ES2256450T3 - Ciclosporina modificada utilizable como profarmaco y su uso. - Google Patents

Ciclosporina modificada utilizable como profarmaco y su uso.

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ES2256450T3 ES02713992T ES02713992T ES2256450T3 ES 2256450 T3 ES2256450 T3 ES 2256450T3 ES 02713992 T ES02713992 T ES 02713992T ES 02713992 T ES02713992 T ES 02713992T ES 2256450 T3 ES2256450 T3 ES 2256450T3
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Abstract

Profármaco que consiste en un undecapéptido cíclico cuya cadena peptídica comprende al menos un resto de aminoácido de la fórmula general (I) siguiente: en la que: - el átomo de carbono Ca constituye uno de los eslabones del anillo undecapeptídico; - los sustituyentes Y representan cada uno un átomo de hidrógeno, o constituyen juntos un enlace; - los sustituyentes R1 y R3 representan, independientemente uno del otro, un átomo de hidrógeno, un grupo aralquilo, un grupo alcarilo, un grupo heteroalquilo, un grupo heterocíclico, un grupo alquil- heterocíclico, un grupo heterocíclico-alquilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado, estando dichos grupos eventualmente sustituidos con al menos uno de los grupos seleccionados de entre -COOH, -CONHR8, -NHC=NH(NH2), -NHC=NR8(NH2), -NH2, -NHR8, -NR82, -N+R83, -OH, -OPO(OR8)2, - OPO(OH)(OR8), -OPO(OH)2, -OSO(OR8)2, -OSO(OH)(OR8), - OSO(OH)2, y las distintas formas salificadas de estos grupos, representando cada uno de los sustituyentes R8, independientemente uno del otro, un grupo alquilo, lineal o ramificado, que tiene de 1 a 6 átomos de carbono; - los sustituyentes R2 y R4 representan, independientemente uno del otro, un átomo de hidrógeno, un grupo alcarilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado; - los sustituyentes R5 y R6 representan, independientemente uno del otro, un átomo de hidrógeno, un grupo aralquilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado, y - el sustituyente R7 representa un grupo aralquilo, un grupo alcarilo, un grupo heteroalquilo, un grupo heterocíclico, un grupo alquil-heterocíclico, un grupo heterocíclico-alquilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado, estando dichos grupos eventualmente sustituidos con al menos uno de los grupos seleccionados de entre -COOH, -CONHR8, - NHC=NH(NH2), -NHC=NR8(NH2), -NH2, -NHR8, -NR82, -N+R83, -OH, -OPO(OR8)2, -OPO(OH)(OR8), -OPO(OH)2, -OSO(OR8)2, - OSO(OH)(OR8), -OSO(OH)2, y las distintas formas salificadas de estos grupos, teniendo cada uno de los sustituyentes R8 la definición anterior.

Description

Ciclosporina modificada utilizable como profármaco y su uso.
La presente invención se refiere a un profármaco que consiste en un undecapéptido cíclico, y a su uso como medicamento, destinado en particular al tratamiento de patologías oculares.
Las ciclosporinas constituyen una clase estructuralmente distinta de los péptidos cíclicos que tienen en común el hecho de que consisten en una cadena de once aminoácidos, siendo algunos atípicos, bien por el hecho de su configuración D, o bien por el hecho de la estructura química compleja de su cadena lateral, o también por el hecho de la alquilación del grupo amino.
Hasta la fecha, se han aislado una treintena de ciclosporinas a partir de una fuente fúngica, y se han obtenido numerosos undecapéptidos cíclicos análogos a estos productos naturales mediante semisíntesis o mediante síntesis total. Entre estos análogos de undecapéptidos cíclicos, se encuentran igualmente peptólidos o depsipéptidos, es decir polipéptidos cíclicos que contienen igualmente en su cadena enlaces éster.
A continuación en esta descripción y al menos que se especifique de otra manera, por "ciclosporina" se entenderá tanto los undecapéptidos cíclicos obtenidos de una fuente natural como sus análogos obtenidos mediante semisíntesis o mediante síntesis total, incluyendo los peptólidos obtenidos de una fuente natural o sus análogos obtenidos mediante semisíntesis o mediante síntesis total.
El primer miembro de esta familia de las ciclosporinas que se ha aislado y que a continuación fue identificado la Ciclosporina A. La cadena peptídica que constituye su ciclo undecapeptídico es la siguiente:
-MeBmt-Abu-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-
siendo su estructura química desarrollada la siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
1 
\vskip1.000000\baselineskip
Entre los aminoácidos atípicos que comprende este undecapéptido cíclico, se observa en particular el que se encuentra en posición 1, a saber, N-metil-(4R)-4-((E)-2-butenil)-4-metil-L-treonina, denominado MeBmt.
Este aminoácido es específico de las ciclosporinas, siendo posible reducir opcionalmente el grupo etilénico. Posee un grupo amina que está metilado. Además, el grupo hidroxilo que lleva es muy relevante en el sentido en el que es el único grupo de todo este undecapéptido cíclico susceptible de producir modificaciones químicas. Además, se puede observar de antemano que se encuentra en un sitio estérico fuertemente impedido, haciendo extremadamente delicado cualquier acercamiento del reactivo.
Estos undecapéptidos cíclicos, ya sean de origen natural u obtenidos mediante síntesis, presentan un espectro amplio de actividades biológicas, entre las cuales las más conocidas son las actividades inmunosupresoras, antiinflamatorias, antiparasitarias, o actividades que permiten combatir o disminuir la resistencia de tumores cancerígenos a otras medicaciones. Se ha encontrado que algunos de estos undecapéptidos cíclicos poseen actividades antivíricas prometedoras, en particular en el tratamiento del SIDA inhibiendo la replicación del virus de la inmunodeficiencia humana de tipo 1 (VIH-1).
\newpage
A este respecto, se ha descrito en la solicitud de patente WO 00/01715 un cierto número de undecapéptidos cíclicos, obtenidos mediante semisíntesis y que tienen una estructura análoga a la de la Ciclosporina A, pero cuya naturaleza de los aminoácidos que se encuentran en posición 4, o en posición 3 y 4, ha sido modificada con relación al aminoácido MeBmt.
Recientes desarrollos farmacológicos han permitido la esperanza de que el efecto inmunomoderador de las ciclosporinas, en particular el efecto de la Ciclosporina A, efecto reversible, no mielotóxico, y para el cual se han enumerado pocos efectos secundarios, se pueda aprovechar en particular en el campo de la oftalmología, para un tratamiento local, en particular de patologías superficiales del ojo y de su entorno.
Entre estas patologías se encuentran, entre otras, las queratoconjuntivitis secas, llamadas igualmente síndrome del ojo seco, el síndrome de Sjögren, las queratoconjuntivitis alérgicas, en particular las resistentes a los corticosteroides, las conjuntivitis que producen moco y sinequia, las queratitis estromales herpéticas, las queratitis límbicas inmunitarias, la queratitis de Thygeson, la prevención del rechazo de transplantes de córnea, y como tratamiento adyuvante de una cirugía filtrante.
Los undecapéptidos cíclicos de la familia de las ciclosporinas poseen un carácter fuertemente hidrófobo, reduciendo por lo tanto su solubilidad en agua. Este carácter está relacionado con la naturaleza de la cadena lateral de la mayoría de sus aminoácidos, pero igualmente con el hecho de que algunos de estos aminoácidos tienen metilado su grupo amino, limitando así el número posible de formación de enlaces de hidrógeno intermolecular entre el undecapéptido cíclico y, por ejemplo, un medio de solubilización acuoso.
Como resultado, la administración por vía intravenosa (i.v.) de estas ciclosporinas requiere el desarrollo de formulaciones galénicas muy complejas, principalmente en forma de emulsiones, a veces de estabilidad precaria y que son difíciles de manipular, y que son fuentes de efectos secundarios adversos.
A título de ejemplo, una de las preparaciones para infusión i.v. de Ciclosporina A, disponible comercialmente con la marca comercial Sandimmun, consiste en una microemulsión que usa, como excipiente, un aceite de ricino polioxietilenado, conocido con el nombre comercial Crémophor. Esta preparación se conserva en forma de un concentrado, y debe ser diluida justo antes de su administración.
Por razón del uso de este aceite de ricino, que se sabe que solubiliza algunos de los componentes de materiales sintéticos, el fabricante recomienda utilizar, durante la manipulación de esta preparación, solamente material hecho de vidrio o, en su defecto, un material sintético conforme a las "normas de Pharmacopea Europea para los recipientes destinados a contener sangre", teniendo que estar todos estos materiales libres de aceite de silicona y de
grasas.
Además, advierte al médico de que este aceite de ricino es capaz de provocar reacciones anafilactoides y, por eso, recomienda que la administración por vía intravenosa se reserve a los casos en los que la administración oral es imposible.
El desarrollo de las aplicaciones prometedoras de las ciclosporinas mediante administración local en oftalmología sigue siendo lento debido también a las dificultades para desarrollar formulaciones galénicas apropiadas, que presentan en particular una buena tolerancia local y que no emborrone la visión debido a la presencia de agentes
viscosos.
Así, a título de ejemplo, Robert et al. han recientemente repasado, en J. Fr. Ophtalmol., 2001, 24(5), 527, todas las dificultades técnicas que hay que resolver debido al carácter lipófilo de las formulaciones galénicas que permiten administrar la Ciclosporina A localmente en oftalmología, y todos los problemas de tolerancia local que conllevan estas formulaciones.
