ES2315600T3 - Conjugados de albumina que contienen un ligador glucuronico. - Google Patents
Conjugados de albumina que contienen un ligador glucuronico. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2315600T3 ES2315600T3 ES04018855T ES04018855T ES2315600T3 ES 2315600 T3 ES2315600 T3 ES 2315600T3 ES 04018855 T ES04018855 T ES 04018855T ES 04018855 T ES04018855 T ES 04018855T ES 2315600 T3 ES2315600 T3 ES 2315600T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- albumin
- glucuronide
- conjugate
- hsa
- pharmaceutical composition
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/4412—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/65—Peptidic linkers, binders or spacers, e.g. peptidic enzyme-labile linkers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Composición farmacéutica que comprende un conjugado que comprende (a) un fármaco farmacológicamente activo, (b) un ácido glucurónico y (c) una albúmina, en la que dicho fármaco farmacológicamente activo es un corticosteroide.
Description
Conjugados de albúmina que contienen un ligador
glucurónico.
La presente invención se refiere a una
composición farmacéutica que comprende un conjugado que comprende
(a) un fármaco farmacológicamente activo, preferiblemente un
corticosteroide, (b) un ácido glucurónico y (c) una albúmina. La
presente invención también se refiere a usos de dicho conjugado para
el tratamiento/la prevención de enfermedades particulares,
preferiblemente enfermedades inflamatorias y enfermedades
tumorales.
Las enfermedades reumáticas se tratan
generalmente mediante la administración de diferentes tipos de
esteroides. Este tipo de terapia no cura la enfermedad sino que
simplemente alivia los síntomas de la enfermedad. Por tanto, se
requiere una aplicación permanente de los fármacos. Dado que los
esteroides muestran sus efectos biológicos no sólo en el tejido
diana, es decir, el tejido inflamado, sino también en muchos otros
órganos, se observan efectos secundarios no deseados graves, como
síndrome de Cushing, osteoporosis, etc. Es evidente que una terapia
mediante el uso de un agente que se acumula dentro del tejido
inflamado conduciría a una reducción de estos efectos secundarios
y, por tanto, sería ventajoso para el paciente. Sin embargo, hasta
la fecha no pudieron proporcionarse soluciones convincentes de este
problema.
Los documentos de la técnica anterior JP 60
061596 A (EIKEN KAGAKU KK), JP 58 033162 A (EIKEN KAGAKU KK) y JP
58 028664 A (EIKEN KAGAKU KK) dan a conocer un conjugado que
comprende un glucurónido de 6-oxoestradiol y
albúmina que se usa como antígeno para producir anticuerpos para la
determinación de
estradiol-3-sulfato-17\beta-glucurónido
mediante métodos inmunoquímicos.
El documento WO 94/15947 A (AKTIEBOLAGET ASTRA)
da a conocer conjugados que comprenden un glucocorticosteroide
(GCS) químicamente unido a un azúcar para la administración
específica en el colon o íleo de
GCS.
GCS.
El documento
EP-A-0 482 540 (LABORATORI BALDACCI
SPA) da a conocer conjugados que comprenden un corticosteroide unido
a albúmina humana.
Por tanto, es objeto de la presente invención
proporcionar un medio que supere las desventajas de los fármacos de
la técnica anterior para el tratamiento de varias enfermedades
(preferiblemente enfermedades de inflamación), es decir, que se
acumulen dentro del tejido enfermo respectivo.
Según la invención, esto se logra mediante los
contenidos definidos en las reivindicaciones, es decir, mediante la
provisión de un conjugado de fármaco que se acumula dentro del
tejido (inflamado) liberándose el fármaco en el órgano diana en una
forma activa. Este conjugado comprende (a) un corticosteroide, (b)
un ácido glucurónico y (c) albúmina. En realizaciones preferidas,
tales como en los experimentos que condujeron a la presente
invención, se unieron corticosteroides tales como hidrocortisona,
prednisolona, dexametasona por medio de un enlace
\beta-glicosídico con un ácido
D-glucurónico en la posición 21 del esteroide y en
la posición 1 del ácido D-glucurónico para formar
un glucurónido. Este compuesto se unió mediante el uso del método de
Bolton-Hunter como una amida de ácido por medio del
ácido carboxílico del glucurónido a un residuo de lisina de la
albúmina sérica humana (HSA) en una razón molar de aproximadamente
1:1.
