ES2245462T3

ES2245462T3 - Procedimiento y aparato para retratar muestras en un analizador quimico automatico.

Info

Publication number: ES2245462T3
Application number: ES97921377T
Authority: ES
Inventors: Joseph Edward Kegelman; John Paul Mizzer; Edward Anthony Nuzzaci; Allan Tit-Shing Chow
Original assignee: Dade Behring Inc
Current assignee: Dade Behring Inc
Priority date: 1996-04-26
Filing date: 1997-04-25
Publication date: 2006-01-01
Anticipated expiration: 2017-04-25
Also published as: DE69733927D1; EP0835452B1; JPH11509635A; JP3673926B2; DE69733927T2; WO1997041445A1; US5985672A; EP0835452A1

Abstract

SE PRESENTA UN PREPROCESADOR PARA UTILIZACION EN LA REALIZACION DE INMUNOENSAYOS HETEROGENEOS EN MUESTRAS, PARA ANALITOS CONTENIDOS EN LA MUESTRA, EMPLEANDO CARRUSELES DE PROCESAMIENTO E INCUBACION, DISPUESTOS CONCENTRICAMENTE. UNA UNICA UNIDAD DE TRANSFERENCIA PERMITE MOVER LOS RECIPIENTES DE REACCION QUE CONTIENEN LA MUESTRA Y LOS REACTIVOS, ENTRE LOS CARRUSELES. DICHAS MUESTRAS SE SEPARAN, SE LAVAN Y SE MEZCLAN EN EL CARRUSEL DE PROCESAMIENTO Y SE INCUBAN EN EL CARRUSEL DE INCUBACION, AUMENTANDO EL RENDIMIENTO DEL PROCESAMIENTO.

Description

Procedimiento y aparato para retratar muestras en un analizador químico automático.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a un procedimiento para procesar muestras líquidas y, más particularmente, para procesar fluidos biológicos tales como, orina, suero sanguíneo, plasma y líquido cefalorraquídeo. En particular, la presente invención provee un procedimiento para procesar automáticamente una muestra a través de una secuencia de etapas que son llevadas a cabo durante inmunoensayos heterogéneos.

Antecedentes de la invención

Los analizadores para diagnóstico totalmente automatizados que realizan análisis químicos e inmunoensayos de fluidos biológicos tales como, orina, suero sanguíneo, plasma, líquido cefalorraquídeo y similares están disponibles comercialmente. Generalmente, las reacciones entre un analito en una muestra de un paciente y los reactivos usados durante el ensayo, dan como resultado la generación de un tipo de señal que puede ser medida por el analizador. Por medio de esta señal se puede calcular la concentración del analito en la muestra del paciente.

Los inmunoensayos heterogéneos son popularmente usados porque su versatilidad permite medir tanto analitos de tamaño grande como pequeño. Los inmunoensayos requieren 3 etapas básicas: (1) unir el analito a una fase sólida, (2) separar el analito no unido de la muestra del que está unido a la fase sólida y (3) medir el analito unido. La etapa de separación física elimina la mayoría de las sustancias interferentes, brindando de este modo una mayor sensibilidad. Los ensayos heterogéneos incluyen inmunoensayos competitivos e inmunoensayos de tipo sándwich. Los analizadores para diagnóstico generalmente usan varias estaciones de procesamiento, donde las operaciones de procesamiento tales como el agregado de muestra y reactivo, separación, lavado y mezclado se llevan a cabo para efectuar tal ensayo.

En un ensayo competitivo, se fija un anticuerpo contra un antígeno contenido en un primer reactivo a una partícula magnetizada, es decir, partículas que responden a un campo magnético, para crear una fase sólida. El segundo reactivo, constituido por un antígeno fijado a un marcador y una muestra del paciente se mezclan con la fase sólida en un tubo de prueba. En ausencia de antígeno del paciente, un 50% del antígeno-marcador se une al anticuerpo de la fase sólida magnética. En presencia de antígeno del paciente, algunos de los anticuerpos se fijan al antígeno del paciente y dejan de estar disponibles para el antígeno marcador. El aumento de la cantidad del antígeno del paciente lleva a una disminución de la cantidad de antígeno marcador. La separación magnética agrupa a las partículas magnéticas de la fase sólida con el marcador unido en un pellet en un lado del tubo. El marcador libre puede luego eliminarse con lavados profundos. Tras la separación y eliminación del marcador libre, se agrega otro reactivo de manera que puede medirse la cantidad de marcador unido.

En un inmunoensayo de tipo sándwich típico se usan múltiples etapas, es decir, se fija un anticuerpo contra un antígeno a la partícula magnética en concentración alta con respecto a la cantidad de antígeno del paciente en la muestra. El anticuerpo en la partícula magnética captura el antígeno del paciente y luego las partículas (con el antígeno del paciente capturado o fijado) se separan de sustancias interferentes de la muestra. Se agrega un segundo reactivo, que contiene un segundo anticuerpo con un marcador fijado. Este segundo reactivo se fija al antígeno del paciente, capturado por el primer anticuerpo en la partícula magnética, dando como resultado la formación de un sándwich de tal manera que el segundo anticuerpo es retenido firmemente por el antígeno al primer anticuerpo en la partícula magnética. En este punto, un lavado profundo y la separación magnética permiten la determinación del marcador unido, el que se encuentra en proporción al antígeno del paciente, habiéndose eliminado el exceso de marcador del segundo reactivo por acción del lavado.

En ambos tipos de inmunoensayo heterogéneo se requieren tiempo y recursos considerables para lograr un grado suficientemente alto de lavado como para eliminar constituyentes que puedan causar interferencia y evitar así resultados espurios en los ensayos. En la medida en que pueda lograrse, esto constituye una importante contribución en la sensibilidad de un analizador.

El alto rendimiento es una característica deseable de tales analizadores. Un contribuyente importante para mantener un rendimiento alto es la capacidad para procesar una pluralidad de muestras a lo largo de una variedad de diferentes etapas del ensayo heterogéneo necesarias antes de que pueda llevarse a cabo la etapa de medición de la señal. Estas múltiples etapas del proceso tienden a limitar el rendimiento. En el diseño de nuevos analizadores automáticos, en particular aquellos que involucran inmunoensayos heterogéneos de tipo "sándwich" complejos, que a menudo requieren muchas operaciones de separación, la capacidad para detectar una amplia variedad de analitos ocupa un mínimo espacio físico y es una ventaja importante en el rendimiento. Generalmente, la operación ininterrumpida, repetitiva, aumenta el rendimiento ya que pueden procesarse simultáneamente una cantidad de cubetas.

