ES2292566T3 - Metodo de esterilizacion de articulos. - Google Patents

Abstract

Un método de tratamiento de un artículo, comprendiendo el método poner en contacto el artículo con una composición esterilizante que comprende un compuesto de amina epoxi y un alcohol.

Description

Método de esterilización de artículos.

Antecedentes de la invención

Esta invención se refiere al tratamiento de artículos usando composiciones esterilizantes. Más particularmente, esta invención se refiere al uso de esterilantes químicos para la esterilización de artículos.

Los artículos usados en procedimientos biológicos y/o médicos se esterilizan para reducir o eliminar significativamente el número de microbios potencialmente contaminantes asociados con los artículos biocompatibles. Los microbios contaminantes asociados con los artículos pueden conducir a fallos de los procedimientos biológicos y/o médicos. En particular, la contaminación microbiológica en procedimientos médicos puede conducir a riesgos graves para la salud.

Diversos artículos médicos biocompatibles están diseñados particularmente para entrar en contacto con los fluidos corporales de un paciente. La duración de este contacto puede ser relativamente corta, como es típico para apósitos para heridas, o puede ser de larga duración, como es típico con válvulas cardiacas protésicas implantadas en el cuerpo de un receptor. Algunos artículos tales como catéteres pueden tener un contacto corto o relativamente duradero. Otros artículos que típicamente tienen un contacto relativamente corto con el paciente incluyen, sin limitación, apósitos para quemaduras, lentes de contacto e instrumentos quirúrgicos. Otros artículos que típicamente tienen un contacto largo con un paciente incluyen, sin limitación, prótesis.

El contacto de los artículos con fluidos corporales crea un riesgo de infección. Este riesgo puede ser grave e incluso amenazar la vida. Además, costes considerables y estancias hospitalarias largas o adicionales pueden ser el resultado debido a infección. Por ejemplo, las infecciones asociadas con apósitos pueden aumentar la gravedad de la lesión para víctimas de quemaderas. También, la infección asociada con una prótesis implantada puede necesitar la sustitución del dispositivo. De esta manera, hay necesidad del aseguramiento de esterilidad en estos artículos.

Las infecciones son una complicación particularmente habitual resultante del uso en hospitales de dispositivos percutáneos tales como catéteres. Las infecciones relacionadas con el uso de catéter pueden dar como resultado invasión intracutánea durante la inserción del catéter o invasión a través del sitio de salida durante el uso. La adherencia de bacterias a la superficie del catéter complica el tratamiento de la infección.

Las prótesis, es decir, artículos protésicos, se usan para reparar o sustituir órganos dañados o enfermos, tejidos y otras estructuras en seres humanos y animales. Las prótesis generalmente deben ser biocompatibles ya que se implantan típicamente durante periodos de tiempo prolongados. Los ejemplos de prótesis incluyen, sin limitación, corazones protésicos, válvulas cardiacas protésicas, materiales de reparación de ligamentos, materiales de reparación y sustitución de vasos y parches quirúrgicos. Muchas prótesis incorporan tejidos como al menos un componente de la prótesis.

Los médicos usan diversas prótesis para corregir problemas asociados con el sistema cardiovascular, especialmente el corazón. Por ejemplo la capacidad para sustituir o reparar válvulas cardiacas enfermas con dispositivos protésicos ha proporcionado a los cirujanos un método de tratamiento de deficiencias en las válvulas cardiacas debido a enfermedad y defectos congénitos. Un procedimiento típico implica la retirada de la válvula nativa y la sustitución quirúrgica con una válvula mecánica o bioprotésica. Otra técnica usa un anillo de anuloplastia para proporcionar soporte estructural al anillo natural de la válvula.

La endocarditis de válvula protésica (PVE) es una infección que puede estar asociada con una prótesis de la válvula cardiaca. Las bacterias pueden formar colonias en el sitio quirúrgico asociado con el implante y en el tejido del dobladillo de la costura de la prótesis de la válvula. El crecimiento de tejido en el material del dobladillo de la costura está asociado también con la unión de bacterias y otros patógenos. Por esta razón, se advierte a los receptores de una válvula cardiaca respecto a la realización de actividades que puedan introducir bacterias en el torrente circulatorio tales como cirugía dental.

Para válvulas de sustitución de tejido, la PVE más particularmente está asociada con una parte de velo mitral de la válvula en lugar de la parte de dobladillo de la costura de la válvula.

PVE puede estar causada por bacterias gram-negativas, bacterias gram-positivas, hongos o rickettsias. La PVE causada por bacterias gram-positivas está particularmente extendida. El diagnóstico se basa generalmente en dos cultivos de sangre positivos para el mismo organismo junto con síntomas clínicos. Sin embargo, ciertos organismos son difíciles de cultivar, lo que puede complicar el diagnóstico.

Con respecto a la sustitución de válvulas cardiacas, debe tenerse cuidado de asegurar la esterilidad durante la producción y evitar la contaminación durante el proceso de implante de la válvula de sustitución. Por ejemplo, algunas válvulas de tejido cardiaco se almacenan en soluciones esterilizantes conocidas. Las soluciones esterilizantes incluyen soluciones de compuestos poliepoxi tales como las mostradas en el documento WO 92/09309. Además, para asegurar la esterilidad o para reducir la contaminación perioperativa, algunos cirujanos aplican antibióticos a las prótesis antes del implante.

Los artículos usados en los procedimientos biológicos in vitro e in vivo pueden requerir también esterilización. La contaminación de los artículos usados en procedimientos biológicos con microbios indeseables puede dar como resultado resultados erróneos. La contaminación microbiana de los matraces de cultivo, por ejemplo, puede conducir a la proliferación de microbios e inhibición de los cultivos celulares deseados.

El análisis de las muestra biológicas, por ejemplo, puede realizarse usando métodos ópticos tales como absorción o transmitancia de luz. Los ensayos que usan métodos ópticos pueden determinar la cantidad de células en una muestra. La presencia de microbios contaminantes en un cultivo celular, sin embargo, puede conducir a datos erróneos respecto al número de células presentes en una muestra. Esto pude conducir a retrasos experimentales de días, meses y en algunas ocasiones incluso años, especialmente si la contaminación microbiana no se detecta de forma temprana.

Sumario de la invención

El primer aspecto la invención se refiere a un método para tratar un artículo. El método incluye poner en contacto el artículo con una composición esterilizante. La composición esterilizante incluye un compuesto de amina epoxi y un alcohol.

En otro aspecto, la invención se refiere a un método de tratamiento de un artículo que incluye tejido reticulado. El método incluye poner en contacto el artículo con una composición esterilizante que incluye un compuesto de amina epoxi y un alcohol. El tejido reticulado generalmente se ha procesado adicionalmente antes de ponerlo en contacto con la composición esterilizante.

En otro aspecto, la invención se refiere a un método de tratamiento de un artículo no proteico. El método incluye poner en contacto el artículo con una composición esterilizante que incluye un compuesto de amina epoxi y un alcohol.

