ES2259928A1

ES2259928A1 - Composicion cosmetica o dermofarmaceutica que comprende peptidos derivados de encefalinas para reducir y/o eliminar arrugas faciales.

Info

Publication number: ES2259928A1
Application number: ES200500824A
Authority: ES
Inventors: Antonio Ferrer Montiel; Juan Cebrian Puche; Arturo Puig Montiel
Original assignee: Lipotec SA
Current assignee: Lipotec SA
Priority date: 2005-04-08
Filing date: 2005-04-08
Publication date: 2006-10-16
Anticipated expiration: 2025-04-08
Also published as: CA2608165A1; MX2007012504A; ES2259928B1; EP1892247B1; US9079048B2; US20090155317A1; ES2653388T3; CA2608165C; EP1892247A1; WO2006106164A1; WO2006106164B1; EP1892247A4; JP2008534658A; JP5596922B2; AU2006231273A1; AU2006231273B2; BRPI0609745A2

Abstract

Composición cosmética o dermofarmacéutica que comprende péptidos derivados de encefalinas para reducir y/o eliminar arrugas faciales. Dicha composición cosmética o dermofarmacéutica es de aplicación en la piel, preferentemente la piel del rostro, para reducir y/o eliminar las arrugas faciales, preferentemente las arrugas faciales de expresión y comprende una cantidad cosmética o dermofarmacéuticamente eficaz de un péptido de fórmula general (I). Uso del péptido de fórmula general (I) en la preparación de una composición cosmética o dermofarmacéutica que reduce y/o elimina las arrugas faciales.

Description

Composición cosmética o dermofarmacéutica que comprende péptidos derivados de encefalinas para reducir y/o eliminar arrugas faciales.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica de aplicación en la piel, preferentemente la piel del rostro, para reducir y/o eliminar las arrugas faciales, preferentemente las arrugas faciales de expresión. Dicha composición comprende una cantidad cosmética o dermofarmacéuticamente eficaz de un péptido de fórmula general (I), donde R_{1} puede ser H o grupo alquilo, arilo, aralquilo o acilo, R_{2} puede ser amino, hidroxilo o tiol, todos ellos sustituidos o no con grupos alifáticos o cíclicos y X e Y se seleccionan del conjunto de aminoácidos naturales en su forma L- o D- o aminoácidos no codificados como por ejemplo citrulina, ornitina, sarcosina, fenilglicina, \beta-alanina o norleucina entre otros.

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Antecedentes de la invención

Uno de los signos más visibles del envejecimiento del ser humano son los cambios que experimenta la piel: sequedad, aparición de manchas, flaccidez y arrugas. Estos efectos pueden ser causados por agentes externos como la exposición constante al sol, la contaminación atmosférica o el contacto con agentes químicos presentes en, por ejemplo, productos de limpieza, pero también son consecuencia de cambios fisiológicos, bioquímicos e histológicos intrínsecos del organismo humano, debidos a la disminución de la síntesis de proteínas como el colágeno o la elastina, a un aumento de la proteólisis, y a una rotura general de la barrera de la piel, del tejido conectivo y de la cohesión.

Se han descrito distintos principios activos para la prevención o disminución de los síntomas del envejecimiento, como por ejemplo retinoides, hidroxiácidos, flavonoides o derivados de vitamina C y E. Dichos compuestos actúan normalmente mejorando la hidratación de la piel, aumentando la renovación celular o preveniendo la degeneración de los tejidos que forman la piel; sin embargo, su eficacia en la prevención o tratamiento de las arrugas faciales motivadas por la contracción de los músculos es limitada. Existe, pues, la necesidad de desarrollar nuevos principios activos con eficacia probada para la preparación de una composición cosmética o dermofarmacéutica para reducir y/o eliminar las arrugas faciales, especialmente las arrugas de expresión.

Se entiende por arrugas de expresión aquellas que son consecuencia del estrés que ejercen las contracciones de los músculos faciales responsables de producir las expresiones del rostro sobre la piel del rostro. Las arrugas de expresión se suelen localizar en la frente, en el espacio entre las cejas, alrededor de la boca y/o alrededor de los ojos. Dependiendo de la forma del rostro, la frecuencia de las expresiones y la existencia de tics (movimientos convulsivos, que se repiten con frecuencia, producidos por la contracción involuntaria de uno o varios músculos, en este caso del rostro) las arrugas de expresión pueden aparecer incluso en la adolescencia. Los factores externos como la exposición al sol acentúan su profundidad y su visibilidad.

Con el objetivo de reducir y/o eliminar las arrugas de expresión se han empleado ampliamente las toxinas botulínicas, en especial el serotipo A (BOTOX® Cosmetic, Allergan) [Carruthers J.D. y Carruthers J.A. (1992) Treatment of glabellar frown lines with C. botulinum-A exotoxin, J. DermatoL Surg. Oncol. 18, 17-21; Mendez-Eastman S.K. (2003) Botox: a review, Plast. Surg. Nurs. 23, 64-69]. Sin embargo, las toxinas botulínicas presentan importantes inconvenientes tales como el requisito de su aplicación por parte de un facultativo mediante inyección, así como la aparición de una respuesta inmune que comporta una disminución de la eficacia del tratamiento con el tiempo.

La industria cosmética ha realizado importantes esfuerzos para desarrollar compuestos que imiten la acción de las toxinas botulinicas en el tratamiento y prevención de la formación de las arrugas de expresión. La solicitud de patente EP1,180,524 de Lipotec, S.A. describe péptidos derivados del fragmento N-terminal de la proteína SNAP-25 que poseen efecto antiarrugas, ya que actúan con un mecanismo similar al de la toxina botulínica: la inhibición del complejo SNARE, mediador de la exocitosis neuronal, comporta la disminución de la liberación de neurotransmisores. La solicitud internacional WO97/34620 describe también péptidos derivados de la secuencia de aminoácidos de la proteína SNAP-25, en concreto de su región C-terminal, capaces de inhibir la exocitosis neuronal. La aplicación tópica de dichos compuestos se perfila como una posible solución a la reducción y/o eliminación de las arrugas de expresión.

Otros métodos descritos para la reducción y/o eliminación de las arrugas de expresión comportan el uso de antagonistas de canales de calcio, en particular sales de manganeso (FR2,809,005) o alverina (FR2,798,590), agonistas de canales de cloro, como glicina (EP0,704,210) o extractos de Iris pallida (FR2,746,641), ciertas aminas secundarias o terciarias (FR2,845,288 y FR2,847,250), sapogeninas (FR2,838,344), compuestos limonoides (US2004/127,556) o ácidos boswélicos (FR2,850,573).

El solicitante de la presente invención ha determinado que los péptidos derivados de la secuencia de las encefalinas son eficaces en la reducción y/o eliminación de las arrugas faciales, especialmente las arrugas de expresión, actuando mediante mecanismos distintos a los conocidos en el estado de la técnica.

Hasta la actualidad, la aplicación cosmética o dermofarmacéutica de las encefalinas ha sido limitada: la solicitud de patente FR2,735,687 describe el uso tópico de las encefalinas y de sus derivados como compuestos con capacidad adelgazante debido su actividad lipolitica, mientras que la solicitud de patente FR2,857,588 describe el uso tópico de secuencias derivadas de la endorfina, incluyendo algunos derivados de las encefalinas, para mejorar la función barrera de la piel, así como para mejorar la hidratación y luminosidad de la piel o para prevenir el efecto de la contaminación atmosférica sobre la piel.

Ninguna de las patentes descritas anteriormente se refiere al uso de encefalinas como agentes antiarrugas, ni, en concreto, el uso de péptidos derivados de las encefalinas para la reducción y/o eliminación de las arrugas de expresión.