Una de las conclusiones que se puede extraer de este repaso es que, hasta hoy en día, no existe ninguna formulación en forma de un colirio que sea apta para ser administrada localmente para el tratamiento de afecciones del ojo y de su entorno. Esta conclusión se puede ampliar al uso de la ciclosporina para el tratamiento local de afecciones de las mucosas o de afecciones cutáneas.
Por consecuencia, existe todavía una necesidad de poner a disposición del médico ciclosporinas, sea cual sea su origen, natural o sintético, o derivados de estas ciclosporinas que se puedan administrar fácilmente a un paciente, en particular local o intravenosamente, a la vez que se evita el uso de formulaciones galénicas complejas con estabilidad precaria y que son difíciles de manipular, y que son fuentes de efectos secundarios adversos.
Esta necesidad existe aun más si estas ciclosporinas, de origen natural o sintético, se deben de aplicar localmente al ojo o a su entorno.
Una de las posibilidades que se presenta al médico cuando se enfrenta al problema de hacer asimilable, en un medio fisiológico, una molécula farmacológicamente activa hidrófoba es modificarla químicamente a fin de conferirle un carácter hidrófilo.
Con el fin de evitar alterar las propiedades farmacológicas de tal molécula farmacológicamente activa, esta modificación química puede consistir en la preparación de un precursor, si es posible un precursor inactivo, de esta molécula farmacológicamente activa que, una vez administrada y bajo el efecto de las condiciones fisiológicas que existen localmente en el organismo, se modificará química o enzimáticamente de tal manera que la molécula farmacológicamente activa sea liberada, si es posible, bien en el sitio en el que se debe de producir su acción farmacológica, o bien en la sangre, que transportará esta molécula farmacológicamente activa así liberada a su sitio de acción, correspondiendo esto al concepto de "profármaco". A continuación en esta descripción, el precursor en cuestión de dicha molécula farmacológicamente activa se denomina "profármaco".
Ya se conoce la modificación química de la estructura de la Ciclosporina A para conferir al producto obtenido un carácter hidrófilo.
Así, Rothbard et al. han descrito, en la solicitud de patente WO 01/13957, un método para mejorar la administración de moléculas farmacológicamente activas, y para permitirles atravesar la dermis y las membranas epiteliales, que consiste en injertar en estas moléculas, de manera reversible, una cadena lateral que consiste en fragmentos de una cadena de poliarginina. Entre estas moléculas farmacológicamente activas, se encuentran moléculas con carácter hidrófobo tal como la Ciclosporina A.
Sin embargo, tales conjugados son extremadamente delicados para manipular y conservar debido a que, como se indica en esta misma solicitud citada, la molécula farmacológicamente activa se libera directamente en cuanto que el pH del medio supera 7. Además, cuando se libera esta molécula farmacológicamente activa, los fragmentos de cadena de poliarginina se liberan en el organismo. Estas poliargininas, conocidas por su toxicidad y su poder irritante, provocarían irritaciones de forma que no se puede prever un uso, en el campo oftálmico, de tales conjugados de cliclosporina.
En la solicitud de patente WO 00/67801, Crooks et al. describen la preparación de profármacos de agentes antiinflamatorios tales como el flurbiprofeno a fin de poder administrarlos localmente en contacto del ojo, evitando esta vez, al mismo tiempo, cualquier irritación local. Esto se logró, para un cierto número de medicamentos, introduciendo cadenas oxigenadas o polioxigenadas.
Por otro lado, cuando se deseo someter a la Ciclosporina A a las mismas modificaciones químicas, se han conseguido obtener solamente productos que se describen como estables, dicho de otra manera, que no se rompen para liberar la Ciclosporina A, tanto si está en contacto del suero humano como en un tampón de fosfato a un pH 7,4. En los documentos WO-A-2001 05819 (Kuhnil) y WO-A-2000 08333 (University of Kansas), se describen otros profármacos de ciclosporinas.
En consecuencia, la presente invención tiene por objeto poner a disposición del médico profármacos de undecapéptidos cíclicos de la familia de las ciclosporinas, que, por una parte, se puedan administrar en el medio fisiológico sin tener que realizar formulaciones galénicas elaboradas, y, por otra parte, que se puedan conservar y después manipular y administrar sin tener que preocuparse en particular de las condiciones de pH del entorno.
La presente invención tiene igualmente por objeto poner a disposición del médico profármacos de undecapéptidos cíclicos de la familia de las ciclosporinas que se puedan administrar localmente de manera general, y en particular sobre la superficie ocular o sobre las mucosas, y que, después, puedan liberar en un tiempo de semivida apropiada, el undecapéptido cíclico farmacológicamente activo, sin irritación local.
Para ello, la presente invención se refiere a un profármaco que consiste en un undecapéptido cíclico cuya cadena peptídica comprende al menos un resto de aminoácido de fórmula general (I) siguiente:
2
en la que:
-
el átomo de carbono C^{a} constituye uno de los eslabones del ciclo undecapeptídico;
-
los sustituyentes Y representan cada uno un átomo de hidrógeno, o constituyen juntos un enlace;
-
los sustituyentes R^{1} y R^{3} representan, independientemente uno del otro, un átomo de hidrógeno, un grupo aralquilo, un grupo alcarilo, un grupo heteroalquilo, un grupo heterocíclico, un grupo alquil-heterocíclico, un grupo heterocíclico-alquilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado, estando dichos grupos opcionalmente sustituidos con al menos uno de los grupos seleccionados de entre -COOH, -CONHR^{8}, -NHC=NH(NH_{2}), -NHC=NR^{8}(NH_{2}), -NH_{2}, -NHR^{8}, -NR^{8}_{2}, -N^{+}R^{8}_{3}, -OH, -OPO(OR^{8})_{2}, -OPO(OH)(OR^{8}), -OPO(OH)_{2}, -OSO(OR^{8})_{2}, -OSO(OH)(OR^{8}), -OSO(OH)_{2}, y las distintas formas salificadas de estos grupos, representando cada uno de los sustituyentes R^{8}, independientemente uno del otro, un grupo alquilo, lineal o ramificado, que tiene de 1 a 6 átomos de carbono;
-
los sustituyentes R^{2} y R^{4} representan, independientemente uno del otro, un átomo de hidrógeno, un grupo alcarilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado;
-
los sustituyentes R^{5} y R^{6} representan, independientemente uno del otro, un átomo de hidrógeno, un grupo aralquilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado; y
-
el sustituyente R^{7} representa un grupo aralquilo, un grupo alcarilo, un grupo heteroalquilo, un grupo heterocíclico, un grupo alquil-heterocíclico, un grupo heterocíclico-alquilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado, estando dichos grupos opcionalmente sustituidos con al menos uno de los grupos seleccionados de entre -COOH, -CONHR^{8}, -NHC=NH(NH_{2}), -NHC=NR^{8}(NH_{2}), -NH_{2}, -NHR^{8}, -NR^{8}_{2}, -N^{+}R^{8}_{3}, -OH, -OPO(OR^{8})_{2}, -OPO(OH)(OR^{8}), -OPO(OH)_{2}, -OSO(OR^{8})_{2}, -OSO(OH)(OR^{8}), -OSO(OH)_{2}, y las distintas formas salificadas de estos grupos, teniendo cada uno de los sustituyentes R^{8} la definición anterior.
Cuando los dos sustituyentes Y constituyen juntos un enlace, dicho resto de aminoácido de fórmula general (I) deriva de un resto de la N-metil-(4R)-4-((E)-2-butenil)-4-metil-L-treonina, en el que el grupo hidroxilo de la treonina se ha esterificado de manera apropiada, y la molécula farmacológicamente activa que se liberará cuando el profármaco se rompa en el organismo consistirá en un undecapéptido cíclico cuya cadena peptídica comprende al menos un resto N-metil-(4R)-4-((E)-2-butenil)-4-metil-L-treonina (MeBmt).
Igualmente, cuando los dos sustituyentes Y representan cada uno un átomo de hidrógeno, dicho resto de aminoácido de fórmula general (I) deriva de un resto de la N-metil-(4R)-4-butil-4-metil-L-treonina, en el que el grupo hidroxilo de la treonina se ha esterificado de manera apropiada, y la molécula farmacológicamente activa que se liberará cuando el profármaco se rompa en el organismo consistirá en un undecapéptido cíclico cuya cadena peptídica comprende al menos un resto N-metil-(4R)-4-butil-4-metil-L-treonina (Dh-MeBmt).
Preferentemente, en la fórmula general (I) que define a dicho resto de aminoácido, al menos uno de los sustituyentes R^{1} y R^{3} representa un grupo aralquilo, un grupo alcarilo, un grupo heteroalquilo, un grupo heterocíclico, un grupo alquil-heterocíclico, un grupo heterocíclico-alquilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado, estando cada uno de dichos grupos sustituido con al menos uno de los grupos seleccionados de entre -COOH, -CONHR^{8}, -NHC=NH(NH_{2}), -NHC=NR^{8}(NH_{2}), -NH_{2}, -NHR^{8}, -NR^{8}_{2}, -N^{+}R^{8}_{3}, -OH, -OPO(OR^{8})_{2},
-OPO(OH)(OR^{8}), -OPO(OH)_{2}, -OSO(OR^{8})_{2}, -OSO(OH)(OR^{8}), -OSO(OH)_{2}, y las distintas formas salificadas de estos grupos, teniendo cada uno de los sustituyentes R^{8} la definición anterior. Estos grupos, reconocidos por su carácter polar, mejoran fuertemente el carácter hidrófilo conferido a dicho profármaco.
