ES2297189T3 - Derivados de epotilona. - Google Patents
Derivados de epotilona. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2297189T3 ES2297189T3 ES03747872T ES03747872T ES2297189T3 ES 2297189 T3 ES2297189 T3 ES 2297189T3 ES 03747872 T ES03747872 T ES 03747872T ES 03747872 T ES03747872 T ES 03747872T ES 2297189 T3 ES2297189 T3 ES 2297189T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- chem
- acid
- epothilone
- mmol
- etoac
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
- C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
- C07D405/06—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
- C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
- C07D407/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
- C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
- C07D417/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
- C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D493/04—Ortho-condensed systems
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Silicon Polymers (AREA)
- Dental Preparations (AREA)
Abstract
Un compuesto representado por medio de la fórmula I: (Ver fórmula)
Description
Derivados de epotilona.
La invención se relaciona con agentes
antitumorales. Más particularmente, la invención se relaciona con
análogos de epotilona B,
trans-12,13-ciclopropil epotilona B
como agentes antitumorales.
La invención está dirigida a análogos de
epotilona B trans-12,13-ciclopropil
epotilona B que tienen una potente actividad citotóxica contra una
variedad de líneas celulares, incluidas las células tumorales
resistentes al Taxol®. Los ejemplos de modalidades de la invención
incluyen al compuesto 12, como el ilustrado en la Figura 1. Otro
aspecto de la invención está dirigido al uso de tales compuestos
como agentes citotóxicos.
Un aspecto de la invención está dirigido a un
compuesto representado por la fórmula I:
\vskip1.000000\baselineskip
o una sal de un compuesto de
fórmula I en donde está presente un grupo que forma la
sal.
En donde la forma plural se utiliza para
compuestos, sales, y similares, esto significa también un compuesto
único, sal, o similar ("un" como artículo indefinido o como un
numeral que significa "uno").
Las sales son principalmente las sales
farmacéuticamente aceptables de compuestos de fórmula I.
Tales sales se forman, por ejemplo, como sales
de adición ácida, preferiblemente con ácidos orgánicos o
inorgánicos, a partir de compuestos de fórmula I con un átomo de
nitrógeno básico, especialmente las sales farmacéuticamente
aceptables. Los ácidos inorgánicos adecuados son, por ejemplo,
hidrácidos de halógeno, tales como ácido clorhídrico, ácido
sulfúrico, o ácido fosfórico. Los ácidos orgánicos adecuados son,
por ejemplo, los ácidos carboxílico, fosfónico, sulfónico o
sulfámico, por ejemplo ácido acético, ácido propiónico, ácido
octanóico, ácido decanóico, ácido dodecanóico, ácido glicólico,
ácido láctico, ácido 2-hidroxibutírico, ácido
glucónico, ácido glucosamonocarboxílico, ácido fumárico, ácido
succínico, ácido adípico, ácido pimélico, ácido subérico, ácido
azeláico, ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido
glucárico, ácido galactárico, aminoácidos, tales como el ácido
glutámico, ácido aspártico, N-metilglicina, ácido
acetilaminoacético, N-acetilasparagina o
N-acetilcisteína, ácido pirúvico, ácido
acetoacético, fosfoserina, 2 ó 3-glicerofosfórico,
ácido maléico, ácido hidroximaléico, ácido metilmaléico, ácido
ciclohexanocarboxílico, ácido benzóico, ácido salicílico, 1 ó
3-hidroxinaftil-2-carboxílico,
3,4,5-trimetoxibenzóico, ácido
2-fenoxibenzóico, ácido
2-acetoxibenzóico, ácido
4-aminosalicílico, ácido ftálico, ácido
fenilacético, ácido glucurónico, ácido galacturónico, ácido metano
o etanosulfónico, ácido 2-hidroxietanosulfónico,
ácido etano-1,2-disulfónico, ácido
bencenosulfónico, ácido 2-naftalenosulfónico, ácido
1,5-naftaleno-disulfónico, ácido
N-ciclohexilsulfámico, ácido
N-metil-, N-etil- o
N-propilsulfámico, u otros ácidos protónicos
orgánicos, tales como el ácido ascórbico.
Las sales de los compuestos de fórmula I con un
grupo formador de sal se pueden preparar en una forma ya conocida.
Las sales de adición ácida de compuestos de fórmula I pueden
obtenerse por lo tanto por ejemplo por medio de tratamiento con un
ácido o con un reactivo de intercambio aniónico adecuado.
Las sales pueden usualmente ser convertidas en
compuestos libres, por ejemplo por medio de tratamiento con agentes
básicos adecuados, por ejemplo con carbonatos de metal alcalino,
-carbonatos ácidos, o -hidróxidos, típicamente carbonato de potasio
o hidróxido de sodio.
Para propósitos de aislamiento o purificación
también es posible utilizar sales farmacéuticamente inaceptables,
por ejemplo picratos o percloratos. Únicamente las sales
farmacéuticamente aceptables o los compuestos libres (si surge la
ocasión, en la forma de preparaciones farmacéuticas) logran uso
terapéutico, y estas son por lo tanto las preferidas.
En vista de la estrecha relación entre los
nuevos compuestos en forma libre y en la forma de sus sales,
incluidas aquellas sales que pueden ser utilizadas como
intermediarias, por ejemplo en la purificación o identificación de
los nuevos compuestos, antes y después cualquier referencia a los
compuestos libres se debe entender que se refiere también a las
sales correspondientes, según proceda y sea conveniente.
Otro aspecto de la invención es un proceso para
sintetizar cualquiera de los compuestos descritos anteriormente o
intermediarios de los mismos, como se describe en la descripción, en
particular un proceso para la preparación de un compuesto de
fórmula I, II, III, IV o V en donde un compuesto de la fórmula
VI
en donde X es CH_{2} y R
es
y PG es un grupo protector para una
función
hidroxi,
en una primera etapa se condensa por medio de
una reacción de esterificación, opcionalmente en presencia de un
catalizador,
y en una segunda etapa se separa el grupo
protector proporcionando así una lactona de fórmula I.
\vskip1.000000\baselineskip
El término "grupos protectores para un grupo
hidroxi" como se lo utiliza aquí se refiere a grupos protectores
lábiles ácidos para un grupo hidroxi, cuyos grupos se conocen como
tales. Una característica de los grupos protectores es que ellos se
prestan por si mismos fácilmente, esto es, sin reacciones
secundarias indeseadas, para remover, típicamente por solvólisis,
reducción, fotólisis o también por actividad enzimática, por ejemplo
bajo condiciones análogas a las condiciones fisiológicas, y que
ellos no están presentes en los productos finales. Los
especialistas saben, o pueden establecer fácilmente, que grupos
protectores son adecuados con las reacciones mencionadas aquí antes
y después.
La protección de los grupos hidroxi por medio de
grupos de protección, los grupos protectores por si mismos, y sus
reacciones de escisión se describen por ejemplo en trabajos estándar
de referencia, tales como J. F. W. McOmie, "Protective Groups in
Organic Chemistry", Plenum Press, Londres y New York 1973, en T.
W. Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley,
New York 1981, en "The Peptides"; Volumen 3 (editores: E.
Gross y J. Meienhofer), Academic Press, Londres y New York 1981, en
"Methoden der organischen Chemie" (Methods of organic
chemistry), Houben Weyl, 4^{ta} edición, Volumen 15/l, Georg
Thieme Verlag, Stuttgart 1974, en H.-D. Jakubke and H. Jescheit,
"Aminosäuren, Peptide, Proteine" (Aminoácidos, péptidos,
proteínas), Verlag Chemie, Weinheim, Deerfield Beach, y Basel 1982,
y en Jochen Lehmann, "Chemie der Kohlenhydrate: Monosaccharide
und Derivate" (Química de carbohidratos: monosacáridos y
derivados), Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974.
Los grupos protectores preferidos son silil
éteres que son inestables al ácido como el éter
tert-butildimetil-sililo (TBS), el
éter Trietilsililo (TES), éter triisopropilsililo (TIPS), éter
dietilisopropilsililo (DEIPS), éter isopropildimetilsililo (IPDMS)
o éter texildimetilsililo (TDS).
La Figura 1 ilustra las estructuras de
epotilonas naturales y diseñadas seleccionadas. Las cajas grises
indican compuestos sintetizados en este estudio.
La Figura 4 ilustra un análisis retrosintético
de los análogos de la trans-ciclopropil epotilona B
12.
La Figura 5 ilustra la construcción del aldehído
32.
La Figura 6 ilustra la construcción de yoduros
de vinilo 20e.
La Figura 7 ilustra la síntesis de análogos de
epotilona 12.
La Figura 8 ilustra una tabla que expone la
citotoxicidad de las epotilonas 1, 2 y 12 y paclitaxel contra las
células humanas de carcinoma de ovario 1A9 y las líneas celulares
mutantes de \beta-tubulina seleccionadas con
paclitaxel o epotilona A.
La Figura 9 ilustra una tabla que expone la
potencia y citotoxicidad de la polimerización de tubulina de la
epotilona 1-2 y 12, contra las líneas celulares
humanas de cáncer epidermoide.
La Figura 10 ilustra una tabla que expone
afinidades de enlazamiento de análogos de epotilona con los sitios
taxoides de enlazamiento de microtúbulos.
\vskip1.000000\baselineskip
Otro aspecto de la invención está dirigido a una
composición farmacéutica que contiene una dosis farmacéutica de un
compuesto ya sea dentro de la fórmula I, II, II, IV o la fórmula V,
representada anteriormente, para el tratamiento de una enfermedad
proliferativa en un mamífero. En una modalidad preferida, el
mamífero es un humano.
Se divulga la construcción de una serie de
epotilonas de ciclopropano y de epóxido con diferentes cadenas
laterales por medio de síntesis química y se las evalúa
biológicamente. El diseño de la presente biblioteca enfocada en
epotilona se basó en el conocimiento actual de las relaciones de
actividad de la estructura (SAR), específicamente el hecho de que:
(1) la epotilona B (2) es considerablemente más potente que la
epotilona A (1), (2) un reemplazo de tiometilo por el grupo metilo
sobre la fracción tiazol refuerza la potencia (Nicolaou, K. C.; y
colaboradores, Angew. Chem. 1998, 110, 2120-2153;
Angew. Chem. Int. Ed. 1998, 37, 2014-2045. Nicolaou,
K. C.; y colaboradores, Tetrahedron 2002, 58,
6413-6432; Nicolaou, K. C.; y colaboradores, Angew.
Chem. 1998, 110, 89-92; Angew. Chem. Int. Ed. 1998,
37, 84-87.); (3) un heterociclo tal como un
reemplazo de piridina (Nicolaou, K. C.; y colaboradores, Chem.
Biol. 2000, 7, 593-599) por el anillo de tiazol
necesita mantener la posición adecuada para el nitrógeno para la
actividad biológica; y (4) un anillo de ciclopropano puede
reemplazar la fracción de epóxido sin perder actividad (Nicolaou, K.
C.; y colaboradores, J. Am. Chem. Soc. 2001, 123,
9313-9323; Nicolaou, K. C.; y colaboradores,
ChemBioChem. 2001, 2, 69-75; Johnson, J. A.; y
colaboradores, Org. Lett. 2000, 2, 1537-1540). A
partir de estas consideraciones, las epotilonas 12 (figura 1) fueron
consideradas como candidatas principales para síntesis química y
evaluación biológica. La evaluación biológica de estos compuestos
condujo a la identificación de la cadena lateral de tiometiltiazol
como un grupo farmacofórico deseable que mejora la actividad
biológica de la epotilonas con relación a las propiedades de
citotoxicidad y polimerización de la tubulina. La actividad
mejorada fue confirmada por medio de tres ensayos biológicos
distintos donde los efectos de los compuestos analizados se
determinaron tanto en células como in vitro.
Como una incursión inicial, decidimos confirmar
la mejora en potencia conferida sobre la construcción de la
epotilona por el grupo metiltio comparado con el sustituyente metilo
en la cadena de la epotilona B. Se sintetizó por lo tanto la
metiltiotiazol epotilona B (3) por medio del acoplamiento de
estanano de Stille 16 (Nicolaou, K. C.; y colaboradores, Bioorg.
Med. Chem. 1999, 7, 665-697) con yoduro de vinilo 15
(Nicolaou, K. C.; y colaboradores, Chem. Eur. J. 2000, 6,
2783-2800) (rendimiento del 80%) como se observa en
la Figura 3. La gran potencia observada del análogo 3 contra una
serie de líneas de células tumorales (ver Tabla 1) nos alentó a
proceder con el diseño y la síntesis de una familia completa de
análogos de metiltio así como una cantidad de nuevas epotilonas que
contienen piridina.
La Figura 4 esboza, en formato retrosintético,
la ruta que fue seguida para la construcción de los análogos de la
ciclopropil epotilona B. Con base en nuestra estrategia previamente
reportada, la secuencia adoptada requirió de una reacción de
ciclopropanación de Charette (Nicolaou, K, C.; y colaboradores, J.
Am. Chem. Soc. 2001, 123, 9313-9323; Charette, A.
B.; y colaboradores, J. Am. Chem. Soc. 1998, 120,
11943-11952) para establecer antes en la síntesis
el sitio 12,13-ciclopropilo, una reacción aldol de
acuerdo con nuestro procedimiento optimizado (Nicolaou, K. C.; y
colaboradores, Chem. Eur. J. 2000, 6, 2783-2800)
para construir el enlace C6-C7 con sus dos
estereocentros, un acoplamiento
Nozaki-Hiyama-Kishi (Nicolaou, K.