Las encefalinas son una familia de péptidos derivados de las \beta-endorfinas que son capaces de inhibir la actividad neuronal [Kieffer, B.L. and Gavériaux-Ruff, C.(2002) Exploring the opioid system by gene knockout (2002) Prog. Neurobiol. 66, 285-306]. La interacción específica de estos péptidos con sus receptores neuronales produce un cambio metabólico en las neuronas que provoca una disminución de la actividad neuronal. Aunque el mecanismo de acción está siendo investigado actualmente, se conoce que las encefalinas son capaces de modular indirectamente la actividad de canales fónicos dependientes de voltaje, especialmente el canal selectivo de K^{+}. [Faber, E.S. and Sah, P. (2004) Opioids inhibit lateral amygdala pyramidal neurons by enhancing a dendritic potassium current. J. Neurosci. 24, 3031-3039]. Desde un punto de vista del mecanismo de acción, la unión de la encefalina a su receptor activa a un complejo trimérico de proteínas G que provoca la liberación de Ca^{2+} de reservas intracelulares a través del receptor de inositoles fosfatos. El calcio citosólico actúa como un mensajero intracelular disparando la activación de rutas de señalización que implican a proteínas quinasa y fosfatasa que modifican químicamente a proteínas celulares, entre ellas, a los canales fónicos. La modificación de los canales fónicos modifica su función; por ejemplo, las encefalinas activan las corrientes de K^{+} en las neuronas produciendo un efecto hiperpolarizante. El resultado de esta hiperpolarización es una reducción en la exocitosis neuronal dependiente del catión Ca^{2+} que, a su vez, disminuye la comunicación en las sinapsis neuronales.

Globalmente, el resultado final es una atenuación de la excitabilidad de las sinapsis neuronales como consecuencia de una menor liberación de neurotransmisores [Bergevin, A., Girardot, D., Bourque, M.J. and Trudeau, L.E. (2002) Presynaptic muopioid receptors regulate a late step of the secretory process in rat ventral legmental area gabaergic neurons. Neuropharmacology, 42, 1065-1078]. Por tanto, una acción de las encefalinas es la inhibición de la neurosecreción por un mecanismo que es diferente al descrito para la toxina botulínica y péptidos que imitan la acción de ésta. Consecuentemente, y al igual que la toxina botulínica y los péptidos inhibidores de la exocitosis neuronal, las encefalinas también son bloqueadores de la exocitosis neuronal dependiente del catión Ca^{2+}.

La solicitud de patente FR2,846,885 describe el efecto sinérgico de la combinación de péptidos inhibidores de la exocitosis neuronal, tales como los descritos en las solicitudes de patente EP1,180,524 y WO97/34620, junto con inhibidores de canales de calcio. Dicha invención se restringe a los inhibidores de canales de calcio que actúan a nivel de membrana inhibiendo la entrada de calcio, o a compuestos que actúen desde el interior de las neuronas, bien sea liberando las reservas intracelulares de calcio, bien sea inhibiendo la formación del complejo calcio,calmodulina. Un experto en la materia no podría deducir que existiese una sinergia en el efecto antiarrugas cuando se combinan péptidos inhibidores de la exocitosis neuronal derivados de la secuencia de SNAP-25 y las encefalinas, ya que estas actúan indirectamente sobre los canales de potasio y no sobre los canales de calcio.

Descripción de la invención

La presente invención proporciona una solución sencilla, eficaz y sin riesgos para la reducción y/o eliminación de las arrugas faciales, preferentemente las arrugas de expresión, que comprende la aplicación en el rostro de una composición cosmética o dermofarmacéutica que contiene, al menos, un péptido de fórmula general (I).

Por lo tanto, un primer aspecto de esta invención se refiere una composición cosmética o dermofarmacéutica con actividad reductora y/o eliminadora de arrugas faciales que contiene una cantidad cosméticamente o dermofarmacéuticamente eficaz de al menos un péptido según la fórmula general (I)

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o de sus sales cosméticamente o dermofarmacéuticamente aceptables, en donde:

X: e Y pueden ser: cualquiera de los aminoácidos naturales codificados en su forma L- o D- o aminoácidos no codificados;

R_{1}: puede ser: H o grupo alquilo, arilo, aralquilo o asilo; y

R_{2}: puede ser: amino, hidroxilo o tiol, todos ellos sustituidos o no con grupos alifáticos o cíclicos.

Las estructuras preferidas de los péptidos representados en la fórmula general (I) son aquellas donde:

X: puede ser: glicil, D-alanil o D-seril;

Y: puede ser: L-leucil o L-metionil

R_{1}: puede ser: H o acilo de C_{2} a C_{24} lineal, ramificado o cíclico, saturado o insaturado; y

R_{2}: puede ser: amino o hidroxilo, sustituidos o no con grupos alifáticos de C_{1} a C_{24} lineales, ramificados o cíclicos, saturados o insaturados.

Las estructuras preferidas de los péptidos de fórmula general (I) son isómeros puros, es decir, enantiómeros o diastereómeros.

En el contexto de la presente invención, el término "aminoácidos no codificados" se refiere a aquellos aminoácidos no codificados por el código genético, naturales o no, como por ejemplo, y sin sentido limitativo, citrulina, ornitina, sarcosina, desmosina, norvalina, 4-aminobutírico, 2-aminobutírico, 2-aminoisobutírico, 6-aminohexanoico, 1-naftilalanina, 2-naftilalanina, 2-aminobenzoico, 4-aminobenzoico, cicloserina, hidroxiprolina, alo-isoleucina, isonipecótico, isoserina, fenilglicina, estatina, \beta-alanina, o norleucina entre otros, así como sus derivados. Una lista de los aminoácidos no naturales se puede encontrar en el artículo "Unusual amino acids in peptide synthesis" de D.C. Roberts y F. Vellaccio, en The Peptides, Vol. 5 (1983), Chapter VI, Gross E. and Meienhofer J., Eds., Academic Press, New York, USA.

El término "grupo alifático" se refiere a un grupo hidrocarbonado saturado o insaturado, lineal o cíclico.

El término "grupo hidrocarbonado" se utiliza en la presente invención para abarcar, por ejemplo, los grupos alquilo, alquenilo y alquinilo.

El término "grupo alquilo" se refiere a un grupo hidrocarbonado saturado lineal o ramificado, incluyendo, por ejemplo, metilo, etilo, isopropilo, isobutilo, t-butilo, heptilo, dodecilo, hexadecilo, octadecilo, amito, 2-etilhexilo, 2-metilbutilo, 5-metilhexilo y similares.

El término "grupo alquenilo" se refiere a un grupo hidrocarbonado no saturado, lineal o ramificado con uno o más enlaces doble carbono-carbono, tal como el grupo vinilo.

El término "grupo alquinilo" se refiere a un grupo hidrocarbonado no saturado, lineal o ramificado con uno o más enlaces triple carbono-carbono.

El término "grupo cíclico" se refiere a un anillo cerrado hidrocarbonado, que puede ser clasificado como grupo alicíclico, aromático o heterocíclico.

El término "grupo alicíclico" se refiere a un grupo hidrocarbonado cíclico con propiedades parecidas a grupos alifáticos.

El término "grupo aromático" o el "grupo arilo" se refieren a un grupo hidrocarbonado aromático mono o policíclico.

El término "grupo heterocíclico" se refiere a un anillo cerrado hidrocarbonado, en el que uno o más de uno de los átomos del anillo es un elemento diferente al carbono (por ejemplo, nitrógeno, oxígeno, azufre, etc.).

Tal y como se entiende en esta área técnica, la existencia de un alto grado de sustitución no es únicamente tolerado, sino que es aconsejado. Por lo tanto, puede existir sustitución en los péptidos de la presente invención. Con el fin de simplificar la presente descripción de la invención, los términos "grupo" y "bloque" se utilizarán para diferenciar entre especies químicas que permiten sustitución o que pueden ser sustituidas ("grupo"), y aquellas que no permiten sustitución o que no pueden ser sustituidas ("bloque"). De esta forma, cuando el término "grupo" se usa para describir un sustituyente químico, el material químico descrito incluye tanto el grupo no sustituido como aquel que contiene los átomos de O, N o S.

Por otro lado, cuando el término "bloque" se utiliza para describir un compuesto químico o sustituyente, únicamente puede incluirse material químico no sustituido. Por ejemplo, la expresión "grupo alquilo" incluirá no únicamente sustituyentes alquílicos saturados de cadena abierta, tales como metilo, etilo, propilo, isobutilo y similares, sino también sustituyentes alquílicos que contengan otros sustituyentes conocidos en el estado de la técnica, tales como hidroxi, alcoxi, amino, carboxilo, carboxamido, átomos de halógeno, ciano, nitro, alquilsulfonilo, y otros. De este modo, "grupo alquilo" incluye grupos éteres, haloalquilos, alcoholes, tioles, carboxilos, aminas, hidroxialquilos, sulfoalquilos, guanidinos, y otros. Por otro lado, la expresión "bloque alquilo" se limita únicamente a la inclusión de sustituyentes alquílicos saturados de cadena abierta, tales como metilo, etilo, propilo, isobutilo y similares.