La albúmina y los conjugados de albúmina se
introducen por medio de endocitosis en células tumorales y
fibroblastos en el caso de inflamación y se digieren mediante
proteasas lisosómicas. En el mismo compartimento celular, es decir,
el lisosoma, se ubican glucuronidasas que pueden separar por
escisión el agente activo del conjugado. En el caso de esteroides,
en particular corticosteroides, el esteroide lipófilo liberado sale
del lisosoma mediante difusión, se une al receptor de esteroides
que está presente en el citoplasma y ejerce sus efectos biológicos.
Alternativamente, el conjugado ya puede escindirse en el espacio
extracelular (líquido sinovial, espacio intersticial tumoral)
mediante proteasas y glucuronidasas secretadas. Este tipo de
conjugación da como resultado una acumulación del fármaco dentro
del tejido deseado, por ejemplo, tejido inflamado y el tumor,
respectivamente, en comparación con el tejido normal. Por
consiguiente, la terapia mediante el uso del conjugado de la
presente invención, es decir, acumulación mediada por albúmina
(terapia basada en el concepto de transporte dirigido del fármaco)
se caracteriza por las siguientes ventajas: efectos secundarios
sistémicos inferiores, aumento de la semivida dentro del organismo,
menos intervalos de aplicación, mejora de la calidad de vida del
paciente.
Figura 1: Fórmula de (A)
prednisolona-21-\beta-D-glucurónido
y (B)
dexametasona-21-\beta-D-glucurónido.
Figura 2: Fórmula de (A)
hidrocortisona-21-\beta-D-glucurónido-HSA,
(B)
dexametasona-21-\beta-D-glucurónido-HSA
y (C)
prednisolona-21-\beta-D-glucurónido-HSA.
Figura 3: Determinación del efecto biológico
de HCG-HSA en cultivo celular.
Véase el ejemplo 2 para los detalles.
Figura 4: Liberación de una aglicona
fluorescente de MUG-HSA en fibroblastos sinoviales
humanos.
Véase el ejemplo 2 para los detalles.
Por consiguiente, la presente invención
proporciona un conjugado que comprende (a) un corticosteroide (b) un
ácido glucurónico y (c) una albúmina.
El acoplamiento de los constituyentes del
conjugado se realiza mediante unión química covalente. Se dan a
conocer métodos para preparar los componentes de los conjugados de
la presente invención y para acoplarlos, por ejemplo, en
Haeberlein, B. et al., Pharmac. Res. 10 (1993), 1553
(adaptado para la síntesis de glucurónido). Preferiblemente, el
conjugado de la presente invención tiene la siguiente estructura:
(a)-(b)-(c) (véase la Fig. 2).
La expresión "fármaco farmacológicamente
activo" en este contexto se refiere a cualquier fármaco que
contiene un grupo hidroxilo que puede conjugarse con ácido
glucurónico, que tras la escisión libera el fármaco activo y es
adecuado para el tratamiento/la prevención de enfermedades
caracterizadas por células que pueden captar albúmina o conjugados
de albúmina por medio de endocitosis, por ejemplo, células tumorales
o fibroblastos de tejido inflamado. Fármacos adecuados son
corticosteroides (por ejemplo, dexametasona, hidrocortisona,
prednisolona).
El término "glucurónido" tal como se usa en
el presente documento se refiere a cualquier compuesto que se
produce mediante la unión de una posición específica del ácido
glucurónico con una aglicona (por ejemplo, fármaco activo). Los
glucurónidos se caracterizan por un enlace \alpha o \beta de
preferiblemente el C1 quiral del ácido glucurónico. El fármaco
puede separarse por escisión del glucurónido al que está
covalentemente acoplado mediante una glucuronidasa que está
presente en el organismo. Preferiblemente, el ácido glucurónico
está acoplado covalentemente al fármaco en su posición 1.
El término "albúmina" tal como se usa en el
presente documento se refiere a cualquier albúmina que puede
captarse por las células, preferiblemente células tumorales humanas
o fibroblastos de tejido inflamado, por medio de endocitosis y
digerirse por proteasas. Una albúmina preferida es la albúmina
sérica humana (HSA).
Para los fines de la presente invención, el
ácido glucurónico tiene que acoplarse al fármaco de tal forma que,
tras escindirse mediante una glucuronidasa el fármaco, por ejemplo,
el corticosteroide, está presente en su forma biológicamente
activa. El experto en la técnica puede determinar tipos adecuados de
enlace covalente mediante experimentación rutinaria y someter a
ensayo la actividad biológica del fármaco tras la escisión según
los métodos descritos en los presentes ejemplos.