En otro aspecto más, la invención se refiere a una composición esterilizante que incluye un compuesto de amina epoxi y un alcohol.

Breve descripción de los dibujos

La Figura 1 es un esquema de un método de síntesis para preparar triglicidil amina (TGA).

La Figura 2 es un diagrama de formación de algunos oligómeros de TGA.

La Figura 3 es una representación del recuento log_{10} medio de colonias de B. subtilis frente al tiempo de incubación con la composición esterilizante de amina poliepoxi de la solución 1.

La Figura 4 es una representación del recuento log_{10} medio de colonias de B. subtilis frente al tiempo de incubación con la composición esterilizante de amina poliepoxi de la solución 2.

Descripción detallada de las realizaciones preferidas

Se describen nuevos enfoques para tratar artículos, particularmente artículos biológicos y médicos. Estos enfoques incluyen el uso de compuestos de amina epoxi como agentes antimicrobianos. En ese documento se describen composiciones esterilizantes que incluyen compuestos de amina epoxi y alcohol. En particular, el nuevo método de tratamiento de artículos incluye poner en contacto los artículos con una composición esterilizante que incluye uno o más compuesto de amina epoxi.

Adicionalmente, los artículos proteicos que se han sometido a procesos de reticulación seguidos de técnicas adicionales pueden tratarse también usando las composiciones esterilizantes. Los artículos pueden tratarse durante un periodo de tiempo limitado. Como alternativa los artículos pueden almacenarse en contacto con composiciones esterilizantes de amina epoxi durante largos periodos de tiempo para mantener el nivel de esterilidad de un artículo esterilizado.

Las composiciones esterilizantes como se denominan en este documento son composiciones que son tóxicas para algunos o todos los microorganismos y/o que son bacteriostáticas de forma que mantienen la esterilidad de un artículo estéril.

Los artículos pertinentes incluyen artículos médicos biocompatibles y artículos biológicos. Los artículos son biocompatibles en el sentido de que no son tóxicos ni carcinogénicos y no inducen hemólisis o una respuesta inmunológica significativa. Los artículos biológicos, como se denominan en este documento, se refieren a artículos usados en procedimientos biológicos in vitro e in vivo.

Pueden usarse diversos artículos médicos para entrar en contacto con los fluidos corporales de un paciente. Los artículos médicos pertinentes generalmente incorporan un material biocompatible que está destinado a entrar en contacto con los fluidos corporales o los tejidos de un paciente. Los fluidos corporales incluyen por ejemplo sangre, plasma, suero, fluidos intersticiales, saliva y orina. El paciente puede ser un animal especialmente un mamífero y preferiblemente un ser humano. Los artículos médicos incluyen, por ejemplo, dispositivos médicos implantables, instrumentos quirúrgicos, instrumentos dentales, catéteres y similares. El contacto de un artículo médico con los fluidos corporales de un paciente puede generar un riesgo de infección.

Diversos artículos biológicos usados en procedimientos biológicos pueden requerir un entorno estéril. Los artículos biológicos pertinentes generalmente se esterilizan antes de entrar en contacto con los fluidos en los procedimientos biológicos. Los fluidos usados en procedimientos biológicos incluyen, por ejemplo, cultivos celulares, cultivos bacterianos, cultivos tisulares, medios de cultivos, soluciones salinas, tampones y similares.

Los artículos que pueden tratarse usando los enfoques descritos en este documento pueden incluir artículos proteicos y/o no proteicos. Proteico, como se denomina en este documento, se refiere a materiales que incluyen polipéptidos que pueden estar reticulados. Los artículos proteicos pueden reticularse antes del tratamiento con la composición esterilizante. En algunas realizaciones, los artículos pueden estar reticulados y procesarse adicionalmente, uniendo los dobladillos de la costura o por tratamiento con un agente de anti-calcificación, antes del tratamiento con la composición esterilizante.

Las nuevas composiciones esterilizantes descritas en este documento incluyen compuestos de amina epoxi, preferiblemente compuestos de amina poliepoxi como agentes antimicrobianos. Los compuestos de amina epoxi son moléculas que incluyen tanto un resto amina (por ejemplo, un resto amina primaria, secundaria, terciaria o cuaternaria) y un resto epóxido. Los compuestos de amina epoxi incluyen, por ejemplo, amina poliepoxi tales como aminas diepoxi, aminas triepoxi y aminas cuaternarias epoxi. Adicionalmente, los compuestos de amina epoxi pueden auto polimerizarse fácilmente para formar una distribución de oligómeros de diversos tamaños.

Los compuestos de amina epoxi usados en la composición esterilizante como se ha descrito en este documento pueden incluir la forma monomérica y/o las formas oligoméricas del compuesto de amina epoxi. En una realización preferida, las composiciones esterilizantes incluyen triglicidil amina. La composición esterilizante puede incluir también una distribución de oligómeros de triglicidil amina que se forma como un resultado de la autopolimerización. La composición esterilizante puede incluir más de un tipo de compuesto de amina epoxi.

Las composiciones esterilizantes incluyen alcohol además de las amina epoxi. La composición esterilizante puede incluir también agentes antimicrobianos adicionales. En algunas realizaciones, las composiciones esterilizantes pueden incluir tensioactivos.

Los métodos descritos en este documento incluyen poner en contacto los artículos con la composición esterilizante. El contacto puede incluir, por ejemplo, sumergir el artículo en la composición, recubrir una superficie del artículo con la composición esterilizante, exponer el artículo a vapores de la composición esterilizante y similares.

Los compuestos de amina epoxi pueden actuar como agentes bactericidas y/o bacteriostáticos. Los agentes bactericidas inactivan los microbios viables mientras que los agentes bacteriostáticos inhiben la proliferación de microbios viables, es decir, evitan la replicación aunque no necesariamente el metabolismo de los microbios. Los compuestos de amina epoxi pueden ser eficaces contra microbios tales como bacterias, hongos, protozoos, levaduras y similares. Las composiciones esterilizantes que incluyen compuestos de amina epoxi pueden usarse para esterilizar y almacenar los artículos descritos en este documento.

En algunas realizaciones, el contacto con la composición esterilizante puede inactivar los microbios viables asociados con los artículos. El contacto con la composición esterilizante preferiblemente da como resultado un artículo esterilizado.

En otra realizaciones, el contacto con la composición esterilizante puede inhibir sustancialmente la proliferación de microbios, manteniendo de esta menara el nivel de microbios asociados con los artículos. En estas realizaciones, los compuestos de amina epoxi en las composiciones esterilizantes actúan como agentes bacteriostáticos. El tratamiento de artículos estériles con la composición esterilizante, preferiblemente mantiene la esterilidad del artículo.

La invención incluye también artículos que se almacenan en las composiciones esterilizantes descritas en este documento. Los artículos pueden esterilizarse y almacenarse también en la composición esterilizante de amina epoxi. Como alternativa, los artículos pueden esterilizarse usando otras técnicas conocidas y almacenarse posteriormente en composiciones esterilizantes que incluyen compuestos de amina epoxi. En algunas realizaciones, los artículos se almacenan en composiciones que incluyen compuestos de amina epoxi y alcohol.