Dentro del ámbito de la presente invención se encuentran las sales cosméticamente o dermofarmacéuticamente aceptables de los péptidos de fórmula (I) proporcionados por esta invención. El término "sales cosméticamente o dermofarmacéuticamente aceptables" incluye las sales habitualmente utilizadas para formar sales metálicas o sales de adición de ácidos, bien sean orgánicos (como por ejemplo acetato, citrato, oleato, oxalato o gluconato entre otros) o inorgánicos (como por ejemplo cloruro, sulfato, borato o carbonato entre otros). La naturaleza de la sal no es crítica, siempre y cuando sea cosméticamente o dermofarmacéuticamente aceptable. Las sales cosméticamente o dermofarmacéuticamente aceptables de los péptidos de fórmula (I) pueden obtenerse por métodos convencionales, bien conocidos en el estado de la técnica.

La síntesis de los péptidos de fórmula general (I) puede realizarse según métodos convencionales, conocidos en el estado de la técnica, como por ejemplo la adaptación de los métodos de síntesis de péptidos en fase sólida [Stewart J.M. and Young J.D.(1984) Solid Phase Peptide Synthesis, 2nd edition, Pierce Chemical Company, Rockford, Illinois. Bodanzsky M. and Bodanzsky A. (1984) The practice of Peptide Synthesis, Springer Verlag, New York. Lloyd-Williams, P., Albericio, F. and Giralt, E. (1997) Chemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins. CRC, Boca Raton (FL, USA)], la síntesis en solución, una combinación de los métodos de síntesis en fase sólida y en solución o la síntesis enzimática [Kullmann W. (1980) Proteases as catalysts for enzymic syntheses of opioid peptides J.Biol.Chem. 255, 8234-8238]. Los péptidos se pueden obtener igualmente por fermentación de una cepa bacteriana, modificada o no por ingeniería genética con el objetivo de producir las secuencias deseadas, o bien por hidrólisis controlada de proteínas de origen animal o vegetal, preferentemente vegetal, que libere fragmentos peptídicos que contengan, al menos, la secuencia deseada, como por ejemplo la \beta-glucosidasa de maíz.

Por ejemplo, un método de obtención de los péptidos de fórmula general (I) es aquel en el cual se hace reaccionar un fragmento del péptido de fórmula general (I) que posee un grupo carboxilo libre o un derivado reactivo de éste, con un fragmento complementario, que posee un grupo amino, con al menos un átomo de hidrógeno libre, con la consecuente formación de un enlace tipo amida, y donde dichos fragmentos presentan los grupos funcionales que no participan en la formación del enlace tipo amida, si los hubiera, convenientemente protegidos, con grupos protectores temporales o permanentes.

Otro ejemplo de método de obtención de los péptidos de fórmula general (I) es aquel en el cual se hace reaccionar un fragmento del péptido de fórmula general (I) que posee un grupo saliente, como por ejemplo el grupo tosilo, el grupo mesilo y grupos halógeno entre otros, con un fragmento complementario que posee un grupo amino con al menos un átomo de hidrógeno libre mediante una reacción de sustitución nucleófila, y donde dichos fragmentos presentan los grupos funcionales que no participan en la formación del enlace N-C, si los hubiera, convenientemente protegidos, con grupos protectores temporales o permanentes. Ejemplos de grupos protectores, su introducción y su eliminación, pueden encontrarse descritos en la literatura [Greene T.W. (1981) Protective groups in organic synthesis, John Wiley & Sons, New York. Atherton B. and Sheppard R.C. (1989) Solid Phase Peptide Synthesis: A practical approach, IRL Oxford University Pres]. El término "grupos protectores" incluye también a los soportes poliméricos empleados en la síntesis en fase sólida.

Cuando la síntesis se realiza total o parcialmente en fase sólida, se pueden citar como soportes sólidos a utilizar en el método de la invención, los soportes de poliestireno, polietilenglicol injertado en poliestireno y similares, como por ejemplo resinas p-metilbenzhidrilamina (MBHA) [Matsueda G.R. and Stewart J.M. (1981) A p-methylbenzhydrylamine resin for improved solid-phase synthesis of peptide amides Peptides 2, 45-50.], resinas 2-clorotritilo [(a) Barlos K., Gatos D., Kallitsis J., Papaphotiu G., Sotiriu P., Wenqing Y. and Schäfer W. (1989) Darstellung geschützter peptid-fragmente unter einsatz substituierter triphenylmethyl-harze Tetrahedron Lett. 30, 3943-3946.(b) Barlos K., Gatos D., Kapolos S., Papaphotiu G., Schäfer W. and Wenqing Y (1989) Veresterung von partiell geschützten peptid-fragmenten mit harzen. Einsatz von 2-chlortritylchlorid zur synthese von Leu15 -gastrin I Tetrahedron Lett. 30, 3947-3951], resinas TentaGel® y similares, que pueden incluir o no un espaciador lábil, tal como ácido 5-(4-aminometil-3,5-dimetoxifenoxi) valérico (PAL) [Albericio F., Kneib-Cordonier N., Biancalana S., Gera L., Masada R.l., Hudson D. and Barany G. (1990) Preparation and application of the 5-(4-(9-fluorenylmethyloxycarbonyl)aminomethyl-3, 5-dimethoxyphenoxy)-valeric acid (PAL) handle for the solid-phase synthesis of C-terminal peptide amides under mild conditions J. Org. Chem. 55, 3730-3743], ácido 2-[4-aminometil-(2,4-dimetoxifenil) fenoxiacético (AM) [Rink H. (1987) Solid-phase synthesis of protected peptide fragments using a trialkoxy-diphenyl-methylester resin Tetrahedron Lett. 28, 3787-3790], Wang [Wang, S.S. (1973) p-Alkoxybenzyl Alcohol Resin and p-Alkoxybenzyloxycarbonylhydrazide Resin for Solid Phase Synthesis of Protected Peptide Fragments J.Am.Chem.Soc. 95, 1328-1333] y similares, que permiten la desprotección y escisión simultánea del compuesto del soporte polimérico.

La composición cosmética o dermofarmacéutica objeto de la presente invención puede ser preparada mediante métodos convencionales conocidos por los expertos en lamateria [Wilkinson J.B. y Moore R.J. (1982), Harry's Cosmeticology, Longman Scientific & Technical, London, UK].

Los péptidos objeto de la presente invención tienen una solubilidad en agua variable, según sea la naturaleza de los grupos R_{1}, R_{2}, X e Y. Aquellos que no sean solubles en agua pueden solubilizarse en solventes convencionales cosmética o dermofarmacéuticamente aceptables tales como por ejemplo etanol, propanol o isopropanol, propilenglicol, glicerina, butilenglicol o polietilenglicol. Los péptidos también se pueden incorporar previamente en vehículos cosméticos o dermofarmacéuticos como liposomas, miliparticulas, micropartículas y nanopartículas así como en esponjas, miliesferas, microesferas y nanoesferas, milicápsulas, microcápsulas y nanocápsulas y lipoesferas.

Las preparaciones que contienen los péptidos de la presente invención pueden usarse en distintos tipos de formulaciones como por ejemplo, y sin sentido limitativo, cremas, lociones, geles, aceites, linimentos, sueros, mousses, pomadas, barras, lápices o vaporizadores ("sprays"), incluyendo las formulaciones de permanencia ("leave on") y las de enjuagado ("rinse-off"), así como pueden ser incorporadas mediante técnicas conocidas por expertos en la materia a distintos tipos de accesorios sólidos tales corno por ejemplo toallitas, hidrogeles, parches adhesivos (o no adhesivos) o mascarillas faciales, o pueden incorporarse a distintos productos de línea de maquillaje tales como fondos de maquillaje, lociones, leches desmaquillantes, correctores de ojeras, sombras de ojos y barras de labios entre otros.

