ES2290019T3 - Nuevas formulaciones de cocleatos aislados en hidrogel, procedimiento de preparacion y su uso para la administracion de moleculas biologicamente relevantes. - Google Patents
Nuevas formulaciones de cocleatos aislados en hidrogel, procedimiento de preparacion y su uso para la administracion de moleculas biologicamente relevantes. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2290019T3 ES2290019T3 ES00909961T ES00909961T ES2290019T3 ES 2290019 T3 ES2290019 T3 ES 2290019T3 ES 00909961 T ES00909961 T ES 00909961T ES 00909961 T ES00909961 T ES 00909961T ES 2290019 T3 ES2290019 T3 ES 2290019T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- lipid
- cochleates
- suspension
- polymer
- biologically relevant
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 96
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 73
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 title description 52
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 52
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims abstract description 93
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims abstract description 75
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims abstract description 64
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 28
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims abstract description 12
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 140
- APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N amphotericin B Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N 0.000 claims description 91
- APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N Amphotericin-B Natural products O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1C=CC=CC=CC=CC=CC=CC=C[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N 0.000 claims description 87
- 229960003942 amphotericin b Drugs 0.000 claims description 87
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 claims description 51
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 36
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 35
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 claims description 31
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 30
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims description 24
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 20
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 claims description 18
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 18
- 230000002051 biphasic effect Effects 0.000 claims description 17
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 16
- -1 octyl glycoside Chemical class 0.000 claims description 16
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 16
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical group [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 14
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims description 14
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims description 14
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 14
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 11
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 11
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims description 11
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims description 11
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims description 11
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 10
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims description 10
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 claims description 9
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 claims description 9
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 claims description 9
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 claims description 9
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 9
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 8
- JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N rifampicin Chemical compound O([C@](C1=O)(C)O/C=C/[C@@H]([C@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)\C=C\C=C(C)/C(=O)NC=2C(O)=C3C([O-])=C4C)C)OC)C4=C1C3=C(O)C=2\C=N\N1CC[NH+](C)CC1 JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N 0.000 claims description 8
- 229960001225 rifampicin Drugs 0.000 claims description 8
- QAGYKUNXZHXKMR-UHFFFAOYSA-N CPD000469186 Natural products CC1=C(O)C=CC=C1C(=O)NC(C(O)CN1C(CC2CCCCC2C1)C(=O)NC(C)(C)C)CSC1=CC=CC=C1 QAGYKUNXZHXKMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 claims description 7
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 claims description 7
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 7
- QAGYKUNXZHXKMR-HKWSIXNMSA-N nelfinavir Chemical compound CC1=C(O)C=CC=C1C(=O)N[C@H]([C@H](O)CN1[C@@H](C[C@@H]2CCCC[C@@H]2C1)C(=O)NC(C)(C)C)CSC1=CC=CC=C1 QAGYKUNXZHXKMR-HKWSIXNMSA-N 0.000 claims description 7
- 229960000884 nelfinavir Drugs 0.000 claims description 7
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 7
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 claims description 7
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 claims description 7
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 claims description 7
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 claims description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 6
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 claims description 6
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 6
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims description 6
- CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N indomethacin Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 claims description 6
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 claims description 6
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 claims description 6
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 claims description 6
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims description 6
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 claims description 5
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 claims description 5
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 claims description 5
- 229920002432 poly(vinyl methyl ether) polymer Polymers 0.000 claims description 5
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 claims description 5
- CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N Naproxen Natural products C1=C(C(C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 claims description 4
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 claims description 4
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims description 4
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 claims description 4
- 229960002009 naproxen Drugs 0.000 claims description 4
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 4
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 claims description 4
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 claims description 4
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 claims description 3
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 claims description 3
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 claims description 3
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 claims description 3
- CXOFVDLJLONNDW-UHFFFAOYSA-N Phenytoin Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C1(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 CXOFVDLJLONNDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N aciclovir Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1N(COCCO)C=N2 MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960004150 aciclovir Drugs 0.000 claims description 3
- 229940009456 adriamycin Drugs 0.000 claims description 3
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 claims description 3
- 229930003827 cannabinoid Natural products 0.000 claims description 3
- 239000003557 cannabinoid Substances 0.000 claims description 3
- 229940065144 cannabinoids Drugs 0.000 claims description 3
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 claims description 3
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 claims description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 claims description 3
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 claims description 3
- 229960000905 indomethacin Drugs 0.000 claims description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 3
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 claims description 3
- 229960001924 melphalan Drugs 0.000 claims description 3
- SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N melphalan Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N 0.000 claims description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 3
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 claims description 3
- 229960001597 nifedipine Drugs 0.000 claims description 3
- HYIMSNHJOBLJNT-UHFFFAOYSA-N nifedipine Chemical compound COC(=O)C1=C(C)NC(C)=C(C(=O)OC)C1C1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O HYIMSNHJOBLJNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 claims description 3
- 244000045947 parasite Species 0.000 claims description 3
- 229960002036 phenytoin Drugs 0.000 claims description 3
- 229960004948 propanidid Drugs 0.000 claims description 3
- KEJXLQUPYHWCNM-UHFFFAOYSA-N propanidid Chemical compound CCCOC(=O)CC1=CC=C(OCC(=O)N(CC)CC)C(OC)=C1 KEJXLQUPYHWCNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960004134 propofol Drugs 0.000 claims description 3
- OLBCVFGFOZPWHH-UHFFFAOYSA-N propofol Chemical compound CC(C)C1=CC=CC(C(C)C)=C1O OLBCVFGFOZPWHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N rapamycin Natural products COCC(O)C(=C/C(C)C(=O)CC(OC(=O)C1CCCCN1C(=O)C(=O)C2(O)OC(CC(OC)C(=CC=CC=CC(C)CC(C)C(=O)C)C)CCC2C)C(C)CC3CCC(O)C(C3)OC)C ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N sirolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N 0.000 claims description 3
- 229960002930 sirolimus Drugs 0.000 claims description 3
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 claims description 3
- 150000003515 testosterones Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000003204 tranquilizing agent Substances 0.000 claims description 3
- 230000002936 tranquilizing effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000003071 vasodilator agent Substances 0.000 claims description 3
- CUKWUWBLQQDQAC-VEQWQPCFSA-N (3s)-3-amino-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s,3s)-1-[[(2s)-1-[(2s)-2-[[(1s)-1-carboxyethyl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-3-(1h-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-ox Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 CUKWUWBLQQDQAC-VEQWQPCFSA-N 0.000 claims description 2
- QMMRCKSBBNJCMR-KMZPNFOHSA-N Angiotensin III Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 QMMRCKSBBNJCMR-KMZPNFOHSA-N 0.000 claims description 2
- 102400000344 Angiotensin-1 Human genes 0.000 claims description 2
- 101800000734 Angiotensin-1 Proteins 0.000 claims description 2
- 102400000345 Angiotensin-2 Human genes 0.000 claims description 2
- 101800000733 Angiotensin-2 Proteins 0.000 claims description 2
- 102400000348 Angiotensin-3 Human genes 0.000 claims description 2
- 101800000738 Angiotensin-3 Proteins 0.000 claims description 2
- 102400000967 Bradykinin Human genes 0.000 claims description 2
- 101800004538 Bradykinin Proteins 0.000 claims description 2
- 102000055006 Calcitonin Human genes 0.000 claims description 2
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 claims description 2
- 239000000055 Corticotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 claims description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 2
- 108010092674 Enkephalins Proteins 0.000 claims description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 claims description 2
- QXZGBUJJYSLZLT-UHFFFAOYSA-N H-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg-OH Natural products NC(N)=NCCCC(N)C(=O)N1CCCC1C(=O)N1C(C(=O)NCC(=O)NC(CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NC(CO)C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(O)=O)CCC1 QXZGBUJJYSLZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 101000904173 Homo sapiens Progonadoliberin-1 Proteins 0.000 claims description 2
- URLZCHNOLZSCCA-VABKMULXSA-N Leu-enkephalin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=CC=C1 URLZCHNOLZSCCA-VABKMULXSA-N 0.000 claims description 2
- 241000711408 Murine respirovirus Species 0.000 claims description 2
- 102100024028 Progonadoliberin-1 Human genes 0.000 claims description 2
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 claims description 2
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 claims description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 2
- 101000996723 Sus scrofa Gonadotropin-releasing hormone receptor Proteins 0.000 claims description 2
- GXBMIBRIOWHPDT-UHFFFAOYSA-N Vasopressin Natural products N1C(=O)C(CC=2C=C(O)C=CC=2)NC(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C1CC1=CC=CC=C1 GXBMIBRIOWHPDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108010004977 Vasopressins Proteins 0.000 claims description 2
- 102000002852 Vasopressins Human genes 0.000 claims description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 2
- ORWYRWWVDCYOMK-HBZPZAIKSA-N angiotensin I Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 ORWYRWWVDCYOMK-HBZPZAIKSA-N 0.000 claims description 2
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000002924 anti-infective effect Effects 0.000 claims description 2
- KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N argipressin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N1)=O)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)C1=CC=CC=C1 KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N 0.000 claims description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 2
- QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N bradykinin Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)CCC1 QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N 0.000 claims description 2
- BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N calcitonin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(N)=O)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1 BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N 0.000 claims description 2
- 229960004015 calcitonin Drugs 0.000 claims description 2
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 claims description 2
- GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L cobalt dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Co+2] GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- IDLFZVILOHSSID-OVLDLUHVSA-N corticotropin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO)C1=CC=C(O)C=C1 IDLFZVILOHSSID-OVLDLUHVSA-N 0.000 claims description 2
- 229960000258 corticotropin Drugs 0.000 claims description 2
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 claims description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 2
- XLXSAKCOAKORKW-UHFFFAOYSA-N gonadorelin Chemical compound C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 claims description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 claims description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 2
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 claims description 2
- CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N methyl (2s)-2-[[(2s)-2-[[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5 Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)OC)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N)C1=CC=CC=C1 CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N 0.000 claims description 2
- 230000003641 microbiacidal effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000003158 microbiostatic effect Effects 0.000 claims description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 2
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000000049 pigment Substances 0.000 claims description 2
- 239000002574 poison Substances 0.000 claims description 2
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 claims description 2
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 claims description 2
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 claims description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 2
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 claims description 2
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003053 toxin Substances 0.000 claims description 2
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 claims description 2
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 claims description 2
- 229960003726 vasopressin Drugs 0.000 claims description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 2
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 claims 5
- CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N naproxen Chemical compound C1=C([C@H](C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N 0.000 claims 3
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 claims 2
- MCCACAIVAXEFAL-UHFFFAOYSA-N 1-[2-(2,4-dichlorophenyl)-2-[(2,4-dichlorophenyl)methoxy]ethyl]imidazole;nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O.ClC1=CC(Cl)=CC=C1COC(C=1C(=CC(Cl)=CC=1)Cl)CN1C=NC=C1 MCCACAIVAXEFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 229940035674 anesthetics Drugs 0.000 claims 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims 2
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 claims 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims 2
- 239000003193 general anesthetic agent Substances 0.000 claims 2
- 229960005040 miconazole nitrate Drugs 0.000 claims 2
- 239000000047 product Substances 0.000 claims 2
- 229940124549 vasodilator Drugs 0.000 claims 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 101001037767 Plasmodium falciparum (isolate FC27 / Papua New Guinea) Small histidine-alanine-rich protein Proteins 0.000 claims 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 claims 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 claims 1
- 229960005475 antiinfective agent Drugs 0.000 claims 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 claims 1
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 claims 1
- DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N barium atom Chemical compound [Ba] DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 claims 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 claims 1
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 claims 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims 1
- 239000002294 steroidal antiinflammatory agent Substances 0.000 claims 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 abstract description 2
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 abstract 1
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 56
- WTBFLCSPLLEDEM-JIDRGYQWSA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phospho-L-serine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC WTBFLCSPLLEDEM-JIDRGYQWSA-N 0.000 description 45
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 32
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 29
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 28
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 28
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 23
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 23
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 17
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 16
- 239000002691 unilamellar liposome Substances 0.000 description 16
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 229920002594 Polyethylene Glycol 8000 Polymers 0.000 description 14
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 14
- 238000009834 vaporization Methods 0.000 description 14
- 230000008016 vaporization Effects 0.000 description 14
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 13
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 description 13
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 12
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 11
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 10
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 10
- 238000002356 laser light scattering Methods 0.000 description 10
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 8
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 8
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 7
- 239000000232 Lipid Bilayer Substances 0.000 description 7
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 7
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 6
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 6
- 244000223760 Cinnamomum zeylanicum Species 0.000 description 5
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000017803 cinnamon Nutrition 0.000 description 5
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 5
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 4
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 4
- 210000003934 vacuole Anatomy 0.000 description 4
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 4
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 3
- 206010007134 Candida infections Diseases 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 2
- 101150060820 Pfas gene Proteins 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 2
- 238000006701 autoxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 2
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical class C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 2
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 229920011301 perfluoro alkoxyl alkane Polymers 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 230000009255 platelet function activity Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 2
- PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 0.000 description 1
- DUHUCHOQIDJXAT-OLVMNOGESA-N 3-hydroxy-(3-α,5-α)-Pregnane-11,20-dione Chemical compound C([C@@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H](C(=O)C)[C@@]2(C)CC1=O DUHUCHOQIDJXAT-OLVMNOGESA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- BYBLEWFAAKGYCD-UHFFFAOYSA-N Miconazole Chemical compound ClC1=CC(Cl)=CC=C1COC(C=1C(=CC(Cl)=CC=1)Cl)CN1C=NC=C1 BYBLEWFAAKGYCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 241000255969 Pieris brassicae Species 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 239000006159 Sabouraud's agar Substances 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 206010042938 Systemic candida Diseases 0.000 description 1
- 239000007984 Tris EDTA buffer Substances 0.000 description 1
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009056 active transport Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 229960003305 alfaxalone Drugs 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940098178 ambisome Drugs 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000003444 anaesthetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 1
- 229920000249 biocompatible polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 201000003984 candidiasis Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001733 carboxylic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 230000009920 chelation Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 208000033921 delayed sleep phase type circadian rhythm sleep disease Diseases 0.000 description 1
- 229940009976 deoxycholate Drugs 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000011536 extraction buffer Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000000855 fungicidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 210000003736 gastrointestinal content Anatomy 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- 230000009422 growth inhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 210000004324 lymphatic system Anatomy 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000034217 membrane fusion Effects 0.000 description 1
- 229960002509 miconazole Drugs 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 229940124561 microbicide Drugs 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-M naproxen(1-) Chemical compound C1=C([C@H](C)C([O-])=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-M 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L potassium sulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 210000005084 renal tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229960003471 retinol Drugs 0.000 description 1
- 235000020944 retinol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011607 retinol Substances 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 239000012449 sabouraud dextrose agar Substances 0.000 description 1
- 238000004626 scanning electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000003307 slaughter Methods 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017550 sodium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229940125725 tranquilizer Drugs 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
- A61K9/1274—Non-vesicle bilayer structures, e.g. liquid crystals, tubules, cubic phases, cochleates; Sponge phases
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
- A61K31/07—Retinol compounds, e.g. vitamin A
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/11—Aldehydes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
- A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
- A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
- A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/54—Lauraceae (Laurel family), e.g. cinnamon or sassafras
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/12—Cyclic peptides, e.g. bacitracins; Polymyxins; Gramicidins S, C; Tyrocidins A, B or C
- A61K38/13—Cyclosporins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P23/00—Anaesthetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/10—Antimycotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/829—Liposomes, e.g. encapsulation
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T428/00—Stock material or miscellaneous articles
- Y10T428/29—Coated or structually defined flake, particle, cell, strand, strand portion, rod, filament, macroscopic fiber or mass thereof
- Y10T428/2982—Particulate matter [e.g., sphere, flake, etc.]