C.; y colaboradores, J. Am. Chem. Soc. 2001, 123,
9313-9323; Takai, K.; y colaboradores, Tetrahedron
Lett. 1983, 24, 5281-5284; Jin, H.; y
colaboradores, J. Am. Chem. Soc. 1986, 108,
5644-5646) para introducir la cadena lateral, y una
macrolactonización de Yamaguchi (Inanaga, J.; y colaboradores,
Bull. Chem. Soc. Jpn. 1979, 52, 1989-1993; Mulzer,
J.; y colaboradores, Synthesis 1992, 215-228;
Nicolaou, K. C.; y colaboradores, J. Am. Chem. Soc. 1997, 119,
7974-7991) para completar la estructura
macrocíclica. Los bloques clave de construcción 18 ó 69 y 19, y 20
se definieron por lo tanto como los puntos de partida para estas
construcciones. La construcción de los análogos correspondientes de
epotilona A se previó que se llevara a cabo en la misma forma en que
la reportamos previamente nosotros (Nicolaou, K. C.; y
colaboradores, J. Am. Chem. Soc. 2001, 123,
9313-9323).
La Figura 5 y la figura 14 esbozan la síntesis
del aldehído requerido 32 ó 82 a partir del geraniol fácilmente
disponible (18 ó 69). Por lo tanto, la ciclopropanación de Charette
de 18 (Et_{2}Zn-CH_{2}l_{2}, en presencia del
ligando quiral 21) (Charette, A. B,; y colaboradores, J. Am. Chem.
Soc. 1998, 120, 11943-11952) proporcionó el alcohol
ciclopropílico 22 con un rendimiento del 87% y del 93% ee ó 71 con
un rendimiento del 80%, 95%ee. La protección del grupo hidroxi en
22 ó 71 (NaH-BnBr) (para las abreviaturas de
reactivos y grupos de protección, ver las inscripciones en los
esquemas) seguida por ozonólisis (O_{3}; NaBH_{4}) del doble
enlace restante condujo al compuesto 23 ó 72 con un rendimiento
total del 89% ó del 83% respectivamente. La conversión del alcohol
23 ó 72 al correspondiente yoduro (24, rendimiento del 95% ó 73,
rendimiento del 91%) se logró por mesilación y posterior reacción
con NaI. La alquilación de (-)-propionaldehído SAMP
hidrazona (25) (Nicolaou, K. C.; y colaboradores, J. Am. Chem. Soc.
1997, 119, 7974-7991; Enders, D. Aymmetric Synth.
1984, 3, 275-339; Enders, D.; Klatt, M. Synthesis
1996, 1403-1418) con yoduro 24 ó 73 bajo la
influencia de LDA produjo un compuesto 26 ó 75 (rendimiento del
84%, rendimiento del 87% respectivamente), cuya escisión (Mel;
HCl_{ac.}) condujo al aldehído 17 con un rendimiento del 86% ó a
76 con un rendimiento del 91%. La proporción de los epímeros
C-8 resultantes se determine que era aproximadamente
de 97,3 por medio de un análisis de RMN ^{1}H de los ésteres MTPA
derivados del aldehído 17 (Tsuda, M.; Endo, T.; Kobayashi, J. J.
Org. Chem. 2000, 65, 1349-1352 y las referencias
citadas allí). La condensación del aldol entre la cetona 19 y el
aldehído 17 ó 76 bajo las condiciones previamente definidas [LDA
(2,4 equiv.), cetona 19 (2,3 equiv.), -78 a -40ºC, 30 min; luego
aldehído 17 ó 76, -78ºC, 5 min] (Nicolaou, K, C.; y colaboradores,
Chem. Eur, J. 2000, 6, 2783-2800) produjo un
producto aldol 27 ó 78 que fue aislado en una forma
diasteroméricamente pura (rendimiento del 81%). La protección
posterior del alcohol secundario en 27 ó 78 como un éter TBS
(TBSOTf, 2,6-lutidina) seguida por escisión
selectiva del grupo TBS primario (HF\bulletpy) produjo, un
rendimiento total del 88%, de alcohol 28 o un rendimiento total del
86%, de alcohol 79. El compuesto fue oxidado por etapas hasta ácido
carboxílico (DMP; luego NaClO_{2}) que luego fue protegido como
el éster TMSE 29 u 80(TMSE-OH, EDC,
4-DMAP) con un rendimiento total del 75% o del 73%.
La hidrogenólisis del éter bencílico en 29 ó 80 seguido por
oxidación con DMP condujo al aldehído 30 u 82 (rendimiento del 84%,
rendimiento del 87%) cuya homologación
(NaHMDS-MeOCH_{2}PPh_{3}Cl; luego PPTS) hasta
el aldehído superior ambicionado 32 u 83 procedió fácilmente, y a
través del éter vinílico 31 (en una proporción aproximada de E:Z
de 1:1), con un rendimiento total del 82%.
Las cadenas laterales (20e, Esquema 4) fueron
sintetizadas a partir de los correspondientes haluros de arilo (33
(Ellingboe, J. W.; y colaboradores, J. Med. Chem. 1994, 37,
542-550), 37,) como se observa en el Esquema 4. La
protección del bromuro de
4-hidroximetil-2-piridil
33 como un tritil éter (TrCl, 4-DMAP, 100%) seguida
por el acoplamiento de Sonogashira (Arcadi, A.; y colaboradores,
Tetrahedron 1994, 50, 437-452) del bromuro
de arilo resultante 34 con propino
[Pd(PPh_{3})_{2}Cl_{2}-CuI, 96%]
condujo al compuesto acetilénico 35 que sirvió como un precursor
para el yoduro de vinilo 20c (n-BuLi; luego
(n-Bu_{3}Sn)_{2}, CuCN, MeOH; luego
I_{2}, rendimiento del 80%). El intercambio del tritil por un
grupo MOM dentro de 35 [HCl(g), CHCl_{3}; luego NaH,
MOM-Cl, rendimiento total del 34%] (Betzer, J.-F.; y
colaboradores, Tetrahedron Lett. 1997, 38,
2279-2282) permitió el acceso al yoduro de vinilo
20d (rendimiento del 67%) por medio de la exposición del
intermediario resultante 36 con las mismas condiciones descritas
anteriormente para la conversión de 35 a 20c. Se empleó una química
similar para construir yoduro de vinilo 20e a partir de 37,
respectivamente, como se observa en el Esquema 4.
Dos formaciones de enlace cruciales y dos
desprotecciones acompañantes separaron los bloques claves de
construcción 32 (preparados en este estudio para análogos de
epotilona B), 40 (preparados como se describió previamente para los
análogos de epotilona A) (Nicolaou, K. C.; y colaboradores, J. Am.
Chem. Soc. 2001, 123, 9313-9323), y
20a-g (para cadenas laterales) a partir de los
análogos de epotilona objetivo. La primera operación fue el
acoplamiento de Nozaki-Hiyama-Kishi
(Takai, K.; y colaboradores, Tetrahedron Lett. 1983, 24,
5281-5284; Jin, H.; y colaboradores, J. Am. Chem.
Soc. 1986, 108, 5644-5646) de los aldehídos 32 y 40
con yoduros de vinilo 20e. Esta reacción formadora del enlace
carbono-carbono funcionó admirablemente en este caso
(CrCl_{2}, NiCl_{2}, 4-t-BuPy,
DMSO), proporcionando, después de la generación del ácido
carboxílico inducida por TBAF, productos de acoplamiento (41e,) en
los rendimientos indicados en los Esquemas 5 (como por ejemplo
mezclas 1:1 de diasterómeros C-15). Cada mezcla de
diasterómeros de hidroxiácido (41e) fue sometida luego a
macrociclización de Yamaguchi (cloruro de
2,4,6-triclorobenzoilo, 4-DMAP)
(Inanaga, J.; y colaboradores, Bull. Chem, Soc. Jpn. 1979, 52,
1989-1993; Mulzer, J.; y colaboradores, Synthesis
1992, 215-228) para producir la lactona deseada
15(S) en los rendimientos indicados (no optimizados) junto
con su 15(R) epímero. La separación de los dos epímeros en
esta unión fue facilitada por sus valores de Rf drásticamente
bastante diferentes sobre gel de sílice. La desprotección final de
los derivados protegidos ya sea con TFA al 20% en CH_{2}Cl_{2}
(43e), condujo a la epotilona 12 en los rendimientos indicados (no
optimizados) (Esquemas 5). Se sometieron los compuestos puros a
evaluaciones biológicas por medios cromatográficos y
espectroscópicos como se describe más adelante.
Las actividades biológicas de las epotilonas
sintetizadas fueron evaluadas a través de citotoxicidad,
polimerización de la tubulina in vitro, y ensayos de
enlazamiento de la tubulina. La citotoxicidad fue evaluada primero
en un conjunto de líneas celulares de carcinoma de ovario, incluida
una línea celular parental (IA9) y tres líneas celulares
resistentes a la droga, principalmente las cepas resistentes al
paclitaxel (Giannakakou, P.; y colaboradores, J. Biol. Chem. 1997,
272, 17118-17125) IA9/PTX10 y IA9/PTX22 y la cepa
resistente a la epotilona (Giannakakou, P.; y colaboradores, Proc.
Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2000, 97, 2904-2909) 1A9/A8.
Estas líneas celulares resistentes hospedan distintas mutaciones
adquiridas de \beta-tubulina que afectan la
interacción droga-tubulina y resultan en taxano
deteriorado y en polimerización de la tubulina dirigida por
epotilona. Los resultados de estas investigaciones biológicas se
resumen en la Tabla 1 (Skehan, P.; y colaboradores, J. Natl. Cancer
Inst. 1990, 82, 1107-1112). Se llevaron a cabo
ensayos adicionales de citotoxicidad y de polimerización in
vitro de la tubulina utilizando un conjunto de líneas celulares
humanas de cáncer epidermoide, incluida una línea celular madre
(KB-31) y una línea celular resistente al paclitaxel
(debido a la sobreexpresión de Pgp) (KB-8511). Los
resultados de estos estudios se resumen en la Tabla 2 (Nicolaou, K.
C.; y colaboradores, Chem. Biol. 2000, 7, 593-599;
Meyer, T.; y colaboradores, Int. J. Cancer 1989, 43,
851-856).
En general, existe una buena concordancia entre
la potencia de polimerización de la tubulina in vitro y el
perfil de citotoxicidad de los compuestos analizados tanto contra
las células humanas de carcinoma de ovario 1A9 como las células
humanas de carcinoma epidermoide KB-31. De acuerdo
con las observaciones originales con las epotilonas A y B de
ocurrencia natural, ninguno de los análogos de las epotilonas A o B
analizadas aquí parece ser un buen sustrato para la bomba que
suministra la droga P-glicoproteína (Pgp). Esto es
evidente por la carencia de resistencia cruzada de cada uno de
estos análogos con la línea celular KB-8511 que
expresa Pgp, en contraste con paclitaxel - un sustrato conocido de
Pgp - que es 214 veces menos activo contra las células
KB-8511 (ver figura 9 y la figura 17). Es notable
que todos los análogos de epotilona parezcan más activos contra los
mutantes de \beta-tubulina comparados con la
epotilona A (1) y la epotilona B (2) (ver figura 8 y figura 16,
valores RR). Esta es más pronunciada con el compuesto 12 para el
cual el rango de valores de resistencia relativa (RR) de
1,6-9,3 contra las células PTX10 (\beta270) y A8
(\beta274) comparado con los valores RR 9,4-24,9
para Epo A (1) y Epo b (2) (figura 8). Además, en el estudio actual,
y de acuerdo con reportes previos (Nicolaou, K. C.; y
colaboradores, ChemBioChem 2001, 2, 69-75;
Giannakakou, P.; y colaboradores, J. Biol. Chem. 1997, 272,
17118-17125; Giannakakou, P.; y colaboradores, Proc.
Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2000, 97,2904-2909),
encontramos que el mutante seleccionado de paclitaxel PTX22
(\beta364) retiene casi toda la sensibilidad con las epotilonas,
y con todos los análogos de epotilona analizados en este reporte
(valores RR ae 3,3).
Existe un acuerdo general en la potencia
relativa de los análogos sustituidos de epotilona B contra las
células cancerosas epidermoides humanas KB-31 y de
ovario humano 1A9. Colectivamente, los resultados de estos ensayos
de citotoxicidad revelaron información interesante en términos de
las relaciones de actividad con la estructura dentro de la familia
de la epotilona. Primero, los compuestos 4 y 6 en los cuales la
fracción epóxido C12-C13 es reemplazada por un
anillo de ciclopropano son los dos compuestos más potentes entre
todos los análogos de epotilona B presentados aquí. Este resultado
reafirma que la fracción de epóxido C12-C13 no es
necesaria para la actividad biológica como se observó previamente
(Nicolaou, K. C.; y colaboradores, J. Am. Chem. Soc. 2001, 123,
9313-9323; Nicolaou, K. C.; y colaboradores,
ChemBioChem. 2001, 2, 69-75; Johnson, J. A.; y
colaboradores, Org. Lett. 2000, 2, 1537-1540). El
compuesto 4 es 6 veces más activo que la epotilona B madre (2)
contra las células humanas de carcinoma de humano 1A9 (Figura 8)
confirmando además que el remplazo del grupo metilo sobre la cadena
lateral de tiazol con un grupo tiometilo conduce a una mayor
actividad. Este resultado está de acuerdo con datos previos sobre
una sustitución similar en la epotilona B sin el reemplazo del
epóxido C12-C13 (esto es, el compuesto 3)
(Nicolaou, K.C.; y colaboradores, Tetrahedron 2002, 58,
6413-6432). Este compuesto (3) fue aproximadamente
2 veces más activo que la epotilona B madre, mientras que el
compuesto 4 es 6 veces más potente que la epotilona B. Este
resultado hace al compuesto 4, el análogo de epotilona B más activo
contra la línea celular 1A9 sintetizada hasta la fecha y sugiere que
el remplazo del epóxido por una fracción de ciclopropano junto con
el reemplazo del sustituyente metilo sobre la fracción de tiazol con
un grupo tiometilo actúa sinergísticamente, conduciendo a la mejora
observada de la actividad biológica. En forma muy interesante, la
sustitución del grupo metilo del anillo de tiazol con fracciones más
grandes (compuesto 12) conduce a la disminución de la actividad
biológica comparado con la epotilona B (Figuras 8 y 9).