La composición cosmética o dermofarmacéutica objeto de la presente invención puede aplicarse mediante inyección subcutánea, inyección intradérmica o mediante iontoforesis directamente en la zona del rostro marcada con arrugas para conseguir una mayor penetración del principio activo. La zona preferida para la aplicación es la zona de la frente que presenta arrugas de expresión así como en el espacio entre las cejas, las arrugas y lineas finas alrededor de la boca y/o alrededor de los ojos.

La composición cosmética o dermofarmacéutica reivindicada en la presente invención puede contener ingredientes adicionales comúnmente empleados en composiciones para el cuidado y tratamiento de la piel, tales como por ejemplo, y sin sentido limitativo, agentes emulsionantes, emolientes, disolventes orgánicos, acondicionadores de la piel como por ejemplo humectantes, alfahidroxiácidos, hidratantes, vitaminas, pigmentos o colorantes, polímeros gelificantes, espesantes, suavizantes, agentes antiarrugas, agentes capaces de disminuir o tratar las bolsas bajo los ojos, agentes blanqueantes o despigmentantes, agentes exfoliantes, agentes anti-envejecimiento, agentes capturadores de radicales libres y/o anti-contaminación atmosférica, agentes inhibidores de la NO-sintasa, agentes antioxidantes, agentes anti-glicación, agentes estimuladores de la síntesis de macromoléculas dérmicas o epidérmicas y/o capaces de inhibir su degradación, como por ejemplo agentes estimuladores de la síntesis de colágeno, agentes estimuladores de la síntesis de elastina, agentes estimuladores de la síntesis de laminina, agentes inhibidores de la degradación de colágeno, agentes inhibidores de la degradación de elastina, agentes estimuladores de la proliferación de fibroblastos, agentes estimuladores de la proliferación de queratinocitos, agentes estimuladores de la diferenciación de queratinocitos, agentes estimuladores de la síntesis de lípidos y componentes del estrato córneo (ceramidas, ácidos grasos, etc.), agentes dermorelajantes, agentes estimuladores de la síntesis de glicosaminoglicanos, agentes reafirmantes, agentes antiestrías, agentes calmantes, agentes antiinflamatorios, agentes que actúen sobre la circulación capilar y/o la microcirculación, agentes que actúen sobre el metabolismo de las células, agentes estimuladores y/o inhibidores de la síntesis de melanina, agentes destinados a mejorar la unión dermis-epidermis, conservantes, perfumes, agentes quelantes, extractos vegetales, aceites esenciales, extractos marinos, agentes provenientes de la biofermentación, sales minerales, extractos celulares y filtros solares (agentes fotoprotectores de naturaleza orgánica o mineral activos contra los rayos ultravioleta A y B) entre otros, siempre que sean física y químicamente compatibles con el resto de componentes de la composición y en especial con los péptidos de fórmula general (I) contenidos en la composición de la presente invención. La naturaleza de dichos ingredientes adicionales puede ser sintética o de origen natural, como por ejemplo extractos vegetales.

Un aspecto adicional de la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica que contiene una cantidad cosméticamente o dermofarmacéuticamente eficaz de al menos un péptido según la fórmula general (I), y además una cantidad cosméticamente o dermofarmacéuticamente eficaz de al menos un extracto con actividad antiarrugas y/o antienvejecimiento como por ejemplo y sin sentido limitativo los extractos de Vitis vinifera, Rosa canina, Curcuma longa, Iris pallida, Theobroma cacao, Ginkgo biloba, o Dunaliella salina entre otros o bien de además al menos un compuesto sintético con actividad antiarrugas y/o antienvejecimiento como por ejemplo y sin sentido limitativo Matrixyl® comercializado por Sederma, Vialox® comercializado por Pentapharm, Myoxinol^{TM} comercializado por Cognis, Algisum C® o Hydroxyprolisilane CN®, comercializados por Exsymol, Argireline® comercializado por Lipotec, Kollaren® comercializado por Institut Europeen de Biologie Cellulaire, antagonistas del canal de Ca^{2+} como la alverina, las sales de manganeso o de magnesio, ciertas aminas secundarias o terciarias, retinol y sus derivados, idebenona y sus derivados, Coenzima Q10 y sus derivados, ácido boswélico y sus derivados o agonistas de canales de cloruro entre otros.

Composición cosmética o dermofarmacéutica preferida es aquella que contiene al menos un péptido según la fórmula general (I), y al menos un péptido derivado de la proteína SNAP-25. En el contexto de la presente invención, el término "péptido derivado de la proteína SNAP-25" se refiere a cualquier secuencia de 3 a 30 aminoácidos o fragmento de secuencia de aminoácidos de la proteína SNAP-25, definida por la SEQ ID No.1, o cualquier secuencia de 3 a 30 aminoácidos que difiera de la SEQ ID No.1 por mutación, inserción, deleción o sustitución de al menos un aminoácido, o por degeneración del código genético, siempre y cuando la secuencia obtenida corresponda a un péptido que tenga la actividad de SNAP-25. Dentro de los péptidos derivados de la secuencia de aminoácidos de SNAP-25, las secuencias preferidas son aquellas que se derivan de la región N-terminal de la proteína SNAP-25, definida por la SEQ ID No.2, más preferentemente de la región comprendida entre los residuos 10 a 22 de la proteína SNAP-25, definida por la SEQ ID No.3, más concretamente de la región comprendida entre los residuos 12 a 19 de la proteína SNAP-25, definida por la SEQ ID No.4 y específicamente por la región comprendida entre los residuos 12 a 17 de la proteína SNAP-25, definida por la SEQ ID No.5.

Los péptidos de fórmula general (I) se utilizan en la composición cosmética o dermofarmacéutica de la presente invención a unas concentraciones cosméticamente o dermofarmacéuticamente efectivas para conseguir el efecto deseado; de forma preferida entre el 0.000001% (en peso) y el 20% (en peso); preferentemente entre el 0.00001% (en peso) y el 10% (en peso) y más específicamente entre el 0.0001% (en peso) y el 5% (en peso).

Por tanto, un aspecto adicional de esta invención se refiere al uso de al menos un péptido de fórmula general (I) en la elaboración de una composición cosmética o dermofarmacéutica para su aplicación en la piel, preferentemente la piel del rostro y más concretamente para reducir y/o eliminar las arrugas faciales, preferentemente las arrugas de expresión.

Otro aspecto de la presente invención se refiere a un método cosmético o dermofarmacéutico para reducir y/o eliminar las arrugas del rostro que comprende la aplicación en la piel del rostro de una composición cosmética o dermofarmacéutica que contiene al menos un péptido de fórmula general (I) o sus sales cosméticamente o dermofarmacéuticamente aceptables.

Método cosmético o dermofarmacéutico preferido es aquel en que la aplicación se realiza en aquellas áreas de la cara o la frente marcadas con arrugas de expresión, preferentemente sobre las arrugas alrededor de la boca y/o los ojos, y/o sobre las arrugas de la frente y/o sobre las arrugas del espacio entre las cejas.

Ejemplos

Los siguientes ejemplos específicos que se proporcionan aquí sirven para ilustrar la naturaleza de la presente invención. Estos ejemplos se incluyen solamente con fines ilustrativos y no han de ser interpretados como limitaciones a la invención que aquí se reivindica.

Metodología General Síntesis Química

Todos los procesos sintéticos se llevan a cabo en jeringas de polipropileno equipadas con discos de polietileno poroso. Todos los reactivos y disolventes son de calidad para síntesis y se usan sin ningún tratamiento adicional. Los disolventes y los reactivos solubles se eliminan por succión. La eliminación del grupo Fmoc se lleva a cabo con piperidina-DMF (2:8, v/v) (1 x I min, 1 x 5 min; 5 mL/g resina) [Lloyd-Williams, P., Albericio, F. and Giralt, E. (1997) Chemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins. CRC, Boca Ratón (FL, USA)]. Los lavados entre las etapas de desprotección, acoplamiento, y, otra vez, desprotección se han llevado a cabo con DMF (3 x 1 min) usando cada vez 10 mL disolvente/g resina. Las reacciones de acoplamiento se han realizado con 3 mL disolvente/g resina. El control de los acoplamientos se realiza mediante el ensayo de la ninhidrina [Káiser, E., Colescott R.L., Bossinger C.D. and Cook P.I. (1970) Color test for detection of free terminal amino groups in the solid-phase synthesis of peptides Anal. Biochem. 34, 595-598]. Todas las transformaciones sintéticas y lavados se han llevado a cabo a 25ºC.