A. Artículos

Los artículos que pueden tratarse usando los enfoques descritos en este documento incluyen artículos biológicos y médicos. Los artículos médicos pertinentes incluyen todos los artículos que entran en contacto con fluidos y/o tejidos corporales. Los artículos médicos pueden incluir dispositivos organizados generalmente en tres grupos: dispositivos implantados, dispositivos percutáneos y dispositivos cutáneos. Los dispositivos implantados incluyen ampliamente artículos que están totalmente implantados en un paciente, es decir, que son completamente internos. Los dispositivos percutáneos incluyen artículos que penetran en la piel, extendiéndose de esta manera desde el exterior del cuerpo hacia el cuerpo. Los dispositivos cutáneos se usan superficialmente, por ejemplo, en el sitio de una herida o en una membrana húmeda.

Los dispositivos implantados y componentes de los mismos incluyen también, sin limitación, prótesis tales como marcapasos, derivaciones eléctricas tales como derivaciones de marcapasos, desfibriladores, órganos artificiales tales como corazones artificiales, dispositivos asistidos ventriculares, prótesis de reconstrucción anatómica tales como implantes de mandíbula, válvulas cardiacas, stents de válvula cardiaca, velos de válvula, anillos de orificio de válvulas cardiacas mecánicas, parches pericardiacos, parches quirúrgicos, stents estructurales, derivaciones vasculares, conductos biológicos, compresas, sutura, anillos de anuloplastia, grapas, conectores, injertos dérmicos para curado de heridas, implantes ortopédicos y espinales, pinzas ortopédicas, dispositivos intrauterinos (DIU), stents urinarios, dispositivos pericárdicos permanentes, placas de reconstrucción maxilofacial, implantes dentales, lentes intraoculares, clips, cables externos, prótesis óseas, prótesis de piel, prótesis de ligamentos, prótesis de tendones y combinaciones de los
mismos.

Los dispositivos implantables de interés particular incluyen dispositivos vasculares implantables. Los sitios y estructuras "vasculares" como se usa en este documento incluyen sitios y estructuras cardiovasculares y otros sitios y estructuras de contacto con la sangre. Los dispositivos vasculares implantables incluyen, por ejemplo stents vasculares, injertos vasculares y conductos, injertos con válvula, stents coronarios, válvulas cardiacas y parches.

Los dispositivos percutáneos incluyen, sin limitación, balones de angioplastia, catéteres de diversos tipos, cánulas, tubos de drenaje tales como tubos precordiales, instrumentos quirúrgicos tales como fórceps, retractores, agujas, guantes, y dobladillo de catéter. Los catéteres pueden usarse para acceder a diversos sistemas corporales tales como el sistema vascular, el tracto gastrointestinal o el sistema urinario.

Los dispositivos cutáneos incluyen, sin limitación, injertos de piel, apósitos para quemaduras, apósitos para heridas de todo tipo, elementos dentales tales como soportes para puentes y componentes de empaste y lentes de contacto. Los artículos médicos pueden incluir también instrumentos tales como instrumentos quirúrgicos, instrumentos dentales y similares.

Los artículos biológicos pertinentes incluyen artículos que entran en contacto con los fluidos usados en los procedimientos biológicos. Los artículos biológicos pueden incluir por ejemplo matraces, tubos, placas de cultivo de tejidos, placas de microtitulación, matraces de cultivo celular, biorreactores y similares. Los artículos pueden incluir también artículos que dispensan fluidos usados en procedimientos biológicos, por ejemplo pipetas, bombas, otros mecanismos de toma de alícuotas y similares. Los artículos biológicos pueden incluir también dispositivos que se usan para almacenar fluidos usados en procedimientos biológicos.

B. Materiales

Los artículos médicos y artículos biológicos hechos a partir de diversos materiales pueden tratarse satisfactoriamente con las composiciones esterilizantes de la invención. Los artículos médicos descritos anteriormente se hacen generalmente a partir de materiales biocompatibles incluyendo materiales naturales, materiales sintéticos, o combinaciones de los mismos. Los materiales pueden ser materiales proteicos y/o materiales no proteicos. Los materiales proteicos pueden incluir otros componentes no peptídicos, tales como carbohidratos, lípidos, ácidos nucleicos, y/o otros compuestos naturales o sintéticos que pueden estar unidos o no covalentemente al polipéptido.

El material natural para usar en la invención incluye tejido (celular) relativamente intacto, tejido descelularizado y recelularizado. Estos tejidos pueden obtenerse a partir de por ejemplo válvulas cardiacas nativas; porciones de válvulas cardiacas nativas tales como raíces, paredes y velos; tejidos pericárdicos tales como parches pericárdicos, tejidos conectivos; injertos de by-pass; tendones, ligamentos, parches cutáneos, vasos sanguíneos, cartílago, duramadre, piel, hueso, fascia, submucosa y tejidos umbilicales y similares.

Los tejidos naturales se derivan de una especie animal particular típicamente un mamífero, tal como un ser humano, bovino, porcino, foca o canguro. Estos tejidos naturales generalmente incluyen material que contiene colágeno. El tejido natural es típicamente, aunque no necesariamente, tejido blando. Los tejidos apropiados incluyen también tejidos equivalentes tales como el material modificado de tejido que implica una matriz repoblada con células que puede formarse a partir de un polímero a partir de un tejido natural descelularizado.

Los tejidos biocompatibles pueden fijarse mediante reticulación de los aminoácidos presentes en los tejidos. Esto proporciona estabilización, evitando la degradación enzimática del tejido. El glutaraldehido típicamente se usa para fijación, aunque pueden usarse otros fijadores, tales como aminas epoxi, epóxidos, otros aldehídos difuncionales, carbodiimida, genipina y formaldehído. Los materiales biocompatibles pueden usarse en forma reticulada o no reticulada dependiendo del tipo de tejido, el uso y otros factores. Los materiales reticulados pueden ponerse en contacto también con las composiciones esterilizantes. Los materiales reticulados que se han procesado adicionalmente tales como el tratamiento con agentes anti-calcificación y/o unión de dobladillos de la costura, pueden conectarse también con las composiciones esterilizantes. Los materiales reticulados, por ejemplo, tratados con agentes anti-calcificación tales como cloruro de aluminio (AlCl_{3}), pueden ponerse en contacto con las composiciones esterilizantes.

Los materiales sintéticos pertinentes incluyen, por ejemplo, polímeros, metales y cerámicos. Los cerámicos apropiados incluyen, sin limitación, hidroxiapatita, alúmina y carbono pirolítico. Los metales adecuados incluyen, por ejemplo, titanio, acero inoxidable, cobalto y aleaciones tales como, Elgiloy®, una aleación de cobalto-cromo-níquel y Nitinol®, una aleación de níquel-titanio. Los materiales poliméricos pueden fabricarse a partir de polímeros sintéticos, así como de polímeros biológicos purificados. Los materiales sintéticos apropiados incluyen hidrogeles y otros materiales sintéticos que no pueden soportar una deshidratación grave.