Más preferentemente, dichos grupos aralquilo, alcarilo, heteroalquilo, heterocíclico, alquil-heterocíclico, heterocíclico-alquilo o alquilo anteriores están sustituidos con al menos uno de los grupos seleccionados de entre -NR^{8}_{2}, -N^{+}R^{8}_{3}, -OPO(OH)_{2} o las distintas formas salificadas de estos grupos, teniendo cada uno de los sustituyentes R^{8} la definición anterior.
Más preferentemente, al menos uno de dichos sustituyentes R^{1} y R^{3} representa un grupo alquilo lineal que tiene de 1 a 6 átomos de carbono sustituidos con al menos uno de los grupos seleccionados de entre -NR^{8}_{2}, -N^{+}R^{8}_{3}, -OPO(OH)_{2}
o las distintas formas salificadas de estos grupos, teniendo cada uno de los sustituyentes R^{8} la definición anterior.
Cuando dichos sustituyentes R^{1} y R^{3} representan un grupo alquilo lineal que tiene de 1 a 6 átomos de carbono sustituidos con al menos uno de los grupos seleccionados de entre -NR^{8}_{2}, -N^{+}R^{8}_{3}, -OPO(OH)_{2} o las distintas formas salificadas de estos grupos, teniendo cada uno de los sustituyentes R^{8} la definición anterior, los restos de aminoácidos correspondientes derivan preferentemente:
-
bien de restos de serina, homoserina, treonina, alotreonina, N-metilserina, N-metiltreonina, N-metilhomoserina, en una cualquiera de las configuraciones (D) o (L), preferentemente (L), y en los que el grupo hidroxilo se ha funcionalizado de manera apropiada tal que la cadena lateral de estos restos de aminoácidos lleva los grupos polares y/o solubilizantes; o
-
de restos de lisina, ornitina, arginina, N-delta-metilarginina, N-alfa-metilarginina, N-metillisina, en una cualquiera de las configuraciones (D) o (L), preferentemente (L), y en los que el grupo respectivamente amina o imina se ha funcionalizado de manera apropiada tal que la cadena lateral de estos restos de aminoácidos lleva los grupos polares y/o solubilizantes.
Cuando los sustituyentes R^{1}, R^{2} y/o R^{3}, R^{4} que forman los pares (R^{1}, R^{2}) y/o (R^{3}, R^{4}), son grupos alquilo que tienen de 1 a 6 átomos de carbono, pueden formar, en cada par, una cadena alquilénica que forma, con el átomo de carbono y el átomo de nitrógeno que los llevan, un anillo. Preferentemente, constituyen la cadena lateral de un resto de prolina.
Cuando los sustituyentes R^{1} y R^{3} representan, independientemente uno del otro, un átomo de hidrógeno, un grupo aralquilo, un grupo alcarilo, un grupo heteroalquilo, un grupo heterocíclico, un grupo alquil-heterocíclico, un grupo heterocíclico-alquilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado, pero dichos grupos no están sustituidos con al menos uno de los grupos seleccionados de entre -COOH, -CONHR^{8}, -NHC=NH(NH_{2}), -NHC=NR^{8}(NH_{2}), -NH_{2}, -NHR^{8}, -NR^{8}_{2}, -N^{+}R^{8}_{3}, -OH, -OPO(OR^{8})_{2}, -OPO(OH)(OR^{8}), -OPO(OH)_{2}, -OSO(OR^{8})_{2},
-OSO(OH)(OR^{8}), -OSO(OH)_{2}, y las distintas formas salificadas de estos grupos, entonces representan preferentemente las cadenas laterales de restos de aminoácidos, con configuraciones (D) o (L), preferentemente (L), o de restos de dichos aminoácidos en formas protegidas y/o activadas, y que tienen eventualmente su grupo amina alquilado, habitualmente disponible en el comercio. Más preferentemente, dichos restos de aminoácidos se selecciona de entre los veinte aminoácidos habitualmente denominados aminoácidos naturales.
Más preferentemente, en la fórmula general (I), los sustituyentes R^{5} y R^{6} no pueden representar simultáneamente un átomo de hidrógeno. Más preferentemente, al menos uno de dichos sustituyentes R^{5} y R^{6} representa un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado, y el sustituyente R^{7} representa un grupo aralquilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado.
Aun más preferentemente, dichos sustituyentes R^{5} y R^{6} representan, independientemente uno del otro, un átomo de hidrógeno o un grupo metilo.
Preferentemente, dicho profármaco consiste en un undecapéptido cíclico cuya cadena peptídica comprende un solo resto de aminoácido de fórmula general (I), y forma así un anillo undecapeptídico con una secuencia lineal de diez aminoácidos de fórmula general (II) siguiente:
(II)-T-U-V-W-MeLeu-Ala-X-MeLeu-Z-MeVal-
en la que:
-
T se selecciona de entre los aminoácidos Ala, Abu, Nval, Val y Thr;
-
U se selecciona de entre los aminoácidos Sar, (D)MeSer, (D)MeAla y (D)MeSer(OCOR^{9}), representando R^{9} un átomo de hidrógeno, un grupo alcarilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado;
-
V representa un aminoácido de fórmula general (N-R^{10})aa, siendo aa seleccionado de entre los aminoácidos Val, Leu, Ile, Thr, Phe, Tyr, y siendo R^{10} un grupo alquilo lineal o ramificado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono;
-
W se selecciona de entre los aminoácidos Val, Nval y Leu;
-
X se selecciona de entre los aminoácidos (D)Ala, (D)Ser, (D)Hiv, (D)Val y (D)Thr, representando (D)Hiv un resto del ácido D-2-hidroxi-isovalérico; y
-
Z se selecciona de entre los aminoácidos Leu y MeLeu.
Así, cuando, en dicho resto de aminoácido de fórmula general (I), los dos sustituyentes Y representan cada uno un átomo de hidrógeno, la molécula farmacológicamente activa que se liberará, durante la ruptura del profármaco en el organismo, consistirá en un undecapéptido cíclico de la familia de las ciclosporinas cuya cadena peptídica contiene un resto de N-metil-(4R)-4-butil-4-metil-L-treonina (Dh-MeBmt).
Igualmente, cuando, en dicho resto de aminoácido de fórmula general (I), los dos sustituyentes Y constituyen juntos un enlace, la molécula farmacológicamente activa que se liberará, durante la ruptura del profármaco en el organismo, consistirá en un undecapéptido cíclico de la familia de las ciclosporinas cuya cadena peptídica contiene un resto de N-metil-(4R)-4-((E)-2-butenil)-4-metil-L-treonina (MeBmt).
Preferentemente, estos undecapéptidos cíclicos corresponden a las ciclosporinas ya descritas en la bibliografía por poseer propiedades farmacológicas, y que tienen en su cadena peptídica, bien un resto de N-metil-(4R)-4-((E)-2-butenil)-4-metil-L-treonina (MeBmt), o bien un resto de N-metil-(4R)-4-butil-4-metil-L-treonina (Dh-MeBmt).
Más preferentemente, la secuencia lineal de los diez restos de aminoácidos restantes que constituyen, con dicho resto de aminoácido de fórmula general (I), dicho undecapéptido cíclico se selecciona de entre las secuencias siguientes de fórmula (III) a (XIV):
-Abu-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-
(III);
-Abu-(D)MeAla-EtVal-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-
(IV);
-Thr-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-
(V);
-Val-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-
(VI);
-NVal-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-
(VII);
-Val-(D)MeAla-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-
(VIII);
-Val-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Val-MeLeu-Leu-MeVal-
(IX);
-Val-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Thr-MeLeu-Leu-MeVal-
(X);
-Abu-(D)MeSer(OAc)-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-Leu-MeVal-
(XI);
-Abu-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ser-MeLeu-MeLeu-MeVal-
(XII);
-Thr-Sar-MeLeu-Leu-MeLeu-Ala-(D)Hiv-MeLeu-Leu-MeVal-
(XIII);
y
-Abu-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Val-MeLeu-Leu-MeVal-
(XIV).
La molécula farmacológicamente activa que se liberará durante la ruptura del profármaco en el organismo será entonces respectivamente una de las ciclosporinas siguientes con, según los casos, un resto derivado de la treonina con una cadena de butenilo (MeBmt) o de butilo (Dh-MeBmt):
Ciclosporina A (CsA); (D)MeAla^{3}EtVal^{4}CsA (documento WO 00/01715); ciclosporina C (CsC); ciclosporina D (CsD); ciclosporina G (CsG); (D)MeAla^{3}CsD; (D)Val^{8}Csl; (D)Thr^{8}Csl; (D)MeSer(OAc)^{3}CsT; (D)Ser^{8}CsA (Progress in Medicinal Chemistry, Vol. 25, ed. Ellis y West, Elsevier Science Publ., Biomedical Division, 1998, p. 1-33); Thr^{2}Leu^{5}(D)Hiv^{8}Leu^{10}CsC (The Journal of Biological Chemistry, 1991, 266(24), 15570); (D)Val^{8}Leu^{10}CsA; siendo las ciclosporinas A, C, D, G, I y T descritas en Progress in the Chemistry of Organic Natural Products, 1986, 50, 124, siendo las ciclosporinas restantes preparadas por analogía con el método descrito en Helvetica Chimica Acta, 1984, 67, 502.
Más preferentemente, los profármacos de la presente invención tienen, respectivamente, las fórmulas (XV) y (XVI) siguientes:
\vskip1.000000\baselineskip
3
4 
\vskip1.000000\baselineskip
El profármaco según la presente invención se puede preparar aplicando métodos de síntesis química bien conocidos por el experto en química de los péptidos, y más particularmente en la química de las ciclosporinas.