- Y10T428/2984—Microcapsule with fluid core [includes liposome]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Anesthesiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
Abstract
Un procedimiento para producir cocleatos basados en lípidos que comprende las etapas de: a) proporcionar una suspensión acuosa de liposomas; b) mezclar la suspensión de liposomas con polímero A; c) añadir la suspensión de liposomas/polímero A, a una disolución que comprende polímero B, en la que el polímero A y el polímero B son inmiscibles, creando así un sistema polimérico bifásico; d) añadir una disolución de una fracción catiónica al sistema polimérico bifásico; y e) lavar el sistema polimérico bifásico para eliminar los polímeros.
Description
Nuevas formulaciones de cocleatos aislados en
hidrogel, procedimiento de preparación y su uso para la
administración de moléculas biológicamente relevantes.
La presente invención se refiere a un nuevo
procedimiento para preparar un nuevo sistema de administración de
cocleatos basado en lípidos, a las preparaciones farmacéuticas
derivadas del sistema de administración de cocleatos basado en
lípidos y al uso de estas preparaciones farmacéuticas para
conseguir una eficaz administración sistémica y a las mucosas de
moléculas biológicamente relevantes.
La capacidad de las moléculas biológicamente
relevantes para ser administradas a través de la vía oral depende
de varios factores. La molécula biológicamente relevante debe ser
soluble en los fluidos gastrointestinales, con objeto de que la
molécula biológicamente relevante sea transportada a través de las
membranas biológicas por un mecanismo de transporte activo, o tener
un tamaño de partícula pequeño adecuado que pueda ser absorbido a
través de las placas de Peyer del intestino delgado y a través del
sistema linfático. El tamaño de partícula es un parámetro
importante cuando se va a conseguir la administración por vía oral
(véase Couvreur P. y col., Adv. Drug Delivery Reviews 10;
141-162, 1993).
La cuestión principal en la capacidad de
administrar fármacos por vía oral es la protección del fármaco
frente a las enzimas proteolíticas. Una metodología ideal es
incorporar el fármaco en un material hidrófobo, de forma que los
fluidos acuosos no puedan penetrar en el sistema. Los cocleatos
basados en lípidos son un sistema ideal que puede conseguir este
propósito.
Las ventajas de los cocleatos son numerosas. Los
cocleatos tienen una estructura no acuosa, y por lo tanto:
- a)
- son más estables debido a una menor oxidación de los lípidos;
- b)
- pueden almacenarse liofilizados, lo que proporciona el potencial de ser almacenados durante largos períodos de tiempo a temperatura ambiente, lo que sería ventajoso para envíos a todo el mundo y para su almacenamiento antes de su administración;
- c)
- mantienen su estructura incluso después de la liofilización, mientras que las estructuras en liposoma son destruidas por la liofilización;
- d)
- muestran una eficaz incorporación de moléculas biológicamente relevantes en la bicapa lipídica de la estructura del cocleato;
- e)
- tienen el potencial de una liberación lenta de una molécula biológicamente relevante in vivo al disociarse el cocleato;
- f)
- tiene una bicapa lipídica que sirve como vehículo y está formada por lípidos simples que se encuentran en las membranas celulares animales y vegetales, por lo que los lípidos no son tóxicos;
- g)
- se producen de forma fácil y segura;
- h)
- pueden producirse como formulaciones definidas formadas por cantidades y proporciones predeterminadas de fármacos o de antígenos.
Las estructuras de los cocleatos fueron
preparadas inicialmente por D. Papahadjopoulos como un intermedio
en la preparación de grandes vesículas unilamelares (véase el
documento US 4.078.052). El uso de cocleatos para administrar
proteínas o moléculas peptídicas para vacunas se ha descrito en el
documento US 5.840.707. Sin embargo, ninguna de estas patentes
aborda la importancia del tamaño de partícula o la administración
eficaz por vía oral de moléculas biológicamente relevantes mediada
por cocleatos de pequeño tamaño.
De acuerdo con lo anterior, es un objeto de esta
invención proporcionar un procedimiento para obtener un cocleato
aislado en hidrogel con un tamaño de partícula menor de un
micrómetro. El procedimiento comprende adicionalmente las etapas
necesarias para coclear al menos una molécula biológicamente
relevante en los cocleatos aislados en hidrogel en una cantidad
terapéuticamente eficaz.
Una "molécula biológicamente relevante" es
aquella que tiene un papel en los procedimientos biológicos de un
organismo vivo. La molécula puede ser orgánica o inorgánica, un
monómero o un polímero, endógena a un organismo hospedador o no,
que aparece de forma natural o sintetizada in vitro, y
similares. Por lo tanto, algunos ejemplos incluyen vitaminas,
minerales, aminoácidos, toxinas, microbicidas, microbiostáticos,
cofactores, enzimas, polipéptidos, agregados de polipéptidos,
polinucleótidos, lípidos, carbohidratos, nucleótidos, almidones,
pigmentos, ácidos grasos, hormonas, citocinas, virus, orgánulos,
esteroides y otras estructuras multianulares, sacáridos, metales,
venenos metabólicos, fármacos y similares.
Estos y otros objetos se han obtenido
proporcionando una molécula biológicamente relevante cocleada, en
la que la molécula biológicamente relevante comprende los
siguientes componentes:
- a)
- una molécula biológicamente relevante,
- b)
- un lípido cargado negativamente, y
- c)
- un componente catiónico,
en la que el tamaño de partícula de
la molécula biológicamente relevante cocleada es menor de un
micrómetro, y adicionalmente en la que la molécula biológicamente
relevante es preferiblemente un
fármaco.
La presente invención proporciona adicionalmente
un procedimiento para administrar por vía oral a un hospedador una
cantidad biológicamente eficaz del cocleato descrito
anteriormente.
En una forma de realización preferida, el
cocleato-molécula biológicamente relevante se
administra por vía oral.
Figura 1 Esquema del procedimiento mediante el
cual se obtienen los cocleatos aislados en hidrogel, con o sin
fármaco.
Figuras 2a y 2b Distribución del tamaño de
partícula (análisis ponderal) de los cocleatos aislados en hidrogel
cargados con anfotericina B (AmB) (fig. 2a) o vacíos (fig. 2b)
medida mediante dispersión de luz láser.
Figuras 3a y 3b Imágenes microscópicas de una
mezcla de liposomas en dextrano dispersados en una disolución de
gel de PEG. Los pequeños puntos negros son partículas de dextrano
formadas dispersando la fase de dextrano en la fase de PEG. Los
grandes círculos blancos se forman mediante la fusión de pequeñas
partículas de dextrano. El reparto de los liposomas favorece la
fase de dextrano, según se indica por el color amarillo de la AmB.
3b. Imágenes microscópicas de la muestra mostrada en la Fig. 3a
después del tratamiento con una disolución de CaCl_{2}. Los
objetos negros de los círculos, indicados por una flecha, son
cocleatos formados mediante la adición de iones Ca^{2+}.
Figuras 4a-4f Imágenes
microscópicas de la muestra mostrada en las Figs. 3a y 3b después
del lavado con un tampón que contiene CaCl_{2} 1 mM y NaCl 100
mM. Los agregados están formados por las partículas de cocleatos.
4b. Suspensión mostrada en la Fig. 4a tras la adición de EDTA.
Partículas de cocleato abiertas en liposomas con un diámetro de
1-2 micrómetros, lo que indica que el tamaño
intrínseco de las partículas de cocleato está en un intervalo
submicrométrico. 4c. Cocleatos aislados en hidrogel con AmB
precipitados con cinc según el procedimiento descrito en el Ejemplo
4. 4d. Cocleatos mostrados en la fig. 4c tras un tratamiento con
EDTA. 4e. Cocleatos aislados en hidrogel vacíos precipitados con
cinc según el procedimiento descrito en el Ejemplo 3. 4f) Cocleatos
mostrados en 4f tras un tratamiento con EDTA.
Figura 5 Micrografías de cocleatos aislados en
hidrogel tras la criofractura.
Figura 6 Inhibición del crecimiento de
Candida albicans mediante cocleatos aislados en hidrogel
cargados con AmB a 0,625 \mug de AmB/ml. Se realiza una
comparación con AmB en DMSO y AmBisome^{R}.
Figura 7 Efecto de los cocleatos aislados en
hidrogel sobre la viabilidad de Candida albicans después de
30 horas.
Figura 8 Eficacia de los cocleatos de
anfotericina B y cultivos de macrófagos.
Figura 9 Niveles tisulares de anfotericina B
tras la administración de cocleatos de anfotericina B.
Figura 10 Perfil temporal de la concentración
tisular de AmB tras la administración de una única dosis de
cocleatos aislados en hidrogel cargados con AmB.
Figura 11 Nivel tisular de AmB 24 h después de
una única dosis y 24 h después de un régimen de dosis múlti-
ples.
ples.
Figura 12 Correlación entre el nivel tisular de
anfotericina B y el nivel de Candida albicans tras la
administración de cocleatos de anfotericina B.
La presente invención proporciona una solución
para conseguir la administración eficaz por vía oral de fármacos
mediante la producción de cocleatos de pequeño tamaño usando un
nuevo procedimiento. La nueva metodología se basa en la
incompatibilidad entre dos disoluciones de polímero, siendo ambas
acuosas. Los sistemas acuosos bifásicos de polímeros se usan
ampliamente para la purificación de proteínas debido a diversas
ventajas, tales como la libertad de no necesitar disolventes
orgánicos, una leve tensión superficial y la biocompatibilidad de
los polímeros acuosos (véase P. A. Albertsson en "Partition of
ceil particles and macro-molecules", 3ª edición,
Wiley NY 1986; y "Separation using aqueous Phase System" D.
Fisher Eds., Plenum NY, 1989). Se sabe, por ejemplo, que grandes
moléculas polares tales como las proteínas se reparten a una
concentración mucho mayor en una fase de polímero con unas
características físicas similares a las del dextrano que en una
fase de polímero con unas características físicas similares a las
del PEG (D. Forciniti, C. K. Hall, M. R. Kula, Biotechnol. Bioeng.
38, 986 1991).
Según la presente invención se proporcionan
procedimientos para preparar partículas de cocleatos de pequeño
tamaño basadas en lípidos y preparaciones derivadas de las mismas,
que comprenden una molécula biológicamente relevante incorporada en
las partículas. Las partículas de cocleatos están formadas por una
secuencia alternante de bicapas lipídicas/catión. La molécula
biológicamente relevante está incorporada bien en las bicapas
lipídicas o bien en el espacio entre las bicapas lipídicas. Uno de
los procedimientos para preparar los cocleatos de pequeño tamaño
comprende: 1) preparar una suspensión de pequeños liposomas
unilamelares o de liposomas cargados con una molécula
biológicamente relevante, 2) mezclar la suspensión de liposomas con
polímero A, 3) añadir, preferiblemente mediante inyección, la
suspensión de liposomas/polímero A, a otro polímero B en el que el
polímero A no es miscible, dando lugar a un sistema acuoso bifásico
de polímeros, 4) añadir una disolución de una sal catiónica al
sistema bifásico de la etapa 3, de forma que el catión difunda en
el polímero B y después en las partículas formadas por
liposomas/polímero A, permitiendo la formación de cocleatos de
pequeño tamaño, 5) eliminar los polímeros mediante lavado y
resuspender los cocleatos vacíos o cargados con fármaco en un tampón
fisiológico o en cualquier vehículo farmacéutico apropiado.
Un segundo procedimiento para preparar los
cocleatos de pequeño tamaño comprende detergente y una molécula
biológicamente relevante y un catión. El procedimiento comprende
las siguientes etapas:
a) proporcionar una suspensión acuosa que
contiene una mezcla de detergente-lípido;
b) mezclar la suspensión de
detergente-lípido con polímero A;
c) añadir la suspensión de
detergente-lípido/polímero A, a una disolución que
comprende polímero B, en la que el polímero A y el polímero B son
inmiscibles, creando así un sistema polimérico bifásico;
d) añadir una disolución de una fracción
catiónica al sistema polimérico bifásico; y
e) lavar el sistema polimérico bifásico para
eliminar el polímero.
Puede aplicarse un procedimiento de
liofilización, y el complejo molécula biológicamente
relevante-cocleato liofilizado se puede introducir
en cápsulas de gelatina dura o blanda, comprimidos u otra forma de
dosificación, para su administración por vía sistémica, dérmica o a
través de las mucosas.
Este procedimiento da lugar a una partícula de
pequeño tamaño con un estrecho intervalo de tamaños que permite una
eficaz administración por vía oral de moléculas biológicamente
relevantes. La molécula biológicamente relevante se reparte en una
o ambas bicapas lipídicas y espacio intermedio, y la molécula
biológicamente relevante es liberada de las partículas de cocleato
mediante la disociación de las partículas in vivo. Algunas
vías de administración alternativas pueden ser sistémicas tales
como intramuscular, subcutánea o intravenosa, o a través de mucosas
tales como intranasal, intraocular, intravaginal, intraanal,
parenteral o intrapulmonar. Las dosis apropiadas pueden
determinarse mediante, por ejemplo, experimentos de
dosis-respuesta en animales de laboratorio o en
ensayos clínicos, y teniendo en cuenta el peso corporal del
paciente, la tasa de absorción, la semivida, la gravedad de la
enfermedad y similares. El número de dosis, la dosificación diaria y
el curso del tratamiento pueden variar de un individuo a otro. Otras
vías de administración pueden ser dérmica, transdérmica o
intradérmica.
La primera etapa del nuevo procedimiento de la
presente invención, que es la preparación de liposomas pequeños,
puede conseguirse mediante procedimientos estándar tales como
aplicación de ultrasonidos o microfluidificación u otros
procedimientos relacionados (véase, por ejemplo, Liposome
Technology, Liposome Preparation and Related Techniques, editado
por Gregory Gregoriadis, Vol. 1, 2ª edición, CRC Press, 1993).
La adición, preferiblemente mediante inyección,
de la suspensión de polímero A/liposoma en el polímero B puede
conseguirse mecánicamente usando una bomba de jeringa a una tasa
apropiada y controlada, por ejemplo, a una tasa desde 0,1 ml/min
hasta 50 ml/min y preferiblemente a una tasa desde 1 hasta 10
ml/min.
Los lípidos de la presente invención son lípidos
no tóxicos e incluyen, pero no se limitan a, lípidos simples que
pueden encontrarse en las membranas celulares animales y vegetales.