Los polímeros sintéticos apropiados incluyen, sin limitación, poliamidas (por ejemplo, nylon), poliésteres, poliestirenos, poliacrilatos, polímeros de vinilo (por ejemplo, polietileno, politetrafluoroetileno, polipropileno y cloruro de polivinilo), policarbonatos, poliuretanos, polidimetilsiloxanos, acetato de celulosa, polimetil metacrilatos, acetatos de etilen vinilo, polisulfonas, nitrocelulosas y copolímeros similares. Estos materiales poliméricos sintéticos pueden estar tejidos en una malla para formar una matriz o sustrato. Como alternativa, los materiales poliméricos sintéticos pueden, por ejemplo, moldearse o vaciarse en las formas apropiadas.

Los polímeros biocompatibles pueden ser de origen natural o producirse in vitro, por ejemplo por fermentación y similares. Los polímeros biológicos purificados pueden formarse apropiadamente en fibras o hilos y después en un sustrato por técnicas tales como devanado, cosido, vertido, moldeado, extrusión, alineamiento celular y alineamiento magnético. Los polímeros biológicos adecuados incluyen, sin limitación, colágeno, elastina, seda, queratina, gelatina, poliaminoácidos, polisacáridos (por ejemplo, celulosa y almidón), ácidos nucleicos y copolímeros de los mismos.

Los materiales biocompatibles pueden incluir una combinación de los diversos materiales naturales y materiales sintéticos descritos anteriormente. Los materiales biocompatibles, pueden incluir también partes metálicas. Algunos materiales protésicos pertinentes se hacen completamente de metal, cerámicos o una combinación de metal cerámico y, opcionalmente, materiales naturales o sintéticos adicionales. Las válvulas cardiacas mecánicas son productos pertinentes, que generalmente se hacen a partir de componentes metálicos poliméricos y/o cerámicos. Los artículos médicos pueden hacerse también a partir de cualquiera de los materiales adecuados descritos a continuación para artículos biológicos.

Los artículos biológicos descritos en este documento pueden hacerse a partir de cualquiera de o una combinación de los materiales descritos anteriormente para artículos médicos. Otros materiales adecuados para artículos biológicos pueden incluir, por ejemplo, vidrio tal como pyrex, metal, policarbonato, polipropianato, poliestireno, y similares. Los materiales adecuados para artículos biológicos pueden incluir también materiales que no son biocompatibles.

C. Composiciones esterilizantes

Las composiciones esterilizantes descritas en este documento incluyen uno o más compuestos de amina epoxi. Las aminas epoxi son moléculas que generalmente incluyen tanto un resto amina (por ejemplo, amina primaria, secundaria, terciaria o cuaternaria) y un resto epóxido. El compuesto de amina epoxi en las composiciones esterilizantes puede ser un compuesto de amina monoepoxi y/o un compuesto de amina poliepoxi. El compuesto de amina epoxi es preferiblemente un compuesto de amina poliepoxi que tiene al menos dos restos epóxido y posiblemente tres o más restos epóxido. En realizaciones más preferidas, el compuesto de amina poliepoxi es TGA.

En realizaciones preferidas, el anillo de epóxido está separado del resto amina más próximo por entre 1 y 5 átomos, una cadena de alquilo o alquilos sustituidos C_{1}-C_{5} lineal o ramificada, tal como el grupo metileno, que separa el anillo de epóxido y el resto amino terciario en TGA como se observa en la Figura 1. Otros grupos químicos que pueden estar interpuestos entre el anillo de epóxido y el resto amino más próximo incluyen, por ejemplo cadenas de alquenilo lineales o ramificadas, cadenas de alquilo sustituidas, grupos de anillo y grupos aromáticos.

Los compuestos de amina poliepoxi pueden sintetizarse usando métodos conocidos en la técnica. Estos métodos incluyen, por ejemplo, una modificación de los enfoques descritos por Ross et al., 1963 J. Org. Chem. 29:824-826, Martyanova et al., 1990, Sb. Nauch. Tr. Lenengr. In-t Kinoinzh. 2: 139-141 (Chem. Abst-Nos. 116:43416 y 116:31137) y Chelzov et al., 1990, Zh. Prikl. Khim. (Leningrad) 63: 1677-1878 (Chem. Abst. No. 114: 121880).

Un método para sintetizar TGA se representa en la Figura 1. Brevemente, epiclorhidrina (compuesto I en la Figura 1) se combina con amoniaco e isopropanol. La mezcla finalmente produce un jarabe viscoso. El jarabe después de incubación adicional puede disolverse en tolueno y concentrase a presión reducida para producir tris-(3-cloro-2-hidroxipropil) amina (compuesto II en la Figura 1). El compuesto II puede disolverse en tolueno seguido de adicción de tetrahidrofurano, hidróxido sódico y agua. La capa orgánica pude separarse de la fase acuosa y secarse durante una noche con un desecante. Después de retirar el desecante, la solución puede concentrarse a presión reducida y el residuo destilarse para producir TGA (compuesto III en la Figura 1). La TGA puede recuperarse en forma de un líquido viscoso que tiene un punto de ebullición de 98ºC-101ºC. La TGA líquido puede solidificarse tras refrigeración y permanecer como sólido cuando se devuelve a la temperatura ambiente.

La polimerización de los compuestos de amina poliepoxi puede dar como resultado también formas adicionales de compuestos de amina poliepoxi. Se reconoce que un polímero formado polimerizando compuestos de amina poliepoxi (por ejemplo, TGA, como se muestra en la Figura 2) puede usarse en composiciones esterilizantes. Los polímeros generalmente se forman por auto-polimerización de moléculas de compuesto de amina poliepoxi si se deja que ocurra un periodo de autopolimerización cuando los restos epoxi reaccionan con la aminas primarias, secundarias o terciaria. La polimerización de un compuesto de amina poliepoxi puede conducir a la formación de un polímero que tiene una pluralidad de restos amonio cuaternario. Cuando se usa un polímero de amina epoxi, el polímero puede ser un polímero lineal o un polímero ramificado y preferiblemente tiene un peso molecular de 185 a 10.000. Por ejemplo, puede usarse un polímero de TGA en el que el polímero está formado por polimerización de al menos aproximadamente 15 moléculas de TGA, produciendo un polímero de TAG que tiene un peso molecular mayor de 3000. Las composiciones esterilizantes de esta manera pueden incluir monómeros del compuesto de amina poliepoxi y/o una distribución de oligómeros de los compuestos de amina poliepoxi debido a la auto-polimerización.

En algunas realizaciones, únicamente un compuesto de amina epoxi se usa en las composiciones esterilizantes. En otras realizaciones se usa una pluralidad de compuestos de amina epoxi en las composiciones esterilizantes tales como la combinación de TGA y una forma cuaternaria de amina epoxi.