Mediante la elección apropiada de los distintos sustituyentes que definen el resto de aminoácido de fórmula general (I), se ha encontrado que los profármacos según la presente invención poseen, de manera interesante, un carácter hidrófilo fuertemente mejorado con relación a la molécula farmacológicamente activa generada durante la ruptura de dicho profármaco. A título de ejemplo, la solubilidad de algunos profármacos de la presente invención, que generan después de la ruptura la Cliclosporina A, es de al menos 3000 veces mayor que la de la Ciclosporina A.
Por consecuencia, los profármacos de la presente invención se pueden fácilmente incorporar en formulaciones galénicas acuosas.
Igualmente, de manera notable, se encuentra que los profármacos de la presente invención no son sensibles a las condiciones de pH que se encuentran habitualmente para este tipo de aplicación cuando se encuentran en disolución acuosa.
Además, los profármacos de la presente invención cumplen totalmente su papel liberando, con un tiempo de semivida totalmente apropiado para una aplicación terapéutica, la molécula farmacológicamente activa cuando están en contacto con las enzimas presentes en los humores biológicos.
La presente invención se refiere igualmente a un profármaco tal como se describe anteriormente como medicamento.
Tal medicamento se utiliza preferentemente para el tratamiento de las patologías o estados fisiológicos que necesiten de antemano el uso de una ciclosporina, en particular todas las patologías que necesiten el uso de la Ciclosporina A local o sistémicamente por vía intravenosa.
Tal medicamento se destina particularmente para permitir la supervivencia prolongada de los aloinjertos de órganos tales como el riñón, el corazón, el hígado, el páncreas, el pulmón, el intestino delgado, o la médula ósea. Se puede destinar igualmente para inhibir la replicación del virus de la inmunodeficiencia humana de tipo 1 (VIH-1).
En tales aplicaciones, la posología del profármaco de la presente invención, en la administración sistémica intravenosa, es igual a la concentración en ciclosporina generada durante la ruptura, por ejemplo de la Ciclosporina A, que corresponde a las concentraciones terapéuticas habitualmente recomendadas.
Más preferentemente, tal medicamento se utiliza en el campo oftálmico y se destina, particularmente, para el tratamiento de patologías del ojo y de su entorno.
Entre estas patologías, se encuentran, entre otras, queratoconjuntivitis secas, denominadas igualmente síndrome del ojo seco, el síndrome de Sjögren, las queratoconjuntivitis alérgicas, en particular las resistentes a los corticosteroides, las conjuntivitis que producen moco y sinequia, las keratitis estrómicas herpéticas, las keratitis límbicas inmunitarias, la keratitis de Thygeson, las patologías relacionadas con los injertos de córnea, y como tratamiento adyuvante de una cirugía filtrante. Más preferentemente, el medicamento de la presente invención se utiliza para el tratamiento de las queratoconjuntivitis secas.
En tales aplicaciones, la posología del profármaco de la presente invención es tal que la concentración lacrimal de ciclosporina generada durante la ruptura del profármaco, por ejemplo de Ciclosporina A, debe de ser mayor que 0,5 \mug/l en la administración por vía local.
El medicamento de la presente invención se puede administrar por vía tópica, en particular para el tratamiento local de afecciones de las mucosas o de afecciones cutáneas, o por vía parenteral, en particular por vía intravenosa. Igualmente, se puede administrar por vía oral con el objetivo de mejorar la biodisponibilidad de la ciclosporina, por ejemplo de la Ciclosporina A.
Cuando el medicamento de la presente invención se administra por vía parenteral, las preparaciones galénicas apropiadas pueden ser disoluciones acuosas concentradas y estériles, o polvos para preparaciones inyectables.
Preferentemente, el medicamento de la presente invención se administra por vía intravenosa. Las preparaciones galénicas apropiadas para tal administración son disoluciones acuosas para inyección o para infusión bien conocidas por el experto en la técnica.
Más preferentemente, el medicamento de la presente invención se administra por vía local. Las preparaciones galénicas apropiadas para tal administración, en particular para una administración oftálmica, son los colirios en forma de disoluciones estériles acuosas, las pomadas oftálmicas, los geles oftálmicos, los insertos oftálmicos.
La presente invención, así como sus propiedades ventajosas, se presentan de manera detallada, sin ser limitativa, en los ejemplos y con la ayuda del dibujo en el que,
- la Figura 1 representa una curva de cinética de conversión in vitro de un profármaco según la invención mediante hidrólisis con la ayuda de esterasas, y una curva de cinética de aparición de la Ciclosporina A;
- la Figura 2a representa el porcentaje sanguíneo de Ciclosporina A después de la administración i.v. de Ciclosporina A en forma oleosa en ratas;
- la Figura 2b y 2c representan el porcentaje sanguíneo de Ciclosporina A después de la administración i.v. respectivamente de una disolución acuosa de dos de los profármacos según la invención, en ratas; y
- la Figura 3 representa respectivamente las concentraciones a lo largo del tiempo de la Ciclosporina A y de un profármaco según la invención, en lagrimas de conejos.
En la nomenclatura usada en los Ejemplos para describir los productos obtenidos, el resto de Ciclosporina A se designa mediante la abreviatura -CsA, estando el resto del fragmento opuesto enlazado al único grupo funcionalizable de este undecapéptido cíclico, a saber, el grupo hidroxilo del aminoácido que tiene la posición 1, la N-metil-(4R)-4-((E)-2-butenil)-4-metil-L-treonina (MeBmt). Las fórmulas químicas desarrolladas de los productos intermedios derivados de la Ciclosporina A representaran solamente el resto del aminoácido en posición 1 con la cadena lateral respectiva.
Ejemplo 1 Preparación del undecapéptido cíclico de fórmula (XV)
5
1. Preparación de MeBmt(O-Sar-Lys(N_{\varepsilon}^{+}Me_{3})-COOCH(CH_{3})-OC-OCH_{3}))^{1}-CsA (XV) 1.1. Preparación del carbonato de \alpha-acetoxietilo de paranitrofenolato de oxicarbonilo (2) 1.1.1. Preparación del carbonato de \alpha-cloroetilo de paranitrofenolato de oxicarbonilo (1)
A una disolución de 3 g (21,6 mmoles, 1 eq) de p-nitrofenol y 1,7 ml (21,7 mmoles, 1 eq) de piridina en 108 ml de cloroformo, se añaden, a 0ºC, 2,6 ml (23,7 mmoles, 1,1 eq) de cloroformiato de \alpha-cloroetilo. La mezcla de reacción se agita durante 30 min. a 0ºC, y después durante 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se extrae con agua, con una disolución al 0,5% de NaOH, y después con agua. La fase orgánica se seca sobre Na_{2}SO_{4}, se filtra y se evapora a vacío reducido para dar un aceite amarillo que da un sólido blanco puro (5,8 g) después de la cristalización en hexano.
RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta: 8,32 (d, 2H), 7,44 (d, 2H), 6,52 (q, 1H), 1,95 (s, 3H).
1.1.2. Preparación del carbonato de \alpha-acetoxietilo de paranitrofenolato de oxicarbonilo (2)
A una disolución de 4 g (16,3 mmoles, 1 eq) de (1) disuelto en 100 ml de ácido acético, se añaden 7,8 g (24,4 mmoles, 1,5 eq) de acetato de mercurio. La mezcla de reacción se agita durante 1 día a temperatura ambiente, y después se añade 1 g (3,13 mmoles, 0,2 eq) suplementario de acetato de mercurio. Después de 1 día suplementario de agitación a temperatura ambiente, la reacción está terminada. El ácido acético se evapora a alto vacío, y el residuo se recoge en éter. La fase orgánica se extrae con una disolución salina, y después se seca sobre Na_{2}SO_{4}, se filtra y se evapora a vacío reducido, para dar un aceite amarillo. El producto bruto se cromatografía sobre gel de sílice para dar un aceite incoloro (4,4 g).
RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta: 8,31 (d, 2H), 7,43 (d, 2H), 6,87 (q, 1H), 2,16 (s, 3H), 1,64 (s, 3H).
1.2. Preparación de la \alpha-acetoxietoxicarbonil-lisina (N_{\varepsilon}(Fmoc)) (5) 1.2.1. Preparación del éster bencílico de la \alpha-acetoxietoxicarbonil-lisina (N_{\varepsilon}(Z)) (3)
Se suspenden 500 mg (1,23 mmoles, 1 eq) de H-Lys(Z)Obn.HCl en 2,5 ml de dioxano. Se añaden a temperatura ambiente 231 \mul (1,35 mmoles, 1,1 eq) de N,N-diisopropiletilamina (DIPEA) y 396 mg (1,47 mmoles, 1,2 eq) de (2). Después de 1 día de agitación a temperatura ambiente, la reacción está terminada. El dioxano se evapora a vacío reducido, y el residuo se recoge en 20 ml de acetato de etilo. La fase orgánica se extrae tres veces con una disolución de ácido cítrico al 6% (20 ml), con una disolución saturada de NaHCO_{3} (20 ml), y con una disolución saturada de NaCl (20 ml), se seca sobre Na_{2}SO_{4} anhidro, se filtra, y el disolvente se evapora a vacío reducido. El producto bruto obtenido se cromatografía sobre gel de sílice para dar un aceite claro, transparente (576 mg).
ESI-MS: m/z: 501,34 [M+H^{+}]; 518,28 [M+H_{2}O+H^{+}].