Preferiblemente, el lípido es un lípido cargado negativamente, más
preferiblemente un fosfolípido cargado negativamente, e incluso más
preferiblemente un lípido de grupo de fosfatidilserina,
fosfatidilinositol, ácido fosfatídico y fosfatidilglicerol. Los
lípidos también pueden incluir cantidades menores de lípidos
bipolares, lípidos catiónicos o lípidos neutros capaces de formar
puentes de hidrógeno con una molécula biológicamente relevante tal
como un lípido PEGilado.
Los polímeros A y B de la presente invención
pueden ser de cualquier clase de polímeros biocompatibles que
puedan producir un sistema acuoso bifásico. Por ejemplo, el
polímero A puede ser, pero no se limita a, dextrano
200.000-500.000, polietilenglicol (PEG)
3.400-8.000; el polímero B puede ser, pero no se
limita a, polivinilpirrolidona (PVP), alcohol polivinílico (PVA),
ficoll 30.000-50.000, polivinilmetil éter (PVMB)
60.000-160.000, PEG 3.400-8.000. La
concentración del polímero A puede variar entre el
2-20% p/p, ya que la concentración final depende de
la naturaleza del polímero. Puede aplicarse el mismo intervalo de
concentración para el polímero B. Algunos ejemplos de sistemas
bifásicos adecuados son dextrano/PEG, 5-20% p/p de
dextrano 200.000-500.000 en 4-10%
p/p de PEG 3.400-8.000; dextrano/PVP,
10-20% p/p de dextrano
200.000-500.000 en 10-20% p/p de PVP
10.000-20.000; dextrano/PVA, 3-15%
p/p de dextrano 200.000-500.000 en
3-15% p/p de PVA 10.000-60.000;
dextrano/ficoll, 10-20% p/p de dextrano
200.000-500.000 en 10-20% p/p de
Ficoll 30.000-50.000; PEG/PVME,
2-10% p/p de PEG 3.500-35.000 en
6-15% p/p de PVME
60.000-160.000.
La molécula biológicamente relevante puede ser
una molécula orgánica que sea hidrófoba en medio acuoso. La
molécula biológicamente relevante puede ser un fármaco, y el
fármaco puede ser un antiviral, un anestésico, un antinfeccioso, un
antifúngico, un anticanceroso, un inmunosupresor, un
antiinflamatorio esteroideo, un antiinflamatorio no esteroideo, un
tranquilizante o un agente vasodilatador. Algunos ejemplos incluyen
anfotericina B, aciclovir, adriamicina, cabamacepina, melfalano,
nifedipino, indometacina, naproxeno, estrógenos, testosteronas,
esteroides, fenitoína, ergotaminas, cannabinoides rapamicina,
propanidida, propofol, alfadiona, equinomicina, nitrato de
miconazol, tenipósido, taxol y taxotero.
La molécula biológicamente relevante puede ser
un polipéptido tal como ciclosporina, angiotensina I, II y III,
encefalinas y sus análogos, ACTH, péptidos antiinflamatorios I, II,
III, bradicinina, calcitonina, b-endorfina,
dinorfina, leucocinina, luliberina (LHRH), insulina, neurocininas,
somatostatina, sustancia P, tiroliberina (TRH) y vasopresina.
La molécula biológicamente relevante puede ser
un antígeno, pero el antígeno no se limita a un antígeno proteico.
El antígeno también puede ser un carbohidrato o un polinucleótido
tal como ADN. Algunos ejemplos de antígenos proteicos incluyen
glucoproteínas de la cubierta de los virus de la gripe o de Sendai,
proteínas de la membrana celular animal, proteínas de la membrana
celular vegetal, proteínas de la membrana bacteriana y proteínas de
la membrana de parásitos.
La molécula biológicamente relevante se extrae
de la partícula, célula, tejido u órgano de origen mediante
procedimientos conocidos. La actividad biológica de las moléculas
biológicamente relevantes no tiene por qué mantenerse. Sin embargo,
en algunos casos (por ejemplo, cuando una proteína tiene fusión de
membranas o actividad de unión de ligandos, o una conformación de
complejo que es reconocida por el sistema inmune), es deseable
mantener la actividad biológica. En estos casos, se usa un tampón
de extracción que contiene un detergente que no destruye la
actividad biológica de la proteína de membrana. Algunos detergentes
adecuados incluyen detergentes fónicos tales como sales de
cola-
to, sales de desoxicolato y similares, o detergentes polioxietilénicos heterogéneos tales como Tween, BRIG o Triton.
to, sales de desoxicolato y similares, o detergentes polioxietilénicos heterogéneos tales como Tween, BRIG o Triton.
La utilización de este procedimiento permite la
reconstitución de antígenos, más específicamente de proteínas, en
los liposomas, conservando las actividades biológicas, y
finalmente, una eficaz asociación con los cocleatos. Esto evita los
disolventes orgánicos, la aplicación de ultrasonidos o el pH, la
temperatura o la presión extremos, todos los cuales pueden tener un
efecto adverso sobre la eficaz reconstrucción del antígeno en una
forma biológicamente activa.
Los cocleatos aislados en hidrogel pueden
contener una combinación de varias moléculas biológicamente
relevantes según sea adecuado.
La formación de cocleatos de pequeño tamaño (con
o sin una molécula biológicamente relevante) se consigue añadiendo
una molécula cargada positivamente a la disolución bifásica de
polímero acuoso que contiene liposomas. En el procedimiento
anterior para elaborar cocleatos, la molécula cargada positivamente
puede ser un catión polivalente, y más específicamente, cualquier
catión divalente que pueda inducir la formación de un cocleato. En
una forma de realización preferida, los cationes divalentes
incluyen Ca^{++}, Zn^{++}, Ba^{++} y Mg^{++} u otros
elementos capaces de formar iones divalentes u otras estructuras
con múltiples cargas positivas capaces de quelatar y puentear
lípidos cargados negativamente. La adición de moléculas cargadas
positivamente a las disoluciones que contienen los liposomas
también se usa para precipitar los cocleatos a partir de la
disolución acuosa.
Para aislar las estructuras de los cocleatos y
para eliminar la disolución de polímero, los precipitados de
cocleatos se lavan repetidamente con un tampón que contiene una
molécula cargada positivamente, y más preferiblemente, un catión
divalente. La adición de una molécula cargada positivamente al
tampón de lavado asegura que las estructuras de los cocleatos se
mantienen a lo largo de la etapa de lavado; y que permanecen como
precipitados.
El medio en el que se suspenden los cocleatos
puede contener sales tales como cloruro cálcico, cloruro de cinc,
cloruro de cobalto, cloruro sódico, sulfato sódico, sulfato
potásico, sulfato amónico, sulfato magnésico y carbonato sódico. El
medio puede contener polímeros tales como Tween 80, BRIG o Triton.
La molécula-cocleato biológicamente relevante se
elabora diluyéndola en un vehículo adecuado o biológicamente
aceptable (por ejemplo, un tampón que contenga un catión
divalente).
Las partículas del cocleato pueden ser
entéricas. Las partículas del cocleato pueden colocarse dentro de
cápsulas de gelatina, y la cápsula pueden ser recubierta
entéricamente.
En las preparaciones de la presente invención
pueden añadirse ciertos materiales hidrófobos para proporcionar un
aumento de las propiedades de absorción para la administración por
vía oral de moléculas biológicamente relevantes. Estos materiales
se eligen preferiblemente del grupo constituido por ácidos
carboxílicos de cadena larga, ésteres de ácidos carboxílicos de
cadena larga, alcoholes de ácidos carboxílicos de cadena larga y
mezclas de los mismos. Los materiales hidrófobos pueden añadirse
inicialmente al lípido antes de la formación de los liposomas o en
una etapa posterior en forma de un vehículo graso, tal como una
emulsión.
El artesano experto puede determinar el medio
más eficaz y terapéutico para efectuar el tratamiento llevando a la
práctica la actual invención. También puede hacerse referencia a
cualquiera de las numerosas autoridades y referencias, incluyendo,
por ejemplo, "Goodman & Gillman's, The Pharmaceutical Basis
for Therapeutics", (6ª ed., Goodman y col., eds., MacMillan
Publ. Co., Nueva York, 1980).
La invención se describirá ahora mediante
ejemplos que no deben considerarse como limitantes de la invención.
En los ejemplos, salvo que se indique de otro modo, todas las
proporciones, porcentajes y cantidades son en peso.
Etapa
1
Se dispuso una disolución de
dioleoilfosfatidilserina (DOPS, Avanti Polar Lipids, Alabaster, AL,
EE.UU.) en cloroformo (10 mg/ml) en un matraz de fondo redondo, y
se secó hasta formar una película usando un rotavapor Buchi a 35°C.
El rotavapor se esterilizó mediante la vaporización instantánea de
nitrógeno gaseoso a través de un filtro de 0,2 \mum. Las
siguientes etapas se llevaron a cabo en una campana estéril. La
película lipídica seca se hidrató con agua desionizada a una
concentración de 10 mg de lípidos/ml. La suspensión hidratada se
purgó y se precintó con nitrógeno, después se aplicaron
ultrasonidos con un aparato de ultrasonidos de baño frío (Laboratory
Supplies Com., Inc.). La aplicación de ultrasonidos continuó
(durante entre varios segundos y varios minutos, dependiendo de la
cantidad y la naturaleza del lípido) hasta que la suspensión se
volvió transparente (suspensión A) y no hubo liposomas claramente
visibles bajo un microscopio de contraste de fases con un aumento
de 1000 X. La dispersión de luz láser (análisis ponderal, Coulter
N4 Plus) indica que el diámetro medio es de 35,7 \pm 49,7 nm.
Etapa
2
La suspensión de liposomas obtenida en la etapa
1 se mezcló entonces con dextrano 500.000 (Sigma) al 40% p/p en una
suspensión de 2/1 v/v de dextrano/liposomas. Esta mezcla se inyectó
entonces con una jeringa en PEG 8.000 (Sigma) al 15% p/p [PEG
8000/(suspensión A)] con agitación magnética para dar como
resultado la suspensión B. La velocidad de agitación era de
800-1.000 rpm. Se añadió una disolución de
CaCl_{2} (100 mM) a la suspensión hasta alcanzar la concentración
final de 1 mM.
La agitación continuó durante una hora, después
se añadió a la suspensión B un tampón de lavado que contenía
CaCl_{2} 1 mM y NaCl 150 mM en una proporción volumétrica de 1:1.
La suspensión se mezcló en vórtex y se centrifugó a 3.000 rpm, a
2-4°C, durante 30 min. Después de retirar el
sobrenadante se añadió tampón de lavado adicional en una proporción
volumétrica de 0,5:1, seguido de una centrifugación en las mismas
condiciones. Un esquema de este nuevo procedimiento de obtención de
cocleatos se detalla en la Figura 1. El sedimento resultante se
reconstituyó con el mismo tampón hasta la concentración deseada. La
dispersión de luz láser (análisis ponderal, Coulter N4 Plus) indica
que el diámetro medio del cocleato es de 407,2 \pm 85 nm (figura
2b).
Etapa
1
Se dispuso una disolución de
dioleoilfosfatidilserina (DOPS) y
1,2-diestearoil-sn-glicerol-3-fosfoetanolamina-n-(poli(etilenglicol)-5000),
(DSPE-PEG, Avanti Polar Lipids, Alabaster, AL,
EE.UU.), en cloroformo (proporción de DOPS:DSPS-PEG
= 100:1, p:p) en un matraz de fondo redondo, y se secó hasta formar
una película usando un rotavapor Buchi a 35°C. El rotavapor se
esterilizó mediante la vaporización instantánea de nitrógeno gaseoso
a través de un filtro de 0,2 \mum. Las siguientes etapas se
llevaron a cabo en una campana estéril. La película lipídica seca
se hidrató con agua desionizada a una concentración de 10 mg de
lípidos/ml. La suspensión hidratada se purgó y se precintó con
nitrógeno, después se aplicaron ultrasonidos con un aparato de
ultrasonidos de baño frío (Laboratory Supplies Com., Inc.). La
aplicación de ultrasonidos continuó (durante entre varios segundos
y varios minutos, dependiendo de la cantidad y la naturaleza del
lípido) hasta que la suspensión se volvió transparente (suspensión
A) y no hubo liposomas claramente visibles bajo un microscopio de
contraste de fases con un aumento de 1000 X.
Etapa
2
La suspensión de liposomas obtenida en la etapa
1 se mezcló entonces con dextrano 500.000 al 40% p/p en una
suspensión de 2/1 v/v de dextrano/liposomas. Esta mezcla se inyectó
entonces mediante una jeringa en PEG 8.000 (Sigma) al 15% p/p [PEG
8000/(suspensión A)] con agitación magnética para dar como
resultado la suspensión B. La velocidad de agitación era de
800-1.000 rpm. Se añadió una disolución de
CaCl_{2} (100 mM) a la suspensión hasta alcanzar la concentración
final de 1 mM.
La agitación continuó durante una hora, después
se añadió a la suspensión B un tampón de lavado que contenía
CaCl_{2} 1 mM y NaCl 150 mM en una proporción volumétrica de 1:1.
La suspensión se mezcló en vórtex y se centrifugó a 3.000 rpm, a
2-4°C, durante 30 min. Después de retirar el
sobrenadante se añadió tampón de lavado adicional en una proporción
volumétrica de 0,5:1, seguido de una centrifugación en las mismas
condiciones. Un esquema de este nuevo procedimiento de obtención de
cocleatos se detalla en la Figura 1. El sedimento resultante se
reconstituyó con el mismo tampón hasta la concentración deseada. El
microscopio óptico de contraste de fases indica la formación de
cocleatos uniformes, muy pequeños y fusiformes.
Etapa
1
Se dispuso una disolución de
dioleoilfosfatidilserina (DOPS) en cloroformo en un matraz de fondo
redondo, y se secó hasta formar una película usando un rotavapor
Buchi a 35°C. El rotavapor se esterilizó mediante la vaporización
instantánea de nitrógeno gaseoso a través de un filtro de 0,2
\mum. Las siguientes etapas se llevaron a cabo en una campana
estéril. La película lipídica seca se hidrató con una disolución de
n-octil-\beta-D-glucopiranósido
(OCG) a 1 mg/ml, en una proporción de DOPS:OCG de 10:1, p:p. La
suspensión hidratada se purgó y se precintó con nitrógeno, después
se aplicaron brevemente ultrasonidos con un aparato de ultrasonidos
de baño frío.
Etapa
2
La suspensión obtenida en la etapa 1 se mezcló
entonces con dextrano 500.000 al 40% p/p en una suspensión de 2/1
v/v de dextrano/liposomas. Esta mezcla se inyectó entonces mediante
una jeringa en PEG 8.000 al 15% p/p [PEG 8000/(suspensión A)] con
agitación magnética para dar como resultado la suspensión B. La
velocidad de agitación era de 800-1.000 rpm. Se
añadió una disolución de CaCl_{2} (100 mM) a la suspensión hasta
alcanzar la concentración final de 1 mM.
La agitación continuó durante una hora, después
se añadió a la suspensión B un tampón de lavado que contenía
CaCl_{2} 1 mM y NaCl 150 mM en una proporción volumétrica de 1:1.