Además de los ensayos biológicos anteriores, se
midió la potencia relativa de cada análogo de epotilona por medio
del ensayo de desplazamiento del taxoide fluorescente (Andreu, J.
M.; Barasoain, I. Biochemistry 2001, 40,
11975-11984). El propósito de estos experimentos fue
comparar las constantes de equilibrio con las cuales se enlazan los
microtúbulos en su sitio de taxano a los análogos de epotilona
investigados. La inhibición del enlazamiento del taxoide
fluorescente bien caracterizado Flutax-2 (Souto, A.
A.; y colaboradores, Angew. Chem. Int. Ed, Engl. 1995, 34,
2710-2712; Diaz, J. F.; y colaboradores, J. Biol.
Chem. 2000, 275, 26265-26276: Abal, M.; y
colaboradores, Cell. Motil. Cytoskeleton 2001, 49,
1-15) con los microtúbulos para cada uno de los
análogos de epotilona se midió a 37ºC (Figura 10). Las constantes de
equilibrio de disociación resultantes mostradas en la Tabla indican
que la epotilona A (1) tiene la menor afinidad de enlazamiento entre
los análogos de epotilona analizados (Kd = 34\ring{A}4). El
ligando más poderoso entre aquellos medidos en este ensayo es el
compuesto 3, con un valor de Kd de 0.64\ring{A}0.24 nM, seguido
por el compuesto 12, con un valor similar de Kd n 1,8 nM. Las
afinidades de enlazamiento de los análogos analizados reflejan sus
respectivas actividades tanto en los ensayos de inhibición del
crecimiento celular como de polimerización de la tubulina in
vitro.
Colectivamente a partir de los tres ensayos
biológicos empleados aquí, se pueden extraer una cantidad de
conclusiones en términos de la relación de la actividad con la
estructura dentro de la familia de la epotilona. Primero, la
adición del grupo metilo C12 no mejora la actividad en la serie del
trans-ciclopropilo (compuesto 5 vs. 6, 7 vs. 8, 9
vs. 10), contrario con el resultado en la serie del
cis-epóxido, donde la epotilona B (2) es al menos
10 veces más activa que la epotilona A (1). Esto puede ser debido a
la orientación diferente del grupo metilo C12 en los compuestos cis
y trans o a todas las diferencias de conformación entre los
compuestos cis y trans, aunque los detalles deben ser todavía
elucidados. Segundo, la introducción de la cadena lateral de
2-tiometiltiazol mejora la actividad comparada con
la cadena lateral natural de 2-metiltiazol
(compuestos 2 vs. 3, 5 vs. 11, y 6 vs. 12). Este efecto fue
previamente observado para los análogos de epotilona C y D
(Nicolaou, K. C.; y colaboradores, Angew. Chem. 1997, 109,
2181-2187; Angew, Chem. Int. Ed. Engl. 1997, 36,
2097-2103; ver también: Sinha, S. C.; y
colaboradores, ChemBioChem 2001, 2, 656-665).
Tercero, el reemplazo del grupo metilo con un grupo tiometilo en la
serie de la cadena lateral de piridina (compuestos 8 vs. 13) reduce
la potencia, contrario a los resultados obtenidos para las cadenas
laterales anteriores de tiazol. Esta conclusión se basó en la
citotoxicidad de la célula y en los datos de la polimerización in
vitro de la tubulina, mientras que en el ensayo de
desplazamiento del taxoide fluorescente, el reemplazo del grupo
metilo con una fracción de tiometilo en la cadena lateral de
piridina es indiferente en términos de la afinidad de enlazamiento.
Esta discrepancia puede simplemente reflejar diferencias en la
incorporación en la célula y la permeabilidad de los compuestos
analizados o en las diferencias en la sensibilidad de los dos
ensayos de la tubulina. A pesar de esta discrepancia, es claro a
partir de estos datos que la introducción de un grupo tiometilo en
la cadena lateral de tiazol es una modificación más favorable que la
introducción de un grupo tiometilo en la cadena lateral de
piridina, lo cual puede ser debido a diferentes requerimientos
estéricos por parte de las dos construcciones de cadena lateral. De
acuerdo con los datos previos obtenidos con los análogos de
epotilona de la piridina cis (Nicolaou, K. C.; y colaboradores,
Chem. Biol. 2000, 7, 593-599), la reubicación del
grupo tiometilo de la cadena lateral de piridina desde la posición 5
(compuesto 13) hasta la posición 6 (compuesto 14) resultó en una
perdida significativa de actividad. Cuarto, se obtienen resultados
mezclados con los compuestos 7 vs. 9 y 8 vs. 10 en los cuales la
cadena lateral de 5-metilpiridina (compuestos 7 y
8) es sustituida por la cadena lateral de
5-hidroximetilpiridina (compuestos 9 y 10). Esta
sustitución parece indiferente en los ensayos de citotoxicidad
contra las células humanas de carcinoma de ovario 1A9 (Tabla 1)
donde se obtuvieron valores IC_{50} muy similares para cada par
(por ejemplo 0,6 y 0,7 nM para los compuestos 7 y 9,
respectivamente; 1,7 nM para los compuestos 8 y 10). Por otro lado,
en las células humanas de carcinoma epidermoide
KB-31, el compuesto 10 es 2 veces más activo que su
contraparte el compuesto 8 con IC_{50} en 0,44 vs. 0,9 nM,
respectivamente. Dadas las pequeñas diferencias en la velocidad de
crecimiento de las dos líneas de células cancerosas humanas que
podrían explicar los resultados diferenciales, podríamos concluir
que la introducción de la cadena lateral de
5-hidroximetilpiridina probablemente no mejore la
actividad, al menos en los análogos de
trans-12,13-ciclopropilo de la
familia de la epotilona.
Debido a estas propiedades, los compuestos son
adecuados para el tratamiento de enfermedades proliferativas,
especialmente enfermedades tumorales, incluida la metástasis; por
ejemplo tumores sólidos tales como tumores de pulmón, tumores de
mama, tumores colorectales, tumores de próstata, melanomas, tumores
de cerebro, tumores de páncreas, tumores de cuello, tumores de
vesícula, neuroblastomas, tumores de garganta, pero también
enfermedades proliferativas de células sanguíneas, tales como
leucemia; también para el tratamiento de otras enfermedades que
responden al tratamiento con inhibidores de despolimerización de
microtúbulos, tal como la soriasis.
Se puede administrar un compuesto de fórmula I
solo o en combinación con uno o más de otros agentes terapéuticos,
posible terapia de combinación que toma la forma de combinaciones
fijas o la administración de un compuesto de la invención y uno o
más de otros agentes terapéuticos administrados escalonadamente o
independientemente uno del otro, o la administración combinada de
combinaciones fijas y uno o más de otros agentes terapéuticos. Un
compuesto de fórmula 1 puede ser administrado también o
adicionalmente para terapia tumoral en combinación con
quimioterapia, radioterapia, inmunoterapia, una intervención
quirúrgica, o una combinación de estas. La terapia de largo plazo
es igualmente posible ya que es una terapia adyuvante en el contexto
de otras estrategias de tratamiento, como se describió
anteriormente. Otros tratamientos posibles son la terapia para
mantener el estatus del paciente después de una regresión tumoral,
o incluso una terapia quimiopreventiva, por ejemplo en pacientes
con riesgo.
Los agentes terapéuticos para una posible
combinación son especialmente uno o más compuestos
antiproliferativos, citostáticos o citotóxicos, por ejemplo uno o
más agente(s) quimioterapéutico(s) seleccionados del
grupo que contiene a los agentes quimioterapéuticos clásicos, un
inhibidor de la biosíntesis de poliamina, un inhibidor de la
proteína quinasa, especialmente de la proteína serina/treonina
quinasa, tal como la proteína quinasa C, o de la proteína tirosina
quinasa, tal como el receptor del factor de crecimiento epidérmico
de la proteína tirosina quinasa, una citoquina, un regulador
negativo de crecimiento, tal como TGF-\beta o
IFN-\beta, un inhibidor de aromatasa, y un
citostático clásico.
Los compuestos de acuerdo con la invención son
no solamente para el tratamiento (profiláctico y preferiblemente
terapéutico) de humanos, sino también para el tratamiento de otros
animales de sangre caliente, por ejemplo de animales comercialmente
útiles, por ejemplo roedores, tal como ratones, conejos o ratas, o
conejillos de indias. También pueden ser utilizados como una
referencia estándar en los sistemas de análisis descritos
anteriormente para permitir una comparación con otros
compuestos.
También se puede utilizar un compuesto de
fórmula I para propósitos de diagnóstico, por ejemplo con tumores
que han sido obtenidos a partir de "huéspedes" animales de
sangre caliente, especialmente humanos, e implantados en ratones
para analizar en ellos la disminución en el crecimiento después del
tratamiento con tal compuesto, con el propósito de investigar su
sensibilidad con dicho compuesto y por lo tanto para mejorar la
detección y determinación de posibles métodos terapéuticos para
enfermedades neoplásicas en el huésped original.
Las mezclas estereoisómeras, por ejemplo mezclas
de diasteroisómeros, se pueden separar en sus isómeros
correspondientes en una forma ya conocida por medio de métodos
adecuados de separación. Las mezclas diasteroisómeras pueden ser
separadas por lo tanto en sus diasteroisómeros individuales por
medio de cristalización fraccionada, cromatografía, distribución en
un solvente, y procedimientos similares. Esta separación puede tener
lugar ya sea en la tapa de uno de los compuestos de partida o en un
compuesto de fórmula I por sí mismo. Los enantiómeros pueden ser
separados a través de la formación de sales diasteroisómeras, por
ejemplo por medio de la formación de una sal con un ácido quiral
puro de enantiómero, o por medio de cromatografía, por ejemplo por
HPLC, utilizando sustratos cromatográficos con ligandos quirales.
(La separación de enantiómeros se efectúa normalmente en la etapa
intermedia).
La presente invención se relaciona también con
preparaciones farmacéuticas que contienen un compuesto de fórmula I
como ingrediente activo y que pueden ser utilizadas especialmente en
el tratamiento de las enfermedades mencionadas anteriormente. Las
preparaciones para administración enteral, tal como administración
nasal, bucal, rectal o, especialmente administración oral, y para
administración parenteral, tal como administración intravenosa,
intramuscular o subcutánea, para animales de sangre caliente,
especialmente humanos, son especialmente preferidas. Las
preparaciones contienen al ingrediente activo solo o,
preferiblemente, junto con un excipiente farmacéuticamente
aceptable. La dosis del ingrediente activo depende de la enfermedad
que va a ser tratada y de la especie, su edad, peso, y condición
individual, de los datos farmacocinéticos individuales, y de la
forma de administración.
La dosis precisa de los compuestos de fórmula I
que van a ser empleados para la inhibición de la enfermedad
proliferativa, preferiblemente tumores, depende de varios factores
incluido el huésped, la naturaleza y la severidad de la condición
que está siendo tratada, la forma de administración y el compuesto
particular empleado. Sin embargo, en general, la inhibición
satisfactoria de tumores se logra cuando un compuesto de fórmula I
se administra parenteralmente, por ejemplo, en forma
intraperitoneal, intravenosa, intramuscular, subcutánea,
intratumoral, o rectal, o en forma enteral, por ejemplo, en forma
oral, preferiblemente en forma intravenosa u oral, más
preferiblemente en forma intravenosa con una dosis única de
1-300 mg/kg de peso corporal por ciclo (ciclo =
3-6 semanas) o, para primates superiores, una dosis
única de 50-5000 mg por ciclo de tratamiento. Una
dosis única intravenosa preferida para un ciclo de tratamiento de
3-6 semanas es de 1-75 mg/kg de peso
corporal o, para primates superiores, una dosis diaria de
50-1500 mg. Una dosis intravenosa típica es de 45
mg/kg, una vez cada tres semanas.
Usualmente, se administra inicialmente una dosis
pequeña y se incrementa gradualmente la dosis hasta que se
determina la dosis óptima para el huésped bajo tratamiento. El
límite superior de la dosis es aquella impuesta por los efectos
secundarios y se puede determinar por medio de ensayos para el
huésped que está siendo tratado.
La invención se relaciona también con
preparaciones farmacéuticas para ser usadas en un método para el
tratamiento profiláctico o especialmente el tratamiento terapéutico
del cuerpo humano o de una animal, con un proceso para la
preparación de las mismas (especialmente en la forma de
composiciones para el tratamiento de tumores)y con un método
para tratar las enfermedades anteriormente mencionadas,
principalmente enfermedades neoplásicas, especialmente aquellas
mencionadas anteriormente.