1.2.2. Preparación de la \alpha-acetoxietoxicarbonil-lisina (4)
A una disolución de 509 mg (1,02 mmoles) de (3) en 10 ml de etanol se añaden 50 mg de paladio sobre carbón activo. Después de agitar durante 3 h a temperatura ambiente en una corriente de hidrógeno, la reacción está terminada. La mezcla de reacción se filtra sobre celita, y el filtrado se evapora a vacío reducido para dar el bruto en forma de cristales marrones que se usa directamente en la etapa siguiente (254 mg).
ES-MS m/z: 276,87 [M+H^{+}].
1.2.3. Preparación de la \alpha-acetoxietoxicarbonil-lisina(N_{\varepsilon}(Fmoc)) (5)
A una disolución de 1,062 (3,84 mmoles, 1 eq) de (4) disuelto en 38 ml de dioxano se añaden 1,11 ml de DIPEA (6,53 mmoles, 1,7 eq) y 1,555 g (4,61 mmoles, 1,2 eq) de Fmoc-O-Suc. Después de agitar durante 1 h a temperatura ambiente, la reacción está terminada, el dioxano se evapora a vacío reducido, y el residuo se recoge en 20 ml de AcOEt. La fase orgánica se lava una vez con una disolución de ácido cítrico al 6% (20 ml) y una disolución saturada de NaCl (20 ml), se seca sobre Na_{2}SO_{4} anhidro, se filtra, y el disolvente se evapora a vacío reducido. El producto bruto obtenido se cromatografía sobre gel de sílice para dar una espuma blanca (1,026 g).
ES-MS m/z: 499,37 [M+H^{+}], 516,29 [M+H_{2}O+H^{+}].
1.3. Preparación de MeBmt(O-Sar-Lys((N_{\varepsilon}^{+}Me_{3})-COOCH(CH_{3})OCOCH_{3}))^{1}-CsA.l^{-} (XV) 1.3.1. Preparación de MeBmt(O-COCH_{2}Br)^{1}-CsA (6)
6
Se disuelven 4 g (3,33 mmoles, 1 eq) de CsA seca en argón en 66 ml (0,76 moles) de bromuro de bromoacetilo. Mediante pequeñas porciones, se añaden 2 g (16,64 mmoles, 5 eq) de dimetilaminopiridina, y la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 40 min. Entonces, la reacción está terminada. La mezcla de reacción se vierte, con cuidado y con agitación vigorosa, en una mezcla de hidrogenocarbonato (77 g, 0,91 moles), agua (500 ml) y hielo picado. La adición eventual de algunas porciones suplementarias de NaHCO_{3} permite llevar el pH de la disolución a 7-8. La fase acuosa separada se extrae dos veces con diclorometano, y las fases orgánicas reunidas se extraen tres veces con una disolución saturada de NaHCO_{3} y con una disolución saturada de NaCl, se secan sobre Na_{2}SO_{4} anhidro, se filtran, y el disolvente se evapora a vacío reducido. El producto bruto obtenido se cromatografía sobre gel de sílice para dar una espuma blanca (3,2 g).
ESl-MS: m/z: 622,6 [M+2H^{+}], 673,9 [M+Na^{+}+H^{+}].
1.3.2. Preparación de MeBmt(O-Sar-H)^{1}-CsA (7) 
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7 
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Se disuelven 300 mg (0,23 mmoles, 1 eq) de (6) en 2,3 ml de etanol. A temperatura ambiente, se añaden 95 \mul (0,68 mmoles, 3 eq) de trietilamina (TEA) y 31 mg (0,45 mmoles, 2 eq) de cloruro de metilamonio suplementario. Después de 3 días de agitación a temperatura ambiente, se ajusta el pH a 12 mediante adición de TEA y adición de 15 mg (0,23 mmoles, 1 eq) de cloruro de metilamonio, la reacción está terminada después de 1 hora. El etanol se evapora a vacío reducido, y el residuo se recoge en acetato de etilo. La fase orgánica se extrae con agua y con una disolución saturada de NaCl, se seca sobre Na_{2}SO_{4} anhidro, se filtran, y el disolvente se evapora a vacío reducido. El producto bruto obtenido se cromatografía sobre gel de sílice para dar una espuma blanca (200 mg).
ESI-MS: m/z: 1273,7 [M+H^{+}].
1.3.3. Preparación de MeBmt(O-Sar-Lys(N_{\varepsilon}(FMOC)-COOCH(CH_{3})OCOCH_{3}))^{1}-CsA (8) 
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8 
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Se disuelven 79 mg (0,06 mmoles, 1 eq) de (7) en 0,5 ml de diclorometano (DCM) en argón. Sucesivamente, se añaden en argón 31,6 \mul (0,18 mmoles, 3 eq) de DIPEA, 35 mg (0,09 mmoles, 1,5 eq) de hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (HATU), y 40 mg (0,08 mmoles, 1,3 eq) de (5) disuelto en 0,8 ml de DCM. Después de 3 h de agitación a temperatura ambiente, la reacción está terminada. El DCM se evapora a vacío reducido, y el residuo se recoge en 20 ml de AcOEt. La fase orgánica se lava una vez con una disolución de ácido cítrico al 6% (20 ml), una disolución saturada de NaHCO_{3} (20 ml), y una disolución saturada de NaCl (20 ml), se seca sobre Na_{2}SO_{4} anhidro, se filtra, y el disolvente se evapora a vacío reducido. El producto bruto se cromatografía sobre gel de sílice para dar una espuma blanca (59 mg).
ES-MS m/s: 1754,36 [M+H^{+}]; 877,86 [M+2H^{+}].
1.3.4. Preparación de MeBmt(O-Sar-Lys(N_{\alpha}-COOCH(CH_{3})OCOCH_{3}))^{1}-CsA (9)
9
A una disolución de 150 mg (0,09 mmoles, 1 eq) de (8) disuelto en 900 \mul de acetonitrilo se añaden 90 \mul (0,86 mmoles, 10 eq) de dietilamina. Después de 3 h de agitación a temperatura ambiente, la reacción está terminada. El disolvente se evapora a vacío reducido, y el producto bruto se cromatografía sobre gel de sílice para dar una espuma blanca (52 mg).
ES-Ms m/z: 1532,79 [M+H^{+}]; 766,79 [M+2H^{+}].
1.3.4. Preparación de MeBmt(O-Sar-Lys(N_{\varepsilon}^{+}Me_{3})-COOCH(CH_{3})OCOCH_{3}))^{1}-CsA.I^{-} (XV)
10
Se disuelven 49 mg (0,03 mmoles, 1 eq) de (9) en 640 \mul de DCM anhidro, después se añaden 30 \mul (0,48 mmoles, 15 eq) de MeI seguido de 14 \mul (0,08 mmoles, 2,5 eq) de DIPEA. Después de 1 día de agitación a temperatura ambiente, la reacción está terminada. El DCM se evapora a vacío reducido, y el producto bruto se purifica mediante HPLC semipreparativa para aislar el compuesto puro en forma de liofilizado (30 mg).
ES-MS m/z: 1574,37 [M+H^{+}], 787,83 [M+2H^{+}].
Ejemplo 2 Preparación del undecapéptido cíclico de fórmula (XVI) 
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11
1. Preparación de MeBmt(O-Sar-Ser(OPO(OH)_{2})-COOCH(CH_{3})OCOCH_{3})^{1}-CsA (XVI) 1.1. Preparación de la \alpha-acetoxietoxicarbonil-serina (11) 1.1.1. Preparación del éster bencílico de la \alpha-acetoxietoxicarbonil-serina (10)
Se suspenden 1,4 g (6,04 mmoles, 1 eq) de H-Ser-Obn.HCl en 12 ml de dioxano. A temperatura ambiente, se añaden 1,14 ml (6,64 mmoles, 1,1 eq) de DIEA y 2,1 g (7,85 mmoles, 1,3 eq) de (2) obtenido según el Ejemplo 1. Después de una noche de agitación a temperatura ambiente, la reacción está terminada. El dioxano se evapora a vacío reducido, y el residuo se recoge en acetato de etilo. La fase orgánica se extrae tres veces con una disolución de ácido cítrico al 6%, una disolución saturada de NaHCO_{3}, y una disolución saturada de NaCl, se seca sobre Na_{2}SO_{4} anhidro, se filtra, y el disolvente se evapora a vacío reducido. El producto bruto obtenido se cromatografía sobre gel de sílice para dar una espuma blanca (1,7 g).
RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 7,34-7,41 (m, 5H), 6,79-6,85 (m, 1H), 5,72-5,82 (m, 1H), 5,24 (s, 2H), 4,47 (m, 1H), 3,94-4,05 (m, 2H), 2,06 y 2,08 (s, 3H), 1,49 y 1,50 (d, 3H).
1.1.2. Preparación de la \alpha-acetoxietoxicarbonil-serina (11)
A una disolución de 400 mg (1,23 mmoles) de (10) en 13 ml de etanol se añaden 40 mg de paladio sobre carbón activo. Después de 4 h de agitación a temperatura ambiente en una corriente de hidrógeno, la reacción está terminada. La mezcla de reacción se filtra sobre celita, y el filtrado se evapora a vacío reducido para dar el bruto en forma de depósito translúcido que se usa directamente en la etapa siguiente (328 mg).
RMN ^{1}H (400 MHz, CDCI_{3}): \delta: 6,3-6,8 (m, 1H), 5,8-6,3 (m, 1H), 4,3-4,4 (m, 1H), 3,7-4,1 (m, 2H), 2,08 (s), 1,49 y 1,50 (d, 3H).