En una realización preferida del conjugado de la
presente invención, el ácido glucurónico se une en la posición 21
del esteroide.
El glucurónido puede acoplarse a cualquier
residuo de la albúmina siempre que el transporte del conjugado
mediante endocitosis no se dificulte o inhiba. Preferiblemente, el
glucurónido se acopla covalentemente a un residuo de lisina de la
albúmina, preferiblemente como una amida de ácido.
En una realización más preferida del conjugado
de la presente invención, la razón molar del
fármaco-glucurónido con respecto a la albúmina es
1:1.
Cualquier corticosteroide que es
farmacológicamente activo y, preferiblemente, muestra propiedades
antiinflamatorias y/o antialérgicas, es adecuado para los fines de
la presente invención. Corticosteroides preferidos son dexametasona,
hidrocortisona y prednisolona.
La presente invención se refiere al uso del
conjugado de la presente invención para la preparación de una
composición farmacéutica. Para la administración, el conjugado se
combina preferiblemente con vehículos farmacéuticos adecuados.
Ejemplos de vehículos farmacéuticos adecuados se conocen bien en la
técnica e incluyen soluciones salinas tamponadas con fosfato, agua,
emulsiones, tales como emulsiones de aceite/agua, diversos tipos de
agentes humectantes, disoluciones estériles, etc. Tales vehículos
pueden formularse mediante métodos convencionales y pueden
administrarse al sujeto a una dosis adecuada. La administración de
las composiciones adecuadas puede efectuarse mediante diferentes
formas, por ejemplo, mediante administración intravenosa,
intraperitoneal, subcutánea, intramuscular, tópica o intradérmica.
La vía de administración, por supuesto, depende de la naturaleza de
la enfermedad y del tipo de conjugado contenido en la composición
farmacéutica. El régimen de dosificación se determinará por el
médico responsable y otros factores clínicos, tales como las
semividas plasmáticas del conjugado. Tal como se conoce bien en las
técnicas médicas, las dosificaciones para un paciente cualquiera
dependen de muchos factores, incluyendo el tamaño del paciente, el
área superficial del organismo, la edad, el sexo, el compuesto
particular que va a administrarse, el tiempo y la vía de
administración, el tipo y estadio de la enfermedad, la salud
general y otros fármacos que se están administrando
simultáneamente.
La presente invención también se refiere a
diversos usos terapéuticos del conjugado de la presente invención.
Preferiblemente, el conjugado de la presente invención se usa para
el tratamiento de una enfermedad inflamatoria, preferiblemente una
enfermedad reumática, uveítis, asma, enfermedad de Crohn, lupus
eritematoso y psoriasis.
Un uso terapéutico preferido adicional del
conjugado de la presente invención es la prevención/el tratamiento
de la enfermedad de injerto frente a huésped o tumor.
"Tumor" en el contexto de la presente
solicitud significa cualquier crecimiento de células neoplásicas.
Incluyen cáncer de la vejiga, de huesos, de la médula ósea, de
cerebro, de mama, de cuello uterino, de la vesícula biliar, del
tracto gastrointestinal, de riñón, de hígado, de pulmón, de músculo,
de ovario, de páncreas, de paratiroides, de próstata, de piel, de
las glándulas salivares, de bazo, de testículos, de útero,
particularmente de mama.
La presente invención se explica mediante los
ejemplos.
\vskip1.000000\baselineskip
Se llevó a cabo la síntesis de
hidrocortisona-21-\beta-ácido
D-glucurónico (HCG) y
dexametasona-21-\beta-ácido
D-glucurónico (DMG) tal como se describe por
Haeberlein, B. et al., Pharmac. Res. 10 (1993), 1553, excepto
que tras la cromatografía ultrarrápida del glucurónido desprotegido
se realizó una purificación mediante HPLC preparativa. Columna: 250
x 10 mm Prosep C18-GOI-5\mu + VS
Latek [Latek, D-69214 Heidelberg, Alemania],
eluyente: 70% de COOH al 0,1% en H_{2}O (A), 30% de CH_{3}CN
(B); velocidad de flujo: 16 ml/min., 254 nm; tiempo de retención
(RT) de HCG: 6,1 min. Eluyente para DMG: 65% de A, 35% de B; RT: 5,6
min. Se controló la fracción purificada de los glucurónidos
mediante HPLC RP-18 analítica (columna: 150 x 4 mm
Prosep C18-GOI-5\mu Latek A
[Latek, Heidelberg] y se analizó mediante espectroscopía de masas.