Los compuestos de amina epoxi son más fácilmente solubles debido a su menor tamaño que los compuestos epoxi convencionales que es lo que particularmente ventajoso para usar en las composiciones esterilizantes descritas en este documento. Los compuestos de amina epoxi pueden solubilizarse fácilmente sin ayuda de tensioactivos. Los compuestos de amina epoxi tienen también una mayor reactividad que otros compuestos epoxi. Sin ceñirse a ninguna teoría particular, se cree que cuanto mayor sea la reactividad puede conducir a una citotoxicidad reducida. La sensibilidad de los microbios a compuestos de amina epoxi acoplado con la reducida citotoxicidad para células eucariotas hace que los compuestos de amina epoxi sean particularmente ventajoso para usar como agentes antimicrobianos para dispositivos médicos.

Pueden seleccionarse las concentraciones adecuadas de los compuestos de amina epoxi en la composición esterilizante. Generalmente, la concentración de los compuestos de amina epoxi es suficiente para esterilizar los artículos a un nivel deseado. La concentración adecuada de los compuestos de amina epoxi en la composición esterilizante puede variar dependiendo por ejemplo del artículo a esterilizar, el uso pretendido del artículo, la carga microbiana esperada antes de la esterilización, el material del artículo, la duración del contacto deseado con la composición esterilizante, el compuesto de amina epoxi particular usado y similares.

Para reducir el riesgo de contaminación posterior del artículo, los artículos esterilizados pueden almacenarse en contacto con un agente bacteriostático. Los artículos, sin embargo, pueden usarse poco después o inmediatamente después del procedimiento de esterilización. Puede ser deseable limitar la cantidad y/o concentración de los compuestos de amina epoxi y cualquier otro componente de las composiciones esterilizantes para reducir el riesgo de citotoxicidad. Una concentración inapropiadamente alta de los compuestos de amina epoxi puede dar como resultado degeneración del tejido, lisis celular, degradación física del artículo y similares. En algunas realizaciones, los artículos pueden estar en contacto con altas concentraciones de las aminas epoxi en las composiciones esterilizantes aunque pueden enjuagarse para reducir y/o eliminar la cantidad de composición esterilizante presente en o dentro del artículo.

Para la mayoría de realizaciones, la concentración de las aminas epoxi en la composición esterilizante puede variar entre el 0,5% en peso al 10% en peso, preferiblemente entre el 3% al 8% en peso y más preferiblemente entre el 6 y 7% en peso.

Generalmente, los compuestos de amina epoxi se solubilizan preferiblemente en agua para usar como una composición esterilizante. La composición esterilizante con los compuestos de amina epoxi solubilizados en agua pueden usarse para poner en contacto los artículos descritos en este documento. Como alternativa, la composición esterilizante puede vaporizarse. La composición esterilizante vaporizada se dirige a los artículos deseados para el contacto. La composición esterilizante vaporizada puede incluir únicamente compuestos de amina epoxi. Como alternativa, la composición esterilizante vaporizada puede incluir componentes adicionales, por ejemplo alcohol. La composición esterilizante puede vaporizarse por calentamiento o usando un aparato de atomización, por ejemplo un pulverizador o una combinación de los mismos.

Las composiciones esterilizantes incluyen también alcohol. La concentración de alcohol es generalmente entre el 5 por ciento en peso y el 50 por ciento en peso, preferiblemente entre el 10 por ciento en peso y el 40 por ciento en peso, o preferiblemente entre el 5 por ciento y el 30 por ciento en peso y más preferiblemente entre el 10 por ciento en peso y el 20 por ciento en peso.

Los alcoholes adecuados incluyen alcoholes alifáticos y aromáticos. Los alcoholes alifáticos adecuados incluyen metanol, etanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol, isobutanol, sec-butanol, t-butanol, ciclohexanol, n-octanol, alcohol alílico y similares. Los alcoholes aromáticos biocompatibles adecuados incluyen alcohol bencílico, cresol, carbinol y similares. Estos alcoholes se usan para solubilizar los recubrimientos de polisacárido ceroso de bacterias y generalmente son moderadamente eficaces por sí mismos para destruir microorganismos y, de esta manera, crear sinergia con y potenciar la capacidad antimicrobiana de las composiciones de amino epoxi.

Las composiciones esterilizantes pueden incluir otros agentes antimicrobianos además de las amina epoxi. Se conoce una amplia variedad de otros agentes antimicrobianos. Los agentes antimicrobianos adecuados que pueden usarse junto con los compuestos de amina epoxi en las composiciones esterilizantes pueden incluir toxinas. Las toxinas adecuadas pueden tener especificidad para microorganismos, es decir, procariotas, levaduras o protistas para promover la destrucción preferente de microorganismos sobre las células de un paciente. Algunas toxinas preferidas tienen también eficacia específica contra tipos particulares de microorganismos, tales como una especie particular de bacterias. Por ejemplo los inhibidores de la bomba de protones tales como omeprazol y lansoprazol son bactericidas contra Helicobacter pylori. Véase Figure et al., "In vitro activity of lansoprazole in Helicobacter pylori", J. Antimicrobial Chemotherapy, 39: 565-590 (1997).

Los agentes antimicrobianos adecuados incluyen también antibióticos tradicionales. Algunos antibióticos son polipéptidos, tales como actinomicina, bacitracina, circulina, fungisporina, gramacidina S, malformina, micobacilina, polimixina, tirocidina y valinomicina.

Generalmente, la actividad de bloqueo celular de los antibióticos específicos es específica para la función microbiana. Por ejemplo, diversos antibióticos tales como penicilina, fosfonomicina, bacitracina y vancomicina interfieren con la síntesis de la pared celular. En particular, la penicilina inhibe una reacción de reticulación en la síntesis de la pared celular. Otros antibióticos tales como estreptomicina, tetraciclina, cloranfenicol y eritromicina actúan inhibiendo la síntesis de proteínas uniéndose a los ribosomas bacterianos. En algunas realizaciones, puede usarse una solución de ampicilina (1 gramo/litro puede).

Las composiciones esterilizantes pueden incluir también tensioactivos. Generalmente, del 1 al 40 por ciento en peso y preferiblemente del 5 al 20 por ciento en peso del tensioactivo se añade a una solución acuosa si se usa un tensioactivo.

Los tensioactivos orgánicos adecuados incluyen tensioactivos aniónicos, catiónicos, y no iónicos y sus sales. Las sales preferidas de los tensioactivos en la presente invención incluyen sodio y potasio. Los tensioactivos aniónicos útiles en la presente invención son aquellos que tienen una región hidrófoba relativamente grande de restos hidrocarburo, incluyendo grupos alifáticos y aromáticos unidos a un grupo iónico cargado negativamente. Los restos alifáticos pueden ser de cadena ramificada, de cadena lineal, cíclicos, heterocíclicos saturados o insaturados. Estos restos hidrófobos pueden conectarse directamente a un grupo aniónico, tal como grupos carboxilato, sulfato, o sulfonatos; o pueden conectarse al mismo mediante una unión intermedia tal como un grupo éster, amida, sulfonamida, éter, o arilo. Los tensioactivos aniónicos en una realización de la presente invención son aquellos que tienen uno o más carboxilatos unidos a una cadena lateral alquino, a un esteroide o a aminoácidos en la cadena lateral tales como en los ácidos biliares.