1.2. Preparación de MeBmt(O-Sar-Ser(OPO(OH)_{2})-COOCH(CH_{3})OCOCH_{3})^{1}-CsA (XVI) 1.2.1. Preparación de MeBmt(O-Sar-Ser-COOCH(CH_{3})OCOCH_{3})^{1}-CsA (12) 
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12
Se disuelven 170 mg (0,13 mmoles) de (7) obtenido según el Ejemplo 1 en 3 ml de diclorometano en argón. Se añaden sucesivamente en argón 92 \mul (0,53 mmoles, 4 eq) de DIEA, 51 mg (0,26 mmoles, 2 eq) de HATU, y 60 mg de (11) (0,26 mmoles, 2 eq). Después de 5 horas de agitación a temperatura ambiente, la reacción está terminada. El diclorometano se evapora a vacío reducido, y el residuo se recoge en acetato de etilo. La fase orgánica se extrae tres veces con una disolución de ácido cítrico al 6%, una disolución saturada de NaHCO_{3}, y una disolución saturada de NaCl, se seca sobre Na_{2}SO_{4} anhidro, se filtra, y el disolvente se evapora a vacío reducido. El producto bruto obtenido se cromatografía sobre gel de sílice para dar una espuma blanca (143 mg).
ESI-MS: m/z: 1513,32 [M+Na^{+}], 1508,34 [M+H_{2}O+H^{+}], 1491,36 [M+H^{+}], 746,36 [M+2H^{+}].
1.2.2. Preparación de MeBmt(O-Sar-Ser(OPO(OAll)_{2})-COOCH(CH_{3})OCOCH_{3})^{1}-CsA (13) 
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13
Se disuelven 130 mg (0,09 mmoles, 1 eq) de (12) en 880 \mul de CH_{2}Cl_{2} anhidro. Después, se añaden 20 mg (0,27 mmoles, 3 eq) de 1H-tetrazol, seguido de 52 \mul (0,17 mmoles, 2 eq) de (AllO)_{2}PN(iPr)_{2}. Después de 4 h de agitación a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se enfría a -60ºC, se añaden 44 mg (0,17 mmoles, 2 eq) de ácido m-cloroperbenzoico, y se continúa la agitación durante 30 min. a -60ºC, 15 min. a 0ºC, y 45 min. a temperatura ambiente. A 0ºC, se añaden 0,5 ml de una disolución al 10% de Na_{2}S_{2}O_{5} al medio de reacción, a fin de destruir el exceso de oxidante, y después se extrae con diclorometano. La fase orgánica se lava con una disolución al 10% de Na_{2}S_{2}O_{5}, y después el diclorometano se evapora a vacío reducido. El residuo se recoge en metil-terc-butiléter, y esta fase orgánica se extrae con una disolución de ácido cítrico al 6% y una disolución saturada de NaCl, se seca sobre Na_{2}SO_{4} anhidro, se filtra, y el disolvente se evapora a vacío reducido. El producto bruto obtenido se cromatografía sobre gel de sílice para dar una espuma blanca (98 mg).
ESI-MS : m/z: 1651,38 [M+H^{+}], 826,35 [M+2H^{+}].
1.2.3. Preparación de MeBmt(O-Sar-Ser(OPO(OH)_{2})-COOCH(CH_{3})OCOCH_{3})^{1}-CsA (XVI) 
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14 
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A una disolución de 184 mg (0,58 mmoles, 3 eq) de Bu_{4}N^{+}·F^{-}·H_{2}O en 2 ml de CH_{2}Cl_{2} se añaden, en argón y a temperatura ambiente, 206 \mul (1,55 mmoles, 8 eq) de Me_{3}SiN_{3} y 1,12 g (0,97 mmoles, 5 eq) de (PPh_{3})_{4}Pd^{0}. Después de agitar a temperatura ambiente durante diez minutos, se añaden 320 mg (0,19 mmoles, 1 eq) de (13), y se deja agitar la mezcla de reacción durante treinta minutos. Entonces, la reacción está terminada. La mezcla de reacción se hidroliza mediante adición de una disolución de ácido cítrico al 6%, y el diclorometano se evapora a vacío reducido. El residuo se recoge en acetato de etilo, y la fase orgánica obtenida se extrae tres veces con una disolución de ácido cítrico al 6% y una disolución saturada de NaCl, se seca sobre Na_{2}SO_{4} anhidro, se filtra, y el disolvente se evapora a vacío reducido. El producto bruto obtenido se cromatografía sobre cartucho Sep-Pack®, y después en HPLC preparativa, para aislar el compuesto puro en forma de liofilizado (342 mg).
ESI-MS: m/z: 1593,32 [M+Na^{+}], 1571,81 [M+H^{+}].
Ejemplo 3 Propriedades físico-químicas de los undecapéptidos cíclicos de fórmulas (XV) y (XVI) 1. Hidrosolubilidad de los undecapéptidos cíclicos de fórmulas (XV) y (XVI)
Las solubilidades en agua se han evaluado mediante un examen visual a temperatura ambiente del laboratorio, mediante disolución directa de una cantidad pesada del undecapéptido cíclico en tampones de fosfatos 67 mM de tipo Sorensen. Los valores se reúnen en la Tabla 1.
\vskip1.000000\baselineskip
Undecapéptido cíclico Solubilidad en agua a
pH=5 pH=6 pH=7 pH=8
(XV) >7 mM
(XVI) >20 mM >20 mM >20 mM >20 mM 
\vskip1.000000\baselineskip
A título indicativo, la Ciclosporina A se describe por tener una solubilidad máxima en agua de 33 \mug/ml a una temperatura de 20ºC y a un pH 7, lo que corresponde a una concentración máxima de 0,027 mM.
2. Estabilidad química y enzimática de los undecapéptidos cíclicos de fórmulas (XV) y (XVI)
Se efectuó una primera evaluación de la estabilidad química a lo largo del tiempo del undecapéptido cíclico de fórmula (XV), por una parte en una disolución isotónica que consiste en manitol, y por otra parte en un tampón de fosfato (PBS) a un pH de 7 y a una temperaturas de 4, 20 y 37ºC.
Los porcentajes de Ciclosporina A detectada se reúnen en la Tabla 2 siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
TABLA 2
4ºC, manitol 20ºC, manitol 37ºC, manitol 37ºC, PBS
30 días 3,5% 17,0% 25,0% 90,0%
90 días 5,0% 38,0% 
\vskip1.000000\baselineskip
Tal como se puede observar, a temperatura de 4ºC en una disolución de manitol, el péptido cíclico demuestra ser estable para responder durante al menos 90 días.
Se efectuó un segundo estudio de estabilidades, tanto química como enzimática, con los dos undecapéptidos cíclicos de fórmula (XV) y (XVI), disueltos en un tampón de HEPES 50 mM a pH 7,4 a 37ºC, en ausencia y en presencia de esterasas. Durante la incubación a 37ºC, se toman muestras de alícuotas de 40 \mul a intervalos de tiempo apropiados, y se analizan mediante HPLC y ESI-MS.
En ausencia de enzima, se observa una estabilidad química mayor que 3 días para los dos undecapéptidos cíclicos.
Los resultados obtenidos durante la hidrólisis en presencia de esterasas se dan en la Figura 1. La curva de cinética de conversión del undecapéptido cíclico (XVI) se representa mediante rombos, mientras que la curva de cinética de aparición de la Ciclosporina A se representa mediante cuadrados. Tal como se puede observar según esta figura, en presencia de esterasas, el undecapéptido cíclico (XVI) se degrada rápidamente para liberar la Ciclosporina A. Se hizo una observación similar para el undecapéptido cíclico (XV).
Los undecapéptidos cíclicos (XV) y (XVI) se sometieron a una incubación en suero bovino a 37ºC. Se evaluaron los tiempos de semivida de conversión de los undecapépotidos cíclicos a Ciclosporina A, y son respectivamente 3,66 y 3,50 horas.
Ejemplo 4 Aplicación para administración intravenosa en forma de disolución acuosa. Estudio de farmacocinética de los undecapéptidos cíclicos de fórmulas (XV) y (XVI)
A fin de poner a disposición del médico una herramienta alternativa a las formulaciones galénicas de la Ciclosporina A usadas corrientemente en forma de microemulsión en aceite de ricino polioxietilenado, que tiene una estabilidad delicada, es relativamente difícil de manipular e induce efectos deletéreos, se han evaluado profármacos de la presente invención, en forma de disoluciones acuosas simples, para una aplicación intravenosa.
Así, los dos undecapéptidos cíclicos (XV) y (XVI), en disolución en tampón de fosfato, se han administrado por vía intravenosa a ratas a razón de una dosis equivalente de 10 mg/kg de Ciclosporina A.
Como referencia, se utilizó una muestra de una disolución inyectable de ciclosporina, disponible en el comercio con la marca de comercio Sandimmun, tras dilución apropiada.
Se tomaron muestras de sangre a intervalos regulares, y después se sometieron a análisis con el fin de efectuar una evaluación de la Ciclosporina A.
Los niveles sanguíneos de Ciclosporina A tras administración i.v. de la Ciclosporina A se dan en la Figura 2a. Los obtenidos tras administración i.v. respectivamente de una disolución acuosa de los dos profármacos (XV) y (XVI) se dan respectivamente en las Figuras 2b y 2c. Los resultados interpretados de las curvas de las Figuras 2a, 2b y 2c se dan en la Tabla 3 siguiente.