Se eliminó el eluyente mediante secado a vacío, se disolvió el
precipitado en agua y se liofilizó.
\vskip1.000000\baselineskip
Se disolvieron 19,8 mg (35,6 \mumol) de HCG
purificado y 50 mg (450 \mumol) de hidroxilsuccinimida en 1 ml de
dimetilacetamida con adición de 1 ml de dioxano. Entonces, se
añadieron 9 mg (71,4 \mumol, 11 \mul) de
diisopropilcarbodiimida y se dejó la mezcla durante 24 h a
temperatura ambiente. Control mediante HPLC del HCG-éster de
succinimida (HCG-SE) formado tras la hidrólisis: se
añadieron 100 \mul (2 mg) de lisina en NaHCO_{3} 0,1 M a 2
\mul de la disolución de reacción y se dejó reaccionar durante 1 h
a 50ºC. Se analizaron 20 \mul del producto mediante HPLC;
columna: 150 x 4 mm Prosep
C18-GOI-5\mu Latek, eluyente: 70%
de A, 30% de B, 1 ml/min., 254 nm.
Se disolvieron 2,0 g de albúmina sérica humana
(HSA) (de Octapharm, D-40764 Langenfeld, Alemania)
lavados con 250 ml de H_{2}O por medio de ultrafiltración (5
veces), liofilizados) en 20 ml de NaHCO_{3} 0,1 M y se añadieron
a 5 ml de CH_{3}CN. Mediante el uso de una jeringuilla de vidrio
equipada con un filtro de 0,2 \mum (Schleicher + Schüll,
D-37586 Passel, Alemania), se añadió lentamente la
disolución de HCG-SE a la disolución de HSA con
agitación constante y se agitó durante 60 min. adicionales. Se
añadió H_{2}O a la disolución dando un volumen final de 50 ml.
Para el análisis de la reacción de acoplamiento, se sometieron 20
\mul de la disolución así obtenida a HPLC de filtración en gel
(SEC); columna: Zorbax GF 250, 250 x 9 mm, Agilent (Bischoff,
D-71229 Leonberg, Alemania); velocidad de flujo: 1
ml/min.; eluyente: acetato de sodio 180 mM, citrato de sodio 20 mM,
pH 7,5, NaN_{3} al 0,05%, 254 nm. RT de HSA: 9,48 min., HCG: 14,45
min.
Para comprobar si quedaban glucurónidos sin
unir, se tomó 1 ml de la disolución, se mezcló con 1 ml de H_{2}O
y se sometió a ultrafiltración con Centricon C50 (Millipore GmbH,
D-65760 Eschborn, Alemania). Se analizaron 20
\mul de la disolución filtrada para determinar el glucurónido sin
reaccionar mediante HPLC RP-18. Se purificó la
disolución de HSA mediante ultrafiltración sobre membranas Amicon YM
(4 veces; añadiendo cada vez 200 ml de disolución de NaCl
fisiológica que contiene gentamicina 160 mg/l). Se determinaron los
volúmenes de las disoluciones filtradas y se determinó el contenido
de HCG sin unir mediante HPLC en los filtrados. Se ajustó la
disolución de proteína purificada hasta HSA 100 mg/ml. Estaban
presentes 5,3 mg de HCG en los filtrados reunidos, es decir, se
acoplaron 14,5 mg de HCG (usándose 19,8 mg como cantidad inicial)
(73,2%), 0,725 mg de HCG/ml a 100 mg de HSA.
La estructura del conjugado de
hidrocortisona-glucurónido-albúmina
se muestra en la figura 2A.