La suspensión se mezcló en vórtex y se centrifugó a 3.000 rpm, a
2-4°C, durante 30 min. Después de retirar el
sobrenadante se añadió tampón de lavado adicional en una proporción
volumétrica de 0,5:1, seguido de una centrifugación en las mismas
condiciones. Un esquema de este nuevo procedimiento de obtención de
cocleatos se detalla en la Figura 1. El sedimento resultante se
reconstituyó con el mismo tampón hasta la concentración deseada. El
microscopio óptico de contraste de fases indica la formación de
cocleatos uniformes, muy pequeños y fusiformes.
\newpage
Etapa
1
Se dispuso una mezcla de
dioleoilfosfatidilserina (DOPS) en cloroformo (10 mg/ml) y AmB en
metanol (0,5 mg/ml) en una proporción molar de 10:1 en un matraz de
fondo redondo, y se secó hasta formar una película usando un
rotavapor Buchi a 40°C. El rotavapor se esterilizó mediante la
vaporización instantánea de nitrógeno gaseoso a través de un filtro
de 0,2 \mum. Las siguientes etapas se llevaron a cabo en una
campana estéril. La película lipídica seca se hidrató con agua
desionizada a una concentración de 10 mg de lípidos/ml. La
suspensión hidratada se purgó y se precintó con nitrógeno, después
se aplicaron ultrasonidos con un aparato de ultrasonidos de baño
frío. La aplicación de ultrasonidos continuó (durante entre varios
segundos y varios minutos, dependiendo de la cantidad y la
naturaleza del lípido) hasta que la suspensión se volvió amarillo
claro (suspensión A) y no hubo liposomas claramente visibles bajo
un microscopio de contraste de fases con un aumento de 1000 X.
La suspensión de liposomas obtenida en la etapa
1 se mezcló entonces con dextrano 500.000 al 40% p/p en una
suspensión de 2/1 v/v de dextrano/liposomas. Esta mezcla se inyectó
entonces mediante una jeringa en PEG 8.000 (Sigma) al 15% p/p [PEG
8000/(suspensión A)] con agitación magnética para dar como
resultado la suspensión B. La velocidad de agitación era de
800-1.000 rpm. Se añadió una disolución de
CaCl_{2} (100 mM) a la suspensión hasta alcanzar la concentración
final de 1 mM.
La agitación continuó durante una hora, después
se añadió a la suspensión B un tampón de lavado que contenía
CaCl_{2} 1 mM y NaCl 150 mM en una proporción volumétrica de 1:1.
La suspensión se mezcló en vórtex y se centrifugó a 3.000 rpm, a
2-4°C, durante 30 min. Después de retirar el
sobrenadante se añadió tampón de lavado adicional en una proporción
volumétrica de 0,5:1, seguido de una centrifugación en las mismas
condiciones. Un esquema de este nuevo procedimiento de obtención de
cocleatos se detalla en la Figura 1. El sedimento resultante se
reconstituyó con el mismo tampón hasta la concentración deseada. La
dispersión de luz láser (análisis ponderal, Coulter N4 Plus) indica
que el diámetro medio de los cocleatos de AmB era de 407,3 \pm
233,8 nm (figura 2a).
Etapa
1
Se dispuso una mezcla de
dioleoilfosfatidilserina (DOPS) en cloroformo (10 mg/ml) y (DXR) en
metanol (0,5 mg/ml) en una proporción molar de 10:1 en un matraz de
fondo redondo, y se secó hasta formar una película usando un
rotavapor Buchi a 40°C. El rotavapor se esterilizó mediante la
vaporización instantánea de nitrógeno gaseoso a través de un filtro
de 0,2 \mum. Las siguientes etapas se llevaron a cabo en una
campana estéril. La película lipídica seca se hidrató con agua
desionizada a una concentración de 10 mg de lípidos/ml. La
suspensión hidratada se purgó y se precintó con nitrógeno, después
se aplicaron ultrasonidos con un aparato de ultrasonidos de baño
frío. La aplicación de ultrasonidos continuó (durante entre varios
segundos y varios minutos, dependiendo de la cantidad y la
naturaleza del lípido) hasta que la suspensión se volvió rosa claro
(suspensión A) y no hubo liposomas claramente visibles bajo un
microscopio de contraste de fases con un aumento de 1000 X.
Etapa
2
Entonces se mezclaron 5 ml de la suspensión de
liposomas obtenida en la etapa 1 con dextrano 500.000 al 40% p/p
(Sigma) en una suspensión de 2/1 v/v de dextrano/liposomas. Esta
mezcla se inyectó entonces mediante una jeringa en PEG 8.000
(Sigma) al 15% p/p [PEG 8000/(suspensión A)] con agitación
magnética para dar como resultado la suspensión B. La velocidad de
agitación era de 800-1.000 rpm. Se añadió una
disolución de CaCl_{2} (100 mM) a la suspensión hasta alcanzar la
concentración final de 1 mM.
La agitación continuó durante una hora, después
se añadió a la suspensión B un tampón de lavado que contenía
CaCl_{2} 1 mM y NaCl 150 mM en una proporción volumétrica de 1:1.
La suspensión se mezcló en vórtex y se centrifugó a 6.400 rpm, a
2-4°C, durante 30 min. Un esquema de este nuevo
procedimiento de obtención de cocleatos se detalla en la Figura 1.
El sedimento resultante se reconstituyó con el mismo tampón hasta
la concentración deseada. La dispersión de luz láser (análisis
ponderal, Coulter N4 Plus) confirmó la formación de pequeños
cocleatos de
DXR.
DXR.
Etapa
1
Se dispuso una mezcla de
dioleoilfosfatidilserina (DOPS) en cloroformo (10 mg/ml) y CSPA en
metanol (0,5 mg/ml) a una proporción molar de 10:1 en un matraz de
fondo redondo, y se secó hasta formar una película usando un
rotavapor Buchi a temperatura ambiente. El rotavapor se esterilizó
mediante la vaporización instantánea de nitrógeno gaseoso a través
de un filtro de 0,2 \mum. Las siguientes etapas se llevaron a
cabo en una campana estéril. La película lipídica seca se hidrató
con agua desionizada a una concentración de 10 mg de lípidos/ml. La
suspensión hidratada se purgó y se precintó con nitrógeno, después
se aplicaron ultrasonidos con un aparato de ultrasonidos de baño
frío. La aplicación de ultrasonidos continuó (durante entre varios
segundos y varios minutos, dependiendo de la cantidad y la
naturaleza del lípido) hasta que la suspensión se volvió
transparente (suspensión A) y no hubo liposomas claramente visibles
bajo un microscopio de contraste de fases con un aumento de 1000
X.
Etapa
2
La suspensión de liposomas obtenida en la etapa
1 se mezcló entonces con dextrano 500.000 al 40% p/p en una
suspensión de 2/1 v/v de dextrano/liposomas. Esta mezcla se inyectó
entonces mediante una jeringa en PEG 8.000 (Sigma) al 15% p/p [PEG
8000/(suspensión A)] con agitación magnética para dar como
resultado la suspensión B. La velocidad de agitación era de
800-1.000 rpm. Se añadió una disolución de
CaCl_{2} (100 mM) a la suspensión hasta alcanzar la concentración
final de 1 mM.
La agitación continuó durante una hora, después
se añadió a la suspensión B un tampón de lavado que contenía
CaCl_{2} 1 mM y NaCl 150 mM en una proporción volumétrica de 1:1.
La suspensión se mezcló en vórtex y se centrifugó a 3.000 rpm, a
2-4°C, durante 30 min. Después de retirar el
sobrenadante se añadió tampón de lavado adicional en una proporción
volumétrica de 0,5:1, seguido de una centrifugación en las mismas
condiciones. Un esquema de este nuevo procedimiento de obtención de
cocleatos se detalla en la Figura 1. El sedimento resultante se
reconstituyó con el mismo tampón hasta la concentración deseada. La
dispersión de luz láser (análisis ponderal, Coulter N4 Plus)
confirmó la formación de pequeños cocleatos de CSPA.
Etapa
1
Se dispuso una mezcla de
dioleoilfosfatidilserina (DOPS) en cloroformo (10 mg/ml) y NVIR en
metanol (0,5 mg/ml) en una proporción molar de 10:1 en un matraz de
fondo redondo, y se secó hasta formar una película usando un
rotavapor Buchi a TA. El rotavapor se esterilizó mediante la
vaporización instantánea de nitrógeno gaseoso a través de un filtro
de 0,2 \mum. Las siguientes etapas se llevaron a cabo en una
campana estéril. La película lipídica seca se hidrató con agua
desionizada a una concentración de 10 mg de lípidos/ml. La
suspensión hidratada se purgó y se precintó con nitrógeno, después
se aplicaron ultrasonidos con un aparato de ultrasonidos de baño
frío. La aplicación de ultrasonidos continuó (durante entre varios
segundos y varios minutos, dependiendo de la cantidad y la
naturaleza del lípido) hasta que la suspensión se volvió
transparente (suspensión A) y no hubo liposomas claramente visibles
bajo un microscopio de contraste de fases con un aumento de 1000
X.
Etapa
2
La suspensión de liposomas obtenida en la etapa
1 se mezcló entonces con dextrano 500.000 al 40% p/p en una
suspensión de 2/1 v/v de dextrano/liposomas. Esta mezcla se inyectó
entonces mediante una jeringa en PEG 8.000 al 15% p/p [PEG
8000/(suspensión A)] con agitación magnética para dar como
resultado la suspensión B. La velocidad de agitación era de
800-1.000 rpm. Se añadió una disolución de
CaCl_{2} (100 mM) a la suspensión hasta alcanzar la concentración
final de 1 mM.
\newpage
La agitación continuó durante una hora, después
se añadió a la suspensión B un tampón de lavado que contenía
CaCl_{2} mM y NaCl 150 mM en una proporción volumétrica de 1:1.
La suspensión se mezcló en vórtex y se centrifugó a 3.000 rpm, a
2-4°C, durante 30 min. Después de retirar el
sobrenadante se añadió tampón de lavado adicional en una proporción
volumétrica de 0,5:1, seguido de una centrifugación en las mismas
condiciones. Un esquema de este nuevo procedimiento de obtención de
cocleatos se detalla en la Figura 1. El sedimento resultante se
reconstituyó con el mismo tampón hasta la concentración deseada. La
dispersión de luz láser (análisis ponderal, Coulter N4 Plus)
confirmó la formación de pequeños cocleatos de NVIR.
Etapa
1
Se dispuso una mezcla de
dioleoilfosfatidilserina (DOPS) en cloroformo (10 mg/ml) y RIF en
metanol (0,5 mg/ml) en una proporción molar de 10:1 en un matraz de
fondo redondo, y se secó hasta formar una película usando un
rotavapor Buchi a TA. El rotavapor se esterilizó mediante la
vaporización instantánea de nitrógeno gaseoso a través de un filtro
de 0,2 \mum. Las siguientes etapas se llevaron a cabo en una
campana estéril. La película lipídica seca se hidrató con agua
desionizada a una concentración de 10 mg de lípidos/ml. La
suspensión hidratada se purgó y se precintó con nitrógeno, después
se aplicaron ultrasonidos con un aparato de ultrasonidos de baño
frío. La aplicación de ultrasonidos continuó (durante entre varios
segundos y varios minutos, dependiendo de la cantidad y la
naturaleza del lípido) hasta que la suspensión se volvió
transparente (suspensión A) y no hubo liposomas claramente visibles
bajo un microscopio de contraste de fases con un aumento de 1000
X.
Etapa
2
La suspensión de liposomas obtenida en la etapa
1 se mezcló entonces con dextrano 500.000 al 40% p/p (Sigma) en una
suspensión de 2/1 v/v de dextrano/liposomas. Esta mezcla se inyectó
entonces mediante una jeringa en PEG 8.000 al 15% p/p (Sigma) [PEG
8000/(suspensión A)] con agitación magnética para dar como
resultado la suspensión B. La velocidad de agitación era de
800-1.000 rpm. Se añadió una disolución de
CaCl_{2} (100 mM) a la suspensión hasta alcanzar la concentración
final de 1 mM.
La agitación continuó durante una hora, después
se añadió a la suspensión B un tampón de lavado que contenía
CaCl_{2} mM y NaCl 150 mM en una proporción volumétrica de 1:1.
La suspensión se mezcló en vórtex y se centrifugó a 3.000 rpm, a
2-4°C, durante 30 min. Después de retirar el
sobrenadante se añadió tampón de lavado adicional en una proporción
volumétrica de 0,5:1, seguido de una centrifugación en las mismas
condiciones. Un esquema de este nuevo procedimiento de obtención de
cocleatos se detalla en la Figura 1. El sedimento resultante se
reconstituyó con el mismo tampón hasta la concentración deseada. La
dispersión de luz láser (análisis ponderal, Coulter N4 Plus)
confirmó la formación de pequeños cocleatos de RIF.
Etapa
1
La vitamina A (retinol) es sensible a la
oxidación al aire y es inactivada por la luz UV. La vitamina A está
protegida cuando está incluida en bicapas lipídicas. La
incorporación se consigue como sigue:
Se dispuso una mezcla de
dioleoilfosfatidilserina (DOPS) en cloroformo (10 mg/ml) y vitamina
A en metano) (0,5 mg/ml) en una proporción molar de 10:1 en un
matraz de fondo redondo, y se secó hasta formar una película usando
un rotavapor Buchi a TA. El rotavapor se esterilizó mediante la
vaporización instantánea de nitrógeno gaseoso a través de un filtro
de 0,2 \mum. Las siguientes etapas se llevaron a cabo en una
campana estéril. La película lipídica seca se hidrató con agua
desionizada a una concentración de 10 mg de lípidos/ml. La
suspensión hidratada se purgó y se precintó con nitrógeno, después
se aplicaron ultrasonidos con un aparato de ultrasonidos de baño
frío. La aplicación de ultrasonidos continuó (durante entre varios
segundos y varios minutos, dependiendo de la cantidad y la
naturaleza del lípido) hasta que la suspensión se volvió
transparente (suspensión A) y no hubo liposomas claramente visibles
bajo un microscopio de contraste de fases con un aumento de 1000
X.
\newpage
\global\parskip0.930000\baselineskip
Etapa
2
La suspensión de liposomas obtenida en la etapa
1 se mezcló entonces con dextrano 500.000 al 40% p/p en una
suspensión de 2/1 v/v de dextrano/liposomas. Esta mezcla se inyectó
entonces mediante una jeringa en PEG 8.000 al 15% p/p [PEG
8000/(suspensión A)] con agitación magnética para dar como
resultado la suspensión B. La velocidad de agitación era de
800-1.000 rpm. Se añadió una disolución de
CaCl_{2} (100 mM) a la suspensión hasta alcanzar la concentración
final de 1 mM.
La agitación continuó durante una hora, después
se añadió a la suspensión B un tampón de lavado que contenía
CaCl_{2} 1 mM y NaCl 150 mM en una proporción volumétrica de 1:1.
La suspensión se mezcló en vórtex y se centrifugó a 3.000 rpm, a
2-4°C, durante 30 min. Después de retirar el
sobrenadante se añadió tampón de lavado adicional en una proporción
volumétrica de 0,5:1, seguido de una centrifugación en las mismas
condiciones. Un esquema de este nuevo procedimiento de obtención de
cocleatos se detalla en la Figura 1. El sedimento resultante se
reconstituyó con el mismo tampón hasta la concentración
deseada.