TABLA 3
Undecapéptido Ciclosporina A (XV) (XVI)
AUC_{0-inf}\mug.h.L^{-1} 69229 66626 44699
CLL/h/kg 0,14 0,15 0,22
MRT h 15,2 15,3 14,9
Vss L/kg 2,2 2,2 3,4
T1/2_{1} h 0,31 0,55 0,20
T1/2_{2} h 11,1 11,8 11,8
En esta Tabla, el significado de las abreviaturas es el siguiente:
\hskip0,3cm - AUC: área bajo la curva ("Area under the curve");
\hskip0,3cm - CL: Aclaramiento ("Clearance");
\hskip0,3cm - MRT: Tiempo medio de residencia ("Mean residence time");
\hskip0,3cm - Vss: volumen de distribución en el estado de equilibrio ("Volume of distribution at steady state");
\hskip0,3cm - T1/2_{1}: tiempo de semivida inicial; y
\hskip0,3cm - T1/2_{2}: tiempo de semivida terminal.
Tal como se puede ver en la Figura 2 y en la Tabla 3, los parámetros farmacocinéticos del experimento de control con Ciclosporina A son comparables a los dados a conocer en la bibliografía. El área bajo la curva de la Ciclosporina A generada durante la ruptura del undecapéptido cíclico (XV) es comparable a la de la Ciclosporina A del experimento de control, mientras que la de la Ciclosporina A generada durante la ruptura del undecapéptido cíclico (XVI) es un 25% más reducida con relación a la de la Ciclosporina A del experimento de control.
Los dos undecapéptidos cíclicos (XV) y (XVI) muestran cada uno un perfil similar de liberación sanguíneo de la Ciclosporina A. Estos perfiles son similares al de la Ciclosporina A en forma galénica a base de aceite de ricino polioxietilenado.
De estos resultados, resulta que los profármacos de la presente invención ofrecen, para un perfil de liberación de Ciclosporina A equivalente, las grandes ventajas siguientes, frente a las formulaciones galénicas existentes de Ciclosporina A:
-
facilidad de uso mediante simple disolución en agua; y
-
ninguna obligación de utilizar excipientes que demuestran ser tóxicos; y
-
ninguna obligación de utilizar materiales particulares para manipularles.
Ejemplo 5 Aplicación para administración tópica ocular en forma de disolución acuosa Estudio de farmacocinética del undecapéptido cíclico de fórmula (XV)
A fin de poner a disposición del médico una herramienta que permita una administración tópica ocular de Ciclosporina A sin que se sientan irritaciones o sensaciones desagradables, o sin que se experimente visión borrosa, se han evaluado profármacos de la presente invención, en forma de disoluciones acuosas simples.
1. Preparación de las disoluciones
Se prepararon disoluciones acuosas isotónicas, que contienen 5% de manitol y a pH 7,0, del undecapéptido cíclico (XV). La concentración de equivalente de Ciclosporina A es de 1% (peso/volumen). Las disoluciones se esterilizaron haciéndolas pasar a través de filtros de nitrocelulosa de 0,22 \mum. Se preparó una formulación de referencia de ciclosporina A en forma de una disolución al 1% en aceite de oliva.
2. Determinación de la tolerancia del undecapéptido cíclico de fórmula (XV)
La tolerancia ocular se determinó según dos métodos, a saber, el ensayo modificado de Draize, y mediante una oftalmoscopia de barrido con láser confocal.
2.1. Ensayo modificado de Draize (ensayo de tolerancia aguda)
Esta evaluación se realizó sobre seis conejos machos albinos. Para cada animal, un ojo recibió una instilación de 50 \mul de la disolución tal como se describe anteriormente, teniendo el otro ojo, no tratado, el papel de control.
La evaluación clínica de una eventual irritación se efectuó visualmente mediante evaluación de la secreción ocular, de la quemosis conjuntival y el enrojecimiento conjuntival según la clasificación descrita en la Tabla 4 siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
TABLA 4
Secreción ocular Normal 0
Ligera secreción 1
Gran secreción que cubre una pequeña superficie de la córnea 2
Gran secreción que cubre una gran parte de la córnea 3
Quemosis Normal 0
Ligera quemosis, incluyendo la membrana nictitante 1
Gran quemosis con el ojo parcialmente cerrado 2
Gran quemosis con el ojo cerrado 3
Enrojecimiento Vasos sanguíneos normales 0
Algunos vasos hiperémicos 1
Enrojecimiento difuso, vasos individuales no fácilmente discernibles 2
Enrojecimiento fuerte difuso 3 
\vskip1.000000\baselineskip
Se observó la eventual irritación, en cada animal, según las reglas anteriores, con intervalos determinados que se extienden durante 48 horas después de la instilación, y se calculó un índice de irritación total (l_{irr}) a partir de la suma total de los índices estimados. Los resultados obtenidos se dan en la Tabla 5 en el punto 2.3 aquí abajo.
2.2. Oftalmoscopia de barrido con láser confocal ("Confocal laser scanning ophtalmoscope, CLSO", en inglés) (ensayo de evaluación de una toxicidad subaguda durante 4 días de administración)
Este ensayo se efectuó sobre el mismo tipo de animal que anteriormente. Se instilaron 25 \mul de una disolución tal como se describe anteriormente, sobre la córnea del ojo derecho, tres veces por día durante cuatro días, y después una vez al cuarto día, justo antes de la observación. Después de la última instilación, se los conejos se sedaron mediante administración de hidrocloruro de cetamina y de xilazina. Se instiló un total de 25 \mul de una disolución de fluoresceína de sodio al 0,5% en peso/volumen sobre el ojo, a fin de permitir un marcado selectivo de las superficies eventualmente dañadas. Después, el ojo se enjuagó durante un minuto mediante una disolución salina a 37ºC.
Finalmente, el ojo se observó mediante una oftalmoscopia de barrido con láser confocal según el método descrito por Furrer et al., J. Ocular Pharmacol., 1997, 13, 559. La oftalmoscopia se acopló a un sistema de tratamiento de imagen a fin de poder reconstituir una imagen en tres dimensiones, y permitir una evaluación de las zonas
dañadas.
El grado de tolerancia se evalúa en función del porcentaje de lesiones de córnea, y según la regla siguiente:
-
de 0% a 25%: buena tolerancia;
-
de 25% a 40%: tolerancia aceptable;
-
de 40% a 60%: baja tolerancia; y
-
por encima de 60%: tolerancia inaceptable.
Se observa que, generalmente, se reconoce que un porcentaje de lesiones menor o igual a 5% corresponde a una tasa de mortalidad celular habitual en un cuerpo sano no sometido a ningún tratamiento.
Los resultados obtenidos se dan en la Tabla 5 en el punto 2.3. aquí abajo.
2.3. Resultados de la tolerancia ocular del undecapéptido cíclico de fórmula (XV) TABLA 5
Undecapéptido (XV) Ciclosporina A
Draize, l_{irr} 1,8 1,9
CLSO, % de lesiones 7 23
De la Tabla 5, parece que se obtuvo un índice de irritación total de 1,8 en el ensayo de Draize para el undecapéptido cíclico de fórmula (XV), y que 7% de la córnea estaba lesionada mediante administración de este producto. Estos dos resultados demuestran una muy buena tolerancia a este undecapéptido cíclico, siendo esta tolerancia claramente mejorada con relación a la obtenida cuando la Ciclosporina A se administra en aceite de oliva.
Por razones obvias, no se evaluó la mejora subjetiva del bienestar visual mediante el uso de una disolución acuosa en lugar de una disolución oleosa sobre el animal.
3. Estabilidad del undecapéptido cíclico de fórmula (XV)
Se conservaron muestras de las disoluciones descritas anteriormente, respectivamente, a 4ºC y 20ºC. Se efectuaron análisis mediante HPLC regularmente durante 3 meses. Se encontró que estas muestras poseen una buena estabilidad en tales condiciones.
4. Cinética de conversión ex vivo del undecapéptido cíclico de fórmula (XV)
Este ensayo de cinética de conversión se efectuó incubando a 37ºC 25 \mul de una muestra de la disolución descrita anteriormente, con agitación suave, con 8 \mul de lagrimas frescas de conejo. A intervalos de 1, 2, 3 y 30 minutos, se tomaron muestras de 2 \mul, y después se analizaron mediante HPLC.
Los resultados obtenidos mostraron que el undecapéptido cíclico de fórmula (XV) desempeña su papel de profármaco directamente desde el primer minuto de contacto con la lagrima de conejo, liberando la Ciclosporina A. A 3 minutos, 3% del profármaco se ha convertido, y después 4,7% tras 30 minutos.
5. Cinética de conversión in vivo del undecapéptido cíclico de fórmula (XV)
Este ensayo de cinética de conversión in vivo se efectuó instilando una muestra de 25 \mul de la disolución descrita anteriormente, en el ojo derecho de conejos machos albinos (4 kg). Se tomaron muestras de lagrimas a intervalos de 1, 2, 3, 4 y 20 minutos, y después se analizaron mediante HPLC.
Los resultados obtenidos se dan en la Figura 3. Tal como se puede constatar, este ensayo confirma los resultados ya obtenidos durante el experimento ex vivo. El undecapéptido cíclico de fórmula (XV) (cuadrados) desempeña claramente su papel de profármaco directamente desde el primer minuto de contacto con la lagrima de conejo, liberando la Ciclosporina A (círculos), y esta liberación continúa durante los 20 minutos siguientes. A 1 minuto, la concentración de Ciclosporina A en la lagrima es de 0,025 mg/ml.