La operación repetitiva es particularmente difícil de lograr en el caso de inmunoensayos de tipo "sándwich" heterogéneo. Este es un procedimiento particularmente difícil aun cuando se lo realiza de forma manual. Resulta un problema particular cuando se incorpora el lavado automático a un analizador capaz de realizar múltiples tipos de inmunoensayos. Esto requiere el uso de múltiples estaciones de lavado lo que se cumple típicamente en los analizadores automáticos proveyendo tales estaciones de lavado múltiple. Por ejemplo, los requerimientos de sensibilidad de algunos ensayos heterogéneos exigen que la eficacia en el lavado sea muy alta. Esto se logra normalmente por medio de lavados reiterados, cada lavado sucesivo elimina líquidos y reactivos no deseados de modo que se obtiene progresivamente una limpieza mayor. Al mismo tiempo, tal régimen de lavado provoca limitaciones en el uso de varios recursos de procesamiento ya que el analizador debe permanecer estacionario en una actividad de lavado. Nominalmente, un ensayo requiere un total de cuatro lavados separados intercalados con etapas de separación. De acuerdo con esto, una característica importante en el diseño del analizador es la capacidad de que los recursos que no son de lavado estén involucrados con una muestra mientras que otra está siendo lavada. Sin embargo, los mecanismos requeridos para operar individualmente las estaciones de lavado y los mecanismos requeridos para las estaciones de lavado mismas pueden resultar muy costosos.

La Patente de EEUU Nº 4.459.265 transferida a Clinicon describe un analizador automático con un plato circular rotativo en etapas. Tiene una pluralidad de tubos de reacción en su periferia con varias estaciones de suministro de reactivo ubicadas en diferentes sitios alrededor de dicha periferia. El uso de estaciones múltiples da a la máquina versatilidad para llevar a cabo varias metodologías de pruebas diferentes, pero no provee los lavados necesarios para inmunoensayos heterogéneos. El analizador automático descrito en esa Patente de Clinicon incluye un plato circular rotativo en etapas. Tiene una pluralidad de tubos de reacción en su periferia con varias estaciones de suministro de reactivo ubicadas en diferentes sitios alrededor de dicha periferia. El uso de estaciones múltiples da a la máquina versatilidad para llevar a cabo varias metodologías de pruebas diferentes, pero no provee los lavados necesarios para inmunoensayos heterogéneos.

Un analizador químico convencional fabricado por Hitachi, Inc., Tokyo, Japón, Modelo Número 7.050 encadena o "vincula" varias sondas de lavado. Cuando esto se lleva a cabo, se afecta la capacidad del instrumento para llevar a cabo procedimientos analíticos múltiples al mismo tiempo.

La Patente de EEUU Nº 5.104.808 de Laska y col., asignada al cesionario de la presente invención, también describe un analizador que "vincula" sondas de lavado juntas. Las sondas de lavado están vinculadas juntas, pero también separadas en dos grupos para conseguir un soporte sólido lavado que contiene una cantidad mínima de la matriz original suero/conjugado. De acuerdo con Laska y col., los medios de lavado incluyen al menos dos sondas de lavado pareadas o vinculadas para inserción simultánea en la cubeta de reacción en diferentes posiciones del procedimiento. Además, las sondas de lavado están ubicadas de manera contigua a la primera posición de muestra y/o reactivo en la secuencia. Este medio para agregar muestra y/o reactivo es deshabilitado en cada ciclo para una cantidad de cubetas, desde la primera y hasta la última cubeta que recibe muestra o reactivo, dicha cantidad correspondiendo al número de posiciones en procesamiento entre las sondas de lavado insertables.

La Patente de EEUU 5.183.638 de Wakatake, describe un analizador en el que una cubeta de reacción es transportada a través de varios dispositivos para agregar y agitar partículas magnéticas como se requiere durante un inmunoensayo EIA.

La Patente de EEUU 5.192.505 de Sakagami, describe un analizador en el que se proveen dos diferentes líneas de reacción, conducidas por un único dispositivo, una línea adaptada para realizar las operaciones del ensayo involucradas en la medición colorimétrica, la otra línea adaptada para realizar las operaciones del ensayo involucradas en la medición de inmunoaglutinación. Una ventaja del analizador es que mantiene un tamaño físico pequeño.

Otra característica usada en analizadores automáticos es el procedimiento de organización usado para presentar la muestra a las herramientas varias de ensayo. Como se describe en la Patente de los EEUU Nº 5.212.094, un analizador químico automático usa un número impar de cubetas de reacción dispuestas en un patrón circular. Las cubetas de reacción se rotan sucesivamente media revolución del patrón circular más la distancia entre los tubos de reacción. Usando tal patrón, es posible situar colectivamente las estaciones de lavado próximas una a la otra y así facilitar la compacidad del analizador, sin embargo tal analizador no es capaz de llevar a cabo inmunoensayos heterogéneos.

La Patente Nº 5.244.633, de Jakubowicz y col., describe un incubador y un procedimiento de incubación usando dos anillos incubadores manejados independientemente, cada uno de los cuales cargan y transfieren una cubeta que contiene líquido entre las estaciones de procesamiento. Al menos una estación de agregado de reactivo está dispuesta permanentemente adyacente a cada uno de los dos anillos. Una ventaja de este incubador es el incremento del rendimiento comparado con el hecho de tener tal anillo solo para todas las estaciones de agregado de reactivo. Sin embargo, este incubador ni está diseñado ni es capaz de realizar inmunoensayos heterogéneos con alta eficacia ya que no provee una secuencia de operaciones que permitan llevar a cabo las diferentes etapas necesarias para procesar la muestra en diferentes etapas del ensayo (agregado de primer/segundo reactivo, separación de muestra-soporte, lavado de muestra) simultáneamente en una pluralidad de muestras sin una programación compleja de los tiempos del procedimiento y movimientos del mecanismo.

El analizador de la Patente de EEUU Nº 5.352.612 incluye un soporte de muestras móvil para asir las muestras dispuestas en una primera pluralidad de posiciones para ser movidas en una primera dirección. Un mecanismo de clasificación para el soporte de muestras mueve las mismas en el soporte de muestras en la primera dirección en un juego de incrementos en los que cada incremento representa un movimiento de las muestras en una cantidad que corresponde a un número de muestras. Tal sistema permite la separación del espacio lógico del espacio físico en el sistema, permitiendo más libertad al equipamiento mecánico mientras permite realizar la secuencia de operaciones de manera apropiada tanto en espacio como en tiempo. Este sistema requiere una motilidad clasificada por tiempos muy compleja de un soporte de muestras rotativo, la que es determinada de manera diferente para todas y cada una de las cargas del soporte de muestra. Como puede entenderse mejor, el patrón de movimiento se determina en base al número de pares de cubetas de reacción. El patrón puede variar dependiendo del ensayo a realizar y los tiempos de reposo antes de los cambios de los diferentes recursos de procesamiento de acuerdo con la operación de los recursos de procesamiento.

