composición: Tabletas recubiertas de película Preparación del núcleo de la tableta

Una mixtura de 100 g de un compuesto de fórmula (I), 570 g de lactosa y 200 g de almidón se mezcla bien y se humidifica después con una solución de 5 g de dodecilsulfato de sodio y 10 g de polivinil-pirrolidona en aproximadamente 200 ml de agua. La mezcla de polvo húmedo se tamiza, se seca y se tamiza nuevamente. Se añaden luego 100 g de celulosa microcristalina y 15 g de aceite vegetal hidrogenado. Se mezcla bien el todo y se comprime en tabletas, obteniéndose 10.000 tabletas, cada una de las cuales contiene 10 mg de un compuesto de fórmula (I).

\vskip1.000000\baselineskip

Revestimiento

A una solución de 10 g de metil-celulosa en 75 ml de etanol desnaturalizado se añade una solución de 5 g de etil-celulosa en 150 ml de diclorometano. Se añaden luego 75 ml de diclorometano y 2,5 ml de 1,2,3-propanotriol, se funden 10 g de polietilenglicol y se disuelven en 75 ml de diclorometano. Se añade la última solución a la primera y se añaden luego 2,5 g de octadecanoato de magnesio, 5 g de polivinil-pirrolidona y 30 de ml de suspensión concentrada de colorante, y se homogeneíza el todo. Los núcleos de la tabletas se revisten con la mezcla así obtenida en un aparato de revestimiento.

Claims

1. Un compuesto de fórmula (I),

43

m es 0, 1, ó 2, y cuando m es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo;

n es 0, 1, 2, ó 3 y cuando n es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo;

p es 0 ó 1, y cuando p es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo;

t es 0 ó 1, y cuanto t es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo;

44

R^{5} es hidrógeno, C_{1-6}alquiloxicarbonilo o C_{1-6}alquilo;

(b-1),-(CH_{2})_{2}-O-(CH_{2})_{2}-

(b-2),-(CH_{2})_{2}-NR^{9}-(CH_{2})_{2}-

en donde R^{9} es hidrógeno, C_{1-6}alquiloxiC_{1-6}alquilo o C_{1-6}alquilo;

Z es un radical seleccionado de

45

450

en donde

R^{10} y R^{11} se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, halo, hidroxi, amino, C_{1-6}alquilo, nitro, polihaloC_{1-6}alquilo, ciano, cianoC_{1-6}alquilo, tetrazoloC_{1-6}alquilo, arilo, heteroarilo, arilC_{1-6}alquilo, heteroarilC_{1-6}al-
quilo, aril(hidroxi)C_{1-6}alquilo, heteroaril(hidroxi)C_{1-6}alquilo, arilcarbonilo, heteroarilcarbonilo, C_{1-6}alquilcarbonilo, arilC_{1-6}alquilcarbonilo, hetero-arilC_{1-6}alquilcarbonilo, C_{1-6}alquiloxi, C_{3-7}cicloalquilcarbonilo, C_{3-7}cicloalquil(hidroxi)C_{1-6}alquilo, arilC_{1-6}alquiloxiC_{1-6}alquilo, C_{1-6}alquiloxiC_{1-6}alquiloxiC_{1-6}alquilo, C_{1-6}alquilcarboniloxiC_{1-6}alquilo, C_{1-6}alquiloxicarbonilC_{1-6}alquiloxiC_{1-6}alquilo, hidroxiC_{1-6}alquiloxiC_{1-6}alquilo, C_{1-6}alquiloxicarbonilC_{2-6}alquenil
C_{1-6}alquiloxiC_{1-6}alquilo (sic), C_{1-6}alquiloxicarbonilo, C_{1-6}alquilcarboniloxi, aminocarbonilo, hidroxiC_{1-6}alquilo,
aminoC_{1-6}alquilo, hidroxicarbonilo, hidroxicarbonilC_{1-6}alquilo y -(CH_{2})_{v}-(C(=O)_{r})-(CHR^{17})_{u}-NR^{13}R^{14}; en donde

r es 0 ó 1, y cuando r es 0 se sobreentiende entonces un enlace directo;

R^{17} es hidrógeno o C_{1-6}alquilo;

arilo es fenilo o naftalenilo;

\vskip1.000000\baselineskip

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde

m es 0; n es 0; p es 1; t es 0; R^{1} y R^{2} son cada uno independientemente hidrógeno; R^{3} y R^{4} son cada uno independientemente hidrógeno; R^{5} es hidrógeno; R^{6} y R^{7} son cada uno independientemente hidrógeno o C_{1-6}alquilo; Z es un radical seleccionado de (a-1), (a-2) o (a-4); o R^{10} y R^{11} se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, hidroxi, C_{1-6}alquiloxicarbonilo o hidroxiC_{1-6}alquilo.

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, en donde m es 0; n es 0; p es 1; t es 0; R^{1} y R^{2} son cada uno independientemente hidrógeno; R^{3} y R^{4} son cada uno independientemente hidrógeno; R^{5} es hidrógeno; R^{6} y R^{7} son cada uno independientemente hidrógeno; Z es un radical seleccionado de (a-2) o (a-4); o R^{10} y R^{11} se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, hidroxi, o hidroxiC_{1-6}alquilo.

4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, 2 ó 3 en donde el compuesto es el compuesto No. 1, el compuesto No. 4 o el compuesto No. 5

46

\vskip1.000000\baselineskip

5. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, 2, 3 ó 4 para uso como medicamento.

6. Una composición farmacéutica que comprende vehículos farmacéuticamente aceptables y, como ingrediente activo, una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 a 4.

7. Un proceso de preparación de una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 6, en donde los vehículos farmacéuticamente aceptables y un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 a 4 se mezclan íntimamente.

8. Uso de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, 2, 3 ó 4 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno mediado por una interacción p53-MDM2.

9. Una composición de un agente anticáncer y un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, 2, 3 ó 4.

10. Un proceso para preparar un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado por

a): hacer reaccionar un compuesto intermedio de fórmula (II) con un compuesto intermedio de fórmula (III) en donde W es un grupo lábil apropiado tal como, por ejemplo, halo,

\vskip1.000000\baselineskip

47

\vskip1.000000\baselineskip

: definiéndose las variables como en la reivindicación 1;

b): convertir un compuesto intermedio de fórmula (IV) en compuestos de fórmula (I), en donde p es 1, a los que se hace referencia en esta memoria como compuestos de fórmula (I-a), en presencia de hidruro de litio y aluminio en un disolvente adecuado,

\vskip1.000000\baselineskip

48

\vskip1.000000\baselineskip

: definiéndose las variables como en la reivindicación 1;

\newpage

c): hacer reaccionar un carboxaldehído de fórmula (VI) apropiado, con un compuesto intermedio de fórmula (V), en presencia de un reactivo apropiado, en un disolvente adecuado, o

\vskip1.000000\baselineskip

49

\vskip1.000000\baselineskip

: definiéndose las variables como en la reivindicación 1;

d): hacer reaccionar un compuesto intermedio de fórmula (II) con un carboxaldehído apropiado de fórmula (VII) con la formación de un compuesto de fórmula (I), en donde t es 1, a los que se hace referencia en esta memoria como compuestos de fórmula (I-b),

50

: definiéndose las variables como en la reivindicación 1;

\vskip1.000000\baselineskip

51