El análisis cromatográfico por HPLC se lleva a cabo en un equipo Shimadzu (Kyoto, Japón) empleando una columna de fase reversa termoestatizada a 30ºC (250 x 4.0 mm, Kromasil C_{8}, 5 \mum, Akzo Nobel, Suecia). La elución se realiza mediante un gradiente de acetonitrilo (+0.07% TFA) en agua (+0.1% TFA) a un flujo de 1 mL/min y la detección se realiza a 220 nm.

Abreviaturas

Las abreviaturas empleadas para los aminoácidos siguen las reglas de la Comisión de Nomenclatura Bioquímica de la IUPAC-IUB especificadas en Eur. J. Biochem. (1984) 138, 9-37 y en J. Biol. Chem. (1989) 264, 633-673.

BoNT A, toxina botulinica serotipo A; DCM, diclorometano; DIEA, N,N-diisopropiletilamina; DIPCDI, N,N-diisopropilcarbodiimida; DMEM, Dulbecco's Modified Eagle's Medium; DMF, N,N-dimetilformamida; ES-MS, espectrometria de masas por electroespray; Fmoc, fluorenilmetoxicarbonilo; HEPES, ácido 4-(2-hidroxietil)piperazin-1-etanosulfonico; HOBt, 1-hidroxibenzotriazol; HPLC, cromatografía líquida de alta resolución; MeCN, acetonitrilo; MeOH, metanol; NGF, factor de crecimiento neuronal; Palm, palmitoil; RNA, ácido ribonucleico; tBu, terc-butilo; TFA, ácido trifluoroacético; THF, tetrahidrofurano.

Ejemplo 1

Obtención de H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-OH

Se incorporan 3.15 g de Fmoc-L-Leu-OH (8.9 mmol, 1 equiv) disueltos en 55 mL de DCM a los que se han añadido 1.3 mL de DIEA (2.9 mmol, 0.33 equiv) sobre la resina 2-clorotritilo (5.5 g, 8.8 mmol) seca. Se deja en agitación durante 5 min, pasados los cuales se añaden 2.5 mL de DIEA (5.9 mmol, 0.67 equiv). Se deja reaccionar durante 40 min. Se bloquean los grupos cloruro remanentes por tratamiento con 4.4 mL de MeOH.

Se desprotege el grupo Fmoc amino terminal como se describe en los métodos generales y se incorporan sobre la peptidil-resina 8.52 g de Fmoc-L-Phe-OH (22 mmol, 2.5 equiv) en presencia de DIPCDI (3.39 mL, 22 mmol, 2.5 equiv) y HOBt {3.37 g, 22 mmol, 2.5 equiv) utilizando DMF como disolvente durante 1h. La resina se lava posteriormente como se describe en los métodos generales y se repite el tratamiento de desprotección del grupo Fmoc para incorporar el siguiente aminoácido. Siguiendo los protocolos descritos se acoplan secuencialmente 2 veces 6.54 g de Fmoc Gly-OH (22 mmol, 2.5 equiv) y 10.11 g de Fmoc-Tyr(tBu)-OH (22 mmol, 2.5 equiv) en presencia en cada acoplamiento de 3.37 g de HOBt (22 mmol, 2.5 equiv) y 3.39 mL de DIPCDI (22 mmol, 2.5 equiv).

Se desprotege el grupo Fmoc N-terminal como se describe en los métodos generales, se lava la peptidil-resina con DMF (5 x 1 min), DCM (4 x 1 min), éter dietílico (4 x 1 min) y se seca al vacío.

12.36 g de la peptidil-resina seca se tratan con 87 mL de TFA-^{i}Pr_{3}Si-H_{2}O (90:5:5) durante 2h a temperatura ambiente. Se recogen los filtrados sobre éter dietílico frío (700 mL), se filtra a través de placa porosa y se lava el precipitado con éter (500 mL) 5 veces. El precipitado final se seca al vacío.

El análisis realizado por HPLC en un gradiente del 20 al 50% de MeCN (+0.07% TFA) en H_{2}O (+0.1% TFA) en 30 min indicó un tiempo de retención de 15.68 minutos y una pureza superior al 98%. Su peso molecular se determinó por ES-MS (M+H)^{+}_{teórico} 556.28, (M+H)^{+}_{exp} 556.3].

Ejemplo 2

Síntesis Palm-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Met-NH_{2}

Se tratan 0.685 mg de la resina Fmoc-AM-MBHA de funcionalización 0.73 mmol/g (0.5 mmol) con piperidina–DMF según el protocolo general descrito con el objetivo de eliminar el grupo Fmoc. Sobre la resina desprotegida se incorporan 0.93 g de Fmoc-L-Met-OH (2.5 mmol, 5 equiv) en presencia de DIPCDI (385 \muL, 2.5 mmol, 5 equiv) y HOBt (385 mg, 2.5 mmol, 5 equiv) utilizando DMF como disolvente durante 1 h.

La resina se lava posteriormente como se describe en los métodos generales y se repite el tratamiento de desprotección del grupo Fmoc para incorporar el siguiente aminoácido. Siguiendo los protocolos descritos se acoplan secuencialmente 0.97 g de Fmoc-L-Phe-OH (2.5 mmol, 5 equiv), 0.74 g de Fmoc-Gly-OH {2.5 mmol, 5 equiv), 0.78 g de Fmoc-D-Ala-OH (2.5 mmol, 5 equiv) y 1.15 g de Fmoc-Tyr(tBu)-OH (2.5 mmol, 5 equiv) en presencia en cada acoplamiento de 385 mg de H08t (2.5 mmol, 5 equiv) y 385 \muL de DIPCDI (2.5 mmol, 5 equiv).

Se desprotege el grupo Fmoc N-terminal como se describe en los métodos generales, y se incorporan 1.28 g de ácido palmitico (5 mmol, 10 equiv) predisuelto en DMF (1.0 mL), en presencia de 770 mg de HOBt (5 mmol, 1.0 equiv) y 770 \muL de DIPCDI {5 mmol, 10 equiv). Se deja reaccionar durante 15 horas, pasadas las cuales la resina se lava con THF (5 x 1 min), DCM (5 x 1 min), DMF (5 x 1 min), MeOH (5 x 1 min), DMF (5 x 1 min), THF (5 x 1 min), DMF (5 x 1 min), DCM (4 x 1 min), éter (3 x 1 min), y se seca al vacío.

1.00 g de la peptidil-resina seca se tratan con 15 mL de TFA-^{i}Pr_{3}Si-H_{2}O (90:5:5) durante 2h a temperatura ambiente. Se recogen los filtrados sobre éter dietílico frío (100 mL), se centrifugan 5 min a 4000 rpm y se decanta la solución etérea. Se repiten los lavados con éter 5 veces. El precipitado final se seca al vacío.

El peso molecular del producto mayoritario se determinó por ES-MS [(M+H)^{+}_{teórico} 826.11, (M+H)^{+}_{exp} 826.3).

Ejemplo 3

Ensayo de la actividad de H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-OH sobre la excitabilidad neuronal

La actividad del péptido derivado de las encefalinas definido por la SEQ ID No.7 (Tyr- D-Ala-Gly-Phe-Leu) sobre la excitabilidad de las neuronas se estudió en cultivos primarios de ganglios de la raíz dorsal de rata. Esta neuronas se extrajeron siguiendo métodos ampliamente conocidos [Nicol, G.D., Lopshire, J.C. and Pafford, C.M. (1997) Tumor necrosis factor enhances the capsaicin sensitivity of rat sensory neurons. J. Neurosci. 17, 975-982]. La neuronas se cultivaron en un medio de DMEM suplementado con 10% suero bovino, 5% suero de caballo y 50 ng/mL NGF durante 2 días y la actividad eléctrica se siguió mediante la técnica del pinzamiento de membrana (patch clamp) con un equipo de electrofisiología convencional en la configuración de pinzamiento de corriente (current-clamp) [Hille, B. (2001) Ion channels of excitable membranes. Third Ed. Sinauer Associates, Inc]. Se utilizaron dos protocolos de estimulación de las neuronas para determinar el efecto inhibitorio del péptido derivado de las encefalinas definido por la SEQ ID No.7.