La Patente de EEUU Nº 5.380.487, transferida a Pasteur Sanofi Diagnostics, describe un analizador en el que los recursos del ensayo están asignados fijos a la secuencia de operación, la que empieza y termina dentro de un ciclo de tiempo de duración fija. Cuando se introducen en el analizador muestras diferentes con diferentes protocolos de ensayos, la necesidad de recursos se determina para las diferentes muestras y los "espacios de tiempo" de los recursos requeridos son asignados al mismo. Se provee la posibilidad de realizar ensayos heterogéneos, sin embargo debido a que una cinta de incubación atraviesa la rueda de lavado, se establece una relación compleja entre el tiempo de clasificación de una cinta de incubación, el tiempo de clasificación de la rueda de lavado y el tiempo del ciclo de las operaciones llevadas a cabo en las cuberas de reacción a medida que se mueven a lo largo de la rueda de lavado. Además, los medios de control deben determinar qué recursos para ensayos basados en el tiempo se necesitan para procesar una prueba y luego comprobar la disponibilidad de esos recursos para el ensayo en una base ciclo por ciclo contra la asignación de los recursos para procesar otros ensayos en progreso. En ausencia de conflictos en cuanto a la asignación de recursos para el ensayo, el procesamiento de una cubeta de reacción seguirá de manera secuencial a la cubeta de reacción precedente. En consecuencia, el inicio del procesamiento de una muestra para una prueba puede ser demorado hasta que todos los recursos necesarios estén disponibles para el procedimiento. Aunque tal programación puede reducir el número total de ciclos de clasificación necesarios para completar el procesamiento de todas las pruebas, los conflictos en la programación demoran el inicio y también dan como resultado que recursos de procesamiento estén en estado ocioso. El documento WO 91/07662 describe un procedimiento para llevar a cabo de manera automática un inmunoensayo heterólogo en múltiples etapas en una manera secuencial que tiene desventajas similares a las de la Patente de EEUU Nº 5.380.487.

De un estudio de las diferentes aproximaciones obtenidas en la técnica anterior con respecto a los problemas encontrados con el procesamiento de inmunoensayos heterogéneos complejos, hay una necesidad de analizadores automáticos y procesos asociados con el manejo de muestras mejorados. Al mismo tiempo, existe una necesidad de mantener un rendimiento alto sin la introducción de programación compleja y, al mismo tiempo, minimizar el tamaño físico del analizador. En particular, existe una necesidad de contar con un procedimiento de separación y lavado de analito unido-no unido en un tiempo mínimo, en un patrón que mejora/mantiene el rendimiento de un analizador automático.

Por lo tanto, es un objeto, de la presente invención proveer un procedimiento para proporcionar las operaciones necesarias en inmunoensayos heterogéneos con una mayor eficacia y con técnicas de manejo de muestras muy simplificadas.

Resumen de la invención

Muchas de las desventajas de la técnica anterior se superan usando el procedimiento de esta invención. Esta invención provee un procedimiento para el procesamiento previo de muestras que tienen un soporte sólido para inmunoensayos heterogéneos en un carrusel de procesamiento montado de forma concéntrica y un carrusel de incubación, este último tiene una pluralidad de cubetas de reacción, los inmunoensayos se llevan a cabo mediante:

(a) el agregado de los reactivos de marcado incluyendo un soporte sólido a una muestra en la cubeta de reacción;

(b) la transferencia de las cubetas de reacción desde el carrusel de incubación al carrusel de procesamiento usando una estación de transferencia que accede a ambos carruseles;

(c) la separación del soporte sólido de la muestra y reactivos usando estaciones de procesamiento dispuestas de forma adyacente a dicho carrusel de procesamiento; y

(d) el lavado del soporte sólido usando estaciones de lavado (W1 y W2) dispuestas de forma adyacente a dicho carrusel, caracterizado en que procedimiento comprende las etapas de:

(e) avanzar el carrusel de procesamiento un primer número de posiciones de clasificación y detener en una estación de procesamiento durante un tiempo constante;

(f) avanzar dicho carrusel de procesamiento un segundo número de posiciones de clasificación y detener en una estación de procesamiento durante dicho tiempo constante igual;

(g) repetir las etapas (e) y (f) las veces necesarias para completar la operación de procesamiento previo en el caso de un inmunoensayo que no necesita reactivos adicionales;

(h) en el caso en que el ensayo necesite reactivos adicionales, transferir la cubeta de reacción desde el carrusel de procesamiento al carrusel de incubación en un primer punto de detención de la cubeta de reacción en dicha estación de transferencia (38) y agregar los reactivos requeridos en esa posición;

(i) reemplazar la cubeta de reacción en dicho carrusel de procesamiento antes de que la operación de procesamiento previo se complete, de tal manera de que los ensayos que necesiten reactivo adicional puedan ser procesados en el carrusel de procesamiento sin cambiar los movimientos de avance de las etapas (e) y (f); y

(j) repetir las etapas (e) y (f) tantas veces como sea necesario, de esta manera se reducen los tiempos de procesamiento de la muestra de inmunoensayos que no requieren reactivos adicionales.

El número y secuencia de etapas se seleccionan de manera que cada cubeta de reacción transferida al carrusel de procesamiento pueda ser retirada del carrusel de procesamiento en la estación de transferencia para un procesamiento adicional y regresada al carrusel de procesamiento usando una única estación de transferencia sin interrumpir el patrón síncrono repetido.

Esta nueva aproximación hace posible conseguir los rigurosos requerimientos necesarios para lavar las muestras en los inmunoensayos heterogéneos. Esto es así aunque varias pruebas o ensayos tienen diferentes tiempos de reacción antes de un lavado y pueden incluir el agregado de un reactivo y una etapa de incubación intercalada con los ciclos de lavado necesarios. Para realizar el procedimiento anterior se puede usar un procesador de muestras automático para llevar a cabo las operaciones previas al inmunoensayo en muestras que usan un soporte sólido. El procesador en un analizador para la detección de un analito, en una muestra, usando soportes sólidos, compren-
de:

un carrusel de procesamiento que lleva una pluralidad de cubetas de reacción, cada una de ellas adaptada para llevar una muestra,

un carrusel de incubación, que lleva una pluralidad de cubetas de reacción cada una de ellas adaptada para llevar una muestra, ubicado de forma concéntrica a dicho carrusel de procesamiento,

estaciones de procesamiento estacionarias ubicadas de forma adyacente a uno de dichos carruseles, dichas estaciones tienen medios para separar dicho soporte sólido del contenido de una cubeta de reacción, medios para lavar el contenido de una cubeta de reacción y medios para mezclar el contenido de una cubeta de reacción,

mecanismos para hacer rotar cada carrusel independientemente del otro, siendo dicho carrusel conducido en una manera repetitiva para ubicar cada una de las cubetas de reacción en posiciones de estaciones de procesamiento predeterminadas contiguas, y

medios de transferencia para transferir las cubetas de reacción entre dichos carruseles, logrando de esta manera mejorar el tiempo de procesamiento al permitir la incubación de todas las cubetas de reacción en el carrusel de incubación sin interrumpir el procesamiento de la muestra en el carrusel de procesamiento.