Los PFA son moléculas biológicamente relevantes
implicadas en el control del nivel de colesterol en sangre, y son
los precursores de las prostaglandinas. Los PFA son sensibles a la
oxidación, lo que limita su incorporación en los alimentos. Los PFA
experimentan, en presencia de oxígeno, una serie de reacciones
denominadas de autoxidación, produciendo aldehídos y después
cetonas que tienen un desagradable olor y sabor a pescado. La
inclusión de PFA en bicapas lipídicas rígidas y enrolladas ayuda a
prevenir la cascada de autoxidación. Un procedimiento general para
preparar cocleatos de PFA es como sigue:
Etapa
1
Se dispuso una mezcla de
dioleoilfosfatidilserina (DOPS) en cloroformo (10 mg/ml) y PFA en
metanol (0,5 mg/ml) en una proporción molar de 10:1 en un matraz de
fondo redondo, y se secó hasta formar una película usando un
evaporador rotatorio a TA. El evaporador rotatorio se esterilizó
mediante la vaporización instantánea de nitrógeno gaseoso a través
de un filtro de 0,2 \mum. Las siguientes etapas se llevaron a
cabo en una campana estéril. La película lipídica seca se hidrató
con agua desionizada a una concentración de 10 mg de lípidos/ml. La
suspensión hidratada se purgó y se precintó con nitrógeno, después
se aplicaron ultrasonidos con un aparato de ultrasonidos de baño
frío. La aplicación de ultrasonidos continuó (durante entre varios
segundos y varios minutos, dependiendo de la cantidad y la
naturaleza del lípido) hasta que la suspensión se volvió
transparente (suspensión A) y no hubo liposomas claramente visibles
bajo un microscopio de contraste de fases con un aumento de 1000
X.
Etapa
2
La suspensión de liposomas obtenida en la etapa
1 se mezcló entonces con dextrano 500.000 al 40% p/p en una
suspensión de 2/1 v/v de dextrano/liposomas. Esta mezcla se inyectó
entonces mediante una jeringa en PEG 8.000 al 15% p/p [PEG
8000/(suspensión A)] con agitación magnética para dar como
resultado la suspensión B. La velocidad de agitación era de
800-1.000 rpm. Se añadió una disolución de
CaCl_{2} (100 mM) a la suspensión hasta alcanzar la concentración
final de 1 mM.
La agitación continuó durante una hora, después
se añadió a la suspensión B un tampón de lavado que contenía
CaCl_{2} 1 mM y NaCl 150 mM en una proporción volumétrica de 1:1.
La suspensión se mezcló en vórtex y se centrifugó a 3.000 rpm, a
2-4°C, durante 30 min. Después de retirar el
sobrenadante se añadió tampón de lavado adicional en una proporción
volumétrica de 0,5:1, seguido de una centrifugación en las mismas
condiciones. Un esquema de este nuevo procedimiento de obtención de
cocleatos se detalla en la Figura 1. El sedimento resultante se
reconstituyó con el mismo tampón hasta la concentración
deseada.
Etapa
1
Se dispuso una mezcla de
dioleoilfosfatidilserina (DOPS) en cloroformo (10 mg/ml) y CinO en
metanol (0,5 mg/ml) en una proporción molar de 10:1 en un matraz de
fondo redondo, y se secó hasta formar una película usando un
rotavapor Buchi a 40°C. El rotavapor se esterilizó mediante la
vaporización instantánea de nitrógeno gaseoso a través de un filtro
de 0,2 \mum. Las siguientes etapas se llevaron a cabo en una
campana estéril. La película lipídica seca se hidrató con agua
desionizada a una concentración de 10 mg de lípidos/ml. La
suspensión hidratada se purgó y se precintó con nitrógeno, después
se aplicaron ultrasonidos con un aparato de ultrasonidos de baño
frío. La aplicación de ultrasonidos continuó (durante entre varios
segundos y varios minutos, dependiendo de la cantidad y la
naturaleza del lípido) hasta que la suspensión se volvió
transparente (suspensión A) y no hubo liposomas claramente visibles
bajo un microscopio de contraste de fases con un aumento de 1000
X.
\global\parskip1.000000\baselineskip
Etapa
2
La suspensión de liposomas obtenida en la etapa
1 se mezcló entonces con dextrano 500.000 al 40% p/p en una
suspensión de 2/1 v/v de dextrano/liposomas. Esta mezcla se inyectó
entonces mediante una jeringa en PEG 8.000 al 15% p/p [PEG
8000/(suspensión A)] con agitación magnética para dar como
resultado la suspensión B. La velocidad de agitación era de
800-1.000 rpm. Se añadió una disolución de
CaCl_{2} (100 mM) a la suspensión hasta alcanzar la concentración
final de 1 mM.
La agitación continuó durante una hora, después
se añadió a la suspensión B un tampón de lavado que contenía
CaCl_{2} 1 mM y NaCl 150 mM en una proporción volumétrica de 1:1.
La suspensión se mezcló en vórtex y se centrifugó a 3.000 rpm, a
2-4°C, durante 30 min. Después de retirar el
sobrenadante se añadió tampón de lavado adicional en una proporción
volumétrica de 0,5:1, seguido de una centrifugación en las mismas
condiciones. Un esquema de este nuevo procedimiento de obtención de
cocleatos se detalla en la Figura 1. El sedimento resultante se
reconstituyó con el mismo tampón hasta la concentración
deseada.
Etapa
1
Se dispuso una disolución de
dioleoilfosfatidilserina en cloroformo (10 mg/ml) en un matraz de
fondo redondo, y se secó hasta formar una película usando un
rotavapor Buchi a TA. El rotavapor se esterilizó mediante la
vaporización instantánea de nitrógeno gaseoso a través de un filtro
de 0,2 \mum. Las siguientes etapas se llevaron a cabo en una
campana estéril. La película lipídica seca se hidrató con una
disolución de
pCMV-\beta-gal-ADN
en tampón de TE (a 1 mg/ml) hasta alcanzar una concentración de
DOPS:ADN de 10:1 y a una concentración de 10 mg de lípidos/ml. La
suspensión hidratada se purgó y se precintó con nitrógeno, después
se mezcló en vórtex durante varios minutos.
Etapa
2
La mezcla de ADN/liposomas se mezcló entonces
con dextrano 500.000 al 40% p/p en una suspensión de 2/1 v/v de
dextrano/liposomas. Esta mezcla se inyectó entonces mediante una
jeringa en PEG 8.000 al 15% p/p [PEG 8000/(suspensión A)] con
agitación magnética para dar como resultado la suspensión B. La
velocidad de agitación era de 800-1.000 rpm. Se
añadió una disolución de CaCl_{2} (100 mM) a la suspensión hasta
alcanzar la concentración final de 1 mM.
La agitación continuó durante una hora, después
se añadió a la suspensión B un tampón de lavado que contenía
CaCl_{2}1 mM y NaCl 150 mM en una proporción volumétrica de 10:1.
La suspensión se mezcló en vórtex y se centrifugó a 3.000 rpm, a
2-4°C, durante 30 min. Después de retirar el
sobrenadante se añadió tampón de lavado adicional en una proporción
volumétrica de 5:1, seguido de una centrifugación en las mismas
condiciones. Un esquema de este nuevo procedimiento de obtención de
cocleatos se detalla en la Figura 1. El sedimento resultante se
reconstituyó con el mismo tampón hasta la concentración
deseada.
Etapa
1
Se dispuso una disolución de
dioleoilfosfatidilserina (DOPS) en cloroformo (10 mg/ml) en un
matraz de fondo redondo, y se secó hasta formar una película usando
un rotavapor Buchi a 35°C. El rotavapor se esterilizó mediante la
vaporización instantánea de nitrógeno gaseoso a través de un filtro
de 0,2 \mum. Las siguientes etapas se llevaron a cabo en una
campana estéril. La película lipídica seca se hidrató con agua
desionizada a una concentración de 10 mg de lípidos/ml. La
suspensión hidratada se purgó y se precintó con nitrógeno, después
se aplicaron ultrasonidos con un aparato de ultrasonidos de baño
frío. La aplicación de ultrasonidos continuó (durante entre varios
segundos y varios minutos, dependiendo de la cantidad y la
naturaleza del lípido) hasta que la suspensión se volvió
transparente (suspensión A) y no hubo liposomas claramente visibles
bajo un microscopio de contraste de fases con un aumento de 1000
X.
Etapa
2
La suspensión de liposomas obtenida en la etapa
1 se mezcló entonces con dextrano 500.000 al 40% p/p en una
suspensión de 2/1 v/v de dextrano/liposomas. Esta mezcla se inyectó
entonces mediante una jeringa en PEG 8.000 al 15% p/p [PEG
8000/(suspensión A)] con agitación magnética para dar como
resultado la suspensión B. La velocidad de agitación era de
800-1.000 rpm. Se añadió una disolución de
ZnCl_{2} (100 mM) a la suspensión hasta alcanzar la concentración
final de 1 mM.
La agitación continuó durante una hora, después
se añadió a la suspensión B un tampón de lavado que contenía
ZnCl_{2} 1 mM y NaCl 150 mM en una proporción volumétrica de 1:1.
La suspensión se mezcló en vórtex y se centrifugó a 3.000 rpm, a
2-4°C, durante 30 min. Después de retirar el
sobrenadante se añadió tampón de lavado adicional en una proporción
volumétrica de 0,5:1, seguido de una centrifugación en las mismas
condiciones. Un esquema de este nuevo procedimiento de obtención de
cocleatos se detalla en la Figura 1. La dispersión de luz láser
(análisis ponderal, Coulter N4 Plus) confirmó la formación de
pequeños cocleatos.
Etapa
1
Se dispuso una mezcla de
dioleoilfosfatidilserina (DOPS) en cloroformo (10 mg/ml) y AmB en
metano) (0,5 mg/ml) en una proporción molar de 10:1 en un matraz de
fondo redondo, y se secó hasta formar una película usando un
rotavapor Buchi a 40°C. El rotavapor se esterilizó mediante la
vaporización instantánea de nitrógeno gaseoso a través de un filtro
de 0,2 \mum. Las siguientes etapas se llevaron a cabo en una
campana estéril. La película lipídica seca se hidrató con agua
desionizada a una concentración de 10 mg de lípidos/ml. La
suspensión hidratada se purgó y se precintó con nitrógeno, después
se aplicaron ultrasonidos con un aparato de ultrasonidos de baño
frío. La aplicación de ultrasonidos continuó (durante entre varios
segundos y varios minutos, dependiendo de la cantidad y la
naturaleza del lípido) hasta que la suspensión se volvió amarillo
claro (suspensión A) y no hubo liposomas claramente visibles bajo
un microscopio de contraste de fases con un aumento de 1000 X.
Etapa
2
La suspensión de liposomas obtenida en la etapa
1 se mezcló entonces con dextrano 500.000 al 40% p/p en una
suspensión de 2/1 v/v de dextrano/liposomas. Esta mezcla se inyectó
entonces mediante una jeringa en PEG 8.000 (Sigma) al 15% p/p [PEG
8000/(suspensión A)] con agitación magnética para dar como
resultado la suspensión B. La velocidad de agitación era de
800-1.000 rpm. Se añadió una disolución de
ZnCl_{2} (100 mM) a la suspensión hasta alcanzar la concentración
final de 1 mM.
La agitación continuó durante una hora, después
se añadió a la suspensión B un tampón de lavado que contenía
ZnCl_{2} 1 mM y NaCl 150 mM en una proporción volumétrica de 1:1.
La suspensión se mezcló en vórtex y se centrifugó a 3.000 rpm, a
2-4°C, durante 30 min. Después de retirar el
sobrenadante se añadió tampón de lavado adicional en una proporción
volumétrica de 0,5:1, seguido de una centrifugación en las mismas
condiciones. Un esquema de este nuevo procedimiento de obtención de
cocleatos se detalla en la Figura 1. El sedimento resultante se
reconstituyó con el mismo tampón hasta la concentración deseada. La
dispersión de luz láser (análisis ponderal, Coulter N4 Plus)
confirmó la formación de pequeños cocleatos de
AmB-Zn.
El estudio microscópico se realizó paso a paso
aisladamente del procedimiento de preparación, con objeto de
obtener algunos detalles mecanicistas sobre la formación de
cocleatos aislados en hidrogel.
\newpage
Las imágenes microscópicas observadas en las
Figuras 3a,b y 4a-f muestran los cambios
morfológicos en cada etapa de preparación de cocleatos aislados en
hidrogel cargados con AmB precipitados con iones Ca^{+2}. Cuando
la mezcla AmB/liposomas-dextrano se dispersaba en
la disolución de PEG, aparecía una separación de fases, según se
muestra en la Fig. 3a. El reparto de los liposomas favorece la fase
dispersa de dextrano, según se indica por el color amarillo de la
AmB. Este reparto asegura que los liposomas estén aislados en cada
partícula de dextrano. La adición de iones calcio a la fase continua
(PEG) dio como resultado la formación de precipitados en la fase
dispersa. Como producto final se formaron pequeños cocleatos
fusiformes y se observaron al microscopio, estos cocleatos se
abrieron en vesículas unilamelares tras la adición de EDTA y la
quelatación del calcio (Figuras 4a,b). La morfología fusiforme fue
confirmada mediante microscopía electrónica de barrido tras la
criofractura (Figura 5). Se obtuvieron unas imágenes microscópicas
similares para los cocleatos aislados en hidrogel vacíos y cargados
con AmB precipitados con Zn (Figuras 4c,d) y para los cocleatos
aislados en hidrogel vacíos precipitados con Zn (Figuras 4e,f).
Se realizó un ensayo de susceptibilidad de
levaduras in vitro comparando los efectos inhibidores y
letales de los cocleatos de AmB, los AmBisomas (formulación
liposómica de AmB) y AmB/DMSO. Se seleccionaron cinco colonias de
Candida albicans recién crecidas a partir de una placa de
agar YPD (procedente de un cultivo de 48 horas) y se añadieron a 2
ml de caldo 2x YPD, pH 5,7. Se midió la DO_{590} de este cultivo
madre y se ajustó la densidad de levadura a una DO_{590} = 0,1, y
se añadieron 0,1 ml de esta suspensión a cada pocillo de una placa
de 96 pocillos.
Los cocleatos de AmB, la AmB/DMSO y los
AmBisomas se añadieron a placas de 96 pocillos hasta una
concentración final de 0,078, 0,156, 0,3125, 0,625, 1,25 y 2,5
\mug/ml de AmB. Las placas de 96 pocillos se incubaron a 37°C con
una agitación suave, y se midió la densidad celular en un lector de
placas de 96 pocillos (Molecular Devices Spectramax 340) a las 0,
2, 4, 6, 24 y 30 horas. La Figura 6 muestra que los cocleatos de
AmB tienen un mayor efecto inhibidor del crecimiento que los
AmBisomas (formulación liposómica de AmB).