En primer lugar, las neuronas se estimularon mediante un estímulo químico como es la exposición a una solución tamponada a pH 6.0. En estas condiciones se activan canales dependientes de ácido que despolarizan la membrana neuronal provocando el disparo de potenciales de acción (Figura 1). La incubación de los cultivos neuronales con 1 mM del péptido derivado de las encefalinas definido por la SEQ ID No.7 induce la inhibición de los potenciales de acción evocados por exposición a un medioextracelular ácido. La inhibición de la excitabilidad neuronal por provocada por el péptido derivado de las encefalinas definido por la SEQ ID No.7 es reversible como demuestra la recuperación de dicha excitabilidad tras la eliminación del péptido del medio extracelular. Por tanto, el péptido derivado de las encefalinas definido por la SEQ ID No.7 disminuye la excitabilidad neuronal provocada por un estímulo excitatorio de naturaleza química.

En segundo lugar, se evaluó el efecto del péptido derivado de las encefalinas definido por la SEQ ID No.7 sobre actividad neuronal evocada eléctricamente. Para ello, las neuronas se excitaron con un estímulo eléctrico despolarizante de 40 mV desde su potencial de reposo. Como resultado, se dispararon potenciales de acción repetitivos a lo largo de tiempo de estimulación eléctrica (Figura 2). La exposición de las neuronas a 1 mM del péptido derivado de las encefalinas definido por la SEQ ID No.7 provocó una disminución en la frecuencia y amplitud de los potenciales de acción, indicando una inhibición de los mismos. Esta inhibición fue parcialmente reversible como indica la recuperación en parte de los potenciales de acción. Por tanto, el péptido derivado de las encefalinas definido por la SEQ ID No.7 inhibe la actividad nerviosa evocada eléctricamente de forma reversible.

Ejemplo 4

Ensayo de la actividad de los péptidos derivados de las encefalinas definidos por las SEQ ID No.6 y SEQ ID No.7 sobre canales de calcio

El canal de calcio del tipo T isoforma \alpha1H se expresó recombinantemente en ovocitos de Xenopus laevis mediante la inyección del RNA codificante del gen. La actividad del canal iónico se monitorizó mediante la técnica del pinzamiento de voltaje con dos microelectrodos (voltaje-clamp) utilizando un amplificador TEC de NPI Electronics (Alemania). A las 72h, los ovocitos se transfierieron a la cámara de registro electrofisiológico, y se perfundieron continuamente con tampón de Ringer con alto Ba^{2} (80mM NaCl, 20mM BaCl_{2}, 3mM KCI, 10mM HEPES pH 7.4). El potencial de membrana de los ovocitos se pintó con microlectrodos a un valor de -80 mV. Los ovocitos fueron estimulados eléctricamente mediante pulsos de voltaje de 200 ms desde el potencial de membrana de -80 mV a +80 mV en saltos de 1.0 mV. Se registraron la corrientes eléctricas evocadas en el ovocito, y se corrigieron de las corrientes de fuga mediante un protocolo de pulsos hiperpolarizantes a -100 mV de magnitud la cuarta parte de los pulsos despolarizantes. Las estimulaciones de voltaje y la adquisición de los datos se realizó con el programa PULSE/PULSEFIT de HEKA ELEKTRONIK GmbH (Alemania). Las corrientes del canal de calcio se monitorizaron primero en ausencia de los péptidos. Seguidamente, los ovocitos pinzados se expusieron a concentraciones 1 mM de los péptidos SEQ ID No.6 y SEQ ID No.7 y se registraron las corrientes de Ca^{2+} en presencia de ellos. El porcentaje de bloqueo se calculó como la relación de la corriente activada a +80 mV en presencia del péptido derivado de la secuencia de las encefalinas con respecto a la activada en su ausencia.

Como se observa en la Figura 3, ninguna de las dos secuencias bloquearon directamente los canales de Ca^{2+} activados por cambios de voltaje. En este sentido, puede concluirse que la inhibición de la actividad nerviosa por parte de los péptidos derivados de las encefalinas no se debió al bloqueo directo de los canales de calcio.

Ejemplo 5

Ensayo de la actividad de los péptidos derivados de las encefalinas definidos por las SEQ ID No.6 y SEQ ID No.7 sobre la exocitosis neuronal de [^{3}H]-L-Glutamato

Para determinar si los péptidos derivados de las encefalinas inhiben la exocitosis neuronal de neurotransmisores se siguió su actividad sobre la liberación del neurotransmisor L-glutamato de cultivos primarios de neuronas de hipocampo de rata. La exocitosis de este neurotransmisor en cultivos neuronales puede conseguirse mediante despolarización eléctrica de las células. Los cultivos primarios de hipocampo embrionario de rata se preparan mediante métodos convenionales [Blanes-Mira, C., Merino, J.M., Valera, E., Fernández-Ballester, G., Gutiérrez, L.M., Viniegra, S., Pérez-Payá, E. and Ferrer-Montiel, A. Small peptides patterned after the N-terminus domain of SNAP25 inhibit SNARE complex assembly and regulated exocytosis. J. Neurochem. 88, 124-135] y se mantienen en cultivo durante 14 días en incubador a 37ºC y 5% CO_{2}. Los cultivos se incuban con [^{3}H]-L-glutamina para cargarlos de [^{3}H]-L-glutamato durante 3 h a 37ºC. Posteriormente, se lava el exceso de [^{3}H]-L-glutamina, y se incuban con 1 mM de los péptidos a estudiar durante 1 h a 37ºC. La liberación de [^{3}H]- L-glutamato se realiza mediante despolarización con 75 mM KCl y 2 mM CaCl_{2} tamponado en tampón fisiológico durante 10 min a 37ºC. Se recoge el medio de cultivo y se cuantifica la cantidad de [^{3}H]-L-glutamato en un contador de radioactividad beta. Los resultados se normalizan con respecto a la liberación de [^{3}H]-L-glutamato en ausencia del péptido y se corrige de la liberación basal en ausencia de calcio. Como muestra la figura 4, en presencia del péptido derivado de las encefalinas definido por la SEQ ID No.7 la exocitosis de [^{3}H]-L-glutamato se inhibió un 12%, indicando que el compuesto es un inhibidor de la exocitosis neuronal. La incubación con el péptido derivado de las encefalinas definido por la SEQ ID No.6 produjo una inhibición del 4%.

Para determinar si la actividad de los péptidos derivados de encefalinas es aditiva y/o sinérgica con el péptido inhibidor de la exocitosis Argireline®, definido por la SEQ ID No.5, se comparó la potencia de ambos péptidos separada y conjuntamente inhibiendo la liberación de [^{3}H]-L-glutamato evocada eléctricamente en presencia de Ca^{2+}. Como se ilustra en la Figura 4, la exposición de las neuronas a 1 mM de Argireline® inhibió la exocitosis de [^{3}H]-L-glutamato en un 18%. La co-incubación de los cultivos con 1 mM Argireline® y 1 mM del péptido derivado de las encefalinas definido por la SEQ ID No.7 inhibió la exocitosis de [^{3}H]-L-glutamato en un 37%, y la co-administración de 1 mM Argireline® y 1 mM del péptido derivado de las encefalinas definido por la SEQ ID No.6 bloqueó la liberación de [^{3}H]-L-glutamato en un 22% (Figura 4). Por tanto, existe un efecto aditivo/sinérgico inhibiendo la exocitosis regulada de [^{3}H]-L-glutamato de la Argireline® y los péptidos derivados de encefalinas definidos por las SEQ ID No.6 y SEQ ID No.7.