Otros componentes puede incluirse en las composiciones esterilizantes para obtener propiedades deseadas. Los sistemas de tampón pueden incluirse para mantener la composición esterilizante en un intervalo de pH deseado. Los tampones adecuados pueden estar basados por ejemplo en los siguientes compuestos: amonio, fosfato, borato, bicarbonato, carbonato, cacodilato, citrato, y otros tampones orgánicos tales como tris(hidroximetil)aminometano (TRIS), ácido morfolina propanosulfónico (MOPS) y N-(2-hidroxietil) piperazina-N'-(ácido 2-etanosulfónico) (HEPES). Los tampones adecuados generalmente se eligen basándose en el intervalo de pH para la composición de esterilización. Los tampones TRIS por ejemplo actúan como tampones en el intervalo de pH de entre aproximadamente 6 y aproximadamente 8.

El intervalo de pH deseado para las composiciones esterilizantes puede variar dependiendo de la naturaleza del artículo a esterilizar. Los artículos que incluyen tejidos pueden ser sensibles al pH del entorno y de esta manera generalmente se esterilizan usando composiciones esterilizantes a un pH dentro del intervalo fisiológico. Los artículos que incluyen únicamente metal, por ejemplo, pueden esterilizarse a un pH fuera del intervalo de pH fisiológico (pH 6-8). Generalmente, la actividad del compuesto de amina epoxi aumenta con el aumento de pH. Los compuestos de amina epoxi pueden tener una alta actividad incluso a un pH mayor de aproximadamente 9.

Las sales y/o soluciones salinas pueden incluirse en las composiciones esterilizantes para proporcionar un equilibrio de electrolito apropiado. Las sales adecuadas incluyen, por ejemplo sales sódicas, sales potásicas, fosfatos y similares.

Generalmente, los artículos que incluyen tejidos se esterilizan usando composiciones esterilizantes y condiciones cerca de los intervalos fisiológicos. De esta manera, la temperatura, pH, equilibrio de electrolito y similares, todos ellos están generalmente cerca de los intervalos para artículos que incluyen tejido. Los intervalos fisiológicos compatibles para tejido están documentados en la técnica.

D. Métodos de esterilización

Los enfoques de esterilización descritos en este documento incluyen poner en contacto el artículo con una composición esterilizante que incluye uno o más compuestos de amina epoxi como agente antimicrobiano. El artículo puede ponerse en contacto con la composición esterilizante de diversas maneras, incluyendo recubrimiento de la composición esterilizante sobre o en el artículo, sumergiendo el artículo en la composición esterilizante, exponiendo el artículo a vapores de la composición esterilizante y similares. Todo o una parte del artículo puede ponerse en contacto con la composición esterilizante. El contacto puede incluir el exterior del artículo, el interior del artículo o ambos.

Los artículos preferiblemente se ponen en contacto con la composición esterilizante hasta que los artículos quedan sustancialmente estériles. La medida convencional usada por la industria médica para evaluar la eficacia de un procedimiento de esterilización se conoce como nivel de aseguramiento de esterilidad (SAL). El nivel de SAL aceptable por la industria médica es de 6, lo que representa que la probabilidad de supervivencia del organismo diana que permanece después de un lapso de un periodo de tiempo especificado es menor de 1 x 10^{-6}. El valor SAL se calcula como un logaritmo en base 10 negativo de la probabilidad de supervivencia microbiana. La cantidad de tiempo necesaria para conseguir el procedimiento particular de esterilidad aceptable como se usa en un organismo diana específico se calcula a partir de una unidad medida de tiempo conocida como valor D.

El valor D generalmente representa la cantidad de tiempo en minutos necesario para reducir una población en un 90% (una unidad logarítmica) en el nivel de recuento de organismos diana viables después de la aplicación del procedimiento de esterilización, representando un menor tiempo del valor D un procedimiento más eficaz. El valor D puede depender de las condiciones en las que se realiza el procedimiento, tales como temperatura, el esterilante específico que se está usando, y la concentración de esterilante en la composición esterilizante.

El tiempo de esterilización eficaz mínimo se refiere a la cantidad mínima de tiempo que los artículos tienen que exponerse a las composiciones esterilizantes para ser eficazmente estériles. Para artículos médicos, el tiempo de esterilización eficaz mínimo es una cantidad de tiempo requerida para alcanzar el valor SAL de 6. Para artículos que no son médicos, el valor SAL de 6 puede ser deseable en algunas realizaciones. En otras realizaciones un valor SAL de 1 puede ser suficiente, en cuyo caso, el tiempo de esterilización eficaz mínimo puede ser únicamente el tiempo del valor D, es decir el tiempo para alcanzar el 90% de la reducción de la carga microbiana. Los artículos pueden ponerse en contacto con la composición esterilizante durante únicamente el tiempo de esterilización eficaz mínimo. Como alternativa, los artículos pueden ponerse en contacto con la composición esterilizante durante periodos de tiempo más largos que el tiempo de esterilización eficaz mínimo.

Como se ha analizado anteriormente, el valor D puede depender de la temperatura a la que se realiza la esterilización, que se domina en este documento temperatura de esterilización. Generalmente, según aumenta la temperatura de esterilización, disminuye el tiempo del valor D. A la inversa, según disminuye la temperatura de esterilización aumenta el tiempo del valor D. En algunas realizaciones, la temperatura de esterilización puede aumentarse para obtener valores D menores.

De forma similar, según aumenta la concentración del esterilante en la composición esterilizante, el valor D del procedimiento antimicrobiano disminuye. En algunas realizaciones, puede ser preferible tener un valor D bajo para el procedimiento de esterilización y, de esta manera, pueden usarse mayores concentraciones de esterilante. En otras realizaciones, puede ser preferible usar concentraciones bajas del esterilante y de esta manera el procedimiento de esterilización puede tener un alto valor D.

Con compuestos de amina epoxi usados como agentes antimicrobianos, el valor D generalmente es de al menos aproximadamente 30 minutos. El valor D puede ser entre aproximadamente una hora y aproximadamente 48 horas. En algunas realizaciones, el valor D es aproximadamente entre 3 horas y aproximadamente 12 horas. El esterilante, la concentración del esterilante y la temperatura de esterilización pueden seleccionarse basándose en el tiempo deseado de esterilización.

Los tiempos de esterilización preferidos dependen también del uso del artículo. En algunas realizaciones pueden preferirse tiempos de esterilización más largos, por ejemplo cuando el artículo se está almacenando en la composición de esterilización hasta que se usa. En otras realizaciones, sin embargo, puede ser preferible esterilizar únicamente durante el tiempo de esterilización eficaz mínimo.