La invención se relaciona también con procesos y
con el uso de compuestos de fórmula I para la preparación de
preparaciones farmacéuticas que contienen compuestos de fórmula I
como componente activo (ingrediente activo).
Se da preferencia a una composición farmacéutica
que es adecuada para la administración a un animal de sangre
caliente, especialmente un humano o un mamífero comercialmente útil,
que sufre de una enfermedad que es responsable por la inhibición de
la despolimerización de microtúbulos, por ejemplo soriasis o
especialmente una enfermedad neoplásica, que comprende una cantidad
correspondientemente efectiva de un compuesto de fórmula I, o de una
sal farmacéuticamente aceptable de la misma cuando están presentes
los grupos formadores de sales, junto con al menos un excipiente
farmacéuticamente aceptable.
Una composición farmacéutica para el tratamiento
profiláctico o especialmente terapéutico de enfermedades
neoplásicas y de otras enfermedades proliferativas de un animal de
sangre caliente, especialmente un humano o un mamífero
comercialmente útil que requiere de tal tratamiento, especialmente
que sufre de una enfermedad así, comprende un compuesto nuevo de
fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como
ingrediente activo en una cantidad que es profilácticamente o
especialmente terapéuticamente activa contra dichas enfermedades,
es igualmente preferida.
Las preparaciones farmacéuticas contienen
aproximadamente desde 0,000001% hasta 95% del ingrediente activo,
por lo cual las formas de dosificación única tienen preferiblemente
aproximadamente desde 0,00001 hasta 90% y las formas de
administración de dosis múltiples tienen preferiblemente
aproximadamente desde 0,0001 hasta 0,5% en el caso de preparaciones
para administración parenteral ó 1% a 20% del ingrediente activo en
el caso de preparaciones para administración enteral. Las formas de
dosis unitarias son, por ejemplo, tabletas recubiertas y no
recubiertas, ampolletas, viales, supositorios o cápsulas. Formas de
dosificación adicionales son, por ejemplo, ungüentos, cremas,
pastas, espumas, tinturas, labiales, gotas, nebulizadores,
dispersiones, etc. Ejemplos son cápsulas que contienen
aproximadamente desde 0,0002 g hasta aproximadamente 1,0 g de
ingrediente activo.
Las preparaciones farmacéuticas de la presente
invención se preparan en una forma ya conocida, por ejemplo por
medio de procesos de mezcla convencional, granulación,
recubrimiento, disolución o liofilización.
Las formulaciones adecuadas para administración
parenteral son principalmente soluciones acuosas [por ejemplo en
solución fisiológica salina, obtenible por medio de dilución de
soluciones en polietilén glicol, tal como el polietilén glicol
(PEG) 300 o PEG 400] de un ingrediente activo en una forma soluble
en agua, por ejemplo una sal soluble en agua, o suspensiones
acuosas inyectables que contienen agentes de viscosidad creciente,
por ejemplo carboximetil celulosa sódica, sorbitol y/o dextrano, y
estabilizadores cuando sea apropiado. El ingrediente activo, si se
requiere que esté junto con los excipientes, puede estar también en
la forma de un liofilizado y puede ser preparado en una solución
antes de administración parenteral por medio de la adición de
solventes adecuados.
Soluciones tales como aquellas utilizadas, por
ejemplo, para administración parenteral pueden ser empleadas
también como soluciones de infusión.
La invención se relaciona en forma similar con
un proceso o un método para el tratamiento de una de las condiciones
patológicas anteriormente mencionadas, especialmente una enfermedad
que responde a una inhibición de despolimerización de microtúbulos,
especialmente una enfermedad neoplásica correspondiente. Un
compuesto de fórmula I puede ser administrado como tal o en la
forma de composiciones farmacéuticas, profilácticamente o
terapéuticamente, preferiblemente en una cantidad efectiva contra
dichas enfermedades, a un animal de sangre caliente, por ejemplo un
humano, que requiere de tal tratamiento, siendo los compuestos
utilizados especialmente en la forma de composiciones
farmacéuticas. En el caso de un individuo que tiene un peso corporal
aproximadamente de 70 kg, la dosis administrada es aproximadamente
de 0,1 mg hasta aproximadamente 1 g, preferiblemente aproximadamente
desde 0,5 mg hasta aproximadamente 200 mg, de un compuesto de la
presente invención. La administración se efectúa preferiblemente
por ejemplo cada 1 a 4 semanas, por ejemplo semanalmente, cada dos
semanas, cada tres semanas o cada 4 semanas.
La presente invención también se relaciona en
particular con el uso de un compuesto de fórmula I, o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo, especialmente un compuesto de
fórmula I denominado como un compuesto preferido, o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo, como tal o en la forma de una
formulación farmacéutica que contiene al menos un excipiente
farmacéuticamente empleable, para el tratamiento terapéutico y
también profiláctico de una o más de las enfermedades
anteriores.
La presente invención también se relaciona en
particular con el uso de un compuesto de fórmula I, o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo, especialmente un compuesto de
fórmula I denominado como un compuesto preferido, o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo, para la preparación de una
formulación farmacéutica para el tratamiento terapéutico y también
profiláctico de una o más de las anteriores enfermedades.
Todas las reacciones fueron realizadas bajo
atmósfera de nitrógeno con solventes secos bajo condiciones
anhidras, a menos que se diga otra cosa. Los solventes anhidros
fueron obtenidos por medio del paso de ellos a través de columnas
de alúmina activada comercialmente disponibles. Todos los reactivos
fueron adquiridos con la calidad comercial más alta y utilizados
sin purificación adicional. Las reacciones fueron generalmente
monitoreadas por medio de cromatografía de capa delgada realizada
sobre placas de gel de sílice de 0,25 mm de E. Merck
(60F-254). El gel de sílice de E. Merck (60, tamaño
de partícula 0,040-0,063 mm) fue utilizado para
cromatografía flash en columna. Se llevaron a cabo separaciones por
cromatografía preparativa en capa delgada (PTLC) sobre placas de
gel de sílice de 0,25, 0,50 ó 1 mm de E. Merck
(60F-254). Los puntos de fusión (pf) no están
corregidos y fueron registrados sobre un aparato para punto de
fusión por medio de capilar marca Thomas-Hoover
Unimelt. Las rotaciones ópticas fueron registradas sobre un
polarímetro marca Perkin-Elmer modelo 241. Los
espectros de RMN fueron registrados sobre instrumentos marca Bruker
DRX-600, DRX-500,
AMX-400 o AC-250 y calibrados
utilizando solventes residuales no deuterados como referencia
interna. Todas las marcaciones de átomos de carbono, por ejemplo
C15, se refieren a la numeración de la epotilona A (1) (ver Figura
1). Los espectros IR fueron registrados sobre un espectrómetro
FT-IR serie 1600 de Perkin-Elmer.
Los espectros de masas de alta resolución fueron registrados sobre
un espectrómetro de masas IonSpec marca PerSeptive Biosystems
Voyager^{TM} (MALDI-FTMS) o sobre un
espectrómetro de masas API 100 marca Perkin-Elmer
(ESI).
Una solución de
Pd_{2}(dba)_{3}(CHCl_{3} (3,9 mg, 3,8
\mumol), AsPh_{3} (4,6 mg, 15 \mumol), y CuI (7,2 mg, 38
\mumol) en DMF (desgasificado, 0,5 mL) fue añadida a 25ºC a una
solución de yoduro 15 (10 mg, 19 \mumol) (Nicolaou, K. C., y
colaboradores,, Chem. Eur. J. 2000, 6, 2783-2800) y
estanano 16 (11 mg, 38 Pmol) (Nicolaou, K. C., y colaboradores,
Bioorg. Med. Chem. 1999, 7, 665-697) en DMF
(desgasificado, 0,5 mL), y la solución resultante fue agitada
durante 2 horas. Se añadió agua (10 mL), y se extrajo la mezcla con
EtOAc (3 (10 mL). La fase orgánica combinada fue lavada con agua (30
mL), salmuera (30 mL), y secada (Na_{2}SO_{4}). Después de la
evaporación de los volátiles, se purificó el residuo por medio de
cromatografía en columna (sílice, hexanos:EtOAc 2:1 (1:1) para
producir epotilona 3 como un sólido de color blanco (7,2 mg, 72%);
TLC Rf = 0.29 (sílice, hexanos:EtOAc 1:1);
[\alpha]_{D}22 -53 (c 0,51, CH_{2}Cl_{2}); IR
(película) v_{max} 3472 (br), 2967, 2920, 1731, 1684, 1461, 1420,
1378, 1249, 1143, 1032, 973, 879, 732, 667 cm^{-1};
MALDI-FTMS m/z 562,2267 (MNa^{+}), calculado para
C_{27}H_{41}NO_{6}S_{2}Na 562,2267.
Alcohol 23. A una solución de ciclopropil
alcohol 22 (4,08 g, 24 mmol) (Charette, A. B.; y colaboradores, J.
Am. Chem. Soc. 1998, 120, 11943-11952) en DMF (40
mL) se le añadió hidruro de sodio (1,45 g, 36 mmol, 60% en aceite
mineral) en porciones con agitación a 0ºC. Después de agitar durante
0,5 h a 25ºC, se enfrió la mezcla a 0ºC, se añadió bromuro de
bencilo (4,3 mL, 36 mmol) durante 2 min, y se continuó la agitación
durante 12 h a 25ºC. La reacción fue terminada con NH_{4}Cl
(saturado, 50 mL), se extrajo la mezcla con EtOAc (3 (50 mL) y se
lavó el extracto combinado con salmuera (2 (100 mL), se lo secó con
(Na_{2}SO_{4}) y se evaporó. Se disolvió el residuo en
CH_{2}Cl_{2}:MeOH 4:1 (60 mL), y se ozonizó la solución (100
L/h, aproximadamente 5 g O_{3}/h) a -78ºC durante 21 min.
(NOTA: Se deben evitar períodos de reacción más largos para
prevenir oxidación del bencil éter hasta el benzoato
correspondiente). Se removió el exceso de ozono por medio de un
flujo copioso con N_{2} durante 1 min, y luego se añadió
NaBH_{4} (2,75 g, 73 mmol) en pequeñas porciones
(PRECAUCIÓN! Exotérmico!) seguido por metanol (20 mL). Se
calentó la mezcla a 25ºC durante 1 hora, y se paró la reacción por
medio de la adición de NH_{4}Cl (saturado, 20 mL). Se extrajo la
mezcla con CH_{2}Cl_{2} (2 (50 mL), y se lavó el extracto
combinado con salmuera (100 mL), se secó (Na2SO4) y evaporó. Se
purificó el residuo por medio de cromatografía flash (sílice,
hexanos:EtOAc 5:2) para producir 23 como un aceite de color
amarillo (5,07 g, 89%). TLC Rf = 0,20 (sílice, hexanos:EtOAc 3:1);
[\alpha]_{D}22 -7,5 (c 1,76, CHCl_{3}); IR (película)
v_{max} 3390 (br), 2933, 2859, 1452, 1070, 739, 698 cm^{-1};
MALDI-FTMS m/z 257,1519 (MNa^{+}), calculado para
C_{15}H_{22}O_{2}Na 257,1512.
Yoduro 24. A una solución de ciclopropil
alcohol 23 (10,08 g, 43,0 mmol) en CH_{2}Cl_{2} seco (100 mL) a
0ºC se le añadió cloruro de metanosulfonilo (4,2 mL, 54 mmol)
seguido por trietilamina (9,0 mL, 65 mmol) gota a gota. Empezó a
formarse inmediatamente un precipitado blanco. Se agitó la mezcla a
25ºC durante 1 hora, luego se añadieron NH_{4}Cl (saturado, 50
mL) y agua (50 mL) y se separaron las fases. Se extrajo la fase
acuosa con EtOAc (100 mL), y se lavó la fase orgánica combinada con
salmuera, se la secó (Na_{2}SO_{4}) y evaporó. Se disolvió el
residuo en acetona seca (200 mL), y s añadió yoduro de sodio (19,3
g, 129 mmol). Se sometió a reflujo a la solución inicialmente casi
clara durante 40 min, durante los cuales se formó un precipitado
blanco. Se añadió agua (100 mL) y se extrajo la mezcla con éter (500
+ 250 mL). Se secó el extracto combinado y se lo evaporó, y se
purificó el residuo por medio de cromatografía flash (sílice,
hexanos:EtOAc 5:1) para producir 24 como un aceite incoloro (14,16
g, 95%). TLC Rf= 0,66 (sílice, hexanos:EtOAc 5:1);
[\alpha]_{D}22 -16 (c 2,05, CHCl_{3}); IR (película)
v_{max} 2916, 2848, 1453, 1217, 1098, 1073, 735, 697 cm^{-1};
ESI-MS m/z 367 (MNa^{+}), calculado para
C_{15}H_{21}IONa 367.
Hidrazona 26. Se preparó una solución de
LDA por medio de la adición de n-BuLi (13,1 mL, 21,0
mmol, 1,6 M en hexanos) a diisopropilamina (2,94 mL, 21,0 mmol) en
THF (10 mL) a -78ºC, luego se calentó la solución a 0ºC, y se agitó
durante 10 min. A esta solución de LDA se le añadió propionaldeído
SAMP hidrazona 25 (3,32 g, 19,5 mmol) (Nicolaou, K. C., y
colaboradores, J. Am. Chem. Soc. 1997, 119,
7974-7991; Enders, D. Aymmetric Synth. 1984, 3,
275-339; y Enders, D., y colaboradores, Synthesis
1996, 1403-1418), y se agitó la mezcla durante 6 h
a 0ºC, durante las cuales se formó un precipitado de color blanco.