Ejemplo 6

Preparación de una composición cosmética conteniendo H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-OH

La siguiente formulación fue preparada según se describe en la presente invención:

En un reactor suficientemente grande se pesan los componentes de la Fase A y se calienta la mezcla a 80ºC para fundir las ceras. En un recipiente adecuado para todo el contenido se pesan los componentes de la Fase B y se calientan a 70ºC. Se adiciona la Fase A sobre la Fase B lentamente y bajo intensa agitación, y posteriormente se adiciona la Fase C a la mezcla anterior bajo agitación. Acabada la adición, se deja enfriar con agitación suave y cuando la mezcla se encuentra a temperatura ambiente se añade una solución acuosa de H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-OH y la lecitina, se homogeneiza y corrige el pH con trietanolamina si es necesario.

La crema que se obtiene tiene un pH entre 6 y 7 y una viscosidad de 10.000-15.000 cps (6/50).

Ingrediente (Nomenclatura INCI)	% en peso
Fase A
\hskip0.5cm MINERAL OIL	8.0
\hskip0.5cm STEARIC ACID	2.4
\hskip0.5cm CETEARYL ALCOHOL	1.6
\hskip0.5cm BEESWAX	0.8

Fase B
\hskip0.5cm GLYCERIN	2.4
\hskip0.5cm AQUA (WATER)	63.4

Fase C
\hskip0.5cm CARBOMER	0.3
\hskip0.5cm TRIETHANOLAMINE	0.9

Fase D
\hskip0.5cm AQUA (WATER)	15.0
\hskip0.5cm H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-OH (0.05%)	5.0
\hskip0.5cm LECITHIN	0.4

Ejemplo 7

Un estudio clínico realizado en 20 sujetos con arrugas en el contorno de los ojos ("patas de gallo") empleando la composición cosmética descrita en el Ejemplo 6 demostró que la composición es capaz de reducir la profundidad de las arrugas del contorno de los ojos. Se instruyó a los sujetos para que aplicasen la composición cosmética en la zona del contorno del ojo con un masaje suave dos veces al día durante cuatro semanas. Se realizaron medidas objetivas del macrorelieve de improntas de piel humana en silicona mediante análisis topográfico empleando un perfilómetro confocal a tiempo 0 y a los 28 días del inicio del tratamiento.

La cuantificación de los resultados (la desviación media del perfil evaluado en superficie) mostró una disminución de la profundidad de las arrugas del 11.6%.

Según un primer aspecto la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica que comprende una cantidad cosmética o dermofarmacéuticamente eficaz de al menos un péptido de fórmula general:

\vskip1.000000\baselineskip

3

o de sus sales cosméticamente o dermofarmacéuticamente aceptables, con actividad reductora y/o eliminadora de arrugas faciales, en donde:

X: e Y se seleccionan del grupo formado por los aminoácidos naturales en su forma L- o D- o aminoácidos no codificados;

R_{1}: se selecciona del grupo formado por H o grupo alquilo, arilo, aralquilo o acilo y;

R_{2}: se selecciona del grupo formado por amino, hidroxilo o tiol, todos ellos sustituidos o no con grupos alifáticos o cíclicos.,

y al menos un excipiente o adyuvante cosmética o dermofarmacéuticamente aceptable.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que los aminoácidos no codificados se seleccionan del grupo formado por citrulina, ornitina, sarcosina, fenilglicina, \beta-alanina o norleucina.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que R_{1} es H o acilo de C_{2} a C_{24}, lineal, ramificado o cíclico, saturado o insaturado.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que R_{2} es amino o hidroxilo, sustituidos o no con grupos alifáticos de C_{1} a C_{24} lineales, ramificados o cíclicos, saturados o insaturados.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que X es glicil, D-alanil o D-seril.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que Y es L-metionil o L-leucil.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que X es glicil, R_{1} es H, acetilo o palmitoílo y R_{2} es amino o hidroxilo, sustituidos o no con grupos metilo o etilo o dodecilo o hexadecilo e Y es L-leucil.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que X es D-alanil, R_{1} es H, acetilo o palmitoílo y R_{2} es amino o hidroxilo, sustituidos o no con grupos metilo o etilo o dodecilo o hexadecilo e Y es L-leucil.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que el péptido de fórmula general (I) se encuentra a una concentración entre el 0.000001% y el 20% en pe-
so.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que el péptido de fórmula general (I) de forma preferida se encuentra a una concentración entre el 0.0001% y el 5% en peso.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica que comprende una cantidad adicional cosmética o dermofarmacéuticamente eficaz de un agente activo seleccionado del grupo formado por un agente exfoliante, un agente hidratante, un agente despigmentante o blanqueante, un agente propigmentante, un agente antiarrugas, un agente capaz de reducir o eliminar las bolsas bajo los ojos, un agente antioxidante, un agente antiglicación, un inhibidor de la NO-sintasa, un agente anti-envejecimiento, un agente estimulador de la síntesis de moléculas dérmicas o epidérmicas y/o para prevenir su degradación, un agente estimulador de la proliferación de fibroblastos y/o queratinocitos o para estimular la diferenciación de queratinocitos, un agente dermorelajante, un agente reafirmante, un agente anti-contaminación atmosférica y/o anti-radicales libres, un agente que actue sobre la circulación capilar y/o la microcirculación, un agente calmante, un agente antiinflamatorio, un agente que actúe sobre el metabolismo de las células, un agente fotoprotector, de naturaleza orgánica o mineral, activo contra los rayos ultravioleta A y/o B, y mezclas de ellos. De forma preferente el agente activo es de origen sintético o un extracto vegetal.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que el agente dermorelajante es un péptido que contiene al menos una secuencia de aminoácidos derivada de la secuencia de aminoácidos de la proteína SNAP-25 definida por la SEQ ID No.1.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que el péptido derivado de la secuencia de aminoácidos de la proteína SNAP-25 tiene una secuencia de aminoácidos contenida en la secuencia SEQ ID No.2.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que el péptido derivado de la secuencia de aminoácidos de la proteína SNAP-25 tiene una secuencia de aminoácidos contenida en la secuencia SEQ ID No.3.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que el péptido derivado de la secuencia de aminoácidos de la proteína SNAP-25 tiene una secuencia de aminoácidos contenida en la secuencia SEQ ID No.4.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que el péptido derivado de la secuencia de aminoácidos de la proteína SNAP-25 es la secuencia SEQ ID No.5.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que el péptido derivado de la secuencia de aminoácidos de la proteína SNAP-25 se encuentra a una concentración entre el 0.000001% y el 20% en peso.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que el péptido derivado de la secuencia de aminoácidos de la proteína SNAP-25 se encuentra a una concentración entre el 0.0001% y el 5% en peso de forma preferente.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que el péptido de fórmula general (I) está incorporado a un vehículo cosméticamente o dermofarmacéuticamente aceptable seleccionado del grupo formado por liposomas, milicápsulas, microcápsulas, nanocápsulas, esponjas, miliesferas, microesferas, nanoesferas, milipartículas, lipoesferas, micropartículas y nanopartículas.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que el péptido de fórmula general (I) se presenta en una formulación seleccionada del grupo formado por emulsiones de aceite y/o silicona en agua, emulsiones de agua en aceite y/o silicona, leches, lociones, geles, pomadas, bálsamos, espumas, aceites corporales, jabones, barras, lápices, vaporizadores, cremas, linimentos, ungüentos, sueros y mousses.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que el péptido de fórmula general (I) es incorporado en soportes sólidos seleccionados del grupo formado por toallitas, hidrogeles, parches y mascarillas faciales.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica en la que el péptido de fórmula general (I) es incorporado en productos de línea de maquillaje seleccionados del grupo formado por correctores de ojeras, fondos de maquillaje, lociones, leches desmaquillantes, sombras de ojos y barras de labios.

Según un aspecto importante la presente invención se refiere al uso del péptido de fórmula general (I) o sus sales cosméticamente o dermofarmacéuticamente aceptables en la preparación de una composición cosmética o dermofarmacéutica que reduce y/o elimina las arrugas faciales.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere al uso del péptido de fórmula general (I) o sus sales cosméticamente o dermofarmacéuticamente aceptables en la preparación de una composición cosmética o dermofarmacéutica que reduce y/o elimina las arrugas faciales de expresión.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere al uso del péptido de fórmula general (I) o sus sales cosméticamente o dermofarmacéuticamente aceptables en la preparación de una composición cosmética o dermofarmacéutica que reduce y/o elimina las arrugas faciales de expresión mediante aplicación tópica en la frente, en el espacio entre las cejas y/o en las arrugas y lineas finas alrededor de la boca y/o alrededor de los ojos.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere al uso del péptido de fórmula general (I) o sus sales cosméticamente o dermofarmacéuticamente aceptables en la preparación de una composición cosmética o dermofarmacéutica que reduce y/o elimina las arrugas faciales de expresión mediante aplicación por iontoforesis en la frente, en el espacio entre las cejas y/o en las arrugas y lineas finas alrededor de la boca y/o alrededor de los ojos.