6. Conclusiones
En estos resultados, resulta que los profármacos de la presente invención ofrecen, para una administración tópica ocular, las ventajas siguientes:
-
facilidad de preparación de una formulación galénica tal como un colirio mediante simple disolución en una disolución acuosa sin necesidad de recurrir a adyuvantes oleosos;
-
buena tolerancia aguda, y muy buena tolerancia subaguda, mayor que las obtenidas con una formulación galénica de ciclosporina en forma oleosa;
-
buena estabilidad; y
-
tiempo de semivida apropiado para una aplicación oftálmica.

Claims (17)

1. Profármaco que consiste en un undecapéptido cíclico cuya cadena peptídica comprende al menos un resto de aminoácido de la fórmula general (I) siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
15 
\vskip1.000000\baselineskip
en la que:
-
el átomo de carbono C^{a} constituye uno de los eslabones del anillo undecapeptídico;
-
los sustituyentes Y representan cada uno un átomo de hidrógeno, o constituyen juntos un enlace;
-
los sustituyentes R^{1} y R^{3} representan, independientemente uno del otro, un átomo de hidrógeno, un grupo aralquilo, un grupo alcarilo, un grupo heteroalquilo, un grupo heterocíclico, un grupo alquil-heterocíclico, un grupo heterocíclico-alquilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado, estando dichos grupos eventualmente sustituidos con al menos uno de los grupos seleccionados de entre -COOH, -CONHR^{8}, -NHC=NH(NH_{2}), -NHC=NR^{8}(NH_{2}), -NH_{2}, -NHR^{8}, -NR^{8}_{2}, -N^{+}R^{8}_{3}, -OH, -OPO (OR^{8})_{2}, -OPO(OH)(OR^{8}), -OPO(OH)_{2}, -OSO(OR^{8})_{2}, -OSO(OH)(OR^{8}), -OSO(OH)_{2}, y las distintas formas salificadas de estos grupos, representando cada uno de los sustituyentes R^{8}, independientemente uno del otro, un grupo alquilo, lineal o ramificado, que tiene de 1 a 6 átomos de carbono;
-
los sustituyentes R^{2} y R^{4} representan, independientemente uno del otro, un átomo de hidrógeno, un grupo alcarilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado;
-
los sustituyentes R^{5} y R^{6} representan, independientemente uno del otro, un átomo de hidrógeno, un grupo aralquilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado, y
-
el sustituyente R^{7} representa un grupo aralquilo, un grupo alcarilo, un grupo heteroalquilo, un grupo heterocíclico, un grupo alquil-heterocíclico, un grupo heterocíclico-alquilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado, estando dichos grupos eventualmente sustituidos con al menos uno de los grupos seleccionados de entre -COOH, -CONHR^{8}, -NHC=NH(NH_{2}), -NHC=NR^{8}(NH_{2}), -NH_{2}, -NHR^{8}, -NR^{8}_{2}, -N^{+}R^{8}_{3}, -OH, -OPO(OR^{8})_{2}, -OPO(OH)(OR^{8}), -OPO(OH)_{2}, -OSO(OR^{8})_{2}, -OSO(OH)(OR^{8}), -OSO(OH)_{2}, y las distintas formas salificadas de estos grupos, teniendo cada uno de los sustituyentes R^{8} la definición anterior.
2. Profármaco según la reivindicación 1, caracterizado porque, en la fórmula general (I) que define dicho resto de aminoácido, al menos uno de los sustituyentes R^{1} y R^{3} representa un grupo aralquilo, un grupo alcarilo, un grupo heteroalquilo, un grupo heterocíclico, un grupo alquil-heterocíclico, un grupo heterocíclico-alquilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado, estando cada uno de dichos grupos sustituido con al menos uno de los grupos seleccionados de entre -COOH, -CONHR^{8}, -NHC=NH(NH_{2}), -NHC=NR^{8}(NH_{2}), -NH_{2}, -NHR^{8}, -NR^{8}_{2}, -N^{+}R^{8}_{3}, -OH, -OPO(OR^{8})_{2}, -OPO(OH)(OR^{8}), -OPO(OH)_{2}, -OSO(OR^{8})_{2}, -OSO(OH)(OR^{8}), -OSO(OH)_{2}, y las distintas formas salificadas de estos grupos, teniendo cada uno de los sustituyentes R^{8} la definición anterior.
3. Profármaco según la reivindicación 2, caracterizado porque dichos grupos aralquilo, alcarilo, heteroalquilo, heterocíclico, alquil-heterocíclico, heterocíclico-alquilo o alquilo están sustituidos con al menos uno de los grupos seleccionados de entre -NR^{8}_{2}, -N^{+}R^{8}_{3}, -OPO(OH)_{2}, o las distintas formas salificadas de estos grupos, teniendo cada uno de los sustituyentes R^{8} la definición anterior.
4. Profármaco según la reivindicación 3, caracterizado porque al menos uno de dichos sustituyentes R^{1} y R^{3} representa un grupo alquilo lineal que tiene de 1 a 6 átomos de carbono sustituido con al menos uno de los grupos seleccionados de entre -NR^{8}_{2}, -N^{+}R^{8}_{3}, -OPO(OH)_{2}, o las distintas formas salificadas de estos grupos, teniendo cada uno de los sustituyentes R^{8} la definición anterior.
5. Profármaco según la reivindicación 1, caracterizado porque, en la fórmula general (I) que define dicho resto de aminoácido, los sustituyentes R^{5} y R^{6} no pueden representar simultáneamente un átomo de hidrógeno.
6. Profármaco según la reivindicación 1, caracterizado porque, en la fórmula general (I) que define dicho resto de aminoácido, al menos uno de dichos sustituyentes R^{5} y R^{6} representa un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado, y el sustituyente R^{7} representa un grupo aralquilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado.
7. Profármaco según la reivindicación 6, caracterizado porque dichos sustituyentes R^{5} y R^{6} representan, independientemente uno de otro, un átomo de hidrógeno o un grupo metilo.
8. Profármaco según la reivindicación 1, caracterizado porque dicha cadena peptídica comprende un único resto de aminoácido de fórmula general (I) que forma un anillo undecapeptídico con una secuencia lineal de diez aminoácidos de fórmula general (II) siguiente:
(II)-T-U-V-W-MeLeu-Ala-X-MeLeu-Z-MeVal-
en la que:
-
T se selecciona de entre los aminoácidos Ala, Abu, Nval, Val y Thr;
-
U se selecciona de entre los aminoácidos Sar, (D)MeSer, (D)MeAla y (D)MeSer(OCOR^{9}), representando R^{9} un átomo de hidrógeno, un grupo alcarilo o un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, lineal o ramificado;
-
V representa un aminoácido de fórmula general (N-R^{10})aa, escogiéndose aa entre los aminoácidos Val, Leu, lle, Thr, Phe, Tyr y Thr, y siendo R^{10} un grupo alquilo lineal o ramificado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono;
-
W se selecciona de entre los aminoácidos Val, Nval y Leu;
-
X se selecciona de entre los aminoácidos (D)Ala, (D)Ser, (D)Hiv, (D)Val y (D)Thr; y
-
Z se selecciona de entre los aminoácidos Leu y MeLeu.
9. Profármaco según la reivindicación 8, caracterizado porque dicha secuencia lineal de diez aminoácidos se selecciona de entre las secuencias siguientes de fórmulas (III) a (XV):
-Abu-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-
(III);
-Abu-(D)MeAla-EtVal-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-
(IV);
-Thr-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-
(V);
-Val-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-
(VI);
-NVal-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-
(VII);
-Val-(D)MeAla-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-
(VIII);
-Val-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Val-MeLeu-Leu-MeVal-
(IX);
-Val-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Thr-MeLeu-Leu-MeVal-
(X);
-Abu-(D)MeSer(OAc)-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-Leu-MeVal-
(XI);
-Abu-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ser-MeLeu-MeLeu-MeVal-
(XII);
-Thr-Sar-MeLeu-Leu-MeLeu-Ala-(D)Hiv-MeLeu-Leu-MeVal-
(XIII);
y
-Abu-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Val-MeLeu-Leu-MeVal-
(XIV).
\newpage
10. Profármaco según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que tiene, respectivamente, las fórmulas (XV) y (XVI) siguientes:
16
17
11. Profármaco según la reivindicación 1, como medicamento.
12. Uso de un profármaco según la reivindicación 1, para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento de patologías de las mucosas.
13. Uso de un profármaco según la reivindicación 1, para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento local de patologías oculares.
14. Uso según la reivindicación 13, caracterizado porque dichas patologías se seleccionan de entre las queratoconjuntivitis secas, síndrome de Sjögren, formas de queratoconjuntivitis alérgicas, en particular las resistentes a los corticosteroides, conjuntivitis que producen moco y sinequia, queratitis estromales herpéticas, queratitis límbicas inmunitarias, queratitis de Thygeson, la prevención del rechazo de transplantes de córnea, y como tratamiento adyuvante de una cirugía filtrante.
15. Uso de un profármaco según la reivindicación 1, para la preparación de un medicamento destinado a permitir la supervivencia prolongada de los aloinjertos de órganos.
16. Uso según la reivindicación 15, caracterizado porque dichos órganos que llevan un injerto se seleccionan de entre el riñón, el corazón, el hígado, el páncreas, el pulmón, el intestino delgado, y la médula ósea.
17. Uso de un profármaco según la reivindicación 1, para la preparación de un medicamento destinado a inhibir la replicación del virus de la inmunodeficiencia humana de tipo 1 (VIH-1).
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