Las estaciones de procesamiento están ubicadas en un orden preseleccionado para permitir al carrusel de procesamiento ubicar sus cubetas de reacción en una secuencia repetitiva de etapas de separación y lavado. Más específicamente, la secuencia repetitiva de las cubetas de reacción es separación, lavado y mezclado. Estas características proveen un analizador con un alto rendimiento, reduce el costo de las estaciones de procesamiento al localizar varias funciones juntas y permite que las muestras sean procesadas y retiradas virtualmente en cualquier momento para incubación o medición.

Breve descripción de los dibujos

La invención se entenderá mejor con la siguiente descripción detallada junto con los dibujos que se incluyen y forman parte de esta solicitud y en los que:

La Figura 1 es un plano esquemático de un analizador químico automático que tiene un procesador previo al ensayo con un carrusel de procesamiento móvil, un carrusel de incubación y una pluralidad de estaciones de procesamiento para procesar las muestras antes del ensayo;

La Figura 2 es plano esquemático del procesador previo al ensayo de la Figura 1; y

La Figura 3 es un diagrama de tiempos para el procesador previo al ensayo.

Descripción detallada de la forma de realización de preferencia

El procedimiento y el aparato de esta invención serán descritos inicialmente con particular referencia a las Figuras 1 y 2 de los dibujos. La Figura 1 muestra esquemáticamente los elementos de un analizador químico automático convencional 10 que comprende un carrusel de copas de muestra 12 con una pluralidad de copas de muestra 14, un carrusel de cubetas 16, adaptado para llevar una pluralidad de cubetas 18 y para proveer una pluralidad de cartuchos de reactivos líquidos 20, ilustrado como se encuentra dispuesto por debajo de un corte de una parte de la tapa 22, que cubre varias áreas controladas térmicamente. Los cartuchos de reactivos 20 son de preferencia recipientes de compartimientos múltiples como aquellos comercializados con el nombre comercial FLEX™ de E.I. du Pont de Nemours and Co., Inc., Wilmington, DE. Las cubetas 18 pueden formarse tirando de dos cintas de composición diferente de película transparente desde un cartucho de película de cubetas, no mostrado, en la periferia del carrusel de cubetas 16, como en el analizador químico Dimension® comercializado por E.I. du Pont de Nemours and Co., Inc., Wilmington, DE. El carrusel de cubetas 16, de preferencia con forma de rueda, tiene aproximadamente cien cavidades separadas para llevar cubetas 18, la pared interna de cada cavidad tiene una abertura para permitir la transmisión de luz. En la parte superior de cada cubeta 18 queda una pequeña abertura para permitir el agregado de reactivo y muestra líquidos. Un brazo para muestra líquida 24 y un recurso de lavado 26 se ubican próximos al carrusel de copas de muestra 12 y al carrusel de cubetas 16. El brazo para muestra líquida 24 lleva una sonda para muestra líquida convencional 28 y está montado sobre un eje que puede rotar 27 de manera que el movimiento del brazo para muestra líquida 24 describe un arco que cruza el carrusel de copas de muestra 12, las cubetas 18 y el recurso de lavado 26. El recurso de lavado puede usarse para lavar la sonda 28.

Una primera sonda para líquidos 25 está montada de manera rotativa sobre el carrusel de cubetas 16 y está adaptado para aspirar líquido reactivo de un cartucho de reactivo líquido 20 apropiado y depositar cada reactivo líquido en una cubeta 18 predeterminada para el procesamiento por el analizador químico 10. La sonda 25 además comprende un mecanismo ultrasónico usado para aspirar, distribuir y mezclar reactivos similar al usado en el analizador químico Dimension®. Ya que los mecanismos de hidratación, aspiración, distribución y mezclado son bien conocidos en la técnica no necesitan ser más descritos. Los medios para análisis fotométrico, no mostrados, ubicados debajo del carrusel de cubetas 16 miden la absorbancia de luz a través de las cubetas 18 a varias longitudes de onda, con lo que puede determinarse la presencia de un analito en la muestra líquida usando técnicas analíticas bien conocidas. Hasta aquí, el analizador químico es convencional y puede ser, por ejemplo, el analizador químico Dimension® comercializado por E.I. du Pont de Nemours and Co., Wilmington, Delaware.

El analizador comprende un módulo de procesamiento de muestras previo al ensayo 30. Esto facilita las etapas adicionales necesarias para realizar ensayos heterogéneos sin disminuir la capacidad del analizador químico de mantener un alto rendimiento. El módulo de procesamiento 30 permite procesar la muestra líquida con el analito y/o el reactivo líquido, antes de ser suministrados a una cubeta 18 para medición. El módulo de procesamiento 30 comprende dos carruseles de tratamiento de muestra previo al ensayo 32 y 34. Estos son un carrusel de procesamiento interno 32 y un carrusel de incubación externo 34, ubicados en una cámara térmica, (no mostrada), ambos carruseles están montados de forma concéntrica con un eje común y de preferencia, en un plano común, siendo ambos de preferencia con forma de un carrusel circular. Ambos carruseles se mueven independientemente y tienen una cantidad predeterminada de cubetas con medios, que pueden ser clips, no mostrados, para llevar una pluralidad de cubetas de reacción previas al ensayo 36.

Los medios de transmisión 31 se proveen para rotar individualmente el carrusel de incubación 34 y el carrusel de procesamiento 32 alrededor de un eje común, estos medios de transmisión comprenden típicamente engranajes dentados dispuestos en cada uno de los carruseles 32 y 34 entrelazados con engranajes de piñón montados en el eje de un motor (no mostrado). Los medios de transmisión pueden ser de diseño convencional. La estación de transferencia 38 descrita anteriormente es una de una pluralidad de estaciones de procesamiento.

El carrusel de incubación 34 de preferencia contiene 45 posiciones discretas, y está ubicado para permitir que las cubetas de reacción sean presentadas para: 1) el agregado de reactivo, 2) el agregado/aspiración de muestra y 3) la transferencia hacia/de la cubeta y carruseles de procesamiento 16, 32 y para carga/descarga. El carrusel puede tener un diámetro de aproximadamente 25,4 cm. El carrusel de incubación 34 es conducido por los medios de transmisión 31 y usa un único sensor de posición. Su posición puede ser verificada en cualquier momento por medio de un codificador adosado al motor de tipo paso a paso.

El carrusel de incubación 34 está ranurado para permitir que las cubetas sean transferidas horizontalmente dentro/fuera del carrusel.

Cuando las cubetas 36 están en el carrusel de incubación 34, se mueven dentro de un canal de incubación térmico, que guía las cubetas a medida que viajan alrededor del carrusel y las mantiene a una temperatura constante. El canal de incubación es de aluminio y se calienta por medio de una resistencia. Un termistor controla la temperatura del metal cercano a las cubetas.

La operación del carrusel de incubación es asíncrona; es decir, puede ubicar cualquiera de las 45 cubetas en cualquiera de tres posiciones, como se cita anteriormente, en cualquier momento. Esto da flexibilidad al formato de los ensayos y acceso aleatorio completo.