Según otro aspecto importante la presente invención se refiere al uso del péptidode fórmula general (I) o sus sales cosméticamente o dermofarmacéuticamente aceptables en la preparación de una composición cosmética o dermofarmacéutica que reduce y/o elimina las arrugas faciales de expresión mediante aplicación por inyección subcutánea o intradérmica en la frente, en el espacio entre las cejas y/o en las arrugas y lineas finas alrededor de la boca y/o alrededor de los ojos.

Claims

1. Composición cosmética o dermofarmacéutica caracterizada porque comprende una cantidad cosmética o dermofarmacéuticamente eficaz de al menos un péptido de fórmula general (I):

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4

R_{2}: se selecciona del grupo formado por amino, hidroxilo o tiol, todos ellos sustituidos o no con grupos alifáticos o cíclicos, y al menos un excipiente o adyuvante cosmética o dermofarmacéuticamente aceptable.

2. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según la reivindicación 1, caracterizada porque R_{1} es H o acilo de C_{2} a C_{24}, lineal, ramificado o cíclico, saturado o insaturado.

3. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según la reivindicación 1, caracterizada porque R_{2} es amino o hidroxilo, sustituidos o no con grupos alifáticos de C_{1} a C_{24} lineales, ramificados o cíclicos, saturados o insaturados.

4. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según la reivindicación 1, caracterizada porque X es glicil, D-alanil o D-seril.

5. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según la reivindicación 1, caracterizada porque Y es L-metionil o L-leucil.

6. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizada porque X es glicil, R_{1} es H, acetilo o palmitoílo y R_{2} es amino o hidroxilo, sustituidos o no con grupos metilo o etilo o dodecilo o hexadecilo.

7. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según la reivindicación 6, caracterizada porque Y es L-leucil.

8. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizada porque X es D-alanil, R_{1}, es H, acetilo o palmitoílo y R_{2} es amino o hidroxilo, sustituidos o no con grupos metilo o etilo o dodecilo o hexadecilo.

9. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según la reivindicación 8, caracterizada porque Y es L-leucil.

10. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, caracterizada porque el péptido de fórmula general (I) se encuentra a una concentración entre el 0.000001% y el 20% en peso.

11. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según la reivindicación 10, caracterizada porque el péptido de fórmula general (I) se encuentra a una concentración entre el 0.0001% y el 5% en peso.

12. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, caracterizada porque comprende una cantidad adicional cosmética o dermofarmacéuticamente eficaz de un agente activo seleccionado del grupo formado por un agente exfoliante, un agente hidratante, un agente despigmentante o blanqueante, un agente propigmentante, un agente anti-estrías, un agente antiarrugas, un agente antioxidante, un agente antiglicación, un inhibidor de la NO-sintasa, un agente anti-envejecimiento, un agente capaz de reducir o eliminar las bolsas bajo los ojos, un agente estimulador de la síntesis de moléculas dérmicas o epidérmicas y/o para prevenir su degradación, un agente estimulador de la proliferación de fibroblastos y/o queratinocitos o para estimular la diferenciación de queratinocitos, un agente dermorelajante, un agente reafirmante, un agente anti-contaminación atmosférica y/o anti-radicales libres, un agente que actúe sobre la circulación capilar y/o la microcirculación, un agente calmante, un agente antiinflamatorio, un agente que actúe sobre el metabolismo de las células, un agente fotoprotector, de naturaleza orgánica o mineral, activo contra los rayos ultravioleta A y/o B, o mezclas de ellos.

13. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según la reivindicación 12, caracterizada porque el agente activo es de origen sintético o un extracto vegetal.

14. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según la reivindicación 12, caracterizada porque el agente dermorelajante es un péptido que contiene al menos una secuencia de aminoácidos derivada de la secuencia de aminoácidos de la proteína SNAP-25 definida por la SEQ ID No.1.

15. Composición cosmética o dermofarmacéutica según la reivindicación 14 caracterizada porque el péptido derivado de la secuencia de aminoácidos de la proteína SNAP-25 tiene una secuencia de aminoácidos contenida en la secuencia SEQ ID No.2.

16. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 14 y 15, caracterizada porque el péptido derivado de la secuencia de aminoácidos de la proteína SNAP-25 tiene una secuencia de aminoácidos contenida en la secuencia SEQ ID No.3.

17. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 14 a 16, caracterizada porque el péptido derivado de la secuencia de aminoácidos de la proteína SNAP-25 tiene una secuencia de aminoácidos contenida en la secuencia SEQ ID No.4.

18. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 14 a 17, caracterizada porque el péptido derivado de la secuencia de aminoácidos de la proteína SNAP-25 es la secuencia SEQ ID No.5.

19. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 14 a 18, caracterizada porque el péptido derivado de la secuencia de aminoácidos de la proteína SNAP-25 se encuentra a una concentración entre el 0.000001% y el 20% en peso.

20. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según la reivindicación 19, caracterizada porque el péptido derivado de la secuencia de aminoácidos de laproteína SNAP-25 se encuentra a una concentración entre el 0.0001% y el 5% en peso.

21. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20, caracterizada porque contiene el péptido de fórmula general (I) incorporado a un vehículo cosméticamente o dermofarmacéuticamente aceptable seleccionado del grupo formado por liposomas, milicápsulas, microcápsulas, nanocápsulas, esponjas, miliesferas, microesferas, nanoesferas, miliparticulas, lipoesferas, micropartículas y nanopartículas.

22. Composición cosmética o dermofarmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, caracterizada porque contiene el péptido de fórmula general (I) presentado en una formulación seleccionada del grupo formado por emulsiones de aceite y/o silicona en agua, emulsiones de agua en aceite y/o silicona, leches, lociones, geles, pomadas, bálsamos, espumas, aceites corporales, jabones, barras, lápices, vaporizadores, cremas, linimentos, ungüentos, sueros y mousses.

23. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, caracterizada porque contiene el péptido de fórmula general (I) incorporado en soportes sólidos seleccionados del grupo formado por toallitas, hidrogeles, parches y mascarillas faciales.

24. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, caracterizada porque contiene el péptido de fórmula general (I) incorporado en productos de línea de maquillaje seleccionados del grupo formado por correctores de ojeras, fondos de maquillaje, lociones, leches desmaquillantes, sombras de ojos y barras de labios.

25. Uso del peptido de fórmula general (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 24 en la preparación de una composición cosmética o dermofarmacéutica que reduce y/o elimina las arrugas faciales.

26. Uso del peptido de fórmula general (I) según la reivindicación 25 en la preparación de una composición cosmética o dermofarmacéutica que reduce y/o elimina las arrugas faciales de expresión.

27. Uso del peptido de fórmula general (I) según reivindicación 26 en la preparación de una composición cosmética o dermofarmacéutica que reduce y/o elimina las arrugas faciales de expresión mediante aplicación en la frente, en el espacio entre las cejas y/o en las arrugas y lineas finas alrededor de la boca y/o alrededor de los ojos.

28. Uso del peptido de fórmula general (I) según reivindicación 26 en la preparación de una composición cosmética o dermofarmacéutica que reduce y/o elimina las arrugas faciales de expresión mediante aplicación por iontoforesis en la frente, en el espacio entre las cejas y/o en las arrugas y lineas finas alrededor de la boca y/o alrededor de los ojos.

29. Uso del peptido de fórmula general (I) según reivindicación 26 en la preparación de una composición cosmética o dermofarmacéutica que reduce y/o elimina las arrugas faciales de expresión mediante aplicación por inyección subcutánea o intradérmica en la frente, en el espacio entre las cejas y/o en las arrugas y lineas finas alrededor de la boca y/o alrededor de los ojos.