La temperatura de esterilización puede variar dependiendo del tipo de artículo a esterilizar, el tiempo deseado de esterilización, la concentración del compuesto de amina epoxi y la composición esterilizante y similares. Los artículos sensibles al calor pueden esterilizarse a temperaturas que no son perjudiciales para el artículo. La temperatura de esterilización puede ser menos crucial para artículos no sensibles a calor. Los instrumentos quirúrgicos pueden esterilizarse a temperaturas muy altas aunque los artículos con tejido generalmente se esterilizan a temperatura menor para mantener la integridad del tejido.

La estabilidad de los componentes presentes en la composición esterilizante pueden determinar las condiciones de esterilización apropiadas. TGA, por ejemplo generalmente es estable en el congelador durante aproximadamente un año. Calentar la TGA, sin embargo, da como resultado auto-polimerización. La temperatura de esterilización, por ejemplo puede depender de los compuestos de amina epoxi usados en la composición de esterilización. Generalmente, la reactividad del compuesto de amina epoxi aumenta según aumenta la temperatura. La temperatura de esterilización puede depender también de cualquiera de los otros componentes incluidos en la composición
esterilizante.

La temperatura de esterilización para artículos sensibles al calor, por ejemplo artículos que contienen tejido, es preferiblemente entre 10ºC y 40ºC, más preferiblemente la temperatura de esterilización es entre 20ºC y 30ºC. La esterilización de los artículos depende de las propiedades del material del artículo y generalmente puede variar entre 100ºC y 150ºC.

Los métodos descritos en este documento pueden usarse también para tratar artículos que incluyen tejidos reticulados. La reticulación de tejidos puede proporcionar estabilización mecánica, por ejemplo, evitando la degradación enzimática del tejido. Glutaraldehido se usa típicamente para fijación aunque pueden usarse otros fijadores tales como carbodiimidas, aminas epoxi, epóxidos, formaldehído y otros aldehídos disfuncionales. Después de la reticulación, pueden realizarse procedimientos adicionales para preparar el artículo para usos posteriores. Estos procedimientos incluyen, por ejemplo, colocación de dobladillos de costura o bioresorbibles sobre los artículos, tratamiento con agentes anti-calcificación, factores de crecimiento y similares. Los artículos después de los procedimientos de reticulación pueden tratarse usando las composiciones esterilizantes y métodos descritos en este documento.

Las composiciones esterilizantes descritas en este documento pueden inactivar los microbios presentes en o dentro del artículo, por ejemplo el compuesto de amina epoxi actúa como agente bactericida. En algunas realizaciones, los artículos inicialmente contienen un número sustancial de microbios. Es deseable en dichos casos reducir la carga microbiana asociada con los artículos antes de poner en contacto con los fluidos corporales y/u otros fluidos usados en procedimientos biológicos. Los artículos de esta manera pueden tratarse con la composición esterilizante para reducir la carga microbiana para obtener artículos estériles como se ha descrito anteriormente.

En otras realizaciones, los artículos pueden tratarse con las composiciones esterilizantes para inhibir la proliferación de microbios, por ejemplo el compuesto de amina epoxi actúa como agente bacteriostático. La medida convencional de un agente bacteriostático se describe en Block, S. S., in Disinfection, Sterilization and Preservation, p. 1050, Lea & Febiger, 1991. Los compuestos de amina epoxi adecuados pueden inhibir el crecimiento durante al menos 7 días, cuando hasta 100 microorganismos viables están asociados con el artículo. Los artículos que se han esterilizado usando los métodos descritos en este documento o usando otros métodos conocidos en la técnica, por ejemplo radiación ultravioleta, calor y presión y otros esterilantes químicos pueden almacenarse en las composiciones esterilizantes descritas en este documento. El almacenamiento de los artículos en las composiciones esterilizantes puede mantener la esterilidad de los artículos durante largos periodos de tiempo. Los artículos generalmente pueden almacenarse en la composición esterilizante durante más de 1 día, alternativamente durante más de 30 días, y en algunas realizaciones durante más de 6 meses. Los artículos que no se han esterilizado pueden almacenarse también en composiciones esterilizantes.

Los artículos pueden almacenarse en las composiciones esterilizantes descritas en este documento y envasarse en recipientes preferiblemente sellados. Los artículos pueden colocarse en un recipiente con la cantidad apropiada de composición esterilizante y después sellarse. En algunas realizaciones, el artículo se sumerge en la composición esterilizante en el recipiente sellado. En otras realizaciones, solo una parte del artículo puede estar en contacto con la composición esterilizante en el recipiente. Como alternativa, el artículo puede almacenarse en presencia de vapores de la composición esterilizante. El recipiente sellado puede almacenarse después y/o distribuirse según se desee para un uso futuro. Los artículos pueden haberse esterilizado antes del almacenamiento en las composiciones de amina epoxi.

E. Almacenamiento, Distribución y Uso

Las composiciones esterilizantes descritas en este documento pueden usarse como esterilantes, como agentes de almacenamiento y similares. Los compuestos de amina epoxi solos pueden almacenarse y distribuirse en forma de un sólido, una pasta, en solución y/o en una forma vaporizable. Como alternativa, las composiciones esterilizantes que contienen los compuestos de amina epoxi y cualquier otro componente opcional, preferiblemente en solución, pueden envasarse apropiadamente, almacenarse y/o distribuirse. En otras realizaciones, todos los componentes de la composición esterilizante pueden almacenarse por separado pero envasarse juntos para su distribución. Antes del uso, los componentes pueden combinarse y/o solubilizarse para formar las composiciones esterilizantes. La composición esterilizante puede usarse entonces para entrar en contacto con los artículos para usarla como esterilizante y/o como agente bacteriostático. El envasado de cualquiera de las composiciones descritas anteriormente es preferiblemente en recipientes sellados.

La composición esterilizante puede entrar en contacto apropiadamente con un artículo y almacenarse. El artículo almacenado puede envasarse y distribuirse según se desee. El artículo almacenado puede envasarse dependiendo de la naturaleza del artículo. Los artículos, en contacto con la composición esterilizante, pueden almacenarse en congeladores, refrigeradores, a temperatura ambiente, incubadoras y similares. El tejido, por ejemplo, puede situarse en la composición esterilizante y almacenarse a la temperatura de refrigeración y/o temperatura ambiente. Los artículos médicos tales como bioprótesis para válvula cardiaca, almacenados en las composiciones esterilizantes, generalmente se distribuyen en recipientes sellados a los profesionales del cuidado de la salud. Generalmente los artículos se envasan con etiquetas de instrucción apropiadas.

Los artículos médicos preferiblemente se retiran de los recipientes de almacenamiento inmediatamente antes de su uso. El artículo puede retirarse del recipiente y usarse directamente. Como alternativa, el artículo puede retirarse del recipiente y enjuagarse antes de su uso. El enjuague, preferiblemente se realiza con una composición estéril.