El carrusel de procesamiento 32 contiene 15 posiciones discretas y está situado de forma concéntrica dentro del carrusel de incubación. El carrusel de procesamiento permite que las cubetas sean presentadas para: 1) separación magnética, 2) aspirado/lavado, 3) mezcla por resuspensión y 4) transferencia dentro/fuera del carrusel de procesamiento hacia el carrusel de incubación. El carrusel de procesamiento 32 puede tener un diámetro de aproximadamente 17,8 cm.

El carrusel de procesamiento 32 es conducido por los medios de transmisión 31 del mismo modo que el carrusel de incubación. De manera similar al carrusel de incubación, el carrusel de procesamiento está ranurado para permitir que las cubetas sean transferidas dentro/fuera. Las cubetas están sostenidas en el carrusel con clips de muelles.

A diferencia del carrusel de incubación, la secuenciación del carrusel de procesamiento es síncrona o repetitiva. Siempre que las cubetas de reacción 36 están en el carrusel, el carrusel las clasificará de memoria, avanzando cada cubeta a través de una serie de etapas de separación-lavado-mezcla.

Generalmente, la operación repetitiva aumenta en rendimiento, pero establece ciertas restricciones en el formato de los ensayos y la capacidad de acceso aleatorio. El rendimiento se mejora ya que 15 cubetas de reacción pueden ocupar el carrusel y procesarse simultáneamente. Sin embargo, como el carrusel de procesamiento opera independientemente del carrusel de incubación, pueden obtenerse procesamientos con acceso aleatorio y formatos de ensayo flexibles.

Los requerimientos de sensibilidad de algunos ensayos heterogéneos exigen que la eficacia de la estación de procesamiento sea muy alta. Esta invención permite lavados repetidos de cada cubeta de reacción, con el fin de asegurar el nivel basal cercano a cero deseado. Nominalmente, cada ensayo tiene un total de 4 secuencias de separación/lavado.

Se provee una estación de transferencia común 38, que accede a ambos carruseles 32 y 34 para transferir cubetas de reacción 36 entre los dos carruseles 32 y 34 y para retirar las cubetas de reacción 36 del módulo de procesamiento de muestra 30 y pasarlas a un recipiente de desecho, no mostrado.

La estación de transferencia 38 (Fig. 2), que puede tener un diseño convencional, se usa para transferir las cubetas de reacción 36 hacia/desde el carrusel de procesamiento y para cargar/descargar cubetas del carrusel de incubación 34. Todas las transferencias de cubetas se realizan en el plano únicamente horizontal, simplemente deslizando las cubetas a lo largo de su trayectoria en una corredera 39. La corredera 39 es operada por medio de un motor de tipo paso a paso, (no mostrado), y puede ubicar las cubetas en cualquier lugar a lo largo de la estación de transferencia 38, es decir, sobre cualquiera de los carruseles 32 ó 34. Se usa un codificador para verificar la posición de la corredera. Como el diseño debe permitir que entren cubetas nuevas y salgan cubetas viejas, se usa un recorrido en forma de "T" 46. Una entrada accionada por un solenoide, no mostrada, se cierra para permitir la carga de nuevas cubetas.

Las cubetas nuevas son dirigidas a la estación de transferencia 38 por medio del recorrido de alimentación 44. Una rueda propulsada 48, ubicada al final del recorrido de alimentación 44, cerca de la estación de transferencia, se usa para proveer movimiento positivo a un grupo de cubetas (no mostrada) cuando el sistema está cargando cubetas nuevas en posición para transferirlas al carrusel de incubación 34.

Las cubetas usadas son dirigidas al recipiente de desecho por medio de un conducto plástico 41 adosado a la parte inferior de la estación de transferencia, debajo de un agujero en el recorrido de salida (no mostrado).

Una segunda sonda para líquidos 40 está montada de forma rotativa sobre el carrusel de cubetas 16 y está adaptada para aspirar líquido reactivo de un cartucho de líquido reactivo 20 apropiado y depositar dicho líquido reactivo en una cubeta de reacción 36 predeterminada en el carrusel de incubación 34. La sonda para muestras líquidas 28 está también adaptada (1) para aspirar muestra líquida desde una cubeta de reacción 36 luego de que la muestra líquida haya pasado por las operaciones previas al ensayo y (2) para depositar la muestra líquida dentro de una cubeta 18 predeterminada para un posterior procesamiento y medición.

De acuerdo con esta invención, los dispositivos para el procesamiento de la muestra, o las estaciones 42 (Fig. 1) están ubicados en posiciones seleccionadas de la circunferencia alrededor de carrusel de procesamiento 32 de manera que pueden acceder a las cubetas de reacción 36. Se recordará que el carrusel de procesamiento 32 está montado de forma concéntrica al carrusel de incubación 34, en el radio externo del carrusel de procesamiento 32 (representado como interno en la Fig. 1 para mayor claridad).

Estas estaciones están adaptadas para proveer los medios para mezclar reactivos líquidos y muestras líquidas contenidos en una cubeta de reacción 36, para lavar la muestra líquida y el reactivo líquido obtenidos en una cubeta de reacción 36 y para realizar la separación magnética de las partículas magnéticas marcadas del marcador libre o reactivo líquido contenido en una cubeta de reacción 36 previa al ensayo.

Se usan dos estaciones de lavado W1 y W2 (Fig. 2) para aspirar y eliminar muestra no unida y/o reactivo de las cubetas de reacción, y eventualmente rellenar la cubeta con un tampón de lavado para las etapas subsiguientes.

El módulo de la estación de lavado comprende un soporte moldeado que lleva dos sondas de lavado duales (W1 y W2), que permite lavar dos cubetas al mismo tiempo. Las sondas tienen un muelle, que asegura el contacto con el fondo de cada cubeta para la aspiración completa. Las sondas operan en cubetas adyacentes; si está presente sólo una probeta, únicamente una sonda aspira/descarga. Las sondas son ubicadas arriba/abajo por medio de un motor de tipo paso a paso. La posición se verifica usando un sensor de posición tras cada operación.

Hay dos estaciones de mezcla M1 y M2 (Fig. 2). Se usan para resuspender y separar partículas magnéticas en el tampón de lavado tras cada lavado. El mezclador tiene un diseño de mezclador externo de tipo vórtex, que impide cualquier contaminación con la muestra/reactivos mientras se mezcla. La estación de mezcla M de preferencia ejerce una acción de tipo vórtex sobre las cubetas de reacción 36 como es una práctica usual en la manipulación de muestras en los laboratorios químicos. Se encuentran disponibles dispositivos para estos fines y de preferencia comprenden un disco montado externamente el que se ubica contra la base de las cubetas de reacción y se rota excéntricamente.