Se retiraron alícuotas de las células de
levadura (50 \mul) de las placas de 96 pocillos y se diluyeron
sucesivamente (hasta 1:10.000 para colocarlas en placas de agar) y
se contaron usando un hemocitómetro. Se colocaron cincuenta \mul
de las células de levadura diluidas en placas de YPD agar y se
incubaron durante 24 horas a 37°C. Las colonias de levadura se
contaron usando un BioRad Fluor-S
Multi-Imager equipado con el programa informático
Quantity One^{TM}.
Las células de levadura tratadas con AmBisomas,
AmB/DMSO y cocleatos de AmB (0,625 ug de AmB/ml) se examinaron para
comprobar la proporción de unidades formadoras de colonias con
respecto al número total de células después de 30 horas de
incubación. Los resultados muestran que los cocleatos de AmB tienen
el mayor efecto letal sobre las células de levadura en comparación
con los otros agentes antifúngicos probados. Hubo una viabilidad de
la levadura de prácticamente el 0% después del tratamiento con los
cocleatos de AmB, y una viabilidad de la levadura del 12% tras un
tratamiento con AmB/DMSO. Los AmBisomas no fueron eficaces, dando
como resultado una viabilidad de la levadura del 52% (Figura
7).
Las células fagocitadoras de partículas, tales
como los macrófagos, son la primera línea de defensa frente a
cualquier infección microbiana. Sin embargo, se ha demostrado que
muchos microbios, que inducen graves infecciones clínicas humanas,
infectan a los macrófagos y evitan su destrucción.
Es posible que, in vivo, los macrófagos
jueguen un importante papel en la captación de cocleatos a través
de un mecanismo de endocitosis. Dado que los macrófagos también
juegan un papel importante en la defensa del hospedador y en la
eliminación de hongos y parásitos, es importante estudiar la
interacción entre los macrófagos y los cocleatos.
Los siguientes ejemplos indican que los
cocleatos son captados por los macrófagos. Se encontró que grandes
dosis de AmB administradas a los macrófagos no resultaban tóxicas y
permanecían dentro del macrófago en una forma biológicamente
activa. Los cocleatos de AmB proporcionaron protección para el
macrófago frente a la infección por Candida albicans cuando
se administran antes o después de la infección fúngica.
Régimen de dosis profiláctica: se
subcultivaron macrófagos J774A.1 (M) en una placa de 96 pocillos a
una concentración de 1 x 10^{5} células/ml en DMEM + un 10% de
FBS. Se añadieron 100 \mul de cocleatos de AmB (AmBc 0,2, 0,6,
1,25, y 2 \mug de AmB/ml), Fungizone o cocleatos vacíos (EC a 2,
6, 12,5 y 25 \mug de lípido/ml), a la concentración especificada.
Las placas se incubaron hasta el día siguiente a 37°C y un 5% de
CO_{2}. 24 horas después se sustituyó el medio. Esta etapa se
realizó dos veces. Se añadió Candida albicans a la placa a
una concentración de 2,5 x 10^{3} células/ml, una proporción de
1:200 con respecto a los macrófagos. Las placas se incubaron hasta
el día siguiente en las condiciones establecidas anteriormente.
Después de la incubación de 24 horas, las placas
se retiraron y se observaron. El medio se pipeteó vigorosamente
para extraer y desorganizar las células, 25 \mul de esta
suspensión se colocaron en placas de agar de Sabouraud con
dextrosa, y después se colocaron en una estufa de incubación en seco
hasta el día siguiente a 37°C. Al día siguiente se contaron las UFC
de Candida albicans. Los datos de la Figura 8 sugieren que
los macrófagos cargados con cocleatos de AmB son muy eficaces para
destruir las células fúngicas.
Régimen de dosis tras la infección: se
subcultivaron macrófagos J774A.1 (M) en una placa de 96 pocillos, y
después se incubaron hasta el día siguiente. Tras la incubación,
los macrófagos se infectaron con CA a una proporción de 200:1, a
continuación se añadieron subsiguientemente AmBc, Fungizone o EC, a
las concentraciones especificadas. Veinticuatro horas después se
observaron los cultivos celulares y se determinaron las UFC según
se describió anteriormente.
Cuando los M fueron expuestos a CA y
subsiguientemente se les aplicó una dosis de cocleatos de AmB, el
recuento de UFC fue de nuevo próximo a cero. Estos resultados
indican que los macrófagos absorben y concentran los cocleatos de
AmB, ya que los macrófagos estaban protegidos frente a la
exposición a C. albicans después de haber eliminado mediante
lavado los cocleatos de AmB (Figura 8).
Por el contrario, Fungizone, (AmB en
desoxicolato), la forma clínica más popular de AmB, era
extremadamente tóxico y letal para los macrófagos in vitro.
A las 5 horas de su administración se hallaron en las placas de
Petri una gran cantidad de desechos celulares, sin ningún signo de
macrófagos viables.
La observación microscópica revela que los
cocleatos de AmB no son tóxicos para los macrófagos, ni siquiera a
las dosis más altas estudiadas. Los cocleatos de AmB se acumulan en
grandes cantidades, dando como resultado grandes vacuolas
dilatadas. Tras eliminar los macrófagos mediante lavado de incubar
de nuevo durante 24 h, la mayoría de las vacuolas había retornado a
su forma y tamaño normales, aunque todavía había algunas
apreciablemente engrosadas. Incluso se apreció que unos pocos
macrófagos se "movían" con las vacuolas engrosadas. Los
cocleatos de AmB están concentrados dentro de las vacuolas, y es
probable que la AmB sea liberada gradualmente con el tiempo.
Se ha evaluado la penetración tisular de la
anfotericina B tras una administración iv. A grupos (n = 5) de
ratones C57BU6 (20-23 g) se les administraron por
vía iv (0,625 mg/kg) cocleatos de AmB (0,05 ml/20 g) con una
jeringa de insulina de 100 U de ½ cc con una aguja de 1 mm. En los
tiempos de sacrificio predetermimados (2, 5, 10, 20 y 40 min, 1, 2,
3, 4, 6, 8, 12, 24, 36 y 48 horas), a los animales se les
administró anestesia, se les extrajo sangre mediante una punción
cardiaca y después se sacrificaron, se diseccionaron y se
extrajeron los tejidos de interés (cerebro, pulmón, hígado, bazo,
riñones, corazón, grasa, estómago, contenido del estómago,
intestino y contenido del intestino) y se pesaron. Para el análisis
de la AmB, las muestras se mezclaron con un disolvente de
extracción (10% de metanol, 35% de agua, 55% de etanol), se
homogeneizaron, se les aplicó ultrasonidos y se centrifugaron. Se
transfirió una alícuota del sobrenadante de 90 \mul a un
microvial, se inyectó en el sistema de HPLC en una columna NovaPak
C-18 (3,9 x 150 mm, 4 \mum de tamaño de
partícula) mantenida a 40°C. La anfotericina B eluyó a una tasa de
flujo de 0,5 ml/min con un 29% de metanol, un 30% de acetonitrilo y
un 41% de EDTA 2,5 mM, y se detectó a 408 nm. La concentración de
AmB se calculó con la ayuda de una curva estándar externa.
En la Figura 9 se muestra la exposición tisular
tras una única dosis iv de cocleatos de AmB. Puede observarse una
gran penetración en tejidos clave como el hígado, el bazo y el
riñón.
La disponibilidad oral de los cocleatos aislados
en hidrogel cargados con AmB se ha examinado mediante la
administración intrínseca de la formulación del ejemplo 2 a ratones
C57BL16 (20-23 g) tras un ayuno nocturno. Se
administró un décimo de ml de la formulación a una dosis de 10 mg/kg
a 9 ratones. Se sacrificaron tres ratones de cada grupo a las 1, 6
y 24 horas tras la administración, seguido de un análisis del nivel
de AmB en órganos y tejidos.
Las muestras tisulares y sanguíneas se
procesaron como sigue: los tejidos se diluyeron a 1/20 ó 1/10
mediante la adición de disolvente de extracción (35% de LKD, 10% de
metanol, 55% de etanol p/p/p nv/v/v) y se homogeneizaron con un
dispositivo Ultra-Turrex®. Se tomó una alícuota de
0,5 ml, se le aplicó ultrasonidos durante 1 min y se centrifugó a
7260 rpm durante 12 min a 4°C. El sobrenadante se transfirió a un
microvial de HPLC y se inyectaron 30 \mul en una columna
analítica de C18, de 3,9 x 150 mm, de 4 \mum de tamaño de
partícula, con una tasa de flujo de 0,5 ml, a 40°C. La concentración
de la AmB detectada a 408 nm se calculó con la ayuda de una curva
de calibración exter-
na.
na.
La Figura 10 muestra el perfil temporal de la
AmB en los tejidos durante un periodo de tiempo de 24 horas. Aunque
sólo están representados tres puntos temporales, puede observarse
la acumulación en los tejidos clave (hígado, pulmones, bazo y
riñones).
Otros dos grupos de ratones recibieron un
régimen de dosis múltiples por vía oral de 10 mg/kg/día durante
diez días, y un grupo fue sacrificado 24 horas después de la última
dosis, y el otro grupo 20 días después de la última dosis recibida.
En los puntos temporales predeterminados los ratones fueron
anestesiados, sacrificados y diseccionados para la recolección de
tejidos. Los tejidos fueron procesados como en el régimen de dosis
únicas, y el nivel de AmB se determinó mediante HPLC. Los
resultados a las 24 h después de la 10ª dosis se describen en la
Figura 11, y muestran que los cocleatos aislados en hidrogel
permiten la administración de AmB desde el tracto gastrointestinal a
niveles terapéuticos.
La Figura 12 muestra la relación entre los
niveles tisulares de anfotericina B (\mug/g de tejido en la
escala izquierda) y la eficacia según disminuye la infección por
Candida albicans (UFC/g en la escala derecha) tras la
administración oral de cocleatos de AmB (Figura 12).
Tras la administración por vía oral de 10
mg/kg/día durante 10 días consecutivos a ratones sanos, la AmB
presentaba altos niveles en los riñones, seguido de los pulmones,
el bazo, el hígado y el cerebro, lo que muestra unos niveles mucho
menores que los otros tejidos. Se ha demostrado que el estado
patológico afecta a la farmacocinética de los fármacos a diferentes
niveles. Este fenómeno puede observarse claramente en el gráfico:
la AmB tisular alcanzó unos niveles menores en ratones infectados
por C. albicans tras la administración oral de 10 mg/kg/día
(misma dosis) durante 15 días, 5 dosis más que el grupo sano.
También muestra un cambio en el patrón de distribución, en el que
los pulmones son el tejido objetivo, con los menores niveles.
La administración por vía oral de una
formulación de cocleatos de AmB a 10 mg/kg/día durante 15 días
proporcionó una elevada eficacia. La disminución en las UFC/g en el
tejido renal es de aproximadamente 3,5 logs para la formulación de
cocleatos. En los pulmones, las formulaciones de cocleatos de AmB
erradicaron completamente a C. albicans y liberaron a los
pulmones de la infección fúngica. Está claro que el sistema de
administración mediante cocleatos proporciona un alto nivel de AmB
en los animales infectados, esto se correlaciona con la mayor
eficacia observada en la formulación de cocleatos, lo que indica que
los cocleatos de AmB son un vehículo adecuado para el tratamiento
por vía oral de una candidiasis sistémica.
Además, los cocleatos de AmB no fueron tóxicos
ni siquiera a la dosis mayor de 50 mg/kg (no se hallaron lesiones
en los riñones, el tracto GI ni en otros órganos de los ratones a
los que se les administraron 10, 20 y 50 mg/kg de los cocleatos de
AmB). Esta elevada dosis (50 mg/kg) es equivalente a 100 veces la
dosis menor (0,5 mg/kg) que mostró el 100% de supervivencia en el
modelo de ratón infectado por Candida.
\vskip1.000000\baselineskip
Esta lista de referencias mencionadas por el
solicitante es únicamente para la comodidad del lector. No forma
parte del documento de patente europea. Aunque se ha tenido
especial cuidado al recopilar las referencias, no pueden excluirse
errores u omisiones, y la OEP renuncia a cualquier responsabilidad a
este respecto.
\bullet US 4078052 A [0005] \hskip2cm
\bullet US 5840707 A [0005]
\bulletCOUVREUR P. y col. Adv. Drug
Delivery Reviews, 1993, vol. 10, 141-162
[0002]
\bullet P. A. ALBERTSSON. Partition of
cell particles and macromolecules. Wiley, 1986
[0012]
\bullet Separation using aqueous Phase System.
Plenum, 1989 [0012]
\bullet D. FORCINITI; C. K.
HALL; M. R. KULA. Biotechnol. Bioeng.,
1991, vol. 38, 986 [0012]
\bullet Liposome Technology, Liposome
Preparation and Related Techniques. CRC Press, 1993,
vol. [0017]
\bulletGoodman &
Gillman's, The Pharmaceutical Basis for Therapeutics.
MacMillan Publ. Co, 1980 [0032]
Claims (75)
1. Un procedimiento para producir cocleatos
basados en lípidos que comprende las etapas de:
- a)
- proporcionar una suspensión acuosa de liposomas;
- b)
- mezclar la suspensión de liposomas con polímero A;
- c)
- añadir la suspensión de liposomas/polímero A, a una disolución que comprende polímero B, en la que el polímero A y el polímero B son inmiscibles, creando así un sistema polimérico bifásico;
- d)
- añadir una disolución de una fracción catiónica al sistema polimérico bifásico; y
- e)
- lavar el sistema polimérico bifásico para eliminar los polímeros.
2. Un procedimiento de la reivindicación 1 en el
que la adición de la suspensión de liposomas/polímero A se realiza
mediante inyección.
3. Un procedimiento de la reivindicación 1 o de
la reivindicación 2 en el que los liposomas están formados por
lípido que comprende lípido cargado negativamente.
4. Un procedimiento de la reivindicación 3 en el
que el lípido cargado negativamente es fosfatidilserina.
5. Un procedimiento de la reivindicación 3 o de
la reivindicación 4 en el que el lípido comprende una cantidad
menor de otros lípidos.
6. Un procedimiento de la reivindicación 5 en el
que el otro lípido se elige del grupo de lípidos bipolares.
7. Un procedimiento de la reivindicación 5 en el
que el otro lípido se elige del grupo de lípidos catiónicos.
8. Un procedimiento de la reivindicación 5 en el
que los otros lípidos se eligen del grupo de lípidos capaces de
formar puentes de hidrógeno con una molécula biológicamente
activa.
9. Un procedimiento de la reivindicación 8 en el
que el lípido neutro es un lípido PEGilado.
10. Un procedimiento de cualquiera de las
reivindicaciones precedentes en el que el polímero A es al menos un
miembro elegido del grupo constituido por dextrano y
polietilenglicol.
11. Un procedimiento de cualquiera de las
reivindicaciones precedentes en el que la concentración de polímero
A en el sistema polimérico bifásico varía en concentración del 2 al
20% p/p.
12. Un procedimiento de cualquiera de las
reivindicaciones precedentes en el que el polímero B es al menos un
miembro elegido del grupo constituido por polivinilpirrolidona,
alcohol polivinílico, ficoll, polivinilmetil éter y
polietilenglicol.