Se enfrió la mezcla a -98ºC (baño de MeOH/N_{2}(I)) y se
añadió una solución de yoduro 24 (5,16 g, 15,0 mmol) en THF (20 mL)
durante 0,5 horas. Se le permitió a la mezcla de reacción
calentarse hasta -10ºC durante 14 horas, y luego se detuvo la
reacción con NH_{4}Cl (saturado, 10 mL). Se extrajo la mezcla con
EtOAc (100 mL + 2 (50 mL), se secó el extracto combinado (Na2SO4) y
se evaporó, y se purificó el residuo por medio de cromatografía
flash (sílice, hexanos:EtOAc 6:1 (4:1) para producir hidrazona 26
como un aceite de color amarillo (4,88 g, 84%). TLC Rf = 0.38
(sílice, hexanos:EtOAc 5:1); [\alpha]_{D}22 -61 (c 1,45,
CHCl_{3}); IR (película) V_{max} 2926, 1454, 1097, 736, 697
cm^{-1}; MALDI-FTMS m/z 387,3008 (MH^{+}),
calculado para C_{24}H_{39}N_{2}O_{2} 387,3006.
Aldehído 17. Se calentó una solución de
hidrazona 26 (3,82 g, 9,9 mmol) en yodometano (10 mL) a 60ºC (con
condensador de reflujo) durante 3 horas, y luego se enfrió hasta
25ºC. Se evaporó el exceso de yodometano y se removieron las trazas
con bomba de vacío de aceite. Se agitó vigorosamente el jarabe
residual de color Amarillo con HCl 3 N (190 mL) y pentano (190 mL)
durante 3 h a 25ºC, se separaron las fases, y se extrajo la fase
acuosa con pentano (100 mL). Se secó la fase orgánica combinada
(Na_{2}SO_{4}, NaHCO_{3}) y se la evaporó para producir
aldehído 17 como un aceite de color amarillo (2,38 g, 88%),
[\alpha]_{D}22 +2 (c 1,3, CHCl_{3}); IR (película)
v_{max} 2931, 2856, 1724, 1454, 1095, 1074, 736, 698 cm^{-1};
MALDI-FTMS m/z 297,1830 (MNa^{+}), calculado para
C_{18}H_{26}O_{2}Na 297,1825.
Debido a la inestabilidad de la configuración
con C8 (numeración de la epotilona), se debe utilizar el aldehído
inmediatamente en la siguiente etapa. Se estimó el dr con C8 de la
siguiente manera: Se trató una muestra de 17 con un exceso de
NaBH_{4} en metanol durante 10 min. Se detuvo la reacción con
NH_{4}Cl (saturado), se extrajo la mezcla con EtOAc, y se secó el
extracto (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó. Se trató el residuo con
(R)-(-)-MTPACI (2-3 equivalentes),
un exceso de trietilamina y 4-DMAP en
CH_{2}Cl_{2} durante 3 horas. La purificación por medio de TLC
preparativa produjo una muestra del éster (S)-MTPA,
que por medio de análisis de RMN ^{1}H mostró un dr = 97:3, con
la estereoquímica absoluta correcta con C8 como el isómero principal
(Tsuda, M., y colaboradores, J. Org. Chem. 2000, 65,
1349-1352). Se obtuvieron resultados análogos por
medio del uso de (S)-(+)-MTPACI.
Producto de Aldol 27. Se preparó una
solución de LDA por medio de la adición de n-BuLi
(7,5 mL, 12 mmol, 1,6 M en hexanos) a diisopropilamina (1,68 mL, 12
mmol) en THF (12 mL) a -78ºC, luego se calentó brevemente la
solución a 0ºC, y finalmente se enfrió nuevamente a -78ºC. Se añadió
gota a gota una solución de cetona 19 (4,63 g, 11,5 mmol)
(Nicolaou, K. C., y colaboradores, J. Am. Chem. Soc. 1997, 119,
7974-7991) en THF (12 mL) durante 2 min, y se agitó
la mezcla durante 1 h a -78ºC y luego durante 0.5 h a -40ºC. Se
enfrió nuevamente a -78ºC, y se añadió una solución de aldehído 17
(1,37 g, 5,0 mmol) en THF (25 mL), preenfriada a -78ºC, a través de
una cánula durante 1 min, teniendo cuidado de garantizar un
calentamiento mínimo durante la transferencia. Se agitó la mezcla
durante 5 min, y se detuvo luego la reacción por medio de una
inyección rápida de una solución de AcOH (1,4 mL) en THF (4,2 mL).
Después de 5 min a -78ºC, se calentó la mezcla hasta 25ºC y se la
repartió entre NH_{4}Cl (saturado, 50 mL) y éter (50 mL). Se
extrajo la fase acuosa con éter (2 (50 mL), se secó el extracto
combinado (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó, y se purificó el residuo
por medio de cromatografía flash (sílice, hexanos:éter 20:1 ( 6:1)
para producir cetona recuperada 19 (1,71 g, 4,25 mmol) seguido por
el producto de aldol 27 en forma diasteroméricamente pura (2,73 g,
81%). TLC Rf = 0.34 (sílice, hexanos:EtOAc 5:1);
[\alpha]_{D}22 -40 (c 1,0, CHCl_{3}); IR (película)
v_{max} 3502 (br), 2954, 2928, 2856, 1681, 1472, 1255, 1098, 836,
776 cm^{-1}; MALDI-FTMS m/z 699,4796 (MNa^{+}),
calculado para C_{39}H_{72}O_{5}Si_{2}Na 699,4816.
Alcohol 28. Se enfrió una solución del
producto de aldol 27 (2,71 g, 4,0 mmol) y
2,6-lutidina (1,40 mL, 12 mmol) en CH_{2}Cl_{2}
(25 mL) hasta -20ºC y luego se añadió gota a gota TBSOTf (1,84 mL,
8,0 mmol). Se agitó la mezcla durante 1 h a -20ºC y se detuvo luego
la reacción por medio de la adición de NH_{4}Cl (saturado, 25
mL). Se calentó la mezcla a 25ºC, se separaron las fases y se
extrajo fase acuosa con CH_{2}Cl_{2} (25 mL) y éter (25 mL). Se
secó la fase orgánica combinada (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó, y
se filtró el residuo a través de un tapón de sílice eluyendo con
hexano:éter 10:1. Se evaporó el filtrado y se disolvió el éter
crudo de sililo resultante (3,14 g, 4,0 mmol, 99%) en THF (40 mL). A
éste se le añadió una solución fría (0ºC) del complejo
HF-piridina (6,4 mL) y piridina (18 mL) en THF (32
mL) a 0ºC (esta solución fue preparada por medio de la adición
lenta del complejo HF-piridina a una solución de
piridina en THF a 0ºC; PRECAUCIÓN!
HF-piridina es altamente corrosivo. La adición de
HF-piridina a la solución de
piridina-THF es altamente exotérmica, y debe ser
hacha con agitación y enfriamiento en baño de hielo para prevenir
salpicaduras), y se agitó la solución resultante a 25ºC durante 4
horas. Se diluyó la mezcla con EtOAc (100 mL), y se la colocó en un
baño de hielo, y se la apagó por medio de la adición cuidadosa de
NaHCO_{3} (saturado, 100 mL) y tanto NaHCO_{3} como sea
necesario para garantizar la neutralización completa
(PRECAUCIÓN! Forma espuma!). Se extrajo la mezcla con EtOAc
(3 (100 mL), y se secó el extracto combinado (Na_{2}SO_{4}) y se
lo evaporó, y se purificó el residuo por medio de cromatografía
flash (sílice, hexanos:EtOAc 5:1) para producir 28 como un aceite
incoloro (2,40 g, 89%). TLC Rf = 0.39 (sílice, hexanos:EtOAc 5:1);
[\alpha]_{D}22 -26 (c 1,1, CHCl_{3}); IR (película)
v_{max} 3458 (br), 2929, 2856, 1693, 1472, 1462, 1255, 1093, 986,
836, 775 cm^{-1}; MALDI-FTMS m/z 699.4807
(MNa^{+}), calculado para C_{39}H_{72}O_{5}Si_{2}Na
699,4816.
Éster 29. Se mezclaron el alcohol 28
(2,40 g, 3,5 mmol), periodinano de Dess-Martin (3,75
g, 8,8 mmol), NaHCO_{3} (0,74 g, 8,8 mmol) y agua (76 \muL, 4,2
mmol) en CH_{2}Cl_{2} (80 mL), y se agitó la suspensión
resultante durante 1 hora. Se diluyó la mezcla con éter (200 mL),
agua (100 mL) y NaHCO_{3} (saturado, 100 mL), y luego se filtró.
Se separaron las fases y se extrajo la fase acuosa con éter (2 (100
mL). Se secó el extracto combinado (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó,
y se filtró el residuo a través de un tapón de sílice eluyendo con
hexanos:EtOAc 6:1. Se evaporó el filtrado y se disolvió el aldehído
crudo resultante (2,15 g, 3,2 mmol, 90%) en una mezcla de THF (80
mL), t-BuOH (145 mL) y
2-metil-2-buteno (25
mL). A esta solución se le añadió una solución de NaH_{2}PO_{4}
(0,95 g, 6,7 mmol) y NaClO_{2} (1,14 g, 10 mmol) en agua (31 mL),
y se agitó la mezcla resultante vigorosamente durante 1 hora. Se
removieron los volátiles por medio de evaporación, y se repartió el
residuo entre EtOAc (100 mL) y salmuera (100 mL). Se separaron las
fases y se extrajo la fase acuosa con EtOAc (3 (100 mL). Se secó el
extracto combinado (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó, y se disolvió el
residuo en DMF (5 mL) y se evaporó nuevamente para remover trazas
de t-BuOH. El ácido crudo así obtenido (2,4 g,
aproximadamente 3,2 mmol >100%,) fue nuevamente disuelto en DMF
(10 mL), al cual se le añadieron 2-(trimetilsilil)etanol
(1,83 mL, 12,7 mmol), EDC (0,92 g, 4,8 mmol), y
4-DMAP (40 mg, 0,33 mmol). Se agitó la suspensión
resultante durante 14 horas, después de las cuales se obtuvo una
solución clara. Se añadió agua (10 mL) y se extrajo la mezcla con
éter (3 (50 mL). Se lavó el extracto combinado con una mezcla de
agua-salmuera (100 + 100 mL), se secó
(Na_{2}SO_{4}) y se evaporó. Se purificó el residuo por medio
de cromatografía flash (sílice, hexanos:EtOAc 10:1) para producir
el éster 29 como un aceite viscoso, de color amarillo pálido (2,08
g, 74%). TLC Rf= 0.57 (sílice, hexanos:EtOAc 10:1);
[\alpha]_{D}22 -33 (c 1,2, CHCl_{3}); IR (película)
v_{max} 2954, 2930, 2856, 1735, 1695, 1472, 1385, 1252, 1090,
988, 836, 776 cm^{-1}; MALDI-FTMS m/z
813-5315 (MNa^{+}), calculado para
C_{44}H_{82}O_{6}Si_{3}Na 813,5311.
Aldehído 30. A una solución de bencil
éter 29 (2,08 g, 2,63 mmol) en EtOH:EtOAc 1:1 (50 mL) se le añadió
Pd(OH)_{2} al 20% sobre carbón (2,1 g, 60% de
humedad), y se hidrogenó la mezcla durante 1 hora. Se filtró
entonces a través de Celite para remover el catalizador, se evaporó
el filtrado, y se evaporó el residuo conjuntamente con benceno para
remover las trazas de EtOH. Se disolvió el alcohol crudo resultante
(1,89 g, aproximadamente 2,6 mmol, >100%) en CH_{2}Cl_{2}
(60 mL), se añadieron periodinano de Dess-Martin
(2,76 g, 6,5 mmol), NaHCO_{3} (0,55 g, 6,5 mmol) y agua (56
\muL, 3,1 mmol), y se agitó la suspensión resultante durante 1
hora. Se diluyó la mezcla con éter (150 mL), agua (75 mL) y
NaHCO_{3} (saturado, 75 mL), y se filtró después. Se separaron
las fases y se extrajo la fase acuosa con éter (2 (75 mL). Se secó
el extracto combinado (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó, y se
purificó el residuo por medio de cromatografía flash (sílice,
hexanos:EtOAc 95:1) para producir aldehído 30 como un aceite
viscoso (1,55 g, 84%). TLC Rf= 0.24 (sílice, hexanos:EtOAc 15:1);
[\alpha]_{D}22 - 47 (c 1,3, CHCl_{3}); IR (película)
v_{max} 2954, 2856, 1734, 1703, 1251, 1173, 1084, 988, 837, 776
cm^{-1}; MALDIFTMS m/z 721.4671 (MNa^{+}), calculado para
C_{37}H_{74}O_{6}Si_{3}Na 721,4685.