El diseño de la estación de mezcla es convencional, por ejemplo, como está descrito en la Patente de EEUU 4.848.917, Benin y col., transferida al cesionario de la presente invención. En una forma de realización de preferencia, se realiza el contacto externo con la cubeta(s) usando una plataforma de mezclado para engranar los extremos de la base de las cubetas. Un movimiento excéntrico mueve la cubeta, provocando una mezcla de tipo vórtex. La plataforma de mezclado descansa normalmente a 1,27 mm bajo la base de las cubetas, de modo que los extremos de la base de las cubetas estarán libres mientras el carrusel de lavado las hace avanzar entre estaciones. Cuando las cubetas están en posición para una mezcla, la plataforma de mezcla se eleva para ponerse en contacto con las cubetas. La elevación se lleva a cabo por medio de levas oscilantes, que engranan cuando el motor de mezcla alcanza una cierta velocidad. Se usa un sensor para detectar el correcto engranado de la plataforma de mezcla.

Al igual que con las estaciones de lavado, las estaciones de mezcla M1 y M2 pueden operar en dos cubetas al mismo tiempo. Normalmente, se mezclan simultáneamente dos cubetas adyacentes; sin embargo, el mezclador es capaz de mezclar una de las dos cubetas adyacentes si falta la otra.

Las estaciones de separación S1 a S9 (Fig. 2) son convencionales y típicamente incluyen imanes dispuestos adyacentes a la ubicación de las cubetas de reacción 36 para atraer las partículas de soporte sólido magnético (como aquellas descritas en EEUU 5.104.808) a las paredes de la cubeta de reacción de manera que el material no unido pueda ser aspirado.

La Figura 2, como se mencionó, muestra varias estaciones de procesamiento estacionario (descritas anteriormente) dispuestas contiguas al carrusel de procesamiento 32. Los medios de transmisión 31 que controlan el movimiento de los carruseles 32 y 34 se controlan convencionalmente mediante una unidad de control, de preferencia una unidad de procesamiento central basada en un microprocesador (CPU), ubicada en el analizador 10 para mover las cubetas en etapas-clasificadas hacia cada estación de procesamiento 42 donde se lleva a cabo el procesamiento previo al ensayo, como se describe a continuación. Un programa informático se encarga del control, típicamente como el usado en el analizador de química clínica Dimension® y es ampliamente usado por los expertos en la técnica de programación de control electromecánico basado en computadoras. Los medios de rotación de preferencia son motores de tipo paso a paso disponibles comercialmente.

De acuerdo con la presente invención el carrusel de procesamiento 32 se clasifica para posiciones de procesamiento sucesivas o estaciones 42 capaces de llevar a cabo varias operaciones previas al ensayo. Las muestras en cada estación están sujetas a varias operaciones previas al ensayo durante un período de tiempo constante. La Figura 2 muestra el carrusel de procesamiento 32 de preferencia asociado con las estaciones de tratamiento previo al ensayo distribuidas como sigue: diez estaciones de separación (S1...S10), dos estaciones de lavado (W1, W2), dos estaciones de mezcla (M1, M2) y la estación de transferencia 38.

Las importantes características de tiempo-modelo del carrusel de procesamiento 32 de la presente invención se describen a continuación en detalle. Estas se implementan operando programas informáticos que serán descritos en conjunción con la Figura 3. Se ha descubierto que es posible aumentar significativamente la eficacia de los procesamientos previos al ensayo de muestras para ensayos heterogéneos, si se establece y se mantiene una relación particular entre el número y la posición de las estaciones de procesamiento en el carrusel de procesamiento 32 y la secuencia a la que las cubetas de reacción 36 son clasificadas repetitivamente para las estaciones de procesamiento 32. Estas muestras pueden necesitar el agregado de un primer reactivo, la separación de soporte-mezcla, la mezcla de las muestras y lavado de la muestra y/o el agregado de un segundo reactivo, una segunda separación de soporte-mezcla, una segunda mezcla de muestras y un segundo lavado de muestra.

Con el fin de obtener los protocolos previos al ensayo asociados con estos requerimientos alternativos previos al ensayo, se ha descubierto que se pueden usar secuencias repetitivas o patrones de movimiento para cada cubeta de reacción 36 hacia las varias estaciones de procesamiento 42, es decir, S, W y M.

De acuerdo con esta invención, en lugar de clasificar o secuenciar el carrusel de procesamiento 32 una posición por vez, una técnica nueva se usa para avanzar las cubetas segmentos únicos o grupos de posiciones clasificadas al mismo tiempo. El carrusel de procesamiento 32 tiene 15 estaciones, por lo tanto hay 15 clasificaciones o posiciones para clasificar el carrusel para una revolución completa. El avance siempre es en la misma dirección y alterna entre grupos de incrementos de clasificaciones o posiciones +6 y clasificaciones o posiciones +7 de la rueda de procesamiento (Fig. 2 y 3). Aplicando esta secuencia al carrusel de procesamiento 32 se puede ver que una cubeta de reacción 36 que entra en "X", la estación de transferencia, y un avance de un total de 30 grupos de clasificaciones, pasarían a través de todas las estaciones en este patrón:

TABLA 1

\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{

X-S-S-S-S-S-W1-X-M1
\+  \hskip1.5cm  \+ (primer lavado)\cr 
 \hskip0.85cm 
-S  -  S  -  S  -  S  -  W1  -  S  -  M1
\+ \+  \hskip0.85cm  (segundo lavado)\cr 
 \hskip1.5cm 
-S  -  S  -  S  -  S  -  W2  -  S  -  M2
\+ \+  \hskip1.7cm  (tercer lavado)\cr 
 \hskip2.35cm 
-S  -  S  -  S  -  S  -  W2  -  S  -  M2  -  X
\+ \+  \hskip2.55cm  (cuarto
lavado)\cr}

\newpage

Esta secuencia provee las cuatro etapas necesarias: separación/lavado/remezcla usando 30 grupos de clasificación. Ensayos simultáneos usarían los cuatro lavados en forma consecutiva. Ensayos secuenciales usarían las primeras etapas separación/lavado tras la primera incubación y la segunda, tercera y cuarta etapas separación /lavado tras la segunda incubación.