\vskip1.000000\baselineskip
Se llevó a cabo la síntesis de
dexametasona-21-\beta-glucurónido-HSA
esencialmente tal como se describió para
hidrocortisona-21-\beta-glucurónido-HSA
excepto que se sustituyó HCG por DMG (16,6 mg; 29,2 \mumol). Se
controló la formación del éster de succinimida con 2 mg de serina en
100 \mul de NaHCO_{3} a 45º. El eluyente usado para la HPLC
RP-18 fue del 65% de A y del 35% de B. La reacción
del DMG-éster de succinimida fue del 100%. Se disolvieron 1,5 g de
HSA en 15 ml de NaHCO_{3} 0,1 M (más 5 ml de CH_{3}CN). Los
tiempos de retención de los productos tras la cromatografía SEC
fueron de 9,48 min. (para HSA) y 16,24 min. (para DMG). Se purificó
la disolución de proteína mediante ultrafiltración con membranas
Amicon YM (5 veces). Se ajustó la disolución de proteína purificada
hasta HSA 100 mg/ml. Estaban presentes 6 mg de DMG sin unir en los
filtrados reunidos, es decir, se acoplaron 10,6 mg de DMG (usándose
16,6 mg como cantidad inicial) (64%), 0,7 mg de DMG/ml a 100 mg de
HSA.
La estructura del conjugado de
dexametasona-glucurónido-albúmina se
muestra en la figura 2B.
Por tanto, los glucurónidos esteroideos
conjugados con HSA se degradan tras la endocitosis en los lisosomas
en tal grado que el esteroide liberado puede difundir desde el
lisosoma y entrar en el núcleo a través de la acción de receptores.
A partir de estudios de modificaciones de corticosteroides
naturales, se sabe que alteraciones en posiciones particulares de
la molécula dan como resultado la pérdida de su actividad biológica,
por ejemplo, la posición 3 y el grupo hidroxilo en la posición
21.
Con el fin de potenciar la solubilidad en agua y
para mejorar la excreción renal, los esteroides se glucuronizan en
el organismo. Estos glucurónidos naturales se acoplan por medio de
la posición 3 y se escinden mediante glucuronidasas que darían como
resultado un grupo hidroxilo y, por tanto, una especie de molécula
que muestra actividad biológica reducida en comparación con el
compuesto inicial. En cambio, un glucurónido en la posición 21 es
ventajoso, dado que, tras la escisión mediante una glucuronidasa,
está presente la molécula original que no muestra pérdida de
actividad biológica.
Tal como se ilustró en el ejemplo 1, se
sintetizaron glucurónidos esteroideos según el método de Haeberlein
et al., citado anteriormente, con las modificaciones citadas
a continuación. El acoplamiento del glucurónido se realizó por
medio de una reacción de Bolton-Hunter con un
residuo de lisina de la albúmina para dar una amida de ácido. Se
llevó a cabo el acoplamiento con una razón molar de aproximadamente
1:1 dado que albúminas con carga superior se desnaturalizan, son
inmunógenas y se degradan en el hígado.
En los experimentos descritos a continuación,
puede mostrarse que el conjugado de
hidrocortisona-21-\beta-D-glucurónido-HSA
es un sustrato para glucuronidasas tal como se muestra mediante los
efectos biológicos del conjugado en células WEHI-7
humanas. Pudo demostrarse la escisión de metilumbeliferona
fluorescente de
metilumbeliferona-glucurónido-HSA
usado como sustrato modelo en fibroblastos sinoviales y en medio
condicionado de estos fibroblastos.
\vskip1.000000\baselineskip
Se indujo la muerte celular en células
WEHI-7 sensibles a glucocorticoide mediante
incubación con hidrocortisona (HC) de bajo peso molecular e
hidrocortisona acoplada a albúmina
(hidrocortisona-21-\beta-D-glucurónido-HSA;
HCG-HSA) a lo largo de un periodo de 72 h. Se
igualaron concentraciones de albúmina diferentes mediante la
adición de HSA libre. Se determinaron las células muertas mediante
análisis fluorimétrico (tinción con yoduro de propidio (PI)). Pudo
demostrase que a pesar del acoplamiento a albúmina, el HCH mantiene
su actividad como glucocorticoide. Dado que el conjugado de
albúmina se captó por las células por medio de endocitosis (mientras
que la HC libre pasa a través de la membrana celular por medio de
difusión), tiene que aplicarse HCG-HSA en una
concentración de dos veces para lograr el mismo efecto. In
vitro, el conjugado de hidrocortisona-HSA
ejerce su efecto como glucocorticoide induciendo una muerte celular
dependiente de la dosis. Los resultados se muestran en la figura
3.
\vskip1.000000\baselineskip
Pudo demostrarse la escisión de
metilumbeliferona-glucurónido-HSA
(MUG-HSA) tras la incubación durante 24 h en
fibroblastos sinoviales (sFb). Los resultados se muestran en la
figura 4. Las cantidades dadas en la figura se refieren a 1 pocillo
y al metilumbeliferona-glucurónido en el conjugado
de HSA. Tras la adición de NaOH 1 M, se determinó
fluorimétricamente la metilumbeliferona en el sobrenadante celular a
448 nm con una excitación a 360 nm. Pudo demostrarse que los sFb
poseen actividad glucuronidasa que escinde MUG-HSA.