13. Un procedimiento de cualquiera de las
reivindicaciones precedentes en el que la concentración del
polímero B en el sistema polimérico bifásico está en el intervalo
del 2 al 20% p/p.
14. Un procedimiento de cualquiera de las
reivindicaciones precedentes en el que la disolución polimérica
bifásica es al menos un miembro elegido del grupo constituido por
dextrano/polietilenglicol, dextrano/polivinilpirrolidona,
dextrano/alcohol polivinílico, dextrano/ficoll y
polietilenglicol/polivinilmetil éter.
15. Un procedimiento de cualquiera de las
reivindicaciones precedentes en el que la fracción catiónica
comprende un ión divalente o superior.
16. Un procedimiento de cualquiera de las
reivindicaciones precedentes en el que la fracción catiónica
comprende un ión metálico divalente o superior.
17. Un procedimiento de la reivindicación 16 en
el que el ión metálico es añadido como una sal de un ácido
inorgánico, preferiblemente en el que la sal es cloruro cálcico,
cloruro de cinc o cloruro de cobalto.
18. Un procedimiento de cualquiera de las
reivindicaciones precedentes en el que los cocleatos de lípidos son
cocleatos de pequeño tamaño.
19. Un procedimiento según la reivindicación 18
en el que el tamaño de los cocleatos es menor de 1 micrómetro.
\newpage
20. Un procedimiento según la reivindicación 18
en el que los cocleatos se forman usando pequeños liposomas
unilamelares.
21. Un procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones precedentes en el que la suspensión acuosa de
liposomas comprende una molécula biológicamente relevante, por lo
que los cocleatos también comprenden la molécula biológicamente
relevante.
22. Un procedimiento según la reivindicación 21
que comprende la etapa preliminar de formar la suspensión de
liposomas formando una película que comprende una mezcla de la
molécula biológicamente relevante y el lípido, y poner en contacto
la película con una fase acuosa para formar la suspensión acuosa de
pequeños liposomas unilamelares.
23. Un procedimiento según la reivindicación 21
en el que la molécula biológicamente relevante está presente en la
fase acuosa.
24. Un procedimiento según la reivindicación 23
que comprende la etapa preliminar de formar liposomas, en la que se
pone en contacto una película de lípidos con una fase acuosa que
contiene la molécula biológicamente relevante para formar la
suspensión acuosa de liposomas.
25. Un procedimiento según la reivindicación 21
que incluye una etapa preliminar en la que se mezcla una suspensión
de liposomas vacíos con la molécula biológicamente relevante para
formar dicha suspensión de liposomas.
26. Un procedimiento según la reivindicación 23
en el que la molécula biológicamente relevante porta una carga.
27. Un procedimiento según la reivindicación 26
en el que la molécula biológicamente relevante está cargada
positivamente.
28. Un procedimiento según la reivindicación 26
en el que la molécula biológicamente relevante está cargada
negativamente.
29. Un procedimiento según la reivindicación 23
en el que la molécula cargada negativamente es un
polinucleótido.
30. Un procedimiento según la reivindicación 29
en el que el polinucleótido es ADN.
31. Un procedimiento para producir cocleatos
basados en lípidos que comprende las etapas de:
- a)
- proporcionar una suspensión acuosa que contiene una mezcla de detergente-lípido;
- b)
- mezclar la suspensión de detergente-lípido con polímero A;
- c)
- añadir la suspensión de detergente-lípido/polímero A, a una disolución que comprende polímero B, en la que el polímero A y el polímero B son inmiscibles, creando así un sistema polimérico bifásico;
- d)
- añadir una disolución de una fracción catiónica al sistema polimérico bifásico; y
- e)
- lavar el sistema polimérico bifásico para eliminar el polímero.
32. Un procedimiento para producir cocleatos
basados en lípidos según la reivindicación 31 en el que el
detergente es glucósido de octilo.
33. Un procedimiento para producir cocleatos
basados en lípidos según la reivindicación 31 en el que el cocleato
comprende una molécula biológicamente activa.
34. Un procedimiento según la reivindicación 33
en el que la molécula biológicamente activa porta una carga.
35. Un procedimiento según la reivindicación 33
en el que la molécula biológicamente activa está cargada
positivamente.
36. Un procedimiento según la reivindicación 33
en el que la molécula biológicamente activa está cargada
negativamente.
37. Un procedimiento según la reivindicación 36
en el que la molécula cargada negativamente es un
polinucleótido.
38. Un procedimiento según la reivindicación 37
en el que el polinucleótido es ADN.
39. Un procedimiento según la reivindicación 31
en el que la molécula biológicamente activa se añade en la etapa
a.
40. Un procedimiento según la reivindicación 21
o la reivindicación 33 en el que la molécula biológicamente
relevante se elige del grupo constituido por fármacos,
polinucleótidos, polipéptidos y antígenos.
41. Un procedimiento de la reivindicación 40 en
el que la molécula biológicamente relevante es un fármaco elegido
del grupo constituido por agentes antivirales, anestésicos, agentes
antinfecciosos, agentes antibacterianos, agentes antifúngicos,
agentes anticancerosos, inmunosupresores, agentes antiinflamatorios
esteroideos, agentes antiinflamatorios no esteroideos,
tranquilizantes y vasodilatadores.
42. Un procedimiento de la reivindicación 41 en
el que el fármaco es al menos un miembro elegido del grupo
constituido por anfotericina B, aciclovir, adriamicina,
cabamacepina, melfalano, nelfinavir, nifedipino, indometacina,
naproxeno, estrógenos, testosteronas, esteroides, fenitoína,
ergotaminas, cannabinoides rapamicina, propanidida, propofol,
alfadiona, equinomicina, nitrato de miconazol, tenipósido, taxol,
taxotero y rifampicina.
43. Un procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones precedentes en el que la etapa de lavado implica
centrifugar el sistema polimérico bifásico para separar el
precipitado de cocleatos, eliminar el sobrenadante que contiene el
polímero, resuspender el precipitado en un tampón de lavado,
centrifugar el precipitado lavado y, opcionalmente, repetir las
etapas de resuspensión y de centrifugación una o más veces.
44. Un procedimiento según la reivindicación 43
en el que el tampón de lavado contiene una fracción catiónica
disuelta.
45. Un procedimiento según la reivindicación 44
en el que la fracción catiónica comprende iones divalentes o
superiores.
46. Un procedimiento según la reivindicación 45
en el que los iones divalentes o superiores son iones
metálicos.
47. Un procedimiento según la reivindicación 46
en el que los iones metálicos se eligen entre calcio y cinc.
48. Un procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 43 a 47 en el que la fracción catiónica está
presente en el tampón de lavado a una concentración de al menos 1
mM.
49. Una composición de cocleato que
comprende:
- a)
- un lípido cargado negativamente;
- b)
- un componente catiónico, y
- c)
- una molécula biológicamente relevante distinta a a) y b), en la que los cocleatos tienen un tamaño medio de partícula menor de 1 \mum, y en la que dicho componente catiónico es un ión metálico divalente o superior.
50. Una composición de cocleato según la
reivindicación 49 en la que la molécula biológicamente relevante se
elige entre vitaminas, minerales, aminoácidos, toxinas microbicidas,
microbiostáticos, cofactores, enzimas, polipéptidos, agregados de
polipéptidos, polinucleótidos, lípidos, carbohidratos, nucleótidos,
almidones, pigmentos, ácidos grasos, hormonas, citocinas, virus,
orgánulos, esteroides y otras estructuras multianulares, sacáridos,
metales, venenos metabólicos y fármacos.
51. Una composición de cocleato según la
reivindicación 50 en la que la molécula biológicamente relevante es
un fármaco elegido del grupo constituido por agentes antivirales,
anestésicos, agentes antinfecciosos, agentes antibacterianos,
agentes antifúngicos, agentes anticancerosos, inmunosupresores,
agentes antiinflamatorios esteroideos, agentes antiinflamatorios no
esteroideos, tranquilizantes y vasodilatadores.
52. Una composición de cocleato según la
reivindicación 51 en la que el fármaco que es al menos un miembro
elegido del grupo constituido por anfotericina B, aciclovir,
adriamicina, cabamacepina, melfalano, nelfinavir, nifedipino,
indometacina, naproxeno, estrógenos, testosteronas, esteroides,
fenitoína, ergotaminas, cannabinoides rapamicina, propanidida,
propofol, alfadiona, equinomicina, nitrato de miconazol,
tenipósido, taxol, taxotero y rifampicina.
53. Una composición de cocleato según la
reivindicación 49 en la que la molécula biológicamente relevante es
anfotericina B.
54. Una composición de cocleato según la
reivindicación 49 en la que la molécula biológicamente relevante es
naproxeno.
55. Una composición de cocleato según la
reivindicación 49 en la que la molécula biológicamente relevante es
un polipéptido elegido de entre ciclosporina, angiotensina I, II y
III, encefalinas y sus análogos, ACTH, péptidos antiinflamatorios
I, II, III, bradicinina, calcitonina, b-endorfina,
dinorfina, leucocinina, luliberina (LHRH), insulina, neurocininas,
somatostatina, sustancia P, tiroliberina (TRH) y vasopresina.
\newpage
56. Una composición de cocleato según la
reivindicación 49 en la que la molécula biológicamente relevante es
un antígeno.
57. Una composición de cocleato según la
reivindicación 56 en la que el antígeno es un carbohidrato, un
polinucleótido o una proteína.
58. Una composición de cocleato según la
reivindicación 57 en la que el antígeno proteico se elige de entre
glucoproteínas de la cubierta de los virus de la gripe o de Sendai,
proteínas de la membrana celular animal, proteínas de la membrana
celular vegetal, proteínas de la membrana bacteriana y proteínas de
la membrana de parásitos.
59. Una composición de cocleato según la
reivindicación 49 en la que la molécula biológicamente relevante es
vitamina A.
60. Una composición de cocleato según la
reivindicación 49 en la que la molécula biológicamente relevante es
un ácido graso poliinsaturado.
61. Una composición de cocleato según la
reivindicación 49 en la que la molécula biológicamente relevante es
un polinucleótido.
62. Una composición de cocleato según la
Reivindicación 61 en la que el polinucleótido es ADN.
63. Una composición de cocleato según la
reivindicación 49 en la que el ión metálico se elige entre calcio,
magnesio, cinc y bario.
64. Una composición de cocleato según la
reivindicación 49 ó 50 en la que el lípido cargado negativamente es
fosfatidilserina.
65. Una composición de cocleato según la
reivindicación 49 ó 50 que comprende adicionalmente una cantidad
menor de un lípido adicional elegido entre un lípido bipolar, un
lípido catiónico y un lípido neutro.
66. Un cocleato según la reivindicación 65 en
el que el lípido adicional es un lípido neutro que forma puentes de
hidrógeno con la molécula biológicamente el relevante.
67. Una composición de cocleato según la
reivindicación 66 en la que el lípido adicional es un lípido
PEGilado.
68. Composición de cocleato según cualquiera de
las reivindicaciones 49 a 67, o el producto de un procedimiento de
cualquiera de las reivindicaciones 1 a 48, para su uso en un
procedimiento de administración de una molécula biológicamente
relevante a un hospedador.
69. Uso de una composición de cocleato según
cualquiera de las reivindicaciones 49 a 67, o del producto de un
procedimiento según las reivindicaciones 1 a 48, para la
elaboración de una composición para su uso en un procedimiento de
tratamiento de un cuerpo humano o animal, o para administrar una
molécula biológicamente relevante a un hospedador.
70. Uso según la reivindicación 69 en el que la
composición se administra a través de las mucosas o por vía
sistémica.
71. Uso de la reivindicación 70 en el que la
composición se administra a través de las mucosas por una vía
elegida entre oral, intranasal, intraocular, intraanal,
intravaginal, parenteral o intrapulmonar.
72. Uso según la reivindicación 71 en el que la
vía es oral.
73. Uso según la reivindicación 71 en el que la
composición es un aerosol.
74. Uso según la reivindicación 70 en el que la
composición se administra a través de una vía sistémica elegida
entre intravenosa, intramuscular, subcutánea, transdérmica o
intradérmica.