Como se describe anteriormente en la Tabla 1, empezando desde el punto de entrada a la estación de transferencia, todas y cada una de las cubetas de reacción 36 en el carrusel de procesamiento 32 pasan por un primer segmento de clasificación o ETAPA 1 en el que el carrusel de procesamiento 32 se clasifica en sentido horario tras cinco estaciones de procesamiento intervinientes sin detenerse en la siguiente-sexta estación de procesamiento S1. Así, una primera cubeta de reacción en la cubeta X se transfiere en sentido horario por un movimiento síncrono del carrusel interno 32, tras cinco estaciones de procesamiento intervinientes a la sexta estación de procesamiento S1. Luego del mismo tiempo de operación predeterminado constante, el carrusel de procesamiento 32 se clasifica repetitivamente en sentido horario tras seis estaciones de procesamiento intervinientes sin detenerse, a la siguiente-séptima estación de procesamiento S2. Este patrón repetitivo de movimiento de clasificación desde la primera hasta la siguiente-sexta estación de procesamiento, seguido por tratamiento de la muestra durante un tiempo de operación predeterminado constante, y posterior clasificación hacia la siguiente-séptima estación de procesamiento se repite con la clasificación siempre en la misma dirección, hacia adelante o en sentido horario visto desde arriba, sin detenerse sin tener en cuenta el ensayo a llevarse a cabo. Por ello, una cubeta de reacción en el carrusel de procesamiento 32 experimenta un primer movimiento rotativo que comprende seis movimientos clasificados en etapas "hacia adelante", cada movimiento de segmento de clasificación seguido por un tiempo de detención en la estación de procesamiento alineada Mn, Sn o Wn como se indica durante una cantidad de tiempo constante de tratamiento de la muestra previo al ensayo. Este patrón repetitivo de seis-siete segmentos de clasificación se repite como se explica a continuación cuando es necesario para llevar a cabo cinco tratamientos separados, es decir, tratamientos de procesamiento previos al ensayo de lavado único y mezcla única como en el caso de un ensayo heterogéneo de "reactivo único". En el caso de un ensayo heterogéneo "de dos reactivos", la cubeta de reacción 36 puede ser eliminada del carrusel de procesamiento 32 para el tratamiento con el reactivo adicional, como se explica a continuación y luego reubicada en el carrusel de procesamiento
32.

Aplicando esta secuencia al arreglo del carrusel de procesamiento 32 como se muestra en la Fig. 2, se puede ver que la cubeta que entra al carrusel de procesamiento 32 desde la estación de transferencia 38, clasificando un total de 30 segmentos de clasificación haría dos revoluciones completas alrededor del carrusel, y pasaría a través de todas las estaciones de procesamiento necesarias presentadas a la estación de transferencia 38 para transferir al carrusel de incubación 34 donde puede producirse la aspiración de la muestra. Esta secuencia provee cuatro ciclos de separación de lavado separados, lavado, y ciclos de mezcla usando 30 segmentos de clasificación. En el caso de un ensayo secuencial, una vez que se completa el primer ciclo de lavado, la cubeta de reacción se ubica en la estación de transferencia. Ciertos ensayos secuenciales requieren un reactivo adicional y un periodo de incubación tras la transferencia inicial al carrusel de incubación 34 y de allí en más se transfieren de nuevo al carrusel de procesamiento 32 para completar el proceso de separación, procesando otra vez el segundo, tercero y cuarto ciclos de lavado como se necesi-
te.

Esta mejora en el rendimiento es posible usando un movimiento repetitivo del carrusel de procesamiento 32, en el que cada cubeta de reacción 36 en el carrusel de procesamiento 32 son presentadas a las estaciones de procesamiento Sn, Mn y Wn de manera ordenada, siendo cada cubeta de reacción 36 procesada por la estación a la que es movida durante el movimiento síncrono del carrusel de procesamiento 32, siendo cada cubeta además procesada por los diferentes dispositivos Sn, Mn y Wn durante una misma cantidad de tiempo constante.

La secuencia de tiempo para estos ciclos de lavado se muestra en la Fig. 3 y las secuencias de tiempo se calculan por el CPU del analizador 10. Sin considerar los tiempos expresados el las varias estaciones de procesamiento 42, las secuencias repetitivas que llevan a cabo los varios ciclos de lavado serán mejor entendidas refiriéndose a la Tabla 2. La elección apropiada del número de estaciones de procesamiento y dispositivos, en combinación con la asignación a cada estación de procesamiento de un mismo tiempo de procesamiento constante sin tener en cuenta la capacidad de la estación permite que el rendimiento del carrusel de procesamiento 32 exceda las expectativas nor-
males.

Además, de acuerdo con la presente invención, tiene la capacidad de manejar una pluralidad de cubetas de reacción, hasta un máximo de catorce, y presentar cada una de las cubetas de reacción al recurso que se necesita en el orden requerido, siendo el número de las estaciones de recurso igual a quince.

TABLA 2

Primer Ciclo de Lavado

Etapa	1	2	3	4	5	6	7	8
Posiciones de Procesamiento	+6	+7	+6	+7	+6	+7	+6	+7
Estación 42	S1	S2	S3	S4	S5	W1	X	M1

Segundo Ciclo de Lavado

Etapa	9	10	11	12	13	14	15
Posiciones de Procesamiento	+6	+7	+6	+7	+6	+7	+6
Estación 42	S2	S6	S4	S7	W1	S/D	M1

Tercer Ciclo de Lavado

Etapa	16	17	18	19	20	21	22
Posiciones de Procesamiento	+7	+6	+7	+6	+7	+6	+7
Estación 42	S8	S6	S9	S7	W2	S/D	M2

Cuarto Ciclo de Lavado

Etapa	23	24	25	26	27	28	29
Posiciones de Procesamiento	+6	+7	+6	+7	+6	+7	+6
Estación 42	S8	S1	S9	S3	W2	S5	M2


Etapa	30
Posiciones de Procesamiento	+7
Estación 42	X

\vskip1.000000\baselineskip

Una "estación de prueba" D está ubicada como se muestra en la primera ubicación en sentido horario adyacente a la estación de transferencia 38. Se las nombra S/D porque tienen un imán de separación para mantener cualquier partícula magnética en las cubetas de reacción 36 agrupadas en aquella estación. La presencia y posicionamiento de la "estación de prueba" D permite el uso de un patrón repetitivo elegido para presentar cada una de las cubetas de reacción 36 a la estación de procesamiento requerida en el orden requerido. Como resultado de la distribución particular de las estaciones de procesamiento previo al ensayo en un patrón circular, acopladas con el patrón de movimiento particular siendo cortado en cuatro ciclos, cada cubeta de reacción es ubicada de forma secuencial en subgrupos por separado, lavado, mezcla, estaciones, permitiendo que los dispositivos auxiliares (motores, plataforma de agitación, drenajes, etc.) que soportan la acción de las dos sondas de lavado y los mezcladores estén unidos juntos para un diseño compacto.

Esta técnica provee:

\bullet arrastre potencial reducido, ya que la estación de lavado W1 se usa para los dos primeros lavados, y la estación W2 para los dos lavados finales

\bullet las estaciones de lavado y mezclado están ubicadas adyacentes una a la otra, permitiendo a las dos sondas de lavado y mezclado estar unidas juntas para un diseño compacto

\bullet rendimiento incrementado cuando se procesa formatos de ensayo secuencial que requieren un lavado de muestra de primera fase y un lavado de reactivo de segunda fase. Además de alcanzar el resultado deseado de ubicación, ya que las estaciones de procesamiento están próximas una a la otra, de manera de alcanzar la utilización máxima de los dispositivos de soporte (motores, bombas, plataformas de agitación común, drenajes, etc.), una vez que el carrusel de procesamiento 32 está completamente lleno de cubetas de reacción 36, por ejemplo, como ocurriría durante procesamiento con volumen alto, todas las cubetas están siendo usadas activamente en una estación de separación o una de mezcla, excepto para aquellas cubetas ubicadas en una posición X o D. Tantas como 13 cubetas de reacción 36 pueden estar en diferentes etapas en las posiciones de tratamiento previo al ensayo proporcionadas por el carrusel de procesamiento 32 y aún permitir a una cubeta de reacción adicional entrar al carrusel, requiriendo solamente que la estación de transferencia X está vacante.