Por tanto, a pesar de su acoplamiento a albúmina,
MUG-HSA es un sustrato para fibroblastos sinoviales
humanos. MUG-(HSA) es estable en medio sin células.
Claims (10)
1. Composición farmacéutica que comprende un
conjugado que comprende (a) un fármaco farmacológicamente activo,
(b) un ácido glucurónico y (c) una albúmina, en la que dicho fármaco
farmacológicamente activo es un corticosteroide.
2. Composición farmacéutica según la
reivindicación 1, en la que dicho ácido glucurónico se acopla en la
posición 21 del corticosteroide para formar un glucurónido.
3. Composición farmacéutica según la
reivindicación 1 ó 2, en la que dicho glucurónido se acopla a un
residuo de lisina de la albúmina como una amida de ácido.
4. Composición farmacéutica según una cualquiera
de las reivindicaciones 1 a 3, en la que la razón molar del
fármaco-glucurónido con respecto a la albúmina es
1:1.
5. Composición farmacéutica según una cualquiera
de las reivindicaciones 1 a 4, en la que dicha albúmina es albúmina
sérica humana.
6. Composición farmacéutica según una cualquiera
de las reivindicaciones 1 a 5, en la que dicho corticosteroide es
dexametasona, hidrocortisona o prednisolona.
7. Uso del conjugado según una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 6, para la preparación de una composición
farmacéutica para el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.
8. Uso según la reivindicación 7, en el que
dicha enfermedad inflamatoria es una enfermedad reumática, uveitis,
asma, enfermedad de Crohn, lupus eritematoso, psoriasis.
9. Uso del conjugado según una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 6, para la preparación de una composición
farmacéutica para el tratamiento o la prevención de la enfermedad de
injerto frente a huésped o el cáncer.
10. Uso según la reivindicación 9, en el que
dicho cáncer es carcinoma mamario.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP04018855A EP1625854B1 (en) | 2004-08-09 | 2004-08-09 | Albumin conjugates containing a glucuronic linker |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2315600T3 true ES2315600T3 (es) | 2009-04-01 |
Family
ID=34926104
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES04018855T Active ES2315600T3 (es) | 2004-08-09 | 2004-08-09 | Conjugados de albumina que contienen un ligador glucuronico. |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP1625854B1 (es) |
| AT (1) | ATE411053T1 (es) |
| DE (1) | DE602004017164D1 (es) |
| ES (1) | ES2315600T3 (es) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2111857A1 (de) | 2008-04-25 | 2009-10-28 | Acino AG | Transdermales therapeutisches System zur Verabreichung von Fentanyl oder einem Analogstoff hiervon |
| EP2295046B1 (de) | 2009-09-14 | 2012-12-19 | Acino AG | Transdermales therapeutisches System zur Verabreichung von Fentanyl oder einem Analogstoff davon |
| CA2799202C (en) * | 2010-05-18 | 2016-07-05 | Cerulean Pharma Inc. | Compositions and methods for treatment of autoimmune and other diseases |
| CN106310290B (zh) * | 2016-10-27 | 2019-08-23 | 深圳先进技术研究院 | 一种肿瘤靶向性热敏前药及其制备方法与应用 |
| JP7330101B2 (ja) | 2016-11-08 | 2023-08-21 | レゲネロン ファーマシューティカルス，インコーポレーテッド | ステロイド及びそのタンパク質コンジュゲート |
| CN110944718A (zh) | 2017-05-18 | 2020-03-31 | 里珍纳龙药品有限公司 | 环糊精蛋白质药物偶联物 |
| BR112020022400A2 (pt) | 2018-05-09 | 2021-02-02 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | anticorpos anti-msr1 e métodos de uso dos mesmos |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5828664A (ja) * | 1981-08-13 | 1983-02-19 | Eiken Kagaku Kk | エストラジオ−ル−１７β−グルクロナイド測定用抗原およびその製造法 |