Enol éter 31. A una suspensión de
MeOCH_{2}PPh_{3}Cl (3,09 g, 9,0 mmol) en THF (20 mL) a 0ºC se le
añadió NaHMDS (8,5 mL, 8,5 mmol, 1 M en THF) gota a gota. Se
desarrolló un color rojo. Se agitó la mezcla a 0ºC durante 0,5 h y
luego se la enfrió hasta -40ºC. Se añadió una solución de aldehído
30 (2,12 g, 3,0 mmol) en THF (7 mL), y se le permitió a la mezcla
calentarse hasta -10ºC durante 2 horas. Se detuvo la reacción con
NH_{4}Cl (saturado, 15 mL), se separaron las fases, y se extrajo
la fase acuosa con EtOAc (2 (75 mL). Se secó el extracto combinado
(Na_{2}SO_{4}) y se evaporó, y se purificó el residuo por medio
de cromatografía flash (sílice, hexanos:EtOAc 30:1) para producir
enol éter 31 como un aceite viscoso incoloro (1,85 g, 84%, olefina
cis:trans aproximadamente 1:1 por medio de RMN ^{1}H). TLC Rf =
0.23 (sílice, hexanos:EtOAc 30:1); [\alpha]_{D}22 -36 (c
1,2, CHCl_{3}); IR (película) v_{max} 2954, 2930, 2856, 1735,
1695, 1251, 1171, 1105, 988, 836, 776 cm^{-1};
MALDI-FTMS m/z 749.4996 (MNa^{+}), calculado para
C_{39}H_{78}O_{6}Si_{3}Na 749,4998.
Aldehído 32. A una solución de enol éter
31 (847 mg, 1,16 mmol) en dioxano:agua 9:1 (12 mL) se le añadió
piridinio para-toluensulfonato (2,34 g, 9,31 mmol)
y se agitó la mezcla a 70ºC hasta que TLC indicó que se completó la
reacción (6-10 h). Se detuvo luego la reacción con
NaHCO_{3} (saturado, 15 mL), y se extrajo luego la mezcla con
EtOAc (3 (50 mL). Se secó el extracto combinado (Na_{2}SO_{4}) y
se evaporó, y se purificó el residuo por medio de cromatografía
flash (sílice, hexanos:EtOAc 15:1) para producir 32 como un aceite
viscoso incoloro (681 mg, 82%). TLC Rf = 0-29
(sílice, hexanos:EtOAc 15:1); [\alpha]_{D}22 -34 (c 1,0,
CHCl_{3}); IR (película) V_{max} 2954, 2856, 1731, 1695, 1251,
1086, 988, 836, 776 cm^{-1}; MALDI-FTMS m/z
735,4823 (MNa^{+}), calculado para
C_{38}H_{76}O_{6}Si_{3}Na 735,4842.
A una solución brevemente desoxigenada (burbujeo
de Ar) del bromuro de arilo 38 (3,5 mmol) en DMF (3 mL) y
diisopropil amina (2.5 mL) se le añadieron
Pd(PPh_{3})_{2}Cl_{2} (25 mg, 36 \mumol) y CuI
(13 mg, 70 \mumol) bajo atmósfera de Ar(g), y luego se
reemplazó la atmósfera inerte por propino (1 atm, en una redoma).
Se agitó la mezcla a 25ºC durante 3 horas. Durante este tiempo, se
formó un precipitado, y la mezcla de reacción se tornó de color
marrón oscuro. Se añadió agua (15 mL), se extrajo la mezcla con
EtOAc, y se secó el extracto combinado (Na_{2}SO_{4}) y se lo
evaporó. Se obtuvo 1-arilpropino puro por medio de
cromatografía flash (sílice, mezclas de hexano:EtOAc).
Producto del acoplamiento de Sonogashira a
partir de 38. Aceite color marrón (97%); TLC Rf = 0,21 (sílice,
hexanos:EtOAc 5:1); IR (película) v_{max} 2908, 2226, 1567, 1531,
1461, 1431, 1361, 1108, 1008, 832 cm^{-1};
MALDI-FTMS m/z 164.0527 (MH^{+}), calculado para
C_{9}H_{10}NS 164,0528.
Hidroestanilación-yodación
(procedimiento general). Esta es una adaptación del
procedimiento previamente reportado (Betzer, J.-F., y
colaboradores, Tetrahedron Lett. 1997, 38,
2279-2282). A una solución de hexabutilditina (10.1
mL, 20 mmol) en THF seco (40 mL) a -78ºC se le añadió
n-BuLi (12,9 mL, 20 mmol, 1,55 M en hexanos), y se
agitó la solución clara resultante a -40ºC durante 30 min. Se la
trasfirió luego a través de una cánula a una suspensión de CuCN
(0,90 g, 10 mmol) en THF (2 mL) a -78ºC. Se formó una solución color
amarillo claro, y se la agitó durante 5 min a -40ºC antes de
enfriarla nuevamente hasta -78ºC. Luego se añadió metanol seco (23
mL, 0,57 mol) para producir una solución de color rojo, que fue
agitada a -40ºC durante 15 min, después de lo cual se añadió una
solución del arilpropino (5,0 mmol) en THF (5 mL). La solución de
color rojo-naranja fue agitada a -10ºC durante la
noche (algunas de las sales de Cu y/o de Cu^{2+} precipitaron),
luego se la enfrió hasta -20ºC, seguido por la adición de metanol
(10 mL). Después de 15 min a -20ºC, se añadió agua (10 mL), y se
continuó la agitación durante otros 15 min, mientras se calentaba
hasta 25ºC. Se extrajo la mezcla con éter, y se lavó la fase
orgánica con salmuera, se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó. La
cromatográfica flash (sílice, mezclas de hexanos:EtOAc) produjo el
vinilestanano intermedio, que se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (5
mL). Se añadió entonces gota a gota una solución de yodo (1,05
equivalentes) en CH_{2}Cl_{2} (40 mL por g de I_{2}) a esta
solución a 0ºC. Después de las últimas gotas, persistió el color del
I_{2}, y se permitió que la reacción continuara durante otros 5
min a 0ºC. Luego se evaporó el solvente y se disolvió el residuo en
éter. Se añadieron KF (solución en agua 1 M, 3 equivalentes) y
Na_{2}S_{2}O_{3} (saturado, 10 mL por mmol de sustrato), y se
agitó la mezcla durante 15 min a 25ºC durante los cuales se formó un
precipitado de color blanco. Se filtró la mezcla a través de
Celite, y se secó la fase orgánica (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó.
Se purificó el residuo por medio de cromatografía flash (sílice,
mezclas de hexanos:EtOAc) para producir el yoduro de vinilo
deseado.
Yoduro de vinilo 20e. El vinil estanano
intermedio es fácilmente protodesestanilado; por lo tanto, la
cromatografía flash de este intermedio debe ser realizado
utilizando hexanos:EtOAc:Et_{3}N 50:1:1 como eluyente, y el
vinilestanano obtenido contenía otros compuestos de butil estaño.
Siguiendo el procedimiento general, se trató la mezcla con
suficiente I_{2} hasta que persistió el color marrón al final de
la adición (aproximadamente 2 equivalentes de I_{2}). Después de
la cromatografía flash (hexanos:EtOAc 50:1), se obtuvo yoduro de
vinilo 20e como un aceite de color amarillo (74%). TLC Rf= 0,41
(sílice, hexanos:EtOAc 50:1); IR (película) v_{max} 3102, 2923,
1620, 1423, 1300, 1065, 1035, 964, 863, 723, 562 cm^{-1};
MALDI-FTMS m/z 297,9215 (MH^{+}), calculado para
C_{7}H_{9}INS_{2} 297,9216.
Acoplamiento de
Nozaki-Hiyama-Kishi de aldehídos
(34, 40) con vinil estananos (20a-g) (procedimiento
general). A una solución de aldehído 32 brevemente
desgasificada al vacío (107 mg, 0.15 mmol), al yoduro de vinilo
requerido 20 (0,45 mmol), y a la
4-tert-butilpiridina (665 \muL,
4,5 mmol) en DMSO (3 mL) se les añadió CrCl_{2} anhidro (184 mg,
1,5 mmol) y NiCl_{2} anhidro (4 mg, 0,03 mmol). Se agitó la mezcla
a 25ºC durante 3 horas, después de lo cual se añadió otra porción
de yoduro de vinilo (0,45 mmol), y se continuó la agitación durante
3 horas más. Esto fue repetido una vez más, después de lo cual se
continuó la agitación durante la noche. Se detuvo entonces la
reacción con agua (5 mL), se añadió piridina (1 mL) para evitar que
los complejos del producto con Cr fueran extraídos en la fase
acuosa, y se extrajo la mezcla con EtOAc (3 (25 mL). Se lavó el
extracto combinado con salmuera (2 (100 mL), se secó
(Na_{2}SO_{4}) y se evaporó. La cromatografía flash (sílice,
mezclas de hexanos:EtOAc) produjo el producto de acoplamiento, en la
mayoría de los casos en forma inseparable del exceso de
4-tert-butilpiridina.
Producto a partir de 20e y 32. Vidrio
amarillo (78%, aproximadamente mezcla 1:1 de epímeros C15). TLC Rf
=
0,40 (sílice, hexanos:EtOAc 5:1); [\alpha]_{D}22 -28 (c 2,0, CHCl_{3}); IR (película) V_{max} 3416 (br), 2929, 2856, 1732, 1694, 1472, 1251, 1037, 988, 836, 776 cm^{-1}; MALDI-FTMS m/z 906,5021 (MH^{+}), calculado para C_{45}H_{85}NO_{6}S_{2}Si_{3}Na 906,5018.
0,40 (sílice, hexanos:EtOAc 5:1); [\alpha]_{D}22 -28 (c 2,0, CHCl_{3}); IR (película) V_{max} 3416 (br), 2929, 2856, 1732, 1694, 1472, 1251, 1037, 988, 836, 776 cm^{-1}; MALDI-FTMS m/z 906,5021 (MH^{+}), calculado para C_{45}H_{85}NO_{6}S_{2}Si_{3}Na 906,5018.
Desprotección de TBAF (procedimiento
general). El producto de la mezcla del acoplamiento de
Nozaki-Hiyama-Kishi se disolvió en
THF (1,5 mL), y se añadió TBAF (1 M en THF, 0,30 mL, 0,30 mmol) a
0ºC. Después de 1 h a 0ºC, se añadió otra porción de TBAF (0,30 mL,
0,30 mmol), y se agitó la mezcla a 25ºC durante 1 hora. Se detuvo
la reacción con NH_{4}Cl (saturado, 5 mL), y se extrajo la mezcla
con EtOAc (4 (20 mL). Se secó el extracto combinado
(Na_{2}SO_{4}) y se evaporó, y se purificó el residuo por medio
de cromatografía flash (sílice, mezclas de hexanos:EtOAc) para
producir el hidroxi ácido deseado como una mezcla aproximadamente
1:1 de epímeros C15 (inseparable en esta etapa).
Hidroxi ácido 41e. Sólido de color
amarillo (79%, mezcla aproximadamente 1:1 de epímeros C15). TLC Rf=
0,37 (sílice, hexanos:EtOAc 2:1); [\alpha]_{D}22 -23 (c
2,3, CHCl_{3}); IR (película) v_{max} 3356 (br), 2929, 2856,
1712, 1472, 1253, 1085, 1038, 988, 836, 776 cm^{-1};
MALDI-FTMS m/z 806,4282 (MNa^{+}), calculado para
C_{40}H_{73}NO_{6}S_{2}Si_{2}Na 806,4315.
Macrolactonización de Yamaguchi
(procedimiento general). A una solución del hidroxi ácido (95
\mumol) en THF seco (8 ml) a 0ºC se le añadió trietilamina (79
\mul, 0.57 mmol) y cloruro de
2,4,6-triclorobenzoilo (40 \mul, 0,23 mmol).
Después de agitar a 0ºC durante 1 hora, se añadió la solución
resultante durante 2 h a una solución de 4-DMAP (26
mg, 0,21 mmol) en tolueno (20 mL) a 75ºC utilizando una bomba tipo
jeringa. Se continuo la agitación a 75ºC durante otra hora después
de lo cual se evaporó el tolueno a presión reducida. El residuo fue
sometido directamente a cromatografía flash (sílice, mezclas de
hexanos:EtOAc) para producir la macrolactona y su epímero (15R),
fácilmente separable. En todos los casos el epímero (15S) deseado
eluyó después del epímero (15R) menos polar.
Macrolactona 43e. Este producto se aisló
como una mezcla cruda que fue directamente sometida a condiciones
de desililación global (véase más abajo) sin purificación
adicional.
Desililación global (procedimiento
general). Se disolvió la macrolactona en TFA al 20% v/v en
CH_{2}Cl_{2}, y se mantuvo la solución a 25ºC durante 3 horas,
después de lo cual se evaporaron los volátiles sin calentamiento.
Se disolvió el residuo en EtOAc, y se lavó la solución con
NaHCO_{3} (saturado), se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó. La
cromatográfica flash (sílice, mezclas de hexanos:EtOAc) produjo la
epotilona pura.
Epotilona 12. Aceite viscoso (17% a
partir de 41e); TLC Rf = 0,38 (sílice, hexanos:EtOAc 2:1);
[\alpha]_{D}22 -52 (c 0,50, CHCl_{3}); IR (película)
v_{max} 3490 (br), 2933, 1732, 1686, 1255, 1038, 756 cm^{-1};
MALDI-FTMS m/z 538,2666 (MH^{+}), calculado para
C_{28}H_{44}NO_{5}S_{2} 538,2655.
5.000 cápsulas blandas de gelatina, cada una
conteniendo como ingrediente activo 0,05 g de uno de los compuestos
de fórmula I mencionado en los ejemplos anteriores, se preparan de
la siguiente manera:
Composición | ||
ingrediente activo | 250 g | |
Lauroglicol | 2 litros |
Proceso de preparación: Se suspende el
ingrediente activo pulverizado en Lauroglykol® (laurato de propilen
glicol, Gattefossé S.A., Saint Priest, Francia) y se muele en un
pulverizador húmedo hasta un tamaño de grano aproximadamente de 1 a
3 \mum. Se introducen porciones cada una conteniendo 0,419 g de la
mezcla en cápsulas blandas de gelatina por medio de una máquina
llenadora de cápsulas.