75. Una composición farmacéutica que comprende
una composición de cocleato según cualquiera de las
reivindicaciones 49 a 67 y un vehículo farmacéuticamente
aceptable.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US09/235,400 US6153217A (en) | 1999-01-22 | 1999-01-22 | Nanocochleate formulations, process of preparation and method of delivery of pharmaceutical agents |
US235400 | 1999-01-22 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
ES2290019T3 true ES2290019T3 (es) | 2008-02-16 |
Family
ID=22885334
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
ES00909961T Expired - Lifetime ES2290019T3 (es) | 1999-01-22 | 2000-01-24 | Nuevas formulaciones de cocleatos aislados en hidrogel, procedimiento de preparacion y su uso para la administracion de moleculas biologicamente relevantes. |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (7) | US6153217A (es) |
EP (1) | EP1143933B1 (es) |
JP (1) | JP2002535267A (es) |
AT (1) | ATE367800T1 (es) |
AU (1) | AU3213300A (es) |
CA (1) | CA2358505C (es) |
CY (1) | CY1106916T1 (es) |
DE (1) | DE60035669T2 (es) |
DK (1) | DK1143933T3 (es) |
ES (1) | ES2290019T3 (es) |
PT (1) | PT1143933E (es) |
WO (1) | WO2000042989A2 (es) |
Families Citing this family (62)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6153217A (en) | 1999-01-22 | 2000-11-28 | Biodelivery Sciences, Inc. | Nanocochleate formulations, process of preparation and method of delivery of pharmaceutical agents |
JP2003529557A (ja) * | 2000-01-24 | 2003-10-07 | バイオデリバリー サイエンス インコーポレーテッド | コクリエート製剤、その調製方法および生物学的関連分子投与のための用途 |
DE10154464B4 (de) * | 2001-11-08 | 2005-10-20 | Max Delbrueck Centrum | Oral verabreichbare pharmazeutische Zubereitung umfassend liposomal verkapseltes Taxol |
US20030219473A1 (en) * | 2002-03-26 | 2003-11-27 | Leila Zarif | Cochleates made with purified soy phosphatidylserine |
CN1674869A (zh) * | 2002-08-06 | 2005-09-28 | 金拓 | 非金属阳离子作桥联剂的脂质卷 |
US20040092727A1 (en) * | 2002-11-13 | 2004-05-13 | Biopharm Solutions Inc. | Cochleates without metal cations as bridging agents |
JP3927887B2 (ja) * | 2002-08-09 | 2007-06-13 | 本田技研工業株式会社 | 軸流圧縮機の静翼 |
US8685428B2 (en) * | 2002-12-10 | 2014-04-01 | Advanced Cardiovascular Systems, Inc. | Therapeutic composition and a method of coating implantable medical devices |
US8980310B2 (en) * | 2002-12-31 | 2015-03-17 | Bharat Serums and Vaccines, Ltd. | Non-pegylated long-circulating liposomes |
WO2004064805A1 (en) * | 2003-01-15 | 2004-08-05 | Biodelivery Sciences International, Inc. | Cochleate preparations of fragile nutrients |
EP1631669A2 (en) | 2003-04-09 | 2006-03-08 | Biodelivery Sciences International, Inc. | Cochleate compositions directed against expression of proteins |
US20050013854A1 (en) * | 2003-04-09 | 2005-01-20 | Mannino Raphael J. | Novel encochleation methods, cochleates and methods of use |
DE10322439A1 (de) * | 2003-05-19 | 2004-12-09 | Bayer Ag | Verfahren und Vorrichtung zur Bestimmung der Isomerenzusammensetzung bei Isocyanat-Herstellprozessen |
US20060188573A1 (en) * | 2003-06-10 | 2006-08-24 | Anna Imberg | Composite materials and particles |
SE527505C2 (sv) * | 2003-06-10 | 2006-03-28 | Anna Imberg | Komposita material och partiklar |
JP4627727B2 (ja) * | 2003-10-15 | 2011-02-09 | 株式会社ナノエッグ | 多価金属無機塩被覆レチノイン酸ナノ粒子含有組成物 |
EP1674093A4 (en) * | 2003-10-15 | 2009-12-09 | Nanoegg Res Lab Inc | METHOD OF CHECKING THE PARTICLE SIZE OF RETINOLIC ACID NANOTEILS WITH A COATING OF POLYVALENT INORGANIC METAL SALT AND NANOTEHTES OBTAINED BY THE CONTROL PROCEDURE |
WO2005063213A1 (en) * | 2003-12-19 | 2005-07-14 | Biodelivery Sciences International, Inc. | Rigid liposomal cochleate and methods of use and manufacture |
US20050244522A1 (en) * | 2004-04-30 | 2005-11-03 | Carrara Dario Norberto R | Permeation enhancer comprising genus Curcuma or germacrone for transdermal and topical administration of active agents |
US7494526B2 (en) * | 2004-07-14 | 2009-02-24 | Yavitz Edward Q | Plant protection and growth stimulation by nanoscalar particle folial delivery |
US20060040896A1 (en) * | 2004-08-18 | 2006-02-23 | Paringenix, Inc. | Method and medicament for anticoagulation using a sulfated polysaccharide with enhanced anti-inflammatory activity |
US20070082107A1 (en) * | 2005-10-07 | 2007-04-12 | Aimutis William R Jr | Compositions and methods for reducing food intake and controlling weight |
US20070082029A1 (en) * | 2005-10-07 | 2007-04-12 | Aimutis William R | Fiber satiety compositions |
US20070082030A1 (en) * | 2005-10-07 | 2007-04-12 | Aimutis William R | Fiber satiety compositions |
US20070082115A1 (en) * | 2005-10-07 | 2007-04-12 | Aimutis William Ronald Jr | Methods for inducing satiety, reducing food intake and reducing weight |
US20100178325A1 (en) * | 2006-08-23 | 2010-07-15 | Biodelivery Sciences International, Inc. | Amphiphilic nucleotide cochleate compositions and methods of using the same |
US20080085354A1 (en) * | 2006-10-06 | 2008-04-10 | Teresa Marie Paeschke | Controlled hydration of hydrocolloids |
CA2672338C (en) | 2006-12-15 | 2017-06-06 | National Research Council Of Canada | Archaeal polar lipid aggregates for administration to animals |
US20090054374A1 (en) * | 2007-02-28 | 2009-02-26 | Paringenix, Inc. | Methods of treating acute exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease |
US8591225B2 (en) * | 2008-12-12 | 2013-11-26 | Align Technology, Inc. | Tooth movement measurement by automatic impression matching |
JP2010534672A (ja) * | 2007-07-23 | 2010-11-11 | ユニバーシティ オブ ユタ リサーチ ファウンデーション | 終末糖化産物受容体(rage)の連結を阻止するための方法 |
US20090047336A1 (en) * | 2007-08-17 | 2009-02-19 | Hong Kong Baptist University | novel formulation of dehydrated lipid vesicles for controlled release of active pharmaceutical ingredient via inhalation |
US8003621B2 (en) | 2007-09-14 | 2011-08-23 | Nitto Denko Corporation | Drug carriers |
CA2730340C (en) | 2008-07-14 | 2017-02-07 | Polypid Ltd. | Sustained-release drug carrier composition |
US20100113352A1 (en) | 2008-11-06 | 2010-05-06 | Elliott Millstein | Retinol formulations and methods for their use |
CN102470105B (zh) | 2009-07-14 | 2015-07-29 | 波利皮得有限公司 | 持续释放药物载体组合物 |
WO2011016043A2 (en) | 2009-08-06 | 2011-02-10 | Technion Research & Development Foundation Ltd. | Antibiotic drug delivery and potentiation |
WO2011031018A2 (ko) * | 2009-09-14 | 2011-03-17 | 한남대학교 산학협력단 | 서방형 방출이 가능한 수용성 약물 전달 시스템 |
AU2011208374B2 (en) * | 2010-01-19 | 2016-09-08 | Polypid Ltd. | Sustained-release nucleic acid matrix compositions |
BR112012020089A2 (pt) * | 2010-02-10 | 2016-05-17 | Biopelle Inc | formulações de retinol e métodos para utilização das mesmas |
KR20200057789A (ko) | 2011-04-29 | 2020-05-26 | 셀렉타 바이오사이언시즈, 인크. | 합성 나노운반체로부터의 면역억제제의 조절 방출 |
CA2834788C (en) * | 2011-05-05 | 2020-11-17 | Coordinated Program Development, Llc | Cochleate compositions and methods of making and using same |
AU2012278832B2 (en) | 2011-07-06 | 2017-04-20 | The Regents Of The University Of California | Multiple-enzyme nanocomplexes |
US9993440B2 (en) | 2011-09-02 | 2018-06-12 | The Regents Of The University Of California | Enzyme responsive nanocapsules for protein delivery |
SG10201914117QA (en) | 2012-05-09 | 2020-02-27 | Cantex Pharmaceuticals Inc | Treatment Of Myelosuppression |
WO2014151775A1 (en) * | 2013-03-15 | 2014-09-25 | Robert Bosch Gmbh | Heated garment and battery holster |
JP6760838B2 (ja) * | 2013-05-03 | 2020-09-23 | セレクタ バイオサイエンシーズ インコーポレーテッドSelecta Biosciences,Inc. | 望ましくない液性免疫応答を低減するための投薬の組み合わせ |
US9750785B2 (en) | 2015-01-30 | 2017-09-05 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9375478B1 (en) | 2015-01-30 | 2016-06-28 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9925233B2 (en) | 2015-01-30 | 2018-03-27 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9937223B2 (en) | 2015-01-30 | 2018-04-10 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9744209B2 (en) | 2015-01-30 | 2017-08-29 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9687526B2 (en) | 2015-01-30 | 2017-06-27 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US10052346B2 (en) | 2015-02-17 | 2018-08-21 | Cantex Pharmaceuticals, Inc. | Treatment of myelodysplastic syndromes with 2-O and,or 3-O desulfated heparinoids |
AU2016226151B2 (en) | 2015-03-03 | 2021-02-25 | Matinas Biopharma Nanotechnologies, Inc. | Cochleates and methods of using the same to enhance tissue penetration of pharmacologically active agent |
SG11201803915UA (en) * | 2015-11-10 | 2018-06-28 | Childrens Research Institute Childrens National Medical Center | Echinomycin formulation, method of making and method of use thereof |
EP3484447A4 (en) * | 2016-07-12 | 2020-07-22 | Matinas BioPharma Nanotechnologies, Inc. | DECOCHLATED ANTIMYCOTIC COMPOUNDS FOR ADMINISTRATION IN THE CENTRAL NERVOUS SYSTEM AND FOR TREATING CRYPTOCOCCUS |
KR101989789B1 (ko) | 2017-11-30 | 2019-06-18 | (주) 에이치엔에이파마켐 | 포스파티딜세린/음이온계면활성제/염화칼슘을 이용한 코킬레이트 |
KR20210016403A (ko) * | 2018-09-28 | 2021-02-15 | 가부시키가이샤 만다무 | 화장료 |
WO2022152939A1 (en) | 2021-01-18 | 2022-07-21 | Conserv Bioscience Limited | Coronavirus immunogenic compositions, methods and uses thereof |
WO2024039729A1 (en) | 2022-08-16 | 2024-02-22 | Matinas Biopharma Nanotechnologies, Inc. | Antifungal agent encapsulated in a lipid nanocrystal for treating mucormycosis |
WO2024039733A1 (en) | 2022-08-16 | 2024-02-22 | Matinas Biopharma Nanotechnologies, Inc. | Methods of controlling lipid nanocrystal particle size and lipid nanocrystals produced by such methods |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4871488A (en) * | 1985-04-22 | 1989-10-03 | Albany Medical College Of Union University | Reconstituting viral glycoproteins into large phospholipid vesicles |
US4663161A (en) * | 1985-04-22 | 1987-05-05 | Mannino Raphael J | Liposome methods and compositions |
US4990291A (en) * | 1986-04-15 | 1991-02-05 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy | Method of making lipid tubules by a cooling process |
US5269979A (en) * | 1988-06-08 | 1993-12-14 | Fountain Pharmaceuticals, Inc. | Method for making solvent dilution microcarriers |
DE69014885T2 (de) * | 1989-06-22 | 1995-04-27 | Vestar Inc | Einkapselverfahren. |
US5840707A (en) * | 1993-10-04 | 1998-11-24 | Albany Medical College | Stabilizing and delivery means of biological molecules |
US5994318A (en) * | 1993-10-04 | 1999-11-30 | Albany Medical College | Cochleate delivery vehicles |
US5643574A (en) * | 1993-10-04 | 1997-07-01 | Albany Medical College | Protein- or peptide-cochleate vaccines and methods of immunizing using the same |
WO1997030725A1 (en) | 1996-02-22 | 1997-08-28 | Raphael James Mannino | Cochleat delivery vehicles |
US6120751A (en) * | 1997-03-21 | 2000-09-19 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Charged lipids and uses for the same |
US6153217A (en) | 1999-01-22 | 2000-11-28 | Biodelivery Sciences, Inc. | Nanocochleate formulations, process of preparation and method of delivery of pharmaceutical agents |
-
1999
- 1999-01-22 US US09/235,400 patent/US6153217A/en not_active Expired - Fee Related
-
2000
- 2000-01-24 EP EP00909961A patent/EP1143933B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-01-24 ES ES00909961T patent/ES2290019T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-01-24 DK DK00909961T patent/DK1143933T3/da active
- 2000-01-24 DE DE60035669T patent/DE60035669T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-01-24 AU AU32133/00A patent/AU3213300A/en not_active Abandoned
- 2000-01-24 AT AT00909961T patent/ATE367800T1/de active
- 2000-01-24 CA CA2358505A patent/CA2358505C/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-01-24 WO PCT/US2000/001684 patent/WO2000042989A2/en active IP Right Grant
- 2000-01-24 PT PT00909961T patent/PT1143933E/pt unknown
- 2000-01-24 JP JP2000594446A patent/JP2002535267A/ja active Pending
- 2000-07-11 US US09/613,840 patent/US6592894B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2003
- 2003-04-23 US US10/421,358 patent/US20030228355A1/en not_active Abandoned
-
2005
- 2005-01-18 US US11/040,615 patent/US20050186265A1/en not_active Abandoned
-
2007
- 2007-10-08 CY CY20071101285T patent/CY1106916T1/el unknown
-
2008
- 2008-04-23 US US12/148,942 patent/US20090028904A1/en not_active Abandoned
-
2012
- 2012-04-06 US US13/441,030 patent/US20120294901A1/en not_active Abandoned
-
2013
- 2013-12-31 US US14/145,268 patent/US20140220109A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2358505C (en) | 2010-04-06 |
US20030228355A1 (en) | 2003-12-11 |
US20050186265A1 (en) | 2005-08-25 |
EP1143933B1 (en) | 2007-07-25 |
DE60035669T2 (de) | 2008-02-07 |
DE60035669D1 (de) | 2007-09-06 |
JP2002535267A (ja) | 2002-10-22 |
CA2358505A1 (en) | 2000-07-27 |
US6153217A (en) | 2000-11-28 |
US20140220109A1 (en) | 2014-08-07 |
AU3213300A (en) | 2000-08-07 |
CY1106916T1 (el) | 2012-09-26 |
US20120294901A1 (en) | 2012-11-22 |
ATE367800T1 (de) | 2007-08-15 |
EP1143933A2 (en) | 2001-10-17 |
PT1143933E (pt) | 2007-09-03 |
WO2000042989A2 (en) | 2000-07-27 |
US20090028904A1 (en) | 2009-01-29 |
DK1143933T3 (da) | 2007-11-26 |
WO2000042989A3 (en) | 2000-11-30 |
US6592894B1 (en) | 2003-07-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
ES2290019T3 (es) | Nuevas formulaciones de cocleatos aislados en hidrogel, procedimiento de preparacion y su uso para la administracion de moleculas biologicamente relevantes. | |
Mehta et al. | Recent advances in inhalable liposomes for treatment of pulmonary diseases: concept to clinical stance | |
Sun et al. | Clodronate-loaded liposomal and fibroblast-derived exosomal hybrid system for enhanced drug delivery to pulmonary fibrosis | |
JP2958774B2 (ja) | アンホテリシンbリポソームの改良調整法 | |
Zarif et al. | Cochleates: new lipid-based drug delivery system | |
ES2964413T3 (es) | Composición liposómica inhalable de liberación sostenida para el uso en el tratamiento de enfermedades pulmonares | |
US20140037715A1 (en) | Disulfiram formulation and uses thereof | |
CN106137967B (zh) | 靶向脑胶质瘤的双重修饰脂质体给药系统的制备和应用 | |
Gulati et al. | Development of liposomal amphotericin B formulation | |
ES2290333T3 (es) | Composiciones de vehiculos lipidicos y metodos para la retencion mejorada de farmacos. | |
WO2008038291A1 (en) | Combination of liposomal anti-cancer drugs and lysosome/endosome ph increasing agents for therapy | |
Tretiakova et al. | Liposomal formulation of a melphalan lipophilic prodrug: Studies of acute toxicity, tolerability, and antitumor efficacy | |
AU3111401A (en) | New cochleate formulations, process of preparation and their use for the delivery of biologically relevant molecules | |
Shinu et al. | Recent Advances and Appropriate Use of Niosomes for the Treatment of Skin Cancer. | |
CN108143719B (zh) | 一种携载多肽的纳米脂质体及其制备方法和应用 | |
AU2007200813B2 (en) | Novel hydrogel isolated cochleate formulations, process of preparation and their use for the delivery of biologically relevant molecules | |
Shivhare et al. | A Review on Liposomes as a Novel Drug Delivery System | |
US20230059528A1 (en) | Liposomal formulations of bcl inhibitors | |
US20240108685A1 (en) | Oral liposomal compositions | |
AU2004200967A1 (en) | Novel hydrogel isolated ochleate formulations, process of preparation and their use for the delivery of biologically relevant molecules | |
AU2006202639A1 (en) | New cochleate formulations, process of preparation and their use for the delivery of biologically relevant molecules | |
JP2018043998A (ja) | 内臓リーシュマニア症を治療するための従来型リポソームと長期循環型リポソームを含有する医薬組成物 |