| JPS5833162A (ja) * | 1981-08-21 | 1983-02-26 | Eiken Kagaku Kk | エストリオ−ル−１６α−グルクロナイド測定用抗原およびその製造法 |
| JPS6061596A (ja) * | 1983-09-16 | 1985-04-09 | Eiken Kagaku Kk | 新規ステロイド化合物，その製造方法，及びその化合物からなる免疫化学的測定法によるエストラジオ−ル−３−サルフエ−ト−１７β−グルクロナイド測定用抗原 |
| IT8922275A0 (it) * | 1990-10-25 | 1989-11-06 | Baldacci Lab Spa | Nuovi derivati di corticosteroidi, procedimento per la loro preparazione e composizioni farmaceutiche che li contengono. |
| WO1993022334A1 (en) * | 1992-05-04 | 1993-11-11 | Sri International | Pharmaceutical compositions and methods for colonic delivery of corticosteroids |
| KR960700266A (ko) * | 1993-01-08 | 1996-01-19 | 클래스 빌헬름슨 | 신규 결장- 또는 회장-특이성 스테로이드 유도체(Novel Colon-or lleum-Specific Steroid Derivatives) |
| EP0721956B1 (en) * | 1993-09-29 | 2000-08-02 | Nissin Shokuhin Kabushiki Kaisha | 21-substituted steroid compound |
-
2004
- 2004-08-09 ES ES04018855T patent/ES2315600T3/es active Active
- 2004-08-09 AT AT04018855T patent/ATE411053T1/de not_active IP Right Cessation
- 2004-08-09 EP EP04018855A patent/EP1625854B1/en not_active Not-in-force
- 2004-08-09 DE DE602004017164T patent/DE602004017164D1/de not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP1625854A1 (en) | 2006-02-15 |
| DE602004017164D1 (de) | 2008-11-27 |
| ATE411053T1 (de) | 2008-10-15 |
| EP1625854B1 (en) | 2008-10-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Xu et al. | Endogenous sialic acid-engineered micelles: a multifunctional platform for on-demand methotrexate delivery and bone repair of rheumatoid arthritis | |
| ES2264141T3 (es) | Conjugados de sacaridos. | |
| CN105622925B (zh) | 一种支化聚乙二醇的脂质衍生物及其组成的脂质膜结构体 | |
| Kunjiappan et al. | Surface receptor‐mediated targeted drug delivery systems for enhanced cancer treatment: A state‐of‐the‐art review | |
| ES2788865T3 (es) | Conjugados farmacéuticos de nanopartículas | |
| EP2994153B1 (de) | Peptide und peptid-wirkstoff-konjugate für renales targeting | |
| CZ20023913A3 (cs) | Kationtová diagnostická, zobrazovací a terapeutická činidla spojená s aktivovanými cévními místy | |
| JP4794735B2 (ja) | ビタミンｂ１２誘導体及びそれらの製造方法 | |
| US20130144045A1 (en) | Novel self-reactive arms and prodrugs comprising same | |
| DE102005009084A1 (de) | Proteinbindende Anthrazyklin-Peptid-Derivate und diese enthaltende Arzneimittel | |
| AU2001266272A1 (en) | Cationic diagnostic, imaging and therapeutic agents associated with activated vascular sites | |
| CN101438252A (zh) | 多功能纳米粒子共轭体及其应用 | |
| JPH08507517A (ja) | 酸解裂性化合物、それらの調製及び二価の酸不安定性架橋剤としての利用 | |
| EP2456467A1 (de) | -polylysin-konjugate und deren verwendung | |
| CN103097413A (zh) | 脂质缀合抗体 | |
| ES2315600T3 (es) | Conjugados de albumina que contienen un ligador glucuronico. | |
| JP4610345B2 (ja) | 医薬品化合物のための改善されたリンカー | |
| WO2011085000A2 (en) | Fatty acid derivatives and analogs of drugs | |
| Châtre et al. | In vivo synthesis of triple-loaded albumin conjugate for efficient targeted cancer chemotherapy | |
| AU2003253890A1 (en) | The use of isocyanate linkers to make hydrolyzable active agent biopolymer conjugates | |
| JP2013539469A (ja) | 巨大環状脂肪族化合物及びその応用 | |
| JPWO2006112362A1 (ja) | 高分子型癌治療用医薬の製造方法 | |
| JPH03505576A (ja) | 有機化合物に関する改良 | |
| US20200323882A1 (en) | Phlip®-mediated targeting of corticosteroids to diseased tissue | |
| US7863470B2 (en) | Linear polyethylenimine-sterol conjugates for gene delivery |