La Figura 1 muestra las estructuras de
epotilonas seleccionadas naturales y diseñadas. Los cajones de color
gris indican los compuestos sintetizados en este estudio.
La Figura 4 muestra el análisis retrosintético
del análogo de trans-ciclopropil epotilona B
(12).
La Figura 5 muestra la construcción del aldehído
32. Reactivos y condiciones: (a) Ver Nicolaou, K. C., y
colaboradores, ChemBioChem 2001, 2, 69-75;
Charette, A. B.; y colaboradores, J. Am. Chem. Soc. 1998, 120,
11943-11952; (b) NaH (1,5 equivalentes), BnBr (1,5
equivalentes), DMF, 0 \rightarrow 25ºC, 12 h; (c) O_{3},
CH_{2}Cl_{2}:MeOH 4:1, -78ºC, 21 min; luego NaBH_{4} (3,0
equivalentes), -78 \rightarrow 25ºC, 1 h, 89% para 2 etapas; (d)
MsCl (1,3 equivalentes), Et_{3}N (1,5 equivalentes),
CH_{2}Cl_{2}, 25ºC , 1 h; (e) NaI (3,0 equivalentes), acetona,
reflujo, 40 min, 95% para 2 etapas; (f) LDA (1,4 equivalentes), 25
(1,3 equivalentes), THF, 0ºC, 6 h; luego 24, -98 \rightarrow
-10ºC, 14 h, 84%; (g) MeI, 60ºC, 3 h; (h) HCl 3 N:pentano 1:1, 25ºC,
3 h, 88% para 2 etapas; (i) LDA (2,4 equivalentes), 19 (2,3
equivalentes), THF, -78ºC, 1 h; luego -40ºC, 0,5 h; luego 17 a
-78ºC, 5 min, 81%; (j) TBSOTf (2,0 equivalentes),
2,6-lutidina (3,0 equivalentes), PH_{2}Cl_{2},
-20ºC, 1 h; (k) HF-py, piridina, THF, 25ºC, 4 h, 89%
para 2 etapas; (I) DMP (2,5 equivalentes), NaHCO_{3} (2,5
equivalentes), H_{2}O, CH_{2}Cl_{2}, 25ºC, 1 h; (m)
NaClO_{2} (3,1 equivalentes), NaH_{2}PO_{4} (2,1
equivalentes),
2-metil-2-buteno (74
equivalentes), t-BuOH, THF, H_{2}O, 25ºC, 1 h; (n)
2-(trimetilsilil)etanol (4,0 equivalentes), EDC (1,5
equivalentes), 4-DMAP (0,1 equivalentes), DMF, 25ºC,
14 h, 74% para 3 etapas; (o) 20% Pd(OH)_{2}/C,
H_{2} (1 atm), EtOH:EtOAc 1:1, 25ºC, 1 h; (p) DMP (2,5
equivalentes), NaHCO_{3} (2,5 equivalentes), H_{2}O,
CH_{2}Cl_{2}, 25ºC, 1 h, 84% para 2 etapas; (q)
MeOCH_{2}PPh_{3}Cl (3,0 equivalentes), NaHMDS (2,8
equivalentes), THF, -40 \rightarrow -10ºC, 2 h, 84%; (r) PPTS (8,0
equivalentes), dioxano:H_{2}O 9:1, 70ºC, 6 h, 82%,
4-DMAP = 4-(dimetilamino)piridina; DME =
1,2-dimetoxi-etano; DMP =
Periodinano de Dess-Martin; EDC = clorhidrato de
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida;
HF-py = complejo de fluoruro de
hidrógeno-piridina; NaHMDS = hexametildisilazida
sódica; PPTS = piridinio para-toluensulfonato; TMSE
= 2-trimetilsililetilo.
La Figura 6 muestra la construcción de yoduros
de vinilo 20e, Reactivos y condiciones: (b)
Pd(PPh_{3})_{2}Cl_{2} (0,01 equivalentes), CuI
(0,02 equivalentes), HCéCCH_{3} (1 atm), DMF,
i-Pr_{2}NEt, 25ºC, 3 h, 35: 96%; (c) (i)
n-BuLi (4,0 equivalentes),
(n-Bu_{3}Sn)_{2} (4,0 equivalentes), CuCN
(2,0 equivalentes), MeOH, THF, -10ºC, 12 h; (ii) I_{2} (1,05
equivalentes), CH_{2}Cl_{2}, 0ºC, 5 min, 20e: 37% a partir de
37; TrCl = cloruro de trifenilmetilo; 4-DMAP =
4-(dimetilamino)piridina; MOMCI = clorometil metil éter,
La Figura 7 es la síntesis de análogos de
epotilona 12, Reactivos y condiciones: (a) CrCl_{2} (10
equivalentes), NiCl_{2} (0,2 equivalentes),
4-t-butilpiridina (30 equivalentes),
20 (3,0 equivalentes), DMSO, 25ºC, durante la noche; (b) TBAF (4,0
equivalentes), THF, 0ºC, 1 h; luego 25ºC, 1 h; (c) Et_{3}N (6,0
equivalentes), 2,4,6-triclorobenzoilcloruro (2,4
equivalentes), 41 ó 42, THF, 0ºC, 1 h; luego 4-DMAP
(2,2 equivalentes), tolueno, 75ºC, 3 h; (d) TFA al 20% v/v en
CH_{2}Cl_{2}, 25ºC, 3 h (excepto 43d); (e) Estimado por medio
de RMN ^{1}H; (f) Desprotección de 43d: TMSBr (10 equivalentes),
4\ring{A} MS, CH_{2}Cl_{2}, -30ºC, 1 h; luego TFA al 20% v/v
en CH_{2}Cl_{2}, 25ºC, 3 h, TBAF = fluoruro de tetrabutilamonio;
4-DMAP = 4-(dimetilamino)piridina; TFA =
ácido trifluoroacético; TMSBr = bromuro de trimetilsililo; MS =
tamices moleculares.
La Figura 8 ilustra una tabla que divulga la
citotoxicidad de las epotilonas 1 a 14 y el paclitaxel contra las
células humanas de carcinoma de ovario 1A9 y las líneas de células
mutantes de \beta-tubulina seleccionadas con
paclitaxel o epotilona A. Los efectos antiproliferativos de los
compuestos analizados contra los clones madre 1A9 y los clones
resistentes a la droga seleccionada entre paclitaxel y epotilona
(PTX10, PTX22 y A8, respectivamente) fueron evaluados en un ensayo
de inhibición de crecimiento de 72 h utilizando el ensayo SRB
(sulforhodamina-B) (Skehan, P.; y colaboradores, J.
Natl. Cancer Inst. 1990, 82, 1107-1112). Los valores
de IC_{50} para cada compuesto se dan en nM y representan el
promedio de 3-9 experimentos independientes con el
error estándar del promedio. La resistencia relativa (RR) se calcula
como un valor de IC_{50} para cada sublínea resistente dividida
por aquel para la línea celular madre (1A9). CP = ciclopropilo; py =
cadena lateral de 5-metilpiridina; pyOH = cadena
lateral de 5-hidroximetilpiridina; 5tmpy = cadena
lateral de 5-tiometilpiridina; 6tmpy = cadena
lateral de 6-tiometilpiridina; tmt = cadena lateral
de 2-tiometil tiazol.
La Figura 9 ilustra una tabla que divulga la
potencia y la citotoxicidad de la polimerización de la tubulina de
las epotilonas 1-8, 10-14, y del
paclitaxel contra líneas celulares humanas de cáncer epidermoide.
(a) El grado de polimerización de la tubulina de porcino (TP) por
parte de 4 \muM de un compuesto se cuantificó con relación al
efecto de 25 \muM de epotilona B (que se definió como el 100%)
como se describió (Nicolaou, K. C.; y colaboradores, Chem. Biol.
2000, 7, 593-599). (b) La concentración de la droga
requerida para máxima inhibición del crecimiento celular (los
valores de IC_{50} se dan en nM) se evaluó después de un período
de exposición a la droga de 96 horas por medio de la cuantificación
de la masa celular utilizando un método de coloración de la
proteína como se describió (Meyer, T.; y colaboradores, Int. J.
Cancer 1989, 43, 851-856), KB-31:
células epidermoides sensibles al Taxol®, KB-8511:
células epidermoides resistentes al Taxol® (debido a la
sobreexpresión de Pgp). La resistencia relativa (RR) se calculó por
medio de la división del valor de IC_{50} para la línea celular
resistente por aquel de la línea celular sensible. (c) Los datos de
la ref. 3 (los valores del % de TP para Taxol®, Epo A y Epo B
fueron 49, 69 y 90, respectivamente). CP = ciclopropilo; py =
cadena lateral de 5-metilpiridina; pyOH = cadena
lateral de 5-hidroximetilpiridina; 5tmpy = cadena
lateral de 5-tiometilpiridina; 6tmpy = cadena
lateral de 6-tiometilpiridina; tmt = cadena lateral
de 2-tiometil tiazol.
La Figura 10 ilustra una tabla que divulga las
afinidades de enlazamiento de los análogos de epotilona con el
sitio de enlazamiento taxoide de los microtúbulos. (a) El
enlazamiento de los diferentes ligandos con el sitio taxoides de
los microtúbulos se midió por medio del desplazamiento de un
derivado fluorescente de Taxol® (Flutax-2) a partir
de su sitio de enlazamiento (Figura 2) (Diaz, J. F.; y
colaboradores, J. Biol. Chem. 2000, 275,
26265-26276). La isoterma de desplazamiento del
Flutax-2 de cada ligando se midió al menos dos veces
con un lector de fluorescencia de microplacas de polarización en un
procedimiento modificado a partir del reporte previo (Andreu, J.
M.; Barasoain, I. Biochemistry 2001, 40,
11975-11984). Se emplearon los microtúbulos
entrelazados estabilizados que habían sido almacenados en nitrógeno
líquido. La constante de enlazamiento del ligando de referencia
Flutax-2 se midió por medio de centrifugación y
anisotropía de fluorescencia, a cada temperatura (Diaz, J. F.; y
colaboradores, J. Biol. Chem. 2000, 275,
26265-26276). El valor de referencia resultante fue
de 2,2 (10^{7} M^{-1} a 37ºC. (b) Las constantes de equilibrio
de disociación (Kd) se dan en nM. (c) Los cambios de energía libre
de enlazamiento estándar (DG^{0}_{app}) se dan en kJ
mol^{-1}.
\vskip1.000000\baselineskip
Este listado de referencias citado por el
solicitante es únicamente para conveniencia del lector. No forma
parte del documento europeo de la patente. Aunque se ha tenido gran
cuidado en la recopilación, no se pueden excluir los errores o las
omisiones y la OEP rechaza toda responsabilidad en este sentido.
\bullet J. F. W. MCOMIE. Protective
Groups in Organic Chemistry. Plenum Press, 1973
[0012]
\bullet T. W. GREENE. Protective Groups
in Organic Synthesis. Wiley, 1981 [0012]
\bullet The Peptides. Academic Press,
1981, vol. 3 [0012]
\bullet Methoden der organischen Chemie.
Methods of organic chemistry. Georg Thieme Verlag,
1974, vol. 15 [0012]
\bullet Aminosäuren, Peptide, Proteine. H.-D.
JAKUBKE; H. JESCHEIT. Amino acids, peptides, proteins.
Verlag Chemie, 1982 [0012]
\bullet Chemie der Kohlenhydrate:
Monosaccharide und Derivate. JOCHEN LEHMANN. Chemistry of
arbohydrates: monosaccharides and derivatives. Georg Thieme
Verlag, 1974 [0012]
\bulletNICOLAOU, K. C. y
colaboradores, Angew. Chem., 1998, vol. 110,
2120-2153 [0016]
\bulletAngew. Chem. Int. Ed.,
1998, vol. 37, 2014-2045 [0016]
\bulletNICOLAOU, K. C. y
colaboradores, Tetrahedron, 2002, vol. 58,
6413-6432 [0016] [0024]
\bulletNICOLAOU, K. C. y
colaboradores, Angew. Chem., 1998, vol. 110,
89-92 [0016]
\bulletAngew. Chem. Int. Ed.,
1998, vol. 37, 84-87 [0016]
\bulletNICOLAOU, K. C. y
colaboradores, Chem. Biol., 2000, vol. 7,
593-599 [0016] [0022] [0026] [0079]
\bulletNICOLAOU, K. C. y
colaboradores, J. Am. Chem. Soc, 2001, vol. 123,
9313-9323 [0016] [0018]
\bulletNICOLAOU, K. C. y
colaboradores, ChemBioChem., 2001, vol. 2,
69-75 [0016] [0024]
\bulletJOHNSON, J. A. y colaboradores,
Org. Lett., 2000, vol. 2, 1537-1540
[0016] [0024]
\bulletNICOLAOU, K. C. y
colaboradores, Bioorg. Med. Chem., 1999, vol. 7,
665-697 [0017] [0048]
\bulletNICOLAOU, K. C. y
colaboradores, Chem. Eur. J., 2000, vol. 6,
2783-2800 [0017] [0048]
\bulletNICOLAOU, K, C. y
colaboradores, J. Am. Chem. Soc., 2001, vol. 123,
9313-9323 [0018]
\bulletCHARETTE, A. B. y
colaboradores, J. Am. Chem. Soc, 1998, vol. 120,
11943-11952 [0018] [0049]
\bulletNICOLAOU, K. C. y
colaboradores, Chem. Eur. J., 27 June 2000,
83-2800 [0018]
\bulletNICOLAOU, K. C. y
colaboradores, J. Am. Chem. Soc., 2001, vol. 123,
9313-9323 [0018] [0021] [0024]
\bulletTAKAI, K. y colaboradores,
Tetrahedron Lett., 1983, vol. 24,
5281-5284 [0018] [0021]
\bulletJIN, H. y colaboradores, J.