La presente invención usa un posicionamiento y avance nuevos de las cubetas de reacción 36 para brindar un rendimiento superior cuando se procesan formatos de ensayo secuencial heterogéneo que requieren un ciclo de lavado inicial seguido por el agregado de reactivo para conseguir marcar el anticuerpo y luego un ciclo de lavado final. Un resultado sorprendente de este procedimiento es la capacidad de conseguir rendimiento alto para formatos de ensayo competitivo que requieren primera y segunda incubación. El rendimiento está en función de los requerimientos del ensayo, de los recursos disponibles para estos requerimientos y de qué tan bien los recursos sean programados. Todo esto debe estar balanceado. Se ha encontrado que la presente invención provee un balance apropiado de todos éstos elementos esenciales para lograr un rendimiento óptimo, sin tener en cuenta si el ensayo es simultáneo o secuencial.

Cuando está completamente cargado con un máximo de 15 cubetas de reacción 36, todas las cubetas pueden ser secuenciadas a través de las etapas requeridas de separación, lavado y mezcla de una manera continua sin interrumpir el movimiento secuencial en etapas del carrusel de procesamiento 32. Esta característica provee una disminución significativa en el tiempo de procesamiento que el que habría sido requerido si las etapas previas al ensayo eran realizadas en el patrón más convencional de completar cada procesamiento previo al ensayo de cada cubeta de reacción 36 antes de iniciar otra y/o de juntar un pequeño número de cubetas de reacción para el tratamiento previo al ensayo.

En una forma de realización particular, el carrusel de procesamiento 32 previo al ensayo de la presente invención está diseñado y representado en la Fig. 3 para procesar ensayos heterogéneos usando un tiempo de clasificación para cada etapa del carrusel de procesamiento 32 de 10,8 segundos. Así para los cuatro ciclos de lavado cada uno incluyendo las estaciones 42 de S, W y M para el tiempo indicado en cada estación de un ensayo heterogéneo secuencia, el tiempo requerido es 30 x 10,8 o 324 segundos. Los ensayos simultáneos usan los cuatro ciclos de lavado consecutivamente. Los ensayos secuenciales usan el primer ciclo de lavado, luego transferencia para incubación, luego transferencia otra vez para el segundo, tercero y cuarto ciclos de lavado.

Debido a los requerimientos de sensibilidad de los ensayos heterogéneos modernos, es muy importante que el lavado se haga de una manera que produzca una eficacia muy alta como así también minimice el arrastre entre cubetas. La presente invención produce niveles basales cercanos a cero. Esto se logra llevando a cabo dos lavados bastante "groseros" en la estación W1 en las etapas 6 y 13. Esto es seguido por un tercer lavado en la estación W2, y un cuarto lavado final en la estación W2 para reducir el nivel basal final a un valor inferior. Como se usa aquí, "partículas magnéticas" o simplemente "partículas que responden a un campo magnético" pueden ser cualquiera de aquellas conocidas en la técnica. Son de preferencia ferromagnéticas y tienen un pequeño magnetismo residual de manera que se produce un pequeño agrupamiento en ausencia de un campo magnético. De preferencia, se usan partículas magnéticas del tipo de las descritas por Lau y col., en la Patente de EEUU Nº 4.661.408. Por ello las estaciones de separación S separan las fases unidas y libres para lograr que se produzca el proceso de mezcla.

Se entenderá que las formas de realización de la invención descritas aquí son ilustrativas de los principios de la invención.

Claims

1. Un procedimiento para llevar a cabo inmunoensayos heterogéneos en un carrusel de procesamiento (32) montado de forma concéntrica y un carrusel de incubación (34), el carrusel de incubación (34) teniendo una pluralidad de cubetas de reacción (36) en el mismo, los inmunoensayos llevados a cabo por:

(a) el agregado de los reactivos de marcado incluyendo un soporte sólido a una muestra en una cubeta de reacción (36) en el carrusel de incubación (34);

(b) la transferencia de la cubeta de reacción (36) desde el carrusel de incubación (34) al carrusel de procesamiento (32) usando una estación de transferencia (38) que accede a ambos carruseles;

(c) la separación del soporte sólido de la muestra y reactivos usando estaciones de procesamiento (42) dispuestas de forma adyacente a dicho carrusel de procesamiento (32); y

(d) el lavado del soporte sólido usando estaciones de lavado (W1 y W2) dispuestas de forma adyacente a dicho carrusel de procesamiento (32), caracterizado en que procedimiento comprende las etapas de:

(e) avanzar el carrusel de procesamiento (32) un primer número de posiciones de clasificación y detener en una estación de procesamiento (42) durante un tiempo constante;

(f) avanzar dicho carrusel de procesamiento (32) un segundo número de posiciones de clasificación y detener en una estación de procesamiento (42) durante dicho tiempo constante igual;

(h) en el caso en que el ensayo necesite reactivos adicionales, transferir la cubeta de reacción (36) desde el carrusel de procesamiento (32) al carrusel de incubación (34) en un primer punto de detención de la cubeta de reacción (36) en dicha estación de transferencia (38) y agregar los reactivos requeridos en esa posición;

(i) reemplazar la cubeta de reacción (36) en dicho carrusel de procesamiento (32) antes de que la operación de procesamiento previo se complete, de tal manera de que los ensayos que necesiten reactivo adicional puedan ser procesados en el carrusel de procesamiento (32) sin cambiar los movimientos de avance de las etapas (e) y (f); y

2. El procedimiento de la reivindicación 1 en el que el número total de estaciones de procesamiento (42) es seleccionado de tal manera que cada cubeta de reacción (36) se detiene en cada estación de procesamiento (42) y dicha estación de transferencia (38) exactamente dos veces.

3. El procedimiento de la reivindicación 1 en el que cada cubeta de reacción (36) también se detiene en una estación de prueba (D) exactamente dos veces antes de que el procesamiento previo de dicha mezcla esté completo.

4. El procedimiento expuesto en la reivindicación 3 en el que dicho número determinado de cubetas de reacción (36) es quince.

5. El procedimiento expuesto en la reivindicación 4 en el que dicho primer número de posiciones de clasificación es seis.

6. El procedimiento expuesto en la reivindicación 4 en el que dicho segundo número de posiciones de clasificación es siete.

7. El procedimiento según la reivindicación 1 en el que el avance del carrusel de procesamiento en las etapas (f) y (g) es en una única dirección.