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Ejemplos

Ejemplo de Referencia 1

Composiciones esterilizantes con triglicidil amina

Este ejemplo se refiere al efecto de triglicidil amina (TGA) sobre los cultivos de Bacillus subtilis (B. subtilis) en tubos de ensayo.

Una suspensión de B. subtilis a una concentración de 2,5 x 10^{7} unidades formadoras de colonias (CFU)/mililitro (ml) se preparó y se mezcló vigorosamente. TGA se sintetizó de acuerdo con el método mostrado en la Figura 1. Una composición esterilizante de TGA 0,2 M (aproximadamente el 3,7% en peso) se preparó en tampón HEPES a un pH de 7,2. El HEPES se obtuvo de Sigma Chemical Co., St. Louis, MO. La solución de TGA después se filtró y esterilizó (solución Nº 1). Un volumen de 50 ml de solución Nº 1 y un volumen de 0,1 ml de suspensión de B. subtilis se añadieron al frasco de ensayo estéril.

Los frascos de ensayo de control negativo contenían volúmenes equivalentes de composición esterilizante estéril sin ningún cultivo de B. subtilis añadido. Los frascos de ensayo de control positivo contenían un volumen equivalente de solución salina de irrigación Baxter^{TM} (lote Nº G946566) y un volumen equivalente de suspensión B. subtilis en el frasco de ensayo.

Se puso una barra magnética estéril en cada frasco de ensayo y los frascos se pusieron en un baño de agua de agitación. La temperatura del baño de agua se mantuvo a 24ºC.

Una alícuota de 1 ml se retiró de cada frasco de ensayo por triplicado, en puntos temporales de 0,5 horas, 2 horas, 4 horas, 6 horas, 22 horas, 24 horas, 26 horas, 28 horas y 30 horas. Las alícuotas de 1 ml se retiraron del frasco de ensayo, diluyendo si fuera necesario para conseguir las poblaciones microbianas contables y se filtraron a través de filtros de membrana estériles diferentes. Cada filtro de membrana se enjuagó entonces al vacío usando 100 ml de alícuota de fluido USP A estéril (lote 100581 UK) obtenido de Disco, Detroit, MI., para retirar la composición esterilizante residual. El fluido USP A es de 1 gramo por 100 mililitros de solución de peptamina. El fluido A se dejó reposar durante un minuto antes de extraer el vacío. Se realizó un enjuague con el fluido A con cada alícuota. Cada una de las alícuotas se trató de la misma manera.

Después del enjuague, cada filtro de membrana se puso sobre la superficie de placas de agar tripticasa soja y se incubó entre aproximadamente 30ºC y aproximadamente 35ºC durante un mínimo de aproximadamente 3 días. Una vez completado el periodo de incubación, las colonias presentes en todas las placas se contaron visualmente.

Se calculó el valor D para la composición esterilizante. Para calcular el valor D, se determinó un recuento de colonia medio por triplicado y se registró el logaritmo (base 10) de la media para cada intervalo de tiempo. La media logarítmica se representó como una función del tiempo como se observa en las Figuras 3 y 4. Se realizó un análisis de regresión lineal de los datos para determinar la pendiente de la representación de las Figura 3 y 4. El valor D de la composición esterilizante se definió como la pendiente de las curvas de las representaciones mostradas en las Figuras 3 y 4.

Como se ha calculado a partir de la Figura 3, la composición esterilizante que contiene TGA 0,2 M (solución Nº 1) tenía un valor D de 357,1 minutos a 24ºC (para un periodo de esterilización de 24 horas). El control negativo no tenía ninguna colonia y el control positivo tenía el crecimiento microbiano esperado a partir de los cultivos sin ninguna composición esterilizante.

Ejemplo 1 Composiciones esterilizantes de TGA y Etanol

Este experimento se refiere a evaluar la eficacia antimicrobiana de una composición esterilizante que incluye etanol y TGA. Los experimentos se realizaron como se ha descrito anteriormente en el ejemplo 1 excepto que se preparó una composición esterilizante que contenía aproximadamente TGA 0,2 M (aproximadamente 3,7% en peso) y aproximadamente el 20% de etanol en peso (solución Nº 2).

Los resultados del experimento se muestran en la Figura 4 para esta composición esterilizante (solución Nº 2). Como se ha calculado a partir de los datos representados en la Figura 4, el valor D para la solución Nº 2 a 24ºC a partir de un periodo de esterilización de 24 horas es de aproximadamente 125,0 minutos. De esta manera, una combinación de alcohol y TGA proporciona propiedades de esterilización extremadamente buenas. Los resultados negativos y positivos fueron como se describe en el Ejemplo 1. Los efectos del etanol solo se conocen en la técnica. Resumiendo, el etanol a una concentración de aproximadamente el 70% en peso es solo moderadamente bactericida. Se sabe que el etanol es más un agente bacteriostático que un agente bactericida. De esta manera, la combinación de alcohol y amina epoxi fue sinérgica con respecto a la eficacia antimicrobiana.

Las realizaciones descritas anteriormente pretenden ser ilustrativas y no limitantes. Las realizaciones adicionales están dentro de las reivindicaciones. Aunque la presente invención se ha descrito con referencia a las realizaciones preferidas, los trabajadores expertos en la técnica reconocerán que pueden hacerse cambios en la forma y el detalle sin alejarse del alcance de la invención.

Claims (14)

1. Un método de tratamiento de un artículo, comprendiendo el método poner en contacto el artículo con una composición esterilizante que comprende un compuesto de amina epoxi y un alcohol.

2. El método de la reivindicación 1, en el que el compuesto de amina epoxi es una amina poliepoxi.

3. El método de la reivindicación 1, en el que el compuesto de amina epoxi es triglicidil amina.

4. El método de cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el artículo comprende tejido.

5. El método de cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que la composición comprende el compuesto de amina epoxi a una concentración entre el 0,5 por ciento en peso y el 10 por ciento en peso.

6. El método de cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que la composición es una solución acuosa.

7. El método de las reivindicaciones 1 a 6, en el que la composición está vaporizada.

8. El método de cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el alcohol se selecciona entre el grupo compuesto por metanol, etanol, n-propanol, isopropanol, alcohol bencílico, cresol y carbinol.

9. El método de cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que la composición tiene una concentración de alcohol entre el 10 por ciento en peso y el 40 por ciento en peso.

10. El método de cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el artículo comprende tejido reticulado, habiéndose procesado adicionalmente el tejido reticulado antes del contacto con la composición esterilizante.

11. El método de la reivindicación 10, en el que el tejido reticulado se ha procesado adicionalmente por tratamiento con un agente anti-calcificación antes del contacto con la composición esterilizante.

12. El método de la reivindicación 10 u 11, en el que los artículos se seleccionan entre el grupo compuesto por válvulas cardiacas, prótesis e injertos vasculares.

13. Un método de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en el que el artículo es un artículo no proteico.

14. Una composición esterilizante que comprende un compuesto de amina epoxi y un alcohol.