Am. Chem. Soc., 1986, vol. 108, 5644-5646
[0018]
\bulletINANAGA, J. y colaboradores,
Bull. Chem. Soc. Jpn., 1979, vol. 52,
1989-1993 [0018]
\bulletMULZER, J. y colaboradores,
Synthesis, 1992, 215-228 [0018]
[0021]
\bulletNICOLAOU, K. C. y
colaboradores, J. Am. Chem. Soc., 1997, vol. 119,
7974-7991 [0018] [0051]
\bulletCHARETTE, A. B y colaboradores,
J. Am. Chem. Soc., 1998, vol. 120,
11943-11952 [0019]
\bulletNICOLAOU, K. C. y
colaboradores, J. Am. Chem. Soc, 1997, vol. 119,
7974-7991 [0019] [0054]
\bulletENDERS, D. Aymmetric
Synth., 1984, vol. 3, 275-339 [0019]
[0051]
\bulletENDERS, D.; KLATT, M.
Synthesis, 1996, 1403-1418 [0019]
\bulletTSUDA, M.; ENDO, T.;
KOBAYASHI, J. J. Org. Chem., 2000, vol. 65,
1349-1352 [0019]
\bulletNICOLAOU, K, C. y
colaboradores, Chem. Eur, J., 2000, vol. 6,
2783-2800 [0019]
\bulletELLINGBOE, J. W. y
colaboradores, J. Med. Chem., 1994, vol. 37,
542-550 [0020]
\bulletBETZER, J.-F. y colaboradores,
Tetrahedron Lett., 1997, vol. 38,
2279-2282 [0020] [0062]
\bulletJ. Am. Chem. Soc, 1986,
vol. 108, 5644-5646 [0021]
\bulletINANAGA, J. y colaboradores,
Bull. Chem, Soc. Jpn., 1979, vol. 52,
1989-1993 [0021]
\bulletGIANNAKAKOU, P. y
colaboradores, J. Biol. Chem., 1997, vol. 272,
17118-17125 [0022] [0023]
\bulletGIANNAKAKOU, P. y
colaboradores, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 2000,
vol. 97, 2904-2909 [0022] [0023]
\bulletSKEHAN, P. y colaboradores,
J. Natl. Cancer Inst., 1990, vol. 82,
1107-1112 [0022] [0078]
\bulletMEYER, T. y colaboradores,
Int. J. Cancer, 1989, vol. 43, 851-856
[0022] [0079]
\bulletNICOLAOU, K. C. y
colaboradores, ChemBioChem, 2001, vol. 2,
69-75 [0023] [0075]
\bulletANDREU, J. M.;
BARASOAIN, I. Biochemistry, 2001, vol. 40,
11975-11984 [0025] [0080]
\bulletSOUTO, A. A. y colaboradores,
Angew. Chem. Int. Ed, Engl., 1995, vol. 34,
2710-2712 [0025]
\bulletDIAZ, J. F. y colaboradores,
J. Biol. Chem., 2000, vol. 275,
26265-26276 [0025] [0080] [0080]
\bulletABAL, M. y colaboradores,
Cell. Motil. Cytoskeleton, 2001, vol. 49,
1-15 [0025]
\bulletNICOLAOU, K. C y colaboradores,
Angew. Chem., 1997, vol. 109,
2181-2187 [0026]
\bulletAngew, Chem. Int. Ed. Engl.,
1997, vol. 36, 2097-2103 [0026]
\bulletSINHA, S. C. y colaboradores,
ChemBioChem, 2001, vol. 2, 656-665
[0026]
\bulletENDERS, D. y colaboradores,
Synthesis, 1996, 1403-1418 [0051]
\bulletTSUDA, M. y colaboradores,
J. Org. Chem., 2000, vol. 65,
1349-1352 [0053]
\bulletCHARETTE, A. B. y
colaboradores, J. Am. Chem. Soc., 1998, vol. 120,
11943-11952 [0075]
Claims (4)
1. Un compuesto representado por medio de la
fórmula I:
2. Una composición farmacéutica que contiene un
excipiente farmacéuticamente aceptable o diluyente y un compuesto
de acuerdo a la reivindicación 1, o un ácido farmacéuticamente
aceptable o una sal de adición básica del mismo, cuando sea
posible.
3. El uso de un compuesto de acuerdo a la
reivindicación 1 para la preparación de un medicamento para el
tratamiento de una enfermedad proliferativa.
4. Un proceso para la preparación de un
compuesto de acuerdo a la reivindicación 1,
en donde un compuesto de la fórmula VI
en donde X es CH_{2} y R
es
y PG es un grupo de protección para
la función
hidroxi,
en una primera etapa se condensa por medio de
una reacción de esterificación, opcionalmente en presencia de un
catalizador,
y en una segunda etapa se desprende el grupo de
protección suministrando de este modo una lactona de fórmula I.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US40053502P | 2002-08-02 | 2002-08-02 | |
US400535P | 2002-08-02 | ||
US48093303P | 2003-06-24 | 2003-06-24 | |
US480933P | 2003-06-24 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
ES2297189T3 true ES2297189T3 (es) | 2008-05-01 |
Family
ID=31720540
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
ES03747872T Expired - Lifetime ES2297189T3 (es) | 2002-08-02 | 2003-08-01 | Derivados de epotilona. |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US7169930B2 (es) |
EP (1) | EP1546152B1 (es) |
JP (1) | JP4276171B2 (es) |
CN (1) | CN100439374C (es) |
AT (1) | ATE381569T1 (es) |
AU (1) | AU2003266961A1 (es) |
BR (1) | BR0313198A (es) |
CA (1) | CA2494259A1 (es) |
DE (1) | DE60318224T2 (es) |
ES (1) | ES2297189T3 (es) |
PT (1) | PT1546152E (es) |
WO (1) | WO2004014919A1 (es) |
Families Citing this family (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE69734362T2 (de) * | 1996-12-03 | 2006-07-20 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Synthese von epothilonen, zwischenprodukte dazu, analoga und verwendungen davon |
US6660758B1 (en) * | 1996-12-13 | 2003-12-09 | The Scripps Research Institute | Epothilone analogs |
US20020058286A1 (en) * | 1999-02-24 | 2002-05-16 | Danishefsky Samuel J. | Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof |
SI1767535T1 (sl) | 2002-08-23 | 2010-03-31 | Sloan Kettering Inst Cancer | Sinteza epotilonov njihovih intermediatov analogov in uporaba le teh |
US7649006B2 (en) | 2002-08-23 | 2010-01-19 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof |
MXPA06002393A (es) * | 2003-09-02 | 2006-06-20 | Novartis Ag | Tratamiento de cancer con epotilomas. |
GB0405898D0 (en) | 2004-03-16 | 2004-04-21 | Novartis Ag | Organic compounds |
US20060121511A1 (en) | 2004-11-30 | 2006-06-08 | Hyerim Lee | Biomarkers and methods for determining sensitivity to microtubule-stabilizing agents |
EP1856255A4 (en) | 2005-02-11 | 2010-01-27 | Univ Southern California | METHODS OF EXPRESSING PROTEINS WITH DISULFIDE BRIDGES |
EP1959952A4 (en) * | 2005-11-22 | 2011-02-23 | Scripps Research Inst | CHEMICAL SYNTHESIS OF A VERY POWERFUL EPOTHILONE |
WO2007130501A2 (en) * | 2006-05-01 | 2007-11-15 | University Of Southern California | Combination therapy for treatment of cancer |
WO2010056901A2 (en) | 2008-11-13 | 2010-05-20 | University Of Southern California | Method of expressing proteins with disulfide bridges with enhanced yields and activity |
EA035193B1 (ru) | 2010-05-18 | 2020-05-14 | Серулин Фарма Инк. | Композиции и способы лечения аутоиммунных и других заболеваний |
US9717803B2 (en) | 2011-12-23 | 2017-08-01 | Innate Pharma | Enzymatic conjugation of polypeptides |
US10132799B2 (en) | 2012-07-13 | 2018-11-20 | Innate Pharma | Screening of conjugated antibodies |
WO2014072482A1 (en) | 2012-11-09 | 2014-05-15 | Innate Pharma | Recognition tags for tgase-mediated conjugation |
WO2014140300A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Innate Pharma | Solid phase tgase-mediated conjugation of antibodies |
WO2014202773A1 (en) | 2013-06-20 | 2014-12-24 | Innate Pharma | Enzymatic conjugation of polypeptides |
JP6744212B2 (ja) | 2013-06-21 | 2020-08-19 | イナート・ファルマ・ソシエテ・アノニムInnate Pharma Pharma S.A. | ポリペプチドの酵素的結合 |
WO2019092148A1 (en) | 2017-11-10 | 2019-05-16 | Innate Pharma | Antibodies with functionalized glutamine residues |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6380394B1 (en) * | 1996-12-13 | 2002-04-30 | The Scripps Research Institute | Epothilone analogs |
US6441186B1 (en) * | 1996-12-13 | 2002-08-27 | The Scripps Research Institute | Epothilone analogs |
US6380395B1 (en) * | 1998-04-21 | 2002-04-30 | Bristol-Myers Squibb Company | 12, 13-cyclopropane epothilone derivatives |
DE60229143D1 (en) * | 2001-08-23 | 2008-11-13 | Novartis Ag | Cyclopropyl und cyclobutyl epothilon analoge |
WO2003026744A1 (en) * | 2001-09-25 | 2003-04-03 | Alcon, Inc. | The use of epothilones and analogs in conjunction with ophthalmic surgery |
-
2003
- 2003-08-01 BR BR0313198-0A patent/BR0313198A/pt not_active IP Right Cessation
- 2003-08-01 PT PT03747872T patent/PT1546152E/pt unknown
- 2003-08-01 AU AU2003266961A patent/AU2003266961A1/en not_active Abandoned
- 2003-08-01 CN CNB038186446A patent/CN100439374C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2003-08-01 DE DE60318224T patent/DE60318224T2/de not_active Expired - Fee Related
- 2003-08-01 CA CA002494259A patent/CA2494259A1/en not_active Abandoned
- 2003-08-01 AT AT03747872T patent/ATE381569T1/de not_active IP Right Cessation
- 2003-08-01 ES ES03747872T patent/ES2297189T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-08-01 EP EP03747872A patent/EP1546152B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-08-01 WO PCT/EP2003/008554 patent/WO2004014919A1/en active Search and Examination
- 2003-08-01 JP JP2004526852A patent/JP4276171B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2003-08-04 US US10/634,537 patent/US7169930B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2006
- 2006-08-28 US US11/511,610 patent/US20060293527A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
PT1546152E (pt) | 2008-03-12 |
BR0313198A (pt) | 2005-07-12 |
CN1675220A (zh) | 2005-09-28 |
EP1546152A1 (en) | 2005-06-29 |
CN100439374C (zh) | 2008-12-03 |
US7169930B2 (en) | 2007-01-30 |
JP4276171B2 (ja) | 2009-06-10 |
JP2006503814A (ja) | 2006-02-02 |
US20060293527A1 (en) | 2006-12-28 |
DE60318224T2 (de) | 2009-01-29 |
DE60318224D1 (de) | 2008-01-31 |
AU2003266961A1 (en) | 2004-02-25 |
US20040072870A1 (en) | 2004-04-15 |
CA2494259A1 (en) | 2004-02-19 |
ATE381569T1 (de) | 2008-01-15 |
WO2004014919A1 (en) | 2004-02-19 |
EP1546152B1 (en) | 2007-12-19 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
ES2297189T3 (es) | Derivados de epotilona. | |
US6387927B1 (en) | Epothilone derivatives and their use as antitumor agents | |
ES2273502T3 (es) | Derivados de epotilona y su sintesis y uso. | |
US10266518B2 (en) | Solid dosage formulations of substituted quinazoline receptor-type kinase modulators and methods of use thereof | |
ES2336937T3 (es) | Sintesis de epotilonas, sus intermedios, analogos y usos. | |
ES2291194T3 (es) | Derivados de 16-halogeno-epotilones, procedimiento acerca de su preparacion y su utilizacion farmaceutica. | |
ES2315399T3 (es) | Analogos de epotilona ciclobutilo y ciclopropilo. | |
US20040259894A1 (en) | N-(4-(4-methylthiazol-5-yl)pyrimidin-2-yl)-N-phenylamines as antiproliferative compounds | |
US7776849B2 (en) | Benzenoid ansamycin derivative | |
US8138361B2 (en) | C-10 carbamates of taxanes | |
US20160115166A1 (en) | Pyrrolo[2, 1-f] [1,2,4]triazine derivative and use thereof for treating tumors | |
US7125893B1 (en) | 6-alkenyl-, 6-alkinyl- and 6-epoxy-epothilone derivatives, process for their production, and their use in pharmaceutical preparations | |
US20060014796A1 (en) | Epothilone derivatives | |
JP7519712B2 (ja) | キナーゼ阻害剤としての多環式化合物 | |
JPH05221950A (ja) | ベンズアミド多剤耐性逆転剤 | |
CN111686113B (zh) | Sonic Hedgehog抑制剂及应用 | |
US20240124503A1 (en) | Heteroaromatic phosphonium salts and their